Набор лекарственных препаратов для проведения курсовой третичной профилактики онкологических заболеваний для иммуномодулирующего воздействия при комбинированной терапии и способ третичной профилактики онкологических заболеваний с использованием комбинированной терапии с помощью набора лекарственных препаратов для иммуномодулирующего воздействия Российский патент 2023 года по МПК A61N5/10 A61K38/19 A61K38/14 A61K38/21 A61P35/00 

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и предназначено для третичной профилактики онкологических заболеваний и конкретно касается способа подбора поддерживающей иммунотерапии после окончания первичного комплексного лечения злокачественного новообразования.

На сегодняшний день в клинической практике существует большое количество противоопухолевых препаратов, но эффективность большинства из них недостаточна и поэтому остается актуальным вопрос о разработке новых более активных препаратов, а также поиск веществ, эффективных при опухолях с первичной и приобретенной резистентностью к лекарственной терапии.

В связи с этим решение о продвижении нового вещества с противоопухолевой активностью принимается на основании следующих критериев: новый механизм действия, высокая противоопухолевая активность, избирательная цитотоксичность в отношении определенных культур опухолевых клеток in vitro и ксенографтов опухолей человека, отсутствие перекрестной устойчивости с известными веществами.

Постоянно ведется поиск новых препаратов, которые могли бы повысить качество лечения пациентов с онкологической патологией.

Всем хорошо известно, что онкологические заболевания лечатся химиотерапевтическими средствами, направленными на подавление роста опухоли и метастазных образований. Кроме того, сами химиотерапевтические средства обладают выраженными негативными свойствами в отношении здоровых клеток тканей организма человека. В частности, нарушается генетическая целостность хромосом, что выражается в резком увеличении регистрируемых хромосомных аберраций при применении химиотерапевтических средств.

Другим негативным побочным эффектом является нарушение метаболизма полисахаридов и липидов, в результате которого как в клетке, так и в цитоплазматической жидкости накапливаются токсические продукты метаболизма.

Таким образом, для снижения негативных последствий противоопухолевой терапии требуется дополнительное комплексное оздоравливающее воздействие на организм человека. В настоящее время значительное внимание для профилактики заболеваний и терапевтического применения уделяется цитокинам - биологически активным факторам пептидной природы, которые вырабатываются клетками иммунной системы и являются ее основными регуляторами.

Иммунотерапия (также известная как биологическая терапия, биотерапия или терапия, модифицирующая биологический ответ) может улучшить функционирование иммунной системы так, что она более эффективно уничтожает раковые клетки. Системная иммунотерапия направлена на весь организм, и может быть полезна для остановки прогрессирования рака или рецидива первичных опухолей на более поздних стадиях рака [1].

Так же известен препарат, который выпускается под торговым наименованием РЕФНОТ ("Рекомбинантная плазмидная ДНК, кодирующая синтез; способ получения и препарат рекомбинантного гибридного белка α-фактор некроза опухолей-тимозинальфа1", RU,2225443, 25.07.2002).

Технология получения субстанции рекомбинантного гибридного белка α-фактор некроза опухолей - тимозин альфа 1 (далее - ФНО-Т) основана на его микробиологическом синтезе рекомбинантным штаммом Escherichia coli SG 200-50, трансформированным плазмидой pThy. Белок выделяют и очищают колоночной хроматографией. Препарат обладает прямым противоопухолевым действием in vivo и in vitro на различных линиях опухолевых клеток. По спектру цитотоксического и цитостатического действия на опухолевые клетки препарат соответствует фактору некроза опухолей альфа (ФНО) человека, однако, имеет в 100 раз меньшую общую токсичность, чем ФНО. Сконструированный слитый белок - фактор некроза опухолей - тимозин альфа 1 (ФНО-Т) имеет удельную цитотоксичность на клетках фибросаркомы L-929 2000000 ЕД на мг белка и проявляет большое иммуностимулирующее действие. По спектру и активности цитотоксического и цитостатического действия на опухолевые клетки препарат ФНО-Т не уступает, а на некоторых опухолях превосходит ФНО человека. При этом ФНО-Т имеет в 100 раз меньшую общую токсичность, чем ФНО, что подтверждено клиническими испытаниями.

Клинические исследования I фазы, проведенные в Российском онкологическом научном центре им. Н.Н. Блохина РАМН, г. Москва, «Изучение безопасности, переносимости и эффективности препарата РЕФНОТ у пациентов с плоскоклеточным раком головы и шеи» в отделении «Опухолей головы и шеи» (зав. отделением: д.м.н., проф. Любаев В.Л.), показали низкую токсичность Рефнота при интратуморальном введении в дозах до 800000 ЕД (400 мкг) на одну инъекцию онкологическим пациентам с опухолями головы.

