РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Настоящая заявка заявляет приоритет по предварительной заявке на патент США № 62/837793, поданной 24 апреля 2019 г.; и заявке на европейский патент № 20305193.3, поданной 27 февраля 2020 г., каждая из которых включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к области лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрациями определенных биомаркеров в сыворотке крови посредством введения субъекту антитела к рецептору IL6.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

У пациентов с ревматоидным артритом (RA) в синовиальных соединениях развивается повреждение костей и хрящей в результате хронического воспаления, которое опосредуется провоспалительными цитокинами, такими как интерлейкин-6 (IL-6) и фактор некроза опухоли альфа (TNF-α). При RA повышенные концентрации циркулирующих цитокинов вызывают разрушение костей и хрящей посредством активации сигнальных каскадов, которые приводят к стимуляции остеокластов с помощью факторов резорбции костей (например, лиганда рецептора-активатора ядерного фактора κВ [RANKL]) и белков, разрушающих суставы (например, матриксных металлопротеиназ). Первопричинное повреждение суставов приводит к длительным ухудшениям физических функций.

IL-6 представляет собой плейотропный цитокин, который играет роль в воспалительных, метаболических, нейронных и регенеративных процессах. IL-6 действует посредством двух различных механизмов, которые называются классической (цис)-передачей и транс-передачей сигнала, что расширяет диапазон его действий и способствует системным проявлениям и сопутствующим заболеваниям, обычно ассоциированным с RA, в том числе ответу острой фазы, остеопорозу, утомляемости, депрессии, анемии и сердечно-сосудистому (CV) заболеванию. Пациенты с RA характеризуются повышенным риском CV-событий, в том числе инфаркта миокарда и инсульта, по сравнению со здоровыми индивидуумами. Следует понимать, что провоспалительные цитокины способствуют эндотелиальной дисфункции и структурным аномалиям сосудов и индуцируют другие факторы CV-риска, в том числе изменения уровней липидов, инсулинорезистентность и окислительный стресс. Кроме того, у пациентов с RA наблюдались значительно повышенные уровни липопротеина (a) (Lp[a]) - биомаркера CV-риска, который вовлечен как в воспаление, так и в тромбоз - по сравнению со здоровыми пациентами из контрольной группы.

Сарилумаб представляет собой моноклональное антитело человека, которое связывает мембраносвязанную и растворимую α-субъединицу рецептора IL-6 с подавлением передачи сигнала, опосредованной IL-6. Он одобрен для лечения взрослых людей с активным RA от умеренного до тяжелого в режиме монотерапии и в комбинации с традиционными синтетическими противоревматическими лекарственными средствами, модифицирующими течение заболевания (csDMARD). Необходимо определить популяции пациентов, которые демонстрируют лучшую эффективность сарилумаба при лечении РА, чтобы лекарственное средство им вводили раньше.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении предусмотрены, помимо прочего, способы идентификации субъектов с предрасположенностью к ответу на лечение с помощью антитела к рецептору интерлейкина-6 (IL-6R), такого как антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2 (например, сарилумаб). В некоторых вариантах осуществления способы позволяют идентифицировать субъекта как имеющего более высокую предрасположенность к ответу на антитело к IL-6R (такое как сарилумаб), чем на ингибитор TNF-α (такой как адалимумаб). В настоящем изобретении дополнительно предусмотрены способы лечения RA у субъектов, у которых имеются уровни определенных биомаркеров, которые позволяют идентифицировать субъекта как имеющего предрасположенность к ответу на введение антитела к IL-6R.

В одном аспекте в данном документе предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией С-реактивного белка (CRP) в сыворотке крови, составляющей более 27,9 мг/л, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация CRP в сыворотке крови равняется 37,6 мг/л или больше. В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация CRP в сыворотке крови равняется 65,1 мг/л или больше.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией С-реактивного белка (CRP) в сыворотке крови, составляющей более 27,9 мг/л, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления концентрация CRP в сыворотке крови у субъекта составляет менее 65,1 мг/л. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается ACR20 спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается балл DAS28-CRP, составляющий менее 3,2, спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается улучшение согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36 или VAS для оценки утренней скованности спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией С-реактивного белка (CRP) в сыворотке крови, составляющей более 6,9 мг/л и менее 13,1 мг/л, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией С-реактивного белка (CRP) в сыворотке крови, составляющей более 6,9 мг/л и менее 13,1 мг/л, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается улучшение согласно общей оценке пациентом по VAS, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36, домену RE в SF-36, VAS для оценки утренней скованности или баллу RAID спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией сывороточного амилоида А (SAA) в сыворотке крови, составляющей более 105,2 нг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация SAA в сыворотке крови составляет менее 256,0 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация SAA в сыворотке крови равняется 174,9 нг/мл или больше. В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация SAA в сыворотке крови равняется 256,0 нг/мл или больше.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией сывороточного амилоида A (SAA) в сыворотке крови, составляющей более 105,2 нг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно. В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация SAA в сыворотке крови составляет менее 256,0 нг/мл.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается ACR20, ACR50 или ACR70 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается балл DAS28-CRP, составляющий менее 3,2, спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается улучшение согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36, домену PF в SF-36, VAS для оценки утренней скованности или баллу RAID спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией SAA в сыворотке крови, составляющей более 11,83 нг/мл и менее 30,08 нг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией сывороточного амилоида А (SAA) в сыворотке крови, составляющей более 11,83 нг/мл и менее 30,08 нг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается улучшение согласно HAQ-DI спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией матриксной металлопротеиназы-3 (MMP-3) в сыворотке крови, составляющей более 77,0 нг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация MMP-3 в сыворотке крови равняется 99,9 нг/мл или больше. В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация MMP-3 в сыворотке крови равняется 154,3 нг/мл или больше.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией матриксной металлопротеиназы-3 (MMP-3) в сыворотке крови, составляющей более 77,0 нг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления концентрация MMP-3 в сыворотке крови у субъекта составляет менее 154,3 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается ACR20 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается балл DAS28-CRP, составляющий менее 3,2, спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается улучшение согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36, домену PF в SF-36, VAS для оценки утренней скованности или баллу RAID спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией MMP-3 в сыворотке крови, составляющей более 35,5 нг/мл и менее 54,1 нг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией матриксной металлопротеиназы-3 (MMP-3) в сыворотке крови, составляющей более 35,5 нг/мл и менее 54,1 нг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается улучшение согласно VAS для оценки боли спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией хемокинового (содержащего мотив C-X-C) лиганда 13 (CXCL13) в сыворотке крови, составляющей более 180,8 пг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация CXCL13 в сыворотке крови равняется 236,8 пг/мл или больше. В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация CXCL13 в сыворотке крови равняется 323,9 пг/мл или больше.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией хемокинового (содержащего мотив C-X-C) лиганда 13 (CXCL13) в сыворотке крови, составляющей более 180,8 пг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления концентрация CXCL3 в сыворотке крови у субъекта составляет менее 323,9 пг/мл. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается ACR20 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается улучшение согласно HAQ-DI, баллу PCS в SF-36 или домену PF в SF-36 спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией CXCL13 в сыворотке крови, составляющей более 98,2 пг/мл и менее 130,6 пг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией хемокинового (содержащего мотив C-X-C) лиганда 13 (CXCL13) в сыворотке крови, составляющей более 98,2 пг/мл и менее 130,6 пг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается улучшение согласно HAQ-DI спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией гепсидина в сыворотке крови, составляющей более 43,9 нг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация гепсидина в сыворотке крови равняется 62,4 нг/мл или больше. В некоторых вариантах осуществления у субъекта концентрация гепсидина в сыворотке крови равняется 77 нг/мл или больше.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией гепсидина в сыворотке крови, составляющей более 62,4 нг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления концентрация гепсидина в сыворотке крови у субъекта составляет менее 77 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается ACR20 спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией гепсидина в сыворотке крови, составляющей более 17 нг/мл и менее 28,9 нг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией гепсидина в сыворотке крови, составляющей более 17 нг/мл и менее 28,9 нг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается улучшение согласно HAQ-DI спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией CXCL13 в сыворотке крови, составляющей менее 72,0 пг/мл, и концентрацией растворимой внутриклеточной молекулы адгезии 1 (sICAM-1) в сыворотке крови, составляющей менее 212,1 нг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией хемокина CXCL13 в сыворотке крови, составляющей менее 72,0 пг/мл, и концентрацией растворимой внутриклеточной молекулы адгезии 1 (sICAM-1) в сыворотке крови, составляющей менее 212,1 нг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления концентрация CXCL3 в сыворотке крови у субъекта составляет более 52,4 пг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация sICAM1 в сыворотке крови у субъекта составляет более 179,7 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается ACR50 спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией CXCL13 в сыворотке крови, составляющей более 180,8 пг/мл, и концентрацией sICAM-1 в сыворотке крови, составляющей более 313,7 нг/мл, включающий отбор субъекта и введение субъекту антитела к IL-6R.

В некоторых вариантах осуществления антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления способ лечения ревматоидного артрита у субъекта с концентрацией хемокина CXCL13 в сыворотке крови, составляющей более 180,8 пг/мл, и концентрацией sICAM-1 в сыворотке крови, составляющей более 313,7 нг/мл, включает отбор субъекта и введение субъекту от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

В некоторых вариантах осуществления концентрация CXCL3 в сыворотке крови у субъекта составляет менее 323,9 пг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация sICAM-1 в сыворотке крови у субъекта составляет менее 380,0 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления у субъекта достигается ACR50 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления любого из способов, предусмотренных выше, у субъекта имеется ревматоидный артрит от умеренного до тяжелого. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят с помощью предварительно заполненного шприца или с помощью автоинъектора.

В некоторых вариантах осуществления антитело вводят в виде водного забуференного раствора с pH приблизительно 6,0, содержащего приблизительно 21 мМ гистидина, приблизительно 45 мМ аргинина, приблизительно 0,2% (вес/об.) полисорбата 20 и приблизительно 5% (вес/об.) сахарозы. В некоторых вариантах осуществления раствор содержит по меньшей мере приблизительно 130 мг/мл антитела. В некоторых вариантах осуществления раствор содержит приблизительно 131,6 мг/мл антитела. В некоторых вариантах осуществления раствор содержит приблизительно 175 мг/мл антитела. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления субъект характеризуется непереносимостью одного или нескольких DMARD. В некоторых вариантах осуществления DMARD представляет собой метотрексат. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает введение субъекту эффективного количества метотрексата. В некоторых вариантах осуществления вводят от 6 до 25 мг метотрексата в неделю. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется ревматоидный артрит от умеренного до тяжелого и наблюдался недостаточный ответ на одно или несколько DMARD. В некоторых вариантах осуществления DMARD представляет собой метотрексат. В некоторых вариантах осуществления субъекту подкожно вводят 150 мг антитела один раз в две недели. В некоторых вариантах осуществления субъекту подкожно вводят 200 мг антитела один раз в две недели.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации CRP в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация CRP составляет более 27,9 мг/л, 37,6 мг/л или 65,1 мг/л, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления у субъекта в образце сыворотки крови от субъекта концентрация CRP составляет менее 65,1 мг/л. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению ACR20 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению балла DAS28-CRP, составляющего менее 3,2, спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению улучшения согласно общей оценке пациентом по VAS, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36, домену RE в SF-36, VAS для оценки утренней скованности или баллу RAID спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации CRP в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация CRP составляет более 6,9 мг/л и менее 13,1 мг/л, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению улучшения согласно общей оценке пациентом по VAS, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36, домену RE в SF-36, VAS для оценки утренней скованности или баллу RAID спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации SAA в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация SAA составляет более 105,2 нг/мл, 174,9 нг/мл или 256 нг/мл и менее 256,0 нг/мл, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению ACR20, ACR50 или ACR70 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению балла DAS28-CRP, составляющего менее 3,2, спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению улучшения согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36, домену PF в SF-36, VAS для оценки утренней скованности или баллу RAID спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации SAA в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация SAA составляет более 11,83 нг/мл и менее 30,08 нг/мл, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению улучшения согласно HAQ-DI спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации MMP-3 в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация MMP-3 составляет более 77,0 нг/мл, 99,9 нг/мл или 154,3 нг/мл, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления у субъекта в образце сыворотки крови от субъекта концентрация MMP-3 составляет менее 154,3 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению ACR20 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению балла DAS28-CRP, составляющего менее 3,2, спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению улучшения согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36, домену PF в SF-36, VAS для оценки утренней скованности или баллу RAID спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации MMP-3 в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация MMP-3 составляет более 35,5 нг/мл и менее 54,1 нг/мл, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению улучшения согласно VAS для оценки боли спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации CXCL13 в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация CXCL13 составляет более 98,2 пг/мл, 116,4 пг/мл, 130,6 пг/мл, 180,8 пг/мл, 236,8 пг/мл или 323,9 пг/мл, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления у субъекта в образце сыворотки крови от субъекта концентрация CXCL3 составляет менее 323,9 пг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению ACR20 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению улучшения согласно HAQ-DI, баллу PCS в SF-36 или домену PF в SF-36 спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации гепсидина в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация гепсидина составляет более 17 нг/мл, 23 нг/мл, 28,9 нг/мл, 43,9 нг/мл, 62,4 нг/мл или 77 нг/мл, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению ACR20 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации CXCL13 в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация CXCL13 составляет менее 72,0 пг/мл, и концентрация sICAM-1 составляет менее 212,1 нг/мл, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления у субъекта в образце сыворотки крови от субъекта концентрация CXCL3 составляет более 52,4 пг/мл. В некоторых вариантах осуществления у субъекта в образце сыворотки крови от субъекта концентрация sICAM1 составляет более 179,7 пг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению ACR50 спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В настоящем изобретении дополнительно предусмотрен способ определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела, включающий измерение концентрации CXCL13 в образце сыворотки крови от субъекта, где в случае, если в образце сыворотки крови концентрация CXCL13 составляет более 180,8 пг/мл, и концентрация sICAM-1 составляет более 313,7 нг/мл, субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению RA с помощью антитела, и где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к эффективному лечению ревматоидного артрита с помощью антитела к IL-6R (такого как сарилумаб) по сравнению с ингибитором TNF-α (таким как адалимумаб).

В некоторых вариантах осуществления у субъекта в образце сыворотки крови от субъекта концентрация CXCL3 составляет менее 323,9 пг/мл. В некоторых вариантах осуществления у субъекта в образце сыворотки крови от субъекта концентрация sICAM-1 составляет менее 380,0 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет повышенную предрасположенность к достижению ACR50 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В некоторых вариантах осуществления способов определения того, имеет ли субъект с ревматоидным артритом повышенную предрасположенность к эффективному лечению, описанных выше, у субъекта имеется ревматоидный артрит от умеренного до тяжелого. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой сарилумаб. В некоторых вариантах осуществления субъект характеризуется непереносимостью одного или нескольких DMARD. В некоторых вариантах осуществления DMARD представляет собой метотрексат. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется ревматоидный артрит от умеренного до тяжелого и наблюдался недостаточный ответ на одно или несколько DMARD. В некоторых вариантах осуществления DMARD представляет собой метотрексат.

В некоторых вариантах осуществления образец сыворотки крови получен из периферической крови субъекта.

В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется по меньшей мере 5, 6, 7, 8, 9 или 10 болезненных суставов. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется по меньшей мере 10, 15, 20, 25 или 30 болезненных суставов. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется 5-10, 10-15, 15-20 или 10-20 болезненных суставов. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется по меньшей мере 5, 6, 7, 8, 9 или 10 припухших суставов. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется по меньшей мере 10, 15, 20, 25 или 30 припухших суставов. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется 5-10, 10-15, 15-20 или 10-20 припухших суставов. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется эрозия суставов в по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 суставах. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется эрозия суставов в 1-5, 5-10, 1-10, 10-15 или 1-15 суставах. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет индекс активности заболевания по 28 суставам (DAS28), составляющий 5, 6, 7, 8, 9 или 10. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет балл DAS28, составляющий по меньшей мере 5. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет балл DAS28, составляющий по меньшей мере 6. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет балл DAS28, составляющий по меньшей мере 7. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет балл DAS28, составляющий по меньшей мере 8. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет балл DAS28, составляющий по меньшей мере 9. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет балл DAS28, составляющий по меньшей мере 10. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет балл DAS28, составляющий 5-10.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На фиг. 1 изображена корреляция между биомаркерами на исходном уровне и гематологическими параметрами. CRP: С-реактивный белок; CXCL13: хемокиновый (содержащий мотив C-X-C) лиганд 13; Lp(a): липопротеин (а); MMP-3: матриксная металлопротеиназа-3; OPG: остеопротегерин; P1NP: N-концевой пропептид проколлагена 1 типа; RANKL: лиганд рецептора-активатора ядерного фактора κB; SAA: сывороточный амилоид А; sICAM-1: растворимая внутриклеточная молекула адгезии 1; TIBC: общая железосвязывающая способность.

На фиг. 2 изображены медианные процентные изменения относительно исходного уровня для биомаркеров до недели 24. Показаны медианные процентные изменения относительно исходного уровня для биомаркеров (A и B) ответа острой фазы (CRP и SAA) и (C) ремоделирования костей (P1NP). *Скорректированное P-значение < 0,05; **скорректированное P-значение < 0,01 в сравнении с адалимумабом; ***скорректированное P-значение < 0,0001 в сравнении с адалимумабом (процедура Беньямини-Хохберга). CRP: С-реактивный белок; P1NP: N-концевой пропептид проколлагена 1 типа; q2w: каждые 2 недели; SAA: сывороточный амилоид A.

На фиг. 3 изображены медианные процентные изменения относительно исходного уровня для биомаркеров до недели 24. Показаны медианные процентные изменения относительно исходного уровня для биомаркеров (A-C) ремоделирования костей (OC, общий RANKL и OPG), (D) синовиального воспаления (MMP-3). *Скорректированное P-значение < 0,05; **скорректированное P-значение < 0,01 в сравнении с адалимумабом; ***скорректированное P-значение < 0,0001 в сравнении с адалимумабом (процедура Беньямини-Хохберга). MMP-3: матриксная металлопротеиназа-3; OC: остеокальцин; OPG: остеопротегерин; q2w: каждые 2 недели; RANKL: лиганд рецептора-активатора ядерного фактора κB.

На фиг. 4 изображены медианные процентные изменения относительно исходного уровня для CXCL13 и sICAM-1 до недели 24. ***Скорректированное P-значение < 0,0001 в сравнении с адалимумабом (процедура Беньямини-Хохберга). CXCL13: хемокиновый (содержащий мотив C-X-C) лиганд 13; Q: квартиль; q2w: каждые 2 недели; sICAM-1: растворимая внутриклеточная молекула адгезии 1.

На фиг. 5 изображены медианные процентные изменения относительно исходного уровня для биомаркеров анемии хронических заболеваний через 2 недели после лечения. Показаны медианные процентные изменения относительно исходного уровня для (A) гепсидина, (B) железа, (C) ферритина и (D) TIBC в неделю 2 после лечения. ***Скорректированное P-значение < 0,0001 в сравнении с адалимумабом (процедура Беньямини-Хохберга). **Скорректированное P-значение < 0,01 в сравнении с адалимумабом (процедура Беньямини-Хохберга). Q: квартиль; q2w: каждые 2 недели; TIBC: общая железосвязывающая способность.

На фиг. 6 изображены (A) медианные процентные изменения относительно исходного уровня для атеротромбоза (Lp[a]) до недели 24 и (B) доли пациентов, у которых значения уровней биомаркеров вернулись в диапазоны нормальных референсных значений в неделю 24. На фиг. 6A показаны *скорректированное P-значение < 0,05; **скорректированное P-значение < 0,01 в сравнении с адалимумабом; ***скорректированное P-значение < 0,0001 в сравнении с адалимумабом (процедура Беньямини-Хохберга). На фиг. 6В показаны доли пациентов с концентрациями биомаркеров в сыворотке крови, превышающими диапазон референсных значений на исходном уровне, которые нормализовались до величин в пределах диапазона референсных значений в неделю 24. ***Нескорректированное P-значение < 0,0001 в сравнении с адалимумабом (критерий χ2). CRP: С-реактивный белок; Lp(a): липопротеин (а); OC: остеокальцин; OPG: остеопротегерин; P1NP: N-концевой пропептид проколлагена 1 типа; q2w: каждые 2 недели; RANKL: лиганд рецептора-активатора ядерного фактора κB; SAA: сывороточный амилоид А.

На фиг. 7 изображены (A) отношения шансов для достижения конечных точек эффективности в неделю 24 по терцилям биомаркеров на исходном уровне и (B) изменения относительно исходного уровня для исходов, сообщаемых пациентами (PRO), в неделю 24 по терцилям биомаркеров на исходном уровне. На фиг. 7A показаны отношения шансов (сарилумаб в сравнении с адалимумабом) для достижения ответов в виде ACR20, ACR50 и DAS28-CRP < 3,2 в неделю 24 по терцилям биомаркеров на исходном уровне. *Номинальное значение для взаимодействия уровень биомаркера-лечение в сравнении с нижним терцилем. Нижние, средние и верхние подгруппы выделены на основании терцильных значений биомаркеров в группах лечения в целом (диапазоны терцилей см. в таблице 1). ACR20/50: улучшение на 20%/50% согласно критериям Американской коллегии ревматологов; CI: доверительный интервал; DAS28-CRP: индекс активности заболевания (по 28 суставам) с использованием уровня С-реактивного белка; MMP-3: матриксная металлопротеиназа-3; NS: незначимо при уровне 5%; SAA: сывороточный амилоид А. На фиг. 7B показаны различия определенных методом LS средних значений изменений относительно исходного уровня между сарилумабом и адалимумабом в неделю 24 по терцилям биомаркеров на исходном уровне согласно HAQ-DI (вверху) и VAS для оценки боли (внизу). *Номинальное значение для взаимодействия уровень биомаркера-лечение в сравнении с нижним терцилем. Нижние, средние и верхние подгруппы выделены на основании терцильных значений биомаркеров в группах лечения в целом (диапазоны терцилей см. в таблице 1). CI: доверительный интервал; CXCL13: хемокиновый (содержащий мотив C-X-C) лиганд 13; HAQ-DI: индекс нарушения жизнедеятельности согласно опроснику для оценки состояния здоровья; LS: метод наименьших квадратов; MMP-3: матриксная металлопротеиназа-3; NS: незначимо при уровне 5%; P1NP: N-концевой пропептид проколлагена 1 типа; SAA: сывороточный амилоид А; VAS: визуальная аналоговая шкала.

На фиг. 8 изображены ответы в виде ACR50 в неделю 24 и соответствующие OR с различными комбинациями CXCL13 и sICAM-1. *Номинальное P-значение < 0,05. OR представлены с 95% CI. ACR50: улучшение на 50% согласно критериям Американской коллегии ревматологов; CI: доверительный интервал; CXCL13: хемокиновый (содержащий мотив C-X-C) лиганд 13; OR: отношение шансов; q2w: каждые 2 недели; sICAM-1: растворимая внутриклеточная молекула адгезии 1.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении представлены свидетельства того, что некоторые биомаркеры, в том числе MMP-3, SAA, гепсидин, CXCL13, sICAM-1 и CRP, были ассоциированы с клинической эффективностью и индивидуальным прогнозируемым ответом на лечение с помощью сарилумаба. Например, у пациентов с наиболее высокими концентрациями SAA на исходном уровне, получавших сарилумаб, с большей вероятностью достигались ответы в виде ACR20/50/70 или DAS28-CRP < 3,2, чем в случае с адалимумабом, по сравнению с пациентами в нижнем терциле: ACR20 (OR [95% CI] 5,5 [2,1, 14,5]); ACR50 (5,4 [2,2, 13,2]); ACR70 (5,7 [1,8, 18,4]); DAS28-CRP < 3,2 (6,1 [2,3, 15,7]). SAA неизменно был прогностическим фактором по сравнению с высокими уровнями MMP-3 и CRP, которые были прогностическими факторами только для ответов в виде ACR20 и DAS28-CRP < 3,2 (таблица 5). Исходные уровни биомаркеров, ассоциированных с ремоделированием костей, синовиальными инфильтратами лимфоидных и миелоидных клеток и анемией воспаления, не были прогностическими факторами для эффективности в неделю 24, за исключением гепсидина и CXCL13, которые были ассоциированы с ответом в виде ACR20.

При анализе фармакодинамических эффектов лечения в отношении циркулирующих биомаркеров было обнаружено, что при лечении с помощью сарилумаба снижаются уровни биомаркеров ответа острой фазы, резорбции костей, синовиального воспаления и CV-риска по сравнению с адалимумабом. Эти эффекты обычно наблюдались рано и сохранялись до недели 24. Это было особенно очевидным в случае с CRP и согласуется с предыдущими наблюдениями. Кроме того, большая доля пациентов, получавших лечение с помощью сарилумаба в сравнении с адалимумабом в режиме монотерапии, продемонстрировала нормализацию сывороточных биомаркеров в неделю 24, которая была наиболее значительной для биомаркеров ответа острой фазы (CRP и SAA).

Как для SAA, так и для CRP, как представлено в данном документе, наблюдалась сильная корреляция с DAS28-CRP на исходном уровне (номинальное P-значение < 0,0001). Однако между биомаркерами на исходном уровне и PRO корреляция не наблюдалась. Снижение уровней некоторых биомаркеров было ассоциировано с клинической эффективностью в неделю 24 у пациентов, получавших лечение с помощью адалимумаба; однако эти ассоциации не наблюдались в группе сарилумаба. Этот результат позволяет предположить, что блокада рецептора IL-6 может оказывать непосредственный эффект в отношении выработки этих биомаркеров независимо от ее эффектов в отношении активности заболевания, в отличие от ингибиторов TNF.

