ПРИМЕНЕНИЕ ПРОИЗВОДНОГО ЦИННАМИЛТИО-1,2,4-ТРИАЗОЛА В КАЧЕСТВЕ АНТИГЕЛЬМИНТНОГО И ЛАРВИЦИДНОГО СРЕДСТВ Российский патент 2023 года по МПК A61K31/4196 C07D403/06 A61P33/00 A61P33/10 

Описание патента на изобретение RU2793284C1

Изобретение относится к области органической химии, применительно к биологически активному производному циннамилтио-1,2,4-триазолу, и может найти применение в качестве антигельминтного и ларвицидного средств в медицине.

Известно близкое по строению и биологической активности к предлагаемому соединению, ряд соединений общей формулы IV:

где R1, R2 и R4 независимо выбираемы из группы H, алкил, арил, арилалкил, гетероарил, замещенные гетероарилметил, а R3 - H, алкил, гетероалкил, циклоалкил, арил и гетероарил, которые предлагается применять в качестве инсектицидов или антигельминтных препаратов [3].

Наиболее близким техническим решением к предлагаемому является применение - препарата пирантел, а при исследовании на инвазированных животных аналогом антигельминтных средств выступает альбендазол [4], прототипом ларвицидной активности является имидаклоприд [5]. Недостатком прототипа является недостаточная эффективность применения на моделях антигельминтной и ларвицидной активности, а также более высокая токсичность.

Острая токсичность пирантела составляет при введении per os 620 мг/кг [4]. Имидаклоприд является инсектицидом и относится к 3 классу умеренно опасных веществ при пероральном применении LD50 - 450 мг/кг. Значительной опасностью применение большинства неоникотиноидов, в том числе - имидаклоприда, все виды наружного применения клотианидина из-за опасности для пчел и других опылителей [5].

Технической задачей предлагаемого решения является расширение спектра антигельминтных средств, повышение эффективности применения с целью профилактики инвазионных заболеваний, вызываемых гельминтами, расширение функциональных возможностей антигельминтных средств.

Для решения поставленной задачи предлагается соединение

N4-бензил-3-циннамилтио-5-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазола формулы I:

использовать в качестве антигельминтного и ларвицидного средства.

Соединение I было получено по описанной в литературе методике [1]: к раствору 10,88 г (0,04 ммоль) N4-бензил-5-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазол-3-тиона в 100 мл абс. ТГФ добавляют 4,74 г (0,042 моль) трет-бутилата калия, кипятят в течение 1 ч, добавляют раствор 6,1 г (0,04 моль) циннамилхлорида в 30 мл абс. ТГФ, кипятят в течение 72 ч, растворитель отгоняют на РПИ в вакууме водоструйного насоса. Остаток промывают серным эфиром (2×10 мл), получают 13,99 г (90%) N4-бензил-3-циннамилтио-5-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазола, с т.пл.98-100°С.

Таким образом, соединение I получено взаимодействием 4-бензил-5-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазол-3-тиона II с циннамилбромидом в тетрагидрофуране, в присутствии трет-бутилата калия при кипячении в течение 7 ч.

Cпектральные характеристики соединения I:

1 H ЯMР-Спектр (δ,м.д., 3J, Гц): 3.93 д (2H, CH2CH=CH, 3J=6.6), 5.68 c (2H, CH2N), 5.85 c (2H, CH2C6H5), 6.2 дт (1H, CH2CH=CH, 3J=6.6), 6.47 д (1Н, CH2CH=CH, 3J=16.1), 6.97 м (2Н, СНAr), 7.22-7.42 м (8Н, СНAr) 7.91 с (1Н, С3НTrz), 8.58 с (1Н, С5НTrz).

Степень чистоты соединения I установлена c помощью 1H ЯМР спектроскопии и составляет более 95%.