Лекарственный препарат фактора некроза опухолей - тимозин альфа 1 рекомбинантный (Рефнот) зарегистрирован и предназначен для лечения онкологических больных. Рефнот был синтезирован генно-инженерными методами на основе не синтетических химиопрепаратов, а эндогенных биологически активных веществ клеток иммунной системы. В составе гибридной молекулы Рефнота соединены два вещества: человеческий фактор некроза опухолей альфа и тимозин-альфа 1 - ацетилированный полипептид, состоящий из 28 аминокислот. Каждое из двух соединений, предшественников Рефнота, обладает рядом противоопухолевых эффектов, в основе которых лежат различные молекулярно-клеточные механизмы.

Например, ФНО-альфа ускоряет дифференцировку Т-лимфоцитов в клетки-киллеры и повышает активность последних в борьбе с раковыми клетками. Тимозин-альфа 1 усиливает противоопухолевые эффекты клеток иммунной системы, влияя на другие субпопуляции Т-клеток. В гибридной молекуле Рефнота соединились наиболее полезные в плане подавления опухоли свойства ФНО-альфа и тимозина-альфа 1.

Согласно доклиническим исследованиям фармакологических свойств, фактор некроза опухолей - тимозин альфа 1 обладает десятикратной активностью в сравнении с фактором некроза опухолей альфа. Зато потенциально негативные качества, в частности, способность нативного ФНО вызывать различные побочные эффекты, были в значительной степени устранены [2].

Этим и объясняется высокая безопасность Рефнота. Препарат широко применяется при лечении таких опухолей, как рак молочной железы и меланома [1,5]. В клинических исследованиях, проведенных ранее для оценки эффективности и безопасности Рефнота в лечении рака молочной железы, Рефнот продемонстрировал высокую эффективность и безопасность [3-7].

Ингарон - рекомбинантный интерферон гамма человека,  состоит из 144 аминокислотных остатков (а. о.), лишен первых трех а. о. Cys-Tyr-Cys, замененных на Met. Молекулярная масса 16,9 кДа. Получен микробиологическим синтезом в рекомбинантном штамме Escherichia coli и очищен колоночной хроматографией. Удельная противовирусная активность на клетках (фибробласты человека), инфицированных вирусом везикулярного стоматита, составляет 2·107 ЕД на мг белка. Интерферон гамма (иммунный интерферон) является важнейшим провоспалительным цитокином, продуцентами которого в организме человека являются естественные киллерные клетки, CD4 Th1 клетки и  CD8 цитотоксические супрессорные клетки.

Рецепторы к интерферону гамма имеют макрофаги, нейтрофилы, естественные киллерные клетки, цитотоксические Т-лимфоциты. Интерферон гамма активирует эффекторные функции этих клеток, в частности их микробоцидность, цитотоксичность, продукцию цитокинов, супероксидных и нитрооксидных радикалов, тем самым вызывая гибель внутриклеточных паразитов. Интерферон гамма ингибирует В-клеточный ответ, интерлейкин-4, подавляет продукцию IgE и экспрессию СD23-антигена. Является индуктором апоптоза дифференцированных В-клеток, дающих начало аутореактивным клонам. Отменяет супрессивный эффект интерлейкина-4 на интерлейкин-2-зависимую пролиферацию и генерацию лимфокин активированных киллеров. Активирует продукцию белков острой фазы воспаления, усиливает экспрессию генов C2 и C4 компонентов  системы комплемента.

В отличие от других интерферонов повышает экспрессию антигенов ГКГС как I-го так и II-го классов на разных клетках, причем индуцирует экспрессию этих молекул даже на тех клетках, которые не экспрессируют их конститутивно. Тем самым повышается эффективность презентации антигенов и способность их распознавания Т-лимфоцитами, что обуславливает его иммуномодулирующее действие, в том числе при реализации процессов иммунной противоопухолевой защиты организма [8].

Известно лечение иммунорезистентной болезни низкой дозой интерферона, когда опухолевые заболевания, гипераллергенность, аутоиммунные расстройства, вирусные инфекции лечат путем введения интерферона в дозе приблизительно от 0,1 до 5 ME/ фунт в день путем контактирования интерферона со слизистой оболочкой глотки.

Интерферон вводят в растворе или в новой твердой лекарственной форме, адаптированной для растворения в слюне при его попадании в рот(WO 1988/003411, 19.05,1988; RU 2277932, С2, 24.09.2004; RU, 2191594 С1, 03.04.2001).

