СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ПРОЦЕССОВ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ ПРИ АКУСТИЧЕСКОЙ НАГРУЗКЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Российский патент 2023 года по МПК A61K31/194 A61P39/06 G09B23/28 

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к фармакологии, может быть использовано для коррекции процессов липопероксидации при акустической нагрузке и найти применение в клинической практике для снижения прооксидантного действия шума в условиях акустического стресса.

Неблагоприятное действие шума на организм базируется на денатурационных изменениях белков клеточных мембран и мембрансвязанных ферментов, потенцирующих нарушение структуры липопротеидных комплексов на фоне повышения интенсивности процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в условиях снижения активности антиоксидантной системы (АОС) [1, Гусаров Д.В. и соавт., Вестн. Рос. воен.-мед. академии, 2011]. Воздействие шума уровнем 91 дБ на лабораторных животных в течение часа сопровождается сдвигами баланса про-антиоксидантной системы в различных тканях и изменениями липид-белковых межмолекулярных взаимодействий в структуре наружного слоя эритроцитарной мембраны [2, Мелконян М.М. и соавт., Новый армянский медицинский журнал, 2012]. Многократное и систематическое воздействие на белых беспородных крыс широкополосным шумом интенсивностью 100 дБ (ежедневно в течение 4 часов 5 раз в неделю на протяжении 30 дней) приводит к устойчивым изменениям в центральной и периферической нервной системе и дисбалансу иммунологических показателей, что предопределяет необходимость разработки способов профилактики и коррекции шумового воздействия [3, Панков В.А. и соавт., Патент РФ №2655545].

Известны способы коррекции неблагоприятных эффектов однократного и хронического воздействия шума применением антиоксидантов: унитиола, аскорбиновой кислоты и альфа-токоферола [4, Торкунова О.В., Шабанов П.Д., Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии, 2014]. Недостатками способов является продолжительность курса фармакокоррекции, влияющая, соответственно, на фармакоэкономические показатели и сроки достижения конечного результата.

Известен способ снижения прооксидантного действия антиконвульсантов в эксперименте, включающий ежедневное внутрибрюшинное введение лабораторным животным сукцинатсодержащего препарата Реамберин в дозе 100 мг/кг по сукцинату ежедневно в течение 10 дней за 90 минут до введения противоэпилептических средств [5, Патент РФ №2715679]. Данное техническое решение взято нами за прототип.

Технической проблемой, решаемой данным изобретением, является расширение арсенала средств, снижающих прооксидантное действие акустической нагрузки, на основе отечественной фармацевтической продукции в условиях уменьшения курсовой дозы сукцинатсодержащего корректора и, следовательно, повышения фармакоэкономической эффективности.

Проблема решена путем разработки нового способа коррекции процессов липопероксидации при акустической нагрузке в эксперименте внутрибрюшинным введением крысам препарата Реамберин (группировочное наименование: меглюмина натрия сукцинат) производства НТФФ «Полисан» г. Санкт-Петербург (Регистрационный номер: Р N001048/01 от 06.09.2007 г.). Препарат Реамберин представляет собой раствор для инфузий (фармакотерапевтическая группа: растворы, влияющие на водно-электролитный баланс), в состав которого входит меглюмина натрия сукцинат – 15,0 г, полученный по следующей прописи: N–метилглюкамин (меглюмин) [C7H17NO5] – 8,725 г, янтарная кислота [C4H6O4] – 5,280 г; и вспомогательные вещества: натрия хлорид – 6,0 г, калия хлорид – 0,30 г, магния хлорид (в пересчёте на безводный) – 0,12 г, натрия гипоксид – 1,788 г, вода для инъекций до 1,0 л. Ионный состав на 1 л: натрий-ион – 147,2 ммоль, калий-ион – 4,0 ммоль, магний-ион – 1,2 ммоль, хлорид-ион – 109,0 ммоль, сукцинат-ион – 44,7 ммоль, N–метилглюкаммоний-ион – 44,7 ммоль.

