КОМПОЗИЦИЯ С НЕПЕРЕВАРИВАЕМЫМИ ОЛИГОСАХАРИДАМИ ДЛЯ ОСЛАБЛЕНИЯ ВОСПАЛЕНИЯ НАЗАЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ Российский патент 2022 года по МПК A61K31/702 A61P31/16 A23L29/30 A61P37/00 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Изобретение относится к применению неперевариваемых олигосахаридов при назальном воспалении.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ, ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ ИЗОБРЕТЕНИЮ

Как правило, ринит рассматривают как хроническое или острое воспаление слизистой оболочки носа. Это воспаление приводит к образованию избыточного количества слизи, что приводит к первичному симптому ринита, течению слизи из носа или "насморку", а также заложенности носа, риноконъюнктивиту (воспалению конъюнктивы) и стеканию слизи из носоглотки.

Как правило, ринит подразделяют на три типа: инфекционный ринит, включающий острые и хронические бактериальные или вирусные инфекции; аллергический ринит, как правило, вызываемый вдыхаемыми аллергенами, присутствующими, например, в пыльце, плесени, шерсти животных и домовых клещах, и неинфекционный неаллергический ринит. Этот последний тип ринита может быть хроническим и может быть обусловлен неаллергическими инициирующими факторами в окружающей среде, такими как запахи, пары, дым, пыль, выхлопы автомобилей, хлор, сигаретный дым, чистящие растворы, озон, смог, тонкодисперсные частицы и изменения температуры. Раздражители окружающей среды являются распространенными инициирующими факторами неаллергического ринита.

Как правило, блокированный, "заложенный", нос не считают серьезным патологическим состоянием. Однако у грудных детей и детей младшего возраста воздействие может являться более высоким, чем у взрослых. Он оказывает значительное отрицательное влияние на качество жизни как родителя, так и ребенка. Грудные дети с заложенным носом пытаются дышать при кормлении молоком, а дети младшего возраста не могут правильно сморкаться для снижения дискомфорта. Грудным детям и детям младшего возраста с заложенным носом также трудно спать по ночам. Родители часто обращаются за помощью, для прочистки носа своего ребенка. Кроме того, грудные дети не могут правильно дышать ртом и могут это делать только при плаче. Ринит у грудных детей и детей младшего возраста ассоциирован с проблемами со сном, ушными нарушениями и даже проблемами с обучением.

Современные схемы лечения направлены на минимизацию воздействия инициирующих факторов ринита и на подавление симптомов. Эффективными для удаления пыли, выделений и аллергенных молекул из слизистой оболочки, таким образом, минимизируя воздействие, могут быть спреи из морской воды, полоскания или пар.

В WO 2011/099875 описано применение HN001 Lactobacillus rhamnosus или его производных для лечения или профилактики ринита. Однако тестирования действия неперевариваемых олигосахаридов не проводилось.

В US 2009/0280099 описан назофарингеальный инокулят пробиотиков для лечения респираторных инфекций. Однако тестирования действия неперевариваемых олигосахаридов не проводилось.

WO 2005/039597 относится к способу усиления иммунной системы и к лечению и/или профилактике связанных с иммунной системой нарушений у млекопитающего, в частности, у новорожденных, где указанный способ включает введение кислотного олигосахарида и нейтрального олигосахарида. В частности, действие на аллергию и атопические заболевания обеспечивает.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Исследователи неожиданно обнаружили, что неперевариваемые олигосахариды оказывают непосредственное воздействие на подавление воспалительного ответа клеток назального эпителия человека у здоровых индивидуумов без аллергий. Результаты продемонстрировали, что присутствие неперевариваемых олигосахаридов непосредственно снижало секрецию провоспалительных хемокинов, таких как IP–10, CCL5 и CCL20 в клетках эпителия, а противовоспалительное действие в клетках назального эпителия индивидуумов без аллергий являлось по меньшей мере таким же высоким, или даже более высоким, чем противовоспалительное действие в клетках назального эпителия страдающих атопией, т.е. аллергией, индивидуумов. Кроме того, воздействие по сравнению с воздействием Lactobacillus rhamnosus было более сильным. В частности у грудных детей и дети младшего возраста профилактика и/или лечение неаллергического ринита были успешными. Таким образом, настоящее изобретение относится к композициям, содержащим неперевариваемые олигосахариды, конкретно, галакто– и/или фруктоолигосахариды, для профилактики и лечения неаллергического ринита.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики неаллергического ринита у человека, включающему введение указанному человеку композиции, содержащей неперевариваемые олигосахариды.