Использование низких доз интерферона известно при лечении опухолевых заболеваний (US 5019382, А, 06.11. 1986). Опухолевые заболевания, аутоиммунные расстройства, вирусные инфекции лечат путем введения интерферона в дозе от т 0,2 до 12 МЕ/кг в день. Интерферон вводят в растворе или твердой лекарственной форме, адаптированной для растворения в слюне при его попадании в рот.

Известна таблетка для рассасывания, обладающая противовирусным действием содержащая ИФН в количестве 1/5-1/20 его разовой терапевтической дозы и один из рекомбинантных человеческих генно-инженерных интерферонов в количестве 500-1000 ME в соотношении 2:1-3:1 и вспомогательные вещества, при этом таблетка имеет массу 0,6-0,7 г, диаметр не менее 12 мм, высоту 2-3 мм (RU2277932, С2, 2004,А61К 38/21). Из патента US 4650674 17.03.1987 известны композиции, содержащие фактор некроза опухоли. Фактор некроза опухоли необязательно комбинируют с другими противоопухолевыми агентами, такими как химиотерапевтические антибиотики (актиномицин-D, адриамицин, аклациномицин А), или с агентами для усиления или стимуляции иммунного ответа, например, иммуноглобулинами, такими как гамма-глобулин, включая иммуноглобулины, обладающие сродством к антигены клеточной поверхности новообразований. Кроме того, поскольку интерфероны действуют синергически с фактором некроза опухоли в анализах лизиса клеток, альфа-, бета- или гамма-интерферон желательно комбинировать с композициями фактора некроза опухоли или композициями, содержащими фактор некроза опухоли и лимфотоксин.

Типичный состав содержит фактор некроза опухоли и гамма-интерферон, и было обнаружено, что они проявляют синергетическую цитотоксическую активность.

Типичный состав содержит фактор некроза опухоли и гамма-интерферон в соотношении единиц активности приблизительно от 0,1:1 до 200:1, обычно 10:1, и может содержать лимфотоксин вместо доли фактора некроза опухоли. Эти пропорции, конечно, могут быть изменены в зависимости от терапевтического опыта.

Композиции фактора некроза опухоли вводят животным, особенно пациентам со злокачественными опухолями, в терапевтически эффективных дозах.

В патенте RU2690677, 05.06.2019, описана стабилизированная композиция, содержащая комбинацию интерферона гамма и ФНО-Т, которые вводятся одновременно. Композиция обладает противовирусной, противоопухолевой, иммуномодулирующей,актопротекторной, антимутагенной и антиоксидантной активностью, Композиция представляет собой кислотоустойчивую капсулу, содержащую стеарат кальция, аэросил, микрокристаллическую карбоксиметилцеллюлозу, крахмал, лактозу, порошок виноградных косточек, маннит и  в низких дозахлиофилизатычеловеческого рекомбинантного интерферона гамма ифакторанекрозаопухоли-тимозина альфа 1,приследующих соотношениях компонентов, мас.%:

- лиофилизат человеческого рекомбинантного интерферона гамма с активностью 0,5-2,5,

- лиофилизат рекомбинантного фактора некроза опухоли - тимозина альфа 1 с активностью 10×106 ЕД/г 0,2- 1 ,0,

- порошок виноградных косточек 20-30, стеарат кальция 1 ,23-3,7, аэросил 0,6- 1 ,8, микрокристаллическая карбоксиметилцеллюлоза 6-14, 1 , крахмал 14,5-29,5, лактоза 6-14, манит - остальное. Использование этой композиции обеспечивает достижение стабилизирующего эффекта цитокинов за счет оптимально подобранного состава компонентов и их количества, получение на основе человеческого рекомбинантного интерферона гамма и ФНО-Т стабилизированной композиции, обладающей высокой противоопухолевой, противовирусной, антиоксидантной, иммуномодулирующей, актопротективной, антимутагенной активностью, расширение диапазона температуры хранения интерферона гамма и ФНО-Т без потери активности, минимальный побочный эффект.

Для получения этого препарата использовали интерферон гамма «Ингарон» фирмы ООО «НПП «Фармаклон» и Sigma, и рекомбинантный фактор некроза опухолей «РЕФНОТ» фирмы ООО «Рефнот-Фарм».

Лекарственные формы, объединяющие в своем составе ФНО-Т и интерферон гамма, которые могут применяться при лечении заболеваний, в том числе в онкологии, обладают минимальным побочным действием.

В известной используют низкие дозы ФНО-Т (от 4000 до 20000 ЕД на капсулу) и интерферона гамма (от 10000 до 50000МЕ на капсулу).