Высокие уровни CRP, SAA, MMP-3, CXCL13 и sICAM-1 позволяли прогнозировать ответы в виде ACR20 на сарилумаб. Эти маркеры были ассоциированы с изменениями некоторых исходов, сообщаемых пациентами (PRO). Высокие исходные уровни SAA и MMP-3 также были ассоциированы с улучшениями некоторых PRO, в том числе согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллам PCS и MCS в SF-36, VAS для оценки утренней скованности и баллу RAID.

С-реактивный белок (CRP) (идентификационный номер в GenBank: NP_001315986.1)

Белок, кодируемый этим геном, принадлежит к семейству пентаксинов. Он вовлечен в несколько функций, связанных с иммунной защитой организма-хозяина, исходя из своей способности распознавать чужеродные патогены и поврежденные клетки организма-хозяина и инициировать их устранение путем взаимодействия с гуморальными и клеточными эффекторными системами в крови. Следовательно, уровень этого белка в плазме крови значительно увеличивается в ходе ответа острой фазы на повреждение ткани, инфекцию или другие воспалительные стимулы.

В определенных вариантах осуществления концентрация CRP в сыворотке крови обычно находится в диапазоне от 1,0 до 3,4 мг/л у пациентов в нижнем терциле, от 6,9 до 13,1 мг/л у пациентов в среднем терциле и от 27,9 до 65,1 мг/л у пациентов в верхнем терциле. В определенных вариантах осуществления у пациентов, у которых концентрации CRP в сыворотке крови находятся в верхнем терциле, может достигаться ACR20, балл DAS28-CRP, составляющий менее 3,2, или улучшение согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36 или VAS для оценки утренней скованности спустя 24 недели лечения с помощью антитела к рецептору IL-6. В определенных вариантах осуществления у пациентов, у которых концентрация CRP в сыворотке крови находится в среднем терциле, может достигаться улучшение согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36, домену PF в SF-36, VAS для оценки утренней скованности или баллу RAID спустя 24 недели лечения с помощью антитела к рецептору IL-6.

В определенных вариантах осуществления последовательности нуклеиновой кислоты и аминокислотные последовательности CRP представлены ниже.

Последовательность кДНК варианта 2 транскрипта CRP (идентификационный номер в GenBank: NP_001315986.1):

ATGGAGAAGCTGTTGTGTTTCTTGGTCTTGACCAGCCTCTCTCATGCTTTTGGCCAGACAGACATGTCGAGGAAGGCTTTTGTGTTTCCCAAAGAGTCGGATACTTCCTATGTATCCCTCAAAGCACCGTTAACGAAGCCTCTCAAAGCCTTCACTGTGTGCCTCCACTTCTACACGGAACTGTCCTCGACCCGTGGGTACAGTATTTTCTCGTATGCCACCAAGAGACAAGACAATGAGATTCTCATATTTTGGTCTAAGGATATAGGATACAGTTTTACAGTGGGTGGGTCTGAAATATTATTCGAGGTTCCTGAAGTCACAGTAGCTCCAGTACACATTTGTACAAGCTGGGAGTCCGCCTCAGGGATCGTGGAGTTCTGGGTAGATGGGAAGCCCAGGGTGAGGAAGAGTCTGAAGAAGGGATACACTGTGGGGGCAGAAGCAAGCATCATCTTGGGGCAGGAGCAGGATTCCTTCGGTGGGAACTTTGAAGGAAGCCAGTCCCTGGTGGGAGACATTGGAAATGTGAACATGTGGGACTTTGTGCTGTCACCAGATGAGATTAACACCATCTATCTTGGCGGGCCCTTCAGTCCTAATGTCCTGAACTGGCGGGCACTGAAGTATGAAGTGCAAGGCGAAGTGTTCACCAAACCCCAGCTGTGGCCCTGA (SEQ ID NO: 11).

Примечание: в варианте 2 транскрипта CRP сохранен интрон в 3’-UTR по сравнению с вариантом 1. Оба из вариантов 1 и 2 кодируют одну и ту же изоформу.

Пептидная последовательность CRP:

MEKLLCFLVLTSLSHAFGQTDMSRKAFVFPKESDTSYVSLKAPLTKPLKAFTVCLHFYTELSSTRGYSIFSYATKRQDNEILIFWSKDIGYSFTVGGSEILFEVPEVTVAPVHICTSWESASGIVEFWVDGKPRVRKSLKKGYTVGAEASIILGQEQDSFGGNFEGSQSLVGDIGNVNMWDFVLSPDEINTIYLGGPFSPNVLNWRALKYEVQGEVFTKPQLWP (SEQ ID NO: 12).

Последовательность геномной ДНК CRP (идентификационный номер в GenBank: NG_013007.1):

GACTGGATTCAGAGACTCAAACAATGTTATTGAGGCATGGTCTATCTCTCAGCTCTACTCGTGAGTCAAGGATGGTGTATTAGTTGGTTTTCACACTGCTGTAAAGAACTACCTGAGTATGGGTAATTTATAAACAAAAGAAATTTTAAATGAACTTACAGTTCCACATGTTTGGGGAGGACTCATGAAACTTACAATCATGGTGGAAGGTGAAGGGGAAGCAGGCATTTTCTTCACAAGGCAGCAGGAGAGAGACAGTGTGAGTGGGGGACTGCCAAGCACTTTTATTTAAATCATCAGACCTAGTGAGAACTCATTATCATGAGCACAGCATGGGCAAAACTACCTCCACGATCCAATCTTCTCCCACCATGTCCCTCCCTCAACTCATGGGGATTACAATTTGAGATGACATTTGGGTGGGAACACAGAACCAAACCATATCATTCCACCTCTGGCTCCTCCAAAATATCATGTTCTTTTCACATTTCAAAACCAATCATACCTTCCCAACAGTCACCCAAACTTAACTCATTTCAGCATTAACTCAAAAGTCCAAGTCTAAAGTTCCATCTGAGAAAAGGCAAGTCACTTCTGCCTATTAGCCTAGTAAAATAAAAAACAAGTTAGTTACTTCCAAGATACAGTGGGGGTATAGGCATTGGGTAAATGGTCCTGTTTGAAATGGGAGAAATTGGCCAAAACAAAGGGGCCACAGGCCCCATGTAAATCCAAAATCTGGCAGGACACTCATGAAATCTTAAAGCTCCAAAATAATCTCCTTTGATTCTTTGTCTCACATCCAGGGCATGCTGATGCAAGCGGTAGGCTTCCATGGCCTTGGGTAGCTCCATACTTGTGGCTCTTCAGGGTACAGCCCCTGTGGCTGCTTTCACAGGCTGGCATTGAACACTTGCAAGCTTTTCTAAGCACAAGGTGCAAACTGTCAGTGGTTCTACCATTCTGGGATCTGGAGGACAGTGGCCCTCTTCTCACAGATCCACTAGGCAGTGCCCCAGTGGGGACTCTGTGTGGAGACTCCAACCCCACATTTCCCTGCTGCATTGCCCTAGTAGAGGTTTTCTGTGAGGGCTCCATGCCTGCAGAAGACTTCTGCCTGAACATCCAGGTGTTTCCATACATCTTCTGAAATCTAGACAGAAACTCCCAAAGCTCAACTCTTGTCTTCTGTGCATCTGCACCCTCAACACTACTTGGAAGCCACCAAGGCTTGGGGCTTGTGCCCTCTGAAGCAATGGCCTGAGCTATATACATTGCCCCCTTTTAGCCATGGCTGGAGCCGCAGCAGCTGGCACACAGGGTGCCATGTTCCTGGGCTGCACAGAGCAGCGGGGCCCTGGGCCTGGCCCATGATACCATTTTTTCCTCCTAGGCTTTTGGACCTCTGATGGGAGGGGCTGCCATGAAGATCTTCTGAAATGACCTGAAGACATTTTCCTCATTGTTTTGGCTATCAACATTCATCTCCTCATTACTTATGCAAATTTCTGCAGCCAGCTTGAATTTTTCCCCAGAAAATGGGTTTTTCTTTTCTACCACATGGTCAGGCTGCACATTTTCCAAACTTTTATGCTCCCTTTCCCTTTTAAACATAAGTTCCAATTTCAGATCATCTCTTTGTGAACACATATGATTGTATGTTTTCAGAAAAAGCCAGGTCACTTCTTGAATGCTTTGGTGCTTAGAAATTTCTTAAGCACCAAAGCATTCAAGAAATCATGTCTCTTAAGTTAAAAGTTCCACAGATCTCTAGGGCATGGGCAAAATGCCACCATTGTCTTTGCTAAAACATAGAAAGAGTGACCTTTACTCCCGTTTCCAATAAGTTCCTCATCTCCATCTAAGGACACCTCTGCATGAACTTCATTTTCCATATCACTATCAGCATTTTGGTCAAAACCATTCAACAAAACTCAGGAAGTTCCAAGCTTTTCCACATCTTCCTGTCTTCTCCTGAGCCCTCCAAACTCTTCCAGCCTCTGCCCCTAGTTGGTTCCAA (SEQ ID NO: 13).

Матриксная металлопептидаза 3 (MMP-3) (идентификационный номер в GenBank: EAW67032.1)

Белки семейства матриксных металлопротеиназ (MMP) вовлечены в разрушение внеклеточного матрикса в ходе нормальных физиологических процессов, таких как эмбриональное развитие, размножение и ремоделирование тканей, а также в ходе болезненных процессов, таких как артрит и метастазирование. Большинство MMP секретируются в виде неактивных пропротеинов, которые активируются при расщеплении внеклеточными протеиназами. Этот ген кодирует фермент, который разрушает фибронектин, ламинин, коллаген III, IV, IX и X типов и протеогликаны хрящей. Считается, что фермент вовлечен в заживление ран, прогрессирование атеросклероза и инициирование опухоли. Данный ген является частью кластера генов MMP, локализованных на хромосоме в положении 11q22.3.

В определенных вариантах осуществления концентрация MMP-3 в сыворотке крови обычно находится в диапазоне от 10,3 до 20,8 нг/мл у пациентов в нижнем терциле, от 35,5 до 54,1 нг/мл у пациентов в среднем терциле и от 77,0 до 154,3 нг/мл у пациентов в верхнем терциле. В определенных вариантах осуществления у пациентов, у которых концентрации MMP-3 в сыворотке крови находятся в верхнем терциле, может достигаться ACR20, балл DAS28-CRP, составляющий менее 3,2, или улучшение согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36 или VAS для оценки утренней скованности спустя 24 недели лечения с помощью антитела к рецептору IL-6. В определенных вариантах осуществления у пациентов, у которых концентрации ММР-3 в сыворотке крови находятся в среднем терциле, может достигаться улучшение согласно VAS для оценки боли спустя 24 недели лечения с помощью антитела к рецептору IL-6.

В определенных вариантах осуществления последовательности нуклеиновой кислоты и аминокислотные последовательности MMP-3 представлены ниже.

Пептидная последовательность MMP-3:

MKSLPILLLLCVAVCSAYPLDGAARGEDTSMNLVQKYLENYYDLKKDVKQFVRRKDSGPVVKKIREMQKFLGLEVTGKLDSDTLEVMRKPRCGVPDVGHFRTFPGIPKWRKTHLTYRIVNYTPDLPKDAVDSAVEKALKVWEEVTPLTFSRLYEGEADIMISFAVREHGDFYPFDGPGNVLAHAYAPGPGINGDAHFDDDEQWTKDTTGTNLFLVAAHEIGHSLGLFHSANTEALMYPLYHSLTDLTRFRLSQDDINGIQSLYGPPPDSPETPLVPTEPVPPEPGTPANCDPALSFDAVSTLRGEILIFKDRHFWRKSLRKLEPELHLISSFWPSLPSGVDAAYEVTSKDLVFIFKGNQFWAIRGNEVRAGYPRGIHTLGFPPTVRKIDAAISDKEKNKTYFFVEDKYWRFDEKRNSMEPGFPKQIAEDFPGIDSKIDAVFEEFGFFYFFTGSSQLEFDPNAKKVTHTLKSNSWLNC (SEQ ID NO: 14).

Последовательность кДНК MMP-3:

ATGAAGAGTCTTCCAATCCTACTGTTGCTGTGCGTGGCAGTTTGCTCAGCCTATCCATTGGATGGAGCTGCAAGGGGTGAGGACACCAGCATGAACCTTGTTCAGAAATATCTAGAAAACTACTACGACCTCAAAAAAGATGTGAAACAGTTTGTTAGGAGAAAGGACAGTGGTCCTGTTGTTAAAAAAATCCGAGAAATGCAGAAGTTCCTTGGATTGGAGGTGACGGGGAAGCTGGACTCCGACACTCTGGAGGTGATGCGCAAGCCCAGGTGTGGAGTTCCTGATGTTGGTCACTTCAGAACCTTTCCTGGCATCCCGAAGTGGAGGAAAACCCACCTTACATACAGGATTGTGAATTATACACCAGATTTGCCAAAAGATGCTGTTGATTCTGCTGTTGAGAAAGCTCTGAAAGTCTGGGAAGAGGTGACTCCACTCACATTCTCCAGGCTGTATGAAGGAGAGGCTGATATAATGATCTCTTTTGCAGTTAGAGAACATGGAGACTTTTACCCTTTTGATGGACCTGGAAATGTTTTGGCCCATGCCTATGCCCCTGGGCCAGGGATTAATGGAGATGCCCACTTTGATGATGATGAACAATGGACAAAGGATACAACAGGGACCAATTTATTTCTCGTTGCTGCTCATGAAATTGGCCACTCCCTGGGTCTCTTTCACTCAGCCAACACTGAAGCTTTGATGTACCCACTCTATCACTCACTCACAGACCTGACTCGGTTCCGCCTGTCTCAAGATGATATAAATGGCATTCAGTCCCTCTATGGACCTCCCCCTGACTCCCCTGAGACCCCCCTGGTACCCACGGAACCTGTCCCTCCAGAACCTGGGACGCCAGCCAACTGTGATCCTGCTTTGTCCTTTGATGCTGTCAGCACTCTGAGGGGAGAAATCCTGATCTTTAAAGACAGGCACTTTTGGCGCAAATCCCTCAGGAAGCTTGAACCTGAATTGCATTTGATCTCTTCATTTTGGCCATCTCTTCCTTCAGGCGTGGATGCCGCATATGAAGTTACTAGCAAGGACCTCGTTTTCATTTTTAAAGGAAATCAATTCTGGGCTATCAGAGGAAATGAGGTACGAGCTGGATACCCAAGAGGCATCCACACCCTAGGTTTCCCTCCAACCGTGAGGAAAATCGATGCAGCCATTTCTGATAAGGAAAAGAACAAAACATATTTCTTTGTAGAGGACAAATACTGGAGATTTGATGAGAAGAGAAATTCCATGGAGCCAGGCTTTCCCAAGCAAATAGCTGAAGACTTTCCAGGGATTGACTCAAAGATTGATGCTGTTTTTGAAGAATTTGGGTTCTTTTATTTCTTTACTGGATCTTCACAGTTGGAGTTTGACCCAAATGCAAAGAAAGTGACACACACTTTGAAGAGTAACAGCTGGCTTAATTGTTGA (SEQ ID NO: 15).

Последовательность мРНК MMP-3 (идентификационный номер в GenBank: NM_002422.5):

ACAAGGAGGCAGGCAAGACAGCAAGGCATAGAGACAACATAGAGCTAAGTAAAGCCAGTGGAAATGAAGAGTCTTCCAATCCTACTGTTGCTGTGCGTGGCAGTTTGCTCAGCCTATCCATTGGATGGAGCTGCAAGGGGTGAGGACACCAGCATGAACCTTGTTCAGAAATATCTAGAAAACTACTACGACCTCAAAAAAGATGTGAAACAGTTTGTTAGGAGAAAGGACAGTGGTCCTGTTGTTAAAAAAATCCGAGAAATGCAGAAGTTCCTTGGATTGGAGGTGACGGGGAAGCTGGACTCCGACACTCTGGAGGTGATGCGCAAGCCCAGGTGTGGAGTTCCTGATGTTGGTCACTTCAGAACCTTTCCTGGCATCCCGAAGTGGAGGAAAACCCACCTTACATACAGGATTGTGAATTATACACCAGATTTGCCAAAAGATGCTGTTGATTCTGCTGTTGAGAAAGCTCTGAAAGTCTGGGAAGAGGTGACTCCACTCACATTCTCCAGGCTGTATGAAGGAGAGGCTGATATAATGATCTCTTTTGCAGTTAGAGAACATGGAGACTTTTACCCTTTTGATGGACCTGGAAATGTTTTGGCCCATGCCTATGCCCCTGGGCCAGGGATTAATGGAGATGCCCACTTTGATGATGATGAACAATGGACAAAGGATACAACAGGGACCAATTTATTTCTCGTTGCTGCTCATGAAATTGGCCACTCCCTGGGTCTCTTTCACTCAGCCAACACTGAAGCTTTGATGTACCCACTCTATCACTCACTCACAGACCTGACTCGGTTCCGCCTGTCTCAAGATGATATAAATGGCATTCAGTCCCTCTATGGACCTCCCCCTGACTCCCCTGAGACCCCCCTGGTACCCACGGAACCTGTCCCTCCAGAACCTGGGACGCCAGCCAACTGTGATCCTGCTTTGTCCTTTGATGCTGTCAGCACTCTGAGGGGAGAAATCCTGATCTTTAAAGACAGGCACTTTTGGCGCAAATCCCTCAGGAAGCTTGAACCTGAATTGCATTTGATCTCTTCATTTTGGCCATCTCTTCCTTCAGGCGTGGATGCCGCATATGAAGTTACTAGCAAGGACCTCGTTTTCATTTTTAAAGGAAATCAATTCTGGGCTATCAGAGGAAATGAGGTACGAGCTGGATACCCAAGAGGCATCCACACCCTAGGTTTCCCTCCAACCGTGAGGAAAATCGATGCAGCCATTTCTGATAAGGAAAAGAACAAAACATATTTCTTTGTAGAGGACAAATACTGGAGATTTGATGAGAAGAGAAATTCCATGGAGCCAGGCTTTCCCAAGCAAATAGCTGAAGACTTTCCAGGGATTGACTCAAAGATTGATGCTGTTTTTGAAGAATTTGGGTTCTTTTATTTCTTTACTGGATCTTCACAGTTGGAGTTTGACCCAAATGCAAAGAAAGTGACACACACTTTGAAGAGTAACAGCTGGCTTAATTGTTGAAAGAGATATGTAGAAGGCACAATATGGGCACTTTAAATGAAGCTAATAATTCTTCACCTAAGTCTCTGTGAATTGAAATGTTCGTTTTCTCCTGCCTGTGCTGTGACTCGAGTCACACTCAAGGGAACTTGAGCGTGAATCTGTATCTTGCCGGTCATTTTTATGTTATTACAGGGCATTCAAATGGGCTGCTGCTTAGCTTGCACCTTGTCACATAGAGTGATCTTTCCCAAGAGAAGGGGAAGCACTCGTGTGCAACAGACAAGTGACTGTATCTGTGTAGACTATTTGCTTATTTAATAAAGACGATTTGTCAGTTATTTTA (SEQ ID NO: 16).

Хемокиновый лиганд 13, содержащий мотив C-X-C (CXCL13) (идентификационный номер в GenBank: NP_006410.1)

Хемоаттрактант B-лимфоцитов, независимо клонированный и названный Angie, представляет собой противомикробный пептид и хемокин CXC, который характеризуется высокой экспрессией в фолликулах селезенки, лимфатических узлах и пейеровых бляшках. Он преимущественно способствует миграции В-лимфоцитов (по сравнению с Т-клетками и макрофагами), по-видимому, благодаря стимуляции притока кальция в клетки, экспрессирующие рецептор 1 лимфомы Беркитта (BLR-1), и их хемотаксиса. Следовательно, он может функционировать, обеспечивая хоминг В-лимфоцитов в фолликулы.

В определенных вариантах осуществления концентрация CXCL13 в сыворотке крови обычно находится в диапазоне от 52,4 до 72,0 пг/мл у пациентов в нижнем терциле, от 98,2 до 130,6 пг/мл у пациентов в среднем терциле и от 180,8 до 323,9 пг/мл у пациентов в верхнем терциле.

В определенных вариантах осуществления у пациентов, у которых концентрации CXCL13 в сыворотке крови находятся в верхнем терциле, может достигаться ACR20 или улучшение согласно HAQ-DI, баллу PCS в SF-36 или домену PF в SF-36 спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В определенных вариантах осуществления последовательности нуклеиновой кислоты и аминокислотные последовательности CXCL13 представлены ниже.

Пептидная последовательность CXCL13 (идентификационный номер в GenBank: NP_006410.1):

MKFISTSLLLMLLVSSLSPVQGVLEVYYTSLRCRCVQESSVFIPRRFIDRIQILPRGNGCPRKEIIVWKKNKSIVCVDPQAEWIQRMMEVLRKRSSSTLPVPVFKRKIP (SEQ ID NO: 17).

Последовательность кДНК CXCL13 (идентификационный номер в GenBank: NP_006410.1):

ATGAAGTTCATCTCGACATCTCTGCTTCTCATGCTGCTGGTCAGCAGCCTCTCTCCAGTCCAAGGTGTTCTGGAGGTCTATTACACAAGCTTGAGGTGTAGATGTGTCCAAGAGAGCTCAGTCTTTATCCCTAGACGCTTCATTGATCGAATTCAAATCTTGCCCCGTGGGAATGGTTGTCCAAGAAAAGAAATCATAGTCTGGAAGAAGAACAAGTCAATTGTGTGTGTGGACCCTCAAGCTGAATGGATACAAAGAATGATGGAAGTATTGAGAAAAAGAAGTTCTTCAACTCTACCAGTTCCAGTGTTTAAGAGAAAGATTCCCTGA (SEQ ID NO: 18).

Последовательность геномной ДНК CXCL13 (идентификационный номер в GenBank: NM_006419.2):

GAGAAGATGTTTGAAAAAACTGACTCTGCTAATGAGCCTGGACTCAGAGCTCAAGTCTGAACTCTACCTCCAGACAGAATGAAGTTCATCTCGACATCTCTGCTTCTCATGCTGCTGGTCAGCAGCCTCTCTCCAGTCCAAGGTGTTCTGGAGGTCTATTACACAAGCTTGAGGTGTAGATGTGTCCAAGAGAGCTCAGTCTTTATCCCTAGACGCTTCATTGATCGAATTCAAATCTTGCCCCGTGGGAATGGTTGTCCAAGAAAAGAAATCATAGTCTGGAAGAAGAACAAGTCAATTGTGTGTGTGGACCCTCAAGCTGAATGGATACAAAGAATGATGGAAGTATTGAGAAAAAGAAGTTCTTCAACTCTACCAGTTCCAGTGTTTAAGAGAAAGATTCCCTGATGCTGATATTTCCACTAAGAACACCTGCATTCTTCCCTTATCCCTGCTCTGGATTTTAGTTTTGTGCTTAGTTAAATCTTTTCCAGGAAAAAGAACTTCCCCATACAAATAAGCATGAGACTATGTAAAAATAACCTTGCAGAAGCTGATGGGGCAAACTCAAGCTTCTTCACTCACAGCACCCTATATACACTTGGAGTTTGCATTCTTATTCATCAGGGAGGAAAGTTTCTTTGAAAATAGTTATTCAGTTATAAGTAATACAGGATTATTTTGATTATATACTTGTTGTTTAATGTTTAAAATTTCTTAGAAAACAATGGAATGAGAATTTAAGCCTCAAATTTGAACATGTGGCTTGAATTAAGAAGAAAATTATGGCATATATTAAAAGCAGGCTTCTATGAAAGACTCAAAAAGCTGCCTGGGAGGCAGATGGAACTTGAGCCTGTCAAGAGGCAAAGGAATCCATGTAGTAGATATCCTCTGCTTAAAAACTCACTACGGAGGAGAATTAAGTCCTACTTTTAAAGAATTTCTTTATAAAATTTACTGTCTAAGATTAATAGCATTCGAAGATCCCCAGACTTCATAGAATACTCAGGGAAAGCATTTAAAGGGTGATGTACACATGTATCCTTTCACACATTTGCCTTGACAAACTTCTTTCACTCACATCTTTTTCACTGACTTTTTTTGTGGGGGGCGGGGCCGGGGGGACTCTGGTATCTAATTCTTTAATGATTCCTATAAATCTAATGACATTCAATAAAGTTGAGCAAACATTTTACTTAAAAAAAAAAAAAAAAAA (SEQ ID NO: 19).

Сывороточный амилоид A (SAA) (идентификационный номер в GenBank: AAB24060.1)

Этот ген кодирует представителя аполипопротеинов из семейства сывороточного амилоида А. Кодируемый препропротеин подвергается протеолитическому процессингу с образованием зрелого белка. Этот белок является основным белком острой фазы, который экспрессируется на высоком уровне в ответ на воспаление и повреждение ткани. Этот белок также играет важную роль в метаболизме HDL и гомеостазе холестерина. Высокие уровни этого белка ассоциированы с хроническими воспалительными заболеваниями, в том числе атеросклерозом, ревматоидным артритом, болезнью Альцгеймера и болезнью Крона. Этот белок также может быть потенциальным биомаркером определенных опухолей. Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких вариантов транскриптов, которые кодируют один и тот же белок. Псевдоген этого гена находится в хромосоме 11.

