ИНГИБИТОР RET ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ЛЕЧЕНИИ РАКА, ИМЕЮЩЕГО RET-АЛЬТЕРАЦИЮ Российский патент 2023 года по МПК A61K31/506 A61P35/00 

Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно предварительной заявке на патент США No. 62/652284, поданной 3 апреля 2018 г., предварительной заявке на патент США No. 62/656297, поданной 11 апреля 2018 г., предварительной заявке на патент США No. 62/657605, поданной 13 апреля 2018 г., и предварительной заявке на патент США No. 62/741683, поданной 5 октября 2018 г., содержание которых полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

Настоящее раскрытие относится к способам лечения субъекта, страдающего раком, имеющим активирующую RET альтерацию, путем введения эффективного количества селективного ингибитора RET, то есть соединения, которое специально разработано для селективного нацеливания на одну или несколько RET или RET-измененных киназ. Как используется в настоящем описании, термин «страдающий раком» означает наличие рака. Другими словами, субъект, страдающий раком, имеет рак. Более конкретно, описанные в настоящем документе способы относятся к лечению субъекта, страдающего раком, характеризующимся активирующей RET-альтерацией. В некоторых вариантах осуществления селективный ингибитор RET представляет собой соединение 1 или его фармацевтически приемлемые соли. В некоторых вариантах осуществления, селективный ингибитор RET вводят один раз в день. В некоторых вариантах осуществления, эффективное количество составляет от 60 мг до 400 мг, от 100 мг до 400 мг, 300 мг или 400 мг. В некоторых вариантах осуществления, эффективное количество составляет от 60 мг до 400 мг, от 100 мг до 400 мг, 300 мг или 400 мг, вводимого один раз в день. В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой RET-альтерированную солидную опухоль, RET-альтерированный немелкоклеточный рак легкого или RET-альтерированный рак щитовидной железы. В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой рак мозга, где рак мозга связан с немелкоклеточным раком легкого. Настоящее раскрытие также относится к способам лечения RET-альтерированного рака путем введения физиологически эффективной дозы селективного ингибитора RET, которая вызывает устойчивую даун-регуляцию по меньшей мере одного маркера эффекта.

Рецепторная тирозинкиназа (RTK) RET, наряду с нейротрофическими факторами глиальной клеточной линии (GDNF) и рецепторами семейства GDNF-α (GFRα), необходима для развития, созревания и поддержания нескольких типов нервных, нейроэндокринных и мочеполовых тканей. Однако все больше доказательств указывает на аберрантную активацию RET как критического фактора роста и пролиферации опухоли в большом количестве солидных опухолей (Mulligan LM., Nat. Rev. Cancer. 14: 173-186 (2014)). Онкогенная активация RET происходит посредством усиления функциональной мутации или реаранжировки гена RET, что приводит к продукции слитого белка RET с конститутивно активной передачей сигналов RET, которая способствует лиганд-независимому росту опухоли. Онкогенная активация RET была первоначально описана при наследственном и спорадическом раке щитовидной железы, а затем и при немелкоклеточном раке легкого (NSCLC).

Онкогенные реаранжировки RET выявлены в 1-2% случаев NSCLC (Lipson, D. et al., Nat. Med. 18: 382-384 (2012); Takeuchi, K. et al., Nat. Med. 18: 378-381 (2012); Stransky, N. et al., Nat. Commun. 5: 4846 (2014)). Это создает конститутивно активную киназу, которая способствует онкогенезу. Как и в случае киназы анапластической лимфомы (ALK) и c-ros онкоген (ROS) 1-реаранжированный NSCLC, RET-реаранжированный NSCLC обычно имеет гистологию аденокарциномы (хотя иногда и плоскоклеточную) и встречается у молодых некурящих пациентов. Поскольку диагностическое исследование на RET не является стандартом лечения, пациенты с реаранжировкой RET с распространенным NSCLC проходят лечение в соответствии с рекомендациями NCCN для рецептор эпидермального фактора роста (EGFR-) и ALK-негативной аденокарциномы. Обычно это включает химиотерапию с использованием платинового дуплета или, в последнее время, с ингибитором контрольной точки, однако клинический ответ и общая выживаемость, особенно при RET-реаранжированном NSCLC с этими средствами, недостаточно изучены. Последующая терапия помимо химиотерапии и ингибиторов контрольных точек для рефрактерных пациентов в соответствии с рекомендациями NCCN является лучшей поддерживающей терапией или клиническим исследованием.

Первоначальные отчеты о случаях и неконтролируемые исследования с применением мультикиназных ингибиторов RET (MKI) кабозантиниба, вандетаниба, сорафениба и алектиниба у пациентов с известным RET-реаранжированным NSCLC продемонстрировали клиническую активность, что позволяет предположить, что RET может быть валидированной мишенью в NSCLC. Хотя в этих ранних исследованиях наблюдали обнадеживающие показатели ответа (~12%-60%) (Horiike A et al., Lung Cancer 93: 43-6 (Mar. 2016); Lin JJ et al., J Thorac Oncol. 11 (11): 2027-32 (Nov. 2016); Gautshi О et al., J Clin Oncol. 34 (suppl; abstr 9014) (2016)) продолжительность ответа обычно составляет менее года. Лечение MKI было связано со значительной токсичностью, требующей приостановки лечения и/или модификации дозы, что, вероятно, ограничивало воздействия, необходимые для эффективного ингибирования RET.

Онкогенная активация RET также связана с раком щитовидной железы. Рак щитовидной железы состоит в основном из дифференцированного рака щитовидной железы (DTC; ~90% случаев), медуллярного рака щитовидной железы (МТС; ~5% случаев) и анапластического рака щитовидной железы (<5% случаев). DTC спорадически возникает из фолликулярных клеток щитовидной железы и состоит из папиллярного рака щитовидной железы (РТС) (~80% всех случаев рака щитовидной железы) и фолликулярного рака щитовидной железы. Напротив, МТС возникает из парафолликулярных С-клеток и встречается как в наследственных, так и в спорадических формах. Онкогенная активация RET является движущей силой как в МТС, так и в РТС.

Рекуррентные реаранжировки генов с участием RET и гена, кодирующего домен димеризации, были идентифицированы примерно в 5%-20% спорадических папиллярных опухолей у взрослых. Активирующие киназу мутации RET встречаются почти во всех случаях наследственного МТС (87%-97%) (Machens A et al., N Engl J Med 349: 1517-25 (2003); Mulligan LM et al., Nature 363 (6428): 458-60 (1993 Jun 3); Mulligan LM et al., J Int Med. 238 (4): 343-346 (1995)) и примерно в 43%-65% случаев спорадического МТС (Elisei R. et al., J Clin Endocrinol Metab. 93: 682-687 (2008); Moura MM et al., British Journal of Cancer 100: 1777-1783 (2009)). Эти мутации RET происходят во внеклеточном домене (в основном в положении С634), которые способствуют лиганд-независимой димеризации и активации RET, и мутациям в киназных доменах (в первую очередь М918Т, A883F или V804L/M), которые способствуют аутоактивации RET и последующей онкогенной передаче сигналов (Romei С et al., Nat Rev Endocrinol. 12(4): 192-202 (2016 Apr.)).

PTC и МТС лечат хирургическим путем при локализации (Fagin JA & Wells SA Jr., N Engl J Med. 375(11): 1054-67 (2016 Sep 15)). Абляционная терапия радиоактивным йодом (RAI) эффективна у пациентов с рецидивом РТС; однако пациенты в конечном итоге становятся невосприимчивыми к RAI. Поскольку МТС возникает из фолликулярных С-клеток, RAI не эффективен. При прогрессировании RAI-рефрактерные РТС и МТС плохо поддаются химиотерапии, и системное лечение низкомолекулярным MKI является стандартом лечения для обоих. Сорафениб и ленватиниб являются одобренными MKI для прогрессирующего и/или симптоматического RAI-рефрактерного ПТК. Кабозантиниб и вандетаниб являются одобренными MKI для распространенного МТС и используются независимо от мутационного статуса RET. MKI, используемые для лечения рака щитовидной железы, обладают широкой активностью в отношении многих киназ (например, RAF, MET, EGFR, VEGFR1-3, PDGFR, RET и другие) И связаны со значительными дерматологическими, сердечно-сосудистыми и желудочно-кишечными побочными эффектами. Поэтому, National Clinical Practice Guidelines in Oncology от National Comprehensive Cancer Network (доступно по адресу https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/f_guidelines.asp) рекомендуют тщательный мониторинг и приостановку лечения и/или модификацию дозы в случае побочных эффектов, связанных с препаратами, с этими лекарственными средствами. Для пациентов с прогрессированием заболевания на фоне терапии MKI или непереносимостью MKI не существует эффективных методов лечения, и в руководствах NCCN рекомендуется участие в клинических исследованиях.

