Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к области фармации и медицины, а именно к водным композициям анти-IL-6R антитела левилимаба, которые могут быть использованы в качестве лекарственного средства для лечения IL-6R-ассоциированных заболеваний.

Уровень техники

Интерлейкин-6 (IL-6, IL6) является одним из основных провоспалительных цитокинов. IL-6 продуцируется активированными моноцитами, макрофагами, Т-клетками, а также рядом других клеток. Наряду с другими цитокинами он участвует в процессах иммунного ответа, воспаления, ангиогенеза, костного метаболизма. Основное действие IL-6 связано с его участием в качестве кофактора в дифференцировке В-лимфоцитов, их созревании и трансформации в плазматические клетки, секретирующие иммуноглобулины. Помимо этого, IL-6 индуцирует экспрессию рецептора IL-6 на активированных клетках иммунной системы, а также индуцирует продукцию IL-2 Т-лимфоцитами. IL-6 стимулирует пролиферацию Т-лимфоцитов и реакции гемопоэза. По многообразию клеток продуцентов и мишеней биологического действия IL-6 является одним из наиболее активных цитокинов, участвующих в реализации иммунного ответа и воспалительной реакции. Установлено, что дисбаланс между про- и антивоспалительными действиями IL-6 приводит к различным аутоиммунным заболеваниям, хроническому воспалению и остеопорозу, псориазу, а избыточная продукция ассоциирована с различными формами рака.

Таким образом, подавление действия IL-6 является привлекательной терапевтической мишенью (PeterC. HeinrichBiochem. J. (2003) 374:1).

Рецептор IL-6 (IL-6R, IL6R), активируясь, запускает каскад реакций в клетке, приводящих к активному синтезу белков, участвующих в реакциях воспалительного ответа. Рецептор активируется при связывании IL-6 с альфа-субъединицей рецептора IL-6 (CD126), и двух молекул gp130, передающих сигнал внутрь клетки (SimonA.JonesTheFASEBJournal 15(1): 43-58). Существуют 2 формы альфа-рецептора: мембранная (mIL-6R) и растворимая (sIL-6R). Растворимая форма образуется в результате протеолиза трансмембранной части mIL-6R или в процессе альтернативного сплайсинга мРНК mIL-6R. Растворимая форма
sIL-6R обеспечивает реакцию на IL-6 клеток, не имеющих mIL-6R на поверхности.

Таким образом, проведение сигнала IL-6 внутрь клетки возможно 2 путями. Первый (классический сигналинг), при котором IL-6 связывается с клетками иммунной системы, экспрессирующими на своей поверхности mIL-6R ассоциированную с молекулой gp130. Второй (транс-сигналинг)– IL-6 связывается с циркулирующей sIL-6R, формируя комплекс, который связывается с клетками, имеющими на мембране только молекулы gp130, т.е. потенциально любыми клетками человеческого организма. В этом случае, на мембране клетки происходит сборка полного комплекса рецептора IL-6 и последующий запуск сигнального каскада в клетке.

Блокирования действия IL-6 и, следовательно, воспалительной реакции можно добиться, помешав сборке полного комплекса рецептора IL-6, состоящего из альфа-субъединицы, молекул gp130 и IL-6. Полипептиды, связываясь с IL-6R, способны препятствовать сборке полного комплекса, соответственно, блокируют проведение сигнала внутрь клетки.

Полипептиды, специфически связывающиеся с IL-6 (патент RU2550262), IL-6R или gp130 показали значительное ингибирующее влияние на функционирование IL-6. В настоящее время известно антитело, связывающееся с IL-6R, тоцилизумаб, которое представляет собой рекомбинантное гуманизированное моноклональное антитело подкласса иммуноглобулина IgG1_κ (гамма-1, каппа), сконструированное путем переноса региона, определяющего комплементарность (CDR) мышиного анти-IL-6R антитела в человеческий IgG1.

Препараты на основе антитела (тоцилизумаб) связывающегося с IL-6R и блокирующего взаимодействие с IL-6 применяются при лечении ревматоидного артрита и системного ювенильного идиопатического артрита, как в виде монотерапии, так и в комбинации с метотрексатом и/или с другими базисными противовоспалительными препаратами.