В определенных вариантах осуществления концентрация SAA в сыворотке крови обычно находится в диапазоне от 2192,7 до 5346,4 нг/л у пациентов в нижнем терциле, от 11832,0 до 30082,0 нг/л у пациентов в среднем терциле и от 105200,0 до 256000,0 нг/л у пациентов в верхнем терциле. В определенных вариантах осуществления у пациентов, у которых концентрации SAA в сыворотке крови находятся в верхнем терциле, может достигаться ACR20, ACR50 или ACR70, балл DAS28-CRP, составляющий менее 3,2, или улучшение согласно общей оценке пациентом по VAS, HAQ-DI, VAS для оценки боли, баллу PCS в SF-36, домену PF в SF-36, VAS для оценки утренней скованности или баллу RAID спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В определенных вариантах осуществления у пациентов, у которых концентрации SAA в сыворотке крови находятся в среднем терциле, может достигаться улучшение согласно HAQ-DI спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В определенных вариантах осуществления последовательности нуклеиновой кислоты и аминокислотные последовательности SAA представлены ниже.

Пептидная последовательность сывороточного амилоида A (идентификационный номер в GenBank: AAB24060.1):

MRLFTGIVFCSLVMGVTSESWRSFFKEALQGVGDMGRAYWDIMISNHQNSNRYLYARGNYDAAQRGPGGVWAAKLISRSRVYLQGLIDYYLFGNSSTVLEDSKSNEKAEEWGRSGKDPDRFRPDGLPKKY (SEQ ID NO: 20).

Последовательность кДНК сывороточного амилоида A (идентификационный номер в GenBank: AAB24060.1):

ATGAGGCTTTTCACAGGCATTGTTTTCTGCTCCTTGGTCATGGGAGTCACCAGTGAAAGCTGGCGTTCGTTTTTCAAGGAGGCTCTCCAAGGGGTTGGGGACATGGGCAGAGCCTATTGGGACATAATGATATCCAATCACCAAAATTCAAACAGATATCTCTATGCTCGGGGAAACTATGATGCTGCCCAAAGAGGACCTGGGGGTGTCTGGGCTGCTAAACTCATCAGCCGTTCCAGGGTCTATCTTCAGGGATTAATAGACTACTATTTATTTGGAAACAGCAGCACTGTATTGGAGGACTCGAAGTCCAACGAGAAAGCTGAGGAATGGGGCCGGAGTGGCAAAGACCCCGACCGCTTCAGACCTGACGGCCTGCCTAAGAAATACTGA (SEQ ID NO: 21).

Последовательность мРНК сывороточного амилоида A (идентификационный номер в GenBank: M81349.1):

TATAGCTCCACGGCCAGAAGATACCAGCAGCTCTGCCTTTACTGAAATTTCAGCTGGAGAAAGGTCCACAGCACAATGAGGCTTTTCACAGGCATTGTTTTCTGCTCCTTGGTCATGGGAGTCACCAGTGAAAGCTGGCGTTCGTTTTTCAAGGAGGCTCTCCAAGGGGTTGGGGACATGGGCAGAGCCTATTGGGACATAATGATATCCAATCACCAAAATTCAAACAGATATCTCTATGCTCGGGGAAACTATGATGCTGCCCAAAGAGGACCTGGGGGTGTCTGGGCTGCTAAACTCATCAGCCGTTCCAGGGTCTATCTTCAGGGATTAATAGACTACTATTTATTTGGAAACAGCAGCACTGTATTGGAGGACTCGAAGTCCAACGAGAAAGCTGAGGAATGGGGCCGGAGTGGCAAAGACCCCGACCGCTTCAGACCTGACGGCCTGCCTAAGAAATACTGAGCTTCCTGCTCCTCTGCTCTCAGGGAAACTGGGCTGTGAGCCACACACTTCTCCCCCCAGACAGGGACACAGGGTCACTGAGCTTTGTGTCCCCAGGAACTGGTATAGGGCACCTAGAGGTGTTCAATAAATGTTTGTCAAATTGA (SEQ ID NO: 22).

Растворимая внутриклеточная молекула адгезии 1 (sICAM-1) (идентификационный номер в GenBank: NP_000192.2)

Все белки ICAM являются трансмембранными гликопротеинами I типа, содержат от 2 до 9 иммуноглобулиноподобных доменов C2-типа и связываются с белком адгезии лейкоцитов LFA-1. Этот белок может играть роль в рециркуляции лимфоцитов посредством блокирования LFA-1-зависимой клеточной адгезии. Он опосредует адгезионные взаимодействия, важные для антигенспецифического иммунного ответа, иммунного клиренса, опосредованного NK-клетками, рециркуляции лимфоцитов, а также другие клеточные взаимодействия, важные для иммунного ответа и надзора. Для этого гена было обнаружено несколько вариантов транскриптов, кодирующих один и тот же белок.

Концентрация sICAM-1 в сыворотке крови обычно находится в диапазоне от 179,7 до 212,1 нг/мл у пациентов в нижнем терциле, от 239,7 до 272,3 нг/мл у пациентов в среднем терциле и от 313,7 до 380,0 нг/мл у пациентов в верхнем терциле. В определенных вариантах осуществления у пациентов, у которых концентрация CXCL13 в сыворотке крови находится в нижнем терциле и у которых концентрация sICAM-1 находится в нижнем терциле, может достигаться ACR50 спустя 24 недели лечения с помощью антитела. В определенных вариантах осуществления у пациентов, у которых концентрация CXCL13 в сыворотке крови находится в верхнем терциле и у которых концентрация sICAM-1 находится в верхнем терциле, может достигаться ACR50 спустя 24 недели лечения с помощью антитела.

В определенных вариантах осуществления последовательности нуклеиновой кислоты и аминокислотные последовательности sICAM-1 представлены ниже.

Пептидная последовательность sICAM-1 (идентификационный номер в GenBank: NP_000192.2):

MAPSSPRPALPALLVLLGALFPGPGNAQTSVSPSKVILPRGGSVLVTCSTSCDQPKLLGIETPLPKKELLLPGNNRKVYELSNVQEDSQPMCYSNCPDGQSTAKTFLTVYWTPERVELAPLPSWQPVGKNLTLRCQVEGGAPRANLTVVLLRGEKELKREPAVGEPAEVTTTVLVRRDHHGANFSCRTELDLRPQGLELFENTSAPYQLQTFVLPATPPQLVSPRVLEVDTQGTVVCSLDGLFPVSEAQVHLALGDQRLNPTVTYGNDSFSAKASVSVTAEDEGTQRLTCAVILGNQSQETLQTVTIYSFPAPNVILTKPEVSEGTEVTVKCEAHPRAKVTLNGVPAQPLGPRAQLLLKATPEDNGRSFSCSATLEVAGQLIHKNQTRELRVLYGPRLDERDCPGNWTWPENSQQTPMCQAWGNPLPELKCLKDGTFPLPIGESVTVTRDLEGTYLCRARSTQGEVTRKVTVNVLSPRYEIVIITVVAAAVIMGTAGLSTYLYNRQRKIKKYRLQQAQKGTPMKPNTQATPP (SEQ ID NO: 23).

Последовательность кДНК sICAM-1 (идентификационный номер в GenBank: NP_000192.2):

ATGGCTCCCAGCAGCCCCCGGCCCGCGCTGCCCGCACTCCTGGTCCTGCTCGGGGCTCTGTTCCCAGGACCTGGCAATGCCCAGACATCTGTGTCCCCCTCAAAAGTCATCCTGCCCCGGGGAGGCTCCGTGCTGGTGACTGCAGCACCTCCTGTGACCAGCCCAAGTTGTTGGGCATAGAGACCCCGTTGCCTAAAAAGGAGTTGCTC

CTGCCTGGGAACAACCGGAAGGTGTATGAACTGAGCAATGTGCAAGAAGATAGCCAACCAATGTGCTATTCAAACTGCCCTGATGGGCAGTCAACAGCTAAAACCTTCCTCACCGTGTACTGGACTCCAGAACGGGTGGAACTGGCACCCCTCCCCTCTTGGCAGCCAGTGGGCAAGAACCTTACCCTACGCTGCCAGGTGGAGGGTGGGGCACCCCGGGCCAACCTCACCGTGGTGCTGCTCCGTGGGGAGAAGGAGCTGAAACGGGAGCCAGCTGTGGGGGAGCCCGCTGAGGTCACGACCACGGTGCTGGTGAGGAGAGATCACCATGGAGCCAATTTCTCGTGCCGCACTGAACTGGACCTGCGGCCCCAAGGGCTGGAGCTGTTTGAGAACACCTCGGCCCCCTACCAGCTCCAGACCTTTGTCCTGCCAGCGACTCCCCCACAACTTGTCAGCCCCCGGGTCCTAGAGGTGGACACGCAGGGGACCGTGGTCTGTTCCCTGGACGGGCTGTTCCCAGTCTCGGAGGCCCAGGTCCACCTGGCACTGGGGGACCAGAGGTTGAACCCCACAGTCACCTATGGCAACGACTCCTTCTCGGCCAAGGCCTCAGTCAGTGTGACCGCAGAGGACGAGGGCACCCAGCGGCTGACGTGTGCAGTAATACTGGGGAACCAGAGCCAGGAGACACTGCAGACAGTGACCATCTACAGCTTTCCGGCGCCCAACGTGATTCTGACGAAGCCAGAGGTCTCAGAAGGGACCGAGGTGACAGTGAAGTGTGAGGCCCACCCTAGAGCCAAGGTGACGCTGAATGGGGTTCCAGCCCAGCCACTGGGCCCGAGGGCCCAGCTCCTGCTGAAGGCCACCCCAGAGGACAACGGGCGCAGCTTCTCCTGCTCTGCAACCCTGGAGGTGGCCGGCCAGCTTATACACAAGAACCAGACCCGGGAGCTTCGTGTCCTGTATGGCCCCCGACTGGACGAGAGGGATTGTCCGGGAAACTGGACGTGGCCAGAAAATTCCCAGCAGACTCCAATGTGCCAGGCTTGGGGGAACCCATTGCCCGAGCTCAAGTGTCTAAAGGATGGCACTTTCCCACTGCCCATCGGGGAATCAGTGACTGTCACTCGAGATCTTGAGGGCACCTACCTCTGTCGGGCCAGGAGCACTCAAGGGGAGGTCACCCGCAAGGTGACCGTGAATGTGCTCTCCCCCCGGTATGAGATTGTCATCATCACTGTGGTAGCAGCCGCAGTCATAATGGGCACTGCAGGCCTCAGCACGTACCTCTATAACCGCCAGCGGAAGATCAAGAAATACAGACTACAACAGGCCCAAAAAGGGACCCCCATGAAACCGAACACACAAGCCACGCCTCCCTGA (SEQ ID NO: 24).

Последовательность мРНК sICAM-1 (идентификационный номер в GenBank: NM_000201.3):

GAGCTCCTCTGCTACTCAGAGTTGCAACCTCAGCCTCGCTATGGCTCCCAGCAGCCCCCGGCCCGCGCTGCCCGCACTCCTGGTCCTGCTCGGGGCTCTGTTCCCAGGACCTGGCAATGCCCAGACATCTGTGTCCCCCTCAAAAGTCATCCTGCCCCGGGGAGGCTCCGTGCTGGTGACATGCAGCACCTCCTGTGACCAGCCCAAGTTGTTGGGCATAGAGACCCCGTTGCCTAAAAAGGAGTTGCTCCTGCCTGGGAACAACCGGAAGGTGTATGAACTGAGCAATGTGCAAGAAGATAGCCAACCAATGTGCTATTCAAACTGCCCTGATGGGCAGTCAACAGCTAAAACCTTCCTCACCGTGTACTGGACTCCAGAACGGGTGGAACTGGCACCCCTCCCCTCTTGGCAGCCAGTGGGCAAGAACCTTACCCTACGCTGCCAGGTGGAGGGTGGGGCACCCCGGGCCAACCTCACCGTGGTGCTGCTCCGTGGGGAGAAGGAGCTGAAACGGGAGCCAGCTGTGGGGGAGCCCGCTGAGGTCACGACCACGGTGCTGGTGAGGAGAGATCACCATGGAGCCAATTTCTCGTGCCGCACTGAACTGGACCTGCGGCCCCAAGGGCTGGAGCTGTTTGAGAACACCTCGGCCCCCTACCAGCTCCAGACCTTTGTCCTGCCAGCGACTCCCCCACAACTTGTCAGCCCCCGGGTCCTAGAGGTGGACACGCAGGGGACCGTGGTCTGTTCCCTGGACGGGCTGTTCCCAGTCTCGGAGGCCCAGGTCCACCTGGCACTGGGGGACCAGAGGTTGAACCCCACAGTCACCTATGGCAACGACTCCTTCTCGGCCAAGGCCTCAGTCAGTGTGACCGCAGAGGACGAGGGCACCCAGCGGCTGACGTGTGCAGTAATACTGGGGAACCAGAGCCAGGAGACACTGCAGACAGTGACCATCTACAGCTTTCCGGCGCCCAACGTGATTCTGACGAAGCCAGAGGTCTCAGAAGGGACCGAGGTGACAGTGAAGTGTGAGGCCCACCCTAGAGCCAAGGTGACGCTGAATGGGGTTCCAGCCCAGCCACTGGGCCCGAGGGCCCAGCTCCTGCTGAAGGCCACCCCAGAGGACAACGGGCGCAGCTTCTCCTGCTCTGCAACCCTGGAGGTGGCCGGCCAGCTTATACACAAGAACCAGACCCGGGAGCTTCGTGTCCTGTATGGCCCCCGACTGGACGAGAGGGATTGTCCGGGAAACTGGACGTGGCCAGAAAATTCCCAGCAGACTCCAATGTGCCAGGCTTGGGGGAACCCATTGCCCGAGCTCAAGTGTCTAAAGGATGGCACTTTCCCACTGCCCATCGGGGAATCAGTGACTGTCACTCGAGATCTTGAGGGCACCTACCTCTGTCGGGCCAGGAGCACTCAAGGGGAGGTCACCCGCAAGGTGACCGTGAATGTGCTCTCCCCCCGGTATGAGATTGTCATCATCACTGTGGTAGCAGCCGCAGTCATAATGGGCACTGCAGGCCTCAGCACGTACCTCTATAACCGCCAGCGGAAGATCAAGAAATACAGACTACAACAGGCCCAAAAAGGGACCCCCATGAAACCGAACACACAAGCCACGCCTCCCTGAACCTATCCCGGGACAGGGCCTCTTCCTCGGCCTTCCCATATTGGTGGCAGTGGTGCCACACTGAACAGAGTGGAAGACATATGCCATGCAGCTACACCTACCGGCCCTGGGACGCCGGAGGACAGGGCATTGTCCTCAGTCAGATACAACAGCATTTGGGGCCATGGTACCTGCACACCTAAAACACTAGGCCACGCATCTGATCTGTAGTCACATGACTAAGCCAAGAGGAAGGAGCAAGACTCAAGACATGATTGATGGATGTTAAAGTCTAGCCTGATGAGAGGGGAAGTGGTGGGGGAGACATAGCCCCACCATGAGGACATACAACTGGGAAATACTGAAACTTGCTGCCTATTGGGTATGCTGAGGCCCCACAGACTTACAGAAGAAGTGGCCCTCCATAGACATGTGTAGCATCAAAACACAAAGGCCCACACTTCCTGACGGATGCCAGCTTGGGCACTGCTGTCTACTGACCCCAACCCTTGATGATATGTATTTATTCATTTGTTATTTTACCAGCTATTTATTGAGTGTCTTTTATGTAGGCTAAATGAACATAGGTCTCTGGCCTCACGGAGCTCCCAGTCCTAATCACATTCAAGGTCACCAGGTACAGTTGTACAGGTTGTACACTGCAGGAGAGTGCCTGGCAAAAAGATCAAATGGGGCTGGGACTTCTCATTGGCCAACCTGCCTTTCCCCAGAAGGAGTGATTTTTCTATCGGCACAAAAGCACTATATGGACTGGTAATGGTTACAGGTTCAGAGATTACCCAGTGAGGCCTTATTCCTCCCTTCCCCCCAAAACTGACACCTTTGTTAGCCACCTCCCCACCCACATACATTTCTGCCAGTGTTCACAATGACACTCAGCGGTCATGTCTGGACATGAGTGCCCAGGGAATATGCCCAAGCTATGCCTTGTCCTCTTGTCCTGTTTGCATTTCACTGGGAGCTTGCACTATGCAGCTCCAGTTTCCTGCAGTGATCAGGGTCCTGCAAGCAGTGGGGAAGGGGGCCAAGGTATTGGAGGACTCCCTCCCAGCTTTGGAAGCCTCATCCGCGTGTGTGTGTGTGTGTATGTGTAGACAAGCTCTCGCTCTGTCACCCAGGCTGGAGTGCAGTGGTGCAATCATGGTTCACTGCAGTCTTGACCTTTTGGGCTCAAGTGATCCTCCCACCTCAGCCTCCTGAGTAGCTGGGACCATAGGCTCACAACACCACACCTGGCAAATTTGATTTTTTTTTTTTTTCCAGAGACGGGGTCTCGCAACATTGCCCAGACTTCCTTTGTGTTAGTTAATAAAGCTTTCTCAACTGCC (SEQ ID NO: 25).

VAS для оценки боли

Визуальная аналоговая шкала (VAS) для оценки боли представляет собой одномерную меру интенсивности боли, которая широко использовалась в различных популяциях взрослых пациентов, в том числе страдающих ревматическими заболеваниями. VAS для оценки боли представляет собой непрерывную шкалу, состоящую из горизонтальной (HVAS) или вертикальной (VVAS) линии, обычно длиной 10 сантиметров (100 мм), с закрепленными на ней 2 словесными описаниями, по одному для каждой крайности симптома. Для оценки интенсивности боли на шкале обычно закреплены "отсутствие боли" (балл 0) и "самая сильная возможная боль" или "наихудшая боль, которую можно себе представить" (балл 100 [шкала длиной 100 мм]). Чтобы избежать сосредоточения баллов около предпочтительного числового значения, использовать числа или словесные описания в промежуточных точках не рекомендуется.

Общая оценка пациентом по VAS

Общая оценка активности заболевания пациентом является важнейшим компонентом различных мер активности заболевания при ревматоидном артрите (RA). Цель авторов настоящего изобретения состояла в том, чтобы идентифицировать лежащие в основе скрытые особенности, обуславливающие общую оценку пациентом, с использованием количественного многопараметрического подхода сжатия данных. В определенных вариантах осуществления пациенты указывают свою общую оценку по визуальной аналоговой шкале (VAS), отвечая на вопрос: "С учетом всех способов, которыми ваше заболевание влияет на вас, насколько хорошо вы себя чувствовали за последнюю неделю?" Поэтому общая оценка пациентом не только предполагает оценку заболевания с точки зрения пациента, но также охватывает различные факторы, влияющие на пациентов в дополнение к RA.

VAS для оценки утренней скованности

Пациентов спрашивали, наблюдалась ли у них скованность суставов при пробуждении (да или нет); ответивших "да" просили указывать степень тяжести утренней скованности путем проставления отметки в виде вертикальной линии на шкале тяжести (визуальной аналоговой шкале [VAS] длиной 100 мм, где 0=совсем не тяжелая и 100=крайне тяжелая). Этих пациентов также просили регистрировать время, когда утренняя скованность в суставах проходила; продолжительность утренней скованности рассчитывали путем вычитания этого времени из времени пробуждения. Пациентов также просили регистрировать интенсивность боли при пробуждении путем проставления отметки в виде линии на VAS длиной 100 мм (где 0=отсутствие боли и 100=очень сильная боль).

Антитела к IL-6R

В настоящем изобретении предусмотрены способы, которые включают введение пациенту антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые специфично связываются с hIL-6R. Используемый в данном документе термин "hIL-6R" означает рецептор цитокина человека, который специфично связывает интерлейкин-6 человека (IL-6). В определенных вариантах осуществления антитело, которое вводят пациенту, специфично связывается с внеклеточным доменом hIL-6R.

Предполагается, что термин "антитело", используемый в данном документе, относится к молекулам иммуноглобулинов, содержащим четыре полипептидные цепи - две тяжелые (H) цепи и две легкие (L) цепи, соединенные между собой дисульфидными связями, а также их мультимерам (например, IgM). Каждая тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи (в данном документе сокращенно обозначенную как HCVR или VH) и константную область тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи содержит три домена - CH1, CH2 и CH3. Каждая легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи (в данном документе сокращенно обозначенную как LCVR или VL) и константную область легкой цепи. Константная область легкой цепи содержит один домен (CL1). Области VH и VL могут быть дополнительно подразделены на гипервариабельные области, называемые областями, определяющими комплементарность (CDR), которые чередуются с более консервативными областями, называемыми каркасными областями (FR). Каждая VH и VL состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных от амино-конца к карбокси-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. В некоторых вариантах осуществления FR антитела (или его антигенсвязывающей части) могут быть идентичны последовательностям человека зародышевого типа или могут быть модифицированы естественным или искусственным путем. Аминокислотная консенсусная последовательность может быть определена на основании параллельного анализа двух или более CDR.

Термин "антитело", используемый в данном документе, также включает антигенсвязывающие фрагменты полных молекул антител. Термины "антигенсвязывающая часть" антитела, "антигенсвязывающий фрагмент" антитела и т. п., используемые в данном документе, включают любой встречающийся в природе, получаемый ферментативным путем, синтетический или полученный с помощью генной инженерии полипептид или гликопротеин, который специфично связывает антиген с образованием комплекса. Антигенсвязывающие фрагменты антитела могут быть получены, например, из полных молекул антител с помощью любых подходящих стандартных методик, таких как протеолитическое расщепление или рекомбинантные методики генной инженерии, предусматривающие манипуляцию с ДНК, кодирующей вариабельные и необязательно константные домены антител, и ее экспрессию. Такая ДНК известна и/или является легкодоступной, например, из коммерческих источников, библиотек ДНК (в том числе, например, фаговых библиотек антител), или может быть синтезирована. ДНК можно секвенировать и с ней можно проводить манипуляции химическим путем или с помощью методик молекулярной биологии, например, для расположения одного или нескольких вариабельных и/или константных доменов в подходящей конфигурации или для введения кодонов, создания цистеиновых остатков, модификации, добавления или удаления аминокислот и т. д.

Неограничивающие примеры антигенсвязывающих фрагментов включают: (i) Fab-фрагменты; (ii) F(ab')2-фрагменты; (iii) Fd-фрагменты; (iv) Fv-фрагменты; (v) одноцепочечные молекулы Fv (scFv); (vi) dAb-фрагменты и (vii) минимальные распознающие единицы, состоящие из аминокислотных остатков, имитирующих гипервариабельную область антитела (например, выделенную область, определяющую комплементарность (CDR), такую как пептид CDR3), или конформационно ограниченный пептид FR3-CDR3-FR4. Другие сконструированные молекулы, такие как доменспецифические антитела, однодоменные антитела, антитела с удаленным доменом, химерные антитела, антитела с трансплантированными CDR, диатела, триатела, тетратела, миниантитела, нанотела (например, моновалентные нанотела и бивалентные нанотела), малые модульные иммунофармацевтические средства (SMIP) и вариабельные домены IgNAR акулы, также охватываются выражением "антигенсвязывающий фрагмент", используемым в данном документе.

Антигенсвязывающий фрагмент антитела, как правило, будет содержать по меньшей мере один вариабельный домен. Вариабельный домен может иметь любой размер или аминокислотный состав и обычно будет содержать по меньшей мере одну CDR, которая прилегает к одной или нескольким последовательностям каркасной области или находится внутри рамки считывания вместе с ними. В антигенсвязывающих фрагментах, содержащих домен VH, связанный с доменом VL, домены VH и VL могут располагаться относительно друг друга в любом подходящем порядке расположения. Например, вариабельная область может быть димерной и содержать димеры VH-VH, VH-VL или VL-VL. В качестве альтернативы антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать мономерный домен VH или VL.

В определенных вариантах осуществления антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать по меньшей мере один вариабельный домен, ковалентно связанный с по меньшей мере одним константным доменом. Неограничивающие иллюстративные конфигурации вариабельных и константных доменов, которые могут быть обнаружены в антигенсвязывающем фрагменте антитела, включают: (i) VH-CH1; (ii) VH-CH2; (iii) VH-CH3; (iv) VH-CH1-CH2; (v) VH-CH1-CH2-CH3; (vi) VH-CH2-CH3; (vii) VH-CL; (viii) VL-CH1; (ix) VL-CH2; (x) VL-CH3; (xi) VL-CH1-CH2; (xii) VL-CH1-CH2-CH3; (xiii) VL-CH2-CH3 и (xiv) VL-CL. В любой конфигурации вариабельных и константных доменов, в том числе в любых иллюстративных конфигурациях, перечисленных выше, вариабельные и константные домены могут быть непосредственно связаны друг с другом либо могут быть связаны с помощью полной или неполной шарнирной или линкерной области. Шарнирная область в различных вариантах осуществления может состоять из по меньшей мере 2 (например, 5, 10, 15, 20, 40, 60 или больше) аминокислот, что приводит к образованию гибкой или полугибкой связи между смежными вариабельными и/или константными доменами в одной молекуле полипептида. Кроме того, антигенсвязывающий фрагмент антитела в различных вариантах осуществления может содержать гомодимер или гетеродимер (или другой мультимер) с любой из конфигураций вариабельных и константных доменов, перечисленных выше, в нековалентной ассоциации друг с другом и/или с одним или несколькими мономерными доменами VH или VL (например, с помощью дисульфидной(дисульфидных) связи(связей)).

Как и в случае с полными молекулами антител, антигенсвязывающие фрагменты могут быть моноспецифическими или полиспецифическими (например, биспецифическими). Полиспецифический антигенсвязывающий фрагмент антитела будет, как правило, содержать по меньшей мере два различных вариабельных домена, где каждый вариабельный домен способен специфично связываться с отдельным антигеном или с другим эпитопом того же антигена. Любой формат полиспецифических антител, в том числе иллюстративные форматы биспецифических антител, раскрытые в данном документе, в различных вариантах осуществления может быть адаптирован для применения в аспекте антигенсвязывающего фрагмента антитела к IL-6R с помощью стандартных методик, доступных из уровня техники.