Учитывая убедительные генетические и преклинические данные о том, что активированный RET является причиной онкогенного заболевания, отсутствие доступных селективных ингибиторов RET и плохой прогноз для многих пациентов с RET-альтерированными опухолями, сохраняется необходимость в определении диапазонов и режимов дозирования с надлежащей безопасностью, воздействием и переносимостью селективных ингибиторов RET для лечения RET-альтерированного рака.

Низкомолекулярные соединения, которые селективно ингибируют RET, являются желательными средствами для лечения рака, имеющего активирующую RET альтерацию. Одна малая молекула представляет собой (1S,4R)-N-((S)-1-(6-(4-фтор-1Н-пиразол-1-ил)пиридин-3-ил)этил)-1-метокси-4-(4-метил-6-((5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино)пиримидин-2-ил)циклогексанкарбоксамид (Соединение 1). Соединение 1 имеет химическую структуру:

В марте 2017 г. соединение 1 (также известное как BLU-667) вошло в фазу I клинических испытаний в США для лечения пациентов с раком щитовидной железы, немелкоклеточным раком легкого и другими распространенными солидными опухолями (NCT03037385). В WO 2017/079140, включенной в настоящий документ посредством ссылки, описан синтез соединения 1 (пример соединения 130), а также описана терапевтическая активность этой молекулы для ингибирования, регулирования и/или модуляции киназы RET (анализы, пример 10 на стр. 72-74.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

Фиг. 1А, 1В и 1С представляют собой серию гистограмм, которые показывают влияние соединения 1 на экспрессию DUSP6 и SPRY4 в LC2/ad (фиг. 1А), MZ-CRC-1 (фиг. 1В), и ТТ (фиг. 1С) клетках.

Фиг. 2 представляет собой гистограмму, которая показывает устойчивое снижение экспрессии генов-мишеней МАРК DUSP6 и SPRY4 в модели KIF5B-RET NSCLC PDX.

Фиг. 3 представляет собой график, который демонстрирует противоопухолевую активность соединения 1 in vivo на модели опухоли устойчивой к кабозантинибу, полученной из сконструированной клеточной линии KIF5B-RET V804L.

Фиг. 4А представляет собой график, который показывает размер опухоли и снижение уровней кальцитонина и СЕА (карциноэмбриональный антиген) в ходе лечения соединением 1. Пациент с RET-мутантным МТС (RET L629P, D631_R635DELINSG, V637R МТС) получал лечение 60 мг один раз в день, и затем последовательно повышали дозу до 300 мг один раз в день. Фиг. 4В представляет собой снимки компьютерной томографии того же пациента с RET-мутантным МТС, показанного на фиг. 4А, на исходном уровне (верхний) и после 8 недель лечения соединением 1 (нижний), демонстрирующие быстрое снижение роста опухоли. Фиг. 4С представляет собой график, который показывает размер опухоли и снижение уровней кальцитонина и СЕА у пациента с RET М918Т-мутантным МТС в течение курса лечения соединением 1 в дозе 300 мг один раз в день. Фиг. 4D представляет собой снимки компьютерной томографии пациента с RET М918Т-мутацией из фиг. 4С, опухоль на исходном уровне (верхний) и после 24 недель лечения соединением 1 (нижний). Фиг. 4Е представляет собой график, который показывает анализ ctDNA уровней RET М918Т в плазме от пациента с МТС во время лечения. Биопсия опухоли до и после лечения выявила снижение DUSP6 на 93% и снижение экспрессии мРНК SPRY4 на 86% после 28 дней лечения соединением 1.

Фиг. 5А представляет собой график, который показывает уменьшение опухоли легких и KIF5B-RET и ТР53 цоДНК в ходе лечения 200 мг соединения 1 один раз в день; фиг. 5В представляет собой снимки компьютерной томографии, которые иллюстрирует опухоль на исходном уровне (верхний) и после 32 недель лечения соединением 1 (нижний).

Фиг. 6А представляет собой график, показывающий среднюю концентрацию в плазме (нг/мл) в зависимости от времени (ч); фиг. 6В представляет собой гистограмму, которая показывает процентное изменение средних уровней экспрессии генов DUSP6 и SPRY4 от исходного уровня.

Фиг. 7А представляет собой гистограмму, которая показывает дозозависимое снижение СЕА у пациентов, измеренное во время цикла 2, день 1. Фиг. 7В представляет собой гистограмму, которая показывает дозозависимое снижение кальцитонина у пациентов, измеренное во время цикла 2, день 1.

Фиг. 8 представляет собой каскадную диаграмму, которая показывает максимальное уменьшение опухоли - сумму изменения диаметра по сравнению с исходным процентом - у пациентов в клиническом исследовании фазы I. Прекращение сбора данных: 6 апреля 2018 г.

Фиг. 9А представляет собой снимок компьютерной томографии головного мозга на исходном уровне до лечения соединением 1. Фиг. 9В представляет собой снимок компьютерной томографии головного мозга после 8 недель лечения соединением 1.

Фиг. 10 представляет собой диаграмму, показывающую частоту ответа пациента при RET-альтерированном NSCLC. Прекращение сбора данных: 6 апреля 2018 г.

Фиг. 11А представляет собой снимок компьютерной томографии на исходном уровне до лечения соединением 1. Фиг. 11В представляет собой снимок компьютерной томографии после 8 недель лечения соединением 1. Фиг. 11С представляет собой снимок компьютерной томографии на исходном уровне до лечения соединением 1. Фиг. 11D представляет собой снимок компьютерной томографии после 8 недель лечения соединением 1.

Фиг. 12 представляет собой график, который показывает, что частота ответа у пациентов с медуллярным раком щитовидной железы увеличивается с дозой и продолжительностью терапии. В частности, на графике показана частота ответа на дозирование Соединения 1 при дозе от 60 до 200 мг один раз в день и 300/400 мг один раз в день в течение периода от 8 до 24+ недель.

Фиг. 13 представляет собой снимок компьютерной томографии на исходном уровне (BSL) и после 5 месяцев лечения соединением 1 в дозе 400 мг один раз в день.

Сокращения и определения

Следующие сокращения и термины по всему документу обозначают указанные значения:

«Соединение 1» представляет собой (1S,4R)-N-((S)-1-(6-(4-фтор-1Н-пиразол-1-ил)пиридин-3-ил)этил)-1-метокси-4-(4-метил-6-((5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино)пиримидин-2-ил)циклогексанкарбоксамид:

Как используется в настоящем описании, "DOR" означает продолжительность ответа.

Как используется в настоящем описании, "PD" означает прогрессирование заболевания.

Как используется в настоящем описании, "SD" означает стабильное заболевание.

Как используется в настоящем описании, "CR" означает полный ответ.

Как используется в настоящем описании, "ORR" означает частоту общего ответа.

Как используется в настоящем описании, "CBR" означает частоту клинической эффективности.

Как используется в настоящем описании, "PFS" означает выживаемость без прогрессирования.

Как используется в настоящем описании, «слияние» представляет собой белок, который возникает в результате хромосомной транслокации, при которой два гена соединяются с помощью кодирующей последовательности внутри рамки и в результате образуется химерный белок. В некоторых вариантах осуществления, слияние представляет собой хромосомную транслокацию, при которой киназный домен одного белка сливается с доменом димеризации другого гена.

Как используется в настоящем описании, «RET-альтерированный рак» представляет собой рак, имеющий активирующую реаранжированную во время трансфекции (RET) альтерацию, которая запускает онкогенез. Неограничивающие примеры активирующих RET альтераций включают мутации, слияния, и вариации числа копий.

Как используется в настоящем описании, «слияние RET» представляет собой реаранжировку генов. Реаранжировки RET создают химерный белок, сопоставляющий киназный домен RET и домен димеризации другого белка, создавая конститутивно активированный димер, который запускает онкогенез.

Как используется в настоящем описании, "химерный белок RET" является результатом реаранжировки гена.

Как используется в настоящем описании, «активирующая мутация RET» означает мутацию в киназе RET, которая способствует лиганд-независимой конститутивной активации киназы RET, которая запускает онкогенез. Например, мутации RET могут возникать во внеклеточных остатках цистеина (например, C620R или C634R/W), которые запускают аберрантную димеризацию рецептора, или мутации RET могут возникать во внутриклеточном киназном домене.

Как используется в настоящем описании, «ингибитор RET» представляет собой соединение, которое ингибирует активность киназы RET. Киназа RET представляет собой киназу RET дикого типа и/или одну или несколько RET-альтерированных киназ (например, слияние RET, мутация RET или вариация числа копий RET).

Примеры ингибиторов RET включают, но не ограничиваются ими, Соединение 1, LOXO-292 (селперкатиниб), кабозантиниб, вандетаниб, алектиниб, сорафениб, леватиниб, понатиниб, довитиниб, сунитиниб, форетиниб, ситраватиниб, DS-5010 (BOS172738), и RXDX-105.