Соединение II, было получены ацилированием (1,2,4-триазол-1-ил)ацетгидразида бензилтиоизоцианатом в абс. этаноле с получением N4-бензил-N1-(1,2,4-триазол-1-илацетил)-тиосемикарбазида III, который затем циклоконденсируют в ключевой N4-бензил-5-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазол-3-тион II, под действием водного раствора гидроксида натрия, с последующим подкислением водным раствором соляной кислотой, по описанной в литературе методике [2].

Острая токсичность синтезированного соединения I cоставляет 1170-1530 мг/кг при пероральном введении у лабораторных животных, что соответствует 4 классу токсичности [6].

Определение ларвицидной активности проводили на личинках хиромонид (Diptera, Chiromonidae) [7], а также дождевых червей - европейский ночной выползок - Dandrobaena veneta (семейство Lumbricidae) [8].

Оценка ларвицидного действия соединения I проводили по следующей методике, изложенной в МУ 3.5.2.1759-03 [9]. Объектом были выбраны личинки хиромонид (Diptera, Chiromonidae) размерами 5±1 см. Одновременно испытывали несколько концентраций, каждая в 3 повторностях. Контролем служили личинки хиромонид, находившиеся в воде без добавления инсектицида. Параллельно ставят контроль с эталонным препаратом - имидаклопридом. В период эксперимента температура воды находилась в пределах 21 - 23°С. Подсчет погибших личинок проводили через 1 час, 2 часа, 3 часа 20 минут (200 минут) и 24 ч. Фиксировали время наступления смерти личинок. Результаты ларвицидного действия оценивали по значению так называемой ларвицидной концентрации ЛК50. Каждый опыт проводился в 3 повторностях. Контролем являлись личинки, находившиеся в 50 мл воды очищенной без добавления соединения. Прототипом и эталоном сравнения использовали раствор имидаклоприда («Щелково Агрохим», Россия) [9].

ЛК50 соединения I для личинок (Diptera, Chiromonidae) возраста (L4) составляет 0,10 мг/мл. Для прототипа ларвицидная концентрация составляет 0,5 мг/мл, что в 5 раз более больше и в течение 24 ч при действии имидаклоприда наблюдалось эффективность 75%, в то время как у соединения I эффективность составила 100%.

Таблица 1
Результаты ларвицидной активности соединения I и прототипа
Соединения Кол. особей Вид особей Кол. неподвижных, % ЛК50,
мг/мл
1 ч 2 ч 3 ч 20 мин 24 ч Имидаклоприд 20 Chironomidae 5 15 20 75 0,5 I 20 Chironomidae 0 24 40 100 0,1 Контроль 20 Chironomidae 0 0 2 5 0

Антигельминтную активность (АГА) синтезированных соединений определяли на дождевых червях Dandrobaena veneta [9]. В чашку Петри с диаметром 80-100 мм наливали 10 мл водного раствора исследуемого соединения в различной концентрации 0,1, 0,3 и 0,5 мг/мл, помещали в него 6 особей длиной 7±1 см и оставляли под наблюдением при температуре
21-23°С. Фиксировали время наступления смерти червей по отсутствию двигательной активности и реакции на внешнее механическое воздействие. Каждый опыт проводился в 3 повторностях. В качестве контроля использовали червей, находившихся в 10 мл воды очищенной без добавления соединений. Препаратами сравнения являлись измельченные таблетки пирантела 250 мг («Озон», Россия) и измельченные таблетки левамизола 150 мг («Гедеон Рихтер», Венгрия). Каждый из прототипов брали в концентрации 0,1, 0,3 и 0,5 мг/мл. Результаты исследования антигельминтной активности приведены в таблице 2.

