ИНГИБИТОРЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ МЕНИН-MLL Российский патент 2023 года по МПК C07D405/14 C07D403/04 C07D403/14 C07D471/10 C07D487/10 C07D491/10 A61K31/407 A61K31/506 A61K31/4427 A61K31/5377 A61P35/00 A61P3/10 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к ингибиторам взаимодействия менина с MLL и слитыми белками MLL, к фармацевтическим композициям, содержащим такие ингибиторы, и к их использованию для лечения злокачественной опухоли и других заболеваний, опосредованных взаимодействием менин-MLL.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Белок недифференцированного лейкоза (MLL) представляет собой гистонметилтрансферазу, которая мутирована в клинически и биологически различных подгруппах острого лейкоза. В реаранжированный недифференцированный лейкоз (MLL-r) вовлечены рекуррентные транслокации локуса хромосомы 11q23, что приводит к агрессивной форме острого лейкоза с ограниченными терапевтическими возможностями. Такие транслокации нацелены на ген MLL, создавая онкогенный слитый белок, включающий в себя N-конец MLL, слитый в рамке более чем с 60 различными партнерами слияния белков. Повсеместно экспрессируемый ядерный белок менин, кодируемый геном-онкосупрессором множественной эндокринной неоплазии 1 типа (MEN1), взаимодействует с высокой аффинностью связывания со слитыми белками MLL, и представляет собой ключевой кофактор онкогенных слитых белков MLL-r (Yokoyama et al., 2005, Cell, 123:207-18; Cierpicki & Grembecka, 2014, Future Med. Chem., 6:447-462). Нарушение такого взаимодействия ведет к селективному росту ингибирования и апоптоза лейкозных клеток MLL-r как in vitro (Grembecka et al., 2012, Nat. Chem. Biol., 8:277-284), так и in vivo (Yokoyama et al., 2005, op. cit.; Borkin et al., 2015, Cancer Cell, 27:589-602).

Комплекс менин-MLL играет роль при кастрационно-резистентном/прогрессирующем раке предстательной железы, и было показано, что ингибитор менин-MLL снижает рост опухоли in vivo (Malik et al., 2015, Nat. Med., 21:344-352). Кроме того, было показано, что ингибитор менин-MLL усиливает пролиферацию β-клеток человека (Chamberlain et al., 2014, J. Clin. Invest., 124:4093-4101), поддерживая роль ингибиторов взаимодействия менин-MLL для лечения сахарного диабета (Yang et al., 2010, Proc Natl Acad Sci U S A., 107:20358-20363). Взаимодействие между менином и MLL или слитыми белками MLL представляет собой перспективную мишень для терапевтического воздействия, и существует потребность в новых средствах, которые ингибируют взаимодействие менин-MLL для лечения различных заболеваний и состояний, включая лейкоз, другие злокачественные опухоли и сахарный диабет.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к ингибиторам взаимодействия менин-MLL, таким как соединение формулы I:

I

или его фармацевтически приемлемая соль, где значения изменяемых составных элементов определены в настоящем документе.

Настоящее изобретение дополнительно относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель.

Настоящее изобретение дополнительно относится к фармацевтически приемлемым солевым формам соединений формулы I.

Настоящее изобретение дополнительно относится к кристаллическим формам соединений формулы I.

Настоящее изобретение дополнительно относится к способу ингибирования взаимодействия между менином и MLL, включающему в себя приведение менина и MLL в контакт с соединением формулы I или его фармацевтически приемлемой солью.

Настоящее изобретение дополнительно относится к способу лечения злокачественной опухоли у пациента, включающему в себя введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение дополнительно относится к способу лечения резистентности к инсулину, предиабета, сахарного диабета, риска развития сахарного диабета или гипергликемии у пациента, включающему в себя введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фигуре 1 представлена характеристическая диаграмма XRPD для N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)-метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида.

На фигуре 2 представлена характеристическая диаграмма XRPD для N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)-метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида сесквифумарата.

На фигуре 3 представлена характеристическая диаграмма XRPD для N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)-метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида бис-метансульфоната.

На фигуре 4 представлена характеристическая диаграмма XRPD для N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)-метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида бис-гидрохлорида.

На фигуре 5 представлена характеристическая диаграмма XRPD для 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида.

На фигуре 6 представлена характеристическая диаграмма XRPD для 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида бис-метансульфоната.

На фигуре 7 представлена характеристическая диаграмма XRPD для 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 8 представлена характеристическая диаграмма XRPD для 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида бис-гидрохлорида.

На фигуре 9 представлены характеристические диаграммы XRPD для кристаллической формы A, формы B, формы C+формы A, формы D, формы E и формы F 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 10 представлена характеристическая диаграмма XRPD для кристаллической формы A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 11 представлена характеристическая DSC-термограмма для кристаллической формы A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 12 представлена характеристическая TGA-термограмма для кристаллической формы A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 13 представлена характеристическая диаграмма DVS для кристаллической формы A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 14 представлены характеристические диаграммы XRPD для варьируемых температур (VT) для кристаллической формы A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 15 представлена характеристическая диаграмма XRPD для кристаллической формы B 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 16 представлены характеристические диаграммы XRPD для кристаллических форм B и D 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата, выделенных при крупномасштабном получении, в виде взвеси (верхняя кривая; форма B), влажного осадка после вакуумного фильтрования (средняя кривая; форма B) и после сушки влажного осадка при 45°C в течение ночи (нижняя кривая; форма D).

На фигуре 17 представлена характеристическая DSC-термограмма для кристаллической формы D 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 18 представлена характеристическая TGA-термограмма для кристаллической формы D 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 19 представлена характеристическая DSC-термограмма для кристаллической формы F 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигурах 20-21 представлены ORTEP-изображения термальных эллипсоидов для вероятности 50% для 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида бис-метансульфоната.

На фигуре 22 представлено ORTEP-изображение термальных эллипсоидов для вероятности 50% для 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

На фигуре 23 представлена характеристическая диаграмма XRPD для кристаллической формы D 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

Настоящее изобретение относится к ингибиторам взаимодействия менин-MLL, таким как соединение формулы I:

I

или его фармацевтически приемлемая соль, где:

каждый A, B, D и E независимо выбирают из -C(R^A1)(R^A2)-, -C(R^A1)(R^A2)- C(R^A1)(R^A2)-, -C(R^A1)(R^A2)- O-, -C(R^A1)(R^A2)- NR^A3-, -C(=O)-, -C(R^A1)(R^A2)- C(=O)- и -N=C(NH₂)-, где не более, чем один из A, B, D и E представляет собой -C(R^A1)(R^A2)- O-, -C(R^A1)(R^A2)- NR^A3-, -C(R^A1)(R^A2)- C(=O)-, -C(=O)- или -N=C(NH₂)-;

U представляет собой N или CR^U, где R^U представляет собой H, галоген, CN, OH, C_1-4алкил, C_1-4алкокси, амино, C_1-4алкиламино или C_2-8диалкиламино;

W представляет собой N или CR^W, где R^W представляет собой H, галоген, CN, OH, C_1-4алкил, C_1-4алкокси, амино, C_1-4алкиламино или C_2-8диалкиламино;

X представляет собой N или CR^X, где R^X представляет собой H, галоген, CN, OH, C_1-4алкил, C_1-4алкокси, амино, C_1-4алкиламино или C_2-8диалкиламино, причем если X представляет собой N, то атом L, который напрямую связан с X, отличен от N, O или S;

L выбирают из -C_1-6алкилен- и -(C_1-4алкилен)_a-Q- (C_1-4алкилен)_b-, где C_1-6алкиленовая группа и любая из C_1-4алкиленовых групп -(C_1-4алкилен)_a-Q- (C_1-4алкилен)_b- группы необязательно замещена 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, CN, OH, C_1-3алкила, C_1-3алкокси, C_1-3галогеналкила, C_1-3галогеналкокси, амино, C_1-3алкиламино и ди(C_1-3алкил)амино;

Q представляет собой -O-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)₂-, -C(=O)-, -C(=O)NR^q1-, -C(=O)O-, -OC(=O)NR^q1-_, -NR^q1-, -NR^q1C(=O)O-, -NR^q1C(=O)NR^q1-, -S(=O)₂NR^q1-, -C(=NR^q2)- или -C(=NR^q2)-NR^q1-, где каждый R^q1 независимо выбирают из H или C_1-6алкила, и где каждый R^q2 независимо выбирают из H, C_1-6алкила и CN;

Cy представляет собой связующий C_6-14арил, C_3-18циклоалкил, 5-16-членную гетероарильную или 4-18-членную гетероциклоалкильную группу, каждый из которых необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из R^Cy;

каждый R^Cy независимо выбирают из галогена, C_1-6алкила, C_1-4галогеналкила, C_1-4цианоалкила, C_2-6алкенила, C_2-6алкинила, C_6-10арила, C_3-10циклоалкила, 5-10-членного гетероарила, 4-10-членного гетероциклоалкила, CN, NO₂, OR^a1, SR^a1, C(O)R^b1, C(O)NR^c1R^d1, C(O)OR^a1, OC(O)R^b1, OC(O)NR^c1R^d1, C(=NR^e1)NR^c1R^d1, NR^c1C(=NR^e1)NR^c1R^d1, NR^c1R^d1, NR^c1C(O)R^b1, NR^c1C(O)OR^a1, NR^c1C(O)NR^c1R^d1, NR^c1S(O)R^b1, NR^c1S(O)₂R^b1, NR^c1S(O)₂NR^c1R^d1, S(O)R^b1, S(O)NR^c1R^d1, S(O)₂R^b1 и S(O)₂NR^c1R^d1, где указанный каждый C_1-6алкил, C_2-6алкенил, C_2-6алкинил, C_6-10арил, C_3-10циклоалкил, 5-10-членный гетероарил и 4-10-членный гетероциклоалкил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из CN, NO₂, OR^a1, SR^a1, C(O)R^b1, C(O)NR^c1R^d1, C(O)OR^a1, OC(O)R^b1, OC(O)NR^c1R^d1, C(=NR^e1)NR^c1R^d1, NR^c1C(=NR^e1)NR^c1R^d1, NR^c1R^d1, NR^c1C(O)R^b1, NR^c1C(O)OR^a1, NR^c1C(O)NR^c1R^d1, NR^c1S(O)R^b1, NR^c1S(O)₂R^b1, NR^c1S(O)₂NR^c1R^d1, S(O)R^b1, S(O)NR^c1R^d1, S(O)₂R^b1 и S(O)₂NR^c1R^d1;

R¹ представляет собой H, Cy¹, галоген, C_1-6алкил, C_1-4галогеналкил, C_1-4цианоалкил, C_2-6алкенил, C_2-6алкинил, CN, NO₂, OR^a2, SR^a2, C(O)R^b2, C(O)NR^c2R^d2, C(O)OR^a2, OC(O)R^b2, OC(O)NR^c2R^d2, C(=NR^e2)NR^c2R^d2, NR^c2C(=NR^e2)NR^c2R^d2, NR^c2R^d2, NR^c2C(O)R^b2, NR^c2C(O)OR^a2, NR^c2C(O)NR^c2R^d2, NR^c2S(O)R^b2, NR^c2S(O)₂R^b2, NR^c2S(O)₂NR^c2R^d2, S(O)R^b2, S(O)NR^c2R^d2, S(O)₂R^b2 и S(O)₂NR^c2R^d2, где каждый указанный C_1-6алкил, C_2-6алкенил и C_2-6алкинил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из галогена, CN, NO₂, OR^a2, SR^a2, C(O)R^b2, C(O)NR^c2R^d2, C(O)OR^a2, OC(O)R^b2, OC(O)NR^c2R^d2, C(=NR^e2)NR^c2R^d2, NR^c2C(=NR^e2)NR^c2R^d2, NR^c2R^d2, NR^c2C(O)R^b2, NR^c2C(O)OR^a2, NR^c2C(O)NR^c2R^d2, NR^c2S(O)R^b2, NR^c2S(O)₂R^b2, NR^c2S(O)₂NR^c2R^d2, S(O)R^b2, S(O)NR^c2R^d2, S(O)₂R^b2 и S(O)₂NR^c2R^d2;

Y представляет собой O, S, CR^Y1R^Y2 или NR^Y3, где каждый R^Y1, R^Y2 и R^Y3 независимо выбирают из H и C_1-4алкила;

Z представляет собой Cy², галоген, C_1-6алкил, C_1-4галогеналкил, C_1-4цианоалкил, C_2-6алкенил, C_2-6алкинил, CN, NO₂, OR^a3, SR^a3, C(O)R^b3, C(O)NR^c3R^d3, C(O)OR^a3, OC(O)R^b3, OC(O)NR^c3R^d3, C(=NR^e3)NR^c3R^d3, NR^c3C(=NR^e3)NR^c3R^d3, NR^c3R^d3, NR^c3C(O)R^b3, NR^c3C(O)OR^a3, NR^c3C(O)NR^c3R^d3, NR^c3S(O)R^b3, NR^c3S(O)₂R^b3, NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3, S(O)R^b3, S(O)NR^c3R^d3, S(O)₂R^b3, S(O)₂NR^c3R^d3 и P(O)R^c3R^d3, где каждый указанный C_1-6алкил, C_2-6алкенил и C_2-6алкинил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из Cy², галогена, CN, NO₂, CN, NO₂, OR^a3, SR^a3, C(O)R^b3, C(O)NR^c3R^d3, C(O)OR^a3, OC(O)R^b3, OC(O)NR^c3R^d3, C(=NR^e3)NR^c3R^d3, NR^c3C(=NR^e3)NR^c3R^d3, NR^c3R^d3, NR^c3C(O)R^b3, NR^c3C(O)OR^a3, NR^c3C(O)NR^c3R^d3, NR^c3S(O)R^b3, NR^c3S(O)₂R^b3, NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3, S(O)R^b3, S(O)NR^c3R^d3, S(O)₂R^b3 и S(O)₂NR^c3R^d3;

каждый R² и R³ независимо выбирают из H, галогена, C_1-6алкила, C_1-4галогеналкила, C_1-4цианоалкила, C_2-6алкенила, C_2-6алкинила, CN, NO₂, OR^a4, SR^a4, C(O)R^b4, C(O)NR^c4R^d4, C(O)OR^a4, OC(O)R^b4, OC(O)NR^c4R^d4, C(=NR^e4)NR^c4R^d4, NR^c4C(=NR^e4)NR^c4R^d4, NR^c4R^d4, NR^c4C(O)R^b4, NR^c4C(O)OR^a4, NR^c4C(O)NR^c4R^d4, NR^c4S(O)R^b4, NR^c4S(O)₂R^b4, NR^c4S(O)₂NR^c4R^d4, S(O)R^b4, S(O)NR^c4R^d4, S(O)₂R^b4 и S(O)₂NR^c4R^d4, где каждый указанный C_1-6алкил, C_2-6алкенил и C_2-6алкинил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из галогена, CN, NO₂, OR^a4, SR^a4, C(O)R^b4, C(O)NR^c4R^d4, C(O)OR^a4, OC(O)R^b4, OC(O)NR^c4R^d4, C(=NR^e4)NR^c4R^d4, NR^c4C(=NR^e4)NR^c4R^d4, NR^c4R^d4, NR^c4C(O)R^b4, NR^c4C(O)OR^a4, NR^c4C(O)NR^c4R^d4, NR^c4S(O)R^b4, NR^c4S(O)₂R^b4, NR^c4S(O)₂NR^c4R^d4, S(O)R^b4, S(O)NR^c4R^d4, S(O)₂R^b4 и S(O)₂NR^c4R^d4;

каждый R^A1 независимо выбирают из H, галогена, C_1-4алкила, C_1-4алкокси, C_1-4галогеналкила, C_1-4галогеналкокси, амино, C_1-4алкиламино, C_2-8диалкиламино, CN, NO₂ и OH;

каждый R^A2 независимо выбирают из H, галогена, C_1-4алкила, C_1-4алкокси, C_1-4галогеналкила, C_1-4галогеналкокси, амино, C_1-4алкиламино, C_2-8диалкиламино, CN, NO₂ и OH;

каждый R^A3 независимо выбирают из H, C_1-4алкила, C_1-4алкокси, C_1-4галогеналкила, C(O)R^z и C(O)OR^z, где указанный C_1-4алкил необязательно замещен фенилом, C_1-4алкокси, C_1-4галогеналкокси, CN, NO₂ или OH;

R^z представляет собой H, C_1-4алкил или фенил;

каждый Cy¹ независимо выбирают из C_6-14арила, C_3-18циклоалкила, 5-16-членного гетероарила и 4-18-членного гетероциклоалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из R^Cy1;

каждый Cy² независимо выбирают из C_6-14арила, C_3-18циклоалкила, 5-16-членного гетероарила и 4-18-членного гетероциклоалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из R^Cy2;

каждый R^Cy1 и R^Cy2 независимо выбирают из галогена, C_1-6алкила, C_1-4галогеналкила, C_1-4цианоалкила, C_2-6алкенила, C_2-6алкинила, фенила, C_3-7циклоалкила, 5-6-членного гетероарила и 4-7-членного гетероциклоалкила, CN, NO₂, OR^a5, SR^a5, C(O)R^b5, C(O)NR^c5R^d5, C(O)OR^a5, OC(O)R^b5, OC(O)NR^c5R^d5, C(=NR^e5)NR^c5R^d5, NR^c5C(=NR^e5)NR^c5R^d5, NR^c5R^d5, NR^c5C(O)R^b5, NR^c5C(O)OR^a5, NR^c5C(O)NR^c5R^d5, NR^c5S(O)R^b5, NR^c5S(O)₂R^b5, NR^c5S(O)₂NR^c5R^d5, S(O)R^b5, S(O)NR^c5R^d5, S(O)₂R^b5 и S(O)₂NR^c5R^d5, где каждый указанный C_1-6алкил, C_2-6алкенил, C_2-6алкинил, фенил, C_3-7циклоалкил, 5-6-членный гетероарил и 4-7-членный гетероциклоалкил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из CN, NO₂, OR^a5, SR^a5, C(O)R^b5, C(O)NR^c5R^d5, C(O)OR^a5, OC(O)R^b5, OC(O)NR^c5R^d5, C(=NR^e5)NR^c5R^d5, NR^c5C(=NR^e5)NR^c5R^d5, NR^c5R^d5, NR^c5C(O)R^b5, NR^c5C(O)OR^a5, NR^c5C(O)NR^c5R^d5, NR^c5S(O)R^b5, NR^c5S(O)₂R^b5, NR^c5S(O)₂NR^c5R^d5, S(O)R^b5, S(O)NR^c5R^d5, S(O)₂R^b5 и S(O)₂NR^c5R^d5;

каждый R^a1, R^b1, R^c1, R^d1, R^a2, R^b2, R^c2, R^d2, R^a3, R^b3, R^c3, R^d3, R^a4, R^b4, R^c4, R^d4, R^a5, R^b5, R^c5 и R^d5 независимо выбирают из H, C_1-6алкила, C_1-4галогеналкила, C_2-6алкенила, C_2-6алкинила, C_6-10арила, C_3-10циклоалкила, 5-10-членного гетероарила, 4-10-членного гетероциклоалкила, C_6-10арил-C_1-6алкила, C_3-10циклоалкил-C_1-6алкила, (5-10-членный гетероарил)-C_1-6алкила и (4-10-членный гетероциклоалкил)-C_1-6алкила, где каждый указанный C_1-6алкил, C_2-6алкенил, C_2-6алкинил, C_6-10арил, C_3-10циклоалкил, 5-10-членный гетероарил, 4-10-членный гетероциклоалкил, C_6-10арил-C_1-6алкил, C_3-10циклоалкил-C_1-6алкил, (5-10-членный гетероарил)-C_1-6алкил и (4-10-членный гетероциклоалкил)-C_1-6алкил необязательно замещен 1, 2, 3, 4 или 5 заместителями, независимо выбранными из R^g;

каждый R^e1, R^e2, R^e3, R^e4 и R^e5 независимо выбирают из H, C_1-4алкила и CN;

каждый R^g независимо выбирают из группы, состоящей из OH, NO₂, CN, галогена, C_1-6алкила, C_2-6алкенила, C_2-6алкинила, C_1-4галогеналкила, C_1-6алкокси, C_1-6галогеналкокси, циано-C_1-3алкила, HO-C_1-3алкила, амино, C_1-6алкиламино, ди(C_1-6алкил)амино, тиола, C_1-6алкилтио, C_1-6алкилсульфинила, C_1-6алкилсульфонила, карбокси, аминокарбонила, C_1-6алкилкарбонила и C_1-6алкоксикарбонила;

n представляет собой 0 или 1;

m представляет собой 0 или 1;

p представляет собой 0, 1, 2 или 3;

q представляет собой 0, 1 или 2;

a представляет собой 0 или 1; и

b представляет собой 0 или 1,

где любая циклоалкильная или гетероциклоалкильная группа необязательно дополнительно замещена 1 или 2 оксогруппами.

Согласно некоторым вариантам осуществления, Y представляет собой O.

Согласно некоторым вариантам осуществления, Y представляет собой NR^Y3. Согласно некоторым вариантам осуществления, Y представляет собой NH.

Согласно некоторым вариантам осуществления, U представляет собой CR^U. Согласно некоторым вариантам осуществления, U представляет собой CH.

Согласно некоторым вариантам осуществления, W представляет собой N.

Согласно некоторым вариантам осуществления, W представляет собой CR^W. Согласно некоторым вариантам осуществления, W представляет собой CH.

Согласно некоторым вариантам осуществления, X представляет собой N.

Согласно некоторым вариантам осуществления, X представляет собой CR^X. Согласно некоторым вариантам осуществления, X выбирают из CH или CNH₂.

Согласно некоторым вариантам осуществления, каждый A, B, D и E независимо выбирают из -C(R^A1)(R^A2)-, -C(R^A1)(R^A2)- C(R^A1)(R^A2)-, -C(R^A1)(R^A2)- O-, -C(R^A1)(R^A2)- C(=O)- и -C(=O)-, где не более, чем один из A, B, D и E представляет собой -C(R^A1)(R^A2)- O-, -C(R^A1)(R^A2)- C(=O)- или -C(=O)-.

Согласно некоторым вариантам осуществления, каждый A, B, D и E независимо выбирают из -C(R^A1)(R^A2)-, -C(R^A1)(R^A2)- C(R^A1)(R^A2)- и -C(R^A1)(R^A2)- O-, где не более, чем один из A, B, D и E представляет собой -C(R^A1)(R^A2)- O-.

Согласно некоторым вариантам осуществления, каждый A, B, D и E независимо выбирают из -C(R^A1)(R^A2)- или -C(R^A1)(R^A2)- C(R^A1)(R^A2)-.

Согласно некоторым вариантам осуществления, каждый R^A1 и R^A2 независимо выбирают из H, OH и NH₂.

Согласно некоторым вариантам осуществления, каждый A, B, D и E независимо выбирают из -CH₂-, -CH₂-CH₂- и -CH₂O-.

Согласно некоторым вариантам осуществления, каждый A, B, D и E независимо выбирают из -CH₂- или -CH₂-CH₂-.

Согласно некоторым вариантам осуществления, спирофрагмент, представленный формулой ниже:

,

где e и f обозначают точки присоединения к оставшейся части молекулы, выбирают из:

, , , , , , , , , , , , , , и .

Согласно некоторым вариантам осуществления, спирофрагмент, представленный формулой ниже:

,

где e и f обозначают точки присоединения к оставшейся части молекулы, выбирают из:

, , и .

Согласно некоторым вариантам осуществления, спирофрагмент, представленный формулой ниже:

,

где e и f обозначают точки присоединения к оставшейся части молекулы, выбирают из:

и .

Согласно некоторым вариантам осуществления, L выбирают из -C_1-6алкилен-, необязательно замещенного 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, CN, OH, C_1-3алкила, C_1-3алкокси, C_1-3галогеналкила, C_1-3галогеналкокси, амино, C_1-3алкиламино и ди(C_1-3алкил)амино.

Согласно некоторым вариантам осуществления, L выбирают из метилена, этилена и -CH₂-CH(OH)-.

Согласно некоторым вариантам осуществления, L представляет собой метилен.

Согласно некоторым вариантам осуществления, L выбирают из -(C_1-4алкилен)_a-Q- (C_1-4алкилен)_b-, где любая из C_1-4алкиленовых групп -(C_1-4алкилен)_a-Q- (C_1-4алкилен)_b- группы необязательно замещена 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, CN, OH, C_1-3алкила, C_1-3алкокси, C_1-3галогеналкила, C_1-3галогеналкокси, амино, C_1-3алкиламино и ди(C_1-3алкил)амино.

Согласно некоторым вариантам осуществления, a представляет собой 1.

Согласно некоторым вариантам осуществления, a представляет собой 0.

Согласно некоторым вариантам осуществления, b представляет собой 1.

Согласно некоторым вариантам осуществления, b представляет собой 0.

Согласно некоторым вариантам осуществления, a и b каждый представляет собой 1.

Согласно некоторым вариантам осуществления, a и b каждый представляет собой 0.

Согласно некоторым вариантам осуществления, a представляет собой 1 и b представляет собой 0.

Согласно некоторым вариантам осуществления, a представляет собой 0 и b представляет собой 1.

Согласно некоторым вариантам осуществления, L выбирают из -C(O)-CH₂-, -C(O)-CH₂-CH₂-, C(O), -NH-CH₂-, NH, -C(O)-CH(NH₂)-, -NH-CH(CH₃)-, -N(CH₃)-C(O)-, N(CH₃)-CH₂-, -CH₂-CH₂-O- и -C(O)-NH-.

Согласно некоторым вариантам осуществления, Cy представляет собой связующий фенил, C_3-18циклоалкил, 5-10-членную гетероарильную или 4-9-членную гетероциклоалкильную группу, каждый из которых необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из R^Cy.

Согласно некоторым вариантам осуществления, Cy представляет собой связующий фенил, C_3-18циклоалкил, 5-10-членную гетероарильную или 4-9-членную гетероциклоалкильную группу, каждый из которых необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из R^Cy.

Согласно некоторым вариантам осуществления, Cy представляет собой связующую группу, характеризующуюся формулой:

, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , или , каждый из которых необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из R^Cy.

Согласно некоторым вариантам осуществления, Cy представляет собой связующую группу, характеризующуюся формулой:

, или .

Согласно некоторым вариантам осуществления, Z представляет собой Cy² или C(O)NR^c3R^d3.

Согласно некоторым вариантам осуществления, каждый Cy² независимо выбирают из C_6-10арила, C_3-10циклоалкила, 5-10-членного гетероарила и 4-10-членного гетероциклоалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из R^Cy2.

Согласно некоторым вариантам осуществления, каждый Cy² независимо выбирают из фенила, C_3-10циклоалкила, 5-6-членного гетероарила и 4-6-членного гетероциклоалкила, каждый из которых необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из R^Cy2.

Согласно некоторым вариантам осуществления, n представляет собой 0.

Согласно некоторым вариантам осуществления, n представляет собой 1.

Согласно некоторым вариантам осуществления, m представляет собой 0.

Согласно некоторым вариантам осуществления, m представляет собой 1.

Согласно некоторым вариантам осуществления, p представляет собой 0.

Согласно некоторым вариантам осуществления, p представляет собой 1.

Согласно некоторым вариантам осуществления, q представляет собой 0.

Согласно некоторым вариантам осуществления, q представляет собой 1.

Согласно некоторым вариантам осуществления, соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль представляет собой соединение формулы IIa, IIb, IIIa или IIIb:

IIa IIb IIIa IIIb

или его фармацевтически приемлемую соль.

Согласно некоторым вариантам осуществления, соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль представляет собой соединение формулы IVa, IVb, IVc, IVd, IVe или IVf:

IVa IVb IVc IVd IVe IVf

или его фармацевтически приемлемую соль.

Согласно некоторым вариантам осуществления, представленное в настоящем описании соединение или фармацевтически приемлемая соль соединения формулы I являются кристаллическими. Подразумевается, что используемые в настоящем описании термины «кристаллический» или «кристаллическая форма» относятся к определенной конфигурации решетки кристаллического вещества. Различные кристаллические формы того же вещества, как правило, обладают различными кристаллическими решетками (например, блоками ячеек), которые объясняют различные физические свойства, которые являются характеристикой каждой из кристаллических форм. В некоторых случаях, различные конфигурации решетки обладают различным содержанием воды или растворителя.

Различные кристаллические формы того же соединения или соли могут обладать различными объемными свойствами в отношении, например, гигроскопичности, растворимости, стабильности и т.п. Формы с высокими точками плавления часто обладают хорошей термодинамической стабильностью, которая является преимущественной в продлении срока хранения лекарственных составов, содержащих твердую форму. Формы с более низкими точками плавления часто являются менее термодинамически стабильными, но обладают тем преимуществами, что они обладают повышенной растворимостью в воде, приводя к повышенной биологической доступности лекарственных препаратов. Формы, которые являются слабо гигроскопическими, необходимы для их стойкости к нагреванию и влажности и устойчивы к распаду в течение длительного хранения.

Различные кристаллические формы могут быть определены такими способами получения характеристик твердого состояния, как порошковая рентгеновская дифрактометрия (XRPD). Другие способы получения характеристик, такие как дифференциальная сканирующая калориметрия (DSC), термогравиметрический анализ (TGA), динамическая сорбция паров (DVS) и т.п., дополнительно помогают установить форму, а также помогают определить стойкость и содержание растворителя/воды.

Диаграмму отражений (пиков) XRPD, как правило, рассматривают как характерный признак конкретной кристаллической формы. Хорошо известно, что относительные интенсивности пиков XRPD могут широко изменяться в зависимости, наряду с прочим, от технологии приготовления образца, распределения кристаллов по размерам, различных используемых фильтров, процедуры установки образца и используемого конкретного прибора. В некоторых случаях могут наблюдаться новые пики, или существующие пики могут исчезать в зависимости от типа прибора или настроек. Используемый в настоящем документе термин «пик» относится к отражению с относительной высотой/интенсивностью, равной, по меньшей мере, приблизительно 5% высоты/интенсивности максимального пика. Более того, на значения 2-тета могут влиять изменения прибора и другие факторы. Таким образом, распределения пиков, описанные в настоящем изобретении, могут варьировать приблизительно на±0,2° (2-тета), и подразумевается, что термины «по существу» и «приблизительно», используемые в настоящем описании в контексте XRPD, охватывают вышеупомянутые вариации.

Аналогичным образом, показания температуры применительно к DSC, TGA или другими температурными экспериментами могут варьировать приблизительно±3°C в зависимости от прибора, особых настроек, пробоподготовки и т.п. Соответственно, представленная в настоящем описании кристаллическая форма «по существу» характеризуется DSC-термограммой, представленной на любой из фигур, или термин «приблизительно» понимают как удовлетворяющий такой вариации.

Настоящее изобретение относится к кристаллическим формам определенных соединений или их солей. Согласно некоторым вариантам осуществления, соединение формулы I представляет собой 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид или его фармацевтически приемлемую соль.

Согласно некоторым вариантам осуществления, настоящее изобретение относится к кристаллическому 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамиду, который характеризуется, например, профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 5.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллический 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 6,2°, приблизительно 8,3°, приблизительно 16,1°, приблизительно 16,6°, приблизительно 17,3°, приблизительно 19,0°, приблизительно 23,5°, приблизительно 25,3° и приблизительно 26,9°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллический 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 6,2°, приблизительно 8,3°, приблизительно 16,1°, приблизительно 16,6° и приблизительно 19,0°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид может быть выделен в виде бис-метансульфоната, который может быть кристаллическим и характеризоваться профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 6.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида бис-метансульфоната характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 5,6°, приблизительно 8,8°, приблизительно 10,2°, приблизительно 12,6°, приблизительно 13,8°, приблизительно 15,3°, приблизительно 16,2°, приблизительно 16,8°, приблизительно 17,6°, приблизительно 18,6°, приблизительно 20,3°, приблизительно 20,9°, приблизительно 21,2°, приблизительно 22,7° и приблизительно 24,6°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида бис-метансульфоната характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 5,6°, приблизительно 8,8°, приблизительно 10,2°, приблизительно 12,6°, приблизительно 13,8°, приблизительно 15,3°, приблизительно 16,2°, приблизительно 16,8°, приблизительно 17,6°, приблизительно 18,6°, приблизительно 20,3°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид может быть выделен в виде бис-гидрохлорида, который может быть кристаллическим и характеризоваться профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 8.

Согласно некоторым вариантам осуществления, 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид может быть выделен в виде соли фумаровой кислоты, такой как сесквифумарат, которая может быть кристаллической. Кристаллический сесквифумарат может быть гидратированным (например, моногидратом), сольватированным (например, содержать отличный от воды растворитель) или безводным и несольватированным. Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма сесквифумарата является по существу безводной или по существу несольватированной. Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма сесквифумарата является гидратированной или сольватированной. Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма сесквифумарата является гидратированной. Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма сесквифумарата является моногидратом.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 7.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 2,9°, приблизительно 5,8°, приблизительно 8,7°, приблизительно 13,2°, приблизительно 16,0°, приблизительно 17,6°, приблизительно 19,1°, приблизительно 20,3°, приблизительно 20,4°, приблизительно 20,8°, приблизительно 21,8°, приблизительно 22,9°, приблизительно 23,0°, приблизительно 23,3°, приблизительно 24,9° и приблизительно 26,0°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 2,9°, приблизительно 5,8°, приблизительно 8,7°, приблизительно 13,2°, приблизительно 16,0°, приблизительно 17,6°, приблизительно 19,1°, приблизительно 20,3°, приблизительно 20,4°, приблизительно 20,8°, приблизительно 21,8°, приблизительно 23,0°, приблизительно 23,3°, приблизительно 24,9° и приблизительно 26,0°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 2,9°, приблизительно 5,8°, приблизительно 8,7°, приблизительно 13,2°, приблизительно 16,0°, приблизительно 19,1°, приблизительно 21,8°, приблизительно 24,9° и приблизительно 26,0°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 2,9°, приблизительно 5,8°, приблизительно 8,7°, приблизительно 13,2°, приблизительно 16,0°, приблизительно 19,1° и приблизительно 21,8°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическую форму 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата выбирают из кристаллической формы A, кристаллической формы B, кристаллической формы C, кристаллической формы D, кристаллической формы E и кристаллической формы F.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата моногидрата характеризуется профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 10.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 5,8°, приблизительно 13,2°, приблизительно 15,9°, приблизительно 19,2°, приблизительно 20,3°, приблизительно 21,8°, приблизительно 23,0° и приблизительно 23,3°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата моногидрата характеризуется DSC-термограммой с пиком эндотермы приблизительно при 183°C.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата моногидрата характеризуется данными термографического анализа (TGA), по существу как представленные на фигуре 12.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма A 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата моногидрата характеризуется данными анализа динамической сорбции паров, по существу как представленные на фигуре 13.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма B 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 15.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма B 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 6,2°, приблизительно 7,8°, приблизительно 8,5°, приблизительно 10,9°, приблизительно 12,6°, приблизительно 13,2°, приблизительно 13,5°, приблизительно 16,1°, приблизительно 19,0°, приблизительно 19,3°, приблизительно 21,2°, приблизительно 21,4° и приблизительно 21,6°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма D 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 23.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма D 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 7,2°, приблизительно 8,5°, приблизительно 11,8°, приблизительно 14,5°, приблизительно 16,0°, приблизительно 17,4°, приблизительно 19,3°, приблизительно 19,7° и приблизительно 21,8°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма D 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется DSC-термограммой с пиком эндотермы приблизительно при 167°C.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма D 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется данными термогравиметрическим анализа (TGA), по существу как представленные на фигуре 18.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма E 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 9.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма F 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 9.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма F 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида сесквифумарата характеризуется данными термогравиметрическим анализа (TGA), по существу как представленные на фигуре 18.

Согласно некоторым вариантам осуществления, 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид представляет собой соль бензолсульфоновой кислоты (безилат), которая может быть кристаллической.

Согласно некоторым вариантам осуществления, 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид представляет собой соль нафталиндисульфоновой кислоты (нападизилат), которая может быть кристаллической. Согласно некоторым вариантам осуществления, 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид представляет собой соль нафталин-1,5-дисульфоновой кислоты, которая может быть кристаллической.

Согласно некоторым вариантам осуществления, 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид представляет собой соль толуолсульфоновой кислоты (тозилат), которая может быть кристаллической.

Настоящее изобретение дополнительно относится к кристаллическим формам N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида или его фармацевтически приемлемой соли.

Согласно некоторым вариантам осуществления, настоящее изобретение относится к кристаллической форме N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида, характеризующейся, например, профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 1.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 9,7°, приблизительно 11,6°, приблизительно 12,6°, приблизительно 16,6°, приблизительно 17,5°, приблизительно 18,8°, приблизительно 19,2°, приблизительно 19,8°, приблизительно 21,0° и приблизительно 25,3°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид может быть выделен в виде соли фумаровой кислоты, такой как сесквифумарат, которая может быть кристаллической. Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма сесквифумарата является по существу безводной. Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма сесквифумарата является гидратированной или сольватированной. Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма сесквифумарата является гидратированной. Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма сесквифумарата является моногидратом.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида сесквифумарата характеризуется профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 2.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 5,8°, приблизительно 8,7°, приблизительно 13,2°, приблизительно 16,0°, приблизительно 17,4°, приблизительно 17,6°, приблизительно 19,1°, приблизительно 20,3°, приблизительно 21,8°, приблизительно 23,0°, приблизительно 23,3°, приблизительно 24,9° и приблизительно 26,0°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 5,8°, приблизительно 8,7°, приблизительно 13,2°, приблизительно 16,0°, приблизительно 17,4°, приблизительно 17,6°, приблизительно 19,1°, приблизительно 20,3°, приблизительно 21,8° и приблизительно 23,0°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида сесквифумарата характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 5,8°, приблизительно 8,7°, приблизительно 13,2°, приблизительно 16,0°, приблизительно 17,4°, приблизительно 17,6° и приблизительно 19,1°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид представляет собой бис-метансульфонат, который может быть кристаллическим и характеризоваться, например, профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 3.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида бис-метансульфоната характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 5,6°, приблизительно 11,0°, приблизительно 13,3°, приблизительно 16,7°, приблизительно 20,1°, приблизительно 20,9°, приблизительно 22,1°, приблизительно 23,6°, приблизительно 24,9° и приблизительно 29,6°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида бис-метансульфоната характеризуется по меньшей мере одним XRPD пиком относительно 2-тета, выбранным из приблизительно 5,6° и приблизительно 16,7°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид представляет собой бис-гидрохлорид, который может быть кристаллическим и характеризоваться, например, профилем XRPD, по существу как представленный на фигуре 4.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида бис-гидрохлорида характеризуется по меньшей мере одним, по меньшей мере двумя, по меньшей мере тремя или по меньшей мере четырьмя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 4,7°, приблизительно 10,7°, приблизительно 13,4°, приблизительно 15,9°, приблизительно 17,0°, приблизительно 19,5°, приблизительно 20,1°, приблизительно 23,8°, приблизительно 25,8° и приблизительно 28,1°.

Согласно некоторым вариантам осуществления, кристаллическая форма N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида бис-гидрохлорида характеризуется по меньшей мере одним или двумя пиками XRPD, выраженными в единицах 2-тета, выбранными из приблизительно 4,7°, приблизительно 17,0° и приблизительно 19,5°.

Следует принимать во внимание, что определенные признаки настоящего изобретения, которые для упрощения описаны в контексте отдельных вариантов осуществления, также могут быть предусмотрены в комбинации в одном варианте осуществления. В свою очередь, различные признаки настоящего изобретения, которые для краткости описаны в контексте одного варианта осуществления, также могут быть предусмотрены по отдельности или в любой подходящей подкомбинации.

Используемое в настоящем изобретении выражение «необязательно замещенный» означает незамещенный или замещенный. Используемый в настоящем документе термин «замещенный» означает, что атом водорода удален и заменен заместителем. Термин «замещенный» также может означать, что два атома водорода удалены и заменены двухвалентным заместителем, таким как оксо или сульфидная группа. Следует понимать, что замещение по определенному атому ограничено валентностью.

В различных местах настоящего описания заместители соединений настоящего изобретения раскрыты в группах или в диапазонах. Особым образом предусмотрено, что настоящее изобретение включает в себя все без исключения отдельные подкомбинации представителей таких групп и диапазонов. Например, термин «C_1-6алкил» конкретно относится к отдельно раскрытому метилу, этилу, C₃алкилу, C₄алкилу, C₅алкилу и C₆алкилу.

Термин «z-членный» (где z является целым числом) обычно описывает число формирующих кольцо атомов во фрагменте, где число формирующих кольцо атомов равно z. Например, пиперидинил является примером 6-членного гетероциклоалкильного кольца, пиразолил является примером 5-членного гетероарильного кольца, пиридил является примером 6-членного гетероарильного кольца и 1,2,3,4-тетрагидронафталин является примером 10-членной циклоалкильной группы.

В различных местах настоящего описания описаны связующие заместители. Особым образом предусмотрено, что каждый связующий заместитель включает в себя как прямую, так и обратную форму связующего заместителя. Например, -NR(CR'R'')_n- включает в себя как -NR(CR'R'')_n-, так и -(CR'R'')_nNR-. Если в структуре определенно необходима связующая группа, то следует понимать, что перечисленные для такой группы переменные Маркуша являются связующими группами. Например, если в структуре необходима связующая группа, и определение группы Маркуша для такой переменной включает в себя «алкил» или «арил», то следует понимать, что «алкил» или «арил» представляет собой связующую алкиленовую группу или ариленовую группу, соответственно.

В различных местах настоящего описания описаны различные арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклоалкильные кольца. Если не определено иное, то такие кольца могут быть присоединены к оставшейся части молекулы по любому кольцевому атому в силу разрешенной валентности. Например, термин «пиридиновое кольцо» или «пиридинил» может относиться к пиридин-2-ильному, пиридин-3-ильному или пиридин-4-ильному кольцу.

Для соединений согласно настоящему изобретению, в которых переменная встречается два или более раз, каждая переменная может представлять собой отдельный фрагмент, независимо выбранный из группы, определяющей переменную. Например, если структура описана как содержащая две группы R, которые одновременно содержатся в этом же соединении, то две группы R могут представлять разные фрагменты, независимо выбранные из группы, определенной для R.

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к насыщенной углеводородной группе, которая может быть неразветвленной или разветвленной, содержащей от i до j атомов углерода. Согласно некоторым вариантам осуществления, алкильная группа содержит от 1 до 6 атомов углерода или от 1 до 4 атомов углерода, или от 1 до 3 атомов углерода. Примеры алкильных фрагментов включают в себя без ограничения химические группы, такие как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил и трет-бутил. Согласно некоторым вариантам осуществления, если алкильная группа представляет собой связующую группу, то она может называться «C_{i j}алкилен».

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкокси», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы -O-алкил, где алкильная группа содержит от i до j атомов углерода. Пример алкоксигрупп включает в себя метокси, этокси и пропокси (например, н-пропокси и изопропокси). Согласно некоторым вариантам осуществления, алкильная группа содержит от 1 до 3 атомов углерода.

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкенил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к ненасыщенной углеводородной группе, содержащей одну или несколько двойных углерод-углеродных связей и содержащей от i до j атомов углерода. Согласно некоторым вариантам осуществления, алкенильный фрагмент содержит от 2 до 6 или от 2 до 4 атомов углерода. Пример алкенильных групп включает в себя без ограничения этенил, н-пропенил, изопропенил, н-бутенил, втор-бутенил и т.п.

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкинил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к ненасыщенной углеводородной группе, содержащей одну или несколько тройных углерод-углеродных связей и содержащей от i до j атомов углерода. Пример алкинильных групп включает в себя без ограничения этинил, пропин-1-ил, пропин-2-ил и т.п. Согласно некоторым вариантам осуществления, алкинильный фрагмент содержит от 2 до 6 или от 2 до 4 атомов углерода.

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкиламино», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы NH(алкил), где алкильная группа содержит от i до j атомов углерода. Согласно некоторым вариантам осуществления, алкильная группа содержит от 1 до 6 или от 1 до 4 атомов углерода.

Используемый в настоящем документе термин «ди-C_{i j}-алкиламино», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы -N(алкил)₂, где каждая из двух алкильных групп независимо содержит от i до j атомов углерода. Согласно некоторым вариантам осуществления, каждая алкильная группа независимо содержит от 1 до 6 или от 1 до 4 атомов углерода. Согласно некоторым вариантам осуществления, диалкиламиногруппа представляет собой -N(C_1-4алкил)₂, такой как, например, диметиламино или диэтиламино.

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкилтио», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы S-алкил, где алкильная группа содержит от i до j атомов углерода. Согласно некоторым вариантам осуществления, алкильная группа содержит от 1 до 6 или от 1 до 4 атомов углерода. Согласно некоторым вариантам осуществления, алкилтиогруппа представляет собой C_1-4алкилтио, такой как, например, метилтио или этилтио.

Используемый в настоящем документе термин «тиол», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к -SH.

Используемый в настоящем документе термин «амино», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы -NH₂.

Используемый в настоящем описании «C_{i j}галогеналкокси», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы -O-галогеналкил, содержащей от i до j атомов углерода. Примером галогеналкоксигруппы является OCF₃. Дополнительным примером галогеналкоксигруппы является OCHF₂. Согласно некоторым вариантам осуществления, галогеналкоксигруппа является только фторированной. Согласно некоторым вариантам осуществления, алкильная группа содержит от 1 до 6 или от 1 до 4 атомов углерода. Согласно некоторым вариантам осуществления, галогеналкоксигруппа представляет собой C_1-4галогеналкокси.

Используемый в настоящем документе термин «галоген», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к атому галогена, выбранному из F, Cl, I или Br. Согласно некоторым вариантам осуществления, «галоген» относится к атому галогена, выбранному из F, Cl или Br. Согласно некоторым вариантам осуществления, галогеновым заместителем является F.

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}галогеналкил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к алкильной группе, содержащей от одного атома галогена до 2s+1 атомов галогена, которые могут быть одинаковыми или разными, где «s» представляет собой число атомов углерода в алкильной группе, где алкильная группа содержит от i до j атомов углерода. Согласно некоторым вариантам осуществления, галогеналкильная группа является только фторированной. Согласно некоторым вариантам осуществления, галогеналкильная группа представляет собой фторметил, дифторметил или трифторметил. Согласно некоторым вариантам осуществления, галогеналкильная группа представляет собой трифторметил. Согласно некоторым вариантам осуществления, галогеналкильная группа представляет собой 2,2,2-трифторэтил. Согласно некоторым вариантам осуществления, галогеналкильная группа представляет собой 2,2-дифторэтил. Согласно некоторым вариантам осуществления, галогеналкильная группа содержит от 1 до 6 или от 1 до 4 атомов углерода.

Используемый в настоящем описании «C_{i j}цианоалкил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы CN-(C_{i j} алкил)-.

Используемый в настоящем документе термин «арил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к моноциклическому или полициклическому (например, содержащему 2, 3 или 4 конденсированных кольца) ароматическому углеводороду, такому как без ограничения фенил, 1-нафтил, 2-нафтил, антраценил, фенантренил и т.п. Согласно некоторым вариантам осуществления, арил представляет собой C_6-10арил. Согласно некоторым вариантам осуществления, арил представляет собой C_6-14арил. Согласно некоторым вариантам осуществления, арильная группа представляет собой нафталиновое кольцо или фенильное кольцо. Согласно некоторым вариантам осуществления, арильная группа представляет собой фенил.

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}циклоалкил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к неароматическому циклическому углеводородному фрагменту, содержащему от i до j формирующих кольцо атомов углерода, которые могут необязательно содержать одну или несколько алкениленовых групп как часть кольцевой структуры. Циклоалкильные группы могут включать в себя моно- или полициклические кольцевые системы. Полициклические кольцевые системы могут включать в себя конденсированные кольцевые системы и спироциклы. Также в определение циклоалкила включены фрагменты, которые содержат одно или несколько ароматических колец, конденсированных (т.e. содержащих общую связь) с циклоалкильным кольцом, например, бензо- или пиридопроизводные циклопентана, циклопентена, циклогексана и т.п. Гетероциклоалкильная группа, которая содержит конденсированный ароматический (например, арильный или гетероарильный) фрагмент, может быть присоединена к молекуле через атом либо ароматической, либо неароматической части. Один или несколько формирующих кольцо атомов углерода циклоалкильной группы может быть окислен с формированием карбонильных связей. Согласно некоторым вариантам осуществления, циклоалкил представляет собой C_3-10циклоалкил, C_3-7циклоалкил или C_5-6циклоалкил. Иллюстративные циклоалкильные группы включают в себя циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклопентенил, циклогексенил, циклогексадиенил, циклогептатриенил, норборнил, норпинил, норкарнил и т.п. Дополнительные иллюстративные циклоалкильные группы включают в себя циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Дополнительный пример циклоалкильных групп, в котором циклоалкильная группа содержит конденсированный арильный или гетероарильный фрагмент, включает в себя тетрагидронафталин-2-ил, 2,3-дигидро-1H-инден-2-ил; 2,3,4,9-тетрагидро-1H-карбазол-7-ил; 2,6,7,8-тетрагидробензо[cd]индазол-4-ил и 5,6,7,8,9,10-гексагидроциклогепта[b]индол-3-ил.

Используемый в настоящем документе термин «гетероарил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к моноциклическому или полициклическому (например, содержащему 2, 3 или 4 конденсированных кольца) ароматическому гетероциклическому фрагменту, содержащему в кольце один или несколько гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарильная группа содержит в кольце 1, 2, 3 или 4 гетероатома. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарильная группа содержит в кольце 1, 2 или 3 гетероатома. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарильная группа содержит в кольце 1 или 2 гетероатома. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарильная группа содержит в кольце 1 гетероатом. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарильная группа является 5-10-членной или 5-6-членной. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарильная группа является 5-членной. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарильная группа является 6-членной. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарильная группа является 9- или 10-членной бициклической. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарил является 9-членным бициклическим. Если гетероарильная группа содержит в кольце два или более гетероатомов, причем гетероатомы могут быть одинаковыми или разными. Атомы азота в кольце(ах) гетероарильной группы могут быть окислены с образованием N-оксидов. Пример гетероарильных групп включает в себя без ограничения пиридинил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, пирролил, пиразолил, азолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, имидазолил, фуранил, тиофенил, триазолил, тетразолил, тиадиазолил, хинолинил, изохинолинил, индолил, бензотиофенил, бензофуранил, бензизоксазолил, бензоимидазолил, имидазо[1,2-b]тиазолил, пуринил, триазинил и т.п. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероарильная группа представляет собой 9H-карбазол-2-ил; 1H-бензо[d]имидазол-6-ил; 1H-индол-6-ил; 1H-индазол-6-ил; 2H-индазол-4-ил; 1H-бензо[d][1,2,3]триазол-6-ил; бензо[d]оксазол-2-ил; хинолин-6-ил или бензо[d]тизол-2-ил.

Используемый в настоящем документе термин «гетероциклоалкил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к неароматической гетероциклической кольцевой системе, которая может необязательно содержать одну или несколько элементов ненасыщенности как часть кольцевой структуры, и которая содержит в кольце по меньшей мере один гетероатом, независимо выбранный из азота, серы и кислорода. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероциклоалкильная группа содержит в кольце 1, 2, 3 или 4 гетероатома. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероциклоалкильная группа содержит в кольце 1, 2 или 3 гетероатома. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероциклоалкильная группа содержит в кольце 1 или 2 гетероатома. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероциклоалкильная группа содержит в кольце 1 гетероатом. Если гетероциклоалкильная группа содержит в кольце два или более гетероатома, то гетероатомы могут быть одинаковыми или разными. Пример формирующих кольцо элементов включает в себя CH, CH₂, C(O), N, NH, O, S, S(O) и S(O)₂. Гетероциклоалкильные группы могут включать в себя моно- или полициклические (например, содержащие 2, 3 или 4 конденсированных кольца) кольцевые системы. Полициклические кольца могут включать в себя как конденсированные системы, так и спироциклы. В определение гетероциклоалкила также включены фрагменты, которые содержат одно или несколько ароматических колец, конденсированных (т.e., содержащих общую связь) с неароматическим кольцом, например, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин, дигидробензофуран и т.п. Гетероциклоалкильная группа, которая включает в себя конденсированный ароматический фрагмент, может быть присоединена к молекуле через атом либо ароматической, либо неароматической части. Атомы углерода или гетероатомы в кольце(ах) гетероциклоалкильной группы могут быть окислены с образованием карбонильной, сульфинильной или сульфонильной группы (или другой окисленной связи), или атом азота может быть кватернизован. Согласно некоторым вариантам осуществления, гетероциклоалкил является 5-10-членным, 4-10-членным, 4-7-членным, 5-членным или 6-членным. Примеры гетероциклоалкильных групп включают в себя 1,2,3,4-тетрагидрохинолинил, дигидробензофуранил, азетидинил, азепанил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил и пиранил. Примеры гетероциклоалкильных групп, которые включают в себя одну или несколько конденсированных ароматических групп (например, арил или гетероарил), включают в себя N-(2'-окоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-6'-ил; 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил; 2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил; 1,3-дигидроспиро[инден-2,3'-индолин]-6'-ил; 2,3-дигидробензо[d]оксазол-5-ил; 1,2-дигидрохинолин-7-ил; индолин-6-ил; спиро[циклопентан-1,3'-индолин]-6'-ил; спиро[циклогексан-1,3'-индолин]-6'-ил; хроман-6-ил; 3,4-дигидро-2H-бензо[b][1,4]оксазин-6-ил и бензо[d][1,3]диоксол-5-ил.

Используемый в настоящем документе термин «арилалкил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к алкильной группе, замещенной арильной группой.

Используемый в настоящем документе термин «циклоалкилалкил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к алкильной группе, замещенной циклоалкильной группой.

Используемый в настоящем документе термин «гетероарилалкил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к алкильной группе, замещенной гетероарильной группой.

Используемый в настоящем документе термин «гетероциклоалкилалкил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к алкильной группе, замещенной гетероциклоалкильной группой.

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкилсульфинил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы -S(=O)-(C_{i j}алкил).

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкилсульфинил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы -S(=O)₂-(C_{i j}алкил).

Используемый в настоящем документе термин «карбокси», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к -C(=O)OH группе.

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкилкарбонил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы -C(=O)-(C_{i j}алкил).

Используемый в настоящем документе термин «C_{i j}алкоксикарбонил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы -C(=O)O-(C_{i j}алкил).

Используемый в настоящем документе термин «аминокарбонил», используемый по отдельности или в комбинации с другими терминами, относится к группе формулы -C(=O)NH₂.

Описанные в настоящем изобретении соединения могут быть асимметричными (например, содержащими один или несколько стереоцентров). Если не указано иное, то предусмотрены все стереоизомеры, такие как энантиомеры и диастереоизомеры. Если в названии или структуре соединения стереохимия стереоцентра умалчивается, то при стереоцентре предусмотрены все возможные конфигурации. Соединения согласно настоящему изобретению, которые содержат асимметрически замещенные атомы углерода, могут быть выделены в оптически активной или рацемической форме. Из области техники известны способы получения оптически активных форм из оптически неактивных исходных веществ, такие как расщепление рацемических смесей или стереоселективный синтез. Геометрические изомеры олефинов, C=N двойные связи и т.п. также могут присутствовать в описанных в настоящем изобретении соединениях, и настоящим изобретением предусмотрены все такие стабильные изомеры. Цис- и транс-геометрические изомеры соединений согласно настоящему изобретению описаны, и могут быть выделены в виде смеси изомеров или в виде отдельных изомерных форм.

Если соединения согласно настоящему изобретению содержат хиральный центр, то соединения могут представлять собой любой из возможных стереоизомеров. В соединениях с одним хиральным центром, стереохимия хирального центра может быть (R) или (S). В соединениях с двумя хиральными центрами, каждая стереохимия хиральных центров может независимо быть (R) или (S), тем самым конфигурация хиральных центров может быть (R) и (R), (R) и (S), (S) и (R) или (S) и (S). В соединениях с тремя хиральными центрами, стереохимия каждого из трех хиральных центров может быть независимо (R) или (S), тем самым конфигурация хиральных центров может быть (R), (R) и (R); (R), (R) и (S); (R), (S) и (R); (R), (S) и (S); (S), (R) и (R); (S), (R) и (S); (S), (S) и (R); или (S), (S) и (S).

Расщепление рацемических смесей соединений может быть проведено любыми из многочисленных способов, известных из области техники. Пример способа включает в себя фракционную перекристаллизацию с применением хиральной расщепляющей кислоты, которая является оптически активной, солеобразующей органической кислотой. Подходящими расщепляющими агентами для способов фракционной перекристаллизации являются, например, оптически активные кислоты, такие как D и L формы виннокаменной кислоты, диацетилвиннокаменной кислоты, дибензоилвиннокаменной кислоты, миндальной кислоты, яблочной кислоты, молочной кислоты, или различные оптически активные камфорсульфоновые кислоты, такие как β-камфорсульфоновая кислота. Другие расщепляющие агенты, подходящие для способов фракционной кристаллизации, включают в себя стереоизомерно чистые формы α-метилбензиламина (например, S и R формы или диастереоизомерно чистые формы), 2-фенилглицинол, норэфедрин, эфедрин, N-метилэфедрин, циклогексилэтиламин, 1,2-диаминоциклогексан и т.п.

Расщепление рацемических смесей также может быть проведено элюированием в колонке, заполненной оптически активным расщепляющим агентом (например, динитробензоилфенилглицином). Подходящая для элюирования композиция растворителя может быть определена специалистом в данной области техники.

Если раскрытое соединение поименовано или изображено без обозначения стереохимии одного или нескольких стереоцентров, то предусмотрено, что каждый из стереоизомеров, полученный в результате возможной стереохимии при неопределенном(ых) стереоцентре(ах), охватывается изобретением. Например, если стереоцентр не обозначен как R или S, то предусмотрен любой из двух или оба варианта.

Соединения согласно настоящему изобретению также включают в себя таутомерные формы. Таутомерные формы возникают в результате смены простой связи на смежную двойную связь вместе с сопутствующей миграцией протона. Таутомерные формы включают в себя прототропные таутомеры, которые находятся в состояниях изомерного протонирования с той же эмпирической формулой и полным зарядом. Пример прототропных таутомеров включает в себя кетон-енольные пары, амид-имидные кислотные пары, лактам-лактимные пары, амид-имидокислотные пары, енамин-иминовые пары и кольцевые формы, где протон может занимает два или более положения в гетероциклической системе, например, 1H- и 3H-имидазол, 1H-, 2H- и 4H-1,2,4-триазол, 1H- и 2H-изоиндол и 1H- и 2H-пиразол. Таутомерные формы могут находиться в равновесии или могут быть пространственно замкнуты в одну форму соответствующим замещением.

Соединения согласно настоящему изобретению также могут включать в себя все изотопы атомов, встречающиеся в промежуточных соединениях или конечных соединениях. Изотопы включают в себя атомы с одинаковым атомным числом, но разными массовыми числами. Изотопы составляющих атомов соединений согласно настоящему изобретению могут присутствовать в количестве, соответствующем или не соответствующем распространенности в природе. Примеры изотопов водорода включают в себя дейтерий и тритий. Согласно некоторым вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению дейтерированы, что означает, что вместо атома водорода присутствует по меньшей мере один дейтерированный атом. Согласно некоторым вариантам осуществления, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 атомов водорода в соединении согласно настоящему изобретению заменены дейтерием. Способы замены водорода на дейтерий в молекуле известны из уровня техники.

Подразумевается, что используемый в настоящем описании термин «соединение» включает в себя все стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и изотопы изображенных структур. Предусмотрено, что соединения в настоящем описании, определенные названием или структурой как одна конкретная таутомерная форма, включают в себя другие таутомерные формы, если не указано иное (например, в случае пуриновых колец, если не указано иное и если название или структура соединения содержат 9H-таутомер, то очевидно, что также охватывается 7H-таутомер).

Все соединения и их фармацевтически приемлемые соли могут встречаться вместе с другими веществами, такими как вода и растворители (например, гидраты и сольваты), или могут быть разделены.

Согласно некоторым вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению или их соли, или кристаллические формы любого из вышеупомянутого, являются очищенными или по существу разделенными. Под «по существу разделенными» подразумевается, что соединение по меньшей мере частично или в существенной степени отделено от среды, в которой оно было образовано или обнаружено. Частичное разделение может включать в себя, например, композицию, обогащенную соединением согласно настоящему изобретению. Значительное разделение может включать в себя композиции, содержащие по меньшей мере приблизительно 50%, по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 97% или по меньшей мере приблизительно 99% по массе соединений согласно настоящему изобретению или их солей. Согласно некоторым вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению или их соли, или кристаллические формы любого из вышеупомянутого, могут быть получены с чистотой приблизительно 75% или более, 80% или более, 85% или более, 90% или более, 95% или более, 98% или более или 99% или более.

Используемое в настоящем описании выражение «фармацевтически приемлемый» относится к таким соединениям, веществам, композициям и/или лекарственным формам, которые по результатам тщательной медицинской оценки подходят для применения в контакте с тканями людей и животных без проявления избыточной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения, соразмерно с приемлемым соотношением польза/риск.

Используемые в настоящем описании выражения «температура окружающей среды» и «комнатная температура» являются понятными в данной области техники и, как правило, относятся к температуре, например, температуре реакции, которая приблизительно равна температуре комнаты, в которой проводят реакцию, например, температуре приблизительно от 20°C приблизительно до 30°C.

Настоящее изобретение также включает в себя фармацевтически приемлемые соли описанных в настоящем изобретении соединений. Используемые в настоящем описании «фармацевтически приемлемые соли» относятся к производным раскрытых соединений, где исходное соединение модифицировано путем преобразования существующего кислого или основного фрагмента в форму его соли. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают в себя без ограничения соли неорганической или органической кислоты основных остатков, таких как амины; щелочные или органические соли кислых остатков, таких как карбоновые кислоты; и т.п. Фармацевтически приемлемые соли согласно настоящему изобретению включают в себя традиционные нетоксичные соли исходного соединения, образованные, например, из нетоксичных неорганических или органических кислот. Фармацевтически приемлемые соли согласно настоящему изобретению могут быть синтезированы из исходного соединения, которое содержит основный или кислый фрагмент, традиционными химическими способами. Как правило, такие соли могут быть получены путем осуществления взаимодействия свободных кислых или основных форм таких соединений со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде или в органическом растворителе, или в их смеси; как правило, предпочтительной является неводная среда, такая как эфир, этилацетат, спирты (например, метанол, этанол, изопропанол или бутанол) или ацетонитрил (MeCN). Списки подходящих солей представлены в Remington's Pharmaceutical Sciences, 17^th Ed., (Mack Publishing Company, Easton, 1985), p. 1418, Berge et al., J. Pharm. Sci., 1977, 66(1), 1-19 и в Stahl et al., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, (Wiley, 2002).

Используемые в настоящем описании термины «субъект» и «пациент» могут быть использованы взаимозаменяемо и означают нуждающееся в лечении млекопитающее, например, домашних животных (например, собаки, кошки и т.п.), сельскохозяйственных животных (например, коровы, свиньи, лошади, овцы, козы и т.п.) и лабораторных животных (например, крысы, мыши, морские свинки и т.п.). Как правило, субъектом или пациентом является человек, нуждающийся в лечении.

Синтез

Соединения согласно настоящему изобретению, включая их соли, могут быть получены с применением известных методик органического синтеза и могут быть синтезированы согласно любому из многочисленных возможных путей синтеза.

Реакции для получения соединений согласно настоящему изобретению могут быть проведены в подходящих растворителях, которые могут быть легко выбраны специалистом в области органического синтеза. Подходящие растворители могут быть по существу не вступающими в реакцию с исходными веществами (реагентами), промежуточными соединениями или продуктами при температурах, при которых проводят реакции, например, при температурах, которые могут находиться в диапазоне от температуры замерзания растворителя до температуры кипения растворителя. Заданная реакция может быть проведена в одном растворителе или в смеси двух или более растворителей. В зависимости от конкретной стадии реакции, подходящие для конкретной стадии реакции растворители могут быть выбраны специалистом настоящей области.

Получение соединений согласно настоящему изобретению может включать в себя введение и снятие защитных групп с различных химических групп. Необходимость во введении и снятии защитных групп и выбор соответствующих защитных групп («Pg») может быть легко установлена специалистом в данной области техники. Химия защитных групп («Pg») может быть найдена, например, в документе P.G.M. Wuts and T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 4^th Ed., Wiley&Sons, Inc., New York (2006), включенном в своей полноте в настоящий документ посредством ссылки.

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены с использованием традиционных способов, в которых использовали легкодоступные реагенты и исходные вещества. Реагенты, используемые при получении промежуточных соединений согласно настоящему изобретению, могут быть либо получены из коммерческих источников, либо получены посредством стандартных методик, описанных в литературе. Различные технологии, такие как химия твердой фазы, микроволновая химия или химия потока и т.п., также могут быть использованы для синтеза промежуточных или конечных соединений. Более того, другие способы получения соединения согласно настоящему изобретению будут совершенно очевидны специалисту настоящей области техники в свете последующих реакций, схем и примеров. Если не указано иное, то значения всех переменных определены ниже. Подходящий способ синтеза описан в следующих ссылках: March, Advanced Organic Chemistry, 3^rd edition, John Wiley & Sons, 1985; Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 2^nd edition, John Wiley & Sons 1991; и Larock, Comprehensive Organic Transformations, 4^th edition, VCH publishers Inc., 1989. Более того, в случае любого другого синтеза, для обеспечения завершения реакции один или несколько реагентов, промежуточных соединений или химических веществ могут быть использованы в избыточном количестве. Подходящие значения температуры реакции обычно находятся в диапазоне приблизительно от 0°C приблизительно до точки кипения растворителя. Более часто, значения температуры являются достаточно высокими для нагревания с обратным холодильником, например, приблизительно 68°C для тетрагидрофурана. В некоторых случаях, таких как условия микроволнового облучения, температура реакции может превышать точку кипения растворителя.

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть синтезированы способами, описанными ниже на схемах 1-3. Многие стадии синтеза хорошо описаны в F.A. Carey, R.J. Sundberg, Advanced Organic Chemistry, 2^nd ed., Plenum publication in 1983. Синтез различных гидроксилзамещенных гетероциклов хорошо документально подтвержден в литературе, и может быть осуществлен известными из литературы способами. Общий синтез подходящих гетероциклических колец был упомянут в The Handbook of Heterocyclic Chemistry, Alan R. Katritzky; Pergamon Press, NY, USA, 1st ed. 1986. Изображенные промежуточные соединения также могут быть доступны в виде коммерческих реагентов от многочисленных поставщиков.

Схема 1

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть синтезированы многими способами на основе ретросинтетического анализа конечных целей. Иллюстративные способы представлены путями A, B и C.

Путь A: этот способ включает в себя сочетание промежуточного аминосоединения I с различными альдегидами, аминами, кислотами, арилгалогенидами и т.п. Альдегиды и кетоны могут быть конденсированы с промежуточным соединением I путем восстановительного аминирования. Этот способ включает в себя осуществление взаимодействия альдегидов или кетонов с амином в присутствии восстановителя (например, цианоборгидрида натрия или триацетоксицианоборгидрида натрия). Различные альтернативные способы реакции аминов с альдегидами и кетонами при восстановительных условиях хорошо известны из области техники. Например, эти реакции могут быть выполнены в различных протонных и апротонных растворителях и при температурах от 78°C до условий с перегонкой с обратным холодильником. Один способ включает в себя осуществление взаимодействия аминов с альдегидами или кетонами в растворителях, таких как, например, метанол, этанол, тетрагидрофуран, дихлорметан или 1,2-дихлорэтан, или их комбинация, в присутствии восстановителя (например, триацетоксиборгидрида натрия или цианоборгидрида натрия) при температуре от к.т. до нагревания с обратным холодильником в присутствии или в отсутствие реактора для микроволнового облучения.

Путь B: этот способ включает в себя сочетание промежуточного соединения II с промежуточным соединением III. Промежуточное соединение II (W=NH) может быть синтезировано, например, из различных спироциклических аминов с применением известных методов синтеза, как описано в литературе, и способами, известными специалисту настоящей области техники. Например, промежуточное соединение III может быть синтезировано любым из различных способов, описанных ниже. Уходящей группой (LVG) может быть любая подходящая группа, такая как, например, галоген, мезилат, тозилат или любые другие группы, которые могут быть подходящими для нуклеофильного замещения, катализированного основанием, или катализируемой металлом реакции замещения (например, медью, палладием и т.п.). Эти способы хорошо описаны в Handbook of Reagents for Organic Synthesis, Catalyst Components for Coupling Reactions; Gary Molander, 1st. edition, 2013; John Wiley&Sons. Один способ включает в себя осуществление взаимодействия галогеновых производных промежуточного соединения III с амином в протонных или апротонных растворителях в присутствии органического или неорганического основания при повышенной температуре. Дополнительный пример включает в себя обработку хлорпроизводных промежуточного соединения III амином в апротонном растворителе (например, DMF или DMSO) в присутствии органического основания (например, триэтиламина или пиридина) при повышенных температурах. Для промежуточных соединений II, где W представляет собой углерод, реакция может быть выполнена, например, путем реакции кросс-сочетания винилборонатов спироаминов с промежуточным соединением III с последующим гидрированием с получением углеродных аналогов.

Путь C: конечное соединение может быть синтезировано из промежуточного соединения IV путем модификации функциональной группы. Функциональная группа может представлять собой, например, кислоту, спирт, амин, арилгалогенид и т.п. В этой реакции используют амины с различными ацилирующими средствами (например, хлорангидрид, сульфонилхлорид, изоцианаты и т.п.). В качестве альтернативы, функциональные группы, такие как кислота, могут быть преобразованы в амиды. Арилгалогениды могут быть преобразованы в требуемый продукт с использованием традиционных способов, известных для других функциональных групп, и многие из таких преобразований функциональных групп хорошо известны из литературы и описаны в «Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations» Richard C. Larock, Edition 2, 1999, Wiley & Sons. Одно преобразование функциональной группы включает в себя реакцию амина с различными ацилирующими средствами (например, хлорангидридом или сульфонилхлоридом) в присутствии апротонного растворителя и основания. Другой пример включает в себя осуществление взаимодействия амина с сульфонилхлоридом в дихлорметане в присутствии органического основания (например, пиридина, триметиламина и т.п.).

Схема 2

Промежуточное соединение I может быть синтезировано многими способами, как изображено на схеме 2. Иллюстративные способы представлены путями D, E и F.

Путь D: способ, используемый в пути D, является аналогичным способу, используемому в пути B (схема 1). Для спиродиаминов одна из функциональных аминогрупп может быть выборочно защищена для того, чтобы провести такую реакцию региоселективным способом. Защитные группы выбирают так, чтобы они могли быть совместимы с другим функциональными группами и их превращениям, и могли быть выборочно удалены. Различные аминозащитные группы хорошо известны из литературы и хорошо документально подтверждены в Greene's Protective Groups in Organic Synthesis by Peter G.M. Wuts & Throdora W. Greene; 4th Edition,; 2006, Wiley-Interscience. Широко используемая аминозащитная группа включает в себя, например, трет-бутоксикарбонил, который отщепляется в кислых условиях в апротонных растворителях. Один примера способа включает в себя применение при к.т. трифторуксусной кислоты или гидрохлорида в виде газа в апротонных растворителях (например, в 1,4-диоксане, дихлорметане и т.п.)