Константная область антитела является важной для способности антитела фиксировать комплемент и опосредовать клеточнозависимую цитотоксичность. Таким образом, изотип антитела может быть выбран, исходя из того, желательно ли для антитела опосредование цитотоксичности.

Предполагается, что термин "антитело человека", используемый в данном документе, включает антитела, содержащие вариабельные и константные области, полученные из последовательностей иммуноглобулинов человека зародышевого типа. Антитела человека, представленные в настоящем изобретении, в различных вариантах осуществления могут все же содержать аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями иммуноглобулинов человека зародышевого типа (например, мутации, введенные посредством случайного или сайт-специфического мутагенеза in vitro или посредством соматической мутации in vivo), например, в CDR и в некоторых вариантах осуществления в CDR3. Однако не предполагается, что термин "антитело человека", используемый в данном документе, включает антитела, в которых последовательности CDR, полученные из зародышевой линии другого вида млекопитающих, такого как мышь, были трансплантированы на последовательности каркасных областей человека.

Предполагается, что термин "рекомбинантное антитело человека", используемый в данном документе, включает все антитела человека, получаемые, экспрессируемые, создаваемые или выделяемые посредством рекомбинантных способов, такие как антитела, экспрессируемые с помощью рекомбинантного вектора экспрессии, введенного путем трансфекции в клетку-хозяина (описанные дополнительно ниже), антитела, выделенные из комбинаторной библиотеки рекомбинантных антител человека (описанные дополнительно ниже), антитела, выделенные из животного (например, мыши), которое является трансгенным по генам иммуноглобулинов человека (см., например, Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295, включенный в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте), или антитела, полученные, экспрессированные, созданные или выделенные посредством любых других способов, которые предусматривают сплайсинг последовательностей генов иммуноглобулинов человека с другими последовательностями ДНК. Такие рекомбинантные антитела человека содержат вариабельные и константные области, полученные из последовательностей иммуноглобулинов человека зародышевого типа. В определенных вариантах осуществления, однако, такие рекомбинантные антитела человека подвергают мутагенезу in vitro (или, в случае с животным, трансгенным по последовательностям Ig человека, соматическому мутагенезу in vivo), и, таким образом, аминокислотные последовательности областей VH и VL рекомбинантных антител представляют собой последовательности, которые, хотя и получены из последовательностей VH и VL человека зародышевого типа и являются родственными им, могут не существовать в природе в репертуаре антител человека зародышевого типа in vivo.

Антитела человека могут существовать в двух формах, что связано с гетерогенностью шарнирных областей. В одном варианте осуществления молекула иммуноглобулина содержит стабильную четырехцепочечную конструкцию размером примерно 150-160 кДа, в которой димеры удерживаются вместе благодаря межцепочечной дисульфидной связи между тяжелыми цепями. В определенных вариантах осуществления димеры не связаны межцепочечными дисульфидными связями, и образуется молекула размером приблизительно 75-80 кДа, состоящая из ковалентно связанных легкой и тяжелой цепей (полуантитело). Эти варианты осуществления/формы было крайне сложно разделить даже после аффинной очистки.

Частота появления второй формы в различных изотипах интактных IgG обусловлена без ограничения структурными различиями, связанными с изотипом шарнирной области антитела. Одна аминокислотная замена в шарнирной области в составе шарнирной области IgG4 человека может приводить к значительному снижению частоты появления второй формы (Angal et al., (1993) Molecular Immunology 30:105, включена посредством ссылки во всей своей полноте) до уровней, обычно наблюдаемых при использовании шарнирной области IgG1 человека. Настоящее изобретение охватывает в различных вариантах осуществления антитела с одной или несколькими мутациями в шарнирной области, области CH2 или CH3, что может быть желательным, например, при получении, для улучшения выхода желаемой формы антитела.

Термин "выделенное антитело", используемый в данном документе, означает антитело, которое было идентифицировано и отделено и/или извлечено из по меньшей мере одного компонента своего естественного окружения. Например, антитело, которое было отделено или удалено из по меньшей мере одного компонента организма или из ткани или клетки, в которой антитело существует в природе или вырабатывается в природе, представляет собой "выделенное антитело". В различных вариантах осуществления выделенное антитело также включает антитело in situ в рекомбинантной клетке. В других вариантах осуществления выделенные антитела представляют собой антитела, которые были подвергнуты по меньшей мере одной стадии очистки или выделения. В различных вариантах осуществления выделенное антитело может практически не содержать другого клеточного материала и/или химических соединений.

Термин "специфично связывает" и т. п. означает, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент образуют комплекс с антигеном, который является относительно стабильным в физиологических условиях. Способы определения наличия специфичного связывания антитела с антигеном хорошо известны из уровня техники и включают, например, равновесный диализ, поверхностный плазмонный резонанс и т. п. Например, антитело, которое "специфично связывает" IL-6R, как используется в данном документе, включает в себя антитела, которые связывают IL-6R или его часть с KD, составляющей менее чем приблизительно 1000 нМ, менее чем приблизительно 500 нМ, менее чем приблизительно 300 нМ, менее чем приблизительно 200 нМ, менее чем приблизительно 100 нМ, менее чем приблизительно 90 нМ, менее чем приблизительно 80 нМ, менее чем приблизительно 70 нМ, менее чем приблизительно 60 нМ, менее чем приблизительно 50 нМ, менее чем приблизительно 40 нМ, менее чем приблизительно 30 нМ, менее чем приблизительно 20 нМ, менее чем приблизительно 10 нМ, менее чем приблизительно 5 нМ, менее чем приблизительно 4 нМ, менее чем приблизительно 3 нМ, менее чем приблизительно 2 нМ, менее чем приблизительно 1 нМ или приблизительно 0,5 нМ, согласно измерению с помощью анализа методом поверхностного плазмонного резонанса. Выделенное антитело, которое специфично связывает IL-6R человека, может, однако, характеризоваться перекрестной реактивностью с другими антигенами, такими как молекулы IL-6R из других (отличных от человека) видов.

Термин "поверхностный плазмонный резонанс", используемый в данном документе, относится к оптическому явлению, которое обеспечивает возможность анализа взаимодействий в реальном времени посредством выявления изменений концентраций белков в биосенсорной матрице, например, с помощью системы BIAcore™ (отдел Biacore Life Sciences в GE Healthcare, Пискатауэй, Нью-Джерси).

Предполагается, что термин "KD", используемый в данном документе, относится к равновесной константе диссоциации взаимодействия антитела и антигена.

Термин "эпитоп" относится к антигенной детерминанте, которая взаимодействует со специфическим антигенсвязывающим центром в вариабельной области молекулы антитела, известным как паратоп. Один антиген может иметь более одного эпитопа. Таким образом, различные антитела могут связываться с различными областями в антигене и могут оказывать различные биологические эффекты. Эпитопы могут быть конформационными или линейными. Конформационный эпитоп образован пространственно близко расположенными аминокислотами из различных сегментов линейной полипептидной цепи. Линейный эпитоп образован смежными аминокислотными остатками в полипептидной цепи. В определенных обстоятельствах эпитоп может содержать фрагменты сахаридов, фосфорильных групп или сульфонильных групп антигена.

Антитела к IL-6R, применимые для способов, представленных в данном документе, в различных вариантах осуществления могут содержать одну или несколько аминокислотных замен, вставок и/или делеций в каркасных областях и/или CDR вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей по сравнению с соответствующими последовательностями зародышевого типа, из которых были получены антитела. Такие мутации можно легко выявить посредством сравнения аминокислотных последовательностей, раскрытых в данном документе, с последовательностями зародышевого типа, доступными, например, из общедоступных баз данных о последовательностях антител. В различных вариантах осуществления настоящее изобретение включает способы, предусматривающие применение антител и их антигенсвязывающих фрагментов, полученных из любых аминокислотных последовательностей, раскрытых в данном документе, где одна или несколько аминокислот в одной или нескольких каркасных областях и/или CDR подвергнуты мутации по типу замены на соответствующий(соответствующие) остаток(остатки) последовательности зародышевого типа, из которой антитело было получено, или на соответствующий(соответствующие) остаток(остатки) другой последовательности человека зародышевого типа, или по типу консервативной аминокислотной замены на соответствующий(соответствующие) остаток(остатки) зародышевого типа (такие изменения последовательностей упоминаются в данном документе в совокупности как "мутации приведения к зародышевому типу"). Можно конструировать многочисленные антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые содержат одну или несколько отдельных мутаций приведения к зародышевому типу или их комбинации. В определенных вариантах осуществления все остатки каркасных областей и/или CDR в доменах VH и/или VL подвергнуты обратной мутации по типу замены на остатки, обнаруживаемые в исходной последовательности зародышевого типа, из которой было получено антитело. В других вариантах осуществления только определенные остатки подвергнуты обратной мутации по типу замены на остатки исходной последовательности зародышевого типа, например, только мутантные остатки, находящиеся в пределах первых 8 аминокислот FR1 или в пределах последних 8 аминокислот FR4, или только мутантные остатки, находящиеся в CDR1, CDR2 или CDR3. В других вариантах осуществления один или несколько остатков каркасных областей и/или CDR подвергнуты мутации по типу замены на соответствующий(соответствующие) остаток(остатки) другой последовательности зародышевого типа (т. е. последовательности зародышевого типа, которая отличается от последовательности зародышевого типа, из которой изначально было получено антитело). Кроме того, антитела могут содержать любую комбинацию из двух или более мутаций приведения к зародышевому типу в каркасных областях и/или CDR, например, где определенные отдельные остатки подвергнуты мутации по типу замены на соответствующий остаток определенной последовательности зародышевого типа, тогда как определенные другие остатки, которые отличаются от исходной последовательности зародышевого типа, сохранены или подвергнуты мутации по типу замены на соответствующий остаток другой последовательности зародышевого типа. После получения антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые содержат одну или несколько мутаций приведения к зародышевому типу, можно легко протестировать в отношении одного или нескольких желаемых свойств, таких как улучшенная специфичность связывания, увеличенная аффинность связывания, улучшенные или усиленные антагонистические или агонистические биологические свойства (в зависимости от ситуации), сниженная иммуногенность и т. д. Настоящее изобретение охватывает применение антител и антигенсвязывающих фрагментов, полученных этим общим способом.

Настоящее изобретение также включает способы, предусматривающие применение антител к IL-6R, содержащих варианты любых из аминокислотных последовательностей HCVR, LCVR и/или CDR, раскрытых в данном документе, с одной или несколькими консервативными заменами. Например, настоящее изобретение включает применение антител к IL-6R, содержащих аминокислотные последовательности HCVR, LCVR и/или CDR с, например, 10 или меньше, 8 или меньше, 6 или меньше, 4 или меньше и т. д. консервативными аминокислотными заменами относительно любой из аминокислотных последовательностей HCVR, LCVR и/или CDR, раскрытых в данном документе.

В соответствии с настоящим изобретением в различных вариантах осуществления антитело к IL-6R или его антигенсвязывающий фрагмент содержат вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), вариабельную область легкой цепи (LCVR) и/или области, определяющие комплементарность (CDR), содержащие любые из аминокислотных последовательностей антител к IL-6R, которые заявлены в патенте США № 7582298, включенном в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Антитело к IL-6R или его антигенсвязывающий фрагмент, которые можно применять в контексте способов по настоящему изобретению, содержит области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR) в HCVR, содержащей аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 1, и области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR) в LCVR, содержащей аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 2. В соответствии с определенными вариантами осуществления антитело к IL-6R или его антигенсвязывающий фрагмент содержат три HCDR (т. е. HCDR1, HCDR2 и HCDR3) и три LCDR (т. е. LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где HCDR1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 3; HCDR2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 4; HCDR3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 5; LCDR1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 6; LCDR2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 7, и LCDR3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 8. В еще нескольких других вариантах осуществления антитело к IL-6R или его антигенсвязывающий фрагмент содержат HCVR, содержащую SEQ ID NO: 1, и LCVR, содержащую SEQ ID NO: 2.

В определенных вариантах осуществления антитело к IL-6R или его антигенсвязывающий фрагмент содержат тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO: 9, и легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 10. В соответствии с определенными иллюстративными вариантами осуществления способы по настоящему изобретению включают применение антитела к IL-6R, называемого и известного из уровня техники как сарилумаб, или его биоэквивалента.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 1 представляет собой

EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASRFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGRIGYADSVKGRFTISRDNAENSLFLQMNGLRAEDTALYYCAKGRDSFDIWGQGTMVTVSS.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 2 представляет собой

DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYGASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFASYYCQQANSFPYTFGQGTKLEIK.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 3 представляет собой RFTFDDYA.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 4 представляет собой ISWNSGRI.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 5 представляет собой AKGRDSFDI.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 6 представляет собой QGISSW.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 7 представляет собой GAS.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 8 представляет собой QQANSFPYT.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 9 представляет собой

EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASRFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGRIGYADSVKGRFTISRDNAENSLFLQMNGLRAEDTALYYCAKGRDSFDIWGQGTMVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK.

Аминокислотная последовательность под SEQ ID NO: 10 представляет собой

DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYGASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFASYYCQQANSFPYTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC.

Термин "биоэквивалент", используемый в данном документе, относится к молекуле, характеризующейся сходной биологической доступностью (коэффициентом и степенью доступности) после введения в той же молярной дозе и в сходных условиях (например, посредством того же пути введения), так что можно ожидать, что в том, что касается как эффективности, так и безопасности, ее эффект является по сути таким же, как и у молекулы для сравнения. Две фармацевтические композиции, содержащие антитело к IL-6R, являются биоэквивалентными, если они являются фармацевтически эквивалентными, что означает, что они содержат одно и то же количество активного ингредиента (например, антитела к IL-6R) в одной и той же лекарственной форме для одного и того же пути введения и соответствуют одним и тем же или сопоставимым стандартам. Биоэквивалентность можно определить, например, посредством исследования in vivo, сравнивая фармакокинетические параметры двух композиций. Параметры, обычно используемые в исследованиях биоэквивалентности, включают пиковую концентрацию в плазме крови (Cmax) и площадь под кривой зависимости концентрации лекарственного средства в плазме крови от времени (AUC).

Настоящее изобретение в определенных вариантах осуществления относится к способам, включающим введение субъекту антитела, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2.

В настоящем изобретении предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие такое антитело, и способы применения этих композиций.

Антитело, которое содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, представляет собой антитело, которое специфично связывается с рецептором интерлейкина-6 человека (hIL-6R). См. международную публикацию № WO2007/143168, включенную в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В определенных вариантах осуществления антитело, которое содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, представляет собой сарилумаб.

DMARD

DMARD представляют собой лекарственные средства, определяемые их применением при ревматоидном артрите для замедления прогрессирования заболевания.

DMARD подразделяются на синтетические (sDMARD) и биологические (bDMARD). Синтетические DMARD включают неисчерпывающий перечень из метотрексата, сульфасалазина, лефлуномида и гидроксихлорохина. Биологические DMARD включают неисчерпывающий перечень из адалимумаба, голимумаба, этанерцепта, абатацепта, инфликсимаба, ритуксимаба и тоцилизумаба.

Способы введения и составы

Описанные в данном документе способы включают введение пациенту терапевтически эффективного количества антитела к hIL-6R в отдельности и необязательно терапевтически эффективного количества антитела к hIL-6R в комбинации с DMARD. Используемая в данном документе фраза "терапевтически эффективное количество" означает дозу терапевтического средства, которая приводит к выявляемому улучшению одного или нескольких симптомов, ассоциированных с депрессией или депрессивным расстройством, или которая вызывает биологический эффект (например, уменьшение уровня определенного биомаркера), коррелирующий с лежащим(лежащими) в основе патологическим(патологическими) механизмом(механизмами), приводящим(приводящими) к состоянию или симптому(симптомам) депрессии или депрессивного расстройства. Например, "терапевтически эффективным количеством" считается доза антитела к hIL-6R, которая вызывает улучшение любого из следующих симптомов или состояний: потери уверенности и самооценки, неуместного чувства вины, мыслей о смерти и самоубийстве, снижения концентрации внимания, нарушения сна и аппетита, а также чувства печали и потери интереса в большинстве ситуаций.

Антитело в различных вариантах осуществления вводят субъекту. В различных вариантах осуществления антитело вводят один раз в две недели. "Один раз в две недели" имеет то же значение, что и "q2w" или "один раз за две недели", т. е. что антитело вводят один раз за двухнедельный период времени. В соответствии с определенными вариантами осуществления антитело вводят подкожно.

В определенных вариантах осуществления вводят приблизительно 150 мг или приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели. В этом контексте "приблизительно" относится к количеству в пределах 5% от указанного количества. Например, "приблизительно 150 мг" означает диапазон от 142 до 158 мг, и "приблизительно 200 мг" означает диапазон от 90 до 210 мг. В соответствии с определенными вариантами осуществления антитело вводят подкожно.

Антитело вводят субъекту в различных вариантах осуществления в составе, содержащем подходящие носители, наполнители и другие средства для обеспечения улучшенного переноса, доставки, переносимости и т. п. и подходящего для подкожной инъекции.

Инъекционные препараты могут быть получены с помощью общеизвестных способов. Например, инъекционные препараты можно получать, например, путем растворения, суспендирования или эмульгирования антитела или его соли, описанных выше, в стерильной водной среде или масляной среде, традиционно используемой для инъекций. В качестве водной среды для инъекций представлены, например, физиологический раствор, изотонический раствор, содержащий глюкозу и другие вспомогательные средства, и т. д., которые можно использовать в комбинации с подходящим солюбилизирующим средством, таким как спирт (например, этанол), многоатомный спирт (например, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль), неионогенное поверхностно-активное вещество [например, полисорбат 20 или 80, HCO-50 (полиоксиэтиленовый (50 моль) аддукт гидрогенизированного касторового масла)] и т. д. В качестве масляной среды используют, например, кунжутное масло, соевое масло и т. д., которые можно использовать в комбинации с солюбилизирующим средством, таким как бензилбензоат, бензиловый спирт и т. д. Полученный таким образом инъекционный препарат может быть налит в подходящую ампулу.

Антитело обычно составляют согласно описанному в данном документе и в международной публикации № WO2011/085158, включенной в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В различных вариантах осуществления антитело вводят в виде водного забуференного раствора с pH приблизительно 6,0, содержащего:

- приблизительно 21 мМ гистидина,

- приблизительно 45 мМ аргинина,

- приблизительно 0,2% (вес/об.) полисорбата 20,

- приблизительно 5% (вес/об.) сахарозы и

- от приблизительно 100 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл антитела.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят в виде водного буферного раствора с pH 6,0, содержащего:

- приблизительно 21 мМ гистидина,

- приблизительно 45 мМ аргинина,

- приблизительно 0,2% (вес/об.) полисорбата 20,

- приблизительно 5% (вес/об.) сахарозы и

- по меньшей мере приблизительно 130 мг/мл антитела.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят в виде водного буферного раствора с pH приблизительно 6,0, содержащего:

- приблизительно 21 мМ гистидина,

- приблизительно 45 мМ аргинина,

- приблизительно 0,2% (вес/об.) полисорбата 20,

- приблизительно 5% (вес/об.) сахарозы и

- приблизительно 131,6 мг/мл антитела.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят в виде водного буферного раствора с pH приблизительно 6,0, содержащего:

- приблизительно 21 мМ гистидина,

- приблизительно 45 мМ аргинина,

- приблизительно 0,2% (вес/об.) полисорбата 20,

- приблизительно 5% (вес/об.) сахарозы и

- приблизительно 175 мг/мл антитела.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят в виде водного буферного раствора с pH 6,0, содержащего:

- 21 мМ гистидина,

- 45 мМ аргинина,

- 0,2% (вес/об.) полисорбата 20,

- 5% (вес/об.) сахарозы и

- от 100 мг/мл до 200 мг/мл антитела.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят в виде водного буферного раствора с pH 6,0, содержащего:

- 21 мМ гистидина,

- 45 мМ аргинина,

- 0,2% (вес/об.) полисорбата 20,

- 5% (вес/об.) сахарозы и

- по меньшей мере 130 мг/мл антитела.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят в виде водного буферного раствора с pH 6,0, содержащего:

- 21 мМ гистидина,

- 45 мМ аргинина,

- 0,2% (вес/об.) полисорбата 20,

- 5% (вес/об.) сахарозы и

- 131,6 мг/мл антитела.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят в виде водного буферного раствора с pH 6,0, содержащего:

- 21 мМ гистидина,

- 45 мМ аргинина,

- 0,2% (вес/об.) полисорбата 20,

- 5% (вес/об.) сахарозы и

- 175 мг/мл антитела.

Антитело согласно настоящему изобретению можно вводить субъекту с помощью любого приемлемого устройства или механизма. Например, введение можно осуществлять с помощью шприца и иглы или с помощью многоразового устройства для доставки в виде шприца-ручки и/или автоинъектора. Способы по настоящему изобретению включают применение целого ряда многоразовых устройств для доставки в виде шприцев-ручек и/или автоинъекторов для введения антитела (или фармацевтического состава, содержащего антитело). Примеры таких устройств включают без ограничения AUTOPEN™ (Owen Mumford, Inc., Вудсток, Великобритания), шприц-ручку DISETRONIC™ (Disetronic Medical Systems, Бургдорф, Швейцария), шприц-ручку HUMALOG MIX 75/25™, шприц-ручку HUMALOG™, шприц-ручку HUMALIN 70/30™ (Eli Lilly and Co., Индианаполис, Индиана), NOVOPEN™ I, II и III (Novo Nordisk, Копенгаген, Дания), NOVOPEN JUNIOR™ (Novo Nordisk, Копенгаген, Дания), шприц-ручку BD™ (Becton Dickinson, Франклин Лейкс, Нью-Джерси), OPTIPEN™, OPTIPEN PRO™, OPTIPEN STARLET™ и OPTICLIK™ (Sanofi-Aventis, Франкфурт, Германия), при этом упомянуты лишь несколько из них. Примеры одноразовых устройств для доставки в виде шприцев-ручек и/или автоинъекторов, применяемых при подкожной доставке фармацевтической композиции, описанной в данном документе, включают без ограничения шприц-ручку SOLOSTAR™ (Sanofi-Aventis), FLEXPEN™ (Novo Nordisk) и KWIKPEN™ (Eli Lilly), автоинъектор SURECLICK™ (Amgen, Таузанд-Окс, Калифорния), PENLET™ (Haselmeier, Штутгарт, Германия), EPIPEN (Dey, L.P.), шприц-ручку HUMIRA™ (Abbott Labs, Эбботт-Парк, Иллинойс), автоинъектор DAI® (SHL Group) и любой автоинъектор, в котором используется технология PUSHCLICK™ (SHL Group), при этом упомянуты лишь несколько из них.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят с помощью предварительно заполненного шприца.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят с помощью предварительно заполненного шприца, имеющего защитное устройство. Например, защитное устройство предупреждает случайную травму от укола иглой. В различных вариантах осуществления антитело вводят с помощью предварительно заполненного шприца, имеющего защитное устройство ÈRIS^TM (West Pharmaceutical Services Inc.). См. также патенты США №№ 5215534 и 9248242, включенные в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В определенных вариантах осуществления антитело вводят с помощью автоинъектора. В различных вариантах осуществления антитело вводят с помощью автоинъектора, в котором используется технология PUSHCLICK™ (SHL Group). В различных вариантах осуществления автоинъектор представляет собой устройство, содержащее шприц, которое обеспечивает возможность введения субъекту дозы композиции и/или антитела. См. также патенты США №№ 9427531 и 9566395, включенные в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Популяция пациентов

В соответствии с настоящим изобретением "субъект" означает субъекта-человека или пациента-человека.

Антитело в соответствии с настоящим изобретением в различных вариантах осуществления вводят субъектам, у которых имеются концентрации сывороточных биомаркеров, описанные выше.

В соответствии с настоящим изобретением субъект, которого его или ее врач считает "получавшим неэффективное лечение", является субъектом, который в различных вариантах осуществления продемонстрировал непереносимость одного или нескольких DMARD, протестированных врачом, и/или субъектом, который продемонстрировал недостаточный ответ на одно или несколько DMARD, протестированных врачом, как правило, субъектом, которого врач считает тем, у кого по-прежнему проявляется или имеется активный ревматоидный артрит, несмотря на предыдущее введение одного или нескольких DMARD. "Активный ревматоидный артрит", как правило, определяется как:

- по меньшей мере 6 из 66 припухших суставов и 8 из 68 болезненных суставов согласно подсчетам врача при обычном количественном обследовании числа припухших и болезненных суставов,

- уровень C-реактивного белка в высокочувствительном анализе (hs-CRP) ≥ 8 мг/л или ESR ≥ 28 мм/ч.,

- DAS28-ESR > 5,1.

В определенных вариантах осуществления "умеренный активный RA" у субъекта определяется как по меньшей мере 8 и не более 26 из 68 болезненных суставов и по меньшей мере 6 и/или не более 16 из 66 припухших суставов у субъекта. В определенных вариантах осуществления "тяжелый активный RA" у субъекта определяется как (i) более 27 из 68 болезненных суставов и/или по меньшей мере 17 из 66 припухших суставов у субъекта.

В некоторых вариантах осуществления субъект, который ранее получал неэффективное лечение ревматоидного артрита посредством введения по меньшей мере одного DMARD, отличного от антитела, является субъектом, который ранее получал неэффективное лечение ревматоидного артрита посредством введения DMARD. В некоторых вариантах осуществления DMARD выбран из группы, состоящей из метотрексата, сульфасалазина, лефлуномида и гидроксихлорохина. В различных вариантах осуществления DMARD представляет собой метотрексат.

В некоторых вариантах осуществления субъект, который ранее получал неэффективное лечение ревматоидного артрита посредством введения одного или нескольких DMARD, отличного от антитела, является субъектом, у которого наблюдались недостаточный ответ на метотрексат или его непереносимость.

