ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА, СОДЕРЖАЩАЯ АЛЬБУМИН ЧЕЛОВЕКА В КАЧЕСТВЕ ДЕЙСТВУЮЩЕГО ВЕЩЕСТВА Российский патент 2023 года по МПК A61K9/06 A61K38/38 A61K47/12 A61P17/02 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к лекарственной форме альбумина человека в форме мази для наружного применения.

Альбумин является важнейшим белком-переносчиком, способным за счёт своего строения транспортировать соединения различной химической природы, включая лекарственные препараты. Он увеличивает переход и способствует проникновению и удерживанию тканевой жидкости в сосудах, является резервом белкового питания органов, тканей и клеток.

Альбумин относится к простым белкам, поскольку содержит в себе исключительно аминокислоты (его молекула не покрыта углеводной оболочкой). Он состоит из одной полипептидной цепи и является уникальным пептидом с относительно малой молекулярной массой - 66000-69000 Дальтон.

Молекула альбумина очень гибкая и легко меняет форму с изменениями условий окружающей среды, но одновременно с этим обладает определённой упругостью. Так, при разрыве дисульфидных мостиков она относительно быстро возвращает прежнюю структуру, восстанавливая разрушенные дисульфидные связи. Денатурация происходит только при резких изменениях температуры, рН и других факторов среды [17 Cabezas F, Lagos J, Cespedes C, Vio CP, Bronfman M & Marzolo MP 2011 Megalin/LRP2 expression is induced by peroxisome proliferator-activated receptor -α and -γ: implications for PPARs' roles in renal function. PLoS ONE 6 e16794.

Основная роль альбумина - участие в поддержании коллоидно-осмотического давления плазмы крови, которое не позволяет жидкости (воде, в частности) вытечь из капилляров в межклеточное пространство под действием давления внутри сосудов. Высокая осмотическая активность данной белковой молекулы объясняется меньшей молекулярной массой и большей степенью гидрофильности в сравнении с γ-глобулинами. Так, за 65-75% онкотического давления отвечает именно альбумин (1 г его определяет 5,5 мм Hg коллоидно-осмотического давления) [Кулабухов В.В., Конкин А.А., Утев М.Д. Раствор альбумина в современной концепции инфузионной терапии - история продолжается? // Вестник анестезиологии и реаниматологии. - 2019. - Т. 16, № 4. - С. 56-64; Синауридзе Е.И. Характеристики гемостаза при гемодилюции. Коррекция гемодилюционной гиперкоагуляции ингибиторами тромбина. // дис. на соиск. учен. степ. док. биол. наук / Синауридзе Елена Ивановна. - Москва, 2013. - 290 с.].

Альбумин способен выполнять антиокислительную функцию, проявляющуюся за счёт наличия сульфгидрильной группы в структуре соединения, однако это свойство для терапии не применяется [Пашина, Е.В. Альбумин в оценке эндогенной интоксикации // Наука и современность. - 2014. - №33. - 23-28 с.].

Основными лекарственными препаратами на основе альбумина являются растворы для инфузий, которые производят в концентрациях равных 5, 10, 15 и 25%. При этом содержание альбумина относительно примесей (α- и β-глобулинов) в них должно быть не менее 97%.

На данный момент времени известно, что проведены исследования по созданию мази для лечения ожоговых заболеваний с альбумином и экстрактом прополиса, а также создана технология получения данного лекарственного препарата. Это медицинское средство может быть использовано для лечения ожогов, обморожения, трофических язв, а также в хирургии для лечения гнойной раневой инфекции [патент РФ №2381804].

Единственным аналогом является мазь для лечения ожоговых заболеваний с альбумином и экстрактом прополиса (патенты РФ №№2381804, 2599505). В качестве мазевой основы она содержит вазелин медицинский, пентол и воду очищенную при определенном соотношении компонентов. Данный состав принят в качестве прототипа.

Признаки прототипа, совпадающие с существенными признаками заявляемого состава, лекарственная форма, содержащая альбумин человека в качестве действующего вещества, мазевую основу и консервант.

Недостатком известного состава, принятого за прототип, является сложность приготовления липосом и использование 10% спиртового экстракта прополиса. Как правило, для открытых ран используют мазь с прополисом на растительном масле.

Задачей изобретения является расширение арсенала средств, обладающих противоожоговым и ранозаживляющим действием, получение лекарственной формы альбумина на основе жидкой фракции упрощенным способом.

На основе требований ГФ РФ, существующих лекарственных препаратов с альбумином человека главным является оптимальный состав лекарственной формы, при которой не происходит расслоения действующего вещества от основы и вспомогательных веществ. Разработанная гидрофильная мазь-репарант содержит в своем составе основу близкую с мазью «Эбермин» производства Heber Biotec (действующие вещества - эпидермальный фактор роста человеческий рекомбинантный и сульфадиазин серебра) [Карякин А.В., Каргина Т.М., Саканян Е.И. Современные подходы к разработке проектов проектов общих фармакопейных статей и фармакопейных статей на препараты крови человека. // Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. - 2015. - (3). - 47-52 с.].