Способ по настоящему изобретению также можно обозначить как немедицинский способ лечения и/или профилактики неаллергического ринита у человека.

Для определенных юрисдикций изобретение также можно сформулировать как применение неперевариваемых олигосахаридов при производстве композиции для лечения и/или профилактики неаллергического ринита у человека.

Для некоторых юрисдикций изобретение также можно сформулировать как композицию, содержащую неперевариваемые олигосахариды для применения при лечении и/или профилактике неаллергического ринита у человека.

Неперевариваемые олигосахариды

Композиция в способе или в применении по настоящему изобретению содержит неперевариваемый олигосахарид, а предпочтительно содержит по меньшей мере два неперевариваемых олигосахарида, конкретно, два разных источника неперевариваемых олигосахаридов. Выявлено, что неперевариваемые олигосахариды непосредственно снижают воспалительный ответ в клетках назального эпителия, в частности, у индивидуумов без аллергий.

Как используют в настоящем документе, термин "олигосахарид" относится к сахаридам со степенью полимеризации (DP) от 2 до 250, предпочтительно с DP от 2 до 100, более предпочтительно от 2 до 60, даже более предпочтительно от 2 до 10. Если олигосахарид с DP от 2 до 100 включен в композицию в способе или применение по настоящему изобретению, это приводит к композиции, которая может содержать олигосахариды с DP от 2 до 5, с DP от 50 до 70 и с DP от 7 до 60. Как используют в настоящем документе, термин "неперевариваемый олигосахарид" относится к олигосахаридам, которые не перевариваются в желудочно–кишечном тракте под действием кислот или пищеварительных ферментов, присутствующих в верхней части желудочно–кишечного тракта человека, например, тонком кишечнике и желудке, но которые предпочтительно подвергаются ферментации под действием кишечной микробиоты человека. Например, сахароза, лактоза, мальтоза и мальтодекстрины считаются перевариваемыми.

Предпочтительно неперевариваемый олигосахарид по настоящему изобретению является растворимым. Термин "растворимый" в отношении полисахарида, волокна или олигосахарида означает, что вещество растворимо по меньшей мере способом, описанным в L. Prosky et al., J. Assoc. Off. Anal. Chem. 71, 1017–1023 (1988).

В одном из вариантов осуществления неперевариваемый олигосахарид, включаемый в композиции в способе или применении по настоящему изобретению, предпочтительно выбран из группы, состоящей из фруктоолигосахаридов (таких как инулин), неперевариваемых декстринов, галактоолигосахаридов (таких как трансгалактоолигосахариды), ксилоолигосахаридов, арабиноолигосахаридов, арабиногалактоолигосахаридов, глюкоолигосахаридов, гентиоолигосахаридов, глюкоманноолигосахаридов, галактоманноолигосахаридов, маннанолигосахаридов, изомальтоолигосахаридов, нигероолигосахаридов, хитоолигосахаридов, соевых олигосахаридов, олигосахаридов с уроновыми кислотами, сиалилолигосахаридов, сиалиллактозы, лактосиалилтерасахарид–a, b,c–дисиалиллакто–N–тетраозы, сиалиллакто–N–гексаозы, сиалиллакто–N–гексаозы, фукозилированных олигосахаридов, (таких как (не)сульфатированные фукоидановые олигосахариды, фукозиллактоза, дифукозиллактоза, лакто–N–фукопентаоза, лакто–N–неопентаоза, лакто–N–дифукозилгексаозы) и их смесей.

В одном из вариантов осуществления неперевариваемый олигосахарид, включаемый в композиции в способе или применении по настоящему изобретению, предпочтительно включает смесь неперевариваемых олигосахаридов. Неперевариваемый олигосахарид предпочтительно выбран из группы, состоящей из фруктоолигосахарида и галактоолигосахарида, даже более предпочтительно выбран из группы, состоящей из трансгалактоолигосахарида и инулина, наиболее предпочтительно он представляет собой трансгалактоолигосахарид.

