Применение пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro для достижения анксиолитического эффекта Российский патент 2019 года по МПК C07K7/06 A61K38/08 A61P25/00 

Описание патента на изобретение RU2705592C1

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, патофизиологии и физиологии, и может быть использовано для получения анксиолитического эффекта при применении пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro в различных дозировках.

Пептид Gly-His-Lys-Gly-Pro состоит из двух составных частей: плазменного медьсвязывающего пептида Gly-His-Lys и глипролина Gly-Pro. Трипептид Gly-His-Lys в свою очередь обладает широким спектром биологических эффектов, в том числе нейротропным, антиоксидантным действием, участвует в процессах регенерации. [Effects of copper tripeptide on the growth and expression of growth factors by normal and irradiated fibroblasts/ J.D. Pollard, S. Quan, T. Kang, R.J. Koch// Arch. Facial Plast. Surg. - 2005. - 7. - C. 27-31]. Отдельно стоит выделить анксиолитический эффект пептида Gly-His-Lys. [Исследование анксиолитических эффектов пептида Gly-His-Lys и его аналогов/ И.И. Бобынцев, О.И. Чернышева, М.Е. Долгинцев и др.// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2014. - 12. - С. 684-687]. Биологические эффекты пептида Gly-His-Lys являются относительно непродолжительными вследствие деградации молекулы протеазами. Для пролонгирования действия пептида возможно присоединение пептидной последовательности с пролином с целью защиты от действия протеаз. [пат. 2443711 Рос. Федерация: МПК С07K 14/00 / Андреева Л.А, Гривенников И.А., Гаврилова С.А., Долотов О.В., Каменский А.А., Кошелев В.Б., Левицкая Н.Г., Мясоедов Н.Ф.; патентообладатель: Учреждение Российской академии наук Институт молекулярной генетики РАН (ИМГ РАН). - №2011103680/10; заявл. 02.02.2011; опубл 27.02.2012, Бюл. №6].

В свою очередь глипролины при присоединении к С-концу трипептида Gly-His-Lys способны не только увеличивать его устойчивость к протеазам, но и модифицировать биологические эффекты данного пептида. В настоящее время установлено, что пептид Gly-Pro обладает способностью к снижению свертывания крови, уменьшению тромбообразования, оказывает антиульцирогенное, а также нейропротекторное и противострессовое действие [Ашмарин, И.П. Глипролины в составе регуляторных трипептидов/ И.П. Ашмарин// Нейрохимия. - 2007. - Т. 24, №1. - С. 5-7].

Однако в литературных источниках отсутствуют данные об анксиолитическом эффекте пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro. Данное исследование было проведено впервые.

Технический результат изобретения: применение пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro для достижения анксиолитического эффекта.

Технический результат изобретения достигается путем применения пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro для анксиолитического эффекта. Нами был использован препарат, разработанный и синтезированный в Институте молекулярной генетики РАН. Растворенный в изотоническом растворе хлорида натрия пептид Gly-His-Lys-Gly-Pro вводился экспериментальным животным (крысы) парентерально (внутрибрюшинно) однократно в дозах 0,5, 5,0 и 50,0 мкг/кг массы тела за 15 минут до проведения эксперимента. Для изучения анксиолитического эффекта использовались методики, основанные на ненаказуемом (методика приподнятого крестообразного лабиринта) и наказуемом (тест конфликтной ситуации по Vogel) поведении.

Пример конкретного выполнения.

Эксперимент был выполнен на крысах-самцах Wistar массой 170-190 г. Животные содержались в стандартных условиях при температуре 22-24°С, двенадцатичасовом световом режиме и на стандартном рационе питания и питья без ограничения. Для проведения эксперимента животные были разделены на группы по 10 особей в каждой.

Анксиолитическое действие пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro оценивалось при помощи методики приподнятого крестообразного лабиринта и теста конфликтной ситуации по Vogel согласно рекомендациям. [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. / под. ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.].

Методика приподнятого крестообразного лабиринта является методикой, основанной на ненаказуемом поведении с целью определения анксиолитического эффекта вещества. Лабиринт представляет собой установку, состоящую из центральной площадки и крестообразно расходящихся от нее под прямым углом четырех рукавов, два противоположных из которых открыты (без стенок), а два других закрыты (имеют стенки). При этом лабиринт приподнят на расстоянии 1 м над полом. Согласно данной методики, животное предварительно выдерживалось 2 минуты в темной камере, затем помещалось в лабиринт на центральную площадку головой к открытому рукаву. В течении 5 минут регистрировалось поведение животного, а именно: время пребывания в открытых, закрытых рукавах, а также на центральной площадке, количество заходов в открытые и закрытые рукава, латентный период первого захода в открытый рукав, число свешиваний с открытых рукавов и др. (таб. 1).

