Способ получения трансплантата десцеметовой мембраны для эндотелиальной кератопластики Российский патент 2023 года по МПК A61F9/07 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии и может быть использовано для получения трансплантата Десцеметовой мембраны для эндотелиальной кератопластики.

Последние годы современной офтальмохирургии ознаменованы значительным прогрессом в связи с развитием селективной кератопластики. Популярность в лечении пациентов с нарушениями эндотелиального слоя роговицы набирает задняя послойная пересадка, смысл которой заключается в замене внутреннего слоя роговицы, который выполняет насосную и барьерную функции, а его несостоятельность приводит к появлению эндотелиально-эпителиальных дистрофий. Трансплантация десцеметовой мембраны (ДМ) (DMEK - Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty - эндотелиальная кератопластика), как наиболее селективная и патогенетически ориентированная операция, становится золотым стандартом при лечении эндотелиальных дистрофий и буллезной кератопатии (Ong HS, Ang М, Mehta J Evolution of therapies for the corneal endothelium: past, present and future approaches British Journal of Ophthalmology 2021;105:454-467).

Достоинствами DMEK считаются минимальный индуцированный астигматизм ввиду отсутствия швов, небольшой объем трансплантируемой ткани, низкий процент реакций отторжения, применения малых разрезов, повышение безопасности вмешательства, короткий период реабилитации, отсутствие необходимости в специальном оборудовании, что экономически выгодно (Lie JT, Birbal R, Ham L, van der Wees J, Melles GR. Donor Tissue Preparation for Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty. J Cataract Refract Surg 2008;34(9): 1578-1583. https://doi.org/10.1016/j.jcrs.2008.05.036).

Следует также отметить недостатки данной техники, такие как сложности в техническом исполнении, высокие риски перфорации ДМ на этапе ее получения. Время, затраченное на выделение ДМ при данной технологии больше, требуются высокие хирургические навыки (Price МО, Gupta Р, Lass J, Price FW Jr. EK (DLEK, DSEK, DMEK): New Frontier in Cornea Surgery. Annu Rev Vis Sci 2017 Sep 15; 3:69-90. doi: 10.1146/annurev-vision-102016-061400.PMID:28697678).

Известен классический мануальный способ получения десцеметовой мембраны из консервированного роговично-склерального лоскута предложенный доктором Мэллсом (Melles GRJ, Lander F, Rietveld F JR. Transplantation of Descemet's membrane carrying viable endothelium through a small scleral incision. Cornea. 2002; 21: 415-418).

Известен способ выделения десцеметовой мембраны при помощи пневмодисекции (Zarei-Ghanavati S, Khakshoor Н, Zarei-Ghanavati М. Reverse big bubble: a new technique for preparing donor tissue of Descemet membrane endothelial keratoplasty. Br J Ophthalmol. 2010; 94:1110-1111).

Известен способ выделения десцеметовой мембраны (Muraine М, Gueudry J, Не Z, et 30 al. Novel technique for the preparation of corneal grafts for Descemet membrane endothelial keratoplasty. Am J Ophthalmol. 2013; 156:851-859.), который заключается в отделении десцеметовой мембраны от поверхности роговицы при помощи механического расслоения канюлей с постоянной подачей жидкости.

Известен способ выделения десцеметовой мембраны с помощью инъекции жидкости (Szurman Р, Januschowski K, Rickmann A, et al. Novel liquid bubble dissection technique for DMEK lenticule preparation. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2016; 254:1819-1823). Способ осуществляется следующим образом: корнеосклеральный трансплантат укладывают эндотелием вверх в панче фирмы «Barron» и фиксируют вакуумом, затем при помощи одноразового лезвия для парацентеза выполняют насечку на склере в 1 мм от Шлеммова канала и производят расслоение по направлению к центру, когда кончик лезвия начинает визуализироваться на периферии в строме роговицы, лезвие заменяют на плоский тупоконечный шпатель и, аккуратно продвигая его дальше, выходят под слой Дюа и десцеметову мембрану. Диссекция осуществляется введением в сформированный карман канюли, подсоединенной к 2 мл шприцу, заполненному жидким красителем, обратный ток которого блокируются компрессией тупфера в зоне сформированного доступа. В результате инъекции жидкого красителя начинает образовываться пузырь отслоения, введение жидкости продолжают до тех пор, пока он не захватит всю площадь роговицы. После этого канюлю меняют на шприц с BSS и через тот же доступ производят дренирование жидкости. В завершение трепаном нужного диаметра выполняют несквозную насечку и трансплантат снимают с поверхности стромы при помощи пинцета.

К недостаткам можно отнести некоторые трудности выполнения, в частности, при расслоении стромы со стороны Шлеммова канала есть риск перфорировать поверхностные слои десцеметовой мембраны, манипуляции требуют лишнего времени и в целом технически сложные. Способ является сложным технически еще и потому, что создает риск перфорации десцеметовой мембраны канюлей в момент, когда ее и окружающие ткани придавливают с помощью тупфера. Помимо этого, попытка выхода к десцеметовой мембране со стороны стромы в подавляющем большинстве случаев, заканчивается выходом к слою Дюа, в результате этого во многих случаях будет выделена не чистая десцеметова мембрана.

