Способ коррекции нарушений микроциркуляции в почке инфликсимабом при ишемически-реперфузионном повреждении Российский патент 2021 года по МПК A61K39/395 A61P13/12 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и урологии.

На сегодняшний день заболеваемость населения онко-урологической патологией остается крайне высокой: согласно данным Росстата в период с 2010 г. по 2018 г. отмечен рост частоты случаев рака почек с 18,7 до 24,3 тысяч в год [И.Н. Шаповал, С.Ю. Никитина. Здравоохранение в России. 2019: Стат.сб./Росстат. - М., З-46 2019. – с 39]. Согласно современным тенденциям, при выявлении болезни на начальных этапах оптимальным считается выполнение органосохранной операции (резекции почки) [М.А. Газимиев, ООО «Медконгресс», Клинические рекомендации Европейской ассоциации урологов 2020, - Москва, 2020 г., с.71], наиболее часто проводимой в условиях тепловой ишемии. Учитывая данный факт, одной из главных задач, поставленных перед врачами и учеными всего мира, является профилактика развития острого почечного повреждения (ОПП), обусловленного окклюзией почечных сосудов [Basile D.P. Renal endothelial dysfunction in acute kidney ischemia reperfusion injury / D.P. Basile, M.C. Yoder // Cardiovasc. Hematol. Disord. Drug Targets. – 2014. – Vol. 14, Iss. 1. – P. 3–14].

Одним из перспективных механизмов предупреждения нарушений микроциркуляции в почке при ишемически-реперфузионных повреждениях является фармакологическое прекондиционирование [Елагин В.В., Костина Д.А., Братчиков О.И., Покровский М.И., Покровская Т.Г. Исследование ренопротективных свойств производных эритропоэтина на модели ишемии-реперфузии почек. Кубанский научный медицинский вестник. 2018; 25(6): 73-77. DOI: 10.25207 / 1608-6228-2018-25-6-73-77].

Прототипом предлагаемого изобретения является способ коррекции нарушений микроциркуляции в почке при моделировании ишемически-реперфузионного повреждения с использованием эритропоэтина [Елагин В.В., Костина Д.А., Братчиков О.И., Покровский М.И., Покровская Т.Г. Исследование ренопротективных свойств производных эритропоэтина на модели ишемии-реперфузии почек. Кубанский научный медицинский вестник. 2018; 25(6): 73-77. DOI: 10.25207 / 1608-6228-2018-25-6-73-77]. Биологические эффекты реализуются при связывании со специфическими гетеродимерными рецепторами, в результате чего происходит торможение апоптоза и нормализуется функционирование паренхимы почек. Модель эксперимента включает наложение атравматичных зажимов на обе почечные ножки на 40 минут. С целью профилактики нарушения микроциркуляции в почках однократно внутрибрюшинно за 30 минут до ишемии вводили эритропоэтин в дозе 50 МЕ/кг. В результате отмечено улучшение показателей микроциркуляции в ткани почек.

Другим патогенетическим звеном развития нарушений микроциркуляции в почке при моделировании ишемически-реперфузионного повреждения, является интенсивная миграция и накопление в паренхиме почек моноцитов и макрофагов в ответ на ишемически-реперфузионное повреждение почек. Последние в свою очередь стимулируют массивный выброс провоспалительных цитокинов, включая фактор некроза опухоли-альфа (TFN-α), приводящих к развитию оксидативного стесса. [Serteser M, Koken T, Kahraman A, Changes in hepatic TNF-alpha levels, antioxidant status, and oxidation products after renal ischemia/reperfusion injury in mice. J Surg Res. 2002;107(2):234–240]. Соответственно другим способом коррекции нарушений микроциркуляции в почке может быть использование фармакологических препаратов снижающих активность IL−1, IL−6, IL−8 и TFN-α.

Поэтому результаты коррекции микроциркуляции в почке при моделировании ишемически-реперфузионного повреждений почек у животных с использованием эритропоэтина неудовлетворительны.

В фармакологии известны препараты, снижающие активности фактора некроза опухоли-альфа. Одним из них является инфликсимаб. Он обладает высокой аффинностью к фактору некроза опухоли- α, а так же понижает концентрацию (связывает и ингибирует синтез) IL−1, IL−6, IL−8, моноцитарного хемоатрактантного белка-1, оксида азота, металлопротеиназ (коллагеназа, стромелизин), и других индукторов воспаления и тканевой деструкции [Cemal Tasdemir 1, Seda Tasdemir, Nigar Vardi, Burhan Ates, Hakan Parlakpinar, Bulent Kati, Merve Goksin Karaaslan, Ahmet Acet. Protective effect of infliximab on ischemia/reperfusion-induced damage in rat kidney. PMID: 22950848].

Задачей изобретения является создание эффективного способа коррекции микроциркуляции в почке при моделировании ишемически-реперфузионных повреждений почек.

Техническим результатом изобретения изобретения является способ коррекции нарушений микроциркуляции при моделировании ишемически-реперфузионных повреждений почек, включающий использование инфликсимаба.

Поставленная задача решается с помощью предлагаемого способа коррекции нарушений микроциркуляции в почке, включающего воспроизведение модели ишемически-реперфузионных повреждений почек путем наложения атравматичных сосудистых зажимов на левую почечную ножку на 40 минут, а коррекцию нарушений микроциркуляции в почке осуществляют внутрибрюшинным введением инфликсимаба в дозировке 10 мг/кг за 1 час до ишемии.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыт проводился на белых лабораторных крысах-самцах линии Wistar массой 280-320г. Моделирование ишемически-реперфузионных повреждений почек производили путем наложения атравматичных сосудистых зажимов на левую почечную ножку на 40 минут. Инфликсимаб вводился внутрибрюшинно за 1 час до моделирования ишемии в дозе 10 мг\кг.

Микроциркуляцию в корковом слое почек измеряли через 5 минут и 24 часа после ишемии с помощью аппаратно-программного комплекса MP100 (Biopac System, Inc., США) с модулем лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) LDF100C и поверхностного датчика TSD143, который прикладывался к средней части почки, не затрагивая область ворот. Регистрация и обработка результатов производилась с помощью программного обеспечения AcqKnowledge версии 3.8.1. Значения показателей выражались в перфузионных единицах (ПЕд).

Статистическая обработка результатов исследования.

Статистическую обработку проводили с использованием программной среды вычислений R. Характер распределения признаков в статистической выборке определяли с помощью критерия Шапиро-Уилка и критерия Шпигельхальтера (библиотека normtest), оценку равенства дисперсий – с помощью критерия Левене (библиотека lawstat). В зависимости от типа распределения признаков и равенства дисперсий значимость полученных результатов оценивали с применением параметрического (ANOVA) или непараметрического (критерий Краскела-Уоллиса) однофакторного дисперсионного анализа, а в качестве post-hoc анализа для выявления различий при межгрупповых сравнениях использовали непарный t-критерий Стьюдента или критерий Манна-Уитни, соответственно, с поправкой Бенджамини-Хохберга на множественную проверку гипотез. Результаты считали достоверными при p≤0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Развитие острого повреждения почек, вызванного наложением атравматичного зажима на почечные сосуды, что приводило к нарушению микроциркуляции в почке, о чем свидетельствует снижение ее величины с 900±42 ПЕд до 219±12 ПЕд (р<0,05) через 5 минут после ишемии, через 24 часа после ишемии с 881±38 ПЕд (у ложнооперированных) до 430±20 ПЕд (в группе ишемии\реперфузии). Внутрибрюшинное введение инфликсимаба в дозировке 10 мг/кг за 1 час до ишемии на фоне моделирования ишемически-реперфузионного повреждения почки крыс приводило к достоверному повышению уровня микроциркуляции в почке через 5 минут после ишемии до 674±28 ПЕд, через 24 часа после ишемии до 743±34 ПЕд соответственно, что статистически выше (р<0,05), чем в группе животных без лечения.

Таким образом, полученные результаты убедительно свидетельствуют о выраженной коррекции нарушения микроциркуляции в почке в условиях воспроизводимой модели ишемически-реперфузионных повреждений почек крыс с использованием инфликсимаба.

Влияние инфликсимаба на микроциркуляцию при моделировании ишемически-реперфузионного повреждения почек крыс в таблице 1.

Таблица 1

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и урологии, и может быть использовано для коррекции нарушений микроциркуляции в почке. Cпособ коррекции нарушений микроциркуляции в почке включает воспроизведение модели ишемически-реперфузионных повреждений почек путем наложения атравматичных сосудистых зажимов на левую почечную ножку на 40 минут. Для коррекции микроциркуляции вводят внутрибрюшинно инфликсимаб в дозировке 10 мг/кг однократно за 1 час до ишемии. Изобретение обеспечивает создание эффективного способа коррекции микроциркуляции в почке при моделировании ишемически-реперфузионных повреждений почек. 1 табл., 1 пр.

Cпособ коррекции нарушений микроциркуляции в почке, включающий воспроизведение модели ишемически-реперфузионных повреждений почек путем наложения атравматичных сосудистых зажимов на левую почечную ножку на 40 минут, отличающийся тем, что для коррекции микроциркуляции вводят внутрибрюшинно инфликсимаб в дозировке 10 мг/кг однократно за 1 час до ишемии.