Комбинированный биологический препарат для лечения эндометритов у сельскохозяйственных животных Российский патент 2023 года по МПК C12N1/20 A61K35/747 C12R1/225 C12R1/25 

Описание патента на изобретение RU2805329C2

Комбинированный биологический препарат для лечения эндометритов у сельскохозяйственных животных. Изобретение относится к области ветеринарии и биотехнологии и может быть использовано при профилактике и лечении эндометритов у сельскохозяйственных животных. Биопрепарат состоит из смеси штаммов лактобактерий и фермента - трипсина.

В животноводческом сельском хозяйстве послеродовой эндометрит у коров является одним из наиболее распространенных гнойно-воспалительных заболеваний. Это влечет за собой увеличение сроков оплодотворяемости, а также возможное бесплодие, и как следствие - снижение рождаемости телят.

На сегодняшний день при лечении эндометритов у коров в основном используют антибиотики, однако, их применение не всегда эффективно из-за широкого распространения антибиотикорезистентных штаммов возбудителей этого заболевания. Одним из направлений в решении данного вопроса является разработка новых экологически безопасных препаратов, обладающих не только выраженным антимикробным, но и противовоспалительным действием.

Известен биопрепарат, в котором предлагается использовать в качестве этиотропного средства пробиотический препарат «Ветомгин», а в качестве средства неспецифической общестимулирующей терапии - фитобиотик «Эраконд» (патент РФ №2652276 «Способ лечения послеродового эндометрита у коров»). При этом больным коровам внутриматочно в первые сутки после родов вводят две свечи препарата «Ветомгин» (которые содержат в 1 г не менее 1016 КОЕ живых спор бактерий Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis) с интервалом 4 часа, через 24 часа процедуру лечения этим препаратом повторяют, одновременно на 1-й и 7-й дни с начала лечения коров препаратом «Ветомгин» вводят 4% раствор «Эраконда» (содержит растительный конденсированный экстракт люцерны посевной) на физиологическом растворе в дозе - 20 см3 внутримышечно.

Известен способ лечения эндометритов у высокопродуктивных коров (патент РФ №2012147670), включающий внутриматочное введение пробиотика «Моноспорин», содержащего штаммы Bacillus subtilis с концентрацией в 1 мл 108 КОЕ. Препарат вводят в дозе 5 см3 разведенным физиологическим раствором в соотношении 1:3 1 раз в день на 9-й, 10-й, 11-й,12-й и 13-й дни лечения после курса общестимулирующей и этиотропной терапии, включающей введение ПДЭ, «Тривитамина», «Эндометронага-Т».

Известен биопрепарат для профилактики и лечения эндометритов у коров (патент РФ №2687041), содержащий бактерии Bacillus subtilis и бактерии Bacillus licheniformis с титром спор 108-1011 в соотношении 1:1, 0,5-1,5% раствор хитозана и вспомогательные вещества, такие как лактоза, СаСО3, молочная сыворотка или свекольный сок в заданном соотношении компонентов.

Известен препарат под названием «Гипролам» (патент РФ №2538804) для профилактики послеродовых эндометритов у коров. Препарат содержит бактерии Lactobacillus fermentum 44/1 и Lactococcus lactis subsp. Lactis 574 в количестве не менее 1·108 КОЕ/см3, а также вспомогательные вещества - воду, сыворотку молочную, глюкозу, экстракт дрожжевой. Препарат вводят в течение 5-7 дней до отела ежедневно в дозе 100 см3. Входящие в состав препарата штаммы молочнокислых бактерий способны приживляться в родополовых путях у коров на срок до 3-х недель и оказывать антагонистическое воздействие на проникающую в матку условно-патогенную микрофлору (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumonia и др.). «Гипролам» расфасовывают по 100 см3, что составляет одну дозу препарата.

Известен способ профилактики эндометрита у коров (патент РФ 2693 900), включающий введение в организм животного биогенного стимулятора, внутримышечно утеротона и внутриматочно пробиотических бактерий, отличающийся тем, что пробиотические бактерии вводят в виде суппозитория, содержащего в равных долях сухую биомассу культур клеток Bacillus Licheniformis, Bacillus Subtilis и Lactobacillus amylovorus, масло какао, парафин, жир молочный. В качестве биогенного стимулятора используют цитогумат, который вводят ежедневно, начиная за 20 дней до отела в расчете 50 мл на голову в смеси с кормом, утеротон - по одному разу в день в дозе 10 мл в течение трех дней подряд после отела, а суппозитории - один раз в день по 4 суппозитория в течение 3-х дней после отела.

Положительной стороной всех приведенных способов лечения является продукция микроорганизмами антибактериальных веществ, что позволяет отказаться от антибиотиков и химиопрепаратов. Однако при лечении эндометритов у коров данными препаратами недостаточно высокая терапевтическая эффективность.

