КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ НЕПРЕРЫВНОГО ВВЕДЕНИЯ ИНГИБИТОРОВ ДОПА-ДЕКАРБОКСИЛАЗЫ Российский патент 2019 года по МПК A61K31/198 A61K31/195 A61K9/08 A61P25/16 

РОДСТВЕННАЯ ЗАЯВКА

Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно заявке на патент US 61/179511, поданной 19 мая 2009 года, содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к соединениям и составам, подходящим для применения в способах лечения заболеваний и расстройств, при которых уменьшается уровень дофамина в головном мозге, например, болезни Паркинсона. В частности, изобретение относится к аргининовым солям карбидопы и леводопы, и содержащим их композициям.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Болезнь Паркинсона представляет собой дегенеративное состояние, характеризующееся снижением концентрации нейромедиатора дофамина в головном мозге. Леводопа (L-допа или L-3,4-дигидроксифенилаланин) представляет собой метаболический предшественник дофамина, который, в отличие от дофамина, способен проходить через гематоэнцефалический барьер и наиболее часто используется для восстановления концентрации дофамина в головном мозге. В течение последних 40 лет леводопа остается наиболее эффективным терапевтическим средством для лечения болезни Паркинсона.

Однако для леводопы характерен короткий период полувыведения из плазмы крови, что даже в лучших условиях современной терапии приводит лишь к пульсирующей стимуляции дофаминэргических нейронов. Поэтому длительная терапия осложнена двигательными отклонениями и дискинезией, являющихся источником существенных ограничений для некоторых пациентов. Терапевтическая стратегия, которая позволит в конечном итоге доставлять леводопу/дофамин в головной мозг более непрерывным и физиологичным образом, могла бы обеспечить преимущества по отношению к стандартной леведопе, уменьшая двигательные осложнения, и является крайне необходимой для пациентов, страдающих болезнью Паркинсона и другими неврологическими или двигательными расстройствами (Olanow CW; Mov. Dis. 2008, 23 (Suppl. 3): S613-S622). В настоящее время разработаны пероральные формы леводопы с замедленным высвобождением, но было показано, что в лучшем случае такие препараты не более эффективны, чем стандартные таблетки. Попытки непрерывного введения леводопы интрадуоденально или с помощью инфузии было осуществлены с помощью амбулаторных насосов и пластырей. Такие способы лечения, особенно интрадуоденальное, считается чрезвычайно агрессивным и неудобным. Кроме того, такие способы лечения также могут вызвать дофаминэргические побочные эффекты; при этом непрерывный прием леводопы или допа-агонистов связан с периодами отсутствия действия вещества, являющимися самоограничивающимися, несмотря на непрерывную доставку препарата (Nutt JG; Mov. Dis. 2008, 23(Suppl. 3): S580-4).

Процесс метаболического превращения леводопы в дофамин катализируется ферментом декарбоксилазой ароматических L-аминокислот, убиквитарным ферментом, в наибольших концентрациях присутствующим в слизистой оболочки кишечника, печени, головном мозге и капиллярах головного мозга. Из-за возможного экстрацеребрального метаболизма леводопы, необходимо вводить большие дозы леводопы, чтобы получить высокую концентрацию экстрацеребрального дофамина, которая в свою очередь может вызвать тошноту у некоторых пациентов. Поэтому прием леводопы обычно проводят совместно с перорально введенным ингибитором допа-декарбоксилазы, таким как карбидопой или бенсеразидом, который уменьшает на 60-80% дозу леводопы, необходимой для клинического ответа и, таким образом, предотвращает некоторые из ее побочных эффектов путем ингибирования конверсии леводопы в дофамин вне головного мозга. Остается в точности неизвестно, каким образом происходит уменьшение дозы леводопы. Хорошо известны различные составы, содержащие леводопу отдельно или совместно с ингибиторами ферментов, связанных с метаболическим разрушением леводопы, например, ингибиторами декарбоксилазы, такими как карбидопа и бенсеразид, ингибиторами катехол-О-метилтрансферазы, такими как энтакапон и толкапон, и ингибиторами моноаминоксидазы (МАО)-А или МАО-В, такими как моклобемид, разагилин или селегилин, или сафинамид. На сегодняшний день доступные пероральные препараты включают таблетки SINEMET® и SINEMET®CR с замедленным высвобождением, содержащие карбидопу или леводопу; таблетки STALEVO, содержащие карбидопу, энтакапон и леводопу; и таблетки MADOPAR®, содержащие леводопу и бенсеразид. До сих пор существует актуальная и острая потребность в способах и композициях, которые могут обеспечить продолжительную стимуляцию L-допы для более эффективного лечения нарушений движений, например болезни Паркинсона.

Карбидопа [моногидрат (-)-L-α-гидразино-α-метил-β-(3,4-дигидроксибензол) пропионовой кислоты], белое кристаллическое вещество, малорастворимое в воде, представляет собой ингибитор допа-декарбоксилазы, наиболее часто вводимый совместно с леводопой. Только 40-70% дозы перорально введенной карбидопы поглощается в организме человека, обезьяны и собаки. Несмотря на то, что в течение более 30 лет карбидопу вводили перорально совместно с леводопой, стабильный жидкий состав, содержащий, например, эффективную концентрацию в объеме подходящем для подкожной или трансдермальной доставки, так и не был получен. Существует острая, давно существующая потребность в таких составах карбидопы, которые можно было бы более легко водить пациентам, особенно в сравнении с существующими в настоящее время инвазивными способами, такими как дуоденальное введение.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно настоящему изобретению было обнаружено, что аргининовые соли карбидопы могут образовывать стабильные жидкие составы, подходящие, например, для непрерывного подкожного, трансдермального, интрадермального, внутривенного и/или дуоденального введения при физиологически приемлемом значении рН. Таким образом, данные предложенные композиции позволяют по существу непрерывно вводить карбидопу пациенту.

Далее было обнаружено, что по существу непрерывное введение ингибитора допа-декарбоксилазы, такого как карбидопа, совместно с дискретно (например, перорально) вводимой леводопой, может стимулировать L-допу по существу непрерывно и, таким образом, например, увеличивать эффективность режима перорального дозирования леводопы и/или снижать дневную дозу леводопы при эффективном лечении двигательных и/или неврологических расстройств, таких как болезнь Паркинсона.

Настоящее изобретение, согласно одному аспекту, относится к аргининовым солям активного агента, выбранного из карбидопы и леводопы, подходящих для, например, непрерывного подкожного, трансдермального, интрадермального, внутривенного, перорального и дуоденального введения.

Также настоящее изобретение включает фармацевтически приемлемую жидкость (например, жидкость при комнатной температуре) или составы или композиции в виде геля, которые включают аргининовую соль карбидопы, например, включают карбидопу и аргинин, которые могут подходить для по существу непрерывного введения пациенту, например, с применением или без применения трансдермального пластыря и подкожного насоса (например, аналогичного инсулиновому насосу). Такие предполагаемые настоящим изобретением жидкие композиции могут содержать по меньшей мере 1%, по меньшей мере 4%, по меньшей мере 6% масс., карбидопы или более (например, от примерно 2% до примерно 6% масс., карбидопы) и такими образом, могут усиливать введение меньших количеств фармакологически приемлемого состава с достижением эффективности, сравнимой с эффективностью состава карбидопы, который только способен содержать менее чем 1% масс., карбидопы). Согласно другому варианту реализации настоящее изобретение включает жидкую или гелеобразную композицию, для которой характерно молярное отношение карбидопа: основная аминокислота, например, карбидопа: аргинин от примерно 1,0:0,5 до примерно 1,0: до примерно 2,5, например, 1:1,0-1,2. Жидкая композиция, содержащая карбидопу и аргинин, предложенная в настоящем изобретении, может иметь физиологически приемлемый рН, например рН от примерно 6,5 до 9,5, например, от примерно 7 до примерно 9 или от примерно 8 до примерно 9, при 25°С.

