ОКСАСПИРО-ПРОИЗВОДНОЕ, ЗАМЕЩЕННОЕ ПО АЗАБИЦИКЛИЧЕСКОМУ КОЛЬЦУ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ЕГО МЕДИЦИНСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2023 года по МПК C07D487/04 C07D471/04 A61K31/444 A61K31/4439 A61K31/4188 A61K31/4162 A61P29/00 A61P25/04 

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0001] Настоящее раскрытие относится к классу оксаспироциклических производных, замещенных по азабициклическому кольцу, способам их получения, фармацевтическим композициям, содержащим производные, и их применению в качестве терапевтических средств, в частности, в качестве агонистов рецептора MOR, и их применению в получении лекарственных средств для лечения и предупреждения боли и заболеваний, связанных с болью.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0002] Опиоидные рецепторы представляют собой важный класс рецепторов, связанных с G-белком (GPCR), с которыми связываются эндогенные опиоидные пептиды и опиоидные лекарственные средства. Эндогенные опиоидные пептиды представляют собой опиоидоподобные активные вещества, которые естественным образом вырабатываются у млекопитающих, а известные эндогенные опиоидные пептиды в широком смысле подразделяются на энкефалины, эндорфины, динорфины и неоэндорфины. Соответствующие опиоидные рецепторы, а именно μ (MOR) рецептор, δ (DOR) рецептор, κ (KOR) рецептор и т. п., присутствуют в центральной нервной системе. Исследованиями установлено, что обезболивающий эффект эндогенных опиоидных пептидов в основном зависит от уровня экспрессии опиоидных рецепторов, мишеней, на которые действуют обезбаливающие эффекты опиоидных лекарственных средств, а также эндогенных опиоидных пептидов.

[0003] Текущие исследования предполагают, что GPCR опосредуют и регулируют физиологические функции в основном двумя сигнальными путями: сигнальным путем G-белка и сигнальным путем β-аррестина. После того, как обычный агонист GPCR связывается с рецептором, активируется сигнальный путь G-белка, который включает системы вторичных мессенджеров, такие как ионы кальция, аденилциклаза (AC) и митоген-активируемые протеинкиназы (MAPK), в то время как β-лиганд, связанный с аррестином, в основном активирует сигнальный путь β-аррестина. Опосредуя ответы GPCR, β-аррестин в основном действует следующим образом: 1) в качестве негативного регулятора он действует с киназой рецептора, связанного с G-белком (GRK), чтобы снизить чувствительность GPCR и остановить передачу сигнала G-белка; 2) в качестве каркасного белка он рекрутирует эндоцитарные белки и индуцирует эндоцитоз GPCR; и 3) в качестве адаптерного белка он образует комплекс с нижестоящими сигнальными молекулами GPCR для активации молекул передачи сигнала, таких как MAPK, протеинтирозинкиназа Src и Akt, независимым от G-белка способом. Различия в стимулированной лигандом передаче сигналов G-белка и/или передаче сигналов β-аррестина в конечном счете определяют лиганд-специфические клеточные биологические эффекты GPCR.

[0004] MOR является мишенью действия эндогенных энкефалинов и опиоидных обезбаливающих средств, таких как морфин. Ранние исследования показали, что эндогенные энкефалины и опиоидные лекарственные средства, такие как эторфин, могут активировать G-белки и запускать эндоцитоз рецепторов, но морфин совсем не запускает эндоцитоз рецепторов, потому что морфин слишком слаб, чтобы бороться с фосфорилированием MOR, и может захватывать только следовые количества β-аррестина на клеточной мембране (Zhang et al., Proc Natl Acad Sci USA, 1998, 95(12): 7157-7162). Такие лиганды осуществляют свои физиологические функции исключительно через сигнальный путь G-белка, а не через путь β-аррестина. Исследования показали, что обезболивающий эффект при посредничестве передачи сигналов G-белка сильнее и сохраняется в течение более длительного времени после инъекции морфина мышам с нокаутом по β-аррестину-2 (Bohn et al., Science, 1999). Можно ожидать, что, если такие лиганды в значительной степени отрицательно связаны с β-аррестином и могут даже избежать снижения чувствительности рецепторов, опосредованного β-аррестином, лиганды могут приводить к длительной передаче сигналов G-белком и более сильным обезболивающим эффектам.

[0005] В настоящее время агонисты MOR раскрыты в патентных заявках WO2017106547, WO2017063509, WO2012129495, WO2017106306 и т. д.

[0006] Длительное использование опиоидных лекарственных средств вызывает толерантность, а также побочные эффекты, такие как угнетение дыхания и запор, которые, как было показано, тесно связаны с функциями β-аррестина. Чтобы уменьшить побочные эффекты опиоидных лекарственных средств, лекарственные средства могут быть разработаны на основе отрицательных лигандов MOR, основанных на β-аррестине, для уменьшения побочных эффектов, опосредованных β-аррестином, и усиления терапевтических эффектов.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0007] Целью настоящего раскрытия является создание соединения, которое имеет новую структуру и можеть использоваться в качестве агониста MOR.

[0008] В первом аспекте в настоящем раскрытии предложено соединение, представленное в формуле (I), или его фармацевтически приемлемая соль, энантиомер, диастереомер, рацемат, смесь диастереомеров, сольват или пролекарство:

(I),

[0009] где

[0010] кольцо A представляет собой C_6-10 ароматическое кольцо или пяти- или шестичленное моноциклическое гетероарильное кольцо;

[0011] (R₀)_n означает, что атомы водорода в кольце A замещены n группами R₀, где n представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4, а n групп R₀ одинаковы или различны и каждая из них независимо представляет собой водород, циано, ацетил, гидроксил, гидроксиметил, гидроксиэтил, карбоксил, галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил), галоген (предпочтительно F или Cl), нитро, C_6-10 арил (предпочтительно фенил), пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил, C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), C_1-8 алкоксил (предпочтительно C_1-4 алкоксил), C_3-6 циклоалкил, C_3-6 циклоалкоксил, C_2-4 алкенил, C_2-4 алкинил, NR₁₁R₁₂, -CONR₁₁R₁₂, -C(O)O(C_1-8 алкил) (предпочтительно -C(O)O(C_1-4 алкил)), -OC(O)(C_1-8 алкил) (предпочтительно -OC(O)(C_1-4 алкил)), -SO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -SO₂(C_1-4 алкил)), -SO₂(C_6-10 арил) (предпочтительно -SO₂(C₆ арил), такой как -SO₂-фенил), -CO(C_6-10 арил) (предпочтительно -CO(C₆ арил), такой как -CO-фенил), четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо или трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо, в котором каждый C_6-10 арил, пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил, четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо и трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо не замещено или замещено одной, двумя или тремя замещающими группами, выбранными из группы, состоящей из ацетила, гидроксила, циано, галогена, C_1-3 алкила, C_1-3 алкоксила, C_3-6 циклоалкила и NR₁₁R₁₂;

[0012] Y₁ представляет собой CR₁ или N;

[0013] Y₂ представляет собой связь, NR₂, C=O или SO₂;

[0014] Y₃ представляет собой CR₃ или N;

[0015] Y₄ представляет собой CR₄ или N;

[0016] если Y₂ представляет собой связь, Y₁ непосредственно связан с N;

[0017] каждый из R₁, R₃ и R₄ независимо представляет собой водород, циано, гидроксил, гидроксиметил, цианометил, галоген, C_1-8 алкоксил (предпочтительно C_1-4 алкоксил), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), -CO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкил)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкил)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкил)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂ или -NHSO₂(C_3-6 циклоалкил);

[0018] R₂ представляет собой водород, C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), -CO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкил)), -CONR₁₁R₁₂ или -SO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -SO₂(C_1-4 алкил));

[0019] W представляет собой CR_w1R_w2, NR_w3, O или C=O,

[0020] каждый из R_w1 и R_w2 независимо представляет собой водород, галоген (предпочтительно F или Cl), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил) или галогенированный C_1-8 алкоксил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкоксил); или R_w1 и R_w2 вместе со связанным с ними атомом углерода образуют четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо или трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо, где каждое четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо и трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо не замещено или замещено одной, двумя или тремя замещающими группами, выбранными из группы, состоящей из циано, гидроксила, гидроксиметила, цианометила, галогена, C_1-8 алкоксила (предпочтительно C_1-4 алкоксила), C_1-8 алкила (предпочтительно C_1-4 алкила), -CO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкила)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкила)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкила)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂ и -NHSO₂(C_3-6 циклоалкила);

[0021] R_w3 представляет собой водород, C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил) или -CO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкил));

[0022] R_a, R_b, R_c и R_d определяются следующим образом:

[0023] (i) каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород, галоген (предпочтительно F или Cl), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил, а более предпочтительно метил, этил, n-пропил или изопропил), галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил) или галогенированный C_1-8 алкоксил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкоксил); или R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо или трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо (предпочтительно трех-пятичленное насыщенное моноциклическое кольцо, а более предпочтительно циклопропильное кольцо, циклобутильное кольцо или циклопентильное кольцо), где каждое четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо и трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо не замещено или замещено одной, двумя или тремя замещающими группами, выбранными из группы, состоящей из циано, гидроксила, гидроксиметила, цианометила, галогена, C_1-8 алкоксила (предпочтительно C_1-4 алкоксила), C_1-8 алкила (предпочтительно C_1-4 алкила), -CO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкила)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкила)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкила)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂ и -NHSO₂(C_3-6 циклоалкила);

[0024] R_c представляет собой водород, галоген (предпочтительно F или Cl), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил, а более предпочтительно метил), C_2-10 алкенил (предпочтительно C_2-6 алкенил, а более предпочтительно C_2-4 алкенил), C_2-10 алкинил (предпочтительно C_2-6 алкинил, а более предпочтительно C_2-4 алкинил), C_1-8 алкоксил (предпочтительно C_1-4 алкоксил, а более предпочтительно метокси), галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил, а более предпочтительно трифторметил), галогенированный C_1-8 алкоксил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкоксил), -CO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкил)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкил)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкил)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_3-6 циклоалкил), -SO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -SO₂(C_1-4 алкил)), -SO₂NR₁₁R₁₂, четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, C_6-10 арил или пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил, где каждое четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, C_6-10 арил и пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил не замещены или замещены одной, двумя или тремя замещающими группами, выбранными из группы, состоящей из циано, гидроксила, гидроксиметила, цианометила, галогена, C_1-8 алкоксила (предпочтительно C_1-4 алкоксила), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкила), -CO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкила)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкила)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкила)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂ и -NHSO₂(C_3-6 циклоалкила);

[0026] R_d представляет собой водород или C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил); или

[0026] (ii) каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород, галоген (предпочтительно F или Cl), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил), или галогенированный C_1-8 алкоксил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкоксил);

[0027] R_c связан с R_d с образованием трех-шестичленного насыщенного моноциклического кольца или четырех-шестичленного насыщенного моногетероциклического кольца;

[0028] каждый из R₁₁ и R₁₂ независимо представляет собой водород, C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил), C_3-6 циклоалкил или четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо; или R₁₁ и R₁₂ вместе со связанным с ними атомом азота образуют четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, в котором четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо не замещено или замещено одной, двумя или тремя группами C_1-4 алкила;

[0029] m представляет собой 0 или 1.

[0030] В другом предпочтительном варианте осуществления кольцо А представляет собой пяти- или шестичленное моногетероциклическое кольцо, которое выбрано из группы, состоящей из тиофена, фурана, тиазола, имидазола, оксазола, пиррола, пиразола, триазола, 1,2,3-триазола, 1,2,4-триазола, 1,2,5-триазола, 1,3,4-триазола, тетразола, изоксазола, оксадиазола, 1,2,3-оксадиазола, 1,2,4-оксадиазола, 1,2,5-оксадиазола, 1,3,4-оксадиазола, тиадиазола, пиридина, пиридазина, пиримидина и пиразина.

[0031] В другом предпочтительном варианте осуществления кольцо А представляет собой бензольное кольцо или пиридиновое кольцо.

[0032] В другом предпочтительном варианте осуществления W представляет собой CR_w1R_w2.

[0033] В другом предпочтительном варианте осуществления W представляет собой CH₂.

[0034] В другом предпочтительном варианте осуществления W представляет собой NR_w3 или O.

[0035] В другом предпочтительном варианте осуществления W представляет собой C=O.

[0036] В другом предпочтительном варианте осуществления R_w1 и R_w2 вместе со связанным с ними атомом углерода образуют четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, которое выбрано из группы, состоящей из азетидина, оксетана, тетрагидрофурана, тетрагидротиофена, тетрагидропиррола, пиперидина, пиперазина, морфолина, тиоморфолина, тиоморфолин-1,1-диоксида и тетрагидропирана.

[0037] В другом предпочтительном варианте осуществления R_w1 и R_w2 вместе со связанным с ними атомом углерода образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо, которое выбрано из группы, состоящей из циклопропильного кольца, циклобутильного кольца, циклопентильного кольца и циклогексильного кольца.

[0038] В другом предпочтительном варианте осуществления представляет собой .

[0039] В другом предпочтительном варианте осуществления R_c связан с R_d с образованием трех-шестичленного насыщенного моноциклического кольца, которое выбрано из группы, состоящей из циклопропильного кольца, циклобутильного кольца, циклопентильного кольца и циклогексильного кольца.

[0040] В другом предпочтительном варианте осуществления R_c связан с R_d с образованием четырех-шестичленного насыщенного моногетероциклического кольца, которое выбрано из группы, состоящей из азетидина, оксетана, тетрагидрофурана, тетрагидротиофена, тетрагидропиррола, пиперидина, пиперазина, морфолина, тиоморфолина, тиоморфолин-1,1-диоксида и тетрагидропирана.

[0041] Во втором аспекте в настоящем раскрытии предложено соединение, представленное в формуле (II), или его фармацевтически приемлемая соль, энантиомер, диастереомер, рацемат, смесь диастереомеров, сольват или пролекарство:

(II),

[0042] где

[0043] Z представляет собой CR₀₁ или N;

[0044] R₀₁ представляет собой водород, циано, ацетил, гидроксил, гидроксиметил, гидроксиэтил, карбоксил, галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил), галоген (предпочтительно F или Cl), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), C_1-8 алкоксил (предпочтительно C_1-4 алкоксил), C_3-6 циклоалкил или NR₁₁R₁₂;

[0045] (R₀)_n означает, что атомы водорода в шестичленном кольце замещены n группами R₀, где n представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4, а n групп R₀ одинаковы или различны и каждая из них независимо представляет собой водород, циано, ацетил, гидроксил, гидроксиметил, гидроксиэтил, карбоксил, галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил), галоген (предпочтительно F или Cl), нитро, C_6-10 арил (предпочтительно фенил), пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил, C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), C_1-8 алкоксил (предпочтительно C_1-4 алкоксил), C_3-6 циклоалкил, C_3-6 циклоалкоксил, C_2-4 алкенил, C_2-4 алкинил, NR₁₁R₁₂, -CONR₁₁R₁₂, -C(O)O(C_1-8 алкил) (предпочтительно -C(O)O(C_1-4 алкил)), -OC(O)(C_1-8 алкил) (предпочтительно -OC(O)(C_1-4 алкил)), -SO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -SO₂(C_1-4 алкил)), -SO₂(C_6-10 арил) (предпочтительно -SO₂C₆ арил, такой как -SO₂-фенил), -CO(C_6-10 арил) (предпочтительно -COC₆ арил, такой как -CO-фенил), четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо или трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо, где каждый C_6-10 арил, пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил, четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо и четырех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо не замещено или замещено одной, двумя или тремя замещающими группами, выбранными из группы, состоящей из ацетила, гидроксила, циано, галогена, C_1-3 алкила, C_1-3 алкоксила, C_3-6 циклоалкила и NR₁₁R₁₂;

[0046] Y₁ представляет собой CR₁ или N;

[0047] Y₂ представляет собой связь, NR₂, C=O или SO₂;

[0048] Y₃ представляет собой CR₃ или N;

[0049] Y₄ представляет собой CR₄ или N;

[0050] если Y₂ представляет собой связь, Y₁ непосредственно связан с N;

[0051] каждый из R₁, R₃ и R₄ независимо представляет собой водород, циано, гидроксил, гидроксиметил, цианометил, галоген, C_1-8 алкоксил (предпочтительно C_1-4 алкоксил), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), -CO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкил)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкил)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкил)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂ или -NHSO₂(C_3-6 циклоалкил);

[0052] R₂ представляет собой водород, C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), -CO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкил)), -CONR₁₁R₁₂ или -SO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -SO₂(C_1-4 алкил));

[0053] каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород, галоген (предпочтительно F или Cl), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил) или галогенированный C_1-8 алкоксил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкоксил); или R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо или трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо, где каждое четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо и трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо не замещено или замещено одной, двумя или тремя замещающими группами, выбранными из группы, состоящей из циано, гидроксила, гидроксиметила, цианометила, галогена, C_1-8 алкоксила (предпочтительно C_1-4 алкоксила), C_1-8 алкила (предпочтительно C_1-4 алкила), -CO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкила)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкила)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкила)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂ и -NHSO₂(C_3-6 циклоалкила);

[0054] R_c представляет собой водород, галоген (предпочтительно F или Cl), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), C_2-10 алкенил (предпочтительно C_2-6 алкенил, а более предпочтительно C_2-4 алкенил), C_2-10 алкинил (предпочтительно C_2-6 алкинил, а более предпочтительно C_2-4 алкинил), C_1-8 алкоксил (предпочтительно C_1-4 алкоксил), галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил), галогенированный C_1-8 алкоксил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкоксил), -CO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкил)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкил) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкил)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкил)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_3-6 циклоалкил), -SO₂(C_1-8 алкил) (предпочтительно -SO₂(C_1-4 алкил)), -SO₂NR₁₁R₁₂, четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, C_6-10 арил или пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил, где каждое четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, C_6-10 арил и пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил не замещены или замещены одной, двумя или тремя замещающими группами, выбранными из группы, состоящей из циано, гидроксила, гидроксиметила, цианометила, галогена, C_1-8 алкоксила (предпочтительно C_1-4 алкоксила), C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкила), -CO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкила)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкила)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкила)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂ и -NHSO₂(C_3-6 циклоалкила);

[0055] каждый из R₁₁ и R₁₂ независимо представляет собой водород, C_1-8 алкил (предпочтительно C_1-4 алкил), галогенированный C_1-8 алкил (предпочтительно галогенированный C_1-4 алкил), C_3-6 циклоалкил или четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо; или R₁₁ и R₁₂ вместе со связанным с ними атомом азота образуют четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, где четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо не замещено или замещено одной, двумя или тремя группами C_1-4 алкила; и

[0056] m представляет собой 0 или 1.

[0057] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₁ представляет собой N или CH.

[0058] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₂ представляет собой связь или C=O.

[0059] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₃ представляет собой CR₃.

[0060] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₃ представляет собой CH или N.

[0061] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₄ представляет собой CR₄.

[0062] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₄ представляет собой CH или N.

[0063] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₁ представляет собой N; Y₂ представляет собой связь; Y₃ представляет собой CR₃ или N; Y₄ представляет собой CR₄ или N; а R₃ и R₄ являются такими, как определено выше.

[0064] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₁ представляет собой N; Y₂ представляет собой связь; Y₃ представляет собой CR₃; Y₄ представляет собой CR₄; а R₃ и R₄ являются такими, как определено выше.

[0065] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₁ представляет собой N; Y₂ представляет собой связь; Y₃ представляет собой CH; а Y₄ представляет собой CH.

[0066] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₁ представляет собой N; Y₂ представляет собой C=O; Y₃ представляет собой CR₃ или N; Y₄ представляет собой CR₄ или N; а R₃ и R₄ являются такими, как определено выше.

[0067] В другом предпочтительном варианте осуществления Y₁ представляет собой CR₁; Y₂ представляет собой связь; Y₃ представляет собой CR₃ или N; Y₄ представляет собой CR₄ или N; а R₁, R₃ и R₄ являются такими, как определено выше.

[0068] В другом предпочтительном варианте осуществления m представляет собой 1.

[0069] В другом предпочтительном варианте осуществления Z представляет собой N.

[0070] В другом предпочтительном варианте осуществления Z представляет собой CR₀₁; а R₀₁ представляет собой водород, циано, ацетил, гидрокси, гидроксиметил, гидроксиэтил, карбоксил, галогенированный C_1-3 алкил, F, Cl, C_1-3 алкил, C_1-3 алкоксил или C_3-6 циклоалкил.

[0071] В другом предпочтительном варианте осуществления Z представляет собой CH.

[0072] В другом предпочтительном варианте осуществления соединение, представленное в формуле (II), имеет структуру, представленную формулой (III):

.

[0073] В другом предпочтительном варианте осуществления пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил, связанный с R₀, выбран из тиофена, фурана, тиазола, имидазола, оксазола, пиррола, пиразола, триазола, 1,2,3-триазола, 1,2,4-триазола, 1,2,5-триазола, 1,3,4-триазола, тетразола, изоксазола, оксадиазола, 1,2,3-оксадиазола, 1,2,4-оксадиазола, 1,2,5-оксадиазола, 1,3,4-оксадиазола, тиадиазола, пиридина, пиридазина, пиримидина или пиразина.

[0074] В другом предпочтительном варианте осуществления четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, связанное с R₀, выбрано из группы, состоящей из азетидина, оксетана, тетрагидрофурана, тетрагидротиофена, тетрагидропиррола, пиперидина, пиперазина, морфолина, тиоморфолина, тиоморфолин-1,1-диоксида и тетрагидропирана.

[0075] В другом предпочтительном варианте осуществления R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, которое выбрано из группы, состоящей из азетидина, оксетана, тетрагидрофурана, тетрагидротиофена, тетрагидропиррола, пиперидина, пиперазина, морфолина, тиоморфолина, тиоморфолин-1,1-диоксида и тетрагидропирана.

[0076] В другом предпочтительном варианте осуществления R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо, которое выбрано из циклопропильного кольца, циклобутильного кольца, циклопентильного кольца и циклогексильного кольца.

[0077] В другом предпочтительном варианте осуществления пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил, связанный с R_c, выбран из тиофена, фурана, тиазола, имидазола, оксазола, пиррола, пиразола, триазола, 1,2,3-триазола, 1,2,4-триазола, 1,2,5-триазола, 1,3,4-триазола, тетразола, изоксазола, оксадиазола, 1,2,3-оксадиазола, 1,2,4-оксадиазола, 1,2,5-оксадиазола, 1,3,4-оксадиазола, тиадиазола, пиридина, пиридазина, пиримидина или пиразина.

[0078] В другом предпочтительном варианте осуществления четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, связанное с R_c, выбрано из группы, состоящей из азетидина, оксетана, тетрагидрофурана, тетрагидротиофена, тетрагидропиррола, пиперидина, пиперазина, морфолина, тиоморфолина, тиоморфолин-1,1-диоксида и тетрагидропирана.

[0079] В другом предпочтительном варианте осуществления четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, связанное с R₁₁ и R₁₂, выбрано из группы, состоящей из азетидина, оксетана, тетрагидрофурана, тетрагидротиофена, тетрагидропиррола, пиперидина, пиперазина, морфолина, тиоморфолина, тиоморфолин-1,1-диоксида и тетрагидропирана.

[0080] В другом предпочтительном варианте осуществления R₁₁ и R₁₂ вместе со связанным с ними атомом азота образуют четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, которое выбрано из группы, состоящей из азетидина, тетрагидропиррола, пиперидина, пиперазина, морфолина, тиоморфолина и тиоморфолин-1,1-диоксида.

[0081] В другом предпочтительном варианте осуществления каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород или C_1-3 алкил (предпочтительно метил); или R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо (предпочтительно циклопропильное кольцо, циклобутильное кольцо или циклопентильное кольцо).

[0082] В другом предпочтительном варианте осуществления R_c представляет собой водород, галоген (предпочтительно F), C_1-3 алкил (предпочтительно метил, этил или n-пропил), C_1-3 алкоксил (предпочтительно метокси) или галогенированный C_1-3 алкил (предпочтительно трифторметил).

[0083] В другом предпочтительном варианте осуществления n представляет собой 0.

[0084] В другом предпочтительном варианте осуществления четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо выбрано из следующих структур:

[0085]

и атомы водорода в четырех-шестичленном насыщенном моногетероциклическом кольце необязательно замещены с помощью одной, двух или трех замещающих групп, каждая из которых независимо выбрана из группы, состоящей из циано, гидроксила, гидроксиметила, цианометила, галогена, C_1-8 алкоксила (предпочтительно C_1-4 алкоксила), C_1-8 алкила (предпочтительно C_1-4 алкила), -CO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкила)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкила)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкила)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂ и -NHSO₂(C_3-6 циклоалкила).