В качестве прототипа выбран способ лечения эндометрита у коров (патент РФ №2067450) путем внутриматочного введения препарата, содержащего лактобациллы штаммов Lactobacillus plantarum «Киров-1» и Lactobacillus buchnery «Киров-4». Препарат вводят по 2-3 дозы с содержанием в одной дозе объемом 4 см3 3,0-3,5 млрд лактобацилл 2-3 раза с интервалом 24-48 ч. Недостатком данного препарата является недостаточно высокая эффективность при лечении хронической формы эндометрита.

Техническим результатом изобретения является повышение терапевтической эффективности лечения послеродового эндометрита у коров. Для повышения эффективности препарата, особенно для лечения хронической формы, в его состав был введен протеолитический фермент - трипсин.

Технический результат достигается методом комплексного лечения послеродового эндометрита у коров, предусматривающим внутриматочное введение препарата, состоящего из композиции лактобактерий и ферментного препарата - трипсина.

Препарат содержит 2 штамма лактобацилл: Lactobacillus buchneri БХ-99 ВКПМ В-11839, Lactobacillus plantarum ПЛ-99 ВКПМ В-11747, выращенных на мясо-пептонном бульоне с содержанием глюкозы 2% и фермент - трипсин. Препарат представляет собой жидкость светло-коричневого цвета с сероватым осадком на дне флакона. Осадок при взбалтывании легко разбивается и вызывает помутнение препарата. Одна лечебно-профилактическая доза содержит 50 см3 препарата с концентрацией не менее 3,5·109 КОЕ/см3. Препарат вводят в матку по одной дозе 2 раза в день на протяжении двух суток.

Причинно-следственная связь между совместным применением микробной и ферментной составляющей препарата и повышением терапевтической эффективности лечения хронического послеродового эндометрита у коров заключается в следующем: трипсин обладает противовоспалительным, некролитическим и регенерирующим действием, в очаге воспаления он расщепляет некротизированные ткани, фибринозные сгустки, разжижает гной, что позволяет усилить процесс ингибирования лактобактериями патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, а также увеличивает адгезивную способность лактобактерий.

Проверка эффективности комбинированного биологического препарата при лечении эндометритов проводилась на коровах. Диагноз - эндометрит ставили в соответствии с «Методическими указаниями по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения у коров и телок» [Методические указания по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения у коров и телок. Утверждены Заместителем руководителя Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ 04.07.2000 г. №13-5-2/2057].

Сущность технического решения поясняется примером.

Оценка эффективности лечения эндометритов с использованием комбинированного биологического препарата осуществлялась путем учета количества выздоровевших животных. Клинические испытания проведены на 30 больных животных через 30 суток после отела, что свидетельствовало о хронизации процесса, разделенных по принципу аналогов на 3 группы (по 10 животных в каждой).

Коровам первой группы внутриматочно (вагинально) в первые сутки вводили смесь штаммов лактобацилл Lactobacillus buchneri БХ-99 ВКПМ В-11839, Lactobacillus plantarum ПЛ-99 ВКПМ В-11747 и фермента - трипсина по 50 см3 с интервалом 8 часов, лечение проводили двое суток.

Животным второй группы вводили только смесь лактобактерий по 50 см3 с интервалом 8 часов, лечение проводили двое суток.

Коровам третьей группы вводили только фермент - трипсин.

За животными вели наблюдение в течение 10 дней с начала лечения.

Результаты исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Терапевтическая эффективность лечения хронического послеродового эндометрита у коров

Показатели Группа 1
(лактобактерии + трипсин)
Группа 2
(лактобактерии)
Группа 3
(трипсин)
Количество животных 10 10 10 Выздоровело 6 3 0 Терапевтическая эффективность, % 60 30 0

Полученные экспериментальные данные свидетельствовали о том, что наибольшей терапевтической эффективностью при хроническом послеродовом эндометрите у коров, обладал комбинированный биологический препарат, состоящий из композиции лактобактерий и трипсина (группа 1). При этом было установлено, что количество выздоровевших животных в группе 1 было больше, чем в группе 2 в 2 раза. Для животных группы 3 терапевтическая эффективность использования только ферментного препарата при лечении послеродового эндометрита отсутствовала.

Изобретение решает задачу повышения терапевтической эффективности лечения коров при хроническом послеродовом эндометрите, что выражается в увеличении количества выздоровевших животных.

Изобретение подтверждается примерами.

Пример 1. Для оценки адгезивной активности лактобацилл подсчитывали средний показатель адгезии (СПА) - среднее количество микробных клеток, прикрепившихся к одной эпителиальной клетке.