Также известно новое антитело к IL-6R - левилимаб (также известный как BCD-089), который представляет собой моноклональное антитело изотипа IgG1 c внесенными в константную часть мутациями. Левилимаб в настоящее время проходит клинические исследования у пациентов с различными заболеваниями, включая ревматоидный артрит и (острый) респираторный дистресс-синдром у взрослых.

Известно, что применение моноклональных антител против рецептора интерлейкина-6 (ИЛ6Р, IL-6R) позволяет эффективно купировать синдром цитокинового шторма, который развивается при использовании CAR-T терапии в онкологии. Эффективность терапии (купирование синдрома в течение 14 дней от первого и единственного введения) достигает 69%

В контексте пандемии COVID-19, показано успешное применение анти- IL-6R терапии у пациентов с тяжелым или критическим течением COVID-19 пневмонии. Проведенный мета-анализ опубликованных данных эффективности ингибиторов IL-6R у пациентов с COVID-19 позволил предварительно подтвердить их эффективность (Xu, X.; Han, M.; etc., Effective treatment of severe COVID-19 patients with tocilizumab. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2020; Coomes, E. A.; Haghbayan, H., Interleukin-6 in COVID-19: A Systematic Review and Meta-Analysis. medRxiv 2020, 2020.03.30.20048058).

В клиническом течении пневмонии COVID-19 существует период окна между постановкой диагноза и развитием синдрома полиорганной недостаточности, составляющий около 5-7 дней, по истечении которого у большинства пациентов наблюдается улучшение, однако у около 20% пациентов наблюдается нарастание тяжести пневмонии (СВЦ, ОРДС). Для улучшения прогноза и снижения летальности, рекомендуется применение упреждающей противовоспалительной терапии, начиная с момента постановки диагноза COVID-19 пневмонии (Sun, X.; Wang, T.; etc., Cytokine storm intervention in the early stages of COVID-19 pneumonia. Cytokine Growth Factor Rev 2020).

Ингибиторы IL-6R включены в российские рекомендации по лечению COVID-19 в качестве препаратов упреждающей противовоспалительной терапии COVID-19 у взрослых (для пациентов со среднетяжелым и тяжелым течением: с острым респираторным дистресс-синдромом, синдромом цитокинового шторма).

Таким образом, в настоящее время является актуальной разработка новых улучшенных стабильных водных фармацевтических композиций для антитела к IL-6R левилимаба.

Краткое описание чертежей

Фигура 1 представляет собой график зависимости оптической плотности растворов при 400 нм от концентрации ПЭГ для моноклонального антитела против рецептора IL-6 левилимаба в исследуемых составах.

Фигура 2 представляет собой график, иллюстрирующий температурный тренд фармацевтической композиции 5 Acet.Buf + 300Glu (выбор осмотического агента).

Фигура 3 представляет собой график, иллюстрирующий температурный тренд фармацевтической композиции 5 Acet Buf. +Mann (выбор осмотического агента).

Фигура 4 представляет собой график, иллюстрирующий температурный тренд фармацевтической композиции 5 Acet. Buf + 100Arg + Mann (выбор осмотического агента).

Фигура 5 представляет собой график, иллюстрирующий температурный тренд фармацевтической композиции 5 Acet Buf. + 200Arg (выбор осмотического агента).

Фигура 6 представляет собой график, иллюстрирующий изменение показателей качества в зависимости от времени при ускоренном хранении в концентрации 220 мг/мл левилимаба.

Фигура 7 представляет собой график, иллюстрирующий изменение показателей качества в зависимости от времени при ускоренном хранении в концентрации 180 мг/мл левилимаба.

Фигура 8 представляет собой график, иллюстрирующий изменение показателей качества в зависимости от времени при ускоренном хранении в концентрации 20 мг/мл левилимаба.

Фигура 9 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов, достигших улучшения в течение болезни, соответствующее ACR20 к 4, 8, 12, 16, 24, 36, 48 и 52 неделе.

Фигура 10 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов, достигших улучшения в течение болезни, соответствующее ACR50 к 4, 8, 12, 16, 24, 36, 48 и 52 неделе.

Фигура 11 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов, достигших улучшения в течение болезни, соответствующее ACR70 к 4, 8, 12, 16, 24, 36, 48 и 52 неделе.

Фигура 12 представляет собой график, иллюстрирующий изменение индекса DAS-28-CRP относительно исходного уровня на протяжение 52 недель терапии.

