ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ СТЕРИЛЬНОЙ ЭМУЛЬСИИ ПЕРФТОРОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ И ПОЛИЭЛЕКТРОЛИТОВ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2024 года по МПК A61K9/107 A61K31/02 A61K31/685 A61K31/728 A61K31/785 A61P7/08 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, в частности к лекарственным препаратам, а именно к кровезаменителям в форме эмульсии на основе перфторорганических соединений и полиэлектролитов, а также к способам их получения.

Уровень техники

Кровезаменители или иначе плазмозаменители представляют собой растворы веществ органического или неорганического происхождения, используемые для возмещения кровопотерь или коррекции патологий крови человека. Одним из видов кровезаменителей являются кровезаменители с функцией переноса кислорода. Традиционно в качестве основного компонента стерильных газотранспортных кровезаменителей используются химически инертные перфторорганические соединения (ПФОС) и их перфторуглеродные эмульсии (эмульсии ПФОС) или их основу составляют модифицированные гемоглобины, производимые из высокоочищенного гемоглобина человека (или крупного рогатого скота), химически или методами генной инженерии - видоизмененного рекомбинантного модифицированного гемоглобина. Молекулы гемоглобина могут быть инкапсулированы в липосомы совместно с другими молекулами. Сложность использования модифицированных гемоглобинов связано с получением и очисткой гемоглобина из донорской крови, а также с индивидуальной непереносимостью, отторжением и прочими побочными иммунными реакциями, следовательно, более перспективными газотранспортными кровезаменителями считаются перфторуглеродные эмульсии.

Наиболее распространенные технологии получения пер фтору глеродных эмульсий - основных компонентов стерильных газотранспортных кровезаменителей - основаны на методах, использующих ультразвуковую кавитацию или гомогенизацию под высоким давлением. Для получения ПФОС в промышленных масштабах предпочтительна гомогенизация под высоким давлением, поскольку она позволяет получать эмульсии в больших количествах и с лучшими физико-химическими характеристиками, например, улучшенным распределением частиц по размеру.

При получении перфторорганических эмульсий используют одновременно несколько типов жидких ПФОС - перфторуглеродов (удельной плотности около 1,872-1,945 г/мл) и их наноэмульсии. Для создания стабильных эмульсий ПФОС используют перфторуглероды из группы С₈-С₁₀, содержащих, например, перфтордекалин (ПФД, CAS №306-94-5) C₁₀F₁₈ или перфтортрипропиламин (ПФТПА, CAS №338-83-0) C₉F₂₁N, или перфтороктилбромид (ПФОБ, CAS №423-55-2) C₈F₁₇Br, и - из группы С₁₁-С₁₂, содержащей, например, перфтор-N-(4-метилциклогексил) пиперидина (ПФМЦП, CAS №86630-50-4) C₁₂F₂₃N или перфтортрибутиламин (ПФТБА, CAS №311-89-7) C₁₂F₂₇N. Данные перфторуглероды растворяют около 40-45 об. % кислорода (при рО₂=760 мм рт.ст.) и 150-190 об. % углекислого газа (при рСО₂=760 мм рт.ст.), вследствие чего, их начали использовать в качестве главного компонента-газоносителя при создании газотранспортных кровезаменителей.

Однако, перфторуглероды не растворимы в воде и в других жидкостях, поэтому их можно использовать только в виде эмульсий с определенным размером перфторуглеродных частиц, покрытых слоем эмульгаторов, одного или нескольких, выбранных из следующего списка, но не ограничивая тем самым свой выбор: фосфолипиды природного сырья (лецитин яичного желтка, сои, фосфатидилхолин и др.), полоксамеры, эфиры сахарозы с жирными кислотами, эфиры глицерола с жирными кислотами, соевых бобов масло очищенное, триглицериды среднецепочечные, оливковое масло очищенное, рыбий жир очищенный, глицерол (безводный), омега 3 жирные кислоты, омега 6 жирные кислоты, омега 9 жирные кислоты, альфа-токоферол, аскорбилпальмитат, солей калия и натрия жирных кислот (пальмитата, олеата и др.). Чем меньше по размеру частица эмульсии, тем лучше, так как эмульсия очень хорошо проникают через гидрофобные биологические барьеры, к примеру, через кожу (трансдермально) или клеточные мембраны и доставляют кислород и другие питательные вещества (биологически активные соединения), растворенные или адсорбированные на гидрофобной поверхности или в объеме наночастицы эмульсии пер фтору глеродов.

Перфторсоединения первого типа (C₈-С₁₀) быстро выводятся из организма (в течение месяца), но не обеспечивают достаточной стабильности эмульсий, соединения же второго типа (С₁₁-С₁₂), напротив, придают эмульсии высокую стабильность, позволяющую хранить ее без замораживания, но они в течение нескольких лет не выводятся из организма, поэтому выбор соотношения между быстро выводящимися и медленно выводящимися перфторуглеродами, влияющими на стабильность, распределение среднего размера частиц в их эмульсиях, влияющих на количество побочных реакций и на седиментационную и агрегативную стабильность остаются важнейшими факторами при создании пер фтору глеродных эмульсий для газотранспортных кровезаменителей биомедицинского назначения.

Из уровня техники известны некоторые составы ПФОС и способы получения их эмульсий.

Из авторского свидетельства СССР SU 797546 (дата приоритета: 02.02.1977 г.) известен способ получения перфторуглеродных эмульсий, использующих, например, перфтордекалин (ПФД) и перфтортрипропиламин (ПФТПА), эмульгирующие агенты, например, блок- сополимер окиси этилена и пропилена (плюроник F-68, российский аналог - проксанол-268), фосфолипиды яичного желтка или соевые фосфолипиды и воду. В соответствии с этим способом, концентрация перфторуглеродов составляет 24 мас. % в физиологически приемлемой водной среде. К недостаткам данного изобретения следует отнести то, что пер фтору глеродная эмульсия получается при данном способе достаточно долго (12 циклов эмульгации), низко концентрированной (не выше 24 мас. %), не может храниться в размороженном виде и эмульсию невозможно стерилизовать.

В способе получения перфторуглеродной 20 мас. % эмульсии, приготовленной для медицинских целей на основе ПФД и ПФТПА - Fluosol-DA 20%, японской фирмы Грин Кросс.

(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Fluosol-DA#section=Chemical-Co-Qccurrences-in-Literature дата обращения: 05.12.2022 г.), в качестве эмульгатора использовался плюроник F-68 и фосфолипиды яичного желтка. Однако способ не позволил создать эмульсии с мелкодисперсным составом, средний диаметр частиц в составе данной эмульсии, был также крупный (200 нм), в связи с тем, что при высоких температурах в процессе эмульгирования и пастеризации происходит укрупнение частиц эмульсии. Кроме того, частицы, использованных в составе эмульсии перфторуглеродов (средний размер 0,118 мкм, доля частиц размером от 0,2 до 0,5 мкм составляла 7,8%) достаточно быстро укрупняются даже при комнатной температуре (Mitsuno Т. et al., 1981). Данная эмульсия хранится только в замороженном виде, т.к. после 8-12 часов хранения при комнатной температуре происходит укрупнение частиц эмульсии и, в связи с этим, становится невозможным ее клиническое применение. Кроме этого, к недостаткам данного изобретения следует отнести наличие тяжелых побочных реакций из-за крупных частиц и не стабильность эмульсии.