Путь E: функциональная группа Fg промежуточного соединения V может подвергаться различным преобразованиям функциональной группы с получением промежуточного соединения I. Такие преобразования хорошо документально подтверждены в литературе, например, в Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure, by Jerry March, Wiley-Interscience; 6 edition 2007. Пример реакции включает в себя кросс-сочетание промежуточного соединения-арилгалогенида V (например, где Fg представляет собой галоген) с различными боронатами, реагентами олова и т.п. Такие реакции кросс-сочетания могут быть выполнены с различными металлическими (например, содержащими медь, палладий, родий и т.п.) катализаторами в различных протонных/апротонных растворителях, или в их комбинации, в присутствии неорганических или органических оснований при температурах в диапазоне от к.т. до повышенных температур. Также может быть необязательно использован микроволновой реактор. Пример способа включает в себя осуществление взаимодействия хлор- или бромпроизводного промежуточного соединения V с арильным реагентом Судзуки в присутствии палладиевого катализатора в различных растворителях (например, DMF, толуол/вода и т.п.) при повышенной температуре в присутствии неорганического основания (например, карбоната цезия или фосфата калия). В некоторых случаях, может быть выполнена дополнительная функционализация с получением требуемого соединения. Например, галогеновая Fg группа в промежуточном соединении V может быть преобразована в кислоту, а затем преобразована в амид, спирт, эфир и т.п. По аналогии, галогеновая Fg группа промежуточного соединения V может быть преобразована в цианогруппу, которая затем может быть преобразована в другие функциональные группы, как это хорошо известно из области техники.

Путь F: этот способ включает в себя реакции фенолов, тиолов, анилинов с 3-галогенпиридинами или 5-галогенпиримидином с применением опосредованных металлом реакций. Нуклеофильное замещение 3-галогенпиридинов или 5-галогенпиримидином фенолами, анилинами и арилтиолами хорошо известно из литературы, как описано, например, в Copper-Mediated Cross-Coupling Reactions by Gwilherm Evano & Nicolas Blanchard by John Wiley & Sons, Edition 1, 2013. Например, промежуточное соединение VII может быть синтезировано из 3,4-дигалогенпиридина или 4,5-дигалогенпиримидина путем осуществления взаимодействия со спироамином с применением способов, подобных описанным в пути B. Кроме того, углеродный аналог может быть синтезирован, например, реакцией кросс-сочетания промежуточного соединения VII с различными алкилцинкгалогенидами в присутствии металлического катализатора, как описано в «Applied Cross-Coupling Reactions» Yasushi Nishihara Springer Science Edition 1, 2013. Пример способа включает в себя реакцию бензилцинкбромида с палладиевым катализатором в апротонном растворителе (например, в диэтиловом эфире или тетрагидрофуране) при повышенной температуре в присутствии или в отсутствие микроволнового реактора. Фторзамещенные фенолы, анилины и тиолы хорошо известны в литературе и могут быть синтезированы различными способами, известными специалисту настоящей области техники.

Различные способы доступны для синтеза промежуточного соединения III, содержащего пиримидин-фенольный эфир. Некоторые способы проиллюстрированы на схеме 3, пути A и B.

Схема 3, путь A

Схема 3, путь A, включает в себя реакцию фенола с 2-галогенацетатом. Этот способ является хорошо известным в литературе и описан, например, в Journal of Medicinal Chemistry (1980), 23(9), 1026-31. Эту реакцию выполняют путем преобразования фенола в соответствующий фенолят путем осуществления взаимодействия с гидридом металла в апротонном растворителе (например, в DMF, THF и т.п.). Один пример включает в себя осуществление взаимодействия фенола с гидридом натрия в апротонных растворителях (например, DMF), а затем добавление метилхлорацетата в ту же емкость при температуре в диапазоне от 78°C до к.т. Промежуточный 2-феноксиацетат затем конденсируют с формальдегидом в присутствии гидрида металла (например, NaH) в апротонном растворителе, как описано на первой стадии. Затем осуществляют взаимодействие этого промежуточного соединения с тиомочевиной в протонном растворителе (например, в спирте) при повышенной температуре с получением промежуточного 2-тиопиримидина. Тиопиримидин может быть восстановлен до пиримидина или преобразован в 2-замещенный пиримидин различными путями синтеза, известными из литературы. Пример способа включает в себя восстановление тиопиримидина в пиримидин в катализируемых металлом условиях гидрирования (например, никель в протонном растворителе, таком как этанол и т.п.). Затем 4-пиримидоновое промежуточное соединение может быть преобразовано в 4-галогенпиримидон путем осуществления взаимодействия с хлорирующим растворителем (например, тионилхлорид, фосфорный окситрихлорид и т.п.) или в чистом виде, или в апротонном растворителе (например, в толуоле, THF и т.п.) при повышенной температуре. В качестве альтернативы, 4-пиримидон может взаимодействовать с сульфонилхлоридом (например, метансульфонилхлоридом или трифторметансульфонилхлоридом) с образованием сульфоната в качестве уходящей группы, подходящей для нуклеофильной замены, которая может быть затем использована при получении требуемых соединений, как описано в настоящем документе на схемах 1 и 2.

Схема 3, путь B

Первая стадия на схеме 3, путь B, включает в себя сочетание фенола с 5-галогенпиримидином, как описано, например, в Organic Letters, 14(1), 170-173; 2012 или в Journal of Organic Chemistry, 75(5), 1791-1794; 2010. Полученный пиримидин затем может быть окислен перкислотой в апротонном растворителе при к.т. с получением пиримидин-N-оксида. Пример способа включает в себя реакцию пиримидинового эфира с мета-перхлорбензойной кислотой в галогенированном растворителе (например, в дихлометане, 1,2-дихлорэтане и т.п.), как описано в J. Org. Chem., 1985, 50 (17), pp 3073-3076. Неочищенное промежуточное соединение затем может быть обработано оксихлоридом фосфора или пентахлоридом фосфора с получением промежуточного соединения III, как описано в международной патентной заявке № WO 2009/137733.

Способы применения

Соединения согласно настоящему изобретению представляют собой ингибиторы взаимодействия менина с MLL и слитыми белками MLL. Согласно некоторым вариантам осуществления, настоящее изобретение относится к способу ингибирования взаимодействия между менином и MLL или слитыми белками MLL путем приведения менина и MLL или слитых белков MLL в контакт с соединением согласно настоящему изобретению. Приведение в контакт может быть осуществлено как in vitro, так и in vivo. Согласно некоторым вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению могут связываться с менином, препятствуя тем самым связыванию MLL с менином. Согласно некоторым вариантам осуществления, настоящее изобретение относится к способу ингибирования активности менина посредством приведения менина в контакт с соединением согласно настоящему изобретению в присутствии MLL или слитых белков MLL. Согласно дополнительным вариантам осуществления, настоящее изобретение относится к способу ингибирования связывания MLL или слитых белков MLL с менином, включающему в себя приведение менина в контакт с соединением согласно настоящему изобретению в присутствии MLL или слитых белков MLL.

Соединения согласно настоящему изобретению также применимы для лечения заболеваний, ассоциированных с взаимодействием менин-MLL или взаимодействием менина со слитыми белками MLL. Например, заболевания или состояния, поддающиеся лечению в соответствии со способами согласно настоящему изобретению, включают в себя злокачественную опухоль, такую как лейкоз, и другие заболевания или нарушения, опосредованные взаимодействием менин-MLL или взаимодействием менина со слитыми белками MLL, такие как сахарный диабет.

Соответственно, считается, что соединения согласно настоящему изобретению эффективны в отношении широкого ряда злокачественных опухолей, включая без ограничения гематологическую злокачественную опухоль (например, лейкоз и лимфому), злокачественную опухоль мочевого пузыря, злокачественную опухоль головного мозга (например, глиому, диффузную истинную глиому варолиева моста (DIPG)), злокачественную опухоль молочной железы (например, злокачественную опухоль молочной железы с тройным негативным фенотипом, эстроген-рецептор-положительную злокачественную опухоль молочной железы (т.е., ER+ злокачественную опухоль молочной железы)), колоректальную злокачественную опухоль, злокачественную опухоль шейки матки, злокачественную опухоль желудочно-кишечного тракта (например, колоректальную карциному, злокачественную опухоль желудка), урогенитальную злокачественную опухоль, злокачественную опухоль головы и шеи, злокачественную опухоль печени, злокачественную опухоль легкого, меланому, злокачественную опухоль яичников, злокачественную опухоль поджелудочной железы, злокачественную опухоль предстательной железы (например, кастрационно-резистентную злокачественную опухоль предстательной железы), злокачественную опухоль почек (например, почечно-клеточную карциному), злокачественную опухоль кожи, злокачественную опухоль щитовидной железы (например, папиллярную тиреокарциному), злокачественную опухоль яичек, саркому (например, саркому Юинга) и злокачественные опухоли, ассоциированные со СПИДом. Согласно некоторым вариантам осуществления, злокачественная опухоль ассоциирована с реаранжированным геном MLL. Согласно некоторым вариантам осуществления, патофизиология злокачественной опухоли зависит от гена MLL. Согласно некоторым вариантам осуществления, злокачественная опухоль ассоциирована с мутацией приобретения функции р53.

Согласно некоторым вариантам осуществления, конкретные злокачественные опухоли, которые могут подвергаться лечению соединениями, композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя злокачественные опухоли сердца, такие как, например, саркома (например, ангиосаркома, фибросаркома, рабдомиосаркома и липосаркома), миксома, рабдомиома, фиброма, липома и тератома; злокачественные опухоли легких, включая, например, бронхогенную карциному (например, сквамозноклеточную, недифференцированную мелкоклеточную, недифференцированную крупноклеточную и аденокарциному), альвеолярную и бронхиолярную карциному, бронхиальную аденому, саркому, лимфому, хондроматозную гамартому, мезотелиому, не мелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, бронхиальные аденомы/карциноиды и плевролегочную бластому; злокачественную опухоль желудочно-кишечного тракта, включая, например, злокачественную опухоль пищевода (например, сквамозноклеточную карциному, аденокарциному, лейомиосаркому и лимфому), злокачественные опухоли желудка (например, карциному, лимфому и лейомиосаркому), злокачественные опухоли поджелудочной железы (например, аденокарциному протоков, инсулиному, глюкагоному, гастиному, карциноидные опухоли и випому), злокачественные опухоли тонкого кишечника (например, аденокарциному, лимфому, карциноидные опухоли, саркому Капоши, лейомиому, гемангиому, липому, нейрофиброму и фиброму), злокачественные опухоли толстого кишечника или ободочной кишки, (например, аденокарциному, тубулярную аденому, ворсинчатую аденому, гамартому и лейомиому), и другие злокачественные опухоли желудочно-кишечного тракта (например, злокачественная опухоль ануса, аноректальная злокачественная опухоль, злокачественная опухоль аппендикса, злокачественная опухоль анального канала, злокачественная опухоль языка, злокачественная опухоль желчного пузыря, желудочно-кишечную стромальную опухоль (GIST), злокачественная опухоль ободочной кишки, колоректальная злокачественная опухоль, злокачественная опухоль внепеченочных желчных протоков, злокачественная опухоль внутрипеченочных желчных протоков, злокачественная опухоль прямой кишки и злокачественная опухоль тонкого кишечника); злокачественные опухоли урогенитального тракта, включая, например, злокачественные опухоли почек (например, аденокарциному, опухоль Вильмса (нефробластома), лимфому и лейкоз), злокачественные опухоли мочевого пузыря и уретры (например, сквамозноклеточную карциному, переходно-клеточную карциному и аденокарциному), злокачественные опухоли предстательной железы (например, аденокарциному и саркому), злокачественные опухоли яичек (например, семиному, тератому, эмбриональную карциному, тератокарциному, хориокарциному, саркому, интерстициально-клеточную карциному, фиброму, фиброаденому, аденоматоидные опухоли и липому), а также переходно-клеточную злокачественную опухоль, переходно-клеточную злокачественную опухоль почечной лоханки и мочеточника и других органов мочевыделения, злокачественную опухоль уретры и злокачественную опухоль мочевого пузыря; злокачественные опухоли печени, включая, например, гепатому (например, гепатоцеллюлярную карциному), холангиосаркому, гепатобластому, ангиосаркому, гепатоцеллюлярную аденому и гемангиому; злокачественные опухоли костей, включая, например, остеогенную саркому (остеосаркому), фибросаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому, хондросаркому, саркому Юинга, злокачественную лимфому (ретикулярно-клеточную саркому), множественную миелому, злокачественную гиганто-клеточную опухоль хордому, остеохондрому (костно-хрящевые экзостозы), доброкачественную хондрому, хондробластому, хондромиксофиброму, остеоидную остеому и гиганто-клеточные опухоли; злокачественные опухоли нервной системы, включая, например, злокачественные опухоли черепа (например, остеому, гемангиому, гранулему, ксантому и деформирующий остит); злокачественные опухоли оболочек головного мозга (например, менингиому, менингиосаркому и глиоматоз); злокачественные опухоли головного мозга (например, астроцитому, медуллобластому, глиому, эпендимому, герминому (пинеалому), мультиформную глиобластому, олигодендроглиому, шванному, ретинобластому и врожденные опухоли); злокачественные опухоли спинного мозга (например, нейрофиброму, менингиому, глиому и саркому), и другие злокачественные опухоли нервной системы (например, глиому ствола головного мозга, диффузную истинную глиому варолиева моста (DIPG), опухоль головного мозга, злокачественную опухоль центральной нервной системы, церебеллярную астроцитому, церебральную астроцитому/злокачественную глиому, детскую церебеллярную астроцитому, детскую церебральную астроцитому, первичную лимфому центральной нервной системы, глиому зрительного пути и гипоталамуса, лимфому нервной системы, супратенториальные недифференцированные нейроэктодермальные опухоли, пинеобластому и супратенториальные недифференцированные нейроэктодермальные опухоли); гинекологические злокачественные опухоли, включая, например, злокачественные опухоли матки (например, эндометриальную карциному), злокачественные опухоли шейки матки (например, цервикальную карциному и предопухолевую цервикальную дисплазию), злокачественные опухоли яичников (например, карциному яичников, включая серозную цистаденокарциному, муцинозную цистаденокарциному, неклассифицированную карциному, гранулезатекаклеточные опухоли, опухоли клеток Сертоли-Лейдига, дисгерминому и злокачественную тератому), злокачественные опухоли вульвы (например, сквамозноклеточную карциному, интраэпителиальную карциному, аденокарциному, фибросаркому и меланому), злокачественные опухоли влагалища (например, светлоклеточную карциному, сквамозноклеточную карциному, ботриоидную саркому и эмбриональную рабдомиосаркому), и злокачественные опухоли фаллопиевых труб (например, карциному); другие злокачественные опухоли репродуктивного тракта, включая, например, эндометриальную злокачественную опухоль, эндометриальную злокачественную опухоль матки, эмбрионально-клеточную опухоль, гестационную трофобластическую опухоль, гестационную трофобластическую опухоль глиому, эпителиальный рак яичников, эмбрионально-клеточную опухоль яичников, опухоль яичников с низким потенциалом злокачественности, злокачественную опухоль полового члена, злокачественную опухоль влагалища, злокачественную опухоль вульвы, экстракраниальную эмбрионально-клеточную опухоль, внегонадную эмбрионально-клеточную опухоль, злокачественную опухоль матки, злокачественную опухоль тела матки, саркому матки; лимфатические и гематологические злокачественные опухоли, включая, например, злокачественные опухоли крови (например, острый миелолейкоз (AML), хронический миелолейкоз(CML), острый лимфобластный лейкоз (ALL), хронический лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, миелопролиферативные заболевания, множественную миелому и миелодиспластический синдром, лимфому Ходжкина, неходжкиновскую лимфому (злокачественную лимфому) и макроглобулинемию Вальденстрема), и другие лимфатические или гематологические злокачественные опухоли включая, например, детский лейкоз, миелопролиферативные нарушения (например, первичный миелофиброз), плазмаклеточную опухоль/множественную миелому, миелодисплазию, миелодиспластический синдром, кожную T-клеточную лимфому, лимфоидную неоплазию, лимфому, ассоциированную со СПИДом, тимому, тимому и карциному тимуса, фунгоидный микоз, и синдром Сезари; злокачественные опухоли кожи, включая, например, злокачественную меланому, базально-клеточную карциному, сквамозноклеточную карциному, саркому Капоши, диспластический невус, липому, ангиому, дерматофиброму, келоиды, псориаз, карциному клеток Меркеля, карциному кожи клеток Меркеля, меланому и карциноидную опухоль; злокачественные опухоли надпочечников, включая, например, нейробластому; другие злокачественные опухоли, ассоциированные с эндокринной системой, включая, например, адренокортикальную карциному, множественную эндокринную неоплазию (например, множественную эндокринную неоплазию I типа), синдром множественной эндокринной неоплазии, злокачественную опухоль паращитовидных желез, опухоль гипофиза, феохромоцитому, злокачественную опухоль островковых клеток поджелудочной железы и опухоли островковых клеток); злокачественную опухоль соединительной ткани (например, злокачественную опухоль кости, злокачественную опухоль кости и сустава, остеосаркому и злокачественную фиброзную гистиоцитому); злокачественную опухоль, ассоциированную с головой, шеей и ротовой полостью (например, злокачественную опухоль головы и шеи, злокачественную опухоль параназального синуса и придаточных пазух носа, метастатический сквамозный рак шеи, злокачественную опухоль ротовой полости, злокачественную опухоль горла, злокачественную опухоль пищевода, злокачественную опухоль гортани, злокачественную опухоль глотки, гипофарингеальный рак, злокачественную опухоль губ и ротовой полости, назофарингеальную злокачественную опухоль, злокачественную опухоль ротовой полости, орофарингеальную злокачественную опухоль и злокачественную опухоль слюнных желез); и злокачественную опухоль, ассоциированную с глазами (например, злокачественную опухоль глаза, внутриглазную меланому). Согласно некоторым вариантам осуществления, злокачественная опухоль представляет собой саркому Юинга.

Согласно некоторым вариантам осуществления, злокачественная опухоль представляет собой гематологическую злокачественную опухоль, такую как лейкоз или лимфома. Приведенные в качестве примера лейкозы и лимфомы, поддающиеся лечению соединениями согласно настоящему изобретению, включают в себя недифференцированный лейкоз (MLL), MLL-связанный лейкоз, MLL-ассоциированный лейкоз, MLL-положительный лейкоз, MLL-индуцированный лейкоз, реаранжированный недифференцированный лейкоз (MLL-r), лейкоз, ассоциированный с реаранжировкой MLL или с реаранжировкой гена MLL, острый лейкоз, хронический лейкоз, вялотекущий лейкоз, лимфобластный лейкоз, лимфоцитарный лейкоз, миелоидный лейкоз, миелогенный лейкоз, детский лейкоз, острый лимфоцитарный лейкоз (ALL) (также называемый острым лимфобластным лейкозом или острым лимфоидным лейкозом), острый миелоидный лейкоз (AML) (также называемый острым миелогенным лейкозом или острым миелобластным лейкозом), острый гранулоцитарный лейкоз, острый нелимфоцитарный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL) (также называемый хроническим лимфобластным лейкозом), хронический миелогенный лейкоз (CML) (также называемый хроническим миелоидным лейкозом), индуцированный лечением лейкоз, миелодиспластический синдром (MDS), миелопролиферативное заболевание (MPD) (такое как первичный миелофиброз (PMF)), миелопролиферативную неоплазию (MPN), неоплазию плазматических клеток, множественную миелому, миелодисплазию, кожную T-клеточную лимфому, лимфоидную неоплазию, AIDS-связанную лимфому, тимому, карциному тимуса, фунгоидный микоз, синдром Алиберта-Базина, фунгоидную гранулему, Синдром Сезари, волосато-клеточный лейкоз, T-клеточный пролимфоцитарный лейкоз (T-PLL), лейкоз из больших зернистых лимфоцитов, менингеальный лейкоз, лейкозный лептоменингит, лейкозный менингит, множественную миелому, лимфому Ходжкина, неходжкиновскую лимфому (злокачественную лимфому) и макроглобулинемию Вальденстрема. Согласно некоторым вариантам осуществления, острый миелоидный лейкоз (AML) представляет собой неименованный острый миелоидный лейкоз с мутированным нуклеофосмином (NPM1) (т.е., NPM1^mut острый миелоидный лейкоз).

Согласно конкретным вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют для лечения лейкоза, ассоциированного с реаранжировкой MLL, острого лимфоцитарного лейкоза, ассоциированного с реаранжировкой MLL, острого лимфобластного лейкоза, ассоциированного с реаранжировкой MLL, острого лимфоидного лейкоза, ассоциированного с реаранжировкой MLL, острого миелоидного лейкоза, ассоциированного с реаранжировкой MLL, острого миелогенного лейкоза, ассоциированного с реаранжировкой MLL, или острого миелобластного лейкоза, ассоциированного с реаранжировкой MLL. Используемый в настоящем документе, термин «реаранжировка MLL» означает реаранжировку гена MLL.

Согласно некоторым вариантам осуществления, заболевания и состояния, поддающиеся лечению соединениями согласно настоящему изобретению, включают в себя резистентность к инсулину, предиабет, сахарный диабет (например, сахарный диабет 2 типа или сахарный диабет 1 типа) и риск развития сахарного диабета. Согласно некоторым вариантам осуществления, заболевания и состояния, поддающиеся лечению соединениями согласно настоящему изобретению, включают в себя гипергликемию. Согласно некоторым вариантам осуществления, гипергликемия ассоциирована с сахарным диабетом, таким как сахарный диабет 2 типа. Согласно некоторым вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют для лечения потери ответа на другие противодиабетические средства и/или сниженной функции бета-клеток у пациента или субъекта. Согласно некоторым вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют для восстановления ответа на другие противодиабетические средства и/или для восстановления функции бета-клеток и/или для снижения необходимости в инсулине у пациента или субъекта. Согласно некоторым вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют для снижения резистентности к инсулину, снижения риска развития сахарного диабета или снижения повышенного уровня глюкозы крови, обусловленных статином, у получающего статин субъекта. Согласно некоторым вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют для лечения сахарного диабета у получающего статин субъекта или для профилактики сахарного диабета у получающего статин субъекта. Способы согласно настоящему изобретению включают в себя снижение, уменьшение, ингибирование, супрессирование, лимитирование или контроль у пациента повышенных уровней глюкозы крови. Согласно дополнительным аспектам, способы согласно настоящему изобретению включают в себя увеличение, стимулирование, усиление, способствование, индуцирование или активирование у субъекта чувствительности к инсулину. Статины включают в себя без ограничения аротвастатин, церивастатин, флувастатин, ловастатин, мевастатин, питавастатин, правастатин, розувастатин и симвастатин.

Согласно некоторым вариантам осуществления, пациенту проводят лечение (например, вводят) соединением согласно настоящему изобретению в количестве, достаточном для лечения или облегчения одного или нескольких из перечисленных выше заболеваний и состояний (например, терапевтически эффективное количество). Соединения согласно настоящему изобретению также могут быть применимы для профилактики одного или нескольких заболеваний, перечисленных в настоящем документе.

Сочетанная терапия

Настоящее изобретение дополнительно относится к сочетанной терапии для лечения заболевания или нарушения, описанного в настоящем документе. Согласно некоторым вариантам осуществления, сочетанная терапия включает в себя введение, по меньшей мере, одного соединения согласно настоящему изобретению в сочетании с одним или несколькими другими фармацевтически активными средствами для лечения злокачественной опухоли или других нарушений, опосредованных менин/MLL. Согласно некоторым вариантам осуществления, сочетанная терапия включает в себя введение, по меньшей мере, одного соединения согласно настоящему изобретению в сочетании с одним или несколькими другими фармацевтически активными средствами для лечения злокачественной опухоли. Фармацевтически активные средства могут быть сочетаны с соединением согласно настоящему изобретению в одной лекарственной форме, или лекарственные средства могут быть введены одновременно или последовательно в виде отдельных лекарственных форм.

Соединения согласно настоящему изобретению также можно использовать в сочетании с иммунотерапией, включая без ограничения клеточную терапию, терапию антителами или цитокиновую терапию для лечения заболевания или нарушения, раскрытого в настоящем документе.

Согласно определенным вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют в сочетании с одним или несколькими пассивными иммунотерапевтическими средствами, включая без ограничения лекарства на основе изолированных моноклональных антител и лекарства на основе конъюгированных моноклональных антител. Примеры лекарств на основе изолированных моноклональных антител, которые могут быть использованы, включают в себя без ограничения ритуксимаб (Rituxan^®), антитело против антигена CD20; трастузумаб (Herceptin^®), антитело против белка HER2; алемтузумаб (Lemtrada^®, Campath^®), антитело против антигена CD52; цетуксимаб (Erbitux^®), антитело против белка EGFR; и бевацизумаб (Avastin^®), который представляет собой ингибитор антиангиогенеза белка VEGF.

Примеры конъюгированных моноклональных антител, которые могут быть использованы, включают в себя без ограничения антитело с радиоактивной меткой ибритумомаб тиуксетан (Zevalin^®); антитело с радиоактивной меткой тозитумомаб (Bexxar^®); и иммунотоксин гемтузумаб озогамицин (Mylotarg^®), который содержит калихеамицин; BL22, конъюгат анти-CD22 моноклонального антитела-иммунотоксина; антитела с радиоактивной меткой, такие как OncoScint^® и ProstaScint^®; брентуксимаб ведотин (Adcetris^®); адо-трастузумаб эмтанзин (Kadcyla^®, также называемый TDM-1).

Дополнительные примеры терапевтических антител, которые могут быть использованы, включают в себя без ограничения REOPRO^® (абциксимаб), антитело против рецептора гликопротеина IIb/IIIa на тромбоцитах; ZENAPAX^® (даклизумаб) иммуносупрессирующее, гуманизированное анти-CD25 моноклональное антитело; PANOREX™, мышиное анти-17-IA мембранного антигена IgG2a антитело; BEC2, мышиное антиидиотип (GD3 эпитоп) IgG антитело; IMC-C225, химерное анти-EGFR IgG антитело; VITAXIN™ гуманизированное анти-αVβ3 интегрин антитело; Campath 1H/LDP-03, гуманизированное анти-CD52 IgG1 антитело; Smart M195, гуманизированное анти-CD33 IgG антитело; LYMPHOCIDE™, гуманизированное анти-CD22 IgG антитело; LYMPHOCIDE™ Y-90; Лимфоскан; Nuvion^® (против CD3; CM3, гуманизированное анти-ICAM3 антитело; IDEC-114 приматизированное анти-CD80 антитело; IDEC-131 гуманизированное анти-CD40L антитело; IDEC-151 приматизированное анти-CD4 антитело; IDEC-152 приматизированное анти-CD23 антитело; SMART анти-CD3, гуманизированное анти-CD3 IgG; 5G1.1, гуманизированное анти-фактор комплемента 5 (C5) антитело; D2E7, гуманизированное анти-TNF-α антитело; CDP870, гуманизированный анти-TNF-α Fab фрагмент; IDEC-151, приматизированное анти-CD4 IgG1 антитело; MDX-CD4, человеческое анти-CD4 IgG антитело; CD20-стрептавидин (+биотин-иттрий 90); CDP571, гуманизированное анти-TNF-α IgG4 антитело; LDP-02, гуманизированное-α4β7 антитело; OrthoClone OKT4A, гуманизированное анти-CD4 IgG антитело; ANTOVA™, гуманизированное анти-CD40L IgG антитело; ANTEGREN™, гуманизированное анти-VLA-4 IgG антитело; и CAT-152, человеческое анти-TGF-β₂ антитело.

Согласно определенным вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют в сочетании с одним или несколькими целевыми иммунотерапевтическими средствами, содержащими токсины, но не антитела, включая без ограничения денилейкин дифтитокс (Ontak^®), связанный с токсином дифтерии IL-2.

Соединения согласно настоящему изобретению также можно использовать в сочетании с адъювантной иммунотерапией для лечения заболевания или нарушения, раскрытого в настоящем документе. Такая адъювантная иммунотерапия включает в себя без ограничения цитокины, такие как гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (G-CSF), макрофагальный белок воспаления (MIP)-1-альфа, интерлейкины (включая IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-12, IL-15, IL-18, IL-21 и IL-27), факторы некроза опухоли (включая TNF-альфа), и интерфероны (включая IFN-альфа, IFN-бета и IFN-гамма); гидроксид алюминия (алюм); бацилла Кальмета-Герена (BCG); гемоцианин лимфы улитки (KLH); неполный адъювант Фрейнда (IFA); QS-21; DETOX; левамизол; и динитрофенил (DNP), и их сочетания, такие как, например, сочетания интерлейкинов, например, IL-2, с другими цитокинами, такими как IFN-альфа.

Согласно определенным вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют в сочетании с вакцинной терапией, включая без ограничения аутологичные и аллогенные вакцины к клеткам опухолей, антигенные вакцины (включая поливалентные антигенные вакцины), вакцины к дендритным клеткам и вирусные вакцины.

Согласно другому варианту осуществления, настоящее раскрытие включает в себя введение субъекту со злокачественной опухолью эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению и одного или нескольких дополнительных противораковых лекарственных средств, выбранных из: хирургического вмешательства, противораковых средств/лекарств, биологической терапии, радиотерапии, терапии анти-ангиогенеза, иммунотерапии, адоптивного переноса эффекторных клеток, генной терапии или гормональной терапии. Примеры противораковых средств/лекарств описаны ниже.

Согласно некоторым вариантам осуществления, противораковые средства/лекарство представляет собой, например, адриамицин, актиномицин, блеомицин, винбластин, цисплатин, ацивицин; акларубицин; акодазола гидрохлорид; акронин; адозелезин; алдеслейкин; алтретамин; амбомицин; аметантрона ацетат; аминоглутетимид; амсакрин; анастрозол; антрамицин; аспарагиназу; асперлин; азацитидин; азетепе; азотомицин; батимастат; бензодепа; бикалутамид; бизантрена гидрохлорид; биснафида димезилат; бизелезин; блеомицина сульфат; бреквинар натрия; бропиримин; бусульфан; цактиномицин; калустерон; карацемид; карбетимер; карбоплатин; кармустин; карубицина гидрохлорид; карзелезин; цедефингол; хлорамибуцил; циролемицин; кладрибин; криснатола мезилат; циклофосфамид; цитарабин; дакарбазин; даунорубицина гидрохлорид; децитабин; дексормаплатин; дезагуанин; дезагуанина мезилат; диазиквон; доксорубицин; доксорубицина гидрохлорид; дролоксифен; дролоксифена цитрат; дромостанолона пропионат; дуазомицин; эдатрексат; эфлорнитина гидрохлорид; эльсамитруцин; энлоплатин; энпромат; эпипропидин; эпирубицина гидрохлорид; эрбулозол; эзорубицина гидрохлорид; эстрамустин; эстрамустина фосфат натрия; этанидазол; этопозид; этопозида фосфат; этоприн; фадрозола гидрохлорид; фазарабин; фенретинид; флоксуридин; флударабина фосфат; фторурацил; флуроцитабин; фосквидон; фостриецин натрия; гемцитабин; гемцитабина гидрохлорид; гидроксимочевина; идарубицина гидрохлорид; ифосфамид; илмофозин; ипроплатин; иринотекана гидрохлорид; ланреотида ацетат; летрозол; лейпролида ацетат; лиарозола гидрохлорид; лометрексол натрия; ломустин; лозоксантрона гидрохлорид; мазопрокол; майтансин; мехлоретамина гидрохлорид; мегестрола ацетат; меленгестрола ацетат; мелфалан; меногарил; меркаптопурин; метотрексат; метотрексат натрия; метоприн; метуредепу; митиндомид; митокарцин; митокромин; митогиллин; митомальцин; митомицин; митоспер; митотан; митоксантрона гидрохлорид; микофеноловую кислоту; нокодазол; ногаламицин; ормаплатин; оксисуран; пегаспаргазу; пелиомицин; пентамустин; пепломицина сульфат; перфосфамид; пипоброман; пипосульфан; пироксантрона гидрохлорид; пликамицин; пломестан; порфимер натрия; порфиромицин; преднимустин; прокарбазина гидрохлорид; пуромицин; пуромицина гидрохлорид; пиразофурин; рибоприн; роглетимид; сафингол; сафингола гидрохлорид; семустин; симтразен; спарфосат натрия; спарсомицин; спирогермания гидрохлорид; спиромустин; спироплатин; стрептонигрин; стрептозоцин; сулофенур; талисомицин; текогалан натрия; тегафур; телоксантрона гидрохлорид; темопорфин; тенипозид; тероксирон; тестолактон; тиамиприн; тиогуанин; тиотепу; тиазофурин; тирапазамин; торемифена цитрат; трестолона ацетат; трицирибина фосфат; триметрексат; триметрексата глюкуронат; трипторелин; тубулозола гидрохлорид; урациловый иприт; уредепу; вапреотид; вертепорфин; винбластина сульфат; винкристина сульфат; виндезин; виндезина сульфат; винепидина сульфат; винглицината сульфат; винлейрозина сульфат; винорелбина тартрат; винрозидина сульфат; винзолидина сульфат; ворозол; зениплатин; зиностатин; зорубицина гидрохлорид; палбоциклиб; Yervoy^® (ипилимумаб); Mekinist^TM (траметиниб); пегинтерферон альфа-2b, рекомбинантный интерферон альфа-2b; Sylatron^TM (пегинтерферон альфа-2b); Tafinlar^® (дабрафениб); Zelboraf^® (вемурафениб); или ниволумаб.

Соединения согласно настоящему изобретению можно вводить в сочетании с существующими способами лечения злокачественных опухолей, например, посредством химиотерапии, радиационного облучения или хирургического вмешательства. Поэтому, дополнительно предусмотрен способ лечения злокачественной опухоли, включающий в себя введение эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению или формы его фармацевтически приемлемой соли, нуждающемуся в таком лечении субъекту, причем субъекту вводят эффективное количество, по меньшей мере, одного дополнительного противоракового химиотерапевтического средства. Примеры подходящих противораковых химиотерапевтических средств включают любой из следующего: арабеликс, адо-трастузумаба эмтанзин, алдеслейкин, алемтузумаб, алитретиноин, аллопуринол, алтретамин, анастрозол, триоксид мышьяка, аспарагиназа, азацитидин, бевацизумаб, бексаротен, блеомицин, bortezombi, бортезомиб, бусульфан внутривенный, бусульфан пероральный, калустерон, капецитабин, карбоплатин, кармустин, цетуксимаб, хлорамбуцил, цисплатин, кладрибин, клофарабин, циклофосфамид, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, далтепарин натрия, дазатиниб, даунорубицин, децитабин, денилейкин, денилейкин дифтитокс, дексразоксан, доцетаксел, доксорубицин, дромостанолона пропионат, экулизумаб, эмтанзин, эпирубицин, эрибулин, эрлотиниб, эстрамустин, этопозида фосфат, этопозид, эверолимус, эксеместан, фентанила цитрат, филграстим, флоксуридин, флударабин, фторурацил, фруквинтиниб, фулвестрант, гефитиниб, гемцитабин, гемтузумаб озогамицин, гозерелина ацетат, гистерелина ацетат, ибритумомаб тиуксетан, идарубицин, ифосфамид, иматиниба мезилат, интерферон альфа 2a, иринотекан, иксабепилон, лапатиниба дитозилат, леналидомид, летрозол, лейковорин, лейпролида ацетат, левамизол, ломустин, меклоретамин, мегестрола ацетат, мелфалан, меркаптопурин, метотрексат, метоксален, митомицин C, митотан, митоксантрон, нандролона фенпропионат, неларабин, нофетумомаб, оксалиплатин, паклитаксел, состав альбумин-стабилизированных наночастиц паклитаксела, памидронат, панитумомаб, пегаспаргаза, пегфилграстим, пеметрексед динатрия, пентостатин, пертузумаб, пипоброман, пликамицин, прокарбазин, квинакрин, расбуриказа, ритуксимаб, сорафениб, стрептозоцин, сульфатиниб, сунитиниб, сунитиниба малеат, тамоксифен, темозоломид, тенипозид, тестолактон, талидомид, тиогуанин, тиотепа, топотекан, торемифен, тозитумомаб, трастузумаб, третиноин, урациловый иприт, валрубицин, винбластин, винкристин, винорелбин, волитиниб, вориностат и золедронат.

Согласно конкретным вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют в сочетании с одним или несколькими противораковыми средствами, выбранными из метотрексата, состава из альбумин-стабилизированных наночастиц паклитаксела, адо-трастузумаба эмтанзина, эрибулина, доксорубицина, фторурацила, эверолимуса, анастрозола, памидроната динатрия, эксеместана, капецитабина, циклофосфамида, доцетаксела, эпирубицина, торемифена, фулвестранта, летрозола, гемцитабина, гемцитабина гидрохлорида, гозерелина ацетата, трастузумаба, иксабепилона, лапатиниба дитозалата, местрола ацетата, тамоскифена цитрата, памидроната динатрия, палбоциклиба и пертузумаба, для лечения злокачественной опухоли молочных желез.

Другие противораковые средства/лекарства включают в себя, без ограничения: 20-эпи-1,25-дигидроксивитамин D3; 5-этинилурацил; абиратерон; акларубицин; ацилфульвен; адеципенол; адозелезин; альдеслейкин; антагонисты ALL-TK; алтретамин; амбамустин; амидокс; амифостин; аминолевулиновую кислоту; амрубицин; амсакрин; анагрелид; андрографолид; ингибиторы ангиогенеза; антагонист D; антагонист G; антареликс; антидорсализующий морфогенетический белок-1; антиандроген; антиэстроген; антинеопластон; антисмысловые олигонуклеотиды; афидиколина глицинат; модуляторы гена апоптоза; регуляторы апоптоза; апуриновую кислоту; ара-CDP-DL-PTBA; аргининдеаминазу; азулакрин; атаместан; атримустин; аксинастатин 1; аксинастатин 2; аксинастатин 3; азасетрон; азатоксин; азатирозин; производные баккатина III; баланол; батимастат; антагонисты BCR/ABL; бензохлорины; бензоилстауроспорин; производные бета-лактама; бета-алетин; бетакламицин B; бетулиновую кислоту; ингибитор bFGF; бикалутамид; бизантрен; бисазиридинилспермин; биснафид; бистратен A; бизелезин; брефлат; бропиримин; будотитан; бутионина сульфоксимин; кальципотриол; калфостин C; производные камптотецина; канарипокс IL-2; капецитабин; карбоксамид-амино-триазол; карбоксиамидотриазол; CaRest M3; CARN 700; ингибитор, полученный из хрящевой ткани; карзелезин; ингибиторы казеинкиназы; кастаноспермин; цекропин B; цетрореликс; хлорины; хлорхиноксалина сульфонамид; цикапрост; цис-порфирин; кладрибин; аналоги кломифена; клотримазол; коллисмицин A; коллисмицин B; комбретастатин A4; аналоги комбретастатина; конагенин; крамбесцидин 816; криснатол; криптофицин 8; производные криптофицина A; курацин A; ингибиторы циклин-зависимой киназы; циклопентантрахиноны; циклоплатам; ципемицин; цитарабина окфосфат; цитолитический фактор; цитостатин; дакликсимаб; децитабин; дегидродидемнин B; деслорелин; дексаметазон; дексифосфамид; дексразоксан; дексверапамил; диазихон; дидемнин B; дидокс; диэтилнорспермин; дигидро-5-азацитидин; 9-диоксамицин; дифенилспиромустин; докозанол; доласетрон; доксифлуридин; дролоксифен; дронабинол; дуокармицин SA; эбселен; экомустин; эделфозин; эдреколомаб; эфлорнитин; элемен; эмитефур; эпирубицин; эпристерид; аналоги эстрамустина; агонисты эстогена; антагонисты эстрогена; этанидазол; этопозида фосфат; фадрозол; фазарабин; фенретинид; филграстим; финастерид; флавопиридол; флезеластин; флуастерон; флударабин; фтордаунорубицина гидрохлорид; форфенимекс; форместан; фостриецин; фотемустин; гадолиния тексафирин; галлия нитрат; галоцитабин; ганиреликс; ингибиторы желатиназы; гемцитабин; ингибиторы глутатиона; гепсульфам; герегулин; гексаметилена бисацетамид; гиперицин; ибандроновую кислоту; идарубицин; идоксифен; идрамантон; илмофозин; иломастат; имидазоакридоны; имиквимод; иммуностимулирующие пептиды; ингибитор рецептора инсулиноподобного фактора роста-1; иобенгуан; йододоксорубицин; 4-ипомеанол; ироплакт; ирсогладин; изобенгазол; изогомогаликондрин B; итасетрон; джасплакинолид; кахалалид F; ламелларин-N триацетат; ланреотид; лейнамицин; ленограстим; лентинана сульфат; лептолстатин; летрозол; фактор ингибирующий лейкоз; лейпролид+эстроген+прогестерон; лейпрорелин; левамизол; лиарозол; линейные аналоги полиамина; липофильный пептид дисахарида; липофильные соединения платины; лиссоклинамид 7; лобаплатин; ломбрицин; лометрексол; лонидамин; лозоксантрон; ловастатин; локсорибин; луртотекан; лютеция тексафирин; лизофиллин; литические пептиды; майтанзин; манностатин A; маримастат; мазопрокол; маспин; ингибиторы матрилизина; ингибиторы матриксной металлопротеиназы; меногарил; мербарон; метерелин; метиониназу; метоклопрамид; ингибитор MIF; мифепристон; милтефозин; миримостим; несопряженную двухцепочечную РНК; митогуазон; митолактол; аналоги митомицина; митонафид; митотоксиновый фактор роста фибробластов-сапорин; митоксантрон; мофаротен; молграмостим; моноклональное антитело, хорионический гонадотропин человека; монофосфорил липид A+клеточная стенка микобактерий; мопидамол; ингибитор гена множественной лекарственной устойчивости; терапию, основанную на супрессоре-1 множественных опухолей; ипритное противораковое средство; микапероксид B; экстракт клеточной стенки микобактерий; мириапорон; N-ацетилдиналин; N-замещенные бензамиды; нафарелин; нагрестип; налоксон+пентазоцин; напавин; нафтерпин; нартограстим; недаплатин; неморубицин; неридроновую кислоту; нейтральную эндопептидазу; нилутамид; низамицин; модуляторы оксида азота; нитроксид антиоксидант; нитруллин; O6-бензилгуанин; октреотид; окиценон; олигонуклеотиды; онапристон; ондансетрон; ондансетрон; орацин; пероральный цитокиновый индуктор; ормаплатин; осатерон; оксалиплатин; оксауномицин; палауамин; пальмитоилризоксин; памидроновую кислоту; панакситриол; паномифен; парабактин; пазеллиптин; пегаспаргазу; пелдезин; пентосан полисульфат натрия; пентостатин; пентрозол; перфлуброн; перфосфамид; периллиловый спирт; феназиномицин; фенилацетат; ингибиторы фосфатазы; пицибанил; пилокарпина гидрохлорид; пирарубицин; пиритрексим; плацетин A; плацетин B; ингибитор активатора плазминогена; комплекс платины; соединения платины; комплекс платина-триамин; порфимер натрия; порфиромицин; преднизон; пропил-бис-акридон; простагландин J2; ингибиторы протеасомы; иммуномодуляторы на основе протеина-A; ингибиторы протеинкиназы C; микроалгал; ингибиторы протеинтирозинфосфатазы; ингибиторы пуриннуклеозидфосфорилазы; пурпурины; пиразолоакридин; конъюгат пиридоксилированного гемоглобина и полиоксиэтилена; антагонисты raf; ралтитрексед; рамосетрон; ингибиторы фарнезилпротеинтрансферазы ras; ингибиторы ras; ингибитор ras-GAP; деметилированный ретеллиптин; рения Re186 этидронат; ризоксин; рибозимы; RII ретинамид; роглетимид; рохитукин; ромуртид; роквинимекс; рубигинон B1; рубоксил; сафингол; саинтопин; SarCNU; саркофитол A; сарграмостим; миметики Sdi 1; семустин; ингибитор 1 старения; смысловые олигонуклеотиды; ингибиторы сигнальной трансдукции; модуляторы сигнальной трансдукции; одноцепочечный антиген связывающий белок; сизофиран; собузоксан; борокаптат натрия; фенилацетат натрия; солверол; белок, связывающий соматомедин; сонермин; спарфосовую кислоту; спикамицин D; спиромустин; спленопентин; спонгистатин 1; скваламин; ингибитор стволовых клеток; ингибиторы деления стволовых клеток; стипиамид; ингибиторы стромелизина; сульфинозин; суперактивный вазоактивный кишечный антагонист пептидов; сурадисту; сурамин; свайнсонин; синтетические гликозаминогликаны; таллимустин; тамоксифена метиодид; тауромустин; тазаротен; текогалан натрия; тегафур; теллурапирилий; ингибиторы теломеразы; темопорфин; темозоломид; тенипозид; тетрахлордекаоксид; тетразомин; талибластин; тиокоралин; тромбопоэтин; миметик тромбопоэтина; тималфазин; агонист рецептора тимопоэтина; тимотринан; тиреостимулирующий гормон; этилэтиопурпурин олова; тирапазамин; титаноцена бихлорид; топсентин; торемифен; фактор тотипотентной стволовой клетки; ингибиторы трансплантации; третиноин; триацетилуридин; трицирибин; триметрексат; трипторелин; трописетрон; туростерид; ингибиторы тирозинкиназы; тирфостины; ингибиторы UBC; убенимекс; фактор ингибирования роста, полученный из урогенитального синуса; антагонисты рецептора урокиназы; вапреотид; вариолин B; векторную систему, эритроцитарную генную терапию; веларезол; верамин; вердины; вертепорфин; винорелбин; винксалтин; витаксин; занотерон; зиласкорб; зиностатин стималамер; 5-фторурацил; и лейковорин.

Согласно некоторым вариантам осуществления, противораковое средство/лекарство представляет собой средство, которое стабилизирует микротрубочки. Используемый в настоящем документе термин «стабилизатор микротубулина» означает противораковое средство/лекарство, которое действует путем остановки клеток в фазах G2-M вследствие стабилизации микротрубочек. Примеры стабилизаторов микротрубочек включают в себя аналоги ACLITAXEL^® и Taxol^®. Дополнительные примеры стабилизаторов микротрубочек включают в себя без ограничения следующие лекарства, зарегистрированные для продажи, и лекарства в стадии разработки: Дискодермолид (также известный как NVP-XX-A-296); Эпотилоны (такие как Эпотилон A, Эпотилон B, Эпотилон C (также известный какдезоксиэпотилон A или dEpoA); Эпотилон D (также называемый KOS-862, dEpoB и дезоксиэпотилон B); Эпотилон E; Эпотилон F; Эпотилон B N-оксид; Эпотилона A N-оксид; 16-азаэпотилон B; 21-аминоэпотилон B (также известный как BMS-310705); 21 гидроксиэпотилон D (также известный как Дезоксиэпотилон F и dEpoF), 26-фторэпотилон); FR-182877 (Fujisawa, также известный как WS-9885B), BSF-223651 (BASF, также известный как ILX-651 и LU-223651); AC-7739 (Ajinomoto, также известный как AVE-8063A и CS-39.HCl); AC-7700 (Ajinomoto, также известный как AVE-8062, AVE 8062A, CS-39-L-Ser.HCl и RPR-258062A); Фиджианолид B; Лаулималид; Карибеозид; Карибеолин; Таккалонолид; Элеутеробин; Саркодиктиин; Лаулималид; Диктиостатин-1; сложные спирты Ятрофана; и их аналоги и производные.

Согласно другому варианту осуществления, противораковое средство/лекарство представляет собой средство, которое ингибирует микротрубочки. Используемый в настоящем документе термин «ингибитор микротубулина» означает противораковое средство, которое действует путем ингибирования полимеризации тубулина или упорядочивания микротрубочек. Примеры ингибиторов микротубулина включают в себя без ограничения следующие лекарства, зарегистрированные для продажи, и лекарства в стадии разработки: Эрбулозол (также известный как R-55104); Доластатин 10 (также известный как DLS-10 и NSC-376128); Мивобулина изетионат (также известный как CI-980); Винкристин; NSC-639829; ABT-751 (Abbott, также известный как E-7010); Альториртины (такие как Альториртин A и Альториртин C); Спонгистатины (такие как Спонгистатин 1, Спонгистатин 2, Спонгистатин 3, Спонгистатин 4, Спонгистатин 5, Спонгистатин 6, Спонгистатин 7, Спонгистатин 8 и Спонгистатин 9); Цемадотина гидрохлорид (также известный как LU-103793 и NSC-D-669356); Ауристатин PE (также известный как NSC-654663); Соблидотин (также известный как TZT-1027), LS-4559-P (Pharmacia, также известный как LS-4577); LS-4578 (Pharmacia, также известный как LS-477-P); LS-4477 (Pharmacia), LS-4559 (Pharmacia); RPR-112378 (Aventis); Винкристина сульфат; DZ-3358 (Daiichi); GS-164 (Takeda); GS-198 (Takeda); KAR-2 (Hungarian Academy of Sciences); SAH-49960 (Lilly/Novartis); SDZ-268970 (Lilly/Novartis); AM-97 (Armad/Kyowa Hakko); AM-132 (Armad); AM-138 (Armad/Kyowa Hakko); IDN-5005 (Indena); Криптофицин 52 (также известный как LY-355703); Витилевуамид; Тубулизин A; Канаденсол; Центауреидин (также известный как NSC-106969); T-138067 (Tularik, также известный как T-67, TL-138067 и TI-138067); COBRA-1 (Parker Hughes Institute, также известный как DDE-261 и WHI-261); H10 (Kansas State University); H16 (Kansas State University); Онкоцидин A1 (также известный как BTO-956 и DIME); DDE-313 (Parker Hughes Institute); SPA-2 (Parker Hughes Institute); SPA-1 (Parker Hughes Institute, также известный как SPIKET-P); 3-IAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, также известный как MF-569); Наркозин (также известный как NSC-5366); Наскапин, D-24851 (Asta Medica), A-105972 (Abbott); Гемиастерлин; 3-BAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, также известный как MF-191); TMPN (Arizona State University); Ванадоцена ацетилацетонат; T-138026 (Tularik); Монсатрол; Инаноцин (также известный как NSC-698666); 3-IAABE (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine); A-204197 (Abbott); T-607 (Tularik, также известный как T-900607); RPR-115781 (Aventis); Элеутеробины (такие как Десметилэлеутеробин, Дезаэтилэлеутеробин, Изоэлеутеробин A и Z-Элейтеробин); Галихондрин B; D-64131 (Asta Medica); D-68144 (Asta Medica); Диазонамид A; A 293620 (Abbott); NPI-2350 (Nereus); TUB-245 (Aventis); A-259754 (Abbott); Диозостатин; (-)-Фенилагистин (также известный как NSCL-96F037); D-68838 (Asta Medica); D-68836 (Asta Medica); Миосеверин B; D-43411 (Zentaris, также известный как D-81862); A 289099 (Abbott); A-318315 (Abbott); HTI-286 (также известный как SPA-110, трифторацетат) (Wyeth); D-82317 (Zentaris); D-82318 (Zentaris); SC-12983 (NCI); Ресверастатин фосфат натрия; BPR-0Y-007 (National Health Research Institutes); SSR-250411 (Sanofi); Комбретастатин A4; эрибулин (Halaven^®)_; и их аналоги и производные.

Согласно дополнительным вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют в сочетании с одним или несколькими алкилирующими средствами, антиметаболитами, натуральными продуктами или гормонами.

Примеры алкилирующих средств, применимых для способов согласно настоящему изобретению, включают в себя без ограничения азотистые иприты (например, мехлорэтамин, циклофосфамид, хлорамбуцил, мелфалан и т.п.), этиленимин и метилмеламины (например, гексаметилмеламин, тиотепа), алкилсульфонаты (например, бусульфан), нитрозомочевины (например, кармустин, ломустин, семустин, стрептозоцин и т.п.), или триазены (дакарбазин и т.п.).

Примеры антиметаболитов, применимых для способов согласно настоящему изобретению, включают в себя без ограничения аналог фолиевой кислоты (например, метотрексат), или аналоги пиримидина (например, фторурацил, флоксоуридин, цитарабин) и аналоги пурина (например, меркаптопурин, тиогуанин, пентостатин). Примеры натуральных продуктов, применимых для способов согласно настоящему изобретению, включают в себя без ограничения алкалоиды барвинка (например, винбластин, винкристин), эпиподофиллотоксины (например, этопозид, тенипозид), антибиотики (например, актиномицин D, даунорубицин, блеомицин, плиамицин, митомицин) или ферменты (например, L-аспарагиназу).

Примеры гормонов и антагонистов, применимых для лечения злокачественной опухоли, включают в себя без ограничения адренокортикостероиды (например, преднизон), прогестины (например, гидроксипрогестерона капроат, мегестрола ацетат, медроксипрогестерона ацетат), эстрогены (например, диэтилстилбестрол, этинилэстрадиол), антиэстроген (например, тамоксифен), андрогены (например, тестостерона пропионат, флуоксиместерон), антиандроген (например, флутамид), и аналог гонадотропин-высвобождающего гормона (например, лейпролид).

Другие средства, которые можно использовать в сочетании с соединениями согласно настоящему изобретению для лечения злокачественной опухоли, включают в себя координационные комплексы платины (например, цисплатин, карбоплатин), антрацендион (например, митоксантрон), замещенную мочевину (например, гидроксимочевину), производное метилгидразина (например, прокарбазин) и адренокортикальный супрессант (например, митотан, аминоглутетимид). Другие противораковые средства/лекарства которые можно использовать в сочетании с соединениями согласно настоящему изобретению, включают в себя без ограничения модуляторы печеночного X рецептора (LXR), включая агонисты LXR и бета-селективные агонисты LXR; ингибиторы арилгидрокарбонового рецептора (AhR); ингибиторы фермента поли-ADP-рибоза полимеразы (PARP), включая олапариб, инипариб, рукапариб, велипариб; ингибиторы рецепторных тирозинкиназ сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF), включая цедираниб; ингибиторы белка 1 программируемой клеточной гибели (PD-1), включая ниволумаб (Bristol-Myers Squibb Co.) и пембролизумаб (Merck & Co., Inc.; MK-3475); ингибиторы MEK, включая кобиметиниб; ингибиторы фермента B-Raf, включая вемурафениб; ингибиторы цитотоксического Т-лимфоцитарного антигена (CTLA-4, включая тремелимумаб; ингибиторы лиганда 1 программируемой гибели (PD-L1), включая MEDI4736 (AstraZeneca); ингибиторы метаболического пути Wnt; ингибиторы рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) включая AZD9291 (AstraZeneca), эрлотиниб, гефитиниб, панитумумаб и цетуксимаб; ингибиторы рецептора аденозина A2A; ингибиторы рецептора аденозина A2B; ингибиторы рецептора колониестимулирующего фактора-1 (CSF1R), включая PLX3397 (Plexxikon), и ингибиторы CD73.

Соединения согласно настоящему изобретению можно использовать в сочетании с одной или несколькими терапевтическими стратегиями, включая ингибиторы иммунных контрольных точек, включая ингибиторы PD-1, PD-L1 и CTLA-4.

Соединения согласно настоящему изобретению можно использовать в сочетании с одним или несколькими противораковыми средствами, выбранными из ингибиторов MCL-1, например, гомогаррингтонина (HHT) и омацетаксина; ингибиторов BCL-2, например, венетокласка (ABT-199), навитоклакса (ABT-263), ABT-737, госсипола (AT-101), апогоссиполона (ApoG2) и обатоклакса; селективных ингибиторов ядерного экспорта (SINEs), например, селинексора (KPT-330).

Согласно конкретным вариантам осуществления, соединения согласно настоящему изобретению используют в сочетании с одним или несколькими противораковыми средствами, выбранными из метотрексата (Abitrexate^®; Folex^®; Folex PFS^®; Mexate^®; Mexate-AQ^®); неларабина (Arranon^®); блинатумомаба (Blincyto^®); рубидомицина гидрохлорида или даунорубицина гидрохлорида (Cerubidine®); циклофосфамида (Clafen^®; Cytoxan^®; Neosar^®); клофарабина (Clofarex^®; Clolar^®); цитарабина (Cytosar-U^®; Tarabine PFS^®); дазатиниба (Sprycel^®); доксорубицина гидрохлорида; аспарагиназы Erwinia chrysanthemi (Эрвиназа); иматиниб мезилата (Gleevec^®); понатиниба гидрохлорида (Iclusig^®); меркаптопурина (Пуринетол; Пуриксан); пегаспаргазы (Oncaspar^®); преднизона; винкристина сульфата (Oncovin^®, Vincasar PFS^®, Vincrex^®); липосом винкристина сульфата (Marqibo^®); гипер-CVAD (фракционированный циклофосфамид, винкристин, адриамицин и дексаметазон); триоксида мышьяка (Trisenox^®); идарубицина гидрохлорида (Idamycin^®); митоксантрона гидрохлорида; тиогуанина (Tabloid^®); ADE (цитарабин, даунорубицин и этопозид); алемтузумаба (Lemtrada^®, Campath^®); хлорамбуцила (Ambochlorin^®, Amboclorin^®, Leukeran^®, Linfolizin^®); офатумумаб (Arzerra^®); бендамустина гидрохлорида (Treanda^®); флударабин фосфата (Fludara^®); обинутузумаба (Gazyva^®); ибрутиниба (Imbruvica^®); иделализиба (Zydelig^®); мехлоретамина гидрохлорида (Mustargen^®); ритуксимаба (Rituxan^®); хлорамбуцил-преднизона; CVP (циклофосфамид, винкристин и преднизон); бозутиниба (Bosulif^®); бусульфана (Busulfex^®; Myleran^®); омацетаксина мепесукцината (Synribo^®); нилотиниба (Tasigna^®); Intron^® A (рекомбинантный интерферон Альфа-2b); ингибиторов DOT1L, включая EPZ-5676 (Epizyme, Inc.); и ингибиторов бромодомена и экстра-терминального фрагмента (BET) белков (ингибиторы BET), включая MS417, JQ1, I-BET 762 и I-BET 151, для лечения лейкоза.

Соединения согласно настоящему изобретению можно использовать в сочетании с одним или несколькими другими средствами или терапиями для лечения резистентности к инсулину, предиабета, сахарного диабета (например, сахарного диабета 2 типа или сахарного диабета 1 типа), и риска развития сахарного диабета, включая без ограничения инсулины и аналоги инсулина, такие как Humulin^® (EIi Lilly), Lantus® (Sanofi Aventis), Novolin^® (Novo Nordisk) и Exubera^® (Pfizer); Avandamet^® (метформин HCI и розиглитазона малеат, GSK); Avandaryl^® (глимепирид и розиглитазона малеат, GSK); Metaglip^® (глипизид и метформин HCI, Bristol Myers Squibb); Glucovance^® (глибурид и метформин HCI, Bristol Myers Squibb); агонисты гамма PPAR agonists, такие как Avandia^® (розиглитазона малеат, GSK) и Actos^® (пиоглитазона гидрохлорид, Takeda/Eli Lilly); сульфонилмочевины, такие как Amaryl^® (глимепирид, Sanofi Aventis), Diabeta^® (глибурид, Sanofi Aventis), Micronase^®/Glynase^® (глибурид, Pfizer), и Glucotrol^®/Glucotrol XL^® (глипизид, Pfizer); меглитиниды, такие как Prandin^®/NovoNorm^® (репаглинид, Novo Nordisk), Starlix^® (натеглинид, Novartis) и Glufast^® (митиглинид, Takeda); бигуаниды, такие как Glucophase^®/Glucophase XR^® (метформин HCI, Bristol Myers Squibb) и Glumetza^® (метформин HCI, Depomed); тиазолидиндионы; аналоги амилина; аналоги GLP-1; ингибиторы DPP-IV, такие как Januvia^® (ситаглиптин, Merck) и Galvus^® (вилдаглиптин, Novartis); ингибиторы PTB-1 B; ингибиторы протеинкиназ (включая ингибиторы AMP-активированных протеинкиназ); антагонисты глюкагона, бета ингибиторы гликоген-синтаза-киназы-3; ингибиторы глюкоза-6-фосфатазы; ингибиторы гликоген фосфорилазы; ингибиторы натрий-глюкозного котранспортера; и ингибиторы альфа-глюкозидазы, такие как Glycet^® (миглитол, Pfizer); статины, фибраты и Zetia^® (эзетимиб); альфа-блокаторы; бета-блокаторы; блокаторы кальциевых каналов; диуретики; ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента (ACE); ингибиторы двойной ACE и нейтральной эндопептидазы (NEP); блокаторы ангиотензиновых рецепторов (ARBs); ингибиторы альдостено-синтазы; антагонисты рецепторов альдостерона; антагонисты рецепторов эндотелина; орлистат; фентермин; сибутрамин; Acomplia^® (римонабант); тиазолидиндионы (например, розиглитазон, пиоглитазон); ингибиторы SGLT 2 (например, дапаглифлозин, ремоглифлозина этабонат, серглифлозин, канаглифлозин и 1-хлор-4-(β-D-глюкопираноз-1-ил)-2-[4-(('S)-тетрагидрофуран-3-илокси)-бензил]-бензол); PPAR-гамма-агонисты (например, Gl 262570) и антагонисты; PPAR-гамма/альфа модуляторы (например, KRP 297); ингибиторы альфа-глюкозидазы (например, акарбоза, воглибоза); ингибиторы DPPIV (например, Januvia^® (ситаглиптин), Galvus^®/Zomelis^® (вилдаглиптин), Onglyza^® (саксаглиптин), Nesina^®/Vipidia^® (алоглиптин) и Tradjenta^®/Trajenta^® (линаглиптин)); альфа2-антагонисты; агонисты и аналоги рецептора глюкагон-подобного белка-1 (GLP-1) (например, эксендин-4); амилин; ингибиторы протеинтирозинфосфатазы 1; вещества, которые воздействуют на дерегулированную продукцию глюкозы в печени, например, ингибиторы глюкоза-6-фосфатазы или фруктоза-1,6-бисфосфатазы, гликогенфосфорилазы; антагонисты рецептора глюкагона; ингибиторы фосфоенолпируваткарбоксикиназы; активаторы гликоген-синтаза-киназы и глюкокиназы; средства, понижающие уровень липидов, такие как ингибиторы HMG-CoA-редуктазы (например, симвастатин, аторвастатин); фибраты (например, безафибрат, фенофибрат), никотиновую кислоту и ее производные, агонисты PPAR-альфа, агонисты PPAR-дельта; ингибиторы ACAT (например, авасимиб); ингибиторы абсорбции холестерина, такие как эзетимиб; вещества, связывающие желчные кислоты, такие как холестирамин; ингибиторы транспорта желчных кислот в подвздошной кишке; соединения, повышающие HDL, такие как ингибиторы CETP и регуляторы ABC1; активные вещества для лечения ожирения, такие каксибутрамин и тетрагидролипостатин; SDRI; аксокин; лептин; миметики лептина; антагонисты рецептора каннабиноид l; и антагонисты MCH-1 рецептора; агонисты рецептора MC4; антагонисты NPY5 и NPY2; бета-3 адренергические агонисты, такие как SB- 418790 и AD-9677; агонисты рецептора 5HT2c; антагонисты GABA-рецептора; блокаторы Na-каналов; топирамат; ингибиторы протеинкиназы C; ингибиторы конечного продукта усиленного гликозилирования; и ингибиторы альдозоредуктазы.

Фармацевтические составы, введение и лекарственные формы

При использовании в качестве фармацевтических средств, соединения согласно настоящему изобретению можно вводить в форме фармацевтической композиции, которая относится к сочетанию соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, и, по меньшей мере, одного фармацевтически приемлемого носителя. Такие композиции могут быть приготовлены способом, хорошо известным в области фармацевтики, и их можно вводить посредством различных путей введения, в зависимости от того, местное или системное лечение является желательным, и от подлежащей обработке площади. Введение может быть местным (включая офтальмологическое и на слизистые оболочки, включая интраназальную, вагинальную и ректальную доставку), легочным (например, посредством ингаляции или инсуффляции порошков или аэрозолей, включая небулайзер; интратрахеально, интраназально, эпидермально и чрескожно), глазным, пероральным или парентеральным. Способы для глазной доставки могут включать в себя местное введение (глазные капли), субконъюнктивальную, периокулярную или интравитреальную инъекцию или введение посредством баллонного катетера или офтальмологических вкладок, помещаемых хирургически в конъюнктивальный мешок. Парентеральное введение включает в себя внутривенную, интраартериальную, подкожную, интраперитонеальную или внутримышечную инъекцию или инфузию; или интракраниальное, например, интратекальное или интравентрикулярное, введение. Парентеральное введение может быть в форме отдельной болюсной дозы, или может быть, например, в виде продолжительной перфузионной помпы. Фармацевтические композиции и составы для местного введения могут включать в себя чрескожные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, спреи, жидкости и порошки. Общепринятые фармацевтические носители, водные, порошковые или масляные основы, загустители и т.п., могут быть необходимы или желательны.

Настоящее изобретение также включает в себя фармацевтические композиции, которые содержат в качестве активного ингредиента одно или несколько из вышеперечисленных соединений согласно настоящему изобретению в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями. При приготовлении композиций согласно настоящему изобретению активный ингредиент обычно смешивают с наполнителем, разбавляют наполнителем или заключают в такой наполнитель в форме, например, капсулы, саше, бумаги или другого контейнера. Если наполнитель служит в качестве разбавителя, то он может представлять собой твердое, полутвердое или жидкое вещество, которое действует как основа, носитель или среда для активного ингредиента. Таким образом, композиции могут быть представлены в форме таблеток, пилюль, порошков, леденцов, саше, облаток, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (как твердых, так и в жидкой среде), мазей, содержащих, например, до 10 масс.% активного соединения, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных инъекционных растворов и стерильных упакованных порошков.

Соединения или композиции, описанные в настоящем документе, можно вводить пациенту с использованием любого количества и любого пути введения, эффективного для лечения или уменьшения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, описанных в настоящем документе. Точное необходимое количество будет варьировать от субъекта к субъекту, в зависимости от вида, возраста и общего состояния здоровья субъекта, тяжести инфекции, заболевания или нарушения, конкретного средства, его способа введения и т.п. Предусмотренные соединения предпочтительно включают в состав конкретной стандартной лекарственной формы для легкого введения и универсальности дозирования. Используемое в настоящем документе выражение «стандартная лекарственная форма» относится к физически дискретной единице средства, подходящего для пациента, подлежащего лечению.

Терапевтическая дозировка соединений согласно настоящему изобретению может варьировать в соответствии, например, с конкретным применением, для которого проводят лечение, со способом введения соединения, здоровьем и состоянием пациента и суждением практикующего врача. Пропорция или концентрация соединения согласно настоящему изобретению в фармацевтической композиции может варьировать в зависимости от ряда факторов, включая дозировку, химические характеристики (например, гидрофобность) и путь введения. Например, соединения согласно настоящему изобретению могут быть предусмотрены в водном физиологическом буферном растворе для парентерального введения, содержащем приблизительно от 0,1 приблизительно до 10% масс./об. соединения. Некоторые типичные диапазоны доз составляют приблизительно от 1 мкг/кг приблизительно до 1 г/кг массы тела в сутки. Согласно некоторым вариантам осуществления, диапазон доз составляет приблизительно от 0,01 мг/кг приблизительно до 100 мг/кг массы тела в сутки. Дозировка, по всей видимости, зависит от таких переменных, как тип и степень прогрессирования заболевания или нарушения, общее состояние здоровья конкретного пациента, соответствующая биологическая эффективность выбранного соединения, состава наполнителя и пути его введения. Эффективные дозы могут быть экстраполированы из кривых дозовой зависимости, полученных из тестовых систем in vitro или животной модели.

ПРИМЕРЫ

Как отображено в ниже Примерах, соединения согласно настоящему изобретению получали и выделяли согласно следующим общим методикам. Следует понимать, что хотя общие способы могут отображать синтез определенных соединений согласно настоящему изобретению, следующие общие способы и другие способы, известные специалисту в данной области техники, могут быть использованы в отношении всех соединений и подклассов и классов каждого из таких соединений, как описано в настоящем документе.

Реакции с микроволновой обработкой проводили в реакторе CEM с применением системы Discover SP. Если представлены данные ЯМР, то спектры получали на Varian-400 (400 MГц). Спектры описаны в м.д. в сторону слабого поля относительно тетраметилсилана с указанием номера протона, мультиплетностями и, в некоторых случаях, константами взаимодействия, указанными в круглых скобках наряду со ссылкой на дейтерированный растворитель. Соединения также очищали системой для флэш-хроматографии ISCO с использованием стандартных способов, описанных в руководстве.

Соединения очищали методом препаративной HPLC с кислой, щелочной или нейтральной подвижной фазой, как описано ниже в способах A-G HPLC.

Препаративная RP-HPLC, способ A:

RP-HPLC (C-18, Boston Green ODS 150×30 мм×5 мкм; элюент-градиент: вода+0,1% TFA/ацетонитрил=81:19→51:49)

Подвижная фаза A: вода+0,1% TFA; подвижная фаза B: CH₃CN; скорость потока: 30 мл/мин; определение: УФ 220 нм/254 нм; колонка: Boston Green ODS 150×30 мм×5 мкм; температура колонки: 30°C.

Время (мин) %A %B 0,00 81 19 8,00 51 49 8,20 0 100 10,00 0 100

Препаративная RP-HPLC, способ B:

RP-HPLC (C-18, Phenomenex Synergi C18 250×21,2 мм×4 мкм; элюент-градиент: вода+0,1% TFA/ацетонитрил=75:25→45:55).

Подвижная фаза A: вода+0,1% TFA; подвижная фаза B: CH₃CN; скорость потока: 25 мл/мин; определение: УФ 220 нм/254 нм; колонка: Phenomenex Synergi C18 250×21,2 мм×4 мкм; температура колонки: 30°C.

Время (мин) %A %B 0,00 75 25 10,00 45 55 10,20 0 100 12,00 0 100

Препаративная RP-HPLC, способ C:

RP-HPLC (C-18, Phenomenex Synergi C18 250×21,2 мм×4 мкм; элюент-градиент: вода+0,05% HCl/ацетонитрил=82:18→52:48).

Подвижная фаза A: вода с 0,05% HCl; подвижная фаза B: CH₃CN; скорость потока: 30 мл/мин; определение: УФ 220 нм/254 нм; колонка: Phenomenex Gemini 150×30 мм×4 мкм; температура колонки: 30°C.

Время (мин) %A %B 0,00 82 18 8,00 52 48 8,20 0 100 10,00 0 100

Препаративная RP-HPLC, способ D:

RP-HPLC (C-18, Phenomenex Gemini 150×25 мм×10 мкм; элюент-градиент: вода+0,05% гидроксид аммония/ацетонитрил=30:70→0:100).

Подвижная фаза A: вода с 0,05% гидроксидом аммония; подвижная фаза B: CH₃CN; скорость потока: 25 мл/мин; определение: УФ 220 нм/254 нм; колонка: Phenomenex Gemini 150×25 мм×10 мкм; температура колонки: 30°C.

Время (мин) %A %B 0,00 30 70 8,00 0 100 8,20 0 100 10,00 0 100

Препаративная RP-HPLC, способ E:

Подвижная фаза A: вода с 0,1% TFA; подвижная фаза B: ацетонитрил с 0,1% TFA; скорость потока: 25 мл/мин; определение: УФ 220 нм/254 нм; колонка: C-18 Synergi Max-RP 150×30 мм×4 мкм; температура колонки: 30°C.