В соответствии с настоящим изобретением для тех субъектов, которые ранее получали неэффективное лечение ревматоидного артрита посредством введения одного или нескольких DMARD, отличных от антитела, одно или несколько DMARD больше не вводятся субъекту, и в различных вариантах осуществления антитело вводят субъекту в отдельности в режиме монотерапии. См. международную публикацию № WO2017155990, которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В некоторых вариантах осуществления субъект характеризуется непереносимостью DMARD ввиду одной или нескольких физических реакций, состояний или симптомов вследствие лечения с помощью DMARD. Физические реакции, состояния или симптомы могут включать аллергические реакции, боль, тошноту, диарею, азотемию, желудочное кровотечение, кишечное кровотечение, язвы в полости рта, уменьшение количества тромбоцитов в крови, перфорацию кишечника, бактериальную инфекцию, воспаление десен или рта, воспаление выстилки желудка или выстилки кишечника, бактериальный сепсис, язву желудка, язву кишечника, чувствительность кожи к солнцу, головокружение, потерю аппетита, упадок сил и рвоту. В некоторых вариантах осуществления непереносимость может быть определена субъектом или медицинским работником при обследовании субъекта. В различных вариантах осуществления DMARD выбран из группы, состоящей из метотрексата, сульфасалазина, лефлуномида и гидроксихлорохина. В некоторых вариантах осуществления DMARD представляет собой метотрексат.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает введение субъекту одного или нескольких дополнительных терапевтических средств в комбинации с антителом к IL-6R. Используемое в данном документе выражение "в комбинации с" означает, что дополнительные терапевтические средства вводят до фармацевтической композиции, содержащей антитело к IL-6R, после нее или одновременно с ней. В определенных вариантах осуществления субъекту вводят антитело с DMARD и/или антагонистом TNF-α.

Все публикации, упомянутые в данном документе, включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте для всех целей.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Дифференциальные эффекты сарилумаба и адалимумаба в отношении биомаркеров резорбции костей и сердечно-сосудистого риска, а также прогнозирование исходов лечения

Способы

Это рандомизированное контролируемое испытание фазы III с использованием активного препарата сравнения было полностью описано ранее (Burmester GR, Ann Rheum Dis 2017;76:840-7). Вкратце, пациентов MTX-INT/IR рандомизировали для получения 200 мг сарилумаба каждые 2 недели (q2w) или 40 мг адалимумаба q2w в течение 24 недель. В неделю 16 было разрешено повышение дозы адалимумаба до еженедельного введения для тех, у которого не было достигнуто улучшение на ≥ 20% по числу болезненных и припухших суставов. Испытание проводилось в соответствии с надлежащей клинической практикой и принципами Хельсинкской декларации; все протоколы и информационные материалы для пациентов были одобрены соответствующими комитетами по этике, и все пациенты предоставили письменное информированное согласие.

Конечные точки эффективности и PRO

Конечные точки эффективности включали: долю пациентов, достигших улучшения на ≥ 20%/50%/70% в соответствии с критериями Американской коллегии ревматологов (ACR20/50/70), клинический индекс активности заболевания (CDAI) ≤ 2,8, CDAI ≤ 10, DAS28 с использованием уровня CRP (DAS28-CRP) или DAS28-ESR < 2,6 и DAS28-CRP или DAS28-ESR < 3,2.

PRO, оцениваемые в исследовании, были описаны ранее для общей популяции ITT (Strand V, Arthritis Res Ther 2018;20:129) и (оцениваемые как изменение относительно исходного уровня в неделю 24) включали общую оценку активности заболевания пациентом по визуальной аналоговой шкале (VAS), индекс нарушения жизнедеятельности согласно опроснику для оценки состояния здоровья (HAQ-DI), балл по VAS для оценки боли, балл по подшкале утомляемости в функциональной оценке терапии хронического заболевания (FACIT), балл по VAS для оценки утренней скованности, балл влияния заболевания при ревматоидном артрите (RAID) и суммарные баллы физического (PCS) и психического (MCS) компонентов краткой формы (из 36 пунктов) опросника для оценки состояния здоровья (SF-36) на основании исследования медицинских результатов, которые включают домены физического функционирования, ролевого функционирования, обусловленного физическим состоянием, интенсивности боли, общего состояния здоровья, жизненной активности, социального функционирования, ролевого функционирования, обусловленного эмоциональным состоянием, и психического здоровья.

Сбор сыворотки крови и анализ биомаркеров

Пациентов отбирали для этого анализа биомаркеров, если они были рандомизированы и получали лечение с помощью сарилумаба или адалимумаба в течение периода лечения в двойном слепом режиме, предоставили письменное информированное согласие на будущее использование образцов, и при этом образец сыворотки крови у них был взят перед введением дозы (на исходном уровне) и поддавался оценке (в популяции для анализа биомаркеров). Образцы сыворотки крови собирали и хранили замороженными на исходном уровне и после лечения до недели 24 у 307 пациентов в популяции, сформированной в соответствии с назначенным лечением (сарилумаб: n=153; адалимумаб: n=154). Результаты на исходном уровне представлены в таблице 1.

Таблица 1. Концентрации биомаркеров в сыворотке крови на исходном уровне в популяции для анализа биомаркеров

Биомаркер Адалимумаб,
40 мг q2w
(n=154) Сарилумаб, 200 мг q2w (n=153) Нижний терциль Средний терциль Верхний терциль Диапазон референсных значений^a SAA, нг/л 22806,0
(5817,2, 115200,0) 16089,0
(4997,5, 85918,0) 3734,7
(2192,7, 5346,4) 18549,5
(11832,0, 30082,0) 174900,0
(105200,0, 256000,0) 1000,0-9249,3 CRP, мг/л 9,4 (3,8, 33,5) 7,8 (2,8, 24,7) 1,9 (1,0, 3,4) 8,5 (6,9, 13,1) 37,6 (27,9, 65,1) ≤ 2,9 Lp(a), мг/л 235,5 (111,0, 559,0) 179,0 (78,0, 402,0)* 48,5
(17,5, 100,0) 192,0
(157,0, 236,0) 689,5
(450,0, 1116,0) 19,0-1028,0 MMP-3, нг/мл 44,0 (25,2, 80,9) 40,8 (19,3, 74,4) 16,0 (10,3, 20,8) 42,8 (35,5, 54,1) 99,9 (77,0, 154,3) 6,0-15,8 Общий RANKL, пмоль/л 484,5
(254,7, 1423,1) 547,6
(268,5, 1361,3) 200,1
(136,7, 258,5) 515,0
(424,3, 674,0) 2252,8
(1417,6, 3657,6) 35,1-639,7 P1NP, нг/мл 45,9 (34,9, 63,9) 44,7 (30,3, 59,9) 27,6 (21,4, 32,9) 45,6 (41,6, 50,1) 73,2 (63,0, 87,6) 47,9-204,1 OPG, пмоль/л 5,9 (5,0, 8,0) 6,0 (4,7, 7,5) 4,3 (3,9, 5,0) 5,9 (5,6, 6,5) 8,8 (7,7, 10,5) 3,6-7,9 OC, нг/мл 19,0 (13,8, 26,0) 18,0 (13,9, 25,8) 12,0 (9,6, 13,8) 18,6 (16,8, 21,1) 28,9 (26,0, 35,6) 13,9-30,6 CXCL13, пг/мл 120,1 (72,4, 184,7) 112,8 (70,8, 180,8) 61,8 (52,4, 72,0) 116,4 (98,2, 130,6) 236,8 (180,8, 323,9) 37,8-153,6 sICAM-1, нг/мл 258,6 (212,1, 324,8) 257,3 (212,7, 304,0) 199,3 (179,7, 212,1) 257,7 (239,7, 272,3) 339,4 (313,7, 380,0) 186,0-331,0 Железо, мкмоль/л 10,5 (7,0, 14,9) 11,3 (7,2, 16,0) 6,1 (4,2, 7,0) 10,9 (9,8, 12,2) 17,2 (15,5, 20,3) 10,8-28,9 Ферритин, нг/мл 80,0 (41,1, 174,0) 74,9 (35,1, 130,6) 24,9 (13,9, 35,5) 76,7 (60,5, 93,5) 204,3 (154,9, 283,4) 18,6-148,3 TIBC, мкг/дл 321,5 (293,5, 350,5) 324,0 (303,0, 361,0) 286,0 (267,0, 297,0) 322,0 (313,0, 332,0) 373,0 (357,0, 397,0) 247,2-363,0 Гепсидин, нг/мл 24,8 (9,7, 48,9) 20,9 (9,2, 39,3) 6,0 (3,7, 9,3) 23,0 (17,0, 28,9) 62,4 (43,9, 77,0) 0,6-46,4

Данные представлены в виде медианных значений (Q1, Q3) на исходном уровне. Диапазон референсных значений для CRP определен на основе результатов в популяции здоровых мужчин и женщин (диапазон референсных значений предоставлен Covance); для всех других биомаркеров диапазон референсных значений определен на основе результатов у здоровых женщин в постменопаузе (от 5-го до 95-го процентиля; диапазоны референсных значений предоставлены Bioclinica). *Нескорректированное P-значение для критерия Уилкоксона < 5%. CRP: С-реактивный белок; CXCL13: хемокиновый (содержащий мотив C-X-C) лиганд 13; Lp(a): липопротеин (а); MMP-3: матриксная металлопротеиназа-3; OC: остеокальцин; OPG: остеопротегерин; P1NP: N-концевой пропептид проколлагена 1 типа; Q: квартиль; q2w: каждые 2 недели; RANKL: лиганд рецептора-активатора ядерного фактора κB; SAA: сывороточный амилоид А; sICAM-1: растворимая внутриклеточная молекула адгезии 1; TIBC: общая железосвязывающая способность.

Биомаркеры анализировали ретроспективно (за исключением CRP) в один или два момента времени после исходного уровня до недели 24 (таблица 2). Моменты времени, выбранные для анализа, были определены на основании предшествующих данных после лечения с помощью сарилумаба либо литературных источников, из которых можно сделать предположение об острых или латентных эффектах терапии RA в отношении конкретных маркеров. Анализируемые характеристики для большинства биомаркеров были описаны ранее (Gabay C, 2018).

Таблица 2. Индивидуальный график оценки сывороточных биомаркеров

Функция Биомаркер Исходный уровень Неделя 2 Неделя 4 Неделя 8 Неделя 12 Неделя 16 Неделя 20 Неделя 24 Ответ острой фазы SAA X X X CRP X X X X X X X Атеротромбоз Lp(a) X X X Синовиальное воспаление MMP-3 X X Ремоделирование костей Общий RANKL X X X P1NP X X OPG X X X Остеокальцин X X Маркер, отражающий синовиальный инфильтрат лимфоидных клеток
Маркер, отражающий синовиальный инфильтрат миелоидных клеток CXCL13 X X X sICAM-1 X X X Анемия хронических заболеваний Железо X X Ферритин X X TIBC X X Гепсидин X X

CRP: С-реактивный белок; CXCL13: хемокиновый (содержащий мотив C-X-C) лиганд 13; Lp(a): липопротеин (а); MMP-3: матриксная металлопротеиназа-3; OPG: остеопротегерин; P1NP: N-концевой пропептид проколлагена 1 типа; RANKL: лиганд рецептора-активатора ядерного фактора κB; SAA: сывороточный амилоид А; sICAM-1: растворимая внутриклеточная молекула адгезии 1; TIBC: общая железосвязывающая способность.

Статистический анализ

Исходные уровни биомаркеров сравнивали между группами лечения с использованием критерия Уилкоксона. Коэффициенты ранговой корреляции Спирмена на исходном уровне вычисляли в общей популяции для анализа биомаркеров.

Для оценки фармакодинамических изменений в концентрациях циркулирующих биомаркеров между группами лечения в каждый момент времени были описаны абсолютные и процентные изменения относительно исходного уровня. Кроме того, процентные изменения концентраций биомаркеров анализировали с помощью непараметрических методов ввиду ненормальных распределений. Для биомаркеров, измеренных один раз после исходного уровня, осуществляли ранговый ковариационный анализ (ANCOVA) с поправкой на исходное значение. Для биомаркеров, измеренных дважды после исходного уровня, выполняли модель со смешанными эффектами для повторных измерений на данных, подвергнутых преобразованию рангов (метод типа дисперсионного анализа [ANOVA]), с лечением, визитом и взаимодействием лечение-визит в качестве фиксированных эффектов, значением исходного уровня биомаркера, подвергнутым преобразованию рангов, взаимодействием значение исходного уровня биомаркера, подвергнутое преобразованию рангов-визит в качестве фиксированных ковариат, предполагая неструктурированную ковариационную структуру. P-значения корректировали с учетом уровня ложноположительных результатов (порог процедуры Беньямини-Хохберга 5%). Количество пациентов с аномальными уровнями биомаркеров на исходном уровне (в соответствии с диапазонами референсных значений, предоставленными испытательной лабораторией), которые нормализовались при лечении, сравнивали между группами с использованием критерия χ2; сообщаются нескорректированные P-значения.

Процентные изменения концентраций биомаркеров в неделю 24 сравнивали между пациентами с клиническим ответом на лечение и пациентами, не отвечающими на лечение, в один и тот же визит в каждой группе лечения с использованием сходных непараметрических способов. P-значения также корректировали с учетом уровня ложноположительных результатов.

Для бинарных конечных точек эффективности прогностические эффекты значений исходных уровней биомаркеров в отношении эффективности сарилумаба в сравнении с адалимумабом тестировали с использованием логистической регрессии с группой лечения и регионом в качестве фиксированных эффектов, значением исходного уровня биомаркера в качестве непрерывной ковариаты и взаимодействием исходный уровень биомаркера-группа лечения. Для непрерывных PRO использовалась линейная регрессия с теми же эффектами, что указаны выше, а также исходное значение PRO в качестве ковариаты. Нескорректированные P-значения для взаимодействия сообщаются для оценки прогностической ценности биомаркеров. Аналогичные анализы выполняли после распределения пациентов по категориям высоких, средних и низких уровней биомаркеров на исходном уровне с использованием терцильных значений в популяции для анализа биомаркеров. Кроме того, выполняли попарные сравнения ответов между сарилумабом и адалимумабом по отдельности у пациентов с высокими, средними и низкими уровнями биомаркеров, а также выводили оценки отношений шансов (OR) по критерию Мантеля-Гензеля, стратифицированные по регионам, и 95% доверительные интервалы (CI), которые представляли графически с помощью лесовидных диаграмм. Для непрерывных PRO линейную регрессию выполняли отдельно в каждом терциле биомаркеров, и были получены различия определенных методом наименьших квадратов (LSM) средних значений изменений с 95% CI между обоими видами лечения.

Различные комбинации циркулирующих CXCL13 и sICAM-1 (низкие или высокие уровни, определенные относительно медианных исходных уровней) оценивали для прогнозирования ответа на сарилумаб с использованием оценок OR по критерию Мантеля-Гензеля, выведенных для каждой комбинации.

Все анализы выполняли с использованием SAS версии 9.2 или выше (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина, США).

Анализ биомаркеров

Концентрации всех биомаркеров в сыворотке крови, за исключением С-реактивного белка (CRP), анализировали ретроспективно с использованием валидированного фирменного твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) в Bioclinica Lab (Лион, Франция). CRP оценивали в Covance Laboratories (Индианаполис, Индиана, США, Женева, Швейцария или Сингапур) с использованием высокочувствительного нефелометрического анализа CRP от Siemens. Внутрианалитическая сходимость составляла < 3%, межаналитическая сходимость составляла < 5,4%, и диапазон референсных значений для здоровых пациентов из контрольной группы составлял ≤2,87 мг/л. Уровни хемокинового (содержащего мотив C-X-C) лиганда 13 и растворимой внутриклеточной молекулы адгезии 1 в сыворотке крови оценивали с помощью ELISA (набор для ELISA Quantikine® ELISA, R&D Systems, Миннеаполис, Миннесота, США) с межсерийным коэффициентом вариации (CV) < 8% и внутрисерийным CV < 15%. Уровень N-концевого пропептида проколлагена 1 типа (P1NP) в сыворотке крови измеряли с помощью анализа S P1NP на Roche Modular с внутрисерийным и межсерийным CV < 7%. Уровень сывороточного амилоида А измеряли с помощью ELISA (Anogen) с внутрисерийным и межсерийным CV < 7%. Уровень ферритина измеряли с помощью анализа сывороточного ферритина на Roche Modular с внутрисерийным и межсерийным CV < 3%. Общую железосвязывающую способность измеряли с помощью анализатора Kone 20, Konelab (общая железосвязывающая способность [RANDOX]) с внутрисерийным и межсерийным CV < 5,5% и < 4,7% соответственно. Уровни железа в сыворотке крови измеряли с помощью анализатора Kone 20, Konelab (железо [Thermo Scientific]) с внутрисерийным и межсерийным CV < 7,8% и < 6% соответственно. Уровни гепсидина измеряли с помощью ELISA (HS ELISA для гепсидина-25 человека (биоактивного) [DRG]) с внутрисерийным и межсерийным CV < 9,6% и < 8,1% соответственно. Уровни биомаркеров ниже нижнего предела количественного определения (LLOQ) заменяли на LLOQ/2 во всех анализах, а уровни выше верхнего предела количественного определения (ULOQ) на ULOQ.

Демографические данные на исходном уровне, характеристики заболевания, эффективность и уровни биомаркеров

Демографические данные на исходном уровне и характеристики заболевания в популяции для анализа биомаркеров в целом были сходными с соответствующими показателями в общей популяции, сформированной в соответствии с назначенным лечением (ITT) (таблица 2). В общем эффективность и PRO также были в целом сходными между популяцией ITT и популяцией для анализа биомаркеров (таблица 3).

Таблица3. Эффективность и PRO в неделю 24 в популяции для анализа биомаркеров и популяции ITT

Популяция ITT Популяция для анализа биомаркеров Адалимумаб,
40 мг q2w
(n=185) Сарилумаб,
200 мг q2w
(n=184) Адалимумаб,
40 мг q2w
(n=154) Сарилумаб,
200 мг q2w
(n=153) Результаты определения эффективности в неделю 24^a Отвечающие на лечение с ACR20, % 58,4 71,7 59,1 73,9 Отвечающие на лечение с ACR50, % 29,7 45,7 29,2 49,7 Отвечающие на лечение с ACR70, % 11,9 23,4 12,3 25,5 ΔDAS28-ESR -2,2 (1,4) -3,4 (1,4) -2,3 (1,3) -3,4 (1,3) DAS28-ESR < 2,6, % 7,0 26,6 8,4 27,5 DAS28-ESR < 3,2, % 14,1 42,9 15,6 43,8 ΔDAS28-CRP -2,1 (1,2) -2,9 (1,3) -2,1 (1,3) -3,0 (1,2) DAS28-CRP < 2,6, % 13,5 34,2 13,0 34,6 DAS28-CRP < 3,2, % 24,3 51,6 24,0 52,3 ΔTJC -16,4 (12,0) -19,0 (13,3) -16,6 (12,3) -19,4 (12,5) ΔSJC -12,2 (9,1) -14,3 (9,6) -12,1 (8,9) -14,6 (9,8) ΔCDAI -25,5 (12,9) -29,7 (12,7) -25,9 (13,3) -30,2 (12,0) CDAI ≤ 2,8, % 2,7 7,1 3,2 7,2 CDAI ≤ 10, % 24,9 41,8 24,7 43,1 Δ общей оценки врачом по
VAS (0-100 мм) -37,3 (22,5) -45,3 (21,4) -37,6 (22,8) -45,7 (20,5) PRO в неделю 24^a ΔHAQ-DI -0,4 (0,6) -0,6 (0,7) -0,4 (0,6) -0,7 (0,7) Δ утомляемости в FACIT
(0-52) 8,2 (10,4) 10,4 (10,2) 8,4 (10,3) 11,3 (10,0) Δ общей оценки пациентом по
VAS (0-100 мм) -25,0 (25,2) -33,5 (26,2) -25,5 (24,9) -33,8 (26,3) ΔVAS для оценки боли
(0-100 мм) -27,9 (24,7) -36,4 (26,9) -28,0 (24,4) -36,9 (27,0) ΔPCS в SF-36 5,5 (7,1) 8,6 (7,7) 5,3 (7,1) 9,0 (7,6) ΔMCS в SF-36 7,0 (11,3) 8,2 (10,8) 6,9 (11,0) 8,5 (11,3) ΔVAS для оценки утренней скованности
(0-100 мм) -27,0 (27,4) -36,1 (27,9) -26,7 (27,8) -36,7 (27,3) ΔRAID (0-10) -2,1 (2,4) -3,2 (2,4) -2,1 (2,4) -3,3 (2,4)

Приведено среднее значение (стандартное отклонение), если не указано иное. Δ: абсолютное изменение относительно исходного уровня; ACR20/50/70: улучшение на 20%/50%/70% согласно критериям Американской коллегии ревматологов; CDAI: клинический индекс активности заболевания; DAS28-CRP: индекс активности заболевания (по 28 суставам) с использованием уровня С-реактивного белка; DAS28-ESR: индекс активности заболевания (по 28 суставам) с использованием скорости оседания эритроцитов; FACIT: функциональная оценка терапии хронического заболевания; HAQ-DI: индекс нарушения жизнедеятельности согласно опроснику для оценки состояния здоровья; ITT: в соответствии с назначенным лечением; MCS: суммарный балл психического компонента; PCS: суммарный балл физического компонента; PRO: исход, сообщаемый пациентом; q2w: каждые 2 недели; RAID: влияние заболевания при ревматоидном артрите; SJC: число припухших суставов; TJC: число болезненных суставов; VAS: визуальная аналоговая шкала.

Исходные уровни большинства биомаркеров в сыворотке крови были сходными между группами лечения, за исключением уровня Lp(a), который был выше в группе адалимумаба, чем в группе сарилумаба (Lp[a]: медианное значение 235,5 в сравнении с 179,0 мг/л соответственно; P-значение для критерия Уилкоксона: 0,039; таблица 1).

Корреляция между уровнями отдельных биомаркеров на исходном уровне, как правило, была низкой или умеренной (р < 0,5; фиг. 1А). Как и ожидалось, коэффициенты корреляции выше 0,7 наблюдались для маркеров воспаления (CRP и SAA; ρ=0,81), костеобразования (P1NP и OC; ρ=0,82) и анемии хронических заболеваний (ферритин и гепсидин; ρ=0,74). Умеренные корреляции наблюдались между исходными уровнями CRP, SAA или MMP-3 и количеством отдельных видов лейкоцитов (лейкоцитов и нейтрофилов; ρ от 0,4 до 0,5), а также, как и ожидалось, между уровнями железа и гемоглобина (ρ=0,57; фиг. 1B).

Фармакодинамические эффекты лечения в отношении биомаркеров

Для сравнения эффектов лечения с помощью сарилумаба и адалимумаба в отношении биомаркеров с течением времени анализировали абсолютные (таблица 4) и процентные изменения концентраций биомаркеров относительно исходного уровня до недели 24. Более значительные снижения уровней биомаркеров, ассоциированных с ответом острой фазы, наблюдались в недели 12 и 24 после лечения с помощью сарилумаба в сравнении с адалимумабом (скорректированное P-значение < 0,0001; фиг. 2A и B). Снижения уровней CRP наблюдались уже в неделю 4 при приеме сарилумаба в сравнении с адалимумабом и поддерживались на протяжении всего периода лечения (фиг. 2А).

Таблица 4. Абсолютное изменение концентраций биомаркеров относительно исходного уровня до недели 24

Медианное абсолютное изменение относительно исходного уровня (Q1, Q3) Неделя 2 Неделя 12 Неделя 24 SAA, нг/мл Адалимумаб, 40 мг q2w - -2442,7
(-22330,7, 1930,9) -476,4
(-19654,3, 3342,1) Сарилумаб,
200 мг q2w - -9066,5
(-80132,7, -1902,8) -9604,7
(-79255,8, -1398,0) CRP, мг/л Адалимумаб, 40 мг q2w - -1,3
(-13,7, 1,3) -1,3
(-13,7, 3,5) Сарилумаб,
200 мг q2w - -6,8
(-22,9, -1,6) -6,6
(-22,8, -1,3) Lp(a), мг/л Адалимумаб, 40 мг q2w - -2,0
(-54,0, 28,0) -4,5
(-40,0, 28,0) Сарилумаб,
200 мг q2w - -59,0
(-134,0, -13,0) -60,3
(-157,0, -21,0) MMP-3, нг/мл Адалимумаб, 40 мг q2w - - -5,6
(-23,6, 6,3) Сарилумаб,
200 мг q2w - - -6,8
(-33,1, 1,4) Общий RANKL, пмоль/л Адалимумаб, 40 мг q2w 15,9
(-7,2, 129,1) - 31,5
(-93,5, 223,2) Сарилумаб,
200 мг q2w -10,5
(-69,5, 31,0) - -76,8
(-438,5, 20,4) P1NP, нг/мл Адалимумаб, 40 мг q2w - - 2,0
(-5,5, 13,5) Сарилумаб,
200 мг q2w - - 8,6
(-0,8, 18,7) OPG, пмоль/л Адалимумаб, 40 мг q2w -0,2
(-0,7, 0,3) - 0,2
(-0,6, 0,9) Сарилумаб,
200 мг q2w 0,1
(-0,5, 0,7) - 0,1
(-0,7, 0,7) OC, нг/мл Адалимумаб, 40 мг q2w - - 0,9
(-1,7, 5,1) Сарилумаб,
200 мг q2w - - 2,4
(-1,4, 5,7) CXCL13, пг/мл Адалимумаб, 40 мг q2w -45,4
(-81,7, -22,9) - -30,5
(-65,7, -1,5) Сарилумаб,
200 мг q2w -12,8
(-41,0, 5,6) - -35,7
(-80,5, -4,5) sICAM-1 Адалимумаб, 40 мг q2w -23,2
(-37,8, -9,3) - -10,8
(-41,7, 14,4) Сарилумаб,
200 мг q2w -0,7
(-15,6, 12,8) - -11,0
(-36,7, 1,9) Железо, мкмоль/л Адалимумаб, 40 мг q2w 1,4
(-0,6, 4,5) - - Сарилумаб,
200 мг q2w 3,7
(0,5, 8,3) - - Ферритин, нг/мл Адалимумаб, 40 мг q2w -8,5
(-31,7, 0,5) - - Сарилумаб,
200 мг q2w -7,7
(-26,4, 0,1) - - TIBC, мкг/дл Адалимумаб, 40 мг q2w 9,0
(-2,0, 22,0) - - Сарилумаб,
200 мг q2w 20,0
(5,0, 35,0) - - Гепсидин, нг/мл Адалимумаб, 40 мг q2w -5,8
(-19,1, -0,1) - - Сарилумаб,
200 мг q2w -3,3
(-16,3, 0,4) - -

Объем выборки в общей популяции для анализа биомаркеров: 40 мг адалимумаба q2w: n=154, 200 мг сарилумаба q2w: n=153. CRP: С-реактивный белок; CXCL13: хемокиновый (содержащий мотив C-X-C) лиганд 13; Lp(a): липопротеин (а); MMP-3: матриксная металлопротеиназа-3; OC: остеокальцин; OPG: остеопротегерин; P1NP: N-концевой пропептид проколлагена 1 типа; Q: квартиль; q2w: каждые 2 недели; RANKL: лиганд рецептора-активатора ядерного фактора κB; SAA: сывороточный амилоид А; sICAM-1: растворимая внутриклеточная молекула адгезии 1; TIBC: общая железосвязывающая способность.