Таким образом, улучшение способа получения пер фтору глеродной газотранспортной эмульсии является объективной необходимостью.

Также известен способ получения перфторуглеродной эмульсии -газотранспортного гемокорректора (патент РФ RU2122404, дата приоритета: 16.12.1997 г.) на основе высокоочищенных перфтордекалин, перфтор-N-(4-метилциклогексил) пиперидина, перфтороктилбромид, перфтортрибутиламин, эмульгируемые проксанолом-268, со средним размером частиц 30-50 нм. Однако имеются некоторые недостатки, а именно длительность получения перфторуглеродной эмульсии.

Известен способ получения перфторуглеродной эмульсии газотранспортного кровезаменителя на основе бинарной смеси высоко очищенных перфтордекалина и перфтор-N-(4-метилциклогексил) пиперидина (патент РФ RU2200582, дата приоритета: 02.04.2001 г.) концентрации ПФОС 1-40 мас. %, эмульгируемые 0,2-8 мас % проксанолом-268 до среднего размера частиц 25 нм. Однако имеются некоторые недостатки по стабильности эмульсии, длительности ее получения.

Известен способ получения перфторуглеродной эмульсии газотранспортного кровезаменителя (патент РФ RU 2206319, дата приоритета: 20.07.2000 г.) на основе бинарной смеси перфторуглеродов с примесями быстро и медленно выводящихся ПФОС: перфтордекалина и перфтор-]\Г-(4-метилциклогексил) пиперидина. Общая концентрацией перфторуглеродов с примесями в эмульсии в предпочтительном варианте составляет около 19,21 мас. %, например, в сравнении с известной эмульсией перфторана, где концентрация перфторуглеродов составляет 19,5 мас. %. Основной быстро выводящийся перфторуглерод в виде смеси цис- и транс-изомеров перфтордекалина в количестве 6 об. %; примеси быстро выводящихся перфторуглеродов, представляющих собой смесь перфторметилиндана, перфтор-1-метил-3-пропилциклогексана, транс-перфториндана, перфтор-4-оксодекалина, перфторбутилциклогексана, перфторпропилциклогексана, перфторэтилцикло-гексана, перфтор бутилциклопентана, цис-перфтор-1-метил-2-этилциклогесана в количестве 0,7 об.. В итоге получается общее количество ПФД (удельной плотности 1,917 г/ см3) составляет 12,84 грамм с примесями, что меньше, например, в сравнении с известной эмульсией перфторана, где ПФД составляет 13 грамм. Другой перфторуглерод, можно предположить, что ПФМЦП, состоящий из медленно выводящегося перфтортретичного амина в виде смеси изомеров перфтор-N-4-(метилциклогексил)-пиперидина в количестве 2,3 об. %; примеси перфтортретичных аминов, представляющих собой смесь перфтор-N-(4-метилциклогексил)-2- метилпирролидина, перфторметил-(4-метилциклогексил)-амина, цис- и трансизомеров перфторметилпропил-(4-метилциклогексил)-амина, смесь изомеров перфторметилпропил-(метилциклопентил)-амина и перфтор-N-(4-метилциклогексил)-1-метилпиперидин всего в количестве 1,0 об. %; Н-перфторалканы в количестве 0,02 об. %. В итоге получается общее количество ПФМЦП (удельной плотности 1,92 г/см3) составляет 6,37 граммов с примесями, что меньше, например, в сравнении с известной эмульсией перфторана, где ПФМЦП составляет 6,5 грамм. Бинарная смесь перфторуглеродов эмульгируется Проксанолом-168 сополимером полноксиэтилена-полиоксипропилена с мол. мае. 8 тыс. Да, до среднего уровня частиц эмульсии 50 нм. Недостатками данного изобретения является то, что в указанном составе используется проксанол-168, вместо лучшего эмульгатора проксанола-268, также примеси, что недопустимо с точки зрения биомедицинского применения, поскольку примеси значительно влияют на токсичность эмульсии и как следствие, не могут применяться в клинической практике. Примеси быстро и медленно выводящихся ПФОС, таких как: перфтордекалин и перфторметилциклогексилпиперидин. Необходимо отметить, что во всех остальных рассмотренных выше патентах, используется бинарная смесь высоко очищенных ПФД и ПФМЦП. К недостаткам также можно отнести длительность получения перфторуглеродной эмульсии.

Известен способ получения перфторуглеродной эмульсии -газотранспортного кровезаменителя (патент РФ RU 2557933, дата приоритета: 27.03.2014 г.), где используются смеси перфтордекалина (ПФД), перфтороктилбромида (ПФОБ), перфтортрипропиламина (ПФТПА), перфторметилциклогексил-пиперидина (ПФМЦП), перфтортрибутиламина (ПФТБА). Смеси указанных перфторуглеродов эмульгируются 10-30 мас. % поверхностно-активными веществами, в том числе проксанолом-268 до среднего размера частиц не более 150 нм, к готовой эмульсии добавляются электролиты. К недостаткам данного технического решения также относятся длительность и трудоемкость технологии получения эмульсии ПФОС.

Известен способ получения перфторуглеродной эмульсии газотранспортного кровезаменителя на основе бинарной смеси высоко очищенных перфтордекалина и перфторметилциклогексилпиперидина (патент РФ RU2307647, дата приоритета: 16.12.2004 г.) концентрации ПФОС 0,5-50 об. %, эмульгируемые проксанолом-268 до среднего размера частиц 50-100 нм. Однако имеются некоторые недостатки, а именно длительный и нетехнологичный процесс приготовления эмульсии, а также при описанном способе получения перфторуглеродных эмульсий происходит увеличение температурного режима эмульгации до +60°С в емкостях и в самих контурах гомогенизатора (экструзионных устройствах), в связи с увеличением температуры происходит укрупнение частиц эмульсии до 150-200 нм, что не допустимо для медикобиологических целей.

В патенте РФ RU 2329788 (дата приоритета: 29.09.2006 г.) раскрыт способ получения перфторуглеродной эмульсии - газотранспортного гемокорректора с концентрацией ПФОС 20 мас. %, перфторуглеродов эмульгируемых проксанолом-268. Весь процесс приготовления эмульсии проводят по меньшей мере в двух экструзионных устройствах высокого давления, пропуская эмульсию последовательно через основное и дополнительное экструзионные устройства. Однако имеются некоторые недостатки по времени эмульгации, стабильности эмульсии и среднему размеру частиц.

