Способ синтеза липосомальной формы тироксина Российский патент 2019 года по МПК A61K9/133 A61K38/22 A61P5/14 

Изобретение относится к медицине, а именно к ее разделу эндокринология и к фармации, а именно к созданию субстанций для лекарственных препаратов содержащих тиреоидные гормоны.

Актуальной проблемой для эндокринологии продолжает оставаться повышение эффективности лечения болезней щитовидной железы. При ряде заболеваний щитовидной железы (нетоксический зоб, лимфоцитарный тиреоидит Хасимото, болезнь Риделя, болезнь Де Кервена) в процессе течения данных заболеваний развивается синдром гипотиреоза (1, 2). При запущенных формах гипотиреоза иногда развивается гипотиреоидная кома, для которой характерно - спутанное сознание или потеря сознания, полностью сопровождающиеся, нарушениями функционирования сердечно-сосудистой системы, мощным отеком слизистых и подслизистых оболочек. Гипотиреоидная кома это ургентное состояние с высоким уровнем летальности и терапия этих состояний должна быть интенсивной и требует немедленного восстановления баланса тиреоидных гормонов в организме. На сегодняшний день практически все руководства и учебные пособия по терапии гипотиреодных ком рекомендуют внутривенное введение тироксина. При этом в России инъекционные формы тироксина не выпускаются (3), а также не зарегистрированы в фармкомитете, и как следствие не могут импортироваться. За рубежом делались попытки создать инъекционные препараты, но на данный момент выпускается лишь лекарственная форма для использования в ветеринарии. Разработка и выпуск инъекционной формы тироксина сопряжена с рядом технических трудностей. Функция тироксина в организме с одной стороны тормозить функцию тиреотропоцитов, снижая синтез и секрецию тиреотропина, с другой стороны он является базой в крови и тканях для конвертации его в трийодтиронин.

Сложность состоит в том, что конвертируется в трийодтиронин свободная не связанная с белками фракция циркулирующего в крови тироксина. Большая же часть тироксина в крови циркулирует в связанной с белками форме и он постепенно освобождается от них, и через этот эффект поддерживая уровень не связанного с тироксинсвязывающими белками гормона в плазме крови.

При попытке создать инъекционную форму исследователи столкнулись с проблемой - не возможностью спрогнозировать, сколько введенного тироксина свяжется с белками, а сколько окажется в свободной форме. Из-за этого на фоне конвертации высокого уровня свободного тироксина в трийодтиронин, возрастала частота развитий гипертиреоидных состояний. Что в состоянии у больных находящихся в гипотиреоидных комах является грозным осложнением, ведущим к развитию сердечных аритмий и метаболических нарушений в миокарде и резко повышает риск летального исхода.

В условиях отсутствия инъекционных форм препаратов левотироксина национальным руководством для врачей рекомендуется внутризондовое введение взвеси растолченных таблеток препаратов левотироксина. Однако при гипотиреозе развиваются подслизистые отеки, в том числе и в желудочно-кишечном тракте, что приводит к резкому снижению резорбции левотироксина в кишечнике. И как следствие резко снижается эффективность терапии гипотиреоидной комы.

Создание эффективных и безопасных инъекционных форм препаратов тиреоидных гормонов является актуальной задачей современных эндокринологии и фармации. Одним из решений этой задачи на наш взгляд является создание липосомальной субстанции с инкорпорированным внутрь левотироксином. Которая будет являться эмульсией которую можно вводить как внутримышечно, так и внутривенно.

В качестве прототипа заявляемого изобретения авторами выбраны опубликованные работы по созданию и изучению гормональных липосомальных препаратов (4, 5): М.А. Кисель, Л.Н. Кулик, Е.А. Холодова, З.В. Забаровская Липосомальный инсулин: получение, свойства и перспективы перорального использования// Медицинские новости. - 1997. - №3. - С. 17-21; Ховака В.В. Изучение сахароснижающего действия инсулина, заключенного в липосомы, при пероральном введении экспериментальным животным: Автореф. дис… канд. хим. наук-Киев, 1988.

Недостатком известного прототипа является, то что инсулину не требуются при циркуляции в крови белки переносчики, а тироксину требуются и увеличение свободной формы тироксина в крови может приводить к эффекту передозировки. Липосомальная форма тироксина не связывается с транспортными белками и напрямую достигает органа мишени. В известном прототипе используется лишь эффект лучшего проникновения через кожу и проникновения в орган мишень. В нашем случае данный препарат точнее вводить тироксин за счет его проникновения только в органы мишени, что наряду с эффектом лучшего дозирования повышает безопасность применения тироксина.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является повышение эффективности лечения гипотиреоза за счет быстрого восстановления баланса тиреоидных гормонов в организме.