В одном из вариантов осуществления неперевариваемый олигосахарид предпочтительно выбран из группы, состоящей из бета–галактоолигосахарида, альфа–галактоолигосахарида и галактана. По более предпочтительному варианту осуществления неперевариваемый олигосахарид представляет собой бета–галактоолигосахарид. Предпочтительно неперевариваемый олигосахарид содержит галактоолигосахарид с бета–(1,4), бета–(1,3) и/или бета–(1,6) гликозидными связями и концевой глюкозой. Например, трансгалактоолигосахарид доступен под торговым наименованием вивиналGOS (Vivinal®GOS) (Domo FrieslandCampina Ingredients), BI2muno (Clasado), кап–олиго (Cup–oligo) (Nissin Sugar) и олигомат55 (Oligomate55) (Yakult). Полагают, что эти олигосахариды оказывают наилучшим действие при снижении воспалительного ответа в клетках назального эпителия.

В предпочтительном варианте осуществления средняя DP галактоолигосахарида, содержащегося в композиции для способа или применения по настоящему изобретению, находится в диапазоне 2–10, предпочтительно 2–7, предпочтительно 3–6.

В одном из вариантов осуществления неперевариваемый олигосахарид предпочтительно содержит фруктоолигосахарид. Фруктоолигосахарид в другом контексте может иметь такие названия как фруктополисахарид, олигофруктоза, полифруктоза, полифруктан, инулин, леван и фруктан и может относиться к олигосахаридам, содержащим бета–связанные фруктозные единицы, которые предпочтительно связаны бета–(2,1) и/или бета–(2,6) гликозидными связями, и, предпочтительно, их DP составляет от 2 до 200. Предпочтительно, фруктоолигосахарид содержит концевую глюкозу, связанную бета–(2,1) гликозидной связью. Предпочтительно, фруктоолигосахарид содержит по меньшей мере 7 бета–связанных фруктозных единиц. В дополнительном предпочтительном варианте осуществления используют инулин. Инулин представляет собой разновидность фруктоолигосахарида, где по меньшей мере 75% гликозидных связей представляют собой бета–(2,1) связи. Как правило, средняя длина цепи инулина составляет от 8 до 60 моносахаридных единиц. Подходящий фруктоолигосахарид для применения в композиции в способе или применении по настоящему изобретению коммерчески доступен под торговым наименованием рафтилинHP (Raftiline®HP) (Orafti). Другие подходящие источники представляют собой рафтилозу (Raftilose) (Orafti), фибрулозу (Fibrulose) и фибрулин (Fibruline) (Cosucra) и фрутафит (Frutafit) и фруталозу (Frutalose) (Sensus).

В предпочтительном варианте осуществления средняя DP фруктоолигосахарида, содержащегося в композиции для способа или применения по настоящему изобретению, находится в диапазоне 7–100, предпочтительно 11–60, предпочтительно 20–50.

В одном из вариантов осуществления композиция в способе или применении по настоящему изобретению содержит смесь галактоолигосахарида и фруктоолигосахарида. Предпочтительно смесь галактоолигосахарида и фруктоолигосахарида находится в массовом отношении от 1/99 до 99/1, более предпочтительно от 1/19 до 19/1, более предпочтительно от 1/1 до 19/1, более предпочтительно от 2/1 до 15/1, более предпочтительно от 5/1 до 12/1, даже более предпочтительно от 8/1 до 10/1, даже более предпочтительно в отношении приблизительно 9/1. Это массовое отношение является особенно эффективным, когда средняя DP галактоолигосахарида является более низкой, а DP фруктоолигосахарида является относительно высокой. Наиболее предпочтительна смесь галактоолигосахарида со средней DP ниже 10, предпочтительно ниже 6, предпочтительно в диапазоне 2–10, предпочтительно в диапазоне 2–7, предпочтительно в диапазоне 3–6, и фруктоолигосахарида со средней DP выше 7, предпочтительно выше 11, даже более предпочтительно выше 20, предпочтительно в диапазоне 7–100, предпочтительно в диапазоне 11–60, предпочтительно в диапазоне 20–50. Полагают, что такая смесь обладает дополнительным улучшенным действием на снижение воспалительного ответа в клетках назального эпителия.

В одном из вариантов осуществления композиция в способе или применении по настоящему изобретению содержит смесь короткоцепочечного фруктоолигосахарида и длинноцепочечного фруктоолигосахарида. Предпочтительно смесь короткоцепочечного фруктоолигосахарида и длинноцепочечного фруктоолигосахарид находится в массовом отношении от 1/99 до 99/1, более предпочтительно от 1/19 до 19/1, даже более предпочтительно от 1/10 до 19/1, более предпочтительно от 1/5 до 15/1, более предпочтительно от 1/1 до 10/1. Предпочтительна смесь короткоцепочечного фруктоолигосахарида со средней DP ниже 10, предпочтительно ниже 6, предпочтительно в диапазоне 2–10, предпочтительно в диапазоне 2–7, предпочтительно в диапазоне 3–6, и фруктоолигосахарида со средней DP выше 7, предпочтительно выше 11, даже более предпочтительно выше 20, предпочтительно в диапазоне 7–100, предпочтительно в диапазоне 11–60, предпочтительно в диапазоне 20–50.

