Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым производным сульфонамида и их применению в терапии, в особенности, при лечении состояний или расстройств, связанных с никотинамидадениндинуклеотидфосфат оксидазой 4 или 2 (Nox4 или Nox2). Более конкретно, настоящее изобретение относится к производным сульфонамида, которые представляют собой ингибиторы Nox4 и/или Nox2, и их применению для лечения различных заболеваний, в особенности, заболеваний, которые вызываются или которые поддерживаются повышенной активностью Nox4 и/или Nox2.
Уровень техники
Окислительный стресс определяют как in vivo дисбаланс между образованием и удалением активных форм кислорода. Вредные радикалы могут вызывать изменения в нормальном окислительно-восстановительном состоянии клетки или тканей, они могут повреждать компоненты клеточного аппарата, включая ДНК, белки и липиды. Если химические изменения клеточных компонентов вызывают генетические изменения, то обычно считается, что это способствует образованию рака или других серьезных заболеваний.
Источники радикалов кислорода - Были идентифицированы многочисленные in vivo генераторы радикалов кислорода (O2-, H2O2 и OH-), которые потенциально могут вызывать окислительный стресс: комплекс I и III в митохондриях и НАДФН-оксидаза, ксантиноксидаза, цитохромы P450, ионы металлов (кобальт, ванадий, хром, медь и железо) и некоторые органические соединения, способные к окислительно-восстановительным превращениям.
Общие антиоксиданты - Также существуют многочисленные эндогенно клеточные антиоксиданты, такие как супероксиддисмутаза (СОД), каталаза, глутатионпероксидаза, пероксиредоксины и сульфиредоксин. Витамины, поступающие с пищей, также считаются важной частью защиты организма от вредных кислородных радикалов, и недавнее открытие важных антиоксидантов, присутствующих во многих источниках пищи, увеличило арсенал антиоксидантов.
Антиоксиданты как терапевтические средства - Совершенно очевидно, что некоторые антиоксиданты могут быть полезны в профилактике заболеваний и укреплении здоровья. Гораздо менее ясно, какие антиоксиданты можно применять. Многие из антиоксидантов, содержащихся в натуральной пище, обладают окислительно-восстановительной активностью. Если эти типы окислительно-восстановительных активных веществ выделить и предоставить в качестве дополнительных лекарственных средств, это может оказаться скорее вредным, чем полезным. Клинические испытания показали, что нецелевое применение антиоксидантов, которые широко улавливают радикалы кислорода, не только неэффективно, но даже может быть вредным. Это было проиллюстрировано в исследовании, проведенном с шестьюдесятью семью рандомизированными испытаниями с участием 232 550 участников, включая здоровых людей и пациентов с различными заболеваниями (Bjelakovic G, Nikolova D, Simonetti RG, Gluud C. Cochrane Database Syst Rev. 2008 Jul 16; (3):CD004183. Epub 2008 Jul 16). Таким образом, общие антиоксиданты, которые обладают окислительно-восстановительной активностью, на самом деле могут усиливать повреждение клеток, опосредуя вредный окислительно-восстановительный цикл. Другие общие антиоксиданты пагубно блокируют нормальную клеточную активность in vivo, необходимую для поддержания функций организма.
Источник и роль активного кислорода - Становится все более очевидным, что то, что вызывает чрезмерную выработку и накопление активных форм кислорода при ряде патологических состояний, таких как воспаление, диабет 2-го типа, осложнения диабета, синдром поликистозных яичников, инсульт, пагубные неврологические состояния и рак, не представляет собой, как правило, утечку кислородных радикалов, например, в комплексе I или III, в митохондриях - скорее это активированные мощные продуценты кислородных радикалов, которые представляют собой часть нормальной клеточной системы передачи сигналов. Таким образом, определение окислительного стресса не обязательно должно включать кислородные радикалы, которые необратимо изменяют ДНК, белок или липиды, а вместо этого все больше вмешиваются, если активируются путем «нормальной» передачи сигнала, создавая дисбаланс на клеточном уровне, который в конечном итоге может повлиять на другие ткани и целые функции организма. Метаболический синдром, связанный с сосудистым заболеванием, диабетом 2, инсультом, нефропатией, невропатией, сердечной недостаточностью и инсультом с инсулинорезистентностью как инициирующим фактором, представляет собой типичный пример этого явления (Reaven, «Role of insulin resistance in human disease», Diabetes 37(12), 1988). Инсулинорезистентность сама по себе также представляет собой часть нормального функционирования организма в качестве инструмента для выборочного накопления энергии в подходящем принимающем органе. Однако когда происходят метаболические изменения, такие как переедание, или другие нарушения, такие как акромегалия с избыточной выработкой гормона роста или неправильная работа лептина, как у мышей ob/ob, это вызывает опасное состояние с неконтролируемой резистентностью к инсулину, которое может привести к поражению органов, связанное с метаболическим синдромом. Общий знаменатель неконтролируемой инсулинорезистентности - это избыточное производство местных и системных кислородных радикалов (Houstis et al., Nature 440, 2006; Katakam et al., J cereb blood Flow Metab, 2012 Jan 11).
Семейство трансмембранных белков (ферментов), называемых НАДФН-оксидазой (Nox) представляет собой одного из наиболее интересных кандидатов на это избыточное производство. Идентифицировано семь членов семейства Nox (Nox 1-5 и Duox 1-2), которых очень часто считают основным или ключевым источником активных форм кислорода и которые также играют важную роль в ряде клеточных событий как часть нормальной системы передачи клеточного сигнала, включая пролиферацию (Brar et al., Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 282, 2002), рост (Brar et al., Am J Physiol Cell Physiol, 282, 2002), фиброз (Grewal et al., Am J Physiol, 276, 1999), миграцию (Sundaresan et al., Science, 270, 1995), апоптоз (Lundqvist-Gustafsson et al., J Leukoc Biol, 65, 1999), дифференциацию (Steinbeck et al., J Cell Physiol, 176, 1998), перестройку цитоскелета (Wu et al., J Virol, 78, 2004) и сокращение (Rueckschloss et al., Exp Gerontol, 45, 2010).
НАДФН-оксидаза и заболевание - Были идентифицированы некоторые генетические состояния со сниженной активностью НАДФН-оксидазы - дефект Nox2 снижает иммунологический ответ на уничтожение и нейтрализацию микробных атак (хроническая гранулематозная болезнь) - дефект Nox3 во внутреннем ухе вызывает нарушение восприятия силы тяжести, а двойная НАДФН-оксидаза Duox2, имеющая недостаточную ферментативную активность в щитовидной железе, вызывает гипотиреоз.
Однако существует гораздо более обширный список публикаций, который также, кажется, растет в геометрической прогрессии, свидетельствующий об убедительных доказательствах того, что повышенная активность Nox представляет собой часть или даже причину ряда заболеваний (Lambeth JD, Review Article «Nox enzymes, ROS and chronic disease: An example of antagonistic pleiotropy», Free Radical Biology & Medicine 43, 2007; Takac I et al., «The Nox Family of NADPH Oxidases: Friend or Foe of the Vascular System», Curr Hypertens Rep. 2011 Nov 10; Montezano AC, «Novel Nox homologues in the vasculature: focusing on Nox4 and Nox5», Clin Sci London 2011; Bedard K et al., «The Nox family of ROS-generating NADPH oxidases: physiology and pathophysiology» Physiol Rev. 2007; Camici M et al., «Obesity-related glomerulopathy and podocyte injury: a mini review», Front Biosci 2012; Nabeebaccus A et al., «NADPH oxidases and cardiac remodeling» Heart Fai Rev. 2011; Kuroda J et al., «NADPH oxidase and cardiac failure» J Cardiovasc Transl Res. 2010; Kuroda J et al., «NADPH oxidase 4 is a major source of oxidative stress in the failing heart» Proc Natl Acad Sci USA 2010; Maejima Y et al., «Regulation of myocardial growth and death by NADPH oxidase» J Mol Cell Cardiol. 2011; Barnes JL et al., «Myofibroblst differentiation during fibrosis: role of NADPH oxidases» Kidney international, 2011; Alison Cave «Selective targeting of NADPH oxidase for cardiovascular protection» Current Opinion in Pharmacology 2009; Albert van der Vliet «Nox enzymes in allergic airway inflammation» Biochimica et Biophysica Acta 1810, 2011; Pendyala S et al., «Redox regulation of Nox proteins» Respiratory Physiology & Neurobiology 174, 2010; Nair D et al., «Intermittent Hypoxia-Induced Cognitive Deficits Are Mediated by NADPH oxidase Activity in a Murine Model of Sleep Apnea» PLoS ONE, vol. 6, Issue 5, May 2011; Chia-Hung Hsieh et al., «NADPH oxidase Subunit 4-Mediated Reactive Oxygen species Contribute to Cycling Hypoxia-Promoted Tumor Progression in Glioblastoma Multiforme» PloS ONE, vol 6, issue 9, September 2011; Sedeek M et al., «Molecular mechanisms of hypertension: role of nox family NADPH oxidase» Current Opinion in Nephrology and Hypertension 2009; Augusto C et al., «Novel Nox homologues in the vasculature: focusing on Nox4 and Nox5» Clinical Science 2011; Briones AM et al., «Differential regulation of Nox1, Nox2 and Nox4 in vascular smooth muscle cells from WKY and SHR» Journal of the American Society of Hypertension 5:3, 2011).
Недавно было показано, что ферменты Nox и особенно Nox4 заметно вовлечены в легочный фиброз. Функция окислительного стресса в фиброзе хорошо известна (Kinnula VL, Fattman CL, Tan RJ, Oury TD (2005) Oxidative stress in pulmonary fibrosis: a possible role for redox modulatory therapy. Am J Respir Crit Care Med 172:417-422), поскольку существует значительный и растущий объем доказательств, указывающих на то, что окислительный стресс играет важную роль в патологическом развитии фиброза легких, а также фиброза во многих системах органов. (Kuwano K, Nakashima N, Inoshima I, Hagimoto N, Fujita M, Yoshimi M, Maeyama T, Hamada N, Watanabe K, Hara N (2003) Oxidative stress in lung epithelial cells from patients with idiopathic interstitial pneumonias. Eur Respir J 21:232-240). Таким образом, ферменты Nox и особенно Nox4, по-видимому, также участвуют в легочных инфекциях, остром повреждении легких, легочной артериальной гипертензии, обструктивных заболеваниях легких, фиброзных заболеваниях легких и раке легких.
Изоферменты НАДФН-оксидазы, сходства, различия и функции - Все семь изоферментов НАДФН-оксидазы (идентифицированные) похожи наличием сайта связывания НАДФН и FAD и шести трансмембранных доменов и в том, что они включают два гемовых комплекса.
Все формы НАДФН-оксидазы применяют один и тот же основной механизм для генерации активных форм кислорода, но их субклеточные локализации и способы действия значительно различаются. Активные формы кислорода, продуцируемые ферментативным семейством Nox, представляют собой либо супероксид O2-, либо пероксид водорода H2O2.
Nox1 и 2 конститутивно присоединены к p22phox, и для активации ферментного комплекса необходимы другие компоненты, такие как Rac, p47phox, p67phox, для полной активности Nox1. Для полной активации Nox2 необходим Rac, p40phox, p47phox и p67phox. Активированные Nox1 и 2 генерируют O2-.
Для активности Nox3 также необходима сборка цитозольных белков (Cheng et al., J Biol Chem, 279(33), 2004).
Nox4 также связан с p22phox и в этой форме постоянно активен. Однако активность Nox4 регулируется посредством экспрессии, а не посредством сборки или активации лиганда, что отличает эту изоформу от других изоформ (Serrander et al., Biochem J. 406, 2007). При индукции Nox4 обычно экспрессируется на более высоком уровне, чем Nox1 и 2 (Ago et al., Circulation, 109, 2004). Nox4, по-видимому, в основном генерирует H2O2 вместо O2-, как другие варианты Nox (Takac et al., J. Biol. Chem. 286, 2011). Это делает эту изоформу уникальной, поскольку H2O2 обладает способностью проникать через мембраны и, таким образом, действовать на большем расстоянии, чем O2-, который имеет очень короткий период полураспада.
Nox5, Doux1 и Doux2 активируются под действием Ca2+ (De Deken, Wang et al., J.Biol Chem., 275(30), 2000).
Nox4 повсеместно экспрессируется во многих типах клеток, хотя и на очень низком уровне, пока не будет индуцирован. Однако его в основном обнаруживают в почках, эндотелиальных клетках, адвентициальных фибробластах, плаценте, гладкомышечных клетках, остеокластах и представляет собой преобладающий Nox, который экспрессируется в опухолях (Chamseddine et al., Am J Physiol Heart Circ Physiol, 285, 2003; Ellmark et al., Cardiovasc Res, 65, 2005; Van Buul et al., Antioxid Redox Signal, 7, 2005; Kawahara et al., BMC Evol Biol, 7, 2007; Krause et al., Jpn J Infect is. 57(5), 2004; Griendling, Antioxid Redox Signal, 8(9), 2006). Было обнаружено, что Nox4 сверхэкспрессируется в большинстве клеточных линий рака молочной железы и первичных опухолях молочной железы. Сверхэкспрессия Nox4 в уже трансформированных клетках опухоли молочной железы показала повышенную онкогенность, и в них Nox4 был идентифицирован в митохондриях. Nox4 был предложен в качестве мишени для лечения рака груди (Graham et al., Cancer Biol Ther 10 (3), 2010). Сообщали, что Nox4 играет важную роль в качестве митохондриального энергетического сенсора, принимающего участие в метаболическом перепрограммировании, что приводит к лекарственной устойчивости рака и, таким образом, он представляет собой потенциальную терапевтическую мишень (Shanmugasundaram et al., Nat Comm. 2017 Oct 19; 8 (1): 997). Сообщалось о пагубной роли Nox4, реализуемой через ROS-опосредованную запрограммированную гибель клеток и воспаление, в остром повреждении почек, вызванном лечением рака цисплатином (Lab Invest. 2018 Jan; 98(1): 63-78).
Ишемически-реперфузионное повреждение представляет собой результат воспалительного процесса, который возникает вслед за временным уменьшением кровотока, а затем восстановлением кровотока (реперфузией). Почечное ишемически-реперфузионное повреждение представляет собой основную причину почечной недостаточности, которая приводит к острому повреждению почек, заболеваемости и смертности пациентов. Гибель канальцевых клеток из-за некроза и апоптоза представляет собой центральный признак ишемически-реперфузионного повреждения почек, при этом Nox4 и Nox2 играют важную роль в патогенезе (Simone et al., Free Radic Biol Med 2014 Sep; 74:263-73).
Nox4 опосредует окислительный стресс и апоптоз, вызываемый TNF-α в эндотелиальных клетках сосудов головного мозга (Basuroy et al., Am J Physiol Cell Physiol, том 296, 2009). Его неблагоприятный эффект после ишемического инсульта хорошо продемонстрирован на животных моделях и тканях человека. В эксперименте с нокдауном Nox4 резко сокращалась область повреждения нейронов (Sedwick, PLos Biology, vol. 8 issue 9, 2010; Kleinschnitz et al., vol. 8 issue 9, 2010).
Исследования нокдауна и сверхэкспрессии в эндотелиальных клетках микрососудов и пупочной вены показали, что повышенная активность Nox4 играет важную роль в пролиферации и миграции эндотелиальных клеток (Datla et al., Arterioscler Throm Vasc Biol, 27(11), 2007). Первоначально считалось, что Nox2 ответственен за ангиогенные дефекты при диабете, но акцент сместился в сторону Nox4 (Zhang et al., PNAS, 107, 2010; Garriodo-Urbani et al., Plos One 2011; Takac et al., Curr Hypertens Rep, 14, 2012).
Nox4 также играет ключевую роль в гибели эпителиальных клеток во время развития фиброза легких (Camesecchi et al., Antiox Redox Signal. 1:15(3), 2011).
Кроме того, было продемонстрировано, что siRNA-опосредованный нокдаун Nox4 значительно снижает активность NADPH-оксидазы в изолированных митохондриях мезангиальных клеток и коры почек. Нокдаун блокировал индуцированное глюкозой образование митохондриального супероксида. Было высказано предположение, что Nox4 действует как центральный медиатор окислительного стресса, который может привести к митохондриальной дисфункции и повреждению клеток при диабете (Block et al., PNAS vol. 106, no. 34, 2009).
Также было продемонстрировано, что уровень Nox4 был системно повышен при индуцированном диетой ожирении у крыс (Jiang, redox rep, 16 (6), 2011). Дальнейшие исследования показали, что некоторые ингибиторы Nox4 противодействуют непереносимости глюкозы у мышей C57BL/6, получавших диету с высоким содержанием жиров, и было также показано, что эти ингибиторы защищают островковые клетки человека, подвергшихся воздействию высокого уровня глюкозы в сочетании с пальмитатом (Anvari E et al., Free Radical Res. 2015; 49 (11): 1308-18; Wang et al., PLoS One, 2018 Sep 28; 13(9)).
Nox4 тесно связан с патологией сердечной недостаточности (Nabeebaccus A et al. «NADPH oxidases and cardiac remodeling» Heart Fai Rev. 2011; Kuroda J et al., «NADPH oxidase and cardiac failure Cardiovasc Transl Res. 2010; Kuroda J et al., «NADPH oxidase 4 is a major source of oxidative stress in the failing heart» Proc Natl Acad Sci USA 2010). Предполагают, что существует связь между повышенной митохондриальной активностью Nox4 и нарушением функции «стареющего сердца». (Tetsuro Ago et al., AGING, December 2010, vol. 2 No 12).
Накопление внеклеточного матрикса способствует развитию патологии хронического заболевания почек. Активность фактора роста IGF-I вносит основной вклад в этот процесс, а Nox4 представляет собой посредника в этом процессе (New et al., Am J Physiol Cell Physiol. 302(1), 2012). Связь между хронической активацией ренин-ангиотензина и прогрессированием системы повреждения почек хорошо установлена, и Nox4 и ангиотензина II участвуют в этом процессе (Chen et al., Mol Cell Biol. 2012).
Диабетическая ретинопатия (ДР) представляет собой одно из серьезных осложнений диабета. ДР представляет собой основную причину потери зрения и причину слепоты в мире и тесно связана с длительным течением диабета, гипергликемии и гипертонии (Wong et al, Nat Rev D is Primers, 2016 Mar 17; 2: 16012). Патогенез ДР до конца не ясен. Повышенный рост микрососудов рассматривают как начальный этап (Antonetti et al., N Engl. J Med 2012, 29 марта; 366 (13): 1227-39), но данные свидетельствуют о том, что нейродегенерация может произойти до появления микрососудистых изменений в доклинических условиях (Carpineto et al., Eye (Lond). 2016 May; 30(5): 673-9).
НАДФН-оксидаза считается потенциальной мишенью при лечении диабетической ретинопатии, и, в особенности, изоформа Nox4 связана с повреждением клеток сетчатки. (Peng et al., «Diabetic retinopathy: Focus on NADPH oxidase and its potential as therapeutic target» Eur J Pharmacol. 2019 Apr 19; 853:381-387; Jiao et al., «Activation of the Notch-Nox4-reactive oxygen species signaling pathway induces cell death in high glucose-treated human retinal endothelial cells». Mol Med Rep. 2019 Jan; 19(1):667).
Острая интенсивная инсулинотерапия вызывает преходящее ухудшение диабетической ретинопатии, опосредованное Nox4 (Poulaki V et al., «Acute intensive insulin therapy exacerbates diabetic blood-retinal breakdown via hypoxia-inducible factor-1 alpha и VEGF, J Clin Invest 109: 805-815, 2002; Meng et al., «NADPH Oxidase 4 mediates Insulin-Stimulated HIF-1 a and VEGF Expression и Angiogenesis in Vitro», PLoS One, Oct 2012, vol 7, issue 10).
Фиброзные заболевания характеризуются появлением миофибробластов и избыточным накоплением внеклеточного матрикса, что приводит к сокращению тканей и нарушению функции. Миофибробласты образуются в результате преобразования фибробластов в миофибробласты, а в некоторых тканях - в результате эпителиально-мезенхимального перехода (EMT), процесса, посредством которого эпителиальная клетка меняет свой фенотип так, чтобы стать более похожей на мезенхимальную клетку, и в этом процессе, как полагают, центральную роль играет трансформирующий фактор роста бета (TGFbeta). Недавно в нескольких исследованиях сообщали, что эпителиально-мезенхимальный переход (EMT) способствует развитию различных фиброзных заболеваний почек. (Zeisberg M, et al., Nat Med. 2003;9:964-968), легкого (Kim KK et al., Proc Natl Acad Sci USA. 2006; 103:13180-13185) и печени (Zeisberg M, et al., J Biol Chem. 2007; 282:23337-23347). Saika Set al. предложили EMT в качестве терапевтической мишени для предотвращения фиброза глазной ткани (в Endocr Metab Immune Disord Drug Targets. 2008 Mar; 8(1): 69-76). EMT также вовлечен в хроническое глазное заболевание человека «трансплантат против хозяина» (Ogawa Y, et al. Epithelial mesenchymal transition in human ocular chronic graft-versus-host disease. Am J Pathol. 2009; 175(6):2372-2381).
Кроме того, пролиферативная витреоретинопатия (PVR) представляет собой осложнение отслоения сетчатки (RD) и представляет собой основную причину хирургической неудачи после лечения RD. PVR характеризуется образованием фиброзной ткани на отслоившейся сетчатке, которая препятствует повторному прикреплению сетчатки и потенциально может вызвать слепоту. Клетки пигментного эпителия сетчатки (RPE) представляют собой основной компонент фиброзной мембраны и трансформируются в фибробластоподобные клетки посредством эпителиально-мезенхимального перехода (EMT). Было показано, что клетки RPE экспрессируют Nox (например, Nox2 и 4) в нормальных физиологических условиях. Следовательно, было высказано предположение, что ингибиторы Nox потенциально могут быть применены для лечения и профилактики PVR (Jing Y. et al., Int J Mol Med. 2018 Jul; 42(1): 123-130).
Ранее с применением хорошо охарактеризованной in vitro модели эпителиально-мезенхимального перехода (EMT) в эпителиальных эксплантатах хрусталика крысы (Hales AM et al., Investigative ophthalmology & visual science. 1995; 36(8):1709-13; Liu J, et al., Investigative ophthalmology & visual science. 1994; 35(2):388-401), показали, что TGFβ способен активировать экспрессию Nox4 и сопутствующее производство активных форм кислорода (ROS) (Das SJ, Investigative ophthalmology & visual science. 2016;57(8):3665-73). Кроме того, было показано, что фармакологическое ингибирование активности Nox4 с помощью селективных ингибиторов Nox4 и Nox2 замедляет прогрессирование EMT, а также отменяет экспрессию маркера миофибробластов, альфа-актина гладких мышц (αSMA) (Das SJ, et al., vide supra).
Черепно-мозговая травма (ЧМТ) представляет собой основную причину смерти и инвалидности во всем мире. Поэтому существует большая потребность в нейропротекторном средстве. Патология ЧМТ развивается от нескольких минут до нескольких лет после первоначальной травмы. Окислительный стресс представляет собой основную движущую силу в сложном каскаде механизмов вторичного повреждения и в значительной степени способствует нейродегенерации и нейровоспалению. Исследования делеции Nox2 и Nox4 показали, что эти мишени могут снижать окислительный стресс, ослаблять нейровоспаление, защищать нейроны и сохранять функциональную способность объекта (Ma et al., «NADPH oxidase 2 regulates NLRP3 inflammasome activation in the brain after traumatic brain injury», Oxid Med. Cell Longev. 2017 60576009; Dohi et al., «Gp91phox(Nox2) in classical activated microglia exacerbates traumatic brain injury», J Neuroinflamm. 7 (2010) 41; Wang et al., «Regulatory role of NADPH oxidase 2 in the polarization dynamics and neurotoxicity of microglia/macrophages after traumatic brain injury». Free Radic. Biol. Med. 113 (2017) 119-131; Kumar et al., «Nox2 drives M1-like microglia/macrophage activation and neurodegeneration following experimental traumatic brain injury», Brain Behav. Immun. 58 (2016) 291-309); Ma et al., «Deletion of NADPH oxidase 4 reduces severity of traumatic brain injury, Free Radic. Biol. Med. 117 (2018) 66-75; Lo et al., «NADPH oxidase inhibition improves neurological outcomes in surgical-induced brain injury», Neurosci. Lett. 414 (2007) 228-232; Chadran et al., «A combination antioxidant therapy to inhibit Nox2 and activate Nrf2 decreases secondary brain damage and improves functional recovery after traumatic brain injury» J. Cereb. Blood Flow. Metab. (2017)).
Из вышесказанного следует, что ферменты Nox, в особенности Nox2 и Nox4, выполняют в живом организме несколько функций, и они также могут быть вовлечены в различные нарушения. Сердечно-сосудистые заболевания, респираторные заболевания, нарушения обмена веществ, эндокринные заболевания, кожные заболевания, заболевания костей, нейровоспалительные и/или нейродегенеративные заболевания, заболевания почек, нарушения репродуктивной функции, заболевания, поражающие глаз и/или хрусталик, и/или состояния, влияющие на внутреннее ухо, воспалительные заболевания, заболевания печени, боль, рак, аллергические расстройства, травмы, такие как черепно-мозговые травмы, септический, геморрагический и анафилактический шок, заболевания или расстройства желудочно-кишечного тракта, ангиогенез, состояния, зависимые от ангиогенеза, представляют собой примеры таких заболеваний и расстройств. Также выяснили, что именно Nox4 участвует в таких расстройствах. Следовательно, считается, что соединения, способные ингибировать Nox, и, в особенности, соединения, способные избирательно ингибировать Nox4, будут представлять большой интерес для применения при лечении заболеваний и расстройств, связанных с ферментами Nox, и в особенности, с Nox2 и Nox4.
