Способ определения прогноза выживаемости больных с глиомами головного мозга Grade 2 - Grade 4 Российский патент 2021 года по МПК C12Q1/68 

Изобретение относится к области молекулярной биологии, нейрохирургии и медицине, в частности к онкологии, и предназначено для определения прогноза выживаемости больных с глиомами головного мозга.

В научных публикациях активно обсуждается роль микроРНК в качестве маркера выживаемости пациентов. В обширной литературе молекулярно-генетического направления имеются также ряд публикаций, авторы которых считают, что показатели экспрессии отдельных микроРНК в глиомах головного мозга могут являться достоверными предикторами выживания больных с данной патологией. Так, например, работами Lan F. et al. (2015) (J Neurochem. 2015 Oct;135(2):274-86. doi: 10.1111/jnc.13272. Epub 2015 Aug 26. miR-144-3р exerts anti-tumor effects in glioblastoma by targeting c- Met./ Lan F¹, Yu H², Нu M³, Xia T⁴, Yue X⁵./PMID: 26250785/DOI: 10.1111/jnc.13272) показано, что микроРНК-144-Зр является антионкогеном в глиоме, и ее пониженная экспрессия положительно связана с плохой общей выживаемостью больных. Установлено, что уровень экспрессии микроРНК - 144-3р снижен не только в тканях глиом вообще, по сравнению с паратуморозной тканью, но и особенно в глиомах высокой степени анаплазии по отношению к опухолям низкой степени злокачественности.

Кроме того, пациенты с глиомой, с низкими уровнями ее экспрессии имели более низкие показатели выживаемости. Наши предыдущие исследования свидетельствуют о том, что показатели экспрессии действительно достоверно отличались в глиомах grade II от опухолей grade III и IV, причем в последних двух случаях они снижались, в среднем, в 5-10 раз (Значение профиля миРНК в диагностике злокачественных глиом головного мозга / Е.В. Ступак, Ю.А. Веряскина, СЕ. Титов, Л.Г. Ахмерова, В.В. Ступак, С.В. Мишинов, Н.А. Копорушко, Ю.В. Петрова, В.В. Пустаханов, М.К. Иванов, И.Ф. Жумулев, Н.Н. Колесников // Российский нейрохирургический журнал. 2016. Т. 8, №2. С. 54-58).

Исследованиями Jiang L. et. Al., (2010) {Jiang L., Мао P., Song L., Wu J., Huang J., Lin C, Yuan J., Qu L., Cheng S.Y., Li J. miR-182 as a prognostic marker for glioma progression and patient survival // Am. J. Pathol. 2010. 177. (1). 29-38). установлено в тканях первичных глиом пятикратное, а в образцах глиобластом 32-х кратное увеличение уровня экспрессии МикроРНК-182, по сравнению с паратуморозной тканью. Значительное увеличение показателей экспрессии микроРНК-182, связано с плохим прогнозом жизни пациентов с глиомой. Показатели уровня циркулирующего микроРНК-182 у этих больных был выше, чем у здоровых людей (Р<0,001). Уровни экспрессии зависели от степени злокачественности опухоли. На основании этого авторы заключают, что микроРНК-182 может быть перспективным биомаркером для ранней диагностики и прогноза выживаемости больных с данными новообразованиями. Выполненная ранее наша работа об изучении микроРНК в тканях глиом свидетельствует об обратном: показано достоверное снижение показателей данной микроРНК между grade II и grade III; grade II и grade IV, приблизительно в 5 и 7 раз соответственно.

При изучении уровней экспрессии микроРНК 183 было установлено, что они были выше в опухолевой ткани, по сравнению с внешне неизмененным мозгом, при этом в глиомах высокой степени злокачественности они доходили до максимальных значений. В подобных исследованиях показано, что и уровни экспрессии микроРНК-183 достоверно коррелируют с выживаемостью пациентов с глиомами мозга. Больные с высокими уровнями экспрессии микроРНК-183 имели значительно более короткую не только общую выживаемость, но и выживаемость без прогрессирования, чем пациенты с низкой ее экспрессией. Кроме того, одномерный и многомерный анализ показал, что уровень экспрессии микроРНК-183 является независимым прогностическим параметром выживаемости больных с данными видами новообразований (Ye Z. et al., 2016). (Ye Z., Zhang Z., Wu L., Liu С, Chen Q., Liu J., Wang X., Zhuang Z., Li W., Xu S., Hang С.Upregulation of miR-183 expression and its clinical significance in human brain glioma. Neurol Sci. 2016. 37. (8). 1341-1347). Здесь наши данные совпадают с литературными - уровень экспрессии микроРНК -183 в глиомах имеет тенденцию к повышению по мере увеличения степени их анаплазии (примерно в 2 раза).

Все приведенные выше методы оценивают прогноз выживаемости пациентов по уровню экспрессии только одной микро РНК, что не может обеспечить достаточную достоверность прогноза.