В неделю 24 лечение с помощью сарилумаба по сравнению с адалимумабом приводило к увеличению концентраций P1NP, являющегося маркером активации остеобластов (скорректированное P-значение=0,027; фиг. 2C). У пациентов, получавших лечение с помощью сарилумаба, в сравнении с адалимумабом также наблюдалось численное увеличение уровня OC, являющегося другим маркером активности остеобластов (фиг. 3А). Кроме того, снижение уровней общего RANKL, являющегося маркером резорбции костей, наблюдалось уже в неделю 2 при приеме сарилумаба по сравнению с адалимумабом и сохранялось до недели 24 (скорректированное P-значение < 0,0001; фиг. 3B); в дополнение, после лечения с помощью адалимумаба наблюдалось численное увеличение уровня общего RANKL. Транзиторное уменьшение уровня OPG, являющегося "ловушкой" для RANKL, наблюдалось после лечения с помощью адалимумаба в неделю 2, но не сохранялось до недели 24 (фиг. 3C). Кроме того, при приеме сарилумаба наблюдалось более значительное снижение уровней MMP-3 в неделю 24 (скорректированное P-значение=0,020; фиг. 3D).

Также исследовали эффекты сарилумаба и адалимумаба в отношении биомаркеров, ассоциированных с маркерами, которые, как предполагается, отражают наличие синовиальных инфильтратов лимфоидных и миелоидных клеток - CXCL13 и sICAM-1 соответственно. Хотя через 2 недели после лечения с помощью адалимумаба в сравнении с сарилумабом наблюдались более значительные снижения уровней этих биомаркеров, эти эффекты не сохранялись до недели 24 (фиг. 4).

Авторы настоящего изобретения также исследовали эффекты лечения в отношении параметров, ассоциированных с анемией хронических заболеваний. В популяции ITT (Burmester GR, Arthritis Rheumatol 2018;70) сарилумаб в сравнении с адалимумабом приводил к большему увеличению уровней гемоглобина в неделю 24 (LSM изменений относительно исходного уровня составляет 0,59 в сравнении с 0,08 г/дл; различие LSM составляет 0,52 г/дл [95% CI: 0,32, 0,71; номинальное P-значение < 0,001]). В этом анализе при приеме как сарилумаба, так и адалимумаба наблюдались снижения уровней гепсидина и ферритина в неделю 2. В отличие от этого, при приеме сарилумаба по сравнению с адалимумабом наблюдались увеличения уровней железа и TIBC в неделю 2 после лечения (фиг. 5). При приеме сарилумаба в сравнении с адалимумабом наблюдалось снижение уровней липидных частиц Lp(a) в неделю 24 (скорректированное P-значение < 0,0001; фиг. 6A).

У подгруппы пациентов были аномальные исходные уровни биомаркеров по сравнению с диапазонами референсных значений. У этих пациентов нормализация уровней CRP и SAA в неделю 24 была очевидной у большей процентной доли пациентов, получавших лечение с помощью сарилумаба, чем в случае с адалимумабом (нескорректированное P-значение < 0,0001). Нормализация уровней общего RANKL, OPG и Lp(a) в неделю 24 происходила у численно большей процентной доли пациентов, получавших лечение с помощью сарилумаба, в сравнении с адалимумабом (фиг. 6B).

Взаимосвязь между изменениями уровней биомаркеров и клиническими ответами

Чтобы установить, были ли изменения уровней биомаркеров после лечения в неделю 24 ассоциированы с клинической эффективностью, сравнивали изменения между пациентами, отвечающими на лечение, и пациентами, не отвечающими на лечение, получавшими лечение с помощью сарилумаба и адалимумаба. Медианные процентные изменения уровней общего RANKL, OPG, P1NP, OC и Lp(a) в неделю 24 различались незначительно между пациентами, отвечающими на лечение, и пациентами, не отвечающими на лечение (данные не показаны). Однако снижение уровней SAA относительно исходного уровня в неделю 24 было более значительным у пациентов, отвечающих на лечение с помощью адалимумаба, с ACR20 и DAS28-CRP < 3,2, чем у пациентов, не отвечающих на такое лечение (-33,3% в сравнении с 0,0% соответственно; номинальное P-значение=0,0038, и -39,2% в сравнении с 0,0% соответственно; номинальное P-значение=0,0061, соответственно). У пациентов, отвечающих на лечение с помощью адалимумаба, с ACR20 также наблюдалось более значительное снижение уровней MMP-3 в сравнении с пациентами, не отвечающими на такое лечение (-23,6% в сравнении с 17,1% соответственно; номинальное P-значение < 0,0001). У пациентов, получавших лечение с помощью сарилумаба, не наблюдались ассоциации между клинической эффективностью и изменениями уровней SAA и MMP-3 относительно исходного уровня, и хотя как у пациентов, отвечающих на лечение, так и у пациентов, не отвечающих на лечение, наблюдалось снижение уровня CRP на ≥ 90%, P-значения при сравнении пациентов, отвечающих на лечение, и пациентов, не отвечающих на лечение, составляли < 0,05 по нескольким параметрам, включая ACR20/50, DAS28-CRP < 3,2 и DAS28-CRP < 2,6 (данные не показаны).

Корреляция между уровнями биомаркеров и активностью заболевания и PRO на исходном уровне

Наиболее сильные корреляции между уровнями биомаркеров на исходном уровне и активностью заболевания на исходном уровне наблюдались для SAA и CRP с DAS28-ESR (ρ=0,26 и 0,31 соответственно), а также для CRP, SAA, MMP-3, гепсидина и CXCL13 с DAS28-CRP (ρ от 0,36 до 0,58). Ни один из уровней биомаркеров не коррелировал с PRO на исходном уровне (все ρ < 0,3).

Прогностический анализ клинических ответов и PRO по исходным уровням биомаркеров

Исходные уровни биомаркеров анализировали в качестве непрерывных и категориальных мер по терцилям (нижний, средний и верхний), поскольку пороговые значения, ассоциированные с клинической эффективностью, в настоящее время не установлены, и рассчитывали P-значения для взаимодействия лечение-уровень биомаркера для оценки прогностической способности биомаркера. Взаимодействия лечение-терциль биомаркера для определения конечных точек эффективности в неделю 24, анализируемые по исходным уровням биомаркеров в терцилях, показаны на фиг. 7A и в таблице 5. У пациентов с наиболее высокими концентрациями SAA на исходном уровне, получавших сарилумаб, с большей вероятностью достигались ответы в виде ACR20/50/70 или DAS28-CRP < 3,2, чем в случае с адалимумабом, по сравнению с пациентами в нижнем терциле: ACR20 (OR [95% CI] 5,5 [2,1, 14,5]); ACR50 (5,4 [2,2, 13,2]); ACR70 (5,7 [1,8, 18,4]); DAS28-CRP < 3,2 (6,1 [2,3, 15,7]) (фиг. 7A и таблица 5). SAA неизменно был прогностическим фактором по сравнению с высокими уровнями MMP-3 и CRP, которые были прогностическими факторами только для ответов в виде ACR20 и DAS28-CRP < 3,2 (таблица 5). Исходные уровни биомаркеров, ассоциированных с ремоделированием костей, синовиальными инфильтратами лимфоидных и миелоидных клеток и анемией воспаления, не были прогностическими факторами для эффективности в неделю 24, за исключением гепсидина и CXCL13, которые были ассоциированы с ответом в виде ACR20.

Таблица 5. Взаимодействия лечение-терциль биомаркера для определения конечных точек эффективности в неделю 24, анализируемые по исходным уровням биомаркеров в терцилях

Конечная точка эффективности в неделю 24 Биомаркер на исходном уровне SAA CRP MMP-3 OPG OC CXCL13 Гепсидин M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L ACR20 NS 0,015 NS 0,039 NS 0,013 NS NS 0,031 NS NS 0,003 NS 0,021 ACR50 NS 0,004 NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS ACR70 NS 0,008 NS NS NS NS 0,032 NS NS NS NS NS NS NS DAS28-ESR < 2,6 NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS DAS28-ESR < 3,2 0,004 NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS DAS28-CRP < 2,6 NS 0,041 NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS DAS28-CRP < 3,2 NS 0,044 NS 0,049 NS 0,014 NS NS NS NS NS NS NS NS

M/L: номинальное P-значение для взаимодействия лечение-уровень биомаркера для среднего терциля в сравнении с нижним; H/L: номинальное P-значение для взаимодействия лечение-уровень биомаркера для верхнего терциля в сравнении с нижним; ACR20/50/70: ответы в виде улучшения на 20%/50%/70% согласно Американской коллегии ревматологов; CRP: С-реактивный белок; CXCL13: хемокиновый (содержащий мотив C-X-C) лиганд 13; DAS28-CRP: индекс активности заболевания (по 28 суставам) с использованием уровня С-реактивного белка; DAS28-ESR: индекс активности заболевания (по 28 суставам) с использованием скорости оседания эритроцитов; MMP-3: матриксная металлопротеиназа-3; NS: незначимо при уровне 5%; OC: остеокальцин; OPG: остеопротегерин; SAA: сывороточный амилоид А.

Способность исходных уровней биомаркеров позволять прогнозировать ответы PRO также анализировали по их соответствующим терцилям, и было продемонстрировано, что пациенты, получавшие лечение с помощью сарилумаба, с более высокими уровнями SAA, MMP-3 и гепсидина сообщали об улучшении ответов PRO, в том числе баллов по HAQ-DI (фиг. 7B, вверху) и VAS для оценки боли (фиг. 7В, внизу), по сравнению с пациентами, получавшими лечение с помощью адалимумаба, что также наблюдалось для общей оценки пациентом по VAS, VAS для оценки утренней скованности, PCS и домена физического функционирования в SF-36 и RAID. P-значения для этих взаимодействий включены в фиг. 7B и таблицу 6 для демонстрации дифференциальной эффективности, прогнозируемой по высоким уровням этих биомаркеров по сравнению с низкими уровнями. Исходные уровни маркеров, ассоциированных с анемией хронических заболеваний (гепсидина, ферритина и железа), также были ассоциированы с улучшениями PRO в неделю 24 (таблица 6). Анализ биомаркеров в качестве непрерывных мер также выявил взаимодействия SAA, MMP-3, CRP и P1NP с HAQ-DI в неделю 24 (номинальные P-значения для взаимодействия < 0,01).

Таблица 6. Взаимодействия лечение-терциль биомаркера для определения PRO в неделю 24, анализируемые по исходным уровням биомаркеров в терцилях

Изменение PRO относительно исходного уровня в неделю 24 Биомаркер на исходном уровне SAA CRP MMP-3 OC CXCL13 Гепсидин s-ICAM1 Железо Ферритин M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L M/L H/L Общая оценка пациентом по VAS NS 0,011 0,002 0,040 NS 0,010 NS NS NS NS NS 0,009 NS NS NS NS NS NS HAQ-DI 0,035 < 0,001 NS 0,005 NS < 0,001 NS NS 0,032 0,004 NS NS NS NS NS 0,032 NS NS VAS для оценки боли NS 0,002 0,021 0,029 0,047 0,002 NS NS NS NS 0,010 0,002 NS NS NS NS NS NS Балл PCS в SF-36 NS < 0,001 0,009 0,016 NS 0,026 NS NS NS 0,031 NS NS NS NS NS NS NS NS Балл MCS в SF-36 NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS 0,030 0,023 NS NS NS NS NS 0,050 Домен PF в SF-36 NS 0,003 NS NS NS 0,036 NS NS NS 0,003 NS NS NS NS NS NS NS NS Домен BP в SF-36 NS NS NS NS NS NS 0,037 NS NS NS 0,002 0,016 NS NS NS NS NS NS Домен VT в SF-36 NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS 0,043 0,005 NS NS NS NS NS NS Домен RE в SF-36 NS NS 0,049 NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS 0,030 NS NS NS NS Домен MH в SF-36 NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS 0,004 0,004 NS NS NS NS 0,047 NS VAS для оценки утренней скованности NS 0,004 0,002 0,017 NS < 0,001 NS NS NS NS 0,029 < 0,001 NS NS NS NS NS NS Балл RAID NS 0,017 0,045 NS NS 0,020 NS NS NS NS NS 0,009 0,032 NS NS NS NS NS

M/L: номинальное P-значение для взаимодействия лечение-уровень биомаркера для среднего терциля в сравнении с нижним; H/L: номинальное P-значение для взаимодействия лечение-уровень биомаркера для верхнего терциля в сравнении с нижним; BP: интенсивность боли; CRP: С-реактивный белок; CXCL13: хемокиновый (содержащий мотив C-X-C) лиганд 13; FACIT: функциональная оценка терапии хронического заболевания; HAQ-DI: индекс нарушения жизнедеятельности согласно опроснику для оценки состояния здоровья; Lp(a): липопротеин (а); MCS: суммарный балл психического компонента; MH: психическое здоровье; MMP-3: матриксная металлопротеиназа-3; NS: незначимо при уровне 5%; OC: остеокальцин; OPG: остеопротегерин; P1NP: N-концевой пропептид проколлагена 1 типа; PCS: суммарный балл физического компонента; PF: физическое функционирование; RAID: влияние заболевания при ревматоидном артрите; RANKL: лиганд рецептора-активатора ядерного фактора κB; RE: ролевое функционирование, обусловленное эмоциональным состоянием; SAA: сывороточный амилоид А; SF-36: краткая форма (из 36 пунктов) опросника для оценки состояния здоровья на основании исследования медицинских результатов; sICAM-1: растворимая внутриклеточная молекула адгезии 1; TIBC: общая железосвязывающая способность; VAS: визуальная аналоговая шкала; VT: жизненная активность.

Оценка различных комбинаций маркеров, ассоциированных с активацией миелоидных и лимфоидных клеток, для прогнозирования клинического ответа

Исходные уровни CXCL13 и sICAM-1 анализировали для определения того, могут ли различные соотношения этих уровней биомаркеров (высокий/высокий, высокий/низкий, низкий/высокий и низкий/низкий; с использованием медианного значения в общей популяции в качестве порога отсечения) позволять прогнозировать клинические ответы на лечение с помощью сарилумаба или адалимумаба в неделю 24. При том что у пациентов с высоким уровнем CXCL13/высоким уровнем sICAM-1 и низким уровнем CXCL13/низким уровнем sICAM-1 наблюдались более значительные ответы в виде ACR50 при приеме сарилумаба, чем в случае с адалимумабом, другие комбинации не были прогностическими факторами (номинальное P-значение > 0,05; фиг. 8). Кроме того, у пациентов с высоким уровнем CXCL13/высоким уровнем sICAM-1 наблюдались более значительные ответы в виде ACR20 при приеме сарилумаба, чем в случае с адалимумабом (OR 3,8 [95% CI 1,5, 9,8]; номинальное P-значение=0,004), но другие комбинации не были прогностическими факторами (номинальное P-значение > 0,05).

ЛИТЕРАТУРНЫЕ ИСТОЧНИКИ

Karmakar S, Kay J, Gravallese EM. Bone damage in rheumatoid arthritis: mechanistic insights and approaches to prevention. Rheum Dis Clin North Am 2010;36:385-404.

McInnes IB, Schett G. Cytokines in the pathogenesis of rheumatoid arthritis. Nat Rev Immunol 2007;7:429-42.

Schett G, Gravallese E. Bone erosion in rheumatoid arthritis: mechanisms, diagnosis and treatment. Nature reviews. Rheumatology 2012;8:656-64.

Choy E. Understanding the dynamics: pathways involved in the pathogenesis of rheumatoid arthritis. Rheumatology (Oxford) 2012;51 Suppl 5:v3-11.

Smolen JS, Aletaha D. The assessment of disease activity in rheumatoid arthritis. Clin Exp Rheumatol 2010;28 Suppl 59:S18-27.

Schett G. Physiological effects of modulating the interleukin-6 axis. Rheumatology (Oxford) 2018;57:ii43-ii50.

Calabrese LH, Rose-John S. IL-6 biology: implications for clinical targeting in rheumatic disease. Nat Rev Rheumatol 2014;10:720-7.

Hunter CA, Jones SA. IL-6 as a keystone cytokine in health and disease. Nat Immunol 2015;16:448-57.

Choy EHS, Calabrese LH. Neuroendocrine and neurophysiological effects of interleukin 6 in rheumatoid arthritis. Rheumatology (Oxford) 2018;57:1885-95.

Solomon DH, Goodson NJ, Katz JN et al. Patterns of cardiovascular risk in rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis 2006;65:1608-12.

Choy E, Ganeshalingam K, Semb AG, Szekanecz Z, Nurmohamed M. Cardiovascular risk in rheumatoid arthritis: recent advances in the understanding of the pivotal role of inflammation, risk predictors and the impact of treatment. Rheumatology (Oxford) 2014;53:2143-54.

Gabay C, McInnes IB, Kavanaugh A et al. Comparison of lipid and lipid-associated cardiovascular risk marker changes after treatment with tocilizumab or adalimumab in patients with rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis 2016;75:1806-12.

Genovese MC, Fleischmann R, Kivitz AJ et al. Sarilumab plus methotrexate in patients with active rheumatoid arthritis and inadequate response to methotrexate: results of a phase III study. Arthritis Rheumatol 2015;67:1424-37.

Fleischmann R, van Adelsberg J, Lin Y et al. Sarilumab and nonbiologic disease-modifying antirheumatic drugs in patients with active rheumatoid arthritis and inadequate response or intolerance to tumor necrosis factor inhibitors. Arthritis Rheumatol 2017;69:277-90.

Burmester GR, Lin Y, Patel R et al. Efficacy and safety of sarilumab monotherapy versus adalimumab monotherapy for the treatment of patients with active rheumatoid arthritis (MONARCH): a randomised, double-blind, parallel-group phase III trial. Ann Rheum Dis 2017;76:840-7.

AbbVie Inc. US prescribing information: HUMIRA (adalimumab) injection, solution for subcutaneous use. 2018: https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2008/125057s0110lbl.pdf (дата последнего доступа 8 февраля 2019 г.).

Strand V, Gossec L, Proudfoot CWJ et al. Patient-reported outcomes from a randomized phase III trial of sarilumab monotherapy versus adalimumab monotherapy in patients with rheumatoid arthritis. Arthritis Res Ther 2018;20:129.

Gabay C, Msihid J, Zilberstein M et al. Identification of sarilumab pharmacodynamic and predictive markers in patients with inadequate response to TNF inhibition: a biomarker substudy of the phase 3 TARGET study. RMD Open 2018;4:e000607.

Boyapati A, Msihid J, Fiore S, van Adelsberg J, Graham NM, Hamilton JD. Sarilumab plus methotrexate suppresses circulating biomarkers of bone resorption and synovial damage in patients with rheumatoid arthritis and inadequate response to methotrexate: a biomarker study of MOBILITY. Arthritis Res Ther 2016;18:225.

Song S-NJ, Iwahashi M, Tomosugi N et al. Comparative evaluation of the effects of treatment with tocilizumab and TNF-α inhibitors on serum hepcidin, anemia response and disease activity in rheumatoid arthritis patients. Arthritis Res Ther 2013;15:R141.

Gavrilă BI, Ciofu C, Stoica V. Biomarkers in rheumatoid arthritis, what is new? J Med Life 2016;9:144-8.

Sechidis K, Papangelou K, Metcalfe PD, Svensson D, Weatherall J, Brown G. Distinguishing prognostic and predictive biomarkers: an information theoretic approach. Bioinformatics 2018;34:3365-76.

Kringelbach TM, Glintborg B, Hogdall EV, Johansen JS, Hetland ML. Identification of new biomarkers to promote personalised treatment of patients with inflammatory rheumatic disease: protocol for an open cohort study. BMJ Open 2018;8:e019325.

Fleischmann R, Connolly SE, Maldonado MA, Schiff M. Brief report: estimating disease activity using multi-biomarker disease activity scores in rheumatoid arthritis patients treated with abatacept or adalimumab. Arthritis Rheumatol. 2016;68:2083-9.

Curtis JR, Wright GC, Strand V, Davis CS, Hitraya E, Sasso EH. Reanalysis of the multi-biomarker disease activity score for assessing disease activity in the abatacept versus adalimumab comparison in biologic-naive rheumatoid arthritis subjects with background methotrexate study: comment on the article by Fleischmann et al. Arthritis Rheumatol. 2017;69:863-5.

Dennis G, Jr., Holweg CT, Kummerfeld SK et al. Synovial phenotypes in rheumatoid arthritis correlate with response to biologic therapeutics. Arthritis Res Ther 2014;16:R90.