Как указано выше в настоящем документе, среди прочих заболеваний Nox4 вовлечен в развитие инсульта. Инсульт представляет собой вторую ведущую причину смерти во всем мире, и выжившие часто становятся инвалидами с серьезными когнитивными проблемами, влияющими на социальную жизнь, а также на способность выполнять работу. Помимо страданий пациентов и близких родственников, это также чрезвычайно дорого обходится обществу и системе здравоохранения. Без новых эффективных способов лечения пациентов с инсультом стоимость ухода за пострадавшими от инсульта в течение следующих 45 лет только в США превысит 2,2 триллиона долларов.
Инсульт делится на две основные категории. Ишемический инсульт, вызывающий нарушение кровоснабжения, и геморрагический инсульт, возникающий в результате разрыва кровеносного сосуда. Оба инсульта вызывают быструю потерю функции мозга, вызванную нарушением кровоснабжения. Ишемический инсульт представляет собой наиболее частую форму, на которую приходится 87% случаев, в то время как 9% связаны с внутримозговым кровоизлиянием, а остальные 4% - с субарахноидальным кровоизлиянием.
Патофизиология ишемического инсульта сложна, и выздоровление пациента зависит от того, сколько времени нейронные ткани лишены кровоснабжения. Ткани мозга, лишенные кислорода более трех часов, будут необратимо повреждены. Патофизиология включает механизмы эксайтотоксичности, воспалительные пути, окислительное повреждение, ионный дисбаланс, апоптоз, ангиогенез и эндогенную защиту нейронов. Кроме того, когда лейкоциты повторно входят в ранее гипоперфузируемую область через возвращающуюся кровь, они могут закупоривать мелкие сосуды, вызывая дополнительную ишемию.
Различные стратегии лечения инсульта заключаются в выявлении групп риска для профилактического лечения и в разработке, внедрении и распространении руководств по клинической практике, основанных на фактических данных, с целью установления стандарта ведения инсульта посредством непрерывной помощи с ранним лечением, что имеет решающее значение для улучшения исхода после приступа ишемического инсульта.
Один из двух одобренных в настоящее время способов лечения - это внутривенное введение тканевого активатора плазминогена (tPA), вызывающего тромболизис, который может удалить сгусток и восстановить кровоснабжение ткани мозга. Другой способ - это механическое удаление сгустка для восстановления кровоснабжения.
Другие подходящие способы находятся на ранней стадии исследований, а некоторые - на стадии клинических испытаниях. Новые, представляющие интерес, потенциальные способы лечения включают введение нейропротекторных средств, охлаждение ишемизированного мозга и применение стентов для реваскуляризации закупоренных артерий.
Таким образом, способ лечения приступа ишемического инсульта обычно включает удаление механических препятствий (сгустков крови) из кровотока, например, путем внутривенного введения тканевого активатора плазминогена (tPA). Считается, что сочетание устранения механических препятствий кровотоку с введением до или после нейропротекторных средств может помочь спасти ишемические нейроны в головном мозге от необратимого повреждения, включая апоптоз. Однако на сегодняшний день не существует нейропротекторного средства для успешного лечения инсульта. Таким образом, представляется, что все еще существует потребность в усовершенствованном лечении инсульта, в особенности, в усовершенствованном лечении путем введения нейропротекторных средств, предпочтительно, в сочетании с удалением тромбов в ишемизированном мозге.
Было показано, что Nox2 участвует в различных патологиях человека, таких как заболевание периферических артерий (Loffredo L. et al., Int J Cardiol 2013; 165: 184-192), острый инфаркт миокарда (Krijnen PA, et al., J Clin Pathol 2003; 56: 194-199) и нейродегенеративные расстройства (Sorce S.; Antioxid Redox Signal 2009; 11: 2481-2504), повреждение сосудов при диабетической ретинопатии (Rojas, M. et al. PLOS ONE. 8 (12): e84357). Кроме того, Schiavone S et al. в Translational Psychiatry volume 6, page e813 (2016) представили доказательства того, что усиление оксидативного стресса, вызванного Nox2, в головном мозге может быть вовлечено в нейропатологические пути, ведущие к суицидальному поведению.
Международная заявка № PCT/EP2015/079586 (WO 2016/096720) раскрывает некоторые производные сульфонамида, которые представляют собой ингибиторы Nox, в особенности, ингибиторы Nox4. Международная заявка № PCT/US2006/049117 (WO 2007/076055) раскрывает некоторые производные сульфонамида в качестве антагонистов рецепторов, активируемых протеиназой, и упоминает два соединения: 4-бутил-N-[2-(2-этоксифенил)этил]бензол-1-сульфонамид и 3,4-дихлор-N-[2-(2-этоксифенил)этил]бензол-1-сульфонамид. 
D., et al. в European Journal of Medicinal Chemistry vol. 44, (2009), 3266-3271, раскрывают пятичленные гетероциклические соединения, протестированные в качестве ингибиторов основных металлокарбоксипептидаз, и упоминают соединение 3-метил-N-(2-метилфенетил)-4-(1H-тетразол-1-ил)бензолсульфонамид.
Сульфонамиды также были описаны как промежуточные продукты синтеза. Так, для этой цели заявка на патент США №12/357,725 (номер публикация 2009/0176804) раскрывает 5-бром-2-хлор-N-[2-(2-метоксифенил)этил]бензолсульфонамид и 5-бромо-2-хлор-N-[2-(2-трифторметоксифенил)-этил]-бензолсульфонамид; заявка на патент США №11/862,818 (номер публикация 2008/0090821) раскрывает N-[2-(2-метоксифенил)-этил]-4-метилбензолсульфонамид и N-[2-(2-гидрокси-группыфенил)этил]-4-метилбензолсульфонамид; Aronica L. et al. раскрыли N-(2-иодфенетил)-4-метилбензолсульфонамид в Eur. J. Org. Chem. 2017, 955-963; Priebbenow D. et al. раскрыли N-(2-бромфенэтил)-4-метилбензолсульфонамид раскрыт в Tetrahedron 53 (2012), 1468-1471; и Henderson L. et al. в Tetrahedron 53 (2012), 4657-4660, раскрыли 4-метил-N-(2-(2',3',4',5'-тетрагидро-[1,1'-бифенил]-2-ил)этил)бензолсульфонамид.
Раскрытие изобретения
Как упоминалось выше в настоящем документе, некоторые производные сульфонамида были ранее описаны для применения в качестве ингибиторов Nox4. Однако все еще существует потребность в соединениях, обладающих улучшенной ингибирующей активностью в отношении Nox4, предпочтительно, в сочетании с высокой селективностью к Nox4 по сравнению с одним или несколькими другими ферментами семейства Nox. Авторы настоящего изобретения идентифицировали новые производные сульфонамида, обладающие неожиданно высокой ингибирующей активностью по отношению к Nox4, преимущественно в сочетании с очень высокой селективностью по отношению к Nox4. Такие характеристики могут позволить применять соединения по изобретению при лечении заболеваний, связанных с активностью Nox4, например, любое из заболеваний, указанных выше в настоящем документе.
Авторы настоящего изобретения также неожиданно обнаружили, что некоторые из производных сульфонамида, обеспеченных в настоящем документе, обладают высокой ингибирующей активностью в отношении Nox2, выгодно сочетающейся с высокой селективностью в отношении Nox2. Такая активность может позволить применять соединения по настоящему изобретению при лечении расстройств, связанных с активностью Nox2, например, любое из нарушений, указанных выше в настоящем документе.
В некоторых воплощениях, обеспечены соединения, обладающие активностью как в отношении Nox2, так и Nox4, преимущественно, в сочетании с высокой селективностью по отношению к Nox2 и Nox4 по сравнению с другими членами семейства Nox. Таким образом, в некоторых воплощениях предложены соединения, способные ингибировать, по меньшей мере, один из Nox2 и Nox4 и имеющие высокую селективность, по меньшей мере, к одному из Nox2 и Nox4 по сравнению с другими ферментами Nox, например, одним или несколькими из Nox1, Nox3 и Nox5. В некоторых предпочтительных воплощениях обеспечены соединения, способные ингибировать как Nox2, так и Nox4, и имеющие высокую селективность как в отношении Nox2, так и Nox4 по сравнению с другими ферментами Nox.
Преимущественно, селективная ингибирующая активность соединений по изобретению в отношении Nox2 и/или Nox4 также может предпочтительно сопровождаться отсутствием внутренней окислительно-восстановительной активности, а также отсутствием ингибирования ксантиноксидазы или глюкозооксидазы.
Таким образом, первый аспект - это соединение формулы (I)
или его фармацевтически приемлемая соль, в которой
n представляет собой целое число от 1 до 5;
каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила, C1-C6 алкоксикарбонила, C1-C6 алкоксикарбонил-C1-C3 алкила и галогенкарбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила, C1-C6 алкоксикарбонила, C1-C6 алкоксикарбонил-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена;
R2 выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила, галогена, гидрокси-группы и гидрокси-C1-C3 алкила;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F;
любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами; и
любой карбоциклил или гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группировками, независимо выбранными из галогена и C1-C3 алкила;
при условии, что соединение не представляет собой
4-бутил-N-[2-(2-этоксифенил)этил]бензол-1-сульфонамид,
3,4-дихлор-N-[2-(2-этоксифенил)этил]бензол-1-сульфонамид,
5-бром-2-хлор-N-[2-(2-метоксифенил)этил]бензолсульфонамид,
5-бром-2-хлор-N-[2-(2-трифторметоксифенил)этил]бензолсульфонамид,
N-[2-(2-метоксифенил)этил]-4-метилбензолсульфонамид,
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-метилбензолсульфонамид,
N-(2-иодфенэтил)-4-метилбензолсульфонамид,
N-(2-бромфенэтил)-4-метилбензолсульфонамид,
4-метил-N-(2-(2',3',4',5'-тетрагидро-[1,1'-бифенил]-2-ил)этил)бензолсульфонамид, или
3-метил-N-(2-метилфенэтил)-4-(1H-тетразол-1-ил)бензолсульфонамид.
Другой аспект относится к соединению формулы (I), как определено в настоящем документе, для применения в терапии. В некоторых воплощениях, терапия направлена на лечение пациента-человека, т.е. соединение формулы (I) предназначено для (фармацевтического) применения человеком. В некоторых других воплощениях, терапия направлена на лечение млекопитающего, не представляющего собой человека, такого как домашнее животное, т.е. фармацевтическое применение имеет ветеринарный характер.
В другом аспекте, обеспечивают фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы (I) или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения и, необязательно, фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция предназначена для применения человеком, то есть для лечения человека. В некоторых других воплощениях фармацевтическая композиция представляет собой ветеринарную композицию, подходящую для лечения животного, такого как, например, собака или кошка.
Согласно одному из аспектов, соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль предназначены для применения при лечении заболеваний, связанных с, например, вызванных или обусловленных, повышенной активностью, по меньшей мере, одного из (т.е. одного или обоих) Nox2 и Nox4.
Согласно другому аспекту, соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль обеспечивают для применения при лечении заболеваний, связанных с, например, вызванных или обусловленных, повышенной активностью Nox4. Примеры таких состояний и расстройств, связанных с активностью Nox4, указаны выше в настоящем документе как связанные с Nox4 или опосредованные им, например, состояния и расстройства, выбранные из эндокринных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний, респираторных заболеваний, нарушений обмена веществ, кожных заболеваний, заболеваний костей, нейровоспалительных и/или нейродегенеративных заболеваний, заболеваний почек, нарушений репродуктивной системы, заболеваний, поражающих глаз и/или хрусталика, и/или состояний, влияющих на внутреннее ухо, воспалительных заболеваний, заболеваний печени, боли, рака, аллергических заболеваний, травм, септического, геморрагического и анафилактического шока, заболеваний или расстройств желудочно-кишечного тракта, аномального ангиогенеза и ангиогенез-зависимых состояний, легочных инфекций, острого повреждения легких, легочной артериальной гипертензии, обструктивных заболеваний легких и фиброзных заболеваний легких.
Согласно другому аспекту, соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль обеспечивают для применения при лечении заболеваний связанных с, например, вызванных или обусловленных, повышенной активностью Nox2. Примеры таких состояний и расстройств, связанных с активностью Nox2 указаны выше в настоящем документе как связанные с Nox2 или опосредованные им, например, состояния и расстройства, выбранные из заболевания периферических артерий, острого инфаркта миокарда и нейродегенеративных заболеваний, повреждения сосудов во время диабетической ретинопатии и психических заболеваний, в особенности, связанных с самоубийством.
Согласно одному из аспектов, обеспечивают способ лечения заболевания, как указано выше в настоящем документе, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) пациенту-млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении. В некоторых воплощениях, заболевание выбирают из эндокринных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний, респираторных заболеваний, нарушений обмена веществ, кожных заболеваний, заболеваний костей, нейровоспалительных и/или нейродегенеративных заболеваний, заболеваний почек, нарушений репродуктивной системы, заболеваний, поражающих глаз и/или хрусталика, и/или состояний, влияющих на внутреннее ухо, воспалительных заболеваний, заболеваний печени, боли, рака, аллергических расстройств, травм, септического, геморрагического и анафилактического шока, заболеваний или нарушений желудочно-кишечного тракта, аномального ангиогенеза и ангиогенез-зависимых состояний, инфекций легких, острого повреждения легких, легочной артериальной гипертензии, обструктивных заболеваний легких и фиброзных заболеваний легких.
Согласно одному из аспектов, обеспечивают способ ингибирования активности Nox4, у нуждающегося в этом млекопитающего, путем введения указанному млекопитающему соединения формулы (I) или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения.
Согласно одному из аспектов, соединение формулы (I) обеспечивают для применения в лечении инсульта, например, ишемический инсульта.
Согласно дополнительному аспекту, соединение формулы (I) обеспечивают для применения в качестве нейропротекторного средства при лечении инсульта, например, ишемический инсульта.
Согласно одному из аспектов, обеспечивают способ ингибирования активности Nox2, у нуждающегося в этом млекопитающего, путем введения указанному млекопитающему соединения формулы (I) или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения.
Согласно дополнительному аспекту, обеспечивают способ ингибирования активности, по меньшей мере, одного из Nox2 и Nox4, у нуждающегося в этом млекопитающего, путем введения указанному млекопитающему соединения формулы (I) или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения.
Согласно одному из аспектов, применение соединения формулы (I) обеспечивают, для производства лекарственного средства для лечения любого из заболеваний, указанных в настоящем документе.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 представляет собой гистограмму, показывающую жизнеспособность клеток как отношение к базальной жизнеспособности эндотелиальных клеток микрососудов головного мозга человека, подвергшихся в течение 5-ти часов гипоксии и голоданию (OGD): недостаток кислорода и глюкозы), а затем культивируемых в течение 24-х часов в отсутствие или в присутствии примера 11 в концентрации, равной 2, 10 или 20 мкМ. Базальные условия = без гипоксии и голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды. OGD = 5 часов гипоксии или голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды.
Фиг. 2 представляет собой гистограмму, показывающую жизнеспособность клеток как отношение к базальной жизнеспособности эндотелиальных клеток микрососудов головного мозга человека, подвергшихся в течение 5-ти часов гипоксии и голоданию (OGD), а затем культивируемых в течение 24-х часов в отсутствие или в присутствии примера 17 в концентрации, равной 0,3, 3 или 10 мкМ. Базальные условия = без гипоксии и голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды. OGD = 5 часов гипоксии или голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды.
Фиг. 3 представляет собой гистограмму, показывающую жизнеспособность клеток как отношение к базальной жизнеспособности эндотелиальных клеток микрососудов головного мозга человека, подвергшихся в течение 6-ти часов гипоксии и голоданию (OGD): недостаток кислорода и глюкозы), а затем культивируемых в течение 24-х часов в отсутствие или в присутствии примера 44 в концентрации, равной от 0,6 до 9,6 мкМ. Базальные условия = без гипоксии и голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды. OGD = 6 часов гипоксии или голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды (*p<0,05, ***p<0,001).
Фиг. 4 представляет собой гистограмму, показывающую жизнеспособность клеток (в % от базальной жизнеспособности клеток) срезов мозга гиппокампа, подвергнутых гипоксии и голоданию в течение 5-ти часов, а затем культивируемых в течение 24-х часов в отсутствии (OGD) или в присутствии примера 11 в концентрации, равной 0,3 мкМ, 3 мкМ или 10 мкМ. Базальные условия = без гипоксии и голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды. OGD = 5 часов гипоксии или голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды.
Фиг. 5 представляет собой гистограмму, показывающую жизнеспособность клеток (в % от базальной жизнеспособности клеток) срезов мозга гиппокампа подвергнутых гипоксии и голоданию в течение 5-ти часов, а затем культивируемых в течение 24-х часов в отсутствии (OGD) или в присутствии примера 17 в концентрации, равной 0,3, 3 или 10 мкМ. Базальные условия = без гипоксии и голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды. OGD = 5 часов гипоксии или голодания, клетки культивировали только в присутствии культуральной среды.
Фиг. 6 показывает фронтальные секционные срезы мозга мышей C57B16/J, которых подвергали окклюзии средней мозговой артерии в течение 1-го часа. Срезы были окрашены хлоридом 2,3,5-трифенилтетразолия (TTC) для визуализации ишемических поражений. Контроль = мыши, получавшие только носитель, умерщвленные через 24 часа; Пример 17 = мыши, получавшие пример 17 в дозировке 2,56 мг/кг массы тела, который вводили в виде одной внутрибрюшинной инъекции в час, от 1 часа после реперфузии до 6 часов после реперфузии, умерщвленные через 24 часа.
Фиг. 7 представляет собой гистограмму, показывающую средний объем инфаркта (в мм3) у мышей в модели острого инсульта. Контроль = мыши, получавшие только носитель. Пример 17 = мыши, получавшие пример 17 в дозировке 2,56 мг/кг массы тела, который вводили в виде одной внутрибрюшинной инъекции в час, от 1 часа после реперфузии до 6 часов после реперфузии. Мышей умерщвляли через 24 часа.
Фиг. 8 показывает фронтальные секционные срезы мозга мышей C57B16/J, которых подвергали окклюзии средней мозговой артерии в течение 1 часа. Контроль = мыши, получавшие только носитель, умерщвленные через 24 часа; пример 17 = мыши, получавшие пример 17 в дозировке 2,56 мг/кг массы тела, который вводили в виде одной внутрибрюшинной инъекции в час, от 30 минут до реперфузии до 4,5 часов, умерщвленные через 24 часа.
Фиг. 9 представляет собой гистограмму, показывающую средний объем инфаркта (в мм3) у мышей в модели острого ишемического инсульта. Контроль = мыши, получавшие только носитель. Пример 17 = мыши, получавшие пример 17 в дозировке 2,56 мг/кг массы тела, который вводили в виде одной внутрибрюшинной инъекции в час, от 30 минут до реперфузии до 4,5 часов после реперфузии. Мышей умерщвляли через 24 часа.
Фиг. 10 представляет собой гистограмму, показывающую жизнеспособность клеток (в % от базальной жизнеспособности клеток) культивируемых клеток нейробластомы человека SHSY-5Y, подвергнутых воздействию окадаиковой кислоты, в отсутствии или в присутствии различных концентраций примера 17 или мелатонина в качестве положительного контроля. Базальные условия = Клетки культивировали только в присутствии культуральной среды; OA = клетки культивировали в присутствии окадаиковой кислоты в концентрации, равной 15 нМ; Пример 17 (0,3 мкМ) = клетки культивировали в присутствии окадаиковой кислоты (15 нМ) и Примера 17 в концентрации, равной 0,3 мкМ; Пример 17 (3 мкМ) = клетки культивировали в присутствии окадаиковой кислоты (15 нМ) и Примера 17 в концентрации, равной 3 мкМ; Пример 17 (10 мкМ) = клетки культивировали в присутствии окадаиковой кислоты (15 нМ) и Примера 17 в концентрации, равной 10 мкМ; Мелатонин (10 мкМ) = клетки культивировали в присутствии окадаиковой кислоты (15 нМ) и мелатонина в концентрации, равной 10 мкМ.
Фиг. 11A представляет схему обработки срезов гиппокампа (нокаут Nox4 или дикий тип), включая 40 минут стабилизации, затем 6 часов обработки окадаиковой кислотой (1 мкМ) или окадаиковой кислотой (1 мкМ) в присутствии либо ингибитора Nox VAS2870 (3-бензил-7-(2-бензоксазолил)тио-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидина) (10 мкМ) или примера 11 (10 мкМ). Фиг. 11B представляет собой гистограмму, показывающую жизнеспособность (в % от жизнеспособности срезов гиппокампа, культивируемых только в питательной среде) клеток гиппокампа с нокаутом Nox4 (KO) или дикого типа (WT), соответственно. Базальные условия = срезы гиппокампа, культивируемые только в культуральной среде; OA1 (1 мкМ) = срезы гиппокампа, культивируемые в присутствии окадаиковой кислоты (1 мкМ). Фиг. 11C представляет собой гистограмму, показывающую жизнеспособность (в % от жизнеспособности срезов гиппокампа, культивируемых только в культуральной среде) клеток гиппокампа дикого типа культивируемых только в культуральной среде (базальные условия); в присутствии окадаиковой кислоты в концентрации, равной 1 мкМ (OA); в присутствии окадаиковой кислоты (1 мкМ) и VAS2870 в концентрации, равной 10 мкМ (VAS) и в присутствии окадаиковой кислоты (1 мкМ) и примера 11 в концентрации, равной 10 мкМ (Пример 11).
Фиг. 12 представляет собой гистограмму, показывающую действие цитокинов IL-1β (20 нг/мл) и IFN-γ (20 нг/мл) на островковые клетки человека (Cyt); на островковые клетки человека в присутствии примера 17 (1 мкМ) (Cyt+Пример 17); на островковые клетки человека в присутствии Phos-I2 (2 мкМ) (Cyt+ инг. Nox2); и на островковые клетки человека в присутствии ML-171 (2 мкМ) (Cyt+ инг. Nox1), соответственно. Эффект показан в виде коэффициента гибели клеток по сравнению с культурой островковых клеток человека в отсутствии каких-либо цитокинов (контроль).
Фиг. 13 представляет собой гистограмму, показывающую эффект пальмитата (1,5 мМ) и высокой глюкозы (20 мМ) на островковые клетки человека (Palm HG); на островковые клетки человека в присутствии примера 17 (1 мкМ) (Palm HG Пример 17); на островковые клетки человека в присутствии Phos-I2 (2 мкМ) (Palm HG инг. NOX2); и на островковые клетки человека в присутствии ML-171 (2 мкМ) (Palm HG инг. NOX1), соответственно. Эффект показан как коэффициент гибели клеток по сравнению с островковыми клетками человека, культивируемыми только в культуральной среде (контроль). Также показаны коэффициенты гибели клеток для островковых клеток человека, культивируемых в присутствии примера 17 в концентрации 1 мкМ (Пример 17), Phos-I2 в концентрации 2 мкМ (инг. NOX2) и ML-171 в концентрации 2 мкМ (инг. NOX1).
Фиг. 14 представляет собой гистограмму, показывающую общую флуоресценцию эпителиальных клеток эксплантатов хрусталика крысы (необработанных), эпителиальных клеток эксплантатов хрусталика крысы, обработанных TGFβ в течение 8-ми часов (TGFβ), эпителиальных клеток эксплантатов хрусталика крысы, обработанных TGFβ и примером 11 в течение 8-ми часов (TGFβ/Пример 11), а также из эпителиальных клеток эксплантатов хрусталика крысы, обработанных TGFβ и примером 17 в течение 8-ми часов (TGFβ/Пример 17), и окрашенных на супероксид с помощью DHE. Средние значения и SEM были рассчитаны с применением программы Graph Pad Prism v7.0. Статистическую значимость определяли с помощью однофакторного дисперсионного анализа с применением апостериорного критерия Тьюки (**p<0,01, ***p<0,001, n = 3 индивидуальных независимых эксперимента). Планки погрешностей: SEM.
Фиг. 15 (A-H) показывает микрофотографии, сделанные в дни 0, 2, 3 и 5, эксплантатов хрусталика крысы, обработанных и культивированных в течение 5-ти дней с TGFβ (A-D) или с TGFβ и примером 17 (E-H).
Фиг. 16 представляет собой гистограмму, показывающую повышение экспрессии генов в эксплантатах эпителия хрусталика крысы P21 через 48 часов культивирования с (TGFβ) или без (контроль) обработки TGFβ. Повышение экспрессии выражали как относительное кратное изменение (Усл. Ед.) по сравнению с экспрессией тех же генов в контрольной культуре.
Фиг. 17 представляет собой гистограмму, показывающую повышение экспрессии генов, в эксплантатах эпителия хрусталика крысы P21, обработанных одним TGFβ (TGFβ) или TGFβ и примером 11 (TGFβ + Пример 11) через 48 часов после обработки культуры. Повышение экспрессии генов выражали как относительное кратное изменение (AU) по сравнению с экспрессией тех же генов в присутствии только TGFβ.
Фиг. 18 представляет собой гистограмму, показывающую повышение экспрессии генов, в эксплантатах эпителия хрусталика крысы P21, обработанных одним TGFβ (TGFβ) или TGFβ и примером 17 (TGFβ+Пример 17) через 48 часов после обработки культуры. Повышение экспрессии генов выражали как относительное кратное изменение (Усл. Ед.) по сравнению с экспрессией тех же генов в присутствии только TGFβ. Средние значения и SEM были рассчитаны с применением программы Graph Pad Prism v7.0. Статистическую значимость определяли с помощью однофакторного дисперсионного анализа с применением апостериорного критерия Тьюки. (*p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001, ****p<0,0001 n = 3 индивидуальных независимых эксперимента). Планки погрешностей: SEM.