Таблица 2
Результаты исследования антигельминтной активности соединения I
и прототипа пирантела
Соединения Кол. особей Вид особей Кол. неподвижных, % IC50 1 ч 2 ч 3 ч 20 мин 24 ч Левамизол 20 Dandrobaena veneta 5 15 20 75 0,5 Пирантел 20 Dandrobaena veneta 5 15 30 75 0,3 I 20 Dandrobaena veneta 0 24 40 100 0,1 Контроль 20 Dandrobaena veneta e 0 0 2 5 0

В соответствии с методическими рекомендациями для определения антигельминтной активности соединения I проводилось изучение in vivo на спонтанно инвазированных животных [10]. Значительная распространенность среди кишечных гельминтозов наблюдается у токсокароза [11]. Аналогом антигельминтного средства для лечения токсокароза является альбендазол [12]. С целью подтверждения антигельминтного действия соединения I были проведены исследования в примере 1.

Пример 1. С целью обнаружения токсокароза проведены скрининговые тесты иммуно-ферментного анализа. Была сформирована группа собак из 30 собак пород немецкая овчарка (21 собака) и бельгийская овчарка (9 собак) в возрасте от 4 до 6 месяцев, у которых был обнаружен положительный тест. Далее собаки были разделены по группам по методу пар-аналогов: 1 группа - опыт (соединение I), 2 группа - эталон сравнения, аналог (альбендазол), 3 группа - контроль по 10 голов обоих полов в каждой группе. В качестве эталона сравнения применяли аналог антигельминтиков альбендазол в дозе 50 мг/кг, соединение I давали в дозе 10 мг/кг. В течение 5 дней препараты были даны в день 1 (1 прием), 2 день (2 прием), 3 день (3 прием) и 4 день (4 прием) собакам, у которых были установлены разная степень инвазированности Toxocara canis. Результаты антигельминтной активности приведены в таблице 3.

Таблица 3
Результаты антигельминтной активности в отношении T.canis
Соединения Кол. собак Интенсивность инвазии - количество яиц гельминтов в 1 г фекалий до после 1
приема
после 2 приема после 3
приема
после 4 приема
Альбендазол 10 3140 1040 360 0 0 I 10 3380 820 240 0 0 Контроль 10 3200 3160 3340 3380 3400

Определение степени инвазии Т.canis определяли методом Фюллеборна с последующей копроовоскопией фекальных масс [13]. Общую антигельминтную активность рассчитывали исходя из числа яиц, обнаруженных при копрологическом анализе, проведенном после применения препарата на 2-е сутки после приема, на 3 сутки, на 4 сутки, на 5 сутки. Таким образом, в сравнении с прототипом альбендазолом, соединение I показало снижение степени инвазии после 1 приема на 75,74% (у прототипа - на 66,88%), после 2 приема - уменьшение степень инвазии составило 92,89% (у прототипа - 88,54%). На 4 и 5 день яиц токсокар при копроовоскопическом анализе обнаружено не было.

Исследования показали, что представленное соединение I расширяет арсенал и спектр антигельминтных средств, повышает эффективность применения с целью профилактики инвазионных заболеваний, вызываемых гельминтами, расширяет функциональные возможности антигельминтных средств и является более безопасным и менее токсичным в качестве антигельминтных и ларвицидных средств.

Литература

1. Патент РФ 2568212 (Российская Федерация), МПК C07D 403/06, C07D 405/14, A01N 43/653, A01P 3/00, A01P 21/00. N4-Замещенные 3-алкилсульфанил-5-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазолы, способ их получения, фунгицидные и рострегуляторные композиции на их основе / Цаплин Г.В., Попков С.В., Алексеенко А.Л., Никишин Г.И., Терентьев А.О., Кузнецова М.А., Рогожин А.Н., Сметанина Т.И. Заявл. 14.11.2017.

2. Цаплин Г.В.; Попков С.В. Синтез N4-(бензил)- и N4-(циклогексил)-N1-(1,2,4-триазол-1-илацетил)тиосемикарбазидов и продуктов их циклоконденсации в кислой и основной среде.// Успехи в химии и хим. технологии: сб. науч. тр. Том XXX, №11, М: РХТУ им. Д. И. Менделеева . - 2016. - С. 91-93.3.

3. Патент US 0171650 (CША), МПК A61K 31/4439. Novel anthelmintic and insecticidal compositions/ Byung Hyun Lee, Martha Jane Larsen, Teresa Maria Publication Classification Kubiak. Заявл. 11.02.2004.