В некоторых вариантах осуществления, ингибитор RET может также ингибировать другие киназы. Как используется в настоящем описании, «мультикиназный ингибитор RET» представляет собой соединение, которое ингибирует киназу RET дикого типа и ингибирует по меньшей мере одну другую киназу в равной или большей степени, чем киназу RET дикого типа. Примеры мультикиназных ингибиторов RET включают: кабозантиниб; вандетаниб; алектиниб; сорафениб; леватиниб, понатиниб; довитиниб; сунитиниб; форетиниб; ситраватиниб; DS-5010; и RXDX-105.

Как используется в настоящем описании, термин «селективный ингибитор RET» означает соединение, которое селективно ингибирует киназу RET. Киназа RET может включать киназу дикого типа RET и/или одну или несколько RET-альтерированных киназ (например, слияние RET, мутация RET, или вариации числа копий RET). Ингибирующая активность селективного ингибитора RET в отношении киназы RET более эффективна с точки зрения значения IC₅₀ (то есть IC₅₀ значение является субнаномолярным) по сравнению с его ингибирующей активностью в отношении многих других киназ (например, KDR, VEGFR-2, ABL, EGFR, FGFR2, HER2, IGFIR, JAKI, KIT, MET, AKTI, MEK1). Эффективность можно измерить с помощью известных биохимических анализов. Примеры селективных ингибиторов RET включают соединение 1 и селперкатиниб.

Как используется в настоящем описании, термин «субъект» или «пациент» относится к организмам, которые подлежат лечению способами настоящего раскрытия. Такие организмы включают, но не ограничиваются ими, млекопитающих (например, мыши, обезьяны, лошади, крупный рогатый скот, свиней, собак, кошек и тому подобное) и в некоторых вариантах осуществления человека.

Многие виды рака связаны с аберрантной экспрессией RET (Kato et al., Clin. Cancer Res: 23(8): 1988-97 (2017)). Неограничивающие примеры «рака», как используется в настоящем описании, включают рак легких, рак головы и шеи, рак желудочно-кишечного тракта, рак молочной железы, рак кожи, рак мочеполовой системы, гинекологический рак, гематологическую злокачественную опухоль, рак центральной нервной системы (CNS), рак периферической нервной системы, рак эндометрия, колоректальный рак, рак костей, саркома, шпицоидная опухоль, аденосквамозный рак, феохромоцитома (РСС), гепатоцеллюлярная карцинома, множественные эндокринные неоплазии (MEN2A и MEN2B), и воспалительная миофибробластическая опухоль. Другие примеры см. Nature Reviews Cancer 14: 173-86 (2014).

Дополнительные неограничивающие примеры рака включают гемангиоперицитому, дифференцированный рак щитовидной железы, анапластический рак щитовидной железы, карциносаркому легкого, уротелиальную карциному мочеточника, карциносаркому матки, базальноклеточную карциному, карцинома из клеток Меркеля, атипичную карциному легкого, аденокарциному фаллопиевых труб, эпителиальную карциному яичников, аденокарциному слюнной железы, менингиому, аденокарциному двенадцатиперстной кишки, аденокарциному шейки матки, карциному надпочечников, карциному гастроэзофагеального перехода, плоскоклеточный рак кожи, аденокарциному протоков поджелудочной железы, аденокарциному простаты, аденокарциному пищевода, аденокарциному эндометрия, серозную карциному яичников, неизвестную первичную карциному, уротелиальную (переходноклеточную) карциному мочевого пузыря, плоскоклеточный рак легкого, колоректальную аденокарциному, плоскоклеточный рак головы и шеи, и аденокарциному желудка.

В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой холангиокарциному печени. В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой аденокарциному двенадцатиперстной кишки. В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой эндометриоидную аденокарциному эндометрия матки.

В некоторых вариантах осуществления, MEN2A связан с феохромоцитомой и гиперплазией паращитовидных желез.

В некоторых вариантах осуществления, MEN2B связан с невромами слизистой оболочки, феохромоцитомами, ганглионевромами кишечника и марфаноидным габитусом.

В некоторых вариантах осуществления, рак легкого выбран из мелкоклеточного рака легкого (SCLC), аденокарциномы легкого, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), бронхиолоальвеолярного рака и мезотелиомы. В некоторых вариантах осуществления, рак легкого представляет собой SCLC. В некоторых вариантах осуществления, рак легкого представляет собой NSCLC.

В некоторых вариантах осуществления, рак головы и шеи выбран из рака щитовидной железы и рака слюнной железы. В некоторых вариантах осуществления, рак щитовидной железы выбран из папиллярной карциномы щитовидной железы (РТС), метастатического папиллярного рака щитовидной железы, медуллярный рак щитовидной железы (МТС), диффузного склерозирующего варианта папиллярного рака щитовидной железы, и рака щитовидной железы. В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой семейный медуллярный рак щитовидной железы. В некоторых вариантах осуществления, рак щитовидной железы представляет собой РТС. В некоторых вариантах осуществления, рак щитовидной железы представляет собой МТС.

В некоторых вариантах осуществления, рак желудочно-кишечного тракта выбран из рака пищевода, рака пищевода и желудка, стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта (например, иматиниб-резистентная стромальная опухоль желудочно-кишечного тракта), рака тонкого кишечника, диффузного рака желудка, и ампулярного рака.

В некоторых вариантах осуществления, рак молочной железы is метастатический рак молочной железы. В некоторых вариантах осуществления, рак кожи представляет собой меланому или немеланому.

В некоторых вариантах осуществления, рак мочеполовой системы выбран из рака толстой кишки, метастатического рака толстой кишки, рака мочевого пузыря, почечно-клеточного рака (RCC), рака предстательной железы, гепатобилиарного рака, рака внутрипеченочного желчного протока, адренокортикального рака, рака поджелудочной железы, и аденокарциномы протоков поджелудочной железы.

В некоторых вариантах осуществления, гинекологический рак выбран из саркомы матки, эмбрионально-клеточной опухоли, рака шейки матки, рака прямой кишки, рака яичка, и рака яичников.

В некоторых вариантах осуществления, гематологическая злокачественная опухоль выбрана из лейкоза, первичного миелофиброза со вторичным острым миелоидным лейкозом, миелодисплазии (MDS), неходжкинской лимфомы, хронического миелоидного - лейкоза, острого лимфобластного лейкоза с филадельфийской хромосомой и хронического миеломоноцитарного лейкоза (CMML).

В некоторых вариантах осуществления, рак периферической нервной системы представляет собой параганглиому. В некоторых вариантах осуществления, рак эндометрия представляет собой аденокарциному эндометрия. В некоторых вариантах осуществления, саркома представляет собой саркому мягких тканей.

В некоторых вариантах осуществления, рак центральной нервной системы (CNS) выбран из рака головного мозга, ассоциированного с раком легкого и глиомой.

Известно, что рак легкого распространяется на головной мозг примерно в 40% случаев, когда возникают метастазы. При раке легких это считается четвертой стадией заболевания, а средняя продолжительность жизни с метастазами в головной мозг обычно составляет менее года. Рак легких с метастазами в мозг имеет относительно плохой прогноз, например, при применении химиотерапевтических препаратов. Метастазы в головной мозг трудно поддаются лечению по многим причинам. Часто к тому времени, когда у пациента появляются первые симптомы, у него уже есть множественные поражения. Метастазы в мозг, как правило, очень агрессивны. Мозг имеет много защитных средств, чтобы уменьшить проникновение вредных веществ. В частности, гематоэнцефалический барьер предотвращает попадание в мозг многих лекарственных средств, например, соединений. Варианты лечения могут повредить окружающие нормальные ткани и оказать значительное влияние на качество жизни. В частности, существует потребность в соединениях, которые можно вводить в безопасной дозе, с хорошей переносимостью и которые проникают в мозг для лечения метастазов в мозге.

В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой метастазы в мозг, связанные с раком легких.

В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой "RET-альтерированный рак," который, как используется в настоящем описании, означает рак, имеющий активирующую RET альтерацию. В некоторых вариантах осуществления, RET-альтерированный рак имеет мутацию RET или реаранжировки гена RET. В некоторых вариантах осуществления, RET-альтерированный рак представляет собой RET-альтерированную солидную опухоль.

Как используется в настоящем описании, термин «эффективное количество» относится к количеству селективного ингибитора RET (например, соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли), достаточному для достижения благоприятных или желаемых результатов. Благоприятные или желаемые результаты могут быть терапевтической пользой или результатом, или физиологической пользой или результатом. Эффективное количество можно вводить за одно или несколько введений, применений или дозировок, и не предназначено для ограничения конкретным составом или путем введения.