[0086] В другом предпочтительном варианте осуществления каждый из пяти- или шестичленного моноциклического гетероарила, связанного с A кольцом, пяти- или шестичленного моноциклического гетероарила, связанного с R₀, и пяти- или шестичленного моноциклического гетероарила, связанного с R_c, независимо выбран из следующих структур:

и пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил необязательно замещен одной, двумя или тремя замещающими группами, каждая из которых независимо выбрана из группы, состоящей из циано, гидроксила, гидроксиметила, цианометила, галогена, C_1-8 алкоксила (предпочтительно C_1-4 алкоксила), C_1-8 алкила (предпочтительно C_1-4 алкила), -CO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -CO(C_1-4 алкила)), -CONR₁₁R₁₂, NR₁₁R₁₂, -NHCO(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHCO(C_1-4 алкила)), -NHCONR₁₁R₁₂, -NHSO₂(C_1-8 алкила) (предпочтительно -NHSO₂(C_1-4 алкила)), -NHSO₂NR₁₁R₁₂ и -NHSO₂(C_3-6 циклоалкила).

[0087] В другом предпочтительном варианте осуществления соединение выбрано из группы, состоящей из:

.

[0088] В третьем аспекте в настоящем раскрытии предложена фармацевтическая композиция, которая включает соединение или его фармацевтически приемлемую соль, энантиомер, диастереомер, рацемат, смесь диастереомеров, сольват или пролекарство в соответствии с первым или вторым аспектом настоящего раскрытия; и фармацевтически приемлемый носитель.

[0089] В четвертом аспекте в настоящем раскрытии предложено применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли, энантиомера, диастереомера, рацемата, смеси диастереомеров, сольвата или пролекарства в соответствии с первым или вторым аспектом настоящего раскрытия, или фармацевтической композиции в соответствии с третьим аспектом настоящего раскрытия при производстве лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения заболевания, опосредованного агонистом рецептора MOR.

[0090] В пятом аспекте в настоящем раскрытии предложено применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли, энантиомера, диастереомера, рацемата, смеси диастереомеров, сольвата или пролекарства в соответствии с первым или вторым аспектом настоящего раскрытия, или фармацевтической композиции в соответствии с третьим аспектом настоящего раскрытия при производстве лекарственного препарата для активации или противодействия рецепторам MOR.

[0091] В шестом аспекте в настоящем раскрытии предложено применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли, энантиомера, диастереомера, рацемата, смеси диастереомеров, сольвата или пролекарства в соответствии с первым или вторым аспектом настоящего раскрытия, или фармацевтической композиции в соответствии с третьим аспектом настоящего раскрытия при производстве лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения боли и заболевания, связанного с болью.

[0092] В другом предпочтительном варианте осуществления заболевание, опосредованное агонистом рецептора MOR, выбрано из группы, состоящей из боли, иммунной дисфункции, воспаления, рефлюкса пищевода, неврологических и психических заболеваний, урологических и репродуктивных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний и респираторных заболеваний, предпочтительно боли.

[0093] В другом предпочтительном варианте осуществления боль выбрана из группы, состоящей из послеоперационной боли, боли, вызванной раком, невропатической боли, травматической боли и боли, вызванной воспалением.

[0094] В другом предпочтительном варианте осуществления рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы, рака эндометрия, рака шейки матки, рака кожи, рака предстательной железы, рака яичников, опухоли маточной трубы, опухоли яичника, гемофилии и лейкемии.

[0095] В седьмом аспекте в настоящем раскрытии предложен способ предупреждения и/или лечения заболевания, опосредованного агонистом рецептора MOR, который включает: введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли, энантиомера, диастереомера, рацемата, смеси диастереомеров, сольвата или пролекарства в соответствии с первым или вторым аспектом настоящего раскрытия, или фармацевтической композиции в соответствии с третьим аспектом настоящего раскрытия.

[0096] В восьмом аспекте в настоящем раскрытии предложен способ предупреждения и/или лечения боли и заболевания, связанного с болью, который включает: введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли, энантиомера, диастереомера, рацемата, смеси диастереомеров, сольвата или пролекарства в соответствии с первым или вторым аспектом настоящего раскрытия, или фармацевтической композиции в соответствии с третьим аспектом настоящего раскрытия.

[0097] В другом предпочтительном варианте осуществления заболевание, опосредованное агонистом рецептора MOR, выбрано из группы, состоящей из боли, иммунной дисфункции, воспаления, рефлюкса пищевода, неврологических и психических заболеваний, урологических и репродуктивных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний и респираторных заболеваний, предпочтительно боли.

[0098] В другом предпочтительном варианте осуществления боль выбрана из группы, состоящей из послеоперационной боли, боли, вызванной раком, невропатической боли, травматической боли и боли, вызванной воспалением.

[0099] В другом предпочтительном варианте осуществления рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы, рака эндометрия, рака шейки матки, рака кожи, рака предстательной железы, рака яичников, опухоли маточной трубы, опухоли яичника, гемофилии и лейкемии.

[0100] В девятом аспекте в настоящем раскрытии предложен способ получения соединения, представленного в формуле (II), который включает следующие шаги:

[0101] проведение восстановительного аминирования соединения, представленного в формуле (I-1), и соединения, представленного в формуле (I-2), с получением соединения, представленного в формуле (I),

[0102] где группы в каждой формуле являются такими, как определено выше.

[0103] В другом предпочтительном варианте осуществления соединение, представленное в формуле (I-1), представляет собой .

[0104] В другом предпочтительном варианте осуществления соединение, представленное в формуле (I-2), представляет собой .

[0105] В другом предпочтительном варианте осуществления восстановительное аминирование проводят в реакционной системе, содержащей инертный растворитель, кислоту Льюиса и восстановитель.

[0106] В другом предпочтительном варианте осуществления инертный растворитель представляет собой C_1-4 алкиловый спирт, толуол, ксилол, метил-трет-бутиловый эфир, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, диэтиловый эфир, дихлорметан, хлороформ, 1,2-дихлорэтан, этилацетат, ацетонитрил, диметилсульфоксид, N,N-диметилформамид или их комбинацию.

[0107] В другом предпочтительном варианте осуществления кислота Льюиса представляет собой изопропоксид титана.

[0109] В другом предпочтительном варианте осуществления восстановитель выбран из группы, состоящей из боргидрида тетрабутиламмония, малонилоксиборгидрида натрия, триацетоксиборгидрида натрия, цианоборгидрида натрия, боргидрида натрия, боргидрида лития, боргидрида калия и борана.

[0109] В десятом аспекте в настоящем раскрытии предложен способ получения соединения, представленного в формуле (II), который включает следующие шаги:

[0110] проведение восстановительного аминирования соединения, представленного в формуле (I-3), и соединения, представленного в формуле (I-4), с получением соединения, представленного в формуле (I),

[0111] где группы в каждой формуле являются такими, как определено выше.

[0112] В другом предпочтительном варианте осуществления соединение, представленное в формуле (I-3), представляет собой .

[0113] В другом предпочтительном варианте осуществления соединение, представленное в формуле (I-4), представляет собой .

[0114] В другом предпочтительном варианте осуществления восстановительное аминирование проводят в реакционной системе, содержащей инертный растворитель, и восстановитель.

[0115] В другом предпочтительном варианте осуществления инертный растворитель представляет собой C_1-4 алкиловый спирт, толуол, ксилол, метил-трет-бутиловый эфир, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, диэтиловый эфир, дихлорметан, хлороформ, 1,2-дихлорэтан, этилацетат, ацетонитрил, диметилсульфоксид, N,N-диметилформамид или их комбинацию.

[0116] В другом предпочтительном варианте осуществления восстановитель выбран из группы, состоящей из боргидрида тетрабутиламмония, малонилоксиборгидрида натрия, триацетоксиборгидрида натрия, цианоборгидрида натрия, боргидрида натрия, боргидрида лития, боргидрида калия и борана.

[0117] В одиннадцатом аспекте в настоящем раскрытии предложено промежуточное соединение замещенного в кольце оксаспироциклического производного пирролопиразола, при этом промежуточное соединение имеет структуру, представленную формулой (I-2):

(I-2),

[0118] в которой Y₁, Y₂, Y₃, Y₄, W, R_a, R_b, R_c, R_d и m являются такими, как определено в первом аспекте настоящего раскрытия.

[0119] В некоторых вариантах осуществления соединение, представленное в формуле (I-2), имеет структуру, представленную формулой (I-2a):

(I-2a).

[0120] В некоторых вариантах осуществления соединение, представленное в формуле (I-2), имеет структуру, представленную формулой (I-2б):

(I-2б).

[0121] В некоторых вариантах осуществления каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород или C_1-3 алкил (предпочтительно метил); или R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо (предпочтительно циклопропильное кольцо, циклобутильное кольцо или циклопентильное кольцо).

[0122] В некоторых вариантах осуществления R_c представляет собой водород, галоген (предпочтительно F), C_1-3 алкил (предпочтительно метил, этил или n-пропил), C_1-3 алкоксил (предпочтительно метокси) или галогенированный C_1-3 алкил (предпочтительно трифторметил).

[0123] В некоторых вариантах осуществления соединение, представленное в формуле (I-2), выбрано из следующих структур:

[0124] В двенадцатом аспекте в настоящем раскрытии предложен способ получения соединения, представленного в формуле I-2б, в соответствии с одиннадцатым аспектом настоящего раскрытия, который включает следующий шаг:

[0125] S1: проведение циклизации соединения, представленного в формуле I-2б₅, с получением соединения, представленного в формуле I-2б.

[0126] В некоторых вариантах осуществления на шаге S1 циклизацию проводят в растворе н-бутиллития в ТГФ.

[0127] В некоторых вариантах осуществления соединение I-2б₅ представляет собой известное вещество (например, CAS № 1310249-96-7 или CAS № 2301048-78-0) или его получают со ссылкой на соответствующие опубликованные документы или с помощью обычных реакций, известных специалистам в данной области техники.

[0128] В некоторых других вариантах осуществления получение соединения, представленного в формуле I-2б₅, включает следующие шаги:

[0129] S2: проведение реакции гидролиза соединения, представленного в формуле I-2б₄, с получением соединения, представленного в формуле I-2b₅.

[0130] В некоторых вариантах осуществления на шаге S2 реакцию гидролиза проводят в растворителе (например, метанол/вода, ТГФ/метанол, ТГФ/метанол/вода) при катализе неорганической щелочью (например, гидроксидом натрия, гидроксидом лития, гидроксидом калия).

[0131] В некоторых вариантах осуществления получение соединения, представленного в формуле I-2б₄, включает следующие шаги:

[0132] S3: проведение реакции присоединения соединения, представленного в формуле I-2б₃, и пиразола с получением соединения, представленного в формуле I-2b₄.

[0133] В некоторых вариантах осуществления на шаге S3 реакцию присоединения проводят в щелочной системе (например, ДБУ, карбонат калия и т. д.) в органическом растворителе (например, ацетонитриле, ДМФА и т. д.).

[0134] В некоторых вариантах осуществления соединение, представленное в формуле I-2б₃, представляет собой известное вещество (например, этил (Е)-бут-2-еноат, этил (Е)-гекс-2-еноат и т. д.) или может быть получено со ссылкой на соответствующие опубликованные документы или с помощью обычных реакций, известных специалистам в данной области техники.

[0135] В некоторых других вариантах осуществления соединение, представленное в формуле I-2б₃, получают с помощью следующего шага:

[0136] где R_e представляет собой C_1-6 алкил, а предпочтительно метил, этил, пропил или изопропил,

[0137] S4: проведение реакции соединения, представленного в формуле I-2б₁, с соединением, представленным в формуле I-2б₂, с получением соединения, представленного в формуле I-2б₃.

[0138] В некоторых вариантах осуществления на шаге S4 реакцию проводят в присутствии ДБУ/хлорида лития в органическом растворителе (например, ацетонитриле, ТГФ).

[0139] В некоторых вариантах осуществления соединение, представленное в формуле I-2б₁, представляет собой известное вещество (например, циклопропанкарбоксальдегид, циклопентанкарбоксальдегид, пропиональдегид, изобутиральдегид, пивалальдегид, 3-метилбутиральдегид, циклобутанон и т. д.) или может быть получено со ссылкой на соответствующие опубликованные документы или с помощью обычных реакций, известных специалистам в данной области техники.

[0140] В некоторых вариантах осуществления соединение, представленное в формуле I-2б₂, представляет собой известное вещество (например, триэтилфосфоноацетат) или может быть получено со ссылкой на соответствующие опубликованные документы или с помощью обычных реакций, известных специалистам в данной области техники.

[0141] Следует понимать, что в рамках настоящего раскрытия вышеуказанные технические признаки настоящего раскрытия и технические признаки, конкретно описанные ниже (например, варианты осуществления), могут быть объединены друг с другом для создания новых или предпочтительных технических решений. Из-за ограничений по объему они не будут повторяться в данном документе.

ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

[0142] Благодаря масштабным и глубоким исследованиям изобретатели неожиданно обнаружили, что такие оксаспироциклические производные, замещенные по азабициклическому кольцу, обладают не только прекрасным обезболивающим действием, но и хорошей погрешностью измерения. К тому же, соединения по настоящему раскрытию обладают превосходными фармакокинетическими свойствами. Таким образом, ожидается, что эти соединения будут разработаны в качестве лекарственных средств для лечения и предупреждения боли и заболеваний, связанных с болью. На этом основании изобретатели выполнили настоящее раскрытие.

[0143] Определение терминов

[0144] Используемый в данном документе термин «алкил» относится к линейной и разветвленной насыщенной алифатической гидрокарбильной группе. C_1-10 алкил относится к алкильной группе, имеющей от 1 до 10 атомов углерода, предпочтительным является C_1-8 алкил, более предпочтительным является C_1-6 алкил, более предпочтительным является C_1-4 алкил, а еще более предпочтительным является C_1-3 алкил, которые имеют аналогичные определения. Примеры алкила более предпочтительно включают, но без ограничения, метил, этил, н-пропил, изoпропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, втор-бутил, н-пентил, 1,1-диметилпропил, 1,2-диметилпропил, 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил, 2-метилбутил, 3-метилбутил, н-гексил, 1-этил-2-метилпропил, 1,1,2-триметилпропил, 1,1-диметилбутил, 1,2-диметилбутил, 2,2-диметилбутил, 1,3-диметилбутил, 2-этилбутил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 4-метилпентил, 2,3-диметилбутил, н-гептил, 2-метилгексил, 3-метилгексил, 4-метилгексил, 5-метилгексил, 2,3-диметилпентил, 2,4-диметилпентил, 2,2-диметилпентил, 3,3-диметилпентил, 2-этилпентил, 3-этилпентил, н-октил, 2,3-диметилгексил, 2,4-диметилгексил, 2,5-диметилгексил, 2,2-диметилгексил, 3,3-диметилгексил, 4,4-диметилгексил, 2-этилгексил, 3-этилгексил, 4-этилгексил, 2-метил-2-этилпентил, 2-метил-3-этилпентил, н-нонил, 2-метил-2-этилгексил, 2-метил-3-этилгексил, 2,2-диэтилпентил, н-децил, 3,3-диэтилгексил, 2,2-диэтилгексил, их различные разветвленные изомеры и т. д.

[0145] Используемый в данном документе термин «алкенил» относится к линейной или разветвленной ненасыщенной алифатической углеводородной группе, имеющей углерод-углеродные двойные связи (C=C), которая предпочтительно содержит от 2 до 10 атомов углерода (C_2-10), более предпочтительно содержит от 2 до 6 атомов углерода (C_2-6), а еще более предпочтительно содержит от 2 до 4 атомов углерода (C_2-4). Примеры алкенила включают, но без ограничения, винил, пропенил, изoпропенил, н-бутенил, изобутенил, пентенил, гексенил и т.д.

[0146] Используемый в данном документе «алкинил» относится к линейной и разветвленной ненасыщенной алифатической углеводородной группе, имеющей углерод-углеродные тройные связи, которая предпочтительно содержит от 2 до 10 атомов углерода (C_2-10), более предпочтительно содержит от 2 до 6 атомов углерода (C_2-6) и еще более предпочтительно содержит от 2 до 4 атомов углерода (C_2-4). Примеры алкинила включают, но без ограничения, этинил, пропинил, н-бутинил, изобутинил, пентинил, гексинил и т. д.

[0147] Используемые в данном документе термины «циклоалкил» и «циклоалкильное кольцо» могут использоваться взаимозаменяемо, и оба они относятся к насыщенным или частично ненасыщенным моноциклическим или полициклическим углеводородным группам. «C_3-8 циклоалкил» относится к циклической гидрокарбильной группе, имеющей от 3 до 8 атомов углерода, и предпочтительным является C_3-6 циклоалкил, который имеет аналогичное определение. Примеры циклоалкила включают, но без ограничения, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил, циклогексил, циклогексенил, циклогексадиенил, циклогептил, циклогептатриенил, циклооктил и т.д., а циклопропил, циклопентил, циклогексенил являются предпочтительными.

[0148] Используемый в данном документе термин «спироциклическое кольцо» относится к полициклической группе, в которой моноциклические кольца имеют один общий атом углерода (называемый спироатомом), эти моноциклические кольца могут содержать одну или более двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженной π-электронной системы. По количеству колец спирокольца делятся на спиробициклические кольца и спирополициклические кольца, причем спиробициклические кольца являются предпочтительными. Четырехчленное/пятичленное, пятичленное/пятичленное или пятичленное/шестичленное спиробициклическое кольцо является более предпочтительным. Примеры включают:

.

[0149] Используемый в данном документе термин «спирогетероциклическое кольцо» относится к полициклическому углеводороду, в котором моноциклические кольца имеют один общий атом (называемый спироатомом), один или два кольцевых атома представляют собой гетероатомы, выбранные из азота, кислорода или S(O)_n (где n представляет собой целое число от 0 до 2), а другие атомы в кольце представляют собой атомы углерода. Эти кольца могут содержать одну или более двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженной π-электронной системы. По количеству колец спирогетероциклические кольца делятся на бициклические спирогетероциклические кольца и полициклические спирогетероциклические кольца, причем бициклические спирогетероциклические кольца являются предпочтительными. Четырехчленное/пятичленное, пятичленное/пятичленное или пятичленное/шестичленное бициклическое спирогетероциклическое кольцо является более предпочтительным. Примеры включают:

.

[150] Используемый в данном документе термин «мостиковое кольцо» относится к полициклической группе, в которой два или более общих атома углерода являются общими, при этом общие атомы углерода называются мостиковыми атомами углерода, и два мостиковых атома углерода могут быть связаны углеродной цепью или связью, которая называется мостом. Это мостиковое кольцо может содержать одну или более двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженной π-электронной системы. Бициклическое или трициклическое мостиковые кольца являются предпочтительными. Примеры включают:

.

[0151] Используемый в данном документе термин «мостиковое гетероциклическое кольцо» относится к полициклической группе, в которой два или более общих атома являются общими, один или более атомов кольца представляют собой гетероатомы, выбранные из азота, кислорода или S(O)_n (где n представляет собой целое число от 0 до 2), а другие атомы кольца представляют собой атомы углерода. Мостиковое гетероциклическое кольцо может содержать одну или более двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженную π-электронную систему. Мостиковые гетеробициклическое или гетеротрициклическое кольца являются предпочтительными. Примеры включают:

.

[0152] Используемый в данном документе термин «восьми-десятичленное бициклическое кольцо» относится к мостиковому кольцу, содержащему два кольца с от 8 до 10 атомов в кольце, а бициклическое кольцо может быть насыщенным полностью углеродным бициклическим кольцом или частично ненасыщенным полностью углеродным бициклическим кольцом. Примеры восьми-десятичленного бициклического кольца включают, но без ограничения,

.

[0153] Используемый в данном документе термин «восьми-десятичленное гетероциклическое кольцо» относится к мостиковому гетероциклическому кольцу, содержащему два кольца с от 8 до 10 атомов в кольце, в котором один, два, три, четыре или пять атомов углерода в кольце замещены гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы. Примеры восьми-десятичленного гетеробициклического кольца включают, но без ограничения, тетрагидрохинолиновое кольцо, тетрагидроизохинолиновое кольцо, декагидрохинолиновое кольцо и т. д.

[0154] Используемый в данном документе термин «C_1-8 алкоксил» относится к -O-(C_1-8 алкилу), в котором алкил является таким, как определено выше. Предпочтительным является C_1-6 алкоксил, предпочтительным является C_1-4 алкоксил, а более предпочтительным является C_1-3 алкоксил. Примеры алкоксила включают, но без ограничения, метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, трет-бутокси, изобутокси, пентилокси и т. д.

[0155] Используемый в данном документе термин «C_3-8 циклоалкоксил» относится к -O-(C_3-8 циклоалкилу), в котором циклоалкил является таким, как определено выше. Предпочтительным является C_3-6 циклоалкоксил. Примеры циклоалкоксила включают, но без ограничения, циклопропокси, циклобутокси, циклопентилокси, циклогексилокси и т. д.

[0156] Используемые в данном документе термины «C_6-10 арил» и «C_6-10 ароматическое кольцо» могут использоваться взаимозаменяемо, при этом оба относятся к полностью углеродной моноциклической или конденсированной полициклической (то есть кольца имеют общие соседние пары атомов углерода) группе, имеющей сопряженную π-электронную систему и относятся к арильной группе, имеющей от 6 до 10 атомов углерода. Предпочтительными являются фенил и нафтил, а более предпочтительным является фенил.

[0157] Используемый в данном документе термин «одна связь» относится к ковалентной связи, посредством которой связаны две группы.

[0158] Используемый в данном документе термин «галоген» относится к фтору, хлору, брому или йоду.

[0159] Используемый в данном документе термин «галогенированный» относится к тому, что один или более (например, один, два, три, четыре или пять) атомов водорода в группе замещены галогеном.

[0160] Например, «галогенированный C_1-10 алкил» означает, что алкильная группа замещена одним или более (например, одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью) атомами галогена, в которых алкил является таким, как определено выше. Предпочтительным является галогенированный C_1-8 алкил, более предпочтительным является галогенированный C_1-6 алкил, более предпочтительным является галогенированный C_1-4 алкил, а еще более предпочтительным является галогенированный C_1-3 алкил. Примеры галогенированного алкила включают, но без ограничения, монохлорметил, дихлорметил, трихлорметил, монохлорэтил, 1,2-дихлорэтил, трихлорэтил, монобромэтил, монофторметил, дифторметил, трифторметил, монофторэтил, дифторэтил, трифторэтил и т. д.

[0161] В другом примере «галогенированный C_1-10 алкоксил» означает, что алкоксильная группа замещена одним или более (например, одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью) атомами галогена, в которых алкоксил является таким, как определено выше. Предпочтительным является галогенированный C_1-8 алкоксил, более предпочтительным является галогенированный C_1-6 алкоксил, более предпочтительным является галогенированный C_1-4 алкоксил, а еще более предпочтительным является галогенированный C_1-3 алкоксил. Галогенированные алкоксильные группы включают, но без ограничения, трифторметокси, трифторэтокси, монофторметокси, монофторэтокси, дифторметокси, дифторэтокси и т. д.

[0162] В другом примере «галогенированный C_3-8 циклоалкил» означает, что циклоалкильная группа замещена одним или более (например, одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью) атомами галогена, в которых циклоалкил является таким, как определено выше. Предпочтительным является C_3-6 циклоалкил. Примеры галогенированного циклоалкила включают, но без ограничения, трифторциклопропил, монофторциклопропил, монофторциклогексил, дифторциклопропил, дифторциклогексил и т. д.

[0163] Используемый в данном документе термин «дейтерированный C_1-8 алкил» означает, что алкильная группа замещена одним или более (например, одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью) атомами дейтерия, в которых алкил является таким, как определено выше. Предпочтительным является дейтерированный C_1-6 алкил, а более предпочтительным является дейтерированный C_1-3 алкил. Примеры дейтерированной алкильной группы включают, но без ограничения, моно-дейтерометил, моно-дейтероэтил, ди-дейтерометил, ди-дейтероэтил, три-дейтерометил, три-дейтероэтил и т. д.