В другом варианте реализации, данное изобретение включает фармацевтически приемлемую жидкую или гелеобразную композицию, в которой молярное отношение леводопа:аргинин составляет примерно от 1,0:0,5 до примерно 1:2, например, примерно 1:1,8. Например, в настоящем изобретении предложена жидкая композиция, которая может содержать по меньшей мере примерно 4% или по меньшей мере 5%, по меньшей мере примерно 6% (например, от примерно 3% до примерно 7%) и более леводопы по массе. Жидкая композиция, содержащая леводопу и основную аминокислоту, включенная в настоящее изобретение, может иметь рН при 25°С от примерно 8 до 10, например, от примерно 8,5 до примерно 9,5.

Примеры жидких композиций, включенных в предлагаемое изобретение, могут представлять собой жидкие растворы, например, могут представлять собой по существу гомогенные смеси, содержащие карбидопу и аргинин, и могут содержать воду или, в альтернативном варианте, могут быть по существу безводными. В других вариантах реализации, предлагаемые композиции могут также содержать один или более фармацевтически приемлемых наполнителей, таких как N-метилпирролидон (НМП), поливинилпирролидон (ПВП), пропиленгликоль, антиоксиданты или их комбинации.

В некоторых вариантах реализации, фармацевтически приемлемая жидкая композиция согласно настоящему изобретению может содержать дополнительные активные агенты, такие как энтакапон или толкапон.

В данном изобретении также предложен набор, содержащий а) первую композицию, подходящую для непрерывного введения, содержащую жидкий или гелеобразный состав согласно изобретению, содержащий аргининовую соль карбидопы; b) вторую композиция, подходящую для перорального введения, содержащую леводопу или ее фармацевтически приемлемую соль или сложный эфир, и с) возможно, инструкции по введению первого состава совместно со вторым составом.

Первая композиция в наборе, предназначенная для непрерывного введения аргининовой соли карбидопы, может быть приготовлена для трансдермального, интрадермального, подкожного, внутривенного и дуоденального введения, такого как введение с использованием инфузионного насоса.

Вторая композиция в наборе может содержать леводопу, фармацевтически приемлемую соль леводопы, предпочтительно аргининовую соль леводопы, предложенную в настоящем изобретении, или может представлять собой композицию, которая содержит леводопу и дополнительно содержит один или более ингибиторов декарбоксилазы, такой как карбидопа и/или бенсеразид, или один и более ингибиторов катехол-О-метилтрансферазы (КОМТ), таких как энтакапон и/или толкапон, или один и более ингибиторов МАО-А или МОА-В, таких как селегилин и/или разагилин, или комбинации перечисленных ингибиторов.

Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения заболевания и расстройства, характеризующегося пониженным уровнем дофамина в головном мозге пациентов (например, болезни Паркинсона), включающий по существу непрерывное введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора декарбоксилазы, его соли, например, аргининовой соли карбидопы, или его сложного эфира, и введение терапевтически эффективного количества леводопы или ее фармацевтически приемлемой соли (аргининовая соль леводопы), или композиции, содержащей леводопу (например, введение композиции, например, таблетки, содержащей леводопу в качестве основного активного агента, или композиции, содержащей леводопу и один или более других активных агентов, таких как карбидопа, бенсеразид, энтакапон, толкапон, селегилин и/или разагилин).

В одном из вариантов реализации, предложен способ лечения или облегчения неврологического или двигательного расстройства у нуждающегося в этом пациента, включающий введение терапевтически эффективного количества композиции, содержащей соль карбидопы и основной аминокислоты (например, карбидопы и аргинина) и введение терапевтически эффективного количества композиции, содержащей леводопу. Например, композицию, содержащую карбидопу и аргинин, можно вводить по существу непрерывно и/или композицию, содержащую леводопу, можно вводить с дискретными интервалами (например, перорально один, два, три или более раз в день) во время по существу непрерывного введения композиции, содержащей аргининовую соль карбидопы.

В настоящем изобретении также предложен способ по существу непрерывного подавления активности декарбоксилаз и/или способ увеличения периода полувыведения леводопы у пациента, получающего леводопу, включающий введение (например, по существу непрерывное) пациенту жидкой или гелеобразной композиции, содержащей соль карбидопы, такую как соль аргинина и карбидопы. Например, предложенные способы могут обеспечить период полувыведения леводопы из плазмы пациента, который по меньшей мере в 1,5 или по меньшей мере в 2 раза больше при непрерывном введении карбидопы, по сравнению с периодом полувыведения леводопы в сыворотке крови пациентов после введения леводопы при дискретном пероральном введении карбидопы.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фиг. 1А-1С приведены масс-спектры аргининовой соли карбидопы (CD).

На фиг. 2А-2С приведены масс-спектры аргининовой соли леводопы (LD).

На фиг. 3А-3С приведены средние уровни содержания карбидопы в плазме крови самок свиней ландрас × большая белая свинья (30-35 кг) с последующим пероральным введением (на фиг. 3А) Stalevo (100/25/200 мг, LD/CD/E), (3В) Dopicar+Lodosyn (125/25 мг LD/CD), (3С) Sinemet CR (100/25 мг, LD/CD) каждые 8 и 12 часов, с (квадраты) или без (ромбы) непрерывного подкожного введения 3% раствора карбидопы.

На фиг. 4А-4В приведены уровни содержания L-допы и дофамина в головном мозге (4А, левая и правая панели, соответственно), и уровень содержания карбидопы и L-допы в плазме крови (4В, левая и правая панели, соответственно), определенные в CD-1 мышах при пероральном введении леводопы/карбидопы с или без непрерывного подкожного введения карбидопы.

На фиг. 5А-5В приведены средние уровни содержания L-допы (5А) и карбидопы (5В) в плазме крови самок свиней ландрас × большая белая свинья (30-35 кг) с последующим непрерывным подкожным введением 0, 2 и 4% карбидопы одновременно с пероральным введением Sinemet® (100/25 мг) каждые 8 часов.

На фиг. 6А-6В приведены средние уровни содержания L-допы, определенные в плазме крови двух самок свиней ландрас × большая белая свинья (30-35 кг) (6А, Свинья #3; 6В, Свинья #4), с последующим непрерывным подкожным введением 2 и 4% карбидопы одновременно с пероральным введением Dopicar® (125/12,5 мг LD/CD) + Lodosyn® (12,5 мг CD) каждые 12 часов.

На Фиг. 7 представлены средние (±SD) концентрации LD (леводопы) (мг/мл) обнаруженной в плазме крови особей женского пола свиней породы ландрас × большая белая свинья (30-35 кг), с последующим пероральным введением Stalevo LD/CD/E 100/25/200) каждые 8 часов с или без непрерывного подкожного введения бенсеразида или карбидопы (60 мг /день).

На фиг. 8А-8В приведены уровни (8А) L-допы и (8В) 3-О-митилдопы (3-ОМД) в плазме крови, как было обнаружено в плазме крови самок свиней ландрас × большая белая свинья (30-35 кг) с последующим непрерывным подкожным введением 2% карбидопы, с или без 2,5% энтакапона, и перорального введения L-допы/карбидопы (LD/CD).

На фиг. 9 представлены результаты трансдермальной доставки пропилового эфира карбидопы (CDPE).

Фиг. 10A-10В приведены уровни содержания (10А) леводопы и (10В) карбидопы в плазме крови самок свиней ландрас × белая большая свинья (30-35 кг) с последующим пероральным введением покрытых и непокрытых кишечнорастворимой оболочкой препаратов аргинина леводопы и карбидопы (обозначенные LDs и CDs, соответственно, 100/25 мг LD/CD) по сравнению с Sinemet (100/25 мг LD/CD).