Время (мин) %A %B 0,00 90 10 12,00 60 40 12,20 10 90 13,5 90 10

Препаративная RP-HPLC, способ F с нейтральной подвижной фазой:

Подвижная фаза A: вода

Подвижная фаза B: CH₃CN

Скорость потока: 120 мл/мин

Определение: УФ 220 нм/254 нм

Колонка: Phenomenex Synergi Max-RP 250×50 мм×10 мкм

Температура колонки: 30°C

Время (мин) %A %B 0,00 80 20 23,00 35 65 23,20 0 100 26,00 0 100

Препаративная RP-HPLC, способ G:

Подвижная фаза A: вода (10 мM NH₄HCO₃)

Подвижная фаза B: CH₃CN

Скорость потока: 25 мл/мин

Определение: УФ 220 нм/254 нм

Колонка: Xtimate C18 150×25 мм×5 мкм

Температура колонки: 30°C

Время (мин) %A %B 0,00 72 28 10,00 52 48 10,20 0 100 13,00 0 100

Данные LCMS получали в следующих условиях проведения хроматографии:

LCMS, способ A:

Система HPLC: Waters ACQUITY; колонка: Waters ACQUITY CSH^TM C18 1,7 мкм. Предколонка: Waters Assy. Frit, 0,2 мкм, 2,1 мм; температура колонки: 40°C.

Подвижная фаза: A: TFA:вода (1:1000, об.:об.); подвижная фаза B: TFA:ACN (1:1000, об.:об.); скорость потока: 0,65 мл/мин; вводимый объем: 2 мкл; время исследования: приблизительно 1,5 мин.

Программа градиента:

Время (мин) B% 0,00 10 1,0 90 1,20 10

Масс-спектрометр: Waters SQD; ионизация: ионизация электрораспылением с регистрацией положительно заряженных ионов (ESI); режим сканирования (m/z 100-1400 каждые 0,2 секунды); напряжение на капилляре ES: 3,5 кВ; напряжение на конусе ES: 25 В.

Температура источника: 120°C; температура десольватации: 500°C; поток газа десольватации: азот, 650 (л/ч); поток газа в конусе: азот 50 (л/ч).

LCMS, способ B:

Система HPLC: Waters ACQUITY; колонка: Waters ACQUITY CSH^TM C18 1,7 мкм. Предколонка: Waters Assy. Frit, 0,2 мкм, 2,1 мм; температура колонки: 40°C.

Подвижная фаза: A: TFA:вода (1:1000, об.:об.); подвижная фаза B: TFA:ACN (1:1000, об.:об.); скорость потока: 0,65 мл/мин; вводимый объем: 2 мкл; время исследования: приблизительно 1,5 мин.

Время (мин) B% 0,00 10 2 90 2,20 90

Масс-спектрометр: Waters SQD; ионизация: ионизация электрораспылением с регистрацией положительно заряженных ионов (ESI); режим сканирования (m/z 100-1400 каждые 0,2 секунды); напряжение на капилляре ES: 3,5 кВ; напряжение на конусе ES: 25 В.

Температура источника: 120°C; температура десольватации: 500°C; поток газа десольватации: азот, 650 (л/ч); поток газа в конусе: азот, 50 (л/ч).

LCMS, способ C:

Колонка MERCK, RP-18e 25-2 мм Подвижная фаза A: вода (4 л)+TFA (1,5 мл) B: ацетонитрил (4 л)+TFA (0,75 мл) Время (мин) B% 0 5 0,7 95 1,1 95 1,11 5 1,5 5 Скорость потока 1,5 мл/мин Длина волны УФ 220, 224 нм Температура печи 50°C MS ионизация ESI

LCMS, способ D:

Колонка Xbrige Shield RP-18,5 мкм, 2,1×50 мм Подвижная фаза A: вода (1 л)+NH₃H₂O (0,5 мл) B: ацетонитрил Время (мин) B% 0 10 2 80 2,48 80 2,49 10 3 10 Скорость потока 1,0 мл/мин Длина волны УФ 220 нм Температура печи 30°C MS ионизация ESI

LCMS, способ E:

Колонка Xtimate C18 2,1×30 мм,3 мкм Подвижная фаза A: вода (4 л)+TFA (1,5 мл) B: ацетонитрил (4 л)+TFA (0,75 мл) Время (мин) B% 0 10 0,9 80 1,5 80 1,51 10 2 10 Скорость потока 1,2 мл/мин Длина волны УФ 220 нм Температура печи 50°C MS ионизация ESI

LCMS, способ F:

Колонка Xtimate C18 2,1×30 мм,3 мкм Подвижная фаза A: вода (4 л)+TFA (1,5 мл) B: ацетонитрил (4 л)+TFA (0,75 мл) Время (мин) B% 0 0 0,9 60 1,5 60 1,51 0 2 0 Скорость потока 1,2 мл/мин Длина волны УФ 220 нм Температура печи 50°C MS ионизация ESI

LCMS, способ G:

Система HPLC: Waters ACQUITY; колонка: Waters ACQUITY CSH^TM C18 1,7 мкм. Предколонка: Waters Assy. Frit, 0,2 мкм, 2,1 мм; температура колонки: 40°C.

Подвижная фаза: A: TFA:вода (1:1000, об.:об.); подвижная фаза B: TFA:ACN (1:1000, об.:об.); скорость потока: 1 мл/мин; вводимый объем: 2 мкл; время исследования: приблизительно 115 мин.

Время (мин) B% 0,1 10 2,0 10 14 90 15 90 16 10

Масс-спектрометр: Waters SQD; ионизация: ионизация электрораспылением с регистрацией положительно заряженных ионов (ESI); режим сканирования (m/z 100-1400 каждые 0,2 секунды); напряжение на капилляре ES: 3,5 кВ; напряжение на конусе ES: 25 В.

Температура источника: 120°C; температура десольватации: 500°C; поток газа десольватации: азот, 650 (л/ч); поток газа через конус: азот, 50 (л/ч).

Далее представлены способы разделения рацемических соединений методом сверхкритической жидкостной хроматографии (SFC).

Способ A

Прибор: Thar SFC 80; колонка: AD 250 мм×30 мм, 5 мкм; подвижная фаза: A: сверхкритический CO₂, B: IPA (0,05% DEA), A:B=80:20 при 60 мл/мин; температура колонки: 38°C; давление в форсунке: 100 бар; температура форсунки: 60°C; температура испарителя: 20°C; температура ножа: 25°C; длина волны: 220 нм.

Способ B

Прибор: SFC MG2; колонка: OJ 250 мм×30 мм, 5 мкм; подвижная фаза: A: сверхкритический CO₂, B: MeOH (0,05% DEA), A:B=90:10 при 70 мл/мин; температура колонки: 38°C; давление в форсунке: 100 бар; температура форсунки: 60°C; температура испарителя: 20°C; температура ножа: 25°C; длина волны: 220 нм.

Далее представлены способы аналитической (аналит.) SFC, использованные для охарактеризования конечных соединений.

Аналит. SFC, способ A: прибор: Thar SFC 80; колонка: AD_H 4 мм×40 мм, 5 мкм; подвижная фаза: A: сверхкритический CO₂, B: IPA (0,05% DEA), A:B=80:20 при 4 мл/мин; прогон 3 мин, температура колонки: 38°C; давление форсунки: 100 бар; температура форсунки: 60°C; температура испарителя: 20°C; температура ножа: 25°C; длина волны: 220 нм.

Аналит. SFC, способ B: прибор: Thar SFC 80; колонка: AD_H 4 мм×40 мм, 5 мкм; подвижная фаза: A: сверхкритический CO₂, B: IPA (0,05% DEA), A:B=80:20 при 2,4 мл/мин; прогон 10 мин, температура колонки: 38°C; давление форсунки: 100 бар; температура форсунки: 60°C; температура испарителя: 20°C; температура ножа: 25°C; длина волны: 220 нм.

Аналит. SFC, способ C: прибор: Thar SFC 80; колонка: AD_H 4 мм×40 мм, 5 мкм; подвижная фаза: A: сверхкритический CO₂, B: IPA (0,05% DEA), A:B=80:20 при 2,8 мл/мин; прогон 13 мин, температура колонки: 38°C; давление форсунки: 100 бар; температура форсунки: 60°C; температура испарителя: 20°C; температура ножа: 25°C; длина волны: 220 нм.

Аналит. SFC, способ D: прибор: Thar SFC 80; колонка: AD-3, 5 мм×40 мм, 5 мкм; подвижная фаза: A: сверхкритический CO₂, B: IPA (0,05% DEA), A:B=80:20 при 25 мл/мин; прогон 5 мин, температура колонки: 38°C; давление форсунки: 100 бар; температура форсунки: 60°C; температура испарителя: 20°C; температура ножа: 25°C; длина волны: 220 нм.

Порошковая рентгеновская дифрактометрия (XRPD), способ A

Использовали рентгеновский дифрактометр Rigaku MiniFlex 600 с высокоскоростным детектором D/teX в следующих условиях: 40 кВ, 15 мА, CuK-альфа-излучение (длина волны=1,54 Å). Диапазон сканирования 2-тета составлял 3-45°, а скорость сканирования составляла 10°/мин.

Порошковая рентгеновская дифрактометрия (XRPD), способ B

Параметр Значение Прибор Система Rigaku SmartLab Геометрия Отражение BB Рентгеновская трубка медная Монохроматизация Бета-фильтр Детектор D'teX PSD Напряжение (кВ) 40,00 Ток (мA) 44,00 Начальный угол (2θ) 2,00 Конечный угол (2θ) 70,00 Размер шага (2θ) 0,04 Скорость сканирования (2θ) 3,00 Щели (S0 град., S1 град., S3 мм) 1/3, 4, 13 Тип измерения Симметричный θ:2θ Держатель образца Si с низким фоном Вращение образца (об./мин) 75

Порошковая рентгеновская дифрактометрия (XRPD), способ C

Геометрия пропускания

Диаграммы XRPD получали на дифрактометре PANalytical X'Pert PRO MPD с применением падающего луча Cu-излучения, производимого источником с точной фокусировкой Optix long. Для фокусировки Cu Kα X-лучей для прохождения через образец и на детектор использовали многослойное зеркало с эллиптическим профилем. Перед проведением анализа, анализировали образец кремния (NIST SRM 640e) для подтверждения того, что наблюдаемое положение пика Si-111 совпадает с сертифицированным NIST положением. Образец пробы размещали между пленками толщиной 3 мкм, и анализировали геометрию пропускания. Для минимизации созданного воздухом фона использовали поглотитель пучка, короткий антирассеивающий удлинитель и антирассеивающий ножевой коллиматор. Щели Соллера для падающих и отраженных лучей были использованы для минимизации расширения от осевого расхождения. Дифрактограммы получали с использованием сканирующего позиционно-чувствительного детектора (X'Celerator), расположенного в 240 мм от образца, и программного обеспечения для сбора данных, версия 2.2b.

Геометрия отражения

Диаграммы XRPD получали на дифрактометре PANalytical X'Pert PRO MPD с применением падающего луча Cu Kα излучения, производимого источником с точной фокусировкой, и никелевого фильтра. Дифрактометр был настроен с использованием симметричной геометрии Брэгга-Брентано. Перед проведением анализа, анализировали образец кремния (NIST SRM 640e) для подтверждения того, что наблюдаемое положение пика Si-111 совпадает с сертифицированным NIST положением. Образец пробы готовили в виде тонкого круглого слоя, размещаемого в центре кремниевой подложки с нулевым фоном. Для минимизации фона, созданного воздухом использовали антирассеивающие щели (SS). Для минимизации расширения от осевого расхождения использовали щели Соллера для падающих и отраженных лучей. Дифрактограммы получали с применением сканирующего позиционно-чувствительного детектора (X'Celerator), расположенного в 240 мм от образца, и программного обеспечения для сбора данных, версия 2.2b.

Дифференциальная сканирующая калориметрия (DSC)

Измерения методом DSC проводили с использованием дифференциального сканирующего калориметра TA Instruments 2920. Калибровку температуры проводили с использованием металлического индия, регистрируемого NIST.

Динамическая сорбция/десорбция паров (DVS)

Данные сорбции/десорбции влаги получали на анализаторе сорбции паров VTI SGA-100. В качестве калибровочных стандартов использовали NaCl и PVP. Перед анализом образцы не подвергали сушке. Данные сорбции/десорбции получали в диапазоне относительной влажности от 5% до 95% с шагом в 10% относительной влажности при продувке азотом. Критерий равновесия, используемый для анализа, составлял менее чем 0,0100% изменения массы в течение 5 минут с максимальным временем уравновешивания 3 часа. Данные не корректировали на начальное содержание влаги в образцах.

Термогравиметрический анализ (TGA)

Анализ методом TG проводили с использованием термогравиметрического анализатора TA Instruments Q5000 IR. Калибровку температуры проводили с использованием никеля и ALUMEL™. Каждый образец готовили в платиновом лотке, и нагревали печь в атмосфере азота.

Изобретение проиллюстрировано последующими примерами, в которых могут быть использованы следующие сокращения:

Сокращение Значение ACN ацетонитрил BOP (бензотриазол-1-илокси)трис(диметиламино)фосфония гексафторфосфат BTC бис(трихлорметил)карбонат DCE 1,2-дихлорэтан DCM метиленхлорид DIEA диизопропилэтиламин DMA диметилацетамид DMF диметилформамид dppf 1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен DSC дифференциальная сканирующая калориметрия DVS динамическая сорбция/десорбция паров EDX энергодисперсионная рентгеновская спектроскопия EtN триэтиламин EtOAc этилацетат EtOH этанол ч час(ы) HATU 1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиния 3-оксида гексафторфосфат HBTU 2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат HCl соляная кислота HPLC высокоэффективная жидкостная хроматография Im имидазол KI йодид калия K₃PO₄ фосфат калия LCMS жидкостная хроматография/масс-спектрометрия мин минута(ы) Me метил мл миллилитры ммоль миллимоли мг миллиграм NaBH₃CN цианборгидрид натрия PLM микроскопия в поляризованном свете RP обращенная фаза к.т. комнатная температура SFC сверхкритическая жидкостная хроматография SPhos Gen 2 хлор(2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диметокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладий(II) t_R, t_r, R_t время удерживания TBAF фторид тетрабутиламмония TBDMS терт-бутилдиметилсилил TEA триэтиламин TFA трифторуксусная кислота THF тетрагидрофуран TGA термогравиметрический анализ TLC тонкослойная хроматография XPhos дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил XRPD порошковая рентгеновская дифрактометрия

Промежуточный продукт 1

5-(2-бром-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимин

Стадия 1: этил-2-(2-бром-4-фторфенокси)ацетат

К раствору 2-бром-4-фторфенола (250 г, 1,31 моль) в CH₃CN (2 л) добавляли K₂CO₃ (270 г, 1,97 моль) и этил-2-бромацетат (219 г, 1,31 моль). Суспензию нагревали при 90°C в течение 1,5 ч. Смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат с получением неочищенного этил-2-(2-бром-4-фторфенокси)ацетата в виде коричневого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии. Выход: 312 г; ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7,32 (дд, J=7,6, 3,2 Гц, 1H), 6,95-6,97 (м, 1H), 6,82 (дд, J=8,8, 4,4 Гц, 1H), 4,66 (с, 2H), 4,27 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 1,31 (т, J=7,2 Гц, 3H). ¹F-ЯМР (CDCl₃): δ -120,06 (с, 1F).

Стадия 2: 5-(2-бром-4-фторфенокси)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1H)-он

К раствору этил-2-(2-бром-4-фторфенокси)ацетата (100 г) в безводном THF (2 л) при 0°C добавляли этилформиат (108 г) и NaH (20 г). Смесь перемешивали при 35-45°C в течение 18 ч. Растворитель удаляли в условиях вакуума, добавляли безводный EtOH (2 л) и тиомочевину (25 г, 324,8 ммоль), и перемешивали при 90°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали и разбавляли водой (2 л) и экстрагировали смесью петролейный эфир:этилацетат (10:1; 500 мл×3). Водный слой подкисляли до pH=4 добавлением водн. HCl (1н, 200 мл), и в осадок выпадало белое твердое вещество. Смесь фильтровали, и сушили полученный осадок на фильтре с получением неочищенного 5-(2-бром-4-фторфенокси)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1H)-она (62 г) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии без очистки. Выход: 62 г; LCMS, способ C: R_t=0,638 мин; (M+H)⁺=316,9, 318,9 (изотопы хлора).

Стадия 3: 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ол

К раствору 5-(2-бром-4-фторфенокси)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1H)-она (62 г) в безводном EtOH (1,5 л) добавляли никель Ренэя (62 г) и нагревали смесь с обратным холодильником в течение 6 ч. Растворитель удаляли в условиях вакуума, и добавляли безводный EtOH (2 л). Смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат с получением неочищенного 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ола в виде серого твердого вещества. Выход: 55 г. LCMS, способ C: R_t=0,619 мин, (M+H)⁺=284,9, 287,0 (изотопы хлора).

Стадия 4: 5-(2-бром-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимин

К раствору 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ола (55 г) в SOCl₂ (500 мл) добавляли безводный DMF (5 мл). Смесь нагревали при 70°C в течение 4 ч. Смесь концентрировали, растворяли в DCM (500 мл), а затем вливали в насыщенный NaHCO₃ (водн.) (500 мл) и перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Органический слой разделяли, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Затем, остаток очищали на колонке ISCO с силикагелем (от 100% петролейного эфира до EtOAc:петролейный эфир=9:1) с получением 5-(2-бром-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимина в виде светло-желтого твердого вещества. Выход: 32 г. LCMS, способ C: R_t=0,858 мин, (M+H)⁺=302,9, 304,9 (изотопы хлора и брома); ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,77 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,45 (дд, J=7,6 3,2 Гц, 1H), 7,06-7,12 (м, 2H). ¹F-ЯМР (CDCl₃): δ -113,64 (с, 1F).

Промежуточные продукты 2-10a

Следующие промежуточные продукты получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного продукта 1.

Таблица 1. Промежуточные продукты 2-10a.

№ промеж. продукта Название Структурная формула Выход Пик(и) MS (M+H)⁺ Значение R_f или R_t 2 4-хлор-5-(2,6-дихлор-4-фторфенокси)пиридимин 87% 294,9, 296,9 R_t=0,828 мин, LCMS, способ C ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,75 (с, 1H), 7,88 (с, 1H), 7,26 (с, 1H), 7,24 (с, 1H). ¹⁹F-ЯМР: (CDCl₃): δ -110,54 (с, 1F). 3 4-хлор-5-(2-хлор-3,4-дифторфенокси)пиридимин 42% 277,0, 279,0 0,994 мин, LCMS, способ C ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,81 (с, 1H), 8,17 (с, 1H), 7,10-7,20 (м, 1H), 6,80-6,85 (м, 1H),1⁹F-ЯМР: (CDCl₃): δ -132,37, -136,57. 4 4-хлор-5-(4-фтор-2-(трифторметил)фенокси)-пиридимин 32% 292,9 0,886 мин, LCMS, способ C ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,80 (с, 1H), 8,26 (с, 1H), 7,46 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,15-7,25 (м, 1H), 6,81-6,95 (м, 1H). ¹⁹F-ЯМР: (CDCl₃): δ -62,00~-62,29, -114,92~-114,95. 5 этил-2-(2-хлор-4-(трифторметил)фенокси)-ацетат 15% 308,8, 310,8 0,854 мин, LCMS, способ C 6 4-хлор-5-(4-фтор-2-(трифторметил)фенокси)-пиридимин 36% 276,8, 278,8 0,834 мин, LCMS, способ C ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,79 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,55 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,30 (дд, J=8,8 2,4 Гц, 1H), 6,99 (д, J=8,8 Гц, 1H). 7 4-хлор-5-(4-фтор-2-(трифторметил)фенокси)-пиридимин 14% 320,8, 322,8 0,878 мин, LCMS, способ C 8 4-хлор-5-(2-бром-3,4-дифторфенокси)пиридимин 31% 321,0, 323,1 1,645 мин, LCMS, способ C 9 5-(2-бром-4,5-дифторфенокси)-4-хлорпиридимин 31% 320,8, 322,8 1,025 мин, LCMS, способ C 10 4-хлор-5-(2-хлор-3-(трифторметил)фенокси)-пиридимин 25% 309,1, 310,9 0,841 мин, LCMS, способ C ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,82 (с, 1H), 8,40 (с, 1H), 7,70 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,54 (т, J=8,0 Гц, 1H) 7,39 (д, J=8,0 Гц, 1H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -63,82 (м, 3F). 10a 4-хлор-5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиридимин 45% 258,1, 260,1 0,829 мин, LCMS, способ C

Промежуточный продукт 11

трет-Бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

Раствор 5-(2-бром-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимина (промежуточный продукт 1, 4 г, 13,18 ммоль), трет-бутил-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (3,0 г, 13,18 ммоль) и K₂CO₃ (7,3 г, 52,72 ммоль) в CH₃CN (100 мл) перемешивали при 95°C в течение 8 ч. Твердое вещество отфильтровывали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:этилацетат=10:1→3:2) с получением трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11) в виде желтого масла. Выход: 9,5 г; HPLC, способ C: R_t=0,749 мин; (M+H)⁺=493,0 495,1 (изотопы брома); ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,29 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,54 (д, J=2,8 Гц, 1H), 7-16 (д, J=6,0 Гц, 1H), 6,96 (д, J=4,8 Гц, 1H), 3,67-3,81 (т, 4H), 3,37 (с, 2H), 3,23-3,27 (м, 2H), 1,87-1,96 (т, 4H), 1,44 (с, 9H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,01.

Промежуточные продукты 12-19

Следующие промежуточные продукты получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного продукта 11.

Таблица 2. Промежуточные продукты 12-19

№ промеж. продукта Название Структурная формула Выход Пик(и) MS (M+H)⁺ Значение R_f или R_t 12 7-(5-(2,6-дихлор-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат 80% 483,0, 485,0 0,775 in LCMS, способ C 13 трет-бутил-6-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-карбоксилат 86% 467,3, 469,3 1,023 мин, LCMS, способ C ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,44 (с, 1H), 7,83 (с, 1H), 7,00-7,10 (м, 1H), 6,45-6,55 (м, 1H), 3,55-3,90 (м, 4H), 3,20-3,50 (м, 4H), 1,80-2,00 (м, 4H), 1,45 (с, 9H),1⁹F-ЯМР: (CDCl₃ 400 МГц): δ -133,24~-133,47, -140,23~-140,44. 14 трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(трифторметил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат 85% 483,1 0,821 мин, LCMS, способ C ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,30-8,40 (м, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,55 (дд, J=8,0 2,8 Гц, 1H), 7,36-7,40 (м, 1H), 6,91-7,00 (м, 1H), 3,70-3,88 (м, 2H), 3,55-3,69 (м, 2H), 3,32-3,50 (м, 2H), 3,15-3,29 (м, 2H), 1,84-2,00 (м, 4H), 1,45 (д, J=3,6 Гц, 9H),1⁹F-ЯМР: (CD₃OD): δ -63,9~-63,53, -120,02~-120,32. 15 трет-бутил-7-(5-(2-хлор-4-(трифторметил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат 70% 499,3, 502,3 (изотопы хлора) 0,819 мин, LCMS, способ E ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,49 (с, 1H), 7,94 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,47 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,80-6,82 (м, 1H), 3,65-3,76 (м, 2H), 3,57-3,60 (м, 2H), 3,41-3,47 (м, 2H), 3,23-3,32 (м, 2H), 1,85-1,92 (м, 4H), 1,46 (с, 9H),1⁹F-ЯМР: (CDCl₃): δ -62,09. 16 трет-бутил-7-(5-(2,4-дихлорфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат 94% (M+H)+=464,9, 466,9 (изотопы хлора) 0,788 мин, LCMS, способ C ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,44 (с, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,19 (д, J=8,4 2,4 Гц, 1H), 6,72 (д, J=8,0 Гц, 1H), 3,60-3,80 (м, 4H), 3,25-3,46 (м, 4H), 1,87-1,93 (м, 4H), 1,46 (с, 9H). 17 трет-бутил7-(5-(2-бром-4,6-дифторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат 90% (M+H)+=513,1, 515,1 (изотопы брома) 0,762 мин, LCMS, способ C 18 трет-бутил7-(5-(2-бром-4,5-дифторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат 90% (M+H)+=510,9, 512,9 (изотопы брома) 0,823 мин, LCMS, способ C 19 трет-бутил-7-(5-(2-хлор-3-(трифторметил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат 74% (M+H)+=499,3, 501,3 (изотопы хлора) 1,060 мин, LCMS, способ D ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,38 (с, 1H), 7,86 (с, 1H), 7,47-7,60 (м, 2H), 7,18 (с, 1H), 3,80-3,84 (м, 2H), 3,61-3,67 (м, 2H), 3,44-3,52 (м, 2H), 3,24-3,27 (м, 2H), 1,89-1,99 (м, 4H), 1,46-1,48 (м, 9H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -63,71 (м, 3F).

Промежуточный продукт 20

трет-бутил-6-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

К раствору 5-(2-бром-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимина (промежуточный продукт 1, 5,55 г, 18,4 ммоль) в CH₃CN (80 мл) добавляли трет-бутил-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат (3,62 г, 18,4 ммоль) и Na₂CO₃ (3,89 г, 36,74 ммоль). Смесь перемешивали при 90-95°C в течение 16 ч. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=0:1) с получением трет-бутил-6-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата в виде желтого твердого вещества. Выход: 6,5 г; HPLC, способ C: R_t=0,742 мин, (M+H)⁺=465,0, 467,0 (изотопы брома).

Промежуточные продукты 20a-25

Следующие промежуточные продукты получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного продукта 20.

Таблица 3. Промежуточные продукты 20a-25

№ промеж. продукта Название Структура Выход Пик(и) MS (M+H)⁺ Значение R_f или R_t 20a трет-бутил-6-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат 70% 421,1, 423,1 0,701 мин, LCMS, способ C 21 трет-бутил(2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-ил)карбамат 76% 478,9, 480,9 0,696 мин, LCMS, способ C 22 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-он 55 378,1, 380,1 0,721 мин, LCMS, способ C 23 трет-бутил-2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилат 82% 493,0, 495,0 0,696 мин, LCMS, способ C 24 трет-бутил2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-6-карбоксилат 90% 478,9, 480,9 0,725 мин, LCMS, способ C 24A трет-бутил2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-6-карбоксилат 90% 435,1 437,1 0,713 мин, LCMS, способ C 25 трет-бутил6-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-карбоксилат 78% 479,0, 481,0 0,716 мин, LCMS, способ C

Промежуточный продукт 26

2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан

Стадия 1: трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К суспензии трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 200 мг, 0,40 ммоль), (4-изопропилпиримидин-5-ил)бороновой кислоты (130 мг, 0,80 ммоль) и K₃PO₄ (170 мг, 0,80 ммоль) в диоксане (6 мл) и H₂O (2 мл) добавляли палладацикл Sphos (14,4 мг, 0,02 ммоль) в атмосфере N₂, и перемешивали смесь при 90°C в течение 16 ч. Реакционную смесь промывали водой (80 мл) и экстрагировали EtOAc (3×50 мл), органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом препаративной TLC на силикагеле (петролейный эфир:EtOAc=1:1, R_f=0,25) с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде белого твердого вещества. Выход: 110 мг; HPLC, способ C: R_t=0,759 мин; (M+H)⁺=535,2.

Стадия 2: 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (100 мг, 1,87 ммоль) в CH₂Cl₂ (3 мл) добавляли TFA (1 мл). Смесь перемешивали при 20-25°C в течение 2 ч. Затем, реакционную смесь нейтрализовали добавлением NH₃-H₂O (pH=8), промывали водой (80 мл) и экстрагировали CH₂Cl₂ (3×50 мл). Органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях вакуума с получением неочищенного 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонана в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 90 мг; HPLC, способ C: R_t=0,575 мин; (M+H)⁺=435,2.

Промежуточные продукты 27-32

Следующие промежуточные продукты получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного продукта 26.

Таблица 4. Промежуточные продукты 27-32

№ промеж. продукта Название Структура Выход Пик(и) MS (M+H)⁺ Значение R_f или R_t 27 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан 59% 407,0 0,566 мин, LCMS, способ C 28 (6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан 90% 421,2 1,941 мин, LCMS, способ D ¹H-ЯМР (MeOD): δ 9,12 (с, 1H), 8,63-8,65 (м, 1H), 8,26 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,25-7,30 (м, 2H), 7,02-7,05 (м, 1H) 3,58-3,74 (м, 8H), 3,09-3,14 (м, 1H), 2,05-2,16 (м, 2H), 1,24 (д, J=6,8 Гц, 6H),1⁹F-ЯМР (MeOD): δ -120,40. 29 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-амин 74% 421,0 0,565 мин, LCMS, способ C 30 2-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан 78% 405,1 0,617 мин, LCMS, способ C 31 2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-2-циклопропил-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил 77% 456,2 0,639 мин, LCMS, способ C 31a 2-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан 70% 423,2 0,539 мин, LCMS, способ C 31b 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан 58 435,2 0,551 мин, LCMS, способ C 31c 2-(5-(2-(2-циклопропилпиридин-3-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан 50% 404,2 0,532 мин, LCMS, способ C 32 2'-((4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-2-циклопропил-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил 49% 428,0 0,615 мин in in LCMS, способ C

Промежуточный пример 33.

2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(метоксикарбонил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 9,5 г, 19,31 ммоль) и Pd(dppf)Cl₂ (7,1 г, 9,66 ммоль) добавляли Et₃N (13,4 мл) и MeOH (100 мл). Затем, реакционную смесь перемешивали при 65°C в атмосфере CO (50 фунт/кв.дюйм) приблизительно в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через Celite™ и концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование DCM:MeOH=1:0~10:1) с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(метоксикарбонил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде коричневого масла. Выход: 9,0 г; LCMS, способ E: R_t=0,914 мин; (M+H)⁺=473,2.

Стадия 2. 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойная кислота

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(метоксикарбонил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (3,3 г, 6,99 ммоль) в MeOH (30 мл), THF (30 мл) и H₂O (10 мл) добавляли KOH (0,78 г, 13,98 ммоль). Смесь перемешивали при 13-23°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали и корректировали до pH=3-4 добавлением водного HCl (3М). Смесь экстрагировали EtOAc (3×50 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенной 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойной кислоты в виде коричневого твердого вещества, которое сразу использовали без дополнительной очистки. Выход: 3,2 г; LCMS, способ C: R_t=0,702 мин, (M+H)⁺=459,0. ¹H-ЯМР (DMSO-d₆): δ 8,30 (с, 1H), 7,39-7,69 (м, 3H), 6,95-7,05 (м, 1H), 3,60-3,72 (м, 5H), 3,17 (с, 3H), 1,77-1,88 (м, 4H), 1,38 (с, 9H). ¹⁹F-ЯМР (DMSO-d₆): δ -119,13.

Стадия 3. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-изопропил(метил)-карбамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойной кислоты (2,9 г, 5,45 ммоль) и N-метилпропан-2-амина (0,6 г, 8,18 ммоль) в DCM (100 мл) добавляли HATU (3,1 г, 8,18 ммоль) и DIPEA (2,1 г, 16,3 ммоль). Смесь перемешивали при 13-21°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали, и очищали остаток методом препаративной HPLC с нейтральной подвижной фазой с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-изопропил(метил)карбамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата. Выход: 2,1 г; LCMS, способ E: R_t=0,731 мин (M+H)⁺=514,1. ¹H-ЯМР (DMSO-d₆): δ 8,30-8,33 (м, 1H), 7,77-7,82 (м, 1H), 7,19-7,29 (м, 2H), 6,87-6,97 (м, 1H), 4,67 (с, 1H), 3,56-3,78 (м, 6H), 3,15-3,17 (м, 2H), 2,67-2,83 (м, 3H), 1,79-1,84 (м, 4H), 1,38 (с, 9H), 1,06-1,11 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (DMSO-d₆): δ -111,36.

Стадия 4. 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)-карбамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (1 г, 1,95 ммоль) в безводном DCM (10 мл) при 0°C в атмосфере N₂ медленно добавляли HCl-MeOH (2 мл, 4М в MeOH). Реакционную смесь перемешивали при 17-23°C в течение 16 ч. Смесь корректировали до pH=11~12 добавлением водн. NaOH (1М), а затем экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамида в виде коричневого твердого вещества. Выход: 0,8 г (95%, неочищ.); LCMS, способ C: R_t=0,508 мин, (M+H)⁺=414,0.

Промежуточные продукты 35-39

Следующие промежуточные продукты получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного продукта 33.

Таблица 5. Промежуточные продукты 35-39

№ промеж. продукта Название Структура Выход Пик(и) MS (M+H)⁺ Значение R_f или R_t 35 2-((4-(2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид 77% 400,0 0,420 мин, LCMS, способ C 36 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид 81% 414,3 0,827 мин, LCMS, способ F ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,22-8,27 (м, 1H), 7,70-7,80 (м, 1H), 6,94-7,22 (м, 3H), 4,77-4,79 (м, 1H), 3,90-4,01 (м, 4H), 2,77-3,31 (м, 7H), 1,84-1,86 (м, 4H), 1,15-1,28 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -115,01. 37 2-((4-(2,6-диазапиро[3.4]октан-6-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид 54% 400,2 1,850 мин, LCMS, способ D ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,25-8,35 (м, 1H), 7,75-7,91 (м, 1H), 7,15-7,25 (м, 2H), 6,85-7,00 (м, 1H), 3,60-4,05 (м, 9H), 2,80-3,00 (м, 3H), 2,15-2,25 (м, 2H), 1,00-1,30 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,13~-120,73. 38 2-((4-(6-амино-2-азаспиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид 37% 399,8 1,45 мин, LCMS, способ D 39 ((4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид 35% 386,1 1,42 мин, LCMS, способ D

Промежуточный продукт 40

2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид

К суспензии 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбонитрила (10 г, 57,75 ммоль) in HCO₂H (187 мл) и H₂O (63 мл) порциями добавляли сплав Ni-Al (6,19 г, 144,38 ммоль). Затем, смесь перемешивали при 90°C в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали, фильтрат промывали EtOH и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток промывали водой (150 мл) и фильтровали. Осадок на фильтре сушили в условиях пониженного давления с получением 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида в виде серовато-белого твердого вещества. Выход: 9,1 г (97,2%); LCMS, способ D: R_t=1,404 мин, (M+H)⁺=163,0. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,87 (с, 1H), 7,65 (дд, J=8,4, 1,2 Гц, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,19 (д, J=8,0 Гц, 1H).

Промежуточный продукт 41

2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид

Стадия 1. метил-5-фтор-2-метоксибензоат

К раствору 5-фтор-2-гидроксибензойной кислоты (100 г, 641 ммоль) в ацетоне (1000 мл) добавляли K₂CO₃ (190 г, 1380 ммоль) и MeI (268,3 г, 1890 ммоль). Смесь перемешивали при 50°C в течение 16 ч. Смесь фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток смешивали с EtOAc (500 мл) и промывали H₂O (3×300 мл). Затем, органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат=20:1 с получением метил-5-фтор-2-метоксибензоата. Выход: 78 г (66%). ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7,50 (дд, J=3,6 Гц, 8,8 Гц, 1H), 7,17-7,18 (м, 1H), 6,92 (дд, J=4,0 Гц, 8,8 Hz 1H), 3,89 (с, 3H), 3,88 (с, 3H).

Стадия 2. 5-фтор-2-метоксибензойная кислота

К раствору метил-5-фтор-2-метоксибензоата (25 г, 135,9 ммоль) в MeOH (250 мл) и H₂O (50 мл) добавляли KOH (25 г, 446,4 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 3 ч. Затем, смесь корректировали до pH 3-4 добавлением 2н раствора HCl и концентрировали в условиях пониженного давления для удаления MeOH. Остаток смешивали с EtOAc (200 мл) и промывали H₂O (2×200 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенной 5-фтор-2-метоксибензойной кислоты в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 23 г.

Стадия 3. 5-фтор-N,N-диизопропил-2-метоксибензамид

К раствору 5-фтор-2-метоксибензойной кислоты (20 г, 117,6 ммоль) и диизопропиламина (23,8 г, 235,6 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (300 мл) при 0°C добавляли DIEA (22,8 г, 176,7 ммоль) и HATU (53,6 г, 141,4 ммоль). Смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч. Затем, смесь промывали H₂O (3×200 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат=5:1 с получением 5-фтор-N,N-диизопропил-2-метоксибензамида в виде белого твердого вещества. Выход: 22 г. LCMS, способ C: R_t: 0,785 мин, (M+H)⁺=254,0.

Стадия 4. 5-фтор-2-гидрокси-N,N-диизопропилбензамид

К раствору 5-фтор-N,N-диизопропил-2-метоксибензамида (15 г, 59,3 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (250 мл) при 70°C по каплям добавляли BBr₃ (11 мл, 116,6 ммоль). Смесь перемешивали при 5°C в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили медленным добавлением MeOH (30 мл) при 78°C и корректировали до pH 7-8 добавлением нас. раствора NaHCO₃. Смесь экстрагировали EtOAc (2×300 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат=4:1 с получением 5-фтор-2-гидрокси-N,N-диизопропилбензамида в виде белого твердого вещества. Выход: 11 г. LCMS, способ C: R_t=0,744 мин; (M+H)⁺=240,0.

Стадия 5. 5-фтор-N,N-диизопропил-2-(пиримидин-5-илокси)-бензамид

К раствору 5-фтор-2-гидрокси-N,N-диизопропилбензамида (11,0 г, 46,0 ммоль) и 5-бромпиридимина (21,8 г, 138,0 ммоль) в безводном DMF (300 мл) добавляли Cs₂CO₃ (45,0 г, 138,0 ммоль). Смесь перемешивали при 130°C в течение 16 ч. Смесь добавляли к EtOAc (500 мл) и промывали H₂O (3×300 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат=3:1 с получением 5-фтор-N,N-диизопропил-2-(пиримидин-5-илокси)бензамида в виде белого твердого вещества. Выход: 14 г (97%) LCMS, способ C: R_t=0,731 мин; (M+H)⁺=317,9.

Стадия 6. 5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)-пиридимин-1-оксид

К раствору 5-фтор-N,N-диизопропил-2-(пиримидин-5-илокси)бензамида (14 г, 44,2 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (400 мл) добавляли m-CPBA (27 г, 132,7 ммоль). Смесь перемешивали при 10°C в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. раствора Na₂SO₃ (200 мл) и промывали NaHCO₃ (2×200 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂CO₃, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного 5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)-пиридимин-1-оксида в виде бледно-желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 16 г (109%). LCMS, способ C: R_t=0,705 мин, (M+H)⁺=333,9.

Стадия 7. 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид

К раствору Et₃N (7,3 г, 72,3 ммоль) в CHCl₃ (30 мл) при 0°C добавляли POCl₃ (12,5 г, 81,7 ммоль). Затем, при 0°C смесь медленно к раствору добавляли 5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиридимин-1-оксида (16,0 г, 48,0 ммоль) в CHCl₃ (270 мл). Смесь перемешивали при 65°C в течение 16 ч. Затем, смесь медленно добавляли к нас. раствору NaHCO₃ (500 мл), и корректировали до pH 7-8 добавлением нас. раствора NaHCO₃. Смесь экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат=5:1 с получением 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида (6 г) в виде желтого твердого вещества; HPLC, способ C: R_t=0,735 мин, (M+H)⁺=351,9. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,71 (с, 1H), 8,21 (с, 1H), 7,02-7,12 (м, 3H), 3,73-3,80 (м, 1H), 3,46-3,53 (м, 1H), 1,49 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,34 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,26 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,14 (д, J=6,8 Гц, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CDCl₃): δ -114,5.

Промежуточный продукт 41a

2-((4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид

Указанное в заголовке соединение синтезировали из промежуточного продукта 41 и трет-бутил-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата способом, описанным для получения промежуточного продукта 20. LCMS, способ C: 0,620 мин, (M+H)⁺=413,2.

Промежуточные продукты 41b-41f.

Следующие промежуточные продукты получали в соответствии с методикой, описанной для промежуточных продуктов 41 и 41a.

Таблица 6. Промежуточные продукты 42b-42f

№ промеж. продукта Название Структура Выход Пик(и) MS (M+H)⁺ Значение R_f или R_t 41b 2-((4-(2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид 77% (M+H)⁺=428,0 0,520 мин, LCMS, способ C 41c 2-((4-(2,6-диазапиро[3.4]октан-6-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид 54% (M+H)⁺=428,2 1,45 мин, LCMS, способ D 41d 2-((4-(6-амино-2азаспиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид 37% (M+H)⁺=428,2 1,42 мин, LCMS, способ D 41e 2-((4-(2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамид 70% (M+H)⁺=414,1 0,512 мин, LCMS, способ C 41f 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамид 54% (M+H)⁺=428,2 1,36 мин, LCMS, способ D

Промежуточные продукты 42 и 42c. 1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид и 2-(5-формил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этилформиат

и

Стадия 1. 4-((2-гидроксиэтил)амино)-3-нитробензонитрил

К раствору 4-фтор-3-нитробензонитрила (15 г, 90,4 ммоль) и 2-аминоэтанола (11,0 г, 180,7 ммоль) в безводном DMF (600 мл) в атмосфере N₂ добавляли K₂CO₃ (37,4 г, 271,2 ммоль), а затем перемешивали реакционную смесь при 25°C в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Остаток промывали H₂O (100 мл), и экстрагировали смесь EtOAc (3×500 мл). Органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением 4-((2-гидроксиэтил)-амино)-3-нитробензонитрила. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки в виде желтого твердого вещества. Выход: 17,3 г. LCMS, способ E: R_t=1,016 мин; (M+H)⁺=207,9.

Стадия 2. 3-амино-4-((2-гидроксиэтил)амино)бензонитрил

К раствору 4-((2-гидроксиэтил)амино)-3-нитробензонитрила (17,3 г, 83,6 ммоль) в EtOH (800 мл) и H₂O (400 мл) в атмосфере N₂ добавляли Fe (23,4 г, 418,0 ммоль) и NH₄Cl (44,8 г, 836,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Остаток растворяли в EtOAc (500 мл), промывали H₂O (2×100 мл), солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением 3-амино-4-((2-гидроксиэтил)амино)бензонитрила. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки в виде коричнево-красного твердого вещества. Выход: 11,6 г. LCMS, способ D: R_t=0,941 мин; (M+H)⁺=178,2.

Стадия 3. 3-амино-4-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-этил)амино)бензонитрил

К раствору 3-амино-4-((2-гидроксиэтил)амино)бензонитрила (11,6 г, 65,46 ммоль) и трет-бутилхлордиметилсилана (11,84 г, 78,55 ммоль) в безводном DMF (300 мл) добавляли имидазол (11,14 г, 163,65 ммоль), а затем перемешивали реакционную смесь при 35°C в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Реакционную смесь добавляли в воду (1000 мл) и экстрагировали EtOAc (3×500 мл). Органический слой промывали солевым раствором (100 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 3-амино-4-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-бензонитрила в виде черного масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 25 г. LCMS, способ C: R_t=0,878 мин; (M+H)⁺=292,1.

Стадия 4. 1-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбонитрил

К раствору 3-амино-4-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-этил)амино)бензонитрила (14 г, 48,1 ммоль) в безводном THF (400 мл) при 0°C добавляли раствор BTC (28,5 г, 96,2 ммоль). Затем, к реакционной смеси при 0°C по каплям добавляли Et₃N (33 мл). После добавления, реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч. Реакционную смесь вливали в нас. водн. NaHCO₃ (500 мл) и экстрагировали EtOAc (3×300 мл). Органический слой промывали солевым раствором, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:EtOAc=5:1→1:1) с получением 1-(2-((трет-бутилдиметилсилил)-окси)этил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбонитрила. Выход: 4,8 г (31%). LCMS, способ F: R_t=1,378 мин, (M+H)⁺=318,3 ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 10,06 (ушир. с, 1H), 7,31 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,16 (с, 1H), 7,11 (д, J=8,0 Гц, 1H), 3,94-3,96 (м, 2H), 3,83-3,85 (м, 2H), 0,67 (с, 9H), -0,198 (с, 6H).

Стадия 5. 1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид и 2-(5-формил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этилформиат

и

К раствору 1-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбонитрила (6,1 г, 19,2 ммоль) в HCOOH (120 мл) и H₂O (40 мл) в атмосфере N₂ добавляли Ni-Al (8,27 г, 96,2 ммоль), а затем перемешивали реакционную смесь при 90°C в течение 16 ч. Затем, реакционную смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование DCM:MeOH=10:1) с получением 1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида в виде белого твердого вещества и 2-(5-формил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этилформиата в виде желтого твердого вещества.

Промежуточный продукт 42. 2-(5-формил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этилформиат: Выход: 1,7 г (27%). LCMS, способ F: R_t=0,858 мин; (M+H)⁺=235,2 ¹H-ЯМР (DMSO-d₆): δ 11,27 (ушир. с, 1H), 9,87 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,63 (дд, J=8,0, 1,2 Гц, 1H), 7,42 (с, 1H), 7,37 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,35-4,38 (м, 2H), 4,12-4,14 (м, 2H).

Промежуточный продукт 42c. 1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид: Выход: 1,5 г (27%). LCMS, способ F: R_t=0,788 мин; (M+H)⁺=207,2 ¹H-ЯМР (DMSO-d₆): δ 11,20 (ушир. с, 1H), 9,86 (с, 1H), 7,60 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,40 (с, 1H), 7,31 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,86 (с, 1H), 3,85-3,86 (м, 2H), 3,63-3,65 (м, 2H).

Промежуточный продукт 42a.

1-(2-метоксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид

Указанный в заголовке продукт получали в соответствии с методикой, предусмотренной для промежуточного продукта 41, используя в качестве исходного вещества 2-метоксиэтан-1-амин. LCMS, способ F: R_t=0,828 мин; (M+H)⁺=221,2.

Промежуточный продукт 42b.

1-этил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид

Указанный в заголовке продукт получали в соответствии с методикой, предусмотренной для промежуточного продукта 41, используя в качестве исходного вещества этиламин. LCMS, способ F: R_t=0,868 мин; (M+H)⁺=191,2.

Промежуточный продукт 43.

2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид

Стадия 1. 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиридимин

К раствору 2-бром-4-фторфенола (6 г, 31,41 ммоль) и 5-бромпиридимина (5,7 г, 36,12 ммоль) в безводном DMF (60 мл) в атмосфере N₂ добавляли Cs₂CO₃ (30,7 г, 94,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 130°C в течение 16 ч. Затем, реакционную смесь фильтровали через Celite™ и разбавляли H₂O (60 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (3×100 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиридимина в виде коричневого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии. Выход: 6,5 г. LCMS, способ F: R_t=0,969 мин, (M+H)⁺=269,1.

Стадия 2. 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-(пиримидин-5-илокси)бензамид

К раствору 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиридимина (5,5 г, неочищ., 20,45 ммоль) и N-метилпропан-2-амина (12 г, 163,60 ммоль) в безводном DMF (60 мл) в атмосфере CO добавляли Pd(dppf)Cl₂ (3 г, 4,09 ммоль) и Et₃N (14 мл, 102,25 ммоль, d=0,726 г/мл). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 20 ч при давлении 50 фунт/кв.дюйм. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:EtOAc=10:1→1:1) с получением 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-(пиримидин-5-илокси)бензамида в виде коричневого масла. Выход: 3,5 г. LCMS, способ E: R_t=0,700 мин; (M+H)⁺=290,1.

Стадия 3. 5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)карбамоил)фенокси)-пиридимин-1-оксид

К раствору 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-(пиримидин-5-илокси)бензамида (1,8 г, 6,22 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (80 мл) в атмосфере N₂ добавляли m-CPBA (2,6 г, 15,55 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 11-20°C в течение 30 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. раствора NaHSO₃ (100 мл) и экстрагировали CH₂Cl₂ (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали нас. раствором NaHCO₃ (3×100 мл), солевым раствором (3×100 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 5-(4-фтор-2 (изопропил(метил)-карбамоил)фенокси)пиридимин-1-оксида в виде желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии. Выход: 1,6 г; LCMS, способ F: R_t=0,886 мин; (M+H)⁺=306,1.

Стадия 4. 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид

К раствору Et₃N (1,1 мл, 7,86 ммоль, d=0,726г/мл) и POCl₃ (1,2 г, 7,86 ммоль) в CHCl₃ (5 мл) в атмосфере N₂ медленно добавляли 5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)карбамоил)фенокси)-пиридимин-1-оксид (1,6 г, 5,24 ммоль) в CHCl₃ (15 мл). Реакционную смесь перемешивали при 65°C в течение 16 ч. Затем, реакционную смесь гасили добавлением нас. раствора NaHCO₃ (100 мл) и экстрагировали CH₂Cl₂ (3×80 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (3×80 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:EtOAc=20:1→3:1) с получением 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамида в виде желтого твердого вещества. Выход: 470 мг. LCMS, способ E: R_t=0,982 мин; (M+H)⁺=324,2.

Промежуточный продукт 43a.

5-(2-(бензилокси)-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимин

Указанный в заголовке продукт синтезировали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного продукта 43, используя в качестве исходного вещества 2-(бензилокси)-4-фторфенол. LCMS, способ B: R_t=2,13 мин; (M+H)⁺=313,3 ¹H-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц): δ 8,66 (с, 1H), 8,03 (с, 1H), 7,32-7,27 (м, 3H), 7,19-7,15 (м, 3H), 6,84-6,81 (м, 1H), 6,76-6,71 (м, 1H), 5,02 (с, 2H).

Промежуточный продукт 43b.

трет-Бутил-7-(5-(4-фтор-2-гидроксифенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(2-(бензилокси)-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору 5-(2-(бензилокси)-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимина (0,80 ммоль) и трет-бутил-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (218 мг, 0,96 ммоль) в iPrOH (2 мл) добавляли основание Хунига (285 мкл, 1,60 ммоль). Реакционную смесь нагревали в микроволновом реакторе при 120°C в течение 90 мин. После охлаждения до к.т., смесь разбавляли H2O (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Органический слой промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4 и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 3% MeOH в DCM с получением 170 мг трет-бутил-7-(5-(2-(бензилокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде оранжевого масла. LCMS, способ B: Rt=1,71 мин; (M+H)+=521,7.

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-гидроксифенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-(бензилокси)-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (160 мг, 0,3 ммоль) в MeOH (5 мл) добавляли палладированный уголь (5% на сухое вещество, 33 мг, 30 мкмоль). Смесь перемешивали при к.т. в атмосфере подаваемого из баллона водорода в течение 3 ч и фильтровали через слой Celite™. Затем, фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления. Неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей реакционной стадии без дополнительной очистки. LCMS, способ B: R_t=1,56 мин; (M+H)⁺=431.

Промежуточный продукт 44.

N-(2-(5-формил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этил)ацетамид

Стадия 1. N-(2-((4-циано-2-нитрофенил)амино)этил)ацетамид

К раствору 4-фтор-3-нитробензонитрила (200 мг, 1,2 ммоль) и N-(2-аминоэтил)ацетамида (245 мг, 2,4 ммоль) в безводном DMF (10 мл) в атмосфере N₂ добавляли K₂CO₃ (496 мг, 3,6 ммоль), а затем перемешивали реакционную смесь при 14-20°C в течение 4 ч. Реакционную смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Затем, остаток экстрагировали H₂O (10 мл) и EtOAc (3×20 мл). Органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением N-(2-((4-циано-2-нитрофенил)амино)-этил)ацетамида. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки в виде желтого твердого вещества. Выход: 250 мг. LCMS, способ D: R_t=1,256 мин, (M+H)⁺=249,1.

Стадия 2. N-(2-((2-амино-4-цианофенил)амино)этил)ацетамид

К раствору N-(2-((4-циано-2-нитрофенил)амино)этил)ацетамида (250 мг, 1,0 ммоль) в EtOH (10 мл) и H₂O (5 мл) в атмосфере N₂ добавляли Fe (280 мг, 5,0 ммоль) и NH₄Cl (530 мг, 10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 2 ч. Затем, реакционную смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Остаток экстрагировали H₂O (10 мл) и EtOAc (20 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением N-(2-((2-амино-4-цианофенил)амино)-этил)ацетамида. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки в виде коричневого твердого вещества. Выход: 200 мг. LCMS, способ F: R_t=0,992 мин, (M+H)⁺=219,1.

Стадия 3. N-(2-(5-циано-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этил)ацетамид

К раствору N-(2-((2-амино-4-цианофенил)амино)этил)ацетамида (10 мг, 0,046 ммоль) в безводном THF (4 мл) добавляли Et₃N (0,5 мл), а затем при 0°C к смеси по каплям добавляли раствор BTC (27 мг, 0,092 ммоль) в безводном THF (2 мл). После добавления, реакционную смесь перемешивали при 3-14°C в течение 12 ч. Реакционную смесь экстрагировали H₂O (5 мл) и EtOAc (20 мл×3). Органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование CH₂Cl₂:MeOH=1:0→10:1) с получением N-(2-(5-циано-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этил)ацетамида в виде коричневого масла. Выход: 20 мг. LCMS, способ F: R_t=1,175 мин; (M+H)⁺=245,2.

Стадия 4. N-(2-(5-формил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этил)ацетамид

К раствору N-(2-(5-циано-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этил)ацетамида (20 мг, 0,082 ммоль) в HCOOH (3 мл) и H₂O (1 мл) добавляли Ni-Al (35 мг, 0,41 ммоль), а затем перемешивали реакционную смесь при 90°C в течение 12 ч. Реакционную смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления с получением N-(2-(5-формил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)этил)ацетамида (15 мг, чистота 92%, 75%). Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки в виде коричневого твердого вещества. Выход: 15 мг. LCMS, способ F: значение R_t: 0,773 мин; (M+H)⁺=248,1.

Промежуточный продукт 44a.

1-(2-(диметиламино)этил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид

Указанный в заголовке продукт синтезировали в соответствии с методикой, описанной для промежуточного продукта 44, используя в качестве исходного вещества N1,N1-диметилэтан-1,2-диамин и 4-фтор-3-нитробензонитрил. LCMS, способ F: R_t=0,773 мин; (M+H)⁺=233,1.

Промежуточный продукт 45.

3,3-диметил-2-оксоиндолин-6-карбальдегид

К раствору 6-бром-3,3-диметилиндолин-2-она (502 мг, 2,09 ммоль) в DMF (10 мл) в атмосфере N₂ добавляли Pd(OAc)2 (14 мг, 0,063 ммоль), N-формилсахарин (662 мг, 3,14 ммоль), dppb (39 мг, 0,094 ммоль), Na₂CO₃ (315 мг, 3,16 ммоль) и Et₃SiH (316 мг, 2,72 ммоль). Полученную смесь нагревали до 80°C в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали H₂O, солевым раствором, сушили над безводным Na₂SO₄ и фильтровали. Затем, фильтрат концентрировали досуха. Остаток очищали методом флэш-хроматографии с получением 70 мг 3,3-диметил-2-оксоиндолин-6-карбальдегида. LCMS, способ B: R_t=1,63 мин; (M+H)⁺=190.

Промежуточный продукт 46.

6-формил-3-метил-2-оксоиндолин-3-карбонитрил

Стадия 1. метил-4-(2-циано-1-этокси-1-оксопропан-2-ил)-3-нитробензоат

К 60% суспензии гидрида натрия (2,0 г, 50 ммоль) в безводном DMF (50 мл) при 0°C по каплям добавляли этил-2-цианоацетат (5,33 мл, 50 ммоль), и перемешивали реакционную смесь дополнительно в течение 30 мин при 0°C. К полученной серой суспензии при 0°C добавляли метил-4-фтор-3-нитробензоат (7,97 г, 40 ммоль). Полученную темно-красную смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин и нагревали до к.т. в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, и добавляли MeI (7,8 мл), а затем KOtBu (8,4 г, 75 ммоль). После добавления, смесь перемешивали в течение 2 суток при к.т., а затем гасили добавлением водного раствора NH₄Cl. Затем, полученную смесь дважды экстрагировали EtOAc. Органические слои объединяли, последовательно промывали H₂O и солевым раствором, и сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии с получением метил-4-(2-циано-1-этокси-1-оксопропан-2-ил)-3-нитробензоата. Выход: 6,04 г. LCMS, способ B: R_t=1,63 мин.

Стадия 2. метил-3-циано-3-метил-2-оксоиндолин-6-карбоксилат

К раствору метил-4-(2-циано-1-этокси-1-оксопропан-2-ил)-3-нитробензоата (6,039 г, 19,72 ммоль) в EtOH (60 мл) добавляли насыщенный водный раствор NH₄Cl (15 мл) и порошковое железо (5,803 г, 98,61 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Затем, смесь охлаждали до к.т., фильтровали через тонкий слой Celite™, а затем промывали EtOAc. Фильтрат промывали H₂O, солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии с получением метил-3-циано-3-метил-2-оксоиндолин-6-карбоксилат. Выход: 4,404 г. LCMS, способ B: R_t=1,07 мин; (M+H)⁺=231.

Стадия 3. 6-(гидроксиметил)-3-метил-2-оксоиндолин-3-карбонитрил

К раствору метил-3-циано-3-метил-2-оксоиндолин-6-карбоксилата (2,101 г, 9,12 ммоль) в безводном THF (40 мл) в атмосфере N₂ добавляли раствор LiBH₄ (9,1 мл, 18,2 ммоль), а затем MeOH (0,2 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, а затем гасили добавлением водного раствора NH₄Cl. Затем, смесь дважды экстрагировали EtOAc. Органические слои объединяли, последовательно промывали H₂O и солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии с получением 6-(гидроксиметил)-3-метил-2-оксоиндолин-3-карбонитрила. Выход: 1,42 г. LCMS, способ B: R_t=0,79 мин; (M+H)⁺=203,1.

Стадия 4. 6-формил-3-метил-2-оксоиндолин-3-карбонитрил

К раствору 6-(гидроксиметил)-3-метил-2-оксоиндолин-3-карбонитрила (0,597 г, 2,95 ммоль) в DCM добавляли активный MnO₂ (2,57 г, 29,56 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи, а затем фильтровали через тонкий слой Celite™. Фильтрат концентрировали для удаления растворителя. Остаток очищали методом флэш-хроматографии с получением 6-формил-3-метил-2-оксоиндолин-3-карбонитрила. Выход: 0,347 г. LCMS, способ B: R_t=1,25 мин, (M+H)⁺=201,1.

Промежуточный продукт 47.

N-((1r,4r)-4-формилциклогексил)метансульфонамид

Стадия 1. метил-(1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексан-1-карбоксилат

Смесь гидрохлорида метил-(1r,4r)-4-аминоциклогексан-1-карбоксилата (50 г, 0,259 моль) и Et₃N (130,8 г, 1,295 моль) в безводном CH₂Cl₂ (2000 мл) перемешивали при к.т. в течение 20 мин. При 0°C в атмосфере N₂ по каплям добавляли MsCl (29,8 г, 0,259 моль), и перемешивали смесь при 0°C в течение 2 ч. Реакционную смесь в DCM промывали H₂O (3×800 мл) и солевым раствором (800 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Смесь очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:EtOAc=2:1→1:1 (добавляя 25 мл CH₂Cl₂ в 1 л смеси петролейный эфир/этилацетат для получения элюента) с получением метил-(1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексан-1-карбоксилата (58 г, 89,5%) в виде белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 4,45 (д, J=7,6 Гц, 1H), 3,69 (с, 3H), 3,29-3,23 (м, 1H), 2,98 (с, 3H), 2,24-2,13 (м, 1H), 2,11-2,09 (м, 2H), 2,05-2,02 (м, 2H), 1,55-1,51 (м, 2H), 1,29-1,26 (м, 2H).

Стадия 2. N-((1r,4r)-4-формилциклогексил)метансульфонамид

Метил-(1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексан-1-карбоксилат (20 г, 85,11 ммоль) в безводном толуоле (500 мл) перемешивали при 40°C в течение 30 мин в атмосфере N₂. Полученный раствор охлаждали до -70°C (внутренняя температура). В течение 110 мин в атмосфере N₂ по каплям добавляли раствор DIBAL-H (1M в толуоле, 180 мл, 180 ммоль) (поддерживая внутреннюю температуру ниже 70°C). После добавления, смесь энергично перемешивали при 70°C в течение 4 ч. Затем, в течение 30 мин осторожно по каплям добавляли MeOH (30 мл) (поддерживая внутреннюю температуру ниже -70^°C). После перемешивания в течение 10 мин, при 70°C добавляли нас. раствор виннокислого калия-натрия (600 мл), нагревали смесь до к.т., добавляли EtOAc (300 мл), и перемешивали смесь при к.т. в течение 16 ч. Смесь разделяли, и экстрагировали водный слой EtOAc (3×400 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (3×500 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного N-((1r,4r)-4-формилциклогексил)-метансульфонамида (19 г), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 9,65 (с, 0,035H), 9,62 (с, 1H), 4,40-4,39 (м, 1H), 3,28-3,25 (м, 1H), 2,98 (с, 3H), 2,18-2,03 (м, 5H), 1,38-1,28 (м, 4H).

Стадия 3. (R)-гидрокси((1r,4R)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метансульфонат натрия

К раствору неочищенного N-((1r,4r)-4-формилциклогексил)-метансульфонамида (19 г) в THF (200 мл) при 45°C в течение 10 мин добавляли раствор водн. NaHSO₃ (4 M, 110 мл). После перемешивания при 45°C в течение 30 мин, смесь охлаждали до к.т. и перемешивали дополнительно в течение 1 ч. Полученный белый осадок фильтровали, осадок на фильтре промывали THF (3×50 мл) и сушили в условиях высокого вакуума с получением (R)-гидрокси((1r,4R)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)-метансульфоната натрия (16,5 г, 55% в ходе стадий 2-3) в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H-ЯМР (DMSO-d₆): δ 9,90 (с, 0,17H), 6,91 (д, J=7,2 Гц, 1H), 4,98 (д, J=5,2 Гц, 1H), 3,65 (т, J=4,4 Гц, 1H), 2,97-2,95 (м, 1H), 2,89 (д, J=6,8 Гц, 3H), 2,06-2,03 (м, 1H), 1,86-1,81 (м, 3H), 1,61 (ушир. с, 1H), 1,23-1,06 (м, 4H).

Стадия 4. N-((1r,4r)-4-формилциклогексил)метансульфонамид

К смеси (R)-гидрокси((1r,4R)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метансульфонат натрия (16,5 г, 53,4 ммоль) в CH₂Cl₂ (160 мл) добавляли водн. раствор Na₂CO₃ (1M, 160 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин. Смесь разделяли, и экстрагировали водный слой CH₂Cl₂ (3×80 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (300 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного N-((1r,4r)-4-формилциклогексил)метансульфонамида (7,5 г, 69%) в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 9,66 (с, 0,021H), 9,62 (с, 1H), 4,38 (ушир. с, 1H), 3,30-3,25 (м, 1H), 2,98 (с, 3H), 2,18-2,14 (м, 3H), 2,05-2,01 (м, 2H), 1,42-1,30 (м, 4H).

Промежуточный продукт 48.

метил-2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензоат

Стадия 1: этил-2-(2-бром-4-фторфенокси)ацетат

К раствору 2-бром-4-фторфенола (250 г, 1,31 моль) в MeCN (2 л) добавляли K₂CO₃ (270 г, 1,97 моль) и этил-2-бромацетат (219 г, 1,31 моль). Суспензию нагревали при 90°C в течение 1,5 ч. Смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат с получением неочищенного этил-2-(2-бром-4-фторфенокси)ацетата в виде коричневого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии (312 г); ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7,32 (дд, J=7,6, 3,2 Гц, 1H), 6,95-6,97 (м, 1H), 6,82 (дд, J=8,8, 4,4 Гц, 1H), 4,66 (с, 2H), 4,27 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 1,31 (т, J=7,2 Гц, 3H); ¹F-ЯМР (CDCl₃): δ -120,06 (с, 1F).

Стадия 2: 5-(2-бром-4-фторфенокси)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1H)-он

К раствору этил-2-(2-бром-4-фторфенокси)ацетата (100 г) в безводном THF (2 л) при 0°C добавляли этилформиат (108 г) и NaH (20 г). Смесь перемешивали при 35-45°C в течение 18 ч. Растворитель удаляли в условиях вакуума, добавляли безводный EtOH (2 л) и тиомочевину (25 г, 324,8 ммоль), и перемешивали смесь при 90°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали, разбавляли водой (2 л) и экстрагировали смесью петролейный эфир:этилацетат (10:1; 500 мл×3). Водный слой подкисляли до pH=4 добавлением водн. HCl (1н, 200 мл), и выпадал белы осадок. Смесь фильтровали, и сушили осадок на фильтре с получением неочищенного 5-(2-бром-4-фторфенокси)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1H)-она (62 г) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии без очистки; LCMS, способ C: R_t=0,638 мин; (M+H)⁺=316,9, 318,9 (изотопы хлора).

Стадия 3: 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ол

К раствору 5-(2-бром-4-фторфенокси)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1H)-она (62 г) в безводном EtOH (1,5 л) добавляли никель Ренэя (62 г), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 6 ч. Растворитель удаляли в условиях вакуума, и добавляли безводный EtOH (2 л). Смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат с получением неочищенного 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ола в виде серого твердого вещества (55 г); LCMS, способ C: Rt=0,62 мин, (M+H)+=284,9, 287,0 (изотопы брома).

Стадия 4: метил-5-фтор-2-((4-гидроксипиримидин-5-ил)окси)бензоат

К раствору 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ола (60 г, 0,17 моль) в DMF (100 мл) и MeOH (150 мл) добавляли TEA (25,5 г, 0,252 моль) и Pd(dppf)Cl₂ (12,4 г, 0,017 моль). Полученную реакционную смесь перемешивали при давлении CO 50 фунт/кв.дюйм при 80°C в течение 24 ч. Затем, смесь концентрировали, разбавляли H₂O (300 мл) и экстрагировали DCM/MeOH (10/1) (200 мл×3). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который промывали этилацетатом (100 мл). Осадок на фильтре сушили с получением неочищенного метил-5-фтор-2-((4-гидроксипиримидин-5-ил)окси)бензоата в виде коричневого твердого вещества (20 г, 45%); LCMS, способ C: R_t=0,56 мин; (M+H)⁺=264,9.

Стадия 5: метил-2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензоат

К раствору неочищенного метил-5-фтор-2-((4-гидроксипиримидин-5-ил)окси)бензоата (11 г, 42 ммоль) в SOCl₂ (5 мл) добавляли DMF (0,5 мл). Полученную смесь нагревали при 70°C в течение 2 ч. Смесь концентрировали с получением остатка, который растворяли в DCM (100 мл) и H₂O (100 мл). Смесь нейтрализовали добавлением насыщенного NaHCO₃ (50 мл). Отделенный органический слой сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, и очищали остаток методом колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=5:1→1:1) с получением метил-2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензоата в виде коричневого твердого вещества (8,3 г, 57%); LCMS, способ C: R_t=0,74 мин; (M+H)⁺=283,5.

Промежуточный продукт 49

5-фтор-2-(пиримидин-5-илокси)бензойная кислота

Стадия 1: 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиридимин

В оснащенный рубашкой реактор емкостью 100 л загружали 2-бром-4-фторфенол (11,00 кг, 57,59 моль), 5-бромпиридимин (9,43 кг, 59,32 моль), карбонат цезия (24,39 кг, 74,87 моль) и DMA (66,00 л), и смесь нагревали до 115-125°C в течение 2,5 ч. Затем, партию перемешивали при 120°C в течение 4 суток. Затем, внутреннюю температуру партии корректировали до 20-30°C. После охлаждения партии, ее распределяли между деионизированной водой (132,00 л) и MTBE (44,00 л) в реакторе емкостью 250 л производства Schott. Содержимое реактора перемешивали при к.т. в течение 30 мин. После этого, перемешивание останавливали, и давали произойти разделению слоев. Верхний органический слой удаляли и помещали в отдельный контейнер. Проводили всего четыре процедуры экстрагирования MTBE. MTBE-экстракты объединяли и промывали 2н гидроксидом натрия (22,00 л), затем 0,5M раствором лимонной кислоты (11,00 л) и, в завершение, 5 масс.% раствором бикарбоната натрия (11,00 л). MTBE-раствор концентрировали с использованием роторного испарителя (вакуум 25 дюйм. рт. ст., водяная баня, 40°C). Остаток пропускали через пленочный испаритель (WFE) для удаления летучих вещества (MTBE) и части оставшегося 5-бромпиридимина. Условия WFE-дистилляции были следующими: первый прогон - вакуум 10-15 дюйм. рт. ст., скорость пленки 600 об/мин, температура рубашки 150-160°C, скорость добавления 4 мл/мин; второй прогон - вакуум 0,7 торр, скорость пленки 600 об/мин, температура рубашки 160-170°C, скорость добавления 4 мл/мин. Продукт, 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиридимин, выделяли с выходом 45% (7,15 кг), чистота согласно HPLC 95,3% (AUC).

Стадия 2: метил-5-фтор-2-(пиримидин-5-илокси)бензоат

В оснащенный рубашкой реактор из нержавеющей стали емкостью 80 л загружали палладиевый катализатор (комплкс Pd(dppf)Cl₂·DCM) (1,00 кг, 1,22 моль), 5-(2-бром-4-фторфенокси)пиридимин (8,54 кг, 31,59 моль), TEA (6,38 кг, 63,18 моль) и метанол (42,50 л). Реактор продували азотом (3 раза до давления азота 50 фунт/кв.дюйм), а затем с монооксидом углерода (3 раза до давления монооксида углерода 50 фунт/кв.дюйм). Внутреннюю тмепературу реактора корректировали до 65-75°C в течение 75 мин. По достижению температуры, внутреннее давление в сосуде корректировали до давления монооксида углерода 50 фунт/кв.дюйм. Содержимое реактора перемешивали при указанной температуре и давлении, по меньшей мере, в течение 34 ч. После этого, реакционную смесь охлаждали до 15-25°C и трижды продували азотом при давлении 50 фунт/кв.дюйм с получением метанольного раствора, содержащего метил-5-фтор-2-(пиримидин-5-илокси)бензоат. Партию фильтровали через слой Celite™ для удаления палладиевого катализатора.

Стадия 3: 5-фтор-2-(пиримидин-5-илокси)бензойная кислота

Метанольный раствор, содержащий метил-5-фтор-2-(пиримидин-5-илокси)бензоат, полученный на стадии 2 помещали в оснащенный рубашкой стеклянный реактор емкостью 100 л и разбавляли водой (17,00 л). После этого, добавляли 50 масс.% водный раствор гидроксида натрия (10,11 кг, 126,36 моль), поддерживая в партии внутреннюю температуру 35-45°C. После завершения добавления, температуру корректировали до 35-45°C, и перемешивали партию, по меньшей мере, в течение 14 ч. Реакционный объем уменьшали с 87 до 33 л путем вакуумной дистилляции (достигали вакуум 27 фунт/кв.дюйм; в конце, температура партии составляла 32,4°C). Затем, партию разбавляли водой (42,5 л), охлаждали до 20-30°C и фильтровали через слой Celite™ для удаления катализатора. Водный слой дважды экстрагировали MTBE (17 л). Партию корректировали до pH=2 с использованием 6M соляной кислоты (приблизительно 17 л), поддерживая в партии внутреннюю температуру 10-20°C. После завершения добавления кислоты, партию охлаждали до 0-10°C и фильтровали через полипропиленовую сетку с использованием фильтра/сушителя. Осадок на фильтре промывали водой (17,00 л) и суши под струей азота при 40-45°C в течение нескольких суток, пока содержание влаги согласно KF-анализу не составило 0,3 масс.%. Продукт выделяли с выходом 102% (7,57 кг) с чистотой 97,5% (AUC) согласно HPLC и чистотой 94 масс.% согласно ЯМР-анализу.

Промежуточный продукт 50.