Предпочтительно композиция в способе или применении по настоящему изобретению содержит от 2,5 до 20% масс. общего неперевариваемого олигосахарида, более предпочтительно 2,5 до 15% масс., даже более предпочтительно 3,0 до 10% масс., наиболее предпочтительно 5,0 до 7,5% масс. от общей сухой массы композиции. В жидкой форме композиция в способе или применении по настоящему изобретению предпочтительно содержит 0,35 до 2,5% масс. общего неперевариваемого олигосахарида, более предпочтительно 0,35 до 2,0% масс., даже более предпочтительно 0,4 до 1,5% масс., на 100 мл композиции. Меньшее количество неперевариваемого олигосахарида является менее эффективным для снижения воспалительного ответа в клетках назального эпителия, тогда как слишком большое количество приводит к побочным эффектам в виде вздутия и дискомфорта в желудочно–кишечном тракте после потребления человеком.

Композиция

В одном из вариантов осуществления композиция в способе или применении по настоящему изобретению представляет собой пищевую композицию. Предпочтительно композиция представляет собой пищевую композицию, которая подходит для введения грудному ребенку. В одном из вариантов осуществления композиция в способе или применении по настоящему изобретению представляет собой фармацевтическую композицию и предпочтительно является фармацевтической композицией, которая подходит для введения грудному ребенку. В одном из вариантов осуществления композиция находится в форме, которая подходит для местного применения в назальной полости человека, предпочтительно композиция находится в форме для введения в виде спрея или в виде капель, или находится в форме спрея или капель. В одном из вариантов осуществления композицию вводят местно, более предпочтительно местно в назальную полость. В одном из вариантов осуществления композицию вводят энтерально, более предпочтительно ее вводят перорально. Так как назальная полость, ротовая полость и глотка находятся в непосредственной близости друг от друга, конкретно у грудных детей и детей младшего возраста, более конкретно у грудных детей, учитывая их другую анатомию, полагают, что пероральное введение также приводит к непосредственному контакту перорально вводимой композиции. Этот непосредственный контакт с назальным эпителием у грудного ребенка дополнительно осуществляется вследствие отрыжки, захлебывания и кашля при кормлении и неосложненной (назальной) регургитации, даже у здорового в остальном грудного ребенка.

Таким образом, композиция в способе или применении по настоящему изобретению предпочтительно представляет собой пищевую композицию, более предпочтительно детскую смесь, молочную смесь второго уровня или детскую смесь для ребенка младшего возраста. Пищевую композицию по настоящему изобретению преимущественно можно применять в качестве сбалансированного питания для грудного ребенка. Предпочтительно пищевая композиция по настоящему изобретению представляет собой детскую смесь. Детская смесь определена как детская смесь для применения для грудного ребенка и может представлять собой, например, молочную смесь первого уровня, предназначенную для грудного ребенка в возрасте от 0 до 6 или 0 до 4 месяцев. Молочная смесь второго уровня предназначена для грудного ребенка в возрасте от 4 или 6 месяцев до 12 месяцев. Молочная смесь третьего уровня предназначена для детей в возрасте от 12 до 36 месяцев. Композиция по настоящему изобретению предпочтительно содержит липидный компонент, белковый компонент и углеводный компонент, и ее предпочтительно вводят в жидкой форме. Пищевая композиция по настоящему изобретению также может находиться в форме сухого питания, предпочтительно в форме порошка, к которому приложены инструкции о том, как смешивать указанное сухое питание, предпочтительно порошок, с подходящей жидкостью, предпочтительно водой. Пищевая композиция, используемая по изобретению, для получения из нее сбалансированной пищевой композиции предпочтительно содержит другие фракции, такие как витамины, минералы, микроэлементы и другие питательные микроэлементы. Предпочтительно детские смеси содержат витамины, минералы, микроэлементы и другие питательные микроэлементы по международным требованиям.

