ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Изобретение, описанное в настоящем документе, относится к соединениям и композициям, способам и их применениям для лечения повреждений головного мозга. Например, изобретение, описанное в настоящем документе, относится к модуляторам рецептора вазопрессина и композициям, способам и их применениям для лечения повреждения головного мозга.
Уровень техники и сущность изобретения
По имеющимся данным, ежегодно 2,5 миллиона американцев страдают от травматического повреждения головного мозга (TBI). Описано, что такие повреждения приводят к 50000 случаев смерти и 275000 случаев госпитализации. Кроме того, такие повреждения обусловливают средние затраты в течение жизни на уровне 550000 долларов на пациента, и ежегодная экономическая нагрузка составляет 86 млрд. долларов. На долю TBI приходится треть всех смертей, связанных с травмой, в США, и оно является одной из главных причин смертности и нетрудоспособности людей младше 35 и старше 65.
Травмы головного мозга часто имеют общую черту, заключающуюся в отеке и опухании мозга. Отек головного мозга, часто называемый вторичным повреждением при TBI, следует за первичным инсультом и является основной причиной осложнений и смертности. При отсутствии лечения повреждение головного мозга также может приводить к серьезным нарушениям когнитивных функций, способности к обучению и памяти. Кроме того, повреждения головного мозга также могут приводить к потере двигательной функции. Отек головного мозга может быть обусловлен травмой головного мозга, а также другими нетравматическими причинами, такими как ишемический инсульт, рак и воспаление мозга, которое может возникать в результате других заболеваний или патологических состояний, таких как менингит или энцефалит. Для ликвидации такого критического недостатка медицинского обслуживания, необходимо лечение, которое устраняет или предотвращает влияние умеренных и тяжелых TBI, включая закрытые травмы черепа, непроникающие травмы, умеренные TBI, которые возникают в результате единичных ударов, таких как автомобильные аварии, падения и т.п. Соответственно, в настоящее время существует потребность в соединениях, композициях и способах лечения повреждения головного мозга.
Обнаружено, что селективные агонисты рецептора аргинина-вазопрессина V1a (V1aR), описанные в настоящем документе, подходят для лечения повреждений головного мозга. Также неожиданно обнаружено, что указанные соединения эффективны для лечения отека, а также дефицита когнитивных функций, памяти и способности к обучению, которые возникают в результате повреждения головного мозга. Следует понимать, что предложенные композиции, способы и применение, описанные в настоящем документе, не ограничены причиной повреждения головного мозга, которое может быть обусловлено многочисленными причинами, включая, но не ограничиваясь ими, удары, быстрое ускорение или замедление движения головы, ударные волны, химиотерапию, такую как CAR-T терапия, или как сопутствующее заболевание с другой болезнью.
Аргинин-вазопрессин (AVP) представляет собой химический сигнал в головном мозге, влияющий на сопротивление мозговых сосудов и проницаемость воды в головной мозг. Не ограничиваясь теорией, полагают, что AVP представляет собой химический сигнал в головном мозге, влияющий на сопротивление мозговых сосудов и проницаемость воды в головной мозг, и что он может участвовать в патофизиологии после травмы или повреждения головы. Такие цереброваскулярные эффекты опосредованы рецептором V1aR, который в значительной степени экспрессируется в корковой и подкорковой области головного мозга всех млекопитающих. Однако описано, что системное лечение повреждения головного мозга осложняется нежелательными побочными эффектами, возникающими вследствие конкурирующего антагонизма периферических рецепторов V1aR, такими как снижение церебрального кровотока, кровяного давления или другие нарушения сердечнососудистой функции. Krieg et al., J. Neurotrauma 32:221-27 (2015).
Неожиданно было обнаружено, что соединения, описанные в настоящем документе, можно вводить системно, включая пероральное введение в дозах, которые являются терапевтически эффективными в центральной нервной системе (ЦНС), без клинически значимых неблагоприятных эффектов в отношении кровяного давления или сердечнососудистой функции.
В одном иллюстративном варианте реализации настоящего изобретения в данном документе описаны селективные антагонисты V1aR, а также композиции и способы применения таких антагонистов вазопрессина. В другом иллюстративном варианте реализации в данном документе описаны селективные антагонисты V1aR, а также композиции и способы применения таких антагонистов V1aR, которые выполнены с возможностью достижения или могут обеспечивать концентрации в ЦНС, составляющие от 1 нМ до по меньшей мере примерно 100 нМ, при введении животному-хозяину. В другом иллюстративном варианте реализации в данном документе описаны селективные антагонисты V1aR, а также композиции и способы применения таких антагонистов V1aR, которые выполнены с возможностью достижения или могут обеспечивать концентрации в ЦНС, составляющие от 1 нМ до по меньшей мере примерно 10 нМ, или по меньшей мере примерно 1 нМ при введении животному-хозяину. В другом иллюстративном варианте реализации в данном документе описаны высокоэффективные и селективные антагонисты V1aR, а также композиции и способы применения таких антагонистов V1aR, которые выполнены с возможностью достижения или могут обеспечивать концентрации в ЦНС, составляющие по меньшей мере примерно 100 пМ, по меньшей мере примерно 10 пМ или по меньшей мере примерно 1 пМ, при введении животному-хозяину.
В настоящем изобретении обнаружено, что повреждения головного мозга можно лечить селективными антагонистами V1aR, описанными в данном документе. В одном варианте реализации антагонисты рецептора вазопрессина имеют формулу
и их фармацевтически приемлемые соли; где
A представляет собой карбоновую кислоту, сложный эфир или амид;
B представляет собой карбоновую кислоту, сложный эфир или амид; или B представляет собой спирт или тиол, или его производное, включая алкильные, арильные или ацильные производные;
R1 представляет собой водород или C1-C6 алкил;
R2 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, алкокси, алкилтио, галоген, галогеналкил, циано, формил, алкилкарбонил или заместитель, выбранный из группы, состоящей из -CO2R8, -CONR8R8′ и -NR8(COR9); где R8 и R8′, каждый независимо, выбраны из водорода, алкила, циклоалкила, необязательно замещенного арила или необязательно замещенного арилалкила; или R8 и R8′ вместе с присоединенным атомом азота образуют гетероциклильную группу; и где R9 выбран из водорода, алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероарилалкила и R8R8′N-(C1-C4 алкила);
R3 представляет собой амино, амидо, ациламидо или уреидо-группу, которая является необязательно замещенной; или R3 представляет собой азотсодержащую гетероциклильную группу, присоединенную у атома азота; и
R4 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, алкилкарбонил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный арилалкил, необязательно замещенный арилгалогеналкил, необязательно замещенный арилалкоксиалкил, необязательно замещенный арилалкенил, необязательно замещенный арилгалогеналкенил или необязательно замещенный арилалкинил.
В другом варианте реализации в данном документе описаны также фармацевтические композиции, содержащие одно или более из предложенных соединений. В одном аспекте предложенные композиции содержат терапевтически эффективное количество одного или более соединений для лечения животного-хозяина с повреждением головного мозга. Следует понимать, что предложенные композиции могут содержать другие компоненты и/или ингредиенты, включая, но не ограничиваясь ими, другие терапевтически активные соединения и/или один или более носителей, разбавителей, вспомогательных веществ и т.п., а также их комбинации. В другом варианте реализации в настоящем документе описаны также способы применения соединений и фармацевтических композиций для лечения животных-хозяев с повреждением головного мозга. В одном аспекте предложенные способы включают стадию введения животному-хозяину одного или более соединений и/или композиций, описанных в настоящем документе. В другом аспекте предложенные способы включают введение терапевтически эффективного количества одного или более соединений и/или композиций, описанных в настоящем документе, для лечения повреждения головного мозга у животного-хозяина. В другом варианте реализации в настоящем документе описано также применение предложенных соединений и композиций в производстве лекарственного средства для лечения животных-хозяев с повреждением головного мозга. В одном аспекте лекарственные средства содержат терапевтически эффективное количество одного или более соединений и/или композиций, описанных в настоящем документе.
Согласно настоящему изобретению, следует понимать, что соединения, описанные в данном документе, можно использовать отдельно или в комбинации с другими соединениями, подходящими для лечения повреждений головного мозга, включая соединения, которые могут быть терапевтически эффективными, действуя по такому же или другому механизму действия. Кроме того, следует понимать, что соединения, описанные в настоящем документе, можно использовать в комбинации с другими соединениями, которые вводят для лечения других симптомов повреждения головного мозга, таких как боль, воспаление, тошнота, рвота, нечеткое зрение, оборок и т.п.
Краткое описание графических материалов
На фиг. 1 представлены результаты теста на распознавание новых объектов; контрольная группа (CG), группа с повреждением (IG), группа лечения (TG); * (p<0,05), ** (p<0,01), *** (p<0,001).
На фиг. 2A представлены результаты теста в лабиринте Барнеса; контрольная группа (CG), группа с повреждением (IG), группа лечения (TG); * (p<0,05), ** (p<0,01).
На фиг. 2B представлены результаты теста в лабиринте Барнеса, разбитые по дням; контрольная группа (•), группа с повреждением (○), группа лечения (□); * (p<0,05), ** (p<0,01).
На фиг. 3 представлены результаты функциональной связности в состоянии покоя, где приведено сравнение группы с повреждением и группы лечения.
На фиг. 4A представлены изображения «стеклянного» головного мозга, демонстрирующие 3D организацию гипосвязности, наблюдаемой в группе с повреждением для зоны G.
На фиг. 4B представлены изображения «стеклянного» головного мозга, демонстрирующие 3D организацию гиперсвязности, наблюдаемой в группе лечения для зоны G.
На фиг. 5 представлены сканограммы и объемы боковых желудочков; контрольная группа (CG), группа с повреждением (IG), группа лечения (TG).
На фиг. 6 представлены изображения «стеклянного» головного мозга, демонстрирующие 3D организацию гипосвязности, наблюдаемой в группе с повреждением и в группе лечения для зоны M.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
В настоящем документе описано применение одного или более антагонистов V1aR для лечения повреждений головного мозга. Соединения, описанные в настоящем документе, могут значительно улучшить жизнь людей, страдающих от повреждений головного мозга, включая, но не ограничиваясь ими, травматическое повреждение головного мозга (TBI), включая TBI при контузии, церебральный отек, хроническую травматическую энцефалопатию (CTE), субарахноидальное кровоизлияние, инсульт, сотрясения и падения.
Некоторые иллюстративные варианты реализации настоящего изобретения описаны следующими иллюстративными пунктами:
Описан способ лечения повреждения головного мозга у животного-хозяина, включающий введение животному-хозяину композиции, содержащей один или более селективных антагонистов V1aR, описанных в настоящем документе.
Описан способ лечения повреждения головного мозга у животного-хозяина, отличающийся тем, что повреждение головного мозга по меньшей мере отчасти обусловлено ударом, травматическим повреждением головного мозга (TBI), умеренным TBI, TBI при контузии, церебральным отеком, хронической травматической энцефалопатией (CTE), субарахноидальным кровоизлиянием, инсультом, ишемическим инсультом, сотрясением, падениями или их комбинацией, и при этом указанный способ включает введение животному-хозяину композиции, содержащей один или более селективных антагонистов V1aR, описанных в настоящем документе.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что повреждение головного мозга характеризуется отеком, таким как отек бокового желудочка, нарушением когнитивных функций, нарушением способности к обучению, нарушением памяти или нарушением двигательных функций, или комбинацией любых из них.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что один или более антагонистов выбраны из соединений формулы:
и их фармацевтически приемлемых солей, где
A представляет собой карбоновую кислоту, сложный эфир или амид;
B представляет собой карбоновую кислоту, сложный эфир или амид; или B представляет собой спирт или тиол, или его производное;
R1 представляет собой водород или C1-C6 алкил;
R2 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, алкокси, алкилтио, галоген, галогеналкил, циано, формил, алкилкарбонил или заместитель, выбранный из группы, состоящей из -CO2R8, -CONR8R8' и -NR8(COR9); где R8 и R8', каждый независимо, выбраны из водорода, алкила, циклоалкила, необязательно замещенного арила или необязательно замещенного арилалкила; или R8 и R8' вместе с присоединенным атомом азота образуют гетероциклильную группу; и где R9 выбран из водорода, алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероарилалкила и R8R8'N-(C1-C4 алкила);
R3 представляет собой амино, амидо, ациламидо или уреидо-группу, которая является необязательно замещенной; или R3 представляет собой азотсодержащую гетероциклильную группу, присоединенную у атома азота; и
R4 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, алкилкарбонил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный арилалкил, необязательно замещенный арилгалогеналкил, необязательно замещенный арилалкоксиалкил, необязательно замещенный арилалкенил, необязательно замещенный арилгалогеналкенил или необязательно замещенный арилалкинил.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что один или более антагонистов выбраны из соединений формулы:
и их фармацевтически приемлемых солей, где
A и A', каждый независимо, выбраны из -CO2H или его сложноэфирного или амидного производного;
n представляет собой целое число, выбранное от 0 до примерно 3;
R1 представляет собой водород или C1-C6 алкил;
R2 представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, алкокси, алкилтио, галоген, галогеналкил, циано, формил, алкилкарбонил или заместитель, выбранный из группы, состоящей из -CO2R8, -CONR8R8' и -NR8(COR9); где R8 и R8′, каждый независимо, выбраны из водорода, алкила, циклоалкила, необязательно замещенного арила или необязательно замещенного арилалкила; или R8 и R8′ вместе с присоединенным атомом азота образуют гетероцикл; и где R9 выбран из водорода, алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероарилалкила и R8R8′N-(C1-C4 алкила);
R3 представляет собой амино, амидо, ациламидо или уреидо-группу, которая является необязательно замещенной; или R3 представляет собой азотсодержащую гетероциклильную группу, присоединенную у атома азота; и
R4 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, алкилкарбонил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный арилалкил, необязательно замещенный арилгалогеналкил, необязательно замещенный арилалкоксиалкил, необязательно замещенный арилалкенил, необязательно замещенный арилгалогеналкенил или необязательно замещенный арилалкинил.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что один или более антагонистов выбраны из соединений формулы:
и их фармацевтически приемлемых солей, где
A представляет собой -CO2H или его сложноэфирное или амидное производное;
Q представляет собой кислород; или Q представляет собой серу или дисульфид, или его окисленное производное;
n представляет собой целое число от 1 до 3;
R1, R2, R3 и R4 являются такими, как определено для формулы I; и
R5" выбран из водорода, алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероциклила или необязательно замещенного гетероциклилалкила и необязательно замещенного аминоалкила.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A представляет собой -CO2R5; где R5 выбран из водорода, алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арилалкила, гетероциклила, гетероциклил(C1-C4 алкила) и R6R7N-(C2-C4 алкила).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A представляет собой монозамещенный амидо, дизамещенный амидо или необязательно замещенный азотсодержащий гетероциклиламидо.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что гетероциклил независимо выбран из тетрагидрофурила, морфолинила, пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, гомопиперазинила или хинуклидинила; причем указанный морфолинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, гомопиперазинил или хинуклидинил необязательно N-замещен C1-C4 алкилом или необязательно замещенным арил(C1-C4 алкилом). Следует понимать, что в каждом случае различных вариантов реализации, описанных в настоящем документе, гетероциклил в каждом случае выбран независимо.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R6 независимо выбран из водорода или алкила; и R7 в каждом случае независимо выбран их алкила, циклоалкила, необязательно замещенного арила или необязательно замещенного арилалкила. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R6 и R7 вместе с присоединенным атомом азота образуют необязательно замещенный гетероцикл, такой как пирролидинил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил и гомопиперазинил; причем указанный пиперазинил или гомопиперазинил также необязательно N-замещен группой R13; где R13 в каждом случае независимо выбран из водорода, алкила, циклоалкила, алкоксикарбонила, необязательно замещенного арилоксикарбонила, необязательно замещенного арилалкила и необязательно замещенного арилоила. Также следует понимать, что в каждом случае различных вариантов реализации, описанных в настоящем документе, каждый из R6 и R7 независимо выбраны в каждом случае.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и A' представляют собой амиды. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид вторичного амина, также упоминаемый в данном контексте как вторичный амид. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и A' представляют собой вторичные амиды. Следует понимать, что вторичные амиды включают амиды циклических аминов, присоединенных у атомов азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A представляет собой амид. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A представляет собой амид вторичного амина, также упоминаемый в данном контексте как вторичный амид.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что антагонисты представляют собой сложные диэфиры, кислоты-эфиры или дикислоты, включая их фармацевтически приемлемые соли, где каждый из A и A' выбран независимо. Способ по любому из предшествующих пунктов, Отличающийся тем, что антагонисты представляют собой сложные эфирамиды, где один из A и A' представляет собой сложный эфир, а другой – амид. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что антагонисты представляют собой диамиды, где каждый из A и A' независимо выбран из монозамещенного амидо, дизамещенного амидо или необязательно замещенного азотсодержащего гетероциклиламидо.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой независимо выбранный монозамещенный амидо формулы C(O)NHX-, где X выбран из алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, гетероциклила, гетероциклил-(C1-C4 алкила), R6R7N- и R6R7N-(C2-C4 алкила), где каждый гетероциклил выбран независимо.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' независимо выбран из дизамещенного амидо формулы C(O)NR14X-, где R14 выбран из гидрокси, алкила, алкоксикарбонила и бензила; и X выбран из алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, гетероциклила, гетероциклил-(C1-C4 алкила), R6R7N- и R6R7N-(C2-C4 алкила), где каждый гетероциклил выбран независимо.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид независимо выбранного необязательно замещенного азотсодержащего гетероцикла, присоединенного у атома азота. Иллюстративные азотсодержащие гетероциклы включают, но не ограничиваются ими, пирролидинил, пирролидинонил, пиперидинил, пиперидинонил, пиперазинил, гомопиперазинил, триазолидинил, триазинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, 1,2-оксазинил, 1,3-оксазинил, морфолинил, оксадиазолидинил, тиадиазолидинил и 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил; каждый из которых необязательно замещен. Такие необязательные замещения включают группы R10, R12, R6R7N- и R6R7N-(C1-C4 алкил), как описано в настоящем документе.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' независимо представляет собой необязательно замещенный 2-(пирролидин-1-илметил)пирролидин-1-ил, присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' независимо представляет собой необязательно замещенный 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил, присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой независимо выбранный амид необязательно замещенного пиперидинила, присоединенного у атома азота. Иллюстративные необязательные замещения включают гидрокси, алкил, циклоалкил, алкокси, алкоксикарбонил, гидроксиалкилоксиалкил, включая (гидрокси(C2-C4 алкокси))-(C2-C4 алкил), R6R7N-, R6R7N-алкил, включая R6R7N-(C1-C4 алкил), дифенилметил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный арил(C1-C4 алкил) и пиперидин-1-ил(C1-C4 алкил).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой независимо выбранный пиперидинил, замещенный в 4-положении и присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой независимо выбранный амид необязательно замещенного пиперазинила, присоединенного у атома азота. Иллюстративные необязательные замещения включают гидрокси, алкил, циклоалкил, алкокси, алкоксикарбонил, гидроксиалкилоксиалкил, включая (гидрокси(C2-C4 алкокси))-(C2-C4 алкил), R6R7N-, R6R7N-алкил, включая R6R7N-(C1-C4 алкил), дифенилметил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный арил(C1-C4 алкил) и пиперидин-1-ил(C1-C4 алкил). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой независимо выбранный пиперазинил, замещенный в 4-положении и присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой независимо выбранный амид необязательно замещенного гомопиперазинила, присоединенного у атома азота. Иллюстративные необязательные замещения включают гидрокси, алкил, циклоалкил, алкокси, алкоксикарбонил, гидроксиалкилоксиалкил, включая (гидрокси(C2-C4 алкокси))-(C2-C4 алкил), R6R7N-, R6R7N-алкил, включая R6R7N-(C1-C4 алкил), дифенилметил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный арил(C1-C4 алкил) и пиперидин-1-ил(C1-C4 алкил). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой независимо выбранный гомопиперазинил, замещенный в 4-положении и присоединенный у атома азота. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой независимо выбранный гомопиперазинил, замещенный в 4-положении алкилом, арилом, арил(C1-C4 алкилом) и присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A' представляет собой монозамещенный амидо, дизамещенный амидо или необязательно замещенный азотсодержащий гетероциклиламидо. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A' представляет собой -CO2R5'; где R5' выбран из водорода, алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арилалкила, гетероциклила, гетероциклил(C1-C4 алкила) и R6R7N-(C2-C4 алкила); где гетероциклил в каждом случае независимо выбран из тетрагидрофурила, морфолинила, пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, гомопиперазинила или хинуклидинила; причем указанный морфолинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, гомопиперазинил или хинуклидинил необязательно N-замещен C1-C4 алкилом или необязательно замещенным арил(C1-C4 алкилом). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R5' представляет собой необязательно замещенный гетероциклилалкил или необязательно замещенными аминоалкил, включая R6R7N-(C2-C4 алкил).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A имеет формулу
где RN представляет собой водород или необязательно замещенный алкил, или группу, образующую амидное пролекарство; Ra представляет собой водород или необязательно замещенный алкил; и RAr представляет собой водород или один или более арильных заместителей, таких как, но не ограничиваясь ими, галоген, гидрокси, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкокси, нитро и т.п.. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере один из RN, Ra и RAr не представляет собой водород. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере один из RN и Ra не представляет собой водород. В другом варианте реализации A имеет формулу
где RN, Ra и RAr являются такими, как определено в настоящем документе.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A выбран из монозамещенного амидо, дизамещенного амидо и необязательно замещенного азотсодержащего гетероциклиламидо. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A представляет собой амид необязательно замещенного 1-тетрагидронафтиламина.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой монозамещенный амидо формулы C(O)NHX, где X выбран из алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, гетероциклила, гетероциклил-(C1-C4 алкила), R6R7N- и R6R7N-(C2-C4 алкила), где каждый гетероциклил выбран независимо.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой дизамещенный амидо формулы C(O)NR14X, где R14 выбран из гидрокси, алкила, алкоксикарбонила и бензила; и X выбран из алкила, циклоалкила, алкоксиалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, гетероциклила, гетероциклил-(C1-C4 алкила), R6R7N- и R6R7N-(C2-C4 алкила), где каждый гетероциклил выбран независимо.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного азотсодержащего гетероцикла, присоединенного у атома азота. Иллюстративные азотсодержащие гетероциклы включают, но не ограничиваются ими, пирролидинил, пирролидинонил, пиперидинил, пиперидинонил, пиперазинил, гомопиперазинил, триазолидинил, триазинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, 1,2-оксазинил, 1,3-оксазинил, морфолинил, оксадиазолидинил, тиадиазолидинил и 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил; каждый из которых необязательно замещен. Такие необязательные замещения включают группы R10, R12, R6R7N- и R6R7N-(C1-C4 алкил), как описано в настоящем документе.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A представляет собой необязательно замещенный 2-(пирролидин-1-илметил)пирролидин-1-ил, присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A представляет собой необязательно замещенный 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил, присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного пиперидинила, присоединенного у атома азота. Иллюстративные необязательные замещения включают гидрокси, алкил, циклоалкил, алкокси, алкоксикарбонил, гидроксиалкилоксиалкил, включая (гидрокси(C2-C4 алкокси))-(C2-C4 алкил), R6R7N-, R6R7N-алкил, включая R6R7N-(C1-C4 алкил), дифенилметил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный арил(C1-C4 алкил) и пиперидин-1-ил(C1-C4 алкил). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой пиперидинил, замещенный в 4-положении и присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного пиперазинила, присоединенного у атома азота. Иллюстративные необязательные замещения включают гидрокси, алкил, циклоалкил, алкокси, алкоксикарбонил, гидроксиалкилоксиалкил, включая (гидрокси(C2-C4 алкокси))-(C2-C4 алкил), R6R7N-, R6R7N-алкил, включая R6R7N-(C1-C4 алкил), дифенилметил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный арил(C1-C4 алкил) и пиперидин-1-ил(C1-C4 алкил). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой пиперазинил, замещенный в 4-положении и присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного гомопиперазинила, присоединенного у атома азота. Иллюстративные необязательные замещения включают гидрокси, алкил, циклоалкил, алкокси, алкоксикарбонил, гидроксиалкилоксиалкил, включая (гидрокси(C2-C4 алкокси))-(C2-C4 алкил), R6R7N-, R6R7N-алкил, включая R6R7N-(C1-C4 алкил), дифенилметил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный арил(C1-C4 алкил) и пиперидин-1-ил(C1-C4 алкил). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой гомопиперазинил, замещенный в 4-положении и присоединенный у атома азота. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой гомопиперазинил, замещенный в 4-положении алкилом, арилом, арил(C1-C4 алкилом) и присоединенный у атома азота.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид гетероцикла, присоединенного у атома азота, причем указанный гетероцикл замещен гетероциклилом, гетероциклилалкилом, циклоалкилом, циклоалкилалкилом, арилом, арилалкилом.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного бензил-, необязательно замещенного 1-нафтилметил- или необязательно замещенного 2-нафтилметиламина. Необязательные замещения включают, но не ограничиваются ими, 2,3-дихлор, 2,5-дихлор, 2,5-диметокси, 2-трифторметил, 2-фтор-3-трифторметил, 2-фтор-5-трифторметил, 2-метил, 2-метокси, 3,4-дихлор, 3,5-дитрифторметил, 3,5-дихлор, 3,5-диметил, 3,5-дифтор, 3,5-диметокси, 3-бром, 3-трифторметил, 3-хлор-4-фтор, 3-хлор, 3-фтор-5-трифторметил, 3-фтор, 3-метил, 3-нитро, 3-трифторметокси, 3-метокси, 3-фенил, 4-трифторметил, 4-хлор-3-трифторметил, 4-фтор-3-трифторметил, 4-метил и т.п.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного бензил-N-метиламина. В другом варианте реализации A в формуле (I) или (II) представляет собой амид необязательно замещенного бензил-N-бутиламина, включая н-бутил и трет-бутил. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A представляет собой амид необязательно замещенного бензил-N-бензиламина. Необязательные замещения включают, но не ограничиваются ими, 2,3-дихлор, 3,5-дихлор, 3-бром, 3-трифторметил, 3-хлор, 3-метил и т.п.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного 1-фенилэтил-, 2-фенилэтил-, 2-фенилпропил- или 1-фенилбензиламина. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного 1-фенилэтил-, 2-фенилэтил-, 2-фенилпропил-, 1-фенилбензиламин-N-метиламина. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного 2-фенил-β-аланина или его производного, 1-фенилпропаноламина и т.п. Необязательные замещения включают, но не ограничиваются ими, 3-трифторметокси, 3-метокси, 3,5-диметокси, 2-метил и т.п.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного 1-фенилциклопропил-, 1-фенилциклопентил- или 1-фенилциклогексиламина. Необязательные замещения включают, но не ограничиваются ими, 3-фтор, 4-метокси, 4-метил, 4-хлор, 2-фтор и т.п.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид необязательно замещенного гетероарилметиламина, включая, но не ограничиваясь ими, 2-фурил, 2-тиенил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил и т.п. Необязательные замещения включают, но не ограничиваются ими, 5-метил, 3-хлор, 2-метил и т.п.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид частично насыщенного бициклического арила, включая, но не ограничиваясь ими, 1-, 2-, 4- и 5-инданиламин, 1- и 2-тетрагидронафтиламин, индолинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил и т.п., каждый из которых необязательно замещен.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A и/или A' представляет собой амид замещенного пиперидина или пиперазина. Заместители у пиперидина или пиперазина включают гетероциклил, гетероциклилалкил, необязательно замещенный арил и необязательно замещенный арилалкил. Иллюстративные пиперидины и пиперазины включают формулы:
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A' представляет собой амид замещенного гетероцикла, присоединенного у атома азота. Заместители включают алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил, арил и арилалкил. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A' представляет собой амид гетероцикла, присоединенного у атома азота, замещенного алкилом, циклоалкилом, циклоалкилалкилом, гетероциклилом или гетероциклилалкилом.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A' представляет собой амид необязательно замещенного арилгетероциклиламина, арилалкилгетероциклиламина, гетероциклиламина или гетероарилалкиламина. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A' представляет собой амид пиперидин-1-илпиперидина или пиперидин-1-илалкилпиперидина. В другом варианте реализации алкил представляет собой C1-C2-алкил.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что A представляет собой амид замещенного пиперидина или пиперазина.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что B представляет собой спирт или тиол, или его производное, включая алкильные, арильные или ацильные производные.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что Q представляет собой кислород или серу.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R5" представляет собой необязательно замещенный арилалкил.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R5" представляет собой необязательно замещенный арил(C2-C4 алкил). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R5" представляет собой необязательно замещенный арил(C1-C2 алкил). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R5'' представляет собой необязательно замещенный бензил. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R5'' представляет собой необязательно замещенный алкил.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что n равен 1 или 2. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что n равен 1.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R2 представляет собой водород, алкил, алкокси, алкилтио, циано, формил, алкилкарбонил или заместитель, выбранный из группы, состоящей из -CO2R8 и -CONR8R8′, где R8 и R8′, каждый независимо, выбраны из водорода и алкила. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R2 представляет собой водород или алкил. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R2 представляет собой водород.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R1 представляет собой водород. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R1 представляет собой метил. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R1 и R2 представляют собой водород.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R3 имеет формулу:
где R10 и R11, каждый независимо, выбраны из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, алкоксикарбонила, алкилкарбонилокси, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного арилалкилокси, необязательно замещенного арилалкилкарбонилокси, дифенилметокси, трифенилметокси и т.п.; и R12 выбран из водорода, алкила, циклоалкила, алкоксикарбонила, необязательно замещенного арилоксикарбонила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного арилоила и т.п.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R3 имеет формулу:
где R10, R11 и R12 являются такими, как описано в настоящем документе.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R3 имеет формулу:
где R10, R11 и R12 являются такими, как описано в настоящем документе.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R3 имеет формулу:
где R10 и R11 являются такими, как описано в настоящем документе.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R3 имеет формулу:
где R10 является таким, как описано в настоящем документе.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R10 представляет собой алкил, арил или арилалкил, каждый из которых необязательно замещен, или R10 представляет собой необязательно замещенный арил.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R4 имеет формулу:
где Y представляет собой электроноакцепторную группу, такую как галоген, и Y1 представляет собой водород или один или более арильных заместителей, таких как, но не ограничиваясь ими, галоген, гидрокси, амино, нитро, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкокси и т.п. Следует понимать, что двойная связь в указанных формулах может быть полностью или по существу полностью (E), полностью или по существу полностью (Z), или их смесью. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что двойная связь в указанных формулах полностью или по существу полностью представляет собой (E). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что R4 имеет формулу:
где Y1 является таким, как определено в настоящем документе. В другом варианте реализации Y1 не представляет собой водород.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что n равен 1, стереохимия α-углерода представляет собой (S) или (R), или представляет собой эпимерную смесь. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что n равен 1, стереохимия α-углерода представляет собой (R). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что n равен 2, стереохимия α-углерода представляет собой (S). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что n равен 1, и Q представляет собой кислород, стереохимия α-углерода представляет собой (R). Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что n равен 1, и Q представляет собой серу, стереохимия α-углерода представляет собой (S). Следует понимать, что соединения формул (I) и (II) являются хиральными по α-углероду, за исключением случая, когда A = A', и n = 0.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере одно соединение имеет связывающую аффинность рецептора вазопрессина V1a (IC50) менее чем примерно 100 нМ, менее чем примерно 50 нМ, менее чем примерно 25 нМ или менее чем примерно 10 нМ.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN228 (пример 233).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN246 (пример 224).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN251 (пример 225).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN296 (пример 232E).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN576 (пример 266).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что стадия введения включает общую суточную дозу от примерно 160 до примерно 700 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов, в единой или дробной форме.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что стадия введения включает общую суточную дозу от примерно 160 до примерно 500 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов, в единой или дробной форме.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что стадия введения включает общую суточную дозу от примерно 160 до примерно 400 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов, в единой или дробной форме.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что стадия введения включает общую суточную дозу от примерно 160 до примерно 320 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов, в единой или дробной форме.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что стадия введения включает общую суточную дозу от примерно 160 до примерно 240 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов, в единой или дробной форме.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что указанная форма предназначена для перорального введения.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что указанная форма предназначена для быстрого или мгновенного высвобождения при пероральном введении.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что указанная форма предназначена для парентерального введения.