В известных клинических схемах лечения используется раздельное инъекционное введение препаратов ФНО-Т и гамма-интерферона. При этом препараты используются последовательно, и их прием разнесен во времени.

В указанном выше известном изобретении в лекарственной форме оба биологически активных соединения поступают в организм одновременно, что усиливает синергизм их действия.

Известная стабилизированная композиция может использоваться в качестве профилактического средства, т.к. обладает антимутагенной и антиоксидантной активностью.

В описании этого изобретения описан следующий режим лечения: в группе 1 пациенты применяли стабилизированную композицию перорально по 2 капсулы 2 раза в день без перерывов; в группе 2 пациенты применяли препарат Рефнот по 200000 ME подкожно 1 раз в день через день и Ингарон по 500000 ME подкожно 1 раз в день через день поочередно в течение 10 дней (по 5 инъекций каждого препарата) перед и в перерывах между циклами химиотерапии.

Технической задачей заявленного изобретения является разработка метода создания поддерживающей иммунотерапии после окончания первичного комплексного лечения злокачественного новообразования, который позволяет остановить прогрессирование и улучшить показатели безрецидивной выживаемости больных со злокачественными заболеваниями и расширение арсенала средств для лечения онкологических заболеваний.

В соответствии с указанной технической задачей техническим результатом заявленного изобретения является создание метода терапевтического воздействия для снижения частоты метастазирования и рецидивирования злокачественных новообразований различной локализации, улучшить показатели безрецидивной выживаемости больных со злокачественными заболеваниями и расширение арсенала средств для лечения онкологических заболеваний, а также снижение риска метастазирования и рецидивов злокачественных новообразований.

Поставленная техническая задача и указанный технический результат достигаются заявленной группой изобретений, в которую входят набор лекарственных препаратов и способ третичной профилактики онкологических заболеваний.

Итак, поставленная техническая задача и указанный технический результат достигаются набором лекарственных препаратов для проведения курсовой третичной профилактики онкологических заболеваний для иммуномодулирующего воздействия при комбинированной терапии, включающий препарат Рефнот, содержащий человеческий фактор некроза опухолей альфа и тимозин-альфа 1 - ацетилированный полипептид, и препарат Ингарон, содержащий интерферон гамма, для подкожного введения их в равных терапевтических дозах 500000 ЕД.

Поставленная техническая задача и указанный технический результат достигаются также и заявленным в качестве изобретения новым способом третичной профилактики онкологических заболеваний с использованием комбинированной терапии с помощью набора лекарственных препаратов для иммуномодулирующего воздействия, включающий оперативное лечение пациентов и химиотерапию, при необходимости и лучевую терапию, или оперативное лечение и гормонотерапию, после чего проводят курсовое лечение в виде шести курсов профилактического лечения путем последовательного введения комбинации препаратов, включающей препарат Рефнот, содержащий человеческий фактор некроза опухолей альфа и тимозин-альфа 1 - ацетилированный полипептид, и препарат интерферона гамма Ингарон, при этом препарат Рефнот вводят подкожно в дозе 500000 ЕД через день в течение 20-дневного курса, а препарат Ингарон вводят также подкожно в дозе 500000 ЕД через день в течение 20-дневного курса, причем первую инъекцию препарата Ингарон проводят на следующий день после введения препарата Рефнот, затем делают перерыв 10 дней и через 45 дней проводят компьютерно-томографическое исследование.

Указанный клинический эффект был выражен среди пациентов, имеющих полиморфизмы в гене фактора некроза опухолей - TNF 308. В ходе клинического наблюдения с применением комбинации генно-инженерных лекарственных препаратов иммуномодуляторов - фактора некроза опухолей тимозин 1 альфа рекомбинантного (далее - Рефнот) и интерферона гамма (далее - Ингарон), было показано статистически достоверное снижение числа рецидивов среди пациентов, закончивших основной курс противоопухолевого лечения и получавших затем комбинацию Рефнота и Ингарона в течение 6 месяцев.

В соответствии с заявленным способом пациенты, с различными формами злокачественных новообразований, закончившие основной курс противоопухолевого лечения с мутациями в гене TNF308, получают курс иммунотерапии по следующей схеме: Рефнот 500000 ЕД подкожно, через день, в течение 20 дневного курса, Ингарон 500000 ЕД подкожно, через день в течение 20 дневного курса, первая инъекция Ингарона на следующий день после введения Рефнота. Затем перерыв 10 дней. Всего проводят 6 курсов такой терапии.