Эпидермальный фактор роста человеческий рекомбинантный (рчЭФР) представляет собой высокоочищенный пептид. Он продуцируется штаммом дрожжей Saccharomyces Cerevisiae, в геном которого предварительно вводят ген эпидермального фактора роста человека. Большинство методик, применяемых в генной инженерии, требуют значительных финансовых затрат и характеризуются длительной и кропотливой работой, что, несомненно, сказывается на конечной стоимости продукции. Кроме того, на ценник препарата влияет и его транспортировка из-за рубежа (Республика Куба). К другим недостатком препарата можно отнести гиперчувствительность к сульфаниламидам и серебру у ряда людей.

Поставленная задача была решена за счет того, что известная лекарственная форма, содержащая альбумин человека в качестве действующего вещества, мазевую основу и консервант, согласно изобретению в качестве действующего вещества содержит 20% раствор альбумина человека, в качестве мазевой основы содержит стеариновую кислоту, в качестве консерванта - цитрат серебра и эмульгатор полисорбат 80 и дополнительно содержит глицерин 96% и карбонат калия при следующем соотношении ингредиентов, на 100 основы, г:

Отличительными признаками предлагаемого изобретения от заявляемого по прототипу являются: использование в качестве действующего вещества 20% раствора альбумина человека; использование в качестве мазевой основы стеариновой кислоты; использование в качестве консерванта цитрата серебра и эмульгатора полисорбат 80; введение в состав глицерина 96% и карбоната калия а также иное количественное соотношение используемых ингредиентов, на 100 основы, г: альбумин человека 20% -ный раствор - 50,00-75,00; стеариновая кислота - 15,50- 31,00; полисорбат 80 4,200- 9,000; глицерин 96% - 3,500-6,500; карбонат калия- 1,300-2,500; цитрат серебра - 0,500-1,000.

Концентрация действующего вещества/альбумин в гидрофильной мази-репаранте составляет - 10,0 -15,0% .

Поскольку 20%-ный раствор альбумина уже содержит в себе воду, вводить её в состав мазевой основы, как дополнительный компонент, нецелесообразно.

Использование в качестве мазевой основы стеариновой кислоты позволяет стабилизировать лекарственную форму, а также стеариновая кислота используется в качестве загустителя.

Использование в качестве консерванта цитрата серебра и эмульгатора полисорбат 80 в соответствующем количестве приводит к появлению у предлагаемого состава нового свойства усилению антибактериальной активности.

Введение в состав глицерина 96% и карбоната калия обеспечивает хорошую намазываемость мази. Глицерин необходим как влагоудерживающий компонент.

Отличительные признаки в совокупности с известными позволят получить композицию альбумина, обеспечивающую стабильность альбумина при производстве и механических воздействиях во время упаковки и транспортировки с сохранением физико-химических свойств при длительном хранении за счет введения вспомогательных веществ, улучшающих структуру связывания мазевой основы, а также улучшение намазываемости на кожу и раневые поверхности при меньшем содержании активного вещества альбумина, если наносить раствор на стерильные салфетки.

Для приготовления лекарственной формы, содержащей альбумин человека в качестве действующего вещества, используют следующие вещества:

Альбумин человека 20% -ный раствор ФС 3.3.2.0006.15

Стеариновая кислота, загуститель, ГОСТ 6484-96

Полисорбат 80 (Твин-80) - консервант, который представляет собой эмульгатор типа масло в воде, ФС 42-2540-88

Глицерин 96% - влагоудерживающий компонент, ГОСТ 6824-96

Карбонат калия - пенообразователь, регулятор кислотности, ТУ 2642-581-00205087-2007

Цитрат серебра - консервант ТУ 20.14.34-005-37232797-2020.

Заявляемые составы лекарственных форм подобраны на основе существующих (на стадии разработки или же уже выпускаемых на производственном уровне) лекарственных препаратов, в качестве действующего вещества у которых выступают пептиды или белки. Это обуславливается высокой молекулярной массой альбумина человека (66000-69000 Да).

Все вспомогательные вещества, наполнители и их количества, использованные авторами при приготовлении мази с альбумином, разрешены к медицинскому применению в России и описаны в Государственной Фармакопее, издание XI, вып.2., с. 145.

Сущность изобретения заключается в том, что состав предлагаемой композиции, готовят по новой методике, разработанной на базе требований ГФ и полученных в ходе экспериментов данных. Последовательность действий в ходе приготовления представлена ниже.

1) Оборудование (стол, ступку, пестик, шпатель) перед использованием обрабатывают спиртом или спирто-эфирной смесью.

2) Подготавливают вводимые в мазь вещества: K₂CO₃ растворяют в минимальном объёме стерильной воды дистиллированной.

3) Приготавливают основу мази: стеариновую кислоту (Т_пл = 69,6°С) в фарфоровой ступке помещают на водяную баню, доводят температуру до 70°С в фарфоровой ступке непосредственно, периодически с помощью термометра сверяя температуру. При достижении нужного значения на термометре его фиксируют и поддерживают до полного расплавления кислоты.

