Инструмент для выделения ооцит-кумулюсных комплексов из яичников млекопитающих Российский патент 2024 года по МПК A61D1/00 

Изобретение относится к сельскохозяйственной биологии, ветеринарной медицине, биотехнологии, гистологии, эмбриологии.

Известно устройство для забора яйцеклеток из яичников млекопитающих [Германия. Gluth J. et al., DE 285020, A61D 1/00], состоящее из корпуса, внутри которого установлены конусообразные, разделенные каждый на две части подвижный и неподвижный держатели ножей. В держателях ножей на возможно меньшем расстоянии сделаны пазы, в которые установлены специальные ножи. Предусмотрена особая заточка ножей для предотвращения их быстрого затупления, связанного с разрезанием белочной оболочки и ткани яичника. С помощью особого толкателя яичник проталкивается по внутреннему каналу устройства. При этом овариальная ткань разрезается, фолликулы вскрываются, и ооциты высвобождаются из фолликулов.

Недостатком данного устройства является то, что его изготовление возможно только в заводских условиях на специальном оборудовании, трудоемко при подготовке к работе, стерилизации, разборке и мытье после работы.

Существует устройство для выделения ооцитов млекопитающих [RU 2071294, A61D 19/00] изготавливается из лезвия безопасной бритвы марки «Восход», «Рапира» с помощью ножниц, а также может готовиться специально промышленным способом. Вначале лезвие ножницами разрезают по его осевым линиям на 4 равные части. Каждую из полученных 4 частей подрезают ножницами таким образом, чтобы на их торцевых краях получилось по одному выступу с закругленными краями длиной 4,5-5 мм, шириной 1,5-2 мм, расположенному параллельно режущей кромке бритвы. Таким образом, из одной бритвы получается четыре устройства для выделения ооцитов, каждое из которых имеет по две рабочие стороны. При этом режущая часть образуется за счет режущей кромки бритвы. Устройство работает следующим образом. Устройство перед работой протирают тампоном, смоченным 70°-ным этиловым спиртом для очистки его поверхности и дезинфекции. В качестве ручки используют какой-либо хирургический зажим (например, кровоостанавливающий зажим, пинцет Пеана, иглодержатель и т.д.). Яичник крупного рогатого скота помещают в чашку Петри со средой. Кончиком режущей кромки устройства разрезают стенку выбранного антрального фолликула, выступающую над поверхностью яичника. Затем с помощью выступа устройства одним движением выскребают внутренние стенки вскрытого фолликула. При этом ооцит с неповрежденным кумулюсом высвобождается из фолликула в среду. Таким образом, с помощью разработанного устройства в зависимости от задач эксперимента выделяются ооциты из всех видимых на поверхности яичника антральных фолликулов или дифференцированно из фолликулов заданного размера.

Недостатками данного устройства является:

Выделение ооцит кумулюсных комплексов возможно провести только из антральных фолликулов, выступающих над поверхностью яичника

Не представляется возможным получить ооцит кумулюсные комплексы из фолликулов диаметром 2 мм и меньше, а также из более глубокого мозгового слоя яичника

Использование единичного лезвия делает процесс получения ооцитов более длительным и трудоемким

Наиболее близким по технической сущности к заявленному является устройство, представляющее собой единичное лезвие безопасной бритвы [Михайленко А.В. и др. "Биологические науки", 1983, 9, 57-62]. Ткань яичника многократно рассекается лезвием безопасной бритвы. При этом антральные фолликулы вскрываются, и ооциты высвобождаются из них. Устройство позволяет выделить большое количество ооцитов в расчете на 1 яичник.

Недостатком является невозможность выделить ооциты дифференцированно из фолликулов определенного размера или определенного местоположения (на поверхности яичника или в его мозговом слое). Вследствие этого популяция выделенных ооцитов оказывается очень гетерогенной по качеству. Кроме того, лезвие бритвы быстро тупится в процессе работы.

Задача изобретения - быстро и эффективно выделять ОКК из овариальных фолликулов разного диаметра не повреждая слой кумулюсных клеток.

Поставленная задача решается за счет того, что в инструменте используется от 2 до 6 пластин, выполненных в виде 1/2 части лезвия, с возможностью регулирования расстояния между ними, а, следовательно, и интервала между разрезами от 0,1 мм до 0,5 мм за счет толщины фольгированной прокладки, а глубину разреза от 5 мм до 7 мм за счет ширины этой прокладки.

Новые существенные признаки:

Используется от 2 до 6 пластин, выполненных в виде 1/2 части лезвия с возможностью регулирования расстояния между ними.