Начиная с 2014 года у всех больных с различными локализациями онкологических заболеваний изучали иммунный статус и генетические полиморфизмы гена TNF-308 с целью оценки прогностической, предсказательной значимости различных параметров, а также выявления влияния терапии препаратами Рефнот и Ингарон на динамику иммунологических показателей и частоту развития рецидивов и метастазирования. У больных в крови оценивалось содержание спонтанной и индуцированной продукции цитокинов интерферорона гамма и фактора некроза опухолей. Анализы проводились в иммунологической лаборатории на лазерном проточном питометре с использованием моноклональных антител и расходных материалов компаний.

С 2014 по 2018 годы различные варианты цитокиновой терапии получили 1611 пациентов с различными злокачественными новообразованиями. Базовым вариантом лечения являлась двухкомпонентная схема, включавшая Рефнот и Ингарон. Терапия осуществлялось до прогрессирования, появления непреодолимых осложнений или по другим причинам, не связанным с медицинскими показаниями.

Для оценки прогноза заболевания учитывались общепризнанные факторы риска развития онкологического заболевания, показатели генетического тестирования и иммунологических параметров.

В результате проведения однофакторного и многофакторного анализа с использованием модели пропорциональных рисков Кокса, были выявлены параметры, достоверно влияющие на отдаленные результаты лечения. Анализ производился с поправкой на локализацию и стадию онкологического процесса. На основе многофакторного анализа была создана интегрированная модель, включающая факторы риска общего характера, иммунологические прогностические факторы, а также генетический статус по гену TNF-308.

Наилучшие отдаленные результаты (медиана безрецидивной выживаемости) для пациентов, получавших двухкомпонентную схему цитокиновой терапии, были получены в подгруппе с благоприятным прогнозом, отсутствием полиморфизма гена TNF308 и наименьшим числом иммунологических факторов риска.

Полиморфизм TNF308 был определен в качестве основного прогностического критерия при определении риска рецидива заболевания, и целесообразности дальнейшего назначения иммуномодулирующей терапии.

На втором этапе, начиная с 2018 года, мы модифицировали подход к выбору схемы иммунотерапии, основываясь на исходных показателях генетического тестирования, а именно на полиморфизме TNF308 драйверной зоны генов фактора некроза опухолей.

В ходе проведенного клинического наблюдения была проведена оценка клинической эффективности комбинации лекарственных препарата фактора некроза опухолей тимозин 1 альфа рекомбинантного (Рефнот) и рекомбинантного интерферона гамма (далее – Комбинация) в качестве иммуномодуляторов для третичной профилактики онкологических заболеваний при наличия мутаций в гене TNF308.

Исследуемая группа (N=108) с включением исследуемой Комбинации, получала следующую Комбинацию лекарственной терапии Рефнот 500000 ЕД подкожно, через день, в течении 20 дневного курса, Ингарон 500000 ЕД подкожно, через день в течении 20 дневного курса, первая инъекция Ингарона на следующий день после введения Рефнота. Затем перерыв 10 дней. Всего 6 курсов терапии.

Контрольная группа (N=107) терапию не получала. Дополнительно оценивался профиль безопасности терапии. Наблюдение осуществлялось в течение 24 месяцев. Перед включением в наблюдательную программу все пациенты закончили основной курс противоопухолевого лечения и не имели признаков прогрессирования заболевания.

Отбор пациентов осуществлялся с учетом результатов генетического исследования на наличие полиморфизмов в гене TNF308. В наблюдательную программу были включены только пациенты с гомо- или гетерозиготным вариантом мутации TNF308. Пациенты были распределены по группам случайным образом, по возрасту и полу, нозологическим вариантам и стадии болезни в анамнезе группы были сопоставимы.

Ниже представлено несколько примеров осуществления изобретения на примерах клинических случаев, иллюстрирующие изобретение, но не ограничивающие его.

Пример 1

Пациентка К. возраст 47 лет, диагноз - аденокарцинома молочной железы слева ER/PR позитивная, HER2neu-негативная, стадия 2В. Проведено комплексное лечение, включая оперативное лечение – радикальная мастэктомия слева, 8 курсов химиотерапии и лучевая терапия. По завершении основного этапа лечения получает гормональную терапию. При обследовании признаков прогрессирования заболевания не выявлено. При проведении генетического обследования – выявлен гетерозиготный полиморфизм в гене TNF308. Пациентка подписала информированное согласие на участие в наблюдательной программа и была распределена в исследуемую группу. Далее пациентка получала рекомендованный курс третичной профилактики - 6 курсов исследуемой комбинации лекарственных препаратов Рефнота и Ингарона (Рефнот 500000 ЕД подкожно, через день, в течение 20 дневного курса, Ингарон 500000 ЕД подкожно, через день в течение 20 дневного курса, первая инъекция Ингарона на следующий день после введения Рефнота. Затем перерыв 10 дней.). Терапию переносила хорошо, выраженных нежелательных побочных реакций не зафиксировано. По завершении 6 курсов лечения, пациентка продолжила наблюдаться в клинике, включая осмотр и необходимые исследования 1 раз в 6 месяцев, на протяжении еще 1,5 лет, общий период наблюдения составил 24 месяца. Через 45 дней проводили компьютерно-томографическое исследование для определения наличия или отсутствия признаков рецидива заболевания. Признаков рецидива не обнаружено. По завершении указанного периода наблюдения, у пациентки также не зафиксировано признаков рецидива заболевания.