4. Дэвис А. Лекарственная терапия кишечных гельминтозов. М.: Медицина, 1975, 144 с.

5. Электронный ресурс: https://dezresursy.ru/neonikotinoidy (дата обращения 21.02.2022).

6. ГОСТ Р 12.1.007-76. Межгосударственный стандарт. Вредные вещества.

7. Зинченко Т.Д. Эколого-фаунистическая характеристика хирономид (Diptera, Chironomidae) малых рек бассейна Средней и Нижней Волги: атлас / Т.Д. Зинченко - Тольятти: Кассандра, 2011. - 258 с.

8. Симонов А.П. Методика испытания и отбора овоцидных химических соединений для обеззараживания почвы. - Бюллетень Всесоюзного ордена Трудового Красного Знамени ин-та гельминтологии им. К.И. Скрябина, 1977, вып. 19. - С. 60-66.

9. МУ 3.5.2.1759-03 Методы определения эффективности инсектицидов, акарицидов, регуляторов развития и репеллентов, используемых в медицинской дезинсекции. - Москва: Ин-т мед. паразитологии и троп. мед. им. Е.И. Марциновского, 2003. - 55 с.

10. Миронов А.Н., Бунатян Н.Д. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. М.: Гриф и К. 2012. - 944с.

11. Сивкова Т.Н., Хазова М.В. Зараженность почвы кинологических центров МВД России по Пермскому краю яйцами гельминтов и способ ее дезинвазии // Российский паразитологический журнал. 2017. №2 (40). URL: https://cyberleninka.ru/article/n/zarazhennost-pochvy-kinologicheskih-tsentrov-mvd-rossii-po-permskomu-krayu-yaytsami-gelmintov-i-sposob-ee-dezinvazii (дата обращения: 03.05.2022).

12. Sawant, R. Synthesis and biological evaluation of some novel 2-phenyl benzimidazole-1-acetamide derivatives as potential anthelmintic agents // R. Sawant, D. Kawade // Acta Pharm. - 2011. - Vol. 61, № 3. - P. 353-361.

13. Новикова Т. В., Гламаздин И. Г., Брагина М. А. Диагностика токсокароза собак: сравнительная характеристика эффективности методов //Молочнохозяйственный вестник. - 2016. - №. 2 (22). - С. 45-51.