Из патента РФ RU 2200544 (дата приоритета: 29.06.2001 г ) известен способ получения перфторуглеродной эмульсии - газотранспортного кровезаменителя концентрации ПФОС 1-40 мас. %, эмульгируемые 0,2-8 мас. % проксанолом-268 до среднего размера частиц 25 нм. Способ, в котором за счет 9-кратной (циклов) эмульгации и струйного пропускания многокомпонентной смеси перфторуглеродов, состоящей из смеси двух, трех, четырех, пяти перфторуглеродов через раствор проксанола-268 через один рабочий контур гомогенизатора получают 40 мас. % эмульсию ПФОС.К недостаткам можно отнести длительность получения перфторуглеродной эмульсии. Длительность получения ПФОС эмульсии приводит к длительному нахождению оператора в стерильном боксе и возможной контаминации (осеменению колоний образующими микроорганизмами) эмульсии.

Известен способ получения перфторуглеродной эмульсии газотранспортного гемокорректора патент РФ RU2308939 (дата приоритета: 05.11.2004 г.). Концентрации ПФОС 1-40 мас. %), перфторуглероды эмульгируемые проксанолом-268 концентрации 0,2-8 мас. % до среднего размера частиц 25-30 нм. Способ, в котором за счет многократной эмульгации и струйно-капельного пропускания многокомпонентной смеси перфторуглеродов, состоящей из смеси нескольких перфторуглеродов, через раствор проксанола-268 получают 40 мас. % эмульсию с помощью двух экструзионных устройств на одном гомогенизаторе. К недостаткам можно отнести длительность получения перфторуглеродной эмульсии.

Известен способ получения перфторуглеродной эмульсии газотранспортного гемокорректора патент РФ RU2415664 (дата приоритета: 11.02.2009 г.). В предпочтительном варианте с концентрацией ПФОС 19,5-20 мас. %, эмульгируемые 44,2 мас. %) проксанолом-268 до среднего размера частиц 30-120 нм. Способ, в котором за счет многократной эмульгации и струйно-капельного пропускания многокомпонентной смеси перфторуглеродов, состоящей из смеси нескольких перфторуглеродов, через раствор проксанола-268 эмульсию с помощью двух гомогенизаторов высокого давления с четырьмя экструзионными устройствами с двумя буферными емкостями для выравнивания давления между экструзионными устройствами. К недостаткам можно отнести длительность получения перфторуглеродной эмульсии.

В патенте РФ RU 2775474 (дата приоритета: 30.04.2021 г.) описана технология получения ПФОС эмульсии с 4-5 циклами гомогенизации, что также ведет к удлинению технологического процесса и ухудшению качества получаемой эмульсии.

Патент РФ RU 2745290 (дата приоритета: 12.04.2019 г.) раскрывает способ получения ПФОС эмульсии при высоком давлении и температуре, что нежелательно из-за укрупнения размера частиц эмульсии.

Прототипом предлагаемого технического решения является бинарная эмульсия ПФОС, раскрытая в патенте RU 2070033, дата приоритета: 28.11.1994 г. Эта эмульсия содержит перфторуглерод в форме цис- и трансизомеров перфтордекалина и пер фторированный третичный амин перфтор-N-(4-метилциклогексил)пиперидин в концентрациях обоих компонентов: 7 об. % и 3,5 об. % соответственно, и стабилизируется сополимером полиоксиэтилена-полиоксипропилена с молекулярной массой 6-8 тыс. дальтон (Да). Способ получения перфторуглеродных эмульсий, в котором имеются высокоочищенные перфтордекалин и перфтор-N-(4-метилциклогексил) пиперидина концентрации ПФОС 20-40 мас. %, со средним размером частиц 100-150 нм. Однако способ имеет ряд недостатков, а именно длительный и нетехнологичный процесс приготовления эмульсии, т.к. эмульгация проходит в 3-х емкостях, при попеременном давлении, за счет повышения давления в гомогенизаторе в 1,1-1,2 раза при прохождении эмульсии в дополнительной емкости по сравнению с давлением при прохождении эмульсии в основных контурах. В эмульсии, приготовленной по данному способу, присутствуют крупнодисперсные частицы с диаметром свыше 0,2 до 0,4 мкм, что может увеличить количество побочных реакций, а также ее нестабильность при хранении.

Таким образом, разработка более технологичного, экономичного процесса получения стабильной перфторуглеродной эмульсии является объективной необходимостью.

Техническая проблема, решение которой обеспечивается при осуществлении или использовании заявляемого технического решения, и которая не могла быть решена при осуществлении или использовании аналогов, заключается в необходимости расширения арсенала стабильных фармацевтических композиций препаратов кровезаменителей на основе ПФОС в лекарственной форме эмульсии и разработке способа их получения, исключающего недостатки аналогов.

Раскрытие изобретения

Разработка лекарственных препаратов в форме эмульсии и способов их получения является достаточно сложной технологической задачей, поскольку эмульсии термодинамически неустойчивые системы.

Техническая проблема была решена разработкой стабильной эмульсии перфторорганических соединений и полиэлектролитов и способа ее получения.

Предлагаемую фармацевтическую эмульсию ПФОС получают в асептических условиях, путем высокоскоростного диспергирования с последующей гомогенизацией двух фаз, предварительно прошедших стерилизующую фильтрацию - фазы жидкой смеси перфторорганических соединений (ПФОС) с плотностью от 1,872 до 1,945 г/мл, при соотношении быстро выводящегося ПФОС (С₈-С₁₀) к медленно выводящемуся ПФОС (С₁₁-C₁₂) от 1:1 до 1:4, и водной фазы - раствора одного или нескольких эмульгаторов суммарно - не более 270 г/л, с добавлением одного или нескольких полиэлектролитов суммарно - не более 3 г/л. Гомогенизацию полученной дисперсии проводят пропусканием через гомогенизатор высокого давления с одной камерой гомогенизации при давлении до 120 МПа, пропуская эмульсию перфторуглеродов последовательно через гомогенизатор в буферную накопительную емкость, затем, возвращая эмульсию в первоначальный реактор с высокоскоростным диспергатором и повторяют первоначальную последовательность операций от 4 до 15 раз, контролируя после каждого цикла распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции до получения частиц эмульсии перфторуглеродов наноразмерного диаметра в диапазоне 30-150 нм. Полученную эмульсию разбавляют водным раствором с добавлением или без противомакроиона, а также с добавлением или без электролитов и/или регуляторов осмоляльности и/или аминокислот и таурина и при необходимости регуляторов рН до значений от 5,0 до 8,0.

При этом быстро выводящийся ПФОС (C₈-С₁₀), один или несколько, выбирают из следующего списка, но не ограничивают тем самым свой выбор: перфтордекалин (ПФД, CAS №306-94-5) C₁₀F₁₈ или перфтортрипропиламин (ПФТПА, CAS №338-83-0) C₉F₂₁N, или перфтороктилбромид (ПФОБ, CAS №423-55-2) C₈F₁₇Br, а медленно выводящийся ПФС (С₁₁-С₁₂), один или несколько, выбирают из следующего списка, но не ограничивают тем самым свой выбор: перфтор-N-(4-метилциклогексил) пиперидина (ПФМЦП, CAS №86630-50-4) C₁₂F₂₃N или перфтортрибутиламин (ПФТБА, CAS №311-89-7) C₁₂F₂₇N.

