Способ определения вероятности развития осложненного течения вторичной лимфедемы нижних конечностей Российский патент 2023 года по МПК G01N33/49 G01N33/573 

Изобретение относится к медицине, а именно к лимфологии и сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для персонифицированного подхода в диагностике и лечении пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей.

Лимфедема представляет собой хроническое, прогрессирующее заболевание, характеризующееся стойким отеком конечности, за счет скопления жидкости с высоким содержанием белка в интерстициальном пространстве, вследствие нарушения лимфооттока.

Медико-социальная проблема лимфедемы, обусловлена тем, что почти 96% всех пациентов составляют люди трудоспособного возраста. Больные за медицинской помощью чаще обращаются поздно, когда уже развиваются осложнения – лимфорея, трофические язвы, экзема, изъязвления, гиперкератоз, фиброз тканей, папилломатоз, лимфангиосаркома. Резистентная к терапии лимфедема и ее осложнения ухудшают психоэмоциональное состояние больных, приводит к беспокойству, эмоциональному дистрессу, нарушению образа тела и ограничению в повседневной деятельности, что в свою очередь приводит к снижению качества жизни.

Исследователи уделяют особое внимание функциональному состоянию эндотелия при развитии заболеваний сердечно-сосудистой системы, в том числе и лимфедемы. Дисфункции эндотелия играет роль универсального неспецифического звена и ведущего патофизиологического механизма в развитии и прогрессировании заболеваний сосудистой системы.

В работах последних нескольких лет доказана патогенетическая роль перекисного окисления (ПОЛ) биомембран, состояния про- и антиоксидантной систем в развитии заболеваний сосудистой системы, в том числе и лимфедемы. Концепция повреждения эндотелия, характеризующаяся нарушением функции ферментов АОС, является наиболее общепризнанной теорией неспецифического повреждения и развития эндотелиальной дисфункции.

Таким образом, биохимические маркеры функционального состояния эндотелия (ферментативное звено антиоксидантной системы и вторичные продукты перекисного окисления липидов) могут играть важную роль в патогенезе осложненных форм лимфедемы. Изучение их уровня и активности может играть потенциальную роль в оценке рисков неблагоприятного и осложненного течения вторичной лимфедемы.

В литературе отсутствуют описанные критерии, по которым можно прогнозировать неблагоприятное течение лимфедемы.

Нами предложен способ прогнозирования развития осложненного течения у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей, путем определения содержания в сыворотке крови показателей ферментативного звена антиоксидантной системы и вторичного продукта перекисного окисления липидов.

Техническим результатом настоящего изобретения является разработка способа прогнозирования осложненного течения вторичной лимфедемы нижних конечностей.

В исследование были включены 110 участников, среди них 90 пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей II стадии по М. Foeldi и 20 пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей III стадии по М. Foeldi с наличием осложнений в виде лимфореи, трофических язв, экземы. Наблюдение пациентов проводилось в течение 5 лет.

Согласно протоколу исследования, всем участникам осуществлялся забор периферической венозной крови для определения биохимических показателей функционального состояния эндотелия. К биохимическим маркерам функционального состояния эндотелия отнесли конечный продукт ПОЛ – малоновый диальдегид (МДА) и показатели ферментативного звена антиоксидантной системы – супероксиддисмутаза (СОД), глутатион пероксидаза (ГП), каталаза (КАТ).

Информация о лабораторной диагностике представлена в следующей таблице:

Показатель Принцип метода Аппарат Реагенты Малоновый диальдегид Конкурентный иммуноферментный тест (ELISA) ИФА–анализатор Stat Fax 3200 («Awareness Technology, Inc.») Набора для оценки общего уровня МДА (производитель: USCN Life Science Inc. US-CEA597GE) Каталаза Конкурентный иммуноферментный тест (ELISA) ИФА–анализатор Stat Fax 3200 («Awareness Technology, Inc.») Набора для количественного in vitro определения каталазы (производитель: USCN Life Science Inc. US- SEC418Hu) Глутатионпероксидаза Конкурентный иммуноферментный тест (ELISA) ИФА–анализатор Stat Fax 3200 («Awareness Technology, Inc.») Набор для количественного определения глутатионпероксидазы 1 (Gpx1), (поставщик Abfrontier, Республика Корея - LF-EK0110) Супероксиддисмутаза Конкурентный иммуноферментный тест (ELISA) ИФА–анализатор Stat Fax 3200 («Awareness Technology, Inc.») Набор для определения общей супероксиддисмутазы (поставщик Cayman Chemical Company, US – 706002)

Статистический анализ полученных данных производился с использованием пакета статистических программ STATISTICA 13.0 (StatSoft Inc., США). Тип распределения данных определялся по критерию Шапиро-Уилка (р>0.05). При нормальном распределении средние значения представлялись средним арифметическим и стандартным отклонением – M±σ. Оценка двух несвязанных совокупностей производилась с использованием t-критерия Стьюдента. Критический уровень статистической значимости различия сравниваемых показателей принимался p<0,05. Для оценки возможности прогнозирования исходов применялся метод бинарной логистической регрессии.