Пищевая композиция в способе или применении по настоящему изобретению предпочтительно содержит липиды, белки и перевариваемые углеводы, где липиды обеспечивают от 5 до 50% общих калорий, белки обеспечивают от 5 до 50% общих калорий, и перевариваемые углеводы обеспечивают от 15 до 90% общих калорий. Предпочтительно, в пищевой композиции липиды обеспечивают от 35 до 50% общих калорий, белки обеспечивают от 7,5 до 12,5% общих калорий, и перевариваемые углеводы обеспечивают от 40 до 55% общих калорий. Пищевая композиция в способе или применении по настоящему изобретению не является молоком человека.

Для удовлетворения потребностей грудных детей или детей ясельного возраста в калориях пищевая композиция предпочтительно содержит от 45 до 200 ккал/100 мл жидкости. Для грудных детей пищевая композиция более предпочтительно содержит от 60 до 90 ккал/100 мл жидкости, даже более предпочтительно от 65 до 75 ккал/100 мл жидкости. Эта калорийность обеспечивает оптимальное соотношение между потреблением воды и калорий. Для детей ясельного возраста, людей в возрасте от 12 до 36 месяцев, пищевая композиция более предпочтительно обладает калорийностью от 45 до 65, даже более предпочтительно от 50 до 60 ккал/100 мл. Осмолярность композиции по настоящему изобретению предпочтительно составляет от 150 до 420 мосмоль/л, более предпочтительно от 260 до 320 мосмоль/л. Низкая осмолярность преследует цель дальнейшего снижения напряжения желудочно–кишечного тракта. Вязкость пищевой композиция по настоящему изобретению в жидкой форме предпочтительно составляет от 1 до 60 мПз, предпочтительно от 1 до 20 мПз, более предпочтительно от 1 до 10 мПз, наиболее предпочтительно от 1 до 6 мПз. Низкая вязкость обеспечивает надлежащее введение жидкости и низкая вязкость дополнительно облегчает контакт с назальным эпителием грудного ребенка. Также эта вязкость имеет очень большое сходство с вязкостью молока человека. Кроме того, низкая вязкость обеспечивает нормальное опорожнение желудка и лучшее потребление энергии, что существенно для грудного ребенка, которому необходима энергия для оптимального роста и развития. Пищевую композицию предпочтительно получают посредством разбавления порошковой композиции водой. В норме таким образом готовят детскую смесь. Таким образом, композиция для способа или применения по настоящему изобретению также относится к упакованной порошковой композиции, где к указанной упаковке приложены инструкции о том, как смешивать порошок с подходящим количеством жидкости, получая, таким образом, жидкую композицию с вязкостью от 1 до 60 мПз. Вязкость жидкости определяют с использованием реометра Physica Rheometer MCR 300 (Physica Messtechnik GmbH, Ostfilden, Germany) при скорости сдвига 95 сек^–1 при 20°C.

В одном из вариантов осуществления композиция в способе или применении по настоящему изобретению представляет собой фармацевтическую композицию и предпочтительно представляет собой фармацевтическую композицию, которая подходит для введения взрослым. Предпочтительно композицию применяют назально, предпочтительно композицию применяют назально у взрослого человека.

Так как действие протестированных Lactobacillus rhamsosus являлось меньшим, чему у неперевариваемых олигосахаридов, и комбинация Lactobacillus rhamnosus и неперевариваемых олигосахаридов не продемонстрировала улучшенного действия на ослабление воспалительного ответа в клетках назального эпителия, предпочтительно композиция не содержит Lactobacillus rhamnosus. Предпочтительно композиция не содержит Lactobacillus. Открытие по настоящему изобретению, что неперевариваемые олигосахариды отдельно являются такими же эффективными или даже более эффективными, чем пробиотики Lactobacillus rhamnosus также обладает дополнительными преимуществами: введение неперевариваемых олигосахаридов проще дозировать, чем введение Lactobacillus. Кроме того, такие композиции с неперевариваемыми олигосахаридами и без Lactobacillus rhamnosus являются более безопасными, требуют менее аккуратного обращения для сохранения активным активного ингредиента и обладают улучшенным сроком годности. В одном из вариантов осуществления композиция в способе или применении по настоящему изобретению не содержит HN001 Lactobacillus rhamsosus. В одном из вариантов осуществления композиция в способе или применении по настоящему изобретению не содержит Aspergillus, Bacillus, Bacteroides, Bifidobacterium, Lactobacillus, Leuconostoc, Pediococcus, Propionibacterium, Saccharomyces и Enterococcus. В одном из вариантов осуществления композиция в способе или применении по настоящему изобретению не содержит пробиотиков.