[0164] Используемый в данном документе термин «амино» относится к NH₂, «циано» относится к CN, «нитро» относится к NO₂, «бензил» относится к -CH₂-фенилу, «оксогруппа» относится к =O, «карбоксил» относится к -C(O)OH, «ацетил» относится к -C(O)CH₃, «гидроксиметил» относится к -CH₂OH, «гидроксиэтил» относится к -CH₂CH₂OH или -CHOHCH₃, «гидроксил» относится к -OH, «тиол» относится к SH и «циклопропилиден» имеет следующую структуру: .

[0165] Используемые в данном документе термины «гетероарильное кольцо» и «гетероарил» могут использоваться взаимозаменяемо, оба относятся к группе, имеющей от 5 до 10 атомов в кольце, 6, 10 или 14 общих π-электронов в массиве колец и от 1 до 5 гетероатомов в дополнение к атомам углерода. «Гетероатом» относится к азоту, кислороду или сере. Предпочтительным является пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил или восьми-десятичленный бициклический гетероарил.

[0166] Используемый в данном документе термин «трех-семичленное (четырех-семичленное) насыщенное моноциклическое кольцо» относится к насыщенному полностью углеродному моноциклическому кольцу, содержащему от 3 до 7 атомов в кольце, а трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо является предпочтительным. Примеры насыщенных моноциклических колец включают, но без ограничения, циклопропильное кольцо, циклобутильное кольцо, циклопентильное кольцо, циклогексильное кольцо, циклогептильное кольцо, циклооктильное кольцо и т. д.

[0167] Используемый в данном документе термин «трех-семичленное (четырех-семичленное) насыщенное моногетероциклическое кольцо» означает, что один, два или три атома углерода в трех-семичленном насыщенном моноциклическом кольце замещены выбранными гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или S(O)_t (где t представляет собой целое число от 0 до 2), кольцевой фрагмент -O-O-, -O-S- или -S-S- не включен, а другие атомы в кольце представляют собой атомы углерода. Предпочтительным является четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, а более предпочтительным является пяти- или шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо. Пример насыщенного моногетероциклического кольца включает, но без ограничения, пропилен оксид, азетидин, оксетан, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, тетрагидропиррол, пиперидин, пирролин, оксазолидин, пиперазин, диоксолан, диоксан, морфолин, тиоморфолин, тиоморфолин-1,1-диоксид, тетрагидропиран и т. д.

[0168] Используемые в данном документе термины «пяти- или шестичленное моноциклическое гетероарильное кольцо» и «пяти- или шестичленный моноциклический гетероарил» могут использоваться взаимозаменяемо и оба они относятся к моноциклическому гетероарильному кольцу, имеющему 5 или 6 атомов в кольце, которые включают, но без ограничения, тиофеновое кольцо, фурановое кольцо, тиазоловое кольцо, имидазовое кольцо, оксазоловое кольцо, пирроловое кольцо, пиразоловое кольцо, триазоловое кольцо, 1,2,3-триазоловое кольцо, 1,2,4-триазоловое кольцо, 1,2,5-триазоловое кольцо, 1,3,4-триазоловое кольцо, тетразоловое кольцо, изоксазоловое кольцо, оксадиазоловое кольцо, 1,2,3-оксадиазоловое кольцо, 1,2,4-оксадиазоловое кольцо, 1,2,5-оксадиазоловое кольцо, 1,3,4-оксадиазоловое кольцо, тиадиазоловое кольцо, пиридиновое кольцо, пиридазиновое кольцо, пиримидиновое кольцо, пиразиновое кольцо и т.д.

[0169] Используемые в данном документе термины «восьми-десятичленное бициклическое гетероарильное кольцо» и «восьми-десятичленный бициклический гетероарил» могут использоваться взаимозаменяемо, и оба они относятся к бициклическому гетероарильному кольцу, содержащему от 8 до 10 атомов в кольце, включая, но без ограничения, бензофуран, бензотиофен, индол, изоиндол, хинолин, изохинолин, индазол, бензотиазол, бензимидазол, хиназолин, хиноксалин, циннолин, фталазин, пиридо[3,2-d]пиримидин, пиридо[2,3-d]пиримидин, пиридо[3,4-d]пиримидин, пиридо[4,3-d]пиримидин, 1,8-нафтиридин, 1,7-нафтиридин, 1,6-нафтиридин, 1,5-нафтиридин.

[0170] Используемый в данном документе термин «замещенный» относится к одному или более атомам водорода, предпочтительно от одного до пяти атомов водорода, а более предпочтительно от оного до трех атомов водорода в группе, при этом каждый из них независимо замещен соответствующим количеством замещающих групп. То есть замещающие группы находятся только в их возможных химических положениях, и специалисты в данной области могут определить (экспериментально или теоретически) возможные или невозможные замещения без каких-либо усилий. Например, связывание амино- или гидроксильной группы, имеющей свободные атомы водорода, с атомами углерода, имеющими ненасыщенные (например, олефиновые) связи, может быть нестабильным.

[0171] Если не указано иное, используемая в данном документе фраза «каждая замещающая группа независимо выбрана из …» означает, что, когда более одного атома водорода в группе замещены замещающими группами, замещающие группы могут быть одного типа или разных типов, и выбранные замещающие группы заместителей являются независимыми с точки зрения их типов.

[0172] Если не указано иное, используемая в данном документе фраза «… являются одинаковыми или разными, и каждая из них независимо…» означает, что, когда в общей формуле существует более одной одинаковой замещающей группы, группы могут быть одинаковыми или разными и независимыми по своим типам. Например, при условии, что L представляет собой (CR₀₁R₀₂)_s, когда s равно 2, то есть L представляет собой (CR₀₁R₀₂)-(CR₀₁R₀₂), где две группы R₀₁ или R₀₂ могут быть одинаковыми или разными и независимыми по своим типам. Например, L может представлять собой C(CH₃)(CN)-C(CH₂CH₃)(OH), C(CH₃)(CN)-C(CH₃)(OH) или C(CN)(CH₂CH₃)-C(OH)(CH₂CH₃).

[0173] Если не указано иное, любая из описанных в данном документе групп может быть замещенной или незамещенной. Если указанная выше группа является замещенной, при этом замещающие группы предпочтительно представляют собой от одной до пяти групп, каждая из которых независимо выбрана из CN, галогена, C_1-10 алкила (предпочтительно C_1-6 алкила и более предпочтительно C_1-3 алкила), C_1-10 алкоксила (предпочтительно C_1-6 алкоксила и более предпочтительно C_1-3 алкоксила), галогенированного C_1-8 алкила (предпочтительно галогенированного C_1-6 алкила и более предпочтительно галогенированного C_1-3 алкила), C_3-8 циклоалкила (предпочтительно C_3-6 циклоалкила), галогенированного C_1-8 алкоксила (предпочтительно галогенированного C_1-6 алкоксила и более предпочтительно галогенированного C_1-3 алкоксила), C_1-8 алкилзамещенного амидо, амидо, галогенированного C_1-8 C_1-8 алкилзамещенного амидо, ацетила, гидроксила, гидроксиметила, гидроксиэтила, карбоксила, нитро, C_6-10 арила (предпочтительно фенила), C_3-8 циклоалкоксила (предпочтительно C_3-6 циклоалкоксила), C_2-10 алкенила (предпочтительно C_2-6 алкенила и более предпочтительно C_2-4 алкенила), C_2-10 алкинила (предпочтительно C_2-6 алкинила и более предпочтительно C_2-4 алкинила), -CONR_a0R_b0, -C(O)O(C_1-10 алкила) (предпочтительно -C(O)O(C_1-6 алкила) и более предпочтительно -C(O)O(C_1-3 алкила)), -CHO, -OC(O)(C_1-10 алкила) (предпочтительно -OC(O)(C_1-6 алкила) и более предпочтительно -OC(O)(C_1-3 алкила)), -SO2(C_1-10 алкила) (предпочтительно -SO₂(C1-6 алкила) и более предпочтительно -SO2(C_1-3 алкила)), -SO2(C_6-10 арила) (предпочтительно -SO₂(C₆ арила), а именно -SO₂-фенила), -CO(C_6-10 арила) (предпочтительно -CO(C₆ арила), а именно -CO-фенила), четырех-шестичленного насыщенного или ненасыщенного моногетероциклического кольца, четырех-шестичленного насыщенного или ненасыщенного моноциклического кольца, пяти- или шестичленного моноциклического гетероарильного кольца, восьми-десятичленного бициклического гетероарильного кольца, спирокольца, спирогетероциклического кольца, мостикового кольца и мостикового гетероциклического кольца, в которой каждый из R_a0 и R_b0 независимо представляет собой водород или C_1-3 алкил.

[0174] Каждая описанная выше замещающая группа сама по себе может быть также замещена описанными в данном документе группами.

[0175] Когда описанное в данном документе четырех-шестичленное (пяти- или шестичленное) насыщенное моногетероциклическое кольцо является замещенным, замещающие группы могут находиться в их возможных химических положениях. Репрезентативные замены типичных моногетероциклических колец показаны ниже:

где «заместитель» относится к различным замещающим группам, описанным в данном документе, а «» относится к связи с другими атомами.

[0176] Если не указано иное, когда описанное в данном документе четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо представляет собой замещающую группу, она также может быть замещена или замещена одной, двумя или тремя замещающими группами, выбранными из группы, состоящей из галогена, гидроксила, C_1-3 алкила, O=, NR_a0R_b0, гидроксиметила, гидроксиэтила, карбоксила, -C(O)O(C_1-3 алкила), ацетила, галогенированного C_1-3 алкила, C_1-3 алкоксила, C_3-6 циклоалкила, азетидина, оксетана, тетрагидрофурана, тетрагидротиофена, тетрагидропиррола, пиперидина, оксазолидина, пиперазина, диоксолана, диоксана, морфолина, тиоморфолина, тиоморфолин-1,1-диоксида, тетрагидропирана, тиофенового кольца, N-алкилпирролового кольца, фуранового кольца, тиазолового кольца, имидазолового кольца, оксазолового кольца, пирролового кольца, пиразолового кольца, триазолового кольца, тетразолового кольца, изоксазолового кольца, оксадиазолового кольца, тиадиазолового кольца, пиридинового кольца, пиридазинового кольца, пиримидинового кольца и пиразинового кольца, в котором каждый из R_a0 и R_b0 независимо представляет собой водород или C_1-3 алкил.

[0177] «Фармацевтически приемлемая соль» включает фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты и фармацевтически приемлемые соли присоединения основания.

[0178] «Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты» относятся к солям, образованным с неорганическими или органическими кислотами, которые могут сохранять биологическую эффективность свободной щелочи, не вызывая других побочных эффектов.

[0179] «Фармацевтически приемлемые соли присоединения основания» включают, но без ограничения, соли, такие как соли натрия, соли калия, соли кальция и соли магния, неорганические щелочи и соли, такие как соли аммония, соли триэтиламина, соли лизина и соли аргинина органических щелочей.

[0180] «Сольват», описанный в данном документе, относится к комплексу, образованному соединением по настоящему раскрытию и растворителем. Соединения либо реагируют в растворителях, либо осаждаются или кристаллизуются из растворителей. Например, комплекс, образованный соединением и водой, называется «гидрат». Сольваты соединения, представленного в формуле (I), входят в объем настоящего раскрытия.

[0181] Соединение, представленное в формуле (I) или в формуле (II) настоящего раскрытия, может содержать два или более хиральных центров, которые присутствуют в различных оптически активных формах. Стереоизомер соединения, представленного в формуле (I) или в формуле (II) настоящего раскрытия, может представлять собой энантиомер или диастереомер. Соединение, представленное в формуле (I) или в формуле (II), может присутствовать в форме отдельного оптически чистого специфического стереоизомера. Например, соединение может присутствовать в форме энантиомера или диастереомера или в форме смеси двух стереоизомеров. Например, соединение может присутствовать в форме смеси энантиомеров, такой как рацемическая смесь, или в форме смеси диастереомеров, или в форме смеси энантиомера и диастереомера. Энантиомер можно получить с помощью существующих в данной области техники способов разделения, таких как кристаллизация и хиральная хроматография. Диастереомер можно получить с помощью существующих способов разделения, таких как кристаллизация и препаративная хроматография. Энантиомеры или диастереомеры соединения, представленного в формуле (I) или в формуле (II) настоящего раскрытия, и смеси этих стереоизомеров находятся в пределах объема охраны настоящего раскрытия.

[0182] Настоящее раскрытие дополнительно относится к пролекарствам на основе вышеуказанных соединений. Пролекарства включают известные аминозащитные группы и карбоксизащитные группы, которые гидролизуются в физиологических условиях или высвобождаются посредством ферментативных реакций с получением исходных соединений. Конкретные способы получения пролекарств смотрите в Saulnier, M.G.; Frennesson, D.B.; Deshpande, M.S.; Hansel, S.B and Vysa, D.M. Bioorg. Med. Chem Lett. 1994, 4, 1985-1990; и Greenwald. R.B.; Choe, Y.H.; Conover, C.D.; Shum, K.; Wu, D.; Royzen, M.J. Med. Chem. 2000, 43, 475.

[0183] Обычно соединение или его фармацевтически приемлемая соль, энантиомер, диастереомер, рацемат, смесь диастереомеров, сольват или пролекарство по настоящему раскрытию и один или более фармацевтических носителей могут быть получены в виде подходящих составов для введения. Эти составы подходят для перорального введения, ректального введения, местного введения, внутриротового введения и другого парентерального (например, подкожного, внутримышечного, внутривенного и т. д.) введения. Например, составы, подходящие для перорального введения, включают капсулы, таблетки, гранулы, сиропы и т. д. Соединение по настоящему раскрытию, содержащееся в этих составах, может представлять собой твердый порошок или частицы, раствор или суспензию в водной или неводной жидкости, или эмульсию вода-в-масле или масло-в-воде и т. д. Вышеуказанные составы могут быть получены из активного соединения и одного или более носителей или наполнителей универсальными фармацевтическими способами. Вышеупомянутые носители должны быть совместимы с активным соединением или другими вспомогательными веществами. Для твердых составов обычно используемые нетоксичные носители включают, но без ограничения, маннит, лактозу, крахмал, стеарат магния, целлюлозу, глюкозу, сахарозу и т.д. Для жидких составов обычно используемые носители включают воду, физиологический раствор, водный раствор глюкозы, этиленгликоль, полиэтиленгликоль и т. д. Активное соединение может образовывать раствор или суспензию с указанным выше носителем.

[0184] Композиции по настоящему раскрытию получают, дозируют и вводят в соответствии с рекомендациями по медицинской практике. «Терапевтически эффективное количество» вводимого соединения определяется такими факторами, как конкретное заболевание, подлежащее лечению, индивидуум, подлежащий лечению, причины нарушения, цель лекарственного средства, способ введения и т. д.

[0185] Используемый в данном документе термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству соединения по настоящему раскрытию, которое вызовет биологический или медицинский ответ у индивидуума, например, снижение или ингибирование ферментативной или белковой активности или облегчение симптомов, облегчение нарушения, замедление или задержку прогрессирования заболевания и предупреждение заболевания.

[0186] Терапевтически эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или стереоизомера по настоящему раскрытию, которое содержится в фармацевтической композиции по настоящему раскрытию, предпочтительно составляет от 0,1 мг до 5 г/кг (масса тела).

[0187] Используемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемый носитель» относится к нетоксичным, инертным и твердым или полутвердым веществам или жидким наполнителям, разбавителям, инкапсулирующим материалам, или адъювантам, или вспомогательным веществам любого типа, которые совместимы с пациентами, предпочтительно млекопитающими, а более предпочтительно с людьми, и подходит для доставки активного реагента к мишени без прекращения действия реагента.

[0188] Используемый в данном документе термин «пациент» относится к животному, предпочтительно млекопитающему, а более предпочтительно к человеку. Термин «млекопитающее» относится к теплокровным позвоночным млекопитающим, к которым относятся кошки, собаки, кролики, медведи, лисы, волки, обезьяны, олени, мыши или крысы, свиньи и люди.

[0189] Используемый в данном документе термин «лечение» относится к облегчению, замедлению прогрессирования, ослаблению, предупрежению или поддержанию существующего заболевания или нарушения (например, рака). Лечение также включает выздоровление от одного или более симптомов заболевания или нарушения, предупреждение развития или облегчение до определенной степени.

[0190] Способы получения

[0191] Экспериментальный способ, описанный в следующих примерах без введения конкретных условий, обычно соответствует обычным условиям, например тем, которые описаны в Sambrook, et al., Molecular Cloning: Laboratory Manual (New York: Cold Spring Harbour Laboratory Press, 1989), или условиям, рекомендованным производителями.

[0192] Если не указано иное, используемые в данном документе термины имеют те же значения, что и термины, известные специалистам в данной области техники. Кроме того, любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные описанным в данном документе, могут быть применимы к настоящему раскрытию.

[0193] Способы получения соединений по настоящему раскрытию:

[0194] Соединения, представленные в формуле (I) и в формуле (II), можно получать с помощью существующих способов, таких как следующие способы, способов, эквивалентных следующим способам, и способов, описанных в примерах. В следующих способах получения необработанное исходное соединение может быть в форме соли, а соль может быть любой фармацевтически приемлемой солью, как показано для соединений, представленных в формуле (I) и в формуле (II) настоящего раскрытия.

[0195] Реакционная схема (а1)

[0196] В каждой формуле, приведенной выше схемы, все группы являются такими, как определено выше.

[0197] В частности, соединение, представленное в формуле (I), можно получать с помощью следующего способа: восстановительное аминирование проводят на соединении, представленном в формуле (I-1), и соединении, представленном в формуле (I-2), с получением соединения, представленного в формуле (I). Восстановительное аминирование проводят в инертном растворителе, при этом соединение, представленное в формуле (I-1), соединение, представленное в формуле (I-2), и кислота Льюиса вступают в реакцию при определенной температуре (например, от -20°С до 80°С, предпочтительно от 0°С до 60°С, а более предпочтительно от 20°С до 60°С) в течение периода времени (например, от 0,5 ч. до 48 ч., предпочтительно от 5 ч. до 24 ч.), затем к реакционному раствору добавляют восстановитель и реакционный раствор вступает в реакцию при определенной температуре (например, от -20°С до 80°С, предпочтительно от 0°С до 60°С, а более предпочтительно от 20°С до 60°С) в течение периода времени (например, от 0,5 ч. до 48 ч., предпочтительно от 0,5 ч. до 5 ч.), с получением соединения, представленного в формуле (I). Инертный растворитель и восстановитель могут быть известны в данной области техники, и восстановитель может быть выбран из боргидрида тетрабутиламмония, малонилоксиборгидрида натрия, триацетоксиборгидрида натрия, цианоборгидрида натрия, боргидрида натрия, боргидрида лития, боргидрида калия, борана и т. д. Кислота Льюиса может представлять собой изопропоксид титана и т. д. Инертный растворитель может быть выбран из C_1-4 алкилового спирта, толуола, ксилола, метил-трет-бутилового эфира, тетрагидрофурана, 1,4-диоксана, диэтилового эфира, дихлорметана, хлороформа, 1,2-дихлорэтана, этилацетата, ацетонитрила, диметилсульфоксида, N,N-диметилформамида или их комбинации.

[0198] Реакционная схема (б1)

[0199] В каждой формуле, приведенной выше схемы, все группы являются такими, как определено выше.

[0200] В частности, соединение, представленное в формуле (I), можно также получать с помощью следующего способа: восстановительное аминирование проводят на соединении, представленном в формуле (I-3), и соединении, представленном в формуле (I-4), с получением соединения, представленного в формуле (I). Восстановительное аминирование проводят в инертном растворителе, а соединение, представленное в формуле (I-3), соединение, представленное в формуле (I-4), и восстановитель вступают в реакцию при определенной температуре (например, от -20°С до 80°С, предпочтительно от 0°С до 60°С и более предпочтительно от 20°С до 60°С) в течение периода времени (например, от 0,5 ч. до 48 ч., предпочтительно от 0,5 ч. до 5 ч.) с получением соединения, представленного в формуле (I). Инертный растворитель и восстановитель могут быть известны в данной области техники, и восстановитель может быть выбран из боргидрида тетрабутиламмония, малонилоксиборгидрида натрия, триацетоксиборгидрида натрия, цианоборгидрида натрия, боргидрида натрия, боргидрида лития, боргидрида калия, борана и т.д. Инертный растворитель может быть выбран из C_1-4 алкилового спирта, толуола, ксилола, метил-трет-бутилового эфира, тетрагидрофурана, 1,4-диоксана, диэтилового эфира, дихлорметана, хлороформа, 1,2-дихлорэтана, этилацетата, ацетонитрила, диметилсульфоксида, N,N-диметилформамида или их комбинации.

[0201] Реакционная схема (а2)

[0202] В каждой формуле, приведенного выше раствора, все группы являются такими, как определено выше.

[0203] В частности, соединение, представленное в формуле (II), можно получать с помощью следующего способа: восстановительное аминирование проводят на соединении, представленном в формуле II-1, и соединении, представленном в формуле II-2, с получением соединения, представленного в формуле (II). Восстановительное аминирование проводят в инертном растворителе, а соединение, представленное в формуле (II-1), соединение, представленное в формуле (II-2), и кислота Льюиса вступают в реакцию при определенной температуре (например, от -20°С до 80°С, предпочтительно от 0°С до 60°С, а более предпочтительно от 20°С до 60°С) в течение периода времени (например, от 0,5 ч. до 48 ч., предпочтительно от 5 ч. до 24 ч.), затем к реакционному раствору добавляют восстановитель и реакционный раствор вступает в реакцию при определенной температуре (например, от -20°С до 80°С, предпочтительно от 0°С до 60°С, а более предпочтительно от 20°С до 60°С) в течение периода времени (например, от 0,5 ч. до 48 ч., предпочтительно от 0,5 ч. до 5 ч.), с получением соединения, представленного в формуле (II). Инертный растворитель и восстановитель могут быть известны в данной области техники, и восстановитель может быть выбран из боргидрида тетрабутиламмония, малонилоксиборгидрида натрия, триацетоксиборгидрида натрия, цианоборгидрида натрия, боргидрида натрия, боргидрида лития, боргидрида калия, борана и т. д. Кислота Льюиса может представлять собой изопропоксид титана и т. д. Инертный растворитель может быть выбран из C_1-4 алкилового спирта, толуола, ксилола, метил-трет-бутилового эфира, тетрагидрофурана, 1,4-диоксана, диэтилового эфира, дихлорметана, хлороформа, 1,2-дихлорэтана, этилацетата, ацетонитрила, диметилсульфоксида, N,N-диметилформамида или их комбинации.

[0204] Реакционная схема (б2)

[0205] В каждой формуле, приведенной выше схемы, все группы имеют являются такими, как определено выше.

[0206] В частности, соединение, представленное в формуле (II), можно также получать с помощью следующего способа: восстановительное аминирование проводят на соединении, представленном в формуле II-3, и соединении, представленном в формуле II-4, с получением соединения, представленного в формуле (II). Восстановительное аминирование проводят в инертном растворителе, а соединение, представленное в формуле (II-3), соединение, представленное в формуле (II-4), и восстановитель вступают в реакцию при определенной температуре (например, от -20°С до 80°С, предпочтительно от 0°С до 60°С и более предпочтительно от 20°С до 60°С) в течение периода времени (например, от 0,5 ч. до 48 ч., предпочтительно от 0,5 ч. до 5 ч.) с получением соединения, представленного в формуле (II). Инертный растворитель и восстановитель могут быть известны в данной области техники, и восстановитель может быть выбран из боргидрида тетрабутиламмония, малонилоксиборгидрида натрия, триацетоксиборгидрида натрия, цианоборгидрида натрия, боргидрида натрия, боргидрида лития, боргидрида калия, борана и т.д. Инертный растворитель может быть выбран из C_1-4 алкилового спирта, толуола, ксилола, метил-трет-бутилового эфира, тетрагидрофурана, 1,4-диоксана, диэтилового эфира, дихлорметана, хлороформа, 1,2-дихлорэтана, этилацетата, ацетонитрила, диметилсульфоксида, N,N-диметилформамида или их комбинации.

[0207] Соединения, содержащие аминогруппу, карбоксильную группу или гидроксильную группу, которые используются в настоящем раскрытии, можно получать из соединений, защищенных защитными группами, обычно используемыми для групп при необходимости, и после процесса реакции, описанной выше реакционной схемы, может быть выполнено известное снятие защиты.

[0208] По сравнению с предшествующим уровнем техники настоящее раскрытие в основном имеет следующие преимущества.