4) Когда кислота расплавится, систематически помешивая, постепенно вводят в мазевую основу вспомогательные вещества в следующей последовательности:

а) глицерин (перемешивают до тех пор, пока смесь не станет визуально однородной);

б) цитрат серебра;

в) полисорбат 80;

г) раствор K₂CO₃ вносят по частям (около ⅓ от общего объёма), поскольку при добавлении всего объёма одномоментно происходит бурное пенообразование, приводящее к потерям продукта.

При вводе вспомогательных веществ в расплавленную стеариновую кислоту необходимо производить помешивания смеси шпателем для равномерного распределения компонентов.

5) После введения всех вспомогательных веществ и остывания основы до 40°С вносят альбумин. По окончания процесса перемешивания мазевую основу с альбумином разливают с тубы или флаконы с соблюдением условий асептики.

По описанному способу были изготовлены 4 состава мази с альбумином с различным соотношением ингредиентов. Приготовленные составы прошли экспериментальные исследования. Физико-химические свойства мази с альбумином определяли в соответствии с требованиями разработанной ФС.

Пример 1.

Для приготовления 10 000 г мази используют коммерческий 20% раствор альбумина человека - 7100 г, стеариновую кислоту - 1800 г, глицерин 96% - 400 г, карбонат калия - 150 г, цитрат серебра - 50 г и полисорбат 80 - 500 г.

Пример 2.

Для приготовления 10 000 г мази используют коммерческий 20% раствор альбумина человека - 6500 г, стеариновую кислоту - 2220 г, глицерин 96% - 420 г, карбонат калия - 180 г, цитрат серебра - 80 г и полисорбат 80 - 600г.

Пример 3.

Для приготовления 10 000 г мази используют коммерческий 20% раствор альбумина человека - 7500 г, стеариновую кислоту - 1550 г, глицерин 96% - 350 г, карбонат калия - 130 г, цитрат серебра - 50 г и полисорбат 80 - 420 г.

Пример 4.

Для приготовления 10 000 г мази используют коммерческий 20% раствор альбумина человека - 5000 г, стеариновую кислоту - 3100 г, глицерин 96% - 650 г, карбонат калия - 250 г, цитрат серебра - 100 г и полисорбат 80 - 900 г.

Оценка качества мази предложенных составов представлена в таблице.

Таблица
Оценка качества мази с альбумином с патентуемым составом Показатели/методики определения По ФС РФ Разработанный состав, № 1 2 3 4 Размер частиц (ОФС 2.9.37) <100 <100 <100 <100 <100 Намазываемость, см (ОФС 1.4.1.0008.18) - 5,16±0,05 4,95±0,07 5,04±0,08 5,14±0,06 Кислотное число (ОФС 1.2.3.0004.15) не должно превышать 2,5 1,79 1,52 1,77 1,81 рН ГОСТ 31460-2012 5,0-9,0. 7,54±0,06 7,99±0,12 7,39±0,07 7,41±0,08 Расслоение (ГОСТ 16887-71) Отсутствует расслоение Отсутствует расслоение Отсутствует расслоение Отсутствует расслоение Отсутствует расслоение Температура плавления (ОФС 1.1.0026.18) - 27-29 28-30 26-28 27-30 Микробная контаминация Общее число аэробных бактерий - не более 10² КОЕ в 1г отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует Менее 10 дрожжевых и плесневых грибов в 1 г отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует Отсутствие бактерий семейства Enterobacteriaceae в 1 г отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1 г отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует Отсутствие Staphylococcus aureus в 1г отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует

Как видно из представленных в таблице данных, предложенный состав по всем исследуемым показателям соответствует требованиям стандартов для лекарственных форм наружного применения, что важно для длительного контакта действующего вещества, а именно альбумина с раневой поверхностью.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к лекарственной форме альбумина человека в форме мази для наружного применения. Лекарственная форма содержит альбумин человека в качестве действующего вещества, мазевую основу и консервант. В качестве действующего вещества содержит 20%-ный раствор альбумина человека, в качестве мазевой основы содержит стеариновую кислоту, в качестве консерванта - цитрат серебра и эмульгатор полисорбат 80 и дополнительно содержит глицерин 96%-ный и карбонат калия при определенном соотношении ингредиентов. Расширяется арсенал средств, обладающих противоожоговым и ранозаживляющим действием. 4 пр., 1 табл.

Лекарственная форма, содержащая альбумин человека в качестве действующего вещества, мазевую основу и консервант, отличающаяся тем, что она в качестве действующего вещества содержит 20%-ный раствор альбумина человека, в качестве мазевой основы содержит стеариновую кислоту, в качестве консерванта - цитрат серебра и эмульгатор полисорбат 80 и дополнительно содержит глицерин 96%-ный и карбонат калия при следующем соотношении ингредиентов на 100 г основы, г:

Альбумин человека 20%-ный раствор 50,00-75,00 Стеариновая кислота 15,50- 31,00 Полисорбат 80 4,200- 9,000 Глицерин 96%-ный 3,500-6,500 Карбонат калия 1,300-2,500 Цитрат серебра 0,500-1,000