На фиг. 11 представлено ингибирование декарбоксилирования L-допы карбидопой и пропиловым эфиром карбидопы (CDPE).

На фиг. 12А-12В представлено ингибирование декарбоксилирования L-допы (12А) и превращение L-допы в дофамин (12Б) карбидопой и пропиловым эфиром карбидопы в печеночном экстракте.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении предложена жидкая композиция с физиологически приемлемым рН, содержащая стабильную при комнатной температуре аргининовую соль карбидопы (например, аргинин и карбидопу), которая способна усиливать эффект непрерывной доставки эффективного количества карбидопы пациенту наименее инвазивным способом (например, предложенный жидкий состав содержит существенно высокую концентрацию карбидопы, при которой не требуется введение больших количеств жидкости). Такого рода составы могут усиливать эффект непрерывного ингибирования декарбоксилазы, продлевает период полувыведения леводопы. Например, результаты in vivo исследований, описанных ниже, в которых непрерывное введение L-допы осуществляли параллельно с пероральным введением карбидопы каждые 6-8 часов, демонстрировали пульсативный график уровней L-допы в плазме крови, что согласуется со схемой перорального приема дозы карбидопы, но сопутствующее и/или часто повторяемое, например, одновременное введение ингибитора допа-декарбоксилазы (например, карбидопы или соли карбидопы, или бенсеразида) совместно с или без ингибиторов катехол-О-метилтрансфераз (СОМТ) с дискретным или непрерывным введением леводопы, является более эффективным способом лечения таких заболеваний, как болезнь Паркинсона. Далее было показано, что фармакокинетический профиль, например, карбидопы, (с или без энтакапона) поддерживает такие новые терапии, включающие по существу непрерывное введение ингибиторов допа-декарбоксилазы (например, бенсеразида или карбидопы или их соли), совместно с ингибиторами СОМТ или без них, вместе с введением (непрерывно или дискретными интервалами), например, леводопы или соли леводопы.

В настоящем изобретении предложены составы карбидопы, которые неожиданно способствуют стабильному растворению высоких концентраций (например, более чем 1% по массе) карбидопы и/или леводопы при, например, физиологически приемлемом рН, для, например, по существу непрерывного введения подкожным или трансдермальным способом. Такие составы также подходят для внутривенного, интрадермального, перорального и интрадуоденального введения. Например, в настоящем изобретении предложены составы и способы, подходящие для достижения по существу непрерывного ингибирования допа-декарбоксилазной активности при введении, с увеличением, таким образом, периода полувыведения вводимой леводопы и по существу уменьшением пульсативных уровней леводопы в плазме крови, чтобы избежать низких остаточных концентраций леводопы в плазме крови.

Стратегия лечения посредством непрерывного введения карбидопы согласно настоящему изобретению может стимулировать L-допу по существу непрерывно. Например, терапии и/или способы согласно настоящему изобретению могут расширить схему перорального дозирования леводопы от примерно 2 до примерно 3 раз в день, и/или уменьшить ежедневную дозу леводопы, и/или уменьшить или даже полностью устранить риск двигательных осложнений, связанных с приемом стандартных пероральных составов леводопы, у пациентов с болезнью Паркинсона.

В настоящем изобретении, согласно одному из вариантов реализации, предложен фармацевтически приемлемый состав, содержащий аргининовую соль карбидопы, который позволяет вводить карбидопу по существу непрерывно. Например, несмотря на то, что свободное основание карбидопы практически нерастворимо в спирте, хлороформе или эфире и мало растворимо в воде, в настоящем изобретении, например, предложен стабильный жидкий состав, который содержит карбидопу и может подходить по существу непрерывного введения пациенту. Более того, такие составы могут иметь физиологически приемлемый уровень рН..

Согласно одному аспекту настоящее изобретение относится к аргининовой соли карбидопы.

В настоящем изобретении также предложен, согласно одному из вариантов, жидкий состав, содержащий соль карбидопы согласно изобретению. Например, предложенная аргининовая соль карбидопы может быть растворена в водном растворе, например, имеющем рН от примерно 6 до 9,5, предпочтительно от примерно 7 до примерно 9, более предпочтительно от примерно 8 до 9 при 25°С или при 30°С. В качестве альтернативы, карбидопа (как свободное основание) и аргинин, растворены совместно в жидкости (например, в водном растворе) с образованием предложенного жидкого состава. Предложенные жидкие составы могут содержать примерно 1,0% или более карбидопы или аргининовой соли карбидопы по массе, например, состав может содержать от примерно 1% до примерно 20% или более карбидопы по массе, например, от примерно 2% до примерно 10% карбидопы по массе. Например, жидкий состав может содержать карбидопу и аргинин в молярном соотношении от примерно 1:0,5 до примерно 1:2,5, или примерно от 1:1 до примерно 1:1,2, например, примерно 1:1 или 1:1,1.

Предложенные жидкие составы (например, жидкая композиция, содержащая карбидопу и аргинин, или аргининовую соль карбидопы) могут быть стабильны в течение 24 часов, 48 часов, 7 дней или более при 25°С. Например, типовой жидкий состав может содержать карбидопу:аргинин в молярном отношении 1:1,1, с примерно от примерно 2% до примерно 15%, или от примерно 2% до примерно 10%, или от примерно 2% до примерно 6% карбидопы по массе. Такой жидкий состав, содержащий карбидопу:аргинин, может быть более стабильным в течение 7 дней, чем жидкая композиция, содержащая лизиновую или гистидиновую соль карбидопы.

В некоторых вариантах реализации, предложенные жидкие составы или композиции являются жидкими растворами, то есть по существу гомогенными жидкими смесями. Такие жидкие смеси могут содержать воду и/или другие вспомогательные вещества. В другом варианте реализации, такие жидкие композиции могут быть по существу безводными.

Например, как представлено ниже в Примере 6, стабильный жидкий раствор может быть получен из карбидопы и аргинина. Такой раствор стабилен при комнатной температуре, например, представляет собой по существу прозрачный раствор даже при таких высоких концентрациях карбидопы, как 2, 3, 4, 6, и/или 8% по массе. Такие растворы, например, содержащие до примерно 6% карбидопы по массе, стабильны (например, не образуют осадка) в течение по меньшей мере 48 часов. Более того, поскольку такие предложенные растворы даже при высоких концентрациях карбидопы имеют физиологически приемлемый рН, они могут быть доведены до подходящего уровня рН, при этом включая большое количество карбидопы в меньшем объеме, что позволит облегчить введение пациенту без, например, введения большого объема раствора.

Более того, растворы, содержащие карбидопу и аргинин (например, аргининовую соль карбидопы), неожиданно являются более стабильными даже по сравнению с растворами солей карбидопы с другими основными аминокислотами, такими как гистидин или лизин, как показано ниже, например, в Примере 6.

Предполагаемые жидкие составы, в некоторых вариантах реализации, дополнительно содержат леводопу или леводопу и аргинин, и/или, возможно, ингибитор катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ), такой как энтакапон или толкапон; и/или ингибитор моноаминоксидазы (МАО)-А или МАО-В, такой как моклобемид, разагилин, селегилин или сафинамид.

Также в настоящем изобретении предложен жидкий состав, содержащий аргининовую соль леводопы, или жидкий состав, содержащий аргинин и леводопу. В одном из вариантов реализации, предложен жидкий состав, содержащий леводопу и аргинин в молярном отношении от примерно 1:1,5 до примерно 1:2,5, или от примерно 1:1,8 до примерно 1,20. Такие составы или растворы, содержащие леводопу и аргинин, могут иметь рН от примерно 8 до примерно 10, например, от примерно 8,5 до примерно 9,5. Предложенный состав, содержащий леводопу и аргинин, может содержать примерно 2%, 3%, 4%, 5%, 6% или более леводопы по массе, т.е. может включать примерно 4% или более леводопы по массе.