((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил-4-метилбензолсульфонат

Стадия 1: метил-(1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексан-1-карбоксилат

Раствор гидрохлорида метил-(1r,4r)-4-аминоциклогексан-1-карбоксилата (120 г, 0,62 моль) и Et₃N (346 мл, 2,48 моль) в безводном DCM (2,5 л) перемешивали при к.т. в течение 30 мин. К реакционной смеси при 0-5°C в течение 30 мин по каплям добавляли этансульфонилхлорид (80,6 г, 0,63 моль). После добавления, смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. Смесь гасили добавлением воды (250 мл) при 0°C. После распределения, органический слой промывали H₂O (600 мл, 5 объемов) и 1н HCl (2×600 мл, 2×5 объемов), H₂O (600 мл, 5 объемов) и солевым раствором (600 мл, 5 объемов), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного метил-(1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексан-1-карбоксилата (117,6 г, 76%) в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H-ЯМР (CDCl₃ 400 МГц): δ 4,36 (д, J=8,0 Гц, 1H), 3,67 (с, 3H), 3,29-3,22 (м, 1H), 3,04 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 2,25-2,21 (м, 1H), 2,15-2,09 (м, 2H), 2,08-2,01 (м, 2H), 1,58-1,51 (м, 2H), 1,39-1,25 (м, 5H).

Стадия 2. N-((1r,4r)-4-(гидроксиметил)циклогексил)-этансульфонамид

К раствору неочищенного метил-(1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексан-1-карбоксилата (100 г, 402 ммоль) в безводном THF (1 л) при 0-5°C в атмосфере N₂ в течение приблизительно 1 ч по каплям добавляли LiAlH₄ (403 мл, 403 ммоль, 1M в THF). Затем, смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч в атмосфере N₂. Затем, к реакционной смеси дополнительно добавляли LiAlH₄ (40 мл, 40 ммоль, 1M в THF). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч в атмосфере N₂. Смесь при 0°C гасили медленным добавлением 20% раствора NaCl (20 мл) и разбавляли THF (500 мл, 5 объемов). Смесь нагревали до 15°C и перемешивали в течение 15 мин. Смесь фильтровали и промывали THF (2×200 мл). Осадок на фильтре суспендировали в THF (1 л, 10 объемов) в течение 30 мин. Суспензию фильтровали и промывали THF (2×200 мл). Суспендирование и фильтрование осадка на фильтре повторяли дважды в THF (1 л, 10 объемов), а затем промывали THF (2×200 мл). Объединенный фильтрат сушили над безводным Na₂SO₄, концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного N-((1r,4r)-4-(гидроксиметил)циклогексил)-этансульфонамида (72 г, 81%) в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки; ¹H-ЯМР (CDCl₃ 400 МГц): δ 4,23 (д, J=8,0 Гц, 1H), 3,46 (т, J=6,4 Гц, 2H), 3,25-3,18 (м, 1H), 3,04 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 2,11-2,07 (м, 2H), 1,88-1,84 (м, 2H), 1,46-1,35 (м, 4H), 1,29-1,24 (м, 2H), 1,09-1,00 (м, 2H).

Стадия 3: ((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил-4-метилбензолсульфонат

К раствору неочищенного N-((1r,4r)-4-(гидроксиметил)-циклогексил)этансульфонамида (30 г, 136 ммоль) в безводном DCM (300 мл) добавляли TsCl (25,84 г, 136 ммоль), DMAP (1,66 г, 13,6 ммоль) и Et₃N (41,2 г, 408 ммоль). Смесь перемешивали при 10°C в течение 6 ч в атмосфере N₂. Затем, смесь гасили добавлением H₂O (200 мл). После распределения, органический слой промывали H₂O (2×150 мл) и солевым раствором (150 мл), сушили над безводным Na₂SO₄ и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат=1/0~2/1 с получением ((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил-4-метилбензолсульфоната (37 г, 73%) в виде белого твердого вещества; ¹H-ЯМР (CDCl₃ 400 МГц): δ 7,78 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,35 (д, J=8,8 Гц, 2H), 4,23 (д, J=7,6 Гц, 1H), 3,81 (д, J=6,4 Гц, 2H), 3,19-3,14 (м, 1H), 3,01 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 2,46 (с, 3H), 2,09-2,03 (м, 2H), 1,79-1,74 (м, 2H), 1,66-1,56 (м, 1H), 1,35 (т, J=7,6 Гц, 3H), 1,28-1,18 (м, 2H), 1,09-1,01 (м, 2H).

Пример 1

5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид (рацемическая смесь)

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(метоксикарбонил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилату (промежуточный продукт 11, 900 мг, 1,82 ммоль) и Pd(dppf)Cl₂ (134 мг, 0,18 ммоль) добавляли Et₃N (3 мл) и MeOH (20 мл). Затем, реакционную смесь перемешивали при 65°C в атмосфере CO (50 фунт/кв.дюйм) приблизительно в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой Celite™, и концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесью дихлорметан:метанол=1:0~0:1) с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(метоксикарбонил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде светло-желтого масла. Выход: 850 мг. LCMS, способ C: R_t=0,739 мин; (M+H)⁺=473,2.

Стадия 2. 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойная кислота

К смеси трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(метоксикарбонил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (850 мг, 1,79 ммоль) и NaOH (143 мг, 3,58 ммоль) в атмосфере N₂ добавляли MeOH (10 мл) и H₂O (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 21-27°C в течение 12 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления с получением остатка. Затем, добавляли 1н HCl для корректировки раствора до pH 5~6, и добавляли EtOAc (10 мл). Органический слой концентрировали в условиях пониженного давления с получением 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойной кислоты. Выход: 700 мг (85%). LCMS, способ C: R_t=0,705 мин (M+H)⁺=459,2.

Стадия 3. трет-бутил-7-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойной кислоты (800 мг, 1,746 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (15 мл) в атмосфере N₂ добавляли HATU (553 мг, 1,455 ммоль) и DIEA (677 мг, 5,238 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 9-20°C в течение 30 мин. Затем, к раствору добавляли диизопропиламин (265 мг, 2,619 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 9-20°C в течение 12 ч. Затем, растворитель удаляли в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование CH₂Cl₂:MeOH=1:0~10:1) с получением трет-бутил-7-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде коричневого масла. Выход: 900 мг. LCMS, способ F: R_t=1,238 мин; (M+H)⁺=542,4.

Стадия 4. 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (900 мг, 1,67 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (25 мл) в атмосфере N₂ добавляли TFA (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 10-22°C в течение 2 ч. Затем, растворитель удаляли в условиях пониженного давления. Полученный остаток корректировали до pH 9~10 добавлением 10% NaOH. Затем, смесь экстрагировали CH₂Cl₂ (20 мл×3). Органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки в виде коричневого масла. Выход: 730 мг. LCMS, способ F: R_t=0,888 мин; (M+H)⁺=442,4.

Стадия 5. 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид

К смеси 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида (730 мг, 1,654 ммоль), 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 536 мг, 3,308 ммоль) и 4Å молекулярных сит (100 мг) добавляли безводный MeOH (20 мл), а затем перемешивали реакционную смесь при 60°C в течение 30 мин в атмосфере N₂. Затем, к раствору добавляли NaBH₃CN (513 мг, 8,270 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 60°C в течение 4 ч. Затем, реакционную смесь фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток разбавляли MeOH (15 мл), и очищали смесь методом препаративной RP-HPLC, способ C (HCl), с получением 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в виде белого твердого вещества. Выход: 540 мг (55%). LCMS, способ C: R_t=0,931; (M+H)⁺=588,5. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,30-8,38 (м, 1H), 7,62-7,84 (м, 1H), 6,86-7,15 (м, 6H), 4,22-4,30 (м, 3H), 3,20-4,03 (м, 9H), 1,87-2,04 (м, 5H), 0,81-1,30 (м, 11H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -117,14.

Примеры 1A и 1B.

5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид (изомеры 1 и 2)

Рацемическое соединение из Примера 1 разделяли методом SFC, способ A, с получением двух изомеров.

Изомер 1 (Пример 1A): LCMS, способ C: R_t=0,931; (M+H)⁺=588,5. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,54-8,61 (м, 1H), 7,86-8,09 (м, 1H), 7,20-7,31 (м, 5H), 7,15 (д, J=36,4 Гц, 1H), 4,41-4,51 (м, 3H), 3,40-4,02 (м, 9H), 2,15-2,25 (м, 4H), 1,06-1,48 (м, 12H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -117,11. Аналит. SFC, способ A: t_R=0,569 мин, э.и.=100%.

Изомер 2 (Пример 1B): LCMS, способ C: R_t=0,930; (M+H)⁺=588,5. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,58-8,65 (м, 1H), 7,90-8,14 (м, 1H), 7,25-7,35 (м, 5H), 7,18 (д, J=44,8 Гц, 1H), 4,45-4,54 (м, 3H), 3,43-4,06 (м, 9H), 2,18-2,30 (м, 4H), 1,10-1,52 (м, 12H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD 400 МГц): δ -117,10. Аналит. SFC, способ A: t_R=0,809 мин, э.и.=98,87%.

Пример 2

N-этил-5-фтор-N-изопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид (рацемическая смесь)

Указанный в заголовке продукт синтезировали способом, описанным в Примере 1. На стадии 3 использовали N-изопропил-N-этиламин. LCMS, способ B: R_t=1,164; (M+H)⁺=574,1.

Примеры 2A и 2B

N-этил-5-фтор-N-изопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид (изомеры 1-2)

Рацемическое соединение из Примера 2 разделяли методом SFC, способ A, с получением двух изомеров.

Изомер 1 (Пример 2A): Выход: 92,5 мг. LCMS, способ E: R_t=1,132 мин; (M+H)⁺=574,3 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,20-8,29 (м, 1H), 7,72-7,80 (м, 1H), 6,85-7,16 (м, 6H), 4,35-4,41 (м, 1H), 3,45-3,89 (м, 8H), 3,12-3,23 (м, 1H), 2,50-2,71 (м, 4H), 1,76-1,96 (м, 4H), 1,05-1,27 (м, 8H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,380. Аналит. SFC, способ A: t_R=0,722 мин, э.и.=100%.

Изомер 2 (Пример 2B): Выход: 115,8 мг. LCMS, способ E: R_t=1,121 мин; (M+H)⁺=574,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,21-8,29 (м, 1H), 7,71-7,80 (м, 1H), 6,85-7,16 (м, 6H), 4,35-4,42 (м, 1H), 3,45-3,90 (м, 8H), 3,15-3,23 (м, 1H), 2,48-2,71 (м, 4H), 1,76-1,96 (м, 4H), 1,05-1,27 (м, 8H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,390. Аналит. SFC, способ A: t_R=1,455 мин, э.и.=99,65%.

Примеры 3A и 3B

5-фтор-2-((4-(7-((1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид (изомеры 1-2)

К раствору 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида (70 мг, 0,16 ммоль) и 1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 42c, 33 мг, 0,16 ммоль) в безводном MeOH (3 мл) в атмосфере N₂ добавляли NaBH₃CN (50 мг, 0,80 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:MeOH=10:1), и дополнителдьно очищали методом SFC, способ B, и методом RP-HPLC, способ E, с получением соединения в виде двух изомеров.

Изомер 1 (Пример 3A): Белое твердое вещество. LCMS, способ E: R_t=0,736 мин (M+H)⁺=632,4. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,28 (с, 1H), 7,80 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,89-7,15 (м, 5H), 6,89-6,90 (м, 1H), 3,99 (т, J=5,6 Гц, 2H), 3,55-3,85 (м, 10H), 2,52-2,72 (м, 4H), 1,84-1,96 (м, 4H), 1,54 (дд, J=2,4, 6,8 Гц, 3H), 1,43 (т, J=4,8 Гц, 3H), 1,19 (д, J=3,2 Гц, 3H), 1,32 (т, J=4,8 Гц, 3H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,25-120,33. Аналит. SFC, способ B: t_R=7,26 мин, э.и.=100%.

Изомер 2 (Пример 3B): Белое твердое вещество. LCMS, способ E: R_t=0,738 мин. (M+H)⁺=632,4. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,28 (с, 1H), 7,80 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,89-7,15 (м, 5H), 6,89-6,90 (м, 1H), 3,99 (т, J=5,6 Гц, 2H), 3,55-3,85 (м, 10H), 2,52-2,72 (м, 4H), 1,84-1,96 (м, 4H), 1,54 (дд, J=2,4, 6,8 Гц, 3H), 1,43 (т, J=4,8 Гц, 3H), 1,19 (д, J=3,2 Гц, 3H), 1,32 (т, J=4,8 Гц, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,27-120,35. Аналит. SFC, способ B: t_R=7,92 мин, э.и.=97,04%.

Пример 4

N-этил-5-фтор-2-((4-(7-((1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-изопропилбензамид

К раствору 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамида (получен в качестве промежуточного продукта в процессе синтеза в Примере 2, 100 мг, 0,23 ммоль) в безводном MeOH (10 мл) добавляли 1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид (промежуточный продукт 42c, 72 мг, 0,35 ммоль), и перемешивали в течение 5 мин в атмосфере N₂. Затем, добавляли NaBH₃CN (71 мг, 1,15 ммоль), и перемешивали смесь при 65°C в течение 2 ч. Реакционную смесь с дополнительными 20 мг 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамида концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесью дихлорметан:метанол=20:1→10:1) с получением N-этил-5-фтор-2-((4-(7-((1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-изопропилбензамида в виде желтого масла. Выход: 70 мг. LCMS, способ C: R_t=0,583 мин; (M+H)⁺=618,1.

Примеры 4A и 4B.

N-этил-5-фтор-2-((4-(7-((1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-изопропилбензамид (изомеры 1-2)

Разделяли 70 мг N-этил-5-фтор-2-((4-(7-((1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-изопропилбензамида (Пример 4) методом SFC, способ A, с получением изомеров 1 и 2 в виде белых твердых веществ.

Изомер 1 (Пример 4A): Выход: 8,70 мг. R_t=1,14 мин; (M+H)⁺=618,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,27-8,29 (м, 1H), 7,78-7,82 (м, 1H), 6,89-7,18 (м, 6H), 3,33-4,01 (м, 13H), 2,48-2,75 (м, 4H), 1,75-1,96 (м, 4H), 1,05-1,26 (м, 9H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,390. Аналит. SFC, способ C: t_R=1,870 мин, э.и.=98,60%.

Изомер 2 (Пример 4B): Выход: 9,2 мг. LCMS, способ E: R_t=1,140 мин; (M+H)⁺=618,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,25-8,31 (м, 1H), 7,76-7,25 (м, 1H), 6,85-7,20 (м, 6H), 3,48-4,00 (м, 13H), 2,48-2,75 (м, 4H), 1,75-1,96 (м, 4H), 1,05-1,33 (м, 9H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,398. Аналит. SFC, способ C: t_R=2,922 мин, э.и.=99,43%.

Пример 5.

5-фтор-N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(2-((2-((трет-бутилдиметилсилил)-окси)этил)(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойной кислоты (промежуточный продукт 33, Стадия 2, 50 мг, 0,1092 ммоль) в безводном DMF (3 мл) добавляли N-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)пропан-2-амин (36 мг, 0,1637 ммоль), HATU (83 мг, 0,2183 ммоль) и DIEA (28 мг, 0,2183 ммоль), и перемешивали смесь при 16°C в течение 6 ч в атмосфере N₂. Затем, смесь разбавляли EtOAc (20 мл) и промывали солевым раствором (3×20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом препаративной TLC с EtOAc с получением трет-бутил-7-(5-(2-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде желтого масла. Выход: 50 мг. LCMS, способ C: R_t=0,851 мин, (M+H)⁺=658,1.

Стадия 2. 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилбензамид

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (50 мг, 0,0761 ммоль) в CH₂Cl₂ (4 мл) добавляли TFA (1 мл), и перемешивали смесь при 16°C в течение 3 ч. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток корректировали до pH=8-9 добавлением нас. раствора NaHCO₃ и разбавляли водой (15 мл). Водный слой экстрагировали CH₂Cl:ⁱPrOH (3:1, 3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилбензамида в виде желтого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 34 мг.

Стадия 3. 5-фтор-N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид

К раствору 2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилбензамида (34 мг, 0,0761 ммоль) в безводном MeOH (3 мл) добавляли 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид (промежуточный продукт 40, 25 мг, 0,1522 ммоль) и NaBH₃CN (24 мг, 0,3805 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 16 ч в атмосфере N₂. Методом LCMS обнаруживали, что реакция завершена. Смесь концентрировали в условиях пониженного давления и очищали методом RP-HPLC, способ D, с получением 5-фтор-N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход: 10,00 мг. LCMS, способ C: R_t=0,560 мин, (M+H)⁺=590,2 ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 10,35-10,15 (м, 0,5H), 9,75-9,60 (м, 0,5H), 9,01-8,77 (м, 1H), 8,36 (с, 1H), 7,81-7,70 (м, 1H), 7,35-7,25 (м, 0,5H), 7,18-7,08 (м, 0,5H), 7,05-6,90 (м, 2H), 6,89-6,75 (м, 2H), 6,65-6,50 (м, 1H), 4,05-3,25 (м, 12H), 2,97-2,25 (м, 4H), 2,12-1,85 (м, 4H), 1,30-1,07 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CDCl₃): δ -119,3.

Пример 6A

5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид

Стадия 1. трет-бутил-2-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилат

Смесь 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида (промежуточный продукт 41, 1,8 г, 5,13 ммоль), трет-бутил-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (1,35 г, 5,13 ммоль) и DIEA (1,32 г, 10,26 ммоль) в iPrOH (20 мл) перемешивали при 70°C в течение 16 ч. После концентрирования, смесь сразу очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат=3:7 с получением трет-бутил-2-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата в виде желтого масла. Выход: 2,9 г. LCMS, способ E: R_t=0,767 мин; (M+H)⁺=542,2

Стадия 2: 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид

К раствору трет-бутил-2-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (2,9 г, 5,35 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (30 мл) добавляли TFA (10 мл), и перемешивали смесь при 25°C в течение 2 ч. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления, и добавляли к остатку 30% водный раствор NaOH до pH=11-12. Водный слой затем экстрагировали CH₂Cl₂/ⁱPrOH (4/1, 3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 2,3 г. LCMS, способ C: R_t=0,584 мин, (M+H)⁺=442,1.

Стадия 3: трет-бутил-((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)карбамат (Пример 99A)

Раствор 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида (2,3 г, 5,20 ммоль) в безводном MeOH (50 мл) корректировали до pH 6-7 добавлением AcOH. Затем, добавляли трет-бутил-((1r,4r)-4-формилциклогексил)-карбамат (1,3 г, 5,72 ммоль). После перемешивания при 25°C в течение 5 мин, добавляли NaBH₃CN (656 мг, 10,41 ммоль), и перемешивали смесь при 70°C в течение 1 ч. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток растворяли EtOAc (50 мл) и промывали H₂O (2×30 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат=3:7 с получением трет-бутил-((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4 фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)-карбамата в виде белого твердого вещества. Выход: 3,0 г. LCMS, способ C: R_t=0,929 мин; (M+H)⁺=653,3.

Стадия 4: 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-аминоциклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид

К раствору трет-бутил-((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)карбамата (3 г, 4,60 ммоль) в безводном этил-CH₂Cl₂ (30 мл) добавляли TFA (10 мл), и перемешивали смесь при 25°C в течение 2 ч. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-аминоциклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида в виде бледно-желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 4,0 г. LCMS, способ C: R_t=0,513 мин; (M+H)⁺=553,2.

Стадия 5: (5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид)

К раствору 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-аминоциклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида (3,6 г, неочищ., приблизительно 4,14 ммоль) и Et₃N (2,47 г, 24,0 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (50 мл) при 0°C в атмосфере N₂ по каплям добавляли MsCl (844 мг, 7,34 ммоль), и перемешивали смесь при 0°C в течение 2 ч. Затем, смесь промывали H₂O (3×50 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя CH₂Cl₂:CH₃OH=19:1 с получением 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в виде белого твердого вещества, которое очищали методом RP-HPLC, способ D, с получением 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в виде белого твердого вещества. Выход: 1,59 г. LCMS, способ C: R_t=0,565 мин; (M+H)⁺=631,1. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,27 (с, 1H), 8,78 (с, 1H), 7,17-7,15 (м, 2H), 7,03-6,99 (м, 1H), 4,06-4,03 (м, 2H), 3,96-3,89 (м, 2H), 3,87-3,84 (м, 1H), 3,66-3,63 (м, 1H), 3,34-3,32 (м, 1H), 3,20-3,15 (м, 1H), 2,95 (с, 3H), 2,55-2,51 (м, 3H), 2,33-2,30 (м, 2H), 2,06-2,04 (м, 2H), 1,89-1,87 (м, 6H), 1,56 (д, J=6,8 Гц, 4H), 1,48 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,33-1,30 (м, 2H), 1,20 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,13 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,08-1,07 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CDCl₃): δ -119,7.

Примеры 6A-6B

Альтернативный синтез 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида (Пример 6A) и 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1s,4s)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида (Пример 6B)

К раствору 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида (Пример 6A, Стадия 2, 11 г, 24,9 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (170 мл) добавляли промежуточный продукт 47 (7,5 г, 36,6 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 15 мин, и порциями в течение 5 мин добавляли NaBH(OAc)₃ (7,2 г, 33,9 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. дополнительно в течение 2 ч. Смесь промывали H₂O (3×100 мл) и солевым раствором (100 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя CH₂Cl₂/CH₃OH=24/1→10/1 с получением указанного в заголовке соединения в виде свободного основания с соотношением транс:цис=97:3. LCMS, способ D: t_R=0,555 мин, MS (m/z 631,3 [M+H]⁺ Транс- и цис-изомеры разделяли методом SFC, способ A.

Транс-изомер (Пример 6A): LCMS, способ E t_R=3,881 мин, m/z 631,3 [M+H]⁺. Изомер SFC t_R=4,430 мин при хроматографии длительностью 10 мин (колонка: OD-3; название способа: OD-3_EtOH/diethylamine_5_40_25 ml, транс=100%). ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,22 (с, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,23-7,10 (м, 2H), 7,01-6,95 (м, 1H), 4,08-3,80 (м, 5H), 3,68-3,56 (м, 1H), 3,20-3,07 (м, 1H), 2,92 (с, 3H), 2,48-2,25 (м, 4H), 2,13 (д, J=6,4 Гц, 2H), 2,06-1,96 (м, 2H), 1,91-1,76 (м, 6H), 1,53 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,51-1,45 (м, 1H), 1,45 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,35-1,24 (м, 2H), 1,17 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,09 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,06-0,98 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CDCl₃): δ -119,711.

Цис-изомер (Пример 6B): LCMS, способ D: t_R=0,582 мин m/z 631,1 [M+H]⁺. Изомер SFC t_R=4,461 мин при хроматографии длительностью 10 мин (колонка: OD-3; название способа: OD-3_EtOH/diethylamine_5_40_25 ml, транс/цис=2,1%/97,9%). ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,36 (с, 1H), 7,75 (с, 1H), 7,05-6,96 (м, 2H), 6,80-6,71 (м, 1H), 4,40-4,30 (м, 1H), 4,05-3,75 (м, 5H), 3,70-3,60 (м, 1H), 3,55-3,45 (м, 1H), 2,96 (с, 3H), 2,45-2,09 (м, 6H), 1,85-1,65 (м, 10H), 1,60-1,45 (м, 7H), 1,44-1,19 (м, 2H), 1,13 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,09 (д, J=6,8 Гц, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CDCl₃): δ -118,583.

Пример 7

5-((7-(5-(2-(амино(циклопентил)метил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Стадия 1: трет-Бутил-7-(5-(2-(1-((трет-бутилсульфинил)амино)этил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 407 мг, 0,83 ммоль) и (E)-N-(циклопентилметилен)-2-метилпропан-2-сульфинамида (249 мг, 1,24 ммоль) в безводном THF (6 мл) в атмосфере N₂ при 78°C по каплям добавляли 1,6M раствор BuLi в гексане (0,78 мл, 1,24 ммоль). После добавления, смесь перемешивали дополнительно в течение 30 мин, после чего гасили добавлением водн. раствора NH₄Cl. Реакционную смесь дважды экстрагировали EtOAc, объединенную органическую фазу промывали H₂O, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и упаривали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом флэш-хроматографии с использованием DCM/MeOH в качестве элюента с получением 461 мг целевого трет-бутил-7-(5-(2-(1-((трет-бутилсульфинил)амино)этил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата. LCMS, способ B: R_t=1,32 мин, (M+H)⁺=616,3.

Стадия 2: N-((2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)(циклопентил)метил)-2-метилпропан-2-сульфинамид

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-(1-((трет-бутилсульфинил)амино)этил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (61 мг, 0,099 ммоль) в DCM (6 мл) добавляли TFA (0,3 мл). Смесь перемешивали в течение 16 ч при к.т. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, последовательно промывали водным раствором NaHCO₃ и солевым раствором, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и упаривали в условиях пониженного давления с получением 37 мг неочищенного продукта, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3: N-(циклопентил(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)метил)-2-метилпропан-2-сульфинамид

К раствору N-((2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)(циклопентил)метил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (37 мг, 0,072 ммоль) в MeOH (2 мл) добавляли 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид (промежуточный продукт 40, 14 мг, 0,086 ммоль) и NaBH₃CN (9 мг, 0,14 ммоль). Суспензию перемешивали при к.т. в течение 24 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4: 5-((7-(5-(2-(амино(циклопентил)метил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Полученные выше неочищенный продукт растворяли в MeOH (1 мл) и 4M HCl в диоксане (3 мл). Раствор перемешивали при к.т. в течение 30 мин, после чего удаляли растворители в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 5-((7-(5-(2-(амино(циклопентил)метил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-она. LCMS, способ A: R_t=0,15 мин, (M+H)⁺=558,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,57 (с, 1H), 7,83 (м, 1H), 7,41 (м, 1H), 7,26-7,17 (м, 4H), 7,09 (д, J=7,6 Гц, 1H), 4,42 (м, 2H), 4,07 (м, 4H), 3,64-3,34 (м, 4H), 2,48 (м, 1H), 2,22-2,03 (м, 5H), 1,78-1,48 (м, 6H), 1,39 (д, J=6,4 Гц, 1H).

Пример 8

5-((7-(5-(2-(циклопентил(диметиламино)метил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

К раствору 5-((7-(5-(2-(амино(циклопентил)метил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-она три-TFA соли (Пример 7, 8,7 мг, 0,01 ммоль) в DCM (2 мл) добавляли TEA (1 капля), параформальдегид (4 мг), а затем NaBH₃(OAc)₃ (9 мг, 0,04 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при к.т. после чего удаляли растворитель в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением указанного в заголовке соединения. LCMS, способ A: R_t=0,53 мин, (M+H)⁺=586,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,57 (с, 1H), 7,83 (м, 1H), 7,61 (м, 1H), 7,36 (м, 1H), 7,26 (м, 1H), 7,21 (с, 1H), 7,18 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,09 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,43 (м, 2H), 4,14 (м, 2H), 3,62-3,45 (м, 3H), 2,84 (с, 6H), 2,20-2,06 (м, 5H), 1,76 (м, 2H), 1,62-1,47 (м, 4H), 0,99 (м, 1H).

Пример 9

N-(циклопентил(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)метил)ацетамид

Указанный в заголовке продукт синтезировали путем ацилирования соединения Примера 7 уксусным ангидридом в пиридине. Конечный продукт очищали методом RP-HPLC, способ A. LCMS, способ A: R_t=0,53 мин, (M+H)⁺=600,3.

Пример 10

6-((7-(5-(4-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-3,3-диметилиндолин-2-он

Стадия 1: 1-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-2-метилпропан-1-ол

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 526 мг, 1,065 ммоль) и N-метокси-N-метилизобутирамида (268 мг, 2,04 ммоль) в безводном THF (6 мл) в атмосфере N₂ при 78°C по каплям добавляли 1,6M BuLi (0,7 мл, 1,067 ммоль). После добавления, реакционную смесь перемешивали дополнительно в течение 10 мин, после чего гасили добавлением водного раствора NH₄Cl. Полученную смесь экстрагировали EtOAc, промывали H₂O, солевым раствором, сушили над безводным Na₂SO₄ и фильтровали. Фильтрат концентрировали досуха. Остаток очищали методом флэш-хроматографии с получением 249 мг трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-изобутирилфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 41b). LCMS, способ B: t_R: 1,76 мин, (M+H)⁺=485,3

К холодному раствору промежуточного продукта 41b (83 мг, 0,17 ммоль) в THF/MeOH (2/0,5 мл) при 0°C добавляли NaBH₄ (20 мг, 0,53 ммоль). Смесь перемешивали дополнительно в течение 20 мин и гасили добавлением ацетона. Растворитель удаляли с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт затем растворяли в MeOH (1 мл), добавляли 4M HCl в диоксане (0,5 мл), и перемешивали смесь в течение 30 мин. Растворители удаляли в условиях пониженного давления с получением неочищенного продукта в виде бис-гидрохлорида.

Стадия 2: 6-((7-(5-(4-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-3,3-диметилиндолин-2-он

Неочищенный продукт, полученный на стадии 1 растворяли в DCM (1 мл) с добавлением TEA (0,1 мл). Затем, удаляли растворитель в условиях пониженного давления. Полученный остаток растворяли в DCM (2 мл). К этому раствору добавляли промежуточный продукт 45 (32 мг, 0,17 ммоль) и NaBH(OAc)₃ (72 мг, 0,34 ммоль), и перемешивали смесь в течение 30 мин. Растворители удаляли, и очищали остаток методом препаративной HPLC, способ A, с получением указанного в заголовке соединения в виде трифторацетата. LCMS, способ A: R_t=075 мин, (M+H)⁺=560,3,1H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,53 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,36-7,10 (м, 6H), 4,53-3,78 (м, 11H), 2,22 (м, 4H), 1,96 (м, 1H), 1,34 (с, 6H), 1,00 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,84 (д, J=6,8 Гц, 3H).

Пример 11

6-((7-(5-(4-фтор-2-изобутирилфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-3-метил-2-оксоиндолин-3-карбонитрил

Указанное в заголовке соединение синтезировали из трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-изобутирилфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 41b) способом, описанным для стадий 2 и 3 в синтезе Примера 10. На стадии 3 использовали 6-формил-3-метил-2-оксоиндолин-3-карбонитрил. LCMS, способ A: R_t=0,57 мин, (M+H)⁺=569,3.

Пример 12

5-фтор-2-((4-(6-(3-(4-фторфенил)пропаноил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид

К раствору промежуточного продукта 41b (10 мг, 0,02 ммоль), 3-(4-фторфенил)пропановой кислоты (10 мг, 0,06 ммоль) и iPr₂NEt (0,02 мл, 0,11 ммоль) в DMF (2 мл) при к.т. добавляли HATU (12 мг, 0,03 ммоль), и перемешивали реакционную смесь в течение 1 ч при к.т. Для выделения продукта реакции добавляли EtOAc (5 мл) и H₂O (2 мл). EtOAc-слйо сушили с использованием Na₂SO₄ и упаривали. Неочищенный остаток очищали методом колоночной ISCO флэш-хроматографии (элюирование 10% MeOH в DCM) с получением 5-фтор-2-((4-(6-(3-(4-фторфенил)пропаноил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамида в виде свободного основания. LCMS, способ G: t_R=6,728 мин, MS (ESI) m/z 578,56 [M+H]⁺. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,45 (с, 1H), 7,72 (с, 1H), 7,25-7,17 (м, 5H), 6,93 (т, J=8,4 Гц, 2H), 4,65-4,20 (м, 4H), 3,77-3,72 (м, 1H), 3,60-3,56 (м, 3H), 3,44-3,40 (м, 2H), 2,85 (т, J=7,6 Гц, 2H), 2,55 (т, J=7,6 Гц, 2H), 2,16-2,10 (м, 2H), 1,46 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,37 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,15 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,03 (д, J=6,4 Гц, 3H).

Пример 13

5-((7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-3-оксо-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадия 1: 2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-он

К раствору трет-бутил-8-оксо-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (1 г, 4,2 ммоль) в безводном CH2Cl2 (5 мл) добавляли HClв диоксане (5 мл) и перемешивали при 16-34°C в течение 1 ч. Смесь концентрировали с получением 2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она (гидрохлорид, неочищ.) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии. Выход: 900 мг (гидрохлорид).

Стадия 2: 7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-он

К раствору 2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она (900 мг, 4,1 ммоль, гидрохлорид, неочищ.) в CH₃CN (20 мл) добавляли 5-(2-бром-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимин (промежуточный продукт 1, 1,3 г, 4,05 ммоль) и K₂CO₃ (1,1 г, 8,1 ммоль). Смесь перемешивали при 85°C в течение 24 ч. Смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат для очистки методом колоночной ISCO хроматографии на силикагеле (от 100% DCM до 5% MeOH в DCM) с получением 7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она в виде бесцветного масла. Выход: 1,2 г (73%); LCMS, способ C: R_t=0,659 мин. (M+H)⁺=407,0, 409,0 (изотопы брома).

Стадия 3: 7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-он

К раствору 7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она (850 мг, 2,09 ммоль) в диоксан:H₂O (15 мл, 1:1) добавляли (1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)бороновую кислоту (385 мг, 2,51 ммоль), палладацикл Sphos gen 2 (75 мг, 0,105 ммоль) и K3PO4 (1,34 г, 6,27 ммоль). Смесь нагревали при 115°C в течение 30 мин в микроволновом реакторе. Затем, смесь концентрировали, разбавляли EtOAc (30 мл) и промывали солевым раствором (50 мл×2). Органические слои концентрировали, и очищали остаток методом колоночной ISCO хроматографии на силикагеле (от 100% DCM до 10% MeOH в DCM) с получением коричневого твердого вещества. Это твердое вещество очищали методом препаративной RP-HPLC с щелочной подвижной фазой, способ D, с получением 7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она в виде белого твердого вещества. Выход: 350 мг. LCMS, способ C: R_t=0,629 мин; (M+H)⁺=437,2. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,40 (с, 1H), 7,82 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,05-7,15 (м, 2H), 6,81 (дд, J=9,2 4,4 Гц, 1H), 6,17 (д, J=2,0 Гц, 1H), 5,74 (с, 1H), 4,30-4,41 (м, 1H), 3,80-3,85 (м, 1H), 3,71 (д, J=11,2 Гц, 1H), 3,50-3,65 (м, 2H), 3,30-3,43 (м, 2H), 2,15-2,25 (м, 1H), 2,00-2,10 (м, 2H), 1,75-1,85 (м, 1H), 143 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,47 (д, J=6,8 Гц, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CDCl₃): δ -119,08.

Стадия 4: 7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-(4-фтор-3-нитробензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-он

К раствору 7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она (50 мг, 0,11 ммоль) в безводном THF (3 мл) добавляли NaH (7 мг, 0,17 ммоль) и n-Bu4I (4 мг, 0,01 ммоль). Затем, к смеси по каплям добавляли 4-(бромметил)-1-фтор-2-нитробензол (33 мг, 0,14 ммоль, растворен в 1 мл THF), и перемешивали смесь при 0°C в течение 30 мин. Затем, смесь перемешивали при 16-25°C в течение 2 ч. Смесь гасили добавлением насыщенного NH4Cl (5 мл, водн.) и экстрагировали EtOAc (5 мл×2). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4 и концентрировали. Полученный остаток очищали методом препаративной RP-HPLC с кислой подвижной фазой, способ A, с получением 7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2-(4-фтор-3-нитробензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она в виде трифторацетата в виде белого твердого вещества. Выход: 21 мг (32%); LCMS, способ C: R_t=0,740 мин; (M+H)⁺=589,9,1H-ЯМР (MeOD): δ 8,54 (с, 1H), 8,03 (д, J=6,8 Гц, 1H),7,94 (с, 1H), 7,60-7,70 (м, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,46 (т, J=9,2 Гц, 1H), 7,35-7,40 (м, 2H), 7,31 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,30 (с, 1H), 4,57 (с, 2H), 4,35-4,45 (м, 1H), 4,05-4,15 (м, 1H), 4,00-4,05 (м, 1H), 3,85-3,95 (м, 1H), 3,65-3,80 (м, 1H), 3,35-3,50 (м, 2H), 2,00-2,25 (м, 4H), 1,30-1,45 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (MeOD): δ -77,21, -117,66, -122,07.

Стадия 5: 2-(4-амино-3-нитробензил)-7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-он

Раствор 7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-(4-фтор-3-нитробензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она (80 мг, 0,14 ммоль) в NH₃-MeOH (5 мл) нагревали до 70°C в течение 36 ч в автоклаве. Затем, смесь концентрировали и очищали методом препаративной TLC на силикагеле (DCM:MeOH=10:1) с получением 2-(4-амино-3-нитробензил)-7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она в виде желтого твердого вещества. Выход: 65 мг (80%); LCMS, способ C: R_t=0,713 мин; (M+H)⁺=587,2. ¹H-ЯМР (MeOD): δ 8,29 (с, 1H), 7,96 (с, 1H), 7,83 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,22-7,30 (м, 2H), 7,19 (дд, J=8,0 2,8 Гц, 1H), 6,96-6,99 (м, 2H), 6,19 (с, 1H), 4,38-4,43 (м, 3H), 3,65-3,73 (м, 1H), 3,59-3,71 (м, 2H), 3,51 (д, J=12,0 Гц, 1H), 3,35 (с, 1H), 3,27-3,29 (м, 1H), 2,11-2,16 (м, 1H), 1,84-2,06 (м, 3H), 1,33-1,44 (м, 6H),1⁹F-ЯМР (MeOD): δ -120,79.

Стадия 6: 2-(3,4-диаминобензил)-7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-он

К раствору 2-(4-амино-3-нитробензил)-7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она (50 мг, 0,85 ммоль) в безводном EtOH (10 мл) добавляли никель Ренэя (10 мг, влажный), и перемешивали при 17-26°C в течение 18 ч в атмосфере H2 (15 фунт/кв.дюйм). Смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат. Остаток очищали методом препаративной TLC на силикагеле (DCM:MeOH=10:1) с получением 2-(3,4-диаминобензил)-7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она в виде белого твердого вещества. Выход: 20 мг (42%); LCMS, способ C: Rt=0,624 мин. (M+H)+=557,3.

Стадия 7: 5-((7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-3-оксо-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

К раствору 2-(3,4-диаминобензил)-7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она (13 мг, 0,023 ммоль) в безводном THF (5 мл) добавляли Et₃N (10 мкл) и бис(трихлорметил)карбонат (7 мг, 0,023 ммоль), и перемешивали полученную смесь при 18-26°C в течение 16 ч. Методом TLC (DCM:MeOH=10:1, R_f=0,7) обнаруживали новое пятно, а расходование 2-(3,4-диаминобензил)-7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она было неполным. Смесь выливали в воду (5 мл) и экстрагировали EA (10 мл×2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл×2), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали для очистки методом препаративной RP-HPLC с щелочной подвижной фазой, способ D, с получением 5-((7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-3-оксо-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она в виде белого твердого вещества. Выход: 2,9 мг (22%); LCMS, способ C: R_t=1,596 мин, (M+H)⁺=583,2. ¹H-ЯМР (MeOD): δ 8,30 (с, 1H), 7,83 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,25-7,35 (м, 1H), 7,21 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,00-7,05 (м, 1H), 6,95-7,00 (м, 3H), 6,16 (с, 1H), 4,35-4,55 (м, 3H), 3,80-3,90 (м, 1H), 3,55-3,70 (м, 2H), 3,45-3,55 (м, 1H), 3,20-3,30 (м, 2H), 1,85-2,20 (м, 4H), 1,35-1,45 (м, 6H),1⁹F-ЯМР (MeOD): δ -120,78.

Примеры 14A-14B

N-(4-фтор-2-(5-изопропил-3-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин (Пример 14A) и 4-(5-фтор-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-5-изопропил-3-метилизоксазол (Пример 14B)

и

Стадия 1. 5-изопропил-3-метилизоксазол и 3-изопропил-5-метилизоксазол

и

Суспензию 5-метилгексан-2,4-диона (300 мг, 2,34 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (194 мг, 2,82 ммоль) в EtOH нагревали в течение 3 мин в микроволновом реакторе при 130°C. Упаривали EtOH, и распределяли неочищенный продукт между Et₂O (5 мл) и водой (3 мл). Et₂O-слой сушили с использованием MgSO₄, а затем упаривали с получением неочищенного продукта в виде смеси региоизомеров изоксазола 4:1. Основной изомер определяли как 5-изопропил-3-метилизоксазол, а минорный как 3-изопропил-5-метилизоксазол. Эту неочищенную смесь использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS, способ A: t_R=1,485; [M+H]⁺=126,28.

Стадия 2. 4-бром-5-изопропил-3-метилизоксазол и 4-бром-3-изопропил-5-метилизоксазол

и

К раствору неочищенного 5-изопропил-3-метилизоксазола (неочищенная смесь 4:1, полученная на стадии 1 2,34 ммоль) в DMF (3 мл) при к.т. добавляли N-бромсукцинимид (625 мг, 3,51 ммоль), и перемешивали реакционную смесь в течение 15 ч при к.т. Для выделения продукта затем добавляли EtOAc (10 мл) и H₂O (10 мл). EtOAc-слой разделяли и промывали насыщенным водным раствором Na₂S₂O₅, а затем солевым раствором. EtOAc-слой затем сушили с использованием Na₂SO₄ и упаривали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной ISCO флэш-хроматографии (элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением 200 мг (42% после 2 стадий) продукта в виде смеси 4:1 региоизомеров. Основной изомер определяли как 4-бром-5-изопропил-3-метилизоксазол, и минорный изомер определяли как 4-бром-3-изопропил-5-метилизоксазол. LCMS, способ A: t_R=1,787; [M]⁺=204,25 и 206,26. ¹H-ЯМР (CDCl₃): основной региоизомер изоксазола - (4-бром-5-изопропил-3-метилизоксазол) δ 3,21-3,14 (м, 1H), 2,26 (с, 3H), 1,32 (д, J=7,2 Гц, 6H).

Стадия 3. 5-изопропил-3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)изоксазол и 3-изопропил-5-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)изоксазол

и

Смесь 4-бром-5-изопропил-3-метилизоксазола (смесь региоизомеров 4:1, полученная на стадии 2 100 мг, 0,49 ммоль), пинаколборана (0,11 мл, 0,78 ммоль), PdCl2(MeCN)2 (3 мг, 2 мол.%), лиганда SPhos (10 мг, 5 мол.%) и Et3N (0,24 мл, 1,72 ммоль) в диоксане (2 мл) нагревали при 100°C в герметизированном флаконе под под защитным слоем N2 в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т., фильтровали через слой Celite™ и упаривали. Неочищенный остаток очищали методом Колоночной ISCO флэш-хроматографии (элюирование 20% EtOAc в гексанах) с получением 100 мг 5-изопропил-3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)изоксазола и 3-изопропил-5-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)изоксазола в виде смеси 4:1 региоизомеров и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4. трет-бутил-6-(5-бромпиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

Суспензию 5-бром-4-хлорпиридимина (1,67 г, 8,65 ммоль), трет-бутил-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата гемиоксалата (2 г, 4,12 ммоль) и iPr₂NEt (1,80 мл, 10,3 ммоль) в iPrOH (10 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 15 ч. Для выделения продукта к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор NH₄Cl (10 мл) и EtOAc (20 мл). EtOAc-слой разделяли, и водный слой снова экстрагировали EtOAc. EtOAc-слои объединяли, промывали водой, затем солевым раствором и сушили с использованием Na₂SO₄. Путем упаривания EtOAc получали трет-бутил-6-(5-бромпиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат в виде не совсем белого пенистого твердого вещества (2 г, 70%), которое было почти чистым согласно данным LCMS-анализа, и который использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS, способ A: t_R=1,330 мин; [M+H]⁺=355,41 и 357.

Стадия 5. трет-бутил-6-(5-((2-хлор-4-фторфенил)амино)-пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

Смесь трет-бутил-6-(5-бромпиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (100 мг, 0,28 ммоль), 2-хлор-4-фторанилина (39 мг, 0,27 ммоль), Pd₂(dba)₃ (5 мг, 0,005 ммоль), Xphos (11 мг, 0,023 ммоль) и NaOtBu (60 мг, 0,63 ммоль) в толуоле (2 мл) нагревали в микроволновом реакторе CEM при 160°C в течение 30 мин. После охлаждения, реакционную смесь разбавляли 5 мл EtOAc и фильтровали через слой Celite™. Путем упаривания растворителей получали неочищенное твердое вещество, которое растирали с гексанами в течение ночи. Путем фильтрования твердого вещества получали 92 мг (79%) трет-бутил-6-(5-((2-хлор-4-фторфенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата, который был почти чистым согласно данным LCMS-анализа, и который использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS, способ A: t_R=1,411; [M+H]⁺=420,54 и 422,55.

Стадия 6. трет-бутил-6-(5-((4-фтор-2-(5-изопропил-3-метилизоксазол-4-ил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат и трет-бутил-6-(5-((4-фтор-2-(3-изопропил-5-метилизоксазол-4-ил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

и

Смесь трет-бутил-6-(5-((2-хлор-4-фторфенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (35 мг, 0,083 ммоль), 5-изопропил-3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)изоксазола и 3-изопропил-5-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)изоксазола в виде смеси 4:1 изомеров (Стадия 3, 21 мг, 0,083 ммоль), K₃PO₄ (53 мг, 0,25 ммоль) и палладацикла SPhos (CAS#:1375325-64-6, 3 мг, 0,004 ммоль) в смеси диоксан/H₂O (1 мл/0,40 мл) нагревали до 120°C в течение 15 мин в микроволновом реакторе CEM. После охлаждения, реакционную смесь фильтровали через Celite™ и упаривали. Путем очистки смеси изомеров исходных веществ методом колоночной ISCO флэш-хроматографии (элюирование 100% EtOAc) получали трет-бутил-6-(5-((4-фтор-2-(5-изопропил-3-метилизоксазол-4-ил)фенил)амино)-пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат в виде основного изомера изоксазола (смесь 4:1). Эту смесь изомеров продуктов использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS, способ A: t_R=1,367; [M+H]⁺=509,70.

Стадия 7. N-(4-фтор-2-(5-изопропил-3-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин и N-(4-фтор-2-(3-изопропил-5-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин

и

К раствору трет-бутил-6-(5-((4-фтор-2-(5-изопропил-3-метилизоксазол-4-ил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата и трет-бутил-6-(5-((4-фтор-2-(3-изопропил-5-метилизоксазол-4-ил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (смесь 4:1 региоизомеров изоксазола, полученная на стадии 6, 40 мг, 0,079 ммоль) в DCM (3 мл) при к.т. добавляли TFA (1 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при к.т., а затем удаляли растворители. Для получения свободного основания-амина из трифторацетата добавляли DCM (2 мл) и Et₃N (0,05 мл). Путем упаривания растворителей и сушки в условиях высокого вакуума получали N-(4-фтор-2-(5-изопропил-3-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин и N-(4-фтор-2-(3-изопропил-5-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин в виде свободных оснований (смесь 4:1 региоизомеров изоксазола). Это вещество использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 8. N-(4-фтор-2-(5-изопропил-3-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин и N-(4-фтор-2-(3-изопропил-5-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин

К раствору неочищенного N-(4-фтор-2-(5-изопропил-3-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амина и N-(4-фтор-2-(3-изопропил-5-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амина (смесь 4:1 региоизомеров изоксазола, полученная на стадии 7, 0,079 ммоль) и тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегида (27 мг, 0,24 ммоль) в дихлорэтане (2 мл, с добавлением 1% AcOH) при к.т. добавляли NaBH(OAc)₃ (50 мг, 0,24 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, и согласно данным LCMS-анализа реакция была завершена. Путем упаривания растворителя с последующей очисткой методом HPLC, способ A, получали N-(4-фтор-2-(5-изопропил-3-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амина трифторацетат и N-(4-фтор-2-(3-изопропил-5-метилизоксазол-4-ил)фенил)-4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин трифторацетат в виде смеси 4:1 региоизомеров изоксазола (15 мг). LCMS, способ B: t_R=1,124; [M+H]⁺=507,70.

Пример 14A: основной региоизомер изоксазола - LCMS, способ B: t_R=1,013; [M+H]⁺=507,70 ¹H-ЯМР (CD₃OD). δ 8,55 (ушир. с, 1H), 7,79 (ушир. с, 1H), 7,17-7,12 (м, 1H), 7,00 (дд, J=3,2, 8,8 Гц, 1H), 6,83 (дд, J=5,2, 9,2 Гц, 1H), 4,60-4,35 (м, 8H), 3,93 (дд, J=4,0, 11,6 Гц, 2H), 3,40 (т, J=11,6 Гц, 2H), 3,11 (д, J=7,2 Гц, 2H), 3,07-3,00 (м, 1H), 2,17 (с, 3H), 1,93-1,87 (м, 1H), 1,60 (д, J=11,6 Гц, 2H), 1,37-1,20 (м, 1H), 1,27 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,26 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,21-1,16 (1H, m).

Пример 14B: минорный региоизомер изоксазола - LCMS, способ B t_R=1,124; [M+H]⁺=507,70.

Пример 15

N-(5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)-4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин

Указанный в заголовке продукт синтезировали способом, описанным в Примерах 14A-14B. На стадии 3 использовали 2-изопропилфенилбороновую кислоту. LCMS, способ G: R_t=4,88 мин; M+H⁺=502,85. ¹H-ЯМР (d₄-MeOH) 8,45 (с, 1H), 7,72, (с, 1H), 7,47 (д, 1H), 7,42 (м, 1H), 7,28 (м, 1H), 7,20 (д, 1H), 7,07 (м, 1H), 6,92 (м, 1H), 6,81 (м, 1H), 4,32-4,56 (м, 8H), 3,94 (м, 2H), 3,39 (м, 2H), 3,11 (д, 2H), 2,82 (м, 2H), 1,86 (м, 1H), 1,59 (д, 2H), 1,33 (м, 2H), 1,20 (д, 3H), 1,13 (д, 3H) м.д.

Пример 16

5-фтор-2-((4-(2-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-ил)амино)-N,N-диизопропилбензамид

Стадия 1. 2-((4-(2-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-ил)амино)-5-фторбензойная кислота

В круглодонную колбу добавляли трет-бутил-7-(5-йодпиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилат (Пример 71, Стадия 1, 500 мг, 1 экв.), 2-амино-5-фторбензойную кислоту (216 мг, 1,2 экв.), Pd₂(dba)₃ (21 мг, 0,02 экв.), Xantphos (54 мг, 0,08 экв.) и Cs₂CO₃ (1,33 г, 3,5 экв.). К этой твердой смеси добавляли диоксан (8 мл, 0,15M применительно к трет-бутил-7-(5-йодпиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилату). Гетерогенный раствор продували струей азота в течение 1 мин. Колбу закрывали крышкой, и нагревали реакционную смесь в течение ночи при 100°C. Затем, Cs₂CO₃ отфильтровывали, фильтрат разбавляли EtOAc, и добавляли 0,5M HCl. Полученное белое твердое вещество фильтровали и сушили в условиях вакуума. Выход: 400 мг.

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-((2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилат

В круглодонную колбу добавляли 2-((4-(2-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-ил)амино)-5-фторбензойную кислоту (500 мг) и HOBt (184 мг). К этой твердой смеси добавляли DMF (3,65 мл), диизопропиламин (1 мл) и диизопропилэтиламин (209 мкл), а затем BOP (532 мг, 1,1 экв.), и перемешивали смесь в течение ночи. Затем, смесь распределяли между EtOAc и водой. Фазы разделяли, и водную фазу дважды обратно экстрагировали EtOAc. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом магния и концентрировали. Неочищенное вещество очищали методом флэш-хроматографии (40 г SiO₂, MeOH/DCM в качестве элюента) с получением трет-бутил-7-(5-((2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилата (300 мг).

Стадия 3. 5-фтор-2-((4-(2-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-ил)амино)-N,N-диизопропилбензамид

В круглодонную колбу добавляли трет-бутил-7-(5-((2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилат (300 мг), DCM (5 мл) и TFA (5 мл), и перемешивали реакционную смесь в течение 30 мин при к.т. Затем, летучие вещества удаляли в условиях вакуума. Неочищенный остаток дважды упаривали совместно с DCM с получением 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-ил)амино)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида бис-трифторацетата. В круглодонную колбу добавляли бис-трифторацетат (20 мг), 2,2-диметилоксиран (11 мг), триэтиламин (21 мкл) и THF:этанол (2 мл, соотношение 1:1). Колбу закрывали крышкой и смесь нагревали при 65°C в течение ночи. После завершения реакции, летучие вещества удаляли в условиях вакуума. Неочищенное вещество очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 5-фтор-2-((4-(2-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-ил)амино)-N,N-диизопропилбензамида (3,7 мг). LCMS, способ G R_t=3,65 мин; (M+H)⁺=513,61. ¹H-ЯМР (d4-MeOH) 8,52 (с, 1H), 7,87 (с, 1H), 7,07-7,15 (м, 2H), 6,93 (м, 1H), 4,23 (д, 2H), 4,04 (д, 2H), 3,82-3,89 (м, 6H), 1,93-1,99 (м, 4H), 1,26-1,34 (м, 18H).

Пример 17

5-((7-(5-(2-(диметилфосфорил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадия 1. трет-Бутил-7-(5-(2-(диметилфосфорил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К смеси трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 200 мг, 0,41 ммоль), (CH₃)₂PO (35 мг, 0,45 ммоль), K₃PO₄ (104 мг, 0,49 ммоль) в безводном DMF (3 мл) добавляли Pd(OAc)₂ (1,0 мг, 0,004 ммоль) и Xantphos (4,0 мг, 0,006 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 150°C в течение 30 мин в условиях микроволновой обработки. Реакционную смесь фильтровали через слой Celite™ и концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование дихлорметан:метанол=1:0~10:1) с получением трет-бутил-7-(5-(2-(диметилфосфорил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде светло-желтого масла. Выход: 120 мг. LCMS, способ E: R_t=0,836 мин.(M+H)⁺=491,2.

Стадии 2-3. 5-((7-(5-(2-(диметилфосфорил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадии 2-3 проводили в соответствии с метододиками, описанными на стадиях 4-5 Примера 1. LCMS, способ E: R_t=1,344 мин; (M+H)⁺=537,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,34 (с, 1H), 7,89 (с, 1H), 7,61 (м, 1H), 7,22-7,60 (м, 1H), 6,96-7,00 (м, 3H), 6,73-6,77 (м, 1H), 3,59 (с, 6H), 2,43-2,67 (м, 4H), 1,90 (д, J=14 Гц, 8H), 1,78 (т, J=6,4 Гц, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,92.

Пример 18

2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-N-(4-фторбензил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-амин

Стадия 1. 5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-она трифторацетат

К раствору трет-бутил-7-оксо-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-2-карбоксилата (300 мг, 1,32 ммоль) в DCM (3 мл) при к.т. добавляли TFA (1 мл), и перемешивали реакционную смесь в течение 1 ч при к.т. Растворители удаляли с получением 5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-она трифторацетата, который использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS, способ A: t_R=0,269 мин; [M+H]⁺=128,28.

Стадия 2. 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-он

Смесь 5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-она трифторацетата (168 мг, 1,32 ммоль), 5-(2-бром-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимина (промежуточный продукт 1, 481 мг, 1,58 ммоль) и iPr₂NEt (0,92 мл,5,28 ммоль) в iPrOH (3 мл) нагревали при 100°C в течение 12 ч. Путем очистки методом колоночной ISCO флэш-хроматографии (элюирование 10% MeOH в DCM) получали 406 мг 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-она. LCMS, способ A: t_R=0,961 мин; [M+H]⁺=394,35 и 396,37.

Стадия 3. 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-он

Смесь 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-она (147 мг, 0,37 ммоль), (4-изопропилпиримидин-5-ил)бороновой кислоты (93 мг, 0,56 ммоль), PdCl₂(PPh₃)₂ (26 мг, 0,037 ммоль) и K₃PO₄ (237 мг, 1,12 ммоль) в диоксане (2,5 мл) и воде (0,25 мл) нагревали при 120°C в микроволновом реакторе CEM в течение 2 ч. Смесь фильтровали через Celite™ и упаривали. Путем очистки методом колоночной ISCO флэш-хроматографии (элюирование 10% MeOH в DCM) получали 151 мг 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-она. LCMS, способ A: t_R=0,926 мин; [M+H]⁺=436,48.

Стадия 4. 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-N-(4-фторбензил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-амин

К раствору 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-она (14 мг, 0,03 ммоль) и (4-фторфенил)метанамина (0,006 мл, 0,047 ммоль) в MeOH (2 мл) добавляли NaBH₃CN (8 мг, 0,12 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 50°C в течение 6 ч. Путем упаривания растворителя и очистки методом Gilson HPLC получали 4,6 мг 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-N-(4-фторбензил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-амина трифторацетат. LCMS, способ A: t_R=0,572 мин; [M+H]⁺=545,60. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,10 (с, 1H), 8,57 (с, 1H), 8,21 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,38-7,34 (м, 2H), 7,30-7,22 (м, 2H), 7,10-7,03 (м, 3H), 4,19 (ушир. с, 1H), 4,14-4,03 (м, 3H), 3,91 (дд, J=6,0, 9,0 Гц, 1H), 3,75 (д, J=6,4 Гц, 2H), 3,71-3,66 (м, 1H), 3,46-3,41 (м, 1H), 3,08-3,01 (м, 1H), 2,35-2,30 (м, 1H), 2,08-2,02 (м, 1H), 1,19 (д, J=6,8 Гц, 6H).

Пример 19

4-(((2-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-ил)амино)метил)бензонитрил

Указанное в заголовке соединение синтезировали в соответствии со способом, описанным для Примера 18. На стадии 3 использовали 2-изопропилфенилбороновую кислоту. На стадии 4 использовали 4-цианобензальдегид. LCMS, способ A: R_t=1,125 мин; (M+H)⁺=550,68. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,12 (с, 1H), 7,70 (д, J=7,6 Гц, 2H), 7,55 (д, J=7,6 Гц, 2H), 7,38-7,32 (м, 2H), 7,21-7,05 (м, 5H), 4,19-4,09 (м, 2H), 4,03-3,97 (м, 2H), 3,92-3,87 (м, 1H), 3,87-3,82 (м, 2H), 3,67 (дд, J=4,8, 9,0 Гц, 1H), 3,40 (ушир. с, 1H), 2,84-2,78 (м, 1H), 2,29-2,22 (м, 1H), 2,05-2,01 (м, 2H), 1,11-1,08 (м, 6H).

Пример 20

7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-N-(4-фторбензил)-1-окса-7-азаспиро[4.4]нонан-3-амин

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя в качестве исходного вещества трет-бутил-3-оксо-1-окса-7-азаспиро[4.4]нонан-7-карбоксилат, в соответствии со способом, описанным для Примера 18. LCMS, способ A: t_R=0,585; [M+H]⁺=559,61. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,10 (с, 1H), 8,57 (с, 1H), 8,21 (с, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,41-7,35 (м, 2H), 7,28-7,20 (м, 2H), 7,09-6,95 (м, 3H), 4,42 (ушир. с, 1H), 3,97-3,47 (м, 8H), 3,12-3,05 (м, 1H), 2,27-2,23 (м, 1H), 2,18-2,10 (м, 1H), 1,99-1,81 (м, 2H), 1,24-1,19 (м, 6H).

Пример 21

5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилкарбамоил)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид

Стадия 1. метил-(1r,4r)-4-((2-(5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)карбамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексан-1-карбоксилат

Указанное в заголовке соединение синтезировали методом восстановительного аминирования из 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамида (0,18 ммоль) и метил-(1r,4r)-4-формилциклогексан-1-карбоксилата (100 мкл) способом, описанным для Примера 18, Стадия 4. LCMS, способ B: R_t=0,73 мин, (M+H)⁺=568,5.

Стадия 2. (1r,4r)-4-((2-(5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)-карбамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексан-1-карбоновая кислота

К раствору метил-(1r,4r)-4-((2-(5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)карбамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексан-1-карбоксилата (30 мг, 0,053 ммоль) в MeOH (1 мл) добавляли 2н раствор LiOH (0,2 мл). Раствор перемешивали при к.т. в течение ночи, растворитель удаляли досуха, и остаток использовали на следующей стадии без очистки; LCMS, способ B: R_t=0,63 мин, (M+H)⁺=554,6.

Стадия 3. 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилкарбамоил)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид

К раствору неочищенного продукта, полученного на стадии 2 в DMF (0,5 мл) добавляли MeNH₂HCl (15 мг) и Et₃N (200 мкл), а затем HATU (20 мг), и перемешивали полученный раствор при к.т. в течение 30 мин. Продукт очищали методом препаративной RP-HPLC, способ A, с получением 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилкарбамоил)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в виде трифторацетата (7 мг); LCMS, способ B: R_t=0,60 мин, (M+H)⁺=567,6; ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,38, 8,37 (с, 1H), 7,73, 7,61 (ушир. с, 1H), 7,24-7,12 (м, 3H), 4,65 (м, 1H), 4,52-3,96 (м, 4H), 3,45 (м, 2H), 2,88 (м, 4H), 2,82, 2,68 (два с, 3H), 2,58 (с, 3H), 2,16 (м, 2H), 2,08-1,88 (м, 3H), 1,74 (м, 5H), 1,41 (м, 2H), 1,12-0,92 (м, 8H).

Примеры 22A и 22B

2-((4-(7-амино-7-(4-цианобензил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид (изомеры 1-2)

Стадия 1. трет-бутил-7-(4-бромбензил)-7-((трет-бутилсульфинил)амино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)имино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (Примеры 250A-250B, Стадия 1, 0,73 г, 2,13 ммоль) в THF (15 мл) при 0°C добавляли 4-бромбензилмагнийбромид (0,25M в Et₂O, 20 мл), Раствор нагревали до к.т. Спустя 2 ч, дополнительно добавляли 20 мл реактива Гриньяра, и перемешивали смесь дополнительно в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. NH₄Cl, и разделяли органический слой. Водный слой экстрагировали EtOAc (2×5 мл), объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали в условиях вакуума. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением трет-бутил-7-(4-бромбензил)-7-((трет-бутилсульфинил)амино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (174,4 мг, 16%). LCMS, способ B: R_t=2,22 мин; (M+H)⁺=513,6.

Стадия 2. трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)амино)-7-(4-цианобензил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(4-бромбензил)-7-((трет-бутилсульфинил)амино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (88,4 мг, 0,17 ммоль) в безводном DMF (0,5 мл) добавляли Zn(CN)₂ (20 мг, 0,17 ммоль) и Pd(PPh₃)₄ (20 мг, 0,02 ммоль). Полученный раствор дегазировали и нагревали на масляной бане при 110°C в атмосфере N₂ в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли EtOAc, промывали 1н HCl (5 мл), солевым раствором и сушили над Na₂SO₄. После удаления растворителя, остаток очищали на колонке с силикагелем (0-9% MeOH/DCM) с получением трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)амино)-7-(4-цианобензил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (56 мг, 72%). LCMS, способ B: R_t=1,67 мин; (M+H)⁺=460,6.

Стадия 3: 4-((7-амино-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)метил)-бензонитрил

К раствору трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)амино)-7-(4-цианобензил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (56 мг, 0,12 ммоль) в DCM (2 мл) добавляли TFA (50 мкл), и перемешивали полученный раствор при к.т. в течение ночи с получением 4-((7-амино-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)метил)бензонитрила. Растворитель удаляли, и использовали полученный остаток на следующей стадии без очистки. LCMS, способ B: R_t=0,32 мин; (M+H)⁺=256,6.

Стадия 4. 2-((4-(7-амино-7-(4-цианобензил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид (изомеры 1-2)

К раствору неочищенного продукта, полученного на стадии 3 в изопропаноле (0,5 мл) добавляли 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид (промежуточный продукт 41, 30 мг) и Et₃N (200 мкл), полученный раствор нагревали в микроволновом реакторе CEM при 110°C в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т., и очищали методом препаративной RP-HPLC, способ A, с получением:

Изомера 1 в виде трифторацетата (1,22 мг); LCMS, способ B: R_t=0,83 мин; (M+H)⁺=571,4. ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,49 (с, 1H), 7,92 (с, 1H), 7,70 (м, 2H), 7,47 (д, J=6,8 Гц, 2H), 7,19 (м, 2H), 7,07 (ушир., 1H), 4,04-3,66 (м, 4H), 3,61 (м, 2H), 3,26 (м, 1H), 3,08 (с, 2H), 2,28-1,76 (м, 8H), 1,49 (м, 3H), 1,40 (м, 3H), 1,17 (д, J=7,6 Гц, 3H), 1,10 (м, 3H); и

Изомера 2 в виде трифторацетата (1,36 мг); LCMS, способ B: R_t=0,89 мин; (M+H)⁺=571,4. ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,36 (с, 1H), 7,86 (ушир., 1H), 7,57 (д, J=8 Гц, 2H), 7,32 (д, J=7,6 Гц, 2H), 7,04 (д, J=7,6 Гц, 2H), 6,96 (ушир., 1H), 3,80-3,48 (м, 5H), 3,18 (м, 1H), 2,94 (с, 2H), 2,05 (м, 2H), 1,86-1,58 (м, 4H), 1,49 (м, 2H), 1,34 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,24 (д, J=6. 4 Гц, 3H), 1,02 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,94 (д, J=6,8 Гц, 3H).

Примеры 23A-23C

5-фтор-2-((4-(7-гидрокси-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид (изомеры 1-3)

Стадия 1. трет-бутил-7-оксо-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метилен)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (0,28 г, 1,17 ммоль) и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 0,23 г, 1,29 ммоль) в DMSO (3 мл) добавляли L-пролин (40 мг), 3-этил-1-метил-1H-имидазол-3-ия 2,2,2-трифторацетат ([EMIm][CF₃COO]) (79 мг, 0,35 ммоль) и H₂O (0,32 г). Полученную смесь нагревали при 80°C в течение 4 суток, охлаждали до к.т., разбавляли H₂O (5 мл) и экстрагировали EtOAc (4×5 мл). Объединенные органические слои концентрировали, и очищали остаток на колонке с силикагелем (0-4% MeOH/DCM) с получением трет-бутил-7-оксо-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метилен)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (~190 мг, ~42%, исходный альдегид все еще присутствует); LCMS, способ B: R_t=1,16 мин; (M-55)⁺=328,3; ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 9,62 (br 1H), 9,46 (ушир., 1H), 7,40 (с, 1H), 7,18 (д, J=6,8 Гц, 1H), 7,03 (д, J=6,8 Гц, 1H), 5,24 (с, 1H), 3,40 (м, 2H), 3,28, 3,20 (два с, 2H), 2,88 (с, 2H), 2,40 (с, 2H), 1,80 (м, 2H), 1,4, 1,40 (два с, 9H).

Стадия 2. трет-бутил-7-гидрокси-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат и трет-бутил-7-оксо-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

и

К раствору трет-бутил-7-оксо-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метилен)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (130 мг) в MeOH (10 мл) добавляли Pd-C (10 мг), и перемешивали раствор при к.т. в атмосфере подаваемого из баллона H₂ в течение ночи. Методом LC-MS обнаруживали смесь трет-бутил-7-гидрокси-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата и трет-бутил-7-оксо-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата. Реакционную смесь фильтровали через слой Celite™, и удаляли растворитель в условиях вакуума. Остаток очищали на колонке с силикагелем (3-7% MeOH в DCM) с получением трет-бутил-7-оксо-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (~50 мг); LCMS, способ B: R_t=1,17 мин; (M-55)⁺=330,3; и трет-бутил-7-гидрокси-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (~80 мг); LCMS, способ B: R_t=1,17 мин; (M-55)⁺=332,3.

Стадия 3. 5-((8-гидрокси-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

К раствору трет-бутил-7-гидрокси-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (20 мг, 0,052 ммоль) в DCM (0,5 мл) добавляли TFA (0,2 мл), и перемешивали раствор при к.т. в течение получаса. Затем, растворитель удаляли досуха с получением трифторацетата 5-((8-гидрокси-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-она, который использовали на следующей стадии без очистки; LCMS, способ B: R_t=0,47 мин; (M+H)⁺=288,3.

Стадия 4. 5-фтор-2-((4-(7-гидрокси-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид (изомеры 1-3)

К раствору неочищенного продукта, полученного на стадии 3 в изопропаноле (0,3 мл) добавляли 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид (промежуточный продукт 41, 20 мг) и Et₃N (150 мкл), и нагревали полученный раствор в микроволновом реакторе CEM при 110°C в течение 1 ч. Методом LC-MS обнаруживали три продукта с t_R=0,88, 0,90 и 0,95 мин и в соотношении 1:1:5. Продукты выделяли методом препаративной RP-HPLC, способ A, с получением:

Изомера 1 в виде трифторацетата (1,4 мг), LCMS, способ B: R_t=0,88 мин; (M+H)⁺=603,5. ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,37 (с, 1H), 7,68, 7,54 (два ушир., 1H), 7,10 (м, 3H), 6,84-6,72 (м, 3H), 4,08-3,94 (м, 2H), 3,94-3,50 (м, 5H), 3,00-2,74 (м, 1H), 2,52-2,26 (м, 1H), 2,14-1,78 (м, 5H), 1,68-1,30 (м, 6H), 1,24-1,02 (м, 6H), 1,02-0,82 (м, 2H);

Изомера 2 в виде трифторацетата (0,82 мг), LCMS, способ B: R_t=0,90 мин; (M+H)⁺=603,5. ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,33 (с, 1H), 7,62, 7,50 (два ушир., 1H), 7,10 (м, 3H), 6,84-6,70 (м, 3H), 3,98-3,54 (м, 6H), 3,52-3,34 (м, 1H), 3,02-2,92 (м, 1H), 2,78, 2,48 (два ушир., 1H), 2,28 (м, 1H), 2,08-1,92 (м, 2H), 1,90-1,72 (м, 2H), 1,68-1,46 (м, 2H), 1,34 (м, 3H), 1,28-0,84 (м, 7H); и

Изомера 3 в виде трифторацетата (5 мг), LCMS, способ B: R_t=0,95 мин; (M+H)⁺=603,5. ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,35 (с, 1H), 7,68-7,50 (м, 1H), 7,22-7,04 (м, 3H), 6,77 (м, 3H), 4,08-3,90 (м, 2H), 3,90-3,56 (м, 4H), 3,56-3,32 (м, 1H), 2,76 (м, 1H), 2,45 (м, 1H), 2,11 (м, 1H), 1,88-1,58 (м, 4H), 1,55-1,24 (м, 6H), 1,22-0,98 (м, 6H), 0,92 (ушир., 1H), 0,84 (ушир., 1H).

Примеры 24A-24B

2-((4-(7-амино-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид (изомеры 1-2)

Стадия 1. трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)имино)-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

Указанный в заголовке продукт синтезировали в виде смеси множества диастереоизомеров в соответствии с методикой, описанной в Примерах 23A-23C, Стадия 1, а затем в Примерах 250A-250B, Стадия 1, используя в качестве исходного вещества трет-бутил-7-оксо-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (см. Примеры 23A-23C, Стадия 2). Указанный в заголовке продукт использовали на следующей стадии без очистки. LCMS, способ B: R_t=1,29-1,32 мин, множество пиков; (M+H)⁺=489,4.

Стадия 2. трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)амино)-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору остатка, полученного на стадии 1 в THF (5 мл) добавляли NaBH₄ (10 мг, 0,26 ммоль) и 1 каплю воды. Полученный раствор перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили добавлением воды со льдом и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои концентрировали в условиях вакуума, и очищали остаток методом препаративной RF-HPLC, способ A, с получением двух фракций диастереоизомеров: фракция 1 (5,8 мг, трифторацетат): LCMS, способ B: R_t=1,26 мин, (M+H)⁺=491,4; фракция 2 (18,8 мг, трифторацетат): LCMS, способ B: R_t=1,32 мин, (M+H)⁺=491,4.