Эмульгатор, один или несколько, выбирают из следующего списка, но не ограничивают тем самым свой выбор: фосфолипиды природного сырья (лецитин яичного желтка, сои, фосфатидилхолин и др.), полоксамеры, эфиры сахарозы с жирными кислотами, эфиры глицерола с жирными кислотами, соевых бобов масло очищенное, триглицериды среднецепочечные, оливковое масло очищенное, рыбий жир очищенный, глицерол (безводный), омега 3 жирные кислоты, омега 6 жирные кислоты, омега 9 жирные кислоты, альфа-токоферол, аскорбилпальмитат, солей калия и натрия жирных кислот (пальмитата, олеаьюта и др.).

Полиэлектролит и противомакроион, один или несколько, выбирают из следующего списка, но не ограничивают тем самым свой выбор: полианионов (гиалуроновая кислота и ее соли, гиалуронат натрия, хондроитина сульфат и его соли, хондроитина сульфат натрия, альгиновая кислота и ее соли, альгинат натрия, α-поли-L-глутаминовая кислота и ее соли, α-поли-L-глутамат натрия, α-поли-L-аспарагиновая кислота и ее соли, α-поли-L-аспарагинат натрия и так далее) или поликатионов (хитозан и его соли, хитозана гидрохлорид, α-поли-L-лизин и его соли, α-поли-L-лизина гидробромид, α-поли-L-лизина гидрохлорид, α-поли-L-орнитин и его соли, α-поли-L-орнитина гидробромид, α-поли-L-орнитина гидрохлорид, α-поли-L-гистидин и его соли, α-поли-L-гистидина гидрохлорид, α-поли-L-аргинин и его соли, α-поли-L-аргинина гидрохлорид и т.д.).

Предлагаемый способ получения эмульсии ПФОС, отличается от ранее описанных аналогов тем, что наноэмульсию возможно получить значительно проще, используя более простую технологическую схему без применения сложного и дорогостоящего инженерного оборудования (дополнительных гомогенизаторов или дополнительных камер гомогенизации), достаточно одного гомогенизатора с одной камерой гомогенизации, и быстрее за счет сокращения числа необходимых циклов гомогенизации.

Авторами предлагаемого технического решения была выдвинута гипотеза о том, что на поверхности частиц эмульсии перфторорганических соединений формируются адсорбционный слой диссоциированного полиэлектролита, который индуцирует в среде растворителя диффузный слой противоионов. Возникновение указанных слоев облегчает процесс эмульгирования, так как исключает обратную агрегацию образующихся мелкодисперсных частиц за счет электростатического отталкивания.

Как видно из данных таблицы 3 технический результат (сокращение циклов гомогенизации) от введения полиэлектролита проявляется тем сильнее, чем меньше показатель диссоциации ионных групп (рКа) выбранного полиэлектролита, то есть чем легче диссоциирует ионная группа и меньше средняя молярная масса ионизированного мономерного звена (Мм, г/моль) полиэлектролита, что указывает на прямо пропорциональную зависимость степени выраженности наблюдаемого эффекта от плотности заряда образующегося на поверхности частиц эмульсии.

Также авторами данного технического решения был получен неожиданный результат, а именно установлено, что технический результат (сокращение циклов гомогенизации) возможно достичь, вводя меньшие суммарные концентрации полимерных соединений, если использовать их не самостоятельно, а в парах полиэлектролит - противомакроион. Для этого перед финальным циклом гомогенизации эмульсию разбавляют раствором, содержащим противомакроион. Как видно из данных таблицы 2, технический результат, достигается уже при введении в состав концентрации полимеров в 2,5 раза более низких, чем при использовании одного из полиэлектролитов.

Также авторами данного технического решения было установлено, что технический результат (сокращение циклов гомогенизации) наблюдается только при введении полиэлектролитов или пар полиэлектролит -противомакроионов в эмульсию в концентрациях от 0,01 до 1,0 г/л, что связанно с конечной адсорбционной емкостью частиц эмульсии.

Кроме того, предложен состав перфторуглеродной эмульсии для инфузий для медицинских целей, включающей перфторорганические соединения перфтордекалин и перфтор-N-(4-метилциклогексил) пиперидин, эмульгатор, аминокислоты, полиэлектролиты, электролиты и регуляторы рН при следующем соотношении компонентов, мг на 1 мл раствора:

Перфтордекалин 104-156 (5,6-8,4 об. %);

Перфтор-N-(4-метилциклогексил) пиперидин 52-78 (2,8-4,2 об. %);

Один или несколько эмульгаторов суммарно - 32-270;

Один или несколько полиэлектролитов суммарно - 0,01-3,0;

Одна или несколько аминокислот, суммарно в пересчете на сухое вещество - 0-2,5;

Один или несколько электролитов, суммарно в пересчете на сухое вещество - 0,01-9,0;

один или несколько регуляторов рН - q.s. до рН 5,0-8,0;

Вода для инъекций - q.s. до 1 мл.

Заявляемый набор компонентов является оптимальным, найден экспериментально и обеспечивает стабильность препарата в течение не менее 3 лет. Благодаря заявленному соотношению компонентов фармацевтическая композиция сохраняет физико-химическую стабильность и микробиологическую стабильность препарата.

Для подтверждения стабильности эмульсии для инфузий на основе перфторорганических соединений, опытно-промышленные серии изучались по физико-химическим и микробиологическим показателям, которые характеризуют качество жидких лекарственных форм для парентерального применения в условиях долгосрочного хранения в течение 36 месяцев, а именно по показателям:

• Описание

• Подлинность

• рН

• Кислородная емкость

• Размер частиц

• Родственные примеси

• Извлекаемый объем

• Стерильность

• Аномальная токсичность

• Бактериальные эндотоксины

• Количественное определение действующих веществ

Как видно из Фиг. 2-5 и Таблицы 1, все показатели качества находятся в рамках установленных для прототипа норм спецификации, также наблюдается низкая вариабельность результатов анализа трех серий. Можно заключить что разработанная эмульсия для инфузий на основе перфторорганических соединений стабильна при хранении в течение не менее 36 мес.

Краткое описание чертежей, иных графических материалов

На Фиг. 1 показано схематическое изображение аппаратной схемы получения эмульсии.

На схеме обозначены: реактор (R1), реактора (R2), смесительный бак (R3) с высокоскоростным диспергатором и гомогенизатором высокого давления (НРН), резервуар-накопитель (R4).

На Фиг. 2 представлена временная зависимость количественного содержания перфтордекалина в эмульсии для инфузий.

На Фиг. 3 представлена временная зависимость количественного содержания перфтор-N-(4-метилциклогексил)пиперидина в эмульсии для инфузий.

