Димерные четвертичные соли пиридиния, обладающие биоцидным действием Российский патент 2019 года по МПК C07D213/60 C07D213/803 A61K31/4412 A61P31/00 

Предлагаемое изобретение относится к новому типу димерных четвертичных солей пиридиния, обладающих биоцидным действием, а также к способу их получения. Предлагаемые соединения могут найти применение в качестве антисептиков и дезинфицирующих средств.

Распространение микробов и их возрастающая резистентность к множеству известных противомикробных лекарственных средств является потенциально высокой опасностью для человечества во всем мире. Поэтому поиск новых химических веществ, обладающих биоцидными свойствами против широкого спектра условно патогенных и патогенных микроорганизмов, является очень важным. В наши дни задача создания нового поколения высокоэффективных антисептиков, обладающих широким спектром антибактериального действия при низкой токсичности и экономичности, является крайне актуальной. Такие новые биоциды увеличат число доступных исходных веществ для создания различных антисептических и дезинфицирующих агентов.

Четвертичные аммониевые соли (ЧАС) являются одним из наиболее часто применяемых классов дезинфицирующих средств, которые находят применение в больницах, для обработки воды, текстильной, лакокрасочной и пищевой промышленности благодаря их относительно низкой токсичности для человека и животных и их широкой специфичности противомикробного действия [Block, S.S. Disinfection, Sterilization and Preservation, 5th ed. Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, U.S.A. 2001, p. 283-319]. Среди них четвертичные соли пиридиния и бис-пиридиния представляют важную группу химических веществ, широко применяемых в качестве биоцидов, благодаря их сильному противомикробному действию даже при очень низких концентрациях, на широкий спектр грамположительных и грамотрицательных бактерий, грибов и некоторых вирусов [Chanawanno, K., Chantrapromma, S., Anantapong, Т., Kanjana-Opas, A., Fun, Н.-K. Synthesis, structure and in vitro antibacterial activities of new hybrid disinfectants quaternary ammonium compounds: Pyridinium and quinolinium stilbene benzenesulfonates. European Journal of Medicinal Chemistry, 45, 4199-4208 (2010); Kourai, H., Yabuhara, Т., Shirai, A., Maeda, Т., Nagamune, H. Syntheses and antimicrobial activities of a series of new bis-quaternary ammonium compounds. European Journal of Medicinal Chemistry, 41 (4), 437-444 (2006); Perles, C.E., Matheus, A., Volpe, P.L.O. The effect of quaternary ammonium surfactants on the inhibition of the aerobic metabolism of Sacharomyce cerevisiae - A calorimetric study. Thermochimica Acta, 479 (1-2), 28-31 (2008); Ng, C.L.L., Singhal, V., Widmer F., Wright, L.C., Sorell, T.C., Jolliffe, K.A. Synthesis, antifungal and hemolytic activity of a series of bis(pyridinium)alkanes. Bioorganic & Medicinal Chemistry, 15 (10), 3422-3429 (2007)].

Учитывая недавние результаты, касающиеся низкого цитотоксического действия некоторых противомикробных агентов из группы бис-четвертичных солей пиридиния на клетки человека, ожидается, что соли пиридиния и бис-пиридиния являются потенциальными агентами, рекомендуемыми для применения в композициях гигиенических продуктов, в пищевой промышленности (производственная среда, оборудование, различные поверхности) и в ресторанной деятельности, больницах и т.д. [Nagamune, Н., Maeda, Т., Ohkura, K., Yamamoto, K., Nakajima, М., Kourai, Н. Evaluation of cytotoxic effects of bisquaternary ammonium antimicrobial reagents on human cells. Toxicology in Vitro, 14 (2), 139-147 (2000)].

В патентах и научной литературе можно найти некоторые соли бис-четвертичного пиридиния, которые обладают противомикробным и противогрибковым действием [патент США 4206215 (1980), WO/2007/128059 (2007), патент США 7612097 (2009)]. Молекулярная структура этих соединений может быть представлена А, В и С типами, как показано ниже

Здесь в структурах А и В спейсер Z представляет собой длинную алифатическую цепь, содержащую от 6 до 18 атомов углерода или содержащую подобную цепь с двойными и тройными связями внутри, или встроенные атомы кислорода, азота и серы, или сложноэфирные группы, присоединенные к атому азота пиридиновых колец [структура А - патент США 4206215 (1980); Bailey D.M., DeGrazia C.G., Hoff S.J., Schulenberg P.L., J.R., Paris D.A., Slee A.M., Bispyridinamines: a new class of topical antimicrobial agents as inhibitors of dental plaque, J. Med. Chem. 27, p. 1457-1464 (1984); структура В - WO 2007/128059 (2007)].

В структуре С спейсер Z представляет собой как длинную алифатическую цепь, содержащую от 6 до 18 атомов углерода или содержащую подобную цепь с двойными и тройными связями внутри, или встроенные атомы кислорода, азота и серы, или сложноэфирные группы [структура С - патент США 7612097 (2009)], так и циклическую кислородсодержащую двухвалентную структуру на основе пентаэритрита, дипентаэритрита или гидрохинона [патент ЕА 026416 (2017)].

Однако существует важное отличие структуры С от структур А и В, а именно в структуре С спейсер Z соединен с атомами углерода пиридинового кольца [патент США 7612097 (2009)].

Одно из соединений структуры А - "дигидрохлорид октенидина" широко применяют в качестве активного антибактериального агента в создании композиций антисептических и дезинфицирующих средств, и оно коммерчески доступно [заявка на патент США 2001/0036963; заявка на патент США 2011/0217360, ЕР 2401914].

Ближайшим аналогом предлагаемых димерных четвертичных солей пиридиния в соответствии с данным изобретением являются бис-четвертичные пиридиниевые соли структуры С со спейсером Z гидрохиноном [патент ЕА 026416 (2017)]. Основными недостатками данных бис-четвертичных пиридиниевых солей структуры С являются слабое биоцидное действие на грамотрицательные бактерии, высокая токсичность и раздражение кожи.

Технической задачей предлагаемого изобретения является расширение ассортимента соединений, обладающих повышенной биоцидной активностью и низкой токсичностью одновременно, и разработка способа их получения. Поставленная техническая задача достигается новым типом димерных четвертичных солей пиридиния общей формулы:

где R является линейной или разветвленной алкильной или алкениленовой или алкиновой группой, содержащей от 8 до 18 атомов углерода; n является 0 либо 1; X является атомом галогена: хлором, бромом или йодом.

Предлагаемые новые соединения общей формулы I обладают биоцидным действием и могут быть использованы в качестве активного биоцидного ингредиента для получения антисептических и дезинфицирующих средств. Соединения общей формулы I, где 4,4'-бифенольный (n=0) или 4,4'-оксибифенольный (n=1) спейсер соединен непосредственно с положением 2, 3 или 4 в пиридиновом кольце, демонстрируют схожие биоцидные свойства в сравнении с бис-четвертичными солями пиридиния, применяемыми в современных антисептиках и дезинфицирующих композиций. Однако, в отличие от известных антисептиков, в частности соединений типа С, описанных выше, новые соединения обладают более высоким биоцидным действием и более низкой токсичностью одновременно. Поэтому применение этих соединений может быть расширено до активных соединений для кожных антисептиков, а также для других дезинфицирующих композиций.

Соединения общей формулы I могут применяться в качестве противомикробных агентов. Они обладают биоцидным действием, т.е. бактериостатическим действием при низкой и даже очень низкой токсичности.

Предложенный новый тип димерных четвертичных солей пиридиния, производных от пиридиновых производных 4,4'-бифенола или 4,4'-оксибифенола и алкилгалогенидов, обладают превосходным биоцидным действием и могут найти применение в качестве активных соединений в композициях антисептических и дезинфицирующих средств. Соединения общей формулы I в соответствии с данным изобретением обладают более высоким биоцидным действием и более низкой токсичностью по сравнению с существующими четвертичными аммониевыми солями.

Согласно Директиве 98/8/ЕС Европейского Парламента и Совета ЕС от 16 февраля 1998 г. следующие определения терминов применяются в данном изобретении:

антибактериальное - химическое вещество, которое убивает или замедляет рост бактерий;

противомикробное - химическое вещество, которое, в низких концентрациях, оказывает действие против микроорганизмов и разрушает их или ингибирует их рост;

антисептическое - противомикробное вещество, которое применяют на живых тканях/коже для снижения вероятности заражения, сепсиса или гнилостного разложения;

противогрибковое - химическое вещество, которое разрушает или ингибирует рост грибов;

бактериостатическое - химическое средство, которое останавливает воспроизводство бактерий, необязательно повреждая их другим способом;

биоцид (биоцидные продукты) - химическое средство, предназначенное для разрушения, обезвреживания, предотвращения действия или другого контролирующего действия на любой вредный организм химическими или биологическими средствами. Примеры включают дезинфицирующие средства, консерванты, антисептики, пестициды, гербициды, фунгициды и инсектициды.

дезинфицирующее - химическое вещество, которое применяют на неживых объектах для разрушения микроорганизмов, которые живут на объектах.

В настоящее время устойчивость бактерий к современным антибактериальным средствам стимулирует исследование и создание работ по поиску новых улучшенных биоцидных материалов.

В данном изобретении представлен тот факт, что димерные четвертичные соли пиридиния, имеющие общую формулу I и являющиеся производными 4,4'-бифенола или 4,4'-оксибифенола, объединяют в себе биоцидное действие широкого противомикробного спектра вместе с низкой токсичностью, и могут применяться в качестве активного ингредиента для создания нового поколения антисептиков и дезинфицирующих средств, обладающих низкой токсичностью по сравнению с известными средствами, применяемыми на практике, т.е. для медицинских целей и использования в быту.