Методика конфликтной ситуации по Vogel основана на наказуемом поведении с целью определения анксиолитического эффекта. Согласно данной методике, животное предварительно лишалось воды на 24 часа, при этом пища не ограничивалась, затем вырабатывался навык взятия воды из поилки, путем помещения крысы в камеру для проведения эксперимента на 5 минут, где она получала доступ к воде без наказания. Затем крысе давали возможность пить в собственной клетке в течение 20 минут, и снова лишали воды на 24 часа. Затем животное снова помещали в камеру для эксперимента на 5 минут, давали возможность пить, при этом каждое взятие воды наказывалось электроболевым раздражением малой силы. В данной методике регистрировались время латентного периода первого взятия воды, общая продолжительность питья в тесте, число наказуемых взятий воды, число шоков и др. (таб. 2).

Эксперименты проводились при помощи экспериментальных установок и программного обеспечения для регистрации и обработки данных фирмы Panlab (Испания).

Пептид, растворенный в физиологическом растворе, животным вводился внутрибрюшинно, однократно в дозах 0,5, 5,0 и 50,0 мкг/кг массы тела за 15 минут до исследования анксиолитического эффекта. Контрольным животным вводился физиологический раствор в эквивалентном объеме.

Для выявления достоверных различий результатов использовался непараметрический критерий Манна-Уитни для сравнения двух независимых выборок.

В результате проведенного исследования установлено, что пептид Gly-His-Lys-Gly-Pro в приподнятом крестообразном лабиринте в дозе 0,5 мкг/кг достоверно уменьшает общее время нахождения в закрытых рукавах лабиринта, увеличивается число свешиваний с открытых рукавов. В дозе 5,0 мкг/кг достоверно увеличивалось время нахождения в открытых рукавах и уменьшилось время нахождения в закрытых рукавах по сравнению с контрольной группой, а также достоверно возрастала пройденная дистанция в открытых рукавах и в центре (таб. 1).

Примечание: * - достоверные отличия (р<0,05) в сравнении с контрольной группой.

По данным результатов теста конфликтной ситуации по Vogel в группе, которой вводили пептид GHK-GP в дозе 50,0 мкг/кг, достоверно увеличивалось число наказуемых взятий воды (таб. 2).

Примечание: * - достоверные отличия (р<0,05) в сравнении с контрольной группой.

Таким образом, результаты исследования показывают наличие анксиолитического эффекта у пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro в дозах 0,5, 5,0 и 50,0 мкг/кг массы тела. При ненаказуемом поведении (методика приподнятого крестообразного лабиринта) наиболее эффективными были дозы 0,5 и 5,0 мкг/кг, а при наказуемом поведении (тест конфликтной ситуации по Vogel) - доза пептида 50,0 мкг/кг.

Данный способ основан на применении регуляторного пептида, относящегося к классу биологически активных веществ, обладающих выраженным модуляторным эффектом и биологической полифункциональностью, не является трудоемким и не требует использования сложного оборудования.