Следует понимать, что в экстренных ситуациях быстрое или мгновенное высвобождение при пероральном и/или парентеральном введении обеспечит Cmax за очень короткое Tmax. Не ограничиваясь теорией, полагают, что быстрое или мгновенное высвобождение при пероральном и/или парентеральном введении позволит исключать дальнейшее поражение головного мозга, обусловленное его повреждением, которое не лечится, такое как вторичные повреждения, возникающие в результате клеточных процессов и биохимических каскадов, проявляющихся от нескольких минут до нескольких дней после травмы. Вторичные повреждения включают поражение гематоэнцефалического барьера, высвобождение факторов, которые вызывают воспаление, повышенное содержание свободных радикалов, эксатотоксичность (избыточное высвобождение глутаматного нейротрансмиттера), приток кальциевых и натриевых ионов в нейроны, дисфункцию митохондрий, повреждение аксонов в белом веществе головного мозга, приводящее к их отделению от тела клетки, изменения в кровотоке в головной мозг, включая ишемию, церебральную гипоксию, отек головного мозга и повышенное внутричерепное давление.
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что стадия введения включает протокол введения доз q.d. (один раз в сутки).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что стадия введения включает протокол введения доз b.i.d. (два раза в сутки).
Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что стадия введения включает протокол введения доз с пролонгированным высвобождением.
Фармацевтическая композиция, выполненная с возможностью или способная обеспечивать лечение повреждения или расстройства головного мозга у животного-хозяина, содержащая одно или более соединений по любому из предшествующих пунктов и необязательно один или более носителей, разбавителей или адъювантов, или их комбинацию.
Разовая доза или единичная лекарственная форма, выполненная с возможностью или способная обеспечивать лечение повреждения или расстройства головного мозга у животного-хозяина, содержащая одно или более соединений по любому из предшествующих пунктов и необязательно один или более носителей, разбавителей или адъювантов, или их комбинацию.
Разовая доза или единичная лекарственная форма по любому из предшествующих пунктов, содержащая от примерно 80 до примерно 350 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов в единой или дробной форме.
Разовая доза или единичная лекарственная форма по любому из предшествующих пунктов, содержащая от примерно 80 до примерно250 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов в единой или дробной форме.
Разовая доза или единичная лекарственная форма по любому из предшествующих пунктов, содержащая от примерно 80 до примерно 200 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов в единой или дробной форме.
Разовая доза или единичная лекарственная форма по любому из предшествующих пунктов, содержащая от примерно 80 до примерно 160 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов в единой или дробной форме.
Разовая доза или единичная лекарственная форма по любому из предшествующих пунктов, содержащая от примерно 80 до примерно 120 мг, в целом, одного или более соединений по любому из предшествующих пунктов в единой или дробной форме.
Разовая доза или единичная лекарственная форма по любому из предшествующих пунктов, предназначенная для пероральной доставки.
Разовая доза или единичная лекарственная форма по любому из предшествующих пунктов, выполненная с возможность пролонгированного высвобождения.
Следует понимать, что каждый из предшествующих пунктов и каждый вариант реализации формулы (I), различных видов, подвидов и групп каждого из A, A', Y, Y1, n, R1, R2, R3, R4, R5 и т.п., описанных в настоящем документе, можно комбинировать без ограничения и, следовательно, каждый такой дополнительный вариант реализации настоящего изобретения описан такой комбинацией. Также следует понимать, что каждый из предшествующих пунктов и каждый вариант реализации формулы (II), различных видов, подвидов и групп каждого из A, Q, Y, Y1, n, R1, R2, R3, R4, R5, R5" и т.п., описанных в настоящем документе, можно комбинировать без ограничения и, следовательно, каждый такой дополнительный вариант реализации настоящего изобретения описан такой комбинацией. Например, способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что описаны соединения формулы (I), где
(a) A имеет формулу
где RN, Ra и RAr являются такими, как определено в настоящем документе; и n равен 1;
(b) n равен 1, и R1 представляет собой водород;
(c) A имеет формулу
где RN, Ra и RAr являются такими, как определено в настоящем документе; n равен 1; и R1 представляет собой водород;
(d) R1 и R3 представляют собой водород;
(e) R1 и R2 представляют собой водород; и R3 имеет формулу
где R10, R11 и R12 являются такими, как описано в настоящем документе;
(f) A имеет формулу
где RN, Ra и RAr являются такими, как описано в настоящем документе; n равен 1; R1 и R2 представляют собой водород; и R3 имеет формулу
где R10 и R11 являются такими, как описано в настоящем документе;
(g) A имеет формулу
где RN, Ra и RAr являются такими, как описано в настоящем документе; n равен 1; R1 и R2 представляют собой водород; и A' имеет формулу
и т.п.
Следует понимать, что в иллюстративных пунктах и вариантах реализации, описанных в настоящем документе, A и/или A' могут содержать хиральный центр, любой из оптически чистых энантиомеров может быть включен в соединения, описанные в настоящем документе; альтернативно, можно использовать рацемическую форму. Например, в соединения, описанные в настоящем документе, может быть включен любой или оба следующих энантиомера: (R)-1-(3-метоксифенил)этиламин, (R)-1-(3-трифторметилфенил)этиламин, (R)-1,2,3,4-тетрагидро-1-нафтиламин, (R)-1-инданиламин, (R)-α,N-диметилбензиламин, (R)-α-метилбензиламин, (S)-1-(3-метоксифенил)этиламин, (S)-1-(3-трифторметилфенил)этиламин, (S)-1,2,3,4-тетрагидро-1-нафтиламин, (S)-1-инданиламин и (S)-α-метилбензиламин, и т.п.
В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, пересекают гематоэнцефалический барьер (BBB) и демонстрируют высокую проницаемость в ЦНС. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, демонстрируют определенные уровни эффективных доз в головном мозге для лечения повреждения головного мозга. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, демонстрируют определенные уровни в плазме, которые равны тем уровням или превышают те уровни, которые необходимы для клинической эффективности при лечении повреждений головного мозга. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, демонстрируют фармакокинетику, соответствующую введению два раза в сутки (b.i.d.). В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, демонстрируют фармакокинетику, соответствующую введению один раз в сутки (q.d.). Следует понимать, что введение доз b.i.d. и q.d. может быть важной характеристикой для улучшения соблюдения пациентом режима лечения, что обеспечивает общее повышение клинической эффективности. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, метаболически стабильны в желудке и крови. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, демонстрируют профили сердечнососудистой безопасности in vivo и in vitro, которые согласуются с лечением повреждений головного мозга. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, демонстрируют респираторную безопасность in vivo.
В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, и фармацевтические композиции и лекарственные средства, содержащие их, демонстрируют высокие уровни в плазме и высокие уровни в головном мозге, в том числе при пероральном введении. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, и фармацевтические композиции и лекарственные средства, содержащие их, могут пересекать гематоэнцефалический барьер (BBB), в том числе при пероральном введении. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, и фармацевтические композиции и лекарственные средства, содержащие их, демонстрируют высокую биодоступность в ЦНС и высокую аффинность без существенного или конкурирующего связывания с другими заранее определенными GPCR или с другими заранее определенными рецепторами, включая, но не ограничиваясь ими, рецепторы, связанные с нейротрансмиттерами, стероидные рецепторы, ионные каналы, рецепторы вторичных мессенджеров, рецепторы простагландинов, рецепторы факторов роста и гормонов, другие пептидные рецепторы головного мозга и желудочно-кишечного тракта, другие ферменты и т.п. В одном аспекте соединения, описанные в настоящем документе, и фармацевтические композиции и лекарственные средства, содержащие их, неактивны или по существу неактивны при 100 нМ против стандартной панели из 64 рецепторов, содержащей 35 GPCR (панель Novascreen), включая рецепторы, связанные с нейротрансмиттерами, стероидные рецепторы, ионные каналы, рецепторы вторичных мессенджеров, простагландиновые рецепторы, рецепторы фактора роста, гормональные рецепторы, пептиды головного мозга/кишечника (за исключением вазопрессина 1) и ферменты.
Не ограничиваясь теорией, полагают, что AVP и родственные пептиды представляют собой семейство химических сигналов у позвоночных животных и выполняют важную функцию при регуляции социального поведения и эмоций. AVP синтезируется в нейронах в гипоталамусе всех млекопитающих. Он высвобождается из нервных окончаний в срединном возвышении и транспортируется в шишковидную железу, где он усиливает высвобождение адренокортикотрофного гормона (ACTH) и, в конечном итоге, уровень гормонов стресса в кровотоке, поскольку он действует на рецептор AVP шишковидной железы. Из нервных окончаний в шишковидной железе AVP также попадает в общий кровоток, где он действует на сердце и кровеносные сосуды, влияя на работу сердца, а также на почки, уменьшая объем мочи. Нейроны AVP и нервные волокна также встречаются в лимбической системе головного мозга. AVP проявляет свое физиологическое и поведенческое влияние посредством связывания со специфическими рецепторами, сопряженными с G-белком (GPCR), в центральной нервной системе и в некоторых периферических тканях/сайтах. Идентифицированы три отдельных подтипа рецептора AVP - V1a, V1b и V2. V1a представляет собой преобладающий рецептор AVP, встречающийся в лимбической системе и коре головного мозга, рецептор V1b расположен в лимбической системе и шишковидной железе, хотя он меньше распространен, чем V1a. Рецептор V2 локализуется в почках, где он опосредует антидиуретическое действие вазопрессина. Как правило, считают, что V2 не экспрессируется в нервной системе взрослых животных или людей.
В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, селективно активны у рецептора AVP V1a. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, селективно активны у рецептора AVP V1a и менее активны, существенно менее активны и/или неактивны у других рецепторов AVP, таких как подтипы рецепторов AVP V1b и/или V2. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, в 10 раз более селективны в отношении рецептора V1a, чем в отношении рецептора V1b и/или V2. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, в 100 раз более селективны в отношении рецептора V1a, чем в отношении рецептора V1b и/или V2. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, в 1000 раз более селективны в отношении рецептора V1a, чем в отношении рецептора V1b и/или V2. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, в 10 000 раз более селективны в отношении рецептора V1a, чем в отношении рецептора V1b и/или V2.
В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, селективно активны у рецептора AVP V1a, по сравнению с другими рецепторами, сопряженными с G-белком (GPCR). В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, селективно активны у рецептора AVP V1a и менее активны, существенно менее активны и/или неактивны у других GPCR. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, в 10 раз более селективны в отношении рецептора V1a, чем в отношении других GPCR. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, в 100 раз более селективны в отношении рецептора V1a, чем в отношении других GPCR. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, в 1000 раз более селективны в отношении рецептора V1a, чем в отношении других GPCR. В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, в 10 000 раз более селективны в отношении рецептора V1a, чем в отношении других GPCR.
В другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, и фармацевтические композиции и лекарственные средства, содержащие их, оказывают специфический поведенческий эффект, который является контекстно-зависимым (см., например, Ferris & Potegal Physiology and Behavior, 44:235-239 (1988)). Например, в другом варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, и фармацевтические композиции и лекарственные средства, содержащие их, эффективны при модулировании нейропсихиатрических расстройств, но оказывают слабый эффект или не оказывают эффекта на половое поведение.
В каждом из вышеуказанных пунктов и в каждом из вариантов реализации, описанных в настоящем документе, следует понимать, что приведенные формулы включают и представляют собой не только все фармацевтически приемлемые соли соединений, но и любые и все гидраты и/или сольваты приведенных формул соединений. Следует понимать, что некоторые функциональные группы, такие как гидрокси, амино и подобные группы, образуют комплексы и/или координационные соединения с водой и/или различными растворителями в различных физических формах представленных соединений. Соответственно, приведенные выше формулы следует понимать как описание таких гидратов и/или сольватов, включая фармацевтически приемлемые сольваты.
В каждом из вышеуказанных пунктов и в каждом из вариантов реализации, описанных в настоящем документе, также следует понимать, что приведенные формулы включают и представляют собой каждый возможный изомер, такой как стереоизомеры и геометрические изомеры, как по отдельности, так и в любой и во всех возможных смесях. В каждом из вышеуказанных пунктов и в каждом из вариантов реализации, описанных в настоящем документе, также следует понимать, что приведенные формулы включают и представляют собой любые и все кристаллические формы, частично кристаллические формы и некристаллические и/или аморфные формы соединений.
В данном контексте термин «сольваты» относится к соединениям, описанным в настоящем документе, связанным в комплекс с молекулой растворителя. Следует понимать, что соединения, описанные в настоящем документе, могут образовывать такие комплексы с растворителями при простом смешивании соединений с растворителем или при растворении соединений в растворителе. Следует понимать, что если такие соединения предназначены для применения в качестве фармацевтических средств, то такие растворители представляют собой фармацевтически приемлемые растворители. Дополнительно следует понимать, что если указанные соединения предназначены для применения в качестве фармацевтических средств, то относительное количество растворителя, который образует сольват, должно быть меньше установленных пределов для фармацевтического применения, например, меньше, чем в руководстве Международного совета по гармонизации (ICH). Следует понимать, что сольваты могут быть выделены из избытка растворителя посредством выпаривания, осаждения и/или кристаллизации. В некоторых вариантах реализации сольваты являются аморфными, а в других вариантах реализации сольваты являются кристаллическими.
Соединения, описанные в настоящем документе, могут содержать один или более хиральных центров, или иначе могут быть способны к существованию в виде нескольких стереоизомеров. Следует понимать, что в одном варианте реализации настоящее изобретение, описанное в данном документе, не ограничено каким-либо конкретным стереохимическим требованием, и что соединения и композиции, способы, применение и лекарственные средства, которые содержат их, могут быть оптически чистыми или могут представлять собой любую из множества стереоизомерных смесей, включая рацемические и другие смеси энантиомеров, другие смеси диастереомеров и т.п. Следует также понимать, что такие смеси стереоизомеров могут включать одну стереохимическую конфигурацию в одном или более хиральных центрах, а также включать смеси стереохимических конфигураций в одном или более других хиральных центрах.
Аналогично, соединения, описанные в настоящем документе, могут содержать геометрические центры, такие как цис, транс, E и Z двойные связи. Следует понимать, что в другом варианте реализации настоящее изобретение, описанное в данном документе, не ограничено каким-либо конкретным требованием к геометрическому изомеру, и что соединения и композиции, способы, применение и медицинские средства, которые содержат их, могут быть чистыми или могут представлять собой любую из множества смесей геометрических изомеров. Следует также понимать, что такие смеси геометрических изомеров могут включать одну конфигурацию у одной или более двойных связей, а также включать смеси геометрических конфигураций у одной или более других двойных связей.
В данном контексте термин «алкил» включает цепь атомов углерода, которая является необязательно разветвленной. В данном контексте термины «алкенил» и «алкинил» включают цепь из атомов углерода, которая является необязательно разветвленной и содержит по меньшей мере одну двойную связь или тройную связь, соответственно. Следует понимать, что алкинил также может содержать одну или более двойных связей. Кроме того, следует понимать, что в некоторых вариантах реализации алкил преимущественно имеет ограниченную длину, включая C1-C24, C1-C12, C1-C8, C1-C6, и C1-C4, и C2-C24, C2-C12, C2-C8, C2-C6, и C2-C4, и т.п. Иллюстративно, такие алкильные группы с определенной ограниченной длиной, включая C1-C8, C1-C6, и C1-C4, и C2-C8, C2-C6, и C2-C4, и т.п., могут быть упомянуты как низший алкил. Кроме того, следует понимать, что в некоторых вариантах реализации алкенил и/или алкинил может преимущественно иметь ограниченную длину, включая C2-C24, C2-C12, C2-C8, C2-C6, и C2-C4, и C3-C24, C3-C12, C3-C8, C3-C6, и C3-C4, и т.п. Иллюстративно, такие алкенильные и/или алкинильные группы с определенной ограниченной длиной, включая C2-C8, C2-C6, и C2-C4, и C3-C8, C3-C6, и C3-C4, и т.п., могут быть упомянуты как низший алкенил и/или алкинил. В данном контексте предполагается, что более короткие алкильные, алкенильные и/или алкинильные группы могут меньше усиливать липофильность соединения и, соответственно, оно будет иметь другие фармакокинетические свойства. В вариантах реализации настоящего изобретения, описанных в данном документе, в каждом случае следует понимать, что упоминание алкила относится к алкилу, определение которого приведено в данном документе, и необязательно к низшему алкилу. В вариантах реализации настоящего изобретения, описанных в данном документе, в каждом случае следует понимать, что упоминание алкенила относится к алкенилу, определение которого приведено в данном документе, и необязательно к низшему алкенилу. В вариантах реализации настоящего изобретения, описанных в данном документе, в каждом случае следует понимать, что упоминание алкинила относится к алкинилу, определение которого приведено в данном документе, и необязательно к низшему алкинилу. Иллюстративные алкильные, алкенильные и алкинильные группы представляют собой, но не ограничиваются ими, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, 2-пентил, 3-пентил, неопентил, гексил, гептил, октил и т.п., и соответствующие группы, содержащие одну или более двойных и/или тройных связей, или их комбинации.
В данном контексте термин «алкилен» включает двухвалентную цепь атомов углерода, которая является необязательно разветвленной. В данном контексте термины «алкенилен» и «алкинилен» включают двухвалентную цепь из атомов углерода, которая является необязательно разветвленной и содержит по меньшей мере одну двойную связь или тройную связь, соответственно. Следует понимать, что алкинилен также может содержать одну или более двойных связей. Кроме того, следует понимать, что в некоторых вариантах реализации алкилен преимущественно имеет ограниченную длину, включая C1-C24, C1-C12, C1-C8, C1-C6, и C1-C4, и C2-C24, C2-C12, C2-C8, C2-C6, и C2-C4, и т.п. Иллюстративно, такие алкиленовые группы с определенной ограниченной длиной, включая C1-C8, C1-C6, и C1-C4, и C2-C8, C2-C6, и C2-C4, и т.п., могут быть упомянуты как низший алкилен. Кроме того, следует понимать, что в некоторых вариантах реализации алкенилен и/или алкинилен может преимущественно иметь ограниченную длину, включая C2-C24, C2-C12, C2-C8, C2-C6, и C2-C4, и C3-C24, C3-C12, C3-C8, C3-C6, и C3-C4, и т.п. Иллюстративно, такие алкениленовые и/или алкиниленовые группы с определенной ограниченной длиной, включая C2-C8, C2-C6, и C2-C4, и C3-C8, C3-C6, и C3-C4, и т.п. могут быть упомянуты как низший алкенилен и/или алкинилен. В данном контексте предполагается, что более короткие алкиленовые, алкениленовые и/или алкиниленовые группы могут меньше усиливать липофильность соединения и, соответственно, оно будет иметь другие фармакокинетические свойства. В вариантах реализации настоящего изобретения, описанных в данном документе, в каждом случае следует понимать, что упоминание алкилена, алкенилена и алкинилена относится к алкилену, алкенилену и алкинилену, определение которых приведено в данном документе, и необязательно к низшему алкилену, алкенилену и алкинилену. Иллюстративные алкильные группы включают, но не ограничиваются ими, метилен, этилен, н-пропилен, изопропилен, н-бутилен, изобутилен, втор-бутилен, пентилен, 1,2-пентилен, 1,3-пентилен, гексилен, гептилен, октилен и т.п.
В данном контексте термин «циклоалкил» включает цепь из атомов углерода, которая является необязательно разветвленной, причем по меньшей мере часть цепи представляет собой цикл. Следует понимать, что циклоалкилалкил представляет собой подмножество циклоалкила. Следует понимать, что циклоалкил может быть полициклическим. Иллюстративный циклоалкил включает, но не ограничивается ими, циклопропил, циклопентил, циклогексил, 2-метилциклопропил, циклопентилэт-2-ил, адамантил и т.п. В данном контексте термин «циклоалкенил» включает цепь из атомов углерода, которая является необязательно разветвленной и содержит по меньшей мере одну двойную связь, причем по меньшей мере часть цепи представляет собой цикл. Следует понимать, что одна или более двойных связей могут быть в циклической части циклоалкенила и/или в нециклической части циклоалкенила. Следует понимать, что циклоалкенилалкил и циклоалкилалкенил представляют собой подмножества циклоалкенила. Следует понимать, что циклоалкил может быть полициклическим. Иллюстративный циклоалкенил включает, но не ограничивается ими, циклопентенил, циклогексилэтен-2-ил, циклогептенилпропенил и т.п. Кроме того, следует понимать, что цепь, образующая циклоалкил и/или циклоалкенил, преимущественно имеет ограниченную длину, включая C3-C24, C3-C12, C3-C8, C3-C6 и C5-C6. В данном контексте предполагается, что более короткие алкильные и/или алкенильные цепи, образующие циклоалкил и/или циклоалкенил, соответственно, могут меньше усиливать липофильность соединения и, соответственно, оно будет иметь другие фармакокинетические свойства.