Фиг. 19 представляет собой гистограмму, показывающую средний уровень яркости для иммунореактивности глиального фибриллярного кислого белка (GFAP), измеренной в препаратах глаз, полученных от здоровых (контроль) или диабетических крыс (диабетические), и от диабетических крыс, обработанных примером 17 (диабетические + пример 17), соответственно. Иммунореактивность, измеренную в препаратах глаз от здоровых крыс, принимали за 100%, и значения, полученные от диабетических крыс с обработкой примером 17 или без нее, указаны по сравнению с контрольными значениями. ***p < 0,001, ## p < 0,01.
Осуществление изобретения
В общем, любому термину, применяемому в настоящем документе, следует придавать его обычное значение, принятое в области, к которой принадлежит настоящее изобретение. Однако для ясности некоторые определения будут даны ниже в настоящем документе и будут применяться во всем описании и прилагаемой формуле изобретения, если иное не указано или не очевидно из контекста.
Термин «эндокринное заболевание» относится к нарушениям эндокринной системы, которые могут представлять собой как гипосекрецию эндокринных желез, так и гиперсекрецию или опухоли эндокринных желез. Диабет и синдром поликистозных яичников представлять собой примеры эндокринных заболеваний.
Термин «сердечно-сосудистое расстройство или заболевание» включает атеросклероз, в особенности, заболевания или расстройства, связанные с эндотелиальной дисфункцией, включая, без ограничений, артериальную гипертензию, сердечно-сосудистые осложнения диабета типа I или типа II, гиперплазию интимы, ишемическую болезнь сердца, церебральный, коронарный или артериальный вазоспазм, эндотелиальную дисфункцию, сердечную недостаточность, включая застойную сердечную недостаточность, заболевание периферических артерий, рестеноз, травму, вызванную стентированием, инсульт, ишемическую атаку, сосудистые осложнения, такие как после трансплантации органов, инфаркт миокарда, гипертензию, образование атеросклеротических бляшек, агрегацию тромбоцитов, стенокардию, аневризму, расслоение аорты, ишемическую болезнь сердца, гипертрофия сердца, тромбоэмболия легочной артерии, тромботические явления, включая тромбоз глубоких вен, повреждение, вызванное ишемией в результате восстановления кровотока или доставки кислорода, как при трансплантации органов, хирургии открытого сердца, ангиопластике, геморрагическом шоке, ангиопластике ишемизированных органов, включая сердце, мозг, печень, почки, сетчатку и кишечник.
Термин «респираторное расстройство или заболевание» включает бронхиальную астму, бронхит, аллергический ринит, респираторный синдром взрослых, муковисцидоз, вирусную инфекцию легких (грипп), легочную гипертензию, идиопатический фиброз легких и хронические обструктивные заболевания легких (COPD).
Термин «аллергическое расстройство» включает сенную лихорадку и астму.
Термин «травматизм» включает политравматизм.
Термин «заболевание или расстройство, влияющее на метаболизм» включает ожирение, метаболический синдром и диабет II типа.
Термин «кожное заболевание или расстройство» включает псориаз, экзему, дерматит, заживление ран и образование рубцов.
Термин «костные нарушения» включает остеопороз, остеосклероз, пародонтит и гиперпаратиреоз.
Термин «нейродегенеративное заболевание или расстройство» включает заболевание или состояние, характеризующееся дегенерацией или изменением центральной нервной системы (CNS), в особенности, на уровне нейронов, такие как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, боковой амиотрофический склероз, эпилепсия и мышечная дистрофия. Он также включает нейровоспалительные и демиелинизирующие состояния или заболевания, такие как лейкоэнцефалопатии и лейкодистрофии.
Термин «демиелинизирующий» относится к состоянию или заболеванию ЦНС, включающему деградацию миелина вокруг аксонов. В контексте изобретения, термин демиелинизирующие заболевание предназначен для включения состояний, которые включают процесс демиелинизации клеток, такие как рассеянный склероз, прогрессирующая мультифокальная лейкоэнцефалопатия (PML), миелопатии, любые нейровоспалительные состояния, связанные с аутореактивными лейкоцитами в CNS, врожденное нарушение обмена веществ, нейропатия с аномальной миелинизацией, демиелинизация, вызванная лекарственными средствами, демиелинизация, вызванная радиацией, наследственное демиелинизирующее состояние, демиелинизирующее состояние, вызванное прионами, энцефалит, вызванный демиелинизацией или повреждением спинного мозга. Предпочтительно заболевание представляет собой рассеянный склероз.
Термин «заболевание или расстройство почек» включает диабетическую нефропатию, почечную недостаточность, гломерулонефрит, нефротоксичность аминогликозидов и соединений платины и гиперактивный мочевой пузырь. В конкретном воплощении термин согласно изобретению включает хронические заболевания или расстройства почек.
Термин «расстройство или заболевание репродуктивной системы» включает эректильную дисфункцию, нарушения фертильности, гипертрофию предстательной железы и доброкачественную гипертрофию предстательной железы.
Термин «заболевание или расстройство, влияющее на глаз и/или хрусталик», включает катаракту, включая диабетическую катаракту, повторное помутнение хрусталика после операции по удалению катаракты, диабетическую и другие формы ретинопатии.
Термин «состояния, влияющие на внутреннее ухо» включают пресбиакузис, шум в ушах, болезнь Меньера и другие проблемы с балансом, утрикулолитиаз, вестибулярную мигрень, а также потерю слуха, вызванную шумом, и потерю слуха, вызванную лекарствами (ототоксичность).
Термин «воспалительное расстройство или заболевание» означает воспалительное заболевание кишечника, сепсис, септический шок, респираторный дистресс-синдром у взрослых, панкреатит, шок, вызванный травмой, бронхиальную астму, аллергический ринит, ревматоидный артрит, хронический ревматоидный артрит, артериосклероз, внутримозговое кровоизлияние, инфаркт мозга, сердечную недостаточность, инфаркт миокарда, псориаз, муковисцидоз, инсульт, острый бронхит, хронический бронхит, острый бронхиолит, хронический бронхиолит, остеоартрит, подагру, миелит, анкилозирующий спондилит, синдром Рейтера, псориатический артрит, спондилоартрит, ювенильный артрит или ювенильный анкилозирующий спондилит, реактивный артрит, инфекционный артрит или артрит после инфекции, гонококковый артрит, сифилитический артрит, болезнь Лайма, артрит, вызванный «синдромом ангиита», узелковым полиартериитом, анафилактическим ангиитом, гранулематозом Лугенека, ревматоидную полимиалгию, ревматизм суставных клеток, артрит с отложением кристаллов кальция, псевдоподагра, неартритический ревматизм, бурсит, тендосиновит, воспаление надмыщелков (теннисный локоть), запястного канала, нарушения, возникающие при многократном применении (типировании), смешанную форму артрита, невропатическую артропатию, геморрагический артрит, сосудистый пелиоз, гипертрофическую остеоартропатию, многоцентровый ретикулогистиоцитоз, артрит, вызванный конкретными заболеваниями, пигментацию крови, серповидно-клеточную анемию и другие нарушения гемоглобина, гиперлипопротеинемию, дисгаммаглобулинемию, гиперпаратиреоз, акромегалию, семейную средиземноморскую лихорадку, болезнь Беше, системное аутоиммунное заболевание, эритематоз, рассеянный склероз и болезнь Крона, или такие заболевания, как рецидивирующий полихондрит, хронические воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) или родственные заболевания, которые требуют введения млекопитающему в терапевтически эффективной дозе соединения по формуле (I), в дозе, достаточной для ингибирования НАДФН-оксидазы.
Термин «заболевания или расстройства печени» включают фиброз печени, алкогольный фиброз, стеатоз и неалкогольный стеатогепатит.
Термин «артрит» означает острый ревматический артрит, хронический ревматоидный артрит, хламидийный артрит, хронический абсорбирующий артрит, анкилезный артрит, артрит, вызванный заболеванием кишечника, филяриальный артрит, гонорейный артрит, подагрический артрит, гемофильный артрит, гипертрофический артрит, юношеский хронический артрит, артрит Лайма, неонатальный артрит жеребят, узелковый артрит, охронотический артрит, псориатический артрит или гнойный артрит или родственные заболевания, которые требуют введения млекопитающему в терапевтически эффективной дозе соединения формулы (I), в дозе, достаточной для ингибирования НАДФН-оксидазы.
Термин «боль» включает гипералгезию, связанную с воспалительной болью.
Термин «рак» означает карциному (например, фибросаркому, миксосаркому, липосаркому, хондросаркому, остеогенная саркому, хордому, ангиосаркому, саркому эндотелия, лимфангиосаркому, лимфангиоэндотелиому, периостеому, мезотелиому, опухоль Юинга, лейомиосаркому, рабдомиосаркому, рак толстой кишки, рак поджелудочной железы, рак груди, рак яичников, рак почек, рак предстательной железы, плоскоклеточный рак, базальноклеточный рак, аденокарциному, карциному потовых желез, карцинома сальных желез, папиллярную карциному, папиллярную аденокарциному, цистаденокарциному, медуллярную карциному, бронхогенную карциному, почечно-клеточную карциному, гепатоцеллюлярную карциному, холангиокарциному, хориокарциному, семиному, эмбриональную карциному, опухоль Вильмса, рак шейки матки, опухоль яичка, рак легких, мелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легких, рак мочевого пузыря или эпителиальный рак) или родственные заболевания, которые требуют введения млекопитающему в терапевтически эффективной дозе соединения формулы (I), в дозе, достаточной для ингибирования НАДФН-оксидазы.
Термин «заболевание или расстройство желудочно-кишечного тракта», включает нарушения слизистой оболочки желудка, лечение ишемической болезни кишечника, энтерит/колит, химиотерапию рака или нейтропению.
Термин «ангиогенез» включает прорастающий ангиогенез, интуссусцепционный ангиогенез, васкулогенез, артериогенез и лимфангиогенез. Ангиогенез представляет собой образование новых кровеносных сосудов из ранее существовавших капилляров или посткапиллярных венул и происходит при патологических состояниях, таких как рак, артрит и воспаление. Большое разнообразие тканей или органов, состоящих из организованных тканей, может поддерживать ангиогенез при болезненных состояниях, включая кожу, мышцы, кишечник, соединительную ткань, суставы, кости и подобные ткани, в которые кровеносные сосуды могут вторгаться при ангиогенных стимулах. Как применено в настоящем документе, термин «зависимое от ангиогенеза состояние» предназначен для обозначения состояния, при котором процесс ангиогенеза или васкулогенеза поддерживает или усиливает патологическое состояние. Васкулогенез возникает в результате образования новых кровеносных сосудов, возникающих из ангиобластов, которые представляют собой предшественников эндотелиальных клеток. Оба процесса приводят к образованию новых кровеносных сосудов и включены в значение термина «состояния, зависимые от ангиогенеза». Точно так же термин «ангиогенез», как применен в настоящем документе, предназначен для включения de novo образования сосудов, таких как сосуды, возникающие в результате васкулогенеза, а также сосуды, возникающие в результате разветвления и разрастания существующих сосудов, капилляров и венул.
Термин «ингибитор ангиогенеза» означает ингибитор, который эффективно снижает степень, количество или скорость неоваскуляризации. Воздействие на уменьшение степени, количества или скорости пролиферации или миграции эндотелиальных клеток в ткани представляет собой конкретный пример ингибирования ангиогенеза. Ингибирующая активность в отношении ангиогенеза особенно полезна при лечении любых видов рака, поскольку она нацелена на процесс роста опухоли и в отсутствие неоваскуляризации опухолевой ткани, опухолевая ткань не получает необходимые питательные веществ, замедляется в росте, прекращает дополнительный рост, регрессирует и в конечном итоге становится некротической, что приводит к гибели опухоли. Кроме того, ингибирующая активность в отношении ангиогенеза особенно полезна при лечении любых видов рака, поскольку она особенно эффективна против образования метастазов, так как для их образования также требуется васкуляризация первичной опухоли, чтобы метастатические раковые клетки могли выйти из первичной опухоли, а их закрепление во вторичном месте требует неоваскуляризации для поддержки роста метастазов.
Как применено в настоящем документе, термин «лечение» и «лечить» включают профилактику названного расстройства или состояния или улучшение или устранение расстройства после того, как оно было установлено. Таким образом, лечение обычно означает получение желаемого фармакологического и физиологического эффекта. Эффект может быть профилактическим, с точки зрения предотвращения или частичного предотвращения заболевания, его симптома или состояния, и/или может быть терапевтическим с точки зрения частичного или полного излечения заболевания, состояния, симптома или неблагоприятного эффекта, приписываемого заболеванию.
Термин «субъект», как применен в настоящем документе, относится к млекопитающим. Млекопитающие, рассматриваемые в настоящем изобретении, включают людей и других млекопитающих, таких как приматы, домашних животных, таких как сельскохозяйственные животные, например, крупный рогатый скот, овцы, свиньи, лошади и т.п., а также домашних животных, таких как собаки и кошки, и тому подобное.
«Эффективное количество» (или «терапевтически эффективное количество» и т.п.) относится к количеству соединения, которое оказывает терапевтический эффект на подвергаемого лечению субъекта. Терапевтический эффект может быть объективным (т.е. измеряемым с помощью какого-либо теста или маркера) или субъективным (т.е. субъект указывает на эффект или ощущает его).
Термин «ингибитор», примененный в контексте изобретения, определяют как молекулу, которая полностью или частично подавляет активность другой молекулы, например, фермента.
«Фармацевтически приемлемый» означает пригодность для приготовления фармацевтической композиции, которая в целом безопасна, нетоксична и не представляет собой нежелательную композицию с биологической или иной точки зрения, и включает ее полезность для ветеринарии, а также для применения в фармацевтике.
Термин «алкил» сам по себе или как часть радикала относится к алкилу с прямой или разветвленной цепью общей формулы CnH2n+1.
Выражение «Cm-Cn» в связи с такой группировкой, как, например, алкил или карбоциклил, указывает на то, что группировка содержит ряд атомов углерода в диапазоне от m до n (где n больше, чем m).
Термин «Cm-Cn алкил» относится к алкилу, содержащему от m до n атомов углерода, где n представляет собой целое число больше m, и m равно, по меньшей мере, 1. Например, метил представляет собой C1 алкил.
Термин «Cm-Cn алкоксикарбонил» относится к группировке по формуле
в которой R представляет собой алкильную группу Cm-Cn.
Термин «Cm-Cn алкоксикарбонил-Cp-Cq» алкил относится к Cp-Cq алкильной группе, имеющей один атом водорода замещенный Cm-Cn алкоксикарбонильной группой, т.е. Cp-Cq алкильной группой, замещенной Cm-Cn алкоксикарбонильной группой.
Термин «карбоциклил» или «карбоциклическое кольцо» относится к насыщенной или ненасыщенной (например, мононенасыщенной или диненасыщенной), неароматической или ароматической циклической группировке, содержащей только атомы углерода в кольце. Насыщенный карбоциклил называется циклоалкилом, а фенил представляет собой ароматический карбоциклил.
Термин «Cm-Cn карбоциклил» относится к карбоциклилу, содержащему от m до n атомов углерода в кольце, где m представляет собой целое число, больше или равное 3.
Термин «Cm-Cn карбоциклил-Cp-Cq алкил» относится к Cp-Cq алкилу, замещенному Cm-Cn карбоциклилом. Например, циклопропилметил представляет собой C3 карбоциклил-C1 алкил радикал формулы
.
Термин «Cm-Cn алкокси-группа» относится к группировке формулы
в которой R представляет собой Cm-Cn алкил. Например, метокси-группа - это C1 алкокси-группа.
Термин «Cm-Cn алкокси-Cp-Cq алкил» относится к Cp-Cq алкилу, замещенному Cm-Cn алкокси-группой. Например, метоксиметил - это C1 алкокси-C1 алкил.
Термин «Cm-Cn карбоциклилокси-группа» относится к группировке по формуле
в которой R представляет собой Cm-Cn карбоциклил; и m представляет собой целое число, равное, по меньшей мере, 3.
Термин «Cm-Cn карбоциклилокси-Cp-Cq алкил» относится к Cp-Cq алкилу, замещенному Cm-Cn карбоциклилокси-группой.
Термин «карбокси» относится к группировке по формуле -COOH, которая также может быть представлена как
.
Термин «карбокси-Cm-Cn алкил» относится к Cm-Cn алкильной группе, имеющей один атом водорода, замещенный карбоксильной функцией (т.е. замещенный карбокси-группой). Один из примеров - карбоксиметил.
Термин «от m- до n-членный гетероциклил» относится к циклической группировке, содержащей от m до n кольцевых атомов, из которых, по меньшей мере, один представляет собой гетероатом, например, циклическая группировка, содержащая от 1 до k-1 гетероатомов, в которой k представляет собой общее количество атомов в кольце (т.е. k представляет собой целое число от m до n); например, 1-4 гетероатомов или 1-3 гетероатомов или 1 или 2 гетероатомов, например, 1 гетероатом. Гетероциклил может быть насыщенным или ненасыщенным и, когда он ненасыщен, может быть неароматическим или ароматическим (т.е. гетероароматическим). Ароматический гетероциклил можно также называть «гетероарилом».
Термин «от m- до n-членный гетероциклил-Cp-Cq алкил» относится к Cp-Cq алкилу (в котором p представляет собой целое число, по меньшей мере, 1), замещенному от m- до n-членным гетероциклилом.
Термин «галоген» относится к F, Cl, Br или I; предпочтительно, к F, Cl или Br.
Термин «гетероатом» относится к атому, выбранному из азота (N), кислорода (O) и серы (S).
Термин «неароматический», как применен в настоящем документе, также включает «негетероароматический», если не указано иное.
Термин «гидрокси-группа» относится к группировке HO-.
Термин «гидрокси-Cm-Cn алкил» относится к алкильной группе, содержащей от m до n атомов углерода и имеющей один атом водорода, замещенный гидрокси-функцией, т.е. Cm-Cn алкил, замещенной гидрокси-функцией. Один из примеров представляет собой гидроксиметил.
Выражение «соседние атомы фенильного кольца» (как в выражении «два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца») относится к двум соседним атомам углерода фенильного кольца.
В контексте настоящего раскрытия, выражение «два R1, присоединенные к соседним атомам в фенильном кольце» или «два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца» относится к двум группировкам R1 которые, в соединении формулы (I), расположены рядом с фенильным кольцом, замещенным n остатками R1, в котором n равно, по меньшей мере, 2.
В соединении формулы (I), n представляет собой целое число в диапазоне от 1 до 5. В некоторых воплощениях, n представляет собой целое число в диапазоне от 1 до 4. В некоторых воплощениях, n представляет собой целое число в диапазоне от 1 до 3. В некоторых воплощениях, n равно 1 или 2. В некоторых воплощениях, n равно 1. В некоторых дополнительных воплощениях, n представляет собой целое число в диапазоне от 2 до 5, например, от 3 до 5 или от 4 до 5. В еще других воплощениях, n представляет собой целое число в диапазоне от 2 до 4. В еще других воплощениях, n равно 2 или 3. В еще других воплощениях, n равно 3 или 4. В некоторых воплощениях, n равно 2. В некоторых воплощениях, n равно 3. В некоторых воплощениях, n равно 4. В некоторых воплощениях, n равно 5.
В соединении формулы (I), каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила, C1-C6 алкоксикарбонила, C1-C6 алкоксикарбонил-C1-C3 алкила и галогенкарбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила, C1-C6 алкоксикарбонила, C1-C6 алкоксикарбонил-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила, C1-C6 алкоксикарбонила, C1-C6 алкоксикарбонил-C1-C3 алкила и галогенкарбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила, C1-C6 алкоксикарбонила, C1-C6 алкоксикарбонил-C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C1-C6 алкокси-группы, от 4- до 6-членного гетероциклила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкил, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых других воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C1-C6 алкокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-группу, от 4- до 6-членного гетероциклила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых других воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, от 4- до 6-членного гетероциклила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила, от 4- до 6-членного гетероциклил-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых других воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, от 4- до 6-членного гетероциклила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, от 4- до 6-членного гетероциклила и галогена. В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила и галогена. В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила и галогена. В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила и C3-C6 карбоциклила. В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C1-C6 алкокси-группы, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C1-C6 алкокси-группы, гидрокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, гидрокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C1-C6 алкокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкил, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила и галогена; например, из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C1-C6 алкокси-группы, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; например, из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C1-C6 алкокси-группы, гидрокси-группы и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, гидрокси-группы и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила и галогена.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C1-C6 алкокси-группы и галогена.
В некоторых воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из галогена и гидрокси-группы.
В некоторых дополнительных воплощениях, по меньшей мере, один R1 выбирают из галогена.
Если R1 представляет собой С1-C6 алкил, то R1 более конкретно может представлять собой С1-C4 алкил или C1-C3 алкил. В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой С1-C6 алкил, то R1 более конкретно представляет собой метил или изопропил. В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой С1-C6 алкил, то R1 более конкретно представляет собой метил.
Если R1 представляет собой С1-C6 карбоциклил, то R1 более конкретно может представлять собой С3-C5 карбоциклил. В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой C3-C6 карбоциклил, R1 более конкретно представляет собой циклопропил.
Если R1 представляет собой С1-C6 карбоциклил-C1-C3 алкил, то R1 более конкретно может представлять собой С3-C5 карбоциклил-C1-C3 алкил, например, циклопропил-C1-C3 алкил или циклопропил-C1-C2 алкил, такой как циклопропилметил. В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой С1-C6 карбоциклил-C1-C3 алкил, то R1 более конкретно представляет собой C3-C6 карбоциклил-C1-C2 алкил, например, R1 представляет собой С1-C6 карбоциклилметил или C3-C5 карбоциклилметил.
В некоторых воплощениях, если любой из R1 представляет собой карбоциклил или включает карбоциклил (как в C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкиле), то карбоциклил представляет собой неароматический карбоциклил. В некоторых воплощениях, если любой из R1 представляет собой карбоциклил или включает карбоциклил, то карбоциклил представляет собой неароматический и насыщенный карбоциклил.
Если R1 представляет собой С1-C6 алкокси-группу, то R1 более конкретно может представлять собой С1-C4 алкокси-группу или C1-C3 алкокси-группу. В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой С1-C6 алкокси-группу, то R1 более конкретно представляет собой метокси-группу.
Если R1 представляет собой С1-C6 алкокси-C1-C3 алкил, то R1 более конкретно может представлять собой С1-C3 алкокси-C1-C3 алкил, например, метокси-C1-C3 алкил или метокси-C1-C2 алкил, такой как метоксиметил. В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой С1-C6 алкокси-C1-C3 алкил, то R1 более конкретно представляет собой С1-C3 алкоксиметил.
Если R1 представляет собой С1-C6 карбоциклилокси-группу, то R1 более конкретно может представлять собой С3-C5 карбоциклилокси-группу, например, циклопропилокси-группу.
Если R1 представляет собой С1-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкил, то R1 более конкретно может представлять собой С3-C5 карбоциклилокси-C1-C3 алкил, например, циклопропилокси-C1-C3 алкил или циклопропилокси-C1-C2 алкил, такой как циклопропилоксиметил. В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой С1-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкил, то R1 более конкретно представляет собой C3-C6 карбоциклилокси-C1-C2 алкил, например, R1 представляет собой С1-C6 карбоциклилоксиметил или C3-C5 карбоциклилоксиметил.
В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой карбоциклил или включает карбоциклильную группировку, такой карбоциклил не представляет собой фенил.
Если R1 представляет собой от 4- до 6-членный гетероциклил или от 4- до 6-членный гетероциклил-C1-C3 алкил, то от 4- до 6-членный гетероциклил, например, может представлять собой 5- или 6-членный гетероциклил. Любой такой гетероциклил может содержать один или несколько гетероатомов, например, 1, 2, 3 или 4 гетероатома или 1-3 гетероатома, например, 1 или 2 гетероатома или 1 гетероатом, выбранные из N, O и S.
В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой от 4- до 6-членный гетероциклил или от 4- до 6-членный гетероциклил-C1-C3 алкил, такой гетероциклил не представляет собой ароматический гетероциклил. В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой 5- или 6-членный гетероциклил или 5- или 6-членный гетероциклил-C1-C3 алкил, такой гетероциклил представляет собой (гетеро)ароматический, т.е. 5- или 6-членный гетероарил. В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой от 4- до 6-членный гетероциклил или от 4- до 6-членный гетероциклил-C1-C3 алкил, гетероциклил представляет собой 5- или 6-членный, в особенности, 5- или 6-членный гетероарил, и содержит один или несколько гетероатомов, например, 1, 2 или 3 гетероатома или 1 или 2 гетероатома, например, 1 гетероатом. В некоторых из этих воплощений, любой такой гетероатом представляет собой азот (N). В некоторых воплощениях, если R1 представляет собой от 4- до 6-членный гетероциклил или от 4- до 6-членный гетероциклил-C1-C3 алкил, то гетероциклил представляет собой пиридинил, например, 3-пиридинил.
В некоторых других воплощениях, любой 4-6-членный гетероциклил может быть выбран из азетидинила, пирролидинила, тетрагидрофурила, тетрагидротиенила, пирролила, фурила, тиенила, имидазолидинила, пиразолидинила, оксазолидинила, изоксазолидинила, тиазолидинила, изотиазолидинила, диоксолила, дитиолила, имидазолила, пиразолила, оксазолила, изоксазолила, тиазолила, изотиазолила, триазолила, фуразолила, оксадиазолила, тиадиазолила, дитиазолила, тетразолила, пиперидинила, тетрагидропиранила, тианила, пиридинила, пиперазинила, морфолинила, тиоморфолинила, диоксанила, диазинила, оксазинила, тиазинила и триазинила.