На Фиг. 4 показана зависимость содержания родственных примесей со временем в эмульсии для инфузий.

На Фиг. 5 показана зависимость размера частиц эмульсии в зависимости от времени хранения.

Осуществление изобретения

Далее приводятся примеры осуществления предлагаемого технического решения, которые его иллюстрируют, но не охватывают все возможные варианты его осуществления. Специалисту в данной области техники понятно, что возможны и другие частные варианты осуществления изобретения, включающие иные эмульсии для инфузий перфторорганических соединений в соответствии с предложенным техническим решением, не описанные в настоящих примерах.

Перфтордекалин (CAS №306-94-5, бесцветная прозрачная жидкость с плотностью около 1,945 г/мл, представляющая собой смесь цис-изомера (CAS №60433-11-6) и транс-изомера (CAS №60433-12-7)). Перфтордекалин является бесцветной жидкостью, нерастворимой в воде, спирте, неполярных и полярных растворителях, хорошо растворяет газы, химически инертен, устойчив до 400°С.

Перфтор-N-(4-метилциклогексил) пиперидин (перфторметилциклогексилпиперидин, CAS №86630-50-4, бесцветная прозрачная жидкость с плотностью около 1,872 г/мл).

В качестве С₈-С₁₀ - перфторорганических соединений используют помимо перфтордекалина (ПФД, CAS №306-94-5) C₁₀F₁₈ еще перфтортрипропиламин (ПФТПА, CAS №338-83-0) C₉F₂₁N, перфтороктилбромид (ПФОБ, CAS №423-55-2) C₈F₁₇Br.

В качестве С₁₁-С₁₂ - перфторорганических соединений используют помимо перфтор->Ц4-метилциклогексил) пиперидина (ПФМЦП, CAS №86630-50-4) C2F23N еще перфтортрибутиламин (ПФТБА, CAS №311-89-7) C,₂F₂7N.

Полиэлектролиты - это полимеры, мономерные звенья которых способны к электролитической диссоциации. При этом в растворе образуются макроионы (полианионы или поликатионы) и низкомолекулярные противоионы (катионы или анионы). В качестве полиэлектролитов можно использовать следующие агенты.

1. Гиалуроновая кислота и ее соли (Полианион, CAS №9067-32-7 включена в монографию Европейской фармакопеи под названием «Sodium Hyaluronate» и отсутствует в Американской фармакопеи описана как природный несульфотированный гликозаминогликан, который получают из гребней петушков или путем ферментации из Streptococci, Lancefield групп А и С, представляет собой линейный полисахарид, состоящий из чередующихся дисахаридов, которые включают D-N-ацетилглюкозамин и D-глюкуроновую кислоту, соединенные β-1,4- и β-1,3-гликозидными связями, внешне представляет собой белый или почти белый, очень гигроскопичный порошок или волокнистый агрегат, мало растворимый или растворимый в воде, практически не растворим в ацетоне и безводном этаноле, теряющий при высушивании не более 20% от своей массы и содержащий не менее 95,0% и не более 105,0% безводного вещества), структурная формула ионной формы мономерного звена:

В организме человека гиалуроновая кислота входит в состав соединительной, эпителиальной и нервной тканей. Является одним из основных компонентов внеклеточного матрикса, содержится во многих биологических жидкостях (слюне, синовиальной жидкости и др.). Играет большую роль в пролиферации и миграции клеток.

2. Хондроитина сульфат и его соли (Полианион, CAS №9082-07-9 включенный в монографии Европейской и Американской фармакопей под названием «Chondroitin Sulfate Sodium», описан как природный сульфатированный линейный гликозаминогликан, который получают из хрящей как наземного, так и морского происхождения, представляет собой биополимер состоящий из димеров L-идуроновой кислоты и сульфа-тированного N-ацетилгалактозамина, внешне представляет собой белый или почти белый гигроскопичный порошок легко растворимый в воде, практически не растворим в ацетоне и этаноле (96%), теряющий при высушивании не более 12% от своей массы и содержащий не менее 90,0% и не более 105,0% безводного вещества), структурная формула ионной формы мономерного звена:

В организме человека хондроитина сульфат обеспечивает упругость хрящевой ткани, а также ее амортизирующие свойства благодаря удерживанию жидкости. Недостаток этого компонента может стать причиной развития остеоартрита.

3. Альгиновая кислота и ее соли (Полианион, CAS №9005-38-3 включенный в монографии Европейской и Американской фармакопей под названием «Sodium Alginate», описан как природный полисахарид, который получают в основном из водорослей, принадлежащих к семейству Phaeophyceae, представляет собой блок сополимер состоящий из фрагментов гомополисахарида β-D-маннуроновой кислоты и гомополисахарида α-L-гулуроновой кислоты, внешне представляет собой белый или бледно-желтовато-коричневый порошок медленно растворимый в воде, образующий вязкий коллоидный раствор, практически не растворимый в этаноле (96%), теряющий при высушивании не более 15% от своей массы и содержащий не менее 90,8% и не более 106,0% безводного вещества), структурная формула ионной формы мономерного звена:

Из организма человека альгиновая кислота выводит ионы тяжелых металлов, улучшает работу сердечно-сосудистой системы.

4. α-Поли-L-глутаминовая кислота и ее соли (Полианион не описан в фармакопеях, доступен к закупке в формах «Poly-L-glutamic acid sodium salt, CAS №26247-79-0» и «Poly(L-glutamic acid), CAS №25513-46-6» у Sigma-Aldrich и Alamanda Polymers описан как синтетический гомополимер аминоксилоты L-глутаминовой кислоты, порошок от белого до практически белого или светло-желтого цвета, при концентрации 50 мг/мл образующий в воде прозрачный раствор), структурная формула ионной формы мономерного звена:

В организме человека поли-L-глутаминовая кислота метаболизируется до глутаминовой кислоты относящейся к нейромедиаторным аминокислотам, присутствующей в белках серого и белого вещества головного мозга, а в свободной форме составляющей 1/3 всех аминокислот в сыворотке крови.

5. α-Поли-L-аспарагиновая кислота и ее соли (Полианион не описан в фармакопеях, доступен к закупке в формах «Poly(l-aspartic acid sodium salt), CAS №34345-47-6» и «Poly(1-aspartic acid), CAS №25608-40-6» у Alamanda Polymers описан как синтетический гомополимер аминоксилоты L-аспарагиновой кислоты, твердое вещество от белого до бледно-желтого цвета, растворимое в воде, при концентрации 50 мг/мл образующий в воде прозрачный раствор), структурная формула ионной формы мономерного звена:

В организме человека поли-L-аспарагиновая кислота метаболизируется до аспарагиновой кислоты отвечающую за передачу нервных импульсов по нейронам и стимулирующую выработку гормонов.