Как используется в настоящем описании, термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству селективного ингибитора (например, соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли), достаточному для достижения благоприятных или желаемых терапевтических результатов у субъекта. Терапевтически эффективное количество может быть введено субъекту, нуждающемуся в этом, в виде одного или нескольких введений, применений или дозировок, и не предназначено для ограничения конкретным составом или путем введения. В некоторых вариантах осуществления, терапевтически эффективное количество обеспечивает желаемую безопасность, воздействие и переносимость. Выбор терапевтически эффективного количества, то есть правильной дозы для введения соединения, является необходимой стадией разработки фармацевтического препарата для клинического применения. Без достоверной информации о дозировке врачи не могут назначать пациентам тот или иной препарат. Поэтому определение правильной дозировки лекарственного средства является ключевым вопросом, на который можно ответить только в клинических исследованиях. Если дозу и частоту введения, которые обеспечивают безопасное и прогнозируемое введение, невозможно определить, то соединение не может быть полезным с медицинской точки зрения или коммерчески жизнеспособным фармацевтическим продуктом.

Как используется в настоящем описании, термин «физиологически эффективное количество» относится к количеству селективного ингибитора (например, соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли), достаточному для достижения благоприятного или желаемого физиологического результата у субъекта. Физиологическим результатом может быть стабильное подавление по меньшей мере одного маркера эффекта у субъекта.

Как используется в настоящем описании, термин «лечение» включает любой эффект, например, ослабление, снижение, модуляцию, улучшение или устранение, который приводит к улучшению состояния, заболевания, расстройства и т.п., или облегчению их симптомов.

Как используется в настоящем описании, «маркер эффекта» означает экспрессию мРНК DUSP6, экспрессию мРНК SPRY4, СЕА, кальцитонин, цоДНК KIF5B или цоДНК ТР53.

Некоторые иллюстративные варианты осуществления изобретения включают следующие:

1. Способ лечения субъекта, страдающего раком, имеющим активирующую реаранжированную во время трансфекции (RET) альтерацию, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества от 300 до 400 мг соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли один раз в сутки.

2. Способ согласно варианту осуществления 1, где вводимое количество составляет 300 мг.

3. Способ согласно варианту осуществления 1 или 2, где вводимое количество составляет 400 мг.

4. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3, где рак выбран из папиллярной карциномы щитовидной железы (РТС), медуллярного рака щитовидной железы (МТС), феохромоцитомы (РСС), аденокарциномы протоков поджелудочной железы, множественной эндокринной неоплазии (MEN2A и MEN2B), метастатического рака молочной железы, рака яичка, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), хронического миеломоноцитарного лейкоза (CMML), колоректального рака, рака яичников, воспалительной миофибробластической опухоли и рака слюнной железы.

5. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3, где рак выбран из рака пищевода, рака кожи (немеланомный), рака эндометрия, рака головы и шеи, рака мочевого пузыря, рака предстательной железы, гематологической злокачественной опухоли, лейкоза, саркомы мягких тканей, почечно-клеточного рака (RCC), неходжкинской лимфомы, гепатобилиарного рака, адренокортикального рака, миелодисплазии (MDS), саркомы матки, эмбрионально-клеточной опухоли, рака шейки матки, рака центральной нервной системы, рака костей, ампулярного рака, стромальной опухоли желудочно-кишечного тракта, рака тонкого кишечника, мезотелиомы, рака прямой кишки, параганглиомы, и рака внутрипеченочного желчного протока.

6. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3, где рак выбран из аденокарциномы, шпицоидной опухоли, аденокарциномы легкого, аденосквамозного рака, рака толстой кишки, метастатического рака толстой кишки, метастатического папиллярного рака щитовидной железы, диффузного склерозирующего варианта папиллярного рака щитовидной железы, первичного миелофиброза со вторичным острым миелоидным лейкозом, диффузного рака желудка, рака щитовидной железы, и бронхиолоальвеолярного рака.

7. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3, где рак выбран из гепатобилиарного рака, ампулярного рака, рака тонкого кишечника, рака внутрипеченочного желчного протока, метастатического рака толстой кишки, рака мозга, ассоциированного с раком легких, метастаз в мозге, ассоциированных с раком легких, и ретроперитонеальной параганглиомы.

8. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3, где рак выбран из медуллярного рака щитовидной железы (МТС) и немелкоклеточного рака легкого (NSCLC).

9. Способ согласно варианту осуществления 8, где рак выбран из спорадического МТС, метастатического RET-альтерированного NSCLC, ингибитор тирозинкиназы (TKI)-рефрактерного KIF5B-RET NSCLC, и KIF5B-RET NSCLC.

10. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3, где рак выбран из рака головного мозга, ассоциированного с раком легкого.

11. Способ согласно варианту осуществления 10, где рак головного мозга представляет собой метастаз в головной мозг.

12. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-11, где активирующая RET альтерация включает мутацию RET или реаранжировку (слияние) гена RET.

13. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-11, где активирующая RET альтерация представляет собой мутацию RET.

14. Способ согласно варианту осуществления 12 или 13, где мутация RET представляет собой точечную мутацию.

15. Способ согласно любому из вариантов осуществления 12-14, где мутация RET представляет собой мутацию резистентности.

16. Способ согласно любому из вариантов осуществления 12-15, где RET альтерация представляет собой мутацию RET, выбранную из таблицы 1.

17. Способ согласно любому из вариантов осуществления 12-16, где мутация RET представляет собой V804M, М918Т, C634R или C634W.

18. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-4, 8, 9, и 12-16, где рак представляет собой RET-альтерированный медуллярный рак щитовидной железы (МТС).

19. Способ согласно варианту осуществления 18, где рак представляет собой семейный МТС.

20. Способ согласно варианту осуществления 18, где рак представляет собой спорадический МТС.

21. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3 и 12-19, где рак представляет собой МТС, имеющий мутацию М918Т.

22. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3 и 12-19, где рак представляет собой МТС, имеющий мутацию C634R.

23. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3 и 12-19, где рак представляет собой МТС, имеющий мутацию V804M.

24. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3, 6, и 12-16, где рак представляет собой параганглиому.

25. Способ согласно варианту осуществления 24, где рак представляет собой ретроперитонеальную параганглиому.

26. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3, 6, 12-16, 24, и 25, где параганглиома имеет мутацию R77H.

27. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-11, где активирующая RET альтерация представляет собой реаранжировку (слияние) гена.

28. Способ согласно варианту осуществления 27, где активирующая RET альтерация представляет собой слияние с партнером по слиянию RET, выбранным из таблицы 2.

29. Способ согласно варианту осуществления 27 или 28, где слияние представляет собой KIF5B-RET, CCDC6-RET, KIAA1468-RET или NCOA4-RET.

30. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-4 и 27-29, где рак представляет собой RET-альтерированный NSCLC.

31. Способ согласно варианту осуществления 30, где рак представляет собой NSCLC, имеющий слияние KIF5B-RET.

32. Способ согласно варианту осуществления 30, где рак представляет собой NSCLC, имеющий слияние CCDC6-RET.

33. Способ согласно варианту осуществления 30, где рак представляет собой NSCLC, имеющий слияние KIAA1468-RET.

34. Способ согласно варианту осуществления 30, где рак представляет собой NSCLC, имеющий слияние RET, идентифицированное как FISH-положительное.

35. Способ согласно варианту осуществления 29 или 30, где RET альтерация представляет собой KIF5B-RET V804L (кабозантиниб-резистентный).

36. Способ согласно варианту осуществления 29 или 30, где RET альтерация представляет собой CCDC6-RET V804M (понатиниб-резистентный).

37. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-4 и 27-29, где рак представляет собой RET-альтерированный РТС.

38. Способ согласно варианту осуществления 37, где рак представляет собой РТС, имеющий слияние CCDC6-RET.

39. Способ согласно варианту осуществления 37, где рак представляет собой РТС, имеющий слияние NCOA4-RET.

40. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-3 и 27-29, где рак представляет собой RET-альтерированную карциному внутрипеченочного желчного протока.

41. Способ согласно варианту осуществления 40, где рак представляет собой карциному внутрипеченочного желчного протока, имеющую слияние NCOA4-RET.

42. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-41, где субъект не получал ранее лечения мультикиназным ингибитором RET.

43. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-41, где субъект получал одно или несколько предшествующих лечений мультикиназным ингибитором RET.

44. Способ согласно варианту осуществления 43, где мультикиназный ингибитор RET выбран из ленватиниба, вандетаниба, кабозантиниба и RXDX-105.

45. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-41, где субъект не получал ранее лечения платиной.

46. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-41, где субъект ранее получал лечение платиной.

47. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-41, где субъект ранее получал лечение селективным ингибитором RET.

48. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-47, где субъект не получал предшествующую химиотерапию.

49. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-47, где субъект ранее получал химиотерапию.

50. Способ согласно варианту осуществления 49, где предшествующая химиотерапия выбрана из карбоплатина, пеметрекседа, абраксана, цисплатина, бевацизумаба и их комбинаций.

51. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-42, где субъект не получал предшествующую иммунотерапию.

52. Способ согласно любому из вариантов осуществления 1-42, где субъект ранее получал иммунотерапию.

53. Способ согласно варианту осуществления 52, где предшествующая иммунотерапия выбрана из ипилимумаба, пембролизумаба, ниволумаба, MPDL3280A, MEDI4736 и их комбинаций.

54. Способ лечения субъекта, страдающего раком головного мозга, ассоциированным с RET-альтерированным раком легкого, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли.

55. Способ согласно варианту осуществления 54, где рак головного мозга представляет собой метастаз в головной мозг.

56. Способ лечения субъекта, страдающего раком, имеющим активирующую мутацию RET, включающий введение субъекту физиологически эффективного количества ингибитора RET, где введение ингибитора RET связано с устойчивой даун-регуляцией по меньшей мере одного маркера эффекта у субъекта.

57. Способ согласно варианту осуществления 56, где ингибитор RET вводят перорально.

58. Способ согласно варианту осуществления 56 или 57, где ингибитор RET представляет собой соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль.

59. Способ согласно любому из вариантов осуществления 56-58, где маркер эффекта выбран из экспрессии мРНК DUSP6, экспрессии мРНК SPRY4, уровня карциноэмбрионального антигена и уровня кальцитонина.

60. Способ согласно любому из вариантов осуществления 56-58, где маркер эффекта представляет собой уровень цоДНК KIF5B или уровень цоДНК ТР53.

61. Способ согласно любому из вариантов осуществления 56-59, где количество, вводимое субъекту, вызывает более чем 95% даун-регуляцию по меньшей мере одного маркера эффекта.

62. Способ согласно любому из вариантов осуществления 56-59, где количество, вводимое субъекту, вызывает более 94%, более 93%, более 92%, более 91%, более 90%, более 89%, более 88%, более 87%, более 86%, более 85%, более 80%, более 75%, более 70%, более 65%, более 60%, более 55% или более 50% даун-регуляцию по меньшей мере одного маркера эффекта.

63. Способ согласно варианту осуществления 61, где количество, вводимое субъекту, вызывает более 89%, более 88%, более 87%, более 86%, более 85%, более 80%, более 75% или более 70% даун-регуляцию по меньшей мере одного маркера эффекта.

64. Способ согласно любому из вариантов осуществления 56-59, где по меньшей мере два маркера эффекта регулируются с понижением.

Некоторые точечные мутации RET в таблице 1 описаны в: публикации заявки на патент США No. 2014/0272951; Krampitz et al., Cancer 120: 1920-31 (2014); Latteyer et al., J Clin. Endocrinol. Metab. 101(3): 1016-22 (2016); Silva et al. Endocrine 49.2: 366-72 (2015); Jovanovic et al., Prilozi 36(1): 93-107 (2015); Qi et al., Oncotarget 6 (32): 33993-4003 (2015); Kim et al. ACTA ENDOCRINOLOGICA-BUCHAREST 11.2, 189-194, (2015); Cecchirini et al. Oncogene, 14: 2609-12 (1997); Karrasch et al., Eur. Thyroid J 5(1): 73-77 (2016); Scollo et al., Endocr. J 63: 87-91 (2016); и Wells et al., Thyroid 25: 567-610 (2015).

R525W и A513D могут действовать в комбинации с S891A для усиления онкогенной активности.

Некоторые Слияния RET в таблице 2 описаны в: Grubbs et al., J Clin Endocrinol Metab, 100: 788-93 (2015); Halkova et al., Human Pathology 46: 1962-69 (2015); патенте США No. 9297011; патенте США No. 9216172; Le Rolle et al., Oncotarget 6 (30): 28929-37 (2015); Antonescu et al., Am J Surg Pathol 39(7): 957-67 (2015); публикации заявки на патент США No. 2015/0177246; публикации заявки на патент США No. 2015/0057335; публикации заявки на патент Японии No. 2015/109806 А; публикации Китайской патентной заявки No. 105255927 А; Fang, et al., Journal of Thoracic Oncology 11.2 (2016): S21-S22; публикации Европейской патентной заявки No. ЕР 3037547 А1; Lee et al., Oncotarget DOI: 10.18632/oncotarget.9137, e-published ahead of printing, 2016; Saito et al., Cancer Science 107: 713-20 (2016); Pirker et al., Transl Lung Cancer Res, 4(6): 797-800 (2015); и Joung et al., Histopathology 69(1): 45-53 (2016).

Специалист в данной области может определить, обладает ли субъект RET-альтерированной клеткой, раком, геном или продуктом гена, например, имеющим мутацию, например, слияние, делецию, вставку, транслокацию, сдвиг рамки считывания, дупликацию, точку мутации и/или реаранжировку, например, с использованием способа, выбранного из способов на основе гибридизации, способов на основе амплификации, микроматричного анализа, проточной цитометрии, секвенирования ДНК, секвенирования нового поколения (NGS), удлинения праймера, ПЦР, гибридизации in situ, флуоресцентной гибридизации in situ, дот-блоттинга и саузерн-блоттинга.

Для обнаружения слияния у субъекта могут быть взяты образцы первичной опухоли. Образцы обрабатывают, нуклеиновые кислоты выделяют с использованием методов, известных в данной области, затем нуклеиновые кислоты секвенируют с использованием методов, известных в данной области. Затем последовательности сопоставляют с отдельными экзонами, и количественно оценивали показатели транскрипционной экспрессии (такой как RPKM или число чтений на килобазу на миллион сопоставленных чтений). Необработанные последовательности и данные массива экзонов доступны из таких источников, как TCGA, ICGC и NCBI Gene Expression Omnibus (GEO). Для данного образца координаты отдельных экзонов аннотированы информацией об идентификаторе гена, а экзоны, принадлежащие к киназным доменам, помечены. Затем уровни экзонов нормализуются по z-оценке для всех образцов опухолей.

Затем идентифицируют гены, в которых 5' экзоны экспрессируются на значительно разных уровнях, чем 3' экзоны. Скользящая рамка используется для определения точки разрыва в отдельном образце. В частности, на каждой итерации инкрементная точка разрыва делит ген на 5' и 3' области, и t-статистика используется для измерения разницы в экспрессии (если есть) между двумя областями. Точка разрыва с максимальной t-статистикой выбирается как вероятная точка разрыва слияния. Как используется в настоящем описании, «точка разрыва» представляет собой граница, на которой сливаются два разных гена. Иногда это называют «точкой слияния». Место, где разница в экспрессии экзонов максимальна между 5' и 3', является предполагаемой точкой разрыва слияния. Таким образом, можно быстро профилировать тысячи образцов опухолей, создав список кандидатов слияния (ранжированный по t-статистике). Затем кандидаты с высоким рейтингом могут быть проверены, и партнеры по слиянию могут быть идентифицированы путем изучения необработанных наборов данных PHK-seq и определения химерных пар и/или расщепленных чтений, которые поддерживают слияние. Затем возможные слияния могут быть экспериментально подтверждены, как описано ниже.

Альтернативно, способы, описанные в Wang L et al., Genes Chromosomes Cancer 51(2): 127-39 (2012). doi: 10.1002/gcc.20937, Epub 2011 Oct 27; и Suehara Y et al., Clin Cancer Res. 18(24): 6599-608 (2012). doi: 10.1158/1078-0432.CCR-12-0838, Epub 2012 Oct 10, также можно использовать.

Было высказано предположение, что включение фармакодинамической оценки молекулярно-направленной терапии в клинические испытания может упростить процесс разработки лекарственного средства (Tan DS et al., Cancer J 15(5): 406-20 (2009); Sarker D & Workman P. Adv Cancer Res 96: 213-68 (2007)). Фармакодинамические биомаркеры успешно используются для клинической разработки ингибиторов киназ, включая иматиниб и гефитиниб (Sarker D & Workman P. Adv Cancer Res 96: 213-68 (2007); Baselga J et al., J Clin Oncol 23 (23): 5323-33 (2005); Druker BJ et al., N Engl J Med 344 (14): 1031-7 (2001)). Как описано в настоящем документе, соединение 1 дозозависимо ингибировало активацию RET и SHC, что отражало ингибирование транскрипции DUSP6 и SPRY4 на доклинических моделях, управляемых RET, что указывает на то, что эти транскрипты могут служить биомаркерами ингибирующей активности RET. Трансляционная способность этих маркеров была установлена в этом исследовании, в котором уменьшение опухоли МТС, вызванное обработкой соединением 1, было связано - с эффективным ингибированием экспрессии DUSP6 и SPRY4 в опухолевой ткани. Насколько известно заявителю, это представляет собой первое подтверждение поражения мишени RET с помощью низкомолекулярного ингибитора, многоцелевого или селективного, в клинических условиях. Эти маркеры эффекта могут использоваться для более точного определения оптимальной дозы и режима, необходимых для эффективного ингибирования RET.