Стадия 3. 2-метил-N-(8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)пропан-2-сульфинамид

К раствору трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)амино)-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (18,8 мг, 0,038 ммоль, фракция 2, Стадия 2) в DCM (3 мл) добавляли TFA (50 мкл), и перемешивали полученный раствор при к.т. в течение ночи. Затем, к раствору добавляли Et₃N для нейтрализации кислоты. После удаления растворителя, остаток использовали на следующей стадии без очистки.

Стадия 4. 2-((4-(7-((трет-бутилсульфинил)амино)-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид

К раствору неочищенного продукта, полученного на стадии 3 в изопропаноле (0,3 мл) добавляли 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид (промежуточный продукт 41, 20 мг) и Et₃N (100 мкл), и нагревали полученный раствор в микроволновом реакторе CEM при 110°C в течение 1 ч. Растворитель удаляли с получением неочищенного продукта, который использовали на следующей стадии без очистки; LCMS, способ B: R_t=1,06 мин, (M+H)⁺=706,6.

Стадия 5. 2-((4-(7-амино-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид (изомеры 1-2)

К неочищенному продукту, полученному на стадии 4, в MeOH (2 мл) добавляли 6н HCl (2 мл), и перемешивали полученный раствор при к.т. в течение ночи. Методом LC-MS обнаруживали два продукта с t_r=0,65, 0,69 мин и в соотношении 1:6; продукты выделяли методом препаративной RP-HPLC, способ A, с получением двух изомеров.

Изомер 1 в виде трифторацетата (0,67 мг); LCMS, способ B: R_t=0,65 мин, (M+H)⁺=602,5; ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,33, 8,31 (два с, 1H), 7,78, 7,71 (два ушир., 1H), 7,06 (м, 2H), 6,96 (м, 1H), 6,82 (м, 1H), 6,76 (м, 2H), 3,78-3,62 (м, 3H), 3,56-3,40 (м, 2H), 3,38-3,28 (м, 1H), 3,08-2,82 (м, 1H), 2,58-2,12 (м, 2H), 1,92-1,54 (м, 4H), 1,36 (м, 6H), 1,22 (м, 1H), 1,06 (м, 6H), 1,02-0,88 (м, 2H).

Изомер 2 в виде трифторацетата (4,24 мг); LCMS, способ B: R_t=0,69 мин, (M+H)⁺=602,5. ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,34 (с, 1H), 7,80 (ушир., 1H), 7,09 (м, 2H), 6,99 (м, 1H), 6,82 (м, 1H), 6,76 (м, 2H), 3,84-3,62 (м, 3H), 3,58-3,42 (м, 2H), 3,36-3,26 (м, 1H), 3,08-2,98 (м, 1H), 2,45-2,12 (м, 2H), 1,88-1,54 (м, 4H), 1,37 (м, 6H), 1,22 (м, 1H), 1,05 (м, 6H), 0,95 (м, 2H).

Пример 25

2-((4-(7-амино-8-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид (изомер 3)

Указанное в заголовке соединение синтезировали в соответствии с методикой, описанной в Примерах 24A-24B, с использованием фракции 1 (5,8 мг), полученной на стадии 2 Примеров 24A-24B. LCMS, способ B: R_t=0,69 мин, (M+H)⁺=602,5.

Примеры 26A-26B

5-фтор-2-((4-(8-(4-фторбензил)-7-(2-гидроксиэтил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид (изомеры 1-2)

Стадия 1. трет-Бутил-7-бензил-3-оксо-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору 7-бензил-2,7-диазапиро[4.4]нонан-3-она (500 мг, 2,17 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли Boc₂O (1,04 г, 4,8 ммоль), а затем при к.т. порциями добавляли DMAP (662 мг, 5,4 ммоль), и перемешивали смесь при к.т. в течение 2 суток. Реакционную смесь гасили добавлением H₂O (20 мл), и экстрагировали водную фазу EtOAc (30 мл). Органические слои объединяли, сушили над Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного продукта, который очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 70% EtOAc в гексанах с получением 400 мг трет-бутил-7-бензил-3-оксо-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде бесцветного масла (выход 56%). LCMS, способ A: t_R=0,73 мин, [M+H]⁺=331,4.

Стадия 2. трет-бутил-((1-бензил-3-(3-(4-фторфенил)-2-оксопропил)пирролидин-3-ил)метил)карбамат

При 0°C к раствору трет-бутил-7-бензил-3-оксо-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (280 мг, 0,85 ммоль) в безводном THF (2 мл) в атмосфере N₂ медленно добавляли 0,25M (4-фторбензил)магнийхлорид в Et₂O (5,0 мл, 1,25 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C, а затем гасили добавлением H₂O (10 мл). Затем, смесь экстрагировали EtOAc (2×30 мл). Органические слои промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и упаривали с получением неочищенного продукта, который очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 30% EtOAc в гексанах с получением 240 мг трет-бутил-((1-бензил-3-(3-(4-фторфенил)-2-оксопропил)пирролидин-3-ил)метил)карбамата в виде бесцветного масла (выход 65%). LCMS, способ A: t_R=1,10 мин, [M+H]⁺=441,4.

Стадия 3. трет-бутил-7-бензил-3-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-((1-бензил-3-(3-(4-фторфенил)-2-оксопропил)пирролидин-3-ил)метил)карбамата (240 мг, 0,55 ммоль) в DCM (3 мл) при к.т. добавляли TFA (0,5 мл), реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при к.т., а затем концентрировали в условиях пониженного давления.

Полученный неочищенный продукт растворяли в DCM (3 мл) и нейтрализовали TEA, а затем добавляли NaCNBH₃ (39 мг, 0,6 ммоль), и перемешивали смесь при к.т. в течение 1 ч. В реакционную смесь добавляли Boc₂O (135 мг, 0,65 ммоль), и перемешивали при к.т. в течение 4 ч. Смесь разбавляли H₂O (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2×20 мл). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 20% EtOAc в гексанах с получением 184 мг трет-бутил-7-бензил-3-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде бесцветного масла (выход 80%). LCMS, способ A: t_R=1,17 мин, [M+H]⁺=425,5.

Стадия 4. трет-бутил-3-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-бензил-3-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (184 мг, 0,43 ммоль) в MeOH (5 мл) добавляли Pd(OH)₂ на угле (сухая масса 5%, 123 мг, 43 мкмоль). Смесь перемешивали при к.т. в атмосфере подаваемого из баллона водорода в течение 40 ч и фильтровали через слой Celite™. Остаток концентрировали в условиях пониженного давления. Неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей реакционной стадии без дополнительной очистки. LCMS, способ A: t_R=1,01 мин, [M+H]⁺=335,5.

Стадия 5. трет-бутил-7-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-3-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

Раствор трет-бутил-3-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (94 мг, 0,28 ммоль) и 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида (промежуточный продукт 41, 100 мг, 0,31 ммоль) в iPrOH (2 мл) нагревали в микроволновом реакторе при 120°C в течение 2 ч. После охлаждения до к.т., смесь разбавляли H2O (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Органический слой промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 70% EtOAc в гексанах с получением 127 мг трет-бутил-7-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-3-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде бесцветного масла (выход 70%). LCMS, способ A: tR=1,48 мин, [M+H]⁺=650,4.

Стадия 6. 5-фтор-2-((4-(8-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-3-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (100 мг, 0,15 ммоль) в DCM (2 мл) при к.т. добавляли TFA (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч и нейтрализовали водным раствором NaHCO₃. Затем, смесь экстрагировали DCM (4×15 мл). Органические слои объединяли, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 10% MeOH в DCM с получением 65 мг 5-фтор-2-((4-(8-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамида в виде бесцветного масла (выход 80%). LCMS, способ A: t_R=0,92 мин, [M+H]⁺=550,5.

Стадия 6. 2-((4-(7-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-8-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид

К раствору 5-фтор-2-((4-(8-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамида (10 мг, 18 мкмоль) и (2-бромэтокси)(трет-бутил)диметилсилана (7 мг, 27 мкмоль) в DMF (0,5 мл) при к.т. добавляли K₂CO₃ (7 мг, 45 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 4 ч и экстрагировали EtOAc (4×5 мл). Органические слои объединяли, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей реакционной стадии без дополнительной очистки. LCMS, способ A: t_R=1,34 мин, [M+H]⁺=708,5.

Стадия 7. 5-фтор-2-((4-(8-(4-фторбензил)-7-(2-гидроксиэтил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид (изомеры 1-2)

К раствору неочищенного 2-((4-(7-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-8-(4-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамида в THF (0,5 мл) при к.т. добавляли раствор TBAF в THF (1M, 0,1 мл, 0,1 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч и концентрировали в условиях пониженного давления. Неочищенный продукт очищали на Gilson-HPLC с получением указанного в заголовке продукта в виде смеси двух рацематов.

Изомер 1: LCMS, способ A: t_R=0,93 мин, [M+H]⁺=594,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,58 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,33-7,25 (м, 5H), 7,27-7,09 (м, 2H), 3,97-3,88 (м, 8H), 3,68-3,61 (м, 2H), 3,48-3,41 (м, 2H), 3,26-3,21 (м, 1H), 3,15-3,05 (м, 1H), 2,90-2,85 (м, 1H), 2,15-2,04 (м, 4H), 1,55-1,52 (м, 3H), 1,39-1,37 (м, 3H), 1,23-1,21 (м, 3H), 1,11-1,07 (м, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,90, -77,38, -117,20.

Изомер 2: LCMS, способ A: t_R=0,92 мин, [M+H]⁺=594,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,56 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,33-7,31 (м, 2H), 7,28-7,25 (м, 1H), 7,24-7,20 (м, 2H), 7,10-7,08 (м, 2H), 3,90-3,81 (м, 8H), 3,62-3,53 (м, 2H), 3,48-3,41 (м, 2H), 3,24-3,13 (м, 2H), 2,90-2,81 (м, 1H), 2,16-2,10 (м, 2H), 1,94-1,91 (м, 2H), 1,53-1,51 (м, 3H), 1,29-1,27 (м, 3H), 1,21-1,19 (м, 3H), 1,11-1,07 (м, 3H).

Пример 27

6-((7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1-метил-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадия 1. трет-бутил-7-(((трифторметил)сульфонил)окси)-2-азаспиро[4.4]нонен-2-карбоксилат

К раствору LiHMDS (4 мл, 4 ммоль, 1M в THF) в THF (10 мл, безводный) при 78°C по каплям добавляли трет-бутил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (500 мг, 2 ммоль) в THF (4 мл, безводный), и перемешивали смесь при 78°C в атмосфере N₂ в течение 1 ч. Добавляли PhNTf₂ (1,1 г, 3 ммоль) в THF (6 мл, безводный), реакционную смесь нагревали до 12-21°C и перемешивали в течение 16 ч в атмосфере N_2. Полученную смесь гасили добавлением нас. водн. раствора NH₄Cl (30 мл) и экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Остаток очищали методом флэш-хроматографии (SiO₂, 1%~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением трет-бутил-7-(((трифторметил)-сульфонил)окси)-2-азаспиро[4.4]нонен-2-карбоксилата (с примесями) в виде бесцветного масла. Выход: 950 мг. ¹H-ЯМР (MeOD-d4): δ 5,69 (с, 1H), 3,38-3,50 (м, 2H), 3,20-3,30 (м, 2H), 2,65-2,80 (м, 2H), 1,90-2,10 (м, 3H), 1,77-1,85 (м, 1H), 1,46 (с, 9H).

Стадия 2. трет-бутил-7-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-азаспиро[4.4]нонен-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(((трифторметил)сульфонил)окси)-2-азаспиро[4.4]нонен-2-карбоксилата (950 мг, 2 ммоль, 55% чистота) и 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксоборолан) (760 мг, 3 ммоль) в диоксане (10 мл, безводный) в атмосфере N₂ добавляли Pd(dppf)Cl₂ (73 мг, 0,11 ммоль) и KOAc (390 мг, 4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 16 ч в атмосфере N_2. Полученную смесь концентрировали с получением неочищенного остатка. Остаток очищали методом флэш-хроматографии (SiO₂, 1%~100% EtOAc в петролейном эфире) с получением трет-бутил-7-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-азаспиро[4.4]нонен-2-карбоксилата (неочищенное вещество) в виде бесцветного масла. Выход: 800 мг. ¹H-ЯМР (MeOD-d4): δ 6,27 (с, 1H), 3,38-3,50 (м, 2H), 3,15-3,30 (м, 2H), 2,40-2,60 (м, 2H), 1,65-1,90 (м, 2H), 1,40-1,50 (м, 9H), 1,26 (с, 12H), 0,80-0,95 (м, 2H).

Стадия 3. трет-бутил-7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонен-2-карбоксилат

К раствору 4-хлор-5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиридимина (промежуточный продукт 10A, 50 мг, 0,2 ммоль), трет-бутил-7-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-азаспиро[4.4]нонен-2-карбоксилата (140 мг, 0,4 ммоль, 50% чистота) в диоксане (2,5 мл) и H₂O (0,5 мл) в атмосфере N₂ добавляли Pd(dppf)Cl₂ (15 мг, 0,02 ммоль) и Na₂CO₃ (42 мг, 0,4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 16 ч в атмосфере N_2. Полученную смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением остатка. Остаток очищали методом препаративной TLC (EtOAc:петролейный эфир=2:1) с получением трет-бутил-7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонен-2-карбоксилат в виде желтого масла. Выход: 50 мг. LCMS, способ C: R_t=0,914 мин; (M+H)⁺=446,0, 448,0 (изотопы хлора).

Стадия 4: трет-бутил-7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонен-2-карбоксилата (50 мг, 0,11 ммоль) в MeOH (5 мл, безводный) и THF (5 мл, безводный) добавляли PtO₂ (5 мг, 10%). Полученную смесь перемешивали при 25°C приблизительно в течение 16 ч в атмосфере H₂ (20 фунт/кв.дюйм). Смесь фильтровали, фильтрат концентрировали и очищали методом препаративной TLC на силикагеле (EtOAc:петролейный эфир=1:5) с получением трет-бутил-7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде желтого масла. Выход: 30 мг (61%). LCMS, способ C: R_t=0,923 мин, (M+H)⁺=448,0, 450,0 (изотопы хлора).

Стадия 5. 7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан

Раствор трет-бутил-7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (30 мг, 0,07 ммоль) в смеси TFA-CH₂Cl₂ (3 мл, об.:об.=1:4) перемешивали при 10-21°C приблизительно в течение 3 ч. Затем, смесь концентрировали. Полученную смесь корректировали до pH 8 добавлением нас. водн. NaHCO₃ и экстрагировали CH₂Cl₂ (2×20 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (10 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением 7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонана в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 30 мг. LCMS, способ C: R_t=0,642 мин; (M+H)⁺=348,0, 350,0 (изотопы хлора).

Стадия 6: 6-((7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1-метил-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

К раствору 7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонана (30 мг, 0,07 ммоль, неочищ.) и 1-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (12 мг, 0,07 ммоль) в MeOH (3 мл, безводный) добавляли NaBH₃CN (22 мг, 0,35 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 10-21°C приблизительно в течение 16 ч. Смесь концентрировали и очищали методом препаративной RP-HPLC с кислой подвижной фазой, способ A, с получением 6-((7-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1-метил-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она (трифторацетат) в виде белого твердого вещества. Выход: 15 мг. LCMS, способ E: R_t=0,902 мин; (M+H)⁺=508,3, 510,3 (изотопы хлора). ¹H-ЯМР (MeOD-d4): δ 8,70-8,85 (м, 1H), 7,99 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,35-7,50 (м, 1H), 7,10-7,35 (м, 5H), 4,35-4,50 (м, 2H), 3,80-3,95 (м, 1H), 3,35-3,70 (м, 6H), 3,20-3,30 (м, 1H), 1,75-2,40 (м, 8H). ¹⁹F-ЯМР (MeOD-d4): δ -77,02, -116,39.

Пример 28

5-((7-(3-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиридин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Стадия 1. 4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенол

К раствору 2-бром-4-фторфенола (650 мг, 3,40 ммоль) в диоксане (15 мл) и H₂O (3 мл) добавляли (4-изопропилпиримидин-5-ил)бороновую кислоту (622 мг, 3,74 ммоль), Pd(dppf)Cl₂ (125 мг, 0,17 ммоль) и Na₂CO₃ (720 мг, 6,55 ммоль). Полученную смесь дегазировали N₂ и перемешивали на масляной бане при 90°C в атмосфере N₂ приблизительно в течение 20 ч. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления для удаления диоксана, и разбавляли полученный остаток EtOAc (20 мл). Суспензию фильтровали через тонкий слой силикагеля. Фильтрат разбавляли EtOAc (20 мл) и водой (20 мл). Органический слой разделяли, промывали солевым раствором (2×30 мл) и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:EtOAc=10:1→1:1) с получением 4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенола в виде желтого твердого вещества. Выход: 300 мг. LCMS, способ C: R_t=0,705 мин; (M+H)⁺=233,1.

Стадия 2. трет-бутил-7-(3-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиридин-4-ил)-2,7-диазаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору 4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенола (250 мг, 1,08 ммоль) в DMSO (25 мл) добавляли трет-бутил-7-(3-бромпиридин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (412 мг, 1,08 ммоль), CuI (206 мг, 1,08 ммоль), 2-пиколиновую кислоту (266 мг, 2,16 ммоль) и K₃PO₄ (916 мг, 4,32 ммоль). Полученную смесь продували N₂ в течение 10 мин и перемешивали на масляной бане при 110°C в атмосфере N₂ приблизительно в течение 24 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали EtOAc (2×30 мл). Органические слои промывали солевым раствором (3×40 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом препаративной TLC (EtOAc) с получением трет-бутил-7-(3-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиридин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде желтого твердого вещества. Выход: 25 мг. LCMS, способ C: R_t=0,747 мин; (M+H)⁺=534,1.

Стадии 3-4. 5-((7-(3-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиридин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадии 3 и 4 проводили, как описано в Примере 1, стадии 4-5. LCMS, способ C: R_t=1,190 мин; (M+H)⁺=580,3. ¹H-ЯМР (MeOD-d4): δ 9,12 (с, 1H), 8,67 (с, 1H), 7,91-8,10 (м, 2H), 7,10-7,38 (м, 6H), 6,89 (с, 1H), 4,40-4,48 (м, 2H), 3,37-3,87 (м, 8H), 3,00-3,14 (м, 1H), 1,99-2,25 (м, 4H), 1,11-1,29 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (MeOD-d4): δ -118,50, -76,93.

Пример 29

5-((7-(5-(2-(3-циклопропил-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он (рацемическая смесь)

Стадия 1. 2-хлор-3-циклопропил-6-метоксипиридин

В круглодонную колбу добавляли 3-бром-2-хлор-6-метоксипиридин (10,57 г), циклопропилбороновую кислоту (4,28 г), ацетат палладия (533 мг), трициклогексинфосфин (1,33 г) и фосфат калия (35,2 г). К этой твердой смеси добавляли толуол:H₂O (158 мл; соотношение 9:1). Гетерогенную смесь продували струей азота в течение 1 мин, а затем нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (100 мл) и водой (100 мл). Фазы разделяли, и дважды обратно экстрагировали водную фазу этилацетатом (по 100 мл каждый раз). Объединенные органические фазы сушили над сульфатом магния, и очищали неочищенный остаток методом флэш-хроматографии (этилацетат/гексаны в качестве элюента) с получением 8,6 г 2-хлор-3-циклопропил-6-метоксипиридина в виде бесцветного масла. LCMS, способ A: R_t=0,61 мин; (M+H)⁺=222,2, 224,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,45 (с, 1H), 8,33 (с, 1H), 3,90-4,00 (м, 2H), 3,70-3,80 (м, 2H), 3,20-3,55 (м, 4H), 1,80-2,0 (м, 4H), 1,27 (с, 9H).

Стадия 2. 6-хлор-5-циклопропилпиридин-2(1H)-он

В круглодонную колбу добавляли 2-хлор-3-циклопропил-6-метоксипиридин (15,6 г) и ацетонитрил (170 мл). К этому раствору добавляли хлортриметилсилан (21,6 мл), а затем йодид натрия (25,6 г). Гетерогенный раствор нагревали при 50°C в течение 3 ч. Затем, добавляли метанол (40 мл) для гашения реакционной смеси, и удаляли летучие вещества в условиях вакуума. Добавляли дихлорметан (250 мл), и перемешивали раствор в течение 30 мин. Твердые вещества осаждали, отфильтровывали, и концентрировали фильтрат. Неочищенный остаток очищали методом флэш-хроматографии (120 г SiO₂, MeOH/CH₂Cl₂ в качестве элюента) с получением светло-коричневого масла (14 г). LCMS, способ A: R_t=0,0,54 мин; (M+H)⁺=222,2, 224,2 ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7,19 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,59 (д, J=8,0 Гц, 1H), 3,93 (с, 3H), 1,95-2,10 (м, 1H), 0,90-1,05 (м, 2H), 0,55-0,65 (м, 4H).

Стадия 3. 6-хлор-5-циклопропил-1-метилпиридин-2(1H)-он

В круглодонную колбу добавляли 6-хлор-5-циклопропилпиридин-2(1H)-он (7,9 г), карбонат калия (12,9 г), бромид лития (8,12 г) и тетрабутиламмония бромид (1,5 г). К этой твердой смеси добавляли толуол:H₂O (156 мл, соотношение 100:1), а затем метилйодид (14,6 мл), и нагревали гетерогенную смесь при 50°C. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и промывали 1M HCl. Органическую фазу сушили над MgSO₄ и концентрировали. Неочищенное вещество очищали методом флэш-хроматографии (120 г SiO₂, MeOH/CH₂Cl₂ в качестве элюента) с получением 4,5 г 6-хлор-5-циклопропил-1-метилпиридин-2(1H)-она в виде светло-желтого масла. LCMS, способ A:: R_t=0,0,63 мин; (M+H)⁺=222,2, 224,2

Стадия 4. 5-циклопропил-6-(5-фтор-2-гидроксифенил)-1-метилпиридин-2(1H)-он

В круглодонную колбу емкостью 100 мл добавляли (5-фтор-2-гидроксифенил)бороновую кислоту (852 мг), палладацикл Sphos Gen 2 (39 мг), фторид калия (951 мг) и 6-хлор-5-циклопропил-1-метилпиридин-2(1H)-он (500 мг). К этой твердой смеси добавляли диоксан (8 мл) и воду (2 мл). Раствор продували N₂ в течение 1 мин, а затем нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Добавляли толуол:EtOAc (30 мл, соотношение 1:1), а затем воду (30 мл). Твердое вещество отфильтровывали и промывали 15 мл толуол:EtOAc (1:1) с получением 581 мг целевого продукта. LCMS (способ продолжительностью 16 мин) -R_t=5,40 мин.; M+H=260,56 ¹H-ЯМР (d4-MeOH) -7,27 (д, 1H), 7,11 (дд, 1H), 6,99-6,3 (м, 2H), 6,55 (д, 1H), 3,32 (с, 3H), 1,40 (м, 1H), 0,71-0,66 (м, 1H), 0,49-0,60 (м, 3H) м.д.

Стадии 5-7. 5-((7-(5-(2-(3-циклопропил-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Указанный в заголовке продукт получали, как описано для стадий 2-4 Примера 28. LCMS, способ G: R_t=3,15 мин.; M+H=608,64. ¹H-ЯМР (d4-MeOH) 8,21 (с, 1H), 7,75 (с, 1H), 7,30-7,34 (м, 2H), 7,15 (м, 1H), 6,97-7,06 (м, 4H), 6,54 (д, 1H), 3,57-3,69 (м, 4H), 3,42-3,52 (м, 2H), 3,31 (д, 3H), 2,72 (ушир. м, 2H), 2,55 (ушир. м, 2H), 1,89 (м, 2H), 1,79 (м, 2H), 1,28 (м, 1H), 0,75 (м, 1H), 0,66 (м, 1H), 0,55 (м, 1H), 0,48 (м, 1H) м.д.

Примеры 29A-29B

5-((7-(5-(2-(3-циклопропил-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он (изомеры 1-2)

Соединение Примера 29 разделяли методом SFC, способ A, с получением двух изомеров.

Пример 29A (изомер 1): ¹H-ЯМР (CD₃OD₎: δ 8,24 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,30-7,40 (м, 2H), 7,10-7,20 (м, 1H), 6,95-7,07 (м, 4H), 6,50-6,60 (м, 1H), 3,40-3,70 (м, 6H), 3,30-3,40 (м, 3H), 2,60-2,70 (м, 2H), 2,40-2,50 (м, 2H), 1,75-1,95 (м, 4H), 1,20-1,35 (м, 1H), 0,40-0,85 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР: (CD₃OD 400 МГц): δ -119,20~-119,12. SFC: t_R=17,556 мин, э.и.=98,93%. Оптическое вращение: дуг. град.=0,389.

Пример 29B (изомер 2): ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,24 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,30-7,40 (м, 2H), 7,10-7,20 (м, 1H), 7,00-7,07 (м, 4H), 6,50-6,60 (м, 1H), 3,50-3,70 (м, 6H), 3,30-3,40 (м, 3H), 2,60-2,75 (м, 2H), 2,40-2,50 (м, 2H), 1,75-1,95 (м, 4H), 1,20-1,35 (м, 1H), 0,45-0,85 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР: (CD₃OD): δ -119,21~-119,13. SFC: t_R=14,363 мин, э.и.=98,46%.

Пример 30

N-(5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)-4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиридин-3-амин

Указанный в заголовке продукт синтезировали способом, описанным для Примера 28. На стадии 1 использовали 2-бром-4-фторанилин и 2-изопропилфенилбороновую кислоту. На стадии 2 использовали трет-бутил-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат. На стадии 5 использовали тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегид. LCMS, способ A: R_t=0,96 мин; (M+H)⁺=500. ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,00 (д, J=6,4 Гц, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,49-7,43 (м, 2H), 7,31-7,23 (м, 2H), 7,02 (с, 1H), 6,88 (д, J=7,2 Гц, 1H), 6,64-6,57 (м, 2H).

Пример 31

2-(5-((4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

Стадия 1. метил-2-бром-5-фторбензоат

К раствору 2-бром-5-фторбензойной кислоты (4,00 г, 18,26 ммоль) в MeOH (120 мл, безводный) при 0°C по каплям добавляли SOCl₂ (3,26 г, 27,40 ммоль), и нагревали смесь при 68°C в течение 18 ч. Методом TLC (петролейный эфир:EtOAc=5:1) подтверждали целевой продукт. Смесь концентрировали, остаток смешивали с EtOAc (200 мл), промывали NaHCO₃ (150 мл), солевым раствором (150 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением метил-2-бром-5-фторбензоата в виде бесцветного масла. Выход: 2,7 г LCMS, способ C: R_t=0,77 мин.

Стадия 2: 2-(2-бром-5-фторфенил)пропан-2-ол

К раствору 2-бром-5-фторбензоата (2,70 г, 11,59 ммоль) в THF (85 мл, безводный) при 0°C в атмосфере N₂ по каплям добавляли MeMgBr (9,66 мл, 28,97 ммоль, 3,0M в Et₂O), и перемешивали смесь при 23-28°C в течение 4 ч. Смесь гасили добавлением нас. водн. NH₄Cl (80 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический слой промывали солевым раствором (40 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной ISCO хроматографии на силикагеле (13% EtOAc в петролейном эфире) с получением 2-(2-бром-5-фторфенил)пропан-2-ола в виде бесцветного масла. Выход: 2,5 г (94%). ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7,42-7,57 (м, 2H), 6,77-6,88 (м, 1H), 1,75 (с, 6H).

Стадия 3. 1-бром-4-фтор-2-(2-фторпропан-2-ил)бензол

К раствору 2-(2-бром-5-фторфенил)пропан-2-ола (2,54 г, 10,90 ммоль) при 78°C по каплям добавляли DAST (2,28 г, 14,17 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 21-27°C в течение 18 ч. Смесь гасили добавлением нас. водн. NH₄Cl (50 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл), промывали солевым раствором (50 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали методом колоночной ISCO хроматографии (5% EtOAc в петролейном эфире) с получением 1-бром-4-фтор-2-(2-фторпропан-2-ил)бензола в виде бесцветного масла. Выход: 2,2 г. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7,49-7,56 (м, 1H), 7,40 (дд, J=10,5, 3,0 Гц, 1H), 6,81-6,90 (м, 1H), 1,88 (с, 3H), 1,82 (с, 3H).

Стадия 4. 4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ол

Раствор 1-бром-4-фтор-2-(2-фторпропан-2-ил)бензола (400 мг, 1,70 ммоль), (5-фтор-2-гидроксифенил)бороновой кислоты (316 мг, 2,04 ммоль) и K₃PO₄ (720 мг, 3,40 ммоль) в диоксане (9 мл) и H₂O (3 мл) барботировали N₂ в течение 1 мин, а затем добавляли палладацикл SPhos (62 мг, 0,086 ммоль). Полученную смесь нагревали в условиях микроволновой обработки при 115°C в течение 0,5 ч. Смесь разбавляли EtOAc (30 мл) и H₂O (30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом препаративной TLC на силикагеле (петролейный эфир:EtOAc=5:1) с получением 4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ола в виде светло-желтого геля. Выход: 380 мг. LCMS, способ A: R_t=1,070 мин; (M+H)⁺=247,1.

Стадия 5. трет-бутил-6-(5-((4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

Раствор трет-бутил-6-(5-йодпиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (231 мг, 0,58 ммоль) в DMSO (6 мл) барботировали N₂ в течение 1 мин, а затем добавляли раствор 4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ола (183 мг, 0,69 ммоль) в DMSO (2 мл). Полученную смесь нагревали при 110°C в течение 22 ч. Затем, смесь разбавляли EtOAc (25 мл) и H₂O (25 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом препаративной HPLC с щелочной подвижной фазой с получением трет-бутил-6-(5-((4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата в виде бесцветного геля. Выход: 90 мг. LCMS, способ C: R_t=0,808 мин; (M+H)⁺=541,2.

Стадия 6. 2-(5-((4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

К раствору трет-бутил-6-(5-((4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (40 мг, 0,09 ммоль) в охлажденном до 0°C DCM (2 мл, безводный) добавляли TFA (0,25 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 4 ч. Смесь гасили добавлением нас. водн. NaHCO₃ (5 мл). Затем, добавляли DCM (20 мл), органический слой разделяли, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного 2-(5-((4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана в виде светло-желтого геля, который непосредственно использовали на следующей стадии. Выход: 44 мг.

Стадия 7. 2-(5-((4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептаны

К раствору 2-(5-((4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана (44 мг, 0,10 ммоль, неочищ.) и тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегида (15 мг, 0,13 ммоль) в MeOH (2 мл, безводный) добавляли NaBH₃CN (12 мг, 0,20 ммоль), и перемешивали смесь при 20-25°C в течение 17 ч. Методом LCMS обнаруживали, что целевой продукт получали с выходом ~30%, а также получали побочный продукт с выходом ~32%. Смесь концентрировали, и остаток очищали методом RP-HPLC с щелочной подвижной фазой, способ D, с получением 2-(5-((4',5-дифтор-2'-(2-фторпропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептанов в виде бесцветного геля. Выход: 6,7 мг. LCMS, способ C: R_t=0,88 мин; (M+H)⁺=539,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,15 (с, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,25 (дд, J=10,8, 2,4 Гц, 1H), 7,04-7,20 (м, 4H), 7,00 (дд, J=9,2, 4,8 Гц, 1H), 4,14-4,22 (м, 4H), 3,93 (дд, J=11,2, 4,0 Гц, 2H), 3,35-3,45 (м, 6H), 2,38 (д, J=6,4 Гц, 2H), 1,57-1,66 (м, 8H), 1,19-1,33 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -115,50, -121,33, -132,73.

Пример 32

5-фтор-N-изопропил-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензолсульфонамид

Стадия 1. трет-бутил-6-(5-(2-(бензилтио)-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

Смесь трет-бутил-6-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 20, 200 мг, 0,43 ммоль), бензилмеркаптана (0,06 мл, 0,52 ммоль), Pd2(dba)3 (39 мг, 10 мол.%), Xantphos (50 мг, 20 мол.%) и iPrNEt (0,15 мл, 0,86 ммоль) в диоксане нагревали до 110°C в микроволновом реакторе CEM в течение 2,5 ч. Затем, реакционную смесь фильтровали через Celite™, и упаривали растворители. Неочищенный остаток очищали методом колоночной ISCO флэш-хроматографии (элюирование 100% EtOAc) с получением 210 мг трет-бутил-6-(5-(2-(бензилтио)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата в виде желтого твердого вещества (96%). LCMS, способ B: R_t=1,544 мин; (M+H)⁺=509,6.

Стадия 2. трет-бутил-6-(5-(2-(хлорсульфонил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-6-(5-(2-(бензилтио)-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (50 мг, 0,10 ммоль) в MeCN (2 мл), H2O (0,10 мл) и AcOH (0,10 мл) при 0°C добавляли 1,3-дихлор-5,5-диметилимидазолидин-2,4-дион (39 мг, 0,20 ммоль). Реакционную смесь нагревали до к.т. и перемешивали в течение 2 ч. Для выделения продукта затем добавляли EtOAc (5 мл) и H2O (5 мл). EtOAc-слой разделяли, сушили над Na2SO4 и упаривали. Неочищенный остаток очищали методом колоночной ISCO флэш-хроматографии (элюирование 10% MeOH в DCM) с получением 21 мг трет-бутил-6-(5-(2-(хлорсульфонил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата. LCMS, способ B: Rt=1,492 мин; (M+H)⁺=485,47 и 487,50

Стадия 3. трет-бутил-6-(5-(4-фтор-2-(N-изопропилсульфамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-6-(5-(2-(хлорсульфонил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (21 мг, 0,04 ммоль) в DCM (2 мл) при к.т. добавляли пропан-2-амин (0,20 мл). Спустя 1 ч, растворители удаляли, и растирали неочищенный продукт с 50% EtOAc в гексанах с получением 15 мг трет-бутил-6-(5-(4-фтор-2-(N-изопропилсульфамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (75%). LCMS, способ B: R_t=1,374 мин; (M+H)⁺=508,64

Стадия 4. 2-((4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензолсульфонамид

К раствору трет-бутил-6-(5-(4-фтор-2-(N-изопропилсульфамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (15 мг) в DCM (3 мл) при к.т. добавляли TFA (1 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при к.т., а затем удаляли растворители с получением 2-((4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензолсульфонамида трифторацетата. Вещество смешивали с DCM, и добавляли Et₃N (0,10 мл). После завершения растворения вещества, растворители удаляли с получением продукта в виде свободного основания. Это неочищенное вещество использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 5. 5-фтор-N-изопропил-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензолсульфонамид

К раствору неочищенного 2-((4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензолсульфонамида и тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегида (14 мг, 0,12 ммоль) в дихлорэтане (2 мл, с 1% AcOH) при к.т. добавляли NaBH(OAc)₃ (25 мг, 0,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, и подтверждали завершение реакции методом LCMS-анализа. Путем упаривания растворителя с последующей очисткой на Gilson HPLC получали 5-фтор-N-изопропил-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензолсульфонамида трифторацетат. LCMS, способ B: R_t=1,293 мин; (M+H)⁺=506,57. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,55 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,77-7,75 (м, 2H), 7,53-7,49 (м, 1H), 7,40-7,37 (м, 1H), 4,60-4,40 (м, 8H), 3,96 (д, J=11,6 Гц, 2H), 3,57-3,54 (м, 1H), 3,44 (т, J=11,6 Гц, 2H), 3,17 (д, J=6,8 Гц, 2H), 2,00-1,84 (м, 1H), 1,63 (д, J=11,6 Гц, 2H), 1,40-1,32 (м, 2H), 1,17 (д, J=6,0 Гц, 6H).

Пример 33

5-((7-(5-(4-фтор-2-(2-метоксибутан-2-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(2-гидроксибутан-2-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 53 мг, 0,11 ммоль) и бутан-2-она (5 эквив.) в THF (2 мл) при 78°C добавляли 1,6M раствор n-BuLi в гексанах (0,08 мл). Реакционную смесь нагревали до к.т. в течение 1 ч, по достижению к.т. добавляли насыщенный водный раствор NH₄Cl (1 мл), а таже EtOAc (5 мл) для выделения продукта. Путем очистки неочищенного остатка методом колоночной ISCO флэш-хроматографии (элюирование 5% MeOH в DCM) получали 20 мг трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(2-гидроксибутан-2-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (38%). LCMS, способ B: R_t=1,589 мин; (M+H)⁺=487,62. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,42 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,36 (д, J=9,2 Гц, 1H), 6,90-6,86 (м, 1H), 6,58-6,50 (м, 1H), 3,80-3,25 (м, 8H), 2,53-2,42 (м, 1H), 2,15-2,05 (м, 1H), 1,95-1,82 (м, 5H), 1,65 (с, 3H), 1,45 (с, 9H), 0,84 (т, J=7,6 Гц, 3H).

Стадия 2. 2-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)бутан-2-ол

К трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(2-гидроксибутан-2-ил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилату (10 мг) при к.т. добавляли 4н раствор HCl в диоксане (2 мл), и перемешивали реакционную смесь в течение 2 ч. The растворители удаляли с получением продукта в виде гидрохлорида. К продукту добавляли DCM (2 мл) и Et3N (0,10 мл), и удаляли растворители с получением неочищенного 2-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)бутан-2-ола в виде свободного основания, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3. 5-((7-(5-(4-фтор-2-(2-метоксибутан-2-ил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

К раствору неочищенного 2-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)бутан-2-ола и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 7 мг, 0,04 ммоль) в MeOH (3 мл) при к.т. добавляли NaBH3CN (8 мг, 0,13 ммоль), и перемешивали реакционную смесь в течение 15 ч. Путем упаривания растворителя с последующей очисткой методом RP-HPLC, способ A, получали 5-((7-(5-(4-фтор-2-(2-метоксибутан-2-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-она трифторацетат. LCMS, способ G: Rt=4,01 мин; (M+H)⁺=547,62. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,52 (ушир. с, 1H), 7,65 (м, 1H), 7,34 (д, J=9,6 Гц, 1H), 7,21-7,18 (м, 2H), 7,13-7,10 (м, 3H), 4,43 (с, 2H), 4,20-3,95 (м, 4H), 3,70-3,50 (м, 2H), 3,47-3,36 (м, 2H), 3,15 (с, 3H), 2,34-2,05 (м, 4H), 1,96-1,87 (м, 2H), 1,58 (с, 3H), 0,76 (т, J=7,6 Гц, 3H).

Пример 34

5-((7-(5-(4-фтор-2-(3-гидроксипентан-3-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-гидроксипентан-3-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 106 мг, 0,22 ммоль) и пентан-3-она (0,10 мл, 1,07 ммоль) в THF (3 мл) при 78°C добавляли 1,6M раствор n-BuLi в гексанах (0,66 мл). Реакционную смесь нагревали до к.т. в течение 1 ч. По достижению к.т., добавляли насыщенный водный раствор NH₄Cl (2 мл), а также EtOAc (8 мл) для выделения продукта. Путем очистки неочищенного остатка методжом колоночной флэш-хроматографии (элюирование 5% MeOH в DCM) получали 32 мг трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-гидроксипентан-3-ил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата.

Стадия 2. 3-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)пентан-3-ол

К трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-гидроксипентан-3-ил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилату (32 мг) при к.т. добавляли 4н раствор HCl в диоксане (2 мл), и перемешивали реакционную смесь в течение 2 ч. Затем, растворители удаляли с получением продукта в виде гидрохлорида. К продукту добавляли DCM (2 мл) и Et₃N (0,10 мл), и удаляли растворители с получением неочищенного 3-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)пентан-3-ола в виде свободного основания, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3. 5-((7-(5-(4-фтор-2-(3-гидроксипентан-3-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

К раствору полученного выше неочищенного 3-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-пентан-3-ола и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 20 мг, 0,12 ммоль) в MeOH (3 мл) при к.т. добавляли NaBH₃CN (10 мг, 0,16 ммоль), и перемешивали реакционную смесь в течение 4 ч. Путем упаривания растворителя с последующей RP-HPLC, способ A, получали 5-((7-(5-(4-фтор-2-(3-гидроксипентан-3-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он. LCMS, способ G: R_t=3,197 мин; (M+H)⁺=547,61. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,52 (ушир. с, 1H), 7,60 (м, 1H), 7,45 (дд, J=2,8, 10,6 Гц, 1H), 7,21-7,18 (м, 2H), 7,11 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,05-6,96 (м, 1H), 4,43 (с, 2H), 4,20-3,90 (м, 4H), 3,70-3,50 (м, 2H), 3,48-3,33 (м, 2H), 2,34-1,90 (м, 6H), 1,89-1,80 (м, 2H), 0,78 (т, J=7,2 Гц, 6H).

Примеры 35-36

2-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-N-метилциклопропанкарбоксамид (Пример 35) и 5-((7-(5-(4-фтор-2-(3-гидрокси-3-метилбутил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он (Пример 36)

и

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-метокси-3-оксопропил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору (E)-трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-метокси-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (Пример 37, Стадия 1, 450 мг, 0,9 ммоль) в безводном MeOH (25 мл) добавляли Pd/C (45 мг). Смесь перемешивали в атмосфере H₂ (30 фунт/кв.дюйм) при 14-25°C в течение 18 ч. Методом LCMS обнаруживали завершение реакции. Смесь фильтровали и концентрировали с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-метокси-3-оксопропил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде светло-желтого геля. Выход: 402 мг. LCMS, способ C: R_t=0,749 мин; (M+H)⁺=501,2.

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-гидрокси-3-метилбутил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-метокси-3-оксопропил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (200 мг, 0,4 ммоль) в безводном THF (5 мл) при 0°C в течение 10 мин по каплям добавляли метилмагнийбромид (0,53 мл, 1,6 ммоль). Смесь гасили добавлением насыщенного NH4Cl (водн.) (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл×2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл×3), сушили над Na2SO4 и концентрировали для очистки на колонке ISCO с силикагелем (100% DCM → 2% MeOH в DCM) с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-гидрокси-3-метилбутил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде бесцветного масла. Выход: 180 мг. LCMS, способ C: R_t=0,744 мин; (M+H)⁺=501,3.

Стадия 3. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-фтор-3-метилбутил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-гидрокси-3-метилбутил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (180 мг, 0,16 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (3 мл) при 0°C по каплям в течение 5 мин добавляли DAST (70 мг, 0,43 ммоль), а затем перемешивали смесь при 17-25°C в течение 2 ч. Методом LCMS обнаруживали целевое соединение и полное расходование трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-гидрокси-3-метилбутил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата. Смесь вливали в насыщенный NH₄Cl (водн.) (5 мл) и экстрагировали DCM (10 мл×3).Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, концентрировали и очищали методом препаративной HPLC с кислой подвижной фазой с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-фтор-3-метилбутил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде бесцветного масла. Выход: 84 мг. LCMS, способ C: R_t=0,790 мин; (M+H)⁺=503,3.

Стадия 4. 2-(5-(4-фтор-2-(3-фтор-3-метилбутил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-фтор-3-метилбутил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (80 мг, 0,16 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (4 мл) добавляли TFA (0,5 мл), и перемешивали полученную смесь при 16-25°C в течение 2 ч. Затем, смесь вливали в насыщенный NaHCO₃ (водн.) (10 мл) и экстрагировали DCM (10 мл×2). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 2-(5-(4-фтор-2-(3-фтор-3-метилбутил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонана в виде бесцветного масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 50 мг.

Стадия 5: 5-((7-(5-(4-фтор-2-(3-фтор-3-метилбутил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он и 5-((7-(5-(4-фтор-2-(3-гидрокси-3-метилбутил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

К раствору 2-(5-(4-фтор-2-(3-фтор-3-метилбутил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонана (50 мг, 0,12 ммоль) в безводном MeOH (2 мл) добавляли 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид (промежуточный продукт 40, 22 мг, 0,14 ммоль) и NaBH₃CN (23 мг, 0,37 ммоль), и перемешивали раствор при 50°C в течение 16 ч. Методом LCMS обнаруживали целевое соединение и полное расходование 2-(5-(4-фтор-2-(3-фтор-3-метилбутил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонана. Смесь очищали методом препаративной RP-HPLC с щелочной подвижной фазой, способ D, с получением 5-((7-(5-(4-фтор-2-(3-фтор-3-метилбутил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она и 5-((7-(5-(4-фтор-2-(3-гидрокси-3-метилбутил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она в виде белых твердых веществ.

Пример 35. LCMS, способ E: R_t=0,618 мин; (M+H)⁺=610,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,23 (д, J=5,6 Гц, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,05-7,12 (м, 1H), 7,03 (с, 1H), 6,95-7,01 (м, 2H), 6,85-6,95 (м, 1H), 6,70-6,75 (м, 1H), 3,63-3,83 (м, 4H), 3,61 (с, 2H), 2,72-2,78 (м, 2H), 2,60-2,70 (м, 2H), 2,48-2,59 (м, 2H), 1,78-1,98 (м, 6H), 1,33 (д, J=21,6 Гц, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,97, -140,72.

Пример 36. LCMS, способ C: R_t=0,586 мин; (M+H)⁺=547,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,23 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,09 (дд, J=9,2 2,8 Гц, 1H), 7,05 (с, 1H), 6,95-7,00 (м, 2H), 6,85-6,95 (м, 1H), 6,72 (дд, J=8,8 4,8 Гц, 1H), 3,69-3,83 (м, 4H), 3,65 (с, 2H), 2,49-2,75 (м, 6H), 1,90-2,00 (м, 2H), 1,84 (т, J=6,8 Гц, 2H), 1,67-1,76 (м, 2H), 1,20 (с, 6H). ¹⁹F-ЯМР (MeOD): δ -121,18.

Пример 37

метил-2-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)циклопропанкарбоксилат

Стадия 1. (E)-трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-метокси-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 1,20 г, 2,44 ммоль), метилакрилата (838 мг, 9,74 ммоль) и Et₃N (246 мг, 2,44 ммоль) в THF (24 мл, безводный) в атмосфере N₂ добавляли P(o-Tol)₃ (292 мг, 0,96 ммоль), а затем Pd₂(dba)₃ (448 мг, 0,48 ммоль). Смесь нагревали в герметизированной пробирке при 80°C в течение 17 ч. Затем, смесь разбавляли EtOAc (300 мл) и H₂O (30 мл). Органический слой фильтровали, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом RP-HPLC, способ D, с получением (E)-трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-метокси-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде бесцветного геля.

Выход: 482 мг. LCMS, способ E: R_t=1,005 мин; (M+H)⁺=499,3.

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(2-(метоксикарбонил)-циклопропил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К суспензии NaH (43 мг, 1,07 ммоль, 60% в минеральном масле) в DMSO (3 мл) в атмосфере N₂ добавляли Me₃SOI (383 мг, 1,74 ммоль). Затем, добавляли раствор (E)-трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(3-метокси-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (383 мг, 1,74 ммоль) в DMSO (3 мл) и THF (3 мл), и перемешивали смесь при 18-23°C в течение 4 ч. Затем, смесь гасили добавлением 1н HCl (20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл). Органический слой промывали H₂O, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной ISCO хроматографии (EtOAc) с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(2-(метоксикарбонил)-циклопропил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде бесцветного геля. Выход: 300 мг. LCMS, способ E: R_t=1,014 мин; (M+H)⁺=513,3.

Стадия 3: метил-2-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)циклопропанкарбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(2-(метоксикарбонил)-циклопропил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (300 мг, 0,58 ммоль) в DCM (8 мл) добавляли HCl в диоксане (1,6 мл, 4н). Смесь перемешивали при 11-16°C в течение 4 ч, после чего методом TLC (DCM:метанол=10:1) обнаруживали завершение реакции. Смесь концентрировали, смешивали с DCM (20 мл), промывали нас. водн. раствором NaHCO₃ (20 мл), солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением метил-2-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)циклопропанкарбоксилата в виде бесцветного геля. Выход: 220 мг. LCMS, способ E: R_t=0,846 мин; (M+H)⁺=413,3.

Стадия 4. метил-2-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)циклопропанкарбоксилат

К раствору метил-2-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)циклопропанкарбоксилата (110 мг, 0,27 ммоль) и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 53 мг, 0,33 ммоль) в MeOH (2 мл) добавляли NaBH₃CN (34 мг, 0,54 ммоль). Смесь перемешивали при 11-16°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали и очищали методом хроматографии на силикагеле (DCM:MeOH=10:1) с получением метил-2-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)циклопропанкарбоксилата в виде белого твердого вещества. Выход: 80 мг. LCMS, способ E: R_t=0,898 мин; (M+H)⁺=599,3. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 9,95-10,20 (с, 2H), 8,32-8,39 (м, 1H), 7,68 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,10 (д, J=6,0 Гц, 1H), 6,88-6,97 (м, 2H), 6,77-6,86 (м, 1H), 6,58-6,72 (м, 2H), 3,51-3,79 (м, 9H), 2,41-2,81 (м, 5H), 1,75-1,98 (м, 5H), 1,55-1,60 (м, 1H), 1,25-1,38 (м, 1H). ¹⁹F-ЯМР (CDCl₃): δ -119,00.

Пример 38

2-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-N-метилциклопропанкарбоксамид

К раствору метил-2-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)циклопропанкарбоксилата (Пример 37, 36 мг, 0,064 ммоль) в THF (0,5 мл) добавляли MeNH₂ (1 мл, водный раствор), и перемешивали смесь при 14-18°C в течение 72 ч. Затем, смесь концентрировали, и очищали остаток методом RP-HPLC, способ A, с получением 2-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-N-метилциклопропанкарбоксамида (трифторацетат) в виде белого твердого вещества. Выход: 22 мг. LCMS, способ E: R_t=0,892 мин; (M+H)⁺=558,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,49 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,17-7,28 (м, 3H), 7,05-7,15 (м, 2H), 6,98 (д, J=7,2 Гц, 1H), 4,46 (с, 2H), 4,05-4,20 (м, 4H), 3,35-3,78 (м, 4H), 2,66 (с, 3H), 2,45-2,50 (м, 1H), 2,02-2,40 (м, 4H), 1,65 (с, 1H), 1,27-1,47 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -77,03, -116,71.

Пример 39

6-((2-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-6-ил)метил)-3,3-диметилиндолин-2-он

Смесь 2-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октана (80 мг, 0,19 ммоль, 81% чистота), синтезированного из промежуточного продукта 24A путем снятия с кислоты защитной группы, промежуточного продукта 45 (54 мг, 0,29 ммоль) и NaBH₃CN (60 мг, 0,95 ммоль) в MeOH (5 мл) перемешивали при 70°C (масляная баня) в течение 18 ч. Смесь концентрировали в условиях пониженного давления, и очищали остаток методом препаративной RP-HPLC с щелочной подвижной фазой, способ D, с получением 6-((2-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4] октан-6-ил)метил)-3,3-диметилиндолин-2-она в виде белого твердого вещества. Выход: 17 мг. LCMS, способ E: R_t=0,584 мин; (M+H)⁺=508,0, 510,0 (изотопы хлора). ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,24 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,41-7,42 (м, 1H), 7,20 (м, J=7,6 Гц, 1H), 6,99-7,08 (м, 3H), 6,95 (с, 1H), 4,21-4,26 (м, 4H), 3,62 (с, 2H), 2,81 (с, 2H), 2,66 (т, J=6,8 Гц, 2H), 2,16 (т, J=7,2 Гц, 2H), 1,34 (с, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -118,54~-117,89.

Пример 40

2-(6-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбонил)-2,3-дигидро-1H-инден-5-сульфонамид

Стадия 1. метил-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоксилат

К раствору 2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоновой кислоты (8,40 г, 51,85 ммоль) в MeOH (220 мл, безводный) при 0°C добавляли H₂SO₄ (4,4 мл), и нагревали смесь при 70°C в течение 17 ч. Смесь концентрировали, разбавляли EtOAc (80 мл), промывали H₂O (80 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением метил-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоксилата (8,70 г, 95%) в виде светло-желтого масла. Выход: 8,7 г. LCMS, способ E: R_t=1,045 мин; (M+H)⁺=177,2.

Стадия 2. метил-5-(хлорсульфонил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоксилат

К предварительно охлажденному раствору ClSO₃H (5 мл) в течение 20 мин добавляли метил-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоксилат (1,00 г, 5,68 ммоль), полученную смесь перемешивали при 13-21°C в течение 3 ч, после чего смесь вливали в ледяную воду, а затем EtOAc (30 мл). Органический слой разделяли, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением метил-5-(хлорсульфонил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоксилата в виде бесцветного масла. Выход: 1,4 г. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7,82-7,89 (м, 2H), 7,43 (д, J=8,4 Гц, 1H), 3,74-3,77 (м, 3H), 3,28-3,50 (м, 5H).

Стадия 3. метил-5-сульфамоил-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоксилат

К раствору метил-5-(хлорсульфонил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоксилата (100 мг, 0,36 ммоль) в THF (2 мл) при 0°C добавляли NH₃•H₂O (100 мкл), и перемешивали смесь при 0°C в течение 1 ч. Затем, смесь концентрировали, разбавляли EtOAc (15 мл), промывали нас. водн. раствором NH₄Cl (10 мл) и солевым раствором (10 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением метил-5-сульфамоил-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоксилата в виде бесцветного геля. Выход: 80 мг. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7,65-7,75 (м, 2H), 7,34 (д, J=8,0 Гц, 1H), 3,70 (с, 3H), 3,37-3,46 (м, 1H), 3,21-3,27 (м, 4H).

Стадия 4. 5-сульфамоил-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоновая кислота

К раствору 5-сульфамоил-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоксилата (80 мг, 0,31 ммоль) в MeOH (1 мл) добавляли H₂O (1 мл), а затем LiOH (96 мг, 4,0 ммоль). Смесь перемешивали при 18-23°C в течение 4 ч. Значение pH корректировали до 2-3 добавлением водн. HCl, и концентрировали смесь с получением неочищенной 5-сульфамоил-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоновой кислоты в виде белого твердого вещества. Выход: 131 мг.

Стадия 5. 2-(6-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбонил)-2,3-дигидро-1H-инден-5-сульфонамид

К раствору 5-сульфамоил-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоновой кислоты (131 мг, 0,31 ммоль) и 2-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана (100 мг, 0,31 ммоль), синтезированного из промежуточного продукта 20A путем снятия с кислоты защитной группы, в DMF (4 мл, безводный) добавляли HATU (177 мг, 0,47 ммоль) и DIEA (120 мг, 154 мкл). Смесь перемешивали при 13-20°C в течение 17 ч, после чего методом LCMS обнаруживали получение целевого продукта с выходом приблизительно 17%. Смесь разбавляли EtOAc (20 мл), промывали H₂O (20 мл), солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом препаративной RP-HPLC с кислой подвижной фазой, способ A, с получением 2-(6-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбонил)-2,3-дигидро-1H-инден-5-сульфонамида (трифторацетат) в виде белого твердого вещества. Выход: 9 мг. LCMS, способ E: R_t=0,843 мин; (M+H)⁺=544,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,48 (с, 1H), 7,67-7,76 (м, 2H), 7,59 (с, 1H), 7,50 (дд, J=8,4, 3,2 Гц, 1H), 7,33-7,43 (м, 2H), 7,21-7,29 (м, 1H), 4,71-4,86 (м, 4H), 4,57 (с, 2H), 4,27 (с, 2H), 3,36-3,45 (м, 1H), 3,17-3,24 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -77,02, -115,29.

Пример 41

5-((7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

Смесь 5-(2-бром-4-фторфенокси)-4-хлорпиридимина (промежуточный продукт 1, 15 г, 49,4 ммоль), трет-бутил-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (14,7 г, 54,3 ммоль) и Na₂CO₃ (20,9 г, 197,6 ммоль) в CH₃CN (300 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 3 ч. Затем, смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование этилацетатом) с получением трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (т.е., промежуточного продукта 11) в виде желтого твердого вещества. Выход: 23 г. LCMS, способ A: R_t=0,759 мин; (M+H)⁺=492,8, 494,9 (изотопы брома). ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,35 (с, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,31-7,33 (д, J=6,8 Гц, 1H), 6,90-6,95 (м, 1H), 6,68-6,70 (м, 1H), 3,50-3,85 (м, 4H), 3,10-3,45 (м, 4H), 1,80-1,95 (м, 4H), 1,39 (с, 9H).

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К дегазированной смеси промежуточного продукта 11 (15 г, 30,4 ммоль), (2-изопропилфенил)бороновой кислоты (7,8 г, 45,6 ммоль) и K₃PO₄ (19,4 г, 91,2 ммоль) в диоксане (360 мл) и H₂O (90 мл) в атмосфере N₂ добавляли палладацикл Sphos (2,2 г, 3,04 ммоль), и перемешивали смесь при 90°C в течение 18 ч. Затем, смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления для удаления диоксана. Полученный остаток экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали H₂O (100 мл) и солевым раствором (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование петролейный эфир:этилацетат=1:2→1:3) с получением трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде желтого твердого вещества. Выход: 8,6 г. LCMS, способ A: R_t=0,785 мин; (M+H)⁺=533,1. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,33 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,3-7,38 (м, 2H), 7,10-7,20 (м, 1H), 6,90-7,05 (м, 3H), 6,70-6,80 (м, 1H), 3,30-3,70 (м, 6H), 3,10-3,30 (м, 2H), 2,80-2,90 (м, 1H), 1,70-1,85 (м, 4H), 1,46 (с, 9H), 1,11-1,16 (м, 6H).

Стадия 3. 2-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан

К смеси трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (8,6 г, 16,1 ммоль) в CH₂Cl₂ (150 мл) при охлаждении ледяной водой добавляли HCl в диоксане (30 мл, 4н), и перемешивали смесь при 14-18°C в течение 2 ч. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления, подщелачивали остаток до pH=12-13 добавлением 10% водного раствора NaOH и экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 2-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонана в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 6,8 г. LCMS, способ C: R_t=0,649 мин; (M+H)⁺=433,1.

Стадия 4. 5-((7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Смесь 2-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонана (6,8 г, 15,7 ммоль), 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 3,05 г, 18,8 ммоль), NaBH₃CN (3,9 г, 62,8 ммоль) и HOAc (3,4 мл) в MeOH (130 мл) перемешивали при 70°C в течение 18 ч. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления, корректировали остаток до pH=8 добавлением насыщенного раствора NaHCO₃ и экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом препаративной RP-HPLC с щелочной подвижной фазой, способ D, с получением 5-((7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она в виде слегка желтого твердого вещества. Выход: 7,2 г. LCMS, способ C: R_t=0,663 мин; (M+H)⁺=579,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,13 (с, 1H), 7,58 (д, J=6,8 Гц, 1H), 6,95-7,35 (м, 10H), 3,62 (с, 2H), 3,40-3,55 (м, 3H), 2,55-2,85 (м, 4H), 2,30-2,45 (м, 2H), 1,65-1,85 (м, 4H), 1,00-1,10 (м, 6H).

Примеры 41A-41B

5-((7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он (изомеры 1-2)

5-((7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он (Пример 40, 1 г, 1,7 ммоль) очищали методом SFC, способ A, с получением двух изомеров в виде белых твердых веществ, которые выделяли в виде гидрохлоридов.

Изомер 1: LCMS, способ C: R_t=0,660 мин; (M+H)⁺=579,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,28 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,10-7,37 (м, 10H), 4,45 (с, 2H), 3,71-3,34 (м, 8H), 2,77-2,85 (м, 1H), 2,03-2,11 (м, 4H), 1,06-1,14 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,18. Аналит. SFC, способ D: 8,122 мин, э.и.=91,32%

Изомер 2: LCMS, способ C: R_t=0,659 мин; (M+H)⁺=579,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD 400 МГц): δ 8,27 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,10-7,37 (м, 10H), 4,44 (с, 2H), 3,33-3,70 (м, 8H), 2,77-2,83 (м, 1H), 2,03-2,11 (м, 4H), 1,06-1,14 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD 400 МГц): δ -119,30. Аналит. SFC, способ D: 8,122 мин, э.и.=93,84%

Пример 42

2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)-пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил (рацемическая смесь)

Указанный в заголовке продукт синтезировали в соответствии со способом, описанным для Примера 41. На стадии 2 использовали 4-циано-2-циклопропилфенилбороновую кислоту. LCMS, способ A: Rt=1,42 мин, 602 (M+H)⁺. ¹H-ЯМР CD₃OD) δ: 8,15 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,42 (м,1H), 7,29 (м, 1H), 7,23-7,14 (м, 3H), 7,07-7,01 (м, 4H), 3,65 (с, 2H), 3,58-3,41 (м, 4H), 2,68 (м, 2H), 2,47 (м, 2H), 1,85 (м, 2H), 1,72 (м, 3H), 0,87 (м, 2H), 0,65 (м, 2H).

Примеры 42A-42B

2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)-пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил (изомеры 1-2)

Соединение Примера 42 разделяли методом SFC, способ A, с получением двух изомеров.

Изомер 1: LCMS, способ D: R_t=1,435 мин, M+H)⁺=602,2; ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,15 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,43 (д, J=9,6 Гц, 1H), 7,29 (д, J=5,6 Гц, 1H), 7,10-7,20 (м, 3H), 7,05-7,10 (м, 2H), 7,01 (с, 2H), 3,63 (с, 2H), 3,35-3,60 (м, 4H), 2,60-2,75 (м, 2H), 2,35-2,50 (м, 2H), 1,80-1,90 (м, 2H), 1,60-1,75 (м, 3H), 0,87 (с, 2H), 0,66 (с, 2H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,38. Аналит. SFC, способ D: t_R=5,306 мин, э.и.=99,70%.

Изомер 2: LCMS, способ D: R_t=1,435 мин, M+H)⁺=602,2; ¹H-ЯМР (CD₃OD 400 МГц): δ 8,15 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 7,29 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,10-7,25 (м, 3H), 6,95-7,10 (м, 4H), 3,60-3,70 (м, 2H), 3,35-3,60 (м, 4H), 2,55-2,75 (м, 2H), 2,35-2,50 (м, 2H), 1,80-1,90 (м, 2H), 1,60-1,75 (м, 3H), 0,87 (с, 2H), 0,65 (с, 2H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD 400 МГц): δ -120,383. Аналит. SFC, способ D: t_R=7,188 мин, э.и.=99,32%.

Примеры 43-44

2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбоксамид (Пример 43) и 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)-пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбоновой кислоты (Пример 44)

и

Смесь 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила бис-гидрохлорида (Пример 42, 41 мг, 0,06 ммоль), THF (3 мл) и 2M LiOH (1 мл) загружали в пробирку CEM для обработки микроволнами емкостью 10 мл и нагревали 120°C в течение 4,5 ч в микроволновом реакторе CEM. Методом LCMS обнаруживали два продукта в соотношении приблизительно 1:1. Реакционную смесь нейтрализовали добавлением 1M раствора HCl, упаривали досуха, и очищали полученный остаток методом RP-HPLC, способ A, с получением 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбоксамида трифторацетата и 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбоновой кислоты в виде трифторацетата.

Пример 43: LCMS, способ A: R_t=0,68 мин, (M+H)⁺=620,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,38 (с, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,63 (м, 1H), 7,45 (дд, J=8,4, 4,4 Гц, 1H), 7,34-7,30 (м, 2H), 7,25-7,20 (м, 4H), 7,12 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,43 (с, 2H), 3,91-3,34 (м, 8H), 2,05 (м, 4H), 1,62 (с, 1H), 0,91-0,70 (м, 4H).

Пример 44: LCMS, способ A: R_t=0,75 мин, (M+H)⁺=621,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,38 (с, 1H), 7,78 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,45-7,42 (м, 2H), 7,33 (тд, J=8,4, 4,4 Гц, 1H), 7,28-7,23 (м, 3H), 7,20 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,12 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,42 (с, 2H), 3,82-3,46 (м, 8H), 2,07 (м, 4H), 1,63 (с, 1H), 0,92 (м, 2H), 0,65 (м, 2H).

Пример 45

2-циклопропил-5'-фтор-N,N-диметил-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбоксамид

К раствору 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбоновой кислоты (Пример 44, 10 мг, 0,012 ммоль) в DCM (1 мл) добавляли TEA (0,05 мл), HATU (5 мг, 0,013 ммоль) и 2,0M Me₂NH в THF (0,2 мл). Полученную смесь перемешивали в течение ночи, а затем удаляли растворители в условиях пониженного давления. Затем, остаток очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 2-циклопропил-5'-фтор-N,N-диметил-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбоксамида в виде трифторацетата. Выход: 8,5 мг. LCMS, способ A: R_t=0,74 мин, (M+H)⁺=648,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,40 (с, 1H), 7,34 (м, 1H), 7,45 (м, 1H), 7,33 (м, 1H), 7,26-7,22 (м, 5H), 7,12 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,45 (с, 2H), 3,85-3,42 (м, 8H), 3,06 (с, 3H), 2,95 (с, 3H), 2,09 (м, 4H), 1,62 (с, 1H), 0,91 (м, 2H), 0,62 (м, 2H).

Пример 46

5-((7-(2-хлор-5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Указанное в заголовке соединение синтезировали, как описано в Примере 41, используя в качестве исходного вещества 2,4-дихлор-5-бромпиридимин. LCMS, способ B: R_t=1,45 мин, (M+H)⁺=603,6; ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 7,90 (с, 1H), 7,45 (д, J=6,4 Гц, 1H), 7,30 (д, J=5,6 Гц, 2H), 7,21 (с, 1H), 7,18 (д, J=8 Гц, 1H), 7,16 (д, J=8 Гц, 1H), 7,12 (д, J=8 Гц, 1H), 6,14 (с, 1H), 4,41 (с, 2H), 4,37 (м, 1H), 3,90-3,65 (м, 3H), 3,64- 3,34 (м, 4H), 3,26 (м, 1H), 2,18 (м, 1H), 2,32-1,92 (м, 3H), 1,36 (м, 6H).

Примеры 47-52

Примеры 47-52 получали в соответствии с методикой, представленной в Примере 41.

Таблица 7. Примеры 47-52

Пример № Структура Выход 47. 5-((7-(5-((4,5-дифтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он 17% 48. 5'-фтор-2-метил-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил 22% 49. 5-((7-(5-((2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он 46% 50. 5-((7-(5-((5-фтор-2'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он (трифторацетат) 62% 51. 5'-фтор-2,6-диметил-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил 14% 52. 2-циклопропил-3',5'-дифтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил 3%

Таблица 8. Данные охарактеризования Примеров 47-52.

Пример No. Данные ЯМР Пик(и) массы (M+H)+ R_f или R_t 47. 5-((7-(5-((4,5-дифтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ 8,45 (с, 1H), 7,88 (с, 1H), 7,00-7,45 (м, 9H), 4,44 (с, 2H), 3,33-3,83 (м, 8H), 2,75-2,81 (м, 1H), 1,96-2,09 (м, 4H), 1,07-1,15 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -137,27~-135,21, -142,54. 597,3 1,620 мин LCMS, способ E 48. 5'-фтор-2-метил-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,16 (с, 1H), 7,47-7,64 (м, 3H), 7,31-7,33 (м, 1H), 7,18-7,22 (м, 1H), 7,01-7,12 (м, 5H), 3,43-3,66 (м, 6H), 2,64-2,69 (м, 2H), 2,46 (с, 2H), 2,21 (с, 3H), 1,73-1,90 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,33. 576,1 1,520 мин, LCMS, способ E 49. 5-((7-(5-((2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,35 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,35-7,45 (м, 1H), 7,25-7,35 (м, 2H), 7,10-7,25 (м, 3H), 7,10-7,15 (м, 1H), 6,95-7,10 (м, 2H), 6,65-6,80 (м, 1H), 4,45 (с, 2H), 3,75-3,90 (м, 4H), 3,35-3,75 (м, 4H), 2,00-2,30 (м, 4H), 1,50-1,65 (м, 1H), 0,70-1,00 (м, 2H), 0,50-0,70 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,96, -117,69. 577,2 0,647 мин, LCMS, способ A 50. 5-((7-(5-((5-фтор-2'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он (трифторацетат) ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,42 (с, 1H), 7,65-7,80 (м, 2H), 7,50-7,65 (м, 2H), 7,42 (д, J=6,8 Гц, 1H), 7,29 (д, J=6,4 Гц, 2H), 7,10-7,20 (м, 3H), 7,05-7,10 (м, 1H), 4,39 (с, 2H), 3,46-3,80 (м, 8H), 1,90-2,20 (м, 4H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -59,35, -118,69. 605,1 0,645 мин, LCMS, способ A 51. 5'-фтор-2,6-диметил-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,17 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,39 (с, 1H), 7,20-7,25 (м, 1H), 7,10-7,15 (м, 1H), 7,00-7,10 (м, 4H), 3,67 (с, 2H), 3,37-3,57 (м, 4H), 2,65-2,70 (м, 2H), 2,40-2,50 (м, 2H), 2,08 (д, J=1,2 Гц, 6H), 1,60-1,95 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,93, -119,73. 592,0 0,644 мин, LCMS, способ A 52. 2-циклопропил-3',5'-дифтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,05 (с, 1H), 7,36-7,47 (м, 2H), 7,30-7,33 (м, 1H), 7,25 (с, 1H), 7,13 (с, 1H), 6,95-7,10 (м, 4H), 3,35-3,75 (м, 6H), 2,64-2,77 (м, 2H), 2,40-2,54 (м, 2H), 1,70-1,96 (м, 4H), 1,52-1,66 (м, 1H), 0,65-0,95 (м, 2H), 0,50-0,60 (м, 2H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -113,73 (с, 2F). 620,2 0,660 мин, LCMS, способ A

Пример 53.

5-((7-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадия 1. 1-(5-фтор-2-метоксифенил)-2-изопропил-1H-имидазол

К раствору (5-фтор-2-метоксифенил)бороновой кислоты (12,0 г, 70,59 ммоль) и 2-изопропил-1H-имидазола (7,0 г, 64,17 ммоль) в безводном DCM (150 мл) в атмосфере O₂ (30 фунт/кв.дюйм) добавляли Cu(OAc)₂ (1,73 г, 9,62 ммоль) и пиридин (15 мл, 192,51 ммоль), и перемешивали полученную смесь при 20°C в течение 16 ч. Смесь фильтровали, фильтрат промывали водой (2×100 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали через Celite™ и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного 1-(5-фтор-2-метоксифенил)-2-изопропил-1H-имидазола в виде черного масла, которое использовали на следующей стадии. Выход: 15,0 г. LCMS, способ E: R_t=0,948 мин, (M+H)⁺=253,3.

Стадия 2. 4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенол

Раствор 1-(5-фтор-2-метоксифенил)-2-изопропил-1H-имидазола (15,0 г, 64,17 ммоль) в HCl-Py (150 г) перемешивали при 195°C в течение 2 ч в атмосфере N₂. Методом LCMS обнаруживали расходование исходного вещества. К реакционной смеси добавляли воду (500 мл), и корректировали до pH~10 добавлением 1н раствора NaOH. Смесь экстрагировали EtOAc (3×200 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали через Celite™ и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование DCM/MeOH=10:1) с получением 4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенола в виде белого твердого вещества. Приблизительно 760 мг 4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенола дополнительно очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование дихлорметан:метанол=10:1) с получением 4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенола (541,40 мг) в виде белого твердого вещества. Выход: 1,41 г. LCMS, способ E: R_t=0,980 мин, (M+H)⁺=221,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 10,06 (с, 1H), 7,15-7,20 (м, 2H), 7,00-7,03 (м, 2H), 6,88 (с, 1H), 2,73-2,76 (м, 1H), 1,10 (д, J=6,8 Гц, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -124,63.