Похожие патенты RU2793284C1

название год авторы номер документа
ПРИМЕНЕНИЕ ПРОИЗВОДНОГО 5-(4-МЕТИЛФЕНИЛ)-1Н-ПИРАЗОЛ-3-АМИНА В КАЧЕСТВЕ АНТИГЕЛЬМИНТНОГО И ЛАРВИЦИДНОГО СРЕДСТВА 2023
  • Зыкова Светлана Сергеевна
  • Суханов Олег Борисович
  • Слободяник Роман Викторович
  • Попков Сергей Владимирович
  • Талисманов Владимир Сергеевич
  • Шустов Максим Вадимович
  • Эюбова Анна Викторовна
RU2811244C1
2-Гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеноат 2-[(6-этокси)бензо[d]-тиазолил]аммония, обладающий антигельминтным и инсектицидным действием 2016
  • Пулина Наталья Алексеевна
  • Липатников Константин Викторович
  • Собин Фёдор Владимирович
  • Сыропятов Борис Яковлевич
  • Рудакова Ирина Павловна
RU2657246C2
Композиция на основе R(-)-празиквантела для лечения и профилактики гельминтозов у теплокровных 2015
  • Золотарева Вера Анатольевна
RU2613490C2
N-Замещенные 3-алкилсульфанил-5-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазолы, способ их получения, фунгицидные и рострегуляторные композиции на их основе 2017
  • Цаплин Григорий Валерьевич
  • Попков Сергей Владимирович
  • Алексеенко Анна Леонидовна
  • Никишин Геннадий Иванович
  • Терентьев Александр Олегович
  • Кузнецова Мария Алексеевна
  • Рогожин Александр Николаевич
  • Сметанина Татьяна Ивановна
RU2668212C1
ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЕЛЬМИНТОЗОВ ЖИВОТНЫХ 2014
  • Оробец Владимир Александрович
  • Деркачев Дмитрий Юрьевич
  • Заиченко Игорь Владимирович
  • Горчаков Эдуард Владимирович
RU2571543C1
ПАРАЗИТИЦИДНЫЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ НЕСКОЛЬКО АКТИВНЫХ АГЕНТОВ, СПОСОБЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ 2011
  • Розентель Мл. Джозеф К.
  • Теджвани Моника
  • Дас-Нанди Арима
RU2574887C2
Средство для лечения и профилактики нематодозов и цестодозов у мелких домашних животных 2019
  • Кокорина Любовь Михайловна
  • Зейналов Орхан Ахмед Оглы
RU2722272C1
ПАРАЗИТИЦИДНЫЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ НЕСКОЛЬКО АКТИВНЫХ АГЕНТОВ, СПОСОБЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ 2011
  • Розентель Мл. Джозеф К.
  • Теджвани Моника
  • Дас-Нанди Арима
RU2633751C1
КОМПЛЕКСНОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ДОМАШНИХ ПЛОТОЯДНЫХ ЖИВОТНЫХ ОТ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ ГЕЛЬМИНТОЗОВ 2008
  • Сапунов Анатолий Яковлевич
  • Антипов Валерий Александрович
  • Дубровин Иван Игоревич
  • Сапунова Надежда Николаевна
RU2367441C1
5-Алкилтио-4-арилиденамино-3-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазолы, способ их получения и фунгицидные композиции на их основе 2023
  • Цаплин Григорий Валерьевич
  • Попков Сергей Владимирович
  • Шуракова Анастасия Олеговна
  • Иванова Екатерина Владиславовна
  • Семчукова Марина Игоревна
  • Алексеенко Анна Леонидовна
RU2810785C1

Реферат патента 2023 года ПРИМЕНЕНИЕ ПРОИЗВОДНОГО ЦИННАМИЛТИО-1,2,4-ТРИАЗОЛА В КАЧЕСТВЕ АНТИГЕЛЬМИНТНОГО И ЛАРВИЦИДНОГО СРЕДСТВ

Изобретение относится к применению производного циннамилтио-1,2,4-триазола в виде N4-бензил-3-циннамилтио-5-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазола формулы I в качестве антигельминтного и ларвицидного средства. Технический результат антигельминтное и ларвицидное действие, обеспеченное применением соединением формулы I. 3 табл., 1 пр.

Формула изобретения RU 2 793 284 C1

Применение производного циннамилтио-1,2,4-триазола в виде N4-бензил-3-циннамилтио-5-(1,2,4-триазол-1-илметил)-1,2,4-триазола формулы I:

в качестве антигельминтного и ларвицидного средства.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2023 года RU2793284C1

US 20040171650 A1, 02.09.2004
RU 2016146967 A1, 29.05.2018
Цаплин Г.В.; Попков С.В
Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды 1921
  • Богач Б.И.
SU4A1
технологии: сб
науч
тр
Том XXX, N 11, М: РХТУ им
Д
И
Менделеева
Токарный резец 1924
  • Г. Клопшток
SU2016A1
- С
Огнетушитель 0
  • Александров И.Я.
SU91A1
RU

RU 2 793 284 C1

Авторы

Зыкова Светлана Сергеевна

Суханов Олег Борисович

Слободяник Роман Викторович

Цаплин Григорий Валерьевич

Попков Сергей Владимирович

Талисманов Владимир Сергеевич

Кулбусинова Акжан Салиховна

Салиева Виолетта Эриковна

Шустов Максим Вадимович

Ганькова Ксения Леонидовна

Даты

2023-03-30Публикация

2022-07-04Подача