Наиболее близким к предлагаемому является способ прогноза выживаемости пациентов (WO/2012/114189, МПК 12 Q 1/68, опубл. 30.08.2012) на основе анализа экспрессии 10 микроРНК у 222 человек с глиобластомами головного мозга для определения их в качестве независимых предикторов выживания. Из этих 10 микроРНК семь (-31, -222, -148а, -221, -146b, -200b и -193а) были сопряжены с плохим прогнозом выживания пациентов, а три (-20а, -106а и -17-5р) свидетельствовали о хорошем прогнозе выживания. Больные с плохим прогнозом выживания имели меньшую медиану выживаемости, чем пациенты с хорошим прогнозом. Больные с глиобластомами, имеющие неблагоприятный прогноз выживания имели и плохие показатели общей выживаемости, по сравнению с пациентами с хорошим прогнозом: 11,0% в 2 года, 5,5% в 3 года, 0,0% в 3 и 4 года против 35,0%, 21,5%, 18,5% и 11,8% соответственно. На основании проведенных исследований уровней экспрессии этих 10 микроРНК авторы показали возможность создания математической модели для расчета риска выживаемости больных с глиобластомами.

К недостаткам данного способа следует отнести прогнозирование выживаемости только у больных с глиобластомой. Для других разновидностей глиом головного мозга данный способ не применим. Кроме того, данный метод трудоемок, требует сложных вычислений, что существенно затрудняет прогнозирование выживаемости.

Задача (технический результат) предлагаемого изобретения заключается в создании способа определения прогноза выживаемости больных с глиомами головного мозга, свободного от выше указанных недостатков.

Поставленная задача решается тем, что в способе определения прогноза выживаемости больных с глиомами головного мозга, включающем измерение уровня экспрессии микроРНК в биологическом образце и определение прогноза выживаемости, согласно предлагаемому изобретению задают пороговые значения относительных уровней экспрессии: для микроРНК-31 - 0,09804, для микроРНК-21 - 4,443, для микроРНК-221 - 0.5312, для микроРНК-223 - 1,315, измеряют уровень экспрессии микроРНК в биологическом образце микроРНК-31, микроРНК-21 микроРНК-223 и микроРНК-221 методом ПНР в режиме реального времени, сравнивают уровни экспрессии микроРНК в биологическом образце с пороговыми значениями, при повышении уровня экспрессии всех 4 микроРНК в биологическом образце, по сравнению с пороговыми значениями, делают вывод о плохом прогнозе выживаемости.

На основании клинических данных лечения больных с супратенториальными глиомами головного мозга (морфологическая принадлежность опухоли, степень ее злокачественности, вида комплексного лечения, продолжительность жизни - сроков выживаемости пациентов после операции и установления гистологического диагноза) и определения профилей экспрессии 10 микроРНК была определена прогностическая значимость последних как предикторов выживаемости. В изучаемую группу вошли 107 пациентов.

МикроРНК-31, -21, -221 и -223 обладали наибольшим влиянием на время выживания пациентов из всех исследованных микроРНК. Для каждой из указанных микроРНК были определены пороговые значения относительных уровней экспрессии. Для микроРНК-31, этот уровень соответствовал - 0,09804, для микроРНК-21 - 4,443, для микроРНК-221 -0.5312, для микроРНК-223 - 1,315.

Экспериментально установлено, что увеличение уровня экспрессии именно этих четырех микроРНК, по сравнению с пороговыми значениями, свидетельствует о плохом прогнозе заболевания и снижении продолжительности жизни пациентов с глиомами головного мозга. Причем, речь идет о глиомах Grade 2 - Grade 4.

Предлагаемое изобретение поясняется клиническими примерами и иллюстрирующими фигурами, где на фиг. 1 и 2 представлена МР-томограмма головного мозга пациентки И., 31 год, с контрастированием; на фиг. 3, 4 и 5 - MP-томограмма головного мозга пациента К., 40 лет; на фиг. 6, 7 и 8 - MP-томограмма головного мозга пациентки Ч., 61 год; фиг. 9, 10 - МР-томограмма головного мозга пациентки Ш., 44 года с контрастированием; фиг. 11, 12 - MP-томограмма головного мозга пациента К., 54 года с контрастированием, на фиг. 13 и 14 - MP-томограмма головного мозга пациентки Ю., 49 лет; на фиг. 15 и 16 - MP-томограмма головного мозга пациента К., 41 год; на фиг. 17, 18 и 19 - MP-томограмма головного мозга пациента Т., 43 года; на фиг. 20, 21 - MP-томограмма головного мозга пациентки А., 55 лет; на фиг. 22, 23 - MP-томограмма головного мозга пациента М., 51 год; на фиг. 24, 25 - MP-томограмма головного мозга пациента К., 56 лет с контрастированием; фиг. 26, 27, 28 - МР-томограмма головного мозга пациентки К., 62 года с контрастированием; фиг. 29, 30, 31 - MP-томограмма головного мозга пациентки С, 46 лет с контрастированием; фиг. 32, 33, 34 - MP-томограмма головного мозга пациента П., 66 лет с контрастированием; фиг. 35, 36 - MP-томограмма головного мозга пациентки Б., 56 лет с контрастированием; фиг. 37, 38 - MP-томограмма головного мозга пациента О., 44 года с контрастированием; фиг. 39, 40 - МР-томограмма головного мозга пациента Д., 55 лет с контрастированием;

В таблицах 1-17 приведены результаты уровней экспрессии микроРНК соответственно у пациентов И., 31 год, К., 40 лет, Ч., 61 год, Ю., 49 лет, К., 41 год, Т., 43 года, А., 55 лет, М., 51 год, К., 56 лет, К., 62 года, С, 46 лет, П., 66 лет, Б., 56 лет, О., 44 года, Д., 55 лет, Ш. 44 года, К. 54 года. В таблице 18 приведены сводные данные по приведенным клиническим примерам. Пример 1.

