СПОСОБ АКТИВАЦИИ ЦИСТ ARTEMIA SP. РАСТВОРОМ ЭПИБРАССИНОЛИДА Российский патент 2023 года по МПК A01K61/20 

Изобретение относится к области аквакультуры, а именно к увеличению количества науплиусов Artemia в процессе инкубации. Ювенильные стадии указанных ракообразных используются в качестве стартового корма для молоди подавляющего большинства объектов рыбоводства. Важнейшим показателем качества заготовленных цист является их способность продолжать развитие в соответствующих условиях, а также количество выклюнувшихся науплиусов, которое в процессе инкубации сильно колеблется. Увеличение процента выклева обеспечивается различными методами, наиболее распространенным из которых является использование активаторов, главным образом, перекиси водорода, способствующей выделению в водную среду кислорода.

Так известен способ получения науплиусов из цист ракообразных, согласно которому в инкубационный аппарат с 5%-ным раствором поваренной соли (хлористый натрий), помещают цисты артемии из расчета 10 г на 1 л солевого раствора и обеспечивают постоянную аэрацию. Инкубация сопровождается внесением 0,1-0,3 мл 33%-ного раствора перекиси водорода на 1 л солевого раствора и проходит при температуре 20°С в течение 48 ч. Причем, если перекись водорода используется в количестве меньшем 0,1 мл на 1 л раствора, то не происходит полной активации цист, а если в концентрации большей 0,3 мл, то науплиусы выклевываются, но погибают (авторское свидетельство СССР №935044, кл. А01К 61/00, 1980 г. ) /2/.

Также известен способ получения науплиусов при стандартном режиме инкубации (соленость от 30 до 35%, температура 25-30°С, постоянное барботирование) с активацией цист перекисью водорода в совокупности с 3,3',5,5'-тетраиодтиронином в общем количестве от 0,5 до 5,0 мкг на 1 л раствора (авторское свидетельство СССР №1472011 А, кл. МКИ А01К 61/00, опублик. БИ №14, 15.04.1989).

Однако, при указанных способах инкубации цист артемии могут образовываться перекисные соединения липидов, негативно влияющие как на гидробионтов-потребителей, так и на жизнеспособность самих науплиев.

Известен способ инкубации, согласно которому в раствор, содержащий 25-30 г соли на 1 л воды добавляют находящиеся в диапаузе цисты артемии в количестве не более 2,5 г на 1 л раствора и активатор, в качестве которого используется аскорбат или изоаскорбат натрия из расчета 0,4-0,9 г на 1 л (авторское свидетельство Российской Федерации №2352108, кл. А01К 61/00 (2006.01).

Также известен способ повышения интенсивности выклева науплиусов артемии, базирующийся на создания градиента рН между внутренней и внешней сторонами оболочки цисты, что достигается введением в цисты ионов Н⁺ и обогащением среды активации ионами OH^-. Поступление в цисты ионов Н⁺ обеспечивается выдерживанием в среде с Рн не выше 3-3,5, содержащей уксусную кислоту (в течение 2-10 мин) или масляную кислоту (в течение 2-5 мин) (авторское свидетельство РФ №2150196 С1, кл. МКП А01К 61/00, опублик. 23.04.1999).

Известно, что инкубация цист артемии, как правило, происходит в нейтральной или слабощелочной среде. В указанных выше способах цисты выдерживаются в кислой среде, способной оказать на них негативное воздействие. Кроме того, применение уксусной и масляной кислот, относящихся к 3 классу опасности (умерено опасные) сопряжено с определенными сложностями, в частности отсутствием специально подготовленного персонала в условиях рыбоводных хозяйств.

Известен способ получения науплиусов артемии, согласно которому инкубацию цист проводят в забуференном растворе хлорида натрия на дистиллированной воде при температуре 20-22°С в течение 24-48 ч. Концентрация цист к объему среды составляет 1 мг: 2 мл. Дополнительно в раствор вводят ферроцианид калия до концентрации 10^-4 М (авторское свидетельство СССР №1738186, кл. А01К 61/00, 1990 г.) /3/. Осуществление данного способа требует, помимо приобретения активатора, установку дополнительных дистилляторов, т.к. объемы инкубируемой артемии в условиях рыбоводных хозяйств довольно значительны.

Цель настоящего изобретения заключается в повышении эффективности выклева науплиусов артемии в процессе инкубации при использовании биостимулятора, в качестве которого применяется эпибрасинолид - фитогормон, являющийся стрессовым адаптогеном и активизирующий биохимические процессы в клетках.

Среди известных источников не выявлен наиболее близкий аналог-прототип. Для осуществления способа применяется известное оборудование, способ реализуется на основе традиционных методов, которыми владеют специалисты в области аквакультуры.

Получение науплий артемиии по предлагаемому способу производится следующим образом. При условии, что соотношение цист составит 2,5 г на 1 л инкубационного раствора, указанное количество цист предварительно помещается в 25 мл пресной воды, содержащей 0,006 мл фитогормона эпибрассинолида. Допускается разведение 0,1 мл эпибрассинолида в 400 мл воды с последующим использованием раствора для активации нескольких партий цист с соблюдением указанных выше пропорций. Выдерживание цист в активирующем растворе осуществляется в течение 30 мин, после чего цисты необходимо извлечь из активирующего раствора (в случае многократного его использования) путем процеживания их через газ-сито и поместить на инкубацию. Для достоверности полученных результатов одновременно проводится инкубация цист артемии, не обработанных раствором эпибрассинолида (контроль). Процесс инкубации осуществляется в течение 24-30 ч в 1 литре водного раствора, содержащем 30 г поваренной нейодированной соли, при температуре 27-30°С и постоянной аэрации. Все параметры осуществления способа, не указанные выше, являются известными для специалистов отрасли. Реализация данного способа позволяет увеличить выклев науплиусов на 20% по сравнению с контрольными показателями.

Зависимости процента выклева науплиусов артемии от концентрации фитогормона эпибрассинолида

Изобретение относится к области аквакультуры и может быть использовано для получения стартового корма для молоди объектов рыбоводства. Способ включает помещение 2,5 г цист артемии на 30 минут в 25 мл пресной воды, включающей 0,006 мл эпибрассинолида. Затем цисты инкубируют в течение 24-30 ч в 1 литре водного раствора, содержащего 30 г поваренной нейодированной соли, при температуре 27-30°С и постоянной аэрации. Изобретение обеспечивает увеличение выхода науплиусов артемии. 1 табл.

Способ получения науплий артемиии, характеризующийся тем, что 2,5 г цист артемии помещают на 30 минут в 25 мл пресной воды, включающей 0,006 мл эпибрассинолида, с последующей инкубацией цист в течение 24-30 ч в 1 литре водного раствора, содержащего 30 г поваренной нейодированной соли, при температуре 27-30°С и постоянной аэрации.