Толщиной фольгированной прокладки определяется интервал между разрезами в процессе овариальной резекции.

Шириной фольгированной прокладки определяется глубина разреза кортикального слоя в процессе овариальной резекции.

Перечисленные новые существенные признаки, в совокупности с известными позволяют получить технический результат во всех случаях, на которые распространяется объем правовой охраны.

Технический результат

Технический результат достигается за счет того, что при применении инструмента с множественной режущей поверхностью, процесс резекции проходит быстро и более эффективно, так как рассекается весь кортикальный слой с минимальным интервалом между разрезами, а, следовательно, вскрываются все имеющиеся фолликулы. Таким образом, получаем значимо большее количество ОКК при низких затратах труда, времени и финансов.

На фиг.1 изображена схема сборки устройства для выделения ооцит-кумулюсных комплексов из овариальной ткани (яичников) млекопитающих.

На фиг.2 представлена схема выделения ооцит - кумулюсных комплексов из яичников млекопитающих методом овариальной резекции с использованием инструмента.

Предлагаемый инструмент изготовлен из лезвия безопасной бритвы марки «Спутник» 1, алюминиевой пищевой фольги и фиксируется держателем, в качестве которого может использоваться анатомический зажим или корнцанг. Вначале лезвие разламывают или разрезают ножницами по его продольной осевой линии 2 на две равные части. Каждую из полученных частей 3 складывают параллельно через фольгированные прокладки 4, сделанные из пищевой алюминиевой фольги, сложенной в несколько слоев, и фиксируют режущую конструкцию удерживающим инструментом 5, например, корцангом. Количество слоев фольги определяет толщину прокладки 4, а, следовательно, интервал между разрезами коркового слоя яичника, а шириной прокладки можно регулировать глубину разреза овариального коркового слоя (фиг.1).

Перед работой инструмент в собранном виде 6 стерилизуют автоклавированием или сухожаровым методом стерилизации (фиг.2). Яичник 7 помещают в чашку Петри 8 с промывочной средой 12, фиксируют яичник 7, прижимая его хирургическим пинцетом 9 ко дну чашки Петри 8. Многолезвийной режущей кромкой 10 инструмента разрезают поверхность коркового слоя яичника 7 на глубину 5-7 мм, вскрывая овариальные фолликулы 11 разного диаметра. В результате рассечения фолликулярной стенки ооцит-кумулюсный комплекс высвобождается из фолликула 11 в промывочную среду 12. Таким образом, с помощью данного инструмента в зависимости от задач эксперимента выделяются ОКК из всех антральных фолликулов 11 на поверхности яичника 7, а также из фолликулов, расположенных в более глубоких слоях кортикального и мозгового слоя. После овариальной резекции яичник промывают в 3-х чашках Петри с промывочной средой 12, после чего исследуют содержимое чашек с применением бинокулярной лупы, с целью визуализации ОКК (фиг.2).

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к инструменту для выделения ооцит-кумулюсных комплексов из яичников млекопитающих. Инструмент для выделения ооцит-кумулюсных комплексов из яичников млекопитающих состоит из металлической пластины в виде лезвия безопасной бритвы, и содержит от 2 до 6 металлических пластин, выполненных в виде 1/2 части лезвия безопасной бритвы, сложенных параллельно друг другу и зафиксированных держателем в виде анатомического зажима или корнцанга. Между пластинами проложены фольгированные прокладки, выполненные с толщиной, обеспечивающей зазор между пластинами и интервал между разрезами коркового слоя яичника от 0,1 мм до 0,5 мм, и шириной, обеспечивающей глубину разреза коркового слоя яичника от 5 мм до 7 мм. Использование изобретения позволяет обеспечить быстрое и эффективное выделение ооцит-кумулюсных комплексов из овариальных фолликулов разного диаметра, не повреждая слой кумулюсных клеток. 2 ил.

Инструмент для выделения ооцит-кумулюсных комплексов из яичников млекопитающих, состоящий из металлической пластины в виде лезвия безопасной бритвы, отличающийся тем, что содержит от 2 до 6 металлических пластин, выполненных в виде 1/2 части лезвия безопасной бритвы, сложенных параллельно друг другу и зафиксированных держателем в виде анатомического зажима или корнцанга, причем между пластинами проложены фольгированные прокладки, выполненные с толщиной, обеспечивающей зазор между пластинами и интервал между разрезами коркового слоя яичника от 0,1 мм до 0,5 мм, и шириной, обеспечивающей глубину разреза коркового слоя яичника от 5 мм до 7 мм.