Стадия 3. этил-2-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)ацетат

К раствору 4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенола (0,65 г, 2,95 ммоль) и этил-2-бромацетата (492 мг, 2,95 ммоль) в CH₃CN (15 мл) добавляли K₂CO₃ (610 мг, 4,42 ммоль), а затем перемешивали реакционную смесь при 80°C в течение 16 ч в атмосфере N₂. Затем, реакционную смесь фильтровали через Celite™, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:EtOAc=1:1~1:2) с получением этил-2-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)ацетата в виде желтого масла. Выход: 720 мг. LCMS, способ E: R_t=0,619 мин, (M+H)⁺=307,0

Стадия 4. 5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1H)-он

К раствору этил-2-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)ацетата (720 мг, 2,35 ммоль) и этилформиата (782 мг, 10,58 ммоль) в безводном THF (15 мл) в атмосфере N₂ добавляли NaH (141 мг, 3,52 ммоль, 60% в минеральном масле), и перемешивали реакционную смесь при 35°C в течение 2 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления с получением этил-(Z)-2-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)-3-гидроксиакрилата в виде светло-коричневого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Промежуточный продукт растворяли в безводном EtOH (15 мл), и в атмосфере N₂ добавляли тиомочевину (179 мг, 2,35 ммоль). Затем, реакционную смесь перемешивали при 90°C приблизительно в течение 16 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование дихлорметан:метанол=20:1→10:1) с получением 5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1H)-она в виде желтого масла, и приблизительно 300 мг этил-2-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)ацетата возвращали в процесс. Выход: 280 мг. LCMS, способ E: R_t=0,945 мин, (M+H)⁺=347,1

Стадия 5. 5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ол

К раствору 5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1H)-она (280 мг, 0,813 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли влажный никель Ренэя (1 г), и перемешивали реакционную смесь при 90°C в атмосфере N₂ в течение 16 ч. Смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления с получением 5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ола (256 мг, 98% чистота, неочищ. 100%) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 256 мг. LCMS, способ E: R_t=0,958 мин, (M+H)⁺=315,1

Стадия 6. 4-хлор-5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиридимин

К раствору 5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ола (256 мг, 0,813 ммоль) в безводном SOCl₂ (5 мл) в атмосфере N₂ добавляли безводный DMF (0,5 мл), и перемешивали реакционную смесь при 80°C в течение 2 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления с получением остатка, который смешивали с CH₂Cl₂ (100 мл) и промывали нас. водн. NaHCO₃ (30 мл), солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 4-хлор-5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиридимина в виде желтого масла. Выход: 210 мг. LCMS, способ E: R_t=0,958 мин, (M+H)⁺=333,1.

Стадия 7. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

Раствор 4-хлор-5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиридимина (100 мг, 0,301 ммоль), трет-бутил-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (82 мг, 0,301 ммоль) и DIEA (116 мг, 0,903 ммоль) в пропан-2-оле (3 мл) перемешивали при 90°C в течение 2 ч. Смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии. Выход: 157 мг. LCMS, способ E: R_t=0,675 мин, (M+H)⁺=523,1.

Стадия 8. 2-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (157 мг, 0,301 ммоль) в безводном DCM (5 мл) при 0°C в атмосфере N₂ медленно добавляли TFA (1 мл), и перемешивали реакционную смесь при 4-10°C в течение 2 ч. Затем, реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток растворяли в воде (30 мл) и корректировали до pH=10 добавлением NaOH (10% в воде). Водный слой экстрагировали CH₂Cl₂/ⁱPrOH (10:1, 3×20 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 2-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонана в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии.

Стадия 9. 5-((7-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

К раствору 2-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонана (10 мг, 0,024 ммоль) в безводном MeOH (2 мл) добавляли 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид (промежуточный продукт 40, 6 мг, 0,036 ммоль), и перемешивали смесь в атмосфере N₂ в течение 5 мин. Затем, добавляли NaBH₃CN (70 мг, 0,118 ммоль), и перемешивали полученную смесь при 65°C в течение 16 ч. Затем, реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом препаративной RP-HPLC, способ G, с получением 5-((7-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она в виде белого твердого вещества. Выход: 2,7 мг (20%) LCMS, способ D: R_t=1,675 мин, (M+H)⁺=569,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,27 (с, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,30-7,40 (м, 2H), 6,98-7,11 (м, 6H), 3,41-3,65 (м, 6H), 2,81-2,96 (м, 1H), 2,62-2,70 (м, 2H), 2,42-2,55 (м, 2H), 1,71-1,96 (м, 4H), 1,22 (д, J=5,2 Гц, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,023.

Пример 54

5-((7-(5-(2-(циклопропилметокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(2-(циклопропилметокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору промежуточного продукта 43b (40 мг, 90 мкмоль) в DMF (0,5 мл) добавляли (бромметил)циклопропан (11 мкл, 110 мкмоль), а затем K₂CO₃ (20 мг, 135 мкмоль), и перемешивали полученную смесь при 50°C в течение 15 ч. После охлаждения до к.т., смесь разбавляли H2O (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Органический слой промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4 и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 50% EtOAc в гексанах с получением 42 мг трет-бутил-7-(5-(2-(циклопропилметокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде желтого масла (выход 90%). LCMS, способ B: R_t=1,69 мин; (M+H)⁺=485,6. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,50 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,33-7,29 (м, 1H), 7,00-6,97 (м, 1H), 6,80-6,75 (м, 1H), 3,84-3,82 (м, 3H), 3,48-3,35 (м, 4H), 2,12-2,02 (м, 5H), 1,46 (с, 11H), 1,10-1,09 (м, 1H), 0,54-0,52 (м, 2H), 0,20-0,19 (м, 2H).

Стадия 2. 5-((7-(5-(2-(циклопропилметокси)-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-(циклопропилметокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (42 мг, 87 мкмоль) в DCM (2 мл) при к.т. добавляли TFA (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, а затем нейтрализовали водным раствором NaHCO₃. Смесь экстрагировали DCM (5×15 мл). Органические слои объединяли, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки.

К раствору неочищенного продукта (12 мг, 30 мкмоль) и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 5 мг, 30 мкмоль) в MeOH (1 мл) добавляли NaCNBH₃ (10 мг, 45 мкмоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 15 ч и очищали методом HPLC, способ A, с получением 5-((7-(5-(2-(циклопропилметокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-она трифторацетата в виде бесцветного масла. LCMS, способ G: R_t=3,83 мин; (M+H)⁺=531,7. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,51 (с, 1H), 7,59 (с, 1H), 7,30-7,28 (м, 1H), 7,22-7,18 (м, 2H), 7,12-7,10 (м, 1H), 6,98 (с, 1H), 6,77 (с, 1H), 4,43-4,41 (м, 2H), 4,12-4,09 (м, 2H), 3,80-3,78 (м, 2H), 2,30-2,15 (м, 5H), 1,29 -1,20 (м, 5H), 0,90-0,88 (м, 1H), 0,51-0,48 (м, 2H), 0,15-0,13 (м, 2H).

Пример 55

этил-2-(7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)тиазол-4-карбоксилат

К раствору 2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-2-циклопропил-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила (220 мг, 0,48 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли этил-2-хлортиазол-4-карбоксилат (111 мг, 0,58 ммоль), CuI (9,2 мг, 0,048 ммоль) и K2CO3 (132 мг, 0,96 ммоль), и нагревали реакционную смесь в микроволновом реакторе при 100°C в течение 16 ч. Затем, смесь фильтровали через Celite™, и дважды промывали осадок на фильтре EtOAc (30 мл). Фильтрат объединяли и разбавляли H2O (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенный органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали методом препаративной TLC (петролейный эфир:этилацетат=1:2) с получением этил-2-(7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)тиазол-4-карбоксилата в виде коричневого масла. Выход: 100 мг. LCMS, способ C: R_t=0,783 мин, (M+H)⁺=610,9. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,35 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,35-7,50 (м, 2H), 7,15-7,25 (м, 2H), 6,95-7,10 (м, 2H), 6,83 (с, 1H), 4,30-4,45 (м, 2H), 3,60-3,75 (м, 2H), 3,40-3,60 (м, 6H), 1,85-2,05 (м, 4H), 1,55-1,80 (м, 1H), 1,20-1,50 (м, 3H), 0,85-0,95 (м, 2H), 0,60-0,75 (с, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CDCl): δ -118,94.

Пример 56

2-(7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)тиазол-4-карбоновая кислота

К раствору этил-2-(7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)тиазол-4-карбоксилата (20 мг, 0,033 ммоль) в THF (2 мл) добавляли водн. LiOH (1 мл, 4н), и перемешивали реакционную смесь при 18-26°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали и очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 2-(7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты в виде твердого вещества. Выход: 6 мг. LCMS, способ C: R_t=0,726 мин, (M+H)⁺=582,9. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,46 (с, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,50-7,55 (м, 2H), 7,20-7,45 (м, 5H), 3,70-4,05 (м, 4H), 3,45-3,65 (м, 4H), 2,00-2,20 (м, 4H), 1,70-1,75 (м, 1H), 0,60-1,00 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -117,77.

Пример 57

2-(7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)-N-метилтиазол-4-карбоксамид

К раствору (2'-((4-(7-(4-амино-3-фторбензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-2-циклопропил-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила (25 мг, 0,03 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли DIEA (12 мг, 0,06 ммоль), HATU (17 мг, 0,045 ммоль) и раствор метанамина в THF (30 мкл, 0,06 ммоль, 2н). Затем, реакционную смесь перемешивали при 16-25°C в течение 16 ч. Смесь очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 2-(7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)-N-метилтиазол-4-карбоксамида (трифторацетат) в виде белого твердого вещества. Выход: 2,7 мг. LCMS, способ C: R_t=0,744 мин, (M+H)⁺=596,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,47 (с, 1H), 7,81 (с, 1H), 7,25-7,48 (м, 7H), 3,49-3,92 (м, 8H), 2,92 (с, 3H), 1,95-2,20 (м, 4H), 1,70 (с, 1H), 0,89-0,90 (м, 2H), 0,67 (с, 2H). ¹⁹F-ЯМР: (CD₃OD 400 МГц): δ -117,725 (s 1 F).

Пример 58

2-(7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)-N,N-диметилтиазол-4-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение синтезировали в соответствии со способами, описанными для Примера 57, заменяя диметиламин метиламином. LCMS, способ D: R_t=1,191 мин, (M+H)⁺=610,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,45 (с, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,30-7,40 (м, 3H), 7,20-7,30 (м, 2H), 7,06 (с, 1H), 3,70-4,10 (м, 4H), 3,35-3,65 (м, 4H), 3,21 (с, 3H), 3,07 (с, 3H), 2,00-2,20 (м, 4H), 1,65-1,75 (м, 1H), 0,60-0,95 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,19.

Пример 59

7-бензил-2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан

Стадия 1. (E)-трет-бутил-7-бензилиден-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К перемешанной суспензии NaH (160 мг, 4 ммоль, 60% в минеральном масле) в THF (8 мл, безводный) при 0°C в атмосфере N₂ по каплям добавляли диэтилбензилфосфонат (920 мг, 4 ммоль) в THF (6 мл, безводный), и перемешивали смесь в течение 20 мин при 0°C. Смесь трет-бутил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (200 мг, 0,8 ммоль) и 15-краун-5 (880 мг, 4 ммоль) в THF (6 мл, безводный) при 0°C по каплям добавляли к реакционной смеси, а затем смесь нагревали до 14-17°C и перемешивали в атмосфере N₂ в течение 16 ч. Полученную смесь гасили добавлением нас. водн. NH₄Cl (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO_4, фильтровали и концентрировали с получением остатка, который очищали методом флэш-хроматографии (SiO₂, 10%~100% EtOAc в петролейном эфире) с получением (E)-трет-бутил-7-бензилиден-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде бесцветного масла. Выход: 230 мг. LCMS, способ C: R_t=0,911 мин, (M+H)⁺=258,0.

Стадия 2. трет-бутил-7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору (E)-трет-бутил-7-бензилиден-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (230 мг, 0,73 ммоль) в MeOH (20 мл, безводный) добавляли Pd-C (100 мг, 10% на угле, безводный), и перемешивали полученную смесь при 30°C приблизительно в течение 16 ч в атмосфере H₂ (40 фунт/кв.дюйм). Суспензию фильтровали через фриттованную воронку, фильтрат концентрировали и очищали методом флэш-хроматографии (10%~100% EtOAc в петролейном эфире) с получением трет-бутил-7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде бесцветного масла. Выход: 120 мг. LCMS, способ C: R_t=0,965 мин, (M+H)⁺=338,0.

Стадия 3. 7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонан

Раствор трет-бутил-7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (120 мг, 0,38 ммоль) в TFA-CH₂Cl₂ (5 мл, об.:об.=1:4) перемешивали при 12-18°C приблизительно в течение 2 ч, после чего методом LCMS обнаруживали завершение реакции. Полученную смесь корректировали до pH=8 добавлением нас. водн. раствора NaHCO₃ и экстрагировали CH₂Cl₂ (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (10 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного 7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонана в виде бесцветного масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 120 мг. LCMS, способ C: R_t=0,627 мин, (M+H)⁺=216,1.

Стадия 4. 7-бензил-2-(5-(2-хлор-4- фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан

К раствору 7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонана (120 мг, 0,38 ммоль, неочищ.) и 4-хлор-5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиридимина (98 мг, 0,38 ммоль) в MeCN (10 мл) добавляли K₂CO₃ (158 мг, 1,14 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 90°C приблизительно в течение 4 ч. Смесь фильтровали, и промывали осадок на фильтре EtOAc (2×30 мл). Фильтрат концентрировали и очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 7-бензил-2-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонана (трифторацетат) в виде белого твердого вещества. Выход: 80 мг. LCMS, способ D: R_t=1,144 мин, (M+H)⁺=483,8. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,43-8,59 (м, 1H), 7,60-7,79 (м, 1H), 7,40-7,55 (м, 1H), 7,30-7,40 (м, 1H), 7,10-7,30 (м, 6H), 3,65-4,30 (м, 4H), 2,60-2,75 (м, 2H), 2,20-2,45 (м, 1H), 1,55-2,10 (м, 6H), 1,25-1,50 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (MeOD): δ -77,26, -115,69.

Стадия 5. 7-бензил-2-(5-(4-фтор-2- (4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан

К раствору 7-бензил-2-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонана (70 мг, 0,16 ммоль) и (4-изопропилпиримидин-5-ил)бороновой кислоты (40 мг, 0,24 ммоль) в диоксане (2 мл) и H₂O (1 мл) в атмосфере N₂ добавляли палладоцикл Sphos (6 мг, 0,008 ммоль) и K₃PO₄ (85 мг, 0,4 ммоль), и перемешивали полученную смесь при 115°C в течение 45 мин в условиях обработки микроволнами. Полученную смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO_4, фильтровали и концентрировали с получением остатка, который очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 7-бензил-2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонана (трифторацетат) в виде белого твердого вещества. Выход: 45 мг. LCMS, способ D: R_t=1,135 мин, (M+H)⁺=524,4. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,03-9,20 (м, 1H), 8,55-8,67 (м, 1H), 8,48 (с, 1H), 7,93 (с, 1H), 7,21-7,40 (м, 5H), 7,10-7,20 (м, 3H), 3,35-3,93 (м, 4H), 2,95-3,12 (м, 1H), 2,55-2,70 (м, 2H), 2,20-2,40 (м, 1H), 1,49-1,96 (м, 6H), 1,10-1,30 (м, 8H) ¹⁹F-ЯМР (MeOD): δ -77,23, -117,91.

Пример 60

5-((7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он (смесь)

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 600 мг, 1,2 ммоль) и (2-ацетилфенил)бороновой кислоты (390 мг, 2,4 ммоль) в диоксане (10 мл) и H₂O (2 мл) в атмосфере N₂ добавляли Pd(dppf)Cl₂ (87 мг, 0,12 ммоль) и Na₂CO₃ (320 мг, 3 ммоль), и перемешивали полученную смесь при 80°C в атмосфере N₂ в течение 16 ч. Полученную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO_4, фильтровали и концентрировали в условиях вакуума с получением остатка, который очищали методом флэш-хроматографии (SiO₂, 10%~100% EtOAc в петролейном эфире) с получением трет-бутил-7-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде желтого твердого вещества. Выход: 400 мг. LCMS, способ C: R_t=0,761 мин, (M+H)⁺=533,2.

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (350 мг, 0,66 ммоль) в MeOH (20 мл, безводный) и THF (10 мл, безводный) добавляли NaBH₄ (98 мг, 2,65 ммоль), и перемешивали полученную смесь при 50°C в атмосфере N₂ приблизительно в течение 2 ч. Затем, полученную смесь гасили добавлением нас. водн. раствора NH₄Cl (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде черного твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 380 мг.

Стадия 3. 1-(2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)этанол

Раствор трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (380 мг, 0,66 ммоль, неочищ.) в TFA-CH₂Cl₂ (9 мл, об.:об.=1:8) перемешивали при 17-24°C приблизительно в течение 2 ч. Смесь концентрировали, корректировали до pH=8 добавлением нас. водн. NaHCO₃ и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением 1-(2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)этанола в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 330 мг. LCMS, способ C: R_t=0,581 мин, (M+H)⁺=435,2.

Стадия 4. 5-((7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

К раствору 1-(2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)этанола (330 мг, 0,66 ммоль, неочищ.) и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 106 мг, 0,66 ммоль) в MeOH (10 мл, безводный) добавляли AcOH (0,2 мл). Смесь перемешивали при 17-25°C приблизительно в течение 30 мин, затем добавляли NaBH3CN (82 мг, 1,32 ммоль), и перемешивали полученную смесь при 17-25°C приблизительно в течение 16 ч. Смесь гасили добавлением нас. водн. раствора NaHCO3 (10 мл) и экстрагировали CH2Cl2 (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением остатка, который очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 5-((7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она (трифторацетат) в виде белого твердого вещества. Выход: 290 мг. LCMS, способ C: Rt=0,593 мин, (M+H)⁺=581,2 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,00-8,15 (м, 1H), 7,50-7,70 (м, 2H), 6,90-7,40 (м, 9H), 4,67 (с, 1H), 4,43 (с, 2H), 3,35-3,95 (м, 8H), 1,90-2,25 (м, 4H), 1,20-1,35 (м, 3H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,92, -117,29~-118,17.

Примеры 60A-60D

5-((7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он (изомеры 1-4)

Указанное в заголовке соединение Примера 60 разделяли на диастереоизомеры методом SFC, способ A, а каждый диастереоизомер дополнительно разделяли на энантиомеры, методом SFC, способ 2.

Изомер 1: LCMS, способ C: R_t=0,606 мин, (M+H)⁺=581,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,30-8,45 (м, 1H), 7,52-7,79 (м, 2H), 7,10-7,40 (м, 8H), 6,95-7,10 (м, 1H), 4,66 (с, 1H), 4,35-4,50 (м, 2H), 3,55-3,95 (м, 5H), 3,35-3,50 (м, 3H), 1,82-2,26 (м, 4H), 1,20-1,35 (м, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,99, -117,37~-118,33. SFC: t_R=3,036 мин (э.и.=100%).

Изомер 2: LCMS, способ C: R_t=0,608 мин, (M+H)⁺=581,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,30-8,45 (м, 1H), 7,50-7,75 (м, 2H), 7,25-7,40 (м, 3H), 7,10-7,25 (м, 5H), 6,95-7,10 (м, 1H), 4,66 (с, 1H), 4,35-4,45 (м, 2H), 3,55-4,00 (м, 8H), 1,95-2,30 (м, 4H), 1,20-1,35 (м, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,98 8, -117,39~-118,17. SFC: t_R=3,353 мин (э.и.=100%).

Изомер 3: LCMS, способ C: R_t=0,606 мин, (M+H)⁺=581,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,15 (с, 1H), 7,57-7,66 (м, 2H), 7,31-7,40 (м, 1H), 7,10-7,25 (м, 3H), 6,83-7,10 (м, 5H), 4,72-4,82 (м, 1H), 3,63 (с, 2H), 3,35-3,60 (м, 4H), 2,55-2,75 (м, 2H), 2,35-2,50 (м, 2H), 1,65-1,90 (м, 4H), 1,20-1,30 (м, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,89~-121,17. SFC: t_R=7,926 мин (э.и.=100%).

Изомер 4: LCMS, способ C: R_t=0,609 мин, (M+H)⁺=581,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,15 (с, 1H), 7,55-7,68 (м, 2H), 7,30-7,40 (м, 1H), 6,81-7,27 (м, 8H), 4,71-4,82 (м, 1H), 3,40-3,72 (м, 6H), 2,60-2,70 (м, 2H), 2,40-2,50 (м, 2H), 1,65-1,90 (м, 4H), 1,28 (дд, J=13,6, 6,4 Гц, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,79~-121,27 (м, 1 F). SFC: t_R=9,407 мин (э.и.=100%).

Пример 61

5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-(3-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид

Стадия 1. 3-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензонитрил

К раствору оксазолидин-2-она (240 мг, 2,75 ммоль), K₂CO₃ (760 мг, 5,5 ммоль), CuI (16 мг, 0,083 ммоль) и транс-циклогександиамина (32 мг, 0,275 ммоль) в безводном диоксане (15 мл) в атмосфере азота добавляли 3-бромбензонитрил (500 мг, 2,75 ммоль), и перемешивали смесь при 110°C в течение 16 ч. Затем, реакционную смесь добавляли к EtOAc (30 мл) и фильтровали диатомитом. Фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного продукта, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением 3-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензонитрила в виде белого твердого вещества. Выход: 75 мг. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7,80-7,90 (м, 2H), 7,45-7,55 (м, 1H), 7,35-7,45(м, 1H), 4,45-4,55 (м, 2H), 4,00-4,10 (м, 2H).

Стадия 2. 3-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензальдегид

К раствору 3-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензонитрила (75 мг, 0,4 ммоль) в HCO₂H (11 мл) и H₂O (4 мл) при 20-24°C добавляли сплав Ni-Al (86 мг, 1 ммоль), а затем перемешивали смесь при 90°C в течение 16 ч. Реакционную смесь перемешивали дополнительно в течение 6 ч, а затем фильтровали. Фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления, полученный остаток добавляли в воду (50 мл) и экстрагировали CH₂Cl₂ (3×50 мл). Органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного 3-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензальдегида в виде белого твердого вещества. Выход: 60 мг. LCMS, способ D: R_t=0,911 мин, (M+H)⁺=192,2.

Стадия 3. 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-(3-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

Указанный в заголовке продукт получали в соответствии с методикой, описанной на стадии 4 Примера 41. Неочищенный продукт очищали методом RP-HPLC, способ D, с получением 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-(3-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в виде белого твердого вещества. LCMS, способ E: R_t=1,230 мин, (M+H)⁺=589,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,20-8,30 (м, 1H), 7,70-7,85 (м, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,40-7,50 (м, 1H), 7,25-7,35 (м, 1H), 7,05-7,20 (м, 3H), 6,75-6,95 (м, 1H), 4,40-4,55 (м, 2H), 4,00-4,15 (м, 2H), 3,55-3,80 (м, 6H), 2,94 (д, J=4,0 Гц, 2H), 2,77 (с, 2H), 2,60-2,75 (м, 2H), 2,40-2,60 (м, 2H), 1,85-2,00 (м, 2H), 1,70-1,85 (м, 2H), 1,05-1,25 (м, 6H),1⁹F-ЯМР (MeOD): δ -120,09~-120,54.

Пример 62

5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-(4-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид

Указанный в заголовке продукт синтезировали в соответствии со способом, сходным с методикой, описанной для Примера 61, используя в качестве исходного вещества 4-бромцианобензол. LCMS, способ C: R_t=0,607 мин, (M+H)⁺=589,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,29-8,33 (м, 1H), 7,80-7,88 (м, 1H),7,60-7,62 (м, 2H), 7,43-7,45 (м, 2H), 7,18-7,20 (м, 2H), 6,83-6,97 (м, 1H), 4,50-4,52 (м, 2H), 4,11-4,15 (м, 2H), 3,93-3,96 (м, 3H), 3,55-3,76 (м, 4H), 2,95-3,05 (м, 2H), 2,75-2,90 (м,3H), 1,93-2,05 (м, 5H), 1,18-1,35 (м, 7H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,17~-120,58

Пример 63

5-((7-(5-((5-фтор-2'-(2-гидроксипропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадия 1. 1-(2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)этанон

Раствор трет-бутил-7-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (200 мг, 0,37 ммоль) в TFA-CH₂Cl₂ (5 мл, об.:об.=1:5) перемешивали при 16-24°C приблизительно в течение 2 ч. Полученную смесь концентрировалии корректировали до pH=8 добавлением нас. водн. Na₂CO₃. Затем, смесь экстрагировали CH₂Cl₂ (3×20 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (10 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного 1-(2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)этанона в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. 5-((7-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

К раствору 1-(2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)этанона (200 мг, 0,37 ммоль, неочищ.) и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 60 мг, 0,37 ммоль) в MeOH (5 мл, безводный) добавляли AcOH (0,2 мл). Полученную смесь перемешивали при 50°C в атмосфере N₂ приблизительно в течение 2 ч, затем добавляли NaBH₃CN (156 мг, 0,74 ммоль), и перемешивали полученную смесь при 50°C приблизительно в течение 16 ч. Смесь гасили добавлением нас. водн. раствора NaHCO₃ (50 мл) и экстрагировали CH₂Cl₂ (5×20 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением остатка, который очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (10%~100% MeOH в CH₂Cl₂) с получением 5-((7-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она в виде желтого твердого вещества. Выход: 100 мг. LCMS, способ C: R_t=0,606 мин, (M+H)⁺=579,2.

Стадия 3. 5-((7-(5-((5-фтор-2'-(2-гидроксипропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

К раствору 5-((7-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она (100 мг, 0,17 ммоль) в THF (5 мл, безводный) при 78°C в атмосфере N₂ по каплям добавляли MeMgBr (0,6 мл, 1,7 ммоль, 3M в эфире), и перемешивали полученную смесь при 78°C в атмосфере N₂ приблизительно в течение 4 ч. Затем, смесь гасили добавлением нас. водн. раствора NH₄Cl (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением остатка, который очищали методом препаративной RP-HPLC с щелочной подвижной фазой, способ D, с получением 5-((7-(5-((5-фтор-2'-(2-гидроксипропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она в виде белого твердого вещества. Выход: 6 мг. LCMS, способ C: R_t=0,614 мин, (M+H)⁺=595,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,10-8,31 (м, 1H), 7,58-7,86 (м, 2H), 7,24-7,40 (м, 1H), 6,81-7,22 (м, 8H), 4,04 (с, 2H), 3,45-3,63 (м, 4H), 2,69-3,20 (м, 4H), 1,80-2,03 (м, 4H), 1,23-1,55 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,92, -121,82.

Пример 64

2-(1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-илметил)-6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

Указанное в заголовке соединение получали из промежуточного продукта 27 (200 мг, 0,49 ммоль) и 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбальдегида (101 мг, 0,59 ммоль) путем восстановительного аминирования, описанного на стадии 4 Примера 11. Продукт очищали методом RP-HPLC, способ D, с получением 2-(1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-илметил)-6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана в виде светло-желтого масла. Выход: 50 мг. LCMS, способ D: Rt=0,803 мин, (M+H)+=561,4 1H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,09 (с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,18 (с, 1H), 7,61-7,68 (м, 1H), 7,20-7,30 (м, 2H), 7,03-7,10 (м, 1H), 4,17 (с, 4H), 3,90 (с, 4H), 3,36 (с, 4H), 3,01-3,11 (м, 1H), 2,30-2,35 (м, 2H), 1,68-1,78 (м, 4H), 1,43-1,51 (м, 2H), 1,32-1,39 (м, 1H), 1,15-1,26 (м, 8H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,88.

Пример 65

4-((6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)метил)циклогексанол

(2-(1,4-Диоксаспиро[4.5]декан-8-илметил)-6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан (1,0 ммоль) при к.т. обрабатывали 4н водн. HCl (10 мл) в течение 6 ч. Растворитель удаляли на роторном испарителе, неочищенный продукт смешивали с MeOH (5 мл), добавляли NaBH4 (3,0 ммоль), и перемешивали полученную смесь в течение 30 мин. Растворитель удаляли на роторном испарителе, и очищали полученный остаток методом RP-HPLC, способ A, с получением 4-((6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)метил)циклогексанола (трифторацетат) в виде бесцветного масла. Выход: 6,3 мг. LCMS, способ C: R_t=0,854 мин, (M+H)⁺=519,4 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,12 (с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,39 (с, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,25-7,41 (м, 3H), 4,22-4,65 (м, 8H), 3,43-3,53 (м, 1H), 3,00-3,14 (м, 3H), 1,94-1,99 (м, 2H), 1,72-1,79 (м, 2H), 1,50-1,59 (м, 1H), 1,03-1,33 (м, 10H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -117,71, -77,02.

Пример 66

2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(6-((4-гидроксициклогексил)-метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил

Указанный в заголовке продукт синтезировали в соответствии со способом, описанным для Примера 65, используя в качестве исходного вещества 2'-((4-(2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-2-циклопропил-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил (промежуточный продукт 32). LCMS, способ D: R_t=1,154 мин, (M+H)⁺=540,4.

Пример 67

2-(5-((5-фтор-2'-(1-метоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)-пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

Стадия 1. трет-бутил-6-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-6-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 20, 150 мг, 0,322 ммоль), (2-ацетилфенил)бороновой кислоты (63 мг, 0,387 ммоль) и K₃PO₄ (205 мг, 0,97 ммоль) в смеси диоксан/H₂O (2 мл/0,5 мл) в атмосфере N₂ добавляли палладацикл Sphos (23 мг, 0,032 ммоль). Реакционную смесь герметизировали и нагревали в микроволновом реакторе при 115°C в течение 0,5 ч. Затем, смесь разбавляли H₂O (20 мл), фильтровали и экстрагировали этилацетатом (20 мл×3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Неочищенный остаток объединяли и очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:этилацетат=10:1→2:3) с получением трет-бутил-6-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата в виде желтого масла. Выход: 180 мг. LCMS, способ C: R_t=0,755 мин, (M+H)⁺=505,2

Стадия 2. 6-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-6-(5-((2'-ацетил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (180 мг, 0,36 ммоль) в безводном THF (10 мл) при 30°C в атмосфере N₂ добавляли NaBH₄ (40 мг, 1,07 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 2 ч. Смесь гасили добавлением H₂O (20 мл) и концентрировали в условиях пониженного давления для удаления THF и MeOH. Остаток экстрагировали EtOAc (20 мл×3), объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления с получением трет-бутил-6-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 181 мг. LCMS, способ C: R_t=0,745 мин, (M+H)⁺=507,2

Стадия 3. трет-бутил-6-(5-((5-фтор-2'-(1-метоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-6-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (100 мг, 0,20 ммоль) в безводном THF (5 мл) при 0°C в атмосфере N₂ добавляли NaH (40 мг, 1,00 ммоль, 60% в минеральном масле), и перемешивали реакционную смесь при 0°C в течение 0,5 ч. Затем, добавляли MeI (2,19 г, 15,43 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 18 ч. Смесь гасили добавлением H₂O (0,1 мл), концентрировали в условиях пониженного давления и очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:этилацетат=10:1→2:3) с получением трет-бутил-6-(5-((5-фтор-2'-(1-метоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата в виде желтого масла. Выход: 43 мг. LCMS, способ C: R_t=0,748 мин, (M+H)⁺=521,2

Стадия 4. 2-(5-((5-фтор-2'-(1-метоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

К раствору трет-бутил-6-(5-((5-фтор-2'-(1-метоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (43 мг, 0,082 ммоль) в безводном DCM (10 мл) при 0°C добавляли TFA (2 мл), и перемешивали реакционную смесь при 19-26°C в течение 2 ч. Смесь разбавляли 1н NaOH (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл×3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления с получением 2-(5-((5-фтор-2'-(1-метоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 5. 2-(5-((5-фтор-2'-(1-метоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

Раствор 2-(5-((5-фтор-2'-(1-метоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана (35 мг, 0,083 ммоль, неочищ.), тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегида (19 мг, 0,17 ммоль) и HOAc (20 мкл) в безводном MeOH (10 мл) перемешивали при 19-25°C в течение 0,5 ч. Затем, добавляли NaBH₃CN (21 мг, 0,33 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 60°C в течение 4 ч, после чего методом LCMS обнаруживали получение целевого продукта. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления, и очищали полученный остаток методом HPLC, способ A, с получением 2-(5-((5-фтор-2'-(1-метоксиэтил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана (трифторацетат) в виде белого твердого вещества. Выход: 22 мг. LCMS, способ C: R_t=0,735 мин, (M+H)⁺=519,2 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,38 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,72 (с, 1H), 7,55-7,60 (м, 1H), 7,40-7,50 (м, 1H), 7,30-7,34 (м, 3H), 7,13-7,28 (м, 2H), 4,4,25-4,60 (м, 9H), 3,94 (д, J=11,6 Гц, 2H), 3,35-3,45 (м, 2H), 3,05-3,15 (м, 5H), 1,80-1,95 (м, 1H), 1,62 (д, J=12,4 Гц, 2H), 1,27-1,37 (м, 5H),1⁹F-ЯМР (MeOD): δ -76,83, 117,75.

Пример 68

5-(5-фтор-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-амин

Стадия 1. 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

К смеси промежуточного продукта 20 (120 мг, 0,3 ммоль) в CH₂Cl₂ (3 мл) при охлаждении ледяной водой добавляли TFA (1 мл), и перемешивали полученную смесь при к.т. в течение 2 ч. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления, остаток корректировали до pH 10-12 добавлением 10% раствора NaOH и экстрагировали CH₂Cl₂ (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

Смесь 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана (90 мг, 0,24 ммоль), тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегида (41 мг, 0,36 ммоль), NaBH₃CN (60 мг, 0,96 ммоль) и HOAc (0,05 мл) в MeOH (5 мл) перемешивали при 70°C в течение 5 ч. Затем, добавляли нас. раствор NaHCO₃ для корректировки до pH=8. Смесь концентрировали в условиях пониженного давления. К остатку добавляли воду (20 мл), а затем экстрагировали EtOAc (2×30 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование дихлорметан:метанол=10:1) с получением 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана в виде белого твердого вещества. Выход: 90 мг. LCMS, способ C: R_t=0,539 мин, (M+H)⁺=463,0, 465,0 (изотопы брома).

Стадия 3. трет-бутил-(5-(5-фтор-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)карбамат

К смеси 2-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана (50 мг, 0,13 ммоль), трет-бутил-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)карбамата (59 мг, 0,17 ммоль) и K₃PO₄ (70 мг, 0,33 ммоль) в диоксане (2 мл) и H₂O (0,5 мл) в атмосфере N₂ добавляли палладацикл Sphos (8 мг, 0,011 ммоль), и перемешивали смесь при 115°C в течение 30 мин в микроволновом реакторе. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток добавляли к H₂O (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2×30 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом препаративной TLC на силикагеле (элюирование дихлорметан:метанол=10:1) с получением трет-бутил-(5-(5-фтор-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)карбамата в виде желтого масла. Выход: 35 мг.

Стадия 4. 5-(5-фтор-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-амин

К смеси трет-бутил-(5-(5-фтор-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)карбамата (35 мг, 0,06 ммоль) в CH₂Cl₂ (3 мл) при охлаждении ледяной водой добавляли TFA (1 мл), и перемешивали смесь при к.т. в течение 2 ч. Смесь концентрировали в условиях пониженного давления, и очищали остаток методом RP-HPLC, способ D, с получением 5-(5-фтор-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-амина в виде белого твердого вещества. Выход: 1,2 мг. LCMS, способ C: R_t=0,516 мин, (M+H)⁺=516,2 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,10 (с, 1H), 7,30-7,40 (м, 4H), 7,10-7,23 (м, 3H), 4,31 (s 4H), 3,90-4,05 (м, 3H), 3,35-3,40 (м, 8H), 2,85-2,95 (м, 2H), 2,37-2,39 (д, J=6,0 Гц, 2H), 1,62-1,64 (д, J=10,0 Гц, 3H), 1,20-1,35 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,93, -119,56.

Пример 69

5-((7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксипропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-((2'-бром-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

В круглую колбу емкостью 100 мл, оснащенную баллоном с азотом и обратным холодильником, последовательно загружали трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (промежуточный продукт 11, 1,0 г, 2,0 ммоль), EtOH (20 мл), толуол (8 мл) и H₂O (8 мл). К полученной смеси в атмосфере N₂ при перемешивании последовательно добавляли (2-бромфенил)бороновую кислоту (0,41 г, 2,0 ммоль), Pd(OAc)₂ (9 мг, 0,04 ммоль), PPh₃ (26 мг, 0,1 ммоль) и Na₂CO₃ (636 мг, 6,0 ммоль). После добавления, конечную смесь дегазировали и 3 раза продували N₂, а затем нагревали при 75-80°C в атмосфере N₂ в течение 16 ч. Затем, смесь концентрировали в условиях пониженного давления для удаления органических растворителей и H₂O (30 мл), добавляли к остатку солевой раствор (30 мл), а затем экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл×2), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления, и очищали полученный остаток методом RP-HPLC, способ D, с получением трет-бутил-7-(5-((2'-бром-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде белого твердого вещества. Выход: 0,26 г. LCMS, способ D: R_t=1,074 мин, (M+H)⁺=569,2.

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-(проп-1-ен-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К суспензии трет-бутил-7-(5-((2'-бром-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (0,26 г, 0,37 ммоль) в диоксане (15 мл) и H₂O (3 мл) в атмосфере азота добавляли 4,4,5,5-тетраметил-2-(проп-1-ен-2-ил)-1,3,2-диоксоборолан (0,12 г, 0,74 ммоль), K₃PO₄ (0,16 г, 0,74 ммоль) и палладацикл Sphos (13 мг, 0,019 ммоль). Полученную смесь дегазировали и 3 раза продували N₂, а затем нагревали при 70-75°C в атмосфере N₂ в течение 24 ч. В атмосфере N₂ добавляли дополнительную порцию 4,4,5,5-тетраметил-2-(проп-1-ен-2-ил)-1,3,2-диоксоборолана (70 мг, 0,42 ммоль) и палладцикла Sphos (7 мг, 0,0097 ммоль), полученную смесь нагревали при 70-75°C в атмосфере N₂ дополнительно в течение 18 ч, после чего методом LCMS обнаруживали завершение реакции. После охлаждения, к смеси добавляли H₂O (30 мл) и солевой раствор (30 мл), а затем экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл×2), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления, и очищали полученный остаток методом колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:EtOAc=1:1→1:2) с получением трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-(проп-1-ен-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде белого твердого вещества. Выход: 0,20 г. LCMS, способ D: R_t=1,108 мин, (M+H)⁺=531,2. ¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 8,35 (с, 1H), 7,83 (с, 1H), 7,20-7,35 (м, 3H), 7,10-7,15 (м, 1H), 6,90-7,10 (м, 2H), 6,65-6,75 (m 1H), 5,03 (с, 1H), 4,80 (с, 1H), 3,50-3,65 (m 2H), 3,35-3,50 (м, 3H), 3,20-3,35 (м, 1H), 3,10-3,20 (м, 2H), 1,82 (с, 3H), 1,70-1,80 (м, 4H), 1,47 (с, 9H). ¹⁹F-ЯМР (CDCl₃): δ -120,31.

Стадия 3. трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксипропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

В круглую колбу емкостью 500 мл, оснащенную баллоном с азотом, в атмосфере азота загружали трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-(проп-1-ен-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (140 мг, 0,23 ммоль) и THF (5 мл, безводный), и охлаждали полученную смесь до 0-3°C в атмосфере N₂. Затем, при 0-3°C в атмосфере N₂ при перемшивании по каплям добавляли BH₃-THF (1 мл, 1,0 ммоль, 1,0M в THF), реакционную смесь перемешивали при 0-3°C в атмосфере N₂ в течение 1 ч, а затем нагревали до к.т. в течение ночи. Последовательно добавляли H₂O (0,5 мл) и NaBO₃·4H₂O (50 мг, 0,32 ммоль), и перемешивали полученную смесь при к.т. в течение 3 ч. Реакционную смесь гасили добавлением H₂O (30 мл). К остатку добавляли солевой раствор (30 мл), и экстрагировали смесь EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (15 мл×2), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления, и очищали полученный остаток методом препаративной TLC на силикагеле (петролейный эфир:EtOAc=1:4) с получением трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксипропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде белого твердого вещества. Выход: 71 мг. LCMS, способ D: R_t=1,019 мин, (M+H)⁺=549,2.

Стадия 4. 2-(2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)пропан-1-ол

К раствору трет-бутил-7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксипропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (35 мг, 0,064 ммоль) в CH₂Cl₂ (3 мл) при 0-3°C при перемешивании добавляли HCl-MeOH (0,5 мл, 2 ммоль, 4M в MeOH), и перемешивали реакционную смесь в течение 1 ч. Реакционную смесь гасили добавлением H₂O (5 мл), и корректировали до pH=12 добавлением 10% водн. NaOH. Добавляли солевой раствор (10 мл), и экстрагировали смесь CH₂Cl₂ (10 мл×2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (10 мл×2), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного 2-(2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)пропан-1-ола в виде желтого липкого твердого вещества.

Стадия 5. 5-((7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксипропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

К суспензии 2-(2'-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)пропан-1-ола (20 мг, 0,45 ммоль) и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 7,3 мг, 0,045 ммоль) в безводном MeOH (3 мл) в атмосфере азота добавляли NaBH₃CN (5,8 мг, 0,09 ммоль), и перемешивали смесь при 60-65°C в течение 16 ч. Добавляли дополнительную порцию 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (10 мг, 0,062 ммоль) и NaBH₃CN (7 мг, 0,11 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 60-65°C дополнительно в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления и очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 5-((7-(5-((5-фтор-2'-(1-гидроксипропан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она (трифторацетат) в виде белого твердого вещества. Выход: 13 мг. LCMS, способ E: R_t=1,752 мин, (M+H)⁺=595,2 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,45 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 7,07-7,44 (м, 10H), 4,35-4,50 (м, 2H), 3,40-3,95 (м, 9H), 3,10-3,25 (м, 1H), 2,75-2,85 (м, 1H), 1,95-2,20 (м, 4H), 1,00-1,25 (м, 3H). ¹⁹F-ЯМР (C MeOD): δ -117,47, -76,69~-77,90.

Пример 70

5-((7-(5-(4-фтор-2-(морфолинометил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(морфолин-4-карбонил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойной кислоты (промежуточный продукт 33, Стадия 2, 60 мг, 0,13 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли HATU (61 мг, 0,16 ммоль), DIEA (168 мг, 1,3 ммоль) и морфолин (113 мг, 1,3 ммоль), и перемешивали смесь при 7°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления и очищали методом хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:MeOH=20:1) с получением неочищенного трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(морфолин-4-карбонил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде коричневого масла. Выход: 60 мг. LCMS, способ C: R_t=0,700 мин, (M+H)⁺=528,2.

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(морфолинометил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(морфолин-4-карбонил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (50 мг, 0,09 ммоль) в безводном THF (5 мл) при 0°C добавляли BH₃-Me₂S (0,2 мл, 10,0M в Me₂S), и перемешивали смесь при 60°C в атмосфере N₂ в течение 4 ч. Реакционную смесь при 0°C гасили добавлением MeOH (5 мл) и перемешивали при 60°C в течение 0,5 ч. Полученную смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:MeOH=20:1) с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(морфолинометил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде белого твердого вещества. Выход: 35 мг. LCMS, способ C: R_t=0,642 мин, (M+H)⁺=514,2.

Стадия 3. 4-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензил)морфолин

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(морфолинометил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (35 мг, 0,05 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (3 мл) добавляли TFA (1 мл), и перемешивали смесь при 10°C в атмосфере N₂ в течение 0,5 ч. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который корректировали до pH 9-10 добавлением 10% раствора NaOH и экстрагировали EtOAc (5 мл). Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 4-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензил)морфолина в виде коричневого масла, которое использовали на следующей стадии.

Стадия 4. 5-((7-(5-(4-фтор-2-(морфолинометил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он

К раствору 4-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)-пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензил)морфолина (20 мг, неочищ., 0,05 ммоль) и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 16 мг, 0,10 ммоль) в безводном MeOH (3 мл) в атмосфере N₂ добавляли NaBH₃CN (17 мг, 0,25 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 55°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом RP-HPLC, способ F, с получением 5-((7-(5-(4-фтор-2-(морфолинометил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она в виде белого твердого вещества. Выход: 7,10 мг. LCMS, способ E: R_t=1,635 мин, (M+H)⁺=560,2. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,23 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,27 (дд, J=9,2, 3,2 Гц, 1H), 7,00-7,05 (дд, J=8,8, 4,4 Гц, 4H), 3,74-3,81 (м, 3H), 3,57-3,68 (м, 9H), 2,59-2,74 (м, 3H), 2,45-2,51 (м, 5H), 1,93-1,99 (с, 2H), 1,84 (т, J=6,8 Гц, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -121,05.

Пример 71

1-(7-(5-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)-2-метилпропан-2-ол

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-йодпиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилат

К раствору 4-хлор-5-йодпиридимина (2 г, 8,3 ммоль) в MeCN (30 мл) добавляли трет-бутил-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилат (1,9 г, 8,3 ммоль) и K₂CO₃ (2,3 г, 16,6 ммоль), и перемешивали полученную суспензию при 90°C в течение 16 ч. Смесь фильтровали, фильтрат концентрировали, а затем очищали на колонке ISCO с силикагелем (петролейный эфир:EtOAc=10:1→3: 1) с получением трет-бутил-7-(5-йодпиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилата в виде желтого твердого вещества. Выход: 3,4 г. LCMS, способ C: R_t=0,718 мин, (M+H)⁺=431,1.

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-((2-бром-4-фторфенил)амино)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-йодпиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилата (350 мг, 0,813 ммоль) и 2-бром-4-фторанилина (186 мг, 0,976 ммоль) и NaO^tBu (234 мг, 2,44 ммоль) в безводном толуоле (5 мл) в атмосфере N₂ добавляли Pd₂(dba)₃ (37 мг, 0,041 ммоль), реакционную смесь герметизировали и нагревали в микроволновом реакторе при 120°C в течение 1 ч. Затем, смесь разбавляли H₂O (20 мл), фильтровали и экстрагировали этилацетатом (50 мл×3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали, фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления и очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:EtOAc (100:0→1:1) с получением трет-бутил-7-(5-((2-бром-4-фторфенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилата в виде коричневого твердого вещества. Выход: 485 мг. LCMS, способ E: R_t=2,229 мин, (M+H)⁺=492,1, 494,1 (изотопы брома).

Стадия 3. трет-бутил-7-(5-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилат

К смеси трет-бутил-7-(5-((2-бром-4-фторфенил)амино)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилата (350 мг, 0,711 ммоль), (2-этилфенил)бороновой кислоты (128 мг, 0,853 ммоль) и Na₂CO₃ (226 мг, 2,133 ммоль) в смеси диоксан/H₂O (20 мл/5 мл) в атмосфере N₂ добавляли Pd(dppf)Cl₂ (52 мг, 0,071 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 100°C в течение 18 ч. Затем, смесь разбавляли H₂O (20 мл), фильтровали и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали, фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления и очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир:EtOAc (10:1→3:2) с получением трет-бутил-7-(5-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилата в виде красного масла. Выход: 300 мг. LCMS, способ C: R_t=0,803 мин, (M+H)⁺=518,3.

Стадия 4. N-(2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-амин

К раствору трет-бутил-7-(5-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-карбоксилата (250 мг, 0,483 ммоль) в безводном DCM (20 мл) при 0°C добавляли HCl-диоксан (5 мл, 4M в диоксане), и перемешивали смесь при 20-24°C в течение 2 ч. Полученный остаток концентрировали в условиях пониженного давления и высокого вакуума с получением N-(2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-амина гидрохлорида в виде серого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 5. 1-(7-(5-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)-2-метилпропан-2-ол

Раствор N-(2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-4-(2-(3,3,3-трифторпропил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-амина (20 мг, 0,05 ммоль), 2,2-диметилоксирана (5 мг, 0,07 ммоль) и Et₃N (24 мг, 0,4 мл, 0,24 ммоль) в безводном EtOH (3 мл) перемешивали при 60°C в течение 18 ч. Смесь концентрировали в условиях пониженного давления и очищали методом RP-HPLC, способ A, с получением 1-(7-(5-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)-2-метилпропан-2-ола (трифторацетат) в виде бесцветного масла. Выход: 15,8 мг. LCMS, способ C: R_t=0,616 мин, (M+H)⁺=490,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,39 (с, 1H), 7,68 (с, 1H), 7,30-7,40 (м, 2H), 7,15-7,25 (м, 1H), 7,05-7,15 (м, 2H), 6,98 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,85-6,95 (м, 1H), 4,15-4,25 (м, 2H), 3,95-4,05 (м, 2H), 3,65-3,85 (м, 4H), 3,25-3,35 (м, 2H), 2,40-2,55 (м, 2H), 1,70-2,00 (м, 4H), 1,27 (с, 1H), 1,08 (т, J=7,6 Гц, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,88, -122,09.

Пример 72

1-((6-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)метил)циклогексан-1-ол

Стадия 1. трет-бутил-6-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

В круглодонную колбу добавляли трет-бутил-6-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат (промежуточный продукт 20, 1 г, 1 экв.), (1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)бороновую кислоту (598 мг, 1,25 экв.), палладацикл Sphos 2^го поколения (47 мг, 0,03 экв.; CAS #1375325-64-6) и ортофосфат калия (1,37 г, 3 экв.). К этой твердой смеси добавляли диоксан (5,6 мл) и воду (1,4 мл). Полученный раствор продували струей азота в течение 1 мин и нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Затем, реакционную смесь разбавляли EtOAc и воду. Фазы разделяли, и дважды обратно экстрагировали водную фазу EtOAc. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄, и концентрировали фильтрат. Неочищенный остаток очищали методом флэш-хроматографии (80 г SiO₂, этилацетат в гексанах в качестве элюента) с получением трет-бутил-6-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (1,0 г) в виде белого твердого вещества.

Стадия 2. 2-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан (промежуточный продукт 101)

В круглодонную колбу добавляли трет-бутил-6-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат (200 мг, 1 экв.), DCM (2 мл) и TFA (2 мл), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 30 мин. Затем, в условиях вакуума удаляли летучие вещества, и дважды упаривали неочищенный остаток совместно с дихлорметаном с получением 2-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана бис-трифторацетата (т.е., промежуточного продукта 101).

Стадия 3. 1-((6-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)метил)циклогексан-1-ол

В круглодонную колбу добавляли 2-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана бис-трифторацетат (20 мг, 1 экв.), 1-оксаспиро[2.5]октан (16 мг, 5 экв.), триэтиламин (21 мкл, 5 экв.) и изопропанол (2 мл). Колбу закрывали крышкой, и нагревали смесь при 70°C в течение ночи. Затем, летучие вещества удаляли в условиях вакуума, и очищали полученное неочищенное вещество методом RP-HPLC, способ A, с получением 1-((6-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)метил)циклогексан-1-ола (2,42 мг) в виде бесцветного масла. LCMS, способ G: R_t=5,58 мин.; M+H=575,68. ¹H-ЯМР (d4-MeOH) 8,41 (с, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,25-7,38 (м, 3H), 6,67 (с, 1H), 4,58 (ушир. с, 2H), 4,20-4,49 (м, 6H), 3,12-3,32 (м, 7H), 1,39 (м, 5H), 1,24-1,30 (м, 6H).

Пример 73

N-(2-амино-2-оксоэтил)-N-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(2-(N-(цианометил)изобутирамидо)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-изобутирамидофенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (100 мг, 0,2 ммоль) в безводном THF (4 мл) в атмосфере N₂ добавляли NaH (24 мг, 1,0 ммоль), а затем перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 30 мин. Добавляли 2-бромацетонитрил (48 мг, 0,4 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 12 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления, и распределяли остаток между EtOAc (10 мл) и H₂O (5 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением трет-бутил-7-(5-(2-(N-(цианометил)изобутирамидо)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде коричневого масла. Выход: 100 мг. LCMS, способ E: R_t=1,190 мин, (M+H)⁺=539,3.

Стадия 2. N-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-(2-амино-2-оксоэтил)изобутирамид

К раствору трет-бутил-7-(5-(2-(N-(цианометил)изобутирамидо)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (100 мг, 0,185 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (10 мл) в атмосфере N₂ добавляли TFA (2 мл), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 2 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления с получением остатка, и корректировали до pH=9-10 добавлением 10% NaOH. Затем, смесь экстрагировали CH₂Cl₂ (10 мл×3). Органические слои концентрировали в условиях пониженного давления с получением N-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-(2-амино-2-оксоэтил)изобутирамида в виде коричневого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 80 мг. LCMS, способ E: R_t=1,714 мин, (M+H)⁺=457,2.

Стадия 3. N-(2-амино-2-оксоэтил)-N-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид

К раствору N-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-(2-амино-2-оксоэтил)изобутирамида (40 мг, неочищ.) и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 29 мг, 0,18 ммоль) в безводном MeOH (4 мл) добавляли 4Å молекулярные сита (50 мг), а затем перемешивали реакционную смесь при 50°C в атмосфере N₂ в течение 2 ч. Спустя 2 ч, в раствор добавляли NaBH₃CN (28 мг, 0,45 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 50°C в течение 12 ч. Затем, реакционную смесь фильтровали, концентрировали в условиях пониженного давления и очищали методом RP-HPLC, способ G, с получением N-(2-амино-2-оксоэтил)-N-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамида в виде белого твердого вещества. Выход: 7,00 мг. LCMS, способ E: R_t=1,498 мин, (M+H)⁺=603,3. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,30 (с, 1H), 7,76 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,52 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,15 (т, J=8,0 Гц, 1H), 6,87-7,03 (м, 4H), 4,73 (дд, J=16,4, 3,6 Гц, 1H), 3,82 (дд, J=16,0, 4,8 Гц, 1H), 3,56-3,85 (м, 5H), 2,45-2,69 (м, 5H), 1,81-1,94 (м, 5H), 1,05 (дд, J=36,8, 6,8 Гц, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,24.

Пример 74

N-(5-фтор-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)пропан-2-сульфонамид

Стадия 1. трет-бутил-2-(5-(4-фтор-2-(1-метилэтилсульфонамидо)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилат

В колбу загружали трет-бутил-7-(5-бромпиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (1,264 г, 3,3 ммоль), N-(5-фтор-2-гидроксифенил)пропан-2-сульфонамид (0,727 г, 3,16 ммоль), CuI (30 мг, 0,16 ммоль), K₃PO₄ (1,34 г, 6,3 ммоль) и пиколиновую кислоту (20 мг, 0,16 ммоль), и трижды дегазировали/заполняли N₂. Добавляли безводный DMSO (10 мл), смесь дегазировали/заполняли N₂, и нагревали реакционную смесь при 80°C в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали H₂O, солевым раствором, сушили над безводным Na₂SO₄ и фильтровали. Фильтрат концентрировали досуха, и очищали полученный остаток методом флэш-хроматографии с использованием DCM/MeOH в качестве элюента с получением 1,33 г трет-бутил-2-(5-(4-фтор-2-(1-метилэтилсульфонамидо)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата. LCMS, способ B: R_t=1,35 мин, (M+H)⁺=536,3.

Стадия 2. N-(2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)пропан-2-сульфонамид

Смесь трет-бутил-2-(5-(4-фтор-2-(1-метилэтилсульфонамидо)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (526 мг, 0,98 ммоль) в MeOH (10 мл), содержащую 4M HCl в диоксане (4 мл), перемешивали при к.т. в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением N-(2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)пропан-2-сульфонамида в виде гидрохлорида. LCMS, способ B: R_t=0,56 мин, (M+H)⁺=436,1.

Стадии 3-5. N-(5-фтор-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)пропан-2-сульфонамид

Стадии 3-5 проводили, как описано для стадий 3-5 Примера 6A. LCMS, способ A: R_t=0,68 мин, (M+H)⁺=625,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,50 (с, 1H), 7,62 (ушир. с, 1H), 7,35 (дд, J= 8,8, 1,6 Гц, 1H), 7,24 (дд, J= 8,8, 1,6 Гц, 1H), 7,03 (м, 1H), 4,64 (м, 2H), 4,22 (м, 2H), 3,58 (д, J=12,4 Гц, 2H), 3,47 (м, 1H), 3,17 (м, 1H), 3,03-2,94 (м, 7H), 2,28 (д, J=13,6 Гц, 2H), 2,13 (д, J=12,8 Гц, 2H), 2,06 (д, J=10,8 Гц, 2H), 1,87 (д, J=12,8 Гц, 2H), 1,81 (м, 1H), 1,41 (д, J=6,8 Гц, 6H), 1,36 (м, 2H), 1,17 (м, 2H).

Пример 75.

трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(N-метилизобутирамидо)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

Стадия 1: трет-бутил-7-(5-(2-амино-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (промежуточный продукт 102)

К смеси трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (промежуточный продукт 11, 2,0 г, 4,0 ммоль) и NaN₃ (1,63 г, 25 ммоль) в EtOH (20 мл) и H₂O (10 мл) в атмосфере N₂ добавляли CuI (1,0 г, 5,0 ммоль) и аскорбат натрия (0,5 г, 2,5 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 100°C в течение 24 ч. Реакционную смесь фильтровали через Celite™ и концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование DCM:MeOH=1:0~10:1) с получением трет-бутил-7-(5-(2-амино-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде светло-коричневого твердого вещества. Выход: 1,4 г. LCMS, способ C: R_t=0,724 мин, (M+H)⁺=430,1.

Стадия 2. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-изобутирамидофенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (промежуточный продукт 103)

К смеси трет-бутил-7-(5-(2-амино-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (700 мг, 1,63 ммоль) в пиридине (20 мл) в атмосфере N₂ добавляли изобутирилхлорид (1,73 г, 16,3 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 19-21°C в течение 12 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления с получением остатка, который экстрагировали EtOAc (20 мл) и H₂O (10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-изобутирамидофенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде коричневого масла. Выход: 700 мг. LCMS, способ C: R_t=0,732 мин, (M+H)⁺=500,1.

Стадия 3. трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(N-метилизобутирамидо)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К смеси трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-изобутирамидофенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (400 мг, 0,80 ммоль) и CH₃I (500 мг, 3,5 ммоль) в безводном THF (10 мл) в атмосфере N₂ добавляли NaH (96 мг, 4,00 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 12-21°C в течение 2 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления с получением остатка, который экстрагировали EtOAc (10 мл) и H₂O (5 мл). Органический слой промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование DCM:MeOH=1:0~10:1) с получением трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(N-метилизобутирамидо)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в виде белого твердого вещества. Выход: 201 мг. LCMS, способ D: R_t=0,995 мин, (M+H)⁺=514,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,29-8,34 (м, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,33 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,17-7,21 (м, 1H), 6,85-7,05 (м, 1H), 3,35-3,81 (м, 8H), 2,57-2,62 (м, 1H), 1,88-1,97 (м, 5H), 1,45 (с, 11H), 1,05 (дд, J=18,8, 6,8 Гц, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,09.

Пример 76

N-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-N-метилизобутирамид

Стадия 1. N-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-метилизобутирамид

К раствору трет-бутил-7-(5-(4-фтор-2-(N-метилизобутирамидо)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (Пример 75, 70 мг, 0,14 ммоль) в безводном CH2Cl2 (10 мл) в атмосфере N2 добавляли TFA (2 мл), и перемешивали реакционную смесь при 19-25°C в течение 5 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления, и корректировали полученный остаток до pH=9-10 добавлением 10% раствора NaOH. Неочищенный остаток затем экстрагировали CH2Cl2 (3×15 мл). Органический слой концентрировали в условиях пониженного давления с получением N-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-метилизобутирамида в виде коричневого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2. N-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-N-метилизобутирамид

К смеси N-(2-((4-(2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-метилизобутирамида (55 мг, 0,15 ммоль) и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида (промежуточный продукт 40, 45 мг, 0,28 ммоль) в безводном MeOH (2 мл) и HOAc (0,1 мл) в атмосфере N2 добавляли NaBH3CN (43,4 мг, 0,7 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 65°C в течение 2 ч, после чего методом LCMS обнаруживали расходование исходного вещества. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления, полученный остаток разбавляли MeOH (5 мл) и очищали методом препаративной HPLC, способ G, с получением N-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-N-метилизобутирамида, в виде белого твердого вещества. Выход: 7,8 мг. LCMS, способ E: R_t=0,936 мин, (M+H)⁺=560,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,29 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 7,32 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,14 (ушир. с, 1H), 6,87-6,91 (м, 4H), 3,60-3,73 (м, 2H), 3,61 (д, J=4,4 Гц, 2H), 3,21 (с, 3H), 2,45-2,67 (м, 6H), 1,79-1,95 (м, 5H), 1,06 (д, J=6,8 Гц, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,16.

Пример 77

5-((7-(5-(4-фтор-2-изобутилфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Стадия 1. трет-бутил-7-(5-(2-бензил-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

В круглодонную колбу добавляли трет-бутил-7-(5-(2-бром-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (промежуточный продукт 11, 50 мг, 1 экв.) и THF (1 мл), и продували раствор струей азота в течение 1 мин. Добавляли бензилцинка бромид (610 мкл, 0,5M в THF, 3 экв.), и продували раствор струей азота. Добавляли Pd(PtBu₃)₂ (3 мг, 0,05 экв.), раствор продували струей азота в течение 1 мин и нагревали до 60°C. Затем, реакционную смесь охлаждали до к.т. К раствору добавляли Celite™, и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный остаток очищали методом флэш-хроматографии (12 г SiO₂, этилацетат/гексаны) с использованием методики сухого ввода. Соответствующие фракции объединяли и концентрировали с получением трет-бутил-7-(5-(2-бензил-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (70 мг).

Стадии 2-4. 5-((7-(5-(2-бензил-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он

Указанный в заголовке продукт синтезировали из трет-бутил-7-(5-(2-бензил-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилата в соответствии со способами, описанными на стадиях 3-4 Примера 41. LCMS, способ G: R_t=4,07 мин.; M+H=551,59.

Пример 78

2-(3-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)метил)пиридин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

Стадия 1. трет-бутил-6-(3-(2-хлор-4-фторбензил)пиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-6-(3-бромпиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (63 мг, 0,178 ммоль) в безводном THF (4 мл) в атмосфере N₂ добавляли раствор бромида (2-хлор-4-фторфенил)цинка(II) в THF (0,7 мл, 0,35 ммоль, 0,5 M), а затем Pd(PBu₃)₂ (6 мг, 7 мол.%), и нагревали смесь при 70°C в течение 1,5 ч. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали водным раствором NH₄Cl, солевым раствором, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали, и концентрировали фильтрат досуха. Остаток очищали методом флэш-хроматографии, а затем препаративной HPLC, способ A, с получением 29 мг трет-бутил-6-(3-(2-хлор-4-фторбензил)пиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата в виде трифторацетата. LCMS, способ B: Rt=1,17 мин.; M+H=418,1.

Стадия 2. трет-бутил-6-(3-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)метил)пиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат

трет-Бутил-6-(3-(2-хлор-4-фторбензил)пиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата трифторацетат (29 мг, 0,055 ммоль), (2-этилфенил)бороновую кислоту (9,8 мг, 0,065 ммоль), K₃PO₄ (80 мг, 0,38 ммоль), SPhos-Pd-G2 (8 мг), диоксан (2 мл) и H₂O (1 мл) смешивали в атмосфере N₂ и нагревали при 110°C в течение 15 мин в микроволновом реакторе. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали H₂O, солевым раствором, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали, и концентрировали фильтрат досуха. Остаток очищали методом флэш-хроматографии с получением 16 мг трет-бутил-6-(3-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)метил)пиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилата. LCMS, способ B: R_t=1,34 мин.; M+H=488,1.

Стадия 3: 2-(3-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)метил)-пиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

трет-Бутил-6-(3-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)метил)пиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-карбоксилат растворяли в 20% TFA/DCM (1 мл) и перемешивали при к.т. в течение 30 мин. Растворители удаляли с получением 2-(3-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)метил)пиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана в виде трифторацетата, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4. 2-(3-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)метил)-пиридин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан

2-(3-((2'-Этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)метил)пиридин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан растворяли в MeOH (2 мл), добавляли K₂CO₃ (40 мг), полученную смесь перемешивали в течение 10 мин и фильтровали через микрофильтр для HPLC. Фильтрат концентрировали досуха с получением свободного амина. Треть амина растворяли в DCM (1 мл), к этому раствору добавляли 1 каплю HOAc и тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегид (1 каплю), а затем NaBH(OAc)₃ (18 мг, 0,085 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин и концентрировали для удаления растворителя. Полученный остаток очищали методом препаративной HPLC, способ A, с получением 1,93 мг 2-(3-((2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)метил)пиридин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептана в виде трифторацетата. LCMS, способ B: R_t=0,89 мин.; M+H=496,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 7,99 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,35 (с, 1H), 7,26 (м, 1H), 7,21-7,18 (м, 2H), 6,99 (м, 2H), 6,44 (д, J=7,2 Гц, 2H), 4,43 (м, 4H), 3,95 (м, 2H), 3,84 (д, J=16,4 Гц, 2H)), 3,71 (д, J=16,4 Гц, 2H),3,41 (м, 2H), 3,12 (д, J=7,2 Гц, 2H), 2,31 (м, 2H), 1,90 (м, 1H), 1,61 (м, 2H), 1,34 (м, 2H), 1,06 (т, J=7,6 Гц, 3H).

Примеры 79-240

Примеры 79-240 получали в соответствии с методикой, описанной в Таблице 9, с использованием соответствующих исходных веществ. Данные охарактеризования Для Примеров 79-240 представлены в Таблице 10.