В некоторых вариантах реализации, раскрытый жидкий состав стабилен при комнатной температуре в течение периода 1 день, 2 дня, 3 дня, 1 неделю или 1 месяц или более. В более предпочтительных вариантах реализации данного изобретения, предложенный жидкий состав дополнительно содержит фармацевтически приемлемый наполнитель, такой как, например, N-метилпирролидон (NMP), поливинилпирролидон (PVP), пропиленгликоль, или комбинацию из одного или более из вышеперечисленных наполнителей, и может дополнительно содержать один или более антиоксидантов, таких как, но не ограничиваясь только ими, N-ацетилцистеин, бисульфит натрия, глутатион и аскорбиновая кислота. Например, в одном из вариантов реализации, в настоящем изобретении предложен стабильный жидкий состав, содержащий от примерно 0,5 до примерно 20% карбидопы (например, от примерно 2% до примерно 6%), от примерно 0,25 до примерно 20% аргинина, от примерно 0 до примерно 30% NMP, от примерно 0 до примерно 5% PVP, и/или от примерно 0 до примерно 5% одного или более растворимых в воде антиоксидантов, по массе.

Согласно настоящему изобретению также предложен стабильный лиофилизованный порошок, содержащий аргининовую соль карбидопы. В одном варианте реализации, такой стабильный лиофилизованный порошок может содержать примерно 20-99% соли карбидопы, примерно 0-60% NMP, примерно 0-15% PVP, и примерно 0-5% одного или более водорастворимых антиоксидантов. Добавлением воды или воды вместе с NMP, лиофилизованный порошок может быть переведен в жидкий раствор, и может содержать или не содержать антиоксидантов.

Жидкие составы согласно настоящему изобретению могут быть приготовлены для непрерывного введения солей карбидопы или леводопы пациенту, нуждающемуся в этом. Например, пациенту могут по существу непрерывно (подкожно, трансдермально, интрадуоденально, интрадермально или внутривенно) вводить состав, содержащий предложенную аргининовую соль карбидопы, при этом леводопу, соли леводопы или композицию, содержащую леводопу, вводят перорально дискретными интервалами, например, 2, 3, 4, или 5 раз в день.

В настоящей заявке термин "композиция, содержащая леводопу" предполагает составы, содержащие леводопу, возможно совместно с одним или более ингибиторами декарбоксилазы, одним или более ингибиторами катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) и/или одним или более ингибиторами МАО-А или МАО-В. Например, композиция, содержащая леводопу, может включать дозированный состав, содержащий леводопу (или соль леводопы) и, возможно, одно или более других лекарственных средств, при этом дозированный состав может представлять собой состав с немедленным, контролируемым, двойственным или множественным высвобождением, подходящий для перорального введения.

Термин "ингибитор декарбоксилазы" относится к ингибиторам допа-декарбоксилазы (DDC), например, представляет собой лекарственное средство, которое ингибирует периферический метаболизм леводопы в дофамин при участии декарбоксилазы ароматических L-аминокислот, такой как карбидопа или бенсеразид.

Термины "фармацевтически приемлемый носитель" или "фармацевтически приемлемый наполнитель", используемые в данной заявке, относятся к любым и всем растворителям, дисперсионным средам, консервантам, антиоксидантам, агентам для покрытий, агентам, замедляющим изотонию и абсорбцию и т.п., подходящим для фармацевтического введения. Применение таких сред и агентов для фармацевтически активных веществ хорошо известно в данной области. Такие композиции могут также содержать активные соединения, обладающие вспомогательными, дополнительными и усиливающими терапевтический эффект функциями.

Термин "физиологически приемлемый уровень рН" принято использовать для обозначения рН, например, для композиции, которая облегчает введение композиции пациенту без значительных побочных эффектов, например, рН от примерно 4 до примерно 9.

Термин "ингибиторы СОМТ" относится к ингибиторам, способным замедлять процесс деградации леводопы до 3-метилдопы при участии катехол-О-метилтрансферазы и продлевать действие леводопы. К таким ингибиторам относятся, например, энтакапон или толкапон. Например, композиции, содержащие леводопу, предполагаемые в данной заявке, могут также содержать ингибитор декарбоксилазы (карбидопу или бенсеразид) и энтакапон, например, "тройная терапия".

Термины "ингибиторы МАО-А или МАО-В" относятся к ингибиторам, которые предотвращают процесс расщепления дофамина под действием моноаминоксидаз типа А или типа В, таким как моклобемид, разагилин, селегилин или сафинамид, более предпочтительным считается разагилин.

Предполагаемое изобретение представляет собой набор, содержащий: а) первый состав, содержащий аргининовую соль карбидопы и/или карбидопу и аргинин, причем указанный первый состав подходит для непрерывного введения пациенту; b) второй состав, содержащий леводопу или аргининовую соль леводопы, причем указанный второй состав подходит для перорального введения; и с) инструкции по введению состава а) совместно с составом b). Состав а), содержащий соль карбидопы, может подходить для непрерывного введения любым подходящим способом, таким как трансдермальное, внутривенное, подкожное, интрадермальное, внутримышечное или интрадуоденальное введение.

Первый состав предложенного набора, содержащий соль карбидопы, может быть в виде жидкости или лиофилизованного порошка, который можно перевести в форму жидкого состава или, например, может быть частью трансдермального пластыря, и может быть приготовлен для непрерывного введения любым подходящим способом, таким как, не ограничиваясь только ими, трансдермально, внутривенно, подкожно, интрадермально, внутримышечно или интрадуоденально. В одном из вариантов реализации, первый состав содержит предложенную аргининовую соль карбидопы и подходит для введения подкожно. Второй состав предполагаемого набора может содержать леводопу, сложный эфир леводопы, соль леводопы или композицию, содержащую леводопу, и может быть представлен в качестве любой приемлемой дозированной формы для перорального введения, такой как, не ограничиваясь только ими, пилюли, таблетки, диспергируемые таблетки, капсулы, жидкость и т.п. В другом варианте реализации второй состав может быть в форме с немедленным высвобождением, контролируемого или двойного высвобождения и может содержать леводопу и бенсеразид, или леводопу и карбидопу. Такой состав для перорального применения в виде пилюль, таблеток и т.п. может содержать карбидопу или бенсеразид в соотношении к леводопе примерно от 1:10 до 1:4, предпочтительно в соотношении примерно от 1:4 до 1:1. Также в настоящее изобретение включено, что вторые составы включают составы, например, в виде таблеток, которые содержат леводопу, карбидопу и энтакапон, или, например, таблетки, которые содержат аргининовую соль леводопы и/или аргининовую соль карбидопы.

В другом варианте реализации, набор содержит первый жидкий состав, содержащий карбидопу и аргинин, подходящий для (не ограничиваясь) трансдермального, внутривенного, подкожного, интрадермального, внутримышечного, интрадуоденального продолжительного непрерывного введения, и второй состав в форме состава для перорального введения с немедленным, контролируемым или двойным высвобождением, содержащий леводопу и карбидопу. Указанный состав для перорального введения в форме пилюль, таблеток, капсул и т.п. может содержать карбидопу и леводопу в соотношении от примерно 1:10 до примерно 1:4, предпочтительно от примерно 1:4 до примерно 1:1.

В другом аспекте, данное изобретение относится к составу, содержащему сложный эфир карбидопы, такой как, не ограничиваясь только ими, этиловый, пропиловый, изопропиловый или гексиловый сложный эфир карбидопы или ее соли. Примеры сложных эфиров леводопы, включенных в настоящее изобретение, представляют собой алкиловые эфиры, например, метиловый, этиловый, пропиловый или изопропиловый, или бензиловый сложный эфир.