Фигура 13 представляет собой график, иллюстрирующий долю больных, достигших ремиссии болезни к 24, 36, 48 и 52 неделям терапии.

Фигура 14 представляет собой график, иллюстрирующий изменения СОЭ на фоне терапии.

Фигура 15 представляет собой график, иллюстрирующий динамику концентрации растворимого рецептора интерлейкина-6 у пациентов на протяжении 12 недель терапии.

Фигура 16 представляет собой график, иллюстрирующий изменение концентрации C-реактивного белка в сыворотке крови пациентов на протяжении 12 недель терапии.

Описание изобретения

Определения

Если иное не определено в настоящем документе, научные и технические термины, используемые в связи с настоящим изобретением, будут иметь значения, которые обычно понятны специалистам в данной области.

Кроме того, если по контексту не требуется иное, термины в единственном числе включают в себя термины во множественном числе, и термины во множественном числе включают в себя термины в единственном числе. Как правило, используемая классификация и методы культивирования клеток, молекулярной биологии, иммунологии, микробиологии, генетики, аналитической химии, химии органического синтеза, медицинской и фармацевтической химии, а также гибридизации и химии белка и нуклеиновых кислот, описанные в настоящем документе, хорошо известны специалистам и широко применяются в данной области. Ферментативные реакции и способы очистки осуществляют в соответствии с инструкциями производителя, как это обычно осуществляется в данной области, или как описано в настоящем документе.

Термин «антитело» или «иммуноглобулин» (Ig), как использовано в данном описании, включает полноразмерные антитела и любой антигенсвязывающий фрагмент (т.е. «антигенсвязывающую часть») или его отдельные цепи.

Термин «антигенсвязывающая часть» антитела или «антигенсвязывающий фрагмент» (или просто «часть антитела» или «фрагмент антитела»), как использовано в данном описании, относится к одному или нескольким фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфически связываться с антигеном. Было показано, что антигенсвязывающая функция антитела может выполняться фрагментами полноразмерного антитела. Примеры связывающих фрагментов, включенных в термин “антигенсвязывающая часть" антитела включают (i) Fab-фрагмент, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и CH 1; (ii) F(ab’)2-фрагмент, двухвалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) Fd-фрагмент, состоящий из доменов VH и CH 1; (iv) Fv-фрагмент, состоящий из доменов VL и VH в едином плече антитела, (v) dAb-фрагмент (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546), который состоит из домена VH/VHH; и (vi) выделенная определяющая комплементарность область (CDR). Кроме того, две области Fv-фрагмента, VL и VH, кодируются разными генами, они могут быть соединены при помощи рекомбинантных способов с использованием синтетического линкера, который дает возможность получать их в виде единой белковой цепи, в которой области VL и VH спариваются с образованием одновалентных молекул (известных как одноцепочечный Fv (scFv); см., например, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Предполагается, что такие одноцепочечные молекулы также включены в термин “антигенсвязывающая часть" антитела. Такие фрагменты антител получают с использованием общепринятых способов, известных специалистам в данной области, и эти фрагменты подвергают скринингу таким же образом, как и интактные антитела.

Предпочтительно CDR антигенсвязывающего участка или весь антигенсвязывающий участок антител по изобретению имеет происхождение из мыши, ламы или донорской человеческой библиотеки или по существу человеческое происхождение с определенными аминокислотными остатками, измененными, например, замещенными разными аминокислотными остатками с тем, чтобы оптимизировать конкретные свойства антитела, например KD, koff, IC₅₀, EC₅₀, ED₅₀. Предпочтительно каркасные участки антитела по изобретению имеют человеческое происхождение или по существу человеческое происхождение (по крайней мере на 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% человеческое происхождение).

Термин «моноклональное антитело» или «mAb» относится к антителу, которое синтезировано и выделено отдельной клональной популяцией клеток. Клональная популяция может быть клональной популяцией иммортализованных клеток. В некоторых вариантах осуществления изобретения иммортализованные клетки в клональной популяции являются гибридными клетками, гибридомами, которые обычно получают путем слияния отдельных В-лимфоцитов от иммунизированных животных с отдельными клетками лимфоцитарной опухоли. Гибридомы представляют собой тип сконструированных клеток и не встречаются в природе.