Таблица 2 - Адгезивная активность лактобацилл

Штамм микроорганизма Средний показатель адгезии (СПА) Степень адгезивности Lactobacillus plantarum ПЛ-99 37,2±4,2 высокая Lactobacillus buchneri БХ-99 30,4±5 высокая

Штаммы лактобацилл, входящие в состав комплексного биопрепарата, обладают высокой адгезивной активностью, что говорит о перспективности их использования для лечения гнойно-воспалительных заболеваний.

Пример 2. Оценку антагонистической активности исследуемых культур лактобацилл проводили по двухслойной методике Фредерика в условиях in vitro.

Таблица 3 - Антагонистическая активность штаммов лактобацилл в отношении клинических культур возбудителей госпитальных инфекций, в том числе антибиотико-резистентных

Вид индикаторных
культур
Кол-во
штаммов
Диаметр зон подавления роста индикаторной культуры штаммом … , мм
L. buchneri
БХ-99
L. plantarum ПЛ-99 Смесь двух штаммов
1 2 3 5 6 Staphylococcus aureus, в т.ч. MRS 10 15-40 17-45 18-45 Staphylococcus aureus, NO 89, ЛУ 1 46 60 50 Staphylococcus aureus, NO 101, ЛУ 1 50 54 50 Staphylococcus sciuri NO 95, ЛУ 1 >60 >60 >60 Enterococcus faecium, в т.ч. ЛУ 7 25-60 25-60 25-60 Enterococcus faecalis, в т.ч. ЛУ 4 22-28 25-30 26-30 Enterococcus gallinarum, в т.ч. ЛУ 2 25-27 30-32 30-32 Enterococcus casseliflavus, ЛУ 1 30 28 30 Listeria monocytogenes, в т.ч. ЛУ 10* >60 >60 >60 Klebsiella pneumonia
NO 77, ЛУ
1* >60 50 54
Klebsiella pneumonia
NO 94/1, ЛУ
1* >60 >60 >60
Acinetobacter baumannii NO 91, ЛУ 1* >60 >60 >60 Pseudomonas aeruginosa NO 128, ЛУ 1* >60 >60 >60 Enterobacter cloacae
NO 110, ЛУ
1* 60 60 40
Enterobacter kobei
NO 105, ЛУ
1* >60 >60 >60
Raoultella ornithinolytica NO 109, ЛУ 1* >60 >60 >60 Raoultella planticola
NO 108, ЛУ
1 27 31 31
Aeromonas hidrophila
NO 10, ЛУ
1 28 32 32
Leclercia adecarboxylata NO 112, ЛУ 1 27 30 30 Pluralibacter pyrinus
NO 11, ЛУ
1 27 30 30
Stenothrophomonas maltophilia NO 3420, ЛУ 1 34 35 36 Shigella flexneri B 8116, ЛУ 1 26 30 30 Shigella sonney S form, ЛУ 1 25 30 30 Shigella dysenteriae Tuck 1362, ЛУ 1 40 30 40 Escherichia coli, в т.ч. ЛУ 14 20-27 22-32 25-32 Salmonella typhimurium 490/60 1 25 29 27 Salmonella choleraesuis 1 26 30 30 Salmonella infantis Новгород 1 1 28 30 30 Salmonella enteritidis 237 1 20 23 25 Salmonella gallinarum 95 1 25 24 25 Примечания:
1 - «*» - штаммы лактобацилл для определения антагонизма на этих индикаторных культурах выращивали на среде MRS-4 в течение 48 часов, остальные в течение 24 часов;
2 - «ЛУ» - лекарственно-устойчивые;
3 - погрешность измерений ±0,5 мм

Штаммы лактобацилл, входящие в состав комбинированного биологического препарата, обладают высокой антагонистической активностью в отношении 71 культуры индикаторных штаммов, что позволяет сделать вывод о том, что данные штаммы смогут обеспечить подавление источников развития гнойно-воспалительного процесса.