[0209] Настоящее раскрытие обеспечивает ряд оксаспироциклических производных, замещенных по азабициклическому кольцу, с новыми структурами, которые обладают высокой ингибирующей активностью по отношению к цAMФ (EC₅₀ составляет от 1 нM до 100 нМ, более предпочтительно от 1 нМ до 50 нМ, а наиболее предпочтительно от 1 нМ до 10 нМ), при этом имеют высокие значения Emax (выше 50%, предпочтительно выше 80%) и обладают прекрасными обезболивающими эффектами. Кроме того, соединения по настоящему раскрытию имеют небольшие значения Emax по отношению к β-аррестину (менее 50%, более предпочтительно менее 30%, а наиболее предпочтительно менее 10%) и имеют хорошую погрешность измерения. Таким образом, соединения по настоящему раскрытию могут быть превращены в лекарственные средства для лечения и предупреждения боли и заболеваний, связанных с болью.

[0210] Настоящее раскрытие будет дополнительно описано ниже со ссылкой на конкретные примеры. Следует понимать, что эти примеры предназначены только с целью описания настоящего раскрытия, а не ограничения объема настоящего раскрытия. Экспериментальный способ, описанный в следующих примерах без введения конкретных условий, обычно соответствует обычным условиям или условиям, рекомендованным производителями. Если не указано иное, процентное содержание и части рассчитывают на основе веса. Если не указано иное, используемые в данном документе термины имеют те же значения, что и термины, известные специалистам в данной области техники. Кроме того, любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные описанным в данном документе, могут быть применимы к настоящему раскрытию.

[0211] Реактивы и инструменты

[0212] ¹HЯМР: ЯМР-спектрометр Bruker AVANCE-400, внутренний стандарт: тетраметилсилан (ТМС);

[0213] ЖХ-МС: спектрометр Agilent 1290 HPLC System/6130/6150 MS LC/MS (производитель: Agilent), колонка: Waters BEH/CHS, 50 × 2,1 мм, 1,7 мкм.

[0214] Препаративная высокоэффективная жидкостная хроматография (пре-ВЭЖХ): GX-281 (производитель: Gilson).

[0215] Сверхкритическая жидкостная хроматография (СФХ): 1260 Infinity (производитель: Agilent).

[0216] Используемый в данном документе ДХЭ относится к 1,2-дихлорэтану, ТГФ относится к тетрагидрофурану, ЭА относится к этилацетату, ПЭ относится к петролейному эфиру, ДХМ относится к дихлорметану, n-BuLi относится к n-бутиллию, HATU относится к 2-(7-азабензотриазол)-N,N,N’,N’-тетраметилурония гексафторфосфату, ДМФ относится к диметилформамиду, ДМСО относится к диметилсульфоксиду, ДИЭА или ДИПЭА относится к N,N-диизoпропилэтиламину, ДБУ относится к 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ену и DIBAL-H относится к гидриду диизобутилалюминия и LiHMD относится к бис(триметилсилил)амиду лития.

[0217] Используемая в данном документе комнатная температура относится к приблизительно от 20°C до 25°C.

[0218] Промежуточное соединение 1a

[0219] (R)-2-(9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)ацетонитрил (10 г, 39 ммоль, приобретен у Shanghai Yucheng Pharmaceutical Technology Co., Ltd., CAS № 1401031-38-6) и никель Ренея (1 г) добавляли к этанолу (200 мл) и аммиачной воде (30 мл) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. под защитой газообразного водорода, с последующей фильтрацией и концентрацией при пониженном давлении с получением (R)-2-(9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)атамина (промежуточное соединение 1a, 10 г, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 99%. МС м/з (ИЭР): 261,2 [M+1].

[0220] Пример 1.

N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-1)

[0221] На шаге 1: этил 1H-пиразол-5-карбоксилат (10 г, 7,14 ммоль) растворяли в ДМФ (100 мл), добавляли этилакрилат (10,7 г, 10,7 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 100°С в течение ночи. Добавляли ЭА (400 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, и концентрировали при пониженном давлении, и очищали полученный остаток с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 1-1 (1,2 г) с выходом 7%. МС м/з (ИЭР): 241,1 [M+1].

[0222] На шаге 2: соединение 1-1 (300 мг, 1,25 ммоль) растворяли в растворе толуола (8 мл), добавляли трет-бутоксид калия (280 мг, 2,5 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 110°С в течение 1 ч. Реакционный раствор фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении, добавляли ЭА (30 мл) и добавляли 2 н раствор хлористоводородной кислоты, затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и сушили над безводным сульфатом натрия. Полученную органическую фазу концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 1-2 (130 мг). МС м/з (ИЭР): 195,1 [M+1].

[0223] На шаге 3: соединение 1-2 (130 мг) растворяли в растворе метанола (8 мл), добавляли 4 М раствор хлороводорода в метаноле (1 мл) и реакционный раствор перемешивали при 50°C в течение ночи. Полученную органическую фазу концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 1-3 (100 мг, неочищенный продукт). МС м/з (ИЭР): 123,1 [M+1].

[0224] На шаге 4: соединение 1-3 (100 мг, 0,82 ммоль) растворяли в растворе ДХЭ (8 мл), добавляли соединение 1а (210 мг, 0,82 ммоль) и изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор нагревали до 60°C с проведением реакции в течение ночи. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (94 мг, 2,46 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли воду, смесь фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-1 (2,15 мг) с выходом 0,7%. МС м/з (ИЭР): 367,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,56 (м, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,68-7,64 (м, 1H), 7,46-7,45 (м, 1H), 7,32-7,29 (м, 1H), 7,17-7,13 (м, 1H), 5,92-5,89 (д, J=12 Гц, 1H), 4,26-4,20 (м, 2H), 4,06-4,01 (м, 1H), 3,72-3,69 (м, 2H), 2,87-2,74 (м, 2H), 2,64-2,43 (м, 6H), 2,35-2,29 (м, 3H), 2,10-2,03 (м, 1H), 1,91-1,84(м, 2H), 1,78-1,63(м, 3H), 1,24-1,21(м, 1H).

[0225] Пример 2.

6-(2-метоксипропан-2-ил)-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-2)

[0226] На шаге 1: 4-хлортиофенол (4,32 г, 30 ммоль) растворяли в метаноле (100 мл), добавляли метилхлорацетат (3,84 г, 31,5 ммоль) и 5,4 М метоксид натрия в растворе метанола (5,4 мл, 31,5 ммоль) и реакционный раствор нагревали до 80°С и перемешивали в течение 1 ч. Реакционный раствор концентрировали, а полученный остаток разбавляли ЭА (150 мл), затем промывали водой (80 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=5/1) с получением соединения 2-1 (5,0 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 77%. МС м/з (ИЭР): 217,3 [M+1].

[0227] На шаге 2: соединение 2-1 (5 г, 23 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (60 мл), при перемешивании медленно добавляли 30% перекись водорода (2,45 г, 23 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток разбавляли ЭА (150 мл), затем промывали водой (70 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=3/1) с получением соединения 2-2 (4,2 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 79%. МС м/з (ИЭР): 233,3 [M+1].

[0228] На шаге 3: соединение 2-2 (4,2 г, 18 ммоль) и пиперидин (1,85 г, 21,8 ммоль) растворяли в ацетонитриле (60 мл) и медленно по каплям добавляли изобутиральдегид в растворе ацетонитрила (1,57 г, 21,8 ммоль) при перемешивании. Реакционный раствор нагревали при 60°C и перемешивали в течение 5 ч. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток разбавляли ЭА (150 мл), затем промывали водой (70 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=3/1) с получением соединения 2-3 (1,68 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 65%. МС м/з (ИЭР): 145,2 [M+1].

[0229] На шаге 4: соединение 2-3 (1,68 г, 11,7 ммоль) и йодметан (2,49 г, 17,5 ммоль) растворяли в ДМФ (50 мл) и медленно по каплям добавляли гидрид натрия (0,7 г, 17,5 ммоль) при перемешивании. Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционный раствор разбавляли ЭА (150 мл), затем промывали водой (70 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=4/1) с получением соединения 2-4 (1,5 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 81%. МС м/з (ИЭР): 159,2 [M+1].

[230] На шаге 5: раствор ацетонитрила (40 мл) и ДБУ (2,89 г, 19 ммоль) добавляли в запаянную пробирку, в которой находились соединение 2-4 (1,5 г, 9,5 моль) и пиразол (1,29 г, 19 ммоль), реакционный раствор перемешивали при 100°С в течение 18 ч., охлаждали до комнатной температуры, концентрировали, полученный остаток разбавляли ЭА (100 мл), затем промывали водой (50 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 2-5 (1,29 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 60%. МС м/з (ИЭР): 227,3 [M+1].

[0231] На шаге 6: соединение 2-5 (1,29 г, 5,7 ммоль) растворяли в смеси метанола (40 мл) и воды (10 мл), добавляли гидроксид натрия (0,456 г, 11,4 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. до завершения реакции. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток растворяли в воде (30 мл), добавляли 2 М хлористоводородную кислоту для доведения рН смеси до 3-4, смесь экстрагировали с помощью ДХМ (40 мл × 3), объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 2-6 (0,97 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 80%. МС м/з (ИЭР): 213,2 [M+1].

[0232] На шаге 7: соединение 2-6 (0,97 г, 4,56 ммоль) растворяли в сухом ТГФ (60 мл), раствор охлаждали до -70°C под защитой газообразного азота и медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор бутиллития в ТГФ (4,5 мл, 11,4 ммоль). После завершения добавления по каплям реакционный раствор медленно нагревали до -40°С и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли воду (5 мл) для гашения реакции с последующей фильтрацией, концентрацией и очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 2-7 (177 мг, желтая маслянистая жидкость) с выходом 20%. МС м/з (ИЭР): 195,3 [M+1].

[0233] На шаге 8: соединение 2-7 (60 мг, 0,31 ммоль) и соединение 1а (80 мг, 0,31 ммоль) растворяли в ДХЭ (10 мл), добавляли изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 18 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (34 мг, 0,9 ммоль), реакционный раствор перемешивали в течение 3 ч., добавляли воду (5 мл), смесь перемешивали в течение 0,5 мин., фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением продукта H-2 (35 мг, бесцветное маслянистое вещество) с выходом 25,7%. МС м/з (ИЭР): 439,3 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,51-8,49 (м, 1H), 7,71-7,69 (м, 1H), 7,45-7,42 (м, 1H), 7,31-7,28 (м, 1H), 7,18-7,16 (м, 1H), 5,68 (дд, J=12,3, 1,8 Гц, 1H), 4,10-4,07 (м, 1H), 3,78 (тд, J=7,9, 4,8 Гц, 1H), 3,57 (дд, J=9,1, 2,8 Гц, 2H), 3,00 (с, 3H), 2,64 (м, 1H), 2,45-2,27 (м, 3H), 2,06-1,70 (м, 5H), 1,66-1,28 (м, 8H), 1,25 (д, J=7,6 Гц, 3H), 1,07 (д, J=7,1 Гц, 3H), 0,97-0,93 (м, 1H), 0,61-0,57 (м, 1H).

[0234] Пример 3.

6-циклопропил-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-3)

[0235] На шаге 1: циклопропанкарбоксальдегид (3,5 г, 50 ммоль) растворяли в ацетонитриле (100 мл), добавляли триэтилфосфоноацетат (11,8 г, 52,5 ммоль) и хлорид лития (2,2 г, 52,5 ммоль), реакционный раствор охлаждали от 2 до 5°C, медленно добавляли ДБУ (7,5 г, 52,5 ммоль) и реакционный раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционный раствор концентрировали, а полученный остаток разбавляли ЭА (120 мл), затем промывали водой (80 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=10/1) с получением соединения 3-1 (4,9 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 70%. МС м/з (ИЭР): 141,2 [M+1].

[0236] На шаге 2: раствор ацетонитрила (90 мл) и ДБУ (7,46 г, 52,5 ммоль) добавляли в запаянную пробирку, в которой находились соединение 3-1 (4,9 г, 35 ммоль) и пиразол (3,57 г, 52,5 ммоль). Смесь перемешивали при 120°C в течение 18 ч., охлаждали до комнатной температуры и концентрировали, полученный остаток разбавляли ЭА (100 мл), затем промывали водой (60 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 3-2 (3,78 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 52%. МС м/з (ИЭР): 209,3 [M+1].

[0237] На шаге 3: соединение 3-2 (3,78 г, 18,2 ммоль) растворяли в смеси метанола (50 мл) и воды (10 мл), добавляли гидроксид натрия (1,46 г, 36,4 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. до завершения реакции. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток растворяли в воде (60 мл), добавляли 2 М хлористоводородную кислоту для доведения значения рН смеси до 3-4, смесь экстрагировали с помощью ДХМ (50 мл × 3), объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 3-3 (2,29 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 70%. МС м/з (ИЭР): 181,2 [M+1].

[0238] На шаге 4: соединение 3-3 (2,29 г, 12,7 ммоль) растворяли в сухом ТГФ (80 мл), реакционный раствор охлаждали до -70°C под защитой газообразного азота и медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор бутиллития в ТГФ (12,7 мл, 31,8 ммоль). После завершения добавления по каплям реакционный раствор медленно нагревали до -40°С и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли воду (10 мл) для гашения реакции с последующей фильтрацией, концентрацией и очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 3-4 (220 мг, желтая маслянистая жидкость) с выходом 10,7%. МС м/з (ИЭР): 163,2 [M+1].

[0239] На шаге 5: соединение 3-4 (50 мг, 0,31 ммоль) и соединение 1а (80 мг, 0,31 ммоль) растворяли в ДХЭ (10 мл), добавляли изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор перемешивают при 45°С в течение 18 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (34 мг, 0,9 ммоль), реакционный раствор перемешивали в течение 3 ч, добавляли воду (5 мл), смесь перемешивали в течение 0,5 мин., фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением продукта H-3 (41,3 мг, белое твердое вещество) с выходом 32,6%. МС м/з (ИЭР): 407,3 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,51 (м, 1H), 7,70 (м, 1H), 7,44 (дд, J=8,1, 1,6 Гц, 1H), 7,28 (дд, J=5,5, 1,9 Гц, 1H), 7,17 (дд, J=7,4, 4,8 Гц, 1H), 5,75-5,59 (м, 1H), 3,95-3,67 (м, 2H), 3,66-3,41 (м, 3H), 2,77 (м, 1H), 2,44-2,37 (м, 1H), 2,35-2,27 (м, 1H), 2,02-1,70 (м, 5H), 1,66-1,25 (м, 8H), 0,97 (м, 2H), 0,65-0,34 (м, 4H), 0,27 (м, 1H).

[0240] Пример 4.

6-этил-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (смесь диастереомеров H-4-1 и смесь диастереомеров H-4-2)

[0241] На шаге 1: пропиональдегид (2,9 г, 0,05 моль) растворяли в ацетонитриле (100 мл), добавляли триэтилфосфоноацетат (11,8 г, 0,0525 моль) и хлорид лития (2,2 г, 0,0525 моль), реакционный раствор охлаждали от 2 до 5°C, медленно добавляли ДБУ (7,5 г, 0,0525 моль) и реакционный раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционный раствор концентрировали, а полученный остаток разбавляли ЭА (120 мл), затем промывали водой (80 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=10/1) с получением соединения 4-1 (5,12 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 80%. МС м/з (ИЭР): 129,2 [M+1].

[0242] На шаге 2: раствор ацетонитрила (90 мл) и ДБУ (8,52 г, 60 ммоль) добавляли в запаянную пробирку, в которой находились соединение 4-1 (5,12 г, 40 ммоль) и пиразол (4 г, 60 ммоль), реакционный раствор перемешивали при 120°С в течение 18 ч., охлаждали до комнатной температуры, концентрировали и полученный остаток разбавляли ЭА (100 мл), затем промывали водой (60 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 4-2 (4,7 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 60%. МС м/з (ИЭР): 197,3 [M+1].

[0243] На шаге 3: соединение 4-2 (4,7 г, 24 ммоль) растворяли в смеси метанола (50 мл) и воды (10 мл), добавляли гидроксид натрия (1,92 г, 48 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. до завершения реакции. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток растворяли в воде (60 мл), добавляли 2 М хлористоводородную кислоту для доведения значения рН смеси до 3-4, смесь экстрагировали с помощью ДХМ (50 мл × 3), объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 4-3 (2,62 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 65%. МС м/з (ИЭР): 169,2 [M+1].

[0244] На шаге 4: соединение 4-3 (2,62 г, 15,6 ммоль) растворяли в сухом ТГФ (80 мл), реакционный раствор охлаждали до -70°C под защитой газообразного азота и медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор бутиллития в ТГФ (15,6 мл, 39 ммоль). После завершения добавления по каплям реакционный раствор медленно нагревали до -40°С и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли воду (10 мл) для гашения реакции с последующей фильтрацией, концентрацией и очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 4-4 (350 мг, желтая маслянистая жидкость) с выходом 15%. МС м/з (ИЭР): 151,2 [M+1].

[0245] На шаге 5: соединение 3-4 (50 мг, 0,33 ммоль) и соединение 1а (87 мг, 0,33 ммоль) растворяли в ДХЭ (10 мл), добавляли изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 18 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (34 мг, 0,9 ммоль), реакционный раствор перемешивали в течение 3 ч., добавляли воду (5 мл), смесь перемешивали в течение 0,5 мин., фильтровали и полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения H-4.

[0246] На шаге 6: соединение H-4 очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением смеси диастереомеров H-4-1 (15,12 мг, белое твердое вещество) с выходом 11,6%: МС м/з (ИЭР): 395,2 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,54-8,47 (м, 1H), 7,71-7,68 (м, 1H), 7,44 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,29-7,27 (м, 1H), 7,21-7,13 (м, 1H), 6,03 (с, 1H), 5,71-5,63(м, 1H), 3,96-3,93 (м, 1H), 3,87-3,84 (м, 1H), 3,63-3,50 (м, 2H), 2,75-2,72 (м, 1H), 2,43-2,27 (м, 3H), 2,00-1,71 (м, 4H), 1,70-1,21 (м, 10H), 0,99-0,82 (м, 4H), 0,60-0,58 (м, 1H) и смесь диастереомеров H-4-2 (1,0 мг, белое твердое вещество) с выходом 0,8%: МС м/з (ИЭР): 395,2 [M+1].

[0247] Пример 5.

6-циклопентил-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-5)

[0248] На шаге 1: циклопентанкарбоксальдегид (4,9 г, 50 ммоль) растворяли в ацетонитриле (100 мл), добавляли триэтилфосфоноацетат (11,8 г, 52,5 ммоль) и хлорид лития (2,2 г, 52,5 ммоль), реакционный раствор охлаждали от 2 до 5°C, медленно добавляли ДБУ (7,5 г, 52,5 ммоль) и реакционный раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток разбавляли ЭА (120 мл), затем промывали водой (70 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=10/1) с получением соединения 5-1 (6,3 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 75%. МС м/з (ИЭР): 169,2 [M+1].

[0249] На шаге 2: раствор ацетонитрила (90 мл) и ДБУ (8,59 г, 56,5 ммоль) добавляли в запаянную пробирку, в которой находились соединение 5-1 (6,3 г, 37,5 ммоль) и пиразол (3,8 г, 56,2 ммоль), реакционный раствор перемешивали при 100°С в течение 18 ч., охлаждали до комнатной температуры, концентрировали и полученный остаток разбавляли ЭА (100 мл), затем промывали водой (60 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 5-2 (4,86 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 55%. МС м/з (ИЭР): 237,3 [M+1].

[0250] На шаге 3: соединение 5-2 (4,86 г, 20,6 ммоль) растворяли в смеси метанола (60 мл) и воды (15 мл), добавляли гидроксид натрия (1,65 г, 41,25 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. до завершения реакции. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток растворяли в воде (40 мл), добавляли 2 М хлористоводородную кислоту для доведения значения рН смеси от 3 до 4, смесь экстрагировали с помощью ДХМ (60 мл × 3), объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 5-3 (3,2 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 75%. МС м/з (ИЭР): 209,2 [M+1].

[0251] На шаге 4: соединение 5-3 (3,2 г, 15,45 ммоль) растворяли в сухом ТГФ (80 мл), реакционный раствор охлаждали до -70°C под защитой газообразного азота и медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор бутиллития в ТГФ (15,45 мл, 38,62 ммоль). После завершения добавления по каплям реакционный раствор медленно нагревали до -40°С и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли воду (10 мл) для гашения реакции с последующей фильтрацией, концентрацией и очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 5-4 (293 мг, желтая маслянистая жидкость) с выходом 10%. МС м/з (ИЭР): 191,3 [M+1].

[0252] На шаге 5: соединение 5-4 (57 мг, 0,30 ммоль) и соединение 1а (78 мг, 0,30 ммоль) растворяли в ДХЭ (10 мл), добавляли изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 18 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (34 мг, 0,9 ммоль), реакционный раствор перемешивали в течение 3 ч., добавляли воду (5 мл), смесь перемешивали в течение 0,5 мин., фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-5 (33 мг, бесцветное маслянистое вещество) с выходом 25,4%. МС м/з (ИЭР): 435,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,50 (дд, J=4,6, 2,1 Гц, 1H), 7,70-7,67 (м, 1H), 7,43 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,27 (дд, J=4,0, 1,8 Гц, 1H), 7,17 (дд, J=7,4, 4,8 Гц, 1H), 5,67 (дд, J=24,4, 1,8 Гц, 1H), 3,96-3,93 (м, 1H), 3,85-3,81 (м, 1H), 3,58-3,55 (м, 2H), 2,76-2,63 (м, 1H), 2,44-2,26 (м, 3H), 2,13-2,09 (м, 1H), 1,99-1,18 (м, 21H), 0,94 (с, 1H), 0,60-0,56 (м, 1H).

[0253] Пример 6.

6-трет-бутил-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-6)

[0254] На шаге 1: пивалальдегид (17,2 г, 0,2 ммоль) растворяли в ацетонитриле (400 мл), добавляли триэтилфосфоноацетат (48 г, 0,21 ммоль) и хлорид лития (8,8 г, 0,21 ммоль), реакционный раствор охлаждали от 2 до 5°C, медленно добавляли ДБУ (30,4 г, 0,2 моль) и реакционный раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционный раствор концентрировали, а полученный остаток разбавляли ЭА (300 мл), затем промывали водой (100 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (80 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=10/1) с получением соединения 6-1 (25,6 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 82%. МС м/з (ИЭР): 157,2 [M+1].

[0255] На шаге 2: раствор ацетонитрила (80 мл) и ДБУ (11,4 г, 75 ммоль) добавляли в запаянную пробирку, в которой находились соединение 6-1 (7,8 г, 50 ммоль) и пиразол (5,1 г, 75 ммоль), реакционный раствор перемешивали при 150°С в течение 48 ч., охлаждали до комнатной температуры, концентрировали, полученный остаток разбавляли ЭА (100 мл), затем промывали водой (60 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 6-2 (8,96 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 80%. МС м/з (ИЭР): 225,1 [M+1].

[0256] На шаге 3: соединение 6-2 (8,96 г, 40 ммоль) растворяли в смеси метанола (100 мл) и воды (20 мл), добавляли гидроксид натрия (3,2 г, 80 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. до завершения реакции. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток растворяли в воде (70 мл), добавляли 2 М хлористоводородную кислоту для доведения значения рН смеси от 3 до 4, смесь экстрагировали с помощью ДХМ (90 мл × 3), объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 6-3 (7 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 90%. МС м/з (ИЭР): 197,2 [M+1].

[0257] На шаге 4: соединение 6-3 (7 г, 35,7 ммоль) растворяли в сухом ТГФ (120 мл), реакционный раствор охлаждали до -70°C под защитой газообразного азота и медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор бутиллития в ТГФ (35,7 мл, 89,2 ммоль). После завершения добавления по каплям реакционный раствор медленно нагревали до -40°С и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли воду (3 мл) для гашения реакции с последующей фильтрацией, концентрацией и очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ЭA=6/1) с получением соединения 6-4 (4,76 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 15%. МС м/з (ИЭР): 179,2 [M+1].