В данном контексте термин «гетероалкил» включает цепь атомов, которая содержит атомы углерода и по меньшей мере один гетероатом и является необязательно разветвленной. Иллюстративные гетероатомы включают азот, кислород и серу. В некоторых вариантах случаях иллюстративные гетероатомы также включают фосфор и селен. В данном контексте термин «циклогетероалкил», включая гетероциклил и гетероцикл, включает цепь из атомов, которая содержит атомы углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как гетероалкил, и является необязательно разветвленной, причем по меньшей мере часть цепи является циклической. Иллюстративные гетероатомы включают азот, кислород и серу. В некоторых вариантах случаях иллюстративные гетероатомы также включают фосфор и селен. Иллюстративный циклогетероалкил включает, но не ограничивается ими, тетрагидрофурил, пирролидинил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил, гомопиперазинил, хинуклидинил и т.п.
В данном контексте термин «арил» включает моноциклические и полициклические ароматические карбоциклические группы, каждая из которых может быть необязательно замещенной. Иллюстративные ароматические карбоциклические группы, описанные в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, фенил, нафтил и т.п. В данном контексте термин «гетероарил» включает ароматические гетероциклические группы, каждая из которых может быть необязательно замещенной. Иллюстративные ароматические гетероциклические группы включают, но не ограничиваются ими, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, триазинил, тетразинил, хинолинил, хиназолинил, хиноксалинил, тиенил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, тиазолил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, триазолил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензтиазолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил и т.п.
В данном контексте термин «амино» включает группу NH2, алкиламино и диалкиламино, причем две алкильные группы в диалкиламино могут быть одинаковыми или различными, т.е. алкилалкиламино. Иллюстративно, амино включает метиламино, этиламино, диметиламино, метилэтиламино и т.п. Кроме того, следует понимать, что если термин «амино» модифицирует или модифицирован другим термином, например, аминоалкил или ациламино, то приведенные выше варианты термина «амино» включены в него. Иллюстративно, аминоалкил включает H2N-алкил, метиламиноалкил, этиламиноалкил, диметиламиноалкил, метилэтиламиноалкил и т.п. Иллюстративно, ациламино включает ацилметиламино, ацилэтиламино и т.п.
В данном контексте термин «амино и его производные» включает амино, описанный в настоящем документе, и алкиламино, алкениламино, алкиниламино, гетероалкиламино, гетероалкениламино, гетероалкиниламино, циклоалкиламино, циклоалкениламино, циклогетероалкиламино, циклогетероалкениламино, ариламино, арилалкиламино, арилалкениламино, арилалкиниламино, гетероариламино, гетероарилалкиламино, гетероарилалкениламино, гетероарилалкиниламино, ациламино и т.п., каждый из которых является необязательно замещенным. Термин «производное амино» также включает мочевину, карбамат и т.п.
В данном контексте термин «гидрокси и его производные» включает OH и алкилокси, алкенилокси, алкинилокси, гетероалкилокси, гетероалкенилокси, гетероалкинилокси, циклоалкилокси, циклоалкенилокси, циклогетероалкилокси, циклогетероалкенилокси, арилокси, арилалкилокси, арилалкенилокси, арилалкинилокси, гетероарилокси, гетероарилалкилокси, гетероарилалкенилокси, гетероарилалкинилокси, ацилокси и т.п., каждый из которых является необязательно замещенным. Термин «производное гидрокси» также включает карбамат и т.п.
В данном контексте термин «тио и его производные» включает SH и алкилтио, алкенилтио, алкинилтио, гетероалкилтио, гетероалкенилтио, гетероалкинилтио, циклоалкилтио, циклоалкенилтио, циклогетероалкилтио, циклогетероалкенилтио, арилтио, арилалкилтио, арилалкенилтио, арилалкинилтио, гетероарилтио, гетероарилалкилтио, гетероарилалкенилтио, гетероарилалкинилтио, ацилтио и т.п., каждый из которых является необязательно замещенным. Термин «производное тио» также включает тиокарбамат и т.п.
В данном контексте термин «ацил» включает формил и алкилкарбонил, алкенилкарбонил, алкинилкарбонил, гетероалкилкарбонил, гетероалкенилкарбонил, гетероалкинилкарбонил, циклоалкилкарбонил, циклоалкенилкарбонил, циклогетероалкилкарбонил, циклогетероалкенилкарбонил, арилкарбонил, арилалкилкарбонил, арилалкенилкарбонил, арилалкинилкарбонил, гетероарилкарбонил, гетероарилалкилкарбонил, гетероарилалкенилкарбонил, гетероарилалкинилкарбонил, ацилкарбонил и т.п., каждый из которых является необязательно замещенным.
В данном контексте термин «карбонил и его производные» включает группу C(O), C(S), C(NH) и ее замещенные аминопроизводные.
В данном контексте термин «карбоновая кислота и ее производные» включает группу CO2H и ее соли, и ее сложные эфиры и амиды, и CN.
В данном контексте термин «сульфиновая кислота или ее производное» включает SO2H и ее соли, и ее сложные эфиры и амиды.
В данном контексте термин «сульфоновая кислота или ее производное» включает SO3H и ее соли, и ее сложные эфиры и амиды.
В данном контексте термин «сульфонил» включает алкилсульфонил, алкенилсульфонил, алкинилсульфонил, гетероалкилсульфонил, гетероалкенилсульфонил, гетероалкинилсульфонил, циклоалкилсульфонил, циклоалкенилсульфонил, циклогетероалкилсульфонил, циклогетероалкенилсульфонил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, арилалкенилсульфонил, арилалкинилсульфонил, гетероарилсульфонил, гетероарилалкилсульфонил, гетероарилалкенилсульфонил, гетероарилалкинилсульфонил, ацилсульфонил и т.п., каждый из которых является необязательно замещенным.
В данном контексте термин «гидроксиламино и его производные» включает NHOH и алкилоксиNH, алкенилоксиNH, алкинилоксиNH, гетероалкилоксиNH, гетероалкенилоксиNH, гетероалкинилоксиNH, циклоалкилоксиNH, циклоалкенилоксиNH, циклогетероалкилоксиNH, циклогетероалкенилоксиNH, арилоксиNH, арилалкилоксиNH, арилалкенилоксиNH, арилалкинилоксиNH, гетероарилоксиNH, гетероарилалкилоксиNH, гетероарилалкенилоксиNH, гетероарилалкинилоксиNH, ацилокси и т.п., каждый из которых является необязательно замещенным.
В данном контексте термин «гидразино и его производные» включает алкилNHNH, алкенилNHNH, алкинилNHNH, гетероалкилNHNH, гетероалкенилNHNH, гетероалкинилNHNH, циклоалкилNHNH, циклоалкенилNHNH, циклогетероалкилNHNH, циклогетероалкенилNHNH, арилNHNH, арилалкилNHNH, арилалкенилNHNH, арилалкинилNHNH, гетероарилNHNH, гетероарилалкилNHNH, гетероарилалкенилNHNH, гетероарилалкинилNHNH, ацилNHNH и т.п., каждый из которых является необязательно замещенным.
Термин «необязательно замещенный» в данном контексте включает замену атомов водорода другими функциональными группами у того радикала, который является необязательно замещенным. Такие другие функциональные группы иллюстративно включают, но не ограничиваются ими, амино, гидроксил, галоген, тиол, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил, нитро, сульфоновые кислоты и их производные, карбоновые кислоты и их производные и т.п. Иллюстративно, любой из амино, гидроксила, тиола, алкила, галогеналкила, гетероалкила, арила, арилалкила, арилгетероалкила, гетероарила, гетероарилалкила, гетероарилгетероалкила и/или сульфоновой кислоты является необязательно замещенным.
В данном контексте термины «необязательно замещенный арил» и «необязательно замещенный гетероарил» включают замену атомов водорода другими функциональными группами у арила или гетероарила, который является необязательно замещенным. Такие другие функциональные группы иллюстративно включают, но не ограничиваются ими, амино, гидрокси, галоген, тио, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил, нитро, сульфоновые кислоты и их производные, карбоновые кислоты и их производные и т.п. Иллюстративно, любой из амино, гидрокси, тио, алкила, галогеналкила, гетероалкила, арила, арилалкила, арилгетероалкила, гетероарила, гетероарилалкила, гетероарилгетероалкила и/или сульфоновой кислоты является необязательно замещенным.
Иллюстративные заместители включают, но не ограничиваются ими, радикал -(CH2)xZX, где x представляет собой целое число от 0 до 6, и ZX выбран из галогена, гидрокси, алканоилокси, включая C1-C6 алканоилокси, необязательно замещенного ароилокси, алкила, включая C1-C6 алкил, алкокси, включая C1-C6 алкокси, циклоалкила, включая C3-C8 циклоалкил, циклоалкокси, включая C3-C8 циклоалкокси, алкенила, включая C2-C6 алкенил, алкинила, включая C2-C6 алкинил, галогеналкила, включая C1-C6 галогеналкил, галогеналкокси, включая C1-C6 галогеналкокси, галогенциклоалкила, включая C3-C8 галогенциклоалкил, галогенциклоалкокси, включая C3-C8 галогенциклоалкокси, амино, C1-C6 алкиламино, (C1-C6 алкил)(C1-C6 алкил)амино, алкилкарбониламино, N-(C1-C6 алкил)алкилкарбониламино, аминоалкила, C1-C6 алкиламиноалкила, (C1-C6 алкил)(C1-C6 алкил)аминоалкила, алкилкарбониламиноалкила, N-(C1-C6 алкил)алкилкарбониламиноалкила, циано и нитро; или ZX выбран из -CO2R4 и -CONR5R6, где R4, R5 и R6, каждый независимо, в каждом случае выбраны из водорода, C1-C6 алкила, арил-C1-C6 алкила и гетероарил-C1-C6 алкила.
Термин «пролекарство» в данном контексте, в целом, относится к любому соединению, которое при введении в биологическую систему образует биологически активное соединение в результате одной или более самопроизвольных химических реакций, катализируемых ферментами химических реакций и/или метаболических химических реакций, или их комбинации. In vivo, пролекарство обычно подвергается действию фермента (такого как эстеразы, амидазы, фосфатазы и т.п.), обычной биологической химии или другого процесса in vivo, высвобождая или восстанавливая более фармакологически активное лекарственное соединение. Такая активация может возникать под действием эндогенного фермента хозяина или неэндогенного фермента, который вводят в организм хозяина до, после или во время введения пролекарства. Дополнительная информация о применении пролекарств представлена в патенте США № 5627165. Следует понимать, что пролекарство преимущественно превращается в исходное лекарственное соединение по достижении цели, такой как направленная доставка, безопасность, стабильность и т.п., после чего происходит быстрое элиминирование высвобожденных остатков группы, образующей пролекарство.
Пролекарства можно получать из соединений, описанных в настоящем документе, посредством присоединения групп, которые, в конечном итоге, расщепляются in vivo на одну или более функциональных групп, присутствующих в исходном соединении, таких как -OH-, -SH, -CO2H, -NR2. Иллюстративные пролекарства включают, но не ограничиваются ими, карбоксилатные сложные эфиры, где указанная группа представляет собой алкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, ацилоксиалкил, алкоксикарбонилоксиалкил, а также сложные эфиры гидроксила, тиола и аминов, где указанная присоединенная группа представляет собой ацильную группу, алкоксикарбонил, аминокарбонил, фосфат или сульфат. Иллюстративные сложные эфиры, также упоминаемые как активные сложные эфиры, включают, но не ограничиваются ими, 1-инданил, N-оксисукцинимид; ацилоксиалкильные группы, такие как ацетоксиметил, пивалоилоксиметил, β-ацетоксиэтил, β-пивалоилоксиэтил, 1-(циклогексилкарбонилокси)проп-1-ил, (1-аминоэтил)карбонилоксиметил и т.п.; алкоксикарбонилоксиалкильные группы, такие как этоксикарбонилоксиметил, α-этоксикарбонилоксиэтил, β-этоксикарбонилоксиэтил и т.п.; диалкиламиноалкильные группы, включая ди(низший алкил)аминоалкильные группы, такие как диметиламинометил, диметиламиноэтил, диэтиламинометил, диэтиламиноэтил и т.п.; 2-(алкоксикарбонил)-2-алкенильные группы, такие как 2-(изобутоксикарбонил)пент-2-енил, 2-(этоксикарбонил)бут-2-енил и т.п.; и лактоновые группы, такие как фталидил, диметоксифталидил и т.п.
Дополнительные иллюстративные пролекарства содержат химический фрагмент, такой как амидная или фосфорсодержащая группа, для увеличения растворимости и/или стабильности соединений, описанных в настоящем документе. Дополнительные иллюстративные пролекарства аминогрупп включают, но не ограничиваются ими, (C3-C20)алканоил; галоген-(C3-C20)алканоил; (C3-C20)алкеноил; (C4-C7)циклоалканоил; (C3-C6)-циклоалкил(C2-C16)алканоил; необязательно замещенный ароил, такой как незамещенный ароил или ароил, замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, циано, трифторметансульфонилокси, (C1-C3)алкила и (C1-C3)алкокси, каждый из которых необязательно дополнительно замещен одним или более из 1-3 атомов галогена; необязательно замещенный арил(C2-C16)алканоил и необязательно замещенный гетероарил(C2-C16)алканоил, такой как арильный или гетероарильный радикал, незамещенный или замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, (C1-C3)алкила и (C1-C3)алкокси, каждый из которых необязательно дополнительно замещен 1-3 атомами галогена; и необязательно замещенный гетероарилалканоил, содержащий от одного до трех гетероатомов, выбранных из O, S и N, в гетероарильном фрагменте и от 2 до 10 атомов углерода в алканоильном фрагменте, такой как гетероарильный радикал, незамещенный или замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, циано, трифторметансульфонилокси, (C1-C3)алкила и (C1-C3)алкокси, каждый из которых необязательно дополнительно замещен 1-3 атомами галогена. Приведенные группы являются иллюстративными, не исчерпывающими, и могут быть получены обычными способами.
Следует понимать, что сами пролекарства могут не обладать существенной биологической активностью, но подвергаться одной или более самопроизвольным химическим реакциям, катализируемым ферментами химическим реакциям и/или метаболическим химическим реакциям, или их комбинациям после введения in vivo с образованием соединения, описанного в настоящем документе, которое является биологически активным или является предшественником биологически активного соединения. Однако следует понимать, что в некоторых случаях пролекарство является биологически активным. Также следует понимать, что пролекарства часто могут служить для повышения эффективности или безопасности лекарственного соединения благодаря улучшению пероральной биодоступности, фармакодинамического периода полувыведения и т.п. Также пролекарства относятся к производным соединений, описанных в настоящем документе, которые содержат группы, просто маскирующие нежелательные свойства лекарственного соединения или улучшающие доставку лекарственного соединения. Например, одно или более соединений, описанных в настоящем документе, могут демонстрировать нежелательное свойство, которое преимущественно блокируют или минимизируют, которое может быть фармакологическим, фармацевтическим или фармакокинетическим препятствием для клинического применения лекарственного средства, такое как низкое усвоение лекарственного соединения при пероральном введении, недостаточная сайт-специфичность, химическая нестабильность, токсичность и неудовлетворенность пациента (плохой вкус, запах, боль в зоне инъекции и т.п.) и др. Следует понимать, что в данном контексте пролекарство или другая стратегия с применением обратимых производных может быть подходящей для оптимизации клинического применения лекарственного соединения.
В данном контексте термин «уходящая группа» относится к реакционноспособной функциональной группе, которая образует электрофильный сайт на атоме, к которому она присоединена, так что к электрофильному сайту атома могут присоединяться нуклеофилы. Иллюстративные уходящие группы включают, но не ограничиваются ими, галогены, необязательно замещенные фенолы, ацилокси-группы, сульфонокси-группы и т.п. Следует понимать, что такие уходящие группы могут быть у алкила, ацила и т.п. Такие уходящие группы также могут быть упомянуты в настоящем документе как активирующие группы, например, если уходящая группа находится у ацила. Кроме того, обычные агенты, связывающие пептиды, амиды и сложные эфиры, такие как, но не ограничиваясь ими, PyBop, BOP-Cl, BOP, пентафторфенол, изобутилхлорформиат и т.п., образуют различные промежуточные соединения, которые содержат уходящую группу, как описано в настоящем документе, у карбонильной группы.
Следует понимать, что в каждом случае, описанном в настоящем документе, упоминание диапазона целых чисел для любой переменной описывает указанный диапазон, каждый отдельный элемент в диапазоне и каждый возможный поддиапазон для данной переменной. Например, упоминание того, что n представляет собой целое число от 0 до 8, описывает указанные диапазон, отдельные и выбираемые значения 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8, например, n равен 0, или n равен 1, или n равен 2 и т.д. Кроме того, упоминание того, что n представляет собой целое число от 0 до 8 также описывает каждый и все поддиапазоны, каждый из которых может быть основанием для дополнительного варианта реализации, например, n представляет собой целое число от 1 до 8, от 1 до 7, от 1д о 6, от 2 до 8, от 2 до 7, от 1 до 3, от 2 до 4 и т.д.
В данном контексте «обработка», «приведение во взаимодействие» или «осуществление реакции» в отношении химической реакции, в целом, означает добавление или смешивание двух или более реагентов в соответствующих условиях, которые обеспечивают возможность химического превращения или протекания химической реакции и/или образования указанного и/или требуемого продукта. Следует понимать, что реакция, в которой получают указанный и/или требуемый продукт, не обязательно может напрямую возникать в результате объединения двух реагентов, которые добавлены первоначально. Другими словами, может присутствовать одно или более промежуточных соединений, образованных в смеси, которые, в конечном итоге, приводят к образованию указанного и/или требуемого продукта.
В данном контексте термин «композиция» обычно относится к любому продукту, содержащему указанные ингредиенты в указанных количествах, а также к любому другому продукту, который прямо или косвенно образуется в результате объединения указанных ингредиентов в указанных количествах. Следует понимать, что композиции, описанные в настоящем документе, могут быть получены из выделенных соединений, описанных в настоящем документе, или из солей, растворов, гидратов, сольватов и других форм соединений, описанных в настоящем документе. Также следует понимать, что композиции могут быть получены из различных аморфных, не аморфных, частично кристаллических, кристаллических и/или других морфологических форм соединений, описанных в настоящем документе. Также следует понимать, что композиции могут быть получены из различных гидратов и/или сольватов соединений, описанных в настоящем документе. Соответственно, следует понимать, что такие фармацевтические композиции, которые содержат соединения, описанные в настоящем документе, содержат каждую или любую комбинацию различных морфологических форм и/или сольватных или гидратных форм соединений, описанных в настоящем документе. Кроме того, следует понимать, что композиции могут быть получены из различных сокристаллов соединений, описанных в настоящем документе.
Иллюстративно, композиции могут содержать один или более носителей, разбавителей и/или вспомогательных веществ. Соединения, описанные в настоящем документе, или композиции, содержащие их, могут быть составлены в терапевтически эффективном количестве в любых традиционных лекарственных формах в соответствии со способами, описанными в настоящем документе. Соединения, описанные в настоящем документе, или композиции, содержащие их, включая такие лекарственные формы, можно вводить различными традиционными путями в соответствии со способами, описанными в настоящем документе, и в различных лекарственных формах, с применением известных процедур (см., в общем, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, (21е изд., 2005)).
Термин «терапевтически эффективное количество» в данном контексте относится к такому количеству активного соединения или фармацевтического агента, которое вызывает биологический или медицинский ответ в тканевой системе, в организме животного или человека, который ожидается исследователем, ветеринаром, лечащим врачом или другим клиницистом, который включает облегчение симптомов заболевания или расстройства, подлежащего лечению. В одном аспекте терапевтически эффективное количество представляет собой количество, которое может обеспечивать лечение или облегчение заболевания или симптомов заболевания при разумном соотношении польза/риск, применимом для любого терапевтического лечения. Однако следует понимать, что общая суточная доза соединений и композиций, описанных в настоящем документе, может быть определена лечащим врачом с медицинской точки зрения. Конкретный уровень терапевтически эффективной дозы для любого конкретного пациента зависит от множества факторов, включая расстройство, подлежащее лечению, и тяжесть расстройства; активность конкретного используемого соединения; конкретную используемую композицию; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и рацион пациента; время введения, способ введения и скорость экскреции конкретного используемого соединения; продолжительность лечения; лекарства, используемые в комбинации или параллельно с конкретным используемым соединением; и подобные факторы, хорошо известные исследователям, ветеринарам, врачам или другим клиницистам средней квалификации.
Также следует понимать, что терапевтически эффективное количество, которое относится к монотерапии или комбинированной терапии, преимущественно выбирают с учетом токсичности или других нежелательных побочных эффектов, которые могут возникать при введении одного или более соединений, описанных в настоящем документе. Кроме того, следует понимать, что совместная терапия, описанная в настоящем документе, может обеспечивать возможность введения более низких доз соединений, демонстрирующих такую токсичность или другой нежелательный побочный эффект, причем указанные более низкие дозы находятся ниже пороговых значений токсичности или ниже в терапевтическом окне, чем при их введении в отсутствие совместной терапии.
Помимо иллюстративных доз и схем введения доз, описанных в настоящем документе, следует понимать, что эффективное количество любого соединения или смеси соединений, описанных в настоящем документе, может быть без труда установлено диагностом или лечащим врачом с помощью известных технологий и/или по результатам, полученным в аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного количества или дозы диагност или лечащий врач учитывает множество факторов, включая, но не ограничиваясь ими, вид млекопитающего, включая человека, его размер, возраст и общее состояние здоровья, конкретное вовлеченное заболевание или расстройство, степень или вовлеченность, или тяжесть заболевания или расстройства, ответ конкретного пациента, конкретное введенное соединение, способ введения, характеристики биодоступности введенного препарата, выбранную схему лечения, применение сопутствующих лекарственных средств и другие релевантные обстоятельства.
Доза каждого соединения в предложенных комбинациях зависит от нескольких факторов, включая: способ введения, патологическое состояние, подлежащее лечению, тяжесть патологического состояния, необходимость лечения или предупреждения патологического состояния, а также возраст, массу и состояние здоровья субъекта, подлежащего лечению. Кроме того, на используемую дозу может влиять фармакогеномная информация о конкретном пациенте (влияние генотипа на фармакокинетику, фармакодинамику или профиль эффективности терапевтического препарата).
Следует понимать, что в способах, описанных в настоящем документе, отдельные компоненты для совместного введения или комбинацию можно вводить любым подходящим способом, в одно время, одновременно, последовательно, раздельно или в одной фармацевтической форме. Если совместно вводимые соединения или композиции вводят в разных лекарственных формах, то количество доз, введенных за сутки, для каждого соединения может быть одинаковым или различным. Соединения или композиции можно вводить одним и тем же или разными способами введения. Соединения или композиции можно вводить в соответствии с одновременной или чередующейся схемой, в одно или в разное время в течение курса терапии, параллельно в дробных или единичных формах.
Термин «введение» в данном контексте включает все способы введения соединений и композиций, описанных в настоящем документе, животному-хозяину, включая, но не ограничиваясь ими, пероральный (po), внутривенный (iv), внутримышечный (im), подкожный (sc), трансдермальный, ингаляции, буккальный, офтальмологический, сублингвальный, вагинальный, ректальный и т.п. Соединения и композиции, описанные в настоящем документе, можно вводить в единичных лекарственных формах и/или в лекарственных формах, содержащих обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и/или среды.
При получении фармацевтических композиций соединений, описанных в настоящем документе, терапевтически эффективное количество одного или более соединений в любой из множества различных форм, описанных в настоящем документе, можно смешивать с одним или более вспомогательными веществами, разбавлять одним или более вспомогательными веществами или вводить в такой носитель, который может быть в форме капсулы, саше, бумажной или другой упаковки. Вспомогательные вещества могут служить в качестве разбавителя и могут быть твердыми, полутвердыми или жидкими материалами, которые действуют как несущая основа, носитель или среда для активного ингредиента. Таким образом, композиции лекарственных форм могут быть в форме таблеток, пилюль, порошков, лепешек, саше, капсул, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (в виде твердого вещества или в жидкой среде), мазей, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных растворов для инъекций или стерильных фасованных порошков. Композиции могут содержать любое количество, от примерно 0,1% до примерно 99,9% активных ингредиентов, в зависимости от выбранной дозы и лекарственной формы.
Термин «антагонист» в данном контексте относится к полному или частичному антагонисту. Несмотря на то, что подходящим может быть частичный антагонист с любой собственной активностью, частичные антагонисты иллюстративно демонстрируют по меньшей мере примерно 50% антагонистический эффект, или по меньшей мере примерно 80% антагонистический эффект. Данный термин также включает соединения, которые являются полными антагонистами одного или более рецепторов вазопрессина. Следует понимать, что для иллюстративных способов, описанных в настоящем документе, необходимы терапевтически эффективные количества антагонистов рецептора вазопрессина; следовательно, соединения, демонстрирующие частичный антагонизм у одного или более рецепторов вазопрессина, могут быть введены в более высоких дозах для достижения достаточной антагонистической активности для ингибирования действия вазопрессина или агониста вазопрессина.
Эффективное применение соединений, композиций и способов, описанных в настоящем документе для лечения или облегчения одного или более эффектов повреждения головного мозга с применением одного или более соединений, описанных в настоящем документе, может быть основано на животных моделях, таких как животные модели заболевания на мышах, собаках, свиньях и низших приматах. Например, следует понимать, что повреждения головного мозга у людей могут характеризоваться потерей функции и/или развитием симптомов, каждый из которых может быть вызван у животных, таких как мыши и другие суррогатные экспериментальные животные. В частности, мышиные модели, описанные в настоящем документе, можно использовать для оценки способов лечения и фармацевтических композиций, описанных в настоящем документе, для определения терапевтически эффективных количеств, описанных в настоящем документе.