Хотя соединение 1 можно вводить отдельно, в некоторых вариантах осуществления соединение 1 можно вводить в виде фармацевтического состава, где соединение 1 объединено с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами или носителями. Соединение 1 может быть составлено для введения любым удобным способом для использования в медицине или ветеринарии. В некоторых вариантах осуществления соединение, включенное в фармацевтический препарат, может быть само по себе активным или может быть пролекарством, например, способным превращаться в активное соединение в физиологических условиях.

Фраза «фармацевтически приемлемый» используется в настоящем документе для обозначения тех соединений, веществ, композиций и/или лекарственных форм, которые в рамках здравого медицинского заключения подходят для использования в контакте с тканями человека и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения, соизмеримых с разумным соотношением польза/риск.

Примеры фармацевтически приемлемых носителей включают: (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлозу и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; (4) порошкообразный трагакант; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) наполнители, такие как масло какао и воски для суппозиториев; (9) масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновая кислота; (16) апирогенная вода; (17) изотонический раствор; (18) раствор Рингера; (19) этиловый спирт; (20) фосфатно-буферные растворы; (21) циклодекстрины, такие как Captisol®; и (22) другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических композициях.

Примеры фармацевтически приемлемых антиоксидантов включают: (1) водорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, гидрохлорид цистеина, бисульфат натрия, метабисульфит натрия, сульфит натрия и тому подобное; (2) маслорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбилпальмитат, бутилированный гидроксианизол (ВНА), бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), лецитин, пропилгаллат, альфа-токоферол и тому подобное; и (3) металлохелатирующие агенты, такие как лимонная кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA), сорбит, винная кислота, фосфорная кислота и тому подобное.

Твердые лекарственные формы (например, капсулы, таблетки, пилюли, драже, порошки, гранулы и т.п.) могут включать один или несколько фармацевтически приемлемых носителей, таких как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или любой из следующих: (1) наполнители или разбавители, такие как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и/или кремниевая кислота; (2) связующие, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и/или гуммиарабик; (3) увлажнители, такие как глицерин; (4) разрыхлители, такие как агар-агар, карбонат кальция, картофельный крахмал или крахмал тапиоки, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия; (5) средства, замедляющие растворение, такие как парафин; (6) ускорители абсорбции, такие как соединения четвертичного аммония; (7) смачивающие средства, такие как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина; (8) поглотители, такие как каолин и бентонитовяа глина; (9) скользящие вещества, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси; и (10) окрашивающие вещества.

Жидкие лекарственные формы могут включать фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активному ингредиенту жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие средства и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и кунжутное), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот сорбитана и их смеси.

Суспензии, помимо активных соединений, могут содержать суспендирующие агенты, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбитол и сложные эфиры сорбитана, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, и их смеси.

Мази, пасты, кремы и гели могут содержать, помимо активного соединения, вспомогательные вещества, такие как животные и растительные жиры, масла, воски, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремниевая кислота, тальк и оксид цинка или их смеси.

Порошки и спреи могут содержать, помимо активного соединения, вспомогательные вещества, такие как лактоза, тальк, кремниевая кислота, гидроксид алюминия, силикаты кальция и порошок полиамида или смеси этих веществ. Спреи могут дополнительно содержать обычные пропелленты, такие как хлорфторуглеводороды, и летучие незамещенные углеводороды, такие как бутан и пропан.

Лекарственные формы для местного или трансдермального введения соединения 1 включают порошки, спреи, мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, растворы, пластыри и лекарственные формы для ингаляции. Активное соединение может быть смешано в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и с любыми консервантами, буферами или пропеллентами, которые могут потребоваться.

Когда соединение 1 вводят в виде фармацевтического средства людям и животным, оно может вводиться само по себе или в виде фармацевтической композиции, содержащей, например, от 0,1 до 99,5% (например, от 0,5 до 90%) активного ингредиента в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.

Лекарственные формы можно вводить местно, перорально, чрескожно, ректально, вагинально, парентерально, интраназально, внутрилегочно, внутриглазно, внутривенно, внутримышечно, внутриартериально, интратекально, интракапсулярно, внутрикожно, внутрибрюшинно, подкожно, внутрикожно или путем ингаляции.

Настоящее раскрытие дополнительно проиллюстрировано следующими примерами, которые не следует рассматривать как дополнительное ограничение. Содержание всех ссылок, процитированных в настоящей заявке, явным образом включено в настоящее описание в качестве ссылки.

Примеры

Пример 1: Анализ экспрессии DUSP6 и SPRY4

Клетки обрабатывали указанными соединениями в течение 7 часов перед лизисом буфером RLT (QIAGEN, Hilden, Germany), содержащим 1% β-меркаптоэтанол. Тотальную РНК выделяли с помощью набора Rneasy Plus Mini (QIAGEN, Hilden, Germany) в соответствии с инструкциями производителя. КДНК первой цепи синтезировали с использованием Superscript VILO Master Mix (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) в соответствии с инструкциями производителя. кПЦР в реальном времени проводили в системе ViiA 7 Real Time PCR System (Thermo Fisher Scientific). Для кПЦР в реальном времени (qRT-PCR) экспрессию референсного гена глюкуронидазы бета (GUSB) использовали для нормализации экспрессии генов-мишеней DUSP6, SPRY4 и гликоген-синтаза-киназа-3 бета (GSK3B). Повторные реакции кПЦР в реальном времени анализировали для каждого образца, и программное обеспечение QuantStudio Real-Time PCR (Life Technologies, Carlsbad, CA) нормализовало среднюю экспрессию DUSP6, SPRY4, или GSK3B до средней экспрессии референсного гена GUSB в каждом образце. На фиг.1А-1С показана относительная экспрессия транскрипта пути RET, нацеленного на DUSP6 и SPRY4, и пути АКТ, нацеленного на GSK3B, через 7 часов после обработки клеток L2C/ad (фиг. 1А), клеток MZ-CRC-1 (фиг. 1В) или клеток ТТ МТС (фиг. 1С) соединением 1 или кабозантинибом. На фиг.2 показана относительная экспрессия транскриптов DUSP6, SPRY4 и GSK3B из KIF5B-RET NSCLC PDX. Опухоли собирали в указанное время (часы) после введения последней дозы. Данные представляют собой среднее значение + SD. *Р<0,05, **Р<0,01, ***р<0,001, двусторонний t-критерий Стьюдента. SD, стандартное отклонение.

Пример 2: Получение KIF5B-RET Ba/F3 клеток и анализы мутагенеза ENU

ДНК, кодирующая аминокислотную последовательность варианта 1 человеческого KIF5B-RET, помещали в лентивирусный вектор под доксициклин-индуцируемым промотором, для максимизации экспрессии с карбоксиконцевым эпитопом FLAG, для облегчения иммунодетекции слияния антителами против FLAG. Опосредованную лентивирусами трансдукцию гена использовали для экспрессии KIF5B-RET в клетках Ba/F3, KIFSB-RET-зависимые клетки отбирали путем удаления IL-3 и подтверждали экспрессию слитого белка KIF5B-RET с помощью анализа иммуноблоттинга. Для.получения клеток Ba/F3, несущих замены V804, клетки WT KIF5B-RET Ba/F3 мутагенизировали в течение ночи с помощью ENU и высевали в 96-луночные планшеты на период 2 недель в присутствии 6 концентраций MKI (понатиниб, регорафениб, кабозантиниб, или вандетаниб). Выбранные концентрации варьировались от 2×-64×IC₅₀ пролиферации для каждого соединения: 125 нМ до 4 мкмоль/л кабозантиниба, 20-640 нМ понатиниба, и 250 нМ до 8 мкмоль/л вандетаниба. Геномную ДНК выделяли из устойчивых клонов, и секвенирование по Сэнгеру использовали для идентификации тех, которые содержали замены. На фиг. 3 показана противоопухолевая активность соединения 1 по сравнению с кабозантинибом в аллотрансплантатах KIF5B-RET V804L Ba/F3.