Пациентка И., 31 г., считает себя больной с ноября 2014 года, когда впервые появилась острая стреляющая головная боль в затылочной области при наклонах головы, обратилась к неврологу по месту жительства. В декабре 2014 года была выполнена МРТ головного мозга (фиг. 1, 2), по результатам которой было обнаружено внутримозговое объемное образование в правой лобной доле.

Консультирована нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное лечение. При поступлении жалобы на периодически возникающую головную боль стреляющего характера, преимущественно в затылочной области при наклонах головы и натуживании.

Функциональное состояние больной по шкале Карновского 70 баллов. В неврологическом статусе очаговой патологии не было.

29.01.2015 г. проведено плановое оперативное лечение: микрохирургическое удаление объемного образования правой лобной доли головного мозга под нейронавигационным контролем.

Послеоперационный период протекал без осложнений. В неврологическом статусе без появления дополнительного неврологического дефицита. Функциональный статус больного по шкале Карновского 60 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Иммуногистохимическим методом выявлена диффузная астроцитома Grade П.

Методом ПНР в режиме реального времени измерили уровень экспрессии микроРНК в биологическом образце опухоли в микроРНК-31, микроРНК-21 микроРНК-223 и микроРНК-221, сравнили уровни экспрессии микроРНК в биологическом образце с пороговыми значениями.

Уровни экспрессии всех четырех значимых микроРНК в опухолевом образце по сравнению с пороговыми значениями снижены (таблица 1). В соответствии с заявляемым способом это свидетельствовало о благоприятном течении заболевания.

Поскольку прогноз был благоприятным, то после выписки из клиники проведен стандартный курс лучевой терапии СОД 60 Гр и 5 курсов адъювантной химиотерапии темодалом.

В настоящий момент (с момента постановки диагноза прошло 5 лет) состояние больной удовлетворительное, беспокоят небольшие периодические головные боли. Функциональное состояние по шкале Карновского 80 балов. В неврологическом статусе по-прежнему очаговых симптомов нет. Клинически и по данным МРТ головного мозга с контрастом данных за продолженный рост новообразования нет. Наблюдается у невролога по месту жительства. С целью контроля течения заболевания 1 раз в год проводится МРТ головного мозга с контрастированием.

Таким образом, у больной с глиомой Grade II умеренной степени злокачественности благоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и длительной продолжительностью жизни.

Пример 2.

Пациент К., 40 лет, считает себя больным с ноября 2013 года, когда на фоне полного здоровья развился генерализованный эпиприступ с потерей сознания. После чего был доставлен в больницу, где было проведено томографическое обследование, выявившее кистозно-солидное объемное образование в лобной доле слева (фиг. 3, 4, 5)).

Консультирован нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное вмешательство.

При поступлении жалобы на умеренную головную боль, головокружение, общую слабость. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 60 баллов. Неврологически - элементы моторной афазии. МР-томограмма головного мозга больного с контрастированием показала наличие в лобной области слева кистозно-солидной внутримозговой опухоли.

05.04.2014 г. проведено оперативное вмешательство: микрохирургическое удаление кистозно-солидного объемного образования правой теменной доли под нейронавигационным контролем. Иммуногистохимическим методом диагностирована анапластическая астрацитома Grade III. Определены уровни экспрессии значимых микроРНК в биологическом образце опухоли.

В опухолевой ткани данного больного определялся пониженный уровень экспрессии всех четырех микроРНК (31, 21, 221 и 223) по сравнению с пороговыми значениями (таблица 2), что свидетельствовало о благоприятном прогнозе течения заболевания.

После выписки из клиники проведен стандартный курс лучевой терапии СОД 60 Гр и 5 курсов химиотерапии темозоломидом. В настоящее время (3 года после операции) состояние удовлетворительное. Сохраняется небольшая общая слабость, утомляемость. Функциональное состояние по шкале Карновского 80 балов. Ежегодно проходит МРТ с контрастом.

Таким образом, у больного со злокачественной глиомой Grade III благоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и длительной продолжительностью жизни

Пример 3.

Пациентка Ч., 61 год, считает себя больной с сентября 2015 года, когда возник эпизод резкого подъема артериального давления, появился шум в ушах, головокружение и головные боли диффузного характера. Через неделю приступ повторился. В связи с этим была госпитализирована в неврологическое отделение одной из больниц города с подозрением на острое нарушение мозгового кровообращения. При проведении МРТ головного мозга было выявлено внутримозговое объемное образование левой височной доли (фиг. 6, 7, 8). После консультации нейрохирурга НИИТО для оперативного лечения госпитализирована в клинику.

При поступлении жалобы на снижение памяти, нарушение речи и письма, шум в ушах, головокружение. Функциональное состояние больной по шкале Карновского 60 баллов.

28.09.2015 года оперирована: Краниотомия в левой теменно-височной области. Микрохирургическое удаление объемного образования левой височной доли под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиобластома Grade IV. Послеоперационный период протекал без осложнений. В неврологическом статусе без усугубления неврологического дефицита. Шкала Карновского 60 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Из таблицы 3 следует, что у оперированной больной в опухолевой ткани имеется сниженная экспрессия всех четырех микроРНК (-31, -21, -221 и -223), что свидетельствовало по нашим данным о благоприятном течении заболевания.