Если R1 представляет собой галоген, то такой галоген, например, может быть выбран из F, Cl и Br. В некоторых воплощениях, любой такой галоген выбирают из Cl и Br.
Если R1 представляет собой гидрокси-C1-C3 алкил, то R1 более конкретно может представлять собой гидрокси-C1-C2 алкил, такой как гидроксиметил.
Если R1 представляет собой карбокси-C1-C3 алкил, то R1 более конкретно может представлять собой карбокси-C1-C2 алкил, такой как карбоксиметил.
Если R1 представляет собой С1-C6 алкоксикарбонил, то R1 более конкретно может представлять собой С1-C3 алкоксикарбонил, например, C1-C2 алкоксикарбонил, такой как метоксикарбонил.
Если R1 представляет собой С1-C6 алкоксикарбонил-C1-C3 алкил, то R1 более конкретно может представлять собой С1-C3 алкоксикарбонил-C1-C3 алкил, например, C1-C2 алкоксикарбонил-C1-C3 алкил, такой как метоксикарбонил-C1-C3 алкил. Еще более конкретно, R1 более конкретно может представлять собой С1-C3 алкоксикарбонил-C1-C2 алкил, например, C1-C2 алкоксикарбонил-C1-C2 алкил, такой как метоксикарбонил-C1-C2 алкил; R1 более конкретно может представлять собой C1-C3 алкоксикарбонилметил, например, C1-C2 алкоксикарбонилметил, такой как метоксикарбонилметил.
Если соединение формулы (I) включает два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца, то такой R1, вместе с атомами фенильного кольца, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена. В некоторых воплощениях, кольцо представляет собой 5- или 6-членное кольцо. В некоторых воплощениях, кольцо представляет собой 5-членное кольцо. В некоторых воплощениях, кольцо представляет собой 5- или 6-членное кольцо и необязательно содержит один или несколько гетероатомов, выбранных из N, O и S. Если такое кольцо содержит один или несколько гетероатомов, то оно, например, может содержать 1-3 гетероатома, например, 1 или 2 гетероатома или 1 гетероатом.
Если два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют от 4- до 6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, то такое кольцо, необязательно будет замещено одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена, например, 1-4 группировок или 1-3 группировок, например, 1 или 2 группировок, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена. В некоторых воплощениях, любую такую группировку независимо выбирают из метила, этила, изопропила, F, Cl и Br, например, из метила, F, Cl и Br или из метила, F и Cl. В некоторых воплощениях, любую такую группировку выбирают из C1-C3 алкила, например, метила.
В некоторых других конкретных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из метила, изопропила, трифторметила, циклопропила, Cl, Br, пиридинила, гидрокси-группы и карбокси-группы. В некоторых дополнительных конкретных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из метила, изопропила, трифторметила, циклопропила, Cl, Br, гидрокси-группы и карбокси-группы; например, из метила, изопропила, трифторметила, циклопропила, Br, гидрокси-группы и карбокси-группы; в особенности, из метила, изопропила, циклопропила, Br, гидрокси-группы и карбокси-группы, например, из изопропила, циклопропила, Br, гидрокси-группы и карбокси-группы.
В некоторых других конкретных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из метила, изопропила, трифторметила, циклопропила, Cl, Br, пиридинила и гидрокси-группы. В некоторых дополнительных конкретных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из метила, изопропила, трифторметила, циклопропила, Cl, Br, гидрокси-группы и карбокси-группы; например, из метила, изопропила, трифторметила, циклопропила, Br и гидрокси-группы; в особенности, из метила, изопропила, циклопропила, Br и гидрокси-группы, например, из изопропила, циклопропила, Br и гидрокси-группы.
В некоторых других конкретных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из метила, изопропила, трифторметила, циклопропила, Cl, Br и пиридинила. В некоторых дополнительных конкретных воплощениях, каждый R1 независимо выбирают из метила, изопропила, трифторметила, циклопропила, Cl и Br; например, из метила, изопропила, трифторметила, циклопропила и Br; в особенности, из метила, изопропила, циклопропила и Br, например, из изопропила, циклопропила и Br.
В соединении формулы (I), R2 выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, C3-C6 карбоциклилокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкила, галогена, гидрокси-группы и гидрокси-C1-C3 алкила. В некоторых воплощениях, R2 выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C1-C6 алкокси-группы, C3-C6 карбоциклилокси-группу, галогена и гидрокси-группы.
В некоторых воплощениях, R2 выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, галогена, гидрокси-группы и гидрокси-C1-C3 алкила.
В некоторых воплощениях, R2 выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 карбоциклила, C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкил, галогена, гидрокси-группы и гидрокси-C1-C3 алкила.
В некоторых воплощениях, R2 выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы. В некоторых воплощениях, R2 выбирают из C1-C6 алкила, галогена и гидрокси-группы. В некоторых воплощениях, R2 выбирают из C1-C6 алкила и гидрокси-группы. В еще дополнительных воплощениях, R2 выбирают из C1-C6 алкила и галогена. В некоторых воплощениях, R2 выбирают из C1-C6 алкила.
В некоторых воплощениях, R2 выбирают из C1-C6 алкила, галогена, гидрокси-группы и гидрокси-C1-C3 алкила. В некоторых воплощениях, R2 выбирают из галогена, гидрокси-группы и гидрокси-C1-C3 алкила. В некоторых воплощениях, R2 выбирают из галогена и гидрокси-группы. В некоторых воплощениях, R2 выбирают из галогена. В некоторых воплощениях, R2 выбирают из гидрокси-группы и гидрокси-C1-C3 алкила, например, R2 представляет собой гидрокси-группу.
Если R2 представляет собой С1-C6 алкил, то R2 более конкретно может представлять собой С1-C4 алкил, в особенности, C1-C3 алкил. В некоторых воплощениях, если R2 представляет собой С1-C6 алкил, то R2 более конкретно представляет собой метил.
Если R2 представляет собой С1-C6 карбоциклил, то R2 более конкретно может представлять собой С3-C5 карбоциклил. В некоторых воплощениях, если R2 представляет собой С1-C6 карбоциклил, то R2 более конкретно представляет собой циклопропил.
Если R2 представляет собой С1-C6 карбоциклил-C1-C3 алкил, то R2 более конкретно может представлять собой С3-C5 карбоциклил-C1-C3 алкил, например, циклопропил-C1-C3 алкил или циклопропил-C1-C2 алкил, такой как циклопропилметил. В некоторых воплощениях, если R2 представляет собой С1-C6 карбоциклил-C1-C3 алкил, то R2 более конкретно представляет собой C3-C6 карбоциклил-C1-C2 алкил, например, R2 представляет собой С1-C6 карбоциклилметил или C3-C5 карбоциклилметил.
В некоторых воплощениях, если любой из R2 представляет собой карбоциклил или включает карбоциклил (как в C3-C6 карбоциклил-C1-C3 алкил), то карбоциклил представляет собой неароматический карбоциклил. В некоторых воплощениях, если любой из R2 представляет собой карбоциклил или включает карбоциклил, то карбоциклил представляет собой неароматический и насыщенный карбоциклил, т.е. циклоалкил. В некоторых воплощениях, если R2 представляет собой карбоциклил или включает карбоциклильную группировку, такой карбоциклил не представляет собой фенил.
Если R2 представляет собой С1-C6 алкокси-группу, то R2 более конкретно может представлять собой С1-C4 алкокси-группу или C1-C3 алкокси-группу. В некоторых воплощениях, если R2 представляет собой С1-C6 алкокси-группу, то R2 более конкретно представляет собой метокси-группу.
Если R2 представляет собой С1-C6 алкокси-C1-C3 алкил, то R2 более конкретно может представлять собой С1-C3 алкокси-C1-C3 алкил, например, метокси-C1-C3 алкил или метокси-C1-C2 алкил, такой как метоксиметил. В некоторых воплощениях, если R2 представляет собой С1-C6 алкокси-C1-C3 алкил, то R2 более конкретно представляет собой С1-C3 алкоксиметил.
Если R2 представляет собой С1-C6 карбоциклилокси-группу, то R2 более конкретно может представлять собой С3-C5 карбоциклилокси-группу, например, циклопропилокси-группу.
Если R2 представляет собой С1-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкил, то R2 более конкретно может представлять собой С3-C5 карбоциклилокси-C1-C3 алкил, например, циклопропилокси-C1-C3 алкил или циклопропилокси-C1-C2 алкил, такой как циклопропилоксиметил. В некоторых воплощениях, если R2 представляет собой С1-C6 карбоциклилокси-C1-C3 алкил, то R2 более конкретно представляет собой C3-C6 карбоциклилокси-C1-C2 алкил, например, R2 представляет собой С1-C6 карбоциклилоксиметил или C3-C5 карбоциклилоксиметил.
Если R2 представляет собой галоген, то такой галоген, например, может быть выбран из F, Cl и Br. В некоторых воплощениях, любой такой галоген выбирают из Cl и Br. В некоторых других воплощениях, любой такой галоген выбирают из F и Cl. В еще других воплощениях, если R2 представляет собой галоген, то он более конкретно представляет собой F. В еще других воплощениях, если R2 представляет собой галоген, то он более конкретно представляет собой Cl. В еще других воплощениях, если R2 представляет собой галоген, то он более конкретно представляет собой Br.
Если R2 представляет собой гидрокси-C1-C3 алкил, то R2, в особенности, может представлять собой гидрокси-C1-C2 алкил, например, R2 может представлять собой гидроксиметил.
Во избежание сомнений указывают, что в любом из вышеупомянутых воплощений, любой алкил (или в R1, или в R2) необязательно замещен одним или несколькими, например, 1-3, галогенами, например, выбранными из одного или нескольких галогенов, независимо выбранными из F, Cl и Br или из F и Cl, в особенности, из F, если не указано иное. В некоторых воплощениях, такой галоген отсутствует в качестве необязательного заместителя.
Кроме того, в любом из вышеупомянутых воплощений, любой карбоциклил или гетероциклил, необязательно замещают одной или несколькими, например, 1-3, группировками, выбранными из галогена и C1-C3 алкила. В некоторых воплощениях, любую такую группировку выбирают из галогена и метила, например, из F, Cl, Br и метила или из F, Cl и метила или из F и метила. В некоторых воплощениях, любую такую группировку выбирают из C1-C3 алкила, например, метила. В других воплощениях, любую такую группировку выбирают из галогена, например, из F, Cl и Br или из F и Cl, в особенности, из F. В некоторых воплощениях, такой необязательный заместитель отсутствует на любом карбоциклиле или гетероциклиле.
В соединении формулы (I) каждый из R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F. В некоторых воплощениях, по меньшей мере, два из R3, R4, R5 и R6 представляют собой H. В некоторых воплощениях, по меньшей мере, три из R3, R4, R5 и R6 представляют собой H. В некоторых воплощениях, R3 и R4 представляют собой H. В некоторых воплощениях, R3, R4 и R5 представляют собой H. В некоторых воплощениях, R3, R4, R5 и R6 все представляют собой H. В некоторых конкретных воплощениях, R3 и R4 представляют собой H и R5 и R6 представляют собой F. В некоторых других конкретных воплощениях, R3, R4 и R5 представляют собой H, и R6 представляет собой F. В еще других воплощениях, по меньшей мере, один из R3, R4, R5 и R6 представляет собой F; например, по меньшей мере, один из R5 и R6 представляет собой F. В еще дополнительных воплощениях, R3 и R4 представляют собой H; и R5 и R6 выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) более конкретно представляет собой соединение формулы (Ia)
в которой
m равно 0 или 1;
n представляет собой целое число от 2 до 5; например, n равно 2, 3 или 4; или n равно 2 или 3;
каждый R1, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе; и каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, галогена, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы и карбокси-C1-C3 алкила, в которых любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Ia), m равно 0. В некоторых других воплощениях соединения формулы (Ia), m равно 1.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Ia), n равно 2. В некоторых других воплощениях соединения формулы (Ia), n равно 3.
В некоторых воплощениях, соединение формулы (Ia) более конкретно представляет собой соединение формулы (Ib)
в котором k равно 0 или 1; m равно 0 или 1; n представляет собой целое число от 3 до 5; и каждый R1a, R1, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Ib), n равно 3 или 4.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Ib), n равно 4. В некоторых воплощениях, в которых n равно 4, k равно 1 и m равно 1. В некоторых других воплощениях соединения формулы (Ib), n равно 3, т.е. соединение может быть представлено формулой (Ic)
в которой k, m, каждый R1a, R1, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе.
В некоторых других конкретных воплощениях, k равно 0 и m равно 1, т.е. соединение формулы (Ic) такое, как представлено формулой (Id)
в которой каждый R1a, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (Ic), k и m оба равны 0, т.е. соединение формулы (Ic) такое, как представлено формулой (Ie)
в которой R1a, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (Ic), k и m оба равны 1, т.е. соединение формулы (Ic) такое, как представлено формулой (If),
в которой каждый R1a, R1, R2, R3, R4, R5 и R6 такой, как определен в настоящем документе.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (Ic), k равно 1 и m равно 0, т.е. соединение формулы (Ic) такое, как представлено формулой (Ig),
в которой каждый R1, R1a, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Ig), оба R1a и R1 представляют собой галоген. В некоторых из этих воплощений, R1a представляет собой Cl; например, R1a представляет собой Cl и R1 представляет собой Br или Cl.
В некоторых дополнительных воплощениях соединения формулы (I), более конкретно могут быть представлены формулой (Ih)
в которой
j равно 0 или 1;
m равно 0 и 1;
p представляет собой целое число от 0 до 4, например, из 0 до 3 или от 0 до 2;
каждый R1a, R1, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе;
каждый R7 независимо выбирают из C1-C3 алкила и галогена; и
кольцо A представляет собой от 4- до 6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, например, 1 или 2 гетероатома; например, 5- или 6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, например, 1 или 2 гетероатома.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Ih), p представляет собой целое число от 1 до 4 или от 1 до 3, например, p равно 2.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Ih), каждый R7 независимо выбирают из C1-C3 алкила, например, каждый R7 представляет собой метил.
В некоторых воплощениях, соединения формулы (Ih) кольцо A представляет собой неароматическое кольцо, например, неароматическое и 5-членное кольцо. Например, в некоторых воплощениях, соединение формулы (Ih) более конкретно может быть представлено формулой (Ii)
в которой
j равно 0 или 1; например, j равно 1;
m равно 0 или 1; например, m равно 1;
p представляет собой целое число от 0 до 4, например, из 0 до 3 или от 0 до 2; например, p представляет собой целое число от 1 до 4 или от 1 до 3;
q равно 0, 1 или 2; например, q равно 1 или 2;
Z представляет собой C(R8)2, NR8, O или S; например, Z представляет собой C(R8)2 или O; или Z представляет собой O;
каждый R1a, R1, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе;
каждый R7 независимо выбирают из C1-C3 алкила и галогена;
каждый R8 независимо выбирают из H и C1-C3 алкила; например, H и метила; и
и любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Ii), q равно 1; например, q равно 1 и Z представляет собой O.
В некоторых воплощениях, соединение формулы (Ii) более конкретно может быть представлено формулой (Ij)
в которой j, m, Z, каждый R1a, R1, R2, R3, R4, R5, R6 и каждый R7 такие, как определены в настоящем документе. В некоторых воплощениях соединения формулы (Ij), каждый R1a, R1 и R7 представляет собой С1-C3 алкил, например, каждый представляет собой метил.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Ii) или (Ij), m равно 1. В некоторых воплощениях соединения формулы (Ii) или (Ij), j равно 1. В некоторых воплощениях соединения формулы (Ii) или (Ij), Z представляет собой O. В некоторых конкретных воплощениях, m равно 1 и j равно 1. В некоторых воплощениях соединения формулы (Ii) или (Ij), m равно 1, j равно 1 и Z представляет собой O.
В соединении по любой из формул (Ia), (Ib), (Ic), (Id), (Ie), (If), (Ig), (Ih), (Ii) или (Ij),
каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила, галогена, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы и карбокси-C1-C3 алкила, в которых любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, галогена, гидрокси-группы и карбокси-группы, в которых любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, C1-C6 алкокси-C1-C3 алкила и галогена, в которых любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы и галогена, в которых любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена, в которых любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, гидрокси-группы и галогена, в которых любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1a выбирают из C1-C6 алкила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена, например, из C1-C3 алкила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена, в особенности, из метила, гидрокси-группы, карбокси-группы и Cl. В некоторых воплощениях каждый R1a независимо выбирают из C1-C3 алкила, гидрокси-группы и галогена; например, из метила, гидрокси-группы и галогена; в особенности, из метила, гидрокси-группы и Cl.
В некоторых воплощениях каждый R1a независимо выбирают из C1-C3 алкила и галогена; например, из метила и галогена; в особенности, из метила и Cl.
В некоторых воплощениях, один R1a представляет собой гидрокси-группу, например, один R1a представляет собой гидрокси-группу и, если присутствует, то другой R1a такой, как указано в настоящем документе, например, выбранный из C1-C3 алкила, необязательно, замещенной одним или несколькими галоген и галогена, в особенности, метил и Cl. В некоторых воплощениях, один R1a представляет собой гидрокси-группу и, если присутствует, то другой R1a представляет собой галоген, например, Cl.
В некоторых дополнительных воплощениях, один R1a представляет собой галоген, в особенности, Cl. В некоторых воплощениях, если k в формуле (Ic) равно 1, т.е. в некоторых воплощениях соединения формулы (Id) или (If), то один R1a представляет собой Cl, а другой представляет собой Cl, гидрокси-группу, карбокси-группу или метил; например, Cl, гидрокси-группу или метил; или Cl или метил; или Cl или гидрокси-группу. В некоторых воплощениях, оба R1a представляют собой Cl. В некоторых других воплощениях, один R1a представляет собой метил, а другой представляет собой Cl, гидрокси-группу, карбокси-группу или метил, например, Cl, гидрокси-группу или метил; или Cl или метил. В некоторых воплощениях, один R1a представляет собой С1-C3 алкил, например, метил. В некоторых воплощениях, если k в формуле (Ic) равно 1, т.е. в некоторых воплощениях соединения формулы (Id) или (If), оба R1a представляют собой метил.
В некоторых воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, C1-C3 алкокси-C1-C3 алкил, гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкил, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила и галогена; или из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; или из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, гидрокси-группы и галогена; в которых любой алкил необязательно может быть замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, C1-C3 алкокси-C1-C3 алкила и галогена; или из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы и галогена; в которых любой алкил необязательно может быть замещен одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила и галогена. В некоторых воплощениях, например, в некоторых воплощениях соединения формулы (Id), каждый R1a независимо выбирают из C1-C3 алкила и галогена, например, из метила и галогена, например, из метила, F, Cl или Br; или из метила, Cl или Br; в особенности, из метила и Cl.
В некоторых других воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, например, из C1-C3 алкила. В некоторых воплощениях каждый R1a представляет собой метил. В еще других воплощениях, каждый R1a независимо выбирают из галогена, например, из F, Cl и Br; или из Cl и Br. В некоторых воплощениях, каждый R1a представляет собой Cl.
В некоторых дополнительных воплощениях, по меньшей мере, один R1a выбирают из гидрокси-группы, гидрокси-C1-C3 алкила, карбокси-группы, карбокси-C1-C3 алкила и галогена; например, из гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; или из гидрокси-группы и карбокси-группы, в особенности, гидрокси-группы.
В некоторых других конкретных воплощениях, например, соединения формулы (Ia), (Ib) или (Ic), каждый R1 и каждый R1a независимо выбирают из C1-C3 алкила, например, каждый R1 представляет собой метил или изопропил и каждый R1a - метил.
В некоторых других воплощениях, например, соединения формулы (Ia), (Ib) или (Ic), каждый R1 и каждый R1a представляют собой галоген, например, каждый независимо выбирают из Cl и Br.
В некоторых воплощениях, например, соединения формулы (Ic), R1 представляет собой Br или циклопропил; и каждый R1a представляет собой Cl. В некоторых других конкретных воплощениях, например, соединения формулы (Ic), R1 представляет собой Br и каждый R1a представляет собой Cl.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (I), каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, пиридинила, Cl, Br, гидрокси-группы и карбокси-группы; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам углерода на фенильном кольце, могут образовывать дигидробензофурановое кольцо, необязательно замещенное одной или несколькими, например, 1 или 2, C1-C3 алкильными группами, например, метильными группами; и R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, F, Cl, Br и гидрокси-группы.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (I), каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, Cl, Br, гидрокси-группы и карбокси-группы; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам углерода на фенильном кольце, могут образовывать дигидробензофурановое кольцо, необязательно замещенное одной или несколькими, например, 1 или 2, C1-C3 алкильными группами, например, метильными группами; и R2 выбирают из метила, трифторметила, F, Cl, Br и гидрокси-группы.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (I), каждый R1 независимо выбирают из метила, изопропила, циклопропила, Cl, Br, гидрокси-группы и карбокси-группы; и R2 выбирают из метила, Cl, Br и гидрокси-группы.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (I), каждый R1 независимо выбирают из метила, изопропила, циклопропила, Cl, Br и гидрокси-группы; и R2 выбирают из метила, Cl, Br и гидрокси-группы.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (I), каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, пиридинила, Cl и Br; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам углерода на фенильном кольце, могут образовывать дигидробензофурановое кольцо, необязательно замещенное одной или несколькими, например, 1 или 2, C1-C3 алкильными группами, например, метильными группами; и R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, F, Cl, Br и гидрокси-группы.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (I), каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, Cl и Br; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам углерода на фенильном кольце, могут образовывать дигидробензофурановое кольцо, необязательно замещенное одной или несколькими, например, 1 или 2, C1-C3 алкильными группами, например, метильными группами; и R2 выбирают из метила, трифторметила, F, Cl, Br и гидрокси-группы.
В некоторых дополнительных конкретных воплощениях соединения формулы (I), каждый R1 независимо выбирают из метила, изопропила, циклопропила, Cl и Br; и R2 выбирают из метила, Cl, Br и гидрокси-группы.
Некоторые предпочтительные воплощения изобретения проиллюстрированы формулами от (Ik) до (Io):
в которых k равно 0 или 1; предпочтительно k равно 1; и R1, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе.
В некоторых дополнительных предпочтительных воплощениях соединения формулы (I), указанное соединение включает, по меньшей мере, одну гидрокси-группу или гидрокси-C1-C3 алкил, например, по меньшей мере, одну гидрокси-группу. Например, особенно предпочтительное воплощение такое, как представлено формулой (Ip)
в которой n, R1, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе.
В некоторых дополнительных воплощениях, по меньшей мере, один R1 представляет собой гидрокси-группу, т.е. соединение может быть представлено формулой (Iq)
в которой R1, R2, R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе и n представляет собой целое число от 1 до 5, например, от 2 до 4. В некоторых воплощениях соединения формулы (Iq), только один R1 представляет собой гидрокси-группу, т.е. любой дополнительный R1 будет таким, как определен в настоящем документе, но отличаться от гидрокси-группы.
В некоторых конкретных воплощениях, R2 и только один R1 представляют собой гидрокси-группы, т.е. соединение может быть представлено формулой (Ir)
в которой R3, R4, R5 и R6 такие, как определены в настоящем документе, n представляет собой целое число от 1 до 5, например, из от 2 до 4, и R1b представляет собой группировку R1, как определена в настоящем документе, но отличающуюся от гидрокси-группы.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Iq), например, формулы (Ir), группа R1, которая представляет собой гидрокси-группу, находится в ortho положении на фенильном кольце, к которому она прикреплена.
В некоторых воплощениях соединения формулы (Iq), группа R1, которая представляет собой гидрокси-группу, находится в meta положении на фенильном кольце, к которому она прикреплена. В некоторых из этих воплощений, соединение представляет собой соединение формулы (Ir).
В некоторых воплощениях соединения формулы (Iq), группа R1, которая представляет собой гидрокси-группу, находится в para положении на фенильном кольце, к которому она прикреплена. Например, в некоторых воплощениях соединения формулы (If), R1 представляет собой гидрокси-группу; например, R1 представляет собой гидрокси-группу, и R1a такая, как определена в настоящем документе, но отличается от гидрокси-группы. В некоторых из этих воплощений, R2 представляет собой гидрокси-группу.
Во избежание сомнений, следует отметить, что любую отсылку к соединению формулы (I) также следует рассматривать как отсылку к соединению по любой из формул (Ia), (Ib), (Ic), (Id), (Ie), (If), (Ig), (Ih), (Ii) или (Ij), (Ik), (Im), (In), (Io), (Ip), (Iq) и (Ir), если иное не указано или не очевидно из контекста.