Композиции настоящего изобретения подходят для лечения заболеваний и нарушений, характеризующихся сниженными и/или колеблющимися уровнями дофамина в головном мозге пациентов при одновременном введении нуждающемуся в этом пациенту по существу непрерывно совместно с терапевтически эффективным количеством леводопы или ее соли или композиции, содержащей леводопу. Как показано в Примерах, раздельное непрерывное введение карбидопы, совместно с введением леводопы, даже при дискретном (например, пероральном) введении леводопы пациенты обеспечивает значительно более высокие уровни леводопы в плазме крови пациента при введении по сравнению со стандартным дискретным одновременным дозированием карбидопы и леводопы. Так, предложенные способы могут обеспечивать увеличение периода полувыведения леводопы из организма пациента по меньшей мере в 1,5 или по меньшей мере в 2 раза в случае непрерывного введения карбидопы по сравнению с периодом полувыведения леводопы в сыворотке пациента после введения леводопы без непрерывного введения карбидопы (например, дискретно и перорально).

Рассматриваемое введение, например, карбидопы и леводопы, предложенными способами обычно может быть осуществлено в определенный период времени (обычно недели, месяцы или годы, в зависимости от выбранной комбинации). Предполагаемая терапия направлена на прием нескольких терапевтических агентов одновременно, таким образом, что ингибитор допа-декарбоксилазы вводят по существу непрерывно, в то время как леводопу вводят дискретными интервалами, а также осуществляют введение включенных терапевтических агентов, или по меньшей мере двух терапевтических агентов по существу одновременно. Введение может быть осуществлено любым подходящим путем, включающим, но не ограничиваясь только ими, пероральные пути, внутривенные пути, внутримышечные пути, интрадермальные пути, подкожные пути, трансдермальные пути и путем прямого всасывания через слизистую оболочку.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения, леводопу можно вводить тем же самым путем, что и состав карбидопы, или другими путями. Например, карбидопу можно вводить подкожно, например, по существу непрерывно, при этом леводопу можно вводить перорально, например, дискретными интервалами. В одном варианте реализации изобретения, предложенную жидкую композицию карбидопы (например, содержащую карбидопу и аргинин) вводят по существу непрерывно, при этом пероральную композицию леводопы (которая также может иметь в своем составе один или более активных агентов, таких как ингибитор допа-декарбоксилазы) вводят дискретными интервалами. В качестве альтернативного варианта, например, и леводопу, и карбидопу можно вводить подкожно или трансдермально.

Заболевание или расстройство, характеризующиеся сниженными уровнями дофамина в головном мозге, рассматриваемые в данной заявке, представляют собой неврологические заболевания или расстройства двигательных функций, такие как синдром беспокойных ног, болезнь Паркинсона, вторичный паркинсонизм, болезнь Гентингтона (Хантингтона), паркинсоноподобный синдром, синдром прогрессирующего супрануклеарного паралича (PSP), множественная системная атрофия (MSA), амиотрофический латеральный склероз (ALS), синдром Шая-Дрейджера и состояния, вызванные повреждением головного мозга, включая отравление угарным газом или марганцем. В одном из предпочтительных вариантов реализации, заболевание, подвергаемое лечению, представляет собой болезнь Паркинсона.

В предпочтительных вариантах реализации, предполагаемый ингибитор декарбоксилазы представляет собой аргининовую соль карбидопы. Предложенный состав карбидопы/леводопы можно вводить по существу непрерывно при использовании, например, жидкого состава, например, через насос для подкожной инфузии (инсулиновый насос) при 10-250 мкл/ч, предпочтительно примерно 15-85 мкл/ч, совместно с пероральным введением леводопы, аргининовой соли леводопы или композиции, содержащей леводопу.

Например, согласно данному изобретению, фармацевтически эффективное количество композиции, содержащей карбидопу и аргинин (аргининовую соль карбидопы из первой композиции набора согласно настоящему изобретению) может быть введено пациенту по существу непрерывно для лечения неврологического расстройства или расстройства двигательных функций, например, болезни Паркинсона, при этом второе соединение набора, содержащее леводопу или соль леводопы, например, аргинин леводопы, вводят пациенту способом, отличным от непрерывного.

В некоторых вариантах изобретения, композиция, содержащая карбидопу и аргинин, может быть жидкостью при комнатной температуре. Такая композиция может быть введена по существу непрерывно в течение 12 часов, 1 дня, 1 недели или более. Указанная композиция, содержащая леводопу, может составлять целиком или являться частью состава для перорального применения с мгновенным, контролируемым или обоими указанными типами высвобождения, содержащего леводопу и, возможно, бенсеразид или карбидопу, и может быть введена 1, 2, 3, или 4 и более раз в день, например, путем перорального введения (например, в виде таблеток).

Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения заболеваний или расстройств, характеризующихся пониженным уровнем дофамина в головном мозге пациентов (например, болезни Паркинсона), включающий совместное введение нуждающемуся в этом пациенту по существу непрерывно терапевтически эффективного количества предложенной соли леводопы.

Настоящее изобретение, которое выше описано в целом, станет более понятным при рассмотрении со ссылкой на последующие примеры, которые включены лишь с целью иллюстрации некоторых аспектов и вариантов реализации согласно настоящему изобретению, и не предназначены для ограничения изобретения каким-либо образом.

ПРИМЕРЫ

Пример 1 - Приготовление и характеристика аргининовой соли карбидопы

Аргининовую соль карбидопы (CD) приготовляли следующим образом:

Карбидопу [Teva Pharmaceuticals Ltd., Israel] и L-аргинин [Merck] (в молярном соотношении 1:1) взвешивали в подходящем контейнере, добавляли 0,2% раствор бисульфита натрия [Sigma] в воде с получением конечной концентрации карбидопы 4,0%. Приготовленную смесь нагревали до 65±10°С при постоянном перемешивании. Когда все компоненты растворились, раствор фильтровали с применением 0,45 мкм нейлоновой мембраны. Отфильтрованный раствор подвергли быстрой заморозке в сухом льду, а затем подвергли лиофилизации. В результате получили кристаллы грязно-белого цвета, которые затем подвергали анализу методом масс-спектрометрии (МС). Результаты масс-спектрометрии (МС) показали наличие ионов карбидопы и L-аргинина и фрагментов (Фиг. 1а). Пик со значением 249 свидетельствует о присутствии ионов карбидопы + Na (226+23) с фрагментами: 227, 188 и 144 (Фиг. 1b); Пик 176 соответствует аргинину + 2Н (174+2) с фрагментами: 157, 130 и 116 (Фиг. 1с).

Пример 2 - Приготовление раствора/состава карбидопы для подкожного введения

4% раствор/состав карбидопы готовили следующим образом:

Карбидопу [Assia Ltd., Israel] взвешивали в подходящем контейнере и добавляли необходимое количество воды с получением 73% от общей предполагаемой навески. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут. L-аргинин [Sigma] добавляли к смеси до достижения молярного соотношения с карбидопой 1:1. Смесь нагревали до 65±10°С при постоянном перемешивании. Когда все твердые компоненты полностью растворились, добавили N-метил-2-пирролидон [Pharmasolve, ISP] до конечной концентрации 10% (масс./масс.). Готовили раствор бисульфита натрия [Sigma] и добавляли его к общей смеси до достижения конечной 1% концентрации (об./масс.). Перемешивание продолжали в течение еще 30 минут при 65±3°С. Затем готовили раствор PVP [Поливинилпирролидон, Sigma] и добавляли его до достижения конечной 1% концентрации (об./масс.). Перемешивание продолжали в течение 30 минут при температуре 65±3°С. После этого нагревание прекращали и давали раствору остыть до комнатной температуры. Раствор отфильтровали с применением стерильной 0,22 мкм мембраны из поливинилиденфторида (PVDF).