Согласно современным научным взглядам на принципы антисептического действия, биоцидное действие соединений общей формулы I может быть определено, но не ограничено этим, их способностью прилипать к стенкам клеток и мембране бактерий, а также проникать внутрь сердцевины клетки с последующим ингибированием клетки.

Последовательность разрушения клетки биоцидом может быть описана следующим образом.

1. Абсорбция биоцида на поверхности клетки.

2. Диффузия молекулы биоцида через стенку клетки внутрь клетки.

3. Присоединение диффузной молекулы биоцида к цитоплазматической мембране.

4. Дестабилизация и разрушение цитоплазматической мембраны.

5. Выделение соединений цитоплазмы из клетки.

6. Разрушение клетки.

Способность связываться с мембранами в основном определяется, с одной стороны, присутствием положительно заряженных групп в соединениях, представленных общей формулы I, в частности двух четвертичных пиридиниевых групп, и, с другой стороны, присутствием отрицательного заряда на поверхности клеток, что является обычным для фосфатных групп липидов и кислот.

Механизм взаимодействия соединений общей формулы I с мембранами микроорганизмов может быть описан следующим образом. После контакта клетки и молекулы биоцида, возникает электростатическое взаимодействие отрицательно заряженных групп на поверхности клеток и молекулы биоцида. Это приводит к переориентации молекулы биоцида и внедрению ее заряженных фрагментов внутрь липидного монослоя (мембраны). Соединение общей формулы I совместно может связываться с большим количеством фосфолипидов в мембране и вызывать нейтрализацию ее отрицательного заряда. Созданный комплекс стабилизируется сильным гидрофобным взаимодействием с алкильными цепями жирных кислот фосфолипидов. Это приводит к сильному дисбалансу в электростатических и гидрофобных взаимодействиях и снижает взаимодействие липид-липид. В то же время, другим аспектом адсорбции биоцида на поверхности клетки является ингибирование барьерных и транспортных функций мембраны. Дальнейшее внедрение гидрофобного фрагмента молекулы биоцида внутрь неполярной части мембраны клетки ведет к ее расширению и снижению сил Ван-дер-Вальса между молекулами липида. Как следствие, во-первых, изменяется электрическая проницаемость мембраны, во-вторых, нарушается целостность мембраны, и наконец, мембрана фрагментируется и разрушается.

Положительный вклад в высокое антибактериальное действие в сочетании с низким уровнем токсичности соединений общей формулы I может вносить спейсер. Присутствие атомов кислорода внутри структуры спейсера, несомненно, закрепляет хороший баланс между гидрофобными и гидрофильными компонентами молекулы. Это дает высокое антибактериальное действие и низкую токсичность.

В общей формуле I R является линейной или разветвленной алкильной или алкениленовой или алкиновой группой, содержащей от 8 до 18 атомов углерода.

Термины "алкил" в соединениях в соответствии с данным изобретением включают обычно С8-18, предпочтительно С8-16, более предпочтительно С8-12. Примеры таких алкильных групп включают н-октил, трет-октил, 2-этилгексил, нонил, децил, изодецил, ундецил, додецил, тридецил, тетрадецил, пентадецил, гексадецил, гептадецил и октадецил и т.д. Предпочтительными группами являются С8-18 линейные алкильные группы, такие как н-октил, нонил, децил, ундецил, додецил, тетрадецил, гексадецил и октадецил; более предпочтительными являются н-октил, нонил, децил, ундецил, додецил.

Термины "алкенилен" в соединениях в соответствии с данным изобретением включают обычно С8-18, предпочтительно С8-16, более предпочтительно С8-12 и по крайней мере одну двойную связь. Примеры таких алкениленовых групп включают октенил, ноненил, деценил, изодеценил, ундеценил, додеценил, тридеценил, тетрадеценил, пентадеценил, гексадеценил и октадеценил и т.д., предпочтительные группы включают С8-18 линейные алкениленовые группы, такие как октенил, деценил, додеценил, тетрадеценил, гексадеценил и октадеценил; более предпочтительными являются октенил, ноненил, деценил, ундеценил, додеценил.

Термины "алкин" в соединении в соответствии с данным изобретением включают обычно С8-18, предпочтительно С8-16, более предпочтительно С8-12 и по крайней мере одну тройную связь. Примеры таких алкиновых групп включают октинил, нонинил, децинил, изодецинил, ундецинил, додецинил, тридеценил, тетрадецинил, пентадецинил, гексадецинил и октадецинил и т.д. Предпочтительные группы включают С8-18 линейные алкиновые группы, такие как октинил, децинил, додецинил, тетрадецинил, гексадецинил и октадецинил; более предпочтительными являются октинил, нонинил, децинил, ундецинил, додецинил.

Подавляющее большинство соединений, представленных общей формулой I, оценили и проверили на антибактериальное и противогрибковое действие против микроорганизмов Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans и Cryptococcus neoformans с применением диско-диффузионного метода [Bauer A.W.; Kirby W.M.; Sherris J.C.; Turck M., Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method, Am. J. Clin. Pathol., 45, 493-496 (1966)]. Эти штаммы рекомендованы для тестирования бактериального действия дезинфицирующих средств [European Committee for Standardization. EN 1040, Chemical disinfectants and antiseptics - Quantitative suspension test for the evaluation of basic bactericidal activity of chemical disinfectants and antiseptics - Test method and requirements. (Phase 1) Brussels, Belgium, (2005)].

Некоторые соединения, представленные общей формулой I, как показано ниже в приведенных примерах, превосходили контрольные соединения - хлорид бензалкония, а также ближайший аналог - димерную четвертичную соль пиридиния дибромид 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния), демонстрируя высокое бактериостатическое и противогрибковое действие против всех указанных выше микроорганизмов. Хлорид бензалкония (ХБА) применяют в качестве ссылочного лекарственного средства для контроля. Хотя ХБА является соединением бензиламмония, которое не имеет бис-четвертичных аммониевых групп, оно было выбрано как стандарт, так как в настоящее время его широко применяют в качестве бактерицидного агента [Murguia М.С., Vaillard V.A., Sanchez V.G., Conza J.D., Grau R.J. Synthesis, surfaceactive properties, and antimicrobial activities of new double-chain gemini surfactants. J. Oleo Sci. 57 (5), 301-308 (2008); US Patent 7612097 (2009)].

Большинство соединений, представленных общей формулой I, как показано ниже в приведенных примерах, имеют низкую токсичность и обладают более низкой цитотоксичностью, чем хлорид бензалкония и другие бис-четвертичные соли пиридиния, например соединение структуры С [патент США 7612097 (2009)] и коммерчески доступная бис-четвертичная соль пиридиния - "дигидрохлорид октенидина" [Muller G., Kramer А. Biocompatibility index of antiseptic agents byparallel assessment of antimicrobial activity and cellular cytotoxicity. J. Antimicrob Chemother 61, p. 1281-7 (2008)].

Соединения общей формулы I могут применяться в качестве антисептиков или дезинфицирующих средств. Они могут быть растворены, суспендированы или эмульгированы. Соединения могут наноситься распылением, протиранием и т.д. Димерные четвертичные пиридиниевые соединения, описанные здесь, могут быть объединены с одним или более приемлемыми адъювантами и/или носителями с получением композиции.

Предложен также способ получения нового типа димерных четвертичных солей пиридиния общей формулы:

где R является линейной или разветвленной алкильной или алкениленовой или алкиновой группой, содержащей от 8 до 18 атомов углерода; n является 0 либо 1; X является атомом галогена: хлором, бромом или йодом, заключающийся в том, что соответствующие дипиридильные производные общей формулы:

где n является 0 либо 1, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы RX, где R является линейной или разветвленной алкильной или алкениленовой или алкиновой группой, содержащей от 8 до 18 атомов углерода, и X является атомом галогена: хлором, бромом или йодом, при кипячении.

Процесс можно проводить в среде органического растворителя либо без него. В качестве органического растворителя можно использовать, например, ацетонитрил, спирты, 4-метилпентан-2-он, ДМСО, ДМФА, ДМА.

При этом новые дипиридильные производные общей формулы II при низких затратах легко получают из доступных соединений пиридина и производных бифенила и бифенилового эфира.