Каждая публикация, цитированная в настоящем документе, включена в него посредством ссылки.
Следующие примеры дополнительно иллюстрируют конкретные варианты реализации настоящего изобретения; однако следующие иллюстративные примеры никоим образом не следует толковать как ограничение настоящего изобретения.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕРЫ СПОСОБА
ПРИМЕР. Модель контролируемого кортикального повреждения от удара. Вкратце, экспериментальных животных сначала анестезировали изофлураном (4,5%), интубировали и механически вентилировали газообразной смесью N2O (66%), O2 (32%) и изофлурана (1,5-2,0%). Ректальную температуру поддерживали при 37,0 ± 0,5 °C с помощью саморегулирующейся грелки-подушки. В бедренную артерию и вену вставляли катетеры. Непрерывно контролировали среднее артериальное кровяное давление (mABP) с помощью системы для сбора данных, и записывали параметры газов артериальной крови (pH, pO2, pCO2 и концентрация Na+) с 15-минутными интервалами. Бедренную вену использовали для введения носителя, диметилсульфоксида (ДМСО) или одного или более соединений, описанных в настоящем документе. Животных фиксировали на стереотаксической рамке. Делали разрез скальпа со средней линии и оттягивали кожу и надкостницу с поверхности черепа. Делали краниотомию диаметром 10 мм посередине между брегмой и лямбдой с правой стороны, на 1 мм в сторону от средней линии. Повреждение создавали с помощью пневматического импактора (например, диаметром 5 мм), установленным под углом (например, 10°) к вертикальной плоскости. Осуществляли один удар (например, со скоростью 6 м/с; глубина деформации 3,0 мм; время задержки 0,3 с) в правой части теменной коры. После повреждения заменяли вырезанный фрагмент черепа, закрывали костным воском и смыкали разрез кожи. Контрольных животных подвергали такой же хирургической операции без осуществления повреждения пневматическим импактором. Дополнительные подробности описаны в публикациях Dixon et al., “A fluid percussion model of experimental brain injury in the rat” J Neurosurg 67:110-119 (1987) и Taya et al., “Modulation of AQP4 expression by the selective V1a receptor antagonist, SR49059, decreases trauma-induced brain edema” Acta Neurochir 102 (Suppl.): S425-S429 (2008).
ПРИМЕР. Модель воздействия с обменом импульса. Указанная модель имеет несколько преимущественных трансляционных отличий от некоторых моделей повреждения головы, таких как модель контролируемого кортикального повреждения от удара. Например, при ударе может двигаться голова, шея и туловище, и скорость движения головы и перенос энергии можно рассчитать и несколько масштабировать с получением диапазона от умеренного до тяжелого сотрясения. Проводили исследования с умеренным воздействием с нейрорадиологическими данными ушиба. Самцов крыс подвергали сотрясению мозга два раза за один день. Дополнительная информация представлена в публикации Viano et al., “Evaluation of three animal models for concussion and serious brain injury” Ann Biomed Eng. 40(1):213-26 (2012). В течение 24 часов после первого испытания сотрясения животным вводили носитель или экспериментальное соединение, такое как высокоселективный антагонист рецептора V1a, который пересекает гематоэнцефалический барьер. Контрольным экспериментальным животным, не подверженным сотрясению, вводили носитель или экспериментальное соединение. Экспериментальных животных лечили дважды в день в течение 5 последовательных дней. Через две недели после сотрясения оценивали когнитивное поведение, используя, например, модели лабиринта Барнеса и/или распознавания нового объекта. Кроме того, оценивали двигательные характеристики, например, с помощью тестов движения на брусе и/или вращающегося стержня. В каждом случае также проводили нейрорадиологическую МРТ.
ПРИМЕР. Визуализация нейроанатомии. В начале каждого сеанса визуализации собирали анатомические данные высокого разрешения, используя последовательность импульсов RARE (20 срезов; 1 мм; поле зрения [FOV] 3,0 см; 256 × 256; время повторения [TR] 2,5 с; время эхо-задержки [TE] 12,4 мс; NEX 6; время записи 6,5 минуты).
ПРИМЕР. T2 Релаксометрическое измерение отека. МРТ проводили через 24-28 дней после повреждения для оценки объема отека в боковых желудочках, используя T2 релаксометрию. Время визуализации основано на крысиной модели, использованной для оценки TBI в компании Charles River. Изображения записывали с использованием последовательности импульсов мульти-срезы мульти-эхо (MSME). Время эхо-задержки (TE) иллюстративно составляет 11 мс, и за время визуализации записывали 16 эхо с временем восстановления (TR) 2500 мс. Изображения записывали для поля зрения [FOV] 3 см2, матрица данных = 256×256×20 срезов, толщина = 1 мм. Значения для времени продольной релаксации (T2) для всех срезов получали с помощью программного обеспечения ParaVison 5.1. T2 использовали для описания объема отека в боковом желудочке. Значения T2 использовали для сегментации и количественной оценки объема желудочка. Значения T2 рассчитывали по уравнению: y = A+Cexp (-t/T2) (взвешенное С.О.), полученному из программного обеспечения Paravision 5.1, где A = абсолютный наклон, C = интенсивность сигнала, t = время эхо-задержки, и T2 = время спин-спиновой релаксации. Желудочек описывали как область гиперинтенсивности на карте T2 для трех 1-мм срезов. Объем рассчитывали с помощью алгоритма «Snake region growth» в itk-SNAP (www.itksnap.org). Пороговое значение иллюстративно устанавливали на 6300 - 9000 в качестве абсолютной интенсивности пикселя. Точку устанавливали в желудочек и запускали алгоритм до завершения сегментации.
ПРИМЕР. Функциональная связность в состоянии покоя. Получали скан фМРТ в состоянии покоя, используя спин-эхо последовательность ЭПВ (эхо-планарной визуализации) с тройным импульсом (параметры визуализации: размер матрицы = 96 x 96 x 20, TR/TE=3000/15 мс, размер воксела = 0,312 x 0,312 x 0,12 мм, толщина среза = 1 мм. Предварительную обработку иллюстративно осуществляли посредством комбинации анализа функциональных нейроизображений (AFNI_17.1.12, http://afni.nimh.nih.gov/afni/), библиотеки программного обеспечения FMRIB (FSL, v5.0.9, http://fsl.fmrib.ox.ac.uk/fsl/), деформируемой регистрации посредством сопоставления атрибутов и взвешивания взаимной значимости (DRAMMS 1.4.1, https://www.cbica.upenn.edu/sbia/software/dramms/index.html) и MATLAB (Mathworks, Натик, штат Массачусетс). Маски ткани головного мозга для функциональных изображений в состоянии покоя рисовали вручную с помощью 3DSlicer (https://www.slicer.org/) и использовали для обнажения черепа. Нормализацию осуществляли посредством регистрации функциональных данных в МРТ шаблоне головного мозга крыс (Ekam Solutions LLC, Бостон, штат Массачусетс) с применением аффинной регистрации с помощью DRAMMS. Метод функциональной связности между областями иллюстративно осуществляли для измерения корреляций в самопроизвольных флуктуациях BOLD. Сетчатая структура состояла из узлов и ребер; узлы представляют рассматриваемую область головного мозга (ROI), а ребра представляют собой взаимосвязи между областями. Узлы определяли с помощью ROI, сегментированных из соответствующего атласа МРТ головного мозга крыс. Иллюстративно, определяли 171 узел. Данные временного ряда вокселей усредняли в каждом узле на основании остаточных изображений с помощью методики регрессии помех. Вычисляли коэффициенты корреляции Пирсона для всех пар узлов (14535 пар дл 171 узла) для каждого субъекта во всех трех группах для оценки временных корреляций между областями. Значения r (от -1 до 1) подвергали z-преобразованию с использованием Z-трансформации Фишера для улучшения нормальности. Для 171 узла строили 171 х 171 симметричных матриц связности, где каждое значение представляет собой интенсивность ребра. Проводили анализ на уровне группы для определения функциональной связности в контрольной группе, в группе с одним совпадением и в группе с тремя совпадениями. Полученные матрицы Z-оценок из t-критериев в одной группе группировали методом кластеризации K-ближайших соседей для определения того, как узлы объединяются в кластеры и образуют сети в состоянии покоя. Использовали пороговое значение Z-оценки |Z|=2,3 для исключения ложных или слабых связей между узлами для визуализации.
ПРИМЕР. Лечение в модели воздействия с обменом импульса с использованием соединений, описанных в настоящем документе. Самцов крыс Спрага-Доули (n=19; 250-270 г) возрастом 65 дней приобретали у компании Charles River (Вустер, штат Массачусетс). Экспериментальных животных выдерживали при 12:12 цикле освещения:темноты при включении света в 0700, и обеспечивали свободный доступ к корму и воде. Протоколы, использованные в данном исследовании, соответствуют требованиям институционального комитета по уходу за животными и их использованию Северо-Восточного университета.
Привод пневматического давления представляет собой дублированный 50 г компактор, описанный в публикации Viano, последовательно создающий скорость удара 7,4, 9,3 и 11,2 м/с, описанную для умеренного, среднего и тяжелого повреждения головы, соответственно. Данные, описанные в настоящем документе, записывали при скорости удара 9,12 м/с, которую определяли по высокоскоростным видеозаписям.
Начиная с периода после рождения (P)70, животных делили на 3 группы (n = 6-7/группа; контрольная группа (контроль, CG), группа с повреждением (IG) и группа лечения (TG)) и начинали осуществлять удары по голове и применять схемы лечения. Все группы анестезировали 4% изофлураном в кислороде, и в группе с повреждением и в группе лечения осуществляли первый из двух ударов по голове, используя пользовательские настройки из программы визуализирующего исследования животных (AIR; Холден, штат Массачусетс) на P70. На следующий день после удара (P71) в группе лечения и в контрольной группе осуществляли введение экспериментального соединения, такого как AVN576. Кроме того, в контрольной группе с чистым носителем (VCG) осуществляли введение солевого раствора. Введение осуществляли в контрольной и в группе лечения два раза в день в 0700 и в 1400 (IP, 10 мг/кг). Схему лечения продолжали следующие 4 дня (всего 5 дней). Второй удар по голове осуществляли через два дня после первого удара на P72. Через две недели после удара животных визуализировали и проверяли когнитивные и двигательные характеристики. Во всех проведенных исследованиях не наблюдали существенного различия между контрольной группой (CG), принимающей экспериментальные соединения, и контрольной группой с чистым носителем (VCG), в которой вводили носитель.
Контуженные животные без лечения (группа с повреждением) демонстрировали существенное нарушение когнитивного поведения, измененную схему функциональной связности и показатели анизотропии, расположенные в заднем мозге и миндалине. Животные в группе лечения, которых подвергали сотрясению и лечению соединением из примера 266 (AVN576), демонстрировали отсутствие нарушения способности к обучению и памяти, а также отсутствие существенного отличия от контрольной группы. Аналогично, не наблюдали существенного отличия общих двигательных характеристик в контрольной группе и в группе лечения. Животные в группе лечения также демонстрировали улучшенную функциональную связность, даже по сравнению с контрольной группой в системе нейронных связей, связанной с обучением, познаванием, памятью и вниманием.
Многократное умеренное травматическое повреждение головного мозга с использованием модели обмена импульса обеспечивало получение наглядных нейрорадиологических данных контузии, признаков воспаления и повреждения белого вещества. Повреждение головного мозга у животных без лечения вызывало существенное нарушение познавательной функции, способности к обучению и памяти.
Повреждение головного мозга у экспериментальных животных без лечения было связано с увеличенным объемом боковых желудочков, что свидетельствует об усиленном воспалении и отеке. Лечение соединениями, описанными в настоящем документе, в течение 5 дней обеспечивало снижение роста отеков в боковых желудочках. Животные в группе лечениятакже демонстрировали существенное уменьшение отека вследствие повреждения вблизи очага воздействия. Не наблюдали статистической разницы между группой лечения и контрольной группой, что свидетельствует о полном восстановлении или исцелении после удара. Полное восстановление/исцеление отека было совершенно неожиданным. Несмотря на то, что в других исследованиях общее содержание воды в головном мозге было заметно снижено на 1-2%, не описано ни уменьшение какого-либо отека, ни полное восстановление до исходного состояния. Kleindienst et al., Acta Neurochir 155:151-64 (2013); Marmarou et al. Brain Research 1581:89-102 (2014).
Повреждение головного мозга у экспериментальных животных без лечения также приводило к гипосвязности в важных сетях головного мозга, таких как гиппокампальная система нейронных связей. Лечение соединениями, описанными в настоящем документе, усиливало гиперсвязность в гиппокампальной системе нейронных связей. Лечение в течение 24 часов после первого сотрясения с применением соединений, описанных в настоящем документе, обеспечивало предотвращение и полное восстановление нарушений когнитивной функции, познавательной способности и памяти, которые возникают после повреждения головного мозга. Группа лечения демонстрировала поведенческие характеристики, которые существенно не отличались от контрольных групп, что свидетельствует о полном восстановлении или исцелении после удара. Полное восстановление/исцеление от нарушений когнитивной функции, познавательной способности и памяти было совершенно неожиданным. До настоящего времени не было описано, что нарушение когнитивной функции, познавательной способности и памяти, обусловленное повреждением головного мозга, можно облегчать посредством антагонизма Va1R.
Не ограничиваясь теорией, полагают, что соединения, описанные в настоящем документе, могут обеспечивать лечение когнитивных и нейробиологических эффектов при умеренных и тяжелых повреждениях головного мозга посредством не только уменьшения воспаления и отека, вызванного повреждением головного мозга, но и улучшения нейроадаптивных изменений в функциональной связности, компенсируя действие травмы. Например, животные в группе лечения демонстрировали гиперсвязность даже по сравнению с животными в контрольной группе, которые не были травмированы, но принимали лечение. Наблюдаемая гиперсвязность связана с сетью пассивного режима работы мозга, представленной контрольными группами, причем группа с повреждением демонстрирует сильную гипосвязность. Не ограничиваясь теорией, полагают, что гиперсвязность, возникающая в результате лечения соединениями, описанными в настоящем документе, может отражать реорганизацию интегрированных нейронных сетей, которые сохраняют функцию в ответ на повреждение головного мозга. Кроме того, нарушенная связность является показателем диффузного аксонального повреждения и, следовательно, результаты, полученные в настоящем документе для моделей удара, таких как rmTBI, применимы к другим повреждениям головного мозга, включая, но не ограничиваясь ими, травматическое повреждение головного мозга, TBI при контузии, церебральный отек, хроническую травматическую энцефалопатию (CTE), субарахноидальное кровоизлияние, инсульт, ишемический инсульт, сотрясение и падения.
ПРИМЕР. Результаты теста на распознавание новых объектов. В данном испытании оценивали эпизодическое обучение и распознавание стимулов, связанных с памятью. На фиг. 1 показано, что животные в группе с повреждением (IG) проводили существенно меньше времени (индекс распознавания), по сравнению с вероятностью (50% от общего изучения объекта) изучения нового объекта (t(5) = 3,393, p < 0,05). Напротив, животные в контрольной группе (CG) (t(6) = 3,08, p < 0,05) и животные в группе лечения (TG) (t(5) = 2,61, p < 0,05) проводили существенно больше времени, чем вероятное время изучения нового объекта. При сравнении между группами, все группы проводили существенно больший процент времени с новым объектом, по сравнению с группой с травмой (CG: P = 0,0006, TG: P = 0,003; апостериорный анализ Тьюки после однофакторного дисперсионного анализа, F(3,21) = 9,14, P = 0,0005). Аналогично, контрольная группа (P = 0,006) и группа лечения (P = 0,02) проводили существенно большее количество общего времени с новым объектом, по сравнению с животными в группе с повреждением (однофакторный дисперсионный анализ, F(3,21) = 5,78, P = 0,005). Эксплоративный индекс (случаи нового исследования/общее количество случаев исследования любого объекта) показал, что группы по-разному вели себя в зависимости от воздействия AVN576 (однофакторный дисперсионный анализ, F(3,21) = 4,48, P = 0,01), причем лишь животные в контрольной группе демонстрировали существенно более высокое количество случаев исследования, чем животные в группе с повреждением (P = 0,01), а животные в группе лечения демонстрировали только тренд в сторону значимости (P = 0.06).
ПРИМЕР. Результаты теста в лабиринте Барнеса. В данном тесте оценивают пространственное обучение и память. Группа с повреждением демонстрировала существенный дефицит поведенческих свойств познавания, а группа лечения не демонстрировала никакого дефицита способности к обучению и памяти и не отличалась ни от одной контрольной группы (CG и/или VCG), как показано на фиг. 2A и фиг. 2B.
При сложении за несколько дней испытания, тест в лабиринте Барнеса показал, что животные в группе IG тратили больше времени на поиск нужний коробки, чем животные в контрольных группах (VCG: P = 0,03, CG: P = 0,01) и в группе лечения (P = 0,04; апостериорный анализ Тьюки после однофакторного дисперсионного анализа, F(3,21) = 4,88, P = 0,009). Аналогично, животные в группе с повреждением проходили большее расстояние при исследовании лабиринта до обнаружения нужний коробки, по сравнению с животными в группе CG (P = 0,009) и TG (P = 0,03). Кроме того, животные в группе с повреждение проводили существенно больше времени на исследование ложных ходов (продолжительность ошибки) по сравнению с животными CG (P = 0,03) и TG (P = 0,03; апостериорный анализ Тьюки после однофакторного дисперсионного анализа, F(3,21) = 3,95, P = 0,02). Оценка пройденного расстояния дала такие же результаты (данные не показаны). Если раздели продолжительность ошибки на дни, то существуют дополнительные различия между группами и по дням (дисперсионный анализ смешанного плана, основное влияние дня: F(3,63) = 9,10, P < 0,0001; и группы: F(3,21) = 3,95, P = 0,02). Животные в группе с повреждением допускали существенно больше ошибок на 1 день по сравнению с животными CG (P = 0,07); и на 2 день по сравнению с животными CG (P = 0,01) и животными TG (P = 0,02). Оценка пройденного расстояния и разбивка по дням дала такие же результаты (данные не показаны).
ПРИМЕР. Функциональная связность в состоянии покоя. На фиг. 3 представлены матрицы корреляции 166 зон головного мозга крыс для функциональной связности в состоянии покоя (rsFC) при сравнении группы с повреждением и группы лечения. Зоны головного мозга с существенной корреляцией часто выглядят как кластеры, поскольку они являются непрерывными по своей нейроанатомии и функции. Такие кластеры включают области:
A: Гипоталамус
B: Дорсальный гиппокамп - CA1, CA3, борозда
C: Таламус
D: Сенсомоторная кора и дорсальный стриатум - (двигательная кора, передняя поясная кора, кора первичного сигмовидного синуса), дорасальный стриатум
E. Префронтальная кора и вентральный стриатум (прелимбическая кора, инфралимбическая кора, вентральная и орбитальная), (вентральный стриатум)
F. Миндалина и грушевидная/островковая кора
G. Вентральный гиппокамп и лобная кора - CA1, CA3, борозда
H. Мозжечок - все доли, ножка 1 и 2, среднее церебеллярное ядро, (ядро шатра мозжечка)
I. Медулла ретикулярной активирующей системы и мозжечок (промежуточное ядро, связка, 10я долька), (гигантоклеточное, парабрахиальное, мелкоклеточное, ретикулярное ядро, ядро одиночного пути, вестибулярное ядро, принципиальное сенсорное ядро тройничного нерва)
J. Мозжечок и медулла и энторинальная кора - (парамедиальная долька, парафлоккулярная часть мозжечка, клочок мозжечка), (вентральная подслойка, энторинальная кора, экторинальная кора), (срединный шов, голубое пятно, трапециевидное тело, дорсомедиальная покрышка, двигательное ядро лицевого нерва, подголубоватое ядро, понтинное ретикулярное ядро, кохлеарное ядро, дорсальное парагигантоклеточное ядро)
K. Дофамин среднего мозга - компактная часть черного вещества, ретикулярная часть черного вещества, вентральная покрышка
L. связки гипоталамуса, миндалина
M. Связки ретикулярной активирующей системы, связки мозжечка, связки линии сращения, гиппокамп, ретикулярная активирующая система
N. Связки миндалины, медулла
O. Связки дофамина среднего мозга, вентральный гиппокамп
P. Связки дофамина среднего мозга, гипоталамус
Диагональная линия разделяет различные экспериментальные группы, а положения пикселей являются зеркальными отражениями по диагонали (зоны G и M отмечены стрелками для наглядности). Зоны A-P демонстрируют выделенные кластеры областей головного мозга, которые имеют функциональные взаимосвязи, и иллюстрируют сеть пассивного режима работы мозга в контрольной группе (данные не показаны). Зоны головного мозга с существенной корреляцией также могут выглядеть как кластеры, поскольку они являются непрерывными по своей нейроанатомии и функции. В общем, наблюдали, что сеть в группе с повреждением демонстрирует гипосвязность, а сеть в группе лечения демонстрирует гиперсвязность. Группа с повреждением также демонстрирует гипосвязность по сравнению с контрольной группой (данные не показаны). Сеть в группе лечения также демонстрирует гиперсвязность по сравнению с контрольной группой (данные не показаны).
В области G на фиг. 3 можно видеть, что вентральный гиппокамп демонстрирует гипосвязность в группе с повреждением по сравнению с контрольной группой (данные не показаны), а группа лечения демонстрирует гиперсвязность по сравнению с группой с повреждением и контрольной группой. Специфические связи в указанной сети, включая контрольную группу, представлены в таблице.
Зона G - гиппокамп/миндалина/височная кора; контрольная группа (CG), группа с повреждением (IG), группа лечения (TG).
3D организация указанных областей головного мозга и различие в связности также проиллюстрированы изображениями «стеклянного» головного мозга на фиг. 4A (группа с повреждением) и на фиг. 4B (группа лечения). Показано, что существует потеря связности в группе с повреждением и гиперсвязность в группе лечения для ключевых узлов в вентральном гиппокампе, особенно с миндалиной, лимбической корой и ретикулярным ядром среднего мозга. Гиперсвязность в группе лечения также наблюдали для ключевых узлов вентрального гиппокампа и височной коры.
Анализ функциональной связности в состоянии покоя подходит для определения слабых изменений в организации травматически поврежденного головного мозга, связанных с когнитивными и эмоциональными симптомами повреждения головного мозга. Потеря связности и кластеризации в группе с повреждением укорачивает длину пути или агрегатов нервных связей, снижая энергетические затраты сигнальной трансдукции. Без лечения миндалина остается в значительной степени отключенной от вентрального гиппокампа и соседних областей. Хорошо известно, что гипосвязность тесно связана с нарушением когнитивных функций и нейродегенерацией. Зона G связана с познавательной функцией, обучением и памятью. Гиперсвязность, наблюдаемая в группе лечения, может отражать реорганизацию интегрированных нейронных сетей для сохранения функции в ответ на повреждение головного мозга.
В области M на фиг. 3 можно видеть, что гиппокамп демонстрирует гипосвязность в группе с повреждением по сравнению с контрольной группой (данные не показаны), а группа лечения демонстрирует гиперсвязность по сравнению с группой с повреждением и контрольной группой. Специфические связи в указанной сети, включая контрольную группу, представлены в таблице.
Зона M - гиппокамп/ретикулярная активирующая система; контрольная группа (CG), группа с повреждением (IG), группа лечения (TG).
(*) Наблюдали низкий уровень связности.
3D организация указанных областей головного мозга и различие в связности также проиллюстрировано изображениями «стеклянного» мозга на фиг. 6. Показано, что существует потеря связности в группе с повреждением и гиперсвязность в группе лечения для ключевых узлов вентрального гиппокампа и ретикулярной активирующей системы.
Без лечения ретикулярная активирующая система остается в значительной степени отключенной от вентрального гиппокампа и соседних областей. Хорошо известно, что гипосвязность тесно связана с нарушением когнитивных функций, памяти и внимания. Зона M связана с познавательной функцией, обучением и памятью. Гиперсвязность, наблюдаемая в группе лечения, в том числе по сравнению с контрольной группой, может отражать реорганизацию интегрированных нейронных сетей для сохранения функции в ответ на повреждение головного мозга и обеспечивать терапевтический эффект, приводящий к восстановлению функции.
ПРИМЕР. Отечный и вентрикулярный объем. На фиг. 5 представлен объем боковых желудочков на уровне удара (гиппокампальная бахромка/диафрагма), для которого проведен расчет и сравнение с помощью одностороннего T-теста. Наблюдали существенное увеличение вентрикулярного объема в группе с повреждением по сравнению с контрольной группой. Группа лечения демонстрировала полный ответ/исцеление, при этом вентрикулярный объем восстанавливался до нормального уровня, и не было существенного различия между контрольной группой и группой лечения.
ПРИМЕР. Двигательные характеристики. Используя стандартный тест баланса на стержне, наблюдали отсутствие различия по общей частоте промахов шагов (однофакторный дисперсионный анализ, F(3,21) = 1,42, P = 0,26) или по общему времени перехода по стержню (однофакторный дисперсионный анализ, F(3,21) = 2,40, P = 0,1) для испытания баланса на стержне. Однако наблюдали существенное различие промахов в широких и средних сегментах (p<0,0001). Используя стандартный тест на вращающемся стержне, животные в группе с повреждением демонстрировали существенно более короткое время до падения (69,8 ± 5,5 с) по сравнению с контрольной группой (105,4 ± 7,6 с, P = 0,01). Группа лечения демонстрировала улучшение времени до падения (84,0 ± 9,0 с) с трендом в сторону значимости (P=0,2). Однако различия, наблюдаемые в тесте NOR, по-видимому, не зависели от измененного двигательного поведения; не наблюдали существенной разницы пройденного расстояния, обусловленной нарушением двигательной функции, ни в одной группе. (Однофакторный дисперсионный анализ, F(3,21) = 1,22, P = 0,32).