Популяция «моноклональных антител», как используется в настоящем документе, относится к гомогенной или по существу гомогенной популяции антител (т.е. по крайней мере приблизительно 96%, но более предпочтительно по крайней мере приблизительно 97 или 98% или еще более предпочтительно по крайней мере 99% антител в популяции будут конкурировать в иммунно-ферментном анализе ELISA за тот же антиген или эпитоп, или более предпочтительно антитела являются идентичными в аминокислотной последовательности).

Полноразмерное антитело, существующее в природе, представляет собой молекулу иммуноглобулина, которая состоит из четырех полипептидных цепей (две тяжелые (Н) цепи (приблизительно 50-70 кДа при полной длине) и две легкие (L) цепи (приблизительно 25 кДа при полной длине)), связанных дисульфидными мостиками. Аминоконцевая часть каждой цепи включает вариабельный домен из приблизительно 100-110 или более аминокислот, которые отвечают за связывание антигена. Карбокси-концевая часть каждой цепи определяет константный участок, главным образом, отвечающий за функцию эффектора. Легкие цепи классифицируют как каппа или лямбда, и они характеризуются специфичным константным участком. Каждая легкая цепь состоит из вариабельного участка N-концевой легкой цепи (в данной заявке «VL» или «VK») и константного участка легкой цепи, состоящего из одного домена (CL или СК). Тяжелые цепи классифицируют как γ (гамма), δ (дельта), альфа (α), мю (μ) или эпсилон (ε), и они определяют изотип антитела, такой как IgG, IgM, IgA, IgD и IgE, соответственно, и несколько из них могут быть дополнительно разделены на подклассы (изотипы), такие как, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2. Каждый тип тяжелой цепи характеризуется конкретным константным участком Fc. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельного участка N-концевой тяжелой цепи (в данной заявке «VH») и константного участка CH (тяжелой цепи). Константный участок тяжелой цепи состоит из трех доменов (CH1, СН2 и СН3) для IgG, IgD и IgA и 4 доменов (CH1, СН2, СН3 и СН4) для IgM и IgE. Вариабельные домены VH и VL могут быть дополнительно разделены на участки гипервариабельности (гипервариабельные участки, CDR), чередующиеся с более консервативными каркасными участками (FR). Каждый вариабельный домен состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных в следующем порядке от N-конца к С-концу: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4.

Вариабельные участки каждой из пар легкая/тяжелая цепь образуют антиген-связывающие сайты антитела. Таким образом, интактное IgG антитело имеет два сайта связывания. За исключением бифункциональных или биспецифических антител два сайта связывания являются одинаковыми. Как используется в данной заявке, «антигенсвязывающая часть», или «антигенсвязывающий участок», или «антигенсвязывающий домен» относятся, взаимозаменяемо, к такой части молекулы антитела, которая содержит аминокислотные остатки, взаимодействующие с антигеном и обуславливающие специфичность и аффинность антитела по отношению к антигену. Такая часть антитела включает «каркасные» аминокислотные остатки, необходимые для поддержания надлежащей конформации антиген-связывающих остатков.

«Фрагмент антитела» может представлять собой фрагмент антитела или фрагмент антитела, имеющий активность полноразмерного антитела. Указанный фрагмент антитела может представлять собой F(ab')2, F(ab)2, Fab', Fab Fv и scFv.

Термин «ингибировать» или «нейтрализовать», как используется в данной заявке, по отношению к функциональной активности антитела по изобретению, означает способность в значительной степени препятствовать, предотвращать, ограничивать, замедлять, прекращать, уменьшать или обращать, например, развитие или тяжесть того, что ингибируют, включая, но не ограничиваясь вышеприведенными, биологическую активность (например, активность IL-6R) или свойство, заболевание или состояние. Ингибирование или нейтрализация активности IL-6R в результате связывания антитела по изобретению с IL-6R составляет предпочтительно по крайней мере приблизительно 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95% или выше.

Термин «выделенный» или «изолированный» при использовании по отношению к нуклеиновой кислоте или белковому препарату (например, антителу) относится к молекуле нуклеиновой кислоты или белковой молекуле, которые идентифицируют и отделяют по крайней мере от одного контаминантного вещества, с которым она обычно связана в природном источнике. Предпочтительно «выделенное антитело» является антителом, которое по существу не содержит другие антитела, обладающие отличительной антигенной специфичностью (например, фармацевтические композиции, согласно настоящему изобретению, содержат выделенное антитело, которое специфически связывает IL-6R и по существу не содержит антитела, которые специфически связывают антигены, отличные от IL-6R).