Соединение формулы IIa могут быть получены алкилированием 4,4'-бифенола 2-бромпиридином с применением известного метода [J.Н. Chu, S.Т. Chen, М.F. Chiang, М.J. Wu, Palladium-catalyzed direct ortho aroylation of 2-phenoxypyridines with aldehydes and catalytic mechanism investigation. Organometallics, 34, p. 953-966 (2015)] с 77% выходом;

кватернизацию соединения IIa с алкилбромидом проводят при кипячении с обратным холодильником в ацетонитриле с получением соединения I(а-с) с 73-85% выходом. Процесс протекает по следующей схеме:

Схема 1

Дипиридильное производное IIb получают алкилированием 3-гидроксипиридина 4,4'-дибромбифенилом с применением известного метода [Й. Цудзи, М. Ямамото, А.Н. Верещагин, А.С. Дорофеев, Т.А. Гейвандова, И.Ф. Агафонова, P.X. Гейвандов, патент ЕА 026416 (2017)] с 75% выходом;

кватернизацию соединения IIb с алкилгалогенидом проводят при кипячении с обратным холодильником в 4-метилпентан-2-оне с получением соединения I(d-i) с 70-96% выходом. Процесс протекает по следующей схеме:

Схема 2

Дипиридильное производное IIc получают алкилированием 4,4'-бифенола 4-хлорпиридином с применением известного метода [Y. Liu, W. Zhang, J. Zhang, патент CN 104262159 (2016)] с 85% выходом;

кватернизацию соединения IIc с алкилгалогенидом проводят при кипячении с обратным холодильником в ацетонитриле с получением соединения I(j-m) с 78-87% выходом. Процесс протекает по следующей схеме:

Схема 3

Дипиридильное производное IId получают алкилированием 4,4'-оксибифенола 2-бромпиридином с применением известного метода [J.Н. Chu, S.Т. Chen, М.F. Chiang, М.J. Wu, Palladium-catalyzed direct ortho aroylation of 2-phenoxypyridines with aldehydes and catalytic mechanism investigation. Organometallics, 34, p. 953-966 (2015)] с 67% выходом;

кватернизацию соединения IId с алкилгалогенидом проводят при кипячении с обратным холодильником в ацетонитриле с получением соединения I(n-p) с 78-90% выходом. Процесс протекает по следующей схеме:

Схема 4

Дипиридильное производное IIe получают алкилированием 3-гидроксипиридина 4,4'-дибромодифениловым эфиром с применением известного метода [Й. Цудзи, М. Ямамото, А.Н. Верещагин, А.С. Дорофеев, Т.А. Гейвандова, И.Ф. Агафонова, P.X. Гейвандов, патент ЕА 026416 (2017)] с 77% выходом;

кватернизацию соединения IIe с алкилгалогенидом проводят при кипячении с обратным холодильником в 4-метилпентан-2-оне с получением соединения I(q-v) с 75-92% выходом.

Схема 5

Дипиридильное производное IIf получают алкилированием 4,4'-оксибифенола 4-хлорпиридином с применением известного метода [Y. Liu, W. Zhang, J. Zhang, патент CN 104262159 (2016)] с 88% выходом;

кватернизацию соединения IIf с алкилгалогенидом проводят при кипячении с обратным холодильником в ацетонитриле с получением соединения I(w-z) с 79-94% выходом. Процесс протекает по следующей схеме:

Схема 6

Другие объекты и преимущества данного изобретения становятся очевидными из подробного описания примеров и формулы изобретения, представленных ниже.

Для более легкого понимания изобретения представлены ссылки на следующие примеры, которые являются только иллюстративными для данного изобретения и не ограничивают его объем.

Температуру плавления определяют с применением аппарата для измерения температуры плавления Stuart ESTSMP3 и не корректируют. Спектр 1Н ядерного магнитного резонанса записывают с помощью спектрометра Bruker Avance II 300 при частоте 300.13 МГц и химические сдвиги записывают в частях на миллион (ч./млн) с дейтерохлороформом (CDCl₃; δ_H 7.26), дейтерометанолом (CD₃OD-d4; δ_Н 3.31) или дейтеродиметилсульфоксидом (ДМСО-d₆; δ_Н 2.50) в качестве внутреннего стандарта. Данные записывают как химический сдвиг (δ), мультиплетность (с = синглет, д = дублет, т = триплет, м = мультиплет), константу связывания (J Гц), расположение относительного интеграла. Аналитическую тонкослойную хроматографию (ТСХ) проводят с применением предварительно покрытых силикагелем пластинок (Merck Kieselgel 60 F254) и визуализируют с применением аппарата УФ-излучения с длиной волны λ=254 нм. Препаративную хроматографию на колонке проводят с применением силикагеля Merck Kieselgel 60 (SiO₂, 0.04-0.065 мм) с указанной системой растворителей. Соотношения растворителей для ТСХ и хроматографии на колонке показаны в (об./об.) как указано. Все растворители дистиллируют перед применением перегоняют, масс-спектр получают непосредственно с применением спектрометра Finningan MAT INCOS 50 (ЭИ, 70 эВ).

Примеры 1-3 [схема 1]. Общий метод синтеза димерных соединений (Ia-с)

К раствору 2,2'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]дипиридина IIa (0,34 г, 1 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли алкилбромид (4 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 7 дней, затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. Остаток кипятили в 10 мл ацетона, охлаждали и отфильтровывали, получая 2,2'-[бифенил-4,4-диилбис(окси)]бис(1-алкилпиридиния) дибромид в виде белого твердого вещества.

2,2'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-октилпиридиния) дибромид формулы:

C₃₈H₅₀Br₂N₂O₂; М=726.6; Белый порошок; Т. пл. 123-125°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.84 (т, J=6.7 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.15-1.38 (м, 20Н, 10СН₂), 1.92-2.06 (м, 4Н, 2СН₂), 4.64 (т, J=7.3 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.32 (д, J=8.8 Гц, 2Н, 2СН), 7.64 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.77 (т, J=6.8 Гц, 2Н, 2СН), 8.01 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 8.47 (т, J=7.5 Гц, 2Н, 2СН), 8.93 (д, J=5.45 Гц, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.9 (2С), 22.0 (2С), 25.6 (2С), 28.3 (2С), 28.4 (2С), 28.6 (2С), 31.0 (2С), 54.8 (2С), 113.5 (2С), 120.5 (2С), 121.6 (4С), 129.3 (4С), 138.1 (2С), 143.6 (2С), 148.4 (2С), 151.3 (2С), 158.8 (2С).

2,2'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-децилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₂H₅₈Br₂N₂O₂; М=782.8; Белый порошок; Т. пл. 174-175°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.83 (т, J=6.7 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.18-1.47 (м, 28Н, 14СН₂), 1.92-2.05 (м, 4Н, 2СН₂), 4.64 (т, J=7.3 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.30 (д, J=8.8 Гц, 2Н, 2СН), 7.63 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.77 (т, J=6.8 Гц, 2Н, 2СН), 7.99 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 8.47 (т, J=7.5 Гц, 2Н, 2СН), 8.95 (д, J=5.5 Гц, 2Н, 2СН); ¹³С NMR (DMSO-d₆): 13.9 (2С), 22.0 (2С), 25.6 (2С), 28.0 (2С), 28.3 (2С), 28.6 (2С), 28.7 (2С), 28.8 (2С), 31.2 (2С), 54.8 (2С), 113.5 (2С), 120.5 (2С), 121.6 (4С), 129.3 (4С), 138.1 (2С), 143.6 (2С), 148.4 (2С), 151.3 (2С), 158.8 (2С).

2,2'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-додецилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₆H₆₆Br₂N₂O₂; М=838.9; Белый порошок; Т. пл. 190-192°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.83 (т, J=6.7 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.18-1.48 (м, 36Н, 18СН₂), 1.92-2.04 (м, 4Н, 2СН₂), 4.64 (т, J=7.3 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.30 (д, J=8.8 Гц, 2Н, 2СН), 7.62 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.76 (т, J=6.8 Гц, 2Н, 2СН), 7.99 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 8.47 (т, J=7.5 Гц, 2Н, 2СН), 8.94 (д, J=5.5 Гц, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.9 (2С), 22.0 (2С), 25.6 (2С), 28.0 (2С), 28.3 (2С), 28.6 (2С), 28.7 (4С), 28.8 (4С), 31.2 (2С), 54.8 (2С), 113.5 (2С), 120.5 (2С), 121.6 (4С), 129.3 (4С), 138.1 (2С), 143.6 (2С), 148.4 (2С), 151.3 (2С), 158.8 (2С).

Примеры 4-9 [схема 2]. Общий метод синтеза димерных соединений (Id-i)

К раствору 3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]дипиридина IIb (0,34 г, 1 ммоль) в 4-метилпентан-2-он (3 мл) добавляли алкилгалогенид (2,2 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 24 часов, затем охлаждали и фильтровали. Осадок промывали 10 мл холодного ацетона и сушили, получая 3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-алкилпиридиния) дигалогенид в виде белого твердого вещества.

3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-октилпиридиния) дибромид формулы:

C₃₈H₅₀Br₂N₂O₂; М=726.6; Белый порошок; Т. пл. 245-247°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.6 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.18-1.44 (м, 20Н, 10СН₂), 1.89-2.08 (м, 4Н, 2СН₂), 4.61 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.32 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.78 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.97-8.07 (м, 2Н, 2СН), 8.12 (д, J=7.3 Гц, 2Н, 2СН), 8.73 (д, J=5.9 Гц, 2Н, 2СН), 8.89 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.6 (2С), 27.1 (2С), 30.0 (2С), 30.1 (2С), 32.5 (2С), 32.8 (2С), 63.4 (2С), 121.8 (4С), 130.3 (2С), 130.5 (4С), 134.1 (2С), 136.6 (2С), 139.4 (2С), 140.2 (2С), 155.1 (2С), 159.0 (2С).

3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-нонилпирнднния) дибромид формулы:

C₄₀H₅₄Br₂N₂O₂; М=754.7; Белый порошок; Т. пл. 268-270°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.6 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.18-1.41 (м, 24Н, 12СН₂), 1.87-2.05 (м, 4Н, 2СН₂), 4.59 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.32 (д, J=8.6 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.77 (д, J=8.6 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.97-8.07 (м, 2Н, 2СН), 8.13 (д, J=7.3 Гц, 2Н, 2СН), 8.70 (д, J=5.9 Гц, 2Н, 2СН), 8.89 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.7 (2С), 27.2 (2С), 30.1 (2С), 30.3 (2С), 30.4 (2С), 32.5 (2С), 32.9 (2С), 63.5 (2С), 121.8 (4С), 130.3 (2С), 130.5 (4С), 134.1 (2С), 136.6 (2С), 139.4 (2С), 140.1 (2С), 155.1 (2С), 159.0 (2С).