Таблица 9. Примеры 79-240

Пример Название Структура Методика 79 N-((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(3-циклопропил-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)-2,2,2-трифторацетамид Синтезировали способом, сходным с Примером 74. На конечной стадии использовали трифтоуксусный ангидрид. 80 N-(4-((2-(5-(2-(3-циклопропил-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)метансульфонамид Синтезировали способом, сходным с Примером 74, используя в качестве исходного вещества 5-циклопропил-6-(5-фтор-2-гидроксифенил)-1-метилпиридин-2(1H)-он 81A Изомер 1: 5-((7-(5-(2-(3-циклопропил-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1-(2-гидроксиэтил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он Синтезировали способом, сходным с Примерами 29A-29B 81B Изомер 2: 5-((7-(5-(2-(3-циклопропил-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1-(2-гидроксиэтил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-он Синтезировали способом, сходным с Примерами 29A-29B 82 (1r,4r)-4-(2-(6-(5-(2-(2-циклопропилпиридин-3-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)этил)циклогексан-1-амин Синтезировали из Примера 88 путем снятия защитных групп с использованием TFA 83 трет-бутил-((1r,4r)-4-(((2-(5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)карбамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-ил)амино)метил)циклогексил)карбамат Синтезировали из промежуточного продукта 38 и трет-бутил-((1r,4r)-4-формилциклогексил)-карбамата путем восстановительного аминирования, как описано на стадии 5 Примера 1 84 трет-бутил-((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(N-этилизобутирамидо)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)карбамат Синтезировали из промежуточного продукта 23 способом, описанным при синтезе Примера 75. На конечной стадии конденсировали с трет-бутил-((1r,4r)-4-формилциклогексил)карбаматом 85 метил-((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(N-этилизобутирамидо)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)карбамат Синтезировали из Примера 84 путем снятия защитных групп кислот, с последующим взаимодействием с метилхлороформиатом 86 N-этил-N-(5-фтор-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид Синтезировали из промежуточного продукта 23 способом, описанным при синтезе Примера 75. На конечной стадии конденсировали с N-((1r,4r)-4-формилциклогексил)метансульфонамидом 87 2-((4-(6-(2-((1r,4r)-4-(3,3-диметилбутанамидо)циклогексил)этил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41 путем восстановительного аминирования с трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-оксоэтил)циклогексил)-карбаматaми, описанного на стадии 5 Примера 1. Проводили снятие защитных BOC-групп с последующим взаимодействием с 3,3-диметилбутаноилхлоридом 88 трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-(6-(5-(2-(2-циклопропилпиридин-3-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)этил)циклогексил)карбамат Синтезировали из промежуточного продукта 31C и трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-оксоэтил)-циклогексил)карбамата способом, описанным на стадии 4 Примера 41 89 5-фтор-2-((4-(7-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта, полученного на стадии 2 Примера 6A и путем осуществления взаимодействия с эпоксидом способом, описанным на стадии 5 Примера 71 90 2-((4-(7-((3-циано-3-метил-2-оксоиндолин-6-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из Примера 99A и промежуточного примера 46 способом, описанным на стадии 5 Примера 1 91 метил-этил(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)карбамат Синтезировали способом, сходным с Примером 75, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 2, с последующим алкилированием метилхлороформиатом и алкилированием этилйодидом 91a 5-фтор-2-((4-(7-((1-(2-гидроксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 3, из промежуточного продукта 33 92 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)амино)-2-азаспиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 38 и 4-пиранкарбоксиальдегида путем восстановительного аминирования, как описано на стадии 5 Примера 1 93 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 36 и N-((1r,4r)-4-формилциклогексил)-метансульфонамида путем восстановительного аминирования, как описано на стадии 5 Примера 1 94 трет-бутил-((1r,4r)-4-((2-(5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)карбамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)карбамат Синтезировали из промежуточного продукта 36 и трет-бутил-((1r,4r)-4-формилциклогексил)-карбамата путем восстановительного аминирования, как описано на стадии 5 Примера 1 95 метил-((1r,4r)-4-((2-(5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)карбамоил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)карбамат Синтезировали из промежуточного продукта 36 и метил-((1r,4r)-4-формилциклогексил)карбамата путем восстановительного аминирования, как описано на стадии 5 Примера 1 96 N-(трет-бутил)-2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.4]октан-6-амин Синтезировали способом, описанным в Примере 18. На стадии 1 использовали трет-бутил-6-оксо-2-азаспиро[3.4]октан-2-карбоксилат. На стадии 3 использовали трет-бутиламин. 97 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(3,3-диметилуреидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта, полученного на стадии 4 Примера 6A, путем осуществления взаимодействия с диметилкарбамилхлоридом 98 5-фтор-2-((4-(7-((4-гидроксициклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из Примера 100 путем обработки кислотой с последующим восстановлением NaBH₄ 99 5-фтор-2-((4-(6-((4-гидроксициклогексил)метил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 98, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 41b 100 2-((4-(7-((1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта, полученного на стадии 2 Примера 6A, путем восстановительного аминирования с 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбальдегидом, как описано на стадии 5 Примера 1 101 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта, полученного на стадии 2 Примера 6A, путем восстановительного аминирования с тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегидом, как описано на стадии 5 Примера 1 102 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(6-неопентил-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41b путем восстановительного аминирования с пивалальдегидом, как описано на стадии 5 Примера 1 103 2-((4-(6-(циклопропилметил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41b путем восстановительного аминирования с циклопропанкарбальдегидом, как описано на стадии 5 Примера 1 104 2-((4-(6-(6-циано-1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41b путем восстановительного аминирования с 6-оксо-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-карбонитрилом, как описано на стадии 5 Примера 1 105 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(6-(2-((1r,4r)-4-пиваламидоциклогексил)этил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41 путем восстановительного аминирования с N-((1r,4r)-4-(2-оксоэтил)циклогексил) pivalamide как описано на стадии 5 Примера 1 106 N-(2-((4-(6-(циклогексилметил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-этилизобутирамид Синтезировали способом, сходным с Примером 75 используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 20 107 N-этил-5-фтор-N-изопропил-2-((4-(7-((1-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На стадии 3 использовали N-изопропил-N-этиламин. 108 2-(5-(2-(циклопентилокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-7-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан Синтезировали способом, описанным в Примере 54 109 2-(5-(2-циклопропокси-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-7-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан Синтезировали способом, описанным в Примере 54 110 N-этил-N-(5-фтор-2-((4-(7-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид Используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 23, синтезировали способом, описанным в Примере 75 111 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41b путем восстановительного аминирования с тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегидом, как описано на стадии 5 Примера 1 112 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41a путем восстановительного аминирования с тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегидом, как описано на стадии 5 Примера 1 113 2-((4-(6-(2-(4-цианофенил)ацетил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41b путем формирования амида с 2-(4-цианофенил)уксусной кислотой, как описано на стадии 5 Примера 12 114 5-фтор-2-((4-(6-(6-фтор-1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41 b путем восстановительного аминирования с 2-фтор-6-оксо-5,6,7,8-тетрагидронафталином, как описано на стадии 5 Примера 1 115 трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-(6-(5-(2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)этил)циклогексил)карбамат Синтезировали из промежуточного продукта 41a путем восстановительного аминирования с трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-оксоэтил)циклогексил)-карбамата, как описано на стадии 5 Примера 1 116 2-((4-(6-(2-(4-цианофенил)ацетил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N,N-диизопропилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 41a путем формирования амида с 2-(4-цианофенил)-уксусной кислотой, как описано на стадии 5 Примера 12 117 N-этил-N-(5-фтор-2-((4-(6-(5-(метилсульфонил)-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбонил)-2,6-диазаспиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид Синтезировали, используя в качестве исходного вещества Пример 120 путем преобразования брома в метансульфон 118 3-(((2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-ил)амино)метил)-бицикло[1.1.1]пентан-1-карбонитрил Синтезировали способом, сходным с методиками, описанными в Примере 41. На стадии 1 использовали трет-бутил-(2-азаспиро[3.3]гептан-6-ил)карбамат, на стадии 2 использовали 4-изопропил-4-пиримидинилбороновую кислоту, и на стадии 4 использовали 3-формилбицикло[1.1.1]пентан-1-карбонитрил 119 N-этил-N-(5-фтор-2-((4-(6-(2-(4-(метилсульфонил)фенил)ацетил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид Используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 22, синтезировали способом, описанным в Примере 12. На конечной стадии использовали 2-(4-(метилсульфонил)-фенил)уксусную кислоту 120 N-(2-((4-(6-(5-бром-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбонил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-этилизобутирамид Используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 22, синтезировали способом, описанным в Примере 12. На конечной стадии использовали 5-бром-2,3-дигидро-1H-инден-2-карбоновую кислоту 121 N-этил-N-(5-фтор-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид Синтезировали способом, сходным с Примером 75, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 20, и на конечной стадии конденсировали с тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегидом 122 N-циклопропил-5-фтор-N-изопропил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На стадии 4 использовали N-изопропил-N-циклопропиламин. 123 2-((4-(7-((1-(2-ацетамидоэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 33. На конечной стадии использовали промежуточный продукт 46. 124 2-((4-(7-((1-(2-(диметиламино)этил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 33. На конечной стадии использовали промежуточный продукт 44a. 125 2-((4-(7-((3-циано-3-метил-2-оксоиндолин-6-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 33. На конечной стадии использовали промежуточный продукт 46. 126 5-((7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)-2-метилпиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества 5-бром-4-хлор-2-метил-пиридимин. На стадии 2 использовали 2-изопропил-3-пиразолбороновую кислоту 127 2-((4-(2-(2-(4-цианофенил)ацетил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-6-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 37 путем сочетания с (4-цианобензол)уксусной кислотой, как описано в Примере 12 128 2-((4-(7-((1-этил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 33. На конечной стадии использовали 1-этил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид 129 5-фтор-N-изопропил-2-((4-(7-((1-(2-метоксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-метилбензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 33. На конечной стадии использовали промежуточный продукт 42A 130 4-(2-(6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)-2-оксоэтил)бензонитрил Промежуточный продукт 28 сочетали с 4-цианобензолацетилхлоридом, как описано в Примере 12 131 5-((7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1-(2-метоксиэтил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41. На стадии 2 использовали 4-изопропил 5-пиримидинбороновую кислоту, и на стадии 4 использовали промежуточный продукт 42. 132 1-(6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)-2-(6-метоксипиридин-3-ил)этан-1-он Промежуточный продукт 27 сочетали с (2-метоксипиридил)уксусной кислотой, как описано на стадии 5 Примера 12 133 6-(2-(6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)-2-оксоэтил)-3,3-диметилиндолин-2-он Промежуточный продукт 27 сочетали с 2-(3,3-диметил-2-оксоиндолин-6-ил)уксусной кислотой, как описано на стадии 5 Примера 12 134 трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-(6-(5-(4-фтор-2-(изопропил(метил)карбамоил)фенокси)-пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)этил)циклогексил)карбамат Синтезировали из промежуточного продукта 39 путем восстановительного аминирования с трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-оксоэтил)циклогексил)карбаматом, как описано на конечной стадии Примера 1 135 5-((7-(5-(4-фтор-2-((изопропил(метил)амино)метил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 70 136 N-этил-N-(5-фтор-2-((4-(6-изобутил-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид Синтезировали способом, сходным с Примером 75, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 24 137 N-(2-((4-(6-((4,4-дифторциклогексил)метил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-этилизобутирамид Синтезировали способом, сходным с Примером 75, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 24. На конечной стадии использовали 4,4-дифторциклогексан-1-карбальдегид 138 трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-(6-(5-(4-фтор-2-(N-метил-изобутирамидо)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)этил)циклогексил)карбамат Синтезировали способом, сходным с Примером 75, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 24. На конечной стадии использовали трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-оксоэтил)циклогексил)карбамат 139 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-7-(6-фтор-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан Синтезировали способом, сходным с Примером 18. На стадии 4 использовали 6-фтор-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин 140 4-(((2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-ил)амино)метил)-1-метилциклогексан-1-карбонитрил Промежуточный продукт 29 конденсировали с 4-формил-1-метилциклогексан-1-карбонитрилом, как описано на стадии 4 Примера 41 141 4-(1-((2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-ил)амино)этил)бензонитрил Промежуточный продукт 29 конденсировали с 4-ацетилбензонитрилом, как описано на стадии 4 Примера 41 142 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-(4-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 33 путем восстановительного аминирования с 4-(2-оксооксазолидин-3-ил)бензальдегидом, как описано на конечной стадии Примера 1 143 N-((1r,4r)-4-(2-(6-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)этил)циклогексил)ацетамид Синтезировали из промежуточного продукта 32 путем восстановительного аминирования с N-((1r,4r)-4-(2-оксоэтил)циклогексил)ацетамидом, как описано на стадии 4 Примера 41 144 метил-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)(изопропил)карбамат Синтезировали способом, сходным с Примером 75, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 102 145 2-((4-(7-((1H-индазол-6-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На конечной стадии использовали 1H-индазол-6-карбальдегид 146 2-((4-(7-((3-циано-1H-индазол-6-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 33 и 6-формил-1H-индазол-3-карбонитрила способом, описанным на стадии 4 Примера 6A 147 трет-бутил-((1r,4r)-4-((7-(5-(2-(циклопентилокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)циклогексил)карбамат Синтезировали способом, описанным в Примере 54 148A Изомер 1: 4-((2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-ил)амино)-1-метилциклогексанкарбонитрил промежуточный продукт 29 конденсировали с 1-метил-4-оксоциклогексан-1-карбонитрилом, как описано на стадии 4 Примера 41 148B Изомер 2: 4-((2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-ил)амино)-1-метилциклогексанкарбонитрил Минорный изомер выделяли методом SFC, способ A, при синтезе Примера 148A 149 4-(2-(2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-6-ил)-2-оксоэтил)бензонитрил Осуществляли взаимодействие промежуточного продукта 28 с (4-цианофенил)уксусной кислотой, как описано в Примере 12 150 5-((7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1-метил-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Промежуточный продукт 26 конденсировали с 1-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегидом, как описано на стадии 4 Примера 41 151 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(6-((4-гидроксициклогексил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали способом, сходным с Примером 65, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 32. 152 4-(((2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[3.3]гептан-6-ил)амино)метил)бензонитрил Промежуточный продукт 29 конденсировали с 4-цианобензальдегидом 153 5-((7-(5-(2-(2,5-диметилпирролидин-1-карбонил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На стадии 4 использовали 2,5-диметилпирролидин 154 5-((7-(5-(4-фтор-2-(пирролидин-1-карбонил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На стадии 4 использовали пирролидин 155 5-((7-(5-(4-фтор-2-(морфолин-4-карбонил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазаспиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На стадии 4 использовали морфолин 156 N-этил-N-(5-фтор-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид Синтезировали способом, сходным с Примером 75, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 24 157 7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-3-(6-фтор-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-1-окса-7-азаспиро[4.4]нонан Синтезировали из 1-окса-7-азаспиро[4.4]нонан-3-она, как описано для синтеза Примера 18 158 N-(2-((4-(6-(циклогексилметил)-2,6-диазапиро[3.4]октан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторфенил)-N-этилизобутирамид Используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 24, синтезировали способом, сходным с Примером 75 159 N-бензил-2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-амин 2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-он конденсировали с бензальдегидом, как описано для синтеза Примера 18 160 5-((7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 26 160A Изомер 1: 5-((7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Отдельный изомер Примера 160 разделяли методом SFC, способ A 160B Изомер 2: 5-((7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Отдельный изомер Примера 160 разделяли методом SFC, способ A 161 5-((7-(5-((5-фтор-2'-(проп-1-ен-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали путем обработки Примера 63 TFA 162 2-(5-(4-фтор-2-(2-изопропоксипиридин-3-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан Промежуточный продукт 20, сочетали с 2-изопропокси-3-пиридилбороновой кислотой. На стадии 4 Примера 41 использовали тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегид 163 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-((1-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На конечной стадии использовали 1-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид 164 этил-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)(метил)карбамат Используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 102, это соединение синтезировали способом, сходным с Примером 75 165 N-циклопропил-5-фтор-N-метил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На стадии 4 использовали N-метилциклопропиламин 166 5-фтор-N-метил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-фенилбензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На стадии использовали 4 N-метиланилин 167 2-((4-(6-(циклогексилметил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 39 и циклогексанкарбальдегида путем восстановительного аминирования, как описано на конечной стадии Примера 1 168 2-(5-(2-(циклопентилокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан Синтезировали способом, описанным в Примере 54, из промежуточного продукта 43a 169 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 31 путем конденсации с 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазол-5-карбальдегидом, как описано на стадии 4 Примера 41 170 метил-(3-((7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)фенил)карбамат Синтезировали из промежуточного продукта 31 путем конденсации с метил-(3-формилфенил)-карбаматом, как описано на стадии 4 Примера 41 171 2'-((4-(7-((1H-бензо[d][1,2,3]триазол-6-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-2-циклопропил-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 31 путем конденсации с 1H-бензо[d][1,2,3]триазол-6-карбальдегидом, как описано на стадии 4 Примера 41 172 N-(2-хлор-4-((7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)фенил)ацетамид Синтезировали из промежуточного продукта 31 путем конденсации с N-(2-хлор-4-формилфенил)ацетамидом, как описано на стадии 4 Примера 41 173 N,N-диэтил-5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На стадии 4 использовали N,N-диэтиламин 174 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 33 и 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазол-5-карбальдегида путем восстановительного аминирования, как описано на конечной стадии Примера 1 175 N-(трет-бутил)-5-фтор-N-метил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 1. На стадии 4 использовали трет-бутилметиламин 176 1-(7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)-2-метилпропан-2-ол Синтезировали из промежуточного продукта 26 и 2,2-диметилоксирана способом, описанным в Примере 72 177 2-(5-(2-(2-циклопропилпиридин-3-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан Синтезировали из промежуточного продукта 31c и тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегида способом, описанным на стадии 4 Примера 41 178 6-((7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-3,3-диметилиндолин-2-он Синтезировали из промежуточного продукта 26 путем конденсации с промежуточным продуктом 45, как описано на стадии 4 Примера 41 179 6-((7-(5-(2-(2-циклопропилпиридин-3-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-3,3-диметилиндолин-2-он Синтезировали из промежуточного продукта 31b путем конденсации с промежуточным продуктом 45, как описано на стадии 4 Примера 41 180 5-((7-(5-(2-(2-циклопропилпиридин-3-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 31b 181 4-(((2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-ил)(метил)амино)метил)бензонитрил Синтезировали способом, описанным для Примера 157, используя в качестве исходного вещества 5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-он 182 6-((7-(5-(4-фтор-2-(2,2,2-трифторэтокси)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-3,3-диметилиндолин-2-он Синтезировали способом, описанным в Примере 54, из промежуточного продукта 43a 183 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид (смесь) Синтезировали из промежуточного продукта 33 и 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегида, как описано в Примере 1 183A Изомер 1: 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Отдельный энантиомер Примера 183 разделяли методом SFC, способ A 183B Изомер 2: 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Отдельный энантиомер Примера 183 разделяли методом SFC, способ A 184 N-(циклогексилметил)-2-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-амин Синтезировали способом, сходным с Примером 19. На стадии 3 использовали 4-изопропил-5-пиримидинбороновую кислоту. На стадии 4 использовали циклогексилметиламин. 185 N-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-N-(2-гидроксиэтил)изобутирамид Синтезировали способом, сходным с Примером 75, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 103, и алкилировали (2-бромэтокси)триметилсиланом 186 N-этил-N-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)изобутирамид Синтезировали способом, сходным с Примером 75 187 N-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)-N-(2,2,2-трифторэтил)изобутирамид Синтезировали способом, сходным с Примером 75, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 103, и алкилировали 2,2,2-трифторэтил-4-метилбензолсульфонатом 188 N-((1r,4r)-4-((7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)циклогексил)ацетамид Синтезировали из промежуточного продукта 31 и N-((1r,4r)-4-формилциклогексил)ацетамида, как описано на стадии 4 Примера 41 189 трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-(6-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)этил)циклогексил)карбамат Синтезировали из промежуточного продукта 32 и трет-бутил-((1r,4r)-4-(2-оксоэтил)циклогексил)карбамата, способом, описанным на стадии 4 Примера 41 190 5-((7-(5-(4-фтор-2-(5-изопропилтиазол-4-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41. На стадии 1 использовали 5-изопропил-4-тиазолбороновую кислоту 190A N-((1s,4s)-4-((7-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)циклогексил)ацетамид Минорный изомер разделяли методом SFC, способ A, при синтезе Примера 188 191 2-циклопропил-2'-((4-(7-((1-этил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 31 и промежуточного продукта 42b, как описано на стадии 4 Примера 41 192 3-((7-(5-(2-(циклопентилокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-индол-6-карбонитрил Синтезировали способом, описанным в Примере 54, из промежуточного продукта 43a 193 6-((7-(5-(2-(циклопентилокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-3,3-диметилиндолин-2-он Синтезировали способом, описанным в Примере 54, из промежуточного продукта 43a 194 2-((4-(7-((6-циано-1H-индол-3-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 33 и 3-формил-1H-индол-6-карбонитрила, как описано на конечной стадии Примера 1 195 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-(4-(2-оксопирролидин-1-ил)бензил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 31 и 4-(2-оксопирролидин-1-ил)бензальдегида, как описано на стадии 4 Примера 41 196 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксоиндолин-6-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 31 и 2-оксоиндолин-6-карбальдегида, как описано на стадии 4 Примера 41 197A Изомер 1: 5-((7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Отдельный изомер Примера 237 разделяли методом SFC, способ A 197B Изомер 2: 5-((7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Отдельный изомер Примера 237 разделяли методом SFC, способ A 198 6-((7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества промежуточный продукт 31a. На стадии 4 использовали 1H-бензо[d][1,2,3]триазол-6-карбальдегид 199 2-циклопропил-3',5'-дифтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 17 способом, описанным для Примера 42 200 3-((7-(5-(2-(циклопропилметокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-индол-6-карбоксамид Синтезировали способом, описанным в Примере 54, из промежуточного продукта 43a 201 3-((7-(5-(2-(циклопропилметокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1H-индол-6-карбонитрил Синтезировали способом, описанным в Примере 54, из промежуточного продукта 43a 202 2-((4-(7-((3,3-диметил-2-оксоиндолин-6-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид Синтезировали из промежуточного продукта 33 и 3,3-диметил-2-оксоиндолин-6-карбальдегида, как описано на конечной стадии Примера 1 203 2'-((4-(6-(4-цианофенэтил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-2-циклопропил-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 32 и 4-(2-оксоэтил)бензонитрила способом, описанным для Примера 41 204 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксоиндолин-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 31 и 2-оксоиндолин-5-карбальдегида, как описано на стадии 4 Примера 41 205 2-циклопропил-2'-((4-(7-((3,3-диметил-2-оксоиндолин-6-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 31 и промежуточного продукта 42, как описано на стадии 4 Примера 41 206A Изомер 1: 2-амино-2-циклогексил-1-(7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)этанон Синтезировали из промежуточного продукта 31a и (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-циклогексилуксусной кислоты способом, описанным в Примере 12, с последующим снятием Boc-группы и разделением изомеров методом SFC, способ A 206B Изомер 2: 2-амино-2-циклогексил-1-(7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)этанон Синтезировали из промежуточного продукта 31a и (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-циклогексилуксусной кислоты способом, описанным в Примере 12, с последующим снятием Boc-группы и разделением изомеров методом SFC, способ A 206C Изомер 3: 2-амино-2-циклогексил-1-(7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)этанон Синтезировали из промежуточного продукта 31a и (R)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-циклогексилуксусной кислоты способом, описанным в Примере 12, с последующим снятием Boc-группы и разделением изомеров методом SFC, способ A 207 метил-(5-фтор-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)фенил)(метил)карбамат Синтезировали способом, сходным с Примером 75. Осуществляли взаимодействие промежуточного продукта 102 с метилхлороформиатом 208 5-((7-(5-(2-(бензилокси)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, описанным в Примере 54, из промежуточного продукта 43a 209 5-((7-(5-(4-фтор-2-метоксифенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, описанным в Примере 54, из промежуточного продукта 43a 210 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-((3-оксо-3,4-дигидро-2H-бензо[b][1,4]оксазин-6-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 33 и 3-оксо-3,4-дигидро-2H-бензо[b][1,4]оксазин-6-карбальдегида способом, описанным на конечной стадии Примера 1 211 5-((7-(5-(4-фтор-2-(2-метилпирролидин-1-карбонил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, описанным в Примере 1. На стадии 4 использовали 2-метилпирролидин 212 5-((7-(5-(2-((1s,4s)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, описанным в Примере 1. На стадии 4 использовали (1s,4s)-7-азабицикло[2.2.1]гептан 213 5-((7-(5-((2'-(1,1-дифторэтил)-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41. На стадии 1 использовали (2-(1,1-дифторэтил)фенил)бороновую кислоту 214 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(6-((4-гидрокситетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 32 и 4-(оксиран-2-ил)тетрагидро-2H-пирана способом, описанным в Примере 72 215 2-циклопропил-5'-фтор-2'-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 32 и тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегида способом, описанным на стадии 4 Примера 41 216 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества 1-изопропил-5-(трибутилстаннил)-3-(трифторметил)-1H-пиразол 217 5-((7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-3-(трифторметил)-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41. На стадии 1 использовали 1-изопропил-5-(трибутилстаннил)-3-(трифторметил)-1H-пиразол 218 5-((7-(5-(4-фтор-2-(2-изопропил-5-оксопирролидин-1-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали из промежуточного продукта 11 путем катализируемого мелью сочетания с 5-изопропилпирролидин-2-оном, как описано на стадиях 3 и 4 Примера 41 219 (1r,4r)-4-((7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)циклогексан-1-амин Синтезировали из Примера 220 путем снятия защитных групп с кислоты 220 трет-бутил-((1r,4r)-4-((7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)циклогексил)карбамат Синтезировали способом, описанным в Примере 41. На стадии 4 использовали трет-бутил-((1r,4r)-4-формилциклогексил)карбамат 221 N-(4-((7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)фенил)ацетамид Синтезировали способом, сходным с Примером 41. На конечной стадии использовали 4-ацетамидобензальдегид 222 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензолсульфонамид Синтезировали способом, сходным с Примером 74, используя в качестве исходного вещества трет-бутил-7-(5-бромпиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-карбоксилат 223 этил-5'-фтор-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-2-карбоксилат Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества 2-этоксикарбонилфенилбороновую кислоту 224 5-((7-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилтиазол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества 4-изопропил-5-тиазолбороновую кислоту 225 5-фтор-N-изопропил-N-метил-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 39 и 4-пиранкарбальдегида способом, описанным в Примере 1 226 5'-фтор-2-метил-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил Синтезировали из Примера 41, используя в качестве исходного вещества 4-циано-2-метил-фенилбороновую кислоту 227 4-(2-(6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)-2-оксоэтил)бензонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 27 и 4-цианофенилацетилхлорида способом, описанным в Примере 12 228 4-(2-(6-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)-2-оксоэтил)бензонитрил Синтезировали из промежуточного продукта 30 и 4-цианофенилацетилхлорида способом, описанным в Примере 12 229 1-(6-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)-2-(4-(метилсульфонил)фенил)этан-1-он Синтезировали из промежуточного продукта 30 и 2-(4-(метилсульфонил)фенил)ацетилхлорида способом, описанным в Примере 12 230 5'-фтор-2-метил-2'-((4-(7-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества 3-циано-2-метилфенилбороновую кислоту 231 2-((3,3-дифторциклогексил)метил)-6-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан Синтезировали из промежуточного продукта 101 и 3,3-дифторциклогексан-1-карбальдегида путем восстановительного аминирования, как описано на стадии 4 Примера 41 232 2-((3,3-дифторциклогексил)метил)-6-(5-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан Синтезировали из промежуточного продукта 27 и 3,3-дифторциклогексан-1-карбальдегида способом, описанным на стадии 4 Примера 41 233 4-(((2-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-5-окса-2-азаспиро[3.4]октан-7-ил)амино)метил)бензонитрил Синтезировали способом, сходным с Примером 19. На стадии 3 использовали 2-изопропил-3-пиразолбороновую кислоту 234 5-((7-(5-(2-(2-этилпиридин-3-ил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества 2-этил-3-пиридилбороновую кислоту 235 5-((7-(5-(4-фтор-2-изопентилфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, описанным для Примера 77, используя в качестве исходного вещества изопентилцинка хлорид 236 5-((7-(5-(4-фтор-2-изобутилфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, описанным для Примера 77, используя в качестве исходного вещества изобутилцинка хлорид 237 5-((7-(5-(4-фтор-2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали из промежуточного продукта 31a способом, описанным в Примере 41 237A 2-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан Синтезировали из промежуточного продукта 30 путем восстановительного аминирования с 4-пиранкарбоксальдегидом 238 N-этил-5-фтор-N-изопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)-метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали способом, сходным с Примером 6A из промежуточного продукта 41f 239 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)амино)-2-азаспиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из промежуточного продукта 38 и 4-пиранкарбальдегида способом, описанным на конечной стадии Примера 1 240 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(6-(метил(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)амино)-2-азаспиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид Синтезировали из Примера 239 путем восстановительного аминирования с формальдегидом.

Таблица 10. Данные охарактеризования Примеров 79-240.

Пример ¹H-ЯМР MS 79 ¹H-ЯМР (d4-MeOH) 8,44 (с, 1H), 7,83 (с, 1H), 7,57 (м, 1H), 7,46-7,51 (м, 2H), 7,06 (д, 1H), 6,60 (д, 1H), 3,93-4,40 (м, 4H), 3,72 (м, 1H), 3,55 (д, 2H), 3,32 (д, 3H), 2,94-3,04 (м, 4H), 2,20 (м, 2H), 1,90-2,06 (м, 7H), 1,45 (дд, 2H), 1,16-1,31 (м, 3H), 0,84 (м, 1H), 0,65 (м, 2H), 0,37 (м, 1H) м.д. LCMS, способ G: R_t=4,25 мин, (M+H)⁺=669,6 80 ¹H-ЯМР (d4-MeOH) -8,42 (с, 1H), 7,82 (с, 1H), 7,47-7,55 (м, 3H), 7,04 (д, 1H), 6,61 (д, 1H), 3,71-4,40 (м, 4H), 3,54 (д, 2H), 3,31 (д, 3H), 3,19 (м, 1H), 3,00 (м, 4H), 2,94 (с, 3H), 1,75-2,20 (м, 9H), 1,20-1,36 (м, 5H), 0,82 (м, 2H), 0,63 (м, 2H), 0,36 (м, 1H) м.д. LCMS, способ G: R_t=3,48 мин, (M+H)⁺=651,6 81A ¹H-ЯМР (MeOD): δ 8,24 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,30-7,40 (м, 2H), 7,10-7,20 (м, 2H), 7,00-7,10 (м, 3H), 6,50-6,65 (м, 1H), 3,95-4,05 (м, 2H), 3,80-3,90 (м, 2H), 3,55-3,70 (м, 4H), 3,40-3,55 (м, 2H), 3,35-3,40 (м, 3H), 2,60-2,80 (м, 2H), 2,40-2,55 (м, 2H), 1,75-1,95 (м, 4H), 1,25-1,35 (м, 1H), 0,50-0,85 (м, 4H),1⁹F-ЯМР (MeOD): δ -119,21~-119,14. LCMS, способ D: R_t=2,045 мин, (M+H)⁺=652,3 81B ¹H-ЯМР (MeOD): δ 8,24 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,30-7,40 (м, 2H), 7,10-7,20 (м, 2H), 7,00-7,10 (м, 3H), 6,56-6,59 (м, 1H), 3,95-4,05 (м, 2H), 3,80-3,87 (м, 2H), 3,55-3,70 (м, 4H), 3,40-3,55 (м, 2H), 3,35-3,40 (м, 3H), 2,40-2,80 (м, 4H), 1,75-1,96 (м, 4H), 1,20-1,35 (м, 1H), 0,40-0,85 (м, 4H),1⁹F-ЯМР (MeOD): δ -119,15. LCMS, способ D: R_t=2,048 мин, (M+H)⁺=652,3 82 LCMS, способ G: R_t=4,21 мин, (M+H)⁺=529,8 83 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,21-8,30 (м, 1H), 7,70-7,79 (м, 1H), 6,89-7,21 (м, 3H), 4,76-4,79 (м, 1H), 3,84-4,27 (м, 5H), 3,19-3,27 (м, 3H), 2,78-2,96 (м, 3H), 2,37-2,50 (м, 4H), 1,79-2,06 (м, 7H), 1,42 (с, 9H), 1,17-1,19 (м, 6H), 0,99-1,13 (м, 2H) ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,92~-118,61. LCMS, способ G: R_t=0,936 мин, (M+H)⁺=611,4 84 LCMS, способ G: R_t=5,11 мин, (M+H)⁺=639,8 85 LCMS, способ G: R_t=3,21 мин, (M+H)⁺=597,2 86 LCMS, способ G: R_t=3,41 мин, (M+H)⁺=616,2 87 LCMS, способ G: R_t=5,21 мин, (M+H)⁺=637,8 88 LCMS, способ G: R_t=6,31 мин, (M+H)⁺=629,8 89 LCMS, способ G: R_t=2,21 мин, (M+H)⁺=514,6 90 ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,58 (с, 1H), 8,00 (м, 1H), 7,59 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,29 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,24 (м, 3H), 7,17 (с, 1H), 4,47 (м, 2H), 4,01-3,48 (м, 8H), 2,15 (м, 4H), 1,78 (с, 3H), 1,52 (с, 3H), 1,39 (с, 3H), 1,21 (д, J=6,4 Гц, 3H). 1,21 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,10 (д, J=6,4 Гц, 3H). LCMS, способ A: R_t=0,84 мин, (M+H)⁺=626 91 LCMS, способ D: R_t=0,946 мин, (M+H)+=562,1 91A ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,26 (д, J=16,0 Гц, 1H), 8,07 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,69-7,82 (м, 2H), 7,33-7,38 (м, 1H), 7,15 (д, J=8,0 Гц, 2H), 6,83-6,93 (м, 1H), 3,93 (с, 1H), 3,68 (ушир. с, 6H), 2,94 (с, 3H), 2,77 (с, 3H), 1,82-1,94 (м, 5H), 1,18 (д, J=6,8 Гц, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,66, -123,26. LCMS, способ E: R_t= 0,840 мин, (M+H)⁺=567,1 92 LCMS, способ D: R_t=0,826 мин (M+H)+=484,1 93 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,20-8,24 (м, 1H), 7,68-7,77 (м, 1H), 6,92-7,20 (м, 3H), 4,76-4,78 (м, 1H), 3,86-3,95 (м, 5H), 3,10-3,13 (м, 1H), 2,76-2,95 (м, 6H), 2,37-2,39 (м, 4H), 2,16-2,17 (м, 2H), 1,99-2,03 (м, 2H), 1,81-1,86 (м, 5H), 0,99-1,48 (м,11H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -121,47~-118,42. LCMS, способ E: R_t= 1,740 мин, (M+H)⁺=603,3 94 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,20-8,24 (м, 1H), 7,67-7,76 (м, 1H), 7,15-7,20 (м, 2H), 6,93-7,04 (м, 1H), 4,76-4,78 (м, 1H), 3,85-3,95 (м, 5H), 3,23-3,24 (м, 4H), 2,76-2,94 (м, 3H), 2,12-2,35 (м, 6H), 1,80-1,90 (м, 7H), 1,41 (с, 9H), 1,14-1,17 (м, 6H), 0,92-1,01 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,43~-118,81. LCMS, способ E:=2,141 мин; (M+H)⁺=625,4 95 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,20-8,24 (м, 1H), 7,67-7,76 (м, 1H), 7,15-7,20 (м, 2H), 6,93-7,04 (м, 1H), 4,76-4,77 (м, 1H), 3,85-3,95 (м, 5H), 3,59 (с, 3H), 2,76-2,94 (м, 3H), 1,80-2,35 (м, 14H), 1,45-1,47 (м, 2H), 1,14-1,23 (м, 7H), 0,93-1,02 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,03~-119,55. LCMS, способ D: R_t=1,829 мин; (M+H)⁺=583,3 96 LCMS, способ G: R_t=2,21 мин; (M+H)⁺=491,2 97 LCMS, способ G: R_t=4,21 мин; (M+H)⁺=624,69 98 LCMS, способ G: R_t=3,66 мин; (M+H)⁺=554,63 99 LCMS, способ G: R_t=3,68 мин; (M+H)⁺=540,63 100 LCMS, способ B: R_t=0,784 мин; (M+H)⁺=596,77 101 LCMS, способ G: R_t=3,79 мин; (M+H)⁺=540,7 102 LCMS, способ G: R_t=4,57 мин; (M+H)⁺=498,61 103 LCMS, способ G: R_t=4,12 мин; (M+H)⁺=482,54 104 LCMS, способ G: R_t=5,36 мин; (M+H)⁺=583,63 105 LCMS, способ G: R_t=5,40 мин; (M+H)⁺=623,70 106 LCMS, способ D: R_t=0,897 мин; (M+H)⁺=496,2 107 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,56-8,65 (с, 1H), 7,81-8,15 (м, 1H), 7,27-7,39 (м, 5H), 7,20-7,22 (м, 1H), 4,32-4,51 (м, 3H), 3,90-4,06 (м, 3H), 3,41-3,58 (м, 9H), 3,32-3,33 (с, 1H), 2,11-2,28 (м, 4H), 1,11-1,37 (м, 9H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -117,18. LCMS, способ D: R_t=1,73 мин; (M+H)⁺=588,3 108 LCMS, способ D: R_t=1,73 мин; (M+H)⁺=468,6 109 LCMS, способ D: R_t=1,65 мин; (M+H)⁺=497,6 110 LCMS, способ G: R_t=3,40 мин; (M+H)⁺=526,2 111 LCMS, способ G: R_t=3,88 мин; (M+H)⁺=526,69 112 LCMS, способ G: R_t=3,88 мин; (M+H)⁺=5120,63 113 LCMS, способ G: R_t=5,93 мин; (M+H)⁺=571,63 114 LCMS, способ G: R_t=5,93 мин; (M+H)⁺=576,69 115 LCMS, способ G: R_t=6,14 мин; (M+H)⁺=639,79 116 LCMS, способ G: R_t=5,84 мин; (M+H)⁺=557,62 117 LCMS, способ G: R_t=5,12 мин; (M+H)⁺=622,5 118 LCMS, способ G: R_t=3,99 мин; (M+H)⁺=526,62 119 LCMS, способ G: R_t=4,75 мин; (M+H)⁺=596,49 120 LCMS, способ G: R_t=7,22 мин; (M+H)⁺=622,49 & 624,44 121 LCMS, способ D: R_t=1,71 мин; (M+H)⁺=498,3 122 LCMS, способ E: R_t 1,710 мин; (M+H)⁺=586,3 123 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,24-8,29 (м, 1H), 7,74-7,83 (м, 1H), 6,83-7,16 (м, 6H), 3,92-3,99 (м, 3H), 3,46-3,64 (м, 8H), 2,94-2,95 (м, 2H), 2,37-2,79 (м, 6H), 1,92 (ушир. с, 3H), 1,80 (с, 3H), 1,17-1,24 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,40 LCMS, способ D: R_t=0,900 мин; (M+H)⁺=645,4 124 LCMS, способ E: R_t+1,711 мин; (M+H)⁺=631,3 125 LCMS, способ G: R_t 3,710 мин; (M+H)⁺=598,3 126 ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 7,71 (с, 1H), 7,40 (с, 1H), 7,28-6,90 (м, 6H), 6,17 (с, 1H), 4,29 (с, 2H), 4,24 (м, 1H), 3,71 (м, 4H), 3,58- 3,32 (м, 4H), 2,39 (с, 3H), 1,97 (м, 4H), 1,23 (м, 6H). LCMS, способ B: R_t=0,62 мин, (M+H)⁺=583,6 127 ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ 8,32 (д, J=14,8 Гц, 1H), 7,81-7,89 (м, 1H), 7,70 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,47-7,50 (м, 2H), 7,17-7,21 (м, 2H), 6,88-7,00 (м, 1H), 4,19-4,25 (м, 2H), 3,63-3,98 (м, 9H), 2,80-2,97 (м, 3H), 2,05-2,15 (м, 2H), 1,18-1,30 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,11~-120,62. LCMS, способ D: R_t=0,92; (M+H)⁺=543,2 128 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,25-8,30 (м, 1H), 7,76-7,83 (м, 1H), 7,08-7,18 (м, 5H), 6,84-6,95 (м, 1H), 3,50-3,94 (м, 9H), 2,77-2,98 (м, 3H), 2,54-2,77 (м, 4H), 1,83-1,95 (м, 4H), 1,31 (т, J=7,2 Гц, 3H), 1,15-1,20 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,12~-120,58. LCMS, способ E: R_t=1,764 мин;(M+H)⁺=588,3 129 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,20-8,30 (м, 1H), 7,70-7,85 (м, 1H), 7,00-7,16 (м, 5H), 6,80-6,93 (м, 1H), 4,02 (т, J=5,2 Гц, 2H), 3,52-3,92 (м, 12H), 2,75-2,93 (м, 3H), 2,48-2,68 (м, 4H), 1,81-1,93 (м, 4H), 1,12-1,18 (м, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,12~-120,56. LCMS, способ E: R_t=1,734 мин; (M+H)⁺=618,3 130 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,11 (с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,27 (с, 1H), 7,79 (с, 1H), 7,71 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,48 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,25-7,31 (м, 2H), 7,04-7,06 (м, 1H), 4,17 (с, 2H), 3,90 (с, 2H), 3,64-3,77 (м, 6H), 3,06-3,13 (м, 1H), 2,05-2,15 (м, 2H), 1,22 (д, J=5,6 Гц, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,26~-120,34. LCMS, способ E: R_t=0,835 мин (M+H)⁺=564,2 131 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,10 (с, 1H), 8,61 (с, 1H), 8,25 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,20-7,25 (м, 2H), 6,90-7,15 (м, 4H), 4,06 (т, J=5,2 Гц, 2H), 3,35-3,70 (м, 11H), 3,05-3,11 (м, 1H), 2,40-2,67 (м, 4H), 1,70-1,95 (м, 4H), 1,15-1,25 (м, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,63 (с, 1 F). LCMS, способ E: R_t=1,834 мин; (M+H)⁺=693,3 132 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,09 (с,1H), 8,62 (с,1H), 8,20 (с,1H), 7,98 (м, 1H), 7,67 (с,1H), 7,50-7,60 (м, 1H), 7,20-7,30 (м, 2H),7,05-7,10 (м, 1H), 6,75-6,77 (д, J=8,8 Гц, 1H), 4,38 (с,2H), 4,26 (с,4H),4,09 (с,2H), 3,88 (с,3H), 3,42 (с,2H), 3,00-3,10 (м, 1H), 1,15-1,25 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,69~-119,72. LCMS, способ E: R_t=31,370 мин; M+H)⁺=556,3 133 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,09 (с, 1H), 8,62 (с, 1H), 8,19 (с, 1H), 7,67 (с, 1H), 7,22-7,27 (м, 3H), 7,17-7,19 (м, 1H), 6,90-7,10 (м, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,35 (с, 2H), 4,24 (с, 4H), 4,09 (с, 2H), 3,46 (с, 2H), 3,03-3,07 (м, 1H), 1,32 (с, 6H), 1,18-1,19 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,72~-119,69. LCMS, способ D: R_t=0,910 мин; (M+H)⁺=608,4 134 LCMS, способ D: R_t=0,910 мин; (M+H)⁺=611,6 135 LCMS, способ E: R_t=1,894; (M+H)=546,3 136 LCMS, способ G: R_t=3,12 мин; (M+H)⁺=470,6 137 LCMS, способ G: R_t=4,12 мин; (M+H)⁺=546,2 138 LCMS, способ G: R_t=5,32 мин; (M+H)⁺=611,7 139 LCMS, способ G: R_t=6,32 мин; (M+H)⁺=571,2 140 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,12 (с, 1H), 8,61 (с, 1H), 8,19 (с, 1H), 7,67 (с, 1H), 7,25-7,30 (м, 2H), 7,08-7,12 (м, 1H), 4,12 (с, 2H), 4,02 (с, 2H), 3,00-3,15 (м, 2H), 2,35-2,50 (м, 4H), 1,70-2,05 (м, 8H), 1,30-1,45 (м, 5H), 1,15-1,30 (м, 7H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,82. LCMS, способ C: R_t=1,13 мин; (M+H)⁺=556,4 141 ¹H-ЯМР (MeOD): δ 9,07 (с, 1H), 8,55 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,67-7,69 (м, 2H), 7,62 (с, 1H), 7,48-7,50 (м, 2H), 7,20-7,25 (м, 2H), 7,03-7,06 (м, 1H), 3,94-3,97 (м, 4H), 3,76-3,79 (м, 1H), 3,00-3,03 (м, 1H), 2,88-2,92 (м, 1H), 2,25-2,35 (м, 1H), 2,12-2,14 (м,1H), 1,91-1,97 (м, 1H), 1,78-1,83 (м, 1H),1,32 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,18-1,18 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,85 LCMS, способ C: R_t=0,639 мин; (M+H)⁺=550,1 142 ¹H-ЯМР (CD₃OD 400 МГц): δ 8,29-8,33 (м, 1H), 7,80-7,88 (м, 1H),7,60-7,62 (м, 2H), 7,43-7,45 (м, 2H), 7,18-7,20 (м, 2H), 6,83-6,97 (м, 1H), 4,50-4,52 (м, 2H), 4,11-4,15 (м, 2H), 3,93-3,96 (м, 3H), 3,55-3,76 (м, 4H), 2,95-3,05 (м, 2H), 2,75-2,90 (м,3H), 1,93-2,05 (м, 5H), 1,18-1,35 (м, 7H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,17~-120,58 LCMS, способ C: R_t=0,607 мин; (M+H)⁺=589,0; 143 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,15 (с, 1H), 7,55-7,57 (м, 3H), 7,37-7,39 (м, 1H), 7,15-7,27 (м, 3H), 4,26 (д, J=8,4 Гц, 2H), 3,97-3,98 (м, 3H), 3,55-3,57 (м, 2H), 2,69-3,05 (м, 4H), 1,56-1,95 (м, 9H), 0,92-1,33 (м, 8H), 0,71-0,73 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,61~-119,49. LCMS, способ D: R_t=0,843 мин; (M+H)⁺=595,4 144 LCMS, способ E: R_t=0,780 мин (M+H)⁺=576,1 145 LCMS, способ E: R_t=0,68 мин; (M+H)⁺=544,1 146 LCMS, способ D: R_t=0,75 мин; (M+H)⁺=569,1 147 LCMS, способ B: R_t=1,34 мин; (M+H)⁺=610,2 148A ¹H-ЯМР (CD₃OD₎: δ 9,10 (с, 1H), 8,59 (с, 1H), 8,17 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,22-7,28 (м, 2H), 7,06-7,10 (м, 1H), 4,10 (с, 2H), 3,98 (с, 2H), 3,16-3,20 (м, 1H), 3,05-3,08 (м, 1H), 2,65-2,75 (м, 1H), 2,44-2,46 (м, 2H), 1,92-1,97 (м, 2H),1,70-1,80 (м, 6H), 1,45-1,60 (м, 2H), 1,35 (с, 3H),1,20-1,21 (д, J=6,8 Гц, 6H). ¹⁹F-ЯМР (MeOD): δ -119,85~-119,86. LCMS, способ D: R_t=0,621 мин; (M+H)⁺=542,1 148B ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,10 (с, 1H), 8,59 (с, 1H), 8,17 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,22-7,28 (м, 2H), 7,06-7,09 (м, 1H), 4,10 (с,2H), 3,98 (с, 2H), 3,23-3,25 (м, 1H), 3,05-3,08 (м, 1H), 2,40-2,50 (м, 3H), 1,91-1,96 (м, 6H),1,38-1,43 (м, 4H), 1,34 (с, 3H), 1,20-1,22 (д, J=7,2 Гц, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,85~-119,86. LCMS, способ C: R_t=0,713 мин; (M+H)⁺=542,1 149 LCMS, способ D: R_t=0,816 мин; (M+H)⁺=573,2 150 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,09 (с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,45 (с, 1H), 7,88 (с, 1H), 7,18-7,37 (м, 6H), 4,45 (с, 2H), 3,75-3,90 (м, 4H), 3,35-3,64 (м, 7H), 2,95-3,15 (м, 1H), 1,95-2,15 (с, 4H), 1,05-1,25 (м, 6H). LCMS, способ D: R_t=0,616 мин; (M+H)⁺=595,0 151 LCMS, способ C: R_t=0,421 мин; (M+H)⁺=540,2 152 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,12 (с, 1H), 8,60 (с, 1H), 8,19 (с, 1H), 7,67-7,70 (м, 2H), 7,67 (с, 1H), 7,50-7,55 (м, 2H), 7,25-7,30 (м, 2H), 7,05-7,10 (м, 1H), 4,09 (с, 2H), 4,02 (с, 2H), 3,75 (с, 2H), 3,14-3,18 (м, 1H), 3,06-3,09 (м, 1H), 2,39-2,42 (м, 2H), 1,95-2,00 (м, 2H), 1,21-1,22 (д, J=6,0 Гц, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,81. LCMS, способ D: R_t=0,626 мин; (M+H)⁺=536,1 153 LCMS, способ D: R_t=0,959 мин; (M+H)⁺=586,1 154 LCMS, способ C: R_t=0,541 мин; (M+H)⁺=558,0 155 LCMS, способ D: R_t=0,875 мин (M+H)+=574,1 156 LCMS, способ G: R_t=3,12 мин; (M+H)⁺=512,2 157 LCMS, способ G: R_t=5,813 мин; (M+H)⁺=585,7 158 LCMS, способ G: R_t=7,22 мин; (M+H)⁺=510,2 159 LCMS, способ G: R_t=6,38 мин; (M+H)⁺=527,2 160A ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,10 (с, 1H), 8,61 (с, 1H), 8,25 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,20-7,30 (м, 2H), 6,80-7,15 (м, 4H), 3,80 (с, 2H), 3,40-3,65 (м, 4H), 3,00-3,15 (м, 1H), 2,50-3,00 (м, 4H), 1,75-2,00 (м, 4H), 1,22 (д, J=6,4 Гц, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,46. LCMS, способ E: R_t=1,060: (M+H)⁺=581,2 160B ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,08 (с, 1H), 8,59 (с, 1H), 8,23 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 7,15-7,25 (м, 2H), 6,90-7,15 (м, 4H), 3,85-4,00 (м, 2H), 3,45-3,65 (м, 5H), 2,55-3,15 (м, 4H), 1,75-2,05 (м, 4H), 1,15-1,25 (м, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,31. LCMS, способ E: R_t=1,112 мин; (M+H)⁺=581,2 161 LCMS, способ C: R_t=0,702 мин; (M+H)⁺=771 162 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,13-8,16 (м, 2H), 7,59-7,64 (м, 2H), 7,13-7,20 (м, 3H), 6,99-7,02 (м, 1H), 5,23-5,31 (м, 1H), 4,19 (с, 4H), 3,91-3,94 (м, 2H), 3,32-3,37 (м, 6H), 2,34-2,36 (д, J=6,4 Гц, 2H), 1,61-1,64 (м, 2H), 1,23-1,30 (м, 2H), 1,18-1,20 (д, J=6,0 Гц, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,36 LCMS, способ C: R_t=0,612 мин; (M+H)⁺=520,1 163 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,56 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,82-8,10 (м, 1H), 7,05-7,40 (м, 6H), 4,60-4,65 (м, 1H), 4,47 (с, 2H), 3,75-4,15 (м, 4H), 3,33-3,72 (м, 7H), 2,65-3,00 (м, 3H), 1,91-2,36 (м, 4H), 0,93-1,33 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,96, -117,20~-117,40. LCMS, способ C: R_t=0,598 мин; (M+H)⁺=574,0 164 LCMS, способ D: R_t=0,951 мин; (M+H)⁺=562,1 165 LCMS, способ E: R_t=0,911 мин; (M+H)⁺=558,1 166 LCMS, способ E: R_t=0,962 мин; (M+H)+=594,1 167 LCMS, способ E: R_t=1,024 мин; (M+H)⁺=482,2 168 LCMS, способ G: R_t=3,12 мин; (M+H)⁺=469,2 169 ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,25 (с, 1H), 7,59 (с, 1H), 7,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,28-7,04 (м, 8H), 4,29 (с, 2H), 3,72 (м, 4H), 3,32 (м, 4H), 1,97 (м, 4H), 1,52 (м, 1H), 0,77 (м, 2H), 0,56 (м, 2H). LCMS, способ B: R_t=1,63 мин; (M+H)⁺=603,7 170 ¹⁹F-ЯМР (MeOD): δ -76,962 (с, 7 F), -117,586 (с, 1 F),1H-ЯМР (MeOD): δ 8,40 (с, 1H), 7,77 (д, J=18,0 Гц, 2H), 7,45-7,59 (м, 1H), 7,29-7,44 (м, 5H), 7,13-7,28 (м, 3H), 4,40 (с, 2H). 3,78-3,94 (м, 4H), 3,75 (с, 3H), 3,34-3,72 (м, 4H) 1,98-2,37 (м, 4H), 1,69 (с, 1H), 0,93 (с, 2H), 0,71 (с, 2H) LCMS, способ C: R_t=0,703 мин; (M+H)⁺=619,0 171 ¹H-ЯМР (CD₃OD₎: δ 8,41 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,98 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,75 (с, 1H), 7,65 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,50 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,30-7,45 (м, 3H), 7,10-7,30 (м, 2H), 4,64 (с, 2H), 3,86 (с, 4H), 3,48 (с, 4H), 2,13 (с, 4H), 1,68 (с, 1H), 0,92 (с, 2H), 0,71 (с, 2H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD₎: δ -77,106. LCMS, способ C: R_t=0,845 мин; (M+H)⁺=587,3 172 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,16 (с, 1H), 7,68-7,73 (м, 1H), 7,67 (с, 1H), 7,48 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,41 (с, 1H), 7,32 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,13-7,26 (м,4H), 7,03 (дд, J=9,2 4,4 Гц, 1H), 3,44-3,64 (м, 5H), 3,30-3,40 (м, 1H), 2,54-2,72 (м, 2H), 2,34-2,46 (м, 2H), 2,18 (с, 3H), 1,65-1,95 (м, 5H), 0,85-0,95 (м, 2H), 0,60-0,75 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,48 (с, 1F). LCMS, способ C: R_t=0,683 мин; (M+H)⁺=637,0 173 LCMS, способ C: R_t=0,56 мин; (M+H)⁺=560,0 174 LCMS, способ G: R_t=2,36 мин; (M+H)⁺=561,2 175 LCMS, способ G: R_t=3,36 мин; (M+H)⁺=574,2 176 LCMS, способ A: R_t=0,66 мин; (M+H)⁺=507,1 177 LCMS, способ A: R_t=0,66 мин; (M+H)⁺=502,1 178 LCMS, способ B: R_t=1,51 мин; (M+H)⁺=608,1 179 LCMS, способ B: R_t=1,48 мин; (M+H)⁺=605,1 180 ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,48 (с, 1H), 8,03 (м, 1H), 7,88 (м, 1H),7,49 (м, 1H), 7,39-7,36 (м, 3H), 7,23 (с, 1H), 7,19 (д, J= 8,4 Гц, 1H), 7,11 (д, J= 8,4 Гц, 1H), 4,43 (с, 1H), 3,91 (м, 4H), 3,64-3,42 (м, 3H), 2,22-2,03 (м, 5H), 1,11 (м, 4H). LCMS, способ B: R_t=1,45 мин; (M+H)⁺=578,1 181 LCMS, способ B: R_t=1,45 мин; (M+H)⁺=566,2 182 LCMS, способ G: R_t=3,36 мин; (M+H)+=586,2 183 LCMS, способ G: R_t=3,07 мин; (M+H)⁺=560,49 183A ¹H-ЯМР (CD₃OD₎: δ 8,28 (с, 1H), 7,79 (с, 1H), 6,86-7,19 (м, 6H), 4,74-4,76 (м, 0,5H), 3,55-3,96 (м, 6,5H), 2,95-2,96 (м, 2,0H), 2,56-2,76 (м, 5H), 1,84-1,96 (м, 4H), 1,14-1,20 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,340 Аналитическая SFC, способ A: t_R=2,254 мин, э.и.=100%. LCMS, способ E: R_t=1,595 мин; (M+H)⁺=560,3 183B ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,28 (с, 1H), 7,79 (с, 1H), 6,86-7,19 (м, 6H), 4,74-4,76 (м, 0,5H), 3,55-3,96 (м, 6,5H), 2,95-2,96 (м, 2,0H), 2,56-2,76 (м, 5H), 1,84-1,98 (м, 4H), 1,15-1,20 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,340 Аналитическая SFC, способ A: t_R=0,879 мин, э.и.=100%. LCMS, способ D: R_t=1,596 мин; (M+H)⁺=560,3 184 LCMS, способ B: R_t=1,36 мин; (M+H)⁺=533,2 185 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,44-8,53 (м, 1H), 7,68-7,95 (м, 1H), 7,02-7,37 (м, 6H), 4,37-4,41 (м, 2H), 3,88-4,11 (м, 5H), 3,30-3,67 (м, 6H), 2,07-2,45 (м, 6H), 0,75-1,07 (м, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -116,59. LCMS, способ D: R_t=0,898 мин; (M+H)⁺=590,2 186 LCMS, способ D: R_t=0,878 мин; (M+H)⁺=574,4 187 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,30 (с, 1H), 7,78 (д, J=1,2 Гц, 1H), 7,32-7,35 (м, 1H), 7,19-7,20 (м, 1H), 6,90-7,02 (м, 4H), 4,04-4,08 (м, 1H), 3,56-3,68 (м, 7H), 2,48-2,64 (м, 5H), 1,78-1,93 (м, 4H), 1,09 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,99-1,01 (м, 3H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -70,50, -119,30. LCMS, способ D: R_t=0,813 мин; (M+H)⁺=628,1 188 ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,42 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,44 (м, 1H), 7,38 (м, 5H), 7,22 (м, 2H), 6,98 (д, J=7,6 Гц, 1H), 4,38 (с, 2H), 4,02-3,72 (м, 4H), 3,62 (м, 2H), 3,58 (с, 2H), 3,40 (м, 2H), 2,24-1,98 (м, 4H), 1,64 (м, 1H), 0,92 (м, 2H), 0,70 (м, 2H). LCMS, способ B: R_t=1,49 мин; (M+H)⁺=601,5 189 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,14 (с, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,50-7,58 (м, 1H), 7,38 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,10-7,30 (м, 4H), 4,17 (с, 4H), 3,35-3,40 (м, 5H), 2,45-2,50 (м, 2H), 1,85-1,95 (м, 2H), 1,65-1,75 (м, 3H), 1,44-1,74 (м, 10H), 1,15-1,35 (м, 5H), 0,90-1,10 (м, 4H), 0,70-0,80 (м, 1H). ¹⁹F-ЯМР (MeOD): δ -119,75. LCMS, способ C: R_t=0,750 мин; (M+H)⁺=653,1 190 LCMS, способ E: R_t=1,314 мин; (M+H)⁺=586,2 190A LCMS, способ E: R_t=1,724 мин; (M+H)⁺=608,2 191 ¹H-ЯМР (CD3OD): δ 8,16 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 7,31 (с, 1H), 7,06-7,23 (м, 7H), 3,94 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 3,75 (с, 2H), 3,41-3,63 (м, 4H), 2,78 (с, 2H), 2,56 (с, 2H), 1,69-1,92 (м, 5H), 1,31 (т, J=7,2 Гц, 3H), 0,89 (с, 2H), 0,67 (с, 2H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -76,916 (с, 0,3F), -120,337 (с, 1F). LCMS, способ E: R_t=1,614 мин; (M+H)⁺=630,3 192 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 11,77 (с, 1H), 8,51 (с, 1H), 7,92 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,87-7,84 (м, 2H), 7,55 (с, 1H), 7,43 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,28 (м, 1H), 7,00 (м, 1H), 6,76 (м, 1H), 4,80-4,70 (м, 1H), 4,68 (с, 2H), 4,45-4,30 (м, 2H), 4,05-3,95 (м, 2H), 3,80-3,60 (м, 2H), 3,50-3,30 (м, 2H), 2,35-2,10 (м, 5H), 1,85 (м, 2H), 1,57 (м, 4H), 1,30 (м, 2H). LCMS, способ B: R_t=1,32 мин; (M+H)⁺=553,6 193 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,52 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,36 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,32-7,30 (м, 1H), 7,19 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,10 (с, 1H), 7,01-6,98 (м, 1H), 6,79-6,75 (м, 1H), 4,80-4,70 (м, 1H), 4,42 (с, 2H), 4,40-3,95 (м, 4H), 3,80-3,60 (м, 2H), 3,50-3,30 (м, 2H), 2,35-2,10 (м, 5H), 1,85 (м, 2H), 1,58 (м, 4H), 1,34 (с, 6H), 1,30 (м, 2H). LCMS, способ B: R_t=1,43 мин; (M+H)⁺=532,7 194 LCMS, способ G: R_t=4,29 мин; (M+H)⁺=568,54 195 ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,27 (с, 1H), 7,63 (м, 1H), 7,60 (д, J=8 Гц, 2H), 7,42 (д, J=8 Гц, 2H), 7,39-7,14 (м, 4H), 7,08 (м, 2H), 4,27 (с, 2H), 3,78 (т, J=6,8 Гц, 2H), 3,86-3,58 (м, 4H), 3,58-3,22 (м, 4H), 2,45 (т, J=7,6 Гц, 2H), 2,24-1,86 (м, 6H), 1,54 (м, 1H), 0,78 (м, 2H), 0,56 (м, 2H). LCMS, способ B: R_t=1,43 мин; (M+H)⁺=629,8 196 ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,36 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 7,49 (д, J=7,3 Гц, 1H), 7,38-7,30 (м, 4H), 7,24 (м, 2H), 7,15 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,06 (с, 1H), 4,29 (с, 2H), 3,84-3,64 (м, 4H), 3,60-3,48 (м, 1H), 3,44 (м, 2H), 3,40-3,26 (м, 2H), 2,16-1,80 (м, 4H), 1,57 (м, 1H), 0,82 (м, 2H), 0,60 (м, 2H). LCMS, способ B: R_t=1,37 мин; (M+H)⁺=601,5 197A LCMS, способ E: R_t=1,814 мин; (M+H)⁺=568,6 197B LCMS, способ E: R_t=1,834 мин; (M+H)⁺=568,6 198 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,49 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,96 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,65 (дд, J=8,4, 1H), 7,45-7,6 (м, 1H), 7,37 (д, J=5,2 Гц, 2H), 7,29 (д, J=7,2 Гц, 1H), 6,30 (с, 1H), 4,64 (с, 2H), 4,38 (м, 1H), 3,90 (д, J=2,8 Гц, 4H), 3,40-3,75 (м, 4H), 2,15 (ушир. с, 4H), 1,36 (д, J=6,4 Гц, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -77,146, -117,398. LCMS, способ D: R_t=0,602 мин; (M+H)+=554,2 199 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,05 (с, 1H), 7,36-7,47 (м, 2H), 7,30-7,33 (м, 1H), 7,25 (с, 1H), 7,13 (с, 1H), 6,95-7,10 (м, 4H), 3,35-3,75 (м, 6H), 2,64-2,77 (м, 2H), 2,40-2,54 (м, 2H), 1,70-1,96 (м, 4H), 1,52-1,66 (м, 1H), 0,65-0,95 (м, 2H), 0,50-0,60 (м, 2H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -113,73 (с, 2F). LCMS, способ D: R_t=0,660 мин; (M+H)⁺=620,2 200 LCMS, способ B: R_t=1,48 мин; (M+H)⁺=557,7 201 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 11,77 (с, 1H), 8,51 (с, 1H), 7,93-7,87 (м, 2H), 7,84 (с, 1H), 7,59 (с, 1H), 7,42 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,30 (м, 1H), 6,96 (м, 1H), 6,77 (м, 1H), 4,68 (с, 2H), 4,40-4,35 (м, 2H), 4,05-3,95 (м, 2H), 3,80-3,60 (м, 4H), 3,50-3,30 (м, 2H), 2,28-2,11 (м, 5H), 1,01 (м, 1H), 0,47 (м, 2H), 0,15 (м, 2H). LCMS, способ B: R_t=1,48 мин; (M+H)⁺=539,7 202 LCMS, способ B: R_t=1,53 мин; (M+H)⁺=587,6 203 LCMS, способ G: R_t=4,53 мин; (M+H)⁺=557,3 204 LCMS, способ G: R_t=2,53 мин; (M+H)⁺=601,7 205 LCMS, способ D: R_t=1,48 мин;
(M+H)+=629,1 206A LCMS, способ C: R_t=1,38 мин; (M+H)+=562,7 206B LCMS, способ D: R_t=0,723 мин; (M+H)⁺=562,1 206C LCMS, способ D: R_t=0,713 мин; (M+H)⁺=562,1 207 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,25 (с, 1H), 7,66 (ушир. с, 1H), 7,20 (дд, J=8,8, 3,2 Гц, 1H), 7,04 (с, 2H), 6,98 (м, 2H), 6,87-6,88 (м, 1H), 3,58-3,69 (м, 9H), 3,19 (с, 3H), 2,64-2,67 (м, 4H), 1,80-1,94 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,65. LCMS, способ D: R_t=0,903 мин; (M+H)⁺=548,1 208 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,48 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,35-7,33 (м, 4H), 7,20-7,10 (м, 6H), 6,85-6,81 (м, 1H), 5,01-4,95 (м, 2H), 4,40-4,35 (м, 2H), 4,30-4,05 (м, 2H), 3,80-3,53 (м, 2H), 3,48-3,30 (м, 3H), 2,06-1,90 (м, 5H). LCMS, способ B: R_t=1,43 мин; (M+H)⁺=567,6 209 LCMS, способ G: R_t=3,81 мин; (M+H)⁺=491,6 210 LCMS, способ G: R_t=3,59 мин; (M+H)⁺=575,54 211 LCMS, способ G: R_t=2,52 мин; (M+H)⁺=572,70 212 LCMS, способ G: R_t=2,99 мин; (M+H)⁺=584,72 213 LCMS, способ D: R_t=0,13 мин; (M+H)⁺=601,3 214 LCMS, способ A: R_t=1,40 мин (M+H)+=542,1 215 LCMS, способ E: R_t=1,42 мин; (M+H)+=526,1 216 LCMS, способ G: R_t=3,19 мин; (M+H)⁺=621,7 217 LCMS, способ D: R_t=0,39 мин; (M+H)⁺=637,3 218 LCMS, способ G: R_t=3,62 мин; (M+H)⁺=586,80 219 LCMS, способ A: R_t=0,1 мин; (M+H)⁺=544,1 220 LCMS, способ E: R_t=1,44 мин; (M+H)⁺=644,1 221 LCMS, способ E: R_t=3,83 мин; (M+H)⁺=596,76 222 LCMS, способ G: R_t=4,75 мин; (M+H)⁺=596,49 223 LCMS, способ D: R_t=0,13 мин; (M+H)⁺=609,1 224 LCMS, способ D: R_t=0,12 мин; (M+H)⁺=586,1 225 LCMS, способ C: R_t=0,539 мин; (M+H)⁺=484,2 226 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,16 (с, 1H), 7,47-7,64 (м, 3H), 7,31-7,33 (м, 1H), 7,18-7,22 (м, 1H), 7,01-7,12 (м, 5H), 3,43-3,66 (м, 6H), 2,64-2,69 (м, 2H), 2,46 (с, 2H), 2,21 (с, 3H), 1,73-1,90 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,33. LCMS, способ C: R_t=0,361 мин; (M+H)⁺=576,1 227 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 9,12 (с, 1H), 8,65 (с, 1H), 8,22 (с, 1H), 7,67-7,71 (м, 3H), 7,46 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,25-7,33 (м, 2H), 7,10-7,14 (м, 1H), 4,41 (с, 2H), 4,28 (с, 4H), 4,13 (с, 2H), 3,60 (с, 2H), 3,05-3,13 (м, 1H), 1,16-1,22 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,62. LCMS, способ C: R_t=0,670 мин; (M+H)⁺=550,1 228 ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ 8,13 (с, 1H), 7,70 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,56 (с, 1H), 7,47 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,34-7,40 (м, 2H), 7,11-7,24 (м, 5H), 4,36 (с, 2H), 4,21 (с, 4H), 4,09 (с, 2H), 3,61 (с, 2H), 2,78-2,89 (м, 1H), 1,13 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,10 (д, J=7,2 Гц, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,81. LCMS, способ C: R_t=0,735 мин; (M+H)⁺=548,1 229 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,13 (с, 1H), 7,93 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,53-7,57 (м, 3H), 7,35-7,40 (м, 2H), 7,10-7,22 (м, 5H), 4,38 (с, 2H), 4,22 (с, 4H), 4,10 (с, 2H), 3,64 (с, 2H), 3,13 (с, 3H), 2,79-2,88 (м, 1H), 1,13 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,10 (д, J=6,8 Гц, 3H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -119,81. LCMS, способ C: R_t=0,712 мин; (M+H)⁺=601,1 230 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,15 (с, 1H), 7,62-7,66 (м, 2H), 7,41-7,47 (м, 1H), 7,18-7,32 (м, 2H), 7,13 (дд, J=8,4, 2,8 Гц, 1H), 6,95-7,08 (м, 4H), 3,43-3,66 (м, 6H), 2,65-2,71 (м, 2H), 2,45-2,50 (м, 2H), 2,36 (с, 3H), 1,75-1,90 (м, 4H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -120,15~-120,21. LCMS, способ C: R_t=0,616 мин; (M+H)⁺=576,1 231 LCMS, способ D: R_t=0,682 мин; (M+H)⁺=526,6 232 ¹H-ЯМР (CD₃OD)_: δ 9,14 (с, 1H), 8,65 (с, 1H), 8,40 (с, 1H), 7,81 (с, 1H), 7,25-7,45 (м, 3H), 4,30-4,50 (м, 8H), 3,15-3,20 (м, 2H), 3,05-3,15 (м, 1H), 1,80-2,09 (м, 4H), 1,70-1,79 (м, 2H), 1,45-1,65 (м, 3H), 1,10-1,25 (м, 6H),1⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -77,06, -117,77, -101,11~-101,76, -90,19~-90,83. LCMS, способ C: R_t=0,652 мин; (M+H)⁺=539,2 233 LCMS, способ B: R_t=1,152 мин; (M+H)⁺=540,2 234 ¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 8,68 (с, 1H), 8,47 (м, 1H), 8,18 (д, J= 7,2 Гц, 1H), 7,90 (м, 1H), 7,68 (м, 1H), 7,36-7,33 (м, 3H), 7,22 (с, 1H), 7,19 (д, J= 8,0 Гц, 1H), 7,11 (д, J= 8,0 Гц, 1H), 4,42 (с, 1H), 3,85 (м, 4H), 3,66-3,48 (м, 3H), 2,87 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 2,11 (м, 4H), 2,87 (д, J=7,6 Гц, 6H). LCMS, способ D: R_t=0,812 мин; (M+H)⁺=566,1 235 LCMS, способ B: R_t=1,252 мин; (M+H)⁺=531,2 236 LCMS, способ B: R_t=1,112 мин; (M+H)⁺=517,2 237 LCMS, способ E: R_t=0,07 мин; (M+H)⁺=569,5 237A ¹H-ЯМР (d4-MeOH) 8,38 (с, 1H), 7,62 (с, 1H), 7,16-7,42 (м, 5H), 7,14 (м, 2H), 4,25-4,62 (м, 8H), 3,94 (м, 2H), 3,41 (м, 2H), 3,12 (д, 2H), 2,81 (м, 1H), 1,88 (м, 1H), 1,61 (д, 2H), 1,33 (м, 2H), 1,14 (д, 3H), 1,10 (д, 3H) м.д. LCMS (способ 16 мин): R_t=5,07 мин; (M+H)⁺=503,8 238 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,50-8,60 (м, 1H), 7,65-7,95 (м, 1H), 7,20-7,45 (м, 3H), 4,20-4,75 (м, 5H), 3,85-3,95 (м, 1H), 3,35-3,65 (м, 3H), 2,90-3,25 (м, 9H), 1,75-2,40 (м, 9H), 1,05-1,45 (м, 12H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -117,14~-116,42, -83,63. LCMS, способ D: R_t=0,709 мин; (M+H)⁺=617,3 239 ¹H-ЯМР (MeOD): δ 8,52 (с, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,20-7,35 (м, 3H), 4,30-4,60 (м, 4H), 3,85-4,05 (м, 3H), 3,75-3,85 (м, 1H), 3,60-3,70 (м, 1H), 3,40-3,50 (м, 2H), 3,25-3,30 (м, 1H), 2,65-2,80 (м, 2H), 2,45-2,60 (м, 2H), 1,90-2,05 (м, 2H), 1,55-1,70 (м, 2H), 1,40-1,55 (м, 6H), 1,05-1,25 (м, 6H),1⁹F-ЯМР (MeOD): δ -116,90~117,18, -76,95. LCMS, способ D: R_t=1,055 мин; (M+H)⁺=512,3 240 LCMS, способ D: R_t=1,155 мин; (M+H)⁺=526,3

Примеры 241-249

Примеры 241-249 получали в соответствии с методикой, описакнной в таблице 11, с использованием соответствующих исходных веществ. Данные охарактеризования Примеров 241-249 представлены в таблице 12.

Таблица 11. Примеры 241-249

Пример Название Структура Способ синтеза 241 трет-бутил-((1r,4r)-4-((7-(5-((2-(диизопропилкарбамоил)-4-фторфенил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)метил)циклогексил)карбамат Синтезировали способом, описанным в Примере 16. На конечной стадии использовали трет-бутил-((1r,4r)-4-формилциклогексил)карбамат в условиях восстановительного аминирования 242 1-((6-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)амино)пиримидин-4-ил)-2,6-диазаспиро[3.3]гептан-2-ил)метил)циклогексан-1-ол Синтезировали способом, сходным с Примером 71, с использованием 1-оксаспиро[2.5]октана на конечной стадии 243 5-((7-(5-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)амино)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 71. На конечной стадии использовали 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-карбальдегид в условиях восстановительного аминирования 244 N-(4-фтор-2-(4-изопропилпиримидин-5-ил)фенил)-4-(6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-2,6-диазапиро[3.3]гептан-2-ил)пиримидин-5-амин Синтезировали способом, сходным с Примером 71. На конечной стадии тетрагидро-2H-пиран-4-карбальдегид использовали в условиях восстановительного аминирования 245 N-(5-фтор-2'-изопропокси-[1,1'-бифенил]-2-ил)-4-(2-изобутил-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-амин Синтезировали способом, сходным с Примером 71. На конечной стадии использовали изобутиральдегид в условиях восстановительного аминирования 246 N-(5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)-4-(2-изобутил-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-амин Синтезировали способом, сходным с Примером 71. На конечной стадии использовали изобутиральдегид в условиях восстановительного аминирования 247 N-(2'-этил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-4-(2-изобутил-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-амин Синтезировали способом, сходным с Примером 71. На конечной стадии использовали изобутиральдегид в условиях восстановительного аминирования 248A Изомер 1: 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(2-(4-(метилсульфонамидо)циклогексил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-ил)амино)бензамид Синтезировали способом, описанным в Примере 16. На конечной стадии использовали N-(4-оксоциклогексил)метансульфонамид в условиях восстановительного аминирования 248B Изомер 2: 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(2-(4-(метилсульфонамидо)циклогексил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)пиримидин-5-ил)амино)бензамид Минорный изомер разделяли методом SFC, способ A, при получении Примера 248A 249 5-((7-(3-((5-фтор-2'-изопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиридин-4-ил)-2,7-диазапиро[4.4]нонан-2-ил)метил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он Синтезировали способом, сходным с Примером 41, используя в качестве исходного вещества 3-бром-4-хлорпиридин

Таблица 12. Данные охарактеризования для Примеров 241-249

Пример ¹H-ЯМР MS 241 LCMS, способ D: R_t=1,15 мин; (M+H)⁺=652,1 242 LCMS, способ D: R_t=1,055 мин; (M+H)⁺=516,1 243 LCMS, способ D: R_t=: 0,8 мин; (M+H)⁺=578,1 244 LCMS, способ B: R_t=0,54 мин; (M+H)⁺=504,7 245 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,21 (с, 1H), 7,94 (с, 1H), 7,34 (т, J=7,2 Гц, 1H), 7,22 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,02-7,11 (м, 4H), 6,95-7,00 (м, 1H), 4,44-4,50 (м, 1H), 3,15-3,25 (м, 4H), 3,13 (с, 4H), 2,40 (д, J=6,8 Гц, 2H), 1,60-1,70 (м, 1H), 1,50-1,60 (м, 4H), 1,11 (д, J=5,6 Гц, 6H), 0,89 (д, J=3,2 Гц, 6H),1⁹F-ЯМР (MeOD): δ -123,08; LCMS, способ D:R_t=0,890 мин; (M+H)⁺=504,3 246 LCMS, способ D: R_t=0,72 мин; (M+H)⁺=488,2 247 LCMS, способ B: R_t=0,68 мин; (M+H)⁺=474,7 248A LCMS, способ D:R_t=0,921 мин; (M+H)⁺=616,6. 248B LCMS, способ D:R_t=0,932 мин; (M+H)⁺=616,6. 249 ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 7,95 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,74 (с, 1H), 7,40-7,10 (м, 10H), 6,77 (м, 1H), 4,41 (с, 2H), 3,63-3,26 (м, 8H), 2,78 (м, 1H), 2,15 (м, 4H), 1,12 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,03 (д, J=6,8 Гц, 3H). LCMS, способ A: R_t=0,81 мин; (M+H)⁺=578,1

Примеры 250A-250B

2'-((4-(7-амино-7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-2-циклопропил-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил (изомеры 1-2)

Стадия 1. трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)имино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (175 мг, 0,73 ммоль) и 2-метилпропан-2-сульфинамида (106,2 мг, 1,2 экв.) в THF (6 мл), добавляли тетраэтоксититан (283 мг, 260 мкл, 1,7 экв.), и нагревали полученный раствор с обратным холодильником в атмосфере N₂ в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т., к раствору добавляли солевой раствор (10 капель), и перемешивали в течение 1 ч при к.т. Смесь фильтровали через слой Celite™ и промывали EtOAc. Объединенные органические слои удаляли с получением трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)имино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (0,16 г, 64%). LCMS, способ B: R_t=1,48 мин; (M+H)⁺=343,1.