После выписки из клиники проведен стандартный курс лучевого лечения и 10 курсов адъювантной химиотерапии темодалом. Наблюдалась у невропатолога, но в декабре 2017 года, спустя 24 месяца после установления диагноза и операции, скончалась от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больной с высокозлокачественной опухолью (глиобластома Grade IV) благоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и длительной продолжительностью жизни

Пример 4.

Пациентка Ш, 44 года, заболела в ноябре 2014 года, когда на фоне относительно удовлетворительного состояния развился генерализованный эпиприступ с потерей сознания. На МРтомографии выявлено солидное объемное образование головного мозга в лобной доле слева (фиг. 37, 38). Консультирован нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное вмешательство.

Жалобы при поступлении на умеренную головную боль, головокружение, общую слабость. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 70 баллов. Неврологически - элементы моторной афазии. Снижена память на текущие события.

В 14.11.2014 г. проведено оперативное вмешательство: микрохирургическое удаление объемного образования левой лобной доли под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК у данной больной, используя разработанный нами оригинальный способ, взяты биоптаты опухоли и неизмененного мозга для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом диагностирована астрацитома grade II.

В Табл. 4 представлен уровень экспрессии значимых микроРНК в опухолевом образце. Из нее следует, что в опухолевой ткани данной больной определялся повышенный уровень экспрессии трех микроРНК (-31, -21, -221) и пониженный микроРНК-223. Полученные молекулярно-генетические данные свидетельствовали о благоприятном прогнозе течения заболевания.

После выписки из клиники прошла курс лучевой терапии СОД 60 Гр и 5 курсов химиотерапии темозоломидом. Спустя 3 года после операции состояние удовлетворительное. Сохраняется небольшая общая слабость, утомляемость. Функциональное состояние по шкале Карновского 80 балов. Ежегодно контролируется рост опухоли - проходит МРТ с контрастом.

Пример 5.

Пациент К. 54 года, заболел в июле 2014 года, когда стал отмечать головные боли диффузного характера, слабость в правых конечностях. Амбулаторно проведена МРтомография, на которой выявлено объемное образование головного мозга в теменной доле слева (фиг. 39, 40). Консультирован нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное вмешательство.

Жалобы при поступлении на головную боль, головокружение, общую

слабость. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 70 баллов. Неврологически - легкий центрального типа правосторонний гемипарез.

В 10.07.2014 г. проведено оперативное вмешательство: микрохирургическое удаление объемного образования левой теменной доли под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК у данной больной, используя разработанный нами оригинальный способ, взяты биоптаты опухоли и неизмененного мозга для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом диагностирована астрацитома grade III.

В Табл. 5 представлен уровень экспрессии значимых микроРНК в опухолевом образце. Из нее следует, что в опухолевой ткани данного больного определялся повышенный уровень экспрессии двух микроРНК (-31, -21) и пониженный микроРНК -221 и -223. Полученные молекулярно-генетические данные свидетельствовали о благоприятном прогнозе течения заболевания.

После выписки из клиники прошел курс лучевой терапии СОД 60 Гр и 5 курсов химиотерапии темозоломидом. Обследован через 2,5 лет после операции, данных за рецидив новообразования нет.Астеничен, сохраняется небольшая общая слабость, утомляемость. Функциональное состояние по шкале Карновского 80 балов. Ежегодно контролируется рост опухоли -проходит МРТ с контрастом.

Пример 6.

Пациентка Ю., 49 лет, заболела в ноябре 2015 года. Обратилась за медицинской помощью к невропатологу в связи с развившимся развернутым эпилептическим припадком. Выполнено МРТ головного мозга, на изображениях которого обнаружена внутримозговое объемное образование правой височной доли (фиг. 9, 10). Консультирована нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное лечение.

При поступлении в клинику жаловалась на головную боль. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 70 баллов. В неврологическом статусе элементы моторной афазии.

22.12. 2015 года оперирована: Краниоэктомия в правой височной области. Микрохирургическое удаление внутримозгового объемного образования под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взяты биоптаты опухоли и неизмененного мозга для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиома (Grade II).

Послеоперационный период протекал спокойно, без осложнений. В неврологическом статусе появился легкий левосторонний гемипарез центрального типа. Функциональное состояние по шкале Карновского 60 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Из показателей таблицы 6 следует, что у данной больной в опухолевой ткани имеется повышенная экспрессия всех четырех микроРНК (-31, -21, -221 и -223), что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

В связи с неблагоприятным прогнозом заболевания после выписки был назначен курс лучевой терапии СОД 60 Гр и 5 курсов адъювантной химиотерапии темодалом по стандартной схеме. Но в сентябре 2016 года, спустя 8 месяцев с момента операции и постановки диагноза, скончалась от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больной с глиомой Grade II умеренной степени злокачественности при стандартном адъювантном лечении неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Пример 7.

Пациент К., 41 года, заболел в сентябре 2015 года. Беспокоили головные боли диффузного характера. Обратился за медицинской помощью к невропатологу. Спустя 2 месяца возник развернутый эпилептический припадок. Выполнено МРТ головного мозга, на изображениях которого выявлено внутримозговое объемное образование височно-затылочной области слева. MP-томограммы головного мозга больного представлены на фиг. 11 и 12. Консультирован нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное лечение.