2 и 3% растворы/составы карбидопа-аргинин готовили разбавлением 4% раствора/состава карбидопа-аргинин соответствующим количеством дважды дистиллированной воды (DDW).

Пример 3 - Приготовление раствора/состава карбидопы для подкожного введения

6% раствор/состав карбидопы готовили следующим образом: Карбидопу [Teva Pharmaceuticals Ltd, Israel] и L-аргинин [Merck] (в молярном соотношении 1:1,1) взвешивали в подходящем контейнере и добавляли воду до достижения концентрации 84% от общей предполагаемой навески. N-метил-2-пирролидон [Pharmasolve, ISP] добавляли до конечной 5% концентрации (масс./масс.), затем готовили раствор бисульфита натрия [Sigma] и добавляли его до конечной концентрации 0,1% (об./масс.). Полученную смесь нагревали до 65±10°С при постоянном перемешивании. Когда все твердые компоненты полностью растворились, нагревание прекращали, а затем давали раствору остыть до комнатной температуры. Полученный раствор фильтровали с применением стерильной 0,22 мкм мембраны из поливинилиденфторида (PVDF).

Пример 4 - Приготовление раствора/состава карбидопы для подкожного введения

4% раствор/состав карбидопы готовили следующим образом:

Карбидопу [Teva] и L-аргинин [Merck] (в молярном соотношении 1:1,1) взвешивали в подходящем контейнере, затем добавляли воду с получением 89% от общей предполагаемой навески. N-метил-2-пирролидон [Pharmasolve, ISP] добавляли до конечной концентрации 3,5% (масс./масс.). Затем готовили раствор бисульфита натрия [Sigma] и добавляли его до достижения конечной концентрации 0,05% (об./масс.). После этого смесь нагревали до 65±10°С при постоянном перемешивании. Когда твердые компоненты полностью растворились, нагревание прекращали и давали раствору остыть до комнатной температуры. Раствор фильтровали с применением стерильной 0,22 мкм мембраны из поливинилиденфторида (PVDF).

2 и 3% растворы/составы карбидопа-аргинин готовили разбавлением 4% раствора/состава карбидопа-аргинин соответствующим количеством дважды дистиллированной воды (DDW), содержащей 3,5% N-метилпирролидона с или без 0,05% бисульфита натрия.

Пример 5 - Приготовление состава карбидопы для трансдермальной доставки

8% состав карбидопы готовили следующим образом:

Карбидопу [Teva] и L-аргинин [Merck] (в молярном соотношении 1:1) взвешивали в подходящем контейнере, затем добавляли пропиленгликоль [Merck] с получением 75% от общей предполагаемой навески. Готовили раствор бисульфита натрия [Sigma] и добавляли его до достижения конечной концентрации 0,05%. Смесь нагревали до 65±10°С при постоянном перемешивании. Когда все твердые компоненты полностью растворились, нагревание прекращали и давали раствору остыть до комнатной температуры. Добавляли PEG-400 [Merck], 10% общей предполагаемой навески. Значение рН доводили до 7,5 с помощью 85% молочной кислоты [Fluka].

Пример 6 - Приготовление и стабилизация растворов/составов карбидопа-аргинин, карбидопа-лизин и карбидопа-гистидин

Растворы/препараты карбидопы готовили следующим образом: Карбидопу [Teva] вместе с L-аргинином [Merck] или L-лизином [Sigma] или L-гистидином [Sigma] (в молярном соотношении 1:1, 1:1,1 или 1:2) взвешивали в подходящем контейнере и добавляли воду. Добавляли N-метил-2-пирролидон [Pharmasolve, ISP] до достижения конечной концентрации 5% (масс./масс.). Затем готовили раствор бисульфита натрия [Sigma] и добавляли его до достижения конечной концентрации 0,05% (об./масс.). Смесь нагревали до 68±3°С при постоянном перемешивании. Когда все твердые компоненты полностью растворились, нагревание останавливали и охлаждали раствор до комнатной температуры. Стабильные составы (2% CD: лизин и 2% CD: аргинин в молярном соотношении 1:1,1) далее подвергали анализу методом ВЭЖХ при t=0 и t=7 дней при 25°С.

Результаты анализа демонстрируют значительное различие между указанными тремя аминокислотами [L-аргинином (PI-10.76), L-лизином (PI-9.74) и L-гистидином (PI-7.59)] в отношении влияния на растворимость и стабильность карбидопы в водных растворах: в Таблице 1 показана растворимость и стабильность карбидопы в указанных водных растворах с основными аминокислотами (аргинином, лизином или гистидином), согласно визуальному определению (Таблица 1А) или определению с помощью анализа УФ-ВЭЖХ (Таблица 1В). Стабильный раствор 6% карбидопы готовили с аргинином, а с лизином возможно было приготовить только менее чем 4% стабильный раствор карбидопы (Таблица 1А). Более того, 2% раствор карбидопы с лизином был менее стабилен с аргинином через 7 дней при 25°С (Таблица 1В). Кроме того, стабильный раствор с гистидином при концентрациях ≥1% было невозможно приготовить (Таблица 1А).

Пример 7 - Получение соли леводопа-аргинин

Соль леводопа-аргинин получали следующим образом:

Леводопу [Teva] и L-аргинин [Merck] взвешивали в подходящем контейнере с L-аргинином [Merck] (в молярном соотношении 1:1,8) и добавляли 0,2% раствор натрия бисульфита [Sigma] в воде до конечной концентрации L-допы 4,4%. Смесь нагревали до 65±10°С при постоянном перемешивании. Когда твердые компоненты полностью растворились, смесь отфильтровали с применением 0,45 мкм нейлоновой мембраны. Отфильтрованный раствор подвергали быстрой заморозке в сухом льду, а затем лиофилизации. Полученные кристаллы грязно-белого цвета подвергали анализу методом масс-спектрометрии. Результаты данного анализа (показаны на фиг. 2) явным образом показали присутствие ионов леводопы и аргинина: леводопа (LD): 197 с фрагментами 178,97, 151,96, 136,98 (Фиг. 2а и 2b); Аргинин: 175 с фрагментами 130, 116 (Фиг. 2а и 2с)

Пример 8 - Приготовление растворов/составов карбидопы и карбидопы/энтакапона для подкожного введения и оценка их местной безопасности на свиньях

Растворы/составы 10% карбидопы и 4/6% карбидопы/энтакапона готовили следующим образом:

Карбидопу [Assia Ltd.] взвешивали в подходящем контейнере и добавили воду с получением 73% от общей предполагаемой навески. Смесь перемешивали в течение 20 минут при комнатной температуре. L-аргинин [Sigma] добавляли к приготовленной смеси до достижения молярного соотношения 1:1 с карбидопой. Смесь нагревали до 65±10°С при постоянном перемешивании. Когда твердые компоненты полностью растворились, к смеси добавили N-метил-2-пирролидон [Pharmasolve, ISP] до конечной концентрации 10% (масс./масс.). Готовили раствор бисульфита натрия [Sigma] и добавили к смеси до конечной концентрации 1% (об./масс.), перемешивая в течение еще 30 минут при 65±3°С. После приготовили раствор PVP [Polyvinylpyrrolidone, Sigma] и добавили его к смеси до конечной концентрации 1% (об./масс.). Перемешивание смеси продолжали в течение еще 30 минут при 65±3°С. Нагревание прекращали и давали раствору остыть до комнатной температуры. Полученный раствор фильтровали с применением стерильной 0,22 мкм мембраны из поливинилиденфторида (PVDF). Отфильтрованный раствор быстро замораживали в сухом льду, после чего подвергли лиофилизации. Лиофилизованные кристаллы были восстановлены с помощью дважды дистиллированной воды с получением 4% и 10% растворов карбидопы. Энтакапон (Е) [выделенный из Comtan®, Novartis] добавили к 4% раствору карбидопы до достижения концентрации 6% (масс./об.). Оба состава (10% CD и 4/6% CD/E) непрерывно вводили свиньям в течение 21 часа для оценки потенциальной местной реакции. Макроскопическое и микроскопическое исследования показали, что непрерывное подкожное введение растворов/составов в течение 21 часа было безопасным (Таблица 2).