Пример 2

Пациент И. возраст 64 года, диагноз – немелкоклеточная аденокарцинома легкого справа, стадия 3А. Драйверные мутации в генах EGFR не обнаружены. Проведено комплексное лечение, включая неоадъювантную химиотерапию, оперативное лечение – субтотальная резекция правой доли легкого, 12 адъювантной курсов химиотерапии. При обследовании признаков прогрессирования заболевания не выявлено. При проведении генетического обследования – выявлен гетерозиготный полиморфизм в гене TNF308. Пациент подписал информированное согласие на участие в наблюдательной программе и был распределен в исследуемую группу. Далее пациент получал рекомендованный курс третичной профилактики - 6 курсов исследуемой Комбинации лекарственных препаратов Рефнота и Ингарона (Рефнот 500000 ЕД подкожно, через день, в течение 20 дневного курса, Ингарон 500000 ЕД подкожно, через день в течении 20 дневного курса, первая инъекция Ингарона на следующий день после введения Рефнота. Затем перерыв 10 дней.). Терапию переносил удовлетворительно, выраженных нежелательных побочных реакций не зафиксировано. По завершении 6 курсов лечения, пациент продолжил наблюдаться в клинике, включая осмотр и необходимые исследования 1 раз в 6 месяцев, на протяжении еще 1,5 лет, общий период наблюдения составил 24 месяца. Через 45 дней проводили компьютерно-томографическое исследование для определения наличия или отсутствия признаков рецидива заболевания. Признаков рецидива не обнаружено. По завершении указанного периода наблюдения, у пациента также не зафиксировано признаков рецидива заболевания.

Пример 3

Пациент Г. возраст 73 года, диагноз – рак предстательной железы, стадия 2В. Проведено комплексное лечение, включая радикальное оперативное лечение, 8 курсов гормонотерапии. При обследовании признаков прогрессирования заболевания не выявлено. При проведении генетического обследования – выявлен гомозиготный вариант полиморфизма в гене TNF308. Пациент подписал информированное согласие на участие в наблюдательной программе и был распределен в исследуемую группу. Далее пациент получал рекомендованный курс третичной профилактики - 6 курсов исследуемой Комбинации лекарственных препаратов Рефнота и Ингарона (Рефнот 500000 ЕД подкожно, через день, в течение 20 дневного курса, Ингарон 500000 ЕД подкожно, через день в течении 20 дневного курса, первая инъекция Ингарона на следующий день после введения Рефнота. Затем перерыв 10 дней.). Терапию переносил удовлетворительно, выраженных нежелательных побочных реакций не зафиксировано, кроме местных кожных реакций, которые не требовали медицинского вмешательства. По завершении 6 курсов лечения, пациент продолжил наблюдаться в клинике, включая осмотр и необходимые исследования 1 раз в 6 месяцев, на протяжении еще 1,5 лет, общий период наблюдения составил 24 месяца. Через 45 дней проводили компьютерно-томографическое исследование для определения наличия или отсутствия признаков рецидива заболевания. Признаков рецидива не обнаружено. По завершении указанного периода наблюдения, у пациента также не зафиксировано признаков рецидива заболевания.

Пример 4

Пациент И. возраст 79 лет, диагноз – аденокарцинома желудка, стадия 3А. Драйверные генетические мутации при исследовании биоптата опухоли не обнаружены. Проведено комплексное лечение, включая радикальное оперативное лечение – резекция желудка с формированием гастродуоденальнго анастомоза, 8 курсов адъювантной химиотерапии. При обследовании на момент подписания информированного согласия, признаков прогрессирования заболевания не выявлено. При проведении генетического обследования – выявлен гомозиготный полиморфизм в гене TNF308. Пациент подписал информированное согласие на участие в наблюдательной программе и был распределен в контрольную группу. Далее пациент наблюдался с периодичностью 1 раз в 6 месяцев, проходя необходимые обследования. Дополнительно пациент получал специализированное лечебное питание. Общий период наблюдения составил 18 месяцев. На третьем контрольном визите в клинику при проведении обследования у пациента было обнаружено объемное образование в печени, после проведения биопсии данного образования был подтвержден рецидив заболевания. Пациент был направлен в клинику по месту жительства для проведения лечения по поводу рецидива заболевания.