Ближайшим аналогом предлагаемого изобретения является способ получения десцеметовой мембраны, при котором осуществляют отделение десцеметовой мембраны из склеророговичного трансплантата с помощью гидродиссекции. При этом сначала удаляют сектор шлеммова канала, через эту зону формируют под ДМ конусовидный тоннель высотой 3 мм с вершиной, направленной в сторону центра роговицы. В сформированный тоннель вводят ирригационную канюлю и с помощью тока жидкости под давлением отслаивают ДМ от подлежащих тканей. Под ДМ вводят краситель, выполняют несквозную трепанацию корнеосклерального лоскута со стороны эндотелия и помещают его в жидкость для отделения ДМ от стромы (RU 2768166, 23.03.22). Однако в этом случае ДМ используют для трансплантации непосредственно после ее получения, поскольку отсутствуют способы консервации изолированной ДМ для проведения эндотелиальной кератопластики.

Задачей данного изобретения является дальнейшее совершенствование способа получения десцеметовой мембраны для ее последующей трансплантации.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является возможность консервации трансплантата со снижением риска потери эндотелиальных клеток для последующей эндотелиальной кератопластики.

Технический результат достигается за счет консервации отсепарованной десцеметовой мембраны в составе корнеосклерального лоскута и отсроченного отделения ДМ с помощью несквозной трепанации непосредственно перед эндотелиальной кератопластикой.

Способ осуществляют следующим образом.

Из донорского корнеосклерального лоскута с помощью гидродиссекции отсепаровывают от стромы десцеметовую мембрану. После гидродиссекции корнеосклеральный лоскут вместе с отсепарованной ДМ помещают в консервационную среду. Перед эндотелиальной кератопластикой выполняют несквозную трепанацию корнеосклерального лоскута. ДМ аспирируют в инжектор и используют для имплантации.

Этап отсепаровывания от стромы десцеметовой мембраны из донорского корнеосклерального лоскута выполняют с помощью ранее разработанных нами приемов, отраженных в ближайшем аналоге. Принципиально новым является то, что после гидродиссекции ДМ, не выполняя трепанацию корнеосклерального лоскута и извлечение ДМ, корнеосклеральный лоскут вместе с отсепарованной ДМ помещают в любую известную консервационную среду для роговицы (https://eyepress.ru/article.aspx?10146).

Предложенным способом было получено 10 трансплантатов ДМ и использовано для трансплантации при эндотелиально-эпителиальной дистрофии роговицы. Во всех случаях наблюдалось восстановление прозрачности роговицы и минимальный процент потери эндотелиальных клеток в послеоперационном периоде.

Клинический пример: Больной Т., 1959 г.р., госпитализирован в стационар с диагнозом OS - эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы. OU - Артифакия. Острота зрения на OD=0,8 н/к, на OS=0,01. Пациенту была выполнена задняя послойная эндотелиальная кератопластика. В качестве трансплантата использована ДМ, полученная по предложенному способу. Непосредственно перед имплантацией трансплантат, который до операции был подготовлен (предварительно выделен с помощью гидродиссекции и законсервирован без трепанации корнеосклерального лоскута в среде Борзенка-Мороз), достали из среды, фиксировали эндотелием кверху на панче (Hessberg-Barron, Katena Products, Inc.), провели несквозную трепанацию корнеосклерального лоскута, как это принято. Пинцетом для завязывания отсепарованная до консервации ДМ без особых усилий отделилась, была аспирирована в инжектор (картридж Gauder DMEK), далее ДМ ввели в переднюю камеру глаза пациента. Провели расправление и фиксацию ДМ путем введения 10% газа SF6.

Через 7 дней острота зрения левого глаза без коррекции была равна 0.2, внутриглазное давление в норме. Плотность эндотелиальных клеток равна 2460 кл/мм². Собственная роговица прозрачная, отек эпителия и буллы отсутствуют.

Через 3 месяца после операции острота зрения левого глаза без коррекции равнялась 0.8, внутриглазное давление в норме. Плотность эндотелиальных клеток - 2140 кл/мм². Роговица прозрачная во всех слоях, без признаков отека стромы.

Таким образом, предложенный способ предварительного выделения и консервации ДМ обеспечивает быстрое и малотравматичное по отношению к клеткам эндотелия роговицы выделение десцеметовой мембраны, сокращение общего времени проведения операции и минимизацию риска отбраковки донорской ткани на этапе подготовки материала с целью последующей трансплантации пациентам с нарушениями эндотелиального слоя роговицы.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для получения трансплантата десцеметовой мембраны для эндотелиальной кератопластики. Для этого из донорского корнеосклерального лоскута с помощью гидродиссекции отсепаровывают от стромы десцеметовую мембрану (ДМ). После гидродиссекции корнеосклеральный лоскут вместе с отсепарованной ДМ помещают в консервационную среду. Перед эндотелиальной кератопластикой выполняют несквозную трепанацию корнеосклерального лоскута. ДМ аспирируют в инжектор и используют для имплантации. Изобретение обеспечивает возможность консервации трансплантата со снижением риска потери эндотелиальных клеток для последующей эндотелиальной кератопластики. 1 пр.

Способ получения трансплантата десцеметовой мембраны для эндотелиальной кератопластики, включающий отсепаровывание от стромы десцеметовой мембраны (ДМ) из донорского корнеосклерального лоскута с помощью гидродиссекции, отличающийся тем, что после гидродиссекции корнеосклеральный лоскут вместе с отсепарованной ДМ помещают в консервационную среду, а перед эндотелиальной кератопластикой выполняют несквозную трепанацию корнеосклерального лоскута, ДМ аспирируют в инжектор и используют для имплантации.