3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-децилпиридиния) дихлорид формулы:

C₄₂H₅₈Cl₂N₂O₂; М=693.8; Белый порошок; Т. пл. 266-268°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.3 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.18-1.42 (м, 28Н, 14СН₂), 1.92-2.06 (м, 4Н, 2СН₂), 4.59 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.32 (д, J=8.4 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.77 (д, J=8.4 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.98-8.03 (м, 2Н, 2СН), 8.12 (д, J=7.9 Гц, 2Н, 2СН), 8.71 (д, J=5.3 Гц, 2Н, 2СН), 8.89 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.7 (2С), 27.1 (2С), 30.1 (2С), 30.3 (2С), 30.4 (2С), 30.5 (2С), 32.5 (2С), 33.0 (2С), 63.4 (2С), 121.7 (4С), 130.3 (2С), 130.5 (4С), 134.1 (2С), 136.6 (2С), 139.4 (2С), 140.2 (2С), 155.1 (2С), 159.0 (2С).

3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-децилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₂H₅₈Br₂N₂O₂; М=782.8; Белый порошок; Т. пл. 237-239°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.3 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.13-1.47 (м, 28Н, 14СН₂), 1.90-2.08 (м, 4Н, 2СН₂), 4.61 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.32 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.78 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.95-8.07 (м, 2Н, 2СН), 8.12 (д, J=8.7 Гц, 2Н, 2СН), 8.73 (д, J=5.6 Гц, 2Н, 2СН), 8.89 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.7 (2С), 27.1 (2С), 30.0 (2С), 30.3 (2С), 30.4 (2С), 30.5 (2С), 32.5 (2С), 33.0 (2С), 63.4 (2С), 121.7 (4С), 130.3 (2С), 130.5 (4С), 134.1 (2С), 136.6 (2С), 139.4 (2С), 140.1 (2С), 155.1 (2С), 159.0 (2С).

3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-децилпиридиния) дииодид формулы:

C₄₂H₅₈I₂N₂O₂; M. м. 876.8; Желтый порошок; Т. пл. 236-238°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.3 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.13-1.47 (м, 28Н, 14СН₂), 1.90-2.08 (м, 4Н, 2СН₂), 4.61 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺) 7.32 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.78 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.95-8.07 (м, 2Н, 2СН), 8.12 (д, J=8.7 Гц, 2Н, 2СН), 8.73 (д, J=5.6 Гц, 2Н, 2СН), 8.89 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.7 (2С), 27.1 (2С), 30.0 (2С), 30.3 (2С), 30.4 (2С), 30.5 (2С), 32.5 (2С), 33.0 (2С), 63.4 (2С), 121.7 (4С), 130.3 (2С), 130.5 (4С), 134.1 (2С), 136.6 (2С), 139.4 (2С), 140.1 (2С), 155.1 (2С), 159.0 (2С).

3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-ундецилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₄H₆₂Br₂N₂O₂; М=810.8; Белый порошок; Т. пл. 263-265°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.6 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.10-1.43 (м, 32Н, 16СН₂), 1.92-2.07 (м, 4Н, 2СН₂), 4.60 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.32 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.77 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.97-8.07 (м, 2Н, 2СН), 8.12 (д, J=7.3 Гц, 2Н, 2СН), 8.71 (д, J=5.9 Гц, 2Н, 2СН), 8.88 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.7 (2С), 27.2 (2С), 30.1 (2С), 30.4 (2С), 30.5 (2С), 30.6 (4С), 32.5 (2С), 33.0 (2С), 63.5 (2С), 121.8 (4С), 130.3 (2С), 130.5 (4С), 134.1 (2С), 136.6 (2С), 139.4 (2С), 140.2 (2С), 155.1 (2С), 159.0 (2С).

Примеры 10-13 [схема 3]. Общий метод синтеза димерных соединений (Ij-m)

К раствору 4,4'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]дипиридина V (0,34 г, 1 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли алкилгалогенид (4 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 дней, затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. Остаток кипятили в 10 мл ацетона, охлаждали и отфильтровывали, получая 4,4'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-алкилпиридиния) дигалогенид.

4,4'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-октилпиридиния) дибромид формулы:

C₃₈H₅₀Br₂N₂O₂; М=726.6; Белый порошок; Т. пл. 245-247°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.86 (т, J=6.4 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.27-1.32 (м, 20Н, 10СН₂), 1.79-1.92 (м, 4Н, 2СН₂), 4.53 (т, J=7.2 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺) 7.50 (д, J=8.6 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.63 (д, J=7.1 Гц, 4Н, 4СН), 7.93 (д, J=8.6 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 9.01 (д, J=7.1 Гц, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 14.0 (2С), 22.0 (2С), 25.4 (2С), 28.4 (2С), 28.5 (2С), 30.7 (2С), 31.2 (2С), 59.1 (2С), 114.8 (4С), 121.6 (4С), 129.3 (4С), 137.8 (2С), 147.0 (4С), 151.9 (2С), 169.0 (2С).

4,4'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-децилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₂H₅₈Br₂N₂O₂; М=782.8; Белый порошок; Т. пл. 225-227°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.85 (т, J=6.4 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.19-1.35 (м, 28Н, 14СН₂), 1.80-1.92 (м, 4Н, 2СН₂), 4.51 (т, J=7.2 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.49 (д, J=8.6 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.62 (д, J=7.1 Гц, 4Н, 4СН), 7.95 (д, J=8.6 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 8.99 (д, J=7.1 Гц, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.9 (2С), 22.0 (2С), 25.3 (2С), 28.0 (2С), 28.3 (2С), 28.6 (2С), 28.8 (2С), 30.7 (2С), 31.2 (2С), 59.1 (2С), 114.7 (4С), 121.5 (4С), 129.2 (4С), 137.7 (2С), 146.9 (4С), 151.8 (2С), 169.0 (2С).

4,4'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-децилпириднния) дииодид формулы:

C₄₂H₅₈I₂N₂O₂; M=876.8; Желтый порошок; Т. пл. 234-236°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.84 (т, J=6.5 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.19-1.33 (м, 28Н, 14СН₂), 1.79-1.93 (м, 4Н, 2СН₂), 4.49 (т, J=7.3 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.50 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.63 (д, J=7.3 Гц, 4Н, 4СН), 7.95 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 8.95 (д, J=7.3 Гц, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.8 (2С), 22.0 (2С), 25.2 (2С), 28.3 (2С), 28.5 (2С), 28.7 (2С), 28.8 (2С), 30.5 (2С), 31.2 (2С), 59.1 (2С), 114.8 (4С), 121.5 (4С), 129.2 (4С), 137.7 (2С), 146.8 (4С), 151.8 (2С), 169.0 (2С).

4,4'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]бис(1-додецилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₆H₆₆Br₂N₂O₂; М=838.9; Белый порошок; Т. пл. 249-251°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.84 (т, J=6.7 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.27-1.32 (м, 36Н, 18СН₂), 1.79-1.92 (м, 4Н, 2СН₂), 4.52 (т, J=7.1 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.50 (д, J=8.5 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.63 (д, J=7.0 Гц, 4Н, 4СН), 7.96 (д, J=8.5 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 9.00 (д, J=7.0 Гц, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.8 (2С), 22.0 (2С), 25.3 (2С), 27.4 (2С), 28.0 (2С), 28.3 (2С), 28.6 (2С), 28.7 (2С), 28.9 (2С), 30.6 (2С), 31.2 (2С), 59.1 (2С), 114.7 (4С), 121.5 (4С), 129.2 (4С), 137.7 (2С), 146.9 (4С), 151.8 (2С), 169.0 (2С).

Примеры 14-16 [схема 4]. Общий метод синтеза димерных соединений (In-Р)

К раствору 2,2'-[(оксибис(4,1-фениленокси)]дипиридина VI (0,36 г, 1 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли алкилбромид (4 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 7 дней, затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. Остаток кипятили в 10 мл ацетона, охлаждали и отфильтровывали, получая 2,2'-[оксибис(4,1-фениленокси)]бис(1-алкилпиридиния) дибромид.

2,2'-[оксибис(4,1-фениленокси)]бис(1-октилпиридиния) дибромид формулы:

C₃₈H₅₀Br₂N₂O₃; M=742.6; Белый порошок; Т. пл. 126-128°С; ¹H NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.6 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.18-1.44 (м, 20Н, 10СН₂), 1.89-2.08 (м, 4Н, 2СН₂), 4.61 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.32 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.78 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar,), 7.97-8.07 (м, 2Н, 2СН), 8.12 (д, J=7.3 Гц, 2Н, 2СН), 8.73 (д, J=5.9 Гц, 2Н, 2СН), 8.89 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.6 (2С), 27.1 (2С), 30.0 (2С), 30.1 (2С), 32.5 (2С), 32.8 (2С), 63.4 (2С), 121.8 (4С), 130.3 (2С), 130.5 (4С), 134.1 (2С), 136.6 (2С), 139.4 (2С), 140.2 (2С), 155.1 (2С), 159.0 (2С).

2,2'-[оксибис(4,1-фениленокси)]бис(1-нонилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₀H₅₄Br₂N₂O₃; М=770.7; Белый порошок; Т. пл. 130-132°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.6 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.18-1.41 (м, 24Н, 12СН₂), 1.87-2.05 (м, 4Н, 2СН₂), 4.59 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.32 (д, J=8.6 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.77 (д, J=8.6 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.97-8.07 (м, 2Н, 2СН), 8.13 (д, J=7.3 Гц, 2Н, 2СН), 8.70 (д, J=5.9 Гц, 2Н, 2СН), 8.89 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.7 (2С), 27.2 (2С), 30.1 (2С), 30.3 (2С), 30.4 (2С), 32.5 (2С), 32.9 (2С), 63.5 (2С), 121.8 (4С), 130.3 (2С), 130.5 (4С), 134.1 (2С), 136.6 (2С), 139.4 (2С), 140.1 (2С), 155.1 (2С), 159.0 (2С).