6. Хитозан и его соли (Поликатион, CAS №9012-76-4 включен в монографию Европейской фармакопеи под названием «Chitosan Hydrochloride)) в монографию Американской фармакопеи под названием «Chitosan» описан как природный неразветвленный бинарный полисахарид или его хлорид, который получают из панцирей креветок и крабов, представляет собой из случайно распределенных β-(1→4) - связанных D-глюкозамина (деацетилированное звено) и N-ацетил- D-глюкозамина (ацетилированное звено), внешне представляет собой белый или почти белый мелкий порошок умеренно растворимый в воде, практически не растворимый в безводном этаноле, теряющий при высушивании не более 10% от своей массы и содержащий не менее 90,0% безводного вещества), структурная формула ионной формы мономерного звена:

В организме человека хитозан способен в определенной мере связываться с молекулами жира. Жир, связанный с хитозаном, не усваивается и выводится из организма. Хитозан применяется как средство, способствующее снижению веса, а также для улучшения холестеринового обмена.

7. α-Поли-L-лизин и его соли (Поликатион не описан в фармакопеях, доступен к закупке в формах: «α-Poly-L-lysine hydrobromide, CAS №25988-63-0», «α-Poly-L-lysine hydrochloride, CAS №26124-78-7» у Sigma-Aldrich описан как синтетический гомополимер аминоксилоты L-лизина, порошок от белого до светло-желтого цвета, растворимый в воде, раствор в воде которого (50 мг/мл) имеет вид от бесцветного, прозрачного до бледно-желтого слегка мутного), структурная формула ионной формы мономерного звена:

В организме человека α-Поли-L-лизин метаболизируется до L-лизина -незаменимой (эссенциальной) аминокислоты, входящей в состав практически всех белков, необходим для формирования костей и роста детей, способствующей усвоению кальция, поддерживающей обмен азота, участвующей в синтезе антител, гормонов и ферментов, участвующей в формировании коллагена и восстановлении тканей, увеличивающей мышечную силу и выносливость, способствует увеличению объема мышц (анаболик), улучшает краткосрочную память, предотвращает развитие атеросклероза, утолщает структуру волос, предотвращает развитие остеопороза.

8. α-Poly-L-орнитин и его соли (Поликатион, не описан в фармакопеях, доступен к закупке в формах «Poly-L-ornithine hydrobromide, CAS №27378-49-0» и «Poly-L-ornithine hydrochloride, CAS №26982-21-8», у Sigma-Aldrich описан как синтетический гомополимер аминоксилоты L-орнитина, порошок от белого до практически белого цвета, растворимый в воде, раствор в воде которого (50 мг/мл) имеет прозрачный вид), структурная формула ионной формы мономерного звена:

В организме человека α-Poly-L-орнитин метаболизируется до L-орнитин - непротеиногенная аминокислота, заменимая, не входящая в состав белков, играет важную роль в биосинтезе мочевины (орнитин важный промежуточный продукт на пути синтеза аргинина). При приеме внутрь стимулирует реакцию образования мочевины из аммиака в орнитиновом цикле мочевинообразования.

9. α-Poly-L-гистидин и его соли (Поликатион не описан в фармакопеях, доступен к закупке в формах «Poly-L-histidine, CAS №26062-48-6» и «Poly-L-histidine hydrochloride, CAS №61857-39-4», у Sigma-Aldrich описан как синтетический гомополимер аминоксилоты L-гистидина, порошок или твердое вещество от белого до светло-желтого цвета, растворимый в воде (45,6 мг/мл)), структурная формула ионной формы мономерного звена:

В организме человека α-Poly-L-гистидин метаболизируется до L-гистидин - условно заменимой аминокислоты, недостаток условно заменимых аминокислот вызывает нарушение обмена веществ, остановку роста, потерю массы тела, снижение иммунитета. В организме человека гистидин входит в состав активных центров множества ферментов, способствует росту и восстановлению тканей, важен для здоровья суставов, содержится в гемоглобине, недостаток гистидина может вызвать ослабление слуха.

10. α-Poly-L-аргинин и его соли (Поликатион не описан в фармакопеях, доступен к закупке в форме «Poly-L-arginine hydrochloride, CAS №26982-20-7» у Sigma-Aldrich и Alamanda Polymers описан как синтетический гомополимер аминоксилоты L-аргинина, порошок или твердое вещество от белого до практически белого цвета, растворимый в воде, при концентрации 50 мг/мл образующий в воде прозрачный раствор), структурная формула ионной формы мономерного звена:

В организме человека α-Poly-L-аргинин метаболизируется до L-аргинин - условно заменимой аминокислоты, недостаток условно заменимых аминокислот вызывает нарушение обмена веществ, остановку роста, потерю массы тела, снижение иммунитета. В организме человека аргинин замедляет рост опухолей, в том числе раковых, за счет стимуляции иммунной системы организма; способствует дезинтоксикации печени; содержится в семенной жидкости, способствует повышению потенции; содержится в соединительной ткани и в коже; участвует в обмене веществ в мышечной ткани; расширяет сосуды и усиливает их кровенаполнение, снижает кровяное давление, способствует снижению уровня холестерина в крови, препятствует образованию тромбов; стимулирует синтез гормона роста и ускоряет рост у детей и подростков; увеличивает массу мышечной ткани и уменьшает массу жировой ткани, способствует нормализации состояния соединительной ткани.

Пример 1. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФС. Технологический процесс осуществляется в асептических условиях, на оборудование схематически изображенном на Фиг. 1

Предварительно готовят и подвергают стерилизующей фильтрации две фазы.

Фаза 1 - Перфторуглеродная смесь, состоящая из медленно выводящегося ПФМЦП и быстро выводящегося ПФД в количестве 156-234 г/л (или 81-122 мл ПФОС в 1 л, т.к. плотность смеси ПФС 1,90-1,94 г/мл), содержащую навески (жидких) 104-156 г/л ПФД и 52-78 г/л ПФМЦП, подвергают предварительной стерилизующей фильтрации под давлением около трех бар на трехкаскадной установке, состоящей из трех фильтров: фильтра грубой очистки (1,5-2,5 мкм), фильтра тонкой очистки (0,45-0,6 мкм) и стерилизующего фильтра (0,22 мкм).

Фаза 2 - 400 мл водного раствора эмульгатора - содержащего 32-270 грамм полоксамера 188, подвергают предварительной стерилизующей фильтрации под давлением около трех бар на трехкаскадной установке, состоящей из трех фильтров: фильтра грубой очистки (1,5-2,5 мкм), фильтра тонкой очистки (0,45-0,6 мкм) и стерилизующего фильтра (0,22 мкм).

Для получения предэмульсии (микронных размеров), фазу 2 из реактора (R2) через трехкаскадную установку стерилизующей фильтрации подают в смесительный бак (R3) включают высокоскоростной диспергатор и гомогенизатор высокого давления (НРН) сразу после этого струйно из реактора (R1) через трехкаскадную установку стерилизующей фильтрации подают в смесительный бак (R3) фазу 1.

