Способ диагностики ДВС-синдрома у больных с гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией Российский патент 2022 года по МПК G01N33/68 G01N33/574 G01N33/86 

Изобретение относится к медицине, в частности, к гематологии и может быть использовано для прогнозирования развития синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания (ДВС-синдром) путем определения сывороточного уровня синдекана-1 у больных гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией.

У пациентов с гематологическими злокачественными новообразованиями ДВС-синдром относят к критическим состояниям, которые являются причиной кровотечений на этапах лечения острого миелоидного лейкоза (ОМЛ), острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ), злокачественных лимфом [1-3]. Известно, что при ОМЛ частота развития ДВС-синдрома достигает 30% [4], а при остром промиелоцитарном лейкозе может превышать 70% [5].

Общепринятым способом диагностики ДВС-синдрома является использование шкалы DIC (Disseminated Intravascular Coagulation score) ISTH (International Society on Thrombosis and Haemostasis, Международного общества по тромбозу и гемостазу) [6]. Для расчета баллов по шкале DIC оценивают количество тромбоцитов и показатели коагулограммы (протромбиновое время, уровень фибриногена и количество Д-димеров). Количество баллов шкалы ISTH находится в прямой зависимости от степени выраженности нарушений этих показателей (например, тромбоцитопения менее 50×10⁹/л соответствует 2 баллам шкалы). Явный ДВС-синдром диагностируется при наличии 5 баллов и более. Благоприятный исход патогенетической терапии ДВС-синдрома ассоциирован с более ранним ее началом.

Недостатком данного способа при диагностике ДВС-синдрома у больных гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией является тот факт, что течение гемобластозов часто сопровождается угнетением костномозгового кроветворения и, как следствие, развитием тромбоцитопении. Кровотечения при этом могут развиваться и при отсутствии коагулопатии потребления [7]. Это усложняет адекватную диагностику ДВС-синдрома и может привести к необоснованному назначению трансфузионной терапии, часто сопровождающейся возникновением аллосенсибилизации, посттрансфузионных осложнений, передачей гемотрансмиссивных инфекций и др.

Предлагаемый метод заключается в подтверждении наличия ДВС-синдрома у пациентов с сопутствующей тромбоцитопенией с помощью дополнительного лабораторного критерия - определения концентрации синдекана-1 в сыворотке периферической крови.

В последние годы убедительно доказана предиктивная роль синдекана-1 в развитии ДВС-синдрома, высвобождающегося при повреждении эндотелиального гликокаликса [8, 9]. Однако данный показатель не включен в перечень критериев диагностики ДВС-синдрома, в том числе и у больных гемобластозами.

Целью изобретения является разработка способа диагностики ДВС-синдрома у больных гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией, позволяющего повысить точность прогнозирования развития этого критического состояния.

В процессе проведения патентно-информационного поиска не выявлено источников, порочащих новизну предполагаемого изобретения.

Заявляемое изобретение разработано в отделе организации и сопровождения научных исследований ФГБУН КНИИГ и ПК ФМБА России в соответствии с планом научно-исследовательской работы.

Способ осуществляют следующим образом. При наличии геморрагического синдрома у пациента с онкогематологическим заболеванием и сопутствующей тромбоцитопенией определяют показатели, необходимые для расчета баллов по шкале ISTH. Одновременно рассчитывают концентрацию синдекана-1 в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа с использованием тест-системы Enzyme-linked Immunosorbent Assay Kit For Syndecan 1 (SDC1) (Cloud-Clone Corp., США).

При подозрении на наличие ДВС-синдрома у больных осуществляют взятие 9 мл венозной крови в вакуумную пробирку с активатором свертывания. Образец периферической крови доставляют в лабораторию в кратчайшие сроки (в течение 24 час после взятия). После доставки биологического образца для исследования, пробирку помещают в центрифугу СМ-6М (Biosan, Латвия) и центрифугировают со скоростью 3000 об/мин при температуре 22±1°С в течение 15 мин. После центрифугирования дозатором с наконечником аккуратно собирают сыворотку, не задевая слой, содержащий форменные элементы крови. Анализ проводят согласно инструкции производителя. Оценку результатов осуществляют на полуавтоматическом иммуноферментном анализаторе Infinite® 200 PRO (Tecan, Австрия). Для расчета сывороточных концентраций синдекана-1 используют пакет программ MS Office Excel 2003. Корреляционный анализ проводят на основании оценки значения коэффициента корреляции Спирмена (r) путем использования статистической программы «Stadia».

ДВС-синдром устанавливают при сумме баллов 5 и более по шкале ISTH и уровне синдекана-1 более 5,5 нг/мл. При отсутствии повышения содержания синдекана-1 (менее 5,5 нг/мл) геморрагический синдром расценивают как тромбоцитопенический.

Исследования выполнены у 48 пациентов (32 - мужчин и 16 женщин) в возрасте от 21 до 66 лет с онкогематологическими заболеваниями и сопутствующей тромбоцитопенией. Определена статистически значимая корреляция уровня синдекана-1 и выраженности ДВС-синдрома (r=0,46, p=0,002). Установлена диагностическая роль содержания синдекана-1 при развитии явного ДВС-синдрома выше 5,5 нг/мл, что в 5 раз превышало уровень синдекана-1 у здоровых доноров.