Сущность изобретения заключается в том, что в способе коррекции процессов липопероксидации при акустической нагрузке в эксперименте, включающем ежедневное внутрибрюшинное введение лабораторным животным препарата Реамберин в дозе 100 мг/кг по сукцинату, крысам вводят сукцинатсодержащий фармакокорректор в течение 6 дней перед шумовым воздействием (ШВ).

ШВ создавали путем подачи через динамики предварительно записанного и воспроизведенного звука (звук работающего двигателя мотоцикла) с уровнем звукового давления 95-105 дБ, определяемого с помощью шумомера PCE-999. По спектральным и временным характеристикам воспроизводимый шум являлся широкополосным (непрерывный спектр шириной более одной октавы) и постоянным (уровень звука изменялся во времени не более чем на 10 дБА). ШВ осуществляли ежедневно в течение 6 дней, длительность экспозиции – 1 ч.

Осуществление способа. Экспериментальным животным (крысам), находящимся в стандартных условиях вивария, в течение 6 дней перед акустической нагрузкой (ШВ с длительностью экспозиции 1 ч) ежедневно внутрибрюшинно вводят Реамберин в дозе 100 мг/кг по сукцинату (20 мл/кг).

Эксперимент проводили на 45 белых беспородных крысах-самцах массой 200 – 220 г, содержащихся на стандартном рационе питания, в течение 6 дней, на 7-й день животные забивались и проводились исследования. Животные были разделены на 3 группы: 1-я – интактная группа, животные находились в стандартных условиях вивария, получали ежедневно внутрибрюшинно эквиобъемное вводимому препарату Реамберин количество раствора натрия хлорида 0,9% (20 мл/кг); 2-я – контрольная группа, животных подвергали акустической нагрузке ежедневно в течение 6 дней на фоне ежедневного внутрибрюшинного введения животным перед ШВ раствора натрия хлорида 0,9% (20 мл/кг); 3-я – экспериментальная группа, животным в течение 6 дней ежедневно внутрибрюшинно вводили препарат Реамберин в дозе 100 мг/кг по сукцинату (20 мл/кг) перед ШВ. На 7^й день эксперимента животные забивались путем декапитации. Результаты учитывались по соотношению содержания продуктов ПОЛ (диеновых конъюгатов, гидроперекисей липидов, малонового диальдегида), основных компонентов антиоксидантной системы (АОС) – церулоплазмина, витамина Е, каталазы – в крови крыс экспериментальной группы в сравнении с животными интактной и контрольной групп, обработаны стандартными параметрическими методами с использованием t-критерия Стьюдента.

Способ позволил обеспечить коррекцию процессов липопероксидации при акустической нагрузке в эксперименте, базируемое на уменьшении содержания продуктов ПОЛ в крови животных и увеличении активности компонентов антиоксидантной системы (АОС), в условиях снижения курсовой дозы сукцинатсодержащего корректора в сравнении с прототипом.

Исследовано содержание продуктов ПОЛ в плазме крови крыс интактной, контрольной и экспериментальной групп на 7^й день эксперимента (таблица 1). Результаты исследования показали, что содержание диеновых конъюгатов в крови контрольных животных, подвергавшихся акустической нагрузке, достоверно выше на 40% относительно интактных крыс (р<0,05), гидроперекисей липидов – на 45% (р<0,05), малонового диальдегида – на 49% (р<0,05), что свидетельствует о повышении интенсивности процессов липопероксидации в условиях ШВ. Введение препарата Реамберин на фоне акустической нагрузки привело к снижению в плазме крови крыс концентрации диеновых конъюгатов на 24% (р<0,05), гидроперекисей липидов – на 28% (р<0,05), малонового диальдегида – на 27% (р<0,05).