[0258] На шаге 5: соединение 6-4 (25 мг, 0,14 ммоль) растворяли в ДХЭ (5 мл), добавляли соединение 1а (36 мг, 0,14 ммоль) и изопропоксид титана (0,5 мл) и реакционный раствор перемешивали при 60°С в течение 12 ч. Добавляли боргидрид натрия (26,5 мг, 0,7 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 65°С в течение 3 ч. Добавляли воду (20 мл), смесь фильтровали и полученный фильтрат экстрагировали с помощью ДХМ (40 мл × 2), затем сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный концентрат очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-6 (15,21 мг, белая жидкость) с выходом 25,74%. МС м/з (ИЭР): 423,2 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,55-8,46 (м, 1H), 7,81-7,69 (м, 1H), 7,50 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,37 (дд, J=3,9, 1,9 Гц, 1H), 7,29-7,18 (м, 1H), 5,83 (дд, J=20,9, 1,2 Гц, 1H), 3,94 (ддд, J=16,0, 12,3, 4,8 Гц, 2H), 3,82-3,68 (м, 2H), 2,72-2,58 (м, 2H), 2,52 (д, J=14,5 Гц, 1H), 2,41 (дд, J=13,8, 2,0 Гц, 1H), 2,14-1,99 (м, 2H), 1,95-1,85 (м, 2H), 1,80-1,36 (м, 8H), 1,09 (с, 1H), 1,00 (д, J=1,8 Гц, 9H), 0,77-0,67 (м, 1H).

[0259] Пример 7.

6-(2-фторпропан-2-ил)-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-7)

[0260] На шаге 1: 2-фтор-2-метилпропан-1-ол (1 г, 10,86 ммоль) растворяли в смеси ацетонитрила (15 мл) и ДХМ (3 мл), (диацетоксииод)бензола (3,67 г, 11,39 ммоль) и добавляли 2,2,6,6-тетраметилпиперидиноокси (85 мг, 0,54 ммоль) и смесь реагировала при комнатной температуре в течение ночи с получением соединения 7-1 (978 мг).

[0261] На шаге 2: хлорид лития (690 мг, 16,28 ммоль) добавляли к ацетонитрилу (30 мл), последовательно добавляли триэтилфосфоноацетат (2,92 г, 13,02 ммоль) и ДБУ (5,3 г, 34,81 ммоль) после того, как реакционный раствор охлаждали до 0°C, добавляли по каплям соединение 7-1 (978 мг) и реакционный раствор реагировал при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (50 мл), смесь экстрагировали ЭА (50 мл × 3), полученные органические фазы объединяли, объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием элюентов (ПЭ/ЭA=1/010/1) с получением соединения 7-2 (734 мг, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 42%. МС м/з (ИЭР): 161,1 [M+1].

[0262] На шаге 3: к ДМФ (20 мл) добавляли соединение 7-2 (734 мг, 4,58 ммоль), пиразол (468 мг, 6,87 ммоль) и карбонат калия (1,27 г, 9,19 ммоль) и реакционный раствор реагировал при 65°С в течение 18 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли ЭА (300 мл) с последующим промыванием водой (30 мл) и насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2). Полученную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием элюентов (ПЭ/ЭA=1/010/1) с получением соединения 7-3 (1 г, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 96%. МС м/з (ИЭР): 229,1 [M+1].

[0263] На шаге 4: соединение 7-3 (1 г, 4,38 ммоль) растворяли в смеси ТГФ (20 мл) и метанола (5 мл), добавляли моногидрат гидроксида лития (368 мг, 8,77 ммоль) и воды (5 мл) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли 1 М раствор хлористоводородной кислоты для доведения значения рН реакционного раствора до 3, органический растворитель удаляли центрифугированием при пониженном давлении, полученную водную фазу экстрагировали с помощью ДХМ (30 мл × 4), полученные органические фазы объединяли, объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии с получением соединения 7-4 (588 мг, белое твердое вещество) с выходом 67%. МС м/з (ИЭР): 201,0 [M+1].

[0264] На шаге 5: соединение 7-4 (588 мг, 2,94 ммоль) растворяли в ТГФ (15 мл), смесь охлаждали до -78°С, медленно по каплям добавляли 2,5 М н-бутиллития (2,9 мл, 7,25 ммоль), реакционный раствор реагировал при -60°С в течение 1 ч., а затем реагировал при -20°С в течение 1 ч. Для гашения реакции добавляли воду (15 мл), смесь экстрагировали ЭА (30 мл × 3), полученные органические фазы объединяли, объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием проявляющей системы растворителей (ПЭ/ЭA=3/1) с получением соединения 7-5 (39 мг, бледно-желтое твердое вещество) с выходом 7,3%. МС м/з (ИЭР): 183,0 [M+1].

[0265] На шаге 6: соединение 7-5 (39 мг, 0,214 ммоль), соединение 1а (67 мг, 0,257 ммоль) и изопропоксид титана (1 мл) растворяли в ДХЭ (10 мл) и реакционный раствор реагировал при 50°С в течение ночи. Добавляли воду (1 мл), чтобы погасить реакцию, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин., фильтровали и полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в метаноле (10 мл), добавляли боргидрид натрия (30 мг, 0,793 ммоль) и реакционный раствор реагировал при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-7 (35,28 мг, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 39%. МС м/з (ИЭР): 427,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,55-8,47 (м, 1H), 7,78-7,73 (м, 1H), 7,50 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,42 (дд, J=5,6, 1,7 Гц, 1H), 7,23 (дд, J=6,6, 5,1 Гц, 1H), 5,86 (дд, J=18.4, 1,3 Гц, 1H), 4,36-4,22 (м, 1H), 4,05-3,94 (м, 1H), 3,82-3,66 (м, 2H), 2,95-2,82 (м, 1H), 2,65-2,37 (м, 3H), 2,18-1,85 (м, 4H), 1,82-1,18 (м, 14H), 1,12-1,06 (м, 1H), 0,75-0,67 (м, 1H).

[0266] Пример 8.

6-изобутил-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-8)

[0267] На шаге 1: хлорид лития (3,69 г, 87,05 ммоль) добавляли к ацетонитрилу (40 мл), затем последовательно добавляли триэтилфосфоноацетат (19,5 г, 86,98 ммоль) и ДБУ (10,6 г, 69,63 ммоль), после охлаждения реакционного раствора до 0°C по каплям добавляли 3-метилбутиральдегид (5 г, 58,08 ммоль) и реакционный раствор реагировал при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли насыщенный раствор хлорида натрия (150 мл), смесь экстрагировали ЭА (50 мл × 3), полученные органические фазы объединяли, объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием элюентов (ПЭ/ЭA=1/0-10/1) с получением соединения 8-1 (6,3 г, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 70%. МС м/з (ИЭР): 157,0 [M+1].

[0268] На шаге 2: к ДМФ (20 мл) добавляли соединение 8-1 (1 г, 6,40 ммоль), пиразол (870 мг, 12,78 ммоль), карбонат калия (1,8 г, 13,02 ммоль) и реакционный раствор реагировал при 65°С в течение 18 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли ЭА (200 мл), смесь промывали насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл × 3), объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием элюентов (ПЭ/ЭA=от 1/0 до 4/1) с получением соединения 8-2 (1,2 г, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 84%. МС м/з (ИЭР): 225,1 [M+1].

[0269] На шаге 3: соединение 8-2 (1,2 г, 5,35 ммоль) растворяли в смеси ТГФ (20 мл) и метанола (5 мл), добавляли гидроксид натрия (428 мг, 10,7 ммоль) и воду (5 мл) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли 6 М раствор хлористоводородной кислоты для доведения значения рН реакционного раствора до 4, органический растворитель удаляли центрифугированием при пониженном давлении, полученную водную фазу экстрагировали с помощью ДХМ (50 мл × 3), полученные органические фазы объединяли, объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии с получением соединения 8-3 (1 г, белое твердое вещество) с выходом 96%. МС м/з (ИЭР): 197,1 [M+1].

[0270] На шаге 4: соединение 8-3 (1 г, 5,09 ммоль) растворяли в ТГФ (40 мл), смесь охлаждали до -78°С, медленно по каплям добавляли 2,5 М н-бутиллития (4,7 мл, 11,75 ммоль) и реакционный раствор реагировал при -78°С в течение 1 ч. Для гашения реакции добавляли насыщенный раствор хлорида аммония (1 мл), смесь фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали полученный остаток с помощью тонкослойной хроматографии с использованием проявляющей системы растворителей (ПЭ/ЭA= 3/1) с получением соединения 8-4 (57 мг, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 6,3%. МС м/з (ИЭР): 179,1 [M+1].

[0271] На шаге 5: соединение 8-4 (57 мг, 0,32 ммоль), соединение 1а (100 мг, 0,38 ммоль) и изопропоксид титана (1 мл) растворяли в ДХЭ (15 мл) и реакционный раствор реагировал при 50°С в течение ночи. Добавляли воду (1,5 мл), чтобы погасить реакцию, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин., фильтровали и полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в метаноле (10 мл), добавляли боргидрид натрия (30 мг, 0,793 ммоль) и реакционный раствор реагировал при комнатной температуре в течение 10 мин. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением продукта H-8 (25,26 мг, бледно-желтая маслянистая жидкость) с выходом 19%. МС м/з (ИЭР): 423,3 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,52-8,51 (м, 1H), 7,78-7,74 (м, 1H), 7,50 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=6,1, 1,7 Гц, 1H), 7,25-7,21 (м, 1H), 5,84 (дд, J=26,2, 1,3 Гц, 1H), 4,17-4,04 (м, 2H), 3,81-3,66 (м, 2H), 2,98-2,90 (м, 1H), 2,65-2,47 (м, 2H), 2,41 (д, J=13,9 Гц, 1H), 2,15-1,88 (м, 4H), 1,83-1,35 (м, 11H), 1,12-1,06 (м, 1H), 0,94 (дд, J=14,5, 6,7 Гц, 6H), 0,76-0,67 (м, 1H).

[0272] Пример 9.

3-фтор-6-изопропил-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-9)

[0273] На шаге 1: 6-изопропил-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-он (соединение 11-4, 250 мг, 1,52 ммоль) растворяли в метаноле (15 мл), добавляли порциями боргидрид натрия (115 мг, 3,04 ммоль) и реакционный раствор реагировал при комнатной температуре в течение 1 ч. Для гашения реакции добавляли насыщенный раствор хлорида аммония (1 мл), смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием системы элюентов (ДХМ/метанол = от 1/0 до 10/1) с получением соединения 9-1 (249 мг, желтое маслянистое вещество) с выходом 98%. МС м/з (ИЭР): 167,1 [M+1].

[0274] На шаге 2: соединение 9-1 (249 мг, 1,50 ммоль) растворяли в ацетонитриле (10 мл), добавляли 1-хлорметил-4-фтор-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан бис(тетрафторборат) (1,1 г, 3,19 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (40 мл), смесь экстрагировали ЭА (40 мл × 3), полученные органические фазы объединяли, объединенную органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, и фильтровали, и полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 9-2 (275 мг, желтое маслянистое вещество) с выходом 99%. МС м/з (ИЭР):185,1 [M+1].

[0275] На шаге 3: соединение 9-2 (275 мг) растворяли в ДХМ (20 мл), добавляли периодинан Десс-Мартина (1,27 г, 2,99 ммоль) и реакционный раствор реагировал при комнатной температуре в течение 2 ч. Для гашения реакции добавляли насыщенный раствор бикарбоната натрия (2 мл), смесь фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной тонкослойной хроматографии с использованием хроматографической системы (ПЭ/ЭA= 3/1) с получением соединения 9-3 (110 мг, бесцветное маслянистое вещество) с выходом 40%. МС м/з (ИЭР):183,1 [M+1].

[0276] На шаге 4: соединение 9-3 (56 мг, 0,31 ммоль), соединение 1a (88 мг, 0,34 ммоль) и изопропоксид титана (1 мл) растворяли в ДХЭ (12 мл). Реакционный раствор реагировал при 50°C в течение ночи, добавляли боргидрид натрия (80 мг, 2,11 ммоль) и реакционный раствор реагировал при 60°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли воду (2 мл), смесь фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-9 (14,92 мг, белое маслянистое вещество) с выходом 25%. МС м/з (ИЭР): 427,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,54-8,45 (м, 1H), 7,76-7,71 (м, 1H), 7,48 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,33-7,14 (м, 2H), 4,17-3,98 (м, 2H), 3,83-3,65 (м, 2H), 2,74-2,47 (м, 3H), 2,44-2,29 (м, 2H), 2,26-1,84 (м, 4H), 1,81-1,29 (м, 8H), 1,12-1,06 (м, 1H), 1,02-0,86 (м, 3H), 0,81- 0,54 (м, 4H).

[0277] Пример 10.

6-(1-метилциклопропил)-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-10)

[0278] На шаге 1: к ДМФ (80 мл) добавляли 1-метилциклопропанкарбоновую кислоту (10 мг, 0,10 моль) и гидрохлорид N,O-диметилгидроксиламина (14,6 г, 0,15 моль), последовательно добавляли HATU (45,6 г, 0,12 моль) и ДИЭА (50 мл, 0,30 мл) и реакционный раствор выдерживали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли ЭА (500 мл). Полученную органическую фазу промывали 1 н. хлористоводородной кислотой (100 мл × 2) и насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием системы элюентов (ПЭ/ЭA=от 1/0 до 1/1) с получением соединения 10-1 (11,3 г, бледно-желтого маслянистого вещества) с выходом 79%. МС м/з (ИЭР):144,1 [M+1].

[0279] На шаге 2: соединение 10-1 (14,5 г, 101 ммоль) растворяли в диэтиловом эфире (90 мл), а после охлаждения смеси до -78°C медленно по каплям добавляли 1 M гидрида диизобутилалюминия (152 мл, 152 ммоль). Реакционный раствор реагировал при -78°C в течение 2 ч., для гашения реакции добавляли 1 М HCl (16 мл), а после нагревания реакционной смеси до 0°C добавляли 1 М HCl (16 мл). Полученную смесь сушили над безводным сульфатом натрия (70 г) и фильтровали с получением соединения 10-2.

[0280] На шаге 3: хлорид лития (6,5 г, 153 ммоль) добавляли к ацетонитрилу (60 мл), последовательно добавляли триэтилфосфоноацетат (24,5 мл, 122 ммоль) и ДБУ (18,1 мл, 121 ммоль) после того, как реакционный раствор охлаждали до 0°C, добавляли по каплям соединение 10-2 (8,5 г, 101 ммоль) и реакционный раствор реагировал при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (150 мл), смесь экстрагировали ЭА (150 мл × 3), полученные органические фазы объединяли, объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием элюентов (ПЭ/ЭA=1/010/1) с получением соединения 10-3 (10,5 г, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 68%. МС м/з (ИЭР): 155,0 [M+1].

[0281] На шаге 4: к ДМФ (50 мл) добавляли соединение 10-3 (10,5 мг, 0,068 ммоль), пиразол (9,3 мг, 0,137 ммоль) и карбонат калия (18,8 г, 0,136 ммоль) и реакционный раствор реагировал при 65°С в течение 45 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли ЭА (300 мл) с последующим промыванием водой (100 мл) и насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл × 2). Полученную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием элюентов (ПЭ/ЭA=от 1/0 до 5/1) с получением соединения 10-4 (12,3 г, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 82%. МС м/з (ИЭР): 223,1 [M+1].

[0282] На шаге 5: соединение 10-4 (12,3 г, 55,3 ммоль) растворяли в смеси ТГФ (50 мл) и метанола (20 мл), добавляли моногидрат гидроксида лития (3,6 г, 85,7 ммоль) и воды (30 мл) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли 6 М раствор хлористоводородной кислоты для доведения значения рН реакционного раствора до 3, органический растворитель удаляли центрифугированием при пониженном давлении, полученную водную фазу экстрагировали с помощью ДХМ (100 мл × 3), полученные органические фазы объединяли, объединенную фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии с получением соединения 10-5 (9,2 г, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 86%. МС м/з (ИЭР): 195,0 [M+1].

[0283] На шаге 6: соединение 10-5 (3,05 г, 15,7 ммоль) растворяли в ТГФ (80 мл), после смесь охлаждали до -78°C, медленно по каплям добавляли 2,5 М н-бутиллитий (15,7 мл, 39,3 ммоль) и реакционный раствор вступал в реакцию при -78°C в течение 0,5 ч. и вступал в реакцию при -45°C в течение 1 ч. Для гашения реакции добавляли насыщенный раствор хлорида аммония (30 мл), смесь экстрагировали с помощью ЭА (50 мл × 4), полученные органические фазы объединяли, объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении, а полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием элюентов (ПЭ/ЭА=от 1/0 до 3/1) с получением соединения 10-6 (460 мг, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 16,7%. МС м/з (ИЭР): 177,0 [M+1].

[0284] На шаге 7: соединение 10-6 (58 мг, 0,33 ммоль), соединение 1a (86 мг, 0,33 ммоль) и изопропоксид титана (1 мл) растворяли в ДХЭ (10 мл) и реакционный раствор реагировали при 50°C в течение ночи. Добавляли боргидрид натрия (80 мг, 2,1 ммоль) и реакционный раствор реагировал при 60°С в течение 2 ч. Добавляли воду (1 мл), чтобы погасить реакцию, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин., фильтровали и полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-10 (51,14 мг, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 37%. МС м/з (ИЭР): 421,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,55-8,47 (м, 1H), 7,80-7,71 (м, 1H), 7,51 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,45-7,38 (м, 1H), 7,27-7,19 (м, 1H), 5,86 (дд, J=21,6, 1,9 Гц, 1H), 4,02 (т, J=7,7 Гц, 1H), 3,80-3,73 (м, 2H), 3,49 (т, J=7,1 Гц, 1H), 2,81-2,72 (м, 1H), 2,68-2,49 (м, 2H), 2,41 (дд, J=13,9, 2,0 Гц, 1H), 2,17-1,96 (м, 3H), 1,91 (д, J=13,9 Гц, 1H), 1,78-1,36 (м, 8H), 1,12-1,07 (м, 1H), 0,83 (д, J=5,3 Гц, 3H), 0,77-0,66 (м, 2H), 0,60-0,54 (м, 1H), 0,50-0,43 (м, 1H), 0,37-0,29 (м, 1H).

[0285] Пример 11.

6-(изопропил)-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-11)

[0286] На шаге 1: в одногорлую колбу объемом 3 л добавляли триэтилфосфоноацетат (476 мл, 2,4 моль), ДБУ (365 г, 2,4 моль), хлорид лития (127 г, 3 моль) и ацетонитрил (1,2 л) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. под защитой газообразного аргона. После охлаждения реакционного раствора до 0°C (внутренняя температура) медленно по каплям добавляли изобутиральдегид (144 г, 2 моль). Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения процесса реакции, контролируемого с помощью ЖХ-МС, реакционный раствор фильтровали и полученный осадок на фильтре промывали с помощью ЭА (100 мл × 2). Добавляли воду (1 л), смесь экстрагировали ЭА (1,5 л × 2), объединенную органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и сушили центрифугированием с получением соединения 11-1 (175 г, бесцветная жидкость).

[0287] На шаге 2: ДМФ (1 л) добавляли в одногорлую колбу (3 л), в которую помещали соединение 11-1 (300 г, 2,1 моль), карбонат калия (579 г, 4,2 моль) и пиразол (287 г, 4,2 моль) добавляли при перемешивании, реакционный раствор перемешивали при 65°С в течение 18 ч., после завершения процесса реакции, контролируемого ЖХ-МС, реакционный раствор сушили непосредственно центрифугированием и полученный твердый остаток растворяли в ацетонитриле (150 мл) с получением суспензии, и суспензию фильтровали с получением белого твердого вещества. Белое твердое вещество отфильтровывали и полученный осадок на фильтре промывали ЭА (500 мл × 2), затем промывали насыщенным солевым раствором (300 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, сушили с помощью центрифугирования и очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижная фаза - ПЭ, содержащий 5% ЭА) с получением соединения 11-2 (258 г, бесцветная жидкость) с выходом 58%. МС м/з (ИЭР):211,1 [M+1].

[0288] На шаге 3: гидроксид калия (133 г, 3,32 моль) растворяли в 200 мл воды и полученный водный раствор гидроксида калия предварительно охлаждали до 5°C. В колбу (3 л) добавляли соединение 11-2 (465 г, 2,21 моль), метанол (0,5 л) и ТГФ (0,5 л), добавляли предварительно охлажденный водный раствор гидроксида калия, реакционный раствор перемешивали в течение 2 ч., добавляли концентрированную хлористоводородную кислоту для доведения значения рН реакционного раствора до примерно 3, смесь экстрагировали с помощью ДХМ (800 мл × 2), все полученные органические фазы объединяли, объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали с получением 11-3 (410,5 г, белое твердое вещество) с выходом 100%. МС м/з (ИЭР):183,1 [M+1].

[0289] На шаге 4: соединение 11-3 (10,2 г, 0,055 моль) и ТГФ (200 мл) помещали в трехгорлую колбу (500 мл) под защитой газообразного азота и смесь охлаждали до -75°C. Медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор н-бутиллития в ТГФ (55 мл, 0,137 моль) и завершали добавление по каплям, реакционный раствор медленно нагревали до -10°С и перемешивали в течение 3 ч. Для гашения реакции добавляли насыщенный хлорид аммония, добавляли воду (100 мл), смесь экстрагировали ЭА (400 мл × 2), полученные органические фазы объединяли и объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали, получая коричневую жидкость. Коричневую жидкость очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижной фазой был ПЭ, содержащий 30% ЭА) с получением соединения 11-4 (4 г, белое твердое вещество) с выходом 22,2%. МС м/з (ИЭР):165,1 [M+1].

[0290] На шаге 5: соединение 11-4 (50 мг, 0,3 ммоль) растворяли в ДХЭ (5 мл), добавляли соединение 1a (79 мг, 0,3 ммоль) и изопропоксид титана (0,5 мл) и реакционный раствор перемешивали при 45°C в течение 16 ч. Добавляли боргидрид натрия (39 мг, 1 ммоль). Реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 3 ч. Добавляли воду (20 мл), смесь фильтровали и полученный фильтрат экстрагировали с помощью ДХМ (20 мл × 2), затем сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный концентрат очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-11 (2,9 мг, белое твердое вещество) с выходом 2,37%. МС м/з (ИЭР): 409,2 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,54 (д, 1H), 7,73 (т, 1H), 7,47 (д, 1H), 7,34-7,32 (м, 1H), 7,22-7,18 (м, 1H), 5,71 (д, 1H), 4,00-3,88 (м, 2H), 3,61-3,55 (м, 2H), 2,62-2,53 (м, 1H), 2,48-2,43 (м, 3H), 2,39-2,30 (м, 2H), 2,05-1,64 (м, 7H), 1,63-1,32 (м, 6H), 0,95 (д, 3H), 0,73 (д, 3H), 0,64-0,51(м, 1H).

[0291] Пример 12.

6-метил-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (смесь диастереомеров H-12-1 и смесь диастереомеров H-12-2)

[0292] На шаге 1: ДМФА (30 мл) помещали в одногорлую колбу (100 мл), в которую помещали этил(E)-бут-2-еноат (3,5 г, 30 ммоль), добавляли при перемешивании карбонат калия (4,14 г, 32 ммоль) и пиразол (2,73 г, 32 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 50°C в течение 20 ч. до завершения процесса реакции, контролируемого с помощью ЖХ-МС. Реакционный раствор отфильтровывали и полученный осадок на фильтре промывали ЭА (50 мл × 2), затем промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, сушили с помощью центрифугирования и очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижная фаза - ПЭ, содержащий 5% ЭА) с получением соединения 12-1 (3,5 г, желтая жидкость) с выходом 64%. МС м/з (ИЭР):183,1 [M+1].

[0293] На шаге 2: гидроксид натрия (0,8 г, 20 ммоль) растворяли в воде (5 мл) и полученный водный раствор гидроксида натрия предварительно охлаждали до 5°С. В колбу (100 мл) помещали соединение 12-1 (1,82 г, 10 моль), метанол (10 мл) и ТГФ (10 мл), добавляли предварительно охлажденный водный раствор гидроксида калия, реакционный раствор перемешивали в течение 2 ч., добавляли концентрированную хлористоводородную кислоту для доведения значения рН реакционного раствора до примерно 4, смесь экстрагировали с помощью ДХМ (100 мл × 2), все полученные органические фазы объединяли и объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали с получением 12-2 (1,2 г, белое твердое вещество) с выходом 78%. МС м/з (ИЭР):155,1 [M+1].