Burmester GR, Hagino O, Dong Q et al. Unique changes in hemoglobin with sarilumab versus adalimumab are independent of better disease control in patients with rheumatoid arthritis (RA). Arthritis Rheumatol 2018;70(Suppl. 10):Abstract 1528.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Sanofi/Regeneron

<120> СПОСОБЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА

<130> 705212 SA9-264

<140> US62/837793

<141> 2019-04-24

<160> 25

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 116

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> вариабельная область тяжелой цепи

<400> 1

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Arg Phe Thr Phe Asp Asp Tyr

20 25 30

Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Arg Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser Leu Phe

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Gly Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Gly Arg Asp Ser Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 2

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> вариабельная область легкой цепи

<400> 2

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 3

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Область 1, определяющая комплементарность, тяжелой цепи

<400> 3

Arg Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Ala

1 5

<210> 4

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Область 2, определяющая комплементарность, тяжелой цепи

<400> 4

Ile Ser Trp Asn Ser Gly Arg Ile

1 5

<210> 5

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Область 3, определяющая комплементарность, тяжелой цепи

<400> 5

Ala Lys Gly Arg Asp Ser Phe Asp Ile

1 5

<210> 6

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Область 1, определяющая комплементарность, легкой цепи

<400> 6

Gln Gly Ile Ser Ser Trp

1 5

<210> 7

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Область 2, определяющая комплементарность, легкой цепи

<400> 7

Gly Ala Ser

1

<210> 8

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Область 3, определяющая комплементарность, легкой цепи

<400> 8

Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Tyr Thr

1 5

<210> 9

<211> 446

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь

<400> 9

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Arg Phe Thr Phe Asp Asp Tyr

20 25 30

Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Arg Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser Leu Phe

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Gly Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Gly Arg Asp Ser Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser

165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu

180 185 190

Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr

210 215 220

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe

225 230 235 240

Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

245 250 255

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

260 265 270

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr

275 280 285

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val

290 295 300

Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

305 310 315 320

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser

325 330 335

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro

340 345 350

Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val

355 360 365

Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly

370 375 380

Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

385 390 395 400

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp

405 410 415

Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

420 425 430

Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 10

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь

<400> 10

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 11

<211> 675

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность кДНК варианта 2 транскрипта CRP

(идентификационный номер в GenBank:

NP_001315986.1)

<400> 11

atggagaagc tgttgtgttt cttggtcttg accagcctct ctcatgcttt tggccagaca 60

gacatgtcga ggaaggcttt tgtgtttccc aaagagtcgg atacttccta tgtatccctc 120

aaagcaccgt taacgaagcc tctcaaagcc ttcactgtgt gcctccactt ctacacggaa 180

ctgtcctcga cccgtgggta cagtattttc tcgtatgcca ccaagagaca agacaatgag 240

attctcatat tttggtctaa ggatatagga tacagtttta cagtgggtgg gtctgaaata 300

ttattcgagg ttcctgaagt cacagtagct ccagtacaca tttgtacaag ctgggagtcc 360

gcctcaggga tcgtggagtt ctgggtagat gggaagccca gggtgaggaa gagtctgaag 420

aagggataca ctgtgggggc agaagcaagc atcatcttgg ggcaggagca ggattccttc 480

ggtgggaact ttgaaggaag ccagtccctg gtgggagaca ttggaaatgt gaacatgtgg 540

gactttgtgc tgtcaccaga tgagattaac accatctatc ttggcgggcc cttcagtcct 600

aatgtcctga actggcgggc actgaagtat gaagtgcaag gcgaagtgtt caccaaaccc 660

cagctgtggc cctga 675

<210> 12

<211> 224

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептидная последовательность CRP

<400> 12

Met Glu Lys Leu Leu Cys Phe Leu Val Leu Thr Ser Leu Ser His Ala

1 5 10 15

Phe Gly Gln Thr Asp Met Ser Arg Lys Ala Phe Val Phe Pro Lys Glu

20 25 30

Ser Asp Thr Ser Tyr Val Ser Leu Lys Ala Pro Leu Thr Lys Pro Leu

35 40 45

Lys Ala Phe Thr Val Cys Leu His Phe Tyr Thr Glu Leu Ser Ser Thr

50 55 60

Arg Gly Tyr Ser Ile Phe Ser Tyr Ala Thr Lys Arg Gln Asp Asn Glu

65 70 75 80

Ile Leu Ile Phe Trp Ser Lys Asp Ile Gly Tyr Ser Phe Thr Val Gly

85 90 95

Gly Ser Glu Ile Leu Phe Glu Val Pro Glu Val Thr Val Ala Pro Val

100 105 110

His Ile Cys Thr Ser Trp Glu Ser Ala Ser Gly Ile Val Glu Phe Trp

115 120 125

Val Asp Gly Lys Pro Arg Val Arg Lys Ser Leu Lys Lys Gly Tyr Thr

130 135 140

Val Gly Ala Glu Ala Ser Ile Ile Leu Gly Gln Glu Gln Asp Ser Phe

145 150 155 160

Gly Gly Asn Phe Glu Gly Ser Gln Ser Leu Val Gly Asp Ile Gly Asn

165 170 175

Val Asn Met Trp Asp Phe Val Leu Ser Pro Asp Glu Ile Asn Thr Ile

180 185 190

Tyr Leu Gly Gly Pro Phe Ser Pro Asn Val Leu Asn Trp Arg Ala Leu

195 200 205

Lys Tyr Glu Val Gln Gly Glu Val Phe Thr Lys Pro Gln Leu Trp Pro

210 215 220

<210> 13

<211> 2020

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность геномной ДНК CRP (идентификационный номер в

GenBank: NG_013007.1)

<400> 13

gactggattc agagactcaa acaatgttat tgaggcatgg tctatctctc agctctactc 60

gtgagtcaag gatggtgtat tagttggttt tcacactgct gtaaagaact acctgagtat 120

gggtaattta taaacaaaag aaattttaaa tgaacttaca gttccacatg tttggggagg 180

actcatgaaa cttacaatca tggtggaagg tgaaggggaa gcaggcattt tcttcacaag 240

gcagcaggag agagacagtg tgagtggggg actgccaagc acttttattt aaatcatcag 300

acctagtgag aactcattat catgagcaca gcatgggcaa aactacctcc acgatccaat 360

cttctcccac catgtccctc cctcaactca tggggattac aatttgagat gacatttggg 420

tgggaacaca gaaccaaacc atatcattcc acctctggct cctccaaaat atcatgttct 480

tttcacattt caaaaccaat cataccttcc caacagtcac ccaaacttaa ctcatttcag 540

cattaactca aaagtccaag tctaaagttc catctgagaa aaggcaagtc acttctgcct 600

attagcctag taaaataaaa aacaagttag ttacttccaa gatacagtgg gggtataggc 660

attgggtaaa tggtcctgtt tgaaatggga gaaattggcc aaaacaaagg ggccacaggc 720

cccatgtaaa tccaaaatct ggcaggacac tcatgaaatc ttaaagctcc aaaataatct 780

cctttgattc tttgtctcac atccagggca tgctgatgca agcggtaggc ttccatggcc 840

ttgggtagct ccatacttgt ggctcttcag ggtacagccc ctgtggctgc tttcacaggc 900

tggcattgaa cacttgcaag cttttctaag cacaaggtgc aaactgtcag tggttctacc 960

attctgggat ctggaggaca gtggccctct tctcacagat ccactaggca gtgccccagt 1020

ggggactctg tgtggagact ccaaccccac atttccctgc tgcattgccc tagtagaggt 1080

tttctgtgag ggctccatgc ctgcagaaga cttctgcctg aacatccagg tgtttccata 1140

catcttctga aatctagaca gaaactccca aagctcaact cttgtcttct gtgcatctgc 1200

accctcaaca ctacttggaa gccaccaagg cttggggctt gtgccctctg aagcaatggc 1260

ctgagctata tacattgccc ccttttagcc atggctggag ccgcagcagc tggcacacag 1320

ggtgccatgt tcctgggctg cacagagcag cggggccctg ggcctggccc atgataccat 1380

tttttcctcc taggcttttg gacctctgat gggaggggct gccatgaaga tcttctgaaa 1440

tgacctgaag acattttcct cattgttttg gctatcaaca ttcatctcct cattacttat 1500

gcaaatttct gcagccagct tgaatttttc cccagaaaat gggtttttct tttctaccac 1560

atggtcaggc tgcacatttt ccaaactttt atgctccctt tcccttttaa acataagttc 1620

caatttcaga tcatctcttt gtgaacacat atgattgtat gttttcagaa aaagccaggt 1680

cacttcttga atgctttggt gcttagaaat ttcttaagca ccaaagcatt caagaaatca 1740

tgtctcttaa gttaaaagtt ccacagatct ctagggcatg ggcaaaatgc caccattgtc 1800

tttgctaaaa catagaaaga gtgaccttta ctcccgtttc caataagttc ctcatctcca 1860

tctaaggaca cctctgcatg aacttcattt tccatatcac tatcagcatt ttggtcaaaa 1920

ccattcaaca aaactcagga agttccaagc ttttccacat cttcctgtct tctcctgagc 1980

cctccaaact cttccagcct ctgcccctag ttggttccaa 2020

<210> 14

<211> 477

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептидная последовательность MMP-3

<400> 14

Met Lys Ser Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Cys Val Ala Val Cys Ser

1 5 10 15

Ala Tyr Pro Leu Asp Gly Ala Ala Arg Gly Glu Asp Thr Ser Met Asn

20 25 30

Leu Val Gln Lys Tyr Leu Glu Asn Tyr Tyr Asp Leu Lys Lys Asp Val

35 40 45

Lys Gln Phe Val Arg Arg Lys Asp Ser Gly Pro Val Val Lys Lys Ile

50 55 60

Arg Glu Met Gln Lys Phe Leu Gly Leu Glu Val Thr Gly Lys Leu Asp

65 70 75 80

Ser Asp Thr Leu Glu Val Met Arg Lys Pro Arg Cys Gly Val Pro Asp

85 90 95

Val Gly His Phe Arg Thr Phe Pro Gly Ile Pro Lys Trp Arg Lys Thr

100 105 110

His Leu Thr Tyr Arg Ile Val Asn Tyr Thr Pro Asp Leu Pro Lys Asp

115 120 125

Ala Val Asp Ser Ala Val Glu Lys Ala Leu Lys Val Trp Glu Glu Val

130 135 140

Thr Pro Leu Thr Phe Ser Arg Leu Tyr Glu Gly Glu Ala Asp Ile Met

145 150 155 160

Ile Ser Phe Ala Val Arg Glu His Gly Asp Phe Tyr Pro Phe Asp Gly

165 170 175

Pro Gly Asn Val Leu Ala His Ala Tyr Ala Pro Gly Pro Gly Ile Asn

180 185 190

Gly Asp Ala His Phe Asp Asp Asp Glu Gln Trp Thr Lys Asp Thr Thr

195 200 205

Gly Thr Asn Leu Phe Leu Val Ala Ala His Glu Ile Gly His Ser Leu

210 215 220

Gly Leu Phe His Ser Ala Asn Thr Glu Ala Leu Met Tyr Pro Leu Tyr

225 230 235 240

His Ser Leu Thr Asp Leu Thr Arg Phe Arg Leu Ser Gln Asp Asp Ile

245 250 255

Asn Gly Ile Gln Ser Leu Tyr Gly Pro Pro Pro Asp Ser Pro Glu Thr

260 265 270

Pro Leu Val Pro Thr Glu Pro Val Pro Pro Glu Pro Gly Thr Pro Ala

275 280 285

Asn Cys Asp Pro Ala Leu Ser Phe Asp Ala Val Ser Thr Leu Arg Gly

290 295 300

Glu Ile Leu Ile Phe Lys Asp Arg His Phe Trp Arg Lys Ser Leu Arg

305 310 315 320

Lys Leu Glu Pro Glu Leu His Leu Ile Ser Ser Phe Trp Pro Ser Leu

325 330 335

Pro Ser Gly Val Asp Ala Ala Tyr Glu Val Thr Ser Lys Asp Leu Val

340 345 350

Phe Ile Phe Lys Gly Asn Gln Phe Trp Ala Ile Arg Gly Asn Glu Val

355 360 365

Arg Ala Gly Tyr Pro Arg Gly Ile His Thr Leu Gly Phe Pro Pro Thr

370 375 380

Val Arg Lys Ile Asp Ala Ala Ile Ser Asp Lys Glu Lys Asn Lys Thr

385 390 395 400

Tyr Phe Phe Val Glu Asp Lys Tyr Trp Arg Phe Asp Glu Lys Arg Asn

405 410 415

Ser Met Glu Pro Gly Phe Pro Lys Gln Ile Ala Glu Asp Phe Pro Gly

420 425 430

Ile Asp Ser Lys Ile Asp Ala Val Phe Glu Glu Phe Gly Phe Phe Tyr

435 440 445

Phe Phe Thr Gly Ser Ser Gln Leu Glu Phe Asp Pro Asn Ala Lys Lys

450 455 460

Val Thr His Thr Leu Lys Ser Asn Ser Trp Leu Asn Cys

465 470 475

<210> 15

<211> 1434

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность кДНК MMP-3

<400> 15

atgaagagtc ttccaatcct actgttgctg tgcgtggcag tttgctcagc ctatccattg 60

gatggagctg caaggggtga ggacaccagc atgaaccttg ttcagaaata tctagaaaac 120

tactacgacc tcaaaaaaga tgtgaaacag tttgttagga gaaaggacag tggtcctgtt 180

gttaaaaaaa tccgagaaat gcagaagttc cttggattgg aggtgacggg gaagctggac 240

tccgacactc tggaggtgat gcgcaagccc aggtgtggag ttcctgatgt tggtcacttc 300

agaacctttc ctggcatccc gaagtggagg aaaacccacc ttacatacag gattgtgaat 360

tatacaccag atttgccaaa agatgctgtt gattctgctg ttgagaaagc tctgaaagtc 420

tgggaagagg tgactccact cacattctcc aggctgtatg aaggagaggc tgatataatg 480

atctcttttg cagttagaga acatggagac ttttaccctt ttgatggacc tggaaatgtt 540

ttggcccatg cctatgcccc tgggccaggg attaatggag atgcccactt tgatgatgat 600

gaacaatgga caaaggatac aacagggacc aatttatttc tcgttgctgc tcatgaaatt 660

ggccactccc tgggtctctt tcactcagcc aacactgaag ctttgatgta cccactctat 720

cactcactca cagacctgac tcggttccgc ctgtctcaag atgatataaa tggcattcag 780

tccctctatg gacctccccc tgactcccct gagacccccc tggtacccac ggaacctgtc 840

cctccagaac ctgggacgcc agccaactgt gatcctgctt tgtcctttga tgctgtcagc 900

actctgaggg gagaaatcct gatctttaaa gacaggcact tttggcgcaa atccctcagg 960

aagcttgaac ctgaattgca tttgatctct tcattttggc catctcttcc ttcaggcgtg 1020

gatgccgcat atgaagttac tagcaaggac ctcgttttca tttttaaagg aaatcaattc 1080

tgggctatca gaggaaatga ggtacgagct ggatacccaa gaggcatcca caccctaggt 1140

ttccctccaa ccgtgaggaa aatcgatgca gccatttctg ataaggaaaa gaacaaaaca 1200

tatttctttg tagaggacaa atactggaga tttgatgaga agagaaattc catggagcca 1260

ggctttccca agcaaatagc tgaagacttt ccagggattg actcaaagat tgatgctgtt 1320

tttgaagaat ttgggttctt ttatttcttt actggatctt cacagttgga gtttgaccca 1380

aatgcaaaga aagtgacaca cactttgaag agtaacagct ggcttaattg ttga 1434

<210> 16

<211> 1822

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность мРНК MMP-3 (идентификационный номер в GenBank:

NM_002422.5)

<400> 16

acaaggaggc aggcaagaca gcaaggcata gagacaacat agagctaagt aaagccagtg 60

gaaatgaaga gtcttccaat cctactgttg ctgtgcgtgg cagtttgctc agcctatcca 120

ttggatggag ctgcaagggg tgaggacacc agcatgaacc ttgttcagaa atatctagaa 180

aactactacg acctcaaaaa agatgtgaaa cagtttgtta ggagaaagga cagtggtcct 240

gttgttaaaa aaatccgaga aatgcagaag ttccttggat tggaggtgac ggggaagctg 300

gactccgaca ctctggaggt gatgcgcaag cccaggtgtg gagttcctga tgttggtcac 360

ttcagaacct ttcctggcat cccgaagtgg aggaaaaccc accttacata caggattgtg 420

aattatacac cagatttgcc aaaagatgct gttgattctg ctgttgagaa agctctgaaa 480

gtctgggaag aggtgactcc actcacattc tccaggctgt atgaaggaga ggctgatata 540

atgatctctt ttgcagttag agaacatgga gacttttacc cttttgatgg acctggaaat 600

gttttggccc atgcctatgc ccctgggcca gggattaatg gagatgccca ctttgatgat 660

gatgaacaat ggacaaagga tacaacaggg accaatttat ttctcgttgc tgctcatgaa 720

attggccact ccctgggtct ctttcactca gccaacactg aagctttgat gtacccactc 780

tatcactcac tcacagacct gactcggttc cgcctgtctc aagatgatat aaatggcatt 840

cagtccctct atggacctcc ccctgactcc cctgagaccc ccctggtacc cacggaacct 900

gtccctccag aacctgggac gccagccaac tgtgatcctg ctttgtcctt tgatgctgtc 960

agcactctga ggggagaaat cctgatcttt aaagacaggc acttttggcg caaatccctc 1020

aggaagcttg aacctgaatt gcatttgatc tcttcatttt ggccatctct tccttcaggc 1080

gtggatgccg catatgaagt tactagcaag gacctcgttt tcatttttaa aggaaatcaa 1140

ttctgggcta tcagaggaaa tgaggtacga gctggatacc caagaggcat ccacacccta 1200

ggtttccctc caaccgtgag gaaaatcgat gcagccattt ctgataagga aaagaacaaa 1260

acatatttct ttgtagagga caaatactgg agatttgatg agaagagaaa ttccatggag 1320

ccaggctttc ccaagcaaat agctgaagac tttccaggga ttgactcaaa gattgatgct 1380

gtttttgaag aatttgggtt cttttatttc tttactggat cttcacagtt ggagtttgac 1440

ccaaatgcaa agaaagtgac acacactttg aagagtaaca gctggcttaa ttgttgaaag 1500

agatatgtag aaggcacaat atgggcactt taaatgaagc taataattct tcacctaagt 1560

ctctgtgaat tgaaatgttc gttttctcct gcctgtgctg tgactcgagt cacactcaag 1620

ggaacttgag cgtgaatctg tatcttgccg gtcattttta tgttattaca gggcattcaa 1680

atgggctgct gcttagcttg caccttgtca catagagtga tctttcccaa gagaagggga 1740

agcactcgtg tgcaacagac aagtgactgt atctgtgtag actatttgct tatttaataa 1800

agacgatttg tcagttattt ta 1822

<210> 17

<211> 109

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептидная последовательность CXCL13 (идентификационный номер в

GenBank: NP_006410.1)

<400> 17

Met Lys Phe Ile Ser Thr Ser Leu Leu Leu Met Leu Leu Val Ser Ser

1 5 10 15

Leu Ser Pro Val Gln Gly Val Leu Glu Val Tyr Tyr Thr Ser Leu Arg

20 25 30

Cys Arg Cys Val Gln Glu Ser Ser Val Phe Ile Pro Arg Arg Phe Ile

35 40 45

Asp Arg Ile Gln Ile Leu Pro Arg Gly Asn Gly Cys Pro Arg Lys Glu

50 55 60

Ile Ile Val Trp Lys Lys Asn Lys Ser Ile Val Cys Val Asp Pro Gln

65 70 75 80

Ala Glu Trp Ile Gln Arg Met Met Glu Val Leu Arg Lys Arg Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Pro Val Pro Val Phe Lys Arg Lys Ile Pro

100 105

<210> 18

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность кДНК CXCL13 (идентификационный номер в GenBank:

NP_006410.1)

<400> 18

atgaagttca tctcgacatc tctgcttctc atgctgctgg tcagcagcct ctctccagtc 60

caaggtgttc tggaggtcta ttacacaagc ttgaggtgta gatgtgtcca agagagctca 120

gtctttatcc ctagacgctt cattgatcga attcaaatct tgccccgtgg gaatggttgt 180

ccaagaaaag aaatcatagt ctggaagaag aacaagtcaa ttgtgtgtgt ggaccctcaa 240

gctgaatgga tacaaagaat gatggaagta ttgagaaaaa gaagttcttc aactctacca 300

gttccagtgt ttaagagaaa gattccctga 330

<210> 19

<211> 1219

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность геномной ДНК CXCL13 (идентификационный номер в

GenBank: NM_006419.2)

<400> 19

gagaagatgt ttgaaaaaac tgactctgct aatgagcctg gactcagagc tcaagtctga 60

actctacctc cagacagaat gaagttcatc tcgacatctc tgcttctcat gctgctggtc 120

agcagcctct ctccagtcca aggtgttctg gaggtctatt acacaagctt gaggtgtaga 180

tgtgtccaag agagctcagt ctttatccct agacgcttca ttgatcgaat tcaaatcttg 240

ccccgtggga atggttgtcc aagaaaagaa atcatagtct ggaagaagaa caagtcaatt 300

gtgtgtgtgg accctcaagc tgaatggata caaagaatga tggaagtatt gagaaaaaga 360

agttcttcaa ctctaccagt tccagtgttt aagagaaaga ttccctgatg ctgatatttc 420

cactaagaac acctgcattc ttcccttatc cctgctctgg attttagttt tgtgcttagt 480

taaatctttt ccaggaaaaa gaacttcccc atacaaataa gcatgagact atgtaaaaat 540

aaccttgcag aagctgatgg ggcaaactca agcttcttca ctcacagcac cctatataca 600

cttggagttt gcattcttat tcatcaggga ggaaagtttc tttgaaaata gttattcagt 660

tataagtaat acaggattat tttgattata tacttgttgt ttaatgttta aaatttctta 720

gaaaacaatg gaatgagaat ttaagcctca aatttgaaca tgtggcttga attaagaaga 780

aaattatggc atatattaaa agcaggcttc tatgaaagac tcaaaaagct gcctgggagg 840

cagatggaac ttgagcctgt caagaggcaa aggaatccat gtagtagata tcctctgctt 900

aaaaactcac tacggaggag aattaagtcc tacttttaaa gaatttcttt ataaaattta 960

ctgtctaaga ttaatagcat tcgaagatcc ccagacttca tagaatactc agggaaagca 1020

tttaaagggt gatgtacaca tgtatccttt cacacatttg ccttgacaaa cttctttcac 1080

tcacatcttt ttcactgact ttttttgtgg ggggcggggc cggggggact ctggtatcta 1140

attctttaat gattcctata aatctaatga cattcaataa agttgagcaa acattttact 1200

taaaaaaaaa aaaaaaaaa 1219

<210> 20

<211> 130

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептидная последовательность сывороточного амилоида A

(идентификационный номер в GenBank: AAB24060.1)

<400> 20

Met Arg Leu Phe Thr Gly Ile Val Phe Cys Ser Leu Val Met Gly Val

1 5 10 15

Thr Ser Glu Ser Trp Arg Ser Phe Phe Lys Glu Ala Leu Gln Gly Val

20 25 30

Gly Asp Met Gly Arg Ala Tyr Trp Asp Ile Met Ile Ser Asn His Gln

35 40 45

Asn Ser Asn Arg Tyr Leu Tyr Ala Arg Gly Asn Tyr Asp Ala Ala Gln

50 55 60

Arg Gly Pro Gly Gly Val Trp Ala Ala Lys Leu Ile Ser Arg Ser Arg

65 70 75 80

Val Tyr Leu Gln Gly Leu Ile Asp Tyr Tyr Leu Phe Gly Asn Ser Ser

85 90 95

Thr Val Leu Glu Asp Ser Lys Ser Asn Glu Lys Ala Glu Glu Trp Gly

100 105 110

Arg Ser Gly Lys Asp Pro Asp Arg Phe Arg Pro Asp Gly Leu Pro Lys

115 120 125

Lys Tyr

130

<210> 21

<211> 393

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность кДНК сывороточного амилоида A (идентификационный

номер в GenBank: AAB24060.1)

<400> 21

atgaggcttt tcacaggcat tgttttctgc tccttggtca tgggagtcac cagtgaaagc 60

tggcgttcgt ttttcaagga ggctctccaa ggggttgggg acatgggcag agcctattgg 120

gacataatga tatccaatca ccaaaattca aacagatatc tctatgctcg gggaaactat 180

gatgctgccc aaagaggacc tgggggtgtc tgggctgcta aactcatcag ccgttccagg 240

gtctatcttc agggattaat agactactat ttatttggaa acagcagcac tgtattggag 300

gactcgaagt ccaacgagaa agctgaggaa tggggccgga gtggcaaaga ccccgaccgc 360

ttcagacctg acggcctgcc taagaaatac tga 393

<210> 22

<211> 614

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность мРНК сывороточного амилоида A (идентификационный

номер в GenBank: M81349.1)

<400> 22

tatagctcca cggccagaag ataccagcag ctctgccttt actgaaattt cagctggaga 60

aaggtccaca gcacaatgag gcttttcaca ggcattgttt tctgctcctt ggtcatggga 120

gtcaccagtg aaagctggcg ttcgtttttc aaggaggctc tccaaggggt tggggacatg 180

ggcagagcct attgggacat aatgatatcc aatcaccaaa attcaaacag atatctctat 240

gctcggggaa actatgatgc tgcccaaaga ggacctgggg gtgtctgggc tgctaaactc 300

atcagccgtt ccagggtcta tcttcaggga ttaatagact actatttatt tggaaacagc 360

agcactgtat tggaggactc gaagtccaac gagaaagctg aggaatgggg ccggagtggc 420

aaagaccccg accgcttcag acctgacggc ctgcctaaga aatactgagc ttcctgctcc 480

tctgctctca gggaaactgg gctgtgagcc acacacttct ccccccagac agggacacag 540

ggtcactgag ctttgtgtcc ccaggaactg gtatagggca cctagaggtg ttcaataaat 600

gtttgtcaaa ttga 614

<210> 23

<211> 532

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептидная последовательность sICAM-1 (идентификационный номер в

GenBank: NP_000192.2)

<400> 23

Met Ala Pro Ser Ser Pro Arg Pro Ala Leu Pro Ala Leu Leu Val Leu

1 5 10 15

Leu Gly Ala Leu Phe Pro Gly Pro Gly Asn Ala Gln Thr Ser Val Ser

20 25 30

Pro Ser Lys Val Ile Leu Pro Arg Gly Gly Ser Val Leu Val Thr Cys

35 40 45

Ser Thr Ser Cys Asp Gln Pro Lys Leu Leu Gly Ile Glu Thr Pro Leu

50 55 60

Pro Lys Lys Glu Leu Leu Leu Pro Gly Asn Asn Arg Lys Val Tyr Glu

65 70 75 80

Leu Ser Asn Val Gln Glu Asp Ser Gln Pro Met Cys Tyr Ser Asn Cys

85 90 95

Pro Asp Gly Gln Ser Thr Ala Lys Thr Phe Leu Thr Val Tyr Trp Thr

100 105 110

Pro Glu Arg Val Glu Leu Ala Pro Leu Pro Ser Trp Gln Pro Val Gly

115 120 125

Lys Asn Leu Thr Leu Arg Cys Gln Val Glu Gly Gly Ala Pro Arg Ala

130 135 140

Asn Leu Thr Val Val Leu Leu Arg Gly Glu Lys Glu Leu Lys Arg Glu

145 150 155 160

Pro Ala Val Gly Glu Pro Ala Glu Val Thr Thr Thr Val Leu Val Arg

165 170 175

Arg Asp His His Gly Ala Asn Phe Ser Cys Arg Thr Glu Leu Asp Leu

180 185 190

Arg Pro Gln Gly Leu Glu Leu Phe Glu Asn Thr Ser Ala Pro Tyr Gln

195 200 205

Leu Gln Thr Phe Val Leu Pro Ala Thr Pro Pro Gln Leu Val Ser Pro

210 215 220

Arg Val Leu Glu Val Asp Thr Gln Gly Thr Val Val Cys Ser Leu Asp

225 230 235 240

Gly Leu Phe Pro Val Ser Glu Ala Gln Val His Leu Ala Leu Gly Asp

245 250 255

Gln Arg Leu Asn Pro Thr Val Thr Tyr Gly Asn Asp Ser Phe Ser Ala

260 265 270

Lys Ala Ser Val Ser Val Thr Ala Glu Asp Glu Gly Thr Gln Arg Leu

275 280 285

Thr Cys Ala Val Ile Leu Gly Asn Gln Ser Gln Glu Thr Leu Gln Thr

290 295 300

Val Thr Ile Tyr Ser Phe Pro Ala Pro Asn Val Ile Leu Thr Lys Pro

305 310 315 320

Glu Val Ser Glu Gly Thr Glu Val Thr Val Lys Cys Glu Ala His Pro

325 330 335

Arg Ala Lys Val Thr Leu Asn Gly Val Pro Ala Gln Pro Leu Gly Pro

340 345 350

Arg Ala Gln Leu Leu Leu Lys Ala Thr Pro Glu Asp Asn Gly Arg Ser

355 360 365

Phe Ser Cys Ser Ala Thr Leu Glu Val Ala Gly Gln Leu Ile His Lys

370 375 380

Asn Gln Thr Arg Glu Leu Arg Val Leu Tyr Gly Pro Arg Leu Asp Glu

385 390 395 400

Arg Asp Cys Pro Gly Asn Trp Thr Trp Pro Glu Asn Ser Gln Gln Thr

405 410 415

Pro Met Cys Gln Ala Trp Gly Asn Pro Leu Pro Glu Leu Lys Cys Leu

420 425 430

Lys Asp Gly Thr Phe Pro Leu Pro Ile Gly Glu Ser Val Thr Val Thr

435 440 445

Arg Asp Leu Glu Gly Thr Tyr Leu Cys Arg Ala Arg Ser Thr Gln Gly

450 455 460

Glu Val Thr Arg Lys Val Thr Val Asn Val Leu Ser Pro Arg Tyr Glu

465 470 475 480

Ile Val Ile Ile Thr Val Val Ala Ala Ala Val Ile Met Gly Thr Ala

485 490 495

Gly Leu Ser Thr Tyr Leu Tyr Asn Arg Gln Arg Lys Ile Lys Lys Tyr

500 505 510

Arg Leu Gln Gln Ala Gln Lys Gly Thr Pro Met Lys Pro Asn Thr Gln

515 520 525

Ala Thr Pro Pro

530

<210> 24

<211> 1598

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность кДНК sICAM-1 (идентификационный номер в GenBank:

NP_000192.2)

<400> 24

atggctccca gcagcccccg gcccgcgctg cccgcactcc tggtcctgct cggggctctg 60

ttcccaggac ctggcaatgc ccagacatct gtgtccccct caaaagtcat cctgccccgg 120

ggaggctccg tgctggtgac tgcagcacct cctgtgacca gcccaagttg ttgggcatag 180

agaccccgtt gcctaaaaag gagttgctcc tgcctgggaa caaccggaag gtgtatgaac 240

tgagcaatgt gcaagaagat agccaaccaa tgtgctattc aaactgccct gatgggcagt 300

caacagctaa aaccttcctc accgtgtact ggactccaga acgggtggaa ctggcacccc 360

tcccctcttg gcagccagtg ggcaagaacc ttaccctacg ctgccaggtg gagggtgggg 420

caccccgggc caacctcacc gtggtgctgc tccgtgggga gaaggagctg aaacgggagc 480

cagctgtggg ggagcccgct gaggtcacga ccacggtgct ggtgaggaga gatcaccatg 540

gagccaattt ctcgtgccgc actgaactgg acctgcggcc ccaagggctg gagctgtttg 600

agaacacctc ggccccctac cagctccaga cctttgtcct gccagcgact cccccacaac 660

ttgtcagccc ccgggtccta gaggtggaca cgcaggggac cgtggtctgt tccctggacg 720

ggctgttccc agtctcggag gcccaggtcc acctggcact gggggaccag aggttgaacc 780

ccacagtcac ctatggcaac gactccttct cggccaaggc ctcagtcagt gtgaccgcag 840

aggacgaggg cacccagcgg ctgacgtgtg cagtaatact ggggaaccag agccaggaga 900

cactgcagac agtgaccatc tacagctttc cggcgcccaa cgtgattctg acgaagccag 960

aggtctcaga agggaccgag gtgacagtga agtgtgaggc ccaccctaga gccaaggtga 1020

cgctgaatgg ggttccagcc cagccactgg gcccgagggc ccagctcctg ctgaaggcca 1080

ccccagagga caacgggcgc agcttctcct gctctgcaac cctggaggtg gccggccagc 1140

ttatacacaa gaaccagacc cgggagcttc gtgtcctgta tggcccccga ctggacgaga 1200

gggattgtcc gggaaactgg acgtggccag aaaattccca gcagactcca atgtgccagg 1260

cttgggggaa cccattgccc gagctcaagt gtctaaagga tggcactttc ccactgccca 1320

tcggggaatc agtgactgtc actcgagatc ttgagggcac ctacctctgt cgggccagga 1380

gcactcaagg ggaggtcacc cgcaaggtga ccgtgaatgt gctctccccc cggtatgaga 1440

ttgtcatcat cactgtggta gcagccgcag tcataatggg cactgcaggc ctcagcacgt 1500

acctctataa ccgccagcgg aagatcaaga aatacagact acaacaggcc caaaaaggga 1560

cccccatgaa accgaacaca caagccacgc ctccctga 1598

<210> 25

<211> 2967

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность мРНК sICAM-1 (идентификационный номер в GenBank:

NM_000201.3)

<400> 25

gagctcctct gctactcaga gttgcaacct cagcctcgct atggctccca gcagcccccg 60

gcccgcgctg cccgcactcc tggtcctgct cggggctctg ttcccaggac ctggcaatgc 120

ccagacatct gtgtccccct caaaagtcat cctgccccgg ggaggctccg tgctggtgac 180

atgcagcacc tcctgtgacc agcccaagtt gttgggcata gagaccccgt tgcctaaaaa 240

ggagttgctc ctgcctggga acaaccggaa ggtgtatgaa ctgagcaatg tgcaagaaga 300

tagccaacca atgtgctatt caaactgccc tgatgggcag tcaacagcta aaaccttcct 360

caccgtgtac tggactccag aacgggtgga actggcaccc ctcccctctt ggcagccagt 420

gggcaagaac cttaccctac gctgccaggt ggagggtggg gcaccccggg ccaacctcac 480

cgtggtgctg ctccgtgggg agaaggagct gaaacgggag ccagctgtgg gggagcccgc 540

tgaggtcacg accacggtgc tggtgaggag agatcaccat ggagccaatt tctcgtgccg 600

cactgaactg gacctgcggc cccaagggct ggagctgttt gagaacacct cggcccccta 660

ccagctccag acctttgtcc tgccagcgac tcccccacaa cttgtcagcc cccgggtcct 720

agaggtggac acgcagggga ccgtggtctg ttccctggac gggctgttcc cagtctcgga 780

ggcccaggtc cacctggcac tgggggacca gaggttgaac cccacagtca cctatggcaa 840

cgactccttc tcggccaagg cctcagtcag tgtgaccgca gaggacgagg gcacccagcg 900

gctgacgtgt gcagtaatac tggggaacca gagccaggag acactgcaga cagtgaccat 960

ctacagcttt ccggcgccca acgtgattct gacgaagcca gaggtctcag aagggaccga 1020

ggtgacagtg aagtgtgagg cccaccctag agccaaggtg acgctgaatg gggttccagc 1080

ccagccactg ggcccgaggg cccagctcct gctgaaggcc accccagagg acaacgggcg 1140

cagcttctcc tgctctgcaa ccctggaggt ggccggccag cttatacaca agaaccagac 1200

ccgggagctt cgtgtcctgt atggcccccg actggacgag agggattgtc cgggaaactg 1260

gacgtggcca gaaaattccc agcagactcc aatgtgccag gcttggggga acccattgcc 1320

cgagctcaag tgtctaaagg atggcacttt cccactgccc atcggggaat cagtgactgt 1380

cactcgagat cttgagggca cctacctctg tcgggccagg agcactcaag gggaggtcac 1440

ccgcaaggtg accgtgaatg tgctctcccc ccggtatgag attgtcatca tcactgtggt 1500

agcagccgca gtcataatgg gcactgcagg cctcagcacg tacctctata accgccagcg 1560

gaagatcaag aaatacagac tacaacaggc ccaaaaaggg acccccatga aaccgaacac 1620

acaagccacg cctccctgaa cctatcccgg gacagggcct cttcctcggc cttcccatat 1680

tggtggcagt ggtgccacac tgaacagagt ggaagacata tgccatgcag ctacacctac 1740

cggccctggg acgccggagg acagggcatt gtcctcagtc agatacaaca gcatttgggg 1800

ccatggtacc tgcacaccta aaacactagg ccacgcatct gatctgtagt cacatgacta 1860

agccaagagg aaggagcaag actcaagaca tgattgatgg atgttaaagt ctagcctgat 1920

gagaggggaa gtggtggggg agacatagcc ccaccatgag gacatacaac tgggaaatac 1980

tgaaacttgc tgcctattgg gtatgctgag gccccacaga cttacagaag aagtggccct 2040

ccatagacat gtgtagcatc aaaacacaaa ggcccacact tcctgacgga tgccagcttg 2100

ggcactgctg tctactgacc ccaacccttg atgatatgta tttattcatt tgttatttta 2160

ccagctattt attgagtgtc ttttatgtag gctaaatgaa cataggtctc tggcctcacg 2220

gagctcccag tcctaatcac attcaaggtc accaggtaca gttgtacagg ttgtacactg 2280

caggagagtg cctggcaaaa agatcaaatg gggctgggac ttctcattgg ccaacctgcc 2340

tttccccaga aggagtgatt tttctatcgg cacaaaagca ctatatggac tggtaatggt 2400

tacaggttca gagattaccc agtgaggcct tattcctccc ttccccccaa aactgacacc 2460

tttgttagcc acctccccac ccacatacat ttctgccagt gttcacaatg acactcagcg 2520

gtcatgtctg gacatgagtg cccagggaat atgcccaagc tatgccttgt cctcttgtcc 2580

tgtttgcatt tcactgggag cttgcactat gcagctccag tttcctgcag tgatcagggt 2640

cctgcaagca gtggggaagg gggccaaggt attggaggac tccctcccag ctttggaagc 2700

ctcatccgcg tgtgtgtgtg tgtgtatgtg tagacaagct ctcgctctgt cacccaggct 2760

ggagtgcagt ggtgcaatca tggttcactg cagtcttgac cttttgggct caagtgatcc 2820

tcccacctca gcctcctgag tagctgggac cataggctca caacaccaca cctggcaaat 2880

ttgatttttt ttttttttcc agagacgggg tctcgcaaca ttgcccagac ttcctttgtg 2940

ttagttaata aagctttctc aactgcc 2967

<---

Группа изобретений относится к биотехнологии. Представлены: применение антитела к рецептору интерлейкина-6 (IL-6R) при лечении ревматоидного артрита (RA) у субъекта, где субъекту вводят от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело к IL-6R содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно, а также способ лечения ревматоидного артрита (RA) у субъекта, включающий введение антитела, которое специфически связывается с рецептором интерлейкина-6 (IL-6R) человека, субъекту, страдающему RA. Изобретение может быть использовано для лечения ревматоидного артрита субъекта. 2 н. и 32 з.п. ф-лы, 8 ил., 6 табл., 1 пр.

1. Применение антитела к рецептору интерлейкина-6 (IL-6R) при лечении ревматоидного артрита (RA) у субъекта, у которого была определена:

(а) концентрация перед введением (на исходном уровне) сывороточного амилоида А(SAA) в сыворотке крови, составляющая более 105,2 нг/мл и необязательно менее 256,0 нг/мл, или концентрация перед введением (на исходном уровне) SAA в сыворотке крови, составляющая более 11,83 нг/мл и менее 30,08 нг/мл,

(b) концентрация перед введением (на исходном уровне) матриксной металлопротеиназы-3 (MMP-3) в сыворотке крови, составляющая более 77,0 нг/мл и необязательно менее 154,3 нг/мл, или концентрация перед введением (на исходном уровне) MMP-3 в сыворотке крови, составляющая более 35,5 нг/мл и менее 54,1 нг/мл,

(с) концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового (содержащего мотив C-X-C) лиганда 13 (CXCL13) в сыворотке крови, составляющая более 180,8 пг/мл и необязательно менее 323,9 пг/мл, или концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая более 98,2 пг/мл и менее 130,6 пг/мл,

(d) концентрация перед введением (на исходном уровне) химокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая менее 72,0 пг/мл, и концентрация перед введением (на исходном уровне) растворимой внутриклеточной молекулы адгезии 1 (sICAM-1) в сыворотке крови, составляющая менее 212,1 нг/мл, или

(e) концентрация перед введением (на исходном уровне) химокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая более 180,8 пг/мл, и концентрация перед введением (на исходном уровне) sICAM-1 в сыворотке крови, составляющая более 313,7 нг/мл,

где субъекту вводят от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело к IL-6R содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2, и антитело вводят подкожно.

2. Применение по п. 1, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) SAA в сыворотке крови, составляющая более 105,2 нг/мл и необязательно менее 256,0 нг/мл.

3. Применение по п. 1, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) MMP-3 в сыворотке крови, составляющая более 77,0 нг/мл и необязательно менее 154,3 нг/мл.

4. Применение по п. 1, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая более 180,8 пг/мл и необязательно менее 323,9 пг/мл.

5. Применение по п. 1, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая менее 72,0 пг/мл, и концентрация перед введением (на исходном уровне) sICAM-1 в сыворотке крови, составляющая менее 212,1 нг/мл.

6. Применение по п. 1, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая более 180,8 пг/мл, и концентрация перед введением (на исходном уровне) sICAM-1 в сыворотке крови, составляющая более 313,7 нг/мл.

7. Применение по любому из пп. 1-6, где у субъекта достигается:

(a) Американская коллегия ревматологов 20 (ACR20), Американская коллегия ревматологов 50 (ACR50) или Американская коллегия ревматологов 70 (ACR70) спустя 24 недели лечения с помощью антитела,

(b) балл Индекса Активности Заболевания 28-С-реактивного белка (DAS28-CRP), составляющий менее 3,2, спустя 24 недели лечения с помощью антитела или

(c) улучшение по меньшей мере по одному из следующих баллов спустя 24 недели лечения с помощью антитела: визуальная аналоговая шкала общей оценки пациента (VAS), индекс нарушения жизнедеятельности согласно опроснику для оценки состояния здоровья (HAQ-DI), VAS для оценки боли, балл Индекса Физического Здоровья согласно Краткому Опроснику по Качеству Жизни из 36 пунктов (SF-36-PCS), балл домена Физического Функционирования согласно Краткому Опроснику по Качеству Жизни из 36 пунктов (SF-36-PF), VAS для оценки утренней скованности и балл влияния заболевания при ревматоидном артрите (RAID).

8. Применение по любому из пп. 1-7, где у субъекта имеется ревматоидный артрит от умеренного до тяжелого и необязательно где субъект характеризуется непереносимостью к или имел недостаточный ответ на одно или более противоревматические лекарственные средства, модифицирующие течение заболевания (DMARD), необязательно где одно или более DMARD включают метотрексат.

9. Применение по любому из пп. 1-8, где антитело вводят с помощью предварительно заполненного шприца или с помощью автоинъектора.

10. Применение по любому из пп. 1-9, где антитело вводят в виде водного забуференного раствора с pH приблизительно 6,0, содержащего приблизительно 21 мМ гистидина, приблизительно 45 мМ аргинина, приблизительно 0,2% (вес/об.) полисорбата 20 и приблизительно 5% (вес/об.) сахарозы.

11. Применение по п. 10, где раствор содержит по меньшей мере приблизительно 130 мг/мл антитела, или где раствор содержит приблизительно 131,6 мг/мл антитела, или где раствор содержит приблизительно 175 мг/мл антитела.

12. Применение по любому из пп. 1-11, где субъекту вводят метотрексат при дозировке от 6 до 25 мг в неделю в дополнение к антителу.

13. Применение по любому из пп. 1-12, где подкожно вводят приблизительно 150 мг антитела один раз в две недели или подкожно вводят приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели.

14. Применение по любому из пп. 1-13, где антитело представляет собой сарилумаб.

15. Применение по любому из пп. 1-14, где субъект проявляет повышенный ответ на антитело к IL-6R по сравнению с ингибитором TNF-α.

16. Применение по п. 15, где ингибитор TNF-α представляет собой адалимумаб.

17. Способ лечения ревматоидного артрита (RA) у субъекта, включающий введение антитела, которое специфически связывается с рецептором интерлейкина-6 (IL-6R) человека, субъекту, страдающему RA, у которого была определена:

(а) концентрация перед введением (на исходном уровне) сывороточного амилоида А(SAA) в сыворотке крови, составляющая более 105,2 нг/мл и необязательно менее 256,0 нг/мл, или концентрация перед введением (на исходном уровне) A(SAA) в сыворотке крови, составляющая более 11,83 нг/мл и менее 30,08 нг/мл,

(b) концентрация перед введением (на исходном уровне) матриксной металлопротеиназы-3 (MMP-3) в сыворотке крови, составляющая более 77,0 нг/мл и необязательно менее 154,3 нг/мл, или концентрация перед введением (на исходном уровне) MMP-3 в сыворотке крови, составляющая более 35,5 нг/мл и менее 54,1 нг/мл,

(с) концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового (содержащего мотив C-X-C) лиганда 13 (CXCL13) в сыворотке крови, составляющая более 180,8 пг/мл и необязательно менее 323,9 пг/мл, или концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая более 98,2 пг/мл и менее 130,6 пг/мл,

(d) концентрация перед введением (на исходном уровне) химокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая менее 72,0 пг/мл, и концентрация перед введением (на исходном уровне) растворимой внутриклеточной молекулы адгезии 1 (sICAM-1) в сыворотке крови, составляющая менее 212,1 нг/мл, или

(e) концентрация перед введением (на исходном уровне) химокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая более 180,8 пг/мл, и концентрация перед введением (на исходном уровне) sICAM-1 в сыворотке крови, составляющая более 313,7 нг/мл.

18. Способ по п. 17, где субъекту вводят от приблизительно 150 мг до приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность под SEQ ID NO: 2.

19. Способ по п. 17 или 18, где антитело вводят подкожно.

20. Способ по любому из пп. 17-19, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) А(SAA) в сыворотке крови, составляющая более 105,2 нг/мл и необязательно менее 256,0 нг/мл.

21. Способ по любому из пп. 17-19, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) матриксной металлопротеиназы-3 (MMP-3) в сыворотке крови, составляющая более 77,0 нг/мл и необязательно менее 154,3 нг/мл.

22. Способ по любому из пп. 17-19, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового (содержащего мотив C-X-C) лиганда 13 (CXCL13) в сыворотке крови, составляющая более 180,8 пг/мл и необязательно менее 323,9 пг/мл.

23. Способ по любому из пп. 17-19, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая менее 72,0 пг/мл, и концентрация перед введением (на исходном уровне) растворимой внутриклеточной молекулы адгезии 1 (sICAM-1) в сыворотке крови, составляющая менее 212,1 нг/мл.

24. Способ по любому из пп. 17-19, где у субъекта определена концентрация перед введением (на исходном уровне) хемокинового CXCL13 в сыворотке крови, составляющая более 180,8 пг/мл, и концентрация перед введением (на исходном уровне) sICAM-1 в сыворотке крови, составляющая более 313,7 нг/мл.

25. Способ по любому из пп. 17-24, где у субъекта достигается:

(a) Американская коллегия ревматологов 20 (ACR20), Американская коллегия ревматологов 50 (ACR50) или Американская коллегия ревматологов 70 (ACR70) спустя 24 недели лечения с помощью антитела,

(b) балл Индекса Активности Заболевания 28-С-реактивного белка (DAS28-CRP), составляющий менее 3,2, спустя 24 недели лечения с помощью антитела или

(c) улучшение по меньшей мере по одному из следующих баллов спустя 24 недели лечения с помощью антитела: визуальная аналоговая шкала общей оценки пациента (VAS), индекс нарушения жизнедеятельности согласно опроснику для оценки состояния здоровья (HAQ-DI), VAS для оценки боли, балл Индекса Физического Здоровья согласно Краткому Опроснику по Качеству Жизни из 36 пунктов (SF-36-PCS), балл домена Физического Функционирования согласно Краткому Опроснику по Качеству Жизни из 36 пунктов (SF-36-PF), VAS для оценки утренней скованности и балл влияния заболевания при ревматоидном артрите (RAID).

26. Способ по любому из пп. 17-25, где у субъекта имеется ревматоидный артрит от умеренного до тяжелого и необязательно где субъект характеризуется непереносимостью к или имел недостаточный ответ на одно или более противоревматические лекарственные средства, модифицирующие течение заболевания (DMARD), необязательно где одно или более DMARD включают метотрексат.

27. Способ по любому из пп. 17-26, где антитело вводят с помощью предварительно заполненного шприца или с помощью автоинъектора.

28. Способ по любому из пп. 17-27, где антитело вводят в виде водного забуференного раствора с pH приблизительно 6,0, содержащего приблизительно 21 мМ гистидина, приблизительно 45 мМ аргинина, приблизительно 0,2% (вес/об.) полисорбата 20 и приблизительно 5% (вес/об.) сахарозы.

29. Способ по п. 28, где раствор содержит по меньшей мере приблизительно 130 мг/мл антитела, или где раствор содержит приблизительно 131,6 мг/мл антитела, или где раствор содержит приблизительно 175 мг/мл антитела.

30. Способ по любому из пп. 17-29, дополнительно включающий введение субъекту метотрексата при дозировке приблизительно от 6 до 25 мг в неделю.

31. Способ по любому из пп. 17-30, где субъекту подкожно вводят приблизительно 150 мг антитела один раз в две недели или подкожно вводят приблизительно 200 мг антитела один раз в две недели.

32. Способ по любому из пп. 17-31, где антитело представляет собой сарилумаб.

33. Способ по любому из пп. 17-32, где субъект проявляет повышенный ответ на антитело к IL-6R по сравнению с ингибитором TNF-α.

34. Способ по п. 33, где ингибитор TNF-α представляет собой адалимумаб.

название	год	авторы	номер документа
АНТИТЕЛА, НЕЙТРАЛИЗУЮЩИЕ GM-CSF, ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ЛЕЧЕНИИ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА ИЛИ В КАЧЕСТВЕ АНАЛЬГЕТИКОВ	2014	Др. Вагнер Томас Карлссон Малин Стаум Калтофт Маргит	RU2714919C2
КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ АНТИТЕЛА К IL6R, ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ УВЕИТА И МАКУЛЯРНОГО ОТЕКА, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ	2016	Сридхара Сундарам Притхи Аавали Бюггаж Рональ Чу Карен В. Кор Ди Жанти Валери Эриксон Кристин А. Мери-Миньяр Доминик Варона Рафаэль Витти Роберт Л.	RU2747193C2
СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ АНТИТЕЛАМИ, КОТОРЫЕ СВЯЗЫВАЮТСЯ С РЕЦЕПТОРОМ КОЛОНИЕСТИМУЛИРУЮЩЕГО ФАКТОРА 1 (CSF1R)	2013	Вонг Брайан Мастеллер Эмма Ридквист Крис Занги Джеймс Аллен Хамблтон Джули Бейкер Кевин	RU2718751C2
АНТИТЕЛА, ИХ ПРИМЕНЕНИЕ И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ	2016	Блэнд-Ворд Филип Космак Миха Холмс Стив Кирби Иан Кэмпбелл Джейми Кин Лесли Сьюзан Ткачев Виктор	RU2725221C2
СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ АСТМЫ ПОСРЕДСТВОМ ВВЕДЕНИЯ АНТАГОНИСТА IL-4R	2013	Арделеану, Мариус Гандхи, Намита Грэхем, Нейл Киркессели, Стефан, К. Кунду, Судип Рейдин, Аллен Роклин, Росс, Э. Вайнштейн, Стивен Дэвидсон Хэмилтон, Дженнифер Минг, Джеффри	RU2801531C2
МОНИТОРИНГ ТЕРАПИИ ПРИ ЛЕЧЕНИИ СВЯЗЫВАЮЩИМ ВЕЩЕСТВОМ ПРОТИВ АДРЕНОМЕДУЛЛИНА (ADM)	2018	Штрук, Йоахим Бергманн, Андреас	RU2776811C2
КОМБИНИРОВАННЫЕ СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ АНТАГОНИСТАМИ PD-L1	2016	Эндрьюс Глен Айан Чень Шихао Ди Пьетро Алессандра Фонтана Дейвид Голдберг Зеланна Линь Чиа-Ян Лонг Хуа Мартиньони Марселла Нуйтен Дмитрий Серж Антуан Толл Арон Дейвид Вулфсон Адриан	RU2766890C2
ДОЗЫ И ВВЕДЕНИЕ АНТИТЕЛ ПРОТИВ C5 ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АТИПИЧНОГО ГЕМОЛИТИКО-УРЕМИЧЕСКОГО СИНДРОМА (аГУС)	2020	Пэйтон, Лори Микс, Кристиан Прадхан, Раджендра Дамокош, Андрю Свенсон, Юджин Скотт Гао, Сян	RU2822664C2
ЛЕЧЕНИЕ И ИНГИБИРОВАНИЕ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЛЕГКИХ У ПАЦИЕНТОВ С АЛЛЕЛЯМИ РИСКА В ГЕНАХ, КОДИРУЮЩИХ IL33 И IL1RL1	2018	Брус, Шэннон Маккарти, Шейн Барас, Арис Дьюи, Фредерик Готтсман, Омри	RU2776241C2
ВИДЫ КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ХИМЕРНЫХ АНТИГЕННЫХ РЕЦЕПТОРОВ И ИНГИБИТОРОВ PD-1	2017	Анак, Озлем Байлик, Сэйнела Брогдон, Дженнифер Кэмерон, Джон, Скотт Чоу, Уилльям Хауард, Дэнни, Роланд, Мл. Исаакс, Ранди Джун, Карл, Х. Лейси, Саймон Мод, Шеннон Миленхорст, Ян, Дж. Шастер, Стивен Кинтас-Кардама, Альфонсо Грапп, Стефан Биттер, Ханс	RU2809160C2

WO 2017155990 A1, 14.09.2017
WO 2016044343 A1, 24.03
Токарный резец	1924	Г. Клопшток	SU2016A1
WO 2015077582 A1, 28.05.2015
КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ	2012	Хуан Сяохун Жассон Мартин Марк Ванесса Рейдин Аллен	RU2664697C2

СПОСОБЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА Российский патент 2024 года по МПК C07K16/28 G01N33/564 A61K39/395 A61P19/02

Описание патента на изобретение RU2828027C2

Похожие патенты RU2828027C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 828 027 C2

Реферат патента 2024 года СПОСОБЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА

Формула изобретения RU 2 828 027 C2

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2024 года RU2828027C2

RU 2 828 027 C2