Пример 3: Фаза I исследования

Была начата фаза I, первое исследование с участием людей (NCT03037385) для определения максимальной переносимой дозы, профиля безопасности, фармакокинетики и предварительной противоопухолевой активности соединения 1 при распространенном, RET-альтерированном NSCLC, МТС и других солидных опухолях. Перед включением в исследование было получено письменное информированное согласие всех пациентов на лечение соединением 1 и сбор образцов крови и опухолей для анализа диагностического биомаркера для характеристики потенциальных прогностических биомаркеров безопасности и эффективности. Взрослые пациенты (возраст ≥18 лет) должны были иметь распространенные, неоперабельные солидные опухоли, с показателем общего состояния по шкале Восточной объединенной онкологической группы от 0 до 2 и приемлемой функцией костного мозга, печени, почек и сердца. Соединение 1 вводили перорально один раз в день в течение 4-недельного цикла с использованием байесовской оптимальной интервальной схемы. При уровнях доз ≥120 мг для включения в исследование дополнительно требовалось задокументированная RET-альтерация. Нежелательные явления оценивали в соответствии с Критериями оценки степени тяжести наиболее частых нежелательных явлений (СТСАЕ). Рентгенологический ответ с помощью компьютерной томографии оценивали с помощью RECIST version 1.1 (European Journal of Cancer 45: 228-247 (2009)). Уровни цоДНК в плазме оценивали с помощью панели PlasmaSELECT™-R64 NGS (Personal Genome Diagnostics, Baltimore, MD). Уровни кальцитонина в сыворотке крови у пациентов с МТС измеряли с помощью ELISA (Medpace, Cincinnati, OH). Уровни DUSP6/SPRY4 в опухоли анализировали с помощью кПЦР в реальном времени (Molecular MD, Portland, OR).

Конкретные примеры

Пациент 1 был 27-летним пациентом со спорадическим МТС, несущим множественные мутации RET (L629P, D631_R635DELINSG, и V637R). Пациентом был пациент, который не получал лечение ингибитором тирозинкиназы до начала лечения соединением 1 с высокоинвазивным заболеванием, которое требовало экстренной трахеостомии и экстенсивной хирургии, включая тотальную тиреоидэктомию, центральную шейную диссекцию, двустороннюю шейную диссекцию на уровнях 1-4, общую тимэктомию и срединную стернотомию. Послеоперационное течение осложнилось хилотораксом. Междисциплинарный медицинский консенсус был против лучевой терапии шеи, и повторное сканирование показало заболевание в левой паратрахеальной области с инвазией в трахею и пищевод, а также метастазирование заболевание в легкие и печень. Два одобренных FDA мультикиназных препарата для лечения МТС (вандетаниб и кабозантиниб) не считались подходящими для этого пациента, учитывая связанный с ними риск токсичности, связанной с VEGFR, которая может включать нарушение заживления ран и увеличивать риск образования свищей и кровотечения (CAPRELSA (вандетаниб) [листовка-вкладыш в упаковке] Cambridge, MA: Sanofi Genzyme; 2016; COMETRIQ (кабозантиниб) [листовка-вкладыш в упаковке]. South San Francisco, CA: Exelixix, Inc.; 2018). Поэтому пациент был включен в клиническое исследование соединения 1 и начал лечение на втором уровне дозы (60 мг, QD (один раз в день)). Примечательно, что через 28 дней лечения соединением 1 наблюдалось снижение уровня опухолевого маркера кальцитонина в сыворотке >90% (фиг. 4А). Через 8 недель целевые поражения уменьшились на 19%. После последовательного увеличения дозы соединения 1 до 200 мг QD пациент достиг частичного ответа с >30% уменьшением опухоли в соответствии с критериями оценки ответа солидных опухолей (RECIST) версия 1.1 (фиг. 4В). Этот пациент впоследствии увеличил дозу до 300 мг 1 раз в день и достиг подтвержденного частичного ответа (максимальное снижение 47%) через 10 месяцев. В целом уровень карциноэмбрионального антигена (СЕА) снизился на 57% за этот период. Улучшение состояния здоровья с помощью лечения соединением 1 позволило удалить трахеостомическую трубку пациента и вернуться к исходной массе тела после потери нескольких килограммов веса до лечения. Соединение 1 хорошо переносилось в течение 11 месяцев непрерывного лечения, при этом единственным побочным эффектом, связанным с лекарством, было временное снижение уровня лейкоцитов 1 степени, которое разрешилось без прерывания приема лекарственного средства или изменения дозы. По состоянию на 13 апреля 2018 г. пациент продолжал лечение.

Пациентом 2 был 56-летний пациент со спорадическим RET М918Т-мутантным МТС, который ответил на лечение, и затем наблюдалось прогрессирование на вандетанибе, начав терапию соединением 1, 300 мг QD. Ранние сигналы клинической активности появились в течение первых нескольких недель лечения соединением 1: кальцитонин в сыворотке снизился >90%, и СЕА снизился на 75% через 28 дней (фиг. 4С). Циркулирующая опухолевая ДНК (цоДНК) RET М918Т уменьшилась на 47% через 28 дней и не была обнаружена через 56 дней. Парные биопсии опухоли, собранные до лечения и через 28 дней после лечения, продемонстрировали снижение DUSP6 на 93% и снижение экспрессии мРНК SPRY4 на 86%, подтверждая ингибирование пути RET в опухоли (фиг. 4Е). Важно отметить, что эти признаки активности были подтверждены радиографическим ответом (-35%) согласно RECIST 1.1 через 8 недель (фиг. 4D). Пациент хорошо переносил лечение соединением 1 без перерыва в приеме дозы; побочные эффекты, связанные с приемом лекарств, включали тошноту 1 степени и гиперфосфатемию. Пациент продолжал терапию через 8 месяцев с подтвержденным частичным ответом (максимальное снижение на 47%) по состоянию на 13 апреля 2018 г.

Пациент 3 был 37-летним пациентом с метастатическим RET-альтерированным NSCLC, который прогрессировал на цисплатине, пеметрекседе и бевацизумабе, имел положительный результат теста ткани опухоли на слияние RET с помощью анализа FISH. Пациент начал лечение с 200 мг QD соединения 1, и анализ цоДНК на исходном уровне выявил каноническое слияние KIF5B-RET и сопутствующую мутацию ТР53. Уменьшение опухоли (-25%) было отмечено при первой рентгенологической оценке после 8 недель лечения и коррелировало с сопутствующим снижением уровней цоДНК KIF5B-RET и ТР53 (фиг. 5А). Пациент достиг частичного ответа при второй рентгенологической оценке через 16 недель (фиг. 5В) и продолжал лечение в течение 10 месяцев с подтвержденным частичным ответом по состоянию на 13 апреля 2018 г. Как наблюдали у пациентов с МТС, описанных выше, соединение 1 хорошо переносится, при этом все связанные с лекарством побочные эффекты относятся к степени 1, включая запор (разрешившийся), сухость кожи, сыпь и лейкопению.

Пациент 4 был 69-летним пациентом с NSCLC, которому была выполнена резекция легкого, нефрэктомия и дренирование плевральной полости. Пациент начал лечение 400 мг соединения 1 один раз в день. Было отмечено уменьшение опухоли в отношении метастазов в головной мозг KIF5B-RET NSCLC (фиг. 9). В частности, у пациента наблюдали признаки внутричерепной противоопухолевой активности. На исходном уровне у пациента было метастатическое поражение головного мозга размером примерно 6 мм, которое, по-видимому, исчезло через 8 недель лечения. На момент 8-недельной оценки у пациента было установлено стабильное заболевание.

Пациент 5 был 74-летним бывшим курильщиком с местнораспространенным KIF5B-RET NSCLC. Изображения КТ пациента показаны на фиг. 11А-11D. Пациент получил одновременную химиолучевую терапию с цисплатином и пеметрекседом, затем лечение карбоплатином и наб-паклитакселом, и в конечном итоге наблюдалось прогрессирование. Секвенирование нового поколения опухолевой ткани, наряду с FISH, выявило слияние KIF5B-RET, и пациент был включен в клиническое испытание, в котором тестировали комбинированный режим вандетаниба и эверолимуса (NCT01582191). Пациент добился частичного ответа, но повторное сканирование, проведенное после 11 циклов, показало прогрессирование заболевания, которое было связано с клиническими симптомами усиления одышки и ухудшения общего состояния. Затем пациент был включен в фазу 1 исследования соединения 1. После 16 недель лечения соединением 1 (300 мг QD) у пациента был частичный ответ с уменьшением объема опухоли на 34% (фиг. 11С и 11D) и улучшение одышки и общего состояния. Соединение 1 хорошо переносилось на протяжении всего лечения, и по состоянию на 13 апреля 2018 г. пациент не испытывал побочных эффектов, связанных с лекарственными препаратами.

Пациент 6 был 23-летней женщиной с РТС, склерозирующим вариантом (слияние CCDC6-RET), у которой 6 лет назад были обнаружены симптоматические диффузные метастазы в легких, требующие дополнительного кислорода с момента постановки диагноза. У нее наблюдалось прогрессирование на сорафенибе и ленватинибе. Она начала лечение соединением 1 в дозе 400 мг один раз в день. На фиг. 13 показано уменьшение опухоли после 5 месяцев лечения соединением 1. В течение 5 месяцев ее приучили к комнатному воздуху.