В Таблице 2 представлены результаты гистологического исследования препаратов биопсии кожи, взятых у самок свиней Ландрас (L) × большая белая свинья (R), которым предварительно непрерывно подкожно вводили 10% CD (карбидопу) или 4/6% CD/энтакапон в течение 21 часа дозами 25 или 82 мкл/ч.

Пример 9 - Влияние непрерывного подкожного введения карбидопы на фармакокинетический профиль леводопы и карбидопы у свиней

Целью данного эксперимента было определить влияние непрерывного подкожного введения карбидопы, карбидопы совместно с перорально вводимым препаратом L-допы/карбидопы на фармакокинетику леводопы у свиней.

Свиньям весом 30-35 кг вводили перорально Stalevo ® (Novartis, 100/25/200 мг, LD/CD/E), Dopicar® [Teva] + Lodosyn® (Merck & Co) (125/25 мг, LD/CD) или Sinemet CR® (MSD, 100/25 мг, LD/CD) три или два раза в день (каждые 8 или 12 часов, соответственно) совместно с карбидопой (60 мг/свинья/день) или без нее в течение общего периода 68 часов. Пробы крови были взяты в предварительно определенные моменты времени и уровень L-допы и карбидопы в плазме крови проанализировали с помощью ЖХ-МС.

Результаты показали, что непрерывное подкожное введение карбидопы с любым пероральным препаратом LD существенно увеличивает (более чем в 2 раза) период полувыведения (t½) и AUC леводопы. Напротив, увеличение дозы или частоты введения карбидопы пероральным путем не оказали существенного положительного влияния на фармакокинетический профиль леводопы, как показано в Таблице 3. Также стоит отметить, что постоянные стабильные уровни содержания CD были достигнуты при 164±34 нг/мл в течение 68 часов непрерывного подкожного введения карбидопы (60 мг/свинья/день). Эти результаты были противоположны нестабильному графику и очень низким минимальным уровням CD, полученным после введения препарата при стандартном лечении (Фиг. 3А-3С). Никаких признаков местного или систематического отравления в течение всех 68 часов лечения обнаружено не было.

Фармакокинетические параметры леводопы, обнаруженной в плазме крови самок свиней ландрас × большая белая свинья (30-35 кг), измеренные после перорального введения (A) Stalevo (100/25/200 мг, LD/CD/E), (Б) Dopicar+Lodosyn (125/25 мг LD/CD), (С) Sinemet CR (100/25 мг, LD/CD) каждые 8 и 12 часов, совместно с или в отсутствие непрерывного подкожного введения 3% раствора карбидопы (CD), представлены в Таблице 3:

Пример 10 - Влияние непрерывного подкожного введения карбидопы на распределение леводопы и дофамина в головном мозге у мышей

Целью данного эксперимента было определить влияние непрерывного подкожного введения карбидопы (15 мг/кг/день) на уровни леводопы и дофамина в головном мозге после перорального введения леводопы/карбидопы (32/8 мг/кг три раза в день) у мышей.

Мышам подкожно имплантировали насосы Alzet, содержащие физиологический раствор (отрицательный контроль), носитель или раствор карбидопы. На следующий день после имплантации LD/CD вводили перорально каждые 8 часов. Уровень леводопы и дофамина в головном мозге определяли после четвертой дозы перорально введенного LD/CD. Результаты показали, что уровни дофамина через 7 часов после перорального введения LD были значительно выше в головном мозге мышей, которым непрерывно подкожно вводили карбидопу (Фиг. 4А), одновременно и с более высокими уровнями LD в плазме крови (Фиг. 4В).

Пример 11 - Влияние дозы непрерывного подкожного введения карбидопы на местную токсичность и фармакокинетический профиль леводопы и карбидопы у свиньей

Целью данного эксперимента было определить влияние дозы непрерывного подкожного введения карбидопы на местную переносимость и фармокинетику L-допы у свиней.

Свиньям весом 30-35 кг вводили Sinemet® (Merck & Co., 100/25 мг, LD/CD) перорально трижды в день (каждые 8 часов) или Dopicar® (Teva) + Lodosyn® (Merck & Co., (125/25 мг LD/CD) дважды в день (каждые 12 часов), с непрерывным подкожным введением носителя, 2% или 4% карбидопы (0, 40 или 80 мг/свинья/день, соответственно) в течение 24 часов. Пробы крови отбирали в заранее заданные моменты времени и анализировали уровни L-допы и карбидопы в плазме крови с помощью ЖХ-МС. Биопсия кожи была проведена в местах инъекций сразу же, 1 и 2 недели после введения препаратов, местная переносимость была определена с помощью гистологического метода окрашивания гематоксилином и эозином препаратов на стекле. Никакой аномалии в гистологическом исследовании образцов в области инъекций, связанных с лечением, не выявили.

Существенного влияния дозы на уровень L-допы в плазме крови при совместном введении 2 или 4% раствора карбидопы с Sinemet® (Фиг. 5А-5В) или Dopicar®+Lodosyn® (Фиг. 6А-6В) не обнаружили. Таким образом, с учетом условий, в которых проводили эксперимент, предположили, что непрерывное подкожное введение 2% или менее карбидопы может быть достаточно для достижения оптимального уровня ингибирования допа-декарбоксилазы (DDC) у свиней.

Пример 12 - Влияние непрерывного подкожного введения карбидопы вместе с или без непрерывного подкожного введения энтакапона на фармакокинетику леводопы у свиней

Целью данного эксперимента было определить уровень L-допы в плазме крови после непрерывного подкожного введения карбидопы, вместе с или без энтакапона, одновременно с пероральным введением L-допы/карбидопы у свиней. Уровень L-допы в плазме измеряли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с детектором электронного захвата. Результаты, показанные на Фиг. 8, демонстрируют эффективное снижение уровня 3-орто-метилдопы (3-OMD) при действии энтакапона (8Б), но также и отсутствие дальнейшего его воздействия на фармакокинетику леводопы (8А), исходя из чего можно предположить, что энтакапон и/или ингибирование катехол-О-метилтрансфераз затрагивает карбидопа/DDC-зависимые, или другие, пути метаболизма леводопы.

Пример 13 - Влияние непрерывного подкожного введения бенсеразида на фармакокинетику леводопы у свиней

Целью данного эксперимента было определить уровень L-допы в плазме при совместном введении перорального препарата L-допы/карбидопы с непрерывным подкожным введением другого ингибитора DDC, бенсеразида. Уровень L-допы в плазме крови был измерен с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с детектором электронного захвата.

Результаты показали, что бенсеразид расширил фармакокинетический профиль леводопы. Это позволяет сделать предположение о том, что непрерывное ингибирование DDC, посредством любого ингибитора DDC, способствует уменьшению периода полувыведения леводопы, как показано на Фиг. 7.

Пример 14 - Трансдермальная доставка пропилового эфира карбидопы (CDPE) сквозь толщу кожи свиньи ex-vivo при помощи системы доставки диффузионной ячейки Франца

Целью данного эксперимента было определить возможность трансдермальной доставки пропилового эфира карбидопы сквозь всю толщу кожи свиньи ex-vivo с использованием системы доставки в виде диффузионной ячейки Франца. Приготовили гелеобразные препараты, содержащие CDPE. Пробы из клетки-реципиента отбирали через 0, 16, 19 и 22 часов после нанесения препарата на кожу. Количество соединений CD в клеточной жидкости получающей клетки определяли с помощью спектрофотометра при 280 нм. Результаты, приведенные на Фиг. 9, демонстрируют способность CDPE проникать через кожу посредством зависимого от дозировки усиливающего эффект агента метода.

