СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ КАРПА Российский патент 2021 года по МПК A01K61/00 A23K50/80 

Изобретение относится к кормопроизводству, в частности к способам приготовления кормов для рыб с введением веществ, обладающих ростостимулирующим действием, способствующих повышению выживаемости и накоплению питательных веществ в теле рыбы.

Известен способ приготовления кормов для рыб, в котором в качестве ростостимулирующих препаратов в корма добавляют кормовые антибиотики [1].

Недостатком данной кормовой добавки является то, что длительное применение антибиотиков оказывает на рыб токсическое воздействие и антибиотики накапливаются в тканях рыбы в виде стойких соединений, что небезопасно для человека, это явилось причиной введения запрета на применение кормовых антибиотиков в большинстве европейских стран [2] поэтому их применение целесообразно только в терапевтических целях.

Известен также способ увеличения продуктивности роста рыб путем введения в корм комплексных соединений инозина [3]. Недостатком данного способа является то, что соединения инозина легко растворимы в воде и ее использование требует специальной технологии приготовления корма для рыб в виде гранул на жировой основе с оболочкой, нерастворимой в воде. Это увеличивает затраты на приготовление корма и снижает его эффективность в процессе хранения.

Настоящее изобретение направлено на повышение ростостимулирующего эффекта корма за счет увеличения массонакопления, выживаемости рыб и повышения технологичности изготовления корма.

Поставленная задача решается путем скармливания комбикорма, отличающемся тем, что в корм вводят экстракт коры дуба, в дозировке 1-2 мл/кг живой массы рыбы.

Задачей предполагаемого изобретения является также интенсификация и ускорение процесса экстракции при увеличении степени извлечения веществ.

Поставленная задача решается, технический результат достигается введением в комбикорм экстракта коры дуба, для получения которого предварительно измельченное до гранулометрического состава от 70 до 2000 мкм сырье коры дуба с влажностью не более 20% обрабатывают электрохимически активированным водным раствором, с содержанием серебра 0,01 мг/л, при соотношении сырье-раствор 1:8-1:15 в течение 600 с при постоянном перемешивании. Подготовленную суспензию экстрагируют н-гексаном в аппарате Сокслета. Для получения водного раствора используют кипяченую маломинерализованную или дистиллированную воду. Экстракт из коры дуба перед введением в комбикорм предварительно смешивают с премиксом, и вводят в корм в дозировке 1-2 мл/кг живой массы рыбы

В условиях кафедры биотехнологии животного сырья и аквакультуры Оренбургского государственного университета для опыта было отобрано 80 годовиков карпа, которых методом аналогов разделили на 4 группы (n=20). Продолжительность эксперимента составила 42 суток.

После подготовительного периода (7 суток) группы были переведены на условия учетного периода (35 суток): контрольная группа получала основной рацион (OP), I опытная - ОР + экстракт коры дуба (1 мл/кг живой массы), II опытная - ОР + экстракт коры дуба (2 мл/кг живой массы), III опытная - ОР + экстракт коры дуба (3 мл/кг живой массы).

В качестве основного рациона был использован корм КРК-110-1 производства ОАО «Оренбургский комбикормовый завод» (г. Оренбург).

Идентификация химических веществ экстракта коры дуба выполнялась на газовом хроматографе с масс-селективным детектором GQCMS 2010 Plus (Shimadzu, Япония), на колонке HP-5MS. При интерпретации результатов исследований использовалось программное обеспечение GCMS Solutions, GCMS PostRun Analysis, для идентификации соединений использовался набор библиотек спектров CAS, NIST08, Mainlib, Wiley9 и DD2012 Lib. Была использована смесь веществ, выделенных из экстракта коры дуба и синтезированных химическим путем (Acros):

4-гидрокси-3-метоксибензальдегида (ванилин),

4-пропил-1,3-бензолдиол (пропилрезорцин),

4-(3-гидрокси-1-пропенил)-2-метоксифенол (конифериловый спирт),

7-гидрокси-6-метокси-2Н-1-бензопиран-2-он (кумарин),

2Н-1-бензопиранон-2 (скополетин),

3, 4, 5-триметилгидросифенол (антиарол).