Измерение уровней цоДНК

Уровни одного из примеров маркера эффекта, цоДНК в плазме (например, цоДНК KIF5B или ТР53), можно оценить с помощью панели PlasmaSELECT™-R64 NGS (Personal Genome Diagnostics, Baltimore, MD). PlasmaSELECT™ 64 анализирует циркулирующую опухолевую ДНК на предмет генетических альтераций при раке. В частности, PlasmaSELECT™ 64 оценивает целевую панель из 64 хорошо изученных генов рака. Бесклеточную ДНК извлекают из плазмы и получают, используя запатентованные методы, которые подходят образцов ДНК с низкой копийностью. Затем образцы обрабатывали с использованием запатентованного процесса захвата и секвенирования нового поколения с высоким охватом.

Стационарная концентрация в плазме, RET IC₉₀ и IC₉₀ мозга (прогнозируемая)

Образцы крови собирали в заранее определенные моменты времени у пациентов, получавших от 30 до 600 мг соединения 1 перорально один раз в день. Образцы плазмы анализировали на соединение 1 с использованием утвержденного метода жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (LC-MS/MS). Данные зависимости концентрации соединения 1 в плазме от времени были представлены на графике с использованием Phoenix WinNonlin© (Version 6.4, Certara L.P.) или Graphpad Prism (Version 7.02). На фиг. 6A показан график зависимости концентрации в плазме от времени соединения 1 в устойчивом состоянии. RET IC₉₀ и IC₉₀ мозга (прогнозируемые) основаны на прогнозах и экстраполяциях, основанных на данных PK и PD у животных.

Режим дозирования два раза в день (BID) также был изучен в рамках фазы I клинического исследования. Режим дозирования BID начинали с общей суточной дозы 300 мг (200 мг утром, 100 мг вечером). В общей сложности 9 пациентов были включены в программу повышения дозы BID: 4 пациента с общей суточной дозой 300 мг (200 мг утром, 100 мг вечером) и 5 пациентов с общей суточной дозой 200 мг (100 мг BID). Из первых 4 пациентов, включенных в общую суточную дозу 300 мг, 2 пациента испытали дозоограничивающая токсичность (DLT) гипертонии 3 степени, и доза была впоследствии снижена до 100 мг BID. Двое из 5 пациентов, принимавших 100 мг BID, испытали DLT, в том числе 1 пациент с гипертонией 3 степени и 1 пациент с синдромом лизиса опухоли 3 степени. Основываясь на общей безопасности, воздействии и переносимости, QD был лучшим режимом дозирования и выбран для увеличения дозы.

Все публикации и патенты, упомянутые в настоящем документе, включены в настоящий документ в качестве ссылки в полном объеме.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к способам лечения рака, имеющего активирующую реаранжированную во время трансфекции альтерацию (RET-альтерированного рака). Предложены варианты способа лечения рака, имеющего активирующую реаранжированную во время трансфекции альтерацию, (RET-альтерированного рака) у субъекта, нуждающегося в этом, включающего введение субъекту терапевтически эффективного количества, 300 мг или 400 мг, соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли один раз в сутки, где соединение 1 представляет собой

Группа изобретений обеспечивает достижение максимального терапевтического эффекта при сохранении безопасности препарата. 3 н. и 34 з.п. ф-лы, 13 ил., 2 табл., 3 пр.

1. Способ лечения рака, имеющего активирующую реаранжированную во время трансфекции альтерацию, (RET-альтерированного рака) у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества,  300 мг или 400 мг, соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли один раз в сутки, где соединение 1 представляет собой

2. Способ по п. 1, где рак представляет собой солидную опухоль.

3. Способ по п. 2, где рак выбран из колоректального рака, рака головы и шеи, гепатобилиарного рака, рака яичников, рака поджелудочной железы, саркомы и рака легкого.

4. Способ по п. 3, где рак выбран из мелкоклеточного рака легкого (SCLC), аденокарциномы легкого, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), бронхиолоальвеолярного рака и мезотелиомы.

5. Способ по п. 3, где рак головы и шеи выбран из рака слюнной железы и рака щитовидной железы.

6. Способ по п. 5, где рак щитовидной железы выбран из дифференцированного рака щитовидной железы (DTC), медуллярного рака щитовидной железы (MTC) и анапластического рака щитовидной железы.

7. Способ по п. 6, где дифференцированный рак щитовидной железы представляет собой папиллярный рак щитовидной железы (PTC).

8. Способ по п. 3, где гепатобилиарный рак представляет собой холангиокарциному.

9. Способ по любому из пп. 1-8, где RET-альтерированный рак содержит слияние RET.

10. Способ по п. 1, где RET-альтерированный рак представляет собой немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), имеющий слияние RET.

11. Способ по п. 1, где RET-альтерированный рак представляет собой рак щитовидной железы, имеющий слияние RET.

12. Способ по п. 11, где рак представляет собой дифференцированный рак щитовидной железы.

13. Соединение по п. 11, где рак представляет собой папиллярный рак щитовидной железы.

14. Способ по п. 11, где рак представляет собой анапластический рак щитовидной железы.

15. Способ по любому из пп. 9-14, где слияние RET выбирают из CLIP 1, PIBF1, BCR, FGFRIOP, CEP55, CUX1, MYH13, PTClex9, MPRIP, CCDC6, KIF5B, TRIM33, MBD1, RAB61P2, PRKAR1A, TRIM24, KTN1, HOOK3, TRIM27, AKAP13, FKBP15, ERC1, KIAA1468, KIAA1217, NCOA4, GOLGA5, SPECC1L, TBL1XR1 и ACBD5.

16. Способ по п. 9, где слияние RET выбирают из CCDC6, KIF5B, TRIM33, TRIM24 и NCOA4.

17. Способ по п. 10, где слияние RET выбирают из MPRIP, KIF5B, CCDC6, NCOA4, TRIM33, KIAA1468 and KIAA1217.

18. Способ по любому из пп. 11-14, где слияние RET выбирают из ERC1, GOLGA5, MYH13, PTClex9, MBD1, RAB61P2, PRKAR1A, TRIM24, KTN1, HOOK3, TRIM27, AKAP13, FKBP15, SPECC1L, TBL1XR1, ACBD5, CCDC6, NCOA4, TRIM33, KIAA1468 и KIAA1217.

19. Способ по любому из пп. 1-8, где RET-альтерированный рак содержит мутацию RET.

20. Способ по п. 1, где RET-альтерированный рак представляет собой RET-мутантный рак щитовидной железы.

21. Способ по п. 19 или 20, где RET-мутация или RET-мутант представляют собой V804L, V804M, V804E, M918T, C609Y, C609S, C609G, C609R, C609F, C609W, C611R, C611S, C611G, C611Y, C611F, C611W, C618S, C618Y, C618R, C618G, C618F, C618W, C620S, C620W, C620R, C620G, C620L, C620Y, C620F, C630A, C630R, C630S, C630Y, C630F, C634W, C634Y, C634S, C634F, C634G, C634L, C634A, C634T, L790F, R844W, R844Q, R844L, A883F, A883S, A883T, K666E, K666M или K666N.

22. Способ по любому из пп. 19-21, где рак представляет собой медуллярный рак щитовидной железы (MTC).

23. Способ по п. 22, где мутация RET или RET-мутант являются спорадическими.

24. Способ по любому из пп. 1-23, где рак является метастатическим.

25. Способ по любому из пп. 1-24, где субъект ранее получал лечение платиной.

26. Способ по п. 25, где платина выбрана из цисплатина и карбоплатина.

27. Способ по любому из пп. 1-26, где субъект ранее получал лечение кабозантинибом или вандетанибом.

28. Способ по любому из пп. 1-27, где субъекту вводят 300 мг соединения 1 один раз в сутки.

29. Способ по любому из пп. 1-27, где субъекту вводят 400 мг соединения 1 один раз в сутки.

30. Способ по п. 1, где

RET-альтерированный рак представляет собой RET-мутантный рак щитовидной железы; и субъекту вводят перорально 300 мг или 400 мг соединения 1 один раз в сутки.

31. Способ по п. 1, где

RET-альтерированный рак представляет собой немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), имеющий слияние RET; и субъекту вводят перорально 300 мг или 400 мг соединения 1 один раз в сутки.

32. Способ по п. 1, где

RET-альтерированный рак представляет собой рак щитовидной железы, имеющий слияние RET; и субъекту вводят перорально 300 мг или 400 мг соединения 1 один раз в сутки.

33. Способ по любому из пп. 1-32, где соединение вводят в виде одной или более твердых лекарственных форм.

34. Соединение по п. 33, где одна или более твердых лекарственных форм представляют собой таблетки.

35. Способ по п. 33, где одна или более твердых лекарственных форм представляют собой капсулы.

36. Способ лечения рака, имеющего активирующую реаранжированную во время трансфекции альтерацию, (RET-альтерированного рака) у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту 300 мг соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли один раз в сутки, где соединение 1 представляет собой

37. Способ лечения рака, имеющего активирующую реаранжированную во время трансфекции альтерацию, (RET-альтерированного рака) у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту 400 мг соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли один раз в сутки, где соединение 1 представляет собой