Предлагается способ синтеза липосомальной формы тироксина включающий подготовку и синтез липосомной субстанции методом экструзии через ультрапористые мембраны размером 100 нм.

Отличием является то, что на этапе подготовки липосомной субстанции для получения мультиламеллярных везикул в колбу роторного испарителя помещают яичный лецетин, холестерин, пегелированный фосфатидилэтаноламин в молярном соотношении 2:1:1 и тироксин из расчета 25 мкг на 1 мл конечного продукта, реактивы растворяют в смеси хлороформ-метанол в соотношении 2:1, затем включают вращение колбы и удаляют растворитель путем упаривания в вакууме при температуре 45°С в течение 3 часов.

Способ осуществляется следующим образом. Разработана и экспериментально апробирована схема синтеза липосомальной субстанции. Липо-сомы получали методом экструзии мультиламеллярных везикул через поликарбонатные фильтры с заданным размером пор.

Для получения мультиламеллярных везикул в колбу роторного испарителя помещали яичный лецетин, холестерин, пегелированный фосфатидилэтаноламин в молярном соотношении 2:1:1 и тироксин из расчета 25 мкг на 1 мл конечного продукта. Реактивы растворяли в смеси хлороформ-метанол в соотношении 2:1. Затем включали вращение колбы и удаляли растворитель путем упаривания в вакууме при температуре 45°С в течение 3 часов. Полученную на стенках колбы липидную пленку гидратировали 0,9% раствором NaCl (физиологический раствор) и встряхивали до образования однородной молочно-белой суспензии.

Полученные мультиламеллярные везикулы пропускали под давлением через мембранный экструдер, что позволяло получить липосомы заданного размера. Размер пор фильтров составлял 100 нм.

Достижение заявленного технического результата подтверждается тем, что за счет того, что тироксин в липосомальной форме не связывается с тироксинсвязывающими транспортными белками крови и печени (в отличие от перорального таблетированного препарата, который связывается с ними) и этим достигается возможность прогнозированно точно ввести внутривенно или внутримышечно необходимую дозу тироксина в кровь. За счет точного дозирования вводимого тироксина и его непосредственного введения в кровь (при гипотиреозе наступает подслизистый отек желудочно-кишечного тракта, что затрудняет резорбцию таблетированных форм препаратов) достигается быстрое восстановление баланса тиреоидных гормонов в организме за короткий промежуток времени.

При этом соотношение пегелированного фосфатидилэтаноламина в молярном соотношении 2:1:1 и тироксина из расчета 25 мкг на 1 мл конечного продукта является оптимальным, так как позволяет внутри липосомы разместить, эту дозу без изменения ее физико-химических свойств и размера частиц.

Подтверждением изобретательского уровня является то, что с использованием предлагаемого способа получен препарат, имеющий наиболее легко усвояемый, более эффективный препарат, при применении которого фармакокинетика совершенно отлична от таблетированных препаратов, а также изменяется фармакодинамика за счет достижения более быстрого действия, при этом возрастает уровень безопасности применения тироксина при гипотиреоидных комах (устраняется возможность передозировок и развития аритмогенного эффекта).

Изобретение относится к медицине, а именно к ее разделу эндокринология, и к фармации, а именно к созданию субстанций для лекарственных препаратов содержащих тиреоидные гормоны. Техническим результатом предлагаемого изобретения является повышение эффективности лечения гипотиреоза за счет быстрого восстановления баланса тиреоидных гормонов в организме. Способ синтеза липосомальной формы тироксина, включающий подготовку и синтез липосомной субстанции методом экструзии через ультрапористые мембраны размером 100 нм. На этапе подготовки липосомной субстанции для получения мультиламеллярных везикул в колбу роторного испарителя помещают яичный лецетин, холестерин, пегелированный фосфатидилэтано-ламин в молярном соотношении 2:1:1 и тироксин из расчета 25 мкг на 1 мл конечного продукта, реактивы растворяют в смеси хлороформ-метанол в соотношении 2:1, затем включают вращение колбы и удаляют растворитель путем упаривания в вакууме при температуре 45°С в течение 3 часов.

Способ синтеза липосомальной формы тироксина, включающий подготовку и синтез липосомной субстанции методом экструзии через ультрапористые мембраны размером 100 нм отличающийся тем, что на этапе подготовки липосомной субстанции для получения мультиламеллярных везикул в колбу роторного испарителя помещают яичный лецетин, холестерин, пегелированный фосфатидилэтаноламин в молярном соотношении 2:1:1 и тироксин из расчета 25 мкг на 1 мл конечного продукта, реактивы растворяют в смеси хлороформ-метанол в соотношении 2:1, затем включают вращение колбы и удаляют растворитель путем упаривания в вакууме при температуре 45°С в течение 3 часов.