Из смесительного бака (R3) через гомогенизатор высокого давления (НРН) эмульсию фазы 1 в фазе 2 перекачивают в резервуар-накопитель (R4) из которого отбирают пробу на определение распределения частиц по размерам методом лазерной дифракции, если распределение частиц не находится в диапазоне от 450 до 2200 нм, эмульсию рециркулируют в смесительный бак (R3) для следующего цикла гомогенизации. Рециркуляцию и гомогенизацию эмульсии фазы 1 в фазе 2 повторяют до тех пор, пока распределение частиц, определенное методом лазерной дифракции из пробы, взятой из резервуара-накопителя (R4), не окажется в диапазоне от 450 до 2200 нм.

Готовую перфторуглеродную наноэмульсию последний раз рециркулируется в смесительный бак (R3) для разбавления фазой 3.

Фазу 3 предварительно готовят и подвергают стерилизующей фильтрации.

Фазу 3 - 519-478 мл водного раствора электролитов и/или регуляторов осмоляльности и/или аминоксилот и таурина и при необходимости регуляторов рН готовят в реакторе (R2), предварительно освобожденном и отмытом от ранее приготовленной фазы 2, после приготовления фазу 3 подвергают стерилизующей фильтрации под давлением около трех бар на трехкаскадной установке, состоящей из трех фильтров: фильтра грубой очистки (1,5-2,5 мкм), фильтра тонкой очистки (0,45-0,6 мкм) и стерилизующего фильтра (0,22 мкм).

Для разбавления наноэмульсии, фазу 3 из реактора (R2) через трехкаскадную установку стерилизующей фильтрации подают в смесительный бак (R3) включают высокоскоростной диспергатор и гомогенизатор высокого давления (НРН) сразу после этого рециркулируют готовую наноэмульсию из резервуара-накопителя (R4) смесительный бак (R3).

Из смесительного бака (R3) через гомогенизатор высокого давления (НРН) разбавленную наноэмульсию перекачивают в резервуар-накопитель (R4), из которого отбирают пробу на определение распределения частиц по размерам методом лазерной дифракции, если распределение частиц не находится в диапазоне от 30 до 150 нм, эмульсию рециркулируют в смесительный бак (R3) для следующего цикла гомогенизации. Рециркуляцию и гомогенизацию эмульсии фазы 1 в фазе 2 повторяют до тех пор, пока распределение частиц, определенное методом лазерной дифракции из пробы, взятой из резервуара-накопителя (R4), не окажется в диапазоне от 30 до 150 нм.

Готовый прототип из резервуара-накопителя (R4) через стерилизующий фильтр (0,22 мкм) подается на линию розлива в первичную упаковку.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, аминокислоты (лейцин, изолейцин, триптофан, фениаланин, валин, треонин, гистидин), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01 - 2,5 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - натрия гидрокарбонат q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л. Полученную предлагаемым способом эмульсию можно применять, как газотранспортный кровезаменитель для возмещения кровопотери. Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм потребовалось 15 циклов рециркуляции и гомогенизации.

Пример 2. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФС с полиэлектролитом.

Способ получения эмульсии ПФОС проводят аналогично примеру 1, но фаза 2 дополнительно содержит полиэлектролит (гиалуронат натрия или α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидина гидрохлорид или α-поли-L-аргинина гидрохлорид) в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, полиэлектролит (гиалуронат натрия или α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидина гидрохлорид или α-поли-L-аргинина гидрохлорид) в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л, аминокислоты (лейцин, изолейцин, триптофан, фениаланин, валин, треонин, гистидин), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-2,5 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01 - 9,0 г/л, регулятор рН - натрия гидрокарбонат q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при концентрации полиэлектролита равной 0,01 г/л потребовалось 15 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 0,40 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 1,00 г/л потребовалось 10 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 3,00 г/л потребовалось 10 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная концентрация полиэлектролита равная - 1,00 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные концентрации полиэлектролитов и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 1.

Пример 3. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с полиэлектролитом.

Способ по примеру 1, отличающийся тем, что фаза 2 дополнительно содержит электролит (α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид) в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, полиэлектролит - (α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид) в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л, аминокислоты (лейцин, изолейцин, триптофан, фениаланин, валин, треонин, гистидин), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-2,5 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - натрия гидрокарбонат q.s. до рН 5,0- ,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при концентрации полиэлектролита равной 0,01 г/л потребовалось 14 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 0,40 г/л потребовалось 12 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 1,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 3,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная концентрация полиэлектролита равная - 1,00 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные концентрации полиэлектролитов и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 1.

Пример 4. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с полиэлектролитом.

Способ осуществляют как в примере 1, отличающийся тем, что фаза 2 дополнительно содержит полиэлектролит (хондроитин сульфат натрия или хитозан или хитозана гидрохлорид) в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, полиэлектролит - (хондроитин сульфат натрия или хитозан или хитозана гидрохлорид) в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л, аминокислоты (лейцин, изолейцин, триптофан, фениаланин, валин, треонин, гистидин), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-2,5 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - натрия гидрокарбонат q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при концентрации полиэлектролита равной 0,01 г/л потребовалось 14 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 0,40 г/л потребовалось 12 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 1,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 3,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная концентрация полиэлектролита равная - 1,00 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные концентрации полиэлектролитов и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 1.

Пример 5. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с полиэлектролитом.

Способ проводят как в примере 1, отличающийся тем, что фаза 2 дополнительно содержит полиэлектролит - альгинат натрия, в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, полиэлектролит - альгинат натрия, в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л, аминокислоты (лейцин, изолейцин, триптофан, фениаланин, валин, треонин, гистидин), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-2,5 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - натрия гидрокарбонат q.s. до рН 5,0 - 8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при концентрации полиэлектролита равной 0,01 г/л потребовалось 14 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 0,40 г/л потребовалось 11 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 1,00 г/л потребовалось 6 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 3,00 г/л потребовалось 6 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная концентрация полиэлектролита равная - 1,00 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные концентрации полиэлектролитов и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 1.

Пример 6. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с полиэлектролитом.

Способ по примеру 1, отличающийся тем, что фаза 2 дополнительно содержит полиэлектролит (α-поли-L-глутаминовой кислоты или α-поли-L-глутамат натрия), в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, полиэлектролит - (α-поли-L-глутаминовой кислоты или α-поли-L-глутамат натрия), в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л, аминокислоты (лейцин, изолейцин, триптофан, фениаланин, валин, треонин, гистидин), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-2,5 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - натрия гидрокарбонат q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при концентрации полиэлектролита равной 0,01 г/л потребовалось 14 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 0,40 г/л потребовалось 11 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 1,00 г/л потребовалось 5 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 3,00 г/л потребовалось 5 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная концентрация полиэлектролита равная - 1,00 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные концентрации полиэлектролитов и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 2.

Пример 7. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с полиэлектролитом.