ПРИМЕР. Анализ связывания рецептора вазопрессина V1a человека. Клеточную линию, экспрессирующую человеческий рецептор V1a в клетках CHO (здесь и далее упоминаемую как клеточная линия hV1a), приобретали у компании Dr. Michael Brownstein, NIMH, Бетесда, штат Мэриленд, США. Последовательность кДНК hV1a описана в публикации Thibonnier et al., Journal of Biological Chemistry, 269, 3304-3310 (1994), а способ экспрессии был таким, как описано в публикации Morel et al. (1992). Клеточную линию hV1a выращивали в среде альфа-MEM с 10% эмбриональной бычьей сыворотки и 250 мкг/мл G418 (Gibco, Гранд-Айленд, штат Нью-Йорк, США). Для анализа конкурентного связывания клетки hV1a помещали на 6-луночный культуральный планшет в разбавлении 1:10 из конфлюентной колбы и культивировали в течение по меньшей мере двух дней. Затем удаляли культуральную среду, промывали клетки 2 мл связывающего буфера (25 мМ Hepes, 0,25% BSA, 1x DMEM, PH = 7,0). В каждую лунку добавляли 990 мкл связывающего буфера, содержащего 1 нМ 3H-AVP, а затем 10 мкл серийно разбавленных соединений из примеров, растворенных в ДМСО. Каждую инкубацию проводили в трех экземплярах, а кривые зависимости ингибирования от дозы состояли из полного связывания (ДМСО) и 5 концентраций (0,1, 1,0, 10, 100 и 1000 нМ) экспериментальных агентов, включая IC50. Для оценки неспецифического связывания использовали 100 нМ холодный AVP (Sigma). Клетки инкубировали в течение 45 минут при 37 °С, аналитическую смесь удаляли и три раза промывали каждую лунку PBS (рН = 7,4). В каждую лунку добавляли 1 мл 2% SDS и оставляли планшеты выстаиваться на 30 минут. Общее содержимое лунки переносили в сцинтилляционную пробирку. Каждую лунку промывали 0,5 мл PBS, который затем добавляли в соответствующую пробирку. Затем добавляли сцинтилляционную жидкость (Ecoscint, National Diagnostics, Атланта, штат Джорджия) в объеме 3 мл на пробирку. Образцы считывали в жидкостном сцинтилляционном счетчике (Beckman LS3801). Значения IC50 рассчитывали с помощью программного обеспечения для построения кривых Prism.
В данном анализе испытывали все алкандионовые сложные эфиры и амиды, представленные в следующих примерах, растворенные в ДМСО. Кривые связывания строили способами, описанными в публикации Thibonnier et al. (1994). В клеточные культуры hV1a добавляли [3H]-AVP, затем 10-кратные разбавления каждого экспериментального соединения. Все активные соединения демонстрировали дозозависимые кривые конкурентного связывания, со значениями IC50 и Ki, характерными для высокой аффинности связывания с рецепторами V1a в клетках CHO, экспрессирующих человеческий рецептор V1a (клеточная линия hV1a). Например, примерно 225 демонстрировал дозозависимую кривую конкурентного связывания со значениями IC50 (1,86-2,13 нМ) и Ki (1,14-1,30 нМ).
Аффинность связывания (IC50) и константы ингибирования (Ki) иллюстративных соединений представлены в следующей таблице.
IC50 (нМ)
(нМ)
IC50 (нМ)
(нМ)
(SRX246)
(AVN246)
(SRX251)
(AVN251)
(SRX296)
(AVN296)
(SRX228)
(AVN228)
(SRX576)
(AVN576)
ПРИМЕР. Клетки, экспрессирующие рецептор вазопрессина V1b человека. кДНК рецептора вазопрессина человека 1b (hV1b) (см., Lolait et al., “Extrapituitary expression of the rat V1b vasopressin receptor gene” Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 92:6783-7 (1995); de Keyzer et al., “Cloning and characterization of the human V3(V1b) pituitary vasopressin receptor” FEBS Lett. 356:215-20 (1994); Sugimoto et al., “Molecular cloning and functional expression of a cDNA encoding the human V1b vasopressin receptor” J. Biol. Chem. 269:27088-92 (1994)) внедряли в вектор экспрессии клеток млекопитающих PCI-neo (Promega) в сайте EcoR1. Рекомбинантную плазмиду, несущую кДНК hV1b, идентифицировали из трансформированных клонов E. Coli и использовали для трансфекции клеток яичников китайских хомячков (CHO-K1, ATCC). Два микрограмма рецепторной ДНК hV1b вводили в 105 клеток CHO, выращенных в 6-луночных планшетах, используя технологию трансфекции, опосредованную Fugene-6 (Boehringer, Мангейм). Через двадцать четыре часа после трансфекции клетки выращивали при выборе G-418 (0,25 мг/мл), добавленного в культуральную среду. Через три дня осуществляли ограниченное разбавление с получением одноклеточных клонов в 96-луночных планшетов. Через 2 недели выращивания моноклоны распространяли на два набора 12-луночных планшетов. После достижения слияния один набор лунок анализировали на их способность связывать аргинин-вазопрессин с тритиевой меткой (NEN). Из проверенных 60 клонов первоначально идентифицировали девять позитивных клонов, и клоны, которые демонстрировали наибольшее связывание AVP, сохраняли в качестве перманентных клеточных линий для скрининга аффинности hV1b.
ПРИМЕР. Клеточный анализ связывания рецептора вазопрессина V1b человека. Клеточные линии V1b (клетки, экспрессирующие человеческий или крысиный рецептор V1b) выращивали в среде альфа-MEM с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки и 250 мкг/мл G418 (Gibco, Гранд-Айленд, штат Нью-Йорк) в колбе размером 75 см2. Для проведения анализа конкретного связывания клетки hV1b диссоциировали с помощью бесферментного раствора для диссоциации клеток на основе PBS (Specialty Media, Филипсбург, штат Нью-Джерси) по инструкции производителя. Клетки помещали в 12-луночные культуральные планшеты в количестве одна колба на 18 планшетов (количество следует подбирать в соответствии со степенью конфлюентности) и выдерживали в культуре в течение 2-3 дней. Затем удаляли культуральную среду, один раз промывали клетки 2 мл связывающего буфера (25 мМ Hepes, 0,25% BSA, 1x DMEM, PH = 7,0) при комнатной температуре. В каждую лунку добавляли 990 мкл связывающего буфера, содержащего 1 нМ 3H-AVP, и затем добавляли 10 мкл серийно разбавленных экспериментальных соединений или холодного AVP, которые растворяли в ДМСО. Каждую инкубацию проводили в трех экземплярах, а кривые зависимости ингибирования от дозы состояли из полного связывания (только ДМСО) и 5 концентраций (0,1, 1,0, 10, 100 и 1000 нМ) экспериментальных агентов или холодного AVP, включая IC50. Клетки инкубировали в течение 30 минут при 37 °С в увлажненном инкубаторе. Затем удаляли аналитическую смесь и три раза промывали каждую лунку PBS (рН = 7,4). После промывания в каждую лунку добавляли 1 мл 2% SDS и оставляли планшеты выстаиваться на 15 минут при комнатной температуре. Осторожно постукивали планшет для открепления лизированных клеток. Общее содержимое лунки переносили в сцинтилляционную пробирку. Затем каждую лунку промывали 0,5 мл PBS и добавляли в соответствующую пробирку. Затем добавляли сцинтилляционную жидкость (Ecoscint, National Diagnostics, Атланта, штат Джорджия) в объеме 3 мл на пробирку. Образцы считывали в жидкостном сцинтилляционном счетчике (Beckman LS3801). Значения IC50 и Ki рассчитывали с помощью программного обеспечения для построения кривых Prism. Иллюстративные соединения, представленные в предыдущей таблице, демонстрировали константу связывания более 100 нМ или более 1000 нМ. В следующей таблице представлены иллюстративные данные ингибирования (Ki, нМ) для некоторых соединений из примеров.
(AVN246)
(AVN251)
(AVN576)
V1b
V2
>1000
>1000
>1000
>1000
>100
>1000
ПРИМЕР. Ингибирование цикла фосфатидилинозитола (V1a). Физиологическое действие вазопрессина опосредовано специфическими рецепторами, сопряженными с G-белком. V1aR связан с семейством Gq/G11 G-белков и опосредует цикл фосфатидилинозитола. Агонистический или антагонистический характер соединений согласно настоящему изобретению можно определить по их способности ингибировать опосредованный вазопрессином цикл фосфатидилинозитола способом, описанным в следующих абзацах. В данном анализе испытали иллюстративные соединения, примеры 35, 44, 88, 110 и 133, и установили, что они являются антагонистами вазопрессина V1a.
ПРИМЕР. Ингибирование цикла фосфатидилинозитола, опосредованного вазопрессином V1b, функциональный анализ антагонистической активности. Физиологическое действие вазопрессина опосредовано специфическими рецепторами, сопряженными с G-белком. Рецептор вазопрессина V1b связан с G-белком, который связан с цАМФ. Агонистический или антагонистический характер соединений, описанных в настоящем документе, можно определить по их способности ингибировать опосредованный вазопрессином цикл фосфатидилинозитола с помощью обычных способов, включая способ, описанный в следующих абзацах.
Выращивание клеток и мечение клеток. За три дня до анализа почти конфлюентные культуры клеток hV1a или hV1b диссоциировали и высевали в 6-луночные планшеты для выращивания тканей, засевали примерно 100 лунок из каждой колбы размером 75 см2 (эквивалентно коэффициенту разведения 12:1). Каждая лунка содержала 1 мл питательной среды с 2 мкКи [3H]мио-инозитола (American Radiolabeled Chemicals, Сент-Луис, штат Миссури, США).
Клетки, экспрессирующие человеческие или крысиные рецепторы V1b, выращивали в альфа-модифицированной минимальной питательной среде, содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки и 0,25 мг/мл G418. За три дня до анализа почти конфлюентные культуры диссоциировали и высевали в 6-луночные планшеты для выращивания тканей, засевали примерно 100 лунок из каждой колбы размером 75 см2 (эквивалентно коэффициенту разведения 12:1). Каждая лунка содержала 1 мл питательной среды с 2 мкКи [3H]мио-инозитола (American Radiolabeled Chemicals, Сент-Луис, штат Миссури).
Инкубация (V1a и V1b). Все анализы проводили в трех экземплярах, за исключением исходного состояния и 10 нМ AVP (в обоих случаях n = 6). AVP ((аргинин-вазопрессин), Peninsula Labs, Белмонт, штат Калифорния, США (№8103)) растворяли в 0,1 н. уксусной кислоте. Экспериментальные агенты растворяли в ДМСО и разбавляли в ДМСО до 200 раз до конечной экспериментальной концентрации. По отдельности добавляли экспериментальные агенты и AVP (или соответствующие объемы ДМСО) в виде 5 мкл раствора в ДМСО в стеклянные пробирки размером 12х75 мм, содержащие 1 мл аналитического буфера (сбалансированный солевой раствор Тироде, содержащий 50 мМ глюкозы, 10 мМ LiCl, 15 мМ HEPES, pH 7,4, 10 мкМ фосфорамидона и 100 мкМ бацитрацина). Порядок инкубаций рандомизировали. Инкубацию начинали с удаления среды для предварительного мечения, однократного промывания монослоя 1 мл 0,9% NaCl и переноса содержимого аналитических пробирок в соответствующие лунки. Планшеты инкубировали в течение 1 часа при 37 °С. Инкубацию прекращали удалением инкубационной среды и добавлением 500 мкл ледяной 5% (мас./об.) трихлоруксусной кислоты, и оставляли лунки стоять на 15 минут.
Измерение [3H]инозитолфосфатов (V1a и V1b). Колонки BioRad Poly-Prep Econo упаковывали, используя 0,3 мл формиатной формы смолы AG 1 X-8 100-200. Смолу смешивали 1:1 с водой и в каждую колонку добавляли 0,6 мл. Затем колонки промывали 10 мл воды. Под каждую колонку ставили сцинтилляционные пробирки (20 мл). Содержимое каждой лунки переносили в миниколонку, после чего лунку промывали 0,5 мл дистиллированной воды, которую также добавляли в миниколонку. Затем колонки дважды промывали 5 мл 5 мМ мио-ионозитола для элюирования свободного инозитола. Аликвоты (1 мл) переносили в сцинтилляционные пробирки объемом 20 мл и добавляли 10 мл реагента Beckman Ready Protein Plus. После завершения промывания мио-инозитола под колонки ставили пустые сцинтилляционные пробирки и элюировали [3H]инозитолфосфаты, три раза добавляя по 1 мл 0,5 М формиата аммония, содержащего 0,1 н. муравьиную кислоту. Условия элюирования оптимизировали для выделения моно-, бис- и трифосфатов инозитола, не элюируя более метаболически инертные тетракис-, пентакис- и гексакис-фосфаты. В каждый образец добавляли 10 мл сцинтилляционной жидкости с высокой солевой емкостью, такой как Tru-Count High Salt Capacity или Packard Hionic-Fluor. Инозитол-содержащие липиды измеряли посредством добавления 1 мл 2% раствора додецилсульфата натрия (SDS) в каждую лунку, оставляли лунки выстаиваться в течение по меньшей мере 30 минут и переносили раствор в сцинтилляционные пробирки объемом 20 мл, в которые затем добавляли 10 мл сцинтилляционной жидкости Beckman Ready Protein Plus. Образцы считывали в жидкостном сцинтилляционном счетчике Beckman LS 3801 в течение 10 минут. Общее внедрение инозитола для каждой лунки рассчитывали как сумму свободного инозитола, инозитол-фосфатов и инозитол-содержащих липидов.
Анализ данных (V1a и V1b): эксперименты зависимости ингибирования от концентрации. Кривые зависимости ответа от концентрации для AVP и кривые зависимости ингибирования от концентрации для экспериментальных агентов по сравнению с 10 нМ AVP анализировали подгонкой нелинейной кривой наименьших квадратов к 4-параметрической логистической функции. Параметры для исходных и максимальных концентраций инозитол-фосфатов, EC50 или IC50, и коэффициент Хилла изменяли для достижения наилучшего соответствия. Подгонку кривой взвешивали с учетом того, что стандартное отклонение пропорционально dpm (количество распадов в минуту) радиоактивности. В каждом эксперименте проходили полные кривые зависимости ответа от концентрации для AVP. Значения IC50 пересчитывали в значения Ki, которые отражают антагонистическую активность против AVP при образовании сигнальной молекулы IP3, используя уравнение Ченга-Прусоффа, основываясь на EC50 для AVP в том же эксперименте. Инозитол-фосфаты выражали как количество dpm на 106 dpm общего внедрения инозитола.
Анализ данных (V1a и V1b): эксперименты конкуренции. Эксперименты для испытания конкуренции экспериментальных агентов за V1a состояли из кривых зависимости ответа от концентрации для AVP в отсутствие и в присутствии двух или более концентраций экспериментального агента. Эксперименты для испытания конкуренции экспериментальных агентов за V1b состояли из кривых зависимости ответа от концентрации для AVP в отсутствие и в присутствии по меньшей мере пяти концентраций экспериментального агента. Данные подгоняли к логистическому уравнению конкуренции
где Y представляет собой dpm инозитол-фосфатов, B представляет собой концентрацию исходных инозитол-фосфатов, M представляет собой максимальное увеличение концентрации инозитол-фосфатов, A представляет собой концентрацию агониста (AVP), E представляет собой EC50 агониста, D представляет собой концентрацию антагониста (экспериментального агента), K представляет собой Ki антагониста, и Q представляет собой кооперативность (коэффициент Хилла).
Соединение из примера 225 обеспечивало дозозависимое подавление действия AVP с IC50 (2,68 нМ) и Ki (0,05 нМ). Указанные значения согласуются с высокой аффинностью связывания примера 225 и его ингибированием синтеза инозитол-содержащих липидов посредством рецептора V1a человека.
ПРИМЕР. Фармакокинетика. Соединения, описанные в настоящем документе, быстро абсорбируются при пероральном введении. Соединения, описанные в настоящем документе, пересекают гематоэнцефалический барьер и достигают терапевтически эффективных концентраций в ЦНС. Соединения, описанные в настоящем документе, можно вводить в соответствии широким диапазоном протоколов, включая, но не ограничиваясь ими, q.d., b.i.d. и т.п. Соединения, описанные в настоящем документе, демонстрируют дозозависимое увеличение Cmax и AUC при введении доз в соответствии с различными протоколами, включая, но не ограничиваясь ими, q.d., b.i.d. Например, введение доз b.i.d. демонстрирует 1,7-кратное накопление и улучшенное T1/2 для AVN246.
ПРИМЕР. Общие способы синтеза. Подход с применением ближнего амида, обеспечивающий возможность синтетического изменения в сайте дальнего амида; сначала устанавливают ближний амид, затем разнообразные дальние амиды посредством параллельного синтеза.
Подход с применением дальнего амида, обеспечивающий возможность синтетического изменения в ближнем сайте; сначала устанавливают дальний амид, затем разнообразные ближние амиды посредством параллельного синтеза.
Синтез AVN251 (SRX251) и AVN251⋅HCl представлен ниже. Все остальные соединения получали аналогичным образом с использованием соответствующего выбора исходных соединений.
Дополнительные подробности и альтернативные способы синтеза для получения соединений, описанных в настоящем документе, представлены в патенте США № 7119083, полное описание которого включено в настоящий документ посредством ссылки. Соединения, описанные в настоящем документе, можно составлять в лекарственные формы и вводить в соответствии со способом, описанным в патенте США № 7119083. Дополнительная информация представлена в публикации Guillon, C.D., et al., Azetidinones as vasopressin V1a antagonists. Bioorg Med Chem, 15(5):2054-80 (2007).
ПРИМЕРЫ СОЕДИНЕНИЙ
Пример 1. (4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлорид. Раствор 1,0 эквивалента (4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)уксусной кислоты (Evans, патент США № 4665171) и 1,3 эквивалента оксалилхлорида в 200 мл дихлорметана обрабатывали каталитическим количеством безводного диметилформамида (85 мкл/миллиэквивалент производного уксусной кислоты), в результате чего наблюдали бурное выделение газа. Через 45 минут выделение газа прекратилось, и реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого твердого вещества после сушки в течение 2 часов под вакуумом.
Пример 1А. (4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлорид. Пример 1A получали способом из примера 1, за исключением того, что использовали (4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)уксусную кислоту вместо (4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)уксусной кислоты (см. Evans & Sjogren, Tetrahedron Lett. 26:3783 (1985)).
Пример 1B. Метил-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетат. Раствор (4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)уксусной кислоты (1 г, 4,52 ммоль) (полученной в соответствии с описанием Evans в патенте США № 4665171) в 20 мл безводного метанола каждый час обрабатывали 5 эквивалентами ацетилхлорида, добавив, в целом, 20 эквивалентов. Полученный раствор перемешивали в течение ночи. Остаток, полученный после выпаривания MeOH, снова растворяли в 30 мл CH2Cl2 и обрабатывали 50 мл насыщенного водного раствора Na2CO3. Органический слой выпаривали и сушили (MgSO4) с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества (1,001 г, 94%); 1H ЯМР (CDCl3) δ 3,37 (д, J==18,0 Гц, 1H), 3,69 (с, 3H), 4,13 (т, J=8,3 Гц, 1H), 4,28 (д, J=18,0 Гц, 1H), 4,69 (т, J=8,8 Гц, 1H), 5,04 (т, J=8,4 Гц, 1H), 7,26-7,29 (м, 2H), 7,36-7,42 (м, 3H).
Пример 1C. Метил-2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)пропаноат. Раствор метил-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетата (1 г, 4,25 ммоль) в 10 мл безводного ТГФ при -78 °C обрабатывали 4,68 мл (4,68 ммоль) 1 M раствора бис(триметилсилил)амида лития в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при примерно -70 °С, затем добавляли MeI (1,59 мл, 25,51 ммоль). После завершения превращения азетидинона реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором NH4Cl и разделяли между EtOAc и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором бисульфита натрия и насыщенным водным раствором NaCl. Полученный органический слой сушили (MgSO4) и выпаривали с получением указанного в заголовке соединения (смесь диастереомеров) в виде белого твердого вещества (1,06 г, 93%); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,07/1,53 (д/д, J=7,5 Гц, 3H), 3,59/3,74 (с/с, 3H), 3,85/4,48 (к/к, J=7,5 Гц, 1H), 4,10-4,14 (м, 1H), 4,60-4,64/4,65-4,69 (м/м, 1H), 4,88-4,92/4,98-5,02 (м/м, 1H), 7,24-7,40 (м, 5H).
Пример 1D. 2-(4(S)-Фенилоксазолидин-2-он-3-ил)пропановая кислота. К раствору метил-2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)пропаноата (1 г, 4,01 ммоль) в 35 мл MeOH при 0 °C добавляли 14,3 мл (12,04 ммоль) 0,84 M раствора LiOH в воде. Затем реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре. После завершения гидролиза азетидинона удаляли MeOH посредством выпаривания, неочищенный остаток растворяли в CH2Cl2 и обрабатывали насыщенным водным раствором NaCl. Полученный органический слой сушили (MgSO4) и выпаривали с получением указанного в заголовке соединения (рацемическая смесь) в виде белого твердого вещества (0,906 г, 96%); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,13/1,57 (д/д, J=7,5 Гц, 3H), 3,75/4,50 (к/к, J=7,5 Гц, 1H), 4,10-4,16 (м, 1H), 4,62-4,72 (м, 1H), 4,92-5,03 (м, 1H), 7,32-7,43 (м, 5H).
Пример 1E. 2-(4(S)-Фенилоксазолидин-2-он-3-ил)пропаноилхлорид. Раствор 1 эквивалента примера 1D и 1,3 эквивалента оксалилхлорида в 200 мл CH2Cl2 (150 мл/г производного пропановой кислоты) обрабатывали каталитическим количеством безводного ДМФА (85 мкл/ммоль производного пропановой кислоты), в результате чего наблюдали бурное выделение газа. Через 45 минут выделение газа прекратилось, и реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого твердого вещества после сушки в течение 2 часов под вакуумом.
Пример 2. Общий способ получения амида из активированного сложноэфирного производного. N-Бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. Раствор N-бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-N-гидроксисукцинимидного эфира (1,95 г, 4,64 ммоль, Advanced ChemTech) в 20 мл сухого тетрагидрофурана обрабатывали 0,68 мл (4,74 ммоль) 3-(трифторметил)бензиламина. После завершения (ТСХ, 60:40 гексаны/этилацетат) смесь выпаривали и разделяли полученное маслянистое вещество между дихлорметаном и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой выпаривали с получением 2,23 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,39 (с, 9H), 2,61 (дд, J=6,5 Гц, J=17,2 Гц, 1H), 2,98 (дд, J=3,7 Гц, J=17,0 Гц, 1H), 4,41 (дд, J=5,9 Гц, J=15,3 Гц, 1H), 4,50-4,57 (м, 2H), 5,15 (с, 2H), 5,96-5,99 (м, 1H), 6,95 (с, 1H), 7,29-7,34 (м, 5H), 7,39-7,43 (м, 2H), 7,48-7,52 (м, 2H).
Примеры 2A-2C и 3-5 получали в соответствии со способом из примера 2, за исключением того, что вместо N-бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-N-гидроксисукцинимидного эфира использовали соответствующее производное аминокислоты, а вместо 3-(трифторметил)бензиламина использовали соответствующий амин.
Пример 2A. N-Бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. N-бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-N-гидроксисукцинимидный эфир (5,0 г, 12 ммоль, Advanced ChemTech) и 4-(фенилэтил)пиперазин, 2,27 мл (11,9 ммоль) обеспечивали получение 5,89 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,40 (с, 9H), 2,45-2,80 (м, 10H), 3,50-3,80 (м, 4H), 4,87-4,91 (м, 1H), 5,08 (с, 2H), 5,62-5,66 (м, 1H), 7,17-7,33 (м, 10H).
Пример 2B. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. N-бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-N-гидроксисукцинимидный эфир (4,83 г, 11,1 ммоль, Advanced ChemTech) и 3-(трифторметил)бензиламин) 1,63 мл (11,4 ммоль) обеспечивали получение 5,41 г (98%) указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,40 (с, 9H), 1,88-1,99 (м, 1H), 2,03-2,13 (м, 1H), 2,23-2,33 (м, 1H), 2,38-2,47 (м, 1H), 4,19-4,25 (с, 1H), 4,46-4,48 (м, 2H), 5,05-5,08 (м, 2H), 5,67-5,72 (м, 1H), 7,27-7,34 (м, 5H), 7,39-7,43 (м, 2H), 7,48-7,52 (м, 2H).
Пример 2C. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. N-бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-N-гидроксисукцинимидный эфир (5,0 г, 12 ммоль, Advanced ChemTech) и 4-(фенилэтил)пиперазин 2,19 мл (11,5 ммоль) обеспечивали получение 5,87 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,43 (с, 9H); 1,64-1,73 (м, 1H);1,93-2,01 (м, 1H); 2,23-2,40 (м, 2H); 2,42-2,68 (м, 6H); 2,75-2,85 (м, 2H); 3,61-3,74 (м, 4H); 4,66-4,73 (м, 1H); 5,03-5,12 (м, 2H); 5,69-5,72 (м, 1H); 7,16-7,34 (м, 10H).
Пример 3. N-Бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. N-бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-N-гидроксисукцинимидный эфир (5,0 г, 12 ммоль, Advanced ChemTech) и 4-(фенилэтил)пиперазин 2,27 мл (11,9 ммоль) обеспечивали получение 5,89 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,40 (с, 9H), 2,45-2,80 (м, 10H), 3,50-3,80 (м, 4H), 4,87-4,91 (м, 1H), 5,08 (с, 2H), 5,62-5,66 (м, 1H), 7,17-7,33 (м, 10H).
Пример 4. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. N-бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-N-гидроксисукцинимидный эфир (4,83 г, 11,1 ммоль, Advanced ChemTech) и 3-(трифторметил)бензиламин) 1,63 мл (11,4 ммоль) обеспечивали получение 5,41 г (98%) указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,40 (с, 9H), 1,88-1,99 (м, 1H), 2,03-2,13 (м, 1H), 2,23-2,33 (м, 1H), 2,38-2,47 (м, 1H), 4,19-4,25 (с, 1H), 4,46-4,48 (м, 2H), 5,05-5,08 (м, 2H), 5,67-5,72 (м, 1H), 7,27-7,34 (м, 5H), 7,39-7,43 (м, 2H), 7,48-7,52 (м, 2H).