Термин «специфическое связывание», как используется в данной заявке, относится к той ситуации, при которой один участник пары специфического связывания не связывает в значительной степени молекулы, отличные от его партнера (партнеров) по специфическому связыванию. Термин также применим, когда, например, антигенсвязывающий домен антитела по изобретению является специфическим по отношению к конкретному эпитопу, который переносится рядом антигенов, в таком случае специфическое антитело, имеющее антигенсвязывающий домен, будет способно к специфическому связыванию различных антигенов, несущих эпитоп.

«Kabat номенклатура» или «номенклатура по Kabat» применяются в данной заявке к системе нумерации аминокислотных остатков, которые являются более вариабельными (т.е. гипервариабельными), чем остальные аминокислотные остатки в вариабельных участках тяжелой и легкой цепи антитела (Kabat et al. Ann. N.Y. Acad. Sci., 190:382-93 (1971); Kabat et al. Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242 (1991)).

Термин «фармацевтическая композиция» относится к композиции и/или составу, содержащему антитело согласно изобретению в терапевтически эффективном количестве и эксцепиенты или вспомогательные вещества (носители, разбавители, наполнители, растворители и другие эксцепиенты).

Термин «буфер» или «буферный раствор» относится к водному раствору, содержащему смесь кислоты (обычно слабой кислоты, такой как, например, уксусная кислота, лимонная кислота) и ее конъюгированного основания (такой как, например, ацетатной или цитратной соли, например, ацетат натрия, цитрат натрия, а также гидраты указанных солей, например, натрия ацетат тригидрат) или альтернативно смесь основания (обычно слабого основания, например, гистидина) и его конъюгированной кислоты (например, гистидина гидрохлорида). Значение рН «буферного раствора» мало изменяется при добавлении к нему небольшого количества сильного основания или сильной кислоты, а также при разбавлении и концентрировании, благодаря «буферному эффекту», обеспечиваемому «буферным агентом».

В настоящей заявке, «буферная система» содержит один или несколько буферных агентов и/или их конъюгата(ов) с кислотой или основанием, и более подходяще содержит один или несколько буферных агентов и их конъюгата(ов) с кислотой или основанием, и наиболее подходяще содержит только один буферный агент и его кислотный/щелочной конъюгат. Если не указано иное, любые концентрации, указанные в настоящем изобретении по отношению к «буферной системе» (концентрация буфера) могут относиться к объединенной концентрации буферного(ых) агента(ов) и/или его конъюгата(ов) с кислотой или основанием. Другими словами, концентрации, указанные в настоящей заявке по отношению к «буферной системе», могут относиться к объединенной концентрации релевантных буферных видов (то есть, видов в динамическом равновесии друг с другом, например, цитрат/лимонная кислота). Суммарное значение рН композиции, содержащей релевантную буферную систему, является отображением равновесной концентрация каждого из релевантных буферных видов (то есть баланса буферного(ых) агента(ов) с его конъюгатом(ами) с кислотой или основанием).

Термин «буферный агент» относится к кислотному или щелочному компоненту (обычно слабой кислоте или слабому основанию) буфера или буферного раствора. Буферный агент помогает поддерживать значение рН данного раствора при или около заранее определенного значения, и буферные агенты обычно выбирают для дополнения заранее определенного значения. Буферный агент может представляет собой единственное соединение, которое приводит к желательному буферному эффекту, в особенности, если указанный буферный агент смешан с (и подходяще способен к протонному обмену с) подходящим количеством (в зависимости от заранее определенного желательного значения) его соответствующего «кислотного/щелочного конъюгата».

Термин «солюбилизатор» при использовании в данном тексте означает фармацевтически приемлемое неионногенное поверхностно-активное вещество. Можно использовать один солюбилизатор, а также комбинации солюбилизаторов. Примерами солюбилизаторов являются, но не ограничиваются ими, полисорбат 20 или полисорбат 80, полоксамер 184 или полоксамер 188, или PLURONIC®.