Обслуживание рыб и экспериментальные исследования выполнены в соответствии с инструкциями Russian Regulations, 1987 (Order No. 755 on 12.08.1977 the USSR Ministry of Health) и «The Guide for Care and Use of Laboratory Animals (National Academy Press Washington, D.C. 1966)». При выполнении исследований были приняты усилия, чтобы свести к минимуму страдания животных и уменьшения количества используемых образцов.

В ходе эксперимента суточную норму кормления определяли в количестве 3% от массы рыб. Кормление подопытной рыбы осуществлялось 3 раза в сутки. Контроль живой массы проводился еженедельно, путем индивидуального взвешивания утром, до кормления (±1 г).

Полученные в ходе исследований результаты были статистически обработаны с помощью персонального компьютера, при этом производилось определение средней арифметической величины, ошибки средней арифметической и стандартного отклонения. Для выявления статистически значимых (достоверных) различий использовали критерий Стьюдента. Достоверными считали различия при уровне вероятности ошибки не выше 5% (Р<0,05) [7].

В ходе исследований отклонений от нормы по поведению и внешним признакам у рыб обнаружено не было. Сохранность рыб во всех группах составила 100%. Включение в рацион карпа экстракта коры дуба, отразилось на росте и развитии рыб (табл. 1). На первой недели эксперимента достоверных различий между группами зафиксировано не было. На второй недели в опытных группах наблюдали повышение массы рыбы по сравнению с контролем: с добавлением экстракта коры дуба, в I группе - на 11%, во II - на 12,3% и III - на 10%.

На третьей неделе динамика изменения массы рыб сохранилась, при этом наилучшие показатели были зафиксированы в группах с добавлением экстракта коры дуба, так в I группе наблюдали повышение массы на 10,6%, во II - на 12,6% (Р<0,05) и III - на 8%, по сравнению с контролем.

На четвертой и пятой неделе эксперимента наилучшие показатели были зафиксированы в группах с добавлением экстракта коры дуба при концентрациях экстракта 1 и 2 мл/кг живой массы. Так, например, на четвертой недели констатировали повышение массы на 10% и 13,5% (Р<0,05), а на пятой недели на 7,9% и 10,7% (Р<0,05), соответственно.

Таким образом из полученных данных следует, что наилучший эффект увеличения массы был получен при введении в корм экстракта коры дуба при концентрации экстракта 1-2 мл/кг живой массы рыбы: масса тела рыбы к концу эксперимента была выше контрольной на 7,9-10,7%.

В исследовании были выявлены определенные изменения в составе крови (табл. 2).

В частности, зафиксировано снижение содержания гемоглобина в I опытной группе - на 9% (Р<0,05), по сравнению с контролем.

Гематокрит (от 16 до 68%) и средний объем эритроцитов (от 7 до 29%) во всех опытных группах были ниже контрольных значений.

Содержание гемоглобина и средняя концентрация гемоглобина в эритроците во всех опытных группах показали значения, превышающие контрольную группу. Максимальные значения этих показателей наблюдались в II группе (СГЭ на 66%, средняя концентрация гемоглобина в эритроците на 20% выше по сравнению с контролем).

Наиболее низкий уровень моноцитов наблюдался во второй опытной группе (на 35% меньше контрольной группы). Количество гранулоцитов во всех опытных группах, кроме I группы было меньше контроля. Пониженное содержание моноцитов и гранулоцитов, вероятно, объясняется, напряжением иммунной системы в результате активизации обмена веществ в организме рыб. Кровь в исследованный период носила лимфоидный характер.

Для характеристики общего состояния организма подопытных рыб было проведено биохимическое исследование сыворотки крови (табл. 3).

Изучение биохимических показателей позволяет получить дополнительные данные о физиологическом состоянии карпа. Зафиксировано повышение содержания глюкозы в группах, получавших экстракт коры дуба, в I опытной группе - в 4,2 (Р<0,001), во II - 3,4 (Р<0,001) и III - 3,3(Р<0,001) раза по сравнению с контролем. Повышение содержания глюкозы свидетельствует об активных обменных процессах в организме рыб, повышению стрессоустойчивости.

Содержание креатинина во всех опытных группах было ниже контрольной группы. Во второй группе, получавшей экстракт коры дуба в дозировке 2 мл/кг корма, этот показатель имел минимальные значения (на 30% меньше контроля).

Содержание железа в крови карпа только в первой опытной группе было выше контроля (в 3 раза выше). Содержание фосфора во всех опытных группах оказалось несколько ниже контроля.

Анализируя полученные данные, можно сделать следующие выводы:

- добавление в корм молоди карпа экстракта коры дуба не вызывает значительных отклонений гематологических показателей от физиологической нормы;

- способ повышения продуктивности роста карпа, предусматривающий введение в кормосмесь ростстимулирующей добавки - экстракта коры дуба в дозировке 1-2 мл/кг живой массы рыбы подтвержден возможностью его осуществления с помощью описанных в заявке средств и методов;

- заявленное изобретение соответствует условию «промышленная применимость».

Источники информации

1. Ветеринарное законодательство. Т.3. Раздел 4. - М.: Колос, 1981. - С. 128-130.

2. Gaggía F. Probiotics and prebiotics in animal feeding for safe food production / F. Gaggía, P. Mattarelli, B. Biavati // International Journal of Food Microbiology. 2010. Vol. 141. P. 815-828.

3. Патент на изобретение RU 2346458 Способ приготовления кормов для рыб / А.В. Линник, Т.И. Сазонова опубликовано 20.02.2009, бюл. №5.

4. Патент на изобретение RU 2104733 Способ экстракции из твердого растительного сырья / М.Г. Сульман; опубликовано 20.02.1998.

5. Серебряная вода / Л.А. Кульский Л.А. - Киев: издательство «Наукова думка», 1977. - 136 с.

6. Платонов В.В. Химический состав органического вещества коры дуба обыкновенного (черешчатого) - (Quercus robur L., семейство Буковые - Fagaceae) (сообщение I-H-гексановый экстракт) / В.В. Платонов, А.А. Хадарцев, Г.Т. Сухих, В.А. Дунаев, М.В. Волочаева // Вестник новых медицинских технологий. - 2020. - №1. - С. 125-130.

7. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.

Способ характеризуется введением в комбикорм экстракта коры дуба. Для получения экстракта предварительно измельченное до гранулометрического состава от 70 до 2000 мкм сырье коры дуба с влажностью не более 20% обрабатывают электрохимически активированным водным раствором, с содержанием серебра 0,01 мг/л, при соотношении сырье-раствор 1:8-1:15 в течение 600 с при постоянном перемешивании. Подготовленную суспензию экстрагируют н-гексаном в аппарате Сокслета. Изобретение обеспечивает повышение продуктивности карпа. 2 з.п. ф-лы, 3 табл.

1. Способ повышения продуктивности карпа, характеризующийся введением в комбикорм экстракта из коры дуба, для получения которого предварительно измельченное до гранулометрического состава от 70 до 2000 мкм сырье коры дуба с влажностью не более 20% обрабатывают электрохимически активированным водным раствором, с содержанием серебра 0,01 мг/л, при соотношении сырье-раствор 1:8-1:15 в течение 600 с при постоянном перемешивании, после чего подготовленную суспензию экстрагируют н-гексаном в аппарате Сокслета.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения водного раствора используют кипяченую маломинерализованную или дистиллированную воду.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что экстракт из коры дуба перед введением в комбикорм предварительно смешивают с премиксом и вводят в корм в дозировке 1-2 мл/кг живой массы рыбы.