Пример 5. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. N-бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-N-гидроксисукцинимидный эфир (5,0 г, 12 ммоль, Advanced ChemTech) и 4-(фенилэтил)пиперазин 2,19 мл (11,5 ммоль) обеспечивали получение 5,87 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,43 (с, 9H); 1,64-1,73 (м, 1H);1,93-2,01 (м, 1H); 2,23-2,40 (м, 2H); 2,42-2,68 (м, 6H); 2,75-2,85 (м, 2H); 3,61-3,74 (м, 4H); 4,66-4,73 (м, 1H); 5,03-5,12 (м, 2H); 5,69-5,72 (м, 1H); 7,16-7,34 (м, 10H).
Пример 5A. N-[(9H-Флуорен-9-ил)метоксикарбонил]-O-(бензил)-D-серина трет-бутиловый эфир. N-[(9H-Флуорен-9-ил)метоксикарбонил]-O-(бензил)-D-серин (0,710 г, 1,70 ммоль) в дихлорметане (8 мл) обрабатывали трет-бутилацетатом (3 мл) и концентрированной серной кислотой (40 мкл) в закрытой колбе при 0 °С. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь гасили дихлорметаном (10 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната калия (15 мл). Органический слой промывали дистиллированной водой и выпаривали. Полученный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (98:2 дихлорметан/метанол) с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного маслянистого вещества (0,292 г, 77%); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,44 (с, 9H); 3,68 (дд, J=2,9 Гц, J=9,3 Гц, 1H); 3,87 (дд, J=2,9 Гц, J=9,3 Гц, 1H); 4,22 (т, J=7,1 Гц, 1H); 4,30-4,60 (м, 5H); 5,64-5,67 (м, 1H); 7,25-7,39 (м, 9H); 7,58-7,61 (м, 2H); 7,73-7,76 (м, 2H).
Пример 5B. O-(Бензил)-D-серина трет-бутиловый эфир. Пример 5A (0,620 г, 1,31 ммоль) в дихлорметане (5 мл) обрабатывали трис(2-аминоэтил)амином (2,75 мл) в течение 5 часов. Полученную смесь дважды промывали фосфатным буфером (pH=5,5), один раз насыщенным водным раствором бикарбоната калия и выпаривали с получением 0,329 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CD3OD) δ 1,44 (с, 9H); 3,48 (дд, J=J′=4,2 Гц, 1H); 3,61 (дд, J=4,0 Гц, J=9,2 Гц, 1H); 3,72 (дд, J=4,6 Гц, J=9,2 Гц, 1H); 4,47 (д, J=12,0 Гц, 1H); 4,55 (д, J=12,0 Гц, 1H); 7,26-7,33 (м, 5H).
Пример 6. Общий способ получения амида из карбоновой кислоты. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. Раствор 1 г (2,93 ммоль) N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрата (Novabiochem) в 3-4 мл дихлорметана обрабатывали, последовательно добавляя 0,46 мл (3,21 ммоль) 3-(трифторметил)бензиламина, 0.44 г (3,23 ммоль) 1-гидрокси-7-бензотриазола и 0,62 г (3,23 ммоль) 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлорида. Через по меньшей мере 12 часов при комнатной температуре или после завершения реакции, по данным тонкослойной хроматографии (элюент 95:5 дихлорметан/метанол), реакционную смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и дистиллированной водой. Органический слой выпаривали с получением 1,41 г (количественный выход) указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,39 (с, 9H); 2,61 (дд, J=6,5 Гц, J=17,2 Гц, 1H); 2,98 (дд, J=4,2 Гц, J=17,2 Гц, 1H); 4,41 (дд, J=5,9 Гц, J=15,3 Гц, 1H); 4,50-4,57 (м, 2H); 5,10 (с, 2H); 5,96-6,01 (м, 1H); 6,91-7,00 (м, 1H); 7,30-7,36 (м, 5H); 7,39-7,43 (м, 2H); 7,48-7,52 (м, 2H).
Примеры 7-7H получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что вместо N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрата использовали соответствующее производное аминокислоты, а вместо 3-(трифторметил)бензиламина использовали соответствующий амин.
Пример 7. N-Бензилоксикарбонил-D-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. N-бензилоксикарбонил-D-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир (1,14 г, 3,37 ммоль) и 0,53 мл (3,70 ммоль, Novabiochem) 3-(трифторметил)бензиламина обеспечивали получение 1,67 г (количественный выход) примера 7 в виде грязновато-белого твердого вещества. Пример 7 демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 7A. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты α-трет-бутиловый эфир, γ-(4-циклогексил)пиперазинамид. N-бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты α-трет-бутиловый эфир (1,36 г, 4,03 ммоль) и 0,746 г (4,43 ммоль) 1-циклогексилпиперазина обеспечивали получение 1,93 г (98%) примера 7A в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,02-1,12 (м, 5H); 1,43 (с, 9H), 1,60-1,64 (м, 1H); 1,80-1,93 (м, 5H); 2,18-2,52 (м, 8H); 3,38-3,60 (м, 4H); 4,20-4,24 (м, 1H); 5,03-5,13 (м, 2H); 5,53-5,57 (м, 1H); 7,28-7,34 (м, 5H).
Пример 7B. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(2-фтор-3-трифторметил)бензиламид. N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат (Novabiochem) (0,25 г, 0,73 ммоль) и 0,12 мл (2-фтор-3-трифторметил)бензиламина обеспечивали получение 0,365 г (количественный выход) примера 7B в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,38 (с, 9H); 2,59 (дд, J=6,5 Гц, J=17,0 Гц, 1H); 2,95 (дд, J=4,3 Гц, J=17,0 Гц, 1H); 4,46-4,56 (м, 3H); 5,11 (с, 2H); 5,94-5,96 (м, 1H); 7,15 (т, J=8,0 Гц, 1H); 7,30-7,36 (м, 5H); 7,47-7,52 (м, 2H).
Пример 7C. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(S)-α-метилбензил]амид. N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат (Novabiochem) (0,25 г, 0,73 ммоль) и 0,094 мл (S)-α-метилбензиламина обеспечивали получение 0,281 г (90%) примера 7C в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,41 (с, 9H); 1,44 (д, J=7,0 Гц, 3H); 2,61 (дд, J=7,0 Гц, J=17,0 Гц, 1H); 2,93 (дд, J=4,0 Гц, J=17,5 Гц, 1H); 4,50-4,54 (м, 1H); 5,04-5,14 (м, 3H); 5,94-5,96 (м, 1H); 6,76-6,80 (м, 1H); 7,21-7,37 (м, 10H).
Пример 7D. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(R)-α-метилбензил]амид. N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат (Novabiochem) (0,25 г, 0,73 ммоль) и 0,094 мл (R)-α-метилбензиламина обеспечивали получение 0,281 г (90%) примера 7D в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,38 (с, 9H); 1,43 (д, J=6,9 Гц, 3H); 2,54 (дд, J=7,3 Гц, J=17,2 Гц, 1H); 2,87 (дд, J=4,1 Гц, J=17,3 Гц, 1H); 4,46-4,50 (м, 1H); 4,99-5,15 (м, 3H); 5,92-5,96 (м, 1H); 6,78-6,82 (м, 1H); 7,21-7,33 (м, 10H).
Пример 7E. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-[N-метил-N-(3-трифторметилбензил)]амид. N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты γ-трет-бутиловый эфир (0,303 г, 0,89 ммоль, Novabiochem) и 0,168 г (0,89 ммоль) N-метил-N-(3-трифторметилбензил)амина обеспечивали получение 0,287 г (65%) примера 7E в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,40 (с, 9H); 2,55 (дд, J=5,8 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 2,81 (дд, J=7,8 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 3,10 (с, 3H); 4,25 (д, J=15,0 Гц, 1H); 4,80 (д, J=15,5 Гц, 1H); 5,01-5,13 (м, 3H); 5,52-5,55 (м, 1H); 7,25-7,52 (м, 10H).
Пример 7F. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(S)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат (Novabiochem) (84 мг, 0,25 ммоль) и 47 мг (S)-1-(3-трифторметилфенил)этиламина обеспечивали получение 122 мг (количественный выход) примера 7F в виде грязновато-белого твердого вещества. Пример 7F демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 7G. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(R)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат (Novabiochem) (150 мг, 0,44 ммоль) и 83 мг (R)-1-(3-трифторметилфенил)этиламина обеспечивали получение 217 мг (количественный выход) примера 7G в виде грязновато-белого твердого вещества. Пример 7G демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 7H. N-Бензилоксикарбонил-D-глутаминовой кислоты α-метиловый эфир, γ-(3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-D-глутаминовой кислоты α-метиловый эфир (508 мг, 1,72 ммоль) и 317 мг (1,81 ммоль) 3-(трифторметил)бензиламина обеспечивали получение 662 мг (85%) примера 7H в виде грязновато-белого твердого вещества. Пример 7H демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 8. Общий способ гидрирования бензилоксикарбониламина. L-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. Суспензию 2,23 г (4,64 ммоль) N-бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметил)бензиламида и палладия (5% масс. на активированном углероде, 0,642 г) в 30 мл метанола выдерживали в атмосфере водорода до полного превращения, по данным тонкослойной хроматографии (элюент 95:5 дихлорметан/метанол). Реакционную смесь фильтровали для удаления палладия на углероде и выпаривали фильтрат с получением 1,52 г (96%) указанного в заголовке соединения в виде маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,42 (с, 9H); 2,26 (шс, 2H); 2,63-2,71 (м, 1H); 2,82-2,87 (м, 1H); 3,75-3,77 (м, 1H); 4,47-4,50 (м, 2H); 7,41-7,52 (м, 4H); 7,90 (шс, 1H).
Примеры 9-13P получали в соответствии со способом из примера 8, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид заменяли на соответствующее производное аминокислоты.
Пример 9. L-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. N-Бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид (5,89 г, 11,9 ммоль) обеспечивал получение 4,24 г (98%) примера 9 в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3): δ 1,42 (с, 9H); 2,61-2,95 (м, 10H); 3,60-3,90 (м, 4H); 4,35-4,45 (м, 1H); 7,17-7,29 (м, 5H).
Пример 10. D-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид (1,41 г, 2,93 ммоль) обеспечивал получение 0,973 г (96%) примера 10 в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3): δ 1,42 (с, 9H); 2,21 (шс, 2H); 2,67 (дд, J=7,1 Гц, J=16,8 Гц, 1H); 2,84 (дд, J=3,6 Гц, J=16,7 Гц, 1H); 3,73-3,77 (м, 1H); 4,47-4,50 (м, 2H); 7,41-7,52 (м, 4H); 7,83-7,87 (м, 1H).
Пример 11. L-Глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид (5,41 г, 10,9 ммоль) обеспечивал получение 3,94 г (количественный выход) примера 11 в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3): δ 1,41 (с, 9H); 1,73-1,89 (м, 3H); 2,05-2,16 (м, 1H); 2,32-2,38 (м, 2H); 3,47 (дд, J=5,0 Гц, J=7,5 Гц, 1H); 4,47-4,49 (м, 2H); 7,36-7,54 (м, 4H); 7,69-7,77 (м, 1H).
Пример 12. L-Глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид (5,86 г, 11,50 ммоль) обеспечивал получение 4,28 г (99%) примера 12 в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,39 (с, 9H); 2,00-2,08 (м, 1H); 2,38-2,46 (м, 1H); 2,55-2,90 (м, 9H); 3,61-3,82 (м, 4H); 4,48-4,56 (м, 1H); 7,17-7,26 (м, 5H).
Пример 13. D-Глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-D-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид (1,667 г, 3,37 ммоль) обеспечивал получение 1,15 г (94%) примера 13 в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,41 (с, 9H); 1,80-2,20 (м, 4H); 2,31-2,40 (м, 2H); 3,51-3,59 (м, 1H); 4,47-4,49 (м, 2H); 7,39-7,52 (м, 4H); 7,71-7,79 (м, 1H).
Пример 13A. L-Глутаминовой кислоты α-трет-бутиловый эфир, γ-(4-циклогексил)пиперазинамид. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты α-трет-бутиловый эфир, γ-(4-циклогексил)пиперазинамид (1,93 г, 3,96 ммоль) обеспечивал получение 1,30 г (93%) примера 13A в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,02-1,25 (м, 5H); 1,41 (с, 9H); 1,45-1,50 (м, 1H); 1,56-1,60 (м, 1H); 1,69-1,80 (м, 6H); 3,30 (дд, J=4,8 Гц, J=8,5 Гц, 1H); 3,44 (т, J=9,9 Гц, 2H); 3,56 (т, J=9,9 Гц, 2H).
Пример 13B. D-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(2-фтор-3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(2-фтор-3-трифторметил)бензиламид (0,36 г, 0,72 ммоль) обеспечивал получение 0,256 г (92%) примера 13B в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,39 (с, 9H); 2,50 (шс, 2H); 2,74 (дд, J=7,0 Гц, J=16,5 Гц, 1H); 2,86 (дд, J=4,8 Гц, J=16,8 Гц, 1H); 3,89 (шс, 2H); 4,47-4,57 (м, 2H); 7,16 (т, J=7,8 Гц, 1H); 7,48 (т, J=7,3 Гц, 1H); 7,56 (т, J=7,3 Гц, 1H); 7,97-8,02 (м, 1H).
Пример 13C D-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(S)-α-метил]бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(S)-α-метилбензил]амид (0,275 г, 0,65 ммоль) обеспечивал получение 0,17 г (90%) примера 13C в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,40 (с, 9H); 1,47 (д, J=6,9 Гц, 3H); 1,98 (шс, 2H); 2,49 (дд, J=7,9 Гц, J=17,7 Гц, 1H); 2,83 (дд, J=3,6 Гц, J=16,7 Гц, 1H); 3,69 (шс, 1H); 4,99-5,10 (м, 1H); 7,19-7,33 (м, 5H); 7,65-7,68 (м, 1H).
Пример 13D. D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(R)-α-метилбензил]амид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(R)-α-метилбензил]амид (0,273 г, 0,64 ммоль) обеспечивал получение 0,187 г (количественный выход) примера 13D в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,38 (с, 9H); 1,46 (д, J=6,9 Гц, 3H); 1,79 (шс, 2H); 2,51 (дд, J=7,8 Гц, J=17,5 Гц, 1H); 2,87 (дд, J=3,6 Гц, J=16,9 Гц, 1H); 4,19 (шс, 1H); 4,99-5,11 (м, 1H); 7,18-7,34 (м, 5H); 7,86-7,90 (м, 1H).
Пример 13E. D-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[N-метил-N-(3-трифторметилбензил)]амид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[N-метил-N-(3-трифторметилбензил)]амид (0,282 г, 0,57 ммоль) обеспечивал получение 0,195 г (95%) примера 13E в виде грязновато-белого маслянистого вещества. Пример 13E демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 13F. L-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. N-Бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид (5,89 г, 11,9 ммоль) обеспечивал получение 4.24 г (98%) примера 13F в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3): δ 1,42 (с, 9H); 2,61-2,95 (м, 10H); 3,60-3,90 (м, 4H); 4,35-4,45 (м, 1H); 7,17-7,29 (м, 5H).
Пример 13G. D-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид (1,41 г, 2,93 ммоль) обеспечивал получение 0,973 г (96%) примера 13G в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3): δ 1,42 (с, 9H); 2,21 (шс, 2H); 2,67 (дд, J=7,1 Гц, J=16,8 Гц, 1H); 2,84 (дд, J=3,6 Гц, J=16,7 Гц, 1H); 3,73-3,77 (м, 1H); 4,47-4,50 (м, 2H); 7,41-7,52 (м, 4H); 7,83-7,87 (м, 1H).
Пример 13H. L-Глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид (5,41 г, 10,9 ммоль) обеспечивал получение 3,94 г (количественный выход) примера 13H в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3): δ 1,41 (с, 9H); 1,73-1,89 (м, 3H); 2,05-2,16 (м, 1H); 2,32-2,38 (м, 2H); 3,47 (дд, J=5,0 Гц, J=7,5 Гц, 1H); 4,47-4,49 (м, 2H); 7,36-7,54 (м, 4H); 7,69-7,77 (м, 1H).
Пример 13I. L-Глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид (5,86 г, 11,50 ммоль) обеспечивал получение 4,28 г (99%) примера 13I в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,39 (с, 9H); 2,00-2,08 (м, 1H); 2,38-2,46 (м, 1H); 2,55-2,90 (м, 9H); 3,61-3,82 (м, 4H); 4,48-4,56 (м, 1H); 7,17-7,26 (м, 5H).
Пример 13J. D-Глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-D-глутаминовой кислоты γ-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид (1,667 г, 3,37 ммоль) обеспечивал получение 1,15 г (94%) примера 13J в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,41 (с, 9H); 1,80-2,20 (м, 4H); 2,31-2,40 (м, 2H); 3,51-3,59 (м, 1H); 4,47-4,49 (м, 2H); 7,39-7,52 (м, 4H); 7,71-7,79 (м, 1H).
Пример 13K. L-Глутаминовой кислоты α-трет-бутиловый эфир, γ-(4-циклогексил)пиперазинамид. N-Бензилоксикарбонил-L-глутаминовой кислоты α-трет-бутиловый эфир, γ-(4-циклогексил)пиперазинамид (1,93 г, 3,96 ммоль) обеспечивал получение 1,30 г (93%) примера 13K в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,02-1,25 (м, 5H); 1,41 (с, 9H); 1,45-1,50 (м, 1H); 1,56-1,60 (м, 1H); 1,69-1,80 (м, 6H); 3,30 (дд, J=4,8 Гц, J=8,5 Гц, 1H); 3,44 (т, J=9,9 Гц, 2H); 3,56 (т, J=9,9 Гц, 2H).
Пример 13L. D-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(2-фтор-3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(2-фтор-3-трифторметил)бензиламид (0,36 г, 0,72 ммоль) обеспечивал получение 0,256 г (92%) примера 13L в виде грязновато-белого маслянистого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,39 (с, 9H); 2,50 (шс, 2H); 2,74 (дд, J=7,0 Гц, J=16,5 Гц, 1H); 2,86 (дд, J=4,8 Гц, J=16,8 Гц, 1H); 3,89 (шс, 2H); 4,47-4,57 (м, 2H); 7,16 (т, J=7,8 Гц, 1H); 7,48 (т, J=7,3 Гц, 1H); 7,56 (т, J=7,3 Гц, 1H); 7,97-8,02 (м, 1H).
Пример 13M. D-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(S)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(S)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид (120 мг, 0,24 ммоль) обеспечивал получение 91 мг (91%) примера 13M в виде грязновато-белого маслянистого вещества, и демонстрировал спектр 1H ЯМР, согласующийся с присвоенной структурой.
Пример 13N. D-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(R)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[(R)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид (217 мг, 0,44 ммоль) обеспечивал получение 158 мг (количественный выход) примера 13N в виде грязновато-белого маслянистого вещества, и демонстрировал спектр 1H ЯМР, согласующийся с присвоенной структурой.
Пример 13O. D-Аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[N-метил-N-(3-трифторметилбензил)]амид. N-Бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-[N-метил-N-(3-трифторметилбензил)]амид (0,282 г, 0,57 ммоль) обеспечивал получение 0,195 г (95%) примера 13O в виде грязновато-белого маслянистого вещества, и демонстрировал спектр 1H ЯМР, согласующийся с присвоенной структурой.
Пример 13P. D-Глутаминовой кислоты α-метиловый эфир, γ-(3-трифторметил)бензиламид. N-Бензилоксикарбонил-D-глутаминовой кислоты α-метиловый эфир, γ-(3-трифторметил)бензиламид (764 мг, 1,69 ммоль) обеспечивал получение (516 мг, 96%) примера 13P в виде грязновато-белого маслянистого вещества, и демонстрировал спектр 1H ЯМР, согласующийся с присвоенной структурой.
Пример 14. Общий способ получения 2-азетидинона из имина и ацетилхлорида.
Стадия 1: Общий способ получения имина из производного аминокислоты. Раствор 1 эквивалента сложного эфира или амида α-аминокислоты в дихлорметане последовательно обрабатывали 1 эквивалентом соответствующего альдегида и осушающим агентом, таким как сульфат магния или силикагель, в количестве примерно 2 грамма осушающего агента на грамм исходного сложного эфира или амида α-аминокислоты. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до исчезновения реагентов, по данным тонкослойной хроматографии. Обычно реакции завершались за один час. Затем реакционную смесь фильтровали, промывали осадок на фильтре дихлорметаном и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением требуемого имина, который использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 2: Общий способ 2+2 циклоприсоединения имина и ацетилхлорида. Дихлорметановый раствор имина (10 мл дихлорметана/1 грамм имина) охлаждали до 0 °С. К полученному охлажденному раствору добавляли 1,5 эквивалента соответствующего амина, обычно триэтиламина, затем по каплям добавляли дихлорметановый раствор 1,1 эквивалента соответствующего ацетилхлорида, такого как описан в примере 1 (10 мл дихлорметана/1 грамм соответствующего ацетилхлорида). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение 1 часа и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония. Полученную смесь разделяли между водой и дихлорметаном. Соли разделяли и последовательно промывали органический слой 1 н. хлористоводородной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Остаток можно напрямую использовать для следующих реакций или при необходимости очищать хроматографией или кристаллизацией из соответствующей системы растворителей. В любом случае, после реакции 2+2 стереохимия β-лактама может быть подтвеждена циркулярным дихроизмом/дисперсией оптического вращения (CD/ORD). Иллюстративно, в качестве стандартов CD/ORD можно использовать примеры стереохимических конфигураций на платформе (αR,3S,4R) и (αS,3S,4R) β-лактама из предшествующих синтезов.
Пример 15. трет-Бутил-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат. Используя способ из примера 14, имин, полученный из 4,53 г (34,5 ммоль) трет-бутилового эфира глицина и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 5,5 г (30%) примера 15 в виде бесцветных кристаллов (перекристаллизовали из н-хлорбутана); Тпл. 194-195 °C.
Пример 16. Общий способ ацилирования азетидин-2-он-1-илацетата. Раствор (азетидин-2-он-1-ил)ацетата в тетрагидрофуране (0,22 M в азетидиноне) охлаждали до -78 °С и добавляли бис(триметилсилил)амид лития (2,2 экв.). Полученный анион обрабатывали соответствующим ацилгалогенидом (1,1 экв.). После завершения превращения азетидинона реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония и разделяли между этилацетатом и водой. Органическую фазу последовательно промывали 1 н. хлористоводородной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой сушили (сульфат магния) и выпаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле с подходящим элюентом, таким как 3:2 гексан/этилацетат.
Пример 17. 2,2,2-Трихлорэтил-2(RS)-(трет-бутоксикарбонил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат.
Используя способ из примера 16, ацилировали 9,0 г (20 ммоль) примера 15 с использованием 4,2 г (20 ммоль) трихлорэтилхлорформиат с получением 7,0 г (56%) примера 17; Тпл. 176-178 °C.
Пример 18. 2(RS)-(трет-Бутоксикарбонил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Раствор 0,20 г (0,32 ммоль) примера 17 и 52 мкл (0,36 ммоль) (3-трифторметилбензил)амина в ТГФ нагревали до кипения с обратным холодильником. После завершения реакции (ТСХ) растворитель выпаривали и перекристаллизовали остаток (хлороформ/гексан) с получением 0,17 г (82%) примера 18 в виде белого твердого вещества; Тпл. 182-184 °С.
Пример 18A. 2(RS)-(трет-Бутоксикарбонил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(2-фтор-3-трифторметилбензил)амид. Пример 18A получали в соответствии со способом из примера 18, используя 2-фтор-3-(трифторметил)бензиламин вместо (3-трифторметилбензил)амина. Пример 18A получали в виде белого твердого вещества (140 мг, 41%), и он имел спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Примеры 19-25AF получали в соответствии со способом из примера 14, используя соответствующее производное аминокислоты и альдегид на стадии 1, а также соответствующий ацетилхлорид на стадии 2.
Пример 19. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 1,52 г (4,39 ммоль) L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметил)бензиламида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил) ацетилхлоридом (пример 1) с получением 2,94 г оранжево-коричневого маслянистого вещества, из которого после очистки с помощью колоночной флэш-хроматографии (70:30 гексаны/этилацетат) получали 2,06 г (70%) примера 19 в виде белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,39 (с, 9H); 2,46 (дд, J=11,1 Гц, J=16,3 Гц, 1H); 3,18 (дд, J=3,8 Гц, J=16,4 Гц, 1H); 4,12-4,17 (м, 1H); 4,26 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,45 (дд, J=6,0 Гц, J=14,9 Гц, 1H); 4,54 (дд, J=5,3 Гц, J=9,8 Гц, 1H); 4,58-4,66 (м, 3H); 4,69-4,75 (м, 1H); 4,81 (дд, J=3,8 Гц, J=11,1 Гц, 1H); 6,25 (дд, J=9,6 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,70 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,14-7,17 (м, 2H); 7,28-7,46 (м, 11H); 7,62 (с, 1H); 8,27-8,32 (м, 1H).
Пример 19A. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(R)-(4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(S)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 19A получали в соответствии со способом из примера 19, за исключением того, что использовали 2-(4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлорид (пример 1A) вместо 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлорида. Пример 19A получали в виде белого твердого вещества (41 мг, 13%); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,37 (с, 9H); 3,11 (дд, J=3,7 Гц, J=17,8 Гц, 1H); 3,20 (дд, J=10,6 Гц, J=17,8 Гц, 1H); 4,02 (дд, J=3,7 Гц, J=10,6 Гц, 1H); 4,10-4,17 (м, 1H); 4,24 (д, J=4,9 Гц, 1H); 4,4652-4,574 (дд, J=5,9 Гц, J=15,1 Гц, 1H); 4,58-4,76 (м, 4H); 6,27 (дд, J=9,6 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,79 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,23-7,53 (м, 13H); 7,63 (с, 1H); 8,51-8,55 (м, 1H).
Пример 20. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 3,94 г (10,93 ммоль) L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметил)бензиламида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 5,53 г (75%) примера 20 после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,36 (с, 9H); 1,85-1,96 (м, 1H); 2,18-2,49 (м, 3H); 4,14-4,19 (м, 1H); 4,30 (д, J=4,9 Гц, 2H); 4,44 (дд, J=6,1 Гц, J=14,9 Гц, 1H); 4,56-4,67 (м, 4H); 4,71-4,75 (м, 1H); 6,26 (дд, J=9,6 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,71 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,16-7,18 (м, 2H); 7,27-7,49 (м, 11H); 7,60 (с, 1H); 8,08-8,12 (м, 1H).
Пример 21. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. Имин, полученный из 4,20 г (11,6 ммоль) L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 4,37 г (55%) примера 21 после очистки колоночной флэш-хроматографией (50:50 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,34 (с, 9H); 2,26-2,32 (м, 1H); 2,46-2,63 (м, 4H); 2,75-2,89 (м, 4H); 3,24-3,32 (м, 1H); 3,49-3,76 (м, 3H); 4,07-4,13 (м, 1H); 4,30 (д, J=4,6 Гц, 1H); 4,22-4,48 (м, 1H); 4,55-4,61 (м, 1H); 4,69-4,75 (м, 1H); 5,04-5,09 (м, 1H); 6,15 (дд, J=9,3 Гц, J=15,9 Гц, 1H); 6,63 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,18-7,42 (м, 15H).
Пример 22. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. Имин, полученный из 2,54 г (6,75 ммоль) L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутилового эфира, α-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 3,55 г (76%) примера 22 после очистки колоночной флэш-хроматографией (50:50 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,32 (с, 9H); 1,96-2,07 (м, 1H); 2,15-2,44 (м, 6H); 2,54-2,62 (м, 2H); 2,69-2,81 (м, 3H); 3,28-3,34 (м, 1H); 3,59-3,68 (м, 1H); 4,08-4,13 (м, 1H); 4,33-4,44 (м, 2H); 4,48-4,60 (м, 2H); 4,67-4,77 (м, 1H); 6,14 (дд, J=8,9 Гц, J=16,0 Гц, 1H); 6,62 (д, J=16,0 Гц, 1H); 7,16-7,42 (м, 15 H).
Пример 23. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 0,973 г (2,81 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметил)бензиламида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 1,53 г (82%) примера 23 после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,37 (с, 9H); 3,10 (дд, J=3,7 Гц, J=17,8 Гц, 1H); 3,20 (дд, J=10,7 Гц, J=17,8 Гц, 1H); 4,02 (дд, J=3,6 Гц, J=10,6 Гц, 1H); 4,11-4,17 (м, 1H); 4,24 (д, J=4,9 Гц, 1H); 4,46 (дд, J=5,8 Гц, J=15,1 Гц, 1H); 4,58-4,67 (м, 3H); 4,70-4,76 (м, 1H); 6,27 (дд, J=9,5 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,79 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,25-7,50 (м, 13H); 7,63 (с, 1H); 8,50-8,54 (м, 1H).
Пример 23A. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(R)-(4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(S)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Example 23A получали в соответствии со способом из примера 23, за исключением того, что использовали 2-(4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлорид (пример 1A) вместо 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлорида. Пример 23A получали в виде белого твердого вещества (588 мг, 49%); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,39 (с, 9H); 2,47 (дд, J=11,2 Гц, J=16,3 Гц, 1H); 3,18 (дд, J=3,8 Гц, J=16,3 Гц, 1H); 4,15 (т, J=8,25, Hz 1H); 4,26 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,45 (дд, J=6,0 Гц, J=15,0 Гц, 1H); 4,52-4,57 (м, 3H); 4,63 (т, J=9 Гц, 1H); 4,70 (т, J=8 Гц, 1H); 4,81 (дд, J=3,8 Гц, J=10,8 Гц, 1H); 6,25 (дд, J=9,8 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,70 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,15-7,17 (м, 2H); 7,27-7,51 (м, 11H); 7,62 (с, 1H); 8,27-8,32 (м, 1H).
Пример 24. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 1,15 г (3,20 ммоль) D-глутаминовой кислоты γ-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметил)бензиламида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 1,84 г (85%) примера 24 после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,37 (с, 9H); 2,23-2,39 (м, 4H); 3,71-3,75 (м, 1H); 4,13-4,18 (м, 1H); 4,31 (д, J=4,9 Гц, 1H); 4,44-4,51 (м, 2H); 4,56-4,68 (м, 2H); 4,71-4,76 (м, 1H); 6,26 (дд, J=9,5 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,71 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,25-7,52 (м, 13H); 7,63 (с, 1H); 8,25-8,30 (м, 1H).
Пример 25. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(4-циклогексил)пиперазинамид. Имин, полученный из 2,58 г (5,94 ммоль) L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутилового эфира, α-(4-циклогексил)пиперазинамида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 3,27 г (94%) примера 25 после очистки колоночной флэш-хроматографией (95:5 дихлорметан/метанол); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,32 (с, 9H); 1,10-1,18 (м, 1H); 1,20-1,31 (м, 2H); 1,38-1,45 (м, 2H); 1,61-1,66 (м, 1H); 1,84-1,89 (м, 2H); 1,95-2,01 (м, 1H); 2,04-2,14 (м, 3H); 2,20-2,24 (м, 1H); 2,29-2,35 (м, 1H); 2,85-2,92 (м, 1H); 3,24-3,32 (м, 1H); 3,36-3,45 (м, 2H); 3,80-3,86 (м, 1H); 4,08 (т, J=8,3 Гц, 1H); 4,27 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,31-4,55 (м, 4H); 4,71 (т, J=8,3 Гц, 1H); 4,83-4,90 (м, 1H); 6,18 (дд, J=9,1 Гц, J=15,9 Гц, 1H); 6,67 (д, J=15,9 Гц, 1H); 7,25-7,44 (м, 10H); 8,22 (шс, 1H).
Пример 25A. трет-Бутил-2(S)-(2-(4-циклогексилпиперазинилкарбонил)этил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат. Имин, полученный из 1,282 г (3,63 ммоль) L-глутаминовой кислоты α-трет-бутилового эфира, γ-(4-циклогексил)пиперазинамида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 1,946 г (80%) примера 25A после очистки колоночной флэш-хроматографией (50:50 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,15-1,26 (м, 6H); 1,39 (с, 9H); 1,55-1,64 (м, 2H); 1,77-1,83 (м, 3H); 2,22-2,35 (м, 2H); 2,40-2,50 (м, 6H); 2,75-2,79 (м, 1H); 3,43-3,48 (м, 1H); 3,56-3,60 (м, 2H); 3,75-3,79 (м, 1H); 4,10 (т, J=8,3 Гц, 1H); 4,31-4,35 (м, 2H); 4,58 (т, J=8,8 Гц, 1H); 4,73 (т, J=8,4 Гц, 1H); 6,17 (дд, J=8,6 Гц, J=16,0 Гц, 1H); 6,65 (д, J=16,0 Гц, 1H); 7,27-7,42 (м, 10H).
Пример 25B. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(2-фтор-3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 0,256 г (0,70 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-(2-фтор-3-трифторметил)бензиламида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 0,287 г (60%) примера 25B после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,38 (с, 9H); 3,12 (дд, J=4,0 Гц, J=17,8 Гц, 1H); 3,20 (дд, J=10,4 Гц, J=17,8 Гц, 1H); 4,05 (дд, J=3,9 Гц, J=10,4 Гц, 1H); 4,14 (дд, J=J′=8,2 Гц, 1H); 4,25 (д, J=4,9 Гц, 1H); 4,59-4,67 (м, 4H); 4,74 (т, J=8,3 Гц, 1H); 6,36 (дд, J=9,6 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,83 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,02-7,07 (м, 1H); 7,28-7,55 (м, 12H); 8,44-8,48 (м, 1H).
Пример 25С. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(S)-α-метилбензил]амид. Имин, полученный из 0,167 г (0,57 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, [(S)-α-метилбензил]амида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 0,219 г (63%) примера 25C после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,35 (с, 9H); 1,56 (д, J=7,0 Гц, 3H); 2,97 (дд, J=3,5 Гц, J=18,0 Гц, 1H); 3,15 (дд, J=11,0 Гц, J=17,5 Гц, 1H); 4,01 (дд, J=3,0 Гц, J=11,0 Гц, 1H); 4,14 (т, J=8,5 Гц, 1H); 4,24 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,57 (дд, J=5,0 Гц, J=9,5 Гц, 1H); 4,64 (т, J=8,8 Гц, 1H); 5,07 (т, J=8,5 Гц, 1H); 5,03-5,09 (м, 1H); 6,43 (дд, J=9,5 Гц, J=16,0 Гц, 1H); 6,83 (д, J=16,0 Гц, 1H); 7,16-7,20 (м, 1H); 7,27-7,49 (м, 14H); 8,07-8,10 (м, 1H).
Пример 25D. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(R)-α-метилбензил]амид. Имин, полученный из 0,187 г (0,46 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, [(R)-α-метилбензил]амида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 0,25 г (64%) примера 25D после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,36 (с, 9H); 1,59 (д, J=7,1 Гц, 3H); 3,10 (дд, J=3,5 Гц, J=17,8 Гц, 1H); 3,22 (дд, J=10,9 Гц, J=17,8 Гц, 1H); 3,93 (дд, J=3,5 Гц, J=10,8 Гц, 1H); 4,14 (т, J=8,1 Гц, 1H); 4,24 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,58 (дд, J=5,0 Гц, J=9,5 Гц, 1H); 4,65 (т, J=8,7 Гц, 1H); 4,74 (т, J=8,2 Гц, 1H); 5,06-5,14 (м, 1H); 6,32 (дд, J=9,5 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,74 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,19-7,43 (м, 15H); 8,15-8,18 (м, 1H).
Пример 25E. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-метил-N-(3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 0,195 г (0,41 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-[N-метил-N-(3-трифторметилбензил)]амида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 0,253 г (69%) примера 25E после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,36 (с, 9H); 2,53 (дд, J=4,0 Гц, J=17,0 Гц, 1H); 3,06 (дд, J=10,8 Гц, J=16,8 Гц, 1H); 3,13 (с, 3H); 4,12 (дд, J=8,0 Гц, J=9,0 Гц, 1H); 4,26 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,38 (д, J=15,0 Гц, 1H); 4,46 (дд, J=5,0 Гц, J=9,5 Гц, 1H); 4,56 (т, J=6,8 Гц, 1H); 4,70-4,79 (м, 2H); 5,27 (дд, J=4,0 Гц, J=11,0 Гц, 1H); 6,22 (дд, J=9,3 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,73 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,33-7,45 (м, 14H).
Пример 25F. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-chlorostyr-2-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 1,62 г (4,44 ммоль) L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметил)бензиламида и α-хлоркоричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 0,708 г (22%) примера 25F после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,35 (с, 9H); 1,68 (шс, 1H); 2,19-2,35 (м, 2H); 2,40-2,61 (м, 2H); 4,13 (дд, J=7,5 Гц, J=9,0 Гц, 1H); 4,22 (т, J=7,0 Гц, 1H); 4,34 (д, J=4,5 Гц, 1H); 4,45 (дд, J=5,5 Гц, J=15,0 Гц, 1H); 4,51-4,60 (м, 3H); 4,89 (дд, J=7,5 Гц, J=8,5 Гц, 1H); 6,89 (с, 1H); 7,28-7,54 (м, 14H).
Пример 25G. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2′-метоксистир-2-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 0,34 г (0,98 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметилбензил)амида и 2'-метоксикоричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 0,402 г (59%) примера 25G после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,35 (с, 9H); 1,68 (шс, 1H); 2,19-2,35 (м, 2H); 2,40-2,61 (м, 2H); 4,13 (дд, J=7,5 Гц, J=9,0 Гц, 1H); 4,22 (т, J=7,0 Гц, 1H); 4,34 (д, J=4,5 Гц, 1H); 4,45 (дд, J=5,5 Гц, J=15,0 Гц, 1H); 4,51-4,60 (м, 3H); 4,89 (дд, J=7,5 Гц, J=8,5 Гц, 1H); 6,89 (с, 1H); 7,28-7,54 (м, 14H).
Пример 25H. трет-Бутил-(2R)-(бензилоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат. Имин, полученный из 0,329 г (1,31 ммоль) O-(бензил)-D-серина трет-бутилового эфира (пример 5B) и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 0,543 г (73%) примера 25H после очистки колоночной флэш-хроматографией (90:10 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,39 (с, 9H); 3,56 (дд, J=2,7 Гц, J=9,5 Гц, 1H); 3,82 (дд, J=4,8 Гц, J=9,5 Гц, 1H); 4,11 (т, J=8,3 Гц, 1H); 4,21-4,29 (м, 2H); 4,50-4,58 (м, 3H); 4,71-4,78 (м, 2H); 6,19 (дд, J=9,1 Гц, J=16,0 Гц, 1H); 6,49 (д, J=16,0 Гц, 1H); 7,07-7,11 (м, 1H); 7,19-7,40 (м, 14H).
Пример 25I. трет-Бутил-2(S)-(2-(4-циклогексилпиперазинилкарбонил)метил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат. Имин, полученный из 0,3 г (0,88 ммоль) L-аспарагиновой кислоты α-трет-бутилового эфира, γ-(4-циклогексил)пиперазинамида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 464 мг (80%) примера 25I в виде белого твердого вещества после очистки колоночной флэш-хроматографией (50:50 гексаны/этилацетат). Пример 25I демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 25J. трет-Бутил-3(R)-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-3-метил-4(R)-(стир-2-ил)азетидин-2-он-1-ил]-3-[(3-трифторметил)фенилметиламинокарбонил]пропаноат. Имин, полученный из 0,307 г (0,89 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметил)бензиламида (Пример 20) и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)пропаноилохлоридом (пример 1E) с получением 120 мг (20%) после очистки колоночной флэш-хроматографией (гексаны 70% / EtOAc 30%); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,25 (с, 3H), 1,38 (с, 9H); 3,09 (дд, J=3,0 Гц, J=18,0 Гц, 1H); 3,33 (дд, J=12,5 Гц, J=18,0 Гц, 1H); 4,01 (дд, J=3,0 Гц, J=11,5 Гц, 1H); 4,04 (дд, J=3,5 Гц, J=8,8 Гц, 1H); 4,42 (д, J=9,0 Гц, 1H); 4,45-4,51 (м, 3H); 4,61-4,66 (м, 1H); 4,75 (дд, J=3,5 Гц, J=8,5 Гц, 1H); 6,23 (дд, J=9,0 Гц, J=15,5 Гц, 1H); 6,78 (д, J=15,5 Гц, 1H); 7,23-7,53 (м, 13H); 7,64 (с, 1H).
Пример 25K. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(проп-1-енил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 0,289 г (0,83 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметил)бензиламида и кротонового альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 381 мг (76%) примера 25K после очистки колоночной флэш-хроматографией (99:1 CH2Cl2/MeOH); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,36 (с, 9H), 1,69 (дд, J=2 Гц, J=6,5 Гц, 3H); 3,08 (дд, J = 3,3 Гц, J = 17,8 Гц, 1H); 3,18 (дд, J = 11 Гц, J = 17,5 Гц, 1H); 3,94 (дд, J = 3,5 Гц, J = 11 Гц, 1H); 4,12 (д, J=5 Гц, 1H); 4,15 (дд, J = 7 Гц, J = 8 Гц, 1H); 4,35 (дд, J = 4,8 Гц, J=9,8Гц, 1H); 4,44 (дд, J=6 Гц, J=15 Гц, 1H); 4,61 (дд, J=6 Гц, J=15 Гц, 1H); 4,67-4,75 (м, 2H); 5,52-5,58 (м, 1H); 5,92-6,00 (м, 1H); 7,33-7,60 (м, 9H); 8,47-8,50 (м, 1H).
Пример 25O. Метил-2(S)-(трет-бутоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат. Имин, полученный из 433 мг (1,99 ммоль) L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутилового эфира, α-метилового эфира и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 682 мг (64%) примера 25O после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,32 (с, 9H); 2,10-2,26 (м, 1H); 2,30-2,41 (м, 3H); 3,66 (с, 3H); 3,95-3,99 (м, 1H); 4,16 (дд, J=7,5 Гц, J=9 Гц, 1H); 4,38 (дд, J=5 Гц, J=9 Гц, 1H); 4,55 (д, J= 5 Hz 1H); 4,61 (т, J= 9 Гц, 1H); 4,86 (дд, J=7,5 Гц, J=9 Гц, 1H); 6,00 (дд, J=9 Гц, J=16 Гц, 1H); 6,60 (д, J=16 Гц, 1H); 7,26-7,43 (м, 10H).
Пример 25M. трет-Бутил-2(S)-(метоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат. Имин, полученный из 428 мг (1,97 ммоль) L-глутаминовой кислоты γ-трет-бутилового эфира, α-метилового эфира и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 864 мг (82%) примера 25M после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат); 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,40 (с, 9H); 2,12-2,27 (м, 1H); 2,32-2,55 (м, 3H); 3,50 (с, 3H); 3,72 (дд, J=4,6 Гц, J=10,4 Гц, 1H); 4,12-4,17 (м, 1H); 4,34 (дд, J=5 Гц, J=9 Гц, 1H); 4,50 (д, J= 5 Гц, 1H); 4,60 (т, J= 8,9 Гц, 1H); 4,81-4,86 (м, 1H); 6,06 (дд, J=9 Гц, J=16 Гц, 1H); 6,59 (д, J=16 Гц, 1H); 7,25-7,42 (м, 10H).
Пример 25P. Метил-2(S)-(трет-бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат. Имин, полученный из 424 мг (2,09 ммоль) L-аспарагиновой кислоты γ-трет-бутилового эфира, α-метилового эфира и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 923 мг (85%) примера 25P после перекристаллизации из смеси CH2Cl2/гексаны; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,41 (с, 9H); 2,77 (дд, J=7,5 Гц, J=16,5 Гц, 1H); 3,00 (дд, J=7 Гц, J=16,5 Гц, 1H); 4,16 (дд, J=7, 5 Гц, J=9 Гц, 1H); 4,41-48 (м, 2H); 4,55 (д, J= 5 Гц, 1H); 4,60 (т, J= 8,8 Гц, 1H); 4,86 (дд, J=7,5 Гц, J=9 Гц, 1H); 5,93 (дд, J=9,5 Гц, J=15,5 Гц, 1H); 6,61 (д, J=15,5 Гц, 1H); 7,25-7,43 (м, 10H).
Пример 25L. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(R)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. Имин, полученный из 160 мг (0,44 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-[(R)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 166 мг (55%) примера 25L после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/ EtOAc). Пример 25L демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 25N. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(S)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. Имин, полученный из 120 мг (0,22 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-[(S)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 75 мг (50%) примера 25N после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/EtOAc). Пример 25N демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 25Q. Метил-2(R)-(2-(3-трифторметилбензил)аминокарбонил)этил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат. Имин, полученный из 517 мг (1,62 ммоль) D-глутаминовой кислоты α-метилового эфира, γ-(3-трифторметил)бензиламида и коричного альдегида, объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 527 мг (51%) примера 25Q после очистки колоночной флэш-хроматографией (50:50 гексаны/ EtOAc). Пример 25Q демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Следующие соединения получали в соответствии со способами, описанными в настоящем документе:
Стереохимия
Стереохимия
Стереохимия
Пример 25AF. трет-Бутил-2(S)-(2-(3-трифторметилбензил)аминокарбонил)этил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]ацетат.
Пример 26. Общий способ гидролиза трет-бутилового эфира. Раствор производного трет-бутилового эфира в муравьиной кислоте, обычно 1 г в 10 мл перемешивали при комнатной температуре до момента, когда сложный эфир перестал обнаруживаться с помощью тонкослойной хроматографии (дихлорметан 95% / метанол 5%), a обычное время реакции составляло около 3 часов. Муравьиную кислоту выпаривали при пониженном давлении; полученный твердый остаток разделяли между дихлорметаном и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой выпаривали с получением грязновато-белого твердого вещества, которое можно напрямую использовать для следующих реакций или при необходимости перекристаллизовать из подходящей системы растворителей.
Примеры 27-34AE получали из соответствующего трет-бутилового эфира способом, использованным в примере 26.
Пример 27. 2(R,S)-(Карбокси)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 18 (0,30 г, 0,46 ммоль) гидролизовали с получением 0,27 г (количественный выход) примера 27 в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 4,17-5,28 (м, 9H); 6,21-6,29 (м, 1H), 6,68-6,82 (м, 1H); 7,05-7,75 (м, 13H); 9,12-9,18 (м, 1H).
Пример 28. 2(S)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 19 (1,72 г, 2,59 ммоль) гидролизовали с получением 1,57 г (количественный выход) примера 28 в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 2,61 (дд, J=9,3 Гц, J=16,6 Гц, 1H); 3,09-3,14 (м, 1H); 4,10-4,13 (м, 1H); 4,30 (д, J=4,5 Гц, 1H); 4,39-4,85 (м, 6H); 6,20 (дд, J=9,6 Гц, J=15,7 Гц, 1H); 6,69 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,12-7,15 (м, 2H); 7,26-7,50 (м, 11H); 7,61 (с, 1H); 8,41-8,45 (м, 1H).
Пример 28A. 2(S)-(Карбоксиметил)-2-[3(R)-(4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(S)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 19A (41 мг, 0,06 ммоль) гидролизовали с получением 38 мг (количественный выход) примера 28A в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 2,26 (д, J=7 Гц, 1H); 4,03 (т, J=7 Гц, 1H); 4,16 (т, J=8 Гц, 1H); 4,26 (д, J=4,3 Гц, 1H); 4,46 (дд, J=5,7 Гц, J=15,1, 1H); 4,53-4,75 (м, 5H); 6,25 (дд, J=9,5 Гц, J=15,7 Гц, 1H); 6,77 (д, J=15,7 Гц, 1H); 7,28-7,53 (м, 13H); 7,64 (с, 1H); 8,65-8,69 (м, 1H).
Пример 29. 2(S)-(Карбоксиэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 20 (4,97 г, 7,34 ммоль) гидролизовали с получением 4,43 г (97%) примера 29 в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,92-2,03 (м, 1H); 2,37-2,51 (м, 3H); 4,13-4,19 (м, 1H); 3,32 (д, J=4,9 Гц, 1H); 4,35-4,39 (м, 1H); 4,44 (дд, J=5,9 Гц, J=14,9 Гц, 1H); 4,50-4,57 (м, 2H); 4,61-4,67 (м, 1H); 4,70-4,76 (м, 1H); 6,24 (дд, J=9,6 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,70 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,18-7,47 (м, 14H).
Пример 30. 2(S)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. Пример 21 (1,88 г, 2,78 ммоль) гидролизовали с получением 1,02 г (60%) примера 30 в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 2,63 (дд, J=6,0 Гц, J=16,5 Гц, 1H); 2,75-2,85 (м, 1H); 3,00 (дд, J=8,2 Гц, J=16,6 Гц, 1H); 3,13-3,26 (м, 4H); 3,37-3,56 (м, 4H); 3,86-4,00 (м, 1H); 4,05-4,11 (м, 1H); 4,24 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,46-4,66 (м, 1H); 4,65-4,70 (м, 1H); 5,10-5,15 (м, 1H); 6,14 (дд, J=9,3 Гц, J=15,9 Гц, 1H); 6,71 (д, J=15,9 Гц, 1H); 7,22-7,41 (м, 15H); 12,02 (с, 1H).
Пример 31. 2(S)-(Карбоксиэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[4-(2-фенилэтил)]пиперазинамид. Пример 22 (0,383 г, 0,55 ммоль) гидролизовали с получением 0,352 г (количественный выход) примера 31 в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,93-2,01 (м, 1H); 2,07-2,36 (м, 6H); 2,82-2,90 (м, 1H); 3,00-3,20 (м, 4H); 3,36-3,54 (м, 4H); 3,74-3,82 (м, 1H); 4,06-4,11 (м, 1H); 4,29 (д, J=4,9 Гц, 1H); 4,33-4,46 (м, 2H); 4,50-4,58 (м, 2H); 4,67-4,72 (м, 1H); 4,95-5,00 (м, 1H); 6,18 (дд, J=9,2 Гц, J=16,0 Гц, 1H); 6,67 (д, J=15,9 Гц, 1H); 7,19-7,42 (м, 15H); 8,80 (шс, 1H).
Пример 32. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 23 (1,51 г, 2,27 ммоль) гидролизовали с получением 1,38 г (количественный выход) примера 32 в виде грязновато-белого твердого вещества.
Пример 32A. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(R)-(4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(S)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 23A (550 мг, 0,83 ммоль) гидролизовали с получением 479 мг (95%) примера 32A в виде грязновато-белого твердого вещества. Пример 32A демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 33. 2(R)-(Карбоксиэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 24 (0,604 г, 0,89 ммоль) гидролизовали с получением 0,554 г (количественный выход) примера 33 в виде грязновато-белого твердого вещества.
Пример 34. 2(S)-(Карбоксиэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(4-циклогексил)пиперазинамид. Пример 25 (0,537 г, 0,80 ммоль) гидролизовали с получением 0,492 г (количественный выход) примера 34 в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,09-1,17 (м, 1H); 1,22-1,33 (м, 2H); 1,40-1,47 (м, 2H); 1,63-1,67 (м, 1H); 1,85-1,90 (м, 2H); 1,95-2,00 (м, 1H); 2,05-2,15 (м, 3H); 2,20-2,24 (м, 1H); 2,30-2,36 (м, 1H); 2,85-2,93 (м, 1H); 3,25-3,33 (м, 1H); 3,36-3,46 (м, 2H); 3,81-3,87 (м, 1H); 4,08 (т, J=8,3 Гц, 1H); 4,28 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,33-4,56 (м, 4H); 4,70 (т, J=8,3 Гц, 1H); 4,83-4,91 (м, 1H); 6,17 (дд, J=9,1 Гц, J=15,9 Гц, 1H); 6,67 (д, J=15,9 Гц, 1H); 7,25-7,44 (м, 10H); 8,22 (шс, 1H).
Пример 34A. 2(S)-(2-(4-Циклогексилпиперазинилкарбонил)этил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусная кислота. Пример 25A (0,787 г, 1,28 ммоль) гидролизовали с получением 0,665 г (92%) примера 34A в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,05-1,13 (м, 1H); 1,20-1,40 (м, 5H); 1,60-1,64 (м, 1H); 1,79-1,83 (м, 2H); 2,00-2,05 (м, 2H); 2,22-2,44 (м, 3H); 2,67-2,71 (м, 1H); 2,93-3,01 (м, 4H); 3,14-3,18 (м, 1H); 3,38-3,42 (м, 1H); 3,48-3,52 (м, 1H); 3,64-3,69 (м, 1H); 4,06-4,14 (м, 2H); 4,34-4,43 (м, 2H); 4,56 (т, J=8,8 Гц, 1H); 4,73 (т, J=8,4 Гц, 1H); 6,15 (дд, J=9,1 Гц, J=16,0 Гц, 1H); 6,65 (д, J=16,0 Гц, 1H); 7,25-7,42 (м, 10H).