Термины «осмотический агент» или «агент, регулирующий тоничность», а также осмолитик в том виде, как они здесь использованы, относятся к эксципиенту, который может обеспечивать требуемое осмотическое давление жидкого раствора антитела. В некоторых воплощениях агент, регулирующий тоничность, может подводить осмотическое давление жидкого препарата антитела до изотоничного так, что данный препарат антитела является физиологически совместимым с клетками ткани организма субъекта. В еще одном воплощении «агент, регулирующий тоничность», может способствовать увеличению стабильности антител. «Изотоничный» препарат представляет собой препарат, который имеет осмотическое давление, эквивалентное человеческой крови. Изотоничные препараты обычно имеют осмотическое давление от примерно 239 до 376 мОсм/кг. Термин «гипотонический» описывает препарат с осмотическим давлением, меньшим, чем осмотическое давление человеческой крови. Соответственно, термин «гипертонический» используется для описания препарата с осмотическим давлением, превышающим осмотическое давление человеческой крови. Изотоничность можно измерять с использованием, например, парового или криоскопического осмометра. Агент, регулирующий тоничность, может находиться в энантиомерной (например, L- или D-энантиомер) или рацемической форме; в форме изомеров, таких как альфа или бета, включая альфа, альфа; или бета, бета; или альфа, бета; или бета, альфа; в форме свободной кислоты или свободного основания; в форме соли; в гидратированной форме (например, моногидрат) или в безводной форме. Примерами осмотических агентов являются, но не ограничиваются ими, сахара (трегалозы дигидрат, сахароза, глюкоза), полиолы (маннитол, сорбитол), аминокислоты (пролин, аргинин, глицин), или соли (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид).

Термин «длительное хранение» или «долговременная стабильность» следует понимать, как обозначение того, что фармацевтическая композиция может храниться в течение трех месяцев или более, в течение шести месяцев или более и предпочтительно в течение одного года или более, наиболее предпочтительно, с минимальным сроком хранения в стабильном состоянии по меньшей мере два года. В общем, термины «длительное хранение» и «долговременная стабильность» дополнительно включают продолжительности хранения в стабильном состоянии, которые по меньшей мере сравнимы или лучше, чем срок хранения в стабильном состоянии, как правило, необходимый для доступных в настоящее время коммерческих составов антитела к IL-6R левилимаба без потерь в стабильности, которые могут сделать состав непригодным для определенного для него фармацевтического применения.

Термин «парентеральное введение» означает режимы введения, обычно выполняемые с помощью инъекции (инфузии), и включает, в частности, внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, внутритрахеальную, внутрикапсулярную, внутриорбитальную, внутрикардиальную, внутрикожную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, внутрисуставную, субкапсулярную, субарахноидальную, внутриспинальную, эпидуральную и надчревную инъекцию или инфузию.

Термин «лекарственное средство» или «препарат» подразумевает вещество (или смесь веществ в виде фармацевтической композиции) в виде таблеток, капсул, растворов, мазей и др. готовых форм, предназначенное для восстановления, исправления или изменения физиологических функций у человека и животных, а также для лечения и профилактики болезней, диагностики, анестезии, контрацепции, косметологии и прочего.

Термин «заболевание или нарушение, ассоциированное с IL-6R» или «заболевание или нарушение, опосредованное IL-6R» подразумевает все заболевания или нарушения, которые либо прямо, либо косвенно связаны с активацией сигнального пути IL6, включая этиологию, патогенез, прогрессирование, персистирование, или патологию заболевания или нарушения.

Термин «применение» относится к возможности применения антитела согласно изобретению или фармацевтической композиции, его содержащей, для лечения, облегчения течения заболеваний, для ускорения ремиссии, снижения частоты рецидивов заболеваний или нарушений, опосредуемых рецепторами, с которыми может связываться антитело согласно изобретению. Примерами заболеваний являются, но не ограничиваются ими, ревматоидный артрит, ювенильный хронический артрит, склеродермия, реакция "трансплантат против хозяина", отторжение трансплантата органа, острое или хроническое иммунное заболевание, связанное с трансплантацией органа, кахексия, взрослый (острый) респираторный дистресс-синдром, болезнь Стилла, системная склеродермия, синдром Шегрена, болезнь/артериит Такаясу, нарушения, связанные с цитокиновой терапией, синдром выброса цитокинов (синдром высвобождения цитокинов), иридоциклит, увеит, оптический неврит, оптический нейромиелит, ювенильный ревматоидный артрит, гигантоклеточный артериит, полиартикулярный ювенильный идиопатический артрит, системный ювенильный идиопатический артрит; рак, в частности, множественная миелома и злокачественные солидные опухоли, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак яичника.