[0294] На шаге 3: соединение 12-2 (0,8 г, 5,19 моль) и ТГФ (10 мл) помещали в трехгорлую колбу (100 мл) под защитой газообразного азота и смесь охлаждали до -75°C. Медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор н-бутиллития в ТГФ (5,2 мл, 12,9 моль, 2,5 моль/л), а после завершения добавления по каплям реакционный раствор перемешивали при -75°C в течение 3 ч. Для гашения реакции добавляли насыщенный хлорид аммония, добавляли воду (40 мл), смесь экстрагировали ЭА (100 мл × 2), полученные органические фазы объединяли и объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали, получая коричневую жидкость. Коричневую жидкость очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижной фазой был ПЭ, содержащий 30% ЭА) с получением соединения 12-3 (45 мг, бесцветная жидкость) с выходом 6,4%. МС м/з (ИЭР):137,1 [M+1].

[0295] На шаге 4: соединение 12-3 (26 мг, 0,2 ммоль) растворяли в ДХЭ (5 мл), добавляли соединение 1а (52 мг, 0,2 ммоль) и изопропоксид титана (0,5 мл) и реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 6 ч. Добавляли боргидрид натрия (38 мг, 1 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 3 ч. Добавляли воду (20 мл), смесь фильтровали и полученный фильтрат экстрагировали с помощью ДХМ (40 мл × 2), затем сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта H-12.

[0296] На шаге 5: полученный концентрат, т.е. неочищенный продукт H-12 очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением смеси диастереомеров H-12-1 (2,04 мг, белое твердое вещество) с выходом 2,68%: МС м/з (ИЭР): 381,3 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,56 (дд, J=3,9, 0,9 Гц, 1H), 8,44 (brs, 1H), 7,85-7,75 (м, 1H), 7,58-7,45 (м, 2H), 7,32-7,24 (м, 1H), 5,99 (дд, J=45,9, 1,7 Гц, 1H), 4,67-4,58 (м, 1H), 4,42 (т, J=7,4 Гц, 1H), 4,30 (дq, J=13,4, 6,7 Гц, 1H), 3,82-3,70 (м, 2H), 3,18-3,06 (м, 1H), 2,98-2,81 (м, 1H), 2,50 (дд, J=24,4, 13,6 Гц, 2H), 2,42-2,35 (м, 1H), 2,08 (ддд, J=25,9, 12,6, 4,4 Гц, 1H), 1,99-1,87 (м, 2H), 1,86-1,66 (м, 3H), 1,66-1,29 (м, 7H), 1,15-1,02 (м, 1H), 0,79-0,62 (м, 1H) и смесь диастереомеров H-12-2 (0,83 мг, белое твердое вещество) с выходом 1,09%: ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,59-8,54 (м, 1H), 8,36 (brs, 1H), 7,85-7,75 (м, 1H), 7,57-7,44 (м, 2H), 7,31-7,23 (м, 1H), 5,98 (дд, J=45,0, 1,4 Гц, 1H), 4,67-4,58 (м, 2H), 4,45-4,36 (м, 1H), 4,30 (дд, J=13,6, 6,8 Гц, 1H), 3,82-3,67 (м, 2H), 3,19-3,08 (м, 1H), 2,96-2,84 (м, 1H), 2,50 (дд, J=24,4, 13,5 Гц, 2H), 2,43-2,28 (м, 1H), 2,08 (ддд, J=17.2, 12,9, 4,8 Гц, 1H), 2,00-1,87 (м, 2H), 1,86-1,27 (м, 9H), 1,12-1,05 (м, 1H), 0,77-0,65 (м, 1H).

[0297] Пример 13.

6-(1-метилциклопропил)-N-(2-((R)-9-(4-фторфенил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-6-изопропил-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-13)

[0298] На шаге 1: циклопентанон (126 г, 1,5 моль) и 3-бутен-1-ол (108 г, 2,4 моль) помещали в одногорлую колбу, а после охлаждения реакционного раствора до 0°С (внутренняя температура) медленно по каплям добавляли 70% серную кислоту (500 мл). Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. до завершения процесса реакции, контролируемого методом ТСХ (подвижной фазой был ПЭ, содержащий 20% ЭА). После охлаждения реакционного раствора до 0°C добавляли воду со льдом (1400 мл), смесь промывали и экстрагировали этилацетатом (500 мл × 2). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, и сушили центрифугированием, и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижная фаза - ДХМ, содержащий 10% метанола) с получением соединения 13-1 (142 г, коричневая жидкость) с выходом 60,9%.

[0299] На шаге 2: соединение 13-1 (56 г, 0,35 моль), хлорхромат пиридиния (100,5 г, 0,47 моль), силикагель (220 г) и ДХМ (0,5 л) помещали в одногорлую колбу (2 л) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. в атмосфере аргона. Реакционный раствор фильтровали, полученный фильтрат концентрировали, а полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижной фазой был ПЭ, содержащий 20% ЭА) с получением соединения 13-2 (110 г, белая маслянистая жидкость) с выходом 91,5%. МС м/з (ИЭР):155,1 [M+1].

[0300] На шаге 3: толуол (0,35 л) добавляли в одногорлую колбу (2 л), в которую помещали соединение 13-2 (85 г, 0,55 моль) и метил-2-цианоацетат (65,6 г, 0,66 моль), при перемешивании добавляли ацетат аммония (12,8 г, 0,17 моль) и уксусную кислоту (5,5 мл). Реакционный раствор перемешивали при 120°С в течение 5 ч. до завершения процесса реакции, контролируемого с помощь ЖХ-МС. Реакционный раствор охлаждали и расслаивали, полученную водную фазу экстрагировали этилацетатом (200 мл × 2), все полученные органические фазы объединяли и объединенную органическую фазу промывали водным раствором бикарбоната натрия, промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали с получением соединения 13-3 (106 г, желтая жидкость) с выходом 81,7%. МС м/з (ИЭР):236,1 [M+1].

[0301] На шаге 4: В трехгорлую колбу (500 мл) помещали ТГФ (200 мл), 4-фторфенилмагнийбромид (72 мл, 0,14 моль, 2 моль/л) и иодид меди (2,3 г, 0,012 моль) при защиту газообразным азотом и реакционный раствор перемешивали в течение 0,5 ч. Медленно по каплям добавляли раствор соединения 13-3 (28,2 г, 0,12 моль) в ТГФ (50 мл), а после завершения добавления по каплям реакционный раствор медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Добавляли ледяную воду (500 мл), смесь экстрагировали ЭА (600 мл × 2), полученные органические фазы объединяли и объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали с получением коричневой жидкости. Коричневую жидкость очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижной фазой был ПЭ, содержащий 10% ЭА) с получением соединения 13-4 (27 г, желтое твердое вещество) с выходом 68%. МС м/з (ИЭР):332,1 [M+1].

[0302] На шаге 5: соединение 13-4 (12 г, 0,036 моль), гидроксид калия (4,1 г, 0,072 моль) и этиленгликоль (84 мл) помещали в трехгорлую колбу (500 мл) и реакционный раствор перемешивали при 120°С в течение 5 ч. Добавляли ледяную воду (300 мл), смесь экстрагировали ЭА (500 мл × 2), полученные органические фазы объединяли и объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали с получением коричневой жидкости. Коричневую жидкость очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижной фазой был ПЭ, содержащий 20% ЭА) с получением соединения 13-5 (19,4 г, бесцветная жидкость) с выходом 82,6%.

[0303] На шаге 6: проводили хиральное разделение соединения 13-5 с помощью сверхкритической жидкостной хроматографии (СФХ) с получением (R)-2-(9-(4-фторфенил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)ацетонитрила (соединение 13-6, 8,51 г, бесцветная жидкость) с выходом 41%. МС м/з (ИЭР):274,1 [M+1].

[0304] На шаге 7: в одногорлую колбу помещали соединение 13-6 (1 г, 3,6 ммоль), этанол (6 мл), аммиачную воду (0,6 мл) и никель Ренея (0,1 г), служащий катализатором (100 мл), и реакционный раствор перемешивали в течение 16 ч под защитой газообразного водорода. Реакционный раствор фильтровали и полученный фильтрат концентрировали с получением соединения 13-7 (0,83 г, желтая жидкость) с выходом 82%. МС м/з (ИЭР):278,2 [M+1].

[0305] На шаге 8: соединение 11-4 (100 мг, 0,6 ммоль) растворяли в ДХЭ (10 мл), добавляли соединение 13-7 (169 мг, 0,6 ммоль) и изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор перемешивали при 65°C в течение 12 ч. Добавляли боргидрид натрия (114 мг, 3 ммоль). Реакционный раствор перемешивали при 65°С в течение 6 ч. Добавляли воду (20 мл), смесь фильтровали и полученный фильтрат экстрагировали с помощью ДХМ (30 мл × 2), затем сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный концентрат очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-13 (30,01 мг, бесцветная жидкость) с выходом 11,8%. МС м/з (ИЭР):426,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 7,39 (дд, J=8,9, 5,3 Гц, 3H), 7,09-6.99 (м, 2H), 5,85 (дд, J=21,3, 1,5 Гц, 1H), 4,15-3,99 (м, 2H), 3,82-3,67 (м, 2H), 2,71-2,64 (м, 1H), 2,60-2,48 (м, 1H), 2,42-3,35 (м, 1H), 2,31 (д, J=14,0 Гц, 1H), 2,15 (qd, J=11.4, 4,9 Гц, 2H), 1,98-1,82 (м, 3H), 1,81-1,67 (м, 3H), 1,66-1.40 (м, 5H), 1,28-1,20 (м, 1H), 0,97 (т, J=12,9 Гц, 3H), 0,93-0,84 (м, 1H), 0,79-0,65 (м, 3H).

[0306] Пример 14.

6-пропил-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-14)

[0307] На шаге 1: ДМФА (30 мл) помещали в одногорлую колбу (100 мл), в которую помещали этил(E)-бут-2-еноат (6 г, 42 ммоль), добавляли при перемешивании карбонат калия (8,7 г, 63 ммоль) и пиразол (4,3 г, 63 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 60°C в течение 36 ч до завершения процесса реакции, контролируемого с помощью ЖХ-МС. Реакционный раствор отфильтровывали и полученный осадок на фильтре промывали ЭА (50 мл × 2), затем промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, сушили с помощью центрифугирования и очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижная фаза - ПЭ, содержащий 5% ЭА) с получением соединения 14-1 (5,5 г, желтая жидкость) с выходом 62,3%. МС м/з (ИЭР):211,1 [M+1].

[0308] На шаге 2: гидроксид натрия (1,52 г, 38 ммоль) растворяли в воде (10 мл) и полученный водный раствор гидроксида натрия предварительно охлаждали до 5°С. В колбу (100 л) помещали соединение 14-1 (4 г, 19 моль), метанол (20 мл) и ТГФ (20 мл), добавляли предварительно охлажденный водный раствор гидроксида калия, реакционный раствор перемешивали в течение 2 ч, добавляли концентрированную хлористоводородную кислоту для доведения значения рН реакционного раствора до приблизительно 4, реакционный раствор экстрагировали с помощью ДХМ (100 мл × 2), все полученные органические фазы объединяли и объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали с получением 14-2 (3 г, белое твердое вещество) с выходом 86,7%. МС м/з (ИЭР):183,1 [M+1].

[0309] На шаге 3: соединение 14-2 (1,82 г, 10 ммоль) и ТГФ (40 мл) помещали в трехгорлую колбу (100 мл) под защитой газообразного азота и смесь охлаждали до -75°C. Медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор н-бутиллития в ТГФ (10 мл, 25 ммоль, 2,5 моль/л), а после завершения добавления по каплям реакционный раствор перемешивали при -75°C в течение 3 ч. Для гашения реакции добавляли насыщенный хлорид аммония, добавляли воду (40 мл), смесь экстрагировали ЭА (100 мл × 2), полученные органические фазы объединяли и объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали, получая коричневую жидкость. Коричневую жидкость очищали с помощью колоночной хроматографии (подвижной фазой был ПЭ, содержащий 30% ЭА) с получением соединения 14-3 (100 мг, бесцветная жидкость) с выходом 6%. МС м/з (ИЭР):165,1 [M+1].

[0310] На шаге 4: соединение 14-3 (42 мг, 0,25 ммоль) растворяли в ДХЭ (10 мл), добавляли соединение 1а (65 мг, 0,25 ммоль) и изопропоксид титана (0,8 мл) и реакционный раствор перемешивали при 58°С в течение 12 ч. Добавляли боргидрид натрия (47,3 мг, 1,25 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 3 ч. Добавляли воду (20 мл), смесь фильтровали и полученный фильтрат экстрагировали с помощью ДХМ (40 мл × 2), затем сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный концентрат очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-14 (15,05 мг, белая жидкость) с выходом 14,7%. МС м/з (ИЭР): 409,2 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,55-8,49 (м, 1H), 7,81-7,73 (м, 1H), 7,54-7,48 (м, 1H), 7,39 (дд, J=5,8, 1,8 Гц, 1H), 7,27-7,20 (м, 1H), 5,83 (ддд, J=4,6, 1,9, 0,6 Гц, 1H), 4,16-4,00 (м, 2H), 3,80-3,72 (м, 2H), 2,95-2,78 (м, 1H), 2,67-2,48 (м, 2H), 2,47-2,37 (м, 1H), 2,16-1,97 (м, 3H), 1,89 (дд, J=13,2, 5,9 Гц, 1H), 1,85-1,64 (м, 4H), 1,64-1,30 (м, 8H), 1,13-1,04 (м, 1H), 0,99-0,88 (м, 3H), 0,79-0,71 (м, 1H).

[0311] Пример 15.

6-(сек-бутил)-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-15)

[0312] На шаге 1: пиразол (2,65 г, 39 ммоль) растворяли в растворе ДМФ (60 мл), этил(Е)-4-метилгексагональ-2-еноате (3 г, 19,5 ммоль) и карбонате калия (4,03 г, 29 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 60°C в течение ночи. Добавляли ЭА (100 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 15-1 (3 г) с выходом 68%. МС м/з (ИЭР): 225,1 [M+1].

[0313] На шаге 2: соединение 15-1 (2,6 г, 11,6 ммоль) растворяли в смеси метанола (20 мл) и воды (4 мл), добавляли гидроксид лития (0,8 г, 34,8 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Добавляли 3 н. раствор хлористоводородной кислоты для доведения значения рН реакционного раствора до 2, смесь экстрагировали смесью ДХМ и метанола (10/1) и полученную органическую фазу перегоняли при пониженном давлении с получением желтого твердого вещества. Желтое твердое вещество очищали препаративной жидкостной хроматографией с получением соединения 15-2 (1,5 г) с выходом 65%. МС м/з (ИЭР): 197,1 [M+1].

[0314] На шаге 3: соединение 15-2 (500 мг, 2,55 ммоль) растворяли в растворе ТГФ (20 мл), добавляли 2,5 М раствор н-бутиллития (2,3 мл, 5,61 ммоль) при -78°С и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли водный раствор хлорида натрия, смесь экстрагировали ЭА, полученную органическую фазу концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 15-3 (180 мг) с выходом 40%. МС м/з (ИЭР): 179.1 [M+1].

[0315] На шаге 4: соединение 1а (116 мг, 0,45 ммоль) растворяли в растворе ДХЭ (5 мл), добавляли соединение 15-3 (80 мг, 0,45 ммоль) и изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор нагревали до 60°C с проведением реакции в течение ночи. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (35 мг, 0,9 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли воду, смесь фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-15 (34,96 мг) с выходом 18%. МС м/з (ИЭР): 423,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8,51-8,50 (д, J=4 Гц, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,72-7,68 (м, 1H), 7,45-7,43 (м, 1H), 7,31-7,30 (м, 1H), 7,19-7,16 (м, 1H), 5,72-5,66 (м, 1H), 4,09-4,02 (м, 1H), 3,93-3,90 (м, 1H), 3,58-3,53 (м, 2H), 2,54-2,47 (м, 1H), 2,47-2,46 (м, 1H), 2,40-2,35 (м, 1H), 2,02-1,95 (м, 2H), 1,88-1,67 (м, 4H), 1,62-1,30 (м, 9H), 1,16-1,08 (м, 1H), 0,97-0,94 (м, 1H), 0,88-0,84 (т, J=8 Гц, 3H), 0,79-0,77 (т, J=4 Гц, 1H), 0,64-0,54 (м, 3H).

[0316] Пример 16.

6-(1-метилциклобутил)-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-16)

[0317] На шаге 1: 1-метилциклобутан-1-карбоксиловую кислоту (1,8 г, 12,7 ммоль) растворяли в растворе ДМФ (20 мл), добавляли раствор гидрохлорида диметилгидроксиламина (1,47 г, 15,2 ммоль), HATU (7,2 г, 19 ммоль) и триэтиламина (3,85 г, 38,1 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли ЭА (100 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 16-1 (2,1 г) с выходом 100%. МС м/з (ИЭР): 158,1 [M+1].

[0318] На шаге 2: соединение 16-1 (1,7 г, 10,8 ммоль) растворяли в растворе ТГФ (20 мл), добавляли алюмогидрид лития (0,82 г, 21,6 ммоль) при 0°C и реакционный раствор перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли декагидрат сульфата натрия, смесь перемешивали в течение 30 мин. и фильтровали, а полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 16-2.

[0319] На шаге 3: соединение 16-2 (1,06 г, 40,8 ммоль) растворяли в растворе ацетонитрила (20 мл), добавляли этилдиэтоксифосфинилформиат (3,63 г, 16,2 ммоль), ДБУ (3,28 г, 21,6 ммоль) и хлорид лития (0,91 г, 21,6 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли ЭА (100 мл), затем промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=2: 1) с получением соединения 16-3 (500 мг) с выходом 28%. МС м/з (ИЭР):169,1 [M+1].

[0320] На шаге 4: пиразол (303 мг, 4,46 ммоль) растворяли в растворе ДМФ (10 мл), добавляли соединение 16-3 (500 мг, 2,98 ммоль) и карбонат калия (822 мг, 5,96 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 60°C в течение ночи. Добавляли ЭА (100 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=2: 1) с получением соединения 16-4 (400 мг) с выходом 57%. МС м/з (ИЭР): 237,1 [M+1].

[0321] На шаге 5: соединение 16-4 (400 мг, 1,69 ммоль) растворяли в смеси метанола (20 мл) и воды (2 мл), добавляли гидроксид лития (78 мг, 3,39 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли 3 н. раствор хлористоводородной кислоты для доведения значения рН реакционного раствора до 2, смесь экстрагировали смесью ДХМ и метанола (10/1), полученную органическую фазу перегоняли при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии с получением соединения 16-5 (330 мг) с выходом 94%. МС м/з (ИЭР): 209,1 [M+1].

[0322] На шаге 6: соединение 16-5 (270 г, 1,3 ммоль) растворяли в растворе ТГФ (10 мл), добавляли 2,5 М раствор н-бутиллития (1,3 мл, 3,25 ммоль) при -78°С и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли водный раствор хлорида натрия, смесь экстрагировали ЭА, полученную органическую фазу концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 16-6 (100 мг) с выходом 40%. МС м/з (ИЭР): 191,1 [M+1].

[0323] На шаге 7: соединение 1а (136 мг, 0,53 ммоль) растворяли в растворе ДХЭ (10 мл), добавляли соединение 16-6 (100 мг, 0,53 ммоль) и изопропоксид титана (0,5 мл) и реакционный раствор реагировал при 60°C в течение ночи. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (40 мг, 1,06 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли воду, смесь фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-16 (15,4 мг) с выходом 6,7%. МС м/з (ИЭР): 435,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ 8,50-8,49 (д, J=4 Гц, 1H), 7,69-7,67 (м, 1H), 7,44-7,42 (д, J=8 Гц, 1H), 7,29-7,27 (м, 1H), 7,18-7,15 (м, 1H), 5,71-5,65 (м, 1H), 4,14-4,12 (м, 1H), 3,86-3,83 (м, 1H), 3,62-3,57 (м, 2H), 2,65-2,63 (м, 1H), 2,47-2,45 (м, 2H), 2,30-2,29 (м, 2H), 2,05-2,03 (м, 1H), 1,97-1,89 (м, 2H), 1,84-1,73 (м, 4H), 1,63-1,53 (м, 6H), 1,41-1,30 (м, 5H), 0,92-0,89 (м, 4H).

[0324] Пример 17.

N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-6-(1-(трифторметил)циклопропил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-17)

[0325] На шаге 1: 1-(трифторметил)циклопропан-1-карбоновую кислоту (6,8 г, 44 ммоль) растворяли в растворе ДМФ (100 мл), добавляли раствор гидрохлорида диметилгидроксиламина (5,14 г, 53 ммоль), HATU (25 г, 66 ммоль) и триэтиламина (13,3 г, 132 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли ЭА (400 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 17-1 (8 г) с выходом 92%. МС м/з (ИЭР): 198,1 [M+1].

[0326] На шаге 2: соединение 17-1 (8 г, 4,06 ммоль) растворяли в растворе ТГФ (100 мл), добавляли DIBAL-H (1,0 М, 60 мл, 6,1 ммоль) при -78°C и реакционный раствор перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли декагидрат сульфата натрия, смесь перемешивали в течение 30 мин. и фильтровали, а полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 17-2.

[0327] На шаге 3: соединение 17-2 (5,6 г, 40,6 ммоль) растворяли в растворе ацетонитрила (100 мл), добавляли этилдиэтоксифосфинилформиат (13,64 г, 60,9 ммоль), ДБУ (12,34 г, 81,2 ммоль) и хлорид лития (3,4 г, 81,2 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли ЭА (300 мл), затем промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=2: 1) с получением соединения 17-3 (4 г) с выходом 47%. МС м/з (ИЭР): 209,1 [M+1].

[0328] На шаге 4: пиразол (2,61 г, 38,5 ммоль) растворяли в растворе ДМФ (100 мл), добавляли соединение 17-3 (4 г, 19,2 ммоль) и карбонат калия (7,95 мг, 57,6 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 60°C в течение ночи. Добавляли ЭА (300 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 17-4 (3,3 г) с выходом 62%. МС м/з (ИЭР): 277,1 [M+1].

[0329] На шаге 5: соединение 17-4 (3,3 г, 12 ммоль) растворяли в смеси метанола (20 мл) и воды (5 мл), добавляли гидроксид лития (0,55 г, 24 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли 3 н. раствор хлористоводородной кислоты для доведения значения рН реакционного раствора до 2, смесь экстрагировали смесью ДХМ и метанола (10/1), полученную органическую фазу перегоняли при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии с получением соединения 17-5 (1,8 г) с выходом 61%. МС м/з (ИЭР): 249,1 [M+1].

[0330] На шаге 6: соединение 17-5 (1,8 г, 7,26 ммоль) растворяли в растворе ТГФ (30 мл), добавляли 2,5 М раствор н-бутиллития (7,3 мл, 18,1 ммоль) при -78°С и реакционный раствор перемешивали при -20 в течение 1 ч. Добавляли водный раствор хлорида натрия, смесь экстрагировали раствором ЭА, полученную органическую фазу концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 2) с получением соединения 17-6 (700 мг) с выходом 42%. МС м/з (ИЭР): 231,1 [M+1].

[0331] На шаге 7: соединение 17-6 (50 мг, 0,22 ммоль), соединение 1а (62 мг, 0,24 ммоль) и изопропоксид титана (1 мл) растворяли в ДХЭ (10 мл) и реакционный раствор реагировал при 50°С в течение ночи. Добавляли боргидрид натрия (60 мг, 1,6 ммоль) и реакционный раствор реагировал при 60°С в течение 2 ч. Добавляли воду (1 мл), чтобы погасить реакцию, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин., фильтровали и полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-17 (30,89 мг, бесцветная маслянистая жидкость) с выходом 30%. МС м/з (ИЭР): 475,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,54-8,47 (м, 1H), 7,79-7,70 (м, 1H), 7,50 (дд, J=8,1, 1,0 Гц, 1H), 7,42 (дд, J=3,4, 1,9 Гц, 1H), 7,25-7,21 (м, 1H), 5,87 (ддд, J=16,6, 1,9, 0,7 Гц, 1H), 4,27 (т, J=6,7 Гц, 1H), 4,09-3,95 (м, 1H), 3,81-3,65 (м, 2H), 3,03-2,98 (м, 1H), 2,65-2,37 (м, 3H), 2,25-1,87 (м, 4H), 1,80-1,24 (м, 9H), 1,12-1,01 (м, 3H), 0,91-0,85 (м, 1H), 0,76-0,67 (м, 1H).

[0332] Пример 18.