В клинике при поступлении жаловался на диффузную головную боль. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 70 баллов. В неврологическом статусе элементы акалькулии.

06.11. 2015 года оперирован: Краниоэктомия в левой теменно-височной области. Микрохирургическое удаление внутримозгового объемного образования под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиома (Grade III).

Послеоперационный период протекал без осложнений. В неврологическом статусе наросли явления акалькулии. Функциональное состояние по шкале Карновского 60 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Из показателей таблицы 7 следует, что у данного больного в опухолевой ткани имеется повышенная экспрессия всех четырех микроРНК (-31, -21, -221 и -223), что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

После выписки из клиники проведен курс лучевой терапии СОД 60 Гр и 6 курсов адъювантной химиотерапии темодалом по стандартной схеме, назначенной химиотерапевтом. Но в августе 2016 года, спустя 8 месяцев с момента операции и постановки диагноза, скончался от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больного со злокачественной глиомой Grade III, получавшего стандартное адъювантное лечение, неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшим сроком продолжительности жизни.

Пример 8.

Пациент Т., 43 года, считает себя больным с января 2014 года, когда стали беспокоить интенсивные головные боли особенно в затылочной области слева, с трудом купируемые анальгетиками. Обратился за медицинской помощью к терапевту по месту жительства. При осмотре отмечалось повышенное АД до 180/90 мм рт.ст., назначено лечение (гипотензивная терапия). Состояние не улучшалось. Возник приступ потери сознания, без судорог. Пациент был госпитализирован в ЦРБ, с диагнозом острое нарушение мозгового кровообращения по ишемическому типу. На фоне проводимой консервативной терапии отрицательная динамика в виде появления правостороннего гемипареза, элементов сенсо-моторной афазии. Переведен в отделение нейрохирургии НИИТО, где выполнено МРТ головного мозга (фиг. 13, 14 и 15), на изображениях которого выявлено внутримозговое объемное образование затылочной доли слева. Консультирован нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное лечение.

При поступлении жалобы на головную боль в затылочной области, двоение при взгляде перед собой. Легкий центрального типа до 4-х баллов гемипарез в правых конечностях. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 60 баллов.

07.04.2014 года оперирован: Краниоэктомия в левой теменно-затылочной области. Микрохирургическое удаление внутримозгового объемного образования левой теменно-затылочной области под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиобластома (Grade IV).

Послеоперационный период протекал без осложнений. В неврологическом статусе гемипарез усугубился до 3-х баллов, со снижением функционального состояния оперированного до 60 баллов по шкале Карновского. Рана зажила первичным натяжением.

Из показателей таблицы 8 следует, что у данного больного в опухолевой ткани имеется повышенная экспрессия микроРНК-31, микроРНК-21, микроРНК-221 и микроРНК-223, что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

После выписки из клиники проведен курс лучевой терапии СОД 60 Гр и 5 курсов адъювантной химиотерапии темодалом по стандартной схеме, назначенной химиотерапевтом. В октябре 2014 года, спустя 5 месяцев после оперативного вмешательства и постановки диагноза, скончался от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больного с высокозлокачественной опухолью (глиобластома Grade IV), получавшим стандартное адъювантное лечение неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшим сроком продолжительности жизни.

Пример 9.

Пациентка А., 55 лет, заболела в ноябре 2016 года. Возникли выраженные головные боли, не купируемые анальгетиками. Боли нарастали, возникла небольшая слабость и нарушение речи в правой руке. Выполнено МРТ головного мозга, на изображениях которого обнаружено внутримозговое объемное образование левой височной доли (фиг. 16, 17). Консультирована нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное лечение.

При поступлении в клинику жаловалась на головную боль и нарастающую слабость в правой руке. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 80 баллов. В неврологическом статусе элементы моторной афазии и легкий парез в правой руке

27.12. 2016 года оперирована: Краниоэктомия в правой височной области. Микрохирургическое удаление внутримозгового объемного образования под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиома (Grade II).

Послеоперационный период протекал без осложнений. В неврологическом статусе нарос левосторонний гемипарез центрального типа. Функциональное состояние по шкале Карновского 70 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Из показателей таблицы 9 следует, что у данной больной в опухолевой ткани имеется повышенная экспрессия всех четырех микроРНК (-31, -21, -221 и -223), что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

Учитывая данные экспрессии мкроРНК, говорящие о неблагоприятном прогнозе заболевания, после выписки из клиники провели курс лучевой терапии СОД 60 Гр и усиленную адъювантную химиотерапию темодалом по стандартной схеме, назначенной химиотерапевтом в виде 10 курсов. Но в ноябре 2017 года, спустя 10 месяцев с момента операции и постановки диагноза, скончалась от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больной с глиомой Grade II умеренной степени злокачественности при усиленном адъювантном лечении неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Пример 10.

Пациент М., 51 год, заболел в июле 2016 года. На фоне развившихся головных болей внезпно развился фокальный эпиприпадок с судорогами в левой конечности. Обратился к невропатологу. Спустя 2 месяца возник развернутый эпилептический припадок. Выполнено МРТ головного мозга, на изображениях которого выявлено внутримозговая опухоли в правой теменно-височной области. MP-томограммы головного мозга больного представлены на фиг. 18 и 19. Госпитализирован в клинику нейрохирургии НИИТО для оперативного лечения.