Таблица 1. Сравнение биохимических маркеров функционального состояния эндотелия у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей

№ п/п Показатель Без осложнений
(n=90)
M±σ С осложнениями
(n=20)
M±σ p 1 Супероксиддисмутаза (ЕД/мл) 0,03±0,009 0,11±0,02 ≤0,001 2 Глутатионпероксидаза (нг/мл) 37,16±23 103,7±3,8 ≤0,001 3 Каталаза (нг/мл) 0,38±0,11 0,94±0,08 ≤0,001 4 Малоновый диальдегид (нг/мл) 368,32±10,57 503,2±12,4 ≤0,001

Последующий статистический анализ производился с использованием программы IBM SPSS Statistics 26. Для оценки возможности прогнозирования течения заболевания был проведен метод бинарной логистической регрессии.

R-квадрат Найджелкерка составил 82,11 (R² =82,11).

Значимость модели составила 0,001 (p=0,001).

Уравнение регрессии: Z = -119,8 + 155,64 * X1 + 36,67 * X2,

где Х1 – уровень каталазы;

Х2 – уровень супероксиддисмутазы;

Расчёт вероятности осложненного течения лимфедемы нижних конечностей: Р = 1 / (1 + е^-Z), где Р – вероятность развития осложненного течения лимфедемы нижних конечностей, е – основание натурального логарифма (число Эйлера).

Согласно результату бинарной логистической регрессии, уровень малонового диальдегида и уровень глутатионпероксидазы не оказали влияния на прогнозирование развития осложнения у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей.

Вероятность развития осложненного течения заболевания у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей находится в прямой зависимости от уровня содержания в сыворотке крови биохимических маркеров функционального состояния эндотелия – СОД, КАТ. Чем выше абсолютные значения уровня СОД, КАТ, тем выше вероятность развития осложненного течения у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей.

Клинический пример №1

Пациент A; уровень КАТ – 0,39, уровень СОД – 2,0. Подставляем значения в уравнение регрессии: Z = -119,8+155,64*0,39+36,67*2=14,24.

Развития осложненного течения у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей P = 1 / (1 + e ^–14,24) = 0,99 или 99%.

У пациента за период наблюдения с 2017 г. по 2022 г. развилась трофические язвы и лимфорея.

Клинический пример №2

Пациент B; уровень КАТ – 0,95, уровень СОД – 0,1. Подставляем значения в уравнение регрессии: Z = -119,8+155,64*0,95+36,67*0,1=31,73.

Развития осложненного течения у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей P = 1 / (1 + e ^–31,73) = 1 или 100%.

У пациента за период наблюдения с 2017 г. по 2022 г. развился фиброз кожи.

Клинический пример №3

Пациент C; уровень КАТ – 0,84, уровень СОД – 0,18. Подставляем значения в уравнение регрессии: Z = -119,8+155,64*0,84+36,67*0,18=17,54

Развития осложненного течения у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей P = 1 / (1 + e ^–17,54) = 0,99 или 99%.

У пациента за период наблюдения с 2017 г. по 2022 г. развилась лимфангиосаркома.

Клинический пример №4

Пациент D; уровень КАТ – 0,98, уровень СОД – 0,174. Подставляем значения в уравнение регрессии: Z = -119,8+155,64*0,98+36,67*0,174=39,11

Развития осложненного течения у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей P = 1 / (1 + e ^-39,11) = 1 или 100%.

У пациента за период наблюдения с 2017 г. по 2022 г. развился паппиломатоз кожи.

Клинический пример №5

Пациент E; уровень КАТ – 0,75, уровень СОД – 0,015. Подставляем значения в уравнение регрессии: Z = -119,8+155,64*0,75+36,67*0,015=-2,52

Развития осложненного течения у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей P = 1 / (1 + e ^2,52) = 0,07 или 7%.

У пациента за период наблюдения с 2017 г. по 2022 г. не наблюдалось осложнений лимфедемы нижних конечностей.

Изобретение относится к медицине, а именно к лимфологии и сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для определения вероятности развития осложненного течения заболевания у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей. Проводят определение в периферической венозной крови пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей методом конкурентного иммуноферментного теста каталазы и супероксиддисмутазы. Осуществляют последующий расчет вероятности развития осложненного течения лимфедемы по формуле Р = 1 / (1 + е ^-Z), где Р – вероятность развития осложненного течения вторичной лимфедемы нижних конечностей в течение 5 лет, е – основание натурального логарифма (число Эйлера), а z – показатель, рассчитываемый следующим образом: Z = -119,8 + 155,64 * X1 + 36,67 * X2 , Х1 – уровень каталазы, Х2 – уровень супероксиддисмутазы. Способ обеспечивает возможность прогнозирования осложненного течения вторичной лимфедемы нижних конечностей за счет определения в крови уровня каталазы и супероксиддисмутазы методом конкурентного иммуноферментного теста. 2 табл., 5 пр.

Способ определения вероятности развития осложненного течения заболевания у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей, заключающийся в определении в периферической венозной крови пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей методом конкурентного иммуноферментного теста каталазы и супероксиддисмутазы, с последующим расчетом вероятности развития осложненного течения лимфедемы по формуле Р = 1 / (1 + е ^-Z), где Р – вероятность развития осложненного течения вторичной лимфедемы нижних конечностей в течение 5 лет, е – основание натурального логарифма (число Эйлера), а z – показатель, рассчитываемый следующим образом: Z = -119,8 + 155,64 * X1 + 36,67 * X2 , Х1 – уровень каталазы, Х2 – уровень супероксиддисмутазы.