2,2'-[оксибис(4,1-фениленокси)]бис(1-децилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₂H₅₈Br₂N₂O₃; M=798.8; Белый порошок; Т. пл. 144-146°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.83 (т, J=6.7 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.18-1.47 (м, 28Н, 14СН₂), 1.92-2.05 (м, 4Н, 2СН₂), 4.64 (т, J=7.3 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.30 (д, J=8.8 Гц, 2Н, 2СН), 7.63 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.77 (т, J=6.8 Гц, 2Н, 2СН), 7.99 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 8.47 (т, J=7.5 Гц, 2Н, 2СН), 8.95 (д, J=5.5 Гц, 2Н, 2СН); ¹³С NMR (DMSO-d₆): 13.9 (2С), 22.0 (2С), 25.6 (2С), 28.0 (2С), 28.3 (2С), 28.6 (2С), 28.7 (2С), 28.8 (2С), 31.2 (2С), 54.8 (2С), 113.5 (2С), 120.5 (2С), 121.6 (4С), 129.3 (4С), 138.1 (2С), 143.6 (2С), 148.4 (2С), 151.3 (2С), 158.8 (2С).

Примеры 17-22 [схема 5]. Общий метод синтеза димерных соединений (Iq-v)

К раствору 2,2'-[(оксибис(4,1-фениленокси)]дипиридина VII (0,36 г, 1 ммоль) в 4-метилпентан-2-оне (3 мл) добавляли алкилгалогенид (2,2 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 24 часов, затем охлаждали и фильтровали. Осадок промывали 10 мл холодного ацетона и сушили, получая 3,3'-[оксибис(4,1-фениленокси)]бис(1-алкилпиридиния) дигалогенид.

3,3'-[оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-октилпиридиния) дибромид формулы:

C₃₈H₅₀Br₂N₂O₃; М=742.6; Белый порошок; Т. пл. 200-202°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.5 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.11-1.47 (м, 20Н, 10СН₂), 1.86-2.07 (м, 4Н, 2СН₂), 4.59 (т, J=7.4 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.16 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.25 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.92-8.03 (м, 2Н, 2СН), 8.01 (д, J=8.5 Гц, 2Н, 2СН), 8.68 (д, J=5.1 Гц, 2Н, 2СН), 8.85 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.6 (2С), 27.2 (2С), 30.0 (2С), 30.1 (2С), 32.5 (2С), 32.8 (2С), 63.5 (2С), 122.1 (4С), 123.1 (4С), 130.2 (2С), 133.7 (2С), 136.2 (2С), 139.9 (2С), 150.9 (2С), 156.6 (2С), 159.5 (2С).

3,3'-[оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-нонилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₀H₅₄Br₂N₂O₃; М=770.7; Белый порошок; Т. пл. 207-209°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.8 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.15-1.42 (м, 24Н, 12СН₂), 1.91-2.05 (м, 4Н, 2СН₂), 4.59 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.15 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.25 (д, J=8.5 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.95-8.03 (м, 2Н, 2СН), 8.08 (д, J=8.7 Гц, 2Н, 2СН), 8.68 (д, J=5.6 Гц, 2Н, 2СН), 8.84 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.7 (2С), 27.1 (2С), 30.1 (2С), 30.2 (2С) 30.4 (2С), 32.5 (2С), 32.9 (2С), 63.4 (2С), 122.0 (4С), 123.1 (4С), 130.2 (2С), 133.6 (2С), 136.2 (2С), 139.9 (2С), 150.9 (2С), 156.6 (2С), 159.5 (2С).

3,3'-[оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-децилпиридиния) дихлорид формулы:

C₄₂H₅₈Cl₂N₂O; М=709.8; Белый порошок; Т. пл. 229-231°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.84 (т, J=6.7 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.21-1.32 (м, 28Н, 14СН₂), 1.83-2.00 (м, 4Н, 2СН₂), 4.64 (т, J=6.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.21 (д, J=9.0 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.35 (д, J=9.0 Гц, 4Н, CH_Ar), 8.09-8.22 (м, 4Н, 4СН), 8.94 (д, J=5.4 Гц, 2Н, 2СН), 9.20 (с, 2Н, 2СН); ¹³C NMR, DMSO-d₆: 13.8 (2С), 22.0 (2С), 25.3 (2С), 28.3 (2С), 28.5 (2С), 28.7 (2С), 28.8 (2С), 30.8 (2С), 31.2 (2С), 60.7 (2С), 120.5 (4С), 121.6 (4С), 128.9 (2С), 132.6 (2С), 135.7 (2С), 139.2 (2С), 149.6 (2С), 154.1 (2С), 156.5 (2С).

3,3'-[оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-децилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₂H₅₈Br₂N₂O₃; M=798.8; Белый порошок; Т. пл. 206-208°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.87 (т, J=6.3 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.13-1.41 (м, 28Н, 14СН₂), 1.82-2.03 (м, 4Н, 2СН₂), 4.65 (т, J=7.3 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.23 (д, J=8.8 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.37 (д, J=8.8 Гц, 4Н, CH_Ar), 8.09-8.17 (м, 2Н, 2СН), 8.20 (д, J=8.5 Гц, 2Н, 2СН), 8.94 (д, J=5.1 Гц, 2Н, 2СН), 9.18 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.9 (2С), 22.0 (2С), 25.3 (2С), 28.3 (2С), 28.6 (2С), 28.7 (2С), 28.8 (2С), 30.7 (2С), 31.2 (2С), 60.9 (2С), 120.6 (4С), 121.6 (4С), 128.9 (2С), 132.6 (2С), 135.6 (2С), 139.1 (2С), 149.6 (2С), 154.1 (2С), 156.6 (2С).

3,3'-[оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-децилпиридиния) дийодид формулы:

C₄₂H₅₈I₂N₂O₃; М=892.8; Желтый порошок; Т. пл. 161-163°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.87 (т, J=6.3 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.13-1.41 (м, 28Н, 14СН₂), 1.82-2.03 (м, 4Н, 2СН₂), 4.65 (т, J=7.3 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.23 (д, J=8.8 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.37 (д, J=8.8 Гц, 4Н, CH_Ar), 8.09-8.17 (м, 2Н, 2СН), 8.20 (д, J=8.5 Гц, 2Н, 2СН), 8.94 (д, J=5.1 Гц, 2Н, 2СН), 9.18 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.9 (2С), 22.0 (2С), 25.3 (2С), 28.3 (2С), 28.6 (2С), 28.7 (2С), 28.8 (2С), 30.7 (2С), 31.2 (2С), 60.9 (2С), 120.6 (4С), 121.6 (4С), 128.9 (2С), 132.6 (2С), 135.6 (2С), 139.1 (2С), 149.6 (2С), 154.1 (2С), 156.6 (2С).

3,3'-[оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-ундецилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₄H₆₂Br₂N₂O₃; М. м. 826.8; Белый порошок; Т. пл. 216-218°С; ¹Н NMR (MeOD): 0.84 (т, J=6.3 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.15-1.46 (м, 32Н, 16СН₂), 1.94-2.08 (м, 4Н, 2СН₂), 4.59 (т, J=7.6 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.16 (д, J=8.8 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.25 (д, J=8.8 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.95-8.03 (м, 2Н, 2СН), 8.08 (д, J=8.7 Гц, 2Н, 2СН), 8.68 (д, J=5.1 Гц, 2Н, 2СН), 8.85 (с, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, MeOD: 14.4 (2С), 23.7 (2С), 27.2 (2С), 30.1 (2С), 30.4 (2С), 30.5 (2С), 30.6 (2С), 30.7 (2С), 32.6 (2С), 33.0 (2С), 63.4 (2С), 122.1 (4С), 123.1 (4С), 130.2 (2С), 133.6 (2С), 136.3 (2С), 139.9 (2С), 150.9 (2С), 156.6 (2С), 159.5 (2С).

Примеры 23-26 [схема 6]. Общий метод синтеза димерных соединений (Iw-z)

К раствору 4,4'-[(оксибис(4,1-фениленокси)]дипиридина VIII (0,36 г, 1 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли алкилбромид (4 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 7 дней, затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. Остаток кипятили в 10 мл ацетона, охлаждали и отфильтровывали, получая 4,4'-[оксибис(4,1-фениленокси)]бис(1-алкилпиридиния) дибромид.

4,4'-[(оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-октилпиридиния) дибромид формулы:

C₃₈H₅₀Br₂N₂O₃; М=742.6; Белый порошок; Т. пл. 214-216°С; ¹H NMR (DMSO-d₆): 0.86 (т, J=6.4 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.27-1.32 (м, 20Н, 10СН₂), 1.79-1.92 (м, 4Н, 2СН₂), 4.53 (т, J=7.2 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.50 (д, J=8.6 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.63 (д, J=7.1 Гц, 4Н, 4СН), 7.93 (д, J=8.6 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 9.01 (д, J=7.1 Гц, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 14.0 (2С), 22.0 (2С), 25.4 (2С), 28.4 (2С), 28.5 (2С), 30.7 (2С), 31.2 (2С), 59.1 (2С), 114.8 (4С), 121.6 (4С), 129.3 (4С), 137.8 (2С), 147.0 (4С), 151.9 (2С), 169.0 (2С).