Применение

В рамках настоящего изобретения, "профилактика" заболевания или определенного нарушения также означает "снижение риска" заболевания или определенного нарушения, а также означает "лечение индивидуума с риском" указанного заболевания или указанного определенного нарушения.

Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что непосредственно применение неперевариваемых олигосахаридов к клеткам назального эпителия человека (HNEC) индивидуумов без аллергий ослабляет воспалительный ответ в большей степени, чем у индивидуумов без аллергий и в большей степени, чем у индивидуумов с аллергиями. Неперевариваемые олигосахариды также преимущественно улучшают барьерную функцию клеток назального эпителия, например, как определяют по увеличению или меньшему снижению трансэпителиального электрического сопротивления (TEER). Это открытие показано для лечения и/или профилактики неаллергического ринита, потому что, во–первых, можно ожидать, что косвенное действие неперевариваемых олигосахаридов посредством улучшения иммунной системы, включающей желудочно–кишечный тракт, например, посредством системного увеличения баланса Th1/Th2 ответа, не действует или действует в меньшей степени на неаллергический ринит, и, во–вторых, наблюдаемое действие намного более выражено для HNEC индивидуумов без аллергий.

Так как действие ринита также выше у грудных детей и детей младшего возраста, в частности, грудных детей при сравнении со взрослыми, настоящее изобретение предпочтительно преимущественно использовать для грудных детей и детей младшего возраста, более предпочтительно грудных детей. Грудные дети с заложенным носом пытаются дышать при кормлении молоком, а дети младшего возраста не могут правильно сморкаться для снижения дискомфорта. Кроме того, грудные дети не могут правильно дышать ртом и могут это делать только при плаче. Ринит у грудных детей и детей младшего возраста ассоциирован с проблемами со сном, ушными нарушениями и даже проблемами с обучением.

В одном из вариантов осуществления композицию по настоящему изобретению используют для профилактики и/или лечения неаллергического ринита у человека, более предпочтительно человек в возрасте от 0 до 36 месяцев, более предпочтительно от 0 до 18 месяцев, даже более предпочтительно грудных детей в возрасте 12 месяцев или менее, даже более предпочтительно грудных детей в возрасте от 0 до 6 месяцев. Предпочтительно композицию дополнительно используют для обеспечения питания указанного человека, более предпочтительно сбалансированного питания. В предпочтительном варианте осуществления способ или применение по настоящему изобретению предназначено для доношенных грудных детей, предпочтительно для здоровых доношенных грудных детей.

Предпочтительно неаллергический ринит представляет собой неинфекционный неаллергический ринит (NINAR). Предпочтительно неаллергический ринит представляет собой хронический неаллергический ринит, так как хронический ринит оказывает наибольшее влияние на здоровье. Предпочтительно лечение и/или профилактику неаллергического ринита проводят посредством прямого контакта неперевариваемых олигосахаридов с клетками назального эпителия. Это дает то преимущество, что лечение и/или профилактику проводят местно, только в пораженном участке. В одном из вариантов осуществления неаллергический ринит также можно обозначить как воспалительный неаллергический ринит или как воспаление назального эпителия.

В одном из вариантов осуществления неаллергический ринит лечат или предотвращают у человека, более предпочтительно ребенка или грудного ребенка, на которого воздействуют загрязнители воздуха окружающей среды. Такие люди особенно подвержены риску возникновения неаллергического ринита, в частности хронического неаллергического ринита и/или неинфекционного неаллергического ринита.

В настоящем документе и в его формуле изобретения, глагол "содержать" и его спряжение используют в его неограничивающем смысле для обозначения того, что включены элементы, следующие после этого слова, но конкретно не указанные элементы не исключены. Кроме того, указание элемента в единственном числе не исключает возможности присутствия более одного элемента, если по контексту явно не требуется наличия одного и только одного из этих элементов. Таким образом, формы единственного числа как правило, означают "по меньшей мере один".% масс. означает массовую долю.

Описание чертежей

Фигура 1: высвобождение CCL5 первичными клетками назального эпителия человека у индивидуумов без аллергий (A) или индивидуумов с аллергиями (B), простимулированное IFN–γ/TNF–α и scGOS/lcFOS, L. rhamnosus GG или их комбинацией или контролем. CCL5 нормализовали по IFN–γ/TNF–α.