Пример 5

Пациентка В. возраст 41 год, диагноз - аденокарцинома молочной железы справа ER/PR негативная, HER2neu-негативная, стадия 2А. При исследовании биоптата опухоли полиморфизмы BRCA1,2 не обнаружены. Проведено комплексное лечение, включая оперативное лечение – радикальная мастэктомия справа, 10 курсов химиотерапии и лучевая терапия. По завершении основного этапа лечения дополнительная терапия не назначалась, кроме курса реабилитации, для устранения явлений лимфостаза правой верней конечности. При обследовании на момент включения в наблюдательную программу признаков прогрессирования заболевания не выявлено. При проведении генетического обследования – выявлен гетерозиготный полиморфизм в гене TNF308. Пациентка подписала информированное согласие на участие в наблюдательной программе и была распределена в контрольную группу, продолжая прохождение курса реабилитации. Однако после 2 визита, на 14 месяце наблюдения, пациентка самостоятельно обратилась в клинику с жалобами на появление узлового образования в левой молочной железе. При обследовании, был подтвержден рецидив заболевания, с поражением левой молочной железы. Пациентка направлена на лечение в клинику по месту жительства.

Пример 6

Пациентка Н. возраст 56 лет, диагноз - аденокарцинома прямой кишки, стадия 3А. При исследовании биоптата опухоли обнаружен полиморфизм в гене K-RAS. Проведено комплексное лечение, включая оперативное лечение – радикальная колонэктомия, 8 курсов химио- и таргетной терапии с включением цетуксимаба. По завершении основного этапа лечения дополнительная терапия не назначалась, кроме курса реабилитации. При обследовании на момент включения в наблюдательную программу признаков прогрессирования заболевания не выявлено. При проведении генетического обследования – выявлен гомозиготный полиморфизм в гене TNF308.

Пациентка подписала информированное согласие на участие в наблюдательной программе и была распределена в контрольную группу, продолжая прохождение курса реабилитации. На 4 визите, на 24 месяце наблюдения, при обследовании обнаружены узловые образования в забрюшинном пространстве. При проведении дополнительного обследования с использованием ПЭТ-КТ, был подтвержден рецидив заболевания, с поражением забрюшинных лимфатических узлов. Пациентка направлена для проведения дальнейшего лечения в клинику по месту жительства.

Таким образом, как следует из представленных данных, в ходе клинического наблюдения отмечены достоверные различия по количеству рецидивов между исследуемой и контрольной группой. В исследуемой группе отмечено 3 случая рецидивов заболевания, против 11 в контрольной группе (р≤0,05). Отмечена хорошая переносимость терапии, не было зафиксировано серьезных нежелательных побочных реакций. Все пациенты исследуемой группы закончили полный курс терапии исследуемой комбинацией в виде набора лекарственных препаратов Рефнот и Ингарон.

Таким образом, при использовании предложенной комбинации - набора лекарственных препаратов, у пациентов закончивших основной курс противоопухолевого лечения с мутациями в гене TNF308, риск рецидива заболевания снижается более чем в 3 раза.

Источники информации

1. В.В. Брюзгин, Л.В. Платинский. Роль цитокинов в химиотерапии злокачественных опухолей: практика применения цитокиновых препаратов Рефнот® и Ингарон® при распространенных опухолевых процессах с множественными метастазами, Москва, «Современная онкология», №1, т. 16, 2014.

2. Шмелёв В.А., Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Рефнот. Рекомбинантный Фактор Некроза Опухолей Тимозин-α1, препарат с низкой системной токсичностью для лечения онкологических заболеваний. М.: Рефнот-Фарм, 2010.

3. Владимирова Л.Ю., Подзорова Н.А., Златник Е.Ю. и др. Опыт перитуморального применения рекомбинантного фактора некроза опухоли - тимозина-A1 при местно-распространенном раке молочной железы IIb-IIIb стадии // Фундаментальные исследования. – 2014. – № 7.

4. Владимирова Л.Ю., Непомнящая Е.М., Подзорова Н.А. и др. Рекомбинантный фактор некроза опухоли - тимозин-А1: влияние на эффективность неоадъювантной химиотерапии и неоангиогенез при раке молочной железы // Вопросы онкологии. – 2017. – Т. 63. – № 1. – С. 76–81.