Стадия 2. трет-бутил-7-бензил-7-((трет-бутилсульфинил)-амино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат

К раствору трет-бутил-7-((трет-бутилсульфинил)имино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (0,16 г, 0,47 ммоль) в THF (0,5 мл) при 0°C добавляли бензилмагнийбромид (1н в THF, 1 мл). Полученный раствор нагревали до к.т., перемешивали в течение ночи, а затем гасили добавлением насыщенного водного раствора NH₄Cl. Птуем экстрагирования EtOAc получали трет-бутил-7-бензил-7-((трет-бутилсульфинил)амино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (112 мг), который использовали на следующей стадии без очистки.

Стадия 3. N-(7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамид

К раствору трет-бутил-7-бензил-7-((трет-бутилсульфинил)-амино)-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (112 мг) в DCM (2 мл) добавляли TFA (200 мкл), и перемешивали полученный раствор при к.т. в течение ночи. Растворитель удаляли в условиях вакуума, и использовали неочищенный продукт на следующей стадии без очистки. LCMS, способ B: R_t=1,27 мин; (M+H)⁺=335,2.

Стадия 4. N-(7-бензил-2-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамид

К трифторацетату N-(7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (0,18 ммоль) в iPrOH (1 мл) добавляли триметиламин (100 мкл) и 4-хлор-5-(2-хлор-4-фторфенокси)-пиридимин (промежуточный продукт 10a) (40 мг, 0,15 ммоль). Полученный раствор нагревали в микроволновом реакторе CEM при 110°C в течение 1 ч. После охлаждения, раствор разбавляли EtOAc, фильтровали, и концентрировали фильтрат досуха. Остаток очищали на колонке ISCO с силикагелем, элюируя 100% EtOAc с получением N-(7-бензил-2-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (31 мг, 31%). LCMS, способ B: R_t=1,72 мин; (M+H)⁺=558,1.

Стадия 5. N-(7-бензил-2-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамид

К раствору N-(7-бензил-2-(5-(2-хлор-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (31 мг, 0,056 ммоль), 3-циклопропил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрила (18 мг, 0,067 ммоль), K₃PO₄ (24 мг, 0,112 ммоль) в 1,4-диоксане (0,6 мл) и воде (0,3 мл) добавляли хлор(2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диметокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладий(II) (2 мг, 5 мол.%). Полученный раствор дегазировали, продували N₂ и нагревали в микроволновом реакторе CEM при 110°C в течение 1 ч. После охлаждения, реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором. Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, концентрировали досуха с получением неочищенного продукта, который использовали на следующй стадии. LCMS, способ B: R_t=1,79 мин; (M+H)⁺=664,7.

Стадия 5. 2'-((4-(7-амино-7-бензил-2-азаспиро[4.4]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-2-циклопропил-5'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил (изомеры 1-2)

К N-(7-бензил-2-(5-((4'-циано-2'-циклопропил-5-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)окси)пиримидин-4-ил)-2-азаспиро[4.4]нонан-7-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамиду в MeOH (1 мл) добавляли 6н водн. раствор HCl (1 мл), и перемешивали полученный раствор при комнатной температуре до исчезновения исходного вещества. Растворитель удаляли в условиях вакуума, и очищали остаток методом препаративной RP-HPLC, способ E, с получением целевого продукта в виде двух изомеров.

Изомер 1 в виде трифторацетата (1,81 мг): LCMS, способ B: R_t=1,41 мин; (M+H)⁺=560,6. ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,34 (с, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,45-7,21 (м, 11H), 3,72 (м, 2H), 3,44 (м, 1H), 3,32 (м, 1H), 2,96 (с, 2H), 2,14 (м, 2H), 1,88 (м, 8H), 1,84 (м, 1H), 0,78 (м, 2H), 0,60 (м, 2H).

Изомер 2 в виде трифторацетата (1,76 мг): LCMS, способ B: R_t=1,45 мин; (M+H)⁺=560,6. ¹H-ЯМР (MeOH-d4): δ 8,24 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,38 (д, J=8 Гц, 1H), 7,35-7,18 (м, 8H), 7,13 (м, 2H), 3,70-3,40 (м, 3H), 3,28 (м, 1H), 2,92 (с, 2H), 2,08 (м, 2H), 1,86-1,50 (м, 6H), 1,49 (м, 1H), 0,78 (м, 2H), 0,60 (м, 4H).

Пример 251

2-((4-(3-(4-ацетамидобензил)-2-амино-4-оксо-1,3,7-триазаспиро[4.4]нон-1-ен-7-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид

Стадия 1: трет-бутил-4-ацетамидобензилкарбамат

Охлажденный раствор трет-бутил-4-аминобензилкарбамата (510 мг, 2,29 ммоль) в пиридине (5 мл) при 0°C обрабатывали ацетилхлоридом (216 мг, 2,75 ммоль) и перемешивали в течение 18 ч при к.т. Растворитель концентрировали в условиях пониженного давления, и очищали остаток методом колоночной флэш-хроматографии (ISCO) на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:EtOAc=10:1→1:1) с получением трет-бутил-4-ацетамидобензилкарбамата в виде белого твердого вещества. LCMS, способ C: R_t=0,894 мин; (M+Na)⁺=287,2.

Стадия 2: N-(4-(аминометил)фенил)ацетамид

К раствору трет-бутил-4-ацетамидобензилкарбамата (550 мг, 2,08 ммоль) в безводном DCM (12 мл) при 0°C в атмосфере N₂ медленно добавляли TFA (3 мл), и перемешивали реакционную смесь при 0°C в течение 1,5 ч. Смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением N-(4-(аминометил)фенил)-ацетамида, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки в виде белого твердого вещества в виде трифторацетата. Выход: 342 мг (100%, неочищ.). LCMS, способ D: R_t=0,1,338 мин; (2M+H)⁺=329,1.

Стадия 3: N-(4-((3-трет-бутоксикарбонилтиоуреидо)метил)-фенил)ацетамид

К смеси N,N'-бис-трет-бутоксикарбонилтиомочевины (500 мг, 1,81 ммоль) и безводного THF (20 мл) при 0°C добавляли 60% NaH (87 мг, 2,17 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 14-17°C в течение 1 ч, затем добавляли TFAA (193 мг/0,129 мл, 1,99 ммоль), и продолжали перемешивание дополнительно в течение 1 ч. Затем, добавляли N-(4-(аминометил)фенил)ацетамид (249 мг, 1,99 ммоль) и Et₃N (1 мл) в безводном THF (10 мл), и перемешивали полученную реакционную смесь при 14-17°C в течение 18 ч. Добавляли H₂O (50 мл) для гашения реакционной смеси, и экстрагировали смесь EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (2×40 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной флэш-хроматографии (ISCO) на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:EtOAc=1:0→10:1) с получением N-(4-((3-трет-бутоксикарбонилтиоуреидо)метил)фенил)ацетамида в виде белого твердого вещества. LCMS, способ C: R_t=0,998 мин; (M+Na)⁺=346,2.

Стадия 4: трет-бутил-3-(4-ацетамидобензил)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-оксо-1,3,7-триазаспиро[4.4]нон-1-ен-7-карбоксилат

К раствору 1-трет-бутил-3-метил-3-аминопирролидин-1,3-дикарбоксилата (100 мг, 0,409 ммоль) в 5 мл DMF добавляли N-(4-((3-трет-бутоксикарбонилтиоуреидо)метил)фенил)ацетамид (159 мг, 0,491 ммоль), EDCI (127 мг, 0,819 ммоль) и DIEA (106 мг, 0,819 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 48 ч. Растворитель концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной флэш-хроматографии (ISCO) на силикагеле (элюирование смесью петролейный эфир:EtOAc=10:1→1:1) с получением трет-бутил-3-(4-ацетамидобензил)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-оксо-1,3,7-триазаспиро[4.4]нон-1-ен-7-карбоксилата в виде белого твердого вещества. Выход: 114 мг (55% в 2 этапа). LCMS, способ D: R_t=1,090 мин; (M+H)⁺=502,4.

Стадия 5: N-(4-((2-амино-4-оксо-1,3,7-триазаспиро[4.4]нон-1-ен-3-ил)метил)фенил)ацетамид

К раствору трет-бутил-3-(4-ацетамидобензил)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-оксо-1,3,7-триазаспиро[4.4]нон-1-ен-7-карбоксилата (114 мг, 0,227 ммоль) в безводном DCM (3 мл) при 0°C в атмосфере N₂ медленно добавляли TFA (1 мл), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением неочищенного N-(4-((2-амино-4-оксо-1,3,7-триазаспиро[4.4]нон-1-ен-3-ил)метил)фенил)ацетамида, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки в виде бесцветного масла. Выход: 68 мг (100%, неочищ.).

Стадия 6: 2-((4-(3-(4-ацетамидобензил)-2-амино-4-оксо-1,3,7-триазаспиро[4.4]нон-1-ен-7-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-N-метилбензамид

К раствору N-(4-((2-амино-4-оксо-1,3,7-триазаспиро[4.4]нон-1-ен-3-ил)метил)фенил)ацетамида (25 мг, 0,077 ммоль) и промежуточного продукта 43 (30 мг, 0,1 ммоль) в i-PrOH (5 мл) добавляли DIEA (60 мг, 0,462 ммоль), и нагревали реакционную смесь с обратным холодильником до 110°C в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка, который очищали методом препаративной HPLC, способ A, с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. Выход: 10,20 мг (22%). LCMS, способ D: R_t=0,995 мин; (M+H)⁺=589,1. ¹H-ЯМР (CD₃OD): δ 8,55-8,79 (м, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,61 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,25-7,46 (м, 5H), 4,16-4,88 (м, 6H), 3,91 (ушир. с, 1H), 2,72-3,03 (м, 3H), 2,43-2,70 (м, 2H), 2,14 (с, 3H), 1,02-1,30 (м, 6H). ¹⁹F-ЯМР (CD₃OD): δ -116,87, 117,22.

Пример 252

N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)-метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид

Стадия 1: трет-бутил-2-(5-(4-фтор-2-(метоксикарбонил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилат

Смесь метил-2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензоата (промежуточный продукт 48, 0,30 г, 0,11 ммоль), трет-бутил-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата гидрохлорида (CAS#: 1023301-84-9) (0,28 г, 1,06 ммоль) и TEA (0,32 г, 3,18 ммоль) в iPrOH (3 мл) нагревали в микроволновом реакторе CEM при 110°C в течение 1 ч. После охлаждения, смесь разбавляли EtOAc (15 мл) и перемешивали до формирования белого твердого вещества, затем фильтровали через слой Celite™^TM, а затем промывали EtOAc (~10 мл). Объединенный фильтрат концентрировали в условиях вакуума с получением неочищенного трет-бутил-2-(5-(4-фтор-2-(метоксикарбонил)фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата в виде темного твердого вещества (0,59 г, преобразование 100%), который использовали на следующей стадии без очистки; LCMS, способ B: R_t=1,13 мин; (M+H)⁺=473,5.

Стадия 2: 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойная кислота

К раствору трет-бутил-2-(5-(4-фтор-2-(метоксикарбонил)-фенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (0,59 г, ~1,06 ммоль) в MeOH (3 мл), добавляли 2н водный раствор LiOH (1,1 мл, 2,2 ммоль). Полученный раствор перемешивали при к.т. в течение 4 ч, растворитель удаляли, остаток промывали EtOAc (10 мл), подкисляли до pH=3 и сущили с получением 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойной кислоты в виде твердого вещества (0,47 г, 97%), который использовали на следующей стадии без очистки; LCMS, способ B: R_t=1,02 мин; (M+H)⁺=458,6.

Стадия 3: трет-бутил-2-(5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилат

К смеси 2-((4-(7-(трет-бутоксикарбонил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фторбензойной кислоты (0,2 г, 0,44 ммоль), N-этилпропан-2-амина (114 мг, 1,32 ммоль) и TEA (200 мкл) в DMF (1 мл) при 0°C добавляли BOP (233 мг, 0,53 ммоль). Полученный раствор нагревали медленно до к.т. и перемешивали в течение 4 ч. Добавляли воду, смесь экстрагировали DCM (4×, 5 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором, концентрировали досуха и очищали на флэш-колонке (ISCO) (10% MeOH/DCM) с получением трет-бутил-2-(5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (160 мг, 70%) в виде пены; LCMS, способ B: R_t=1,16 мин; (M+H)⁺=528,6.

Стадия 4: 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамид

К раствору трет-бутил-2-(5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)-пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (160 мг, 0,30 ммоль) в безводном DCM (3 мл), добавляли TFA (0,6 мл). Полученный раствор перемешивали при к.т. в течение 30 мин. Смесь концентрировали в условиях пониженного давления досуха и и использовали на следующей стадии в виде неочищенного трифторацетата; LCMS, способ B: R_t=0,57 мин, (M+H)⁺=427,6.

Стадия 5: трет-бутил-((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)карбамат

К раствору 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамида (0,30 ммоль) в безводном MeOH (5 мл) добавляли NaOAc (140 мг) для коррекции до pH=6-7. Затем, добавляли трет-бутил-((1r,4r)-4-формилциклогексил)карбамат (CAS#: 181308-57-6) (105 мг, 0,45 ммоль). После перемешивания при к.т. в течение 10 мин, добавляли NaBH₃CN (28 мг, 0,45 ммоль), и перемешивали полученную смесь при к.т. в течение ночи. Смесь концентрировали, и очищали остаток на флэш-колонке (ISCO) (8% MeOH/DCM) с получением трет-бутил-((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)карбамата в виде белого твердого вещества (156,5 мг, 82% в два этапа); LCMS, способ B: R_t=0,87 мин; (M+H)⁺=639,5.

Стадия 6: 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-аминоциклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамид

Раствор трет-бутил-((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(этил(изопропил)-карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-ил)метил)циклогексил)карбамата (156,5 мг, 0,25 ммоль) в 1,25н HCl/MeOH (3 мл) перемешивали при к.т. в течение ночи. Затем, удаляли растворитель с получением 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-аминоциклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамида в виде гидрохлорида с преобразованием 100%, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS, способ B: R_t=0,52 мин; (M+H)⁺=539,6.

Стадия 7: N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид

К раствору 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-аминоциклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамида гидрохлорида (0,25 ммоль) и Et₃N (75 мг, 0,75 ммоль) в безводном DCM (2 мл) при 0°C по каплям добавляли этансульфонилхлорид (33 мг, 0,26 ммоль), и перемешивали смесь при 0°C в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили добавлением H₂O (5 мл), экстрагировали DCM (3×5 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (5 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали на флэш-колонке (ISCO), элюируя 8-10% MeOH в DCM с получением N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропил-бензамида в виде белого твердого вещества (41 мг, 26%); LCMS, способ B: R_t=0,73 мин; (M+H)⁺=631,6; ¹H-ЯМР (MeOD-d4): δ 8,23, 8,22 (два с, 1H), 7,74, 7,70 (два с, 1H), 7,22-7,15 (м, 2H), 7,03-6,96 (м, 1H), 4,45, 3,51 (два м, 1H), 4,08-3,82 (м, 4H), 3,36 (м, 1H), 3,24 (м, 1H), 3,12-2,94 (м, 3H), 2,32 (м, 4H), 2,10 (д, J=6,8 Гц, 2H), 1,96 (м, 2H), 1,88-1,76 (м, 6H), 1,48 (м, 1H), 1,20-1,04 (м, 14H), 1,02 (м, 2H); ¹⁹F-ЯМР (MeOD-d4): δ -119,7.

Пример 253

Cинтез N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид в увеличенном масштабе

Стадия 1: N-этил-5-фтор-N-изопропил-2-(пиримидин-5-илокси)бензамид

К раствору 5-фтор-2-(пиримидин-5-илокси)бензойной кислоты (промежуточный продукт 49, 5 г, 21,4 ммоль) в безводном DCM (60 мл) при 0°C медленно добавляли оксалилхлорид (2,2 мл, 25,6 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин, и раствор становился мутным. В реактор затем порциями каждые 30 мин добавляли триэтиламин (3,6 мл, 25,6 ммоль). После завершения добавления, водяную баню нагревали до температуры окружающей среды, и перемешивали реакционную смесь приблизительно в течение 3 ч. Затем, к реакционной смеси медленно добавляли раствор изопропилэтиламина (6,5 мл, 53,5 ммоль), и перемешивали смесь при к.т. в течение 10 ч. Содержимое реактора последовательно промывали 1н водным раствором HCl и 1н гидроксидом натрия. Органический слой концентрировали и сушили в условиях высокого вакуума с получением неочищенного N-этил-5-фтор-N-изопропил-2-(пиримидин-5-илокси)бензамида в виде коричневого масла (6,2 г); LCMS, способ B: t_R=1,18 мин; [M+H]⁺=304,2

Стадия 2: 5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)-пиридимин 1-оксид

При комнатной температуре в круглодонную колбу загружали неочищенный N-этил-5-фтор-N-изопропил-2-(пиримидин-5-илокси)бензамид, полученный на стадии 1 и перекись мочевины в порошке (15-17% активного кислорода, 14,1 г, 150 ммоль) в THF (60 мл). К реакционной смеси затем медленно добавляли трифторуксусный ангидрид (6 мл, 42,8 ммоль). После завершения добавления, смесь перемешивали при к.т. в течение 45 мин. Реакционную смесь гасили медленным добавлением раствора NaHCO₃. Продукт экстрагировали дихлорметаном. Органический слой обрабатывали 1M Na₂S₂O₃. Двухфазную смесь тестировали индикаторной KI-крахмальной бумагой, и получали отрицательный результат. Затем, фазы разделяли, органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали в условиях пониженного давления. Затем, неочищенный 5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)-пиридимин-1-оксид сушили в условиях высокого вакуума с получением оранжевого масла (5,8 г); LCMS, способ B: t_R=1,03 мин; [M+H]⁺=320,3.

Стадия 3: 2-((4-Хлорпиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамид

К суспензии неочищенного 5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиридимин-1-оксида (5,8 г, чистота ~90%), полученного на стадии 2 и DIEA (16,2 мл, 90,9 ммоль) в EtOAc (70 мл) при 0°C медленно добавляли POCl₃ (2,0 мл, 21,8 ммоль). После добавления, полученную реакционную смесь нагревали до к.т. и перемешивали при к.т. в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и гасили медленным добавлением H₂O (30 мл). Органический слой разделяли, и дважды экстрагировали водный слой EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои сушили над солевым раствором, Na₂SO₄, фильтровали, затем концентрировали в условиях пониженного давления и сушили в условиях вакуума с получением неочищенного 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамида в виде темного твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки; LCMS, способ B: t_R=1,40 мин; [M+H]⁺⁼338,2

Стадия 4: трет-бутил-2-(5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилат

Смесь неочищенного 2-((4-хлорпиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамида, полученного на стадии 3 трет-бутил-2,7-диазапиро[3.5]нонан-7-карбоксилата гидрохлорида (CAS#: 1023301-84-9) (5,0 г, 19,1 ммоль) и DIEA (9,8 мл, 54,6 ммоль) в iPrOH (35 мл) перемешивали при 80°C в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т. и разбавляли EtOAc (60 мл). Затем, смесь промывали H₂O (60 мл), органический слой разделяли, и экстрагировали водный слой EtOAc (60 мл). Объединенные органические слои сушили над солевым раствором, Na₂SO₄, фильтровали, а затем концентрировали в условиях пониженного давления и сушили в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали на флэш-колонке (ISCO) (3% MeOH в DCM) с получением трет-бутил-2-(5-(2-(этил(изопропил)-карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-7-карбоксилата в виде коричневого твердого вещества (4,95 г, 44% после 4 стадий); LCMS, способ B: t_R=1,17 мин; [M+H]⁺=528,4; ¹H-ЯМР (CD₃OD, 400 МГц): δ 8,24 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,21- 7,15 (м, 2H), 7,00-6,96 (м, 1H), 4,05-3,95 (м, 2H), 3,95-3,90 (м, 3H), 3,31-3,27 (м, 2H), 1,75-1,70 (м, 5H), 1,45 (с, 9H), 1,31-1,10 (м, 12H).

Стадия 5: 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамид

К раствору трет-бутил-2-(5-(2-(этил(изопропил)карбамоил)-4-фторфенокси)пиримидин-4-ил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (69 г, 130,9 ммоль), полученного на стадии 4, в безводном DCM (300 мл) добавляли HCl-диоксан (110 мл, 4M в диоксане). Реакционную смесь перемешивали при 5-9°C в течение 4 ч. Смесь разбавляли водой (500 мл) и экстрагировали DCM (3×400 m). Водный слой корректировали до pH=12-14 добавлением 10% раствора NaOH и экстрагировали DCM (3×800 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамида (46 г, 100%) в виде желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки; LCMS, способ C: R_t=0,416 мин; [M+H]⁺=428,2.

Стадия 6: N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид

К смеси 2-((4-(2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-N-этил-5-фтор-N-изопропилбензамида (39,0 г, 91,3 ммоль), полученного на стадии 5, в N-метил-2-пирролидоне (400 мл) добавляли ((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил-4-метилбензолсульфонат (промежуточный продукт 50, 41 г, 109,56 ммоль), KI (16 г, 95,9 ммоль) и K₂CO₃ (63 г, 456,5 ммоль). Затем, реакционную смесь перемешивали при 70-75°C в атмосфере N₂ в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т., дополнительно добавляли ((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил-4-метилбензолсульфонат (промежуточный продукт 50, 4,0 г, 10,9 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 70-75°C дополнительно в атмосфере N₂ в течение 12 ч. Смесь охлаждали до к.т., разбавляли водой (500 мл) и экстрагировали DCM (3×800 мл). Объединенные органические слои промывали водой (3×1,5 л), сушили над безводным Na₂SO_4, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом препаративной HPLC с нейтральной подвижной фазой, способ A, с получением N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида (20,9 г, 36,8%) в виде белого твердого вещества; LCMS, способ A: R_t=1,82 мин; [M+H]⁺=631,3; ¹H-ЯМР (CDCl₃ 400 МГц): δ м.д. 8,36-8,37 (м, 1H), 7,76 (с, 1H), 6,99-7,04 (м, 2H), 6,74-6,80 (м, 1H), 4,59-4,66 (м, 0,2H), 4,04-4,06 (м, 1H), 3,83-3,93 (м, 4H), 3,48-3,53 (м, 0,8H), 3,30-3,39 (м, 1H), 3,17-3,21 (м, 1H), 3,02-3,06 (м, 2H), 2,25 (с, 4H), 2,03-2,05 (с, 4H), 1,73-1,84 (м, 7H), 1,12-1,36 (м, 14H), 0,89-0,98 (м, 2H); ¹⁹F-ЯМР (CDCl₃ 400 МГц): δ м.д. -118,57; SFC, способ A: t_R=1,357 мин; HPLC, способ A: t_R=6,84 мин.

Пример 254

Кристаллизация N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)-метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид в виде свободного амина

N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)-метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида в виде свободного амина (0,50 г) растворяли в смеси EtOAc (6 мл) и гексана (9 мл) с получением прозрачного раствора, в который в качестве затравки вносили <1 мг кристаллического 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамидаа в виде свободного амина (Пример 6A). Полученный раствор перемешивали при 25°C в течение 2 суток, белое твердое вещество собирали путем фильтрования и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи (0,39 г, 76%); ¹H-ЯМР (MeOD-d4): δ 8,23, 8,22 (два с, 1H), 7,74, 7,70 (два с, 1H), 7,22-7,15 (м, 2H), 7,03-6,96 (м, 1H), 4,45, 3,51 (два м, 1H), 4,08-3,82 (м, 4H), 3,36 (м, 1H), 3,24 (м, 1H), 3,12-2,94 (м, 3H), 2,32 (м, 4H), 2,10 (д, J=6,8 Гц, 2H), 1,96 (м, 2H), 1,88-1,76 (м, 6H), 1,48 (м, 1H), 1,20-1,04 (м, 14H), 1,02 (м, 2H); ¹⁹F-ЯМР (MeOD-d4): δ -119,7; точка плавления=156,6-157,6°C. Концентрация в воде для достижения pH=7: 7,6 мг/мл.

Диаграмму порошковой рентгеновской дифрактометрии (XRPD) определяли для кристаллического соединения в виде свободного амина (XRPD, способ A) и представляли на фигуре 1. Перечень пиков 2-тета представлен ниже в таблице 13.

Таблица 13.

2-тета (^o) Относительная высота (%) 5,5 3,38 7,4 4,45 8,7 4,46 9,7 10,26 10,7 1,11 11,6 12,68 12,6 15,77 14,8 2,8 15,3 7,52 15,6 6,68 15,8 8,92 16,6 100 17,5 12,82 17,9 5,84 18,8 32,29 19,2 28,69 19,8 22,32 21,0 18,85 21,4 7,86 22,0 3,31 22,8 6,98 23,4 3,78 24,6 2,77 25,3 7,45 26,1 2,04 26,6 4,55

Пример 255

Кристаллизация полуторной соли фумаровой кислоты (сесквифумарата) N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида

N-Этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)-метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид в виде свободного амина (497,2 мг, 0,79 ммоль) и фумаровую кислоту (137,2 мг, 1,5 экв.) растворяли в EtOH (5 мл) с получением прозрачного раствора; EtOH удаляли в условиях вакуума, и сушили сольв условиях высокого вакуума в течение ночи.

Соль (0,54 г) растворяли в EtOH/MeCN (21,8 мл, ~4% EtOH), и перемешивали полученный раствор при 25°C в течение ночи, в процессе чего медленно осаждалось белое твердое вещество. Белое твердое вещество собирали путем фильтрования и сушили в условиях высокого вакуума в течение 24 ч (0,41 г, 76%). ¹H-ЯМР (DMSO-d6, задержка релаксации 25 с): δ 8,26, 8,25 (два с, 1H), 7,72, 7,66 (два с, 1H), 7,32-7,22 (м, 2H), 7,06 (м, 1H), 7,00 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,59 (с, 3H), 4,39, 3,72 (два м, 1H), 3,98-3,76 (м, 4H), 3,38 (м, 1H), 3,22 (м, 1H), 2,98 (м, 3H), 2,42 (м, 4H), 2,20 (д, J=6,4 Гц, 2H), 1,84 (м, 2H), 1,74 (м, 6H), 1,43 (м, 1H), 1,28-0,82 (м, 16H); ¹⁹F-ЯМР (DMSO-d6): δ -118,43; точка плавления=176,1-177,8°C. Концентрация в воде для достижения pH=7: 224,7 мг/мл.

Диаграмму порошковой рентгеновской дифрактометрии (XRPD) определяли для кристаллической соли сесквифумаровой кислоты (XRPD, способ B) и представляли на фигуре 2. Перечень пиков 2-тета представлен ниже в таблице 14. Соотношение N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид:фумаровая кислота=1:1,5.

Таблица 14.

Пик № 2-тета (°) Относит. интенсивн. I Пик № 2-тета (°) Относит. интенсивн. I 1 2,9 2,29 22 23,3 89,63 2 5,8 100 23 23,8 11,88 3 8,7 30,83 24 24,1 4,11 4 10,7 2 25 24,9 23,75 5 11,3 6,2 26 26,0 27,37 6 12,6 7,44 27 26,9 7,73 7 13,2 32,95 28 27,8 4,3 8 14,5 11,48 29 28,3 6,99 9 15,3 10,8 30 28,8 16,43 10 16,0 82,33 31 29,0 1,46 11 17,1 9,59 32 31,7 13,12 12 17,4 33,3 33 34,0 1,49 13 17,6 29,24 34 34,6 8,69 14 18,0 6,2 35 34,9 2,8 15 18,9 9,23 36 35,2 1 16 19,1 56,98 37 37,2 2,42 17 20,3 41,59 38 37,5 1,24 18 20,7 15,72 39 38,4 1,05 19 21,2 4,29 40 40,1 6,27 20 21,8 39,15 41 42,5 4,29 21 23,0 39,41 42 45,6 1,49

Пример 256

Кристаллизация соли бис-метансульфоновой кислоты (бис-мезилата) N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида

К прозрачному раствору N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамидв в виде свободного амина (419,7 мг) в iPrOH (2,5 мл) и EtOAc (3 мл), по каплям добавляли MeSO₃H (>99,5%, Sigma-Aldrich) (0,13 г, 88,6 мкл, 2,05 экв.). Дополнительно добавляли к полученному раствору 3 мл EtOAc, и перемешивали смесь при к.т. в течение ночи. Белое твердое вещество затем собирали путем фильтрования, все твердое вещество дважды переносили в маточный раствор и сушили в условиях высокого вакуума в течение 2 суток (535,1 г, 97%); ¹H-ЯМР (MeOD-d4): δ 8,53, 8,52 (два с, 1H), 7,92, 7,82, 7,71 (three s, 1H), 7,38-7,22 (м, 3H), 4,69-4,16 (ушир., m, 4H), 3,90 (м, 1H), 3,57 (м, 2H), 3,45 (м, 1H), 3,26 (м, 1H), 3,16 (м, 1H), 3,03 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 2,98 (м, 4H), 2,68 (с, 6H), 2,22-2,02 (м, 6H), 1,92-1,74 (м, 3H), 1,44-1,06 (м, 16H); ¹⁹F-ЯМР (MeOD-d4): δ -116,53, -116,79, -117,27; точка плавления=207,6-209,7°C. Концентрация в воде для достижения pH=7: 261 мг/мл.

Диаграмму порошковой рентгеновской дифрактометрии (XRPD) определяли для кристаллического бис-метансульфоната (XRPD, способ A) и представляли на фигуре 3. Перечень пиков 2-тета представлен ниже в таблице 15. Соотношение N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид:метансульфоновая кислота=1:2.

Таблица 15.

2-тета (^o) Относительная высота (%) 5,6 58,6 11,0 4,48 13,3 6,67 16,7 100 17,5 2,81 18,1 2,75 20,1 13,43 20,6 7,78 20,9 15,37 22,1 4,08 23,6 4,44 24,4 0,88 24,9 4,33 25,8 2,33 27,0 3,5 28,0 1,91 29,6 6,5 30,4 0,82 31,8 1,61 33,7 1,18

Пример 257

Кристаллизация соли бис-хлористоводородной кислоты (бис-гидрохлорида) N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамида

К прозрачному раствору N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид в виде свободного амина (0,71 г) в EtOH (3 мл) по каплям добавляли 1н водный раствор HCl (2,25 мл, 2 экв.). Полученный раствор смешивали и упаривали досуха в условиях высокого вакуума.

Полученную соль(0,71 г) растворяли в iPrOH (4 мл) и EtOAc (7 мл) с получением прозрачного раствора. Затравочный кристалл получали путем растворения Примера 252 (~5 мг) в EtOH (100 мкл), с последующим медленным упариванием в камере с iPrOH (~5 мл). В раствор бис-гидрохлорида вносили затравочный кристалл, и перемешивали раствор при 25°C в течение ночи. Белое твердое вещество собирали путем фильтрования и сушили в условиях высокого вакуума в течение 2 суток (0,54 г, 76%); ¹H-ЯМР (MeOD-d4): δ 8,54, 8,52 (два с, 1H), 7,92, 7,82, 7,71 (three s, 1H), 7,38-7,24 (м, 3H), 4,68-4,12 (ушир., m, 4H), 3,88 (м, 1H), 3,57 (м, 2H), 3,45 (м, 1H), 3,26 (м, 1H), 3,16 (м, 1H), 3,03 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 2,99 (м, 4H), 2,34-2,02 (м, 6H), 1,94-1,76 (м, 3H), 1,44-1,06 (м, 16H); ¹⁹F-ЯМР (MeOD-d4): δ -116,48, -116,77, -117,26; точка плавления=219-220°C. Концентрация в воде для достижения pH=7: 317,6 мг/мл.

Диаграмму порошковой рентгеновской дифрактометрии (XRPD) определяли для кристаллического бис-гидрохлорида (XRPD, способ A) и представляли на фигуре 4. Перечень пиков 2-тета представлен ниже в таблице 16. Соотношение N-этил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(этилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)-5-фтор-N-изопропилбензамид:хлористоводородная=1:2.

Таблица 16.

2-тета (^o) Относительная высота (%) 4,7 87,32 9,3 8,17 10,7 15,59 11,4 11,99 11,9 9,62 13,4 16,46 14,0 6,76 15,1 7,1 15,9 33,04 17,0 100 18,6 14,63 19,5 39,53 20,1 16,47 21,4 12,15 23,8 34,71 24,4 8,37 25,1 4,31 25,8 22,42 26,6 4,53 28,1 16,14 28,7 8,75

Пример 258

Кристаллизация 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в виде свободного амина

5-Фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид в виде свободного амина (Пример 6A, 0,79 г) растворяли в смеси EtOAc и гексана (28 мл, ~38% объема EtOAc). После добавления всего вещества к раствору, прозрачный раствор постепенно становился мутным. Полученный раствор перемешивали при 25°C в течение ночи. Белое твердое вещество затем собирали путем фильтрования и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи (0,58 г, 73%); методом ¹H-ЯМР обнаруживали чистое соединение со следами EtOAc; точка плавления=177-178°C.

Диаграмму порошковой рентгеновской дифрактометрии (XRPD) определяли для кристаллического соединения в виде свободного амина (XRPD, способ B) и представляли на фигуре 5. Перечень пиков 2-тета представлен ниже в таблице 17.

Таблица 17.

Пик № 2-тета (°) Относит. интенсивн. I Пик № 2-тета (°) Относит. интенсивн. I 1 6,2 15,16 31 28,8 0,78 2 8,3 6,31 32 29,1 2,46 3 12,3 4,1 33 29,8 1,61 4 12,7 5,92 34 30,3 5,42 5 13,4 7,82 35 30,8 1,37 6 14,5 1,41 36 31,6 2,1 7 15,0 2,65 37 32,3 0,73 8 15,7 5,05 38 32,5 0,42 9 16,1 28,24 39 32,9 1,72 10 16,6 100 40 33,5 5,09 11 17,3 12,06 41 34,0 0,91 12 17,7 8,6 42 34,6 0,93 13 18,6 3,34 43 35,7 0,65 14 19,0 46,74 44 36,1 0,99 15 19,3 2,78 45 36,9 0,46 16 20,2 0,91 46 37,6 0,53 17 20,7 3,76 47 37,9 1,78 18 21,5 2,37 48 38,8 0,44 19 22,1 4,99 49 39,2 0,24 20 22,4 5,43 50 39,5 0,32 21 22,7 0,83 51 39,8 0,48 22 23,5 12,82 52 41,2 1,47 23 23,8 1,66 53 41,9 0,49 24 24,7 3,75 54 42,1 1,43 25 25,0 1,25 55 42,6 1,06 26 25,3 13,75 56 42,9 0,74 27 25,7 1,48 57 44,0 0,55 28 26,9 13,48 58 44,3 1,39 29 27,6 2,21 59 45,0 0,15 30 28,7 1,41 60 45,8 2,16

Пример 259

Кристаллизация соли бис-метансульфоновой кислоты (бис-мезилата) 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

5-Фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид в виде свободного амина (Пример 6A) (1,02 г) растворяли в iPrOH (25 мл), и медленно добавляли к раствору MeSO₃H (>99,5%, Sigma-Aldrich) (0,31 г, 207,5 мкл, 2,05 экв.). В полученный раствор вносили одиночный затравочный кристалл 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида бис-метансульфоната (Пример 264), и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Белое твердое вещество собирали путем фильтрования и сушили в условиях высокого вакуума в течение 4 суток (0,94 г, 73%); методом ¹H-ЯМР подтверждали бис-мезилат без пиков растворителя; точка плавления=217,6-219,6°C.

Диаграмму порошковой рентгеновской дифрактометрии (XRPD) определяли для кристаллического бис-метансульфоната (XRPD, способ B), подтверждая его кристаллическую форму, и представляли на фигуре 6. Перечень пиков 2-тета представлен ниже в таблице 18.

Таблица 18.

Пик № 2-тета (°) Относит. интенсивн. I Пик № 2-тета (°) Относит. интенсивн. I 1 5,6 12,05 26 24,6 17,45 2 8,8 7,15 27 24,9 4,88 3 10,2 14,78 28 25,3 11,87 4 11,0 9,26 29 25,7 5,37 5 12,0 3,86 30 26,0 9,41 6 12,6 18,25 31 26,3 10,65 7 12,9 3,26 32 26,7 7,5 8 13,8 16,04 33 27,2 11,08 9 14,1 14,7 34 27,8 1,58 10 15,3 61,65 35 28,6 4,7 11 16,2 20,21 36 29,5 3,58 12 16,3 4,22 37 30,0 1,54 13 16,8 38,78 38 30,4 12,64 14 17,6 100 39 31,7 4,4 15 18,6 33,5 40 32,7 5,31 16 20,3 57,51 41 36,2 1,99 17 20,7 12,84 42 37,9 1,86 18 20,9 19,21 43 39,6 2,29 19 21,2 18,21 44 40,2 2,82 20 21,5 15,41 45 42,1 3,32 21 21,8 9,06 46 42,7 1,03 22 22,1 2,08 47 45,4 2,2 23 22,4 14,23 48 46,0 0,99 24 22,7 17,02 49 47,0 0,71 25 23,6 3,46 50 49,3 1,14

Пример 260

Кристаллизация полуторной соли фумаровой кислоты (сесквифумарата) 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

5-Фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамид в виде свободного основания (Пример 6A) (0,34 г) растворяли в MeCN (2 мл). Фумаровую кислоту (82,3 мг, 1,3 экв.) растворяли в EtOH (1,5 мл, нагревали до растворения). Затем, раствор фумаровой кислоты переносили к раствору амина, хорошо перемешивали, а затем удаляли растворитель в условиях вакуума досуха. Полученный остаток заново растворяли в смеси MeCN (10 мл) и EtOH (0,2 мл) с получением прозрачного раствора. После внесения одиночного затравочного кристалла полуторной соли фумаровой кислоты (Пример 265), раствор перемешивали при 30°C в течение ночи. Белое твердое вещество собирали путем фильтрования и сушили в условиях высокого вакуума в течение 24 ч (0,35 г, 83%). Точка плавления=176-178°C.

Диаграмму порошковой рентгеновской дифрактометрии (XRPD) определяли для кристаллической полуторной соли фумаровой кислоты (XRPD, способ B) и представляли на фигуре 7. Перечень пиков 2-тета представлен ниже в таблице 19.

Таблица 19.

Пик № 2-тета (°) Относит. интенсивн. I Пик № 2-тета (°) Относит. интенсивн. I 1 2,9 56,27 31 24,9 29,15 2 5,8 73,54 32 25,9 8,57 3 7,6 1,21 33 26,0 25,8 4 8,7 33,16 34 26,9 10,93 5 10,7 2,9 35 27,6 2,42 6 11,3 5,23 36 27,8 2,71 7 12,6 5,55 37 28,3 5,33 8 13,2 35,83 38 28,5 3,73 9 14,3 6,7 39 28,8 7,98 10 14,5 6,96 40 29,0 6,07 11 15,1 8,22 41 29,4 8,58 12 15,3 4,32 42 30,1 0,81 13 16,0 100 43 30,4 1,3 14 17,1 11,22 44 30,9 2,63 15 17,4 22,99 45 31,2 0,88 16 17,6 46,84 46 31,7 13,42 17 18,1 10,97 47 32,1 1,94 18 18,9 12,77 48 32,3 1,12 19 19,1 70,8 49 32,8 1,86 20 20,3 21,58 50 34,0 1,79 21 20,4 21,2 51 34,4 3,03 22 20,8 18,63 52 34,6 7,16 23 21,2 3,5 53 34,9 4,56 24 21,8 45,24 54 35,2 1,64 25 22,2 2,33 55 36,0 2,93 26 22,9 12,63 56 37,2 2,95 27 23,0 46,11 57 37,5 1,55 28 23,3 83,24 58 38,4 1,44 29 23,8 13,36 59 39,1 1,82 30 24,2 4,36 60 39,7 2,22

Пример 261

Соль бис-хлористоводородной кислоты (бис-гидрохлорид) 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

К неочищенному свободному основанию 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазапиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида (~86 г, чистота ~92%) при к.т. добавляли EtOH (13 объемов). К этому раствору при к.т. добавляли 3 эквивалента 1-2M раствора HCl в EtOH. Раствор перемешивали приблизительно в течение 15 минут, а затем к этанольному раствору при перемешивании при к.т. медленно добавляли диизопропиловый эфир (iPr₂O, 7 объемов) Смесь перемешивали при к.т., и в течение приблизительно 1 суток формировался белый осадок. Белый осадок фильтровали и промывали смесью EtOH и iPr₂O (1:1) с получением 67 г бис-гидрохлорида с чистотой ~96% согласно данным HPLC-анализа. Полученное вещество, по-видимому, представляло собой смесь аморфной и кристаллической форм. Остаток EtOH (~4,5 масс.%) удаляли путем лиофилизации с ~8 объемами воды. Вещество после лиофилизации характеризовалось точкой плавления ~210-215°C и разлагалось при указанных температурах в процессе определения точки плавления.

Диаграмму порошковой рентгеновской дифрактометрии (XRPD) определяли для бис-гидрохлорида (XRPD, способ B) и представляли на фигуре 8. Порошковая диаграмма, представленная на фигуре 8, обладает существенно гладким и непрерывным профилем, характерным для некристаллического вещества.

Пример 262. Анализ характеристик кристаллического вещества

Способ цифрового фильтра

Для примеров 258-261 определяли вали процентное содержание кристаллического вещества. В данных порошковой рентгеновской дифрактометрии на присутствие кристаллического вещества указывало присутствие острых четко выраженных пиков дифракции. Процентное содержание кристаллического вещества представляет собой по существу общую величину дифракции во всех пиках кристаллического вещества, выраженную в процентах по отношению к общей величине дифракции в образце. Для определения дифракции в образце, результаты измерений сначала предварительно обрабатывали с удалением фона прибора, а затем нормировали к общей площади. Предварительно обработанные данные затем пропускали через два цифровых фильтра, один для удаления комптоновского и термального диффузного рассеяния, а другой для удаления сигнала некристаллического образца из пробы. Выраженное в процентах от общего значения величина нормированной интенсивности, оставшейся после прохождения данных через цифровые фильтры, означает процентное содержание идеального кристаллического вещества в образце. Выраженные в процентах величины для кристаллического вещества, определенные с применением цифрового фильтра, просуммированы в Таблице 20. Эти значения не включают в себя измененное кристаллическое вещество, а потому не являются абсолютным показателем выраженной в процентах степени кристаллизации вещества для образца. Выраженные в процентах значения степени кристаллизации, представленные в Таблице 20, позволяют производить сравнение относительное процентного содержания кристаллического вещества между образцами, содержащими тот же кристаллический полиморф.

Таблица 20.

№ примера Содержание кристаллического вещества (%) 258 91,4 259 76,7 260 84,0 261 1,5

Байесовская модель

Принятие преимущественно некристаллического сигнала, наблюдаемого для примера 261, в качестве репрезентативного некристаллического образца для всех проб, позволяет определение байесовской модели, которая может быть использована для оценки максимального содержания некристаллического компонента, для установленных данных наблюдения. Объединенные результаты оценки процентного содержания кристаллического вещества с применением байесовской модели представлены в Таблице 21. Байесовская модель обеспечивает хорошее приближение для диффузного рассеяния рентгеновских лучей, которое наблюдалось для набора данных Примера 259, что показывает, что процентное содержание кристаллического вещества от 71% до 75% являлось приемлемым. Байесовская модель не обеспечивает хорошее соответствие для Примеров 258 и 260. Оба набора данных, по-видимому, являются преимущественно кристаллическими по природе.

Таблица 21.

№ примера Минимальное содержание кристаллического компонента (%) 258 94 259 71 260 88

Пример 263. Скрининговые исследования кристаллической формы полуторной соли фумаровой кислоты 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

Получение полуторной соли фумаровой кислоты 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

Соль фумаровой кислоты, используемую в твердой форме в скрининговых методах анализа, получали из 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в форме свободного основания-амина следующим способом:

Свободное основание-амин очищали путем добавления к воде и перемешивания в течение ночи. Полученные твердые вещества затем сушили в атмосфере азота. Затем, к 4,4 г 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в форме свободного основания в EtOH (35 мл) добавляли 1,6 молярных эквивалента фумаровой кислоты, и перемешивали реакционную смесь. Добавляли дополнительную порцию EtOH (5 мл), и сушили реакционную смесь над MgSO₄. Затем, смесь фильтровали, добавляли диэтиловый эфир (150 мл), и перемешивали взвесь в течение ночи. Образец твердого вещества из взвеси идентифицировали как форму B (см. ниже). Затем, полученные твердые вещества собирали путем вакуумного фильтрования. Образец полученного влажного осадка также идентифицировали как форму B. Затем, влажный осадок сушили в условиях вакуума при 45°C в течение 1 суток, и определяли полученный сухой образец как форму D (см. ниже).

Идентификация твердых форм

Наблюдали семь разных твердых форм полуторной соли фумаровой кислоты 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида, и ниже приведены их описания. Порошковые дифракционные рентгенограммы (XRPD) (XRPD, способ C) для установленных форм полуторной соли фумаровой кислоты представлены на фигуре 9.

Аморфное вещество: формируется посредством быстрым выпаривания из EtOH.

Форма A: моногидрат полуторной соли фумаровой кислоты; соотношение 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида:фумаровой кислоты:воды составляет 2:3:2.

XRPD: соответствует гидрату полуторной соли фумаровой кислоты (XRPD, способ C), как представлено на фигуре 10. Перечень 2-тета пиков представлен ниже в Таблице 22.

DSC/TG: широкая эндотерма, возникающий одновременно с потерей массы в TG от 70 до 130°C. Конечное эндотермическое событие происходит при 179°C, как представлено на фигуре 11. Потерю 1,7% массы наблюдали вплоть до 90°C, как представлено на фигуре 12.

DVS: увеличение массы на 0,92% при относительной влажности от 5 до 95%. Потеря массы при десорбции представлена на фигуре 13.

XRPD для варьируемых температур (VT): изменения формы не наблюдали. Сдвиг пиков соответствует термическому расширению при нагревании, как представлено на фигуре 14. Диаграмма XRPD при 165°C соответствует форме A.

Нет изменений при вакуумной сушке или нагревании.

Форма B и форма D преобразуются в форму A во взвесях с водной активностью 0,22 a_w и выше.

Таблица 22.

Номер пика 2-тета (град.) Интенсивность (%) Номер пика 2-тета (град.) Интенсивность (%) 1 2,9 15 22 18,6 4 2 5,8 34 23 18,9 11 3 7,5 5 24 19,2 45 4 8,7 12 25 20,3 17 5 10,4 3 26 20,4 15 6 10,7 6 27 20,8 11 7 11,3 9 28 21,2 4 8 11,7 3 29 21,4 4 9 12,6 7 30 21,8 28 10 13,2 30 31 22,2 4 11 14,3 5 32 22,8 9 12 14,5 4 33 23,0 17 13 15,1 7 34 23,3 19 14 15,3 12 35 23,8 10 15 15,9 100 36 24,2 7 16 16,7 4 37 24,4 5 17 17,1 9 38 24,9 14 18 17,4 8 39 25,3 4 19 17,6 13 40 26,0 14 20 17,9 5 41 26,9 6 21 18,0 10

Форма B - Изоструктурный сольват с MeOH или EtOH.

Форму B наблюдали в экспериментах с MeOH и EtOH. Диаграмма XRPD (XRPD, способ C) была проградуирована и совпала с сольватом, как представлено на фигуре 15. Список пиков 2-тета представлен ниже в таблице 23.

¹H-ЯМР указывает на ограниченные количества MeOH в анализируемом образце.

В ходе масштабного эксперимента, два подобразца (взвесь и влажный осадок) разделяли, и обнаруживали как форму B. Сушкой объемного вещества в вакуумной печи при 45°C преобразовывали в форму D, как представлено на фигуре 16 (XRPD, способ C).

Устойчивость: преобразование в форму A во взвеси с водной активностью 0,22 a_w.

Таблица 23.

Номер пика 2-тета (град.) Интенсивность (%) Номер пика 2-тета (град.) Интенсивность (%) 1 6,2 24 25 18,6 16 2 6,9 7 26 19,0 24 3 7,8 57 27 19,3 23 4 8,5 29 28 19,7 12 5 9,6 8 29 19,9 9 6 9,8 13 30 20,2 9 7 10,4 8 31 20,4 12 8 10,9 24 32 20,6 15 9 11,4 12 33 20,8 12 10 11,9 17 34 21,0 11 11 12,4 6 35 21,2 28 12 12,6 20 36 21,4 27 13 13,0 9 37 21,6 36 14 13,2 21 38 22,0 10 15 13,5 33 39 22,4 7 16 13,7 6 40 22,4 8 17 14,0 13 41 22,7 6 18 14,2 14 42 22,9 13 19 15,4 9 43 23,2 7 20 15,7 10 44 24,0 8 21 16,1 100 45 24,1 8 22 16,9 15 46 24,4 8 23 17,0 8 47 24,7 8 24 17,2 12 48 25,0 9

Форма C: Наблюдали в виде смеси с формой A, формирование EtOH. Форма C наблюдалась только из этанола.

Форма D: Формировалась при увеличении масштаба с применением «сухих» условий и из медленного упаривания MeOH/гептана.

XRPD: более низкое содержание кристаллических форм, как представлено на фигурах 16 и 23 (XRPD, способ C). Список 2-тета пиков представлен ниже в таблице 24.

¹H ЯМР соответствовал полуторной соли фумаровой кислоты, органический растворитель не наблюдался.

DSC/TG: широкая эндотерма с началом при 157°C, наблюдаемая методом DSC (фигура 17), и потеря 0,4% массы при нагревании вплоть до 90°C, как представлено на фигуре 18.

Устойчивость: преобразование в форму A во взвеси с водной активностью 0,22 a_w.

Таблица 24.

Номер пика 2-тета
(град.) Интенсивность
(%) Номер пика 2-тета
(град) Интенсивность
(%) 1 0,6 14 12 16,0 100 2 7,2 35 13 17,4 28 3 8,5 60 14 18,1 12 4 9,5 20 15 19,3 26 5 10,6 24 16 19,7 27 6 10,9 16 17 20,4 26 7 11,8 28 18 21,8 35 8 13,5 19 19 22,7 23 9 14,1 29 20 23,8 20 10 14,5 35 21 24,4 22 11 15,0 13 22 25,7 18

Форма E: сольват с THF

В XRPD не наблюдалось никаких изменений после 45°C в вакуумной печи в течение 1 суток (способ C XRPD).

Методом ¹H-ЯМР наблюдали сольват с THF. После сушки в вакууме, все еще присутствовало0,6 моль THF.

Форма F:

DSC: Широкая низкотемпературная эндотерма с максимумом около 65°C, приводящая к видимому экзотермическому результату с максимумом около 109°C. Конечная эндотерма с появлением около 143°C, как представлено на фигуре 19.

Наблюдали преобразование в форму A при формировании взвеси в смеси ACN/вода.

Анализ водной активности

В таблице 25 представлены результаты анализа водной активности полуторной соли фумаровой кислоты 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида в различных системах водных и органических растворителей.

Таблица 25.

Растворитель Водная активность (об.% H₂O) Условие Результаты наблюдений Результат H₂O/IPA 0,96 (50%) окружающая среда, 7 суток белые твердые вещества, желтый раствор Форма A H₂O/ацетон 0,91 (50%) окружающая среда, 7 суток белые твердые вещества, желтый раствор Форма A H₂O/ацетон 0,80 (18%) окружающая среда, 7 суток белые твердые вещества, желтый раствор Форма A H₂O/IPA 0,70 (11%) окружающая среда, 7 суток желтые твердые вещества Форма A H₂O/ACN 0,60 (4%) окружающая среда, 7 суток белые твердые вещества Форма A H₂O/IPA 0,50 (6%) окружающая среда, 7 суток желтые твердые вещества Форма A H₂O/ацетон 0,44 (3%) окружающая среда, 7 суток белые твердые вещества Форма A H₂O/ACN 0,38 (2%) окружающая среда, 7 суток белые твердые вещества Форма A H₂O/ацетон 0,22 (1%) окружающая среда, 7 суток белые твердые вещества Форма A

Анализ физической стойкости

В таблице 26 представлены результаты анализа физической стойкости полуторной соли фумаровой кислоты 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида.

Таблица 26.

Источник Способ Результаты наблюдений Результат Форма B+форма A 75% RH, 2 суток белый цвет, сыпучий Форма A Форма B+форма A 75% RH, 3 суток - Форма A Форма D 75% RH, 2 суток - Форма D Форма A 105°C 3 суток 20% LOD Форма A Форма A 70°C, вакуум, 3 суток нет изменения массы Форма A+пики Форма A вакуум, окружающая среда, 3 суток нет изменения массы Форма A Форма A 95°C, в атмосфере N₂, 2 суток сыпучие белые твердые вещества Форма A Форма A+B 1. 45°C вакуум, 4 суток
2. хранение в условиях окружающей среды, 15 суток - Форма D+форма A Форма A+пики вакуум в окружающих условиях, 2 суток - Форма A Форма E 45°C, вакуум, 1 день сыпучие белые твердые вещества Форма E Форма A+B 45°C. вакуум, 4 суток белые твердые вещества Форма A+форма B

RH=относительная влажность

Пример 264. Получение монокристаллической соли бис-метансульфоновой кислоты (бис-мезилата) 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

Монокристаллы бис-метансульфоната 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида получали путем медленной диффузии EtOAc в раствор iPrOH, что подтверждалось рентгеноструктурным анализом. Краткое описание рентгеноструктурного анализа монокристалла представлено ниже в Таблице 27. ORTEP-изображения термальных эллипсоидов для вероятности 50% для бис-метансульфоната представлены на фигурах 20-21.

Таблица 27.

Прибор Площадной детектор Bruker APEXII CCD с графит-монохроматорным M°-Kα облучением (λ=0,71073Å) Температура/K 100 Кристаллическая система триклинная Пространственная группа PĪ a 16,9767(4)Å b 17,1695(4)Å c 21,5658(5)Å α 72,8540(10)° β 81,8960(10)° γ 61,5280(10)° Объем 5280,2(2)ų Z 4 D_{рассчит.} 1,166 г/см³ μ 0,200 мм ¹ F(000) 1984,0 Размер кристалла, мм 0,48 × 0,3 × 0,08 Диапазон сбора данных 2θ 2,73-50,938° Диапазоны индексов -20 ≤ h ≤ 20, -20 ≤ k ≤ 18, -26 ≤ l ≤ 26 Собранные отражения 159085 Независимые отражения 19412[R(int)=0,0273] Данные/ограничения/параметры 19412/162/1155 Степень согласия при F² 1,115 Конечные индексы R [I>=2σ (I)] R₁=0,0495, wR₂=0,1387 Конечные индексы R [все данные] R₁=0,0609, wR₂=0,1497 Наибольшая разница пик/впадина 0,93/-0,75 eÅ^-3

Пример 265. Получение монокристаллической полуторной соли фумаровой кислоты (секвифумарата) 5-Фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

Монокристаллы полуторной соли фумаровой кислоты 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида получали путем медленного упариванием в растворе MeCN. Рентгенографический анализ монокристалла обнаружил соотношение 1:1,5 между 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамидом и фумаровой кислотой. Краткое описание рентгеноструктурного анализа монокристалла представлено ниже в Таблице 28. ORTEP-изображение термальных эллипсоидов для вероятности 50% для полуторной соли фумаровой кислоты 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида представлено на фигуре 22.

Таблица 28.

Прибор Площадной детектор Bruker D8QUEST CMOS с графит-монохроматорным M°-Kα облучением (λ=0,71073Å) Температура/K 100 Кристаллическая система моноклинная Пространственная группа C2/c a 60,682(3)Å b 11,7644(5)Å C 11,5570(6)Å β 93,854(2)° Объем 8231,8(7)ų Z 8 D_{рассчит.} 1,328 г/см³ μ 0,149 мм ¹ F(000) 3504,0 Размер кристалла, мм 0,25 × 0,10 × 0,01 Диапазон сбора данных 2θ 5,846-50,928° Диапазоны индексов -73 ≤ h ≤ 73, -13 ≤ k ≤ 14, -13 ≤ l ≤ 13 Собранные отражения 164974 Независимые отражения 7568[R(int)=0,1031] Данные/ограничения/параметры 7568/451/583 Степень согласия при F² 2,231 Конечные индексы R [I>=2σ(I)] R₁=0,1568, wR₂=0,4560 Конечные индексы R [все данные] R₁=0,1874, wR₂=0,4951 Наибольшая разница пик/впадина 2,84/-3,16 eÅ^-3

Пример 266. Получение монокристаллического бис-гидрохлорида 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

К 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамиду в виде свободного основания (140 мг) при комнатной температуре добавляли 5н раствор HCl в iPrOH (2 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 мин растворитель удаляли с получением 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида бис-гидрохлорида. Часть этого белого аморфного вещества (~25 мг) отбирали, и при комнатной температуре добавляли MeCN (0,5 мл). Полученную суспензию осторожно нагревали в течение 2 минут до полного растворения вещества. Затем, раствор медленно охлаждали до к.т. при отстаивании в течение ночи с получением кристаллического 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)-циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида бис-гидрохлорида. Точка плавления: ~210-215°C.

Пример 267. Скрининговые исследования кристаллической соли 5-Фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамида

Фармацевтически приемлемые противоионы выбирали на основе известных значений pKa, и проводили эксперименты по кристаллизации солей согласно общей методике прямого добавления приблизительно одного или двух молярных эквивалентов противоиона к 5-фтор-N,N-диизопропил-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(метилсульфонамидо)циклогексил)метил)-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-ил)пиримидин-5-ил)окси)бензамиду в форме свободного основания (пример 6A) в растворе или суспензии. Твердые вещества собирали после того, как происходило осаждение достаточного количества. В случае необходимости, для индукции кристаллизации или увеличение выхода проводят дополнительные стадии, такие как охлаждение, добавление антирастворителя и/или формирование взвеси. Продукты качественно оценивают на содержание кристаллических форм при помощи микроскопии в поляризованном свете (PLM) и/или XRPD. Для определения несольватированных кристаллических форм предполагаемых солей используют вакуумную сушку. ¹H-ЯМР спектроскопию растворов используют для подтверждения состава и стехиометрии, отсутствия химического распада и для оценки количества присутствующего растворителя. Для солей соляной кислоты для подтверждения стехиометрии используют энергодисперсионную рентгеновскую спектроскопию (EDX). В таблице 29 представлен список фармацевтически приемлемых солей, определенных в экспериментах по скринингу солей. «Нет данных» относится к данным, которые недоступны (например, было невозможно выделить соль в кристаллической форме; соль растворялась при относительной влажности 75%; соль преобразовывалась в другую форму; или наблюдалась разупорядоченная диаграмма XRPD).

Таблица 29.

Форма соли Стехиометрия (Пример 6A: кислота) Ацетат нет данных Безилат A 1:1 Фумарат A 2:1 Фумарат B нет данных Фумарат C нет данных Фумарат D нет данных Фумарат E нет данных Секвифумарат A 2:3 Секвифумарат B 2:3 Гидрохлорид A нет данных Гидрохлорид B 1:2 Гидрохлорид C 1:2 Малат A нет данных Малат B 1:1 Мезилат A 1:1 Мезила B нет данных Мезилат C нет данных Напсилат (аморфный) нет данных Нападизилат A нет данных Нападизилат B нет данных Фосфат (аморфный) нет данных Сукцинат A 2:1 Сукцинат (аморфный) нет данных Сульфат нет данных Тартрат нет данных Тозилат A 1:1 Тозилат B 1:1 Тозилат C нет данных Тозилат D 1:1

БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА

Метод анализа 1 (анализ связывания)

Эффективности соединений-ингибиторов связывания менин/MLL оценивали посредством метода анализа AlphaLISA с использованием биотинилированного (1) менина дикого типа или (2) мутированного менина (описанного в Huang et al, 2012, Nature, 482, 542-546) и слитого белка MLL-AF9, несущего эпитоп FLAG на его С-конце. Белки-менины экспрессировали в E.coli и ковалентно модифицировали биотином с использованием EZ-Link™ сульфо-NHS-биотина (ThermoFisher кат. № 21217) в соответствии с протоколом производителя. Слитый с AF91-92 MLL1-1396 и С-концевой пептид FLAG экспрессировали в клетках HEK293 и использовали в виде лизата, очищенного при 21000 об/мин в течение 10 минут.

Соединения (2 мкл растворов в DMSO) вносили в белые 96-луночные планшеты с половинным объемом лунок (Corning кат. № 3693) и инкубировали в течение 30 минут при комнатной температуре с 5 нМ биотинилированным менином и подходящим количеством лизата MLL-AF9-FLAG в 40 мкл 50 мМ Трис-HCl буфера (pH 7,4), содержащего 5% (об./об.) DMSO, 50 мМ NaCl, 0,01% (масс./об.) альбумин бычьей сыворотки (BSA) и 1 мМ DTT. К этой инкубационной смеси добавляли 40 мкл акцепторных AlphaLISA анти-FLAG гранул (PerkinElmer кат. № AL112C) и донорных стрептавидиновых гранул (PerkinElmer кат. № 6760002) (по 10 мкг/мл каждых), и продолжали инкубацию при комнатной температуре в течение 60 минут. Сигнал ALPHA-анализа (гомогенного анализа усиления люминесценции при сближении) измеряли на многоканальном планшетном ридере Envision в конце инкубации. Все стадии проводили под слабым флуоресцентным светом.

Выраженные в процентах значения ингибирования вычисляли на основании контролей без ингибирования (DMSO) и с полным ингибированием (10 мкМ MI-2-2, EMD Millipore кат. № 444825). Была построена регрессия указанных выраженных в процентах значений ингибирования относительно концентраций соединения в методе анализа с использованием аппроксимирования нелинейной кривой по четырем параметрам логистической функции (XLFit, IDBS). Значения IC₅₀ получали из аппроксимированной кривой в виде точек перегиба на кривых дозовой зависимости, и представлены их ниже в таблице 30.

Метод анализа 2: (анализ клеточной пролиферации)

Активность соединений-ингибиторов в отношении пролиферации клеток оценивали на линии клеток MV-4-11 острого моноцитарного лейкоза человека (ATCC^® CRL-9591^™) посредством количественной оценки ATP. Клетки MV-4-11 или клетки HL-60 для контроля токсичности (ATCC^® CCL-240^™) инкубировали в 96-луночных культуральных планшетах (1,67×10⁴ клеток на лунку в 200 мкл культуральной среды, содержащей 10% FBS) в присутствии или в отсутствие тестируемого соединения в течение 72 часов при 37°C и 5% CO₂. После инкубации, содержимое каждой лунки перемешивали путем пипетирования, и переносили из каждой лунки 95 мкл в лунку 96-луночных черных планшетов OptiPlate^® (PerkinElmer). В каждую лунку добавляли равный объем реагента CellTiter-Glo^® для люминесцентного анализа жизнеспособности клеток (Promega), а затем перемешиванием в течение 5 минут на орбитальном шейкере для планшетов. Для количественной оценки ATP на многоканальном ридере Wallac EnVision 2104 (PerkinElmer) измеряли люминесценцию. Выраженное в процентах ингибирование пролиферации клеток тестируемыми соединениями вычисляли на основании роста клеток без ингибирования (DMSO) в сравнении с клетками, обработанными активным ингибитором менина в концентрации, дающей, по меньшей мере, 100-кратную LD₅₀. Значения EC₅₀ вычисляли на основании кривых дозовой зависимости выраженного в процентах ингибирования от концентрации соединения, и представляли их ниже в таблице 30.

Данные для методов анализа 1 и 2 представлены ниже в Таблице 27 («н/д» означает, что данные не доступны; «+++» означает <100 нМ; «++» означает ≥100 нМ и <1000 нМ; и «+» означает ≥1000 нМ).

Таблица 30. Биологические данные

Пример Метод анализа 1 Метод анализа 2 1 +++ +++ 1A +++ +++ 1B +++ +++ 2 +++ +++ 2A +++ +++ 2B +++ +++ 3A +++ +++ 3B +++ +++ 4 +++ +++ 4A +++ +++ 4B +++ +++ 5 +++ +++ 6A +++ +++ 6B +++ +++ 7 +++ ++ 8 +++ +++ 9 +++ + 10 +++ + 11 +++ +++ 12 +++ ++ 13 +++ н/д 14A +++ н/д 15 +++ ++ 16 +++ ++ 17 ++ н/д 18 +++ ++ 19 +++ ++ 20 ++ н/д 21 ++ н/д 22A +++ + 22B +++ н/д 23A +++ ++ 23B ++ н/д 23C +++ + 24A +++ + 24B +++ + 25 +++ + 26A +++ ++ 26B +++ + 27 +++ + 28 +++ +++ 29 +++ +++ 29A +++ +++ 29B +++ ++ 30 +++ н/д 31 +++ н/д 32 +++ н/д 33 +++ ++ 34 +++ + 35 +++ ++ 36 +++ ++ 37 +++ ++ 38 +++ + 39 ++ н/д 40 ++ + 41 +++ +++ 41A +++ +++ 41B +++ +++ 42 +++ +++ 42A +++ +++ 42B +++ +++ 43 +++ +++ 44 +++ ++ 45 +++ +++ 46 ++ н/д 47 +++ ++ 48 +++ ++ 49 +++ н/д 50 +++ н/д 51 +++ +++ 52 +++ +++ 53 +++ +++ 54 +++ ++ 55 + н/д 56 + н/д 57 +++ н/д 58 ++ н/д 59 + н/д 60 +++ ++ 60A +++ +++ 60B +++ +++ 60C +++ +++ 60D +++ +++ 61 ++ н/д 62 +++ ++ 63 +++ +++ 64 +++ ++ 65 +++ ++ 66 +++ + 67 +++ ++ 68 +++ + 69 +++ +++ 70 +++ +++ 71 +++ н/д 72 +++ ++ 73 +++ ++ 74 +++ н/д 76 +++ +++ 77 +++ + 78 ++ н/д 79 +++ +++ 80 +++ +++ 81A +++ ++ 81B +++ +++ 82 +++ ++ 83 +++ ++ 84 +++ +++ 85 +++ ++ 86 +++ +++ 87 +++ ++ 88 +++ +++ 89 +++ ++ 90 +++ +++ 91 +++ +++ 91A +++ +++ 92 +++ ++ 93 +++ ++ 94 +++ ++ 95 +++ ++ 96 +++ ++ 97 +++ ++ 98 +++ ++ 99 +++ ++ 99A +++ +++ 100 +++ ++ 101 +++ ++ 102 +++ +++ 103 +++ ++ 104 +++ +++ 105 +++ +++ 106 +++ +++ 107 +++ +++ 108 +++ + 109 +++ + 110 +++ ++ 111 +++ +++ 112 +++ +++ 113 +++ +++ 114 +++ ++ 115 +++ +++ 116 +++ ++ 117 +++ ++ 118 +++ ++ 119 +++ ++ 120 +++ +++ 121 +++ ++ 122 +++ +++ 123 +++ + 124 +++ ++ 125 +++ +++ 126 +++ ++ 127 +++ ++ 128 +++ ++ 129 +++ ++ 130 +++ ++ 131 +++ +++ 132 +++ ++ 133 +++ ++ 134 +++ ++ 135 +++ + 136 +++ ++ 137 +++ ++ 138 +++ +++ 139 +++ ++ 140 +++ ++ 141 +++ ++ 142 +++ + 143 +++ + 144 +++ +++ 145 +++ ++ 146 +++ ++ 147 +++ + 148A +++ ++ 148B +++ ++ 149 +++ +++ 150 +++ +++ 151 +++ + 152 +++ +++ 153 +++ ++ 154 +++ ++ 155 +++ ++ 156 +++ ++ 157 +++ н/д 158 +++ ++ 159 +++ ++ 160 +++ +++ 160A +++ +++ 160B +++ +++ 161 +++ +++ 162 +++ ++ 163 +++ ++ 164 +++ ++ 165 +++ + 166 +++ ++ 167 +++ ++ 168 +++ + 169 +++ +++ 170 +++ ++ 171 +++ +++ 172 +++ ++ 173 +++ ++ 174 +++ +++ 175 +++ + 176 +++ + 177 +++ +++ 178 +++ +++ 179 +++ +++ 180 +++ +++ 181 +++ ++ 182 +++ ++ 183 +++ +++ 183A +++ +++ 183B +++ +++ 184 +++ ++ 185 +++ ++ 186 +++ +++ 187 +++ +++ 188 +++ ++ 189 +++ ++ 190 +++ +++ 190A +++ ++ 191 +++ +++ 192 +++ ++ 193 +++ +++ 194 +++ ++ 195 +++ ++ 196 +++ +++ 197A +++ +++ 197B +++ +++ 198 +++ +++ 199 +++ + 200 +++ ++ 201 +++ + 202 +++ ++ 203 +++ + 204 +++ ++ 205 +++ +++ 206A +++ ++ 206B ++ н/д 206C ++ н/д 207 +++ ++ 208 +++ + 209 +++ ++ 210 +++ ++ 211 +++ ++ 212 +++ ++ 213 +++ +++ 214 +++ ++ 215 +++ ++ 216 +++ ++ 217 +++ +++ 218 +++ + 219 +++ ++ 220 +++ ++ 221 +++ ++ 222 +++ + 223 +++ ++ 224 +++ +++ 225 +++ ++ 226 +++ + 227 +++ +++ 228 +++ ++ 229 +++ ++ 230 +++ ++ 231 +++ ++ 232 +++ +++ 233 +++ ++ 234 +++ +++ 235 +++ ++ 236 +++ ++ 237 +++ +++ 237A +++ +++ 238 +++ +++ 239 +++ +++ 240 +++ +++ 241 +++ ++ 242 +++ ++ 243 +++ н/д 244 +++ н/д 245 +++ н/д 246 +++ н/д 247 +++ н/д 248A +++ ++ 248B +++ ++ 249 +++ ++ 250A ++ н/д 250B +++ + 251 +++ + 252 +++ +++

Хотя был описан целый ряд вариантов осуществления настоящего изобретения, очевидно, что основные примеры могут быть изменены для получения других вариантов осуществления, в которых используются соединения и способы согласно настоящему изобретению. Поэтому, следует понимать, что объем настоящего изобретения должен определяться приложенной формулой изобретения, а не конкретными вариантами осуществления, которые были представлены посредством примера.

Содержание всех ссылок (включая библиографические ссылки, выданные патенты, опубликованные патентные заявки и патентные заявки, одновременно находящиеся на рассмотрении), процитированных по тексту всей заявки, в явном виде полностью включено в настоящий документ посредством ссылки. Если не определено иное, то все технические и научные термины, использованные в настоящем документе, соответствуют значению, общеизвестному среднему специалисту в данной области техники.