КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ УРОЛИТИНЫ Российский патент 2021 года по МПК A61K31/20 A61K31/366 A61K31/352 A61K47/14 A61K47/24 A61K47/44 A61K9/00 A61K9/06 A61K9/08 A61K9/107 A61K9/48 A61K9/50 A61P21/00 C07D311/80 

Данное изобретение относится к питательным и лекарственным составам уролитинов и среднецепочечных триглицеридов.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Уролитины оказывают сильное воздействие на улучшение состояния здоровья, и демонстрируют высокую биологическую активность in vitro и in vivo. Уролитины были предложены для лечения различных состояний, включая состояния, связанные с нарушенной митохондриальной активностью, включая ожирение, ухудшение памяти, сниженную скорость обмена веществ, метаболический синдром, сахарный диабет, сердечно-сосудистое заболевание, гиперлипидемию, нейродегенеративное заболевание, когнитивное расстройство, расстройство настроения, стресс, тревожное расстройство, стеатоз печени (например, неалкогольная жировая болезнь печени (НЖБП) или неалкогольный стеатогепатит (НАСГ)), и для улучшения функции печени и для контроля массы тела. В частности, было показано, что уролитины оказывают благотворное влияние на усиление мышечной функции.

Низкая мышечная масса или низкая мышечная функция являются характеристиками многих заболеваний и состояний. Связанные с мышцами патологические состояния включают миопатии, нервно-мышечные заболевания, такие как мышечная дистрофия Дюшенна, острая саркопения, например, атрофия мышц и/или кахексия, например, связанная с ожогами, постельным режимом, иммобилизацией конечности или обширным торакальным, абдоминальным, шейным и/или ортопедическим оперативным вмешательством. Возрастная атрофия мышечной ткани является особенно распространенным заболеванием Кахексия из-за длительной иммобилизации или других заболеваний, например, рака, относится к другим состояниям, для которых часто характерна низкая мышечная функция.

Хорошая мышечная функция важна для продуктивной жизни на всех этапах жизни здоровых субъектов, а также субъектов, страдающих заболеванием, особенно пожилых людей. Повышенная мышечная функция также представляет особый интерес для спортсменов. Например, увеличение силы мышечного сокращения, увеличение амплитуды мышечного сокращения или уменьшение времени реакции мышц между стимуляцией и сокращением, являются в интересах субъектов, особенно спортсменов. В тяжелых случаях мышечной атрофии пациенту вводят анаболический стероид, такой как Метандростенолон, для оказания помощи в лечении. Такие лекарственные средства могут иметь многочисленные побочные действия, поэтому предпочтительно избегать их длительного применения.

Уролитины обладают свойствами, которые делают их пригодными при лечении и профилактике различных состояний, в том числе для повышения мышечной функции. Однако в виде простой суспензии в физиологическом растворе, уролитины демонстрируют неудовлетворительный фармакокинетический профиль с отсроченным повторным повышением их уровня в крови через некоторое время после первоначального пика, что затрудняет введение таких суспензий.

Многократное достижение максимума концентрации перорально вводимого соединения в крови, с двумя или более пиками концентрации через некоторое время может быть обусловлено рядом факторов, включающим: (i) композицию, и выбором вспомогательного вещества; (ii) физиологию самого желудочно-кишечного тракта, включая рН и компоненты желчи, которая регулируется гормональными и пищевыми факторами; (iii) биохимические различия в разных отделах желудочно-кишечного тракта, которые могут привести к созданию точек для абсорбции и, следовательно, к многократному достижению максимума; а также (iv) энтерогепатическую рециркуляцию. При пероральном введении биологически активных соединений предпочтительно, чтобы концентрация соединения в плазме представляла собой один пик, а не многократный профиль пиков. Составы, которые допускают один пик действующего соединения после перорального введения, облегчают оптимизацию вводимой дозы, а также частоту введения по сравнению с составами, которые приводят к множественным пиковым концентрациям в крови. Следовательно, желательны композиции, которые приводят к получению одного пика, и облегчают создание терапевтического дозирующего окна, в котором соединение может оказывать свои преимущества для здоровья млекопитающих.

В дополнение к нежелательным фармакокинетический свойствам простой суспензии в физиологическом растворе, во многих случаях, соединения также характеризуются ограниченной биодоступностью. Таким образом, существует потребность

в составах уролитинов, которые имеют как приемлемый фармакокинетический профиль, так и улучшенную биодоступность.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к композиции, содержащей:

a) среднецепочечный триглицерид; и

b) соединение формулы (I) или его соль:

где:

А, В, С и D, каждый независимо, выбирают из Н и ОН;

W, X и Y, каждый независимо, выбирают из Н и ОН; и

Z выбирают из Н и ОН.

Соединения Формулы (I) являются членами семейства уролитинов; в частности, соединение Формулы (I) может быть Уролитином А. Неожиданно было обнаружено, что Уролитин А в композиции среднецепочечного триглицерида и Уролитина А имеет улучшенную биодоступность и фармакокинетический профиль по сравнению с Уролитином А в чистом виде в простой суспензии в физиологическом растворе. Таким образом, композиция по данному изобретению пригодна для улучшения общего состояния здоровья и контроля общего состояния здоровья здоровых субъектов, а также при лечении и профилактике различных заболеваний и состояний, в частности, состояний, характеризующихся нарушенной митохондриальной активностью. В частности, композицию применяют при лечении и контроле состояния здоровья субъектов, которые получат пользу от улучшенной мышечной функции, включая субъектов с нарушенной физической работоспособностью и нарушенной мышечной функцией. Композиция также находит применение при лечении, профилактике или ведении заболеваний и состояний, характеризующихся низкой мышечной массой или низкой мышечной функции, и при повышении мышечного роста и/или мышечной функции. Она также пригодна для поддержания мышечной функции.

Данное изобретение дополнительно предлагает композицию по данному изобретению для применения при лечении различных заболеваний, включая заболевания, связанные с нарушенной митохондриальной активностью, включая ожирение, сниженную скорость обмена веществ, метаболический синдром, сахарный диабет, сердечно-сосудистое заболевание, гиперлипидемию, ухудшение памяти, нейродегенеративное заболевание, когнитивное расстройство, расстройство настроения, стресс и тревожное расстройство, стеатоз печени (например, неалкогольная жировая болезнь печени (НЖБП) или неалкогольный стеатогепатит (НАСГ)), и для улучшения функции печени и для контроля массы тела. В частности, данное изобретение предлагает композицию для применения при лечении связанных с мышцами патологических состояний. Данное изобретение также предлагает способ лечения, связанного с мышцами патологического состояния у субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества композиции по данному изобретению. Данное изобретение предлагает композицию по данному изобретению для применения в усилении мышечной функции. Данное изобретение также предлагает способ усиления мышечной функции путем введения субъекту эффективного количества композиции по данному изобретению.

Кроме того, данное изобретение предлагает соединение Формулы (I) или его соль, имеющее размер частиц D₅₀ в диапазоне от 0,5 до 50 мкм и размер частиц D₉₀ в диапазоне от 5 до 100 мкм. Предпочтительно, соединение или соль имеет размер частиц D₉₀ в диапазоне от 8,2 до 16,0 мкм, размер частиц D₅₀ в диапазоне от 2,8 до 5,5 мкм и размер частиц D₁₀ в диапазоне от 0,5 до 1,0 мкм. Было обнаружено, что соединения по данному изобретению с такими размерами частиц обладают хорошей дисперсионной способностью и хорошей растворимостью, и повышенной биодоступностью.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На Фигуре 1 изображены результаты экспериментов, в которых крысам вводили составы, содержащие Уролитин А и/или физиологический раствор, или различные другие компоненты, такие как среднецепочечные триглицериды, и показана оценка уровня Уролитина А в крови.

На Фигуре 2 изображены результаты экспериментов, в которых крысам и людям вводили составы, содержащий Уролитин А и среднецепочечные триглицериды, и оценка уровня Уролитина А в крови.

На Фигуре 3 изображены результаты экспериментов, в которых крысам вводили составы, содержащими Уролитин А при различных размерах частиц, и показана оценка уровня Уролитина А в крови.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Как описано выше, данное изобретение предлагает композицию, содержащую среднецепочечный триглицерид и уролитин.

Среднецепочечный триглицерид обычно составляет по меньшей мере 1% мас./мас. композиции по данному изобретению, например, по меньшей мере 5% мас./мас., например, по меньшей мере 10% мас./мас., например, по меньшей мере 15% мас./мас.. Среднецепочечный триглицерид предпочтительно составляет 20% мас./мас. или более композиции, например, 25% мас./мас. или более по массе, например, 30% мас./мас. или более по массе композиции. Например, среднецепочечный триглицерид может составлять 1-40% мас./мас. композиции, 2-40% мас./мас. композиции, 5-40% мас./мас. композиции; 10-40% мас./мас. композиции; 1-99% мас./мас. композиции, 5-99% мас./мас. композиции, 10-99% мас./мас. композиции, 20-99% мас./мас. композиции, 5-90% мас./мас. композиции, 10-90% мас./мас. композиции, например, 20-90% мас./мас. композиции, 20-80% мас./мас. композиции например, 30-80% мас./мас. композиции, например, 30-70% мас./мас. композиции, например, 30-60% мас./мас. композиции, например, 30-50% мас./мас. композиции, например, 30-40% мас./мас. композиции, например, 30-35% мас./мас. композиции. Например, среднецепочечный триглицерид может составлять 40-70% мас./мас. композиции, например, 50-70% мас./мас. композиции, например, 55-65% мас./мас. композиции Массовое соотношение среднецепочечного триглицерида к уролитину, как правило находится в диапазоне от 0,01:1 до 100:1, например, от 0,5:1 до 100:1, например, от 0,5:1 до 50:1, например, от 0,5:1 до 5:1; или, например, от 1:1 до 75:1, например, от 1:1 до 50:1, например, от 1:1 до 20:1, например, от 1:1 до 10:1, например, от 1:1 до 2,5:1, например, от 1:1 до 2:1, например, от 1:1 до 1,5:1. Массовое соотношение среднецепочечного триглицерида к уролитину может быть в соотношении от 0,01:1 до 10:1, например, от 0,1:1 до 10:1 или от 0,01:1 до 5:1, например, от 0,01:1 до 0,1:1. Композиция по данному изобретению обычно имеет консистенцию вязкой жидкости или пасты, и она может быть введена в виде одноразовой добавки к общей диете субъекта (например, в батончике, геле или мягкой желатиновой капсуле, твердой капсуле или разбавленной в напитке); альтернативно, она может быть введена частично или полностью при каждом приеме пищи.

Как правило уролитин составляет от 0,1 до 80% мас./мас. композиции по данному изобретению, например, от 0,1 до 60% мас./мас., например, от 0,25 до 50% мас./мас.. Например, уролитин может составлять 0,5-50% мас./мас. композиции. Если композиция вводится частично или полностью при приеме пищи, то уролитин может составлять, например, 0,25-5% мас./мас. композиции, например, 0,3-3% мас./мас. композиции. Если композиция по данному изобретению предназначена как одноразовая добавка к общей диете субъекта; то уролитин как правило составляет от 20 до 80% мас./мас. композиции, например, от 20 до 40% мас./мас., например, от 25 до 35% мас./мас. композиции по данному изобретению. Например, уролитин может составлять 26-34% мас./мас. композиции, например, 28-33% мас./мас. композиции; например, 29-32% мас./мас. композиции, например, 29-31% мас./мас. композиции.

Среднецепочечные триглицериды:

Среднецепочечные триглицериды представляют собой соединения формулы CH₂(OR¹)-CH(OR²)-CH₂(OR³), где R¹, R² и R³ представляют собой карбонильные группы жирных кислот со средней длиной цепи, причем обычно формула -С(=O)(СН₂)_nCH₃, где n находится в диапазоне от 4 до 10, например, от 6 до 8. Жирные кислоты со средней длиной цепи представляют собой жирные кислоты, которые имеют алифатический остаток из 6-12 атомов углерода. Алифатический остаток преимущественно насыщенный. В частности, жирные кислоты со средней длиной цепи включают капроновую кислоту (гексановая кислота, С6:0), каприловую кислоту (октановая кислота, С8:0), каприновую кислоту (декановая кислота, С10:0) и лауриновую кислоту (додекановая кислота, С12:0). Миристиновая кислота (тетрадекановая кислота, С14:0) также может присутствовать в незначительных количествах. Наиболее часто используемые среднецепочечные триглицериды обычно имеют смесь триглицеридов каприловой кислоты и каприновой кислоты, и содержат 95% или более насыщенных жирных кислот. Компонент среднецепочнего триглицерида в композиции по данному изобретению может состоять из гомогенного, содержащего остаток жирной кислоты со средней длиной цепи одного типа; более чаще, компонент среднецепочечного триглицерида в композиции по данному изобретению представляет собой смесь двух или более различных среднецепочечных триглицеридов.

Европейская фармакопея описывает среднецепочечные триглицериды как нелетучее масло, экстрагированное из твердой, высушенной фракции эндосперма Cocos nucifera L. (кокосовая пальма) или из высушенного эндосперма Elaeis guineenis Jacq. (Африканская масличная пальма). Европейская фармакопея и Фармакопея США имеют спецификации для среднецепочечных триглицеридов, регламентирующие присутствие конкретных следующих жирных кислот: капроновую кислоту (С6)≤2,0%; каприловую кислоту (С8) 50,0-80,0%; каприновую кислоту (С10) 20,0-50,0%; лауриновую кислоту (С12)≤3,0%; и миристиновую кислоту (С14)≤1%.

В частности, среднецепочечные триглицериды для применения в композициях по данному изобретению включают смесь триглицеридов с цепями жирных кислот, присутствующих в следующих пропорциях: С6≤5%; С8 50-70%; С10 30-50%; и С12≤12%, например, С6≤0,5%; С8 55-65%; С10 35-45%; и С12≤1,5%.

Среднецепочечные триглицериды для применения в композициях по данному изобретению могут быть получены из любого известного или иного подходящего источника. Среднецепочечные триглицериды могут быть экстрагированы из природных источников или синтезированы из глицерина и подходящих жирных кислот в соответствующих условиях. Неограничивающие примеры коммерческих источников для экстракции среднецепочечных триглицеридов (или жирных кислот со средней длинной цепи, которые могут быть использованы в синтезе среднецепочечных триглицеридов), включают кокосовое масло и пальмовое масло, а также молочный жир, в частности сливочное масло. Могут быть использованы комбинации источников или типов среднецепочечных триглицеридов.

Среднецепочечные триглицериды для применения в композициях по данному изобретению могут быть приобретены в виде жидких или твердых препаратов и в виде простых или сложных комбинаций с сахарами, витаминами, незаменимыми жирными кислотами и минералами. Среднецепочечные триглицериды также доступны в виде масла или маргарина.

Уролитины

Уролитины представляют собой метаболиты, продуцируемые под влиянием млекопитающих, включая человеческую, кишечную микробиоту на эллагитанинах и эллагиновой кислоте. Эллаготанины и эллаговая кислота представляют собой соединения, обычно встречающиеся в пищевых продуктах, таких как гранаты, орехи и ягоды. Эллаготанины минимально всасываются самим кишечником. Уролитины представляют собой класс соединений с представленной выше структурой (I). Структуры некоторых особенно распространенных уролитинов описаны в Таблице 1 ниже, со ссылкой на структуру (I).

На практике удобно синтезировать уролитины в промышленных масштабах. Методики синтеза описаны, например, в WO 2014/004902.

Уролитины любой структуры в соответствии со структурой (I) могут быть использованы в композициях по данному изобретению. Особенно подходящими соединениями для использования в композициях по данному изобретению являются природные уролитины. Таким образом, Z предпочтительно представляет собой ОН и W, X и Y предпочтительно представляют собой все Н. В случае, если W, X и Y представляют собой все Н, и А, и В представляют собой оба Н, и С, D и Z представляют собой все ОН, то соединение представляет собой Уролитин С. В случае, если W, X и Y представляют собой все Н, и А, В и С представляют собой все Н, и D и Z представляют собой оба ОН, то соединение представляет собой Уролитин А. Предпочтительно, уролитин используемый в составе по данному изобретению представляет собой Уролитин А, Уролитин В, Уролитин С или Уролитин D. Наиболее предпочтительно, уролитин наиболее предпочтительный по данному изобретению представляет собой Уролитин А.

Предпочтительно, чтобы уролитин для применения в композициях по данному изобретению был тонкоизмельченным. Тонкое измельчение приводит к улучшению диспергируемости или увеличению скорости растворения. Если используется тонкоизмелченный уролитин, то предпочтительно, чтобы уролитин имел размер частиц D₅₀ менее 100 мкм - то есть 50% уролитина по массе имеет диаметр частиц менее 100 мкм.

Более предпочтительно, уролитин имеет размер частиц D₅₀ менее 75 мкм, например, менее 50 мкм, например, менее 25 мкм, например, менее 20 мкм, например, менее 10 мкм. Более предпочтительно, уролитин имеет D₅₀ в диапазоне 0,5-50 мкм, например, 0,5-20 мкм, например, 0,5-10 мкм, например, 1,0-10 мкм, например, 1,5-7,5 мкм, например, 2,8-5,5 мкм. Предпочтительно, уролитин имеет размер частиц D₉₀ менее 100 мкм. Более предпочтительно, уролитин имеет размер частиц D₉₀ менее 75 мкм, например, менее 50 мкм, например, менее 25 мкм, например, менее 20 мкм, например, менее 15 мкм. Уролитин предпочтительно имеет D₉₀ в диапазоне от 5 до 100 мкм, например, от 5 до 50 мкм, например, от 5 до 20 мкм, например, от 7,5 до 15 мкм, например, от 8,2 до 16,0 мкм. Предпочтительно, уролитин имеет D₁₀ в диапазоне 0,5-1,0 мкм. Предпочтительно, уролитин имеет D₉₀ в диапазоне от 8,2 до 16,0 мкм, D₅₀ в диапазоне от 2,8 до 5,5 мкм и D₁₀ в диапазоне от 0,5 до 1,0 мкм. Тонкое измельчение может быть проведено с помощью способов, определенных в данной области техники, например, может быть использован помолом на центробежно-эллиптической шаровой мельнице, молотковой дробилке, помол на универсальной мельнице или на дезинтеграторе, или помол на струйной мельнице (например, помол на спиральной струйной мельнице или помол на струйной мельнице с псевдоожиженным слоем). Особенно подходит помол на струйной мельнице.

Фосфатидилхолин

Композиции по данному изобретению могут, предпочтительно, содержать один или более фосфолипидов. Особенно предпочтительный фосфолипид для применения в композициях по данному изобретению представляет собой фосфатидилхолин. Преимущества, вызванные фосфатидилхолином, могут быть обусловлены по меньшей мере частично их амфипатической природой.

Особенно полезный источник фосфолипидов, в частности фосфатидилхолина, для применения в изобретении представляет собой лецитин, и композиции по данному изобретению предпочтительно содержат лецитин. Лецитин, когда он присутствуют в композициях по данному изобретению, как правило, составляет по меньшей мере 0,5% мас./мас. композиции по данному изобретению, предпочтительно по меньшей мере 1% мас./мас. композиции по данному изобретению. Лецитин предпочтительно составляет 10% мас./мас. или более композиции, например, 20% мас./мас. или более по массе, например, 30% мас./мас. или более по массе композиции. Например, лецитин может составлять 0,5-80% мас./мас. композиции, например, 1-80% мас./мас., например, 20-80% мас./мас., например, 40-80% мас./мас., альтернативно, например, 0,5-75% мас./мас. композиции, например, 1-40% мас./мас. композиции, например, 30-40% мас./мас. композиции, например, 30-35% мас./мас. композиции, например, 30-75% мас./мас. композиции. В альтернативном варианте, лецитин может составлять 0,5-5% мас./мас. композиции, например, 1-5% мас./мас. композиции, например, 1-3% мас./мас. композиции, например, 0,5-2% мас./мас. композиции, например, 1-2% мас./мас. композиции. Массовое соотношение между лецитином, если присутствует, и уролитином находится, как правило, в диапазоне от 0,02:1 до 3:1, например, от 0,03:1 до 1,2:1, например, от 1:1 до 1,2:1, например, от 1,1:1 до 1,2:1.

«Лецитин» обозначает любую группу жировых веществ, входящих в состав ткани животных и растений, включая фосфорную кислоту, холин, жирные кислоты, глицерин, гликолипиды, триглицериды и фосфолипиды (например, фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин и фосфатидилинозитол). В частности, коммерческий лецитин, полученный из сои и подсолнечника, включает фосфолипиды фосфатидилхолин, фосфатидилинозитол, фосфатидилэтаноламин и фосфатидную кислоту. Лецитин может быть получен путем химической экстракции из его источника в неполярном растворителе, таком как гексан, этанол, ацетон, петролейный эфир или бензол, или путем механической экстракции. В частности, лецитин может быть получен путем экстракции из источников, включая соевые бобы, яйца, молоко, семена рапса, хлопковые семена и подсолнечник. Коммерческий лецитин может быть легко приобретен для использования в пищевых препаратах.

Коммерчески полученный лецитин, который может быть использован в композициях по данному изобретению, обычно содержит следующие основные компоненты: 33-35% соевого масла, 20-21% инозитолфосфатидов, 19-21% фосфатидилхолинов, 8-20% фосфатидилэтаноламина, 5-11% других фосфатидов, 5% свободных углеводов, 2-5% стеролов и 1% влаги.

Коммерчески полученный лецитин, который может быть использован в композициях по данному изобретению, может быть обогащен фосфатидилхолином, имеющий минимум 5% мас./мас. фосфатидилхолина в лецитине, например, имеющий минимум 10% мас./мас. фосфатидилхолина в лецитине, например, имеющий минимум 15% мас./мас. фосфатидилхолина в лецитине, например, имеющий минимум 20% мас./мас. фосфатидилхолина в лецитине, например, имеющий минимум 25% мас./мас. фосфатидилхолина в лецитине, например, имеющий минимум 30% мас./мас. фосфатидилхолина в лецитине, например, имеющий минимум 32% мас./мас. фосфатидилхолина в лецитине, например, имеющий минимум 40% мас./мас. фосфатидилхолина в лецитине.

Лецитины также могут быть модифицированы с помощью одного или более следующих способов, чтобы адаптировать их свойства: спиртовая экстракция конкретных фосфолипидов для получения лецитина с модифицированным соотношением различных фосфолипидов; экстракция ацетоном для удаления масла, что приводит к образованию порошкообразной или гранулированной смеси фосфолипидов; сушка распылением на белки в качестве носителей; распыление с охлаждением синтетическими эмульгаторами, такими как высокоплавкие моно- и диглицериды для получения хлопьевидных или порошкообразных продуктов; модификация под действием фермента (фосфолипазы, обычно в частности фосфолипаза А2), в частности, частичный гидролиз для получения лецитинов с выраженным эмульгирующим поведением; гидролиз карбокси-групп жирных кислот кислотами и щелочами; ацетилирование; и гидроксилирование цепей жирных кислот и аминогрупп.

Формы композиций

Композиции по данному изобретению могут принимать любое подходящее агрегатное состояние. Они могут быть в форме твердого вещества (например, батончик), полутвердого вещества (например, мягкого геля, капсулы (например, жесткой капсулы) или драже) или жидкости (включая эмульсии). Во многих случаях композиции по данному изобретению находятся в форме вязкой жидкости или пасты. Выбирая подходящие среднецепочечные триглицериды и вспомогательные вещества, агрегатное состояние композиции может быть адаптировано к требованиям предложенного продукта. Композиции по данному изобретению могут быть фармацевтическими композициями. Композиции по данному изобретению могут быть питательными композициями.

Композиция мягкого геля может быть представлена в виде капсулы, имеющей оболочку. Оболочка может быть стандартного типа, например, это может быть мягкая желатиновая оболочка. Композиции по данному изобретению также могут быть внутри капсулы с твердой оболочкой.

Батончик может быть любого подходящего типа и может содержать ингредиенты, обычно используемые для приготовления батончиков для перекуса.

Полутвердые формы также могут содержать вспомогательные вещества, обычные для данной области техники. Вспомогательные вещества могут, например, обеспечивать желаемую твердость, срок годности и аромат, так что композиция имеет приемлемый вкус, привлекательный внешний вид и хорошую стабильность при хранении. Полутвердые формы могут быть в виде пасты.

Жидкие композиции могут быть в форме лекарственного средства, биологически активной добавки или напитка, каждый для перорального приема. Жидкие составы могут представлять собой растворы, эмульсии, суспензии или другие псевдожидкости. Вспомогательные вещества в жидкой композиции могут, например, обеспечивать срок годности, визуальный внешний вид, аромат и ощущение вкуса, так что композиция имеет приемлемый вкус, привлекательный внешний вид и хорошую стабильность при хранении. При определенных уровнях разбавления, может потребоваться встряхнуть напиток перед тем, как приемом его субъектом, так, чтобы поддерживать равномерную суспензию активного ингредиента.

Дополнительные компоненты в композициях по данному изобретению

Помимо уролитина и среднецепочечного триглицерида, композиция по данному изобретению может содержать дополнительные компоненты. Дополнительными компонентами могут быть соединения, которые приносят пользу для здоровья, например, выбранные из витаминов, минералов, полиненасыщенных жирных кислот и других соединений. Среди витаминов можно особо упомянуть Витамин А, Витамин С, Витамин D, Витамин Е, Витамин В12 и Витамин К2. Термин «витамин D», в контексте данного документа, относится к любой известной форме витамина D и, в частности, включает витамин D2 (эргокальциферол), витамин D3 (холекальциферол), предшественники витамина D, метаболиты и другие аналоги и их комбинации, а также различные активные и неактивные формы витамина D. Например, витамин D3 может быть представлен в своей негидроксилированной неактивной форме в виде холекальциферола или может быть представлен в его гидроксилированной активной форме в виде кальцитриола

Креатин характеризовался положительным влиянием при лечении мышечных заболеваний. Он может быть включен в композицию по данному изобретению. β-гидроксил-β-метилбутират (НМВ) характеризовался положительным влиянием при лечении мышечных заболеваний. Он может быть включен в композицию по данному изобретению.

Полиненасыщенные жирные кислоты представляют собой жирные кислоты, которые содержат более чем одну двойную связь в цепи. Этот класс включает множество важных соединений, таких как незаменимые жирные кислоты, например, омега-3 и омега-6 ненасыщенные жирные кислоты. Пригодны полиненасыщенные жирные кислоты с длинной цепью и предпочтительно те, которые имеют по меньшей мере 20 атомов углерода в молекуле. Такие омега-3 жирные кислоты с длинной цепью включают цис-11, 14, 17-эйкозатриеновую кислоту (ЭТК) С20:3, цис-8, 11, 14,17- эйкозатетраеновую кислоту (ЭТК) С20:4, цис-5, 8, 11, 14, 17-эйкозапентаеновую кислоту (ЭПК) С20:5, цис-7, 10, 13, 16, 19-докозапентаеновую кислоту (ДПК, клупанодоновая кислота) С22:5, цис-4, 7, 10, 13, 16, 19-докозагексаеновую кислоту (ДГК) С22:6, цис-9, 12, 15, 18,21-тетракозапантаеновую кислоту С24:5; цис-6,9, 12, 15, 18,21-тетракозагексаеновую кислоту (Nisinic кислота) С24:6. Омега-6 жирные кислоты с длинной цепью содержат по меньшей мере 20 атомов углерода и включают цис-11, 14-эйкозадиеновую кислоту С20:2, цис-8, 11, 14-эйкозатриеновую кислоту (дигомо-гамма-линоленовая кислота) (ДГЛК) С20:3, цис-5, 8, 11, 14-эйкозатетраеновую кислоту (арахидоновая кислота) (АК, АА) С20:4, цис-13, 16-докозадиеновую кислоту С22:2, цис- 7, 10, 13, 16-докозатетраеновую кислоту (адреновая кислота) С22:4, цис-4, 7, 10, 13, 16- докозапентаеновую кислоту (Osbond кислота) С22:5. Композиция по данному изобретению предпочтительно содержит ЭПК, ДГК или их комбинацию, например, в количестве от 10 до 1,000 мг на порцию; например, в количестве от 25 до 250 мг на порцию.

Фармацевтические композиции по данному изобретению могут включать дополнительные фармацевтически активные соединения.

В некоторых иллюстративных вариантах реализации данного изобретения, композиции по данному изобретению могут содержать, в дополнение к среднецепочечный триглицеридам и уролитину, один или более дополнительных макронутриентов, обычно жиров или углеводов.

Неограничивающие примеры подходящих жиров или их источников для применения в композициях, описанных в данном документе, включают кокосовое масло; фракционированное кокосовое масло; соевое масло; кукурузное масло; оливковое масло; сафлоровое масло; высокоолеиновое масло сафлора; подсолнечное масло; высокоолеиновое подсолнечное масло; пальмовое и пальмоядровое масла; пальмовый олеин; рапсовое масло; масла из продуктов моря; хлопковое масло; полиненасыщенные жирные кислоты, такие как докозагексаеновая кислота (ДГК), арахидоновая кислота (АРК), эйкозапентаеновая кислота (ЭПК); и их комбинации.

Неограничивающие примеры подходящих углеводов или их источников для применения в композициях, описанных в данном документе, могут включать мальтодекстрин, гидролизованный или модифицированный крахмал или кукурузный крахмал, полимеры глюкозы, кукурузную патоку, сухую кукурузную патоку, углеводы, полученные из риса, глюкозу, фруктозу, лактозу, кукурузную патоку с высоким содержанием фруктозы, декстин тапиоки, изомальтулозу, сукромальт, порошок мальтитола, глицерин, фруктоолигосахариды, соевое волокно, кукурузное волокно, гуаровая камедь, конжаковая мука, полидекстроза, мед, сахарные спирты (например, мальтитол, эритритол, сорбитол) и их комбинации. Мальтодекстрин, сахароза и фруктоза являются особенно предпочтительными.

Общие концентрации или количества жира и углеводов, и других компонентов варьируются в зависимости от потребностей в питании для предполагаемого пользователя.

Дополнительные компоненты в композиции по данному изобретению могут быть соединениями, которые не приносят пользу для здоровья субъекта, но вместо этого улучшают композицию каким-либо другим способом, например, улучшают ее вкус, текстуру или срок годности, как упомянуто выше. Таким образом, композиция по данному изобретению может дополнительно содержать одно или более соединений, выбранных из эмульгаторов, красителей, консервантов, камеди, фиксирующих компонентов, загустителей, подсластителей и ароматизаторов.

Подходящие эмульгаторы, стабилизаторы, красители, консерванты, камеди, фиксирующие компоненты и загустители хорошо известны в области производства эмульсий и других псевдожидкостей. Эмульгаторы могут включать один или более из фосфатидилхолина, лецитина, полисорбатов, таких как полисорбат 60 или полисорбат 80 (Твин-60 и Твин-80), и моностеарат глицерина (ГМС). Моностеарат глицерина также известен как глицеринмоностеарат. Могут также использоваться металлохелаторы или комплексообразователи, такие как кальциево-натриевые соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА). Другие компоненты, которые могут быть включены в составы по данному изобретению, включают полиэтиленгликоли, диоксид кремния, растительный комбижир и пчелиный воск.

Стабилизаторы могут использоваться в композиции по данному изобретению. Многие композиции по данному изобретению представляют собой стабильные суспензии без необходимости добавления стабилизатора. Стабильная суспензия - это суспензия, которая не подвергается фазовому разделению во времени. Для некоторых композиций по данному изобретению стабильность может быть улучшена за счет включения добавленного стабилизатора. Подходящие стабилизаторы для использования в композициях по данному изобретению включают моностеарат глицерина (ГМС), диоксид кремния и растительный комбижир. Типичным стабилизатором является ГМС, а предпочтительные композиции по данному изобретению содержат ГМС. Его свойства также делают ГМС хорошим растворителем для фосфолипидов, например, лецитина. ГМС существует в двух полиморфах: α-форма является диспергируемой и пенистой, полезной в качестве эмульгатора или консерванта. β-форма подходит для восковых матриц, α-форму превращают в β-форму при нагревании при 50°С.

ГМС может быть двух категорий: 40-55% моноглицеридов и 90% моноглицеридов. Категория 40-55% моноглицеридов, как определенно Европейской фармакопеей, описывает ГМС как смесь моноацилглицерина, в основном моностеаролглицерина, вместе с определенным количеством ди- и триглицеридов. В частности, категория 40-55 содержит 40-55% моноацилглицеридов, 30-45% диацилглицеридов и 5-15% триацилглицеридов. Категория 99% содержит не менее 90% моноглицеридов. Моноглицериды в коммерческих ГМС продуктах представляют собой смеси переменного содержания с глицерилмоностеаратом и глицерилмонопальмитатом. Европейская фармакопея далее разделяет категорию глицерилмоностеарат 40-55 на три типа в зависимости от доли стеарата в смеси. Тип 1 содержит 40,0-60,0% стеариновой кислоты, а сумма пальмитиновой и стеариновой кислот составляет ≤90%. Тип 2 содержит 60,0-80,0% стеариновой кислоты, а сумма пальмитиновой и стеариновой кислот составляет ≤90%. Тип 3 содержит 90,0-99,0%) стеариновой кислоты, а сумма пальмитиновой и стеариновой кислот составляет ≤96%. Любая форма ГМС может быть использована в композициях по данному изобретению.

Ароматизатор может быть особенно полезен в композиции по данному изобретению. В жидкой или полужидкой композиции фруктовый аромат можно получить путем включения фруктового соуса или пюре. Типичные ароматизаторы включают клубнику, малину, голубику, абрикос, гранат, персик, ананас, лимон, апельсин и яблоко. Как правило, фруктовые ароматизаторы включают фруктовый экстракт, фруктовые консервы или фруктовое пюре с любой комбинацией подсластителей, крахмала, стабилизатора, натуральных и/или искусственных ароматизаторов, красителей, консервантов, воды и лимонной кислоты или другой подходящей кислоты для контроля рН.

Дозирование

Эффективное количество композиции для применения будет варьироваться в зависимости от способа введения, возраста, массы тела и общего состояния здоровья субъекта. Факторы, такие как состояние болезни, возраст и вес субъекта, могут быть важными, и схемы дозирования могут быть скорректированы для обеспечения оптимального ответа на лечение.

Ежедневное потребление компонента уролитина (например, уролитина А) обычно находится в диапазоне от 10 мг до 5 г в день, например, от 20 мг до 2500 мг в день, например, от 50 мг до 1500 мг в день, например, от 100 мг до 1500 мг в день, например, от 150 мг до 1500 мг в день, например, от 200 мг до 1500 мг в день, например, от 250 мг до 1500 мг в день, например, от 50 мг до 1000 мг в день, например, 250 мг до 1000 мг в день. В одном варианте реализации изобретения, композицию берут в количестве, обеспечивающем дозировку уролитина в диапазоне от около 0,2 мг/кг/день до более чем около 100 мг/кг/день. Например, дозировка уролитина может составлять от 0,2 до 100, от 0,2 до 50, от 0,2 до 40, от 0,2 до 25, от 0,2 до 10, от 0,2 до 7,5, от 0,2 до 5, от 0,25 до 100, от 0,25 до 25, от 0,25 до 25, 0,25 до 10, от 0,25 до 7,5, от 0,25 до 5, от 0,5 до 50, от 0,5 до 40, от 0,5 до 30, от 0,5 до 25, от 0,5 до 20, от 0,5 до 15, от 0,5 до 10, от 0,5 до 7,5, от 0,5 до 5, от 0,75 до 50, от 0,75 до 25, от 0,75 до 20, от 0,75 до 15, от 0,75 до 10, от 0,75 до 7,5, от 0,75 до 5, от 1,0 до 50, от 1 до 40, от 1 до 25, от 1 до 20, от 1 до 15, от 1 до 10, от 1 до 7,5, от 1 до 5, от 2 до 50, от 2 до 25, от 2 до 20, от 2 до 15, от 2 до 10, от 2 до 7,5, или от 2 до 5 мг/кг/день.

Композиция с единичной дозой по данному изобретению предпочтительно содержит от 10 мг до 5 г уролитина, например, от 20 мг до 2500 мг, например, от 50 мг до 1500 мг, например, от 250 мг до 1500 мг, например, от 50 мг до 1000 мг, например, 100 мг до 1000 мг, например, от 250 мг до 1000 мг. Единичная доза может быть в виде энергетического батончика; масса энергетического батончика составляет от 25 до 150 г (например, от 40 до 100 г) и может содержать необходимое количество уролитина. Композиция с единичной дозой может альтернативно быть в виде напитка, например, предусмотренного в контейнере (например, пакет), с объемом, подходящим для разовой дозы (например, от 100 до 300 мл). В напитке от 25 мл до 500 мл (например, от 50 мл до 300 мл) может содержаться необходимое количество уролитина. Напиток, содержащий предложенную композицию по данному изобретению, может содержать уролитин в концентрации от 0,1 до 50 мг на мл, от 0,25 до 25 мг на мл, например, от 0,5 до 10 мг на мл, например, от 1 до 5 мг на мл. Единичная доза может альтернативно быть в форме одной или нескольких полутвердых доз, таких как мягкий гель или паста. Одна капсула из мягкого геля может содержать дозу уролитина, например, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 350 мг, 400 мг, 450 мг или 500 мг, например, 250 мг.

Соотношения диапазонов компонентов композиций по данному изобретению описаны выше. Композиция по данному изобретению может содержать от 10 мг до 15 г среднецепочечного триглицерида и от 10 до 5000 мг уролитина; например, от 20 до 7500 мг среднецепочечного триглицерида и от 20 до 2500 мг уролитина; например, от 25 мг до 2500 мг среднецепочечных триглицеридов и от 50 до 1500 мг уролитина; например, от 50 мг до 4500 мг среднецепочечных триглицеридов и от 50 до 1500 мг уролитина; например, от 250 до 4500 мг среднецепочечных триглицеридов и от 250 до 1500 мг уролитина; например, от 50 до 3000 мг среднецепочечных триглицеридов и от 50 до 1000 мг уролитина; например, от 250 до 3000 мг среднецепочечных триглицеридов и от 250 до 1000 мг уролитина. Композиции предпочтительно дополнительно содержат лецитин. Кроме того, композиции также предпочтительно содержат дополнительный стабилизатор, например, моностеарат глицерина.

Репрезентативная композиция показана в таблице 1:

Композиции по данному изобретению содержат уролитин и среднецепочечные триглицериды. Композиция по данному изобретению может содержать, например, 20-85% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов и 15-70% мас./мас. уролитина, например, 40-80% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов и 20-60% мас./мас., например, 50-70% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов и 30-50% мас./мас. уролитина, например, 60-75% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов и 25-40% мас./масс уролитина.

Предпочтительные композиции по данному изобретению включают уролитин, среднецепочечные триглицериды и эмульгатор, такой как фосфатидилхолин, например, лецитин. Например, композиция по данному изобретению может содержать 10-80% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 5-70% мас./мас. уролитина и 0,5-65% мас./мас. лецитина; композиция по данному изобретению может содержать 20-70% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 15-70% мас./мас. уролитина и 0,5-50% мас./мас. лецитина; например, 25-50% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 20-50% мас./мас. уролитина и 20-50% мас./мас. лецитина; например, 30-40% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 25-35% мас./мас. уролитина и 30-40% мас./мас. лецитина. Альтернативно, композиции по данному изобретению, содержащие уролитин, среднецепочечные триглицериды и лецитин, могут содержать, например, 60-75% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 25-40% мас./мас. уролитин и 0,5-5% мас./мас. лецитина.

Другие предпочтительные композиции по данному изобретению могут содержать уролитин, среднецепочечные триглицериды, эмульгатор, такой как лецитин, и стабилизатор, такой как ГМС. Например, композиция по данному изобретению может содержать 25-75% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 20-50% мас./мас. уролитина, 0,5-50%) мас./мас. лецитина и 0,5-5% мас./мас., например, 30-40% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 25-35% мас./мас. уролитина, 30-40% мас./мас. лецитина и 0,5-3% мас./мас. ГМС. Альтернативно, композиции по данному изобретению, содержащие уролитин, среднецепочечные триглицериды, лецитин и ГМС, могут содержать, например, 60-75% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 25-40% мас./мас. уролитина, 0,5-5% мас./мас. лецитина и 0,5-3% мас./мас. ГМС.

Другие композиции по данному изобретению могут содержать уролитин, среднецепочечные триглицериды, эмульгатор, такой как лецитин и/или Твин (полисорбат), и стабилизатор, такой как ГМС. Например, композиция по данному изобретению может содержать 25-75% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 20-50% мас./мас. уролитина, 0,5-50%) мас./мас. лецитина, 0,5-5% мас./мас. ГМС и 1-10% мас./мас. Твин-60, например, 60-75% мас./мас. среднецепочечных триглицеридов, 25-40% мас./мас. уролитина, 0,5-5% мас./мас. лецитина, 0,5-3% мас./мас. ГМС и 1-5% мас./мас. Твин-60.

Лечение

Композиция по данному изобретению может применяться как единоразово, или, чаще всего, в виде серии. В одном примере субъект принимает дозу до или после тренировки. Субъекту, который не в состоянии тренироваться, дозу композиции можно принимать, например, один раз, два или три раза в день или один, два, три, четыре, пять или шесть раз в неделю. В другом примере, композиция может приниматься субъектом, независимо от способности или необходимости субъекта в тренировке. Также будет понятно, что эффективная доза соединения может увеличиваться или уменьшаться в течение конкретного лечения.

Медицинское и немедицинское лечение

Композиция по данному изобретению может применяться в качестве лекарственного средства. Композиция может применяться в качестве пищевой добавки, как функциональное питание и как медицинское питание. Таким образом, композиция по данному изобретению применима для лечения различных заболеваний, а также состояний здоровья, которые не считаются заболеваниями. В частности, болезни и состояния здоровья, не связанные с болезнью, могут характеризоваться недостаточной митохондриальной активностью. Композиция находит применение при лечении как заболеваний, так и болезненных состояний. Композиция находит применение в управлении нормальной физиологической функцией у здоровых людей, которые характеризуются плохой физической работоспособностью, нарушенной выносливостью и нарушенной функцией мышц. Композиции по данному изобретению могут улучшить физическую работоспособность у людей с заболеванием, включая молодых и пожилых людей. Композиции по данному изобретению могут улучшить физическую работоспособность, например, краткосрочную производительность или долгосрочную эффективность у здоровых людей, включая спортсменов, лиц, не занимающихся спортом, сидячих людей и пожилых людей. Это улучшение производительности может быть измерено временем, затрачиваемым на прогулку или пробег определенного расстояния (например, улучшенная производительность во время 6-минутного теста ходьбы (MWT)), улучшенное время пробега определенного расстояния, улучшенная оценка IPAQ по международному опросному листу по физической активности, увеличенное количество приседаний-подъемов за определенное время или другой тест, предназначенный для измерения физических характеристик.

Композиции по данному изобретению дополнительно обеспечивают улучшение выносливости. Улучшение выносливости относится к времени до усталости при тренировке при постоянной нагрузке, обычно при интенсивности <80% VCkmax. Композиции по данному изобретению могут повысить выносливость у людей с заболеванием, включая молодых и пожилых людей. Композиции по данному изобретению могут повысить выносливость у здоровых людей, включая спортсменов, лиц, не относящихся к спорту, сидячих людей и пожилых людей. Изобретение относится к способу увеличения времени до усталости при выполнении определенной активности, например, тренировки в фитнесе, ходьбе, беге, плавании или велосипеде. Это улучшение выносливости можно оценивать объективными измерениями (например, измерение скорости, потребления кислорода или частоты сердечных сокращений), или измерениями с самооценкой (например, с использованием утвержденной анкеты).

Изобретение далее предлагает композицию для улучшения, поддержания или уменьшения потери мышечной функции. Композиции по данному изобретению могут улучшать, поддерживать или уменьшать потерю мышечной функции у людей с заболеванием, включая молодых и пожилых людей. Композиции по данному изобретению могут улучшать, поддерживать или уменьшать потерю мышечной функции у здоровых людей, включая спортсменов, незанимающихся спортом людей, сидячих людей и пожилых людей. Например, композиции по данному изобретению могут увеличить мышечную силу, о чем свидетельствует улучшение физической активности, например, упражнение, например, повышенная способность поднимать тяжести или повысить силу кистевого жима. Кроме того, композиции по данному изобретению могут улучшить мышечную структуру, например, путем увеличения или поддержания мышечной массы в условиях нормальной мышечной функции, снижения функции мышц или нарушения функции мышц.

Данное изобретение также предлагает композицию для улучшения физической результативности или выносливости индивидуума. Например, путем уменьшения ощутимого напряжения или усилий во время упражнений или деятельности, как определено с использованием самозаполняемого опросника.

Изобретение также предлагает композицию по данному изобретению для использования при лечении различных состояний, в том числе состояний, связанных с неадекватной митохондриальной активностью, включая ожирение, снижение скорости обмена веществ, метаболический синдром, сахарный диабет, сердечно-сосудистые заболевания, гиперлипидемию, ухудшение памяти, нейродегенеративные заболевания, когнитивное расстройство, расстройство настроения, стресс и тревожное расстройство, стеатоз печени (например, неалкогольная жировая болезнь печени (НЖБП) или неалкогольный стеатогепатит (НАСГ)), с улучшением функции печени и для контроля массы тела. В частности, композиции по данному изобретению находят применение при лечении патологических состояний, связанных с мышцами. Соответственно, изобретение предлагает композицию по данному изобретению для использования при лечении патологического состояния, связанного с мышцами. Изобретение также предлагает способ лечения, связанного с мышцами патологического состояния у субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества композиции по данному изобретению. Состояния, связанные с мышцами, включают как состояния, влияющие на здоровых индивидуумов, так и патологические состояния. Такие мышечные состояния найдены у здоровых людей или людей, страдающих от болезни, включают скелетно-мышечные заболевания или нарушения; кахексии; атрофию мышц; связанное с возрастом снижение функции мышц; раннюю дряхлость; дряхлость; миопатии; нервно-мышечные заболевания, такие как мышечную дистрофию Дюшенна и другие дистрофии; возрастную саркопению; острую саркопению; мышечную атрофию и/или кахексию, например, мышечную атрофию и/или кахексию, связанную с ожогами, постельным положением, иммобилизацией конечностей или обширной хирургией, включая грудную, абдоминальную и/или ортопедическую хирургию; и мышечную дегенеративную болезнь.

Примеры возрастных состояний, которые могут поддаваться лечению композициями по данному изобретению, включают саркопению и мышечное истощение.

Миопатия также может быть вызвана синдромом мышечной дистрофии, таким как синдром мышечной дистрофии Дюшенна.

В WO 2014111580 сообщалось, что уролитин В (но не уролитин А) увеличивает средний диаметр миотрубочек in vitro. Данный эффект не наблюдался в случае уролитина А.

Немедицинское лечение

Композиция по данному изобретению пригодна для повышения выносливости мышц. Таким образом, изобретение предлагает композицию по данному изобретению для использования в повышении выносливости мышц. Изобретение также предлагает способ повышения выносливости мышц путем введения субъекту эффективного количества композиции по данному изобретению. Введение может представлять собой самовведение. Повышенная выносливость мышц может быть одной или более улучшенными функциями мышц, улучшенной мышечной силой, улучшенной выносливостью мышц и улучшенным восстановлением мышц.

Таким образом, композиция по данному изобретению может быть использована в способе улучшения физической выносливости (например, способности выполнять физическую задачу, такую как физические упражнения, физический труд, спортивные мероприятия), ингибирования или замедления физической усталости, повышения работоспособности и выносливости, уменьшения усталости мышц, повышения сердечной и сердечно-сосудистой функции.

Улучшенная функция мышц может быть особенно полезной у пожилых пациентов с уменьшенной функцией мышц в результате возрастных состояний. Например, у субъекта, для которого улучшение мышечной функции может быть полезно, может наблюдаться снижение функции мышц, что затем приводит к недомоганию и дряхлости. Такие субъекты могут не обязательно испытывать потерю в мышечной массе в дополнение к снижению у них функции мышц. Некоторые субъекты испытывают как мышечное истощение, так и снижение мышечной функции, например, пациенты с саркопенией. Композиция по данному изобретению может быть использована для повышения выносливости мышц путем введения композиции по данному изобретению субъекту, с дряхлостью или преддряхлым состоянием.

Выносивость мышц может быть спортивной, что означает способность мышц спортсмена показывать результаты при участии в спортивных мероприятиях. Усиленная спортивная производительность, сила, скорость и выносливость измеряются увеличением мышечной силы сокращения, увеличением амплитуды сокращения мышц или сокращением времени реакции мышц между стимуляцией и сокращением. Термин «спортсмен» относится к человеку, который практикует спорт на любом уровне и который стремится достичь более высокого уровня силы, скорости или выносливости в своем выступлении, например, бодибилдерам, велосипедистам, дальним бегунам и бегунам на коротких дистанциях Повышенная спортивная производительность проявляется в способности преодолевать усталость мышц, способность поддерживать активность в течение более длительных периодов времени и проводить более эффективную тренировку.

Примеры

Следующие примеры иллюстрируют данное изобретение.

Соединения

Уролитин А получали по следующей методике:

Уролитин А (4) получали в две стадии начиная с 2-бром-5-метокибензойной кислоты 1 и резорцина 2. Чистое соединение получали в виде светло желтого порошка.

Стадия 1:

Смесь 2-бромо-5-метоксибензойной кислоты 1 (27,6 г; 119 ммоль; 1,0 экв.), резорцина 2 (26,3 г; 239 ммоль; 2,0 экв.) и гидроксид натрия (10,5 г; 263 ммоль; 2,2 экв.) в воде (120 мл) кипятили с перемешиванием в течение 1 часа. После чего добавляли 5% водный раствор сульфата меди (3,88 г CUSO₄⋅5H₂O в 50 мл воды; 15,5 ммоль; 0,1 экв.) и смесь дополнительно кипятили с перемешиванием в течение 30 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры и твердое вещество фильтровали на фильтре Бюхнера. Остаток промывали холодной водой с получением бледно-красного твердого вещества, которое растирали в горячем МеОН. Суспензию оставляли на ночь при 4°С. Полученный осадок отфильтровывали и промывали холодным МеОН с получением указанного в заголовке соединения 3 в виде бледно-коричневого твердого вещества.

Стадия 2:

К суспензии 3 (10,0 г, 41 ммоль, 1,0 экв.) в сухом дихлорметане (100 мл) добавляли по каплям при 0°С 1 М раствор трибромида бора в сухом дихлорметане (11,93 мл чистого BBr₃ в 110 мл безводном дихлорметане, 124 ммоль, 3,0 экв.). Смесь оставляли при 0°С в течение 1 часа и затем позволяли ей нагреться до комнатной температуры. Раствор перемешивали при этой температуре в течение 17 часов. Затем к смеси добавляли лед. Желтый осадок отфильтровывали и промывали холодной водой с получением желтого твердого вещества, которое нагревали до кипения с обратным холодильником в уксусной кислоте в течение 3 часов. Горячий раствор быстро фильтровали и осадок промывали уксусной кислотой, затем диэтиловым эфиром с получением указанного в заголовке соединения 4 в виде желтого твердого вещества. ¹Н и ¹³С ЯМР соответствовали структуре 4.

Пример 1: Исследование биодоступности уролитина А, в составе с среднецепочечными триглицеридами или без них.

Самцам крыс Sprague-Dawley с помощью перорального зонда после ночного голодания вводили либо суспензию уролитина А в физиологическом растворе без дополнительных вспомогательных веществ, либо дополнительные составы уролитина А с различными вспомогательными веществами в дозе, соответствующей 60 мг/кг/день. Уролитин, используемый в препаратах, был тонко измельчен с распределением частиц по размеру D₉₀=от 9 мкм до 15 мкм и D₅₀=от 2 до 9 мкм. Фактический размер частиц составлял D₉₀=11,5, D₅₀=3,9 и D₁₀=0,7 мкм. Компоненты по весу % мас./мас. составов приведены ниже в таблице 2.

Среднецепочечные триглицериды были получены от Cremer Oleo GmbH & Со KG под названием CremerCOOR МСТ 60/40 ЕР, который содержит С6≤0,5%; С8 - 55-65%; С10 35-45%; и С12≤1,5%.

Лецитин получали от Cargill, Inc. под названием Epikuron® 135 F IP, который содержит минимум 32% фосфатидилхолина.

Моностеарат глицерина был получен от Cremer Oleo GmbH & Со KG под названием IMWITOR® 900 (F) Р, который содержит 40,0-50,0% моноацилглицеридов, 30,0-45,0 и диацилглицеридов и 5,0-15,0% триацилглицеридов.

Кровь отбирали у крыс путем канюлирования с яремной вены в разные моменты времени, а количество уролитина А определяли в плазме для определения его фармакокинетического профиля в разных составах. Изучение каждого состава повторяли на шести крысах. На Фиг. 1 показаны полученные фармакокинетические профили каждого из использованных составов. Полученные данные суммированы ниже в Таблице 3.

Суспензия уролитина А в физиологическом растворе имеет двухпиковую кривую со значительно замедленным значением Tmax в течение 24 часов, а также меньшим пиком уровня в крови при 4 часах. Напротив, каждый из составов 65-68, содержащих вспомогательные вещества, имеет только один пик, с Tmax 4 часа. Однопиковые фармакокинетические профили составов 65-68 гораздо более благоприятны для перорального введения, чем таковые с двойными пиками, в физиологическом растворе, поскольку они облегчают оптимизацию дозирования и частоты введения.

Как изображено в Таблице 3 и на Фиг. 1, уролитин А, когда он в составе со среднецепочечными триглицеридами (составы 65 и 66), также более биодоступен, чем состав, который не содержит среднецепочечных триглицеридов (составы 67 и 68), как показывают его более высокие значения Cmax и AUC. Состав 66, который содержит как среднецепочечные триглицериды, так и лецитин в комбинации, имеет значительно более высокие Cmax и AUC, а уролитин А в этой композиции более биодоступен, чем в составе, который содержит только лецитин и среднецепочечный триглицерид (состав 67), добавление Твин 60 к составу с лецитином не улучшает биодоступность (состав 68). Основное различие в составах 65 и 68 было замещение лецитина на среднецепочечные триглицериды. Использование среднецепочечных триглицеридов привело к увеличению Cmax (нг/мл) от 1,606 в составе 68 до 3,177 в составе 65 или увеличении примерно на около 98%. Кроме того, состав 65 показал AUC 28,77 по сравнению с составом 68, который имел AUC 15,7, что демонстрирует увеличение биодоступности на 83%, когда среднецепочечные триглицериды используются вместо лецитина.

Таким образом, составы 65 и 66 в соответствии с изобретением демонстрируют как более благоприятные фармакокинетические профили, включающие только один пик концентрации в крови, так и повышенную биодоступность по сравнению с уролитином в чистом виде в физиологическом растворе, что делает их полезными при пероральном введении уролитинов.

Пример 2: Сравнение фармакокинетического профиля уролитина А в препарате 66 у крыс и людей

Фармакокинетический профиль уролитина А в составе 66 у людей сравнивали с фармакокинетический профилем у крыс. Эквивалентная доза уролитина А, определенная с помощью отношения площади поверхности у крыс и у человека, была введена людям. Фармакокинетические исследования проводили с составом 66 у крыс в дозе 60 мг/кг/сут. Эквивалентную дозу человека, следуя руководству FDA (Управление по контролю за продуктами и лекарствами) по конверсии дозы на основе поверхностного соотношения, определяют путем деления этой дозы на коэффициент пересчета 6,2, в результате чего человеческая эквивалентная доза составляет 9,68 мг/кг/сут для человека. Предполагая, что средний вес взрослого человека составляет от 60 до 70 кг, это приводит к суточной дозе от 580 до 680 мг уролитина А. Люди получали аналогичную эквивалентную дозу 500 мг/день уролитина А, поставляемого в мягких гелях. В обоих случаях уролитин А, используемый в составах, имел распределение частиц по размерам от D₉₀=8 мкм до 20 мкм и D₅₀=от 2 до 8 мкм, и от D₁₀=от 0,5 мкм до 2 мкм.

Фармакокинетический профиль для состава 66 определяли у самцов крыс Sprague-Dawley, которым вводили уролитин А в составе 66 через пероральный зонд после ночного голодания в дозе, соответствующей 60 мг/кг/день. Компоненты % мас./мас. составов приведены в таблице 4 ниже.

Среднецепочечные триглицериды были получены от Cremer Oleo GmbH & Со KG под названием CremerCOOR МСТ 60/40 ЕР, который содержит С6≤0,5%; С8 - 55-65%; С10 35-45%; и С12≤1,5%. Лецитин получали от Cargill, Inc. под названием Epikuron® 135 F IP, который содержит минимум 32% фосфатидилхолина.

Моностеарат глицерина был получен от Cremer Oleo GmbH & Со KG под названием IMWITOR® 900 (F) Р, который содержит 40,0-50,0% моноацилглицеридов, 30,0-45,0 и диацилглицеридов и 5,0-15,0% триацилглицеридов.

Кровь у крыс отбирали путем канюлирования с яремной вены в разные моменты времени, а количество уролитина А определяли в плазме для определения его фармакокинетического профиля. Изучение состава повторяли на шести крысах. На Фиг. 2 изображены полученные фармакокинетические профили, нормированные на относительный Cmax=1.

Для сравнения фармакокинетических профилей у людей с таковыми наблюдаемыми у крыс в дозе 60 мг/кг/день, капсулы мягкого геля, содержащие по 250 мг состава 66 с уролитином А, получали стандартными способами.

Чтобы определить, был ли фармакокинетический профиль уролитина А, введенного с мягкими гелями, содержащими состав 66, подобен таковому, наблюдаемому у крыс, шести здоровым людям, 3 мужчинам и 3 взрослым женщинам было введено 500 мг уролитина А, введено с помощью двух мягких гелей. Индивидуумы голодали в течение ночи и получали перорально при Т0ч, два мягких геля, каждый из которых содержал 250 мг уролитина А в составе 66, с водой.

Кровь отбирали в следующих временных точках, 0,5, 1, 2, 3,4, 6, 8, 12, 24 и 36 часов. В каждый момент времени образец крови объемом 6 мл отбирали в пробирку, покрытую K2-EDTA. Образцы крови перемешивали до полного смешивания с антикоагулянтом. В течение 30 минут после забора крови каждый образец крови центрифугировали при 1500g в течение 10 минут при 4°С. В течение 30 минут после центрифугирования верхний слой плазмы человека переносили в предварительно маркированную полипропиленовую трубку. Уровень уролитина А определяли количественно в образцах плазмы для каждой временной точки, для определения его фармакокинетического профиля. На Фиг. 2 изображен полученный в результате фармакокинетический профиль для состава 66 в образцах крови крысы и человека. Для сравнения этих профилей максимальная концентрация, обнаруженная в крови или Cmax, была установлена равной 1.

Как изображено на Фиг. 2, уролитин А, введенный с мягким гелем для человека, показал фармакокинетический профиль аналогичный наблюдаемому у крыс, с одним быстрым пиком. Tmax для крыс составлял 4 часа для грызунов и 6 ч для людей. Этот сдвиг на кривой, вероятно, объясняется различием в введении состава 66 простым зондом грызунам, либо мягкими гелями людям. Кроме того, у людей мы наблюдали устойчивый уровень уролитина А в крови, который не ожидался на основании данных полученных у грызунов, еще раз подчеркивая полезность среднецепочечных триглицеридов при пероральном введении уролитинов людям.

Это показывает, что состав 66, содержащий среднецепочечные триглицериды, пригоден для доставки уролитина А у людей и других млекопитающих. Эти результаты показывают, что уролитин А, когда он приготовлен в составе 66, содержащем среднецепочечные триглицериды (МСТ), демонстрирует привлекательный профиль биодоступности у людей и крыс, и демонстрирует благоприятный фармакокинетический профиль, что делает их пригодными для перорального введения уролитинов.

Пример 3: Влияние размера частиц на биологическую доступность уролитина

Размер частиц уролитина А уменьшался контролируемым образом с использованием спиральной Jetmill МС50 с использованием фильтрованного азота со скоростью подачи 240 г/ч, прессом Venturi в 12 бар и давлением мельницы в 12 бар. Различные распределения частиц по размерам уролитина А определяли на анализаторе размера частиц Malvern (Malvern Instruments, UK). Три образца были оценены по толщине. Образец №1 уролитина А имел распределение частиц по размерам D₁₀ 1,03 мкм, D₅₀ 53,4 мкм и D₉₀ 365 мкм. Образец №2 уролитина А имел размер частиц D₁₀ 0,272 мкм, D₅₀ 2,17 мкм и D₉₀ 6,84 мкм. Образец №3 уролитина А имел размер частиц D₁₀ 0,597 мкм, D₅₀ 5,67 мкм и D₉₀ 40,1 мкм

Чтобы продемонстрировать влияние конкретных распределений частиц по размерам на биодоступность, самцы крыс Sprague-Dawley голодали в течение ночи, после чего им вводили пероральный зонд с образцом №1, образцом №2 или образцом №3 уролитина А, суспендированным в 15% ДМСО, 85% (0,5% метилцеллюлозы, 0,25% Твин 80 в воде), в дозе, соответствующей 25 мг/кг/день.

Растворы перорального введения готовили следующим образом: 35 мг порошка уролитина А разбавляли в 7 мл 15% ДМСО, 0,5% метилцеллюлозы/0,25% Твин 80 в воде, в результате чего получали суспензию с концентрацией 5 мг/мл. ДМСО получали от BDH, метилцеллюлозу получали от Sigma, а Твин 80 получали от Sigma-Aldrich.

Кровь у крыс отбирали путем канюлирования с яремной вены в разные моменты времени, а количество уролитина А определяли в плазме для определения его фармакокинетического профиля после перорального введения образца №1, образца №2 и образца №3. Исследование повторяли на трех крысах для каждого образца. На Фиг. 3 показаны полученные фармакокинетические профили образца №1 и образца №2 уролитина. Собранные данные суммированы ниже в таблице 8.

Уролитин А показал увеличение биодоступности, когда размер частиц был уменьшен ниже D₉₀ 50 мкм. Для образца №2 наблюдалось относительное увеличение Cmax 116% (увеличение в 2,16 раза) и увеличение AUC на 28% по сравнению с образцом №1. Для образца №3 наблюдалось относительное увеличение AUC на 26%.

Эти результаты показывают, что препараты уролитина А, имеющие размер частиц D₉₀<50 мкм, последовательно демонстрируют более высокую биодоступность по сравнению с препаратами уролитина А, имеющими размер частиц D₉₀>300 мкм. Кроме того, было обнаружено, что препараты для приготовления уролитина А, имеющие размер частиц D₉₀<20 мкм, были особенно выгодными и позволили достичь значительно более высокого пика уровня уролитина А в крови, поскольку Cmax достигла более чем удвоения.

Изобретение относится к композициям для перорального введения для лечения и/или профилактики состояний, связанных с неадекватной митохондриальной активностью, содержащим среднецепочечный триглицерид и уролитин А. Данное изобретение также относится к способу усиления мышечной функции, улучшения выносливости или улучшения, поддержания или уменьшения потери мышечной функции, включающему введение субъекту эффективного количества композиций. 3 н. и 13 з.п. ф-лы, 3 ил., 8 табл., 3 пр.

1. Композиция для перорального введения для лечения и/или профилактики состояний, связанных с неадекватной митохондриальной активностью, содержащая:

a) 20-80% мас./мас. среднецепочечного триглицерида; и

b) 0,5-50% мас./мас. Уролитина A;

где среднецепочечный триглицерид имеет формулу CH₂(OR¹)-CH(OR²)-CH₂(OR³), где R¹, R² и R³ представляют собой жирную кислоту со средней длиной цепи формулы -C(=O)(CH₂)_nCH_3, где n находится в диапазоне от 4 до 10.

2. Композиция для перорального введения для лечения и/или профилактики состояний, связанных с неадекватной митохондриальной активностью, содержащая:

a) 20-80% мас./мас. среднецепочечного триглицерида; и

b) 0,5-50% мас./мас. Уролитина A;

где массовое соотношение среднецепочечного триглицерида к уролитину находится в диапазоне от 0,5:1 до 3:1; и

где среднецепочечный триглицерид имеет формулу CH₂(OR¹)-CH(OR²)-CH₂(OR³), где R¹, R² и R³ представляют собой жирную кислоту со средней длиной цепи формулы -C(=O)(CH₂)_nCH₃, где n находится в диапазоне от 4 до 10.

3. Композиция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что

(i) уролитин имеет размер частиц D₅₀ в диапазоне от 0,5 до 50 мкм и размер частиц D₉₀ в диапазоне от 5 до 100 мкм;

(ii) уролитин имеет размер частиц D₅₀ в диапазоне от 0,5 до 20 мкм и размер частиц D₉₀ в диапазоне от 5 до 50 мкм;

(iii) уролитин имеет размер частиц D₅₀ менее 50 мкм и размер частиц D₉₀ менее 75 мкм; или

(iv) уролитин имеет размер частиц D₅₀ менее 25 мкм и размер частиц D₉₀ менее 50 мкм;

(v) уролитин имеет размер частиц D₅₀ менее 10 мкм и размер частиц D₉₀ менее 20 мкм;

(vi) уролитин имеет размер частиц D₅₀ менее 10 мкм и размер частиц D₉₀ менее 15 мкм;

(vii) уролитин имеет размер частиц D₁₀ в диапазоне от 0,5 до 1,0 мкм, размер частиц D₅₀ в диапазоне от 2,8 до 5,5 мкм и размер частиц D₉₀ в диапазоне от 8,2 до 16,0 мкм; или

(viii) уролитин имеет размер частиц D₅₀ 10 мкм и размер частиц D₉₀ 20 мкм.

4. Композиция по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что среднецепочечный триглицерид составляет:

(i) 20-60% мас./мас. композиции;

(ii) 30-80% мас./мас. композиции;

(iii) 30-40% мас./мас. композиции; или

(iv) 30-35% мас./мас. композиции.

5. Композиция по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что среднецепочечный триглицерид включает каприловую кислоту и/или каприновую кислоту и/или среднецепочечный триглицерид получен из источника, который выбирают из кокосового масла, пальмового масла и молочного жира.

6. Композиция по любому из пп. 1-5, дополнительно содержащая эмульгатор.

7. Композиция по п. 6, отличающаяся тем, что эмульгатор представляет собой источник фосфатидилхолина.

8. Композиция по п. 7, отличающаяся тем, что источник фосфатидилхолина представляет собой лецитин и составляет

(i) 0,5-80% мас./мас. композиции;

(ii) 1-40% мас./мас. композиции;

(iii) 30-40% мас./мас. композиции; или

(iv) 30-35% мас./мас. композиции.

9. Композиция по любому из пп. 1-8, дополнительно содержащая стабилизатор, например, моностеарат глицерина.

10. Композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что композиция находится в форме твердого вещества (например, батончик), полутвердого вещества (например, мягкого геля, капсулы (например, жесткой капсулы) или драже) или жидкости (включая эмульсии).

11. Композиция по п. 10, отличающаяся тем, что композиция представляет собой капсулу из мягкого геля.

12. Композиция по любому из пп. 1-11 для применения в качестве лекарственного средства, пищевой добавки, функционального питания или лечебного питания.

13. Композиция по любому из пп. 1-11 для применения в качестве лекарственного средства для применения при лечении и/или профилактики связанного с мышцами патологического состояния, например, где связанное с мышцами патологическое состояние выбрано из заболеваний и расстройств опорно-двигательного аппарата; мышечной атрофии; миопатий; нервно-мышечных заболеваний, таких как мышечная дистрофия Дюшенна и другие дистрофии; саркопении, острой саркопении; атрофии мышц и/или кахексии.

14. Способ усиления мышечной функции, улучшения выносливости или улучшения, поддержания или уменьшения потери мышечной функции, включающий введение субъекту эффективного количества композиции по любому из пп. 1-11.

15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что субъект страдает от возрастной атрофии мышечной ткани, возрастной саркопении, возрастной мышечной атрофии, физического утомления, мышечного утомления и/или является ослабленным или недееспособным.

16. Композиция по любому из пп. 1-11 для применения при состояниях, связанных с неадекватной митохондриальной активностью, ожирением, снижением скорости обмена веществ, метаболическим синдромом, сахарным диабетом, сердечно-сосудистым заболеванием, гиперлипидемией, ухудшением памяти, нейродегенеративными заболеваниями, когнитивным расстройством, расстройством настроения, стрессом и тревожным расстройством, стеатозом печени (например, неалкогольная жировая болезнь печени (НЖБП) или неалкогольный стеатогепатит (НАСГ)), для улучшения функции печени и для контроля массы тела.