Термин «способ лечения» относится к возможности применения антитела согласно изобретению или фармацевтической композиции, его содержащей, для лечения, облегчения течения заболеваний, для ускорения ремиссии, снижения частоты рецидивов вследствие заболеваний или нарушений, связанных с активностью IL-6R. «Лечить» или «лечение», «профилактика» заболевания, нарушения или состояния может включать предотвращение или замедление появления клинических симптомов заболевания, нарушения или состояния, развивающегося у человека, ингибирования заболевания, нарушения или состояния, то есть остановки, уменьшения или замедления развития заболевания или его рецидива (в случае поддерживающей терапии) или по меньшей мере его одного клинического или субклинического симптома, или облегчение или ослабление заболевания, то есть вызывание регресса заболевания, нарушения или состояния. Примерами заболеваний являются, но не ограничиваются ими, ревматоидный артрит, ювенильный хронический артрит, склеродермия, реакция "трансплантат против хозяина", отторжение трансплантата органа, острое или хроническое иммунное заболевание, связанное с трансплантацией органа, кахексия, взрослый (острый) респираторный дистресс-синдром, болезнь Стилла, системная склеродермия, синдром Шегрена, болезнь/артериит Такаясу, нарушения, связанные с цитокиновой терапией, синдром выброса цитокинов (синдром высвобождения цитокинов), иридоциклит, увеит, оптический неврит, оптический нейромиелит, ювенильный ревматоидный артрит, гигантоклеточный артериит, полиартикулярный ювенильный идиопатический артрит, системный ювенильный идиопатический артрит; рак, в частности, множественная миелома и злокачественные солидные опухоли, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак яичника.

Термин «водная композиция» при использовании в данном документе относится к композиции на основе воды, в качестве воды могут быть использованы: вода, вода для инъекций, физиологический раствор (0,9-1,0%-ный водный раствор хлористого натрия).

В одном варианте осуществления изобретения субъект лечения или пациент является млекопитающим, предпочтительно человеческим субъектом. Вышеупомянутый субъект может быть мужского или женского пола любого возраста.

В настоящем описании и в последующей формуле изобретения, если контекстом не предусмотрено иное, слова «иметь», «включать» и «содержать» или их вариации, такие как «имеет», «имеющий», «включает», «включающий», «содержит» или «содержащий», следует понимать, как включение указанного целого или группы целых, но не исключение любого другого целого или группы целых.

Сущность изобретения

В настоящем изобретении раскрыты стабильные водные фармацевтические композиции антитела к IL-6R левилимаба, которые могут быть использованы в качестве лекарственного средства для лечения IL-6R- ассоциированных заболеваний.

Антитело к IL-6R левилимаб, представляющее собой моноклональное антитело изотипа IgG1, включает тяжелую цепь (HC) с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 5, где вариабельный домен тяжелой цепи (SEQ ID NO: 4) содержит HCDR1 (SEQ ID NO: 1), HCDR2 (SEQ ID NO: 2) и HCDR3 (SEQ ID NO: 3); и легкую цепь (LC) с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 10, где вариабельный домен легкой цепи (SEQ ID NO: 9) содержит LCDR1 (SEQ ID NO: 6), LCDR2 (SEQ ID NO: 7) и LCDR3 (SEQ ID NO: 8).

Левилимаб – рекомбинантное моноклональное антитело к рецептору интерлейкина-6. Левилимаб связывается и блокирует как растворимые (sIL-6R), так и мембранные рецепторы IL-6 (mIL-6R). Блокада обеих форм рецептора позволяет предотвратить развитие IL-6-ассоциированного провоспалительного каскада, в том числе препятствует активации антигенпрезентирующих клеток, В- и Т-лимфоцитов, моноцитов и макрофагов, эндотелиальных клеток и фибробластов, и избыточной продукции других провоспалительных цитокинов. IL-6 участвует в активации и поддержании местных воспалительных реакций (образование паннуса в синовии, стимуляция остеокластогенеза – эрозии хрящевой ткани, остеопороз), кроме того, IL-6 непосредственно индуцируюет синтез острофазовых белков в гепатоцитах: СРБ, фибриногена, сывороточного амилоидного белка А – SAA, гипсидина, лептина.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции левилимаба, содержащей:

(a) 5-220 мг/мл левилимаба;

(b) 0,4-1,8 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(c) 20-50 мг/мл полиола и 5-10 мг/мл глицина

или

10-32 мг/мл аргинина гидрохлорида; и

(d) уксусную кислоту до pH 4,5-6,5.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полиол выбран из маннитола или сорбитола.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции левилимаба, содержащей:

(i) 5-220 мг/мл левилимаба;

(ii) 0,4-1,8 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(iii) 20-50 мг/мл полиола;

(iv) 5-10 мг/мл глицина; и

(v) уксусную кислоту до pH 4,5-6,5.