Таблица 1

Содержание продуктов ПОЛ в плазме крови крыс на фоне акустической нагрузки и введения Реамберина (нмоль/мл)

Группы животных Диеновые конъюгаты Гидроперекиси липидов Малоновый диальдегид Интактная группа 34,7 ± 1,5 28,6 ± 1,2 3,7 ± 0,1 Контрольная группа (ШВ) 48,6 ± 2,0* 41,5 ± 2,2* 5,5 ± 0,2* Экспериментальная группа (ШВ + Реамберин) 36,9 ± 1,8** 30,1 ± 2,0** 4,0 ± 0,2**

Примечание: * - значения, достоверно отличающиеся от значений интактных животных (р<0,05); ** - значения, достоверно отличающиеся от значений контрольных животных (р<0,05).

Таблица 2

Содержание основных компонентов АОС в крови крыс на фоне акустической нагрузки и введения Реамберина

Группы животных Церулоплазмин (мкг/мл) Витамин Е (мкг/мл) Каталаза (ммоль Н₂О₂ л^-1с^-1) Интактная группа 27,2 ± 1,6 48,0 ± 2,4 127,5 ± 4,2 Контрольная группа (ШВ) 16,9 ± 1,1* 37,8 ± 2,0* 105,0 ± 3,5* Экспериментальная группа (ШВ + Реамберин) 25,8 ± 1,5** 46,6 ± 2,3** 125,0 ± 4,0**

Примечание: * - значения, достоверно отличающиеся от значений интактных животных (р<0,05); ** - значения, достоверно отличающиеся от значений контрольных животных (р<0,05).

Повышение интенсивности процессов липопероксидации в условиях акустической нагрузки сопровождается снижением активности компонентов АОС в крови контрольных животных в сравнении с интактными крысами (таблица 2): уровень церулоплазмина в плазме крови животных группы контроля ниже на 38% (р<0,05), витамина Е – на 21% (р<0,05), активность каталазы – на 18% (р<0,05). В крови экспериментальных животных, получавших Реамберин на фоне ШВ, содержание церулоплазмина выше на 53% по сравнению с контрольной группой крыс (р<0,05), витамина Е – на 23% (р<0,05), активность каталазы – на 19% (р<0,05), что подтверждает наличие у препарата Реамберин антиоксидантной активности и согласуется с литературными данными [5, Патент РФ №2715679].

Таким образом, экспериментально установлена возможность коррекции процессов липопероксидации при акустической нагрузке в эксперименте введением препарата Реамберин, основанная на уменьшении содержания продуктов ПОЛ и увеличении активности основных компонентов АОС в крови животных.

В целом, базируясь на полученных результатах, предложенный способ обеспечивает коррекцию процессов липопероксидации, индуцированных шумовым воздействием на лабораторных животных, в условиях уменьшения курсовой дозы сукцинатсодержащего препарата в сравнении с прототипом, что свидетельствует о наличии антиоксидантной, стресс-протективной активности и способности Реамберина снижать прооксидантную нагрузку на организм акустического стресса.

Технический результат использования изобретения заключается в уменьшении длительности курса коррекции процессов липопероксидации до 6 дней введением сукцинатсодержащего препарата Реамберин лабораторным животным, подвергавшимся воздействию шума, в сравнении с прототипом.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к фармакологии. Ежедневно в течение 6 дней крысам внутрибрюшинно вводят Реамберин в дозе 100 мг/кг по сукцинату. Затем проводят шумовое воздействие с уровнем звукового давления 95-105 дБ и длительностью экспозиции 1 ч. Способ позволяет обеспечить коррекцию процессов липопероксидации при акустической нагрузке в эксперименте, базируемую на уменьшении содержания продуктов перекисного окисления липидов в крови животных и увеличении активности основных компонентов антиоксидантной системы, в условиях снижения курсовой дозы сукцинатсодержащего корректора. 2 табл., 1 пр.

Способ коррекции процессов липопероксидации при акустической нагрузке в эксперименте, включающий ежедневное внутрибрюшинное введение лабораторным животным Реамберина в дозе 100 мг/кг по сукцинату, отличающийся тем, что крысам вводят сукцинатсодержащий препарат ежедневно в течение 6 дней перед шумовым воздействием с уровнем звукового давления 95-105 дБ и длительностью экспозиции 1 ч.