Фигура 2: высвобождение IP–10 первичными клетками назального эпителия человека у индивидуумов без аллергий (A) или индивидуумов с аллергиями (B), простимулированное IFN–γ/TNF–α и scGOS/lcFOS, IMS1, L. rhamnosus или их комбинацией. IP–10 нормализовали по IFN–γ/TNF–α.

Примеры

Пример 1: Действие пребиотиков и пробиотиков на стимулированные IFN–γ/TNF–α клетки назального эпителия

В качестве подходящей модельной системы in vitro давно известно применение клеток назального эпителия человека, см. например, Schmidt et al., Advanced Drug Delivery Reviews, 1998, 29:51–79. Первичные клетки назального эпителия человека (HNEC) выделяли у индивидуумом без аллергий (NA), выращивали и замораживали в жидком азоте для дальнейшего применения. Для проведения экспериментов в монослое первичные эпителиальные клетки человека (HNEC) размораживали и высевали в среду для выращивания клеток эпителия дыхательных путей (AEGM) с добавками (PromoCell, C–21060) в 24–луночные планшеты. Клетки инкубировали при 37°C с 5% CO₂ в течение 5–6 суток до достижения 80% конфлуэнтности. Утром суток эксперимента получали свежую смесь короткоцепочечных галактоолигосахаридов/длинноцепочечных фруктоолигосахаридов (scGOS/lcFOS). Кроме того размораживали пробиотические бактерии, LW744 Lactobacillus rhamnosus и цитокины и разбавляли до рабочих концентраций. scGOS/lcFOS смешивали в соотношении 9/1 масс./масс. Источником scGOS был вивиналGOS (VivinalGOS), источником lcFOS был рафтилинHP (RaftilineHP). Рабочая концентрация scGOS/lcFOS составляла 0,5% масс./об., IFN–γ составляла 300 МЕ, TNF–α составляла 10 нг/мл, LW744 L.rhamnosus rhamnosus составляла 10⁴ КОЕ. Размораживали лиганд Toll–подобного рецептора 3 (TLR3) полиинозиновую–полицитидиловую кислоту (Поли I:C), стимулятор воспалительного ответа, и разбавляли до рабочей концентрации. Рабочая концентрация Поли I:C составляла 10 мкг/мл. Все стимуляторы и условия применяли одновременно и инкубировали с клетками в течение 24 часов при 37°C, 5% CO₂. HNEC индивидуумы NA инкубировали в AEGM (отрицательный контроль) или стимулировали IFN–γ и TNF–α (положительный контроль) с или без scGOS/lcFOS, L. rhamnosus LW744 и их комбинациями в различных концентрациях в течение 24 часов при 37°C, 5% CO₂. Через 24 часа отбирали супернатанты и замораживали при –80°C для дальнейшего применения. Затем супернатанты использовали для проведения ELISA CCL5, IP–10 и CCL20 в не содержащих клеток супернатантах. Результаты трех независимых экспериментов представлены в виде среднего нормализованных уровней ± SEM. Уровни пг/мл нормализовали по контролю IFN–γ/TNF–α. Значимое отличие между условиями со стимуляцией представлено *, p<0,05, односторонний ANOVA с поправкой Бонферрони на множественные сравнения.

Результаты:

Наиболее и значимое снижение стимулированного IFN–γ/TNF–α высвобождения CCL5 наблюдали со смесью неперевариваемых олигосахаридов scGOS/lcFOS (GF), добавляемых к клеткам HNEC индивидуумов без аллергий. См. фигуру 1A. Добавление Lactobacillus rhamnosus (L. rham) было менее эффективным и комбинация scGOS/lcFOS и Lactobacillus rhamnosus не действовала лучше, чем scGOS/lcFOS отдельно. В HNEC индивидуумов с аллергиями также наблюдали снижение при добавлении scGOS/lcFOS, но не до наивысшей степени, см. фигуру 1B.

CCL5 или RANTES представляет собой индуцирующий хемотаксис хемокин, играющий активную роль в привлечении циркулирующих лимфоцитов в участки воспаления. Таким образом, снижение индуцированного IFN–γ/TNF–α высвобождения CCL5 свидетельствует о сниженном назальном воспалительном ответе.