При поступлении жаловался на головную головную боль. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 70 баллов. В неврологическом статусе легкий левосторонний гемипарез центрального типа.

02.09.2016 года оперирован: Краниоэктомия в правой височной области. Микрохирургическое удаление внутримозгового объемного образования под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиома (Grade III).

Послеоперационный период протекал спокойно, рана зажила первичным натяжением. В неврологическом статусе наросли явления левостороннего гемипареза. Функциональное состояние по шкале Карновского 60 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Из показателей таблицы 10 следует, что у данного больного в опухолевой ткани имеется повышенная экспрессия всех четырех микроРНК (-31, -21, -221 и -223), что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

Учитывая данные экспрессии микроРНК, говорящие о неблагоприятном прогнозе заболевания, после выписки из клиники проведен курс лучевой терапии СОД 60 Гр и усиленная адъювантная химиотерапия темодалом по стандартной схеме, назначенной химиотерапевтом в виде 14 курсов. Но в апреле 2017 года, спустя 8 месяцев с момента операции и постановки диагноза, скончался от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больного со злокачественной глиомой Grade III при усиленном адъювантном лечении неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Пример 11.

Пациент К., 56 лет, считает себя больным с октября 2014 года, когда возникли интенсивные головные боли в лобной области. На фоне проводимой консервативной терапии у невропатолога возникла отрицательная динамика в виде нарушения зрения. На проведенном МРТ головного мозга выявлена внутримозговая опухоли затылочной области справа (фиг. 20, 21). Консультирован нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное лечение.

При поступлении жалобы на головную боль в затылочной области, двоение при взгляде перед собой. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 80 баллов.

01.11.2014 года оперирован: Краниоэктомия в левой теменно-затылочной области. Микрохирургическое удаление внутримозговой опухоли правой затылочной области под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиобластома (Grade IV).

Послеоперационный период протекал без осложнений. В неврологическом статусе выявлен левосторонний гемипарез до 4-х баллов, со снижением функционального состояния оперированного до 60 баллов по шкале Карновского. Рана зажила первичным натяжением.

Из показателей таблицы 11 следует, что у данного больного в опухолевой ткани имеется повышенная экспрессия четырех микроРНК - микроРНК-31, микроРНК-21, микроРНК-221 и микроРНК-223, что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

Учитывая данные экспрессии микроРНК, говорящие о неблагоприятном прогнозе заболевания, после выписки из клиники проведен курс лучевой терапии СОД 60 Гр и усиленную адъювантную химиотерапию темодалом по стандартной схеме, назначенной химиотерапевтом в виде 5 курсов. Но в апреле 2015 года, спустя 5 месяцев с момента операции и постановки диагноза, скончался от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больного с высокозлокачественной глиомой Grade IV при усиленном адъювантном лечении неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Пример 12.

Пациентка К., 62 года. Заболела с марта 2015 года, когда без видимых причин появилась головная боль. Интенсивность головной боли нарастала, в связи с чем выполнено МРТ головы с контрастным усилением, на изображениях которого обнаружена опухоль головного мозга в левой теменной доли (фиг. 22, 23, 24). Консультирована нейрохирургом НИИТО, рекомендовано плановое оперативное лечение.

При поступлении жалобы на головную боль, головокружение. Имеется правосторонний центрального типа гемипарез до 3-х баллов. Функциональное состояние больной по шкале Карновского 60 баллов.

06.05.2015 г. проведено плановое оперативное вмешательство: Краниотомия в левой теменно-височной области, микрохирургическое удаление внутримозговой опухоли под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК у данной больного, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно- генетических исследований.

Иммуногистохимическим методом выявлена анапластическая астрацитома Grade II.

Послеоперационный период протекал без осложнений. В неврологическом статусе нарастание очаговой симптоматики не отмечено. Шкала Карновского 60 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Из таблицы 12 следует, что у данной больной в опухолевой ткани имелась повышенная экспрессия всех четырех микроРНК: -31, -21, -223 и -221, что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном течении заболевания. После выписки больная адъювантное лечение не проходила -отказалась.

Спустя 6 месяцев с момента постановки гистологического диагноза по данным клиники и МРТ головного мозга диагностирован продолженный рост объемного образования правой теменно-височной области с ростом в мозолистое тело и в противоположную сторону. В декабре 2015 г., спустя 7 месяцев после установки диагноза, скончалась от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больной с глиомой умеренной степени злокачественности Grade II при ее отказе от адъювантного лечения неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Пример 13.

Пациентка С., 46 лет, считает себя больной с декабря 2014 года, когда после черепно-мозговой травмы появилась головная боль. Получала консервативное лечение, несмотря на проводимое лечение, головная боль усиливалась. Поэтому 14.01.15 г. выполнено МРТ головы с контрастным усилением, на изображениях которого обнаружено объемное образование правой теменной доли кистозно-солидного характера. МР-томограммы головного мозга больной представлены на фиг. 25, 26, 27. Консультирована нейрохирургом НИИТО, рекомендовано плановое оперативное лечение.

При поступлении жалобы на головную боль, головокружение. Левосторонний центрального типа гемипарез со снижением силы в левых конечностях до 4-х баллов. Функциональное состояние больной по шкале Карновского 60 баллов.