4,4'-[оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-нонилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₀H₅₄Br₂N₂O₃; M=770.7; Белый порошок; Т. пл. 215-217°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.84 (т, J=6.5 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.19-1.33 (м, 24Н, 12СН₂), 1.79-1.93 (м, 4Н, 2СН₂), 4.49 (т, J=7.3 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺) 7.50 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.63 (д, J=7.3 Гц, 4Н, 4СН), 7.95 (д, J=8.7 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 8.95 (д, J=7.3 Гц, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.8 (2С), 22.0 (2С), 25.2 (2С), 28.3 (2С), 28.7 (2С), 28.8 (2С), 30.5 (2С), 31.2 (2С), 59.1 (2С), 114.8 (4С), 121.5 (4С), 129.2 (4С), 137.7 (2С), 146.8 (4С), 151.8 (2С), 169.0 (2С).

4,4'-[оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-децилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₂H₅₈Br₂N₂O₃; М=798.8; Белый порошок; Т. пл. 205-207°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.85 (т, J=6.4 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.19-1.35 (м, 28Н, 14СН₂), 1.80-1.92 (м, 4Н, 2СН₂), 4.51 (т, J=7.2 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.49 (д, J=8.6 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.62 (д, J=7.1 Гц, 4Н, 4СН), 7.95 (д, J=8.6 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 8.99 (д, J=7.1 Гц, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.9 (2С), 22.0 (2С), 25.3 (2С), 28.0 (2С), 28.3 (2С), 28.6 (2С), 28.8 (2С), 30.7 (2С), 31.2 (2С), 59.1 (2С), 114.7 (4С), 121.5 (4С), 129.2 (4С), 137.7 (2С), 146.9 (4С), 151.8 (2С), 169.0 (2С).

4,4'-[оксибис(4,1-фенилен)]бис(1-ундецилпиридиния) дибромид формулы:

C₄₄H₆₂Br₂N₂O₃; М. м. 826.8; Белый порошок; Т. пл. 216-218°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆): 0.84 (т, J=6.7 Гц, 6Н, 2СН₃), 1.27-1.32 (м, 32Н, 16СН₂), 1.79-1.92 (м, 4Н, 2СН₂), 4.52 (т, J=7.1 Гц, 4Н, 2CH₂N⁺), 7.50 (д, J=8.5 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.63 (д, J=7.0 Гц, 4Н, 4СН), 7.96 (д, J=8.5 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 9.00 (д, J=7.0 Гц, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 13.8 (2С), 22.0 (2С), 25.3 (2С), 28.0 (2С), 28.3 (2С), 28.6 (2С), 28.7 (2С), 28.9 (2С), 30.6 (2С), 31.2 (2С), 59.1 (2С), 114.7 (4С), 121.5 (4С), 129.2 (4С), 137.7 (2С), 146.9 (4С), 151.8 (2С), 169.0 (2С).

Примеры получения исходных материалов.

Исходные материалы, применяемые в представленных выше примерах, включают соединения, полученные с применением стандартных способов из известных материалов. Некоторые из исходных материалов попадают в объем данного изобретения.

Примеры 27-32 показаны только для иллюстрации и не ограничивают способы синтеза этих исходных материалов.

Пример 27 (схема 1).

Способ получения 2,2'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]дипиридина формулы:

В колбу в атмосфере аргона последовательно загружали 4,4'-дигидрокси-1,1'-дифенил (1.86 г, 10 ммоль), 2-бромпиридин (3.16 г 20 ммоль), фосфат калия (8.48 г 40 моль), йодид меди (1.90 г 10 ммоль), пиколиновую кислоту (0.25 г, 2 ммоль) и диметилсульфоксид (35 мл). Смесь перемешивали при температуре 900С в течение 24 ч. Затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. К сухому остатку добавляли этилацетат (50 мл) и кипятили при перемешивании 1 ч. Осадок отфильтровывали через бумажный фильтр. Фильтрат упаривали в вакууме водоструйного насоса. Остаток кристаллизовали из гептана. Получали 2,2'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]дипиридин (2.62 г 7.6 ммоль), выход 77%. C₂₂H₁₆N₂O₂; М=340.4; Белый порошок; Т. пл. 132-134°С; ¹Н NMR (300 МГц, CDCl₃): 6.86-7,07 (м, 4Н, 4СН), 7.23 (д, J=8.5 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.62 (д, J=8.5 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.68-7.77 (м, 2Н, 2СН), 8.21-8.28 (м, 2Н, 2СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 111.7 (2С), 119.2 (2С), 121.7 (4С), 127.9 (4С), 136.0 (2С), 140.3 (2С), 147.5 (2С), 153.4 (2С), 161.0 (2С); Масс-спектр (ЭИ, 70 эВ): m/z=340 [М⁺].

Пример 28 (схема 2).

Способ получения 3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]дипиридина формулы:

В колбу в атмосфере аргона последовательно загружали 4,4'-дибромо-1,1'-дифенил (3.12 г, 10 ммоль), 3-гидроксипиридин (2.09 г 22 ммоль), карбонат калия (6.07 г 44 ммоль), медь (2.79 г, 44 ммоль) и диметилформамид (50 мл). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч. Затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. К сухому остатку добавляли этилацетат (50 мл) и кипятили при перемешивании 1 ч. Осадок отфильтровывали через бумажный фильтр. Фильтрат упаривали в вакууме водоструйного насоса. Остаток кристаллизовали из гептана. Получали 3,3'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]дипиридин (2.55 г 7.5 ммоль), выход 75%. C₂₂H₁₆N₂O₂; М=340.4; Белый порошок; Т. пл. 85-87; ¹Н NMR (CDCl₃): 7.11 (д, J=8.4 Гц, 4Н, CH_Ar), 7.26-7.39 (м, 4Н, 4СН), 7.57 (д, J=8.4 Гц, 4Н, CH_Ar), 8.24-8.52 (м, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, CDCl₃: 119.3 (4С), 124.2 (2С), 125.5 (2С), 128.5 (4С), 136.3 (2С), 141.5 (2С), 144.5(2С), 153.8 (2С), 155.9 (2С); Масс-спектр (ЭИ, 70 эВ): m/z=340 [М⁺].

Пример 29 (схема 3).

Способ получения 4,4'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]дипиридина формулы:

В колбу в атмосфере аргона последовательно загружали 4,4'-дигидрокси-1,1'-дифенил (1.86 г, 10 ммоль), 4-хлорпиридин гидрохорид (3,00 г, 20 ммоль), фосфат калия (16.96 г, 80 ммоль), йодид меди (1.90 г, 10 ммоль), пиколиновую кислоту (0.25 г, 2 ммоль) и диметилсульфоксид (35 мл). Смесь перемешивали при температуре 140°С в течение 3 дней. Затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. К сухому остатку добавляли этилацетат (50 мл) и кипятили при перемешивании 1 ч. Осадок отфильтровывали через бумажный фильтр. Фильтрат упаривали в вакууме водоструйного насоса. Остаток кристаллизовали из гептана. Получали 4,4'-[бифенил-4,4'-диилбис(окси)]дипиридин (2.88 г, 8.5 ммоль), выход 85%. C₂₂H₁₆N₂O₂; М=340.4; Белый порошок; Т. пл. 153-155°С; ¹Н NMR (CDCl₃): 6.85-7.02 (м, 4Н, 4СН), 7.20 (д, J=8.5 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.65 (д, J=8.5 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 8.41-8.73 (м, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, DMSO-d₆: 121.0 (4С), 128.6 (4С), 136.4 (4С), 138.3 (2С), 151.6 (4С), 153.2 (2С), 163.7 (2С). Масс-спектр (ЭИ, 70 эВ): m/z=340 [М⁺].

Пример 30 (схема 4).

Способ получения 2,2'-[оксибис(4,1-фениленокси)]дипиридин формулы:

В колбу в атмосфере аргона последовательно загружали 4,4'-дигидроксидифениловый эфир (2.02 г, 10 ммоль), 2-бромпиридин (3.16 г, 20 ммоль), фосфат калия (8.48 г, 40 ммоль), йодид меди (1.90 г, 10 ммоль), пиколиновую кислоту (0.25 г, 2 ммоль) и диметилсульфоксид (35 мл). Смесь перемешивали при температуре 90°С в течение 24 ч. Затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. К сухому остатку добавляли этилацетат (50 мл) и кипятили при перемешивании 1 ч. Осадок отфильтровывали через бумажный фильтр. Фильтрат упаривали в вакууме водоструйного насоса. Остаток кристаллизовали из гептана. Получали 2,2'-[(оксибис(4,1-фениленокси)]дипиридин (2.38 г, 6.7 ммоль), выход 67%. C₂₂H₁₆N₂O₃; М=356.4; Белый порошок; Т. пл. 102-104°С; ¹H NMR (300 МГц, CDCl₃): 6.90-6.95 (м, 4Н, 4СН), 6.91-7.06 (м, 4Н, 4СН), 7.09 (д, J=9.0 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.14 (д, J=9.0 Гц, 4Н, 4CH_Ar), 7.66-7.74 (м, 4Н, 4СН), 8.19-8.26 (м, 4Н, 4СН); ¹³С NMR (DMSO-d₆): 111.2 (2С), 118.9 (2С), 119.5 (4С), 122.7 (4С), 140.1 (2С), 147.3 (2С), 149.3 (2С), 153.4 (2С), 163.1 (2С). Масс-спектр (ЭИ, 70 эВ): m/z=356 [М⁺].

Пример 31 (схема 5).