Подобным образом, у HNEC индивидуумов без аллергий наблюдали значимое снижение высвобождения IP–10, для Lactobacillus, а также scGOS/lcFOS, но наибольшее подавление наблюдали с scGOS/lcFOS, см. фигуру 2A. Комбинация scGOS/lcFOS и Lactobacillus rhamnosus не действовала лучше, чем scGOS/lcFOS отдельно. В HNEC индивидуумов с аллергиями наблюдали подавление scGOS/lcFOS индуцированного высвобождения IP–10, но в меньшей степени, см. фигуру 2B, чем при сравнении с HNEC индивидуумов без аллергий.

IP–10, также известному как CXCL10 или малый индуцируемый цитокин B10, в воспалительном ответе приписывают несколько ролей, таких как хемоатракция моноцитов/макрофагов, T–клеток, NK клеток и дендритных клеток, содействие адгезии T–клеток к эндотелиальным клеткам, противоопухолевая активность и ингибирование формирования колоний костного мозга и ангиогенез. Таким образом, снижение индуцированного IFN–γ/TNF–α высвобождения IP–10 свидетельствует о сниженном назальном воспалительном ответе.

Подобным образом при сравнении воспалительного ответа в HNEC индивидуумов без аллергий с HNEC индивидуумов с аллергиями снижение индуцированного Поли I:C высвобождения CCL20 наблюдали для scGOS/lcFOS, в HNEC, полученных у индивидуумов без аллергий, но не HNEC индивидуумов с аллергиями, данные не показаны. CCL20, также известный как LARC или MIP3A, представляет собой хемокин и хемотаксический фактор, который активно привлекает лимфоциты, дендритные клетки и слабо привлекает нейтрофилы в участки воспаления. Таким образом, снижение высвобождения CCL20 свидетельствует о сниженном назальном воспалительном ответе.

Эти результаты являются показателем ослабления воспалительного ответа в клетках назального эпителия, в частности у людей без аллергий, посредством неперевариваемых олигосахаридов, в частности, галакто– и/или фруктоолигосахаридов.

Настоящее изобретение относится к области медицины и предназначено для применения композиции, содержащей неперевариваемые олигосахариды, для лечения или профилактики неаллергического ринита у человека, где человек представляет собой ребенка и где неаллергический ринит представляет собой неинфекционный неаллергический ринит, и где неперевариваемые олигосахариды включают галактоолигосахариды со средней степенью полимеризации (DP) от 2 до 10 и фруктоолигосахариды со средней DP от 11 до 60, и где композиция содержит от 2,5 до 20% масс. общего неперевариваемого олигосахарида от общей сухой массы композиции или, если композиция находится в жидкой форме, композиция содержит от 0,35 до 2,5% масс. общего неперевариваемого олигосахарида на 100 мл композиции. Техническим результатом настоящего изобретения является подавление воспалительного ответа клеток назального эпителия человека у здоровых индивидуумов без аллергий, снижение секреции провоспалительных хемокинов, таких как IP–10, CCL5 и CCL20, в клетках эпителия, улучшение барьерной функции клеток назального эпителия, увеличение или уменьшение снижения трансэпителиального электрического сопротивления (TEER). 6 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 пр.

1. Применение композиции, содержащей неперевариваемые олигосахариды, для лечения или профилактики неаллергического ринита у человека, где человек представляет собой ребенка и где неаллергический ринит представляет собой неинфекционный неаллергический ринит, и где неперевариваемые олигосахариды включают галактоолигосахариды со средней степенью полимеризации (DP) от 2 до 10 и фруктоолигосахариды со средней DP от 11 до 60, и где композиция содержит от 2,5 до 20% масс. общего неперевариваемого олигосахарида от общей сухой массы композиции или, если композиция находится в жидкой форме, композиция содержит от 0,35 до 2,5% масс. общего неперевариваемого олигосахарида на 100 мл композиции.

2. Применение по п. 1, где возраст человека составляет от 0 до 36 месяцев.

3. Применение по любому из предыдущих пунктов, где композиция представляет собой пищевую композицию, предпочтительно детскую смесь или молочную смесь второго уровня.

4. Применение по любому из предыдущих пунктов, где неаллергический ринит представляет собой хронический неаллергический ринит.

5. Применение по любому из предыдущих пунктов, где лечение и/или профилактику неаллергического ринита проводят посредством прямого контакта неперевариваемых олигосахаридов с клетками назального эпителия.

6. Применение по любому из предыдущих пунктов, где ребенок подвержен действию загрязнителей воздуха окружающей среды.

7. Применение по любому из предыдущих пунктов, где композиция не содержит Lactobacillus rhamnosus.