N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-6-(1,1,1,-трифтор-2-метилпроп-2-ил)-5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-18)

[0333] На шаге 1: 3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропановую кислоту (5 г, 32 ммоль) растворяли в растворе ДМФ (100 мл), добавляли раствор гидрохлорида диметилгидроксиламина (3,74 г, 38,5 ммоль), HATU (18,2 г, 48 ммоль) и триэтиламина (9,7 г, 96 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли ЭА (400 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и органическую фазу концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 18-1 (4,5 г) с выходом 70%. МС м/з (ИЭР): 200,1 [M+1].

[0334] На шаге 2: соединение 18-1 (4,3 г, 21,6 ммоль) растворяли в растворе ТГФ (30 мл), добавляли алюмогидрид лития (1,64 г, 43,2 ммоль) при 0°C и реакционный раствор перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли декагидрат сульфата натрия, смесь перемешивали в течение 30 мин. и фильтровали, а полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 18-2.

[0335] На шаге 3: соединение 18-2 (3,02 г, 21,6 ммоль) растворяли в растворе ацетонитрила (30 мл), добавляли этилдиэтоксифосфинилформиат (7,26 г, 32,4 ммоль), ДБУ (6,57 г, 43,2 ммоль) и хлорид лития (1,81 г, 43,2 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли ЭА (100 мл), затем промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и органическую фазу концентрировали при пониженном давлении, а полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=2: 1) с получением соединения 18-3 (700 мг) с выходом 15%. МС м/з (ИЭР): 211,1 [M+1].

[0336] На шаге 4: пиразол (340 мг, 5 ммоль) растворяли в растворе ДМФ (10 мл), добавляли полученное соединение 18-3 (700 мг, 3,33 ммоль) и карбонат калия (919 мг, 6,66 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 60°C в течение ночи. Добавляли ЭА (100 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и органическую фазу концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 18-4 (800 мг) с выходом 86%. МС м/з (ИЭР): 279,1 [M+1].

[0337] На шаге 5: соединение 18-4 (800 мг, 2,88 ммоль) растворяли в смеси метанола (10 мл) и воды (2 мл), добавляли гидроксид лития (0,13 г, 5,76 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли 3 н. раствор хлористоводородной кислоты для доведения значения рН реакционного раствора до 2, реакционную смесь экстрагировали смесью ДХМ и метанола (10/1), полученную органическую фазу перегоняли при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии с получением соединения 18-5 (0,5 г) с выходом 69%. МС м/з (ИЭР): 251,1 [M+1].

[0338] На шаге 6: соединение 18-5 (0,2 г, 0,8 ммоль) растворяли в растворе ТГФ (10 мл), добавляли 2,5 М раствор н-бутиллития (0,8 мл, 2 ммоль) при -78°С и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли водный раствор хлорида натрия, смесь экстрагировали раствором ЭА, полученную органическую фазу концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (ПЭ: ЭA=1: 1) с получением соединения 18-6 (20 мг) с выходом 10%. МС м/з (ИЭР): 233,1 [M+1].

[0339] На шаге 7: соединение 1а (23 мг, 0,09 ммоль) растворяли в растворе ДХЭ (5 мл), добавляли соединение 18-6 (20 мг, 0,09 ммоль) и изопропоксид титана (0,3 мл) и реакционный раствор нагревали до 60°C с проведением реакции в течение ночи. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (11 мг, 0,27 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли воду, смесь фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-18 (1,65 мг) с выходом 3,9%. МС м/з (ИЭР): 477,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ 8,53-8,52 (м, 1H), 7,77-7,73 (м, 1H), 7,52-7,50 (м, 1H), 7,42-7,40 (м, 1H),7,25-7,21 (м, 1H), 5,91-4,84 (м, 1H), 5,33-5,31 (т, J=4 Гц, 1H), 4,28-4,24 (т, J=4 Гц, 1H), 4,02-3,99 (м, 1H), 3,80-3,74 (м, 2H), 2,64-2,40 (м, 4H), 2,17-2,03 (м, 5H), 1,92-1,89 (д, J=12 Гц, 1H), 1,75-1,70 (м, 2H), 1,65 (с, 3H), 1,54-1,39 (м, 5H), 1,01-1,00 (д, J=4 Гц, 3H).

[0340] Пример 19.

N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-4’,5’-дигидроспиро[циклопентан-1,6’-пирроло[1,2-b]пиразол]-4’-амин (H-19)

[0341] На шаге 1: раствор ацетонитрила (60 мл) и ДБУ (2,28 г, 15 ммоль) добавляли в запаянную пробирку, в которой находились этил 2-циклопентилиденацетат (1,54 г, 10 ммоль) и пиразол (1 г, 15 ммоль). Смесь перемешивали при 100°C в течение 18 ч., охлаждали до комнатной температуры и концентрировали, полученный остаток разбавляли этилацетатом (100 мл), затем промывали водой (60 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=6/1) с получением соединения 19-1 (1,11 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 50%. МС м/з (ИЭР): 223,1 [M+1].

[0342] На шаге 2: соединение 19-1 (1,11 г, 5 ммоль) растворяли в смеси метанола (20 мл) и воды (5 мл), добавляли гидроксид натрия (0,4 г, 10 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч до завершения реакции. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток растворяли в воде (20 мл), добавляли 2 М хлористоводородную кислоту для доведения значения рН смеси от 3 до 4, смесь экстрагировали с помощью дихлорметана (40 мл × 3), объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 19-2 (0,77 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 80%. МС м/з (ИЭР): 195,2 [M+1].

[0343] На шаге 3: соединение 19-2 (0,77 г, 4 ммоль) растворяли в сухом тетрагидрофуране (15 мл), смесь охлаждали до -70°C под защитой газообразного азота, медленно по каплям добавляли 2,5 M раствор бутиллития в тетрагидрофуране (4 мл, 10 ммоль). После завершения добавления по каплям реакционную смесь нагревали до -40°С и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли воду (10 мл) для гашения реакции с последующей фильтрацией, концентрацией и очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=6/1) с получением соединения 19-3 (85 мг, желтая маслянистая жидкость) с выходом 12%. МС м/з (ИЭР): 177,3 [M+1].

[0344] На шаге 4: соединение 19-3 (53 мг, 0,30 ммоль) и соединение 1а (78 мг, 0,30 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл), добавляли изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 18 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (34 мг, 0,9 ммоль), реакционный раствор перемешивали в течение 3 ч, добавляли воду (5 мл), смесь перемешивали в течение 0,5 мин., фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-19 (26 мг, бесцветное маслянистое вещество) с выходом 20,6%. МС м/з (ИЭР): 421,3 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,54-8,47 (м, 1H), 7,71-7,68 (м, 1H), 7,44 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,28 (дд, J=4,8, 1,8 Гц, 1H), 7,17 (дд, J=7,4, 4,8 Гц, 1H), 5,65 (дд, J=23,8, 1,7 Гц, 1H), 3,88 (дт, J=7,6, 5,3 Гц, 1H), 3,64-3,49 (м, 2H), 2,58-2,54 (м, 1H), 2,47-2,26 (м, 5H), 2,09-1,20 (м, 19H), 1,00-0,89 (м, 1H), 0,60-0,56 (м, 1H).

[0345] Пример 20.

N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-2,3,4’,5,5’,6-гексагидроспиро[пиран-4,6’-пирроло[1,2-b]пиразол]-4’-амин (H-20)

[0346] На шаге 1: раствор ацетонитрила (60 мл) и ДБУ (2,28 г, 15 ммоль) добавляли в запаянную пробирку, в которой находились этил 2-(дигидро-2H-пиран-4(3H)-алкилен)ацетат (1,7 г, 10 ммоль) и пиразол (1 г, 15 ммоль). Смесь перемешивали при 100°C в течение 18 ч., охлаждали до комнатной температуры и концентрировали, полученный остаток разбавляли этилацетатом (100 мл), затем промывали водой (60 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=6/1) с получением соединения 20-1 (1,09 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 46%. МС м/з (ИЭР): 239,1 [M+1].

[0347] На шаге 2: соединение 20-1 (1,09 г, 40 ммоль) растворяли в смеси метанола (20 мл) и воды (5 мл), добавляли гидроксид натрия (0,4 г, 10 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. до завершения реакции. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток растворяли в воде (20 мл), добавляли 2 М хлористоводородную кислоту для доведения значения рН смеси от 3 до 4, смесь экстрагировали с помощью дихлорметана (40 мл × 3), объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 20-2 (0,73 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 76%. МС м/з (ИЭР): 211,2 [M+1].

[0348] На шаге 3: соединение 20-2 (0,73 г, 3,5 ммоль) растворяли в сухом тетрагидрофуране (15 мл), а после охлаждения смеси до -70°C под защитой газообразного азота медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор бутиллития в тетрагидрофуране (3,5 мл, 8,7 ммоль). После завершения добавления по каплям реакционный раствор медленно нагревали до -40°С и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли воду (10 мл) для гашения реакции с последующей фильтрацией, концентрацией и очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=6/1) с получением соединения 20-3 (168 мг, желтая маслянистая жидкость) с выходом 25%. МС м/з (ИЭР): 193,3 [M+1].

[0349] На шаге 4: соединение 20-3 (58 мг, 0,30 ммоль) и соединение 1а (78 мг, 0,30 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл), добавляли изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 18 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (34 мг, 0,9 ммоль), реакционный раствор перемешивали в течение 3 ч, добавляли воду (5 мл), смесь перемешивали в течение 0,5 мин., фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-20 (20 мг, бесцветное маслянистое вещество) с выходом 20,6%. МС м/з (ИЭР): 437,2 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,52-8,50 (м, 1H), 7,75-7,65 (м, 1H), 7,44 (дд, J=8,1, 1,2 Гц, 1H), 7,31 (дд, J=5,4, 1,8 Гц, 1H), 7,22-7,13 (м, 1H), 5,68 (дд, J=24,4, 1,7 Гц, 1H), 3,94-3,92 (м, 3H), 3,58-3,55 (м, 2H), 3,47-3,32 (м, 2H), 2,73-2,63 (м, 1H), 2,43-2,41 (м, 2H), 2,35-2,26 (м, 2H), 2,12-1,71 (м, 7H), 1,66-1,22 (м, 9H), 0,99-0,90 (м, 1H), 0,60-0,57 (м, 1H).

[0350] Пример 21.

N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-4’,5’-дигидроспиро[циклобутан-1,6’-пирроло[1,2-b]пиразол]-4’-амин (H-21)

[0351] На шаге 1: циклобутанон (3,5 г, 50 ммоль) растворяли в ацетонитриле (100 мл), добавляли триэтилфосфоноацетат (11,8 г, 52,5 ммоль) и хлорид лития (2,2 г, 52,5 ммоль), реакционный раствор охлаждали от 2 до 5°C, медленно добавляли ДБУ (7,5 г, 52,5 ммоль) и реакционный раствор реагировал при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток разбавляли этилацетатом (120 мл), затем промывали водой (70 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=10/1) с получением соединения 21-1 (5,6 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 80%. МС м/з (ИЭР): 141,2 [M+1].

[0352] На шаге 2: раствор ацетонитрила (90 мл) и ДБУ (9,12 г, 60 ммоль) добавляли в запаянную пробирку, в которой находились соединение 21-1 (5,6 г, 40 ммоль) и пиразол (4 г, 60 ммоль). Смесь перемешивали при 100°C в течение 18 ч., охлаждали до комнатной температуры и концентрировали, полученный остаток разбавляли этилацетатом (100 мл), затем промывали водой (60 мл × 1), промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 1), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=6/1) с получением соединения 21-2 (5 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 60%. МС м/з (ИЭР): 209,1 [M+1].

[0353] На шаге 3: соединение 21-2 (5 г, 24 ммоль) растворяли в смеси метанола (60 мл) и воды (15 мл), добавляли гидроксид натрия (1,92 г, 48 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. до завершения реакции. Реакционный раствор концентрировали, полученный остаток растворяли в воде (40 мл), добавляли 2 М хлористоводородную кислоту для доведения значения рН смеси от 3 до 4, смесь экстрагировали с помощью дихлорметана (60 мл × 3), объединенную органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 21-3 (3,0 г, желтая маслянистая жидкость) с выходом 70%. МС м/з (ИЭР): 181,2 [M+1].

[0354] На шаге 4: соединение 21-3 (3,0 г, 16,7 ммоль) растворяли в сухом тетрагидрофуране (80 мл), а после охлаждения смеси до -70°C под защитой газообразного азота медленно по каплям добавляли 2,5 М раствор бутиллития в тетрагидрофуране (16,7 мл, 41,7 ммоль). После завершения добавления по каплям реакционный раствор медленно нагревали до -40°С и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли воду (10 мл) для гашения реакции с последующей фильтрацией, концентрацией и очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=6/1) с получением соединения 21-4 (243 мг, желтая маслянистая жидкость) с выходом 9%. МС м/з (ИЭР): 163,3 [M+1].

[0355] На шаге 5: соединение 21-4 (49 мг, 0,30 ммоль) и соединение 1а (78 мг, 0,30 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл), добавляли изопропоксид титана (1 мл) и реакционный раствор перемешивали при 45°С в течение 18 ч. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (34 мг, 0,9 ммоль), реакционный раствор перемешивали в течение 3 ч., добавляли воду (5 мл), смесь перемешивали в течение 0,5 ч., фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-21 (8 мг, бесцветное маслянистое вещество) с выходом 6,6%. МС м/з (ИЭР): 407,3 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,51-8,49 (м, 1H), 7,74-7,64 (м, 1H), 7,43 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,34-7,31 (м, 1H), 7,18-7,15 (м, 1H), 5,66 (дд, J=17.7, 1,7 Гц, 1H), 3,86 (дт, J=7,6, 4,9 Гц, 1H), 3,64-3,49 (м, 2H), 2,79 (дд, J=13,0, 7,5 Гц, 1H), 2,64-2,50 (м, 1H), 2,46-2,24 (м, 5H), 2,17 (ддд, J=13,1, 5,1, 1,5 Гц, 1H), 2,06-2,01 (м, 2H), 1,97-1,65 (м, 5H), 1,65-1,18 (м, 8H), 0,99-0,88 (м, 1H), 0,59-0,55 (м, 1H).

[0356] Пример 22.

6,6-диметил-N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-5,6-дигидро-4H- пирроло[1,2-b]пиразол-4-амин (H-22)

[0357] На шаге 1: 1H-пиразол (2,68 г, 40 ммоль) растворяли в растворе ДМФ (50 мл), добавляли этил 3-метил-2-еноат (4,5 г, 40 ммоль) и карбонат калия (8,3 г, 60 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при 60°C в течение ночи. Добавляли этилацетат (100 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и органическую фазу концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (петролейный эфир:этилацетат=1: 1) с получением соединения 22-1 (1,2 г) с выходом 15%. МС м/з (ИЭР): 197,1 [M+1].

[0358] На шаге 2: соединение 22-1 (1,2 г, 6,2 ммоль) растворяли в смеси метанола (30 мл) и воды (10 мл), добавляли гидроксид лития (0,43 г, 18,6 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Добавляли 3 н. раствор хлористоводородной кислоты для доведения значения рН реакционного раствора до 2, смесь экстрагировали смесью дихлорметана и метанола (10/1) и полученную органическую фазу перегоняли при пониженном давлении с получением желтого соединения 22-2 (0,8 г). МС м/з (ИЭР): 169,1 [M+1].

[0359] На шаге 3: соединение 22-2 (0,8 г, 4,8 ммоль) растворяли в растворе тетрагирофурана (40 мл) и добавляли 2,5 М раствор н-бутиллития (0,8 мл, 10,6 ммоль) при -78°С и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли водный раствор хлорида натрия, смесь экстрагировали раствором этилацетата, полученную органическую фазу концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (петролейный эфир:этилацетат=1: 1) с получением соединения 22-3 (50 мг) с выходом 7%. МС м/з (ИЭР): 151,1 [M+1].

[0360] На шаге 4: соединение 1a (87 мг, 0,33 ммоль) растворяли в растворе 1,2-дихлорэтана (10 мл), добавляли соединение 22-3 (50 мг, 0,33 ммоль) и изопропоксид титана (0,5 мл) и реакционный раствор нагревали при 60°C с проведением реакции в течение ночи. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (26 мг, 0,66 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли воду, смесь фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии (препаративная колонка: колонка С18 21,2 × 250 мм; система: 10 мМ NH₄HCO₃H₂O; длины волн: 254/214 нм; градиенты: 30%-60% изменений в ацетонитриле) с получением соединения H-22 (2,27 мг) с выходом 1,7%. МС м/з (ИЭР): 395,1 [M+1]; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8,51 (д, J=4Гц, 1H), 7,70-7,68 (м, 1H), 7,45-7,43 (д, J=8 Гц, 1H), 7,29-7,27 (м, 1H), 7,19-7,16 (м, 1H), 5,68-5,60 (м, 1H), 3,92-3,89 (м, 1H), 3,58-3,56 (м, 2H), 2,51-2,50 (м, 1H), 2,46-2,42 (м, 2H), 1,95-1,74 (м, 5H), 1,64-1,48 (м, 5H), 1,46-1,36 (м, 4H), 1,31-1,29 (м, 2H), 1,22-1,20 (м, 5H).

[0361] Пример 23.

N-(2-((R)-9-(пиридин-2-ил)-6-оксаспиро[4.5]декан-9-ил)этил)-4’,5’-дигидроспиро[циклопропан-1,6’-пирроло[1,2-b]пиразол]-4’-амин (H-23)

[0362] На шаге 1: 1H-пиразол (6,8 г, 100 ммоль) растворяли в ДМФ (200 мл), добавляли трет-бутил-2-бромацетат (21,8 г, 120 ммоль) и карбонат калия (20,7 г, 150 ммоль), а реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Добавляли этилацетат (400 мл), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали органическую фазу при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (петролейный эфир:этилацетат=3: 2) с получением соединения 23-1 (7 г) с выходом 38%. МС м/з (ИЭР): 183,1 [M+1].

[0363] На шаге 2: соединение 23-1 (7 г, 38,5 ммоль) растворяли в растворе тетрагирофурана (200 мл), добавляли раствор LiHMD (1 М, 85 мл) при -78°C, реакционный раствор перемешивали при -78°C в течение 1 ч., добавляли 1,3-диоксатиолан-2,2-диоксид (4,77 г, 38,5 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли раствор хлорида аммония, смесь экстрагировали раствором этилацетата, полученную органическую фазу концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (петролейный эфир:этилацетат=1: 1) с получением соединения 23-2 (5,4 г) с выходом 67,5%. МС м/з (ИЭР): 209,1 [M+1].

[0364] На шаге 3: соединение 23-2 (5,4 г, 26 ммоль) растворяли в растворе тетрагидрофурана (100 мл), добавляли алюмогидрид лития (2,96 г, 78 ммоль) при 0°C и реакционный раствор перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли декагидрат сульфата натрия, реакционный раствор перемешивали в течение 30 мин. и фильтровали, полученный фильтрат концентрировали с получением твердого вещества. Твердое вещество очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (петролейный эфир:этилацетат=1: 1) с получением соединения 23-3 (2,2 г) с выходом 61%. МС м/з (ИЭР): 139,1 [M+1].

[0365] На шаге 4: соединение 23-3 (2,2 г, 16 ммоль) растворяли в растворе дихлорметана (100 мл), добавляли раствор триэтиламина (3,23 г, 32 ммоль) и раствор метансульфонилхлорида (2,76 г, 24 ммоль) при 0°С и реакционный раствор перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Добавляли раствор дихлорметана, затем промывали 3 н. раствором хлористоводородной кислоты, промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 23-4 (3 г, желтого твердого вещества). МС м/з (ИЭР): 217,1 [M+1].

[0366] На шаге 5: соединение 23-4 (1,5 г, 6,9 ммоль) растворяли в раствор ацетонитрила (20 мл) и добавляли цианид тетрабутиламмония (1,85 г, 6,9 ммоль) и карбонат калия (1,44 г, 10,4 ммоль). Реакционный раствор нагревали в микроволновых условиях при 120°С в течение 30 мин. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с использованием элюентов (петролейный эфир:этилацетат=1: 1) с получением соединения 23-5 (800 мг) с выходом 79%. МС м/з (ИЭР): 148,1 [M+1].

[0367] На шаге 6: соединение 23-5 (800 мг, 5,4 ммоль) растворяли в этанольном растворе (6 мл), добавляли раствор гидроксида калия (50%, 6 мл) и реакционный раствор перемешивали при 100°С в течение ночи. Добавляли 3 н. раствор хлористоводородной кислоты для доведения значения рН реакционного раствора до 2, смесь экстрагировали смесью дихлорметана и метанола (10/1), полученную органическую фазу перегоняли при пониженном давлении с получением желтого твердого вещества (500 мг). Желтое твердое вещество очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии с получением соединения 23-6 (150 г) с выходом 18,5%. МС м/з (ИЭР): 167,1 [M+1].

[0368] На шаге 7: соединение 23-6 (150 мг, 0,9 ммоль) растворяли в растворе тетрагирофурана (10 мл) и добавляли 2,5 М раствор н-бутиллития (0,8 мл, 10,6 ммоль) при -78°С и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли водный раствор хлорида натрия, смесь экстрагировали раствором этилацетата, а полученную органическую фазу концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 23-7. МС м/з (ИЭР): 149,1 [M+1].

[0369] На шаге 8: соединение 1a (35 мг, 0,14 ммоль) растворяли в растворе 1,2-дихлорэтана (4 мл), добавляли соединение 23-7 (20 мг, 0,14 ммоль) и изопропоксид титана (0,2 мл) и реакционный раствор нагревали при 60°C с проведением реакции в течение ночи. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры добавляли боргидрид натрия (11 мг, 0,28 ммоль) и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли воду, смесь фильтровали, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной жидкостной хроматографии с получением соединения H-23 (0,45 мг) с выходом 0,8%. МС м/з (ИЭР): 393,1 [M+1].

[0370] Биоанализ

[0371] Клеточные линии, используемые в следующих анализах, представляют собой клеточную линию β-аррестина PathHunter® CHO-K1 OPRM1 от DiscoverX, каталожный № 93-0213C2, партия № 13K0402.

[0372] Используемые реактивы, поставщики, каталожный номер и температура хранения указаны ниже:

[0373] Набор для клеточных культур Assay Complete™ 107, DiscoverX, 92-3107G, -20°C;

[0374] Реактив для оттаивания Assay Complete™, DiscoverX, 92-4002TR, -20°C;

[0375] Реактив для отделения клеток Assay Complete™, DiscoverX, 92-0009, -20°C;

[0376] Реактив для клеточного покрытия Assay Complete™, DiscoverX, 93-0563R2, -20°C;

[0377] Набор для обнаружения Pathhunter, DiscoverX, 93-0001, -20°C;

[0378] PBS (1×) 0,0067M (PO4), Hyclone, SH30256,01, 4°C;

[0379] ДМСО, Sigma, D5879-100ML, комнатная температура;

[0380] NKH477, Sigma, 1603, -20°C; и

[0381] IBMX, Tocris, I5879, -20°C.

[0382] Используемые инструменты, модели и поставщики указаны ниже:

[0383] Countsatr BioMed, IM1200, ALIT;

[0384] Микроскоп, IX51, OLYMPUS;

[0385] Центрифуга, 5804, Eppendorf;

[0386] Термостатическая водяная баня, DK-S420, Шанхайский завод термостатического оборудования Shenxian;

[0387] Клеточный инкубатор, 3111, Thermo;

[0388] Шкаф биологической безопасности BSC-1300IIA2, AIRTECH;

[0389] Белый непрозрачный материал OptiPlate-384, 6007290, Perkin Elmer;

[0390] Многорежимный считыватель планшетов Victor X5, PerkinElmer; и

[0391] Белый непрозрачный планшет для культивирования-384, обработанный TC, 6007680, PerkinElmer.

[0392] Пример испытания 1. Эксперимент с клетками HTRF-цАМФ

[0393] Экспериментальные способы и шаги

[0394] I. Реанимация клеток

[0395] 1. Раствор для реанимации доставали из холодильника при 4°С и предварительно прогревали над водяной баней при 37°С в течение 15 мин.

[0396] 2. Клетки поколения Р6 извлекали из контейнера с жидким азотом, пробирку для криоконсервации замороженных клеток сразу же помещали на водяную баню при 37°С и осторожно встряхивали в течение от 30 с до 1 мин. до появления мелких кристаллов льда или до полного оттаивания клеток.

[0397] 3. Пробирку для криоконсервации тщательно стерилизовали 70% спиртом и вытирали насухо.