5. Гайсина Е.А., Царев О.Н., Филиппов И.А., Петрова С.А. Опыт применения препарата Рефнот в неоадъювантном лечении рака молочной железы // Академический журнал Западной Сибири. - 2016. - № 4. - С. 47-48.

6. Славина Е.Г., Черткова А.И., Абрамов М.Е. и др. Рефнот - новый иммуномодулятор в онкологии. Российский биотерапевтический журнал, 2016, 15(1): 100-101.

7. Plavinskiy SL, Shabalkin PI (2019) Cost-Effectiveness and Budget Impact Analysis of Recombinant Tumor Necrosis Factor-Thymosin Alpha 1 in a Complex Treatment of Metastatic Breast Cancer. J Cancer Sci Clin Oncol 6(1): 103.

8. Alspach E, Lussier DM, Schreiber RD. Interferon γ and Its Important Roles in Promoting and Inhibiting Spontaneous and Therapeutic Cancer Immunity. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2019 Mar 1;11(3):a028480. doi: 10.1101/cshperspect.a028480. PMID: 29661791; PMCID: PMC6396335.

9. Balkwill F. Tumour necrosis factor and cancer. Nat Rev Cancer. 2009 May;9(5):361-71. doi: 10.1038/nrc2628. Epub 2009 Apr 3. PMID: 193430.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использована для третичной профилактики онкологических заболеваний у пациентов с гомо- или гетерозиготным вариантом мутации TNF308. Набор по изобретению включает препарат Рефнот, содержащий человеческий фактор некроза опухолей альфа и тимозин-альфа1-ацетилированный полипептид, и препарат Ингарон, содержащий интерферон гамма, для подкожного введения их в равных терапевтических дозах 500000 Ед. Способ по изобретению включает оперативное лечение пациентов и химиотерапию или оперативное лечение и гормонотерапию, после чего проводят курсовое лечение в виде шести курсов профилактического лечения путем последовательного введения комбинации препаратов, включающей препарат Рефнот, содержащий человеческий фактор некроза опухолей альфа и тимозин-альфа1-ацетилированный полипептид, и препарат интерферона гамма Ингарон. Рефнот вводят подкожно в дозе 500000 ЕД через день в течение 20-дневного курса, а Ингарон вводят также подкожно в дозе 500000 ЕД через день в течение 20-дневного курса, причем первую инъекцию препарата Ингарон проводят на следующий день после введения препарата Рефнот, затем делают перерыв 10 дней. Через 45 дней проводят компьютерно-томографическое исследование для определения наличия или отсутствия признаков рецидива заболевания. Использование изобретений позволяет снизить риск рецидива и прогрессирования и улучшить показатели безрецидивной выживаемости больных со злокачественными заболеваниями. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 6 пр.

1. Набор лекарственных препаратов для проведения курсовой третичной профилактики онкологических заболеваний для иммуномодулирующего воздействия при комбинированной терапии у пациентов с гомо- или гетерозиготным вариантом мутации TNF308, включающий препарат Рефнот, содержащий человеческий фактор некроза опухолей альфа и тимозин-альфа1-ацетилированный полипептид, и препарат Ингарон, содержащий интерферон гамма, для подкожного введения их в равных терапевтических дозах 500000 Ед.

2. Способ третичной профилактики онкологических заболеваний у пациентов с гомо- или гетерозиготным вариантом мутации TNF308 с использованием комбинированной терапии с помощью набора лекарственных препаратов для иммуномодулирующего воздействия, включающий оперативное лечение пациентов и химиотерапию или оперативное лечение и гормонотерапию, после чего проводят курсовое лечение в виде шести курсов профилактического лечения путем последовательного введения комбинации препаратов, включающей препарат Рефнот, содержащий человеческий фактор некроза опухолей альфа и тимозин-альфа1-ацетилированный полипептид, и препарат интерферона гамма Ингарон, при этом препарат Рефнот вводят подкожно в дозе 500000 ЕД через день в течение 20-дневного курса, а препарат Ингарон вводят также подкожно в дозе 500000 ЕД через день в течение 20-дневного курса, причем первую инъекцию препарата Ингарон проводят на следующий день после введения препарата Рефнот, затем делают перерыв 10 дней и через 45 дней проводят компьютерно-томографическое исследование для определения наличия или отсутствия признаков рецидива заболевания.

3. Способ третичной профилактики онкологических заболеваний у пациентов с гомо- или гетерозиготным вариантом мутации TNF308 по п.2, отличающийся тем, что дополнительно после химиотерапии проводят лучевую терапию.