Способ получения 3,3'-[оксибис(4,1-фениленокси)]дипиридина формулы:

В колбу в атмосфере аргона последовательно загружали 4,4'-дибромдифениловый эфир (3.28 г, 10 ммоль), 3-гидроксипиридин (2.09 г, 22 ммоль), карбонат калия (6.07 г, 44 ммоль), медь (2.79 г, 44 ммоль) и диметилформамид (50 мл). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч. Затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. К сухому остатку добавляли этилацетат (50 мл) и кипятили при перемешивании 1 ч. Осадок отфильтровывали через бумажный фильтр. Фильтрат упаривали в вакууме водоструйного насоса. Остаток кристаллизовали из гептана. Получали 3,3'-[(оксибис(4,1-фениленокси)]дипиридин (2.74 г, 7.7 ммоль), выход 77%. C₂₂H₁₆N₂O₃; М=356.4; Белый порошок; Т. пл. 68-70°С; ¹Н NMR (CDCl₃): 7.01-7.08 (м, 8Н, CH_Ar), 7.26-7.31 (м, 4Н, CH_Ar), 8.35-8.44 (м, 4Н, 4СН); ¹³С NMR, CDCl₃: 120.0 (4С), 120.5 (4С), 123.9 (2С), 124.5 (2С), 140.8 (2С), 144.0 (2С), 151.5 (2С), 153.6 (2С), 154.2 (2С); Масс-спектр (ЭИ, 70 эВ): m/z=356 [М⁺].

Пример 32 (схема 6).

Способ получения 4,4'-[оксибис(4,1-фениленокси)]дипиридина формулы:

В колбу в атмосфере аргона последовательно загружали 4,4'-дигидроксидифениловый эфир (2.02 г, 10 ммоль), 4-хлорпиридин гидрохорид (3.00 г, 20 ммоль), фосфат калия (16.96 г, 80 ммоль), йодид меди (1.90 г, 10 моль), пиколиновую кислоту (0.25 г, 2 ммоль) и диметилсульфоксид (35 мл).

Смесь перемешивали при температуре 140°С в течение 5 дней. Затем охлаждали и упаривали растворитель в вакууме водоструйного насоса. К сухому остатку добавляли этилацетат (50 мл) и кипятили при перемешивании 1 ч. Осадок отфильтровывали через бумажный фильтр. Остаток кристаллизовали из гептана. Фильтрат упаривали в вакууме водоструйного насоса. Получали 4,4'-[(оксибис(4,1-фениленокси)]дипиридин (3,13 г, 8.8 ммоль), выход 88%. C₂₂H₁₆N₂O₃; М=356.4; Белый порошок; Т. пл. 112-114°С; ¹Н NMR (CDCl₃): 6.85 (м, 4Н, 4СН), 7.08-7.12 (м, 8Н, 8CH_Ar), 8.44-8.53 (м, 4Н, 4СН); ¹³С NMR (CDCl₃): 112.0 (4С), 120.3 (4С), 122.3 (4С), 149.6 (2С), 151.5 (4С), 154.5 (2С), 164.9 (2С). Масс-спектр (ЭИ, 70 эВ): m/z=356 [М⁺].

Примеры 33-36.

Новые соединения общей формулы I обладают полезным антибактериальным и противогрибковым действием и эффективны против грамположительных и грамотрицательных бактерий и нескольких видов грибов. Таким образом, данные соединения действительно являются биоцидными агентами широкого спектра действия. Более того, эти соединения обладают низкой токсичностью. Тестируемыми бактериальными штаммами (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa), применяемыми в примерах ниже, являются наиболее резистентные формы бактерий. Резистентность указанных бактерий к дезинфицирующим средствам или антисептической обработке является наивысшей среди большого количества различных классов простейших. Действие химического средства против указанных бактерий является критерием биоцидного действия химического средства в тесте. Например, если бактерии Escherichia coli эффективно гибнут после биоцидной обработки, другие представители класса Е. coli будут погибать также, или даже более эффективно от того же биоцидного средства.

Соединение хлорида бензалкония (ХБА) часто применяют в качестве ссылки для количественного сравнения различных антисептиков и дезинфицирующих средств [патент США 7612097 (2009)]. Таким образом, представленные ниже тесты даны в сравнении с ХБА для демонстрации высокой биоцидной эффективности новых соединений при тестировании, а также их низкой токсичности.

Результаты токсичности для сравнительного теста для типовых димерных четвертичных солей пиридиния, полученных согласно общей формуле I и коммерчески доступного хлорида бензалкония (ХБА), бисчетвертичных аммониевых солей: 1,4-бис-(3,3'-(1-децилпиридиний)метилокси)бутандибромид (тип С), известной как "Hygenia" (от Tama Kagaku Kogyo Со, Ltd.), "Октенидина дигидрохлорид" (от Dishman Group, тип А), а также ближайшего аналога - дибромида 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния) (тип С).

Биологическое тестирование

Биоцидную эффективность образцов новых соединений общей формулы I, полученных согласно рекомендациям института клинических и лабораторных стандартов CLSI (Clinical and Laboratory Standartds Institute), определяют по минимальной ингибирующей концентрации (МИК) и цитотоксичности в отношении эмбриональные клеток почек человека, а также теста на гемолиз (разрушение клеток эритроцитов крови человека). Материалы и методы

Тестирование биоцидного действия новых соединений общей формулы I проводят согласно обычному методу разведения в жидкой питательной среде. Тестируемые соединения: Ib (получено согласно примеру 2), Ie (получено согласно примеру 5), If (получено согласно примеру 6), Ig (получено согласно примеру 7), Ih (получено согласно примеру 8), Ik (получено согласно примеру 11), Ip (получено согласно примеру 16), 1 г (получено согласно примеру 18), Is (получено согласно примеру 19), It (получено согласно примеру 20), Iu (получено согласно примеру 21) и Iy (получено согласно примеру 25)

Ссылочные соединения: хлорид бензалкония (ХБА), бис-четвертичные аммониевые соли: 1,4-бис(3,3'-(1-децилпиридиний)метилокси)бутандибромид (Бис-ЧАС-1), ближайший структурный аналог дибромид 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния) (Бис-ЧАС-2) и «Октенидина дигидрохлорид» (Бис-ЧАС-3).

Стандартные тестируемые микроорганизмы:

Бактерии:

- Staphylococcus aureus АТСС 43300,

- Escherichia coli АТСС 25922,

- Klebsiella pneumoniae АТСС 700603,

- Acinetobacter baumannii АТСС 19606

- Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

МИК тест:

Тестируемые образцы готовят в смеси ДМСО и воды до конечной концентрации тестирования 32 мкг/мл и серийно разбавляют стерилизованной водой вдвое 7 раз, получая концентрации образцов 16, 8, 4, 2, 1, 0.5 и 0.25 мкг/мл. Конечная концентрация ДМСО не превышает 0.5%. Образец каждой концентрации помещают в 384-луночный планшет Corning 3640. Все бактерии культивировали в бульоне Мюллера-Хинтона (Cation-adjusted Mueller Hinton broth, CAMHB) при 37°C в течение 12 часов. Затем образец каждой культуры разбавляли в 40 раз физиологическим раствором и инкубировали при 37°С в течение 1,5-3 ч, получая 5×10⁵ КОЕ/мл. Все образцы в планшете инкубировали при 37°С в течение 18 ч без встряхивания. Ингибирование роста бактерий определяли измерением оптической плотности при 600 нм (OD600). МИК определяли как самую низкую концентрацию, при которой рост бактерий был полностью подавлен.

Пример 33.

Тестирование бактериостатического действия описанных выше новых соединений (Ib, Ie, If, Ig, Ih, Ik, Ip, Ir, Is, It, Iu, Iy) против различных бактерий.

С применением хлорида бензалкония (ХБА), 1,4-бис-(3,3'-(1-децилпиридиний)метилокси)бутандибромида (Бис-ЧАС-1) и ближайшего структурного аналога - дибромида 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния) (Бис-ЧАС-2) в качестве ссылочных соединений определяют минимальные ингибирующие концентрации (МИК). Результаты представлены в таблице 1.

Заключение: соединения Ib, Ie, If, Ig, Ih, Ik, Ip, Ir, Is, It, Iu, Iy в сравнении со ссылочными соединениями - ХБА, Бис-ЧАС-1 и ближайшего структурного аналога - Бис-ЧАС-2 демонстрируют сравнимое или более высокое бактериостатическое действие против всех тестируемых штаммов бактерий.

Пример 34

Тестирование противогрибкового действия описанных выше соединений в соответствии с данным изобретением (Ib, Ie, If, Ig, Ih, Ik, Ip, Ir, Is, It, Iu, Iy) против грибов Candida albicans и Cryptococcus neoformans.

Ib (получено согласно примеру 2), Ie (получено согласно примеру 5), If (получено согласно примеру 6), Ig (получено согласно примеру 7), Ih (получено согласно примеру 8), Ik (получено согласно примеру 11), Ip (получено согласно примеру 16), Ir (получено согласно примеру 18), Is (получено согласно примеру 19), It (получено согласно примеру 20), Iu (получено согласно примеру 21) и Iy (получено согласно примеру 25).

Ссылочные соединения: хлорид бензалкония (ХБА), бис-четвертичные аммониевые соли: 1,4-бис(3,3'-(1-децилпиридиний)метилокси)бутандибромид (Бис-ЧАС-1) и ближайший структурный аналог - дибромид 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния) (Бис-ЧАС-2).