Разработанный способ диагностики ДВС-синдрома у больных гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией позволил в 67% случаев получить положительный результат, а специфичность теста составила 85%. Способ отличается от аналога тем, что по содержанию синдекана-1 в сыворотке крови >5,5 нг/мл с учетом показателей шкалы ISTH в 5 и более баллов диагностируют явный ДВС-синдром у больных гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией. При таком сочетании значений шкалы и уровня синдекана-1 рекомендуется назначать патогенетическую терапию ДВС-синдрома. При отсутствии повышения содержания синдекана-1 >5,5 нг/мл кровотечение расценивают как тромбоцитопеническое и назначают заместительную терапию концентратом тромбоцитов.

Предлагаемый способ информативен, может быть использован в гематологических отделениях, отделениях трансфузиологии для диагностики ДВС-синдрома у больных гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией.

Список литературы:

1. Intravascular coagulation in acute leukemia: clinical and subclinical abnormalities / H.R. Gralnick, S. Marchesi, H. Givelber // Blood. - 1972. - Vol. 40 (5). - P. 709-718.

2. The prognosis of disseminated intravascular coagulation associated with hematologic malignancy and its response to recombinant human thrombomodulin / N. Kurita, T. Sakamoto, T. Kato, M. Kusakabe, Y. Yokoyama, H. Nishikii, M. Sakata-Yanagimoto, N. Obara, Y. Hasegawa, S. Chiba // Thromb. Res. - 2019. - no. 173. - P. 57-64.

3. Disseminated intravascular coagulation in non-Hodgkin lymphoma / S. Chi, T. Ikezoe//Int J. Hematol. - 2015. - Vol. 102 (4). - P. 413-419.

4. Disseminated intravascular coagulation in acute leukemia: clinical and laboratory features at presentation / M. Yanada, T. Matsushita, M. Suzuki, H. Kiyoi, K. Yamamoto, T. Kinoshita, T. Kojima, H. Saito, T. Naoe // Eur. J. Haematol. - 2006. - Vol. 77. - P. 282-287.

5. Clinical bleeding events and laboratory coagulation profiles in acute promyelocytic leukemia / H. Chang, M. - C. Kuo, L.-Y. Shih, P. Dunn, P.-N. Wang, J.-H. Wu, T.-L. Lin, Y.-S. Hung, T.-C. Tang // Eur. J. Haematol. - 2012. - Vol. 88 - P. 321-328.

6. Towards definition, clinical and laboratory criteria, and a scoring system for disseminated intravascular coagulation / F.B. Taylor Jr., C.-H. Toh, W.K. Hoots, H. Wada, M. Levi // Thrombosis and Haemostasis. - 2001. - Vol. 86 (5). - P. 1327-1330.

7. Prophylactic platelet transfusion for prevention of bleeding in patients with haematological disorders after chemotherapy and stem cell transplantation / L. Estcourt, S. Stanworth, C. Doree, S. Hopewell, M.F Murphy, A. Tinmouth, N. Heddle // Cochrane Database Syst Rev. - 2012. - Vol. 16 (5). - CD004269.

8. Plasma endothelial glycocalyx components as a potential biomarker for predicting the development of disseminated intravascular coagulation in patients with sepsis / X. Huang, H. Ни, T Sun, W. Zhu, H. Tian, D. Hao, T. Wang, X. Wang // J. Intensive Care Med. - 2020. - Vol. 17. - 885066620949131.

9. Circulating syndecan-1 predicts the development of disseminated intravascular coagulation in patients with sepsis / M. Ikeda, H. Matsumoto, H. Ogura, T. Hirose, K. Shimizu, K. Yamamoto, I. Maruyama, T. Shimazu // J. Crit. Care. - 2018. - Vol. 43. - P. 48-53.

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и может быть использовано для диагностики ДВС-синдрома у больных гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией. Для диагностики явного ДВС-синдрома, кроме наличия 5 и более баллов по шкале DIC (ISTH), оценивается уровень синдекана-1 в сыворотке крови, повышение которого более 5,5 нг/мл подтверждает диагноз и требует назначения патогенетической терапии. Способ обеспечивает возможность диагностики ДВС-синдрома у больных гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией, позволяющей повысить точность прогнозирования развития этого критического состояния, за счет подтверждения наличия ДВС-синдрома у пациентов с сопутствующей тромбоцитопенией с помощью дополнительного лабораторного критерия - определения концентрации синдекана-1 в сыворотке периферической крови.

Способ диагностики ДВС-синдрома у больных гемобластозами с сопутствующей тромбоцитопенией, отличающийся тем, что для диагностики явного ДВС-синдрома кроме наличия 5 и более баллов по шкале DIC (ISTH) оценивается уровень синдекана-1 в сыворотке крови, повышение которого более 5,5 нг/мл подтверждает диагноз и требует назначения патогенетической терапии.