02.03.2015 г. проведено плановое оперативное вмешательство: микрохирургическое удаление кистозно-солидного объемного образования правой теменной доли под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК у данной больного, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно- генетических исследований.

Иммуногистохимическим методом выявлена анапластическая астрацитома grade III.

Послеоперационный период протекал без осложнений. В неврологическом статусе без дополнительного дефицита. Шкала Карновского 60 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Из таблицы 13 следует, что у данного больного в опухолевой ткани имелась повышенная экспрессия всех четырех микроРНК: -31, -21, -223 и -221, что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном течении заболевания.

От дальнейшего комплексного лечения оперированная отказалась. Через 6 месяцев с момента постановки гистологического диагноза по данным клиники и МРТ головного мозга диагностирован продолженный рост объемного образования правой теменно-височной области с ростом в подкорковые структуры. В декабре 2015 г. со слов родственников, спустя 7 месяцев после установки диагноза, скончалась от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больного со злокачественной глиомой Grade 3 при ее отказе от адъювантного лечения неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Пример №14.

Пациент П., 66 лет, заболел в мае 2015 года. Началась и стала прогрессировать головная боль, общая слабость. Появилось снижение памяти. Состояние не улучшалось, напротив- нарастала общая слабость. В июне 2015 года выполнена МРТ головного мозга, на изображениях которой диагностирована внутримозговая опухоль правой лобной доли (Рис. 12) Консультирован нейрохирургом НИИТО, рекомендовано плановое оперативное лечение.

При поступлении в клинику предъявлял жалобы на головную боль, общую слабость. Функциональное состояние больной по шкале Карновского 60 баллов.

22.06.2015 г. проведено плановое оперативное вмешательство: Краниотомия в лобной области справа, микрохирургическое удаление внутримозговой опухоли под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК у данной больного, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно- генетических исследований.

Иммуногистохимическим методом выявлена анапластическая астрацитома Grade ГУ.

Послеоперационный без осложнений. В неврологическом статусе нарастание очаговой симптоматики не отмечено. Шкала Карновского 60 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Из таблицы 14 следует, что у данного больного в опухолевой ткани имелась повышенная экспрессия всех четырех микроРНК: -31, -21, -223 и -221, что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном течении заболевания.

Больной от адъювантного лечения в послеоперационном периоде отказался. Спустя 5 месяцев с момента постановки гистологического диагноза по данным клиники и МРТ головного мозга диагностирован продолженный рост объемного образования правой лобной доли с ростом в мозолистое тело. В декабре 2015 г., спустя 6 месяцев после установки диагноза, скончался от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больного с высокозлокачественной глиомой Grade 1У при его отказе от адъювантного лечения неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Пример №15.

Пациентка Б., 56 лет, заболела в феврале 2014 года. Без всяких видимых причин возникли и стали прогрессировать головные и боли в лобной области. Снизилась память. Самостоятельно прошла МРТ головного мозга, на которых выявлена внутримозговая опухоль правой лобной (фиг. 31, 32). Консультирован нейрохирургом НИИТО, госпитализирована для операции.

В клинике жаловалась на головную боль, снижение памяти. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 80 баллов. В неврологическом статусе без очаговой симптоматики.

20.04.2014 года оперирована: Краниоэктомия в правой лобной области. Микрохирургическое удаление внутримозгового объемного образования под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиома (Grade И).

Послеоперационный период протекал без осложнений. В неврологическом статусе возник легкий центрального типа левосторонний гемипарез. Функциональное состояние по шкале Карновского 70 баллов. Послеоперационное течение без осложнений. Рана зажила первичным натяжением.

Из показателей таблицы 15 следует, что у данной больной в опухолевой ткани имеется повышенная экспрессия всех четырех микроРНК (-31, -21, -221 и -223), что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

Учитывая данные экспрессии микроРНК, говорящие о неблагоприятном прогнозе заболевания после выписки из клиники проведен курс лучевой терапии СОД 60 Гр и усиленную адъювантную химиотерапию темодалом по стандартной схеме, назначенной химиотерапевтом в виде 12 курсов. В течении 18 месяцев состояние было стабильным. Работала по специальности. Но с октября 2015 года, состояние стало прогрессивно ухудшаться и через 20 месяцев после проведения операции и постановки диагноза, скончалась от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больной с глиомой умеренной степени злокачественности Grade II при проведении стандартной адъювантной терапии и дополнительного лечения неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Пример 16.

Пациент О., 44 года, заболел в начале марта 2016 года. Стали беспокоить головные боли, тошнота, стал дезориентирован. Резко снизилась память. Обратился к невропатологу, который рекомендовал проведение МРТ головного мозга, на изображениях которого выявлено внутримозговая опухоли в правой лобной доле (фиг. 33, 34). Госпитализирован в клинику нейрохирургии НИИТО для оперативного лечения.

При поступлении жаловался на головную боль. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 70 баллов. В неврологическом статусе легкий левосторонний гемипарез центрального типа.

11.04.2016 года оперирован: Краниоэктомия в правой лобной области. Микрохирургическое удаление внутримозгового объемного образования под нейронавигационным контролем.

Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиома (Grade III).

Послеоперационный период без осложнений, рана зажила первичным натяжением. В неврологическом статусе появился рефлекторный гемипарез в левых конечностях. Функциональное состояние по шкале Карновского снизилось до 60 баллов. Рана зажила первичным натяжением.