В некоторых дополнительных воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила, C1-C6 алкокси-группы, 5- или 6-членный гетероарила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами, например, одним или несколькими F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C3 алкила, циклопропила, C1-C3 алкокси-группы, 5- или 6-членный гетероарила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5- или 6-членный неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, метокси-группы, пиридила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одним или несколькими метилами;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, метокси-группы, пиридила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена (например, Cl и Br);
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена (например, F, Cl и Br) и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, метокси-группы, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, метокси-группы, гидрокси-группы, карбокси-группы, Cl и Br;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, F, Cl, Br и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых дополнительных воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила, 5- или 6-членного гетероарила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C3 алкила, циклопропила, 5- или 6-членного гетероарила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5- или 6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C3 алкила, циклопропила, 5- или 6-членного гетероарила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5- или 6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, пиридила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одним или несколькими метилами;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, пиридила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена (например, Cl и Br);
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена (например, F, Cl и Br) и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, гидрокси-группы, карбокси-группы и галогена;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, гидрокси-группы, карбокси-группы, Cl и Br;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, F, Cl, Br и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых дополнительных воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила, 5- или 6-членного гетероарила, гидрокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать от 4- до 6-членное (предпочтительно неароматическое) кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C3 алкила, циклопропила, 5- или 6-членного гетероарила, гидрокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5- или 6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C3 алкила, циклопропила, 5- или 6-членного гетероарила, гидрокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5- или 6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, пиридила, гидрокси-группы и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одним или несколькими метил;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, пиридила, гидрокси-группы и галогена (например, Cl и Br);
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена (например, F, Cl и Br) и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, гидрокси-группы и галогена;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, гидрокси-группы, Cl и Br;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, F, Cl, Br и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых дополнительных воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила, 5- или 6-членного гетероарила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать от 4- до 6-членное (предпочтительно неароматическое) кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C3 алкила, циклопропила, 5- или 6-членного гетероарила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5- или 6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из C1-C3 алкила, циклопропила, 5- или 6-членного гетероарила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5- или 6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила;
R2 выбирают из C1-C3 алкила, C1-C3 алкокси-группы, галогена и гидрокси-группы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; и
любого алкила, необязательно замещенного одним или несколькими галогенами.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, пиридила и галогена; и если n равно, по меньшей мере, 2, то два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько гетероатомов и необязательно замещенное одним или несколькими метил;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, пиридила и галогена (например, Cl и Br);
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена (например, F, Cl и Br) и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила и галогена;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, галогена и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых воплощениях соединения формулы (I),
каждый R1 независимо выбирают из метила, трифторметила, изопропила, циклопропила, Cl и Br;
R2 выбирают из метила, трифторметила, метокси-группы, F, Cl, Br и гидрокси-группы; и
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F.
В некоторых из приведенных выше воплощений, R2 выбирают из C1-C3 алкила (необязательно, замещенного одним или несколькими галоген), галогена и гидрокси-группы, например, из метила, трифторметила, хлора и гидрокси-группы, в особенности, метила, хлора и гидрокси-группы. В некоторых из приведенных выше воплощений, R2 представляет собой гидрокси-группу. В некоторых других приведенных выше воплощениях, R2 представляет собой метил или трифторметил, в особенности, метил. В еще некоторых других приведенных выше воплощениях, R2 представляет собой галоген, например, хлор.
В еще некоторых дополнительных воплощениях, каждый R1 (включая, если присутствует, R1a) и R2 независимо выбирают из C1-C3 алкила, гидрокси-группы и галогена (например, метила, гидрокси-группы, F, Cl и Br), в которых любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галоген; например, R1 выбирают из C1-C3 алкила, гидрокси-группы и галогена и R2 представляет собой гидрокси-группу.
Соединения формулы (I) могут быть получены следующими способами, обычно хорошо известными специалистам в области химического синтеза, в свете описанных ниже иллюстративных примеров. Например, соединения по изобретению могут быть получены взаимодействием подходящим образом замещенного бензолсульфонилхлорида 1 с амином 2, как показано на схеме реакции 1.
Схема реакции 1
Реакция, как проиллюстрирована на схеме реакции 1, может быть осуществлена при любой подходящей температуре, предпочтительно, при комнатной температуре, в подходящем растворителе для реагентов, таком как дихлорметан, и предпочтительно в присутствии подходящего основания, например, триэтиламина.
Соединения настоящего изобретения представляют собой ингибиторы Nox4 и/или ингибиторы Nox2. Некоторые из этих соединений обладают высокой селективностью по Nox4 и поэтому могут быть применены при заболеваниях с участием (связанных с активностью) Nox4. Некоторые из этих соединений способны подавлять как Nox2, так и Nox4, поэтому могут быть применены при заболеваниях с участием (связанных с активностью) или Nox2, или Nox4, или - предпочтительно - как Nox2, так и Nox4. Некоторые из этих соединений обладают высокой селективностью по Nox2 и, следовательно, могут быть применены при заболеваниях с участием (связанных с активностью) Nox2.
Например, в некоторых воплощениях, соединение формулы (I), например, соединение, в котором R2 представляет собой гидрокси-группу или гидрокси-C1-C3 алкил (в особенности, гидрокси-группу), применяют в качестве ингибитора как Nox2, так и Nox4, в особенности, в качестве ингибитора Nox2.
В некоторых предпочтительных воплощениях, соединение формулы (I) представляет собой ингибитор как Nox2, так и Nox4.
В некоторых дополнительных воплощениях, соединение формулы (I), например, соединение формулы (I) в которой R2 не выбирают из гидрокси-группы и гидрокси-C1-C3 алкила (например, R2 выбирают из C1-C6 алкила и галогена, например, из C1-C6 алкила) применяют, в особенности, в качестве ингибитора Nox4.
В зависимости от условий способа соединение изобретения может быть получено как в нейтральной, так и в солевой форме. Кислотно-аддитивные соли соединения по настоящему изобретению могут быть преобразованы известным способом в свободное основание с применением основных агентов, таких как щелочь, или путем ионного обмена. Полученное свободное основание может также образовывать соли с органическими или неорганическими кислотами. Щелочные аддитивные соли соединения по изобретению могут быть известным способом превращены в свободную кислоту с применением кислотных агентов, таких как кислота, путем ионного обмена. Полученная свободная кислота может также образовывать соли с органическими или неорганическими основаниями.
При получении кислотно-аддитивных солей или оснований предпочтительно применяются такие кислоты или основания, которые образуют подходящие терапевтически приемлемые соли. Галогеноводородные кислоты, серная кислота, фосфорная кислота, азотная кислота, алифатические, алициклические, ароматические или гетероциклические карбоксильные или сульфоновые кислоты, такие как муравьиная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, янтарная кислота, гликолевая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, аскорбиновая кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, пировиноградная кислота, п-гидрокси-бензойная кислота, эмбоновая кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, гидроксиэтансульфоновая кислота, галогенбензолсульфоновая кислота, толуолсульфоновая кислота или нафталинсульфоновая кислота представляют собой примеры таких кислот. Соли присоединения оснований включают соли, полученные из неорганических оснований, таких как гидроксиды аммония или щелочных или щелочноземельных металлов, карбонаты, бикарбонаты и тому подобное, органические основания, такие как алкоксиды, алкиламиды, алкил- и ариламины и тому подобное. Примеры оснований, применяемых при получении солей по настоящему изобретению, включают гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид аммония, карбонат калия и тому подобное.
Фармацевтические препараты обычно получают путем смешивания активного вещества, т.е. соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, с обычными фармацевтическими вспомогательными веществами. Композиции могут быть дополнительно обработаны известными способами, такими как гранулирование, прессование, микрокапсулирование, нанесение покрытия распылением и т.п. Композиции могут быть получены общепринятыми способами в виде таких лекарственных форм, как таблетки, капсулы, гранулы, порошки, сиропы, суспензии, суппозитории или инъекции. Жидкие композиции могут быть получены растворением или суспендированием активного вещества в воде или других подходящих носителях. Покрытие на таблетки и гранулы может быть нанесено обычным способом.
Для клинического применения соединение формулы (I) составляют в виде фармацевтических композиций для перорального, ректального, парентерального или другого способа введения. Эти лекарственные препараты представляют собой еще один объект изобретения.
Обычно эффективное количество активного соединения составляет от 0,1 до 95% от массы препарата, лучше от 0,2 до 20% от массы препарата для парентерального применения и лучше от 1 до 50% от массы препарата для перорального введения.
Уровень дозы и частота дозирования конкретного соединения будут варьировать в зависимости от множества факторов, включая эффективность конкретного применяемого соединения, метаболическую стабильность и продолжительность действия этого соединения, возраст пациента, массу тела, общее состояние здоровья, пол, диету, режим и время введения, скорость выведения, комбинацию лекарственных средств, тяжесть состояния, подлежащего лечению, и пациента, проходящего терапию. Суточная доза может, например, находиться в диапазоне от примерно 0,001 мг до примерно 100 мг на килограмм веса тела, вводимая однократно или многократно, например, от примерно 0,01 мг до примерно 25 мг каждая. Обычно такую дозу назначают перорально, но можно также выбрать парентеральное введение.
При приготовлении фармацевтических композиций, содержащих соединение настоящего изобретения в форме единиц дозирования для перорального введения, соединение может быть смешано с твердыми порошкообразными ингредиентами, такими как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, крахмал, амилопектин, производные целлюлозы, желатин или с другим подходящим ингредиентом, а также с дезинтегрирующими средствами и смазывающими средствами, такими как стеарат магния, стеарат кальция, стеарилфумарат натрия и воски полиэтиленгликоля. Затем смесь перерабатывают в гранулы или прессуют в таблетки.
Мягкие желатиновые капсулы могут быть получены с капсулами, содержащими смесь активного соединения по изобретению, растительного масла, жира или другого подходящего носителя для мягких желатиновых капсул. Твердые желатиновые капсулы могут содержать гранулы активного соединения. Твердые желатиновые капсулы могут также содержать соединение по изобретению в комбинации с твердыми порошкообразными ингредиентами, такими как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, картофельный крахмал, кукурузный крахмал, амилопектин, производные целлюлозы или желатин.
Единицы дозирования для ректального введения могут быть получены (i) в форме суппозиториев, которые содержат активное вещество, смешанное с нейтральной жировой основой; (ii) в форме желатиновой ректальной капсулы, которая содержит активное вещество в смеси с растительным маслом, парафиновым маслом или другим носителем, подходящим для желатиновых ректальных капсул; (iii) в виде готовой микроклизмы; или (iv) в форме сухой композиции для микроклизмы, которую нужно восстановить в подходящем растворителе непосредственно перед введением.
Жидкие препараты для перорального введения могут быть получены в форме сиропов или суспензий, например, растворов или суспензий, содержащих от 0,2% до 20% по массе активного ингредиента, а остальное состоит из сахара или сахарных спиртов и смеси этанола, воды, глицерина, пропиленгликоля и полиэтиленгликоля. При желании такие жидкие препараты могут содержать красители, ароматизаторы, сахарин и карбоксиметилцеллюлозу или другой загуститель. Жидкие препараты для перорального введения также могут быть приготовлены в форме сухого порошка, который следует восстановить подходящим растворителем перед применением.
Растворы для парентерального введения, например, внутривенного введения или для введения, например, в глаз, могут быть получены в виде раствора соединения по настоящему изобретению в фармацевтически приемлемом растворителе, предпочтительно, в концентрации от 0,01 до 10% по массе или от 0,1% до 10% по массе. Эти растворы также могут содержать стабилизирующие ингредиенты и/или буферные ингредиенты и могут быть распределены по стандартным дозам в форме ампул или пузырьков. Растворы для парентерального введения также могут быть приготовлены в виде сухого препарата, который следует разбавить подходящим растворителем немедленно перед применением.
Соединения формулы (I) также можно применять или вводить в сочетании с одним или несколькими дополнительными терапевтически активными средствами. Компоненты могут находиться в одной и той же композиции или в отдельных композициях для введения одновременно или последовательно.
Соответственно, в дополнительном аспекте изобретения обеспечивают комбинированный продукт, включающий:
(A) соединение формулы (I), как определено в настоящем документе; и
(B) другое терапевтическое средство; при этом (А) и (В) составляют в смеси с фармацевтически приемлемым наполнителем.
Такие комбинированные продукты обеспечивают для введения соединения формулы (I) в сочетании с другим терапевтическим средством и, таким образом, могут быть представлены в виде отдельных композиций, в которых, по меньшей мере, одна из этих композиций включает соединение формулы (I) и, по меньшей мере, одна включает другое терапевтические средство или может быть представлена в виде комбинированного препарата (т.е. представлена в виде единой композиции, включающей соединение формулы (I) и другое терапевтическое средство).
Таким образом, дополнительно обеспечивают:
(1) фармацевтическую композицию, включающую соединение формулы (I), другое терапевтическое средство и фармацевтически приемлемый наполнитель, например, вспомогательное средство, разбавитель или носитель; или
(2) составной набор, включающий в качестве компонентов:
(a) фармацевтическую композицию, включающую соединение формулы (I), как определено в настоящем документе, в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, например, вспомогательное средство, разбавитель или носитель; и
(b) фармацевтическую композицию, включающую другое терапевтическое средство в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, например, вспомогательным средством, разбавителе или носителем, каждый из компонентов (а) и (b) которого обеспечен в форме, подходящей для введения вместе с другим компонентом.
В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) (или его фармацевтически приемлемая соль) предназначено для лечения эндокринного заболевания. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения сердечно-сосудистого расстройства или заболевания. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения респираторного расстройства или заболевания. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения аллергического заболевания. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения травматизма. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения заболевания или расстройства, влияющего на обмен веществ. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения кожного заболевания или расстройства. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения костных нарушений. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения нейродегенеративного заболевания или расстройства, например, болезни Альцгеймера. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения заболевания или расстройства почек. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения расстройства или заболевания репродуктивной системы. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения заболевания или нарушения, поражающего глаз и/или хрусталик. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения состояния, влияющего на внутреннее ухо. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения воспалительного заболевания. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения заболеваний или нарушений печени. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения артрита. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения боли, например, гипералгезии, связанной с воспалительной болью. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения рака, например, рака молочной железы. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения заболевания или расстройства желудочно-кишечного тракта. В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения аномального ангиогенеза.
В еще дополнительных воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения фиброза. В некоторых из этих воплощений, фиброз представляет собой фиброз легких. В некоторых других из этих вариантов, фиброз представляет собой кистозный фиброз. Еще в этих воплощениях фиброз представляет собой фиброз печени, например, индуцированный алкоголем фиброз печени. В еще дополнительных воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения диабета, например, диабета 2-го типа. В еще дополнительных воплощениях, соединение формулы (I) предназначено для лечения хронического заболевания почек (также называемого хронической почечной недостаточностью). В некоторых воплощениях, соединение формулы (I) предназначен для применения в производстве лекарственного средства для лечения любого из вышеупомянутых заболеваний или расстройств.
В некоторых конкретных воплощениях, соединения, раскрытые в настоящем документе, применяют при лечении ишемических ретинопатий, такой как диабетическая ретинопатия. Таким образом, в некоторых воплощениях, соединение согласно изобретению обеспечивает для лечения ретинопатии, например, ишемической ретинопатии, такая как диабетическая ретинопатия. Соединение может быть обеспечено в композиции, подходящей для введения в глаз, например, композиции в виде глазных капель, необязательно, содержащей один или несколько дополнительных активных ингредиентов, например, противовоспалительное средство.
В некоторых дополнительных воплощениях, соединение формулы (I) применяют в комбинации с противоопухолевым средством при лечении злокачественного гиперпролиферативного заболевания. Такая комбинированная терапия может быть особенно полезна при химиотерапии рака для противодействия антиапоптотическому эффекту Nox4, который может привести к устойчивости опухоли к противоопухолевому средству. Таким образом, дополнительно обеспечивают:
(1) фармацевтическую композицию, включающую соединение формулы (I), как определено выше в настоящем документе, противоопухолевое средство и фармацевтически приемлемое вспомогательное средство, например, вспомогательное средство, разбавитель или носитель; или
(2) составной набор, включающий в качестве компонентов:
(a) фармацевтическую композицию, включающую соединение формулы (I), как определено в настоящем документе, в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, например, вспомогательное средство, разбавитель или носитель; и
(b) фармацевтическую композицию, включающую противоопухолевое средство в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, например, вспомогательное средство, разбавитель или носитель, каждый из компонентов (а) и (b) которого обеспечен в форме, подходящей для введения вместе с другим.
Компоненты (a) и (b) в любом из вышеперечисленных составных наборов можно вводить одновременно, последовательно или отдельно друг от друга. Соединение настоящего изобретения также можно применять или вводить в сочетании с другими способами лечения, таким как облучение для лечения рака.
Согласно одному из аспектов, обеспечивают способ ингибирования активности Nox4, у пациента, нуждающегося в этом, путем введения указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I), как определено в настоящем документе. Пациент может представлять собой любое млекопитающее, но предпочтительно представляет собой человека. Пациент, подлежащий лечению, может представлять собой персону, страдающую от состояния или расстройства, связанного с повышенной активностью Nox4, или пациент с риском развития такого состояния или расстройства. Примеры таких состояний и расстройств представляют собой сердечно-сосудистые заболевания, респираторные заболевания, нарушения метаболизма, кожные заболевания, заболевания костей, нейровоспалительные и/или нейродегенеративные заболевания, заболевания почек, нарушения репродуктивной системы, заболевания, поражающие глаз и/или хрусталика, и/или состояния, влияющие на внутреннее ухо, воспалительные расстройства, заболевания печени, боли, рак, аллергические расстройства, травмы, септический, геморрагический и анафилактический шок, заболевания или нарушения желудочно-кишечного тракта, ангиогенез, состояния, зависимые от ангиогенеза, инфекции легких, острое повреждение легких, легочную артериальную гипертензию, обструктивные заболевания легких, фиброзные заболевания легких и рак легких.
В одном из воплощений, соединение настоящего изобретения предназначено для лечения инсульта. В одном конкретном варианте инсульт представляет собой ишемический инсульт. Считается, что соединение настоящего изобретения обладает нейропротекторным действием при лечении инсульта. Следовательно, соединение настоящего изобретения целесообразно применять в сочетании с удалением тромбов при лечении ишемического инсульта. В одном конкретном воплощении соединение настоящего изобретения применяют в сочетании с tPA (тканевым активатором плазминогена) при лечении ишемического инсульта.
Соединение формулы (I) применяют для лечения любого субъекта-млекопитающего, например человека или животного (млекопитающего, не представляющего собой человека). В некоторых воплощениях, подвергаемый лечению субъект представляет собой человека. В некоторых других воплощениях, подвергаемый лечению субъект - это млекопитающее, не представляющее собой человека, например, сельскохозяйственное животное, домашнее животное или лабораторное животное. В некоторых воплощениях, подвергаемое лечению млекопитающее, не представляющее собой человека - это домашнее животное. В некоторых воплощениях, домашнее животное представляет собой собаку. В некоторых других воплощениях, домашнее животное представляет собой кошку. В других воплощениях, подвергаемый лечению субъект представляет собой сельскохозяйственное животное, например, корову или свинью или овцу. В других воплощениях, подвергаемый лечению субъект представляет собой лошадь.
Изобретение будет проиллюстрировано следующими неограничивающими примерами.
Примеры
В примерах, колоночную флэш-хроматографию выполняли на Teledyne ISCO, Combi Flash Rf+ Lumen, применяя колонку RediSep Rf с силикагелем. Препаративную HPLC выполняли на системе «Gilson», оснащенной УФ-детектором, с применением XBridge Prep C-18 5 мкм OBD, колонка 50×19 мм. Аналитическую HPLC-MS выполняли с применением жидкостного хроматографа/масс-селективного детектора Agilent серии 1100 (MSD) (Single Quadrupole), оснащенного интерфейсом для электрораспыления и УФ-детектором на диодной матрице. Анализы выполняли двумя способами с применением колонки ACE 3 C8 (3,0×50 мм) с градиентом ацетонитрила в 0,1% водном TFA в течение 3-х мин и потоком 1 мл/мин или колонки Xbridge C18 (3,0×50 мм) с градиентом ацетонитрила в 10 мМ бикарбонате аммония в течение 3-х мин и потоком 1 мл/мин. Спектры 1H-ЯМР записывали на приборе Varian 400 МГц при 25°C. Соединения назвали с помощью программного обеспечения MarvinSketch 16.2.29.0. Кроме того, для коммерческих исходных материалов и реагентов применяли коммерческие названия или тривиальные названия.
Пример 1. N-[2-(2-метоксифенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид
2,4,6-Триметилбензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-метоксифенил)этанамин (45 мг, 0,30 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (8,7 мг, 15%). MS ESI+ m/z 334 [M+H]+.
Пример 2. N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид
2,4,6-Триметилбензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-фторфенил)этанамин (41,1 мг, 0,30 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (4,6 мг, 8%). MS ESI+ m/z 322 [M+H]+.
Пример 3. N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,2,4,6,7-пентаметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-сульфонамид
2,2,4,6,7-пентаметил-3H-бензофуран-5-сульфонил хлорид (27 мг, 0,09 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-фторфенил)этанамин (22 мг, 0,16 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1%TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (36,6 мг, 22%). MS ESI+ m/z 392 [M+H]+.
Пример 4. 4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-метоксифенил)этил]бензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлор-бензолсульфонил хлорид (25 мг, 0,08 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-метоксифенил)этанамин (20 мг, 0,13 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (34 мг, 20%). MS ESI+ m/z 440 [M+H]+.
Пример 5. 4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлор-бензолсульфонил хлорид (500 мг, 1,54 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-фторфенил)этанамин (0,34 мл, 2,62 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (0,43 мл, 3,08 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с PE/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде бледно-желтого твердого вещества (484 мг, 73%),1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,88 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,30-3,41 (m, 2H), 5,25 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 6,95-7,01 (m, 1H), 7,04 (td, J = 7,5, 0,9 Hz, 1H), 7,13 (td, J = 7,5, 1,5 Hz, 1H), 7,17-7,25 (m, 1H), 7,58 (s, 2H). MS ESI+ m/z 428 [M+H]+.
Пример 6. N-[2-(2-хлорфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид
2,4,6-Триметилбензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-хлорфенил)этанамин (46 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (7,9 мг, 13%). MS ESI+ m/z 338 [M+H]+.
ПРИМЕР 7. N-[2-(2-бромфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид
2,4,6-Триметилбензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-бромфенил)этанамин (59 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (7,9 мг, 13%). MS ESI+ m/z 384 [M+H]+.
Пример 8. 4-бром-2-хлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
4-бром-2-хлор-бензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,13 ммоль) растворяли в DCM (1 мл) и 2-(2-хлорфенил)этанамин (35 мг, 0,22 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (38 мкл, 0,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (7,8 мг, 15%). MS ESI+ m/z 410 [M+H]+.
Пример 9. N-[2-(2-хлорфенил)этил]-2,2,4,6,7-пентаметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-сульфонамид
2,2,4,6,7-пентаметил-3H-бензофуран-5-сульфонил хлорид (38 мг, 0,13 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-хлорфенил)этанамин (46 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (6,9 мг, 10%). MS ESI+ m/z 408 [M+H]+.
Пример 10. 2,4,6-триметил-N-{2-[2-(трифторметил)фенил]этил}бензол-1-сульфонамид
2,4,6-Триметилбензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-[2-(трифторметил)фенил]этанамин (56 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (8,0 мг, 12%). MS ESI+ m/z 372 [M+H]+.
Пример 11. 2-хлор-6-метил-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
2-Хлор-6-метил-бензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(o-толил)этанамин (40 мг, 0,30 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (5,6 мг, 14%).MS ESI+ m/z 324 [M+H]+.
Пример 12. 2-хлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]-6-метилбензол-1-сульфонамид
2-Хлор-6-метил-бензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-хлорфенил)этанамин (46 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (8,0 мг, 13%). MS ESI+ m/z 344 [M+H]+.
Пример 13. 2-хлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
2-Хлорбензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,18 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(2-хлорфенил)этанамин (46 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (6,2 мг, 11%). MS ESI+ m/z 330 [M+H]+.
Пример 14. 2,4,6-триметил-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
2,4,6-Триметилбензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(o-толил)этанамин (40 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (1,1 мг, 2%). MS ESI+ m/z 318 [M+H]+.
Пример 15. 2,4,6-триметил-N-{2-[2-(трифторметокси)фенил]этил}бензол-1-сульфонамид
2,4,6-Триметилбензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-[2-(трифторметокси)фенил]этанамин (61 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (3,7 мг, 6%). MS ESI+ m/z 388 [M+H]+.
Пример 16. 2-хлор-6-метил-N-{2-[2-(трифторметил)фенил]этил}бензол-1-сульфонамид
2-Хлор-6-метил-бензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,17 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-[2-(трифторметил)фенил]этанамин (56 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (6,8 мг, 10%). MS ESI+ m/z 378 [M+H]+.
Пример 17. 4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлор-бензолсульфонил хлорид (38 мг, 0,12 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(o-толил)этанамин (40 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (24 мг, 33%). MS ESI+ m/z 424 [M+H]+.
Пример 18. 2,4-дихлор-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
2,4-Дихлорбензолсульфонил хлорид (43 мг, 0,18 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли 2-(o-толил)этанамин (40 мг, 0,3 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (50 мкл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа при комнатной температуре. Добавляли воду (1 мл). Слои разделяли и органическую фазу концентрировали. Очистка с помощью препаративной HPLC (XBridge C18 19×50 мм; 0,1% TFA (водн.)/MeCN; от 80:20 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (27 мг, 45%). MS ESI+ m/z 344 [M+H]+.
Пример 19. 4-бром-2,6-дихлор-N-{2-[2-(трифторметил)фенил]этил}бензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлор-бензолсульфонил хлорид (200 мг, 0,62 ммоль) растворяли в DCM (0,7 мл) и добавляли триэтиламин (0,17 мл, 1,23 ммоль), а затем добавляли 2-[2-(трифторметил)фенил]этанамин (0,17 мл, 1,05 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде бледно-желтого твердого вещества (189 мг, 64%). MS ESI- m/z 476 [M-H]-.
Пример 20. 4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлор-бензолсульфонил хлорид (200 мг, 0,62 ммоль) растворяли в DCM (0,7 мл) и добавляли 2-(2-хлорфенил)этанамин (0,15 мл, 1,05 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (0,17 мл, 1,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (231 мг, 84%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,97 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,31-3,43 (m, 2H), 5,25 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7,15-7,21 (m, 3H), 7,29-7,34 (m, 1H), 7,58 (s, 2H). MS ESI- m/z 442 [M-H]-.