Пример 15 - Влияние перорального введения аргинина карбидопы и аргинина леводопы на фармакокинетический профиль леводопы и карбидопы

Целью данного эксперимента было определить фармакокинетику LD и CD, введенных перорально в виде аргининовых солей, покрытых или не покрытых кишечнорастворимой оболочкой. Свиньям, весом 30-35 кг, перорально вводили 255/45 мг соль LD-аргинина (LDs)/coflb CD-аргинина (CDs) в покрытых (или покрытых) желатином капсулах (соответствующий 100/25 LD/CD). Уровни LD и CD в плазме крови измеряли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с детектором электронного захвата.

Результаты, приведенные на Фиг. 10A-10В, показали, что LDs и CDs абсорбировались быстрее и эффективнее по сравнению с LD/CD (Sinemet®), и пероральное введение покрытых кишечнорастворимой оболочкой LDs/CDs расширили фармакокинетический профиль LD (10А) и CD (10В) в плазме крови.

Пример 16 - Ингибирующее действие эфиров карбидопы на активность допа-декарбоксилазы (DDC) in vitro

Целью данного эксперимента было определить ингибирующее действие эфиров карбидопы (CDEs) на активность допа-декарбоксилазы (DDC). Ферменты DDC получали из гомогената свиной печени, и их активность ферментов измеряли, сравнивая концентрации LD с и без пропилового эфира карбидопы (CDPE). Гомогената печени получали согласно методу, описанному Умезава и др. (Umezawa et al. J. Antib. 1975, 28(12): 947-52).

Все пробы разделяли на колонках высокоэффективной жидкостной хроматографии, определение веществ и концентраций L-допы и дофамина осуществляли с помощью анализа УФ-ВЭЖХ при 280 нм.

Результаты, приведенные на Фиг. 11 и 12А-12В, показали, что CDPE ингибирует процесс декарбоксилизации L-допы в дофамин аналогичным образом, что и карбидопа, и бенсеразид.

Несмотря на то, что в настоящем описании представлены конкретные варианты реализации объектов настоящего изобретения, настоящее описание является иллюстративным и не ограничивающим. Многие вариации данного изобретения станут очевидными специалистов в данной области после просмотра настоящего описания. Полный объем изобретения должен быть определен со ссылкой на формулу изобретения в совокупности с полным объемом эквивалентов, а также в соответствии с описанием, включая такие вариации.

Если не указано обратное, следует понимать, что все числа, выражающие количество ингредиентов, условия реакций и т.п., используемые в настоящем описании и формуле изобретения, могут быть изменены во всех случаях посредством термина «примерно». Соответственно, если не определено обратное, численные параметры, используемые в настоящем описании и приложенной формуле изобретения, являются приближенными, которые могут быть изменены в зависимости от желаемых свойств, которые необходимо достичь посредством настоящего изобретения.

Группа изобретений касается лечения неврологического расстройства. Предложены: жидкая композиция для лечения неврологического расстройства, выбранного из синдрома беспокойных ног, болезни Паркинсона, вторичного паркинсонизма, болезни Хантингтона, паркинсоноподобного синдрома, прогрессирующего супрануклеарного паралича (PSP), множественной системной атрофии (MSA) или бокового амиотрофического склероза (ALS) в совместной терапии с леводопой, причем указанная композиция содержит от 0,5 до 20 мас. %. аргинина, от 0,5 до 6 мас. % карбидопы, от 0 до 30 мас. % N-метилпирролидона (НМП), от 0 до 5 мас. % поливинилпирролидона (ПВП) и от 0 до 5 мас. % одного или более растворимых в воде антиоксидантов, имеет pH от примерно 8,0 до примерно 9,5 и является по существу стабильной при 25°C в течение 48 часов или более, и набор того же назначения, включающий указанную композицию для непрерывного введения и вторую композицию для перорального введения, содержащую терапевтически эффективное количество леводопы или её соли и инструкции. Технический результат состоит в повышении уровня леводопы в головном мозге после введения набора и стабильности заявленного раствора аргинина и карбидопы. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 12 ил., 6 табл., 16 пр.

1. Фармацевтически приемлемая жидкая композиция для лечения неврологического расстройства в совместной терапии с леводопой, содержащая от 0,5 до 20 мас. %. аргинина, от 0,5 до 6 мас. % карбидопы, от 0 до 30 мас. % N-метилпирролидона (НМП), от 0 до 5 мас. % поливинилпирролидона (ПВП) и от 0 до 5 мас. % одного или более растворимых в воде антиоксидантов, причем указанная композиция имеет pH от примерно 8,0 до примерно 9,5 и является по существу стабильной при 25°C в течение 48 часов или более, и указанное неврологическое расстройство выбрано из синдрома беспокойных ног, болезни Паркинсона, вторичного паркинсонизма, болезни Хантингтона, паркинсоноподобного синдрома, прогрессирующего супрануклеарного паралича (PSP), множественной системной атрофии (MSA) или бокового амиотрофического склероза (ALS).

2. Фармацевтически приемлемая жидкая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что молярное отношение карбидопы к аргинину составляет 1:≥1.

3. Фармацевтически приемлемая жидкая композиция по п. 1 или 2, содержащая от 0,5 до 20 мас. % аргинина, от 0,5 до 6 мас. % карбидопы, 0 мас. % N-метилпирролидона (НМП), 0 мас. % поливинилпирролидона (ПВП) и 0 мас. % одного или более растворимых в воде антиоксидантов.

4. Фармацевтически приемлемая жидкая композиция по любому из пп. 1-3, где указанные один или более растворимых в воде антиоксидантов выбраны из N-ацетилцистеина, бисульфита натрия, глутатиона или аскорбиновой кислоты.

5. Фармацевтически приемлемая жидкая композиция по любому из пп. 1-4, дополнительно содержащая воду.

6. Фармацевтически приемлемая жидкая композиция по любому из пп. 1-4, дополнительно содержащая энтакапон или толкапон.

7. Фармацевтически приемлемая жидкая композиция по любому из пп. 1-4, дополнительно содержащая воду и один из энтакапона и толкапона.

8. Набор для лечения неврологического расстройства, выбранного из синдрома беспокойных ног, болезни Паркинсона, вторичного паркинсонизма, болезни Хантингтона, паркинсоноподобного синдрома, прогрессирующего супрануклеарного паралича (PSP), множественной системной атрофии (MSA) или бокового амиотрофического склероза (ALS), содержащий: a) первую композицию, подходящую для непрерывного введения, содержащую жидкую композицию по любому из пп. 1-7; b) вторую композицию, подходящую для перорального введения, содержащую терапевтически эффективное количество леводопы или ее фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира; и, возможно, с) инструкции по введению первой композиции в сочетании со второй композицией.

9. Набор по п. 8, отличающийся тем, что указанная первая композиция для непрерывного введения предназначена для трансдермального, интрадермального, подкожного, внутривенного или интрадуоденального введения.

10. Набор по п. 9, отличающийся тем, что указанное непрерывное введение включает введение с применением инфузионного насоса.

11. Набор по п. 8, отличающийся тем, что указанная вторая композиция содержит фармацевтически приемлемую соль леводопы, предпочтительно аргининовую соль леводопы.

12. Набор по любому из пп. 8-11, отличающийся тем, что указанная вторая композиция дополнительно содержит карбидопу, бенсеразид, энтакапон, толкапон или их комбинацию.