Из показателей таблицы 16 следует, что у данного больного в опухолевой ткани имеется повышенная экспрессия всех четырех микроРНК (-31, -21, -221 и -223), что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

Учитывая данные экспрессии мкроРНК, говорящие о неблагоприятном прогнозе заболевания после выписки из клиники проведен курс лучевой терапии СОД 60 Гр и усиленная адъювантная химиотерапия темодалом по стандартной схеме, назначенной химиотерапевтом в виде 13 курсов. С апреля 2016 г. по февраль 2017 года состояние было стабильным, но затем появились признаки прогрессирования процесса и спустя 3 месяца (через 14 месяцев с момента операции и постановки диагноза), скончался от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больного со злокачественной глиомой Grade III при проведении стандартной адъювантной терапии и дополнительного лечения неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Пример 17.

Пациент Д., 55 лет, считает себя больным с августа 2014 года, когда появились и стали прогрессировать головные боли, через 1 месяц возник эпиприпадок общего типа. На проведенном МРТ головного мозга выявлена внутримозговая опухоль теменной доли справа (фиг. 35, 36). Консультирован нейрохирургом НИИТО, рекомендовано оперативное лечение.

В клинике предъявлял жалобы на интенсивную головную боль в затылочной области. Функциональное состояние больного по шкале Карновского 60 баллов.

04.10.2014 года оперирован: Краниоэктомия в правой теменной области. Микрохирургическое удаление внутримозговой опухоли правой затылочной области под нейронавигационным контролем. Интраоперационно, для изучения показателей экспрессии микроРНК, используя разработанный нами оригинальный способ, взят биоптат опухоли для молекулярно-генетических исследований. Иммуногистохимическим методом выявлена глиобластома (Grade IV).

Послеоперационный период протекал спокойно. В неврологическом статусе появился умеренный центрального типа левосторонний гемипарех до 3-х баллов, со снижением функционального состояния оперированного до 60 баллов по шкале Карновского. Рана зажила первичным натяжением.

Из показателей таблицы 17 следует, что у данного больного в опухолевой ткани имеется повышенная экспрессия четырех микроРНК -микроРНК-31, микроРНК-21, микроРНК-221 и микроРНК-223, что свидетельствовало по нашим данным о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

Учитывая данные экспрессии микроРНК, говорящие о неблагоприятном прогнозе заболевания после выписки из клиники проведен курс лучевой терапии СОД 60 Гр и усиленная адъювантная химиотерапия темодалом по стандартной схеме, назначенной химиотерапевтом в виде 14 курсов. С октября 2014 г. по сентябрь 2015 года состояние было стабильным, но затем появились признаки прогрессирования процесса и спустя 2 месяца (через 12 месяцев с момента операции и постановки диагноза), скончался от прогрессирования заболевания.

Таким образом, у больного высокозлокачественной глиомой Grade IV при проведении стандартной адъювантной терапии и дополнительного лечения неблагоприятный прогноз подтвержден дальнейшим течением заболевания и небольшой продолжительностью жизни.

Сводные данные по приведенным клиническим примерам приведены в таблице 18.

Повышенные экспрессии микроРНК-31, микроРНК-21, микроРНК -223 и микроРНК-221 в глиомах головного мозга достоверно коррелируют с резким снижением выживаемости пациентов и свидетельствуют о плохом прогнозе течения заболевания.

Уровни экспрессии данных микроРНК могут быть использованы как предикторы в оценке выживания больных с супратенториальными глиомами головного мозга.

Изобретение относится к области молекулярной биологии, нейрохирургии и медицине, в частности к онкологии. Задают пороговые значения относительных уровней экспрессии: для микроРНК-31 - 0,09804, для микроРНК-21 - 4,443, для микроРНК-221 - 0,5312, для микроРНК-223 - 1,315. Измеряют уровень экспрессии микроРНК в биологическом образце миРНК-31, миРНК-21, миРНК-223 и миРНК-221 методом ПЦР в режиме реального времени. Сравнивают уровни экспрессии миРНК в биологическом образце с пороговыми значениями. Определяют прогноз выживаемости, где при повышении уровня экспрессии всех 4 микроРНК в биологическом образце по сравнению с пороговыми значениями делают вывод о плохом прогнозе выживаемости. Изобретение обеспечивает создание способа, который является нетрудоемким и не требует сложных вычислений. 18 табл., 17 пр., 40 ил.

Способ определения прогноза выживаемости больных с глиомами головного мозга Grade 2 - Grade 4, включающий измерение уровня экспрессии микроРНК в биологическом образце и определение прогноза выживаемости, отличающийся тем, что задают пороговые значения относительных уровней экспрессии: для микроРНК-31 - 0,09804, для микроРНК-21 - 4,443, для микроРНК-221 - 0,5312, для микроРНК-223 - 1,315, измеряют уровень экспрессии микроРНК в биологическом образце миРНК-31, миРНК-21, миРНК-223 и миРНК-221 методом ПЦР в режиме реального времени, сравнивают уровни экспрессии миРНК в биологическом образце с пороговыми значениями, при повышении уровня экспрессии всех 4 микроРНК в биологическом образце по сравнению с пороговыми значениями делают вывод о плохом прогнозе выживаемости.