Пример 21. 2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
2,6-Дихлорбензолсульфонил хлорид (100 мг, 0,41 ммоль) растворяли в DCM (0,5 мл) и добавляли триэтиламин (0,11 мл, 0,81 ммоль), а затем добавляли 2-(2-фторфенил)этанамин (0,09 мл, 0,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (74 мг, 52%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,88 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,36-3,46 (m, 2H), 5,31 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 6,95-7,02 (m, 1H), 7,05 (td, J = 7,5, 1,0 Hz, 1H), 7,14 (td, J = 7,5, 1,6 Hz, 1H), 7,17-7,24 (m, 1H), 7,32 (dd, J = 8,7, 7,3 Hz, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,45 (d, J = 0,7 Hz, 1H). MS ESI+ m/z 348 [M+H]+.
Пример 22. 2,6-дихлор-N-{2-[2-(трифторметил)фенил]этил}бензол-1-сульфонамид
2,6-Дихлорбензолсульфонил хлорид (100 мг, 0,41 ммоль) растворяли в DCM (0,5 мл) и добавляли триэтиламин (0,11 мл, 0,81 ммоль), а затем добавляли 2-[2-(трифторметил)фенил]этанамин (0,11 мл, 0,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (131 мг, 80%).MS ESI+ m/z 398 [M+H]+.
Пример 23. 2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
2,6-Дихлорбензолсульфонил хлорид (100 мг, 0,41 ммоль) растворяли в DCM (0,5 мл) и добавляли триэтиламин (0,11 мл, 0,81 ммоль), а затем добавляли 2-(2-хлорфенил)этанамин (0,10 мл, 0,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (110 мг, 73%). MS ESI+ m/z 366 [M+H]+.
Пример 24. 2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]-4-(пиридин-3-ил)бензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид (50 мг, 0,12 ммоль) и 3-пиридилбороновую кислоту (17 мг, 0,14 ммоль) растворяли в DME (3 мл) и добавляли ил) бензол 2 M водный раствор K2CO3 (0,18 мл, 0,35 ммоль), а затем добавляли PdCl2(dppf) (9,56 мг, 0,010 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 16-ти часов при 80°C в атмосфере азота. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 0:100), а затем с PE/EtOAc (от 60:40 до 30:70) давала указанное в подзаголовке соединение в виде бледно-желтого твердого вещества (38 мг, 74%),1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,91 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,36-3,46 (m, 2H), 5,44 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 11,6, 6,6 Hz, 1H), 7,05 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,19 (dt, J = 15,1, 7,5 Hz, 2H), 7,68 (s, 2H), 7,81 (s, 1H), 8,28 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,98 (s, 1H). MS ESI+ m/z 425 [M+H]+.
Пример 25. 2,6-дихлор-4-циклопропил-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид (50 мг, 0,12 ммоль) и циклопропилтрифторборат калия (21 мг, 0,14 ммоль) растворяли в DME (3 мл) и добавляли фторфенил) этил 2 M водный раствор K2CO3 (0,18 мл, 0,35 ммоль), а затем добавляли PdCl2(dppf) (9,56 мг, 0,010 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 16-ти часов при 80°C в атмосфере азота. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (24 мг, чистота 70%). MS ESI+ m/z 388 [M+H]+.
Пример 26. 2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]-4-циклопропилбензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]бензол-1-сульфонамид (50 мг, 0,12 ммоль) и циклопропилтрифторборат калия (21 мг, 0,14 ммоль) растворяли в DME (3 мл) и добавляли 2 M водный раствор K2CO3 (0,18 мл, 0,35 ммоль), а затем добавляли PdCl2(dppf) (9,6 мг, 0,010 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 16-ти часов при 80°C в атмосфере азота. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (24 мг, 46%). MS ESI+ m/z 406 [M+H]+.
Пример 27. 2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]-4-(трифторметил)бензол-1-сульфонамид
2,6-дихлор-4-(трифторметил)бензолсульфонил хлорид (60 мг, 0,19 ммоль) растворяли в DCM (0,4 мл) и добавляли триэтиламин (0,05 мл, 0,35 ммоль), а затем добавляли 2-(2-хлорфенил)этанамин (0,05 мл, 0,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (51 мг, 60%). MS ESI- m/z 430 [M-H]-.
Пример 28. N-[2,2-дифтор-2-(2-метилфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид
2,4,6-триметилбензолсульфонил хлорид (30 мг, 0,14 ммоль) и 2,2-дифтор-2-(2метил-фенил)-этан-1-амин гидрохлорид (48 мг, 0,23 ммоль) растворяли в DCM (0,5 мл) и добавляли триэтиламин (0,6 мл, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 60:40 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (34 мг, 69%),1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,29 (t, J = 2,2 Hz, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,57 (s, 6H), 3,63 (td, J = 14,2, 6,7 Hz, 2H), 4,81 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 6,91 (s, 2H), 7,15 (dd, J = 15,6, 7,8 Hz, 2H), 7,27-7,33 (m, 2H). MS ESI+ m/z 354 [M+H]+.
Пример 29. 4-бром-2,6-дихлор-N-[2,2-дифтор-2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлорбензолсульфонил хлорид (45 мг, 0,14 ммоль) и 2,2-дифтор-2-(2метил-фенил)-этан-1-амин гидрохлорид (49 мг, 0,24 ммоль) растворяли в DCM (0,5 мл) и добавляли триэтиламин (0,06 мл, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3-х часов при комнатной температуре и затем добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 100:0 до 95:5) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (32 мг, 50%), 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,39 (t, J = 2,1 Hz, 2H), 3,88 (td, J = 14,5, 6,4 Hz, 1H), 5,76 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,08-7,18 (m, 2H), 7,27-7,36 (m, 2H), 7,56 (s, 2H). MS ESI- 458 [M-H]-.
Пример 30. N-[2-(2-хлорфенил)-2,2-дифторэтил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид
2,4,6-Триметилбензол-1-сульфонил хлорид (50 мг, 0,23 ммоль) растворяли в DCM (1 мл) и 2-(2-хлорфенил)-2,2-дифторэтан-1-амин (66 мг, 0,34 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (0,1 мл, 0,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (от 100:0 до 99:1) давала указанное в подзаголовке соединение в виде бесцветного масла (63 мг, 74%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,29 (s, 3H), 2,53 (s, 6H), 3,88 (td, J = 13,7, 7,0 Hz, 2H), 4,80 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 6,86 (s, 2H), 7,21-7,26 (m, 1H), 7,27-7,36 (m, 2H), 7,43 (dd, J = 7,7, 1,6 Hz, 1H). MS ESI- 372 [M-H]-.
Пример 31. 4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)-2,2-дифторэтил]бензол-1-сульфонамид
4-бром-2,6-дихлорбензолсульфонил хлорид (50 мг, 0,15 ммоль) растворяли в DCM (1 мл) и 2-(2-хлорфенил)-2,2-дифторэтан-1-амин (50 мг, 0,26 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (0,06 мл, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (от 100:0 до 99:1) давала указанное в подзаголовке соединение в виде бесцветного масла (45 мг, 66%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ, 4,11 (td, J = 14,3, 6,5 Hz, 2H), 5,71 (t, J = 6,5 Hz, 1H) 7,17-7,26 (m, 1H), 7,31-7,39 (m, 2H), 7,43-7,51 (m, 1H), 7,55 (s, 2H).MS ESI- 478 [M-H]-.
Пример 32. N-[2-(2-хлорфенил)этил]-2,6-диметил-4-(пропан-2-ил)бензол-1-сульфонамид
4-Изопропил-2,6-диметил-бензолсульфонилхлорид (50 мг, 0,20 ммоль) растворяли в DCM (0,5 мл) и 2-(2-хлорфенил)этиламин (48 мкл, 0,34 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (0,08 мл, 0,61 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 65:35 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде бесцветного масла (56 мг, 75%). MS ESI- m/z 364 [M-H]-.
Пример 33. 2,6-диметил-N-[2-(2-метилфенил)этил]-4-(пропан-2-ил)бензол-1-сульфонамид
4-Изопропил-2,6-диметил-бензолсульфонилхлорид (50 мг, 0,20 ммоль) растворяли в DCM (0,5 мл) и добавляли 2-(2-метилфенил)этиламин (50 мкл, 0,34 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (0,08 мл, 0,58 ммоль) Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/DCM (от 65:35 до 40:60) давала указанное в подзаголовке соединение в виде бесцветного масла (43 мг, 60%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,23 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,56 (s, 6H), 2,79 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,84 (hept, J = 9,7 Hz, 1H), 3,07-3,18 (m, 2H), 4,41 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 6,96 (s, 2H), 6,99-7,03 (m, 1H),7,07-7,16 (m, 3H). MS ESI- m/z 344 [M-H]-.
Пример 34. N-[2-фтор-2-(2-метилфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид
2,4,6-Триметилбензол-1-сульфонил хлорид (50 мг, 0,23 ммоль) растворяли в DCM (1 мл) и добавляли 2-фтор-2-(2-метилфенил)этан-1-амин (52 мг, 0,34 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (0,1 мл, 0,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (от 100:0 до 99:1) давала указанное в подзаголовке соединение в виде бесцветного масла (45 мг, 59%),1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,18 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,64 (s, 6H), 3,13 (dddd, J = 16,3, 14,5, 8,9, 3,5, 1H), 3,26 (dddd, J = 32,5, 14,5, 9,1, 2,9, 1H), 5,02 (dd, J = 9,1, 3,5 Hz, 1H), 5,61 (ddd, J = 47,9, 8,9, 2,9 Hz, 1H), 6,96 (s, 2H), 7,09-7,14 (m, 1H),7,17-7,30 (m, 4H), 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -185,14 (ddd, J = 47,9, 32,5, 16,3 Hz). MS ESI+ m/z 336 [M+H]+.
Пример 35. 4-Бром-2,6-дихлор-N-[2-фтор-2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамид
4-Бром-2,6-дихлорбензолсульфонил хлорид (50 мг, 0,15 ммоль) растворяли в DCM (1 мл) и добавляли 2-фтор-2-(2-метилфенил)этан-1-амин (35 мг, 0,23 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (60 мкл, 0,45 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (от 100:0 до 99:1) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (45 мг, 66%),1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2,22 (s, 3H), 3,28 (dddd, J = 17,2, 14,7, 8,5, 4,4 Hz, 1H), 3,49 (dddd, J = 31,4, 14,7, 8,2, 2,8 Hz, 1H), 5,63 (ddd, J = 47,8, 8,5, 2,8 Hz, 1H), 5,69-5,73 (m, 1H), 7,04-7,18 (m, 3H), 7,20-7,25 (m, 1H), 7,56 (s, 2H), 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -185,14 (ddd, J = 47,8, 31,4, 17,2 Hz). MS ESI- m/z 440 [M-H]-.
Соединение по примеру 35 существует в виде 2 оптических изомеров (энантиомеров). Эти два изомера разделяли с помощью хроматографии со сверхкритической подвижной фазой (SFC) следующим образом: рацемат (65 мг) растворяли в 1,2 мл метанола (MeOH) и проводили препаративную хроматографию путем впрыскивания одного за другим по 100 мкл этого раствора в систему SFC, подключенную к детектору на фотодиодной матрице (PDA). Примененная колонка представляла собой колонку 5 мкм, YMC Chiral Cellulose-SC, 10 мм × 250 мм (диаметр×длина), и температура колонки была установлена на 45°C. Применяли изократическое элюирование 20%-ным MeOH в CO2 при скорости тока 15 мл/мин. Противодавление было установлено на 120 бар. PDA сканировали от 220 до 400, и энантиомеры собирали в отдельные фракции (с помощью MeOH до 2 мл/мин в качестве вспомогательного растворителя для сбора) и объединяли от каждой инъекции. В этой системе время удерживания энантиомера 1 (изомер 1) составляло 2,43 мин (2,26-2,57 мин), а время удерживания энантиомера 2 (изомер 2) составляло 2,72 мин (2,59-2, 97 мин). Было получено 20 мг каждого энантиомера. Энантиомерное соотношение было >99% для каждого из двух изолированных изомеров.
Пример 36. N-[2-фтор-2-(2-метилфенил)этил]-2,6-диметил-4-(пропан-2-ил)бензол-1-сульфонамид
4-Изопропил-2,6-диметилбензолсульфонил хлорид (50 мг, 0,20 ммоль) растворяли в DCM (1 мл) и 2-фтор-2-(2-метилфенил)этан-1-амин (47 мг, 0,30 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (0,09 мл, 0,60 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов при комнатной температуре. К смеси добавляли DCM (10 мл) и соляной раствор (10 мл). Слои разделяли и органическую фазу высушивали над сульфатом магния, фильтровали и растворитель упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (от 100:0 до 99:1) давала указанное в подзаголовке соединение в виде белого твердого вещества (52 мг, 71%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,24 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 2,15 (s, 3H), 2,66 (s, 6H), 2,85 (hept, J = 6,9 Hz, 1H), 3,22 (dddd, J = 16,5, 14,7, 8,8, 3,6 Hz, 1H), 3,33 (dddd, J = 32,4, 14,7, 9,2, 2,9 Hz, 1H), 5,03 (dd, J = 9,2, 3,6 Hz, 1H), 5,60 (ddd, J = 48,0, 8,8, 2,9 Hz, 1H), 6,99 (s, 2H), 7,08-7,15 (m, J = 6,9 Hz, 1H),7,16-7,30 (m, 3H), 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -185,14 (ddd, J = 48,0, 32,4, 16,5 Hz). MS ESI+ m/z 364 [M+H]+.
Пример 37. N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид
2-(2-Аминоэтил)фенол (53 мг, 0,39 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли TMS-Cl (49 мкл, 0,39 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (0,1 мл, 0,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30-ти минут при комнатной температуре, затем добавляли 2,4,6-триметилбензолсульфонил хлорид (50 мг, 0,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа. Добавляли подкисленную воду (1 мл) и перемешивали в течение нескольких минут, фазы разделяли и органическую фазу упаривали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (100:0 до 97:3) давала указанное в подзаголовке соединение в виде желтого твердого вещества (45 мг, 61%). MS ESI+ m/z 320 [M+H]+.
Пример 38. 4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]бензолсульфонамид
2-(2-аминоэтил)фенол (53 мг, 0,39 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли TMS-Cl (50 мкл, 0,40 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (100 мкл, 0,73 ммоль). Реакционная смесь становилась прозрачной, ее перемешивали в течение 20-ти минут перед добавлением 4-бром-2,6-дихлор-бензолсульфонил хлорида (74 мг, 0,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа перед добавлением воды (2 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 5-ти минут и собирали органическую фазу. Водную фазу экстрагировали DCM (2 мл) и объединенные органические слои высушивали (MgSO4) и концентрировали. Смесь растворяли в ацетонитриле (1 мл), добавляли 1 каплю 2 н HCl и реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 10-ти минут. Реакционную смесь концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (95:5) в качестве элюента. Выход 40 мг (41%). MS ESI+ m/z 426 [M+H]+. 1H NMR (CDCl3) 2,85 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,35 (t, J=6,6 Hz, 2H), 4,84 (s, br, 1H), 5,44 (s, br, 1H), 6,67-6,73 (m, 1H), 6,77-6,86 (m, 1H), 6,98-7,04 (m, 1H), 7,05-7,13 (m, 1H), 7,55 (s, 2H).
Пример 39. 2,6-дихлор-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-(трифторметил)бензолсульфонамид
2-(2-аминоэтил)фенол (53 мг, 0,39 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли TMS-Cl (50 мкл, 0,40 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (100 мкл, 0,73 ммоль). Реакционная смесь становилась прозрачной, ее перемешивали в течение 20-ти минут перед добавлением 2,6-дихлор-4-(трифторметил)бензолсульфонил хлорида (72 мг, 0,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2-х часов, добавляли 1 каплю воды и реакционную смесь концентрировали. К остатку добавляли DCM (2 мл), а затем добавляли 3 капли 3 н HCl с последующим добавлением воды (1 мл). Смесь перемешивали в течение 5-ти минут и затем экстрагировали DCM (2×1 мл). Объединенные органические слои высушивали (MgSO4) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (от 100:0 до 95:5) в качестве элюента. Выход 20,5 мг (21%). MS ESI+ m/z 431 [M+17]+. 1H NMR (CDCl3) ppm 2,85 (t, J=6,64, 2H), 3,41 (t, J=6,64, 2H), 6,64-6,69 (m, 1H), 6,76-6,82 (m, 1H), 6,98-7,02 (m, 1H), 7,03 -7,09 (m, 1H), 7,61 (s, 2H).
Пример 40. 2,6-дихлор-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]бензолсульфонамид
2-(2-аминоэтил)фенол (53 мг, 0,39 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), добавляли TMS-Cl (50 мкл, 0,40 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (100 мкл, 0,73 ммоль). Реакционная смесь становилась прозрачной, ее перемешивали в течение 20-ти минут перед добавлением 2,6-дихлорбензолсульфонил хлорида (56 мг, 0,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов, затем добавляли 1 каплю воды и реакционную смесь концентрировали. К остатку добавляли DCM (2 мл), а затем добавляли 3 капли 3 н HCl с последующим добавлением воды (1 мл). Смесь перемешивали в течение 5-ти минут и затем экстрагировали DCM (2×1 мл). Объединенные органические слои высушивали (MgSO4) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с петролейный эфир/этилацетат (от 100:0 до 50:50) в качестве элюента. Выход 12 мг (15%). MS ESI+ m/z 346 [M+H]+.
Пример 41. 2,4-дихлор-6-гидрокси-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]бензолсульфонамид
2-(2-Аминоэтил)фенол (90 мг, 0,66 ммоль) растворяли в безводном DCM (3 мл) и TMS-Cl (83 мкл, 0,66 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (136 мкл, 1,16 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30-ти минут при комнатной температуре перед добавлением 2,4-дихлор-6-гидрокси-бензолсульфонил хлорида (101 мг, 0,386 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа перед добавлением 2 н HCl (водн.). Реакционную смесь концентрировали и очищали с помощью препаративной HPLC (колонка XBridge C18, 10-60% ацетонитрил в NH4CO3/NH3 буфере) и получали 72 мг, (51%) светло-желтого твердого вещества. MS ESI+ m/z 362 [M+H]+ 1H NMR (CDCl3) 2,86 (t, 2H), 3,27 (q, 2H), 5,00 (br s, 1H), 5,53 (br t, 1H), 6,71 (d, 1H), 6,86 (dt, 1H), 6,94 (d, 1H), 6,98 (d, 1H), 7,04 (dd, 1H), 7,12 (dt, 1H), 10,08 (s, 1H)
Пример 42. 2,4-дихлор-6-гидрокси-N-[2-(o-толил)этил]бензолсульфонамид
2-(o-толил)этанамин (31 мг, 0,23 ммоль) растворяли в безводном DCM (2 мл), затем добавляли триэтиламин (45 мкл, 0,38 ммоль) и 2,4-дихлор-6-гидрокси-бензолсульфонил хлорид. Реакционную смесь перемешивали в течение 30-ти минут при комнатной температуре перед добавлением 2,4-дихлор-6-гидрокси-бензолсульфонил хлорида (50 мг, 0,19 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа и концентрировали. Остаток растворяли в ацетонитриле и очищали с помощью препаративной HPLC (колонка XBridge C18, 10-70% ацетонитрил в NH4CO3/NH3 буфере). Полученный продукт растворяли в дихлорметане и, перед его концентрированием, фильтровали для удаления остатков NH4CO3 из буфера. Бесцветное масло растворяли в воде и лиофилизировали с получением белого твердого вещества. Выход 24 мг (35%). MS ESI+ m/z 360 [M+H]+ 1H NMR (CDCl3) 2,25 (s, 3H), 2,86 (t, 2H), 3,20 (q, 2H), 6,99 (q, 2H), 7,06 (m, 1H), 7,15 (m, 3H), 10,07 (s, 1H)
Пример 43. 4-хлор-3-гидрокси-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]бензолсульфонамид
2-(2-Аминоэтил)фенол (51,4 мг, 0,37 ммоль) растворяли в безводном DCM (2 мл) и TMS-Cl (48 мкл, 0,37 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (78 мкл, 0,66 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30-ти минут при комнатной температуре перед добавлением 4-хлор-3-гидрокси-бензолсульфонил хлорида (50 мг, 0,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа перед добавлением 2 н HCl (водн.) и реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в смеси ацетонитрил-вода и очищали с помощью препаративной HPLC (колонка XBridge C18, 10-60% ацетонитрил в NH4CO3/NH3 буфере) и получали 22 мг (31%) продукта. MS ESI+ m/z 328 [M+H]+ 1H NMR (CDCl3) 2,80 (t, 2H), 3,25 (q, 2H), 5,11 (br s, 1H), 6,19 (br s, 1H), 6,73 (dd, 1H), 6,81 (dt, 1H), 6,97 (dd, 1H), 7,08 (dt, 1H), 7,25 (dd, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,40 (d, 1H).
Пример 44. 6-хлор-3-гидрокси-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,4-диметил-бензолсульфонамид
2-(2-Аминоэтил)фенол (47 мг, 0,34 ммоль) растворяли в безводном DCM (2 мл) и TMS-Cl (43 мкл, 0,34 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (71 мкл, 0,60 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30-ти минут при комнатной температуре перед добавлением 6-хлор-3-гидрокси-2,4-диметил-бензолсульфонил хлорида (51,0 мг, 0,20 ммоль) и смесь дополнительно перемешивали в течение 1-го часа. После завершения реакции, добавляли 4 н HCl в диоксане и смесь перемешивали в течение 15-ти минут. Реакционную смесь концентрировали и остаток растворяли в ацетонитрил-вода и очищали с помощью препаративной HPLC (колонка XBridge C18, 10-70% ацетонитрил в NH4CO3/NH3 буфере) и получали 29 мг (41%) указанного в подзаголовке продукта в виде белого твердого вещества. MS ESI+ m/z 356 [M+H]+ 1H NMR (CDCl3) 2,25 (s, 3H), 2,60 (s, 3H), 2,83 (t, 2H), 3,19 (q, 2H), 5,05 (br s, 1H), 5,56 (t, 1H), 6,74 (dd, 1H), 6,83 (dt, 1H), 7,02 (dd, 1H), 7,10 (m, 2H).
Пример 45. 3,5-дихлор-2-[2-(o-толил)этилсульфамоил]бензойная кислота
2-(o-толил)этанамин (26,5 мг, 0,196 ммоль) растворяли в безводном DCM (2 мл), затем добавляли триэтиламин (39 мкл, 0,34 ммоль) и метил-3,5-дихлор-2-хлорсульфонил-бензоат (51,0 мг, 0,168 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2,5 часов при комнатной температуре и концентрировали. Остаток растворяли в ацетонитриле и очищали с помощью препаративной HPLC (колонка XBridge C18, 20-80% ацетонитрил в NH4CO3/NH3 буфере). Полученный продукт растворяли в дихлорметане, фильтровали для удаления остатков NH4CO3 избуфера и концентрировали. Остаток растворяли в воде и лиофилизировали с получением продукта в виде белого твердого вещества (26 мг, 40% выход). MS ESI+ m/z 388 [M+H]+ 1H NMR (CDCl3) 2,44 (s, 3H), 3,15 (t, 2H), 3,92 (t, 2H), 7,18 (m, 4H), 7,77 (d, 1H), 7,90 (d, 1H).
Пример 46. N-[2-(2-хлорфенил)этил]-4-метокси-2,6-диметил-бензолсульфонамид
4-метокси-2,6-диметил-бензолсульфонил хлорид (100 мг, 0,426 ммоль) растворяли в DCM (2 мл) и 2-(2-хлорфенил)этанамине (66,3 мг, 0,426 моль), а затем добавляли триэтиламин (131 мкл, 0,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3-х часов, разбавляли водой и экстрагировали DCM (2×10 мл). Объединенные органические слои высушивали над (MgSO4) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (от 100:0 до 97,5:2,5) с получением указанного в подзаголовке соединения соединение в виде бесцветного масла. Выход 95 мг (63%). MS m/z 354[M+H]+. Чистота по HPLC 95%, 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): ppm 2,58 (s, 6H), 2,89 (t, J=7,0 Hz, 2H), 3,16-3,21 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 4,40-4,46 (m, 1H), 6,61 (s, 2H), 7,10-7,19 (m, 3H), 7,26-7,33 (m, 1H).
Пример 47. N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-метокси-2,6-диметил-бензолсульфонамид
4-метокси-2,6-диметил-бензолсульфонил хлорид (100 мг, 0,426 ммоль) растворяли в DCM (4 мл) и TMS-Cl (0,0919 мл, 0,724 ммоль), а затем добавляли триэтиламин (150 мкл, 0,128 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 минут, затем добавляли 4-метокси-2,6-диметил-бензолсульфонил хлорид (100 мг, 0,426 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1-го часа, затем добавляли 0,25 н HCl (4 мл) и смесь перемешивали в течение 10-ти минут. Реакционную смесь экстрагировали DCM (2×10 мл) и объединенные органические слои высушивали (MgSO4) и концентрировали с получением бесцветного масла. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с DCM/MeOH (от 100:0 до 97,5:2,5) с получением указанного в подзаголовке соединения соединение. Выход 40 мг (28%). MS m/z 336 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDDl3) ppm 2,56 (s, 6H), 2,79 (t, J=6,44 Hz, 2H), 3,12-3,17 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 4,84-4,90 (m, 1H), 5,70 (bs, 1H), 6,60 (s, 2H), 6,74-6,80 (m, 2H), 6,95-7,00 (m, 1H), 7,06-7,10 (m, 1H).
Пример 48. 4-гидрокси-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,6-диметил-бензолсульфонамид
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-метокси-2,6-диметил-бензолсульфонамид (35,0 мг, 0,104 ммоль) растворяли в DCM (300 мкл) и добавляли раствор 1 н BBr3 (300 мкл, 0,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3-х часов перед добавлением воды. Формировалась эмульсия. Смесь разбавляли DCM и водой. Водную фазу экстрагировали DCM (11x). Объединенные органические слои высушивали (MgSO4) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной HPLC (ACE C18 19×50 мм); 0,1% TFA в воде/MeCN; от 90:10 до 30:70 с получением 2,0 мг (6%) белого твердого вещества. MS ESI+ m/z 322 [M+H]+. Чистота по HPLC >95%.