Похожие патенты RU2805329C2

название год авторы номер документа
Биологически активная кормовая добавка 2022
  • Комоско Владимир Геннадьевич
  • Кузнецов Сергей Михайлович
  • Новикова Ольга Александровна
  • Скуднова Татьяна Александровна
  • Сюткина Анна Сергеевна
RU2794878C1
БИОПРЕПАРАТ ДЛЯ КОНСЕРВИРОВАНИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ КОРМОВ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 2022
  • Кузнецов Сергей Михайлович
  • Киселев Денис Евгеньевич
  • Новикова Ольга Александровна
  • Скуднова Татьяна Александровна
  • Комоско Владимир Геннадьевич
RU2789442C1
ПРОБИОТИЧЕСКАЯ КОРМОВАЯ ДОБАВКА ДЛЯ КОРОВ И ТЕЛЯТ 2022
  • Кузнецов Сергей Михайлович
  • Киселев Денис Евгеньевич
  • Новикова Ольга Александровна
  • Скуднова Татьяна Александровна
  • Комоско Владимир Геннадьевич
RU2797587C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ПОСЛЕРОДОВОГО ЭНДОМЕТРИТА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 2012
  • Новикова Елена Николаевна
  • Коба Игорь Сергеевич
  • Копыльцов Сергей Васильевич
  • Зимин Константин Викторович
RU2497534C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИЙНОГО ПРЕПАРАТА "БИОСАН" 1991
  • Варганов А.И.
  • Опекунов К.А.
RU2102075C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЭНДОМЕТРИТА У КОРОВ 1991
  • Варганов А.И.
  • Опекунов К.А.
RU2067450C1
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЙ КОМПЛЕКС НА ОСНОВЕ БЕСКЛЕТОЧНОГО ПРОБИОТИКА, КОРМОВАЯ КОМПОЗИЦИЯ ЕГО СОДЕРЖАЩАЯ, И СПОСОБ КОРМЛЕНИЯ МОЛОДНЯКА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ И ПТИЦЫ 2013
  • Самуйленко Анатолий Яковлевич
  • Неминущая Лариса Анатольевна
  • Провоторова Олеся Владимировна
  • Бобровская Ирина Владимировна
  • Еремец Наталья Киреевна
  • Воробьёва Галина Ивановна
  • Скотникова Татьяна Анатольевна
  • Гринь Светлана Анатольевна
  • Иванов Александр Васильевич
  • Красочко Пётр Альбинович
  • Усов Сергей Михайлович
  • Красочко Павел Петрович
  • Еремец Владимир Иванович
RU2538116C2
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ПОСЛЕРОДОВОГО ЭНДОМЕТРИТА У КОРОВ 2013
  • Шахов Алексей Гаврилович
  • Сашнина Лариса Юрьевна
  • Ерина Татьяна Анатольевна
  • Синицын Андрей Александрович
  • Новикова Елена Николаевна
  • Коба Игорь Сергеевич
RU2538804C1
Биопрепарат для профилактики и лечения эндометритов у коров 2018
  • Дриняев Виктор Антонович
  • Тихомирова Ольга Ильинична
  • Колесникова Наталья Александровна
  • Березкина Надежда Евгеньевна
  • Стерлина Татьяна Сергеевна
RU2687041C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ LACTOBACILLUS PLANTARUM P4, ШТАММ БАКТЕРИЙ LACTOBACILLUS BUCHNERI P0 И ПРЕПАРАТ-ПРОБИОТИК НА ИХ ОСНОВЕ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ДИСБАКТЕРИОЗОВ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ У ЛЮДЕЙ И ЖИВОТНЫХ 2002
  • Пименов Е.В.
  • Дармов И.В.
  • Комоско Г.В.
  • Швецов С.А.
  • Ежов А.В.
RU2247148C2

Реферат патента 2023 года Комбинированный биологический препарат для лечения эндометритов у сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии. Предложен комбинированный биологический препарат для лечения эндометритов у сельскохозяйственных животных, включающий смесь штаммов Lactobacillus buchneri БХ-99 ВКПМ В-11839 и Lactobacillus plantarum ПЛ-99 ВКПМ В-11747 и патогенетический компонент - трипсин. Изобретение обеспечивает расширение арсенала способов лечения гнойно-воспалительных заболеваний и повышения эффективности проводимых лечебно-профилактических мероприятий при эндометритах у животных. 2 табл., 2 пр.

Формула изобретения RU 2 805 329 C2

Комбинированный биологический препарат для лечения эндометритов у сельскохозяйственных животных, состоящий из штаммов лактобактерий Lactobacillus buchneri, Lactobacillus plantarum, отличающийся тем, что он включает этиотропный компонент - смесь штаммов Lactobacillus buchneri БХ-99 ВКПМ В-11839 и Lactobacillus plantarum ПЛ-99 ВКПМ В-11747 и патогенетический компонент - трипсин.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2023 года RU2805329C2

СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЭНДОМЕТРИТА У КОРОВ 1991
  • Варганов А.И.
  • Опекунов К.А.
RU2067450C1
БИОПРЕПАРАТ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ПРИ ЭНДОМЕТРИТАХ ЖИВОТНЫХ 2003
  • Борисова Г.В.
  • Кузин А.И.
  • Щекотуров В.Л.
  • Березина Г.Ю.
RU2253674C2
НОВИКОВА Е.Н
"Этиология и патогенез неспецифического послеродового эндометрита и разработка системы его профилактики и терапии у коров"; Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук, 2020, Краснодар, с.75-82
CN 0103751755 B, 19.10.2018.

RU 2 805 329 C2

Авторы

Костровский Егор Александрович

Кузнецов Сергей Михайлович

Новикова Ольга Александровна

Лобанова Елена Олеговна

Сюткина Анна Сергеевна

Даты

2023-10-16Публикация

2019-12-30Подача