Тестируемые грибы:

- Candida albicans АТСС 90028

- Cryptococcus neoformans АТСС 208821

Метод тестирования:

Тестируемые образцы готовят в смеси ДМСО и воды до конечной концентрации тестирования 32 мкг/мл и серийно разбавляют стерилизованной водой вдвое 7 раз, получая концентрации образцов 16, 8, 4, 2, 1, 0.5 и 0.25 мкг/мл. Конечная концентрация ДМСО не превышает 0.5%.

Штаммы грибов культивировали в течение 3 дней на агаре дрожжевого экстракта пептон-декстрозы (Yeast Extract-Peptone Dextrose, YPD) при 30°C. Суспензия дрожжей от 1×10⁶ до 5×10⁶ КОЕ/мл (как определено OD530) готовилась из пяти колоний. Затем суспензию разбавляли и добавляли в лунку к каждому тестируемому соединению. Конечная клеточная плотность грибов 2.5×10³ КОЕ/мл, общий объем 50 мкл. Все образцы инкубировали при 35°С в течение 36 ч без встряхивания.

Ингибирование роста С. albicans определяли измерением поглощения при 630 нм (OD600), в то время как ингибирование роста С. neoformans определяли, измеряя разницу в оптической плотности от 600 до 570 нм (OD 600-570) после добавления резазурина (0,001% конечная концентрация) и инкубации при 35°С в течение 2 часов. МИК определяли как самую низкую концентрацию, при которой рост бактерий был полностью подавлен.

С применением хлорида бензалкония (ХБА), 1,4-бис-(3,3'-(1-децилпиридиний)метилокси)бутандибромида (Бис-ЧАС-1) и ближайшего структурного аналога - дибромида 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния) (Бис-ЧАС-2) в качестве ссылочных соединений определяют минимальные ингибирующие концентрации (МИК). Результаты представлены в таблице 2.

Заключение: соединения Ib, Ie, If, Ig, Ih, Ik, Ip, Ir, Is, It, Iu, Iy в сравнении со ссылочными соединениями - ХБА, Бис-ЧАС-1 и ближайшего структурного аналога - Бис-ЧАС-2 демонстрируют демонстрируют сравнимое или более высокое бактериостатическое действие против всех тестируемых грибов.

Пример 35

Тестирование цитотоксичности описанных выше новых соединений Ib, Ie, If, Ig, Ih, Ik, Ip, Ir, Is, It, Iu, Iy на эмбриональных клетках почек человека. Ссылочные соединения: бисчетвертичные аммониевые соли: 1,4-бис(3,3'-(1-децилпиридиний)метилокси)бутандибромид (Бис-ЧАС-1), ближайший структурный аналог - дибромид 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния) (Бис-ЧАС-2), "Октенидин дигидрохлорид" (Бис-ЧАС-3). Клетки HEK293: эмбриональные клетки почек человека.

Среда для выращивания: модифицированная среда Дульбекко DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки FBS (Foetal Bovine Serum).

Клетки HEK293 подсчитывали вручную с помощью гемоцитометра Нейбауэра и затем высевали в 384-луночные планшеты, содержащие тестируемые соединения в среде, получая плотность 5000 клеток/лунка и объемом раствора 50 мкл. HEK293 клетки инкубировали вместе с соединениями в течение 20 ч при 37°С в 5% CO₂. Затем добавляли 5 мкл 25 мкг/мл резазурина (конечная концентрация 2,3 мкг/мл) и дополнительно инкубируют в течение еще 3 ч при 37°С в 5% CO₂.

Оптическую плотность каждой лунки затем измеряют с применением автоматизированного планшетного ридера (Tecan M1000 Pro) при длине волны 560 нм. Цитотоксичность (или жизнеспособность клеток) выражают как процент от контроля (обработанного очищенной водой).

С применением 1,4-бис-(3,3'-(1-децилпиридиний)метилокси)бутандибромида (Бис-ЧАС-1), ближайшего структурного аналога - дибромида 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния) (Бис-ЧАС-2) и "Октенидин дигидрохлорид" (Бис-ЧАС-3) в качестве ссылочных соединений определяют данные цитотоксичности. Результаты представлены в таблице 3.

Заключение: соединения Ib, Ie, If, Ig, Ih, Ik, Ip, Ir, Is, Iu, Iy обладают значительно меньшей токсичностью по сравнению с контрольными соединениями - димерными пиридиниевыми солями: Бис-ЧАС-1, ближайшим структурным аналогом Бис-ЧАС-2 и "Октенидин дигидрохлоридом" Бис-ЧАС-3.

Пример 36

Тестирование цитотоксичности описанных выше новых соединений Ib, Ie, If, Ig, Ih, Ik, Ip, Ir, Is, It, Iu, Iy на эритроцитах человека (гемолиз).

Ссылочные соединения: бис-четвертичные аммониевые соли: 1,4-бис(3,3'-(1-децилпиридиний)метилокси)бутандибромид (Бис-ЧАС-1), ближайший структурный аналог - дибромид 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния) (Бис-ЧАС-2) и "Октенидин дигидрохлорид" (Бис-ЧАС-3). Клетки RBC (Human red blood cells): эритроциты человека.

Цельную кровь человека трижды промывали 3 объемами 0,9% NaCl, а затем ресуспендировали в такой же концентрации до 5×10⁷ клеток/мл. Промытые клетки (50 мкл) засевали в лунки 384-луночного планшета, содержащие тестируемые образцы. После 10 минутного встряхивания растворы инкубировали в течение 1 ч при 37°С. После инкубации образцы центрифугировали при 1000 g в течение 10 минут для осаждения клеток и дебриса. Пробу 25 мкл супернатанта переносят на 384-луночный планшет для количественного анализа.

Гемолиз определяли путем измерения поглощения супернатанта при 405 мм (OD405). Абсорбцию измеряли с использованием планшет-ридера Tecan М1000 Pro. НС10 и НС50 (концентрация при гемолизе 10% и 50% соответственно) были рассчитаны путем подбора кривой зависимости значений ингибирования от log (концентрации) с использованием сигмоидальной функции концентрация-отклик.

С применением, 1,4-бис-(3,3'-(1-децилпиридиний)метилокси)бутандибромида (Бис-ЧАС-1), ближайшего структурного аналога - дибромида 3,3'-[1,4-фенилен-бис-(окси)]-бис-(1-додецилпиридиния) (Бис-ЧАС-2) и "Октенидин дигидрохлорида" (Бис-ЧАС-3) в качестве ссылочных соединений определяют данные гемолиза. Результаты представлены в таблице 4.

Заключение: все протестированные соединения (Ib, Ie, If, Ig, Ih, Ik, Ip, Ir, Is, It, Iu, Iy) обладают значительно меньшей токсичностью при действии на эритроциты человека по сравнению с контрольными соединениями - димерными пиридиниевыми солями: Бис-ЧАС-1, ближайшим структурным аналогом Бис-ЧАС-2 и "Октенидин дигидрохлоридом" Бис-ЧАС-3.

Основываясь на представленных выше результатах можно сделать заключение, что множество соединений формулы (I) демонстрируют высокое антибактериальное и противогрибковое действие в сочетании с низкой цитотоксичностью по сравнению с контрольными соединениями - хлоридом бензалкония (ХБА), димерными пиридиниевыми солями: Бис-ЧАС-1, ближайшим структурным аналогом Бис-ЧАС-2 и "Октенидин дигидрохлоридом" Бис-ЧАС-3 - и могут применяться в качестве эффективных бактерицидных ингредиентов в дезинфицирующих средствах или антисептических композициях, которые обладают низкой токсичностью. Хотя данное изобретение описано подробно со ссылкой на конкретные предпочтительные варианты, специалист в области техники, к которой принадлежит данное изобретение, поймет, что различные модификации и улучшения могут быть сделаны, не выходя за суть и объем представленной формулы изобретения.

Техническим результатом данного изобретения является создание нового типа димерных четвертичных солей пиридиния общей формулы I, обладающих сравнимой или более высокой биоцидной активностью и низкой клеточной токсичностью одновременно по сравнению с прототипом, пригодных для получения антисептических или дезинфицирующих средств, а также разработка способа их получения.

Изобретение относится к новому типу димерных четвертичных солей пиридиния общей формулы:

где R является линейной или разветвленной алкильной или алкениленовой или алкиновой группой, содержащей от 8 до 18 атомов углерода; n является 0 либо 1; X является атомом галогена: хлором, бромом или йодом, обладающим биоцидным действием, а также к способу их получения. Предлагаемые соединения могут найти применение в качестве антисептиков и дезинфицирующих средств. Техническим результатом данного изобретения является создание нового типа димерных четвертичных солей пиридиния общей формулы I, обладающих сравнимой или более высокой биоцидной активностью и низкой клеточной токсичностью одновременно по сравнению с прототипом, пригодных для получения антисептических или дезинфицирующих средств, а также разработка способа их получения. 3 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 табл., 36 пр.

1. Димерные четвертичные соли пиридиния общей формулы:

где R является линейной или разветвленной алкильной или алкениленовой или алкиновой группой, содержащей от 8 до 18 атомов углерода; n является 0 либо 1; X является атомом галогена: хлором, бромом или йодом.

2. Соединения по п. 1, обладающие биоцидным действием.

3. Применение соединения по пп. 1, 2 в качестве активного биоцидного ингредиента для получения антисептических и дезинфицирующих средств.

4. Способ получения соединения по пп. 1, 2, заключающийся в том, что соответствующие дипиридильные производные общей формулы:

где n является 0 либо 1, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы RX, где R является линейной или разветвленной алкильной или алкениленовой или алкиновой группой, содержащей от 8 до 18 атомов углерода, и X является атомом галогена: хлором, бромом или йодом, при кипячении.