Структурные формулы по примерам 1-48 приведены в таблице 1.
Таблица 1
Биологические анализы
Анализ активности ингибирования Nox in vitro
Материалы
RPMI 1640 с Glutamax, DMEM/F12 (1:1), забуференный солевой раствор Хэнкса (HBSS), фетальную бычью сыворотку (FBS) и Amplex Red приобретали в «Invitrogen», Пейсли, Великобритания. Pest (пенициллин, стрептомицин), неомицин, бластицидин, иономицин, форболмиристатацетат (PMA), дифенилениодония хлорид (DPI), дапсон, ML-171, Phox-I2, ксантин, гипоксантин, ксантиноксидаза, DMSO, DPPH (2,2-дифенил-1-пикрилгидразил), Tween® 20, сахарозу, флавинадениндинуклеотид (FAD), фосфатидную кислоту, этиленгликоль-бис-(β-аминоэтиловый эфир)-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты (EGTA), пероксидазу хрена (HRP) и NADPH приобретали в «Sigma-Aldrich». Ficoll Paque Plus («GE Healthcare») GKT136901 (химическое наименование: 2-(2-Хлорфенил)-4-метил-5-(пиридин-2-илметил)-1H-пиразоло[4,3-c]пиридин-3,6-дион), селективный ингибитор Nox1/Nox4, был любезным подарком проф. Harald H.H. Schmidt (Маастрихтский университет, Нидерланды).
Культура клеток
HEK293, сверхэкспрессирующие клетки Nox4 (CJ Nox4), были приобретены в «Redoxis», Лунд, Швеция. Клетки HEK 293, экспрессирующие Nox5, Nox3 (HEK TRex), и клетки CHO, экспрессирующие Nox1, были любезным подарком от Центра Vincent Jaque Медицинского университета, Женева, Швейцария. Nox2, экспрессируемый в изолированных нейтрофилах, выделяли из цельной крови (человека), как описано ранее (Anvari E, et al., Free Radic Res 2015; 49: 1308-1318).
Клетки HEK293 (CJ Nox4) культивировали в RPMI 1640 с Glutamax с добавлением FBS (10%), пенициллина (100 Ед./мл) и стрептомицина (100 мг/мл) при 37°C на воздухе с 5% CO2. На каждый третий пассаж в качестве селективного агента вносили 200 г/мл неомицина в питательную среду.
Клетки HEK293T, экспрессирующие индуцируемые тетрациклином (Nox3 или Nox4) человека, и клетки HEK293, стабильно экспрессирующие Nox5 человека, получали, как описано ранее (Serrander et al., 2007a, b). Клетки HEK культивировали в среде Игла в модификации Дульбекко (DMEM) с 4,5 г/л глюкозы, дополненной FBS (10%), пенициллином (100 Ед./мл) и стрептомицином (100 мг/мл) при 37°C на воздухе с 5% CO2.
Клетки CHO, экспрессирующие Nox1, культивировали в среде DMEM 12 (DMEM/F12) с добавлением FBS (10%), пенициллина (100 Ед./мл) и стрептомицина (100 мкг/мл) при 37°C на воздухе с 5% CO2.
Измерение АФК в анализах
Активный кислород, продуцируемый в целых клетках или в препаратах мембран Nox1, Nox3, Nox4, Nox5 и ксантиноксидазы и глюкозооксидазы, определяли с применением Amplex Red в качестве зонда для обнаружения образовавшейся H2O2. Amplex Red (10-ацетил-3,7-дигидроксифеноксазин) в сочетании с HRP и кофакторами реагирует с H2O2 в стехиометрии 1:1 с образованием высокофлуоресцентного резоруфина, возбуждаемого при 544 нМ, с эмиссией при 590 нМ.
Окислительно-восстановительный анализ DPPH
DPPH, хорошо известный чувствительный химикат для мониторинга реакций с участием радикалов, описанный Xiong Q, et al., Biol Pharm Bull 1996; 19: 1580-1585, применяли в качестве контроля для исключения любого окислительно-восстановительного активного соединения. DPPH инкубировали с уменьшающимися концентрациями (200-0,003 мкМ) соединения по изобретению или соединения GKT136901 предшествующего уровня техники (в качестве положительного контроля). Планшет выдерживали в темноте 60 мин, после чего измеряли оптическую плотность раствора при 518 нМ.
Флуоресцентный анализ с применением Amplex Red интактных клеток HEK и CHO, экспрессирующих Nox
Прикрепившиеся клетки (CHO, HEK) собирали трипсинизацией, центрифугировали, промывали HBSS, подсчитывали и ресуспендировали в HBSS. Клетки высевали в 96-луночные черные планшеты с плоским дном при плотности 50000-100000 клеток/лунку. Все соединения растворяли в DMSO и тестировали в концентрациях в диапазоне от 0,003 до 200 мкМ в клеточных анализах Nox с конечной концентрацией DMSO 1%. Перед измерением клетки инкубировали при 37°C в течение 30-ти минут. Клетки, экспрессирующие Nox1 и Nox2, активировали PMA (0,1 мкМ), активатором PKC. Nox5 активировали иономицином (1 мкМ), ионофором Ca2+, и дополнительно усиливали PMA. Клетки CJ HEK 293 конститутивно сверхэкспрессируют Nox4. В HTS-скрининге применяли HEK 293 TRex и за 18 часов до измерения добавляли тетрациклин (1 мг/мл), чтобы вызвать экспрессию Nox4. Производство перекиси водорода Nox в интактных клетках измеряли с применением флуоресценции Amplex Red, как описано Jaquet V и др., Br J Pharmacol 2011; 164: 507-520. Реагенты для анализа, включая HRP (0,1 мМ) и Amplex Red (50 мкМ), добавляли для инициирования продукции пероксида водорода. Флуоресценцию считывали с помощью флуоресцентного спектрофотометра для прочтения планшетов при 37°C каждую минуту между 30-60 минутами.
Мембранный препарат
Мембраны из трансфицированных клеток, сверхэкспрессирующих Nox1 (CHO), Nox2 (PLB), Nox3 (HEK), Nox4 (HEK) и Nox5 (HEK), получали, как описано в Pailcz et al., 2001, J. Biol. Chem, 76, 3090-3097. Клетки суспендировали и гомогенизировали в буфере для обработки ультразвуком, содержавшем PBS, сахарозу (11%), NaCl (120 мМ) и EGTA (1 мМ) с добавлением ингибиторов протеаз и дополнительно обрабатывали, а затем разрушали ультразвуком, охлаждая на ледяной бане. Затем образец центрифугировали при 200×g в течение 10-ти мин. Супернатант осторожно добавляли поверх прерывистого градиента сахарозы 17/40% и центрифугировали при 150000×g в течение 60-ти мин. Мембраны, содержащие изоформы Nox, собирали на границе раздела 17/40% сахарозы, как описано Jaquet V. et al., Br J Pharmacol 2011; 164: 507-520. Для изоформ Nox Nox1, Nox2, Nox3 была разработана субъединично-специфическая бесклеточная мембранная система и были добавлены рекомбинантные белки субъединиц для получения активации изоформ Nox в бесклеточном анализе. Анализ с Amplex Red проводили в черных 96-луночных планшетах с плоским дном. Добавляли реагенты для анализа, включавшие HRP (0,1 мМ), FAD (6 мкМ), фосфатидную кислоту (15 мкМ) и Amplex Red (50 мкМ), а затем НАДФН (30 мкМ) для инициирования образования пероксида водорода. За продукцией перекиси водорода следили с помощью флуоресцентного спектрофотометра для прочтения планшетов, показания считывали при 37°C каждую минуту между 30-60 минутами.
Определение IC50 для ингибирования Nox2 в нейтрофилах человека с применением изолюминол-зависимой хемилюминесценции
Соединения по изобретению протестировали на селективность в отношении Nox2 в изолированных нейтрофилах из цельной крови (человека), как описано ранее. (Anvari E, et al., vide supra). Уровни АФК из первичных нейтрофилов человека, стимулированных PMA, измеряли с помощью изолюминол-зависимой хемилюминесценции. Изолюминол представляет собой гидрофобный краситель, неспособный проходить через биологические мембраны, поэтому можно определять внеклеточные АФК. Краситель возбуждают под действием АФК, и измеряют свет, излучаемый при возвращении возбужденных молекул в основное состояние, относительно количества высвобожденных АФК. Пероксидазы катализируют и усиливают эту реакцию. Этого можно добиться с помощью природных пероксидаз, однако секреция эндогенных пероксидаз ограничена, и поэтому необходимо добавлять дополнительную пероксидазу в форме HRP. Соединения по изобретению и GKT136901 разбавляли до 4-кратной рабочей концентрации и титровали от 100 мкМ до 0,006 мкМ с шагом 1:4 в качестве конечных концентраций. DPI разводили в буфере с изолуминолом в 4-кратной рабочей концентрации, титруемой от 10 мкМ до 0,0006 мкМ в качестве конечных концентраций. PMA разводили в буфере с изолуминолом в 4-кратной рабочей концентрации до конечной концентрации 30 нг/мл. Соединения и DPI имели конечную концентрацию DMSO, равную 1%, в лунках и также 1%-ный DMSO в контроле. Люминесценцию регистрировали с помощью FluoStar Optima (BMG, Labtech). Буфер с изюминолом готовили непосредственно перед добавлением в планшет для тестирования. Буфер содержал фракцию HRP с или без PMA (30 нг/мл). Применяли исходные растворы с концентрацией 6 мкг/мл (PMA в HBSS), 3 мкг/мл (PMA в DMSO) и 24 мМ (DPI), которые дополнительно разбавляли в день анализа до 4-кратных рабочих концентраций в HBSS с DMSO или без него.
Анализ ксантиноксидазы (XO) с Amplex Red
Тест был разработан для анализа продукции перекиси водорода с помощью Amplex Red. Тестируемые соединения инкубировали с 5 мЕд./мл бычьей ксантиноксидазы в течение 15-ти мин при комнатной температуре с последующим добавлением субстрата и смеси для детектирования (конечные концентрации 0,2 Ед./мл HRP, 5 мкМ гипоксантина и 50 мкМ Amplex Red). Как описано в работе Hirano K et al., Antioxid Redox Signal 2015 10; 23: 358-374, за образованием пероксида водорода следили путем детектирования флуоресценции в течение 30 мин при 37°C с помощью спектрофотометра для прочтения планшетов, с возбуждением при 544 нМ и генерацией излучение при 590 нМ.
Amplex Red и анализ глюкозооксидазы (GO)
Анализ выполняли с применением модифицированной формы набора для анализа глюкозы/глюкозооксидазы Invitrogen Amplex™ Red, № по каталогу: A22189. Тестируемые соединения инкубировали с 5 мЕд./мл глюкозооксидазы в течение 30 мин при комнатной температуре с последующим добавлением субстрата и смеси для детектирования (конечные концентрации 0,1 Ед./мл HRP, 10 мМ глюкоза, 50 мкМ Amplex Red в фосфатном буфере pH 7,4), а затем проводили флуоресцентное детектирование продукции пероксида водорода в течение 30 мин при 37°C с помощью спектрофотометра для прочтения планшетов, с возбуждением при 544 нМ и генерацией излучение при 590 нМ.
Результаты описанных выше биологических анализов показаны в таблицах 2 и 3.
Таблица 2
в клетках HEK293, экспрессирующих Nox4
в клетках СНО, экспрессирующих Nox1
Таблица 3
и соединения предшествующего уровня техники GKT136901
Знак «-» означает «неактивный»; «n.a.» означает «не анализировали».
Ишемический инсульт и Nox4 - модель in vitro
Соединения по изобретению (примеры 11, 17 и 44) продемонстрировали нейропротекторный эффект на двух различных моделях инсульта in vitro. Срезы головного мозга гиппокампа и эндотелиальные клетки микрососудов головного мозга человека подвергали гипоксии и депривации глюкозы (голоданию) в течение 5-ти часов и тестировали на жизнеспособность после 24-х часов культивирования в присутствии примера 11 или примера 17 в различных концентрациях. Кроме того, эндотелиальные клетки микрососудов головного мозга человека подвергали гипоксии и депривации глюкозы (голоданию) в течение 6-ти часов и тестировали на жизнеспособность после 24-х часов культивирования в присутствии примера 44 в различных концентрациях. Результаты приведены на фиг. 1-5.
In vivo модель острого ишемического инсульта
Применяли мышиную модель острого ишемического инсульта, возникавшего вследствие транзиторой окклюзии средней мозговой артерии (tMCAO). Модель описана в работе Kleinschnitz C, et al. 2010, J Exp Med 203(3): 513-518. Мышей C57Bl6/J анестезировали изофлураном (0,8% в кислороде). Животное помещали на грелку и ректальную температуру поддерживали на уровне 37,0°C, применяя устройство, включающее ректальный датчик с сервоуправлением и грелку-подушку («Cibertec», Испания). Транзиторную церебральную ишемию индуцировали с применением методики внутрипросветного филамента. С помощью хирургического микроскопа (Tecnoscopio OPMI pico, Carl Zeiss, Meditec Iberia SA, Испания), делали разрез по средней линии шеи, правую общую и внешнюю сонную артерии изолировали и окончательно лигировали. На внутреннюю сонную артерию помещали временную микрососудистую лигатуру, чтобы ненадолго перекрыть кровоток. Монофиламент с покрытием из силиконовой резины (6023910PK10, Doccol Corporation, Sharon, MA, США) вводили через небольшой разрез в общую сонную артерию и продвигали во внутреннюю сонную артерию до тех пор, пока не почувствовалось сопротивление. Кончик монофиламента располагали точно в начале правой средней мозговой артерии для того, чтобы прервать кровоток. Нить удерживали жгутом в общей сонной артерии для предотвращения перемещения нити во время периода ишемии. Животных держали под наркозом в течение 1-го часа окклюзии, после чего следовал период реперфузии, который начинался после удаления монофиламента. После операции раны тщательно зашивали, и животным позволили восстановиться после операции в шкафу с регулируемой температурой. Время операции для одного животного не превышало 15-ти минут. Животных исключали из анализа инсульта, если они умирали в течение первых 24-х часов или если происходило внутримозговое кровоизлияние.
Пример 17 растворяли в смеси DMSO/Кремофор/физиологический раствор. Либо пример 17 (2,56 мг/кг), либо наполнитель (DMSO/Кремофор/физиологический раствор) вводили путем внутрибрюшинной (ip) инъекции либо через 1 час после реперфузии, либо за 30 минут до удаления нити. Инъекцию проводили всего 6 раз, один раз в час, и мышей умерщвляли через 24 часа.
После умерщвления мышей (24-часовая реперфузия) мозг быстро извлекали и разрезали на четыре коронарных среза толщиной 2 мм, применяя матрицу срезов мозга мыши («Harvard Apparatus», Испания). Срезы окрашивали в течение 15-ти минут при комнатной температуре 2%-ным 2,3,5-трифенилтетразолия хлоридом (TTC; «Sigma-Aldrich», Нидерланды) в PBS для визуализации инфарктов (фиг. 6 и 8). Объемы непрямого инфаркта рассчитывали волюметрическим способом (программа ImageJ, Национальные институты здравоохранения, США) в соответствии со следующим уравнением: Vнепрямой (мм3) = Vинфаркт×(1-(Vih-Vch)/Vch), где термин (Vih-Vch) представляет собой разность объемов между ишемическим полушарием и контрольным полушарием и (Vih-Vch)/Vch выражает эту разницу в процентах от контрольного полушария (фиг. 7 и 9).
Как видно из фиг. 6 и 8, контрольные животные страдали от гибели больших участков нейрональных клеток, что показано белыми областями на изображениях. У мышей, которых лечили примером 17, наблюдали значительное уменьшение повреждения мозга, об этом свидетельствует значительное уменьшение площади белого цвета, что демонстрирует защитный эффект высокоселективного ингибитора Nox4. На фиг. 7 и 9 представлено существенное уменьшение объема инфаркта у животных, получавших пример 17, по сравнению с контрольными животными.
Модели болезни Альцгеймера (таупатия) in vitro
Таупатия относится к классу нейродегенеративных заболеваний, связанных с патологической агрегацией тау-белка в нейрофибриллярных или глиофибриллярных клубках головного мозга человека. Клубки образуются из белка, связанного с микротрубочками, известного как тау, заставляя его агрегировать в нерастворимой форме. В модели in vitro культивируемые клетки нейробластомы человека SHSY-5Y подвергали воздействию окадаиковой кислоты (15 нМ), в отсутствии или в присутствии различных концентраций (0,3 мкМ, 3 мкМ или 10 мкМ) примера 17 или в присутствии мелатонина (10 мкМ) в качестве положительного контроля (фиг. 10).
В следующем эксперименте срезы гиппокампа мышей обрабатывали окадаиковой кислотой. Животные представляли собой мышей дикого типа (WT) или мышей с нокаутом Nox4 (KO). Срезы стабилизировали в течение 40 минут в культуральной среде и обрабатывали в течение 6-ти часов окадаиковой кислотой (1 мкМ), в отсутствие или в присутствии примера 11 (10 мкМ). Ингибитор Nox VAS2870 (3-бензил-7-(2-бензоксазолил)тио-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин) применяли в качестве положительного контроля. Жизнеспособность клеток определяли с помощью МТТ-анализа. Результаты представлены на фиг. 11.
Влияние на жизнеспособность островковых клеток человека
Островковые клетки человека инкубировали в контрольных условиях с цитокинами IL-1β (20 нг/мл) + IFN-γ (20 нг/мл) или с пальмитатом (1,5 мм + 2% BSA) + высоким содержанием глюкозы (20 мМ) (PH) в течение 2-х дней с ингибитором Nox1 ML-171 (2 мкМ), ингибитором Nox2 Phos-I2 (2 мкМ) или с примером 17 (1 мкМ) или без них. Островки фотографировали в инвертированном флуоресцентном микроскопе и количественно определяли интенсивности красного (PI) и синего (бисбензимид) сигналов с помощью программного обеспечения Image J. Результаты указаны как среднее значение ± стандартная ошибка среднего для 7 доноров островков человека.
Как показано на фиг. 12 и 13, селективный ингибитор Nox1 ML171 (Gianni D, et al., ACS Chem Biol. 2010 Oct 15; 5 (10): 981-93) в концентрации равной 2 мкМ не смог снизить гибель островковых клеток человека в течение 48-часового периода культивирования с цитокинами или с высоким содержанием глюкозы + пальмитата. Селективный ингибитор Phox-I2 для Rac1/Nox2 (Bosco EE, et al., Chem Biol. 2012 Feb 24; 19 (2): 228-42), в концентрации, равной 2 мкМ, также не смог защитить островковые клетки человека от цитокинов, но частично защитил от высокого содержания глюкозы и пальмитата. С другой стороны, пример 17, в концентрации, равной только 1 мкМ, защищает как от цитокинов, так и от высокого содержания глюкозы + пальмитата.
Модуляция индуцированного TGFβ перехода хрусталика из эпителиального в мезенхимальный (EMT)
Глазные ткани собирали у крыс-альбиносов линии Wistar (Rattus norvegicus) на 21 день после рождения, которых умерщвляли асфиксией с последующим шейным вывихом.
Эпителиальные эксплантаты хрусталика получали, как описано ранее (Wang Q, et al., Investigative ophthalmology & visual science. 2010; 51 (7): 3599-610), и культивировали в среде 199 (M199) с солями Эрла («Life Technologies», США) с добавлением 50 мкг/мл L-глютамина, 50 МЕ/мл пенициллина/50 мкг/мл стрептомицина («Thermo Scientific», США), 2,5 мкг/мл амфостата B («Thermo Scientific», США) и 0,1% бычьего сывороточного альбумина (BSA) («Sigma», США). M199 уравновешивали при 37°C, 5% CO2. Для индукции EMT рекомбинантный TGF-β2 добавляли в среду в каждой культуральной чашке в рабочей концентрации 200 пг/мл (R&D Systems, США). Перед добавлением TGF-β2 некоторые эксплантаты предварительно обрабатывали в течение 30-ти минут примером 11 или примером 17 при рабочих концентрациях 2,4 мкМ и 0,3 мкМ, соответственно. Прогрессирование EMT в живых клетках наблюдали и фиксировали с помощью фазово-контрастной микроскопии (Olympus CK2, Япония) и цифровой камеры (Leica DFC-280, Германия). Количественную оценку потери клеток в процентах проводили с применением пороговой функции ImageJ (NIH), так что клетки можно было отличить от непокрытой капсулы хрусталика.
Для иммунофлуоресцентного анализа в конце периода культивирования эксплантаты фиксировали в абсолютном метаноле в течение 45 секунд с последующими 3 последовательными 15-секундными промывками в фосфатно-солевом буфере (PBS). Эксплантаты блокировали в 10%-ной нормальной козьей сыворотке (NGS) в течение 1-го часа при комнатной температуре. Избыток NGS удаляли и наносили первичные антитела, разбавленные 0,15% NGS/PBS с добавлением 1%-ного бычьего сывороточного альбумина (BSA). Чашки оставляли инкубироваться в течение ночи при 4°C в увлажненной камере. α-Актин гладких мышц метили специфическим моноклональным мышиным антителом («Sigma», США), разведенным 1:100. Nox4 метили специфическим поликлональным кроличьим антителом («Santa Cruz Biotechnology», США) в разведении 1:50. На следующий день чашки уравновешивали при комнатной температуре и промывали 3 раза по 5 минут в PBS/BSA. Соответствующее вторичное антитело разводили в PBS/BSA и наносили на каждый эксплантат на 2 часа в темноте. α-Актин гладких мышц детектировали с помощью козьего антитела к Alexa-Fluor 488 мыши («Cell Signaling», США). Nox4 выявляли с применением цельного IgG кролика, конъюгированного с Alexfluor 594 («Sigma»). Для всех вторичных антител применяли разведение 1:1000. Затем чашки ополаскивали в PBS/BSA и наносили раствор бисбензимида (красителя Хехст) в соотношении 1:2000 в PBS/BSA на 3 минуты для визуализации ядер клеток. Иммунофлуоресцентное мечение просматривали и фиксировали с помощью эпифлуоресцентной микроскопии («Leica-DMLB», Германия) и цифровой камеры (Q-Imaging MicroPublisher 3.3 RTV, Канада).
В течение определенного периода обработки 1 мкл 30 мМ DHE (дихлорэтидиум, «Life Technologies», США) (восстановленного в DMSO в соответствии с инструкциями производителя) добавляли в каждую чашку, содержавшую 1 мл сбалансированного солевого раствора Хэнка («Life Technologies»), для получения рабочей концентрации 30 мкМ. Чашки возвращали в инкубатор на 30 минут. Затем эксплантаты промывали холодным фосфатно-солевым буфером (PBS) (3×15 секунд), а затем помещали в 40 мкл 10% глицерина/PBS. В восстановленной форме DHE обычно флуоресцирует синим светом; однако в присутствии супероксид-аниона он подвергается окислению, что позволяет ему интеркалировать с клеточной ДНК и излучать красную флуоресценцию, окрашивая ядер клеток (Wang X, et al. Imaging ROS signaling in cell and animals. J Mol Med (Berl). 2013; 91(8): 917-27). Окрашивание DHE просматривали с помощью эпифлуоресцентного микроскопа (Leica-DMLB, Германия) и цифровой камеры (Q-Imaging MicroPublisher 3.3 RTV, Канада). Суммарную флуоресценцию рассчитывали с помощью ImageJ (NIH, США) (фиг. 14).
Кроме того, было отмечено, что эксплантаты, обработанные одним TGFβ, претерпевали EMT, который характеризовался удлинением эпителиальных клеток хрусталика (LEC) за 2 дня лечения (фиг. 15B) и прогрессирующей потерей клеток на 3 и 5 день (фиг. 15C и 15D, соответственно), по сравнению с необработанными эпителиальными эксплантами, где клетки сохраняли вид булыжника (данные не показаны), и с контрольными эксплантами на день 0 (фиг. 15A и 15E). Прогрессирующая потеря клеток выявила оголенную капсулу хрусталика, на которой наблюдалась заметная складчатость капсулы хрусталика (фиг. 15C, белые стрелки). В этом заключалось отличие от необработанных эксплантатов, в которых клетки оставались кубовидными в течение 5-ти дней, что сравнимо с эксплантами в день 0 (фиг. 15A и 15E). Совместное лечение с TGFβ и примером 17, по-видимому, задерживало прогрессирование ЭМП (фиг. 15F); аналогичный эффект был получен при совместной обработке с TGFβ и примером 11. Хотя через 2 дня культивирования с добавлением как TGFβ, так и любого из ингибиторов наблюдали некоторую оголенную капсулу (фиг. 15F), клетки не удлинялись в такой степени, как при обработке только TGFβ, и не проявляли сморщивания капсулы хрусталика к 3-му дню (фиг. 15G). К 5 дню в эксплантатах, обработанных TGFβ, оставались некоторые кластеры клеток (фиг. 15D), тогда как в эксплантах, обработанных TGFβ и либо примером 11, либо примером 17, некоторые из оставшихся клеток выглядели подобными эпителию. Ни один из ингибиторов существенно не увеличивал выживаемость клеток ни в один из дней культивирования. Результаты исследования предполагают, что Nox4 принципиально не требуется для всех аспектов TGFβ-индуцированной EMT хрусталика и что эпителиальные клетки хрусталика могут быть способны активировать компенсаторные механизмы. Исследование демонстрирует, что активность Nox4, индуцированная TGFβ, ответственна за продукцию АФК на ранних стадиях ЭМП хрусталика.
Анализ экспрессии генов
Количественный анализ экспрессии генов с помощью RT-PCR (qRT-PCR) выполняли, как описано ранее (Shu D, et al., Investigative ophthalmology & visual science. 2017; 58(2): 781-96.). Аббревиатуры названий генов, названия генов и идентификаторы NCBI исследуемых генов приведены в таблице 4, а последовательности прямого и обратного праймеров, примененных для экспрессии qRT-PCR, показаны в таблицах 5 и 6, соответственно.
Таблица 4
Snail 1
Таблица 5
Таблица 6
Для анализа данных применяли способ 2^-ΔΔCt для оценки относительного кратного изменения экспрессии гена. Применяя способ 2^-ΔΔCt, интересующий ген количественно определяли относительно, во-первых, гена домашнего хозяйства, GAPDH, и, во-вторых, относительной экспрессии гена в необработанных эксплантатах.
Анализ экспрессии генов с помощью qRT-PCR выявил значительное повышение транскриптов мРНК для αSMA, Col1A и Fn после обработки TGFβ (фиг. 16). Оба соединения были способны подавлять индуцируемую TGFβ активацию Col1A и Fn и оба смогли подавить экспрессию αSMA (фиг. 17 и 18), хотя пример 17 демонстрировал это в большей степени, чем пример 11. Таким образом, представляется, что для ослабления генерации ROS, индуцированных TGFβ, может потребоваться более высокая доза примера 11. Однако оба соединения ингибировали индуцированную TGFβ активацию мезенхимальных генов, позволяя предположить, что оба соединения активно нацелены на опосредованную Nox4 регуляцию этих генов.
Модель индуцированной стрептозотоцином диабетической ретинопатии на крысах
Животных поддерживали при 12-часовом цикле свет-темнота при 22-25°C. Еда и вода были доступны ad libitum. Диабет вызывали однократной дозой стрептозотоцина (STZ, 70 мг/кг, внутрибрюшинно, «Sigma-Aldrich», Германия), растворенного в буфере цитрата натрия (0,1 М) (диабетическая группа), после периода голодания в течение 8-12 часов. Животные с уровнем глюкозы в крови >350 мг/дл после 72-х часов после инъекции СТЗ считались диабетиками. В исследовании применяли как самцов, так и самок крыс Sprague-Dawley. Применяли три экспериментальные группы: контрольная (n = 6), диабетическая (n = 7) и диабетическая, получавшая лечение группа (n = 6). Пример 17 (10 мг/мл), растворенный в DMSO, вводили в виде глазных капель в течение двух недель, начиная со второго (2) дня после введения STZ. Животных умерщвляли через 24 часа после последней обработки и их глаза извлекали.
Иммуногистохимические исследования проводили согласно Arias et al. (Diabetes, 67, 321-333, 2018). Вкратце, глаза, извлеченные из умерщвленных животных, фиксировали путем погружения в 4% параформальдегид в 0,1 М фосфатном буфере на 45 мин при 4°C. Глазные чаши изолировали и фиксировали в 4% параформальдегиде в 0,1 М фосфатном буфере в течение 1,5 ч при 4°C. После фиксации ткани помещали в матричную среду для криотомии (OCT compound, Prolabo, Leuven, Бельгия) и замораживали в изопентане в течение 1-ой мин. Собрали последовательные поперечные срезы сетчатки (10 мкм).
Применяли антитела против маркера макроглии, глиального фибриллярного кислого белка (GFAP). Количественную оценку, полученную с помощью общедоступного программного обеспечения ImageJ 1.43m, применяли для расчета среднего значения серого [интегрированная плотность (плотность флуоресценции)/очерченная область], выраженного в процентах от среднего значения серого для контроля. Статистический анализ данных выполняли с применением программы GraphPad Prism v5.0 (Сан-Диего, Калифорния, США), а различия между группами оценивали с помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) методом Неймана-Кеулса. Статистическая значимость была установлена на p<0,05. Как показано на фигуре 19, пример 17 (10 мг/мл), введенный в виде глазных капель в течение двух недель, ослаблял вызванное диабетом повышение иммунореактивности GFAP.
Растворимость, химическая и метаболическая стабильность и свойства связывания с белками плазмы
Растворимость, химическая и метаболическая стабильность и свойства связывания с белками плазмы соединений по настоящему изобретению также были изучены, как описано ниже в настоящем документе.
Определение растворимости
Два мкл тестируемого соединения (из 10 мМ исходного раствора в DMSO) разводили в 100 раз в 10 мМ фосфате калия, pH 7,4, в стеклянном флаконе для HPLC, герметично закрывали и инкубировали в течение 24-х ч при вращении (900 об/мин) при комнатной температуре. После инкубации 150 мкл переносили в конические стеклянные вставки и центрифугировали в течение 20-ти мин при 10000×g. Два мкл супернатанта переносили в 96-луночный планшет, разбавляли в 100 раз ацетонитрил/H2O (60/40, объем/объем) и анализировали с помощью LC-MS/MS.
Определение химической стабильности
Тестируемое соединение переносили пипеткой во флакон для HPLC, из 10 мМ DMSO, до конечной концентрации 2 мкМ в трех отдельных флаконах, содержавших буферы с различным pH. В начале реакции три разных буфера смешивали с изопропанолом (1:2, буфер : изопропанол). Примененные буферы: pH 2 (H3PO4/KH2PO4 10 мМ), pH 7,4 (KH2PO4/K2HPO4 10 мМ) и pH 10 (глицин/NaOH 10 мМ). Сразу (<1 минуты) после добавления буфера или буфера/изопропанола аликвоту 100 мкл добавляли в отдельный планшет, содержащий 100 мкл ацетонитрила:H2O (60:40) и варфарин (внутренний стандарт, IS), герметично закрывали и замораживали при -20°C. Этот тест длился 2 часа и 20 часов. Анализы выполняли на масс-спектрометре XEVO TQ, соединенном с системой Acquity UPLC в режиме ESI + MRM, разделение на колонке BEH C18 2×50 мм.
Определение метаболической стабильности
В анализе микросомальной метаболической стабильности применяют объединенные микросомы печени человека или животных (мышей), с добавленным кофактором (НАДФН), чтобы в первую очередь способствовать проявлению активности цитохрома Р450 (CYP) в отношении целевого соединения. Тестируемое соединение (концентрация в инкубации - 1 мкМ) и микросомы (концентрация в инкубации - 0,5 мг/мл) разводили в 0,1 М фосфатном буфере, pH 7,4, в объеме 150 мкл. Реакцию инициировали добавлением НАДФН (1 мМ). Время инкубации составляло 0, 5, 15, 40 мин, и реакцию гасили в каждый момент времени добавлением 100 мкл ацетонитрила, содержащего варфарин в качестве IS. Затем планшет герметично закрывали, центрифугировали и замораживали при -20°C до анализа LC-MS/MS.
Determination of plasma protein binding
Соединения примеров инкубировали в концентрации 10 мкМ в плазме и затем подвергали равновесному диализу в течение 4-х часов, применяя устройство для быстрого установления равновесия. Связывание с белками (fu%) определяли с помощью LS/MS, как описано ранее (Anvari E, et al., vide supra).
Результаты, полученные для некоторых соединений по изобретению, приведены ниже в таблице 7 в настоящем документе.
Таблица 7
раств.
мкМ
pH 7,4
t1/2мин
мышь
t1/2 мин
Белков плазмы человека
Белков плазмы мыши
Как можно видеть из таблицы 7, некоторые из соединений по изобретению обладают неожиданно благоприятными характеристиками с точки зрения растворимости, метаболической стабильности и связывания с белками плазмы.
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> GLUCOX BIOTECH AB
<120> NOVEL SULFONAMIDE DERIVATIVES HAVING SELECTIVE NOX INHIBITING
ACTIVITY
<130> P11899PC00
<160> 20
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Smurf1 Forward (5'-3') primer sequence
<400> 1
aaggcttcaa ggctctgcaa
20
<210> 2
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Snail1 Forward (5'-3') primer sequence
<400> 2
cgtgtgtgga gttcaccttc c
21
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> GAPDH Forward (5'-3') primer sequence
<400> 3
agacagccgc atcttcttgt
20
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> NCad Forward (5'-3') primer sequence
<400> 4
ctgccatgac cttctacgga
20
<210> 5
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Fn Forward (5'-3') primer sequence
<400> 5
ccatcactgg tctggagcc
19
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Col1A1 Forward (5'-3') primer sequence
<400> 6
tgactggaag agcggagagt
20
<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> alfaSMA Forward (5'-3') primer sequence
<400> 7
ctatgctctg cctcatgcca
20
<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Ecad Forward (5'-3') primer sequence
<400> 8
ctggaccgag agagttaccc
20
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> MMP9 Forward (5'-3') primer sequence
<400> 9
tgaggcccct acagagtctt
20
<210> 10
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CTGF Forward (5'-3') primer sequence
<400> 10
gcgtgtgcac tgccaaagat
20
<210> 11
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Smurf1 Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 11
aaggcccaca cctgctttaa t
21
<210> 12
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Snail1 Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 12
tttgccactg tcctcatcgg
20
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> GAPDH Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 13
atgactctac ccacggcaag
20
<210> 14
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> NCad Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 14
tttgccatcc tgacagaccc
20
<210> 15
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Fn Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 15
accagttggg gaagctcatc
20
<210> 16
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Col1A1 Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 16
gatagcgaca tcggcaggat
20
<210> 17
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> alfaSMA Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 17
ctcacgctca gcagtagtca
20
<210> 18
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Ecad Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 18
ggcaccgacc tcattctcaa
20
<210> 19
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> MMP9 Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 19
tccaataccg accgtccttg
20
<210> 20
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CTGF Reverse (5'-3') primer sequence
<400> 20
tggctcgcat catagttggg
20
<---
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| 19-НОР C3, 3-ДИЗАМЕЩЕННЫЕ C21-N-ПИРАЗОЛИЛЬНЫЕ СТЕРОИДЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2014 |
|
RU2675855C2 |
| 19-НОР C3,3-ДИЗАМЕЩЕННЫЕ C21-N-ПИРАЗОЛИЛЬНЫЕ СТЕРОИДЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2014 |
|
RU2812930C2 |
| ИНГИБИТОРЫ АКТИВИН-РЕЦЕПТОРОПОДОБНОЙ КИНАЗЫ | 2018 |
|
RU2788628C2 |
| КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ | 2018 |
|
RU2810331C2 |
| ИНГИБИТОРЫ MEK И ИХ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ | 2021 |
|
RU2812929C1 |
| 8-АНИЛИНОИМИДАЗОПИРИДИНЫ И СПОСОБЫ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ | 2008 |
|
RU2498985C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ БОРОНОВОЙ КИСЛОТЫ И ИХ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ ПРИМЕНЕНИЯ | 2017 |
|
RU2773346C2 |
| КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ИМИДАЗОЛА В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ АКТИВНОСТИ TNF | 2014 |
|
RU2700004C1 |
| КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ | 2018 |
|
RU2799448C2 |
| КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ПРОИЗВОДНЫЕ БЕНЗИМИДАЗОЛОВ В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ АКТИВНОСТИ TNF | 2014 |
|
RU2689777C1 |
Изобретение относится к соединению формулы (Iа) или его фармацевтически приемлемой соли, которые способны ингибировать никотинамидадениндинуклеотидфосфат оксидазу 4 (Nox4). В формуле (Iа) m равно 0 или 1; n представляет собой целое число от 2 до 5; каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила, C1-C6 алкоксигруппы, гидроксигруппы и галогена; или два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца, вместе с атомами фенильного кольца, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один атом кислорода и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена; каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, гидроксигруппы и галогена; R2 выбирают из C1-C6 алкила, галогена и гидроксигруппы; R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F; любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами; при условии, что соединение не представляет собой N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид, N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-метокси-2,6-диметилбензолсульфонамид, 2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид, 2,4,6-триметил-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамид, N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид, N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2-метилбензол-1-сульфонамид, 2,4-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид, 2-бром-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид, 2-хлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]-6-метилбензол-1-сульфонамид, N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,5-диметилбензол-1-сульфонамид, N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,3,5,6-тетраметилбензол-1-сульфонамид, 2,6-дифтор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензолсульфонамид, 2,6-дибром-4-фтор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензолсульфонамид, 2,3,5,6-тетрафтор-4-метокси-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензолсульфонамид, 2,6-дихлор-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензолсульфонамид или N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,3,4,5,6-пентаметилбензолсульфонамид. Изобретение относится также к фармацевтической композиции, включающей указанное соединение, его применению в производстве лекарственного средства для лечения заболевания, для которого полезно ингибирование активности Nox4, и способу лечения заболевания, для которого полезно ингибирование активности Nox4. 4 н. и 14 з.п. ф-лы, 19 ил., 7 табл., 48 пр.
1. Соединение формулы (Iа)
или его фармацевтически приемлемая соль, в которой
m равно 0 или 1;
n представляет собой целое число от 2 до 5;
каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила, C1-C6 алкоксигруппы, гидроксигруппы и галогена; или два R1, присоединенные к соседним атомам фенильного кольца, вместе с атомами фенильного кольца, к которым они присоединены, могут образовывать 4-6-членное неароматическое кольцо, необязательно содержащее один атом кислорода и необязательно замещенное одной или несколькими группировками, независимо выбранными из C1-C3 алкила и галогена;
каждый R1a независимо выбирают из C1-C6 алкила, гидроксигруппы и галогена;
R2 выбирают из C1-C6 алкила, галогена и гидроксигруппы;
R3, R4, R5 и R6 независимо выбирают из H и F;
любой алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами;
при условии, что соединение не представляет собой:
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид,
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-метокси-2,6-диметилбензолсульфонамид,
2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид,
2,4,6-триметил-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамид,
N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамид,
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2-метилбензол-1-сульфонамид,
2,4-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид,
2-бром-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамид,
2-хлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]-6-метилбензол-1-сульфонамид,
N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,5-диметилбензол-1-сульфонамид,
N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,3,5,6-тетраметилбензол-1-сульфонамид,
2,6-дифтор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензолсульфонамид,
2,6-дибром-4-фтор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензолсульфонамид,
2,3,5,6-тетрафтор-4-метокси-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензолсульфонамид,
2,6-дихлор-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензолсульфонамид или
N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,3,4,5,6-пентаметилбензолсульфонамид.
2. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R2 выбирают из C1-C3 алкила, галогена и гидроксигруппы.
3. Соединение по п. 2 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R2 выбирают из метила, галогена и гидроксигруппы.
4. Соединение по п. 3 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R2 выбирают из метила, хлоро и гидроксигруппы.
5. Соединение по любому из пп. 1-4 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором каждый R1 независимо выбирают из C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила, C1-C6 алкоксигруппы, гидроксигруппы и галогена.
6. Соединение по любому из пп. 1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором каждый R1a независимо выбирают из C1-C3 алкила, гидроксигруппы и галогена.
7. Соединение по п. 6 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором каждый R1a независимо выбирают из метила, гидроксигруппы и галогена.
8. Соединение по любому из пп. 1-7 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором m равно 1.
9. Соединение по п. 8, в котором один R1a представляет собой хлоро, а другой представляет собой хлоро, гидрокси или метил.
10. Соединение по п. 9, в котором один R1a представляет собой хлоро, а другой представляет собой хлоро или метил.
11. Соединение по любому из пп. 1-10 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором n равно 3.
12. Соединение по любому из пп. 1-11 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором соединение представлено формулой (If)
,
в которой R1, каждый R1a, R2, R3, R4, R5 и R6 являются такими, как определено в любом из пп. 1-7, 9 или 10.
13. Соединение по п. 12 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R1 представляет собой бромо и каждый R1a представляет собой хлоро.
14. Соединение по п. 1, выбранное из:
N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,2,4,6,7-пентаметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-сульфонамида;
4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
N-[2-(2-хлорфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида;
N-[2-(2-бромфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида;
4-бром-2-хлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
N-[2-(2-хлорфенил)этил]-2,2,4,6,7-пентаметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-сульфонамида;
2,4,6-триметил-N-{2-[2-(трифторметил)фенил]этил}бензол-1-сульфонамида;
2-хлор-6-метил-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
2-хлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]-6-метилбензол-1-сульфонамида;
2-хлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
2-хлор-6-метил-N-{2-[2-(трифторметил)фенил]этил}бензол-1-сульфонамида;
4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
2,4-дихлор-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
4-бром-2,6-дихлор-N-{2-[2-(трифторметил)фенил]этил}бензол-1-сульфонамида;
4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
2,6-дихлор-N-{2-[2-(трифторметил)фенил]этил}бензол-1-сульфонамида;
2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
2,6-дихлор-4-циклопропил-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]-4-циклопропилбензол-1-сульфонамида;
2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)этил]-4-(трифторметил)бензол-1-сульфонамида;
N-[2,2-дифтор-2-(2-метилфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида;
4-бром-2,6-дихлор-N-[2,2-дифтор-2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
N-[2-(2-хлорфенил)-2,2-дифторэтил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида;
4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-хлорфенил)-2,2-дифторэтил]бензол-1-сульфонамида;
N-[2-(2-хлорфенил)этил]-2,6-диметил-4-(пропан-2-ил)бензол-1-сульфонамида;
2,6-диметил-N-[2-(2-метилфенил)этил]-4-(пропан-2-ил)бензол-1-сульфонамида;
N-[2-фтор-2-(2-метилфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида;
4-бром-2,6-дихлор-N-[2-фтор-2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
N-[2-фтор-2-(2-метилфенил)этил]-2,6-диметил-4-(пропан-2-ил)бензол-1-сульфонамида;
4-бром-2,6-дихлор-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]бензолсульфонамида;
2,6-дихлор-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-(трифторметил)бензолсульфонамида;
2,6-дихлор-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]бензолсульфонамида;
2,4-дихлор-6-гидрокси-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]бензолсульфонамида;
2,4-дихлор-6-гидрокси-N-[2-(o-толил)этил]бензолсульфонамида;
6-хлор-3-гидрокси-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,4-диметил-бензолсульфонамида;
N-[2-(2-хлорфенил)этил]-4-метокси-2,6-диметил-бензолсульфонамида и
4-гидрокси-N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,6-диметил-бензолсульфонамида;
или его фармацевтически приемлемая соль.
15. Фармацевтическая композиция для ингибирования никотинамидадениндинуклеотидфосфат оксидазы 4 (Nox4), включающая соединение по любому из пп. 1-14 или соединение, выбранное из:
N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида;
2,4,6-триметил-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида и
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-метокси-2,6-диметилбензолсульфонамида,
или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
16. Соединение по любому из пп. 1-14 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении заболеваний, для которых полезно ингибирование активности Nox4, выбранных из:
эндокринных заболеваний, выбранных из диабета 1 типа и диабета 2 типа;
сердечно-сосудистых заболеваний, выбранных из атеросклероза, гипертензии, эндотелиальной дисфункции, сердечной недостаточности, включая застойную сердечную недостаточность, ишемического инсульта, инфаркта миокарда, образования атеросклеротических бляшек, агрегации тромбоцитов, стенокардии, аневризмы, расслоения аорты, ишемической болезни сердца, гипертрофии сердца и повреждений, вызванных ишемией путем восстановления кровотока или доставки кислорода;
респираторных заболеваний, выбранных из бронхиальной астмы, аллергического ринита, респираторного дистресс-синдрома взрослых, легочной артериальной гипертензии, идиопатического легочного фиброза и острого повреждения легких;
нарушений обмена веществ, выбранных из метаболического синдрома и ожирения;
заболеваний костей, выбранных из остеопороза и пародонтита;
нейродегенеративных заболеваний, выбранных из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Хантингтона и бокового амиотрофического склероза;
заболеваний почек, выбранных из диабетической нефропатии, почечной недостаточности, нефротоксичности аминогликозидов и соединений платины и гиперактивного мочевого пузыря;
нарушений репродуктивной системы, выбранных из гипертрофии предстательной железы;
заболеваний, поражающих глаз;
заболеваний, поражающих хрусталик;
воспалительных заболеваний, выбранных из сепсиса, септического шока, внутримозгового кровоизлияния и остеоартрита;
заболеваний печени, выбранных из фиброза печени, стеатоза и неалкогольного стеатогепатита;
боли, выбранной из гипералгезии, связанной с воспалительной болью; и
раков, выбранных из глиобластомы, карциномы толстой кишки, рака поджелудочной железы, рака молочной железы, рака яичников, рака почки, рака предстательной железы, плоскоклеточного рака, рака легких и рака мочевого пузыря.
17. Применение соединения по любому из пп. 1-14 или соединения, выбранного из:
N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида;
2,4,6-триметил-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида и
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-метокси-2,6-диметилбензолсульфонамида,
или его фармацевтически приемлемой соли в производстве лекарственного средства для лечения заболевания, для которого полезно ингибирование активности Nox4, выбранного из:
эндокринных заболеваний, выбранных из диабета 1 типа и диабета 2 типа;
сердечно-сосудистых заболеваний, выбранных из атеросклероза, гипертензии, эндотелиальной дисфункции, сердечной недостаточности, включая застойную сердечную недостаточность, ишемического инсульта, инфаркта миокарда, образования атеросклеротических бляшек, агрегации тромбоцитов, стенокардии, аневризмы, расслоения аорты, ишемической болезни сердца, гипертрофии сердца и повреждений, вызванных ишемией путем восстановления кровотока или доставки кислорода;
респираторных заболеваний, выбранных из бронхиальной астмы, аллергического ринита, респираторного дистресс-синдрома взрослых, легочной артериальной гипертензии, идиопатического легочного фиброза и острого повреждения легких;
нарушений обмена веществ, выбранных из метаболического синдрома и ожирения;
заболеваний костей, выбранных из остеопороза и пародонтита;
нейродегенеративных заболеваний, выбранных из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Хантингтона и бокового амиотрофического склероза;
заболеваний почек, выбранных из диабетической нефропатии, почечной недостаточности, нефротоксичности аминогликозидов и соединений платины и гиперактивного мочевого пузыря;
нарушений репродуктивной системы, выбранных из гипертрофии предстательной железы;
заболеваний, поражающих глаз;
заболеваний, поражающих хрусталик;
воспалительных заболеваний, выбранных из сепсиса, септического шока, внутримозгового кровоизлияния и остеоартрита;
заболеваний печени, выбранных из фиброза печени, стеатоза и неалкогольного стеатогепатита;
боли, выбранной из гипералгезии, связанной с воспалительной болью; и
раков, выбранных из глиобластомы, карциномы толстой кишки, рака поджелудочной железы, рака молочной железы, рака яичников, рака почки, рака предстательной железы, плоскоклеточного рака, рака легких и рака мочевого пузыря.
18. Способ лечения заболевания, для которого полезно ингибирование активности Nox4, выбранного из:
эндокринных заболеваний, выбранных из диабета 1 типа и диабета 2 типа;
сердечно-сосудистых заболеваний, выбранных из атеросклероза, гипертензии, эндотелиальной дисфункции, сердечной недостаточности, включая застойную сердечную недостаточность, ишемического инсульта, инфаркта миокарда, образования атеросклеротических бляшек, агрегации тромбоцитов, стенокардии, аневризмы, расслоения аорты, ишемической болезни сердца, гипертрофии сердца и повреждений, вызванных ишемией путем восстановления кровотока или доставки кислорода;
респираторных заболеваний, выбранных из бронхиальной астмы, аллергического ринита, респираторного дистресс-синдрома взрослых, легочной артериальной гипертензии, идиопатического легочного фиброза и острого повреждения легких;
нарушений обмена веществ, выбранных из метаболического синдрома и ожирения;
заболеваний костей, выбранных из остеопороза и пародонтита;
нейродегенеративных заболеваний, выбранных из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Хантингтона и бокового амиотрофического склероза;
заболеваний почек, выбранных из диабетической нефропатии, почечной недостаточности, нефротоксичности аминогликозидов и соединений платины и гиперактивного мочевого пузыря;
нарушений репродуктивной системы, выбранных из гипертрофии предстательной железы;
заболеваний, поражающих глаз;
заболеваний, поражающих хрусталик;
воспалительных заболеваний, выбранных из сепсиса, септического шока, внутримозгового кровоизлияния и остеоартрита;
заболеваний печени, выбранных из фиброза печени, стеатоза и неалкогольного стеатогепатита;
боли, выбранной из гипералгезии, связанной с воспалительной болью; и
раков, выбранных из глиобластомы, карциномы толстой кишки, рака поджелудочной железы, рака молочной железы, рака яичников, рака почки, рака предстательной железы, плоскоклеточного рака, рака легких и рака мочевого пузыря;
путем введения терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-14 или соединения, выбранного из:
N-[2-(2-фторфенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида;
2,4,6-триметил-N-[2-(2-метилфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
2,6-дихлор-N-[2-(2-фторфенил)этил]бензол-1-сульфонамида;
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-2,4,6-триметилбензол-1-сульфонамида и
N-[2-(2-гидроксифенил)этил]-4-метокси-2,6-диметилбензолсульфонамида,
или его фармацевтически приемлемой соли млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении.
| Станок для изготовления деревянных ниточных катушек из цилиндрических, снабженных осевым отверстием, заготовок | 1923 |
|
SU2008A1 |
| I.-J | |||
| KANG ET AL., Synthesis of ethyl 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-1-carboxylates by Pictet-Spengler condensation using phenyliodine(III) bis(trifluoroacetate), HETEROCYCLES, 2002, vol | |||
| Способ получения на волокне оливково-зеленой окраски путем образования никелевого лака азокрасителя | 1920 |
|
SU57A1 |
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| J.-J | |||
| LI ET AL, Synthesis of Indolines and Tetrahydroisoquinolines from Arylethylamines by Pd(II)-Catalyzed | |||