[0398] 4. Клетки центрифугировали для удаления криопротектора и ресуспендировали в предварительно нагретом свежем растворе для реанимации.

[0399] а. 3 мл предварительно нагретого раствора для реанимации клеток отсасывали и помещали в центрифужную пробирку на 15 мл.

[0400] б. Клетки центрифугировали при 1300 об./мин. в течение 3 мин.

[0401] в. Удаляли надосадочную жидкость криопротектора, а клетки ресуспендировали с 4 мл предварительно нагретого реанимационного раствора.

[0402] 5. Клеточную суспензию переносили в колбу для культивирования клеток Т25 и культивировали с 5% CO₂ при 37°С в течение 24 ч.

[0403] 6. После культивирования клеток в течение 24 ч. реанимационный раствор в колбе для культивирования клеток заменяли на предварительно нагретую среду для культивирования клеток.

[0404] II. Субкультура клеток

[0405] 1. После того как плотность роста клеток в культуральной колбе T25 превышала 70%, клетки переваривали с помощью раствора для диссоциации клеток для пересева.

[0406] а. Среду из колбы для культивирования удаляли отсасыванием, добавляли 4 мл предварительно нагретого PBS, колбу для культивирования осторожно встряхивали, чтобы промыть клетки, и PBS удаляли отсасыванием.

[0407] б. 1 мл раствора для диссоциации клеток отсасывали и добавляли в колбу для культивирования Т25.

[0408] в. Колбу с культурой неоднократно встряхивали, чтобы раствор для диссоциации полностью покрыл культуральную колбу, и помещали в инкубатор с 5% CO₂ при 37°C на 5 мин.

[0409] г. Извлекали колбу с клеточной культурой и клетки наблюдали под микроскопом, чтобы увидеть, диссоциировали ли клетки.

[0410] д. Для прекращения переваривания добавляли 3 мл предварительно нагретой среды для культивирования клеток.

[0411] е. Колбу для культивирования клеток повторно осторожно промывали средой для культивирования клеток, собирали клеточную суспензию и помещали в центрифужную пробирку объемом 15 мл.

[0412] ж. Клетки центрифугировали при 1300 об./мин. в течение 3 мин. и удаляли надосадочную жидкость.

[0413] и. Клетки ресуспендировали с 3 мл среды для культивирования клеток.

[0414] 2. Пересев клеток проводили в соотношении 1: 3 (то есть 1 мл раствора для ресуспендирования клеток и 3 мл среды для культивирования клеток помещали в каждую колбу для культивирования клеток Т25).

[0415] III. Посев клеток в планшет

[0416] 1. Шаг 2.2.1 (от a до и) повторяли до тех пор, пока не были получены клетки поколения P8. Клетки подсчитывали и ресуспендировали с 2×/1 мМ буферного раствора для стимуляции IBMX до тех пор, пока плотность клеток не составила 1,2×10⁶ клеток/мл.

[0417] 2. Раствор клеток с плотностью 1,2×10⁶ клеток/мл инокулировали в 384-луночный планшет с помощью многоканальной пипетки по 10 мкл/лунку (т.е. 12000 клеток/лунку).

[0418] IV. Анализ ц-АМФ

[0419] 1. Получали соответствующие реагенты, а соединения получали в соответствии с таблицами получения растворов лекарственных средств.

[0420] а. 1× Буферный раствор для стимуляции: добавляли 1 мл исходного буферного раствора 5× для стимуляции и равномерно смешивали с 4 мл дистиллированной воды.

[0421] б. 2×/1 мМ буферного раствора для стимуляции IBMX (5 мл): 10 мкл исходного раствора IBMX с концентрацией 500 мМ добавляли к 4990 мкл среды для культивирования клеток и равномерно перемешивали путем осторожного пипетирования.

[0422] в. Таблица получения градиентного разведения для положительного лекарственного средства морфина:

Концентрация исходного раствора / мкМ Объем от высокой концентрации градиента (мкл) Объем буфера для стимуляции (мкл) Концентрация после разбавления / мкМ Объем образца, который необходимо добавить в 384-луночный планшет (мкл) Конечная концентрация реакции / мкМ 26606 - - - - - Градиенты 1 19 1330,3 - - 1) 2 104,4 25 8 10,0000 2) 20 40 8,3333 8 3,3333 3) 20 40 2,7778 8 1,1111 4) 20 40 0,9259 8 0,3704 5) 20 40 0,3086 8 0,1235 6) 20 40 0,1029 8 0,0412 7) 20 40 0,0343 8 0,0137 8) 20 40 0,0114 8 0,0046 9) 20 40 0,0038 8 0,0015 10) 20 40 0,0013 8 0,0005 11) 20 40 0,0004 8 0,0002

[0423] г. Перед разбавлением соединение растворяли в ДМСО до концентрации при хранении 10 мМ.

[0424] Таблица подготовки разведения для положительного лекарственного средства TRV130 и различных соединений:

Концентрация исходного раствора / мкМ Объем от высокой концентрации градиента (мкл) Объем буфера для стимуляции (мкл) Концентрация после разбавления / мкМ Объем образца, который необходимо добавить в 384-луночный планшет (мкл) Конечная концентрация реакции / мкМ 10000 - - - - - 1) 1 399 25 8 10,0000 2) 20 40 8,3333 8 3,3333 3) 20 40 2,7778 8 1,1111 4) 20 40 0,9259 8 0,3704 5) 20 40 0,3086 8 0,1235 6) 20 40 0,1029 8 0,0412 7) 20 40 0,0343 8 0,0137 8) 20 40 0,0114 8 0,0046 9) 20 40 0,0038 8 0,0015 10) 20 40 0,0013 8 0,0005 11) 20 40 0,0004 8 0,0002

[0425] e. 50 мкМ NK477 (1 мл): 1 мкл 50 мМ исходного раствора NKH477 добавляли к 999 мкл 1× буферного раствора для стимуляции и однородно перемешивали встряхиванием.

[0426] Реагенты для обнаружения

[0427] A. Реакционный раствор цАМФ-криптата (донорный, лиофилизированный): 1 мл исходного раствора 5× цАМФ-криптат добавляли к 4 мл 1× буферного раствора для лизиса и обнаружения и аккуратно перемешивали до однородности.

[0428] Б. Реакционный раствор анти-цАМФ-d2 (акцепторный, лиофилизированный): 1 мл исходного раствора 5× анти-цАМФ-d2 добавляли к 4 мл 1× буферного раствора для лизиса и обнаружения и аккуратно перемешивали до однородности.

[0429] 2. Шаги анализа цАМФ

[0430] а. 12000 клеток инокулировали в каждую лунку, содержащую 10 мкл 2× буферного раствора для стимуляции IBMX.

[0431] б. К клеткам в каждую лунку добавляли по 8 мкл разбавленного раствора образца соединения.

[0432] в. В каждую лунку добавляли по 2 мкл приготовленного 10× раствора NKH477.

[0433] г. Клетки инкубировали при 37°С в течение 45 мин.

[0434] д. Добавляли 10 мкл цАМФ-d2 и 10 мкл реакционного раствора анти-цАМФ-криптата.

[0435] е. Клетки инкубировали в темноте при комнатной температуре в течение 60 мин.

[0436] ж. Планшет с клеточной культурой считывали с помощью HTRF.

[0437] 3. Обнаружение RFU и считывание планшета

[0438] После инкубации клеток в течение 60 мин. планшет со всеми образцами подвергали обнаружению и считывали по гомогенной флуоресценции с временным разрешением.

[0439] Анализ данных

[0440] Данные, которые включали два значения сигнала соответственно при 665 нм и 620 нм, экспортировали из соответствующего программного обеспечения на компьютер, подключенный к многорежимному считывателю планшетов. Формула расчета отношения была следующей: отношение=значение сигнала при 665 нм/значение сигнала при 620 нм×10000. Данные анализировали с помощью программного обеспечения GraphPad Prism. Наилучшей подходящей кривой был логарифм (агонист) против ответа. Значения EC50 соединений определяли с помощью нелинейного регрессионного анализа компьютерных кривых доза-ответ; PEC50=-logEC50 (единицей значений EC50 был моль); % максимального значения эффекта морфина = (соотношение образцов соединения - соотношение холостых лунок)/TOP×100 (примечание: TOP представляет собой верхнее значение кривой соотношения образцов морфина и холостых лунок, которое было проанализировано и подобрано с использованием программного обеспечения Graphpad Prism). Результаты представлены в таблице 1.

[0441] Таблица 1 Активность соединений в отношении цАМФ

Соединение цАМФ
EC₅₀ (нM) цАМФ
Emax (%)
Морфин составлял 100% Соединение цАМФ
EC₅₀ (нM) цАМФ
Emax
Морфин составлял 100% H-1 49 124,6 H-2 47 93,2 H-3 17 74,6 H-4-1 8 64,1 H-4-2 18 91,8 H-6 9 99,6 H-7 29 104,6 H-10 11 74,7 H-11 15 84,8 H-12-1 12 99,5 H-12-2 12 77,8 H-14 31 73 H-15 84 64,9 H-17 31 68,6 H-18 68 89,1 H-19 21 94,1 H-20 4 107 H-21 22 70,8 H-22 11 104

[0442] Пример испытания 2. Эксперимент с клетками β-аррестина

[0443]Экспериментальный способ и шаги

[0444] I. Реанимация клеток

[0445] 1. Раствор для реанимации доставали из холодильника при 4°С и предварительно прогревали на водяной баней при 37°С в течение 15 мин.

[0446] 2. Клетки поколения Р6 извлекали из контейнера с жидким азотом, пробирку для культивирования замороженных клеток сразу же помещали на водяную баню при 37°С и осторожно встряхивали в течение от 30 с до 1 мин. до появления мелких кристаллов льда или до полного оттаивания клеток.

[0447] 3. Пробирку для культивирования тщательно стерилизовали 70% спиртом и вытирали насухо.

[0448] 4. Клетки центрифугировали для удаления криопротектора и ресуспендировали в предварительно нагретом свежем растворе для реанимации.

[0449] а. 3 мл предварительно нагретого раствора для реанимации клеток отсасывали и помещали в центрифужную пробирку на 15 мл.

[0450] б. Клетки центрифугировали при 1300 об./мин. в течение 3 мин.

[0451] в. Удаляли надосадочную жидкость, а клетки ресуспендировали с 4 мл предварительно нагретого раствора для реанимации.

[0452] 5. Клеточную суспензию переносили в колбу для культивирования клеток Т25 и культивировали с 5% CO₂ при 37°С в течение 24 ч.

[0453] 6. После культивирования клеток в течение 24 ч. реанимационный раствор в колбе для культивирования клеток заменяли на предварительно нагретую среду для культивирования клеток.

[0454] II. Субкультура клеток

[0455] 1. После того как плотность роста клеток в культуральной колбе T25 превышала 70%, клетки переваривали с помощью раствора для диссоциации клеток для пересева.

[0456] а. Среду из колбы для культивирования удаляли отсасыванием, добавляли 4 мл предварительно нагретого PBS, колбу для культивирования осторожно встряхивали, чтобы промыть клетки, и PBS удаляли отсасыванием.

[0457] б. 1 мл раствора для диссоциации клеток отсасывали и добавляли в колбу для культивирования Т25.

[0458] в. Колбу с культурой неоднократно встряхивали, чтобы раствор для диссоциации полностью покрыл культуральную колбу, и помещали в инкубатор с 5% CO₂ при 37°C на 5 мин.

[0459] г. Извлекали колбу с клеточной культурой и клетки наблюдали под микроскопом, чтобы увидеть, диссоциировали ли клетки.

[0460] д. Для прекращения переваривания добавляли 3 мл предварительно нагретой среды для культивирования клеток.

[0461] е. Колбу для культивирования клеток повторно осторожно промывали средой для культивирования клеток, клеточную суспензию окончательно переносили в центрифужную пробирку объемом 15 мл.

[0462] ж. Клетки центрифугировали при 1300 об./мин. в течение 3 мин. и удаляли надосадочную жидкость.

[0463] и. Клетки ресуспендировали с 3 мл среды для культивирования клеток.

[0464] 2. Пересев клеток проводили в соотношении 1: 3 (то есть 1 мл раствора для ресуспендирования клеток и 3 мл среды для культивирования клеток помещали в каждую колбу для культивирования клеток Т25).

[0465] 3. Шаг 2.2.1 (от a до и) повторяли до тех пор, пока не были получены клетки поколения P8.

[0466] III. Посев клеток в планшет

[0467] 1. Пипеткой отбирали 20 мкл клеточной суспензии и измеряли количество клеток с помощью счетчика для клеток.

[0468] 2. Клетки центрифугировали при 1300 об./мин. в течение 3 мин. для осаждения клеток.

[0469] 3. Удаляли надосадочную жидкость и добавляли соответствующий раствор для культивирования клеток до тех пор, пока плотность клеток не составляла 2×10⁵ клеток/мл.

[0470] 4. Раствор клеток с плотностью 2×10⁵ клеток/мл инокулировали в 384-луночный планшет с помощью многоканальной пипетки по 20 мкл/лунку (т.е. 4 000 клеток/лунку).

[0471] 5. Засеянный клетками 384-луночный планшет помещали в инкубатор с 5% СО₂ при 37°С на 24 ч.

[0472] IV. Анализ β-аррестина

[0473] 1. Соединения получали в соответствии со следующими таблицами разведения.

[0474] а. Таблица получения градиентного разведения для положительного лекарственного средства морфина:

Концентрация исходного раствора / мкМ Объем от высокой концентрации градиента (мкл) Объем добавленного буфера для посева (мкл) Объем добавленного ДМСО (мкл) Концентрация после разбавления / мкМ Объем образца, который необходимо добавить в 384-луночный планшет (мкл) Конечная концентрация реакции / мкМ 26606 - - - - - - Подготовка 2 18 0 2660,6 - - A 2 101,763 2,661 50,000 5 10,000 Б 20 39 1 16,667 5 3,333 В 20 39 1 5,556 5 1,111 Г 20 39 1 1,852 5 0,370 Д 20 39 1 0,617 5 0,123 Е 20 39 1 0,206 5 0,041 Ж 20 39 1 0,069 5 0,014 И 20 39 1 0,023 5 0,005

[0475] б. Перед разбавлением соединение растворяли в ДМСО до концентрации при хранении 10 мМ.

[0476] Таблица подготовки разведения для положительного лекарственного средства TRV130 и различных соединений:

Концентрация исходного раствора / мкМ Объем от высокой концентрации градиента (мкл) Объем добавленного ДМСО (мкл) Концентрация после разбавления / мкМ Объем разбавленного раствора (мкл) Объем добавленного буфера для посева (мкл) Конечная концентрация разбавленного раствора / мкМ Объем образца, который необходимо добавить в 384-луночный планшет (мкл) Конечная концентрация реакции / мкМ 10000 - - - - - - - - A 12,5 50 2000 2,5 97,5 50,000 5 10,000 Б 20 40 666,667 2,5 97,5 16,667 5 3,333 В 20 40 222,222 2,5 97,5 5,556 5 1,111 Г 20 40 74,074 2,5 97,5 1,852 5 0,370 Д 20 40 24,691 2,5 97,5 0,617 5 0,123 Е 20 40 8,230 2,5 97,5 0,206 5 0,041 Ж 20 40 2,743 2,5 97,5 0,069 5 0,014 И 20 40 0,914 2,5 97,5 0,023 5 0,005

[0477] 2. В 384-луночный планшет добавляли по 5 мкл разбавленного раствора образца соединения.

[0478] 3. После добавления образцов 384-луночный планшет помещали в инкубатор с 5% СО₂ при 37°С на 90 мин.

[0479] V. Определение RLU

[0480] 1. Перед завершением инкубации соединения готовили рабочий раствор для обнаружения (в темноте) в соответствии со следующим соотношением. Затем в каждую лунку добавляли по 12,5 мкл рабочего раствора для обнаружения и клетки инкубировали со встряхиванием в темноте при комнатной температуре в течение 1 ч.

[0481]

Ингредиенты Соотношение Буфер для клеточного анализа 19 Реагент для субстрата 1 5 Реагент для субстрата 2 1 Общий объем 25

[0482] 2. После окончания инкубации соединения в каждую лунку добавляли по 12,5 мкл указанного выше рабочего раствора и клетки инкубировали со встряхиванием в темноте при комнатной температуре и 80 об./мин. в течение 1 ч.

[0483] 3. После завершения инкубации планшет считывали с помощью многорежимного считывателя планшетов.

[0484] Анализ данных

[0485] Данные экспортировали из соответствующего программного обеспечения на компьютер, подключенный к многорежимному считывателю планшетов, и анализировали с использованием программного обеспечения GraphPad Prism. Наилучшей подходящей кривой был логарифм (агонист) против ответа. Значения EC50 соединений определяли с помощью нелинейного регрессионного анализа компьютерных кривых доза-ответ; PEC50=-logEC50 (единицей значений EC50 был моль); % максимального значения эффекта морфина = (значение RLU пробы соединения - значение RLU пустой лунки)/TOP×100 (примечание: TOP представляет собой верхнее значение кривой отношения значения RLU образца морфина к значению RLU пустой лунки, которое анализировали и подбирали с использованием программного обеспечения Graphpad Prism). Результаты представлены в таблице 2.

[0486] Таблица 2. Результаты испытаний соединений на β-аррестине

Соединение β-аррестин
Emax (%)
Морфин составлял 100% Соединение β-аррестин
Emax (%)
Морфин составлял 100% H-1 29,7 H-2 6,2 H-3 4,9 H-4-1 1,8 H-4-2 4,8 H-5 4,8 H-6 15,3 H-7 22,1 H-9 1,0 H-10 5,1 H-11 4,3 H-12-1 12 H-12-2 15,7 H-14 7,2 H-17 2,6 H-19 17,3 H-21 8,0 H-22 39,9

[0487] Из Таблицы 1 и Таблицы 2 видно, что репрезентативные соединения по настоящему раскрытию обладают высокой ингибирующей активностью в отношении цАМФ и имеют высокие значения Emax. Кроме того, соединения по настоящему раскрытию имеют небольшие значения Emax по отношению к β-аррестину и имеют хорошую погрешность измерения.

[0488] Все документы, упомянутые в настоящем раскрытии, включены в настоящее раскрытие посредством ссылки, как если бы каждый документ был отдельно включен посредством ссылки. Кроме того, следует понимать, что после ознакомления с приведенным выше обучающим содержанием настоящего раскрытия специалисты в данной области техники могут вносить различные изменения или модификации в настоящее раскрытие, и эти эквивалентные формы также подпадают под объем, определяемый прилагаемой формулой настоящего раскрытия.

Изобретение относится к соединению, представленному в формуле (I), или к его фармацевтически приемлемой соли, диастереомеру, рацемату или смеси диастереомеров, где кольцо А представляет собой пиридин-2-ил; (R₀)_n означает, что атомы водорода в кольце А замещены n группами R₀, где n представляет собой 0; Y₁ представляет собой N; Y₂ представляет собой связь; Y₁ непосредственно связан с N; Y₃ представляет собой CR₃; Y₄ представляет собой CR₄; R₃ и R₄ независимо представляют собой водород или галоген; W представляет собой СН₂; R_a, R_b, R_c и R_d определяются следующим образом: (i) каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород или C_1-8 алкил; или R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо; R_c представляет собой водород, галоген, С_1-8 алкил, C_1-8 алкоксил или галогенированный C_1-8 алкил; или R_d представляет собой водород или C_1-8 алкил; или (ii) каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород; или R_c связан с R_d с образованием трех-шестичленного насыщенного моноциклического кольца или четырех-шестичленного насыщенного моногетероциклического кольца, где гетероатом в четырех-шестичленном насыщенном моногетероциклическом кольце является О или N; и m представляет собой 0 или 1. Изобретение также относится к промежуточным соединениям формулы (I-2б). Технический результат – получены новые соединения, которые могут найти применение в медицине в качестве терапевтических средств для лечения и предупреждения боли и заболеваний, связанных с болью. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 2 табл., 23 пр.

1. Соединение, представленное в формуле (I), или его фармацевтически приемлемая соль, диастереомер, рацемат, или смесь диастереомеров:

где кольцо А представляет собой пиридин-2-ил;

(R₀)_n означает, что атомы водорода в кольце А замещены n группами R₀, где n представляет собой 0;

Y₁ представляет собой N;

Y₂ представляет собой связь;

Y₁ непосредственно связан с N;

Y₃ представляет собой CR₃;

Y₄ представляет собой CR₄;

R₃ и R₄ независимо представляют собой водород или галоген;

W представляет собой СН₂;

R_a, R_b, R_c и R_d определяются следующим образом:

(i) каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород или C_1-8 алкил; или R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо;

R_c представляет собой водород, галоген, С_1-8 алкил, C_1-8 алкоксил или галогенированный C_1-8 алкил; или

R_d представляет собой водород или C_1-8 алкил; или

(ii) каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород; или

R_c связан с R_d с образованием трех-шестичленного насыщенного моноциклического кольца или четырех-шестичленного насыщенного моногетероциклического кольца, где гетероатом в четырех-шестичленном насыщенном моногетероциклическом кольце является О или N; и

m представляет собой 0 или 1.

2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, диастереомер, рацемат или смесь диастереомеров по п. 1, где

представляет собой

где кольцо A, R₀ и n определены в п. 1.

3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, диастереомер, рацемат или смесь диастереомеров по п. 1, причем соединение, представленное в формуле (I), имеет структуру, представленную формулой (II)

где Z представляет собой N;

(R₀)_n означает, что атомы водорода в шестичленном кольце замещены n группами R₀, где n представляет собой 0;

каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород или С_1-4 алкил; или R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо;

R_c представляет собой водород, галоген, C_1-4 алкил, C_1-4 алкоксил или галогенированный С_1-4 алкил; и

Y₁, Y₂, Y₃, Y₄ и m определены в п. 1.

4. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, диастереомер, рацемат или смесь диастереомеров по п. 1, где Y₃ представляет собой СН и Y₄ представляет собой СН.

5. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, диастереомер, рацемат, или смесь диастереомеров по п. 1, где m представляет собой 1.

6. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, диастереомер, рацемат или смесь диастереомеров по п. 3, где соединение, представленное в формуле (II), имеет структуру, представленную формулой (III)

7. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, диастереомер, рацемат или смесь диастереомеров по п. 1, где каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород или С_1-3 алкил или R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо.

8. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, диастереомер, рацемат или смесь диастереомеров по п. 1, где R_c представляет собой водород, галоген, C_1-3 алкил, C_1-3 алкоксил или галогенированный C_1-3 алкил.

9. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, диастереомер, рацемат или смесь диастереомеров по п. 1, где соединение выбрано из группы, состоящей из:

10. Промежуточное соединение производного пирролопиразола, замещенного по оксаспироциклическому кольцу, причем промежуточное соединение имеет структуру, представленную формулой (I-2б)

(I-2б),

где R_a, R_b, R_c и R_d определены следующим образом:

(i) R_a и R_b, каждый, независимо друг от друга представляют собой водород или C_1-8 алкил; или R_a и R_b вместе с атомом углерода, к которому они привязаны, образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо;

R_c представляет собой водород, галоген, C_1-8 алкил, C_1-8 алкоксил или галогенированный C_1-8 алкил; а

R_d представляет собой водород или C_1-8 алкил; или

(ii) R_a и R_b, каждый, независимо друг от друга представляют собой водород; и

R_c связан с R_d, образуя трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо или четырех-шестичленное насыщенное моногетероциклическое кольцо, при этом гетероатом в четырех-шестичленном насыщенном моногетероциклическом кольце является О или N; и

m равно 0 или 1;

при этом, когда m равно 0 и одно из значений R_c и R_d является водородом, другое значение R_c и R_d не является водородом.

11. Промежуточное соединение по п. 10, причем соединение, представленное в формуле (I-2б), имеет структуру, представленную формулой (I-2а)

где R_a, R_b и R_c являются такими, как определено в п. 10.

12. Промежуточное соединение по п. 10, где каждый из R_a и R_b независимо представляет собой водород или C_1-3 алкил; или R_a и R_b вместе со связанным с ними атомом углерода образуют трех-шестичленное насыщенное моноциклическое кольцо.

13. Промежуточное соединение по п. 10, где R_c представляет собой водород, галоген, C_1-3 алкил, C_1-3 алкоксил или галогенированный C_1-3 алкил.

14. Промежуточное соединение по п. 10, причем соединение, представленное в формуле (I-2б), выбрано из группы, состоящей из следующих структур: