СПОСОБ КОРРЕКЦИИ НЕГАТИВНЫХ ПОСЛЕДСТВИЙ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ В ИНКУБАЦИЮ ЯИЦ ОТ СТАРОГО РОДИТЕЛЬСКОГО СТАДА Российский патент 2023 года по МПК A01K67/02 A01K45/00 

Данное изобретение относится к сельскому хозяйству, и в частности, к птицеводству (применение водного раствора Цитохрома С методом орошения перед инкубацией яиц).

Некоторые промышленные птицефабрики в силу различных причин используют в инкубацию яйца от старого родительского стада. Известно, что таковые не соответствуют нормативам по целому ряду параметров качества, при этом выведенный из них молодняк обладает неудовлетворительной стрессоустойчивостью, ослаблен и характеризуется низким уровнем жизнеспособности, что увеличивает затраты на его содержание, а хозяйственно-полезные показатели у таких особей в дальнейшем реализуются не в полной мере. Как известно вследствие воздействия любых факторов стресса экстремальных по силе, совокупность которых может быть обусловлена использованием яиц в инкубацию от старого родительского стада, в клетке развивается оксидативный стресс, сопряженный с аномальной интенсификацией свободнорадикальных реакций и, как следствие липопероксидации, определяющих масштабные деструктивные явления и тяжелые гипоэнергетические состояния в организме [1,4].

Для коррекции интенсивности вышеуказанных негативных процессов используют различные биологически активные вещества, среди которых особую ценность представляют естественные метаболиты, не обладающие побочным действием, относящиеся к группе антиоксидантов - энергостимуляторов. К таковым по данным Чеснокова Н.П., Понукалина Е.В., Бизенкова М.Н. (2006) можно отнести Цитохрома С [3].

Обсуждаемый биостимулятор является обязательным звеном митохондриальной дыхательной цепи, поскольку принимает непосредственное участие в переносе электронов от комплекса III к комплексу IV, что необходимо для синтеза АТФ. По данным Чеснокова Н.П. (2006) участие Цитохрома С в биологическом окислении высоко значимо для синтеза энергии, так как, без него невозможны большинство реакций цикла Кребса, а также β окисления и в ряде случаев гликолиза. Таким образом, обсуждаемый метаболит является важным участником наиболее энергетически значимых процессов, без которых невозможно качественное и интенсивное развитие особи, ее высокая жизнеспособность [3].

В свою очередь, рядом авторов доказано, доказано, что заявленный метаболит является высокоэффективным антикосидантом. Данное свойство «Цитохрома С» по данным Валеева И.Х. (2019), обусловлена возможностью передачи активным частицам супероксиду и оксиду не хватающего электрона, при этом структура самого Цитохрома С остается стабильной. [4]. Помимо этого, в соответствии с работами Оковитого С.В. (2014), благодаря Цитохрому С возможна активизация других компонентов антикосидантной системы [1], что обуславливает возможность многопланового его влияния на синтез свободных радикалов и интенсивность ПОЛ, создавая перспективы сохранения структурной и функциональной целостности клетки.

Наряду с этим антигипоксическая функция по данным Понукалина Е.В. (2006) выражается в возможности участия заявленного биостимулятора в восстановлении процесса окислительного фосфорилирования и фиксации кислорода, что необходимо для адекватного энергообеспечения не только всех клеток, но и тканей, органов, и организма в целом [3].

Все это указывает на высокую значимость заявленного вещества в системе становления биологически полноценного как эмбриона, так и молодняка.

На данный момент в доступной нам литературе отсутствуют данные об использовании Цитохрома С в промышленном птицеводстве.

С целью выявления эффективности использования Цитохрома С для коррегирования негативных последствий, обусловленных использованием в инкубацию яиц от старого родительского стада, была осуществлена обработка заявленным метаболитом куриных яиц методом орошения в диапазоне концентраций от 0,01 до 2% перед закладкой на инкубацию. Следует отметить, что при осуществлении предынкубационной обработки яиц предлагаемым биостимулятором использовали только химически чистый Цитохрома С.

В качестве прототипа данного метода был взят опыт применения комбинации растворов антиоксидантов - антигипоксантов: янтарной кислоты и глицина в равнозначных концентрациях - 0,1% для предынкубационной обработки куриных яиц. При использовании этой композиции выводимость яиц в опытной группе достоверно повысилась на 2,8% (р<0,05) по сравнению с контролем[5].

Цель изобретения: повышение качественных и количественных результатов промышленной инкубации при использовании яиц от кур старого родительского стада, посредствам орошения таковых антиоксидантом Цитохромом С, путем стимуляции в их организме энергетического синтеза, снижения интенсивности свободнорадикальных реакций и, как следствие липопероксидации при повышении общей антиокислительной активности.

Технический результат заключается в том, что однократная обработка инкубационных яиц водным раствором Цитохрома С методом орошения способствовала снижению таких продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), как малоновый диальдегид (МДА) на 20%, и оснований Шиффа (ОШ) на 25% при повышении общей антиоксидантной активности на 11% (ОАА). Указанное обусловило рост качественных и количественных показателей молодняка, что определило преимущество опытной группы по критериям «Пасгар» и «Оптистарт» на 1,6 и на 1,4 балла и увеличение выводимости яиц на 11,4% и вывода цыплят на 14,7% соответственно по сравнению с контролем.

Способ осуществляется следующим образом. На поверхность скорлупы за 3-4 часа до начала инкубации яйца кур однократно наносят водный раствор Цитохрома С методом орошения в концентрациях от 0,01 до 2%. Предварительно Цитохрома С растворяют и смешивают в дистиллированной воде при температуре 18-22°С.

Пример 1. Эксперимент проводили на пяти партиях яиц-одна, из которых контрольная и четыре опытные. При этом следует отметить, что наибольшую разницу между опытом и контролем по обсуждаемым показателям фиксировали в опытной группе 3, которую обрабатывали 1% концентрацией раствора Цитохрома С, далее данная группа будет именоваться, как «лучшая». Яйца кур кросса «Смена 9» получали от одного родительского стада, сортировали по 252 штуки в каждую партию при соблюдении аналогичности массы, времени снесения и сроков хранения. Однократная обработка водным раствором Цитохрома С методом орошения в оптимальной концентрации оказывала позитивное влияние на эмбриональную жизнеспособность практически на всех этапах эмбриогенеза, что обусловило повышение таких важнейших показателей жизнеспособности как: выводимость яиц на 11,4% (p <0,001) и вывод цыплят на 14,7% (p <0,001), соответственно. При этом была отмечена тенденция к снижению практически по всем категориям отходов инкубации, в частности таким как: «неоплодотворенные», очевидно за счет «ложно неоплодотворенных» в 1,7 раза, «кровяных колец» в 2,2 раза (p <0,05), «замерших»- в 1,6 раза (p <0,05), «задохликов»- в 1,06 раза, соответственно. При этом стоит отметить, что использование остальных концентраций также позволило получить позитивные результаты.

Таблица 1. Биологический контроль инкубации, %, (M±m, n=252) Партия Отходы инкубации Выводимость яиц % ±Δ Вывод цыплят % ±Δ Неоплод
(в том числе ложный неоплод) Кровяные кольца Тумак Замершие
5-10 Замершие
11-18 Задохлики Слабые К 15,48
±2,28 4,37
±1,29 0,4
±0,4 5,95
±1,49 5,95
±1,49 6,35
±1,54 0,79
±0,56 71,83
±2,83 - 60,71
±3,08 - О1
(0,01%) 11,1
±2,04 5,56
±1,44 0,79
±0,56 4,37
±1,49 8,33
±1,74 5,56
±1,44 0,4
±0,47 72,52
±2,81 0,68 63,89
±3,03 3,81 О2
(0,1%) 15,08
±2,25 2,78
±1,04 0±0 3,57
±1,17 5,95
±1,49 6,75
±1,58 0,79
±0,56 76,64
±2,67 4.81 65,08
±
3 4,37 О3
(1%) 9,12
±1,81 1,59
±0,79** 0,4
±0,1 0,79
±0,56** 6,75
±1,58** 5,95
±1,49 0±0 82,97
±2,46*** 11,14 75,40
±2,77*** 14,7 О4
(2%) 11,11
±1,98 1,19
±0,68 0,79
±0,56 3,17
±1,10 6,35
±1,54 7,15
±1,62 1,19
±0,68 78,57
±2,58 6,74 69,84
±2,84 9,13

Примечание: Здесь и далее *- р<0,05; **- р<0,01; ***- р<0,001, К - контрольная, О1-О4 - опытные группы.

Пример 2. Более высокая эмбриональная жизнеспособность сопровождалась получением молодняка суточного возраста более высокого качества. В этой связи бальная оценка представителей лучшей опытной группы по шкалам «Пасгар» и «Оптистарт» имела преимущество относительно контроля на 1,6 (р<0,05) и 1,4(р<0,01) балла соответственно.

Таблица 2. Качество цыплят суточного возраста по шкале Пасгар, баллы (M±m, n=10). Показатели Группы Контрольная Опытная 3 Рефлекс поведения 1,4±0,2 1,9±0,2 Пупочное кольцо 1,8±0,1 1,9±0,2 Плюсна и пальцы 1,4±0,2 2,0±0 Клюв 1,6±0,2 2,0±0 Живот 1,6±0,2 2,0±0 Критерий «Пасгар» 7,6±0,05 9,5±0,08

Таблица 3. Качество цыплят суточного возраста по шкале Оптистарт, баллы (M±m, n=10) Показатели Группы Контрольная Опытная 3 Мышечный тонус шеи 1,4±0,5 2,0±0,4 Рефлекс поведения 1,6±0,1 1,9±0,2 Пупочное кольцо 1,8±0,1 2,0±0,0* Клюв 1,8±0,2 2,0±0,2 Живот 1,8±0,1 2,0±0,1 Критерий «Оптистарт» 8,4±0,07 9,8±0,04**

Пример 3. Полученные позитивные биологические эффекты, очевидно, во многом были следствием снижения интенсивности свободнорадикальных реакций, и как следствие липопероксидации, что выразилось в снижении таких продуктов перекисного окисления липидов ПОЛ, как малоновый диальдегид (МДА) на 20% (p <0,01), и основания Шиффа (ОШ) на 25% (p <0,001), при повышении общей антиокислительной активности на 11%(ОАА) [7].

Таблица 4. Показатели перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиоксидативной защитной системы (АОСЗ) у суточных цыплят (M±m, n=5) Показатели Группы Контрольная Опытная 3 ОАА, мг/мл, 1,76±0,01 1,97±0,01 МДА, мкмоль/л 4,0±0,24 3,2±0,11** ОШ, отн.ед/мл 0,4±0,09 0,3±0,14***

Снижение аномальной интенсивности липопероксидации по данным Вахитова Х.М. (2019) создает предпосылки для сохранения целостности клеточных структур различной химической природы, а вместе с тем и их функциональности [4]. Также это указывает на снижение вероятности инактивации ферментов и сохранение интенсивности их синтеза [7]. Очевидно, вышеизложенное во многом обусловило более высокую интенсивность обменных процессов у представителей лучшей опытной группы.

Пример 4. Повышение интенсивности обменных процессов обусловило присутствие обменостимулирующих свойств Цитохрома С. По данным Кондрахин (2004), высокая интенсивность обменных процессов, залог высокоинтенсивного и качественного развития особи [8].Так, использование обсуждаемого метаболита обусловило интенсификацию углеводно-энергетического, белкового и липидного обменов, что выразилось в повышении активности α-амилазы на 11 % (р <0,01), концентрации глюкозы в крови на 7%, пировиноградной кислоты (ПВК) на 14% при снижении активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ) на 25% (р <0,001), что свидетельствует о снижении интенсивности анаэробного гликолиза и о повышении аэробного, определяя более эффективное энергообеспечение организма представителей опытной группы. При этом содержание общего белка у таковых повысилось на 1,45%, альбуминов на 10%, на фоне увеличения живой массы молодняка суточного возраста на 14%, что согласуется с данными Горячковского А. М. (1998) [9].

Таблица 5. Биохимические показатели крови цыплят в суточном возрасте (M±m, n=5) Показатели Группы Контрольная Опытная 3 Общий белок, г/л 34,3±0,13 34,8±0,37 Альбумины, г/л 10,2±0,24 11,3±0,11 Триглицериды, ммоль/л 0,57±0,01 0,59±0,01 α-Амилаза, Е/л 712±1,67 797±6,79** ЛДГ, E/л 419±4,18 314±2,58*** Глюкоза, ммоль/л 10,0±0,28 10,7±0,15 ПВК, ммоль/л 0,07±0,011 0,010±0,015

Вывод: Однократная предынкубационная обработка водным раствором

Цитохрома С в оптимальной концентрации по предложенной схеме за счет реализации энергостимулирующих и антиоксидантных и антигипоксических свойств обусловила снижение интенсивности липопероксидации, определила оптимизацию обменных процессов, а вместе с тем сохранение целостности и функциональности клеток организма зародыша, создав условия для более качественного развития и высокой жизнеспособности особи на всех этапах эмбриогенеза.

Список литературы:

1. Османян А.К., Рыбаков Д.И., Яловенко А.В., Галкин В.А. Воспроизводительные качества кур родительского стада и эффективность выращивания бройлеров. Птица и птицепродукты, 2014, 5: 46-48.

2. Фисинин В.И., Тучемский Л.И., Саламатин А.В., Журавлев И.В., Долгорукова A.M. Изменчивость относительной массы желтка как основа для повышения воспроизводства у мясных кур при сохранении высокой скорости роста цыплят-бройлеров. Сельскохозяйственная биология, 2008, 6: 33-39.

3. Чеснокова Н.П., Понукалина Е.В., Бизенкова М.Н. Источники образования свободных радикалов и их значение в биологических системах в условиях нормы // Современные наукоемкие технологии, 2006. № 6. С. 28-34.

4. Лоскутова Е.В. Вахитов Х.М. Капралова А.М. Романова Н.К. Симонова Н.Н Макарова Т.П. Валеева И.Х. Закирова Г.Ш. Процессы липопероксидации при различных патологических состояниях и возможности их коррекции// Вятский медицинский вестник-2019- №4.-92-96 c.

5.Брюшинин, Н.В. Предынкубационная обработка яиц мясных кур растворами сукцината и глицина / Брюшинин Н.В.// XI Московский Междун. Ветеринарный конгресс. - М., 2003.

7. Оковитый С.В., Суханов Д.С., Заплутанов В.А., Смагина А.Н. Антигипоксанты в современной клинической практике. Клин. мед. 2012; 90 (9): 69-74.

8. Кондрахин, И. П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: справ. изд. / И.П.Кондрахин и др. - М. - КолосС. - 2004. - 520 с.

9. Горячковский, А. М. Клиническая биохимия / А.М. Горячковский. - Одесса: Астропринт, 1998. - 608 с.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к птицеводству. Проводят однократную обработку куриных яиц водным раствором Цитохрома С методом орошения. На поверхность скорлупы за 3-4 часа до инкубации наносят водный раствор Цитохрома С в концентрации от 0,01 до 2%. Предварительно Цитохром С растворяют и смешивают в дистиллированной воде при температуре 18-22°С. Изобретение обеспечивает повышение качественных и количественных показателей инкубации кур. 5 табл., 4 пр.

Способ коррекции негативных последствий использования в инкубацию яиц от старого родительского стада цитохромом С, отличающийся тем, что проводят однократную обработку куриных яиц водным раствором Цитохрома С методом орошения: на поверхность скорлупы за 3-4 часа до инкубации наносят водный раствор Цитохрома С в концентрации от 0,01 до 2%, предварительно Цитохром С растворяют и смешивают в дистиллированной воде при температуре 18-22°С.