Концентрация левилимаба, содержащегося в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, может варьироваться в зависимости от желаемых свойств композиций, а также от конкретных условий, способов и целей использования фармацевтических композиций.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 5-40 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 5 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 5-15 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 10 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 15-25 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 20 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 100-180 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 140-220 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 180-220 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 160-200 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 180 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный левилимаб находится в концентрации 200 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетата тригидрат находится в концентрации 0,4-1,0 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетата тригидрат находится в концентрации 0,4-0,5 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетата тригидрат находится в концентрации 0,436 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полиол находится в концентрации 20-26 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полиол находится в концентрации 22-24 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полиол находится в концентрации 23 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полиол может быть выбран из сахароспирта, такого как маннитол, сорбитол, глицерин или ксилит или их комбинаций.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный маннитол находится в концентрации 20-26 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный маннитол находится в концентрации 22-24 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный маннитол находится в концентрации 23 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный сорбитол находится в концентрации 20-26 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный сорбитол находится в концентрации 22-24 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный сорбитол находится в концентрации 23 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная комбинация маннитола и сорбитола находится в концентрации 20-26 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная комбинация маннитола и сорбитола находится в концентрации 22-24 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная комбинация маннитола и сорбитола находится в концентрации 23 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный глицин находится в концентрации 7-8 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный глицин находится в концентрации 7,5 мг/мл.

Необходимое значение pH фармацевтической композиции по настоящему изобретению может достигаться путем добавления уксусной кислоты.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота добавлена до pH 4,5-5,5.

В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота добавлена до pH 4,5 5,0, 5,5, 6,0, или 6,5.

В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, содержащая:

(i) 20 мг/мл левилимаба;

(ii) 0,436 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(iii)23 мг/мл полиола, выбранного из маннитола или сорбитола;

(iv) 7,5 мг/мл глицина; и

(v) уксусную кислоту до pH 5,0.

В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, содержащая:

(i) 5 мг/мл левилимаба;

(ii) 0,436 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(iii) 23 мг/мл полиола, выбранного из маннитола или сорбитола;

(iv) 7,5 мг/мл глицина; и

(v) уксусную кислоту до pH 5,0.

В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, содержащая:

(i) 10 мг/мл левилимаба;

(ii) 0,436 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(iii) 23 мг/мл полиола, выбранного из маннитола или сорбитола;

(iv) 7,5 мг/мл глицина; и

(v) уксусную кислоту до pH 5,0.

В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, содержащая:

(i) 100 мг/мл левилимаба;

(ii) 0,436 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(iii) 23 мг/мл полиола, выбранного из маннитола или сорбитола;

(iv) 7,5 мг/мл глицина; и

(v) уксусную кислоту до pH 5,0.

В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, содержащая:

(i) 180 мг/мл левилимаба;

(ii) 0,436 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(iii) 23 мг/мл маннитола или сорбитола;

(iv) 7,5 мг/мл глицина; и

(v) уксусную кислоту до pH 5,0.

В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, содержащая:

(i) 200 мг/мл левилимаба;

(ii) 0,436 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(iii) 23 мг/мл полиола, выбранного из маннитола или сорбитола;

(iv) 7,5 мг/мл глицина; и

(v) уксусную кислоту до pH 5,0.

В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, содержащая:

(i) 220 мг/мл левилимаба;

(ii) 0,436 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(iii) 23 мг/мл полиола, выбранного из маннитола или сорбитола;

(iv) 7,5 мг/мл глицина; и

уксусную кислоту до pH 5,0.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции левилимаба, содержащей:

(i) 5-220 мг/мл левилимаба;

(ii) 0,4-1,8 мг/мл натрия ацетата тригидрата;

(iii) 10-32 мг/мл аргинина гидрохлорида; и

(iv) уксусную кислоту до pH 4,5-6,5.