Похожие патенты RU2705592C1

название год авторы номер документа
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ АНКСИОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2013
  • Катаев Валерий Алексеевич
  • Сергеева Светлана Александровна
  • Черненко Олег Валерианович
RU2519191C1
Применение пептида Gly-His-Lys-Pro-Gly-Pro для достижения анальгетического эффекта при боли, вызванной температурным раздражением 2018
  • Бобынцев Игорь Иванович
  • Алферова Марина Евгеньевна
  • Тенькова Анна Николаевна
  • Белых Андрей Евгеньевич
  • Ворвуль Антон Олегович
  • Андреева Людмила Александровна
  • Мясоедов Николай Федорович
RU2687740C1
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ АНКСИОЛИТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ, НА ОСНОВЕ ГИДРИРОВАННЫХ ПИРИДО(4,3-b)ИНДОЛОВ (ВАРИАНТЫ), ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО НА ЕГО ОСНОВЕ И СПОСОБ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ 2007
  • Бачурин Сергей Олегович
  • Воронина Татьяна Александровна
  • Гарибова Таисия Леоновна
  • Григорьев Владимир Викторович
RU2338533C1
Применение пептида Gly-His-Lys-Val-Glu-Pro для повышения обучаемости и улучшения памяти. 2020
  • Бобынцев Игорь Иванович
  • Алферова Марина Евгеньевна
  • Тенькова Анна Николаевна
  • Белых Андрей Евгеньевич
  • Ворвуль Антон Олегович
  • Анфилова Марина Геннадьевна
  • Андреева Людмила Александровна
  • Мясоедов Николай Федорович
RU2743293C1
ПРИМЕНЕНИЕ ПЕПТИДА Gly-His-Lys ДЛЯ АНКСИОЛИТИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА 2012
  • Долгинцев Максим Евгеньевич
  • Бобынцев Игорь Иванович
  • Смахтин Михаил Юрьевич
  • Чернышёва Ольга Игоревна
  • Белых Андрей Евгеньевич
  • Крюков Алексей Анатольевич
RU2480232C1
Применение пептида Gly-His-Lys-Pro-Gly-Pro для достижения антидепрессивного эффекта. 2020
  • Бобынцев Игорь Иванович
  • Алферова Марина Евгеньевна
  • Тенькова Анна Николаевна
  • Белых Андрей Евгеньевич
  • Ворвуль Антон Олегович
  • Анфилова Марина Геннадьевна
  • Андреева Людмила Александровна
  • Мясоедов Николай Федорович
RU2747224C1
АНКСИОЛИТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ АНКСИОЛИТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ 1999
  • Андреева Л.А.
  • Алфеева Л.Ю.
  • Гривенников И.А.
  • Мясоедов Н.Ф.
  • Незавибатько В.Н.
  • Середенин С.Б.
  • Козловская М.М.
  • Козловский И.И.
  • Вальдман Е.А.
  • Незнамов Г.Г.
RU2155065C1
ФЕНИЛГИДРАЗИД (4-ФЕНИЛ-2-ПИРРОЛИДОН-1-ИЛ)-УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩИЙ НООТРОПНОЙ, АНТИДЕПРЕССИВНОЙ И АНКСИОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2010
  • Берестовицкая Валентина Михайловна
  • Васильева Ольга Сергеевна
  • Остроглядов Евгений Сергеевич
  • Петров Владимир Иванович
  • Тюренков Иван Николаевич
  • Багметова Виктория Владимировна
RU2440981C1
СОЛИ 2-ЭТИЛ-6-МЕТИЛ-3-ОКСИПИРИДИНА С ОРГАНИЧЕСКИМИ КАРБОНОВЫМИ КИСЛОТАМИ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНКСИОЛИТИЧЕСКОЙ, АНТИДЕПРЕССИВНОЙ, ПРОТИВОГИПОКСИЧЕСКОЙ, АНТИАМНЕСТИЧЕСКОЙ И АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ 2002
  • Смирнов Леонид Дмитриевич
  • Воронина Татьяна Александровна
RU2284993C2
Новые глипролины с ноотропной, антигипоксической, нейропротективной и анксиолитической активностью 2016
  • Середенин Сергей Борисович
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Колясникова Ксения Николаевна
  • Кузнецова Елена Александровна
  • Воронина Татьяна Александровна
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Антипова Татьяна Алексеевна
  • Литвинова Светлана Александровна
  • Золотов Николай Николаевич
RU2646604C2

Реферат патента 2019 года Применение пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro для достижения анксиолитического эффекта

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, патофизиологии и физиологии. Сущностью изобретения является применение пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro с целью достижения анксиолитического эффекта. Изобретение позволяет достичь анксиолитического эффекта при применении различных доз пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro. 2 табл., 1 пр.

Формула изобретения RU 2 705 592 C1

Применение пептида Gly-His-Lys-Gly-Pro, имеющего формулу NH2-Gly-His-Lys-Gly-Pro-СООН, для достижения анксиолитического эффекта.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2019 года RU2705592C1

ТЕТРАПЕПТИД, ОБЛАДАЮЩИЙ АНКСИОЛИТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ 2010
  • Белушкина Наталья Николаевна
  • Ковтун Анатолий Леонидович
  • Махлай Александр Александрович
  • Павлова Людмила Анатольевна
  • Петров Валерий Евгеньевич
  • Ульянов Андрей Михайлович
  • Дегтярева Ольга Геннадьевна
  • Гайдуков Игорь Олегович
  • Тарасов Вадим Владимирович
RU2429003C1
СЕМЕЙСТВО ПЕПТИДОВ, ОБЛАДАЮЩИХ НЕЙРОТРОПНЫМИ СВОЙСТВАМИ 2001
  • Ашмарин И.П.
  • Алфеева Л.Ю.
  • Андреева Л.А.
  • Гривенников И.А.
  • Дубынин В.А.
  • Каменский А.А.
  • Козловская М.М.
  • Левицкая Н.Г.
  • Мясоедов Н.Ф.
  • Незавибатько В.Н.
  • Середенин С.Б.
RU2206573C1
ПРИМЕНЕНИЕ ПЕПТИДА Gly-His-Lys ДЛЯ АНКСИОЛИТИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА 2012
  • Долгинцев Максим Евгеньевич
  • Бобынцев Игорь Иванович
  • Смахтин Михаил Юрьевич
  • Чернышёва Ольга Игоревна
  • Белых Андрей Евгеньевич
  • Крюков Алексей Анатольевич
RU2480232C1

RU 2 705 592 C1

Авторы

Бобынцев Игорь Иванович

Алферова Марина Евгеньевна

Тенькова Анна Николаевна

Белых Андрей Евгеньевич

Ворвуль Антон Олегович

Телегина Ирина Артуровна

Музалева Юлия Александровна

Андреева Людмила Александровна

Мясоедов Николай Федорович

Даты

2019-11-11Публикация

2019-02-26Подача