Пример 34B. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(2-фтор-3-трифторметилбензил)карбоксамид. Пример 25B (0,26 г, 0,38 ммоль) гидролизовали с получением 0,238 г (количественный выход) примера 34B в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 3,27 (д, J=7,2 Гц, 1H); 4,06 (т, J=7,2 Гц, 1H); 4,15 (т, J=8,1 Гц, 1H); 4,27 (д, J=4,8 Гц, 1H); 4,56-4,76 (м, 5H); 6,34 (дд, J=9,5 Гц, J=15,7 Гц, 1H); 6,80 (д, J=15,7 Гц, 1H); 7,06 (т, J=7,7 Гц, 1H); 7,31-7,54 (м, 12H); 8,58 (т, J=5,9 Гц, 1H).
Пример 34C. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(S)-α-метилбензил]амид. Пример 25C (0,215 г, 0,35 ммоль) гидролизовали с получением 0,195 г (количественный выход) примера 34C в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,56 (д, J=7,0 Гц, 1H); 3,10 (дд, J=4,5 Гц, J=17,9 Гц, 1H); 3,18 (дд, J=9,8 Гц, J=17,9 Гц, 1H); 4,00 (дд, J=4,5 Гц, J=9,7 Гц, 1H); 4,14 (т, J=8,2 Гц, 1H); 4,26 (д, J=4,7 Гц, 1H); 5,02-5,09 (м, 1H); 6,41 (дд, J=9,4 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,78 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,18 (т, J=7,3 Гц, 1H); 7,26-7,43 (м, 12H); 8,29 (д, J=8,2 Гц, 1H).
Пример 34D. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(R)-α-метилбензил]амид. Пример 25D (0,22 г, 0,35 ммоль) гидролизовали с получением 0,20 г (количественный выход) примера 34D в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,59 (д, J=7,0 Гц, 1H); 3,25 (д, J=7,0 Гц, 2H); 3,92 (т, J=7,3 Гц, 1H); 4,15 (т, J=8,3 Гц, 1H); 4,26 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,52 (дд, J=4,8 Гц, J=9,3 Гц, 1H); 4,65 (т, J=8,8 Гц, 1H); 4,72 (т, J=8,3 Гц, 1H); 5,07-5,28 (м, 1H); 6,29 (дд, J=9,5 Гц, J=15,6 Гц, 1H); 6,71 (д, J=16,0 Гц, 1H); 7,20-7,43 (м, 13H); 8,31 (д, J=8,0 Гц, 1H).
Пример 34E. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-метил-N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 25E (0,253 г, 0,37 ммоль) гидролизовали с получением 0,232 г (количественный выход) примера 34E в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 3,07-3,15 (м, 4H); 4,13 (т, J=8,2 Гц, 1H); 4,30 (д, J=4,9 Гц, 1H); 4,46-4,78 (м, 5H); 5,23 (дд, J=4,6 Гц, J=9,7 Гц, 1H); 6,20 (дд, J=9,4 Гц, J=15,9 Гц, 1H); 6,73 (д, J=15,9 Гц, 1H); 7,25-7,43 (м, 15H).
Пример 34F. 2(S)-(Карбоксиэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-хлорстир-2-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 25F (0,707 г, 0,99 ммоль) гидролизовали с получением 0,648 г (99%) примера 34F в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 2,22-2,28 (м, 2H); 2,49-2,64 (м, 2H); 4,09 (т, J=8,0 Гц, 1H); 4,25-4,62 (м, 6H); 4,87 (т, J=8,0 Гц, 1H); 6,88 (с, 1H); 7,25-7,66 (м, 15H).
Пример 34G. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2′-метоксистир-2-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 25G (0,268 г, 0,39 ммоль) гидролизовали с получением 0,242 г (98%) примера 34G в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 3,26 (д, J=7,1 Гц, 1H); 3,79 (с, 3H); 4,14 (т, J=8,2 Гц, 1H); 4,25 (д, J=4,5 Гц, 1H); 4,51 (дд, J=5,9 Гц, J=15,5 Гц, 1H); 4,53-4,66 (м, 4H); 6,36 (дд, J=9,4 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 8,88 (т, J=8,2 Гц, 1H); 6,70 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,18 (д, J=6,5 Гц, 1H); 7,25-7,48 (м, 10H); 7,48 (с, 1H); 8,66-8,69 (м, 1H).
Пример 34H. (2R)-(Бензилоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусная кислота. Пример 25H (0,16 г, 0,28 ммоль) гидролизовали с получением 0,144 г (количественный выход) примера 34H в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 3,65 (дд, J=4,0 Гц, J=9,5 Гц, 1H); 3,82 (дд, J=5,5 Гц, J=9,5 Гц, 1H); 4,11 (дд, J=7,8 Гц, J=8,8 Гц, 1H); 4,33 (с, 2H); 4,50 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,57 (т, J=9,0 Гц, 1H); 4,67 (дд, J=4,0 Гц, J=5,0 Гц, 1H); 4,69 (дд, J=5,0 Гц, J=9,5 Гц, 1H); 4,75 (т, J=8,0 Гц, 1H); 6,17 (дд, J=9,3 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,55 (д, J=16,0 Гц, 1H); 7,09-7,12 (м, 2H); 7,19-7,42 (м, 13H).
Пример 34I. 2(S)-(2-(4-Циклогексилпиперазинилкарбонил)метил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусная кислота. Пример 25I (737 мг, 1,12 ммоль) гидролизовали с получением 640 мг (95%) примера 34I в виде грязновато-белого твердого вещества. Пример 34I демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 34J. 3(R)-[3(S)-(4(S)-Фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-3-метил-4(R)-(стир-2-ил)азетидин-2-он-1-ил]-3-[(3-трифторметил)фенилметиламинокарбонил]пропановая кислота. Используя общий способ получения примера 26, гидролизовали 120 мг (0,18 ммоль) примера 25J с получением 108 мг (98%) примера 34J в виде грязновато-белого твердого вещества; 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,22 (с, 3H); 3,25 (дд, J=3,5 Гц, J=18,0 Гц, 1H); 3,36 (дд, J=10,8 Гц, J=18,2 Гц, 1H); 4,01 (дд, J=4,0 Гц, J=10,5 Гц, 1H); 4,05 (дд, J=3,8 Гц, J=8,8 Гц, 1H); 4,33 (д, J=9,0 Гц, 1H); 4,44-4,51 (м, 3H); 4,61-4,66 (м, 1H); 4,73 (дд, J=3,8 Гц, J=8,8 Гц, 1H); 6,19 (дд, J=9,0 Гц, J=16,0 Гц, 1H); 6,74 (д, J=16,0 Гц, 1H); 7,22-7,54 (м, 13H); 7,65 (с, 1H).
Пример 34K. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(пропен-1-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Используя общий способ получения примера 26, гидролизовали 160 мг (0.27 ммоль) примера 25K с получением 131 мг (90%) примера 34K в виде грязновато-белого твердого вещества. 1H ЯМР (CDCl3) δ 1,69 (дд, J=1 Гц, J=6,5 Гц, 3H); 3,23 (д, J = 7 Гц, 1H); 3,93 (т, J= 7,3Гц, 1H); 4,14-4,20 (м, 3H); 4,29 (дд, J = 5 Гц, J = 9,5 Гц, 1H); 4,43 (дд, J = 6 Гц, J = 15 Гц, 1H); 4,61 (дд, J=6,5 Гц, J=15 Гц, 1H); 4,66 -4,74 (м, 2H); 5,50-5,55 (м, 1H); 5,90-5,98 (м, 1H); 7,32-7,60 (м, 9H); 8,60-8,64 (м, 1H).
Пример 34L. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(R)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. Пример 25L (166 мг, 0,24 ммоль) гидролизовали с получением 152 мг (количественный выход) примера 34L в виде грязновато-белого твердого вещества; и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 34M. 2(S)-(Метоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусная кислота. Пример 25M (875 мг, 1,64 ммоль) гидролизовали с получением 757 мг (97%) примера 34M в виде грязновато-белого твердого вещества, и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 34N. 2(R)-(Карбоксиметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(S)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. Пример 25N (38,5 мг, 0,057 ммоль) гидролизовали с получением 35 мг (количественный выход) примера 34N в виде грязновато-белого твердого вещества, и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 34O. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусная кислота. Пример 25O (97 мг, 0,18 ммоль) растворяли в смеси метанол/тетрагидрофуран (2,5 мл/2 мл) и приводили во взаимодействие с гидроксидом лития (0,85 мл 0,85 M раствора в воде; 0,72 ммоль) в течение 6 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли 15 мл дихлорметана и добавляли водный раствор хлористоводородной кислоты (1 М) до достижения рН водного слоя 5 (измеряли обычной рН-индикаторной бумагой). Затем отделяли органический слой и выпаривали досуха с получением 84 мг (89%) примера 34O в виде грязновато-белого твердого вещества, и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 34P. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусная кислота. Пример 25P (200 мг, 0,39 ммоль) гидролизовали в соответствии со способом, использованным для примера 34O, с получением 155 мг (88%) примера 34P в виде грязновато-белого твердого вещества; и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 34Q. 2(R)-(2-(3-трифторметилбензил)амино-1-илкарбонил)этил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусная кислота. Пример 25Q (150 мг, 0,24 ммоль) гидролизовали в соответствии со способом, использованным для примера 34O, с получением 143 мг (97%) примера 34Q в виде грязновато-белого твердого вещества, и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 34R. 2(R)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(RS)-2-тиенилметил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Имин, полученный из 290 мг (0,84 ммоль) D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира, α-(3-трифторметил)бензиламида и коричного альдегида, объединяли с 2-тиофен-ацетилхлоридом с получением 42 мг (8%) примера 34R после очистки колоночной флэш-хроматографией (70:30 гексаны/этилацетат), и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Следующие соединения получали в соответствии со способами, описанными в настоящем документе:
Стереохимия
Стереохимия
Стереохимия
Примеры 36-42A, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 27, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Примеры 43-86A, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 28, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Пример 86B. Пример 63 (44 мг, 0,06 ммоль) растворяли в 4 мл дихлорметана и приводили во взаимодействие с 3-хлорпероксибензойной кислотой (12 мг, 0,07 ммоль) до завершения реакции, по данным ТСХ (дихлорметан 94%/метанол 6%, УФ обнаружение). Реакцию гасили водным раствором сульфита натрия, дихлорметановый слой промывали 5% водным раствором бикарбоната натрия и дистиллированной водой. После выпаривания дихлорметанового слоя получали пример 86B в виде грязновато-белого твердого вещества (35 мг, 78%), и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Примеры 121-132, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 30, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Примеры 132A-132B, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34I, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Пример 132C. 2(S)-(трет-Бутоксикарбонилметил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(4-циклогексил)пиперазинамид. Пример 132C получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34P, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 1-циклогексилпиперазин. Пример 132C демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Соединения, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способами, описанными в настоящем документе:
Примеры 133-134G, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 32, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Пример 134H. Пример 134H получали способом из примера 86B, за исключением того, что пример 133 заменяли на пример 110. Пример 134H получали в виде грязновато-белого твердого вещества (48 мг, 94%), и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 134I. 2(R)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбоксиметил]-2-[3(S)-(4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 134I получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 32A, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин, и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Соединения, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способами, описанными в настоящем документе:
Стереохимия
Пример 222. 2(R)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(2-фтор-3-трифторметилбензил)карбоксамид. Пример 222 получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34B, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин; пример 222 демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 223. 2(R)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(S)-α-метилбензил]амид. Пример 223 получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34C, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин; пример 223 демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 224.
2(R)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(R)-α-метилбензил]амид. Пример 224 получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34D, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин; пример 223 демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 225.
2(R)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-метил-N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 225 получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34E, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин; пример 223 демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре; рассчитано для C43H48F3N5O5: C, 66,91; H, 6,27; N, 9,07; найдено: C, 66,68; H, 6,25; N, 9,01.
Гидрохлоридная соль примера 225. Пример 225 (212,5 мг) растворяли в 30 мл сухого Et2O. Через полученный раствор пропускали сухой газообразный HCl, что приводило к быстрому образованию грязновато-белого осадка. Добавление HCl прекращали после прекращения видимого образования осадка (около 5 минут). Твердое вещество выделяли фильтрованием с отсасыванием, дважды промывали 15 мл сухого Et2O и сушили с получением 213,5 мг (выход 96%) грязновато-белого твердого вещества; рассчитано для C43H49ClF3N5O5: C, 63,89; H, 6,11; N, 8,66; Cl, 4,39; найдено. C, 63,41; H, 5,85; N, 8,60; Cl, 4,86.
Пример 225A. 2(R)-[[4-[2-(пиперидинил)этил]пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(S)-α-метилбензил]амид. Пример 225A получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34C, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-[2-(пиперидинил)этил]пиперидин. Пример 225A демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 225B. 2(R)-[[4-[2-(пиперидинил)этил]пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(R)-α-метилбензил]амид. Пример 225B получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34D, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-[2-(пиперидинил)этил]пиперидин. Пример 225B демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 225C. 2(R)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(R)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. Пример 225C получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34L, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин. Пример 225C демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 225D. 2(R)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(S)-1-(3-трифторметилфенил)этил]амид. Пример 225D получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34N, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин. Пример 225D демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Примеры 87-120E, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 29, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Пример 120F. Пример 120F получали способом из примера 86B, за исключением того, что пример 63 заменяли на пример 110 с получением грязновато-белого твердого вещества (54,5 мг, 98%). Пример 120F демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 120G. 2(S)-(Метоксикарбонилэтил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 120G получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34M, и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 35. 2(S)-[4-(2-фенилэтил)пиперазинил-карбонилэтил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Использовали способ из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на карбоновую кислоту из примера 29, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(2-фенилэтил)пиперазин, с получением указанного в заголовке соединения; 1H ЯМР (CDCl3) δ 2,21-2,23 (м, 1H); 2,25-2,45 (м, 6H); 2,52-2,63 (м, 3H); 2,72-2,82 (м, 2H); 3,42-3,48 (м, 2H); 3,52-3,58 (м, 1H); 4,13-4,18 (м, 1H); 4,26 (дд, J=5,1 Гц, J=8,3 Гц, 1H); 4,29 (д, J=5,0 Гц, 1H); 4,44 (дд, J=6,0 Гц, J=15,0 Гц, 1H); 4,54 (дд, J=6,2 Гц, J=14,9 Гц, 1H); 4,61-4,68 (м, 2H); 4,70-4,75 (м, 1H); 6,27 (дд, J=9,6 Гц, J=15,8 Гц, 1H); 6,73 (д, J=15,8 Гц, 1H); 7,16-7,60 (м, 19H); 8,07-8,12 (м, 1H); FAB+ (M+H)+/z 794; элементный анализ, рассчитано для C45H46F3N5O5: C, 68,08; H, 5,84; N, 8,82; найдено: C, 67,94; H, 5,90; N, 8,64.
Примеры 141-171, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Примеры 172-221R, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34A, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Соединения, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способами, описанными в настоящем документе:
Примеры 135-140, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 33, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Пример 140A. 2(R)-( 2-(3-трифторметилбензил)амино-1-илкарбонил)этил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(4-циклогексил)пиперазинамид. Пример 140A получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34Q, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 1-циклогексилпиперазин, и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Примеры 226-230C, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34F, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Следующие соединения получали в соответствии со способами, описанными в настоящем документе:
Стереохимия
Пример 86C. 2(S)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(R)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 86C получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 28A, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин, и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 231. 2(R)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2′-метоксистир-2-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 231 получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34G, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин, и он демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Примеры 232-233A, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34H, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на соответствующий амин; все перечисленные примеры демонстрировали спектры 1H ЯМР, соответствующие присвоенной структуре.
Пример 234. (2RS)-[4-(пиперидинил)пиперидинилкарбонил]-2-метил-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид.
Пример 37 (50 мг, 0,067 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) последовательно обрабатывали гидридом натрия (4 мг, 0,168 ммоль) и метилйодидом (6 мкл, 0,094 ммоль) при -78 °С. Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и выпаривали. Полученный остаток разделяли между дихлорметаном и водой и выпаривали органический слой. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (95:5 хлороформ/метанол) с получением 28 мг (55%) указанного в заголовке соединения в виде грязновато-белого твердого вещества; МС (ЭР+): m/z=757 (M+).
Пример 234A. 4-(Пиперидинил)-пиперидинил 3(R)-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-3-метил-4(R)-(стир-2-ил)азетидин-2-он-1-ил]-3-[(3-трифторметил)фенилметиламинокарбонил]пропановая кислота.
Использовали способ из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на карбоновую кислоту из примера Example 34J, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин, с получением указанного в заголовке соединения с количественным выходом; МС (m+H)+ 772.
Соединения, представленные в следующей таблице, получали в соответствии со способами, описанными в настоящем документе:
Стереохимия
Пример 235. 2(S)-[[(1-Бензилпиперидин-4-ил)амино]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-фенилэт-1-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 235 получали способом из примера 8, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид заменяли на пример 63 (50 мг, 0,064 ммоль) с получением 40 мг (80%) примера 235 в виде грязновато-белого твердого вещества; пример 235 демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 236. (2S)-[(4-циклогексилпиперазинил)карбонилэтил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-фенилэт-1-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 236 получали способом из примера 8, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид заменяли на пример 110 (50 мг, 0,065 ммоль) с получением 42 мг (84%) примера 236 в виде грязновато-белого твердого вещества; пример 236 демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 236A. (2S)-[(4-циклогексилпиперазинил)карбонилэтил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-фенилэт-1-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[(R)-1,2,3,4-тетрагидронафт-1-ил]амид. Пример 236A получали способом из примера 8, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-L-аспарагиновой кислоты β-трет-бутиловый эфир, α-(3-трифторметил)бензиламид заменяли на пример 215 (76 мг, 0,10 ммоль) с получением 69 мг (90%) примера 236A в виде грязновато-белого твердого вещества. Пример 236A демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 237. 2(R)-[[4-(Пиперидинил)пиперидинил]карбонилметил]-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(пропен-1-ил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-(3-трифторметилбензил)амид. Пример 237 получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на пример 34K, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-(пиперидинил)пиперидин. Пример 237 демонстрировал спектр 1H ЯМР, соответствующий присвоенной структуре.
Пример 238. (2S)-(Бензилтиометил)-2-[3(S)-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)-4(R)-(2-стирил)азетидин-2-он-1-ил]уксусной кислоты N-[4-[2-(пиперид-1-ил)этил]пиперидин-1-ил]амид. Указанный пример получали способом из примера 6, за исключением того, что N-бензилоксикарбонил-D-аспарагиновой кислоты β-трет-бутилового эфира моногидрат заменяли на соответствующий бензил-защищенный цистеиновый аналог, а 3-(трифторметил)бензиламин заменяли на 4-[2-(пиперид-1-ил)этил]пиперидин.
Стадия 1. N-трет-Бутилоксикарбонил-(S)-(бензил)-D-цистеин-[4-(2-(1-пиперидил)этил)]пиперидинамид. N-трет-Бутилоксикарбонил-(S)-бензил-N-(трет-бутилоксикарбонил)-D-цистеин (0,289 г, 0,93 ммоль) и 4-[2-(1-пиперидил)этил]пиперидин (0,192 г, 0,98 ммоль) в дихлорметане (20 мл) обеспечивали получение 0,454 г (количественный выход) примера X в виде грязновато-белого твердого вещества. 1H ЯМР (CDCl3) δ 0,89-1,15 (м, 2H); 1,39-1,44 (м, 16H); 1,54-1,61 (м, 4H); 1,62-1,71 (м, 1H); 2,21-2,35 (м, 5H); 2,49-2,58 (м, 2H); 2,66-2,74 (м, 1H); 2,79-2,97 (м, 1H); 3,67-3,76 (м, 3H); 4,48-4,51 (м, 1H); 4,72-4,75 (м, 1H); 5,41-5,44 (м, 1H); 7,19-7,34 (м, 5H).
Стадия 2. (S)-(бензил)-D-цистеин-[4-(2-(1-пиперидил)этил)]пиперидинамид, дигидрохлорид. N-трет-Бутоксикарбонил-(S)-(бензил)-D-цистеин-[4-(2-(1-пиперидил)этил)]пиперидинамид (0,453 г, 0,93 ммоль) в течение ночи приводили во взаимодействие с ацетилхлоридом (0,78 мл, 13,80 ммоль) в безводном метаноле (15 мл). Указанное в заголовке соединение получали в виде грязновато-белого твердого вещества посредством выпаривания реакционной смеси досуха (0,417 г, 97%). 1H ЯМР (CD3OD) δ 0,94-1,29 (м, 2H); 1,49-1,57 (м, 1H); 1,62-1,95 (м, 10H); 2,65-2,80 (м, 2H); 2,81-2,97 (м, 4H); 3,01-3,14 (м, 2H); 3,50-3,60 (м, 3H); 3,81-3,92 (м, 2H); 4,41-4,47 (м, 2H); 7,25-7,44 (м, 5H).
Стадия 3. Используя общие способы, описанные в настоящем документе, имин, полученный из (S)-(бензил)-D-цистеин-[4-(2-(1-пиперидил)этил)]пиперидинамида, дигидрохлорида (0,417 г, 0,90 ммоль), и коричного альдегида, в присутствии триэтиламина (0,26 мл, 1,87 ммоль) объединяли с 2-(4(S)-фенилоксазолидин-2-он-3-ил)ацетилхлоридом (пример 1) с получением 0,484 г (76%) примера 238 в виде грязновато-белого твердого вещества после перекристаллизации из смеси дихлорметан/гексаны. 1H ЯМР (CDCl3) δ 0,89-1,06 (м, 2H); 1,40-1,44 (м, 5H); 1,57-1,67 (м, 6H); 2,25-2,43 (м, 6H); 2,45-2,59 (м, 2H); 2,71-2,88 (м, 2H); 3,55-3,70 (м, 3H); 4,11-4,17 (м, 1H); 4,37-4,47 (м, 2H); 4,54-4,61 (м, 1H); 4,64-4,69 (м, 1H); 4,76-4,84 (м, 2H); 6,05-6,19 (м, 1H); 6,66-6,71 (м, 1H); 7,12-7,40 (м, 15H).
Описаны следующие соединения
Пример 266 (AVN576) 
Описаны следующие соединения
Описаны следующие соединения
Описаны следующие соединения
Описаны следующие соединения
Описаны следующие соединения
В следующей таблице представлены некоторые соединения, дополнительно охарактеризованные масс-спектральным анализом с применением FAB+ для наблюдения соответствующего исходного иона (M+H)+.
Изобретение относится к соединениям и композициям, способам и их применению для лечения повреждений головного мозга. Способ лечения повреждения головного мозга у животного-хозяина включает введение животному-хозяину композиции, содержащей один или более селективных антагонистов рецептора вазопрессина V1a. 2 н. и 11 з.п. ф-лы, 238 пр., 6 ил.
1. Способ лечения повреждения головного мозга у животного-хозяина, включающий введение животному-хозяину композиции, содержащей один или более селективных антагонистов рецептора вазопрессина V1a, где один или более указанных антагонистов выбраны из соединений формул:
225;
222;
236;
238;
и
и их фармацевтически приемлемых солей.
2. Способ по п. 1, в котором по меньшей мере одно соединение выбрано из группы, состоящей из:
AVN228 или его фармацевтически приемлемой соли,
AVN246 или его фармацевтически приемлемой соли,
AVN251 или его фармацевтически приемлемой соли,
AVN296 или его фармацевтически приемлемой соли и
AVN576 или его фармацевтически приемлемой соли и их комбинаций.
3. Способ по п. 1, где по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN228 или его фармацевтически приемлемую соль.
4. Способ по п. 1, где по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN246 или его фармацевтически приемлемую соль.
5. Способ по п. 1, где по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN251 или его фармацевтически приемлемую соль.
6. Способ по п. 1, где по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN296 или его фармацевтически приемлемую соль.
7. Способ по п. 1, где по меньшей мере одно соединение представляет собой AVN576 или его фармацевтически приемлемую соль.
8. Способ по любому из пп. 1-7, в котором повреждение головного мозга представляет собой травматическое повреждение головного мозга (TBI).
9. Способ по п. 8, в котором TBI включает TBI при контузии, повторяющееся умеренное TBI (rmTBI), отек головного мозга, хроническую травматическую энцефалопатию (CTE), субарахноидальное кровоизлияние, инсульт, ишемический инсульт или сотрясение.
10. Применение фармацевтической композиции для производства лекарственного средства для лечения повреждения головного мозга у животного-хозяина, содержащей селективный антагонист рецептора вазопрессина V1a и один или более носителей, разбавителей или адъювантов или их комбинацию, где указанный селективный антагонист рецептора вазопрессина V1а представляет собой соединение, выбранное из соединений формул:
225;
222;
236;
238;
и
и их фармацевтически приемлемых солей.
11. Применение по п. 10, в котором по меньшей мере одно соединение выбрано из группы, состоящей из:
AVN228 или его фармацевтически приемлемой соли,
AVN246 или его фармацевтически приемлемой соли,
AVN251 или его фармацевтически приемлемой соли,
AVN296 или его фармацевтически приемлемой соли и
AVN576 или его фармацевтически приемлемой соли и их комбинаций.
12. Применение по любому из пп. 10, 11, в котором повреждение головного мозга представляет собой травматическое повреждение головного мозга (TBI).
13. Применение по п. 12, в котором TBI включает TBI при контузии, повторяющееся умеренное TBI (rmTBI), отек головного мозга, хроническую травматическую энцефалопатию (CTE), субарахноидальное кровоизлияние, инсульт, ишемический инсульт или сотрясение.
| US 2017174670 A1, 2017.06.22 | |||
| WO 2014127350 A1, 2014.08.21 | |||
| WO 03031407 A2, 2003.04.17 | |||
| Karine M.Fabio et al., Pharmacokinetics and Metabolism of SRX246: A Potent and Selective Vasopressin 1a Antagonist, Journal of Pharmaceutical Sciences, Volume 102, Issue 6, June 2013, Pages 2033-2043, найдено онлайн, найдено в интернете: |