Способ по примеру 1, отличающийся тем, что фаза 2 дополнительно содержит полиэлектролит (α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия), в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, полиэлектролит - (α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия), в концентрации от 0,01 до 3,0 г/л, аминокислоты (лейцин, изолейцин, триптофан, фениаланин, валин, треонин, гистидин), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-2,5 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - натрия гидрокарбонат q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при концентрации полиэлектролита равной 0,01 г/л потребовалось 14 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 0,40 г/л потребовалось 11 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 1,00 г/л потребовалось 4 циклов рециркуляции и гомогенизации, при концентрации полиэлектролита равной 3,00 г/л потребовалось 4 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная концентрация полиэлектролита равная - 1,00 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные концентрации полиэлектролитов и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 2.

Пример 8. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 1, отличающийся тем, что фаза 3 не содержит аминокислот, а в фазе 3 регулятор рН (натрия гидрокарбоната) заменен на пару регуляторов рН (яблочная кислота или натрия гидроксид), в фазу 3 дополнительно введены регулятор осмоляльности (глюкоза) в концентрации 0,01-50 г/л и противомакроион (хитозан или хитозана гидрохлорид), а также в фазу 2 дополнительно введен полиэлектролит - (гиалуронат натрия) при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, пара полиэлектролит (гиалуронат натрия)-противомакроион (хитозан или хитозана гидрохлорид), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-3,0 г/л, регуляторы осмоляльности - глюкоза - 0,01-50 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (яблочная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная -0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 9. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 8, отличающийся тем, что в фазе 2 полиэлектролит (гиалуронат натрия) заменен на полиэлектролит (хитозан или хитозана гидрохлорид), а в фазе 3 противоматроион (хитозан или хитозана гидрохлорид) заменен на противоматроион (гиалуронат натрия) при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, пара полиэлектролит (хитозан или хитозана гидрохлорид)-противомакроион (гиалуронат натрия), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01- 3,0 г/л, регуляторы осмоляльности -глюкоза - 0,01-50 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (яблочная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0- ,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная - 0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 10. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 8, отличающийся тем, что в фазе 2 полиэлектролит (гиалуронат натрия) заменен на полиэлектролит (хондроитина сульфат натрия или альгинат натрия) при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, пара полиэлектролит (хондроитина сульфат натрия или альгинат натрия)-противомакроион (хитозан или хитозана гидрохлорид), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01- 3,0 г/л, регуляторы осмоляльности - глюкоза - 0,01-50 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (яблочная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии, размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная - 0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 11. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 8, отличающийся тем, что в фазе 2 полиэлектролит (гиалуронат натрия) заменен на полиэлектролит (хитозан или хитозана гидрохлорид), а в фазе 3 противомакроион (хитозан или хитозана гидрохлорид) заменен на противоматроион (хондроитина сульфат натрия или альгинат натрия) при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор - полоксамер 188 - 32-270 г/л, пара полиэлектролит (хитозан или хитозана гидрохлорид) - противомакроион (хондроитина сульфат натрия или альгинат натрия), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-3,0 г/л, регуляторы осмоляльности - глюкоза - 0,01-50 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (яблочная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная -0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 12. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 1, отличающийся тем, что в фазе 3 содержится больше аминокислот и таурин (тирозин, лейцин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глутамин, изолейцин, триптофан, фенилаланин, валин, метионин, треонин, гистидин, лизина ацетат, аргинин, аланин, цистеин гидрохлорид моногидрат, ацетилцистеин, глицин, серии, N-ацетил L-тирозин, пролин, таурин), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-170,0 г/л, в фазе 3 регулятор рН (натрия гидрокарбоната) заменен на пару регуляторов рН (янтарная кислота или натрия гидроксид), в фазу 3 дополнительно введен противоматроион (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид), а также в фазе 2 содержится больше эмульгаторов (полоксамер 188, смесь фосфолипидов с фосфатидилхолином, альфа-токоферол), суммарно 32- 270 г/л и в фазу 2 дополнительно введен полиэлектролит - (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия), при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор (полоксамер 188, смесь фосфолипидов с фосфатидилхолином, альфа-токоферол), суммарно - 32-270 г/л, аминокислоты и таурин (тирозин, лейцин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глутамин, изолейцин, триптофан, фенилаланин, валин, метионин, треонин, гистидин, лизина ацетат, аргинин, аланин, цистеин гидрохлорид моногидрат, ацетилцистеин, глицин, серии, N-ацетил L-тирозин, пролин, таурин), суммарно в пересчете на сухое вещество - 0,01-170,0 г/л, пара полиэлектролит (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия)-противомакроион (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-3,0 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (янтарная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная -0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 13. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 12, отличающийся тем, что в фазе 2 полиэлектролит (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия) заменен на полиэлектролит (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид), а в фазе 3 противоматроион (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид) заменен на противоматроион (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия) при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор (полоксамер 188, смесь фосфолипидов с фосфатидилхолином, альфа-токоферол), суммарно - 32-270 г/л, аминокислоты и таурин (тирозин, лейцин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глутамин, изолейцин, триптофан, фенилаланин, валин, метионин, треонин, гистидин, лизина ацетат, аргинин, аланин, цистеин гидрохлорид моногидрат, ацетилцистеин, глицин, серии, N-ацетил L-тирозин, пролин, таурин), суммарно в пересчете на сухое вещество - 0,01-170,0 г/л, пара полиэлектролит (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид)-противомакроион (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01- 3,0 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (янтарная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 8 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная -0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 14. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 12, отличающийся тем, что в фазе 2 может содержаться больше типов полиэлектролитов (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия или α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия), и в фазе 3 содержаться больше типов противомакроионов (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид или α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид), при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор (полоксамер 188, смесь фосфолипидов с фосфатидилхолином, альфа-токоферол), суммарно - 32-270 г/л, аминокислоты и таурин (тирозин, лейцин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глутамин, изолейцин, триптофан, фенилаланин, валин, метионин, треонин, гистидин, лизина ацетат, аргинин, аланин, цистеин гидрохлорид моногидрат, ацетилцистеин, глицин, серии, N-ацетил L-тирозин, пролин, таурин), суммарно в пересчете на сухое вещество - 0,01-170,0 г/л, пара полиэлектролит (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия или α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия)-противомакроион (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид или α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-3,0 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (янтарная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная -0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 15. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 12, отличающийся тем, что в фазе 2 полиэлектролит (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия) заменен на полиэлектролит (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид или α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид), а в фазе 3 противоматроион (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид) заменен на противоматроион (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия или α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия) при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор (полоксамер 188, смесь фосфолипидов с фосфатидилхолином, альфа-токоферол), суммарно - 32-270 г/л, аминокислоты и таурин (тирозин, лейцин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глутамин, изолейцин, триптофан, фенилаланин, валин, метионин, треонин, гистидин, лизина ацетат, аргинин, аланин, цистеин гидрохлорид моногидрат, ацетилцистеин, глицин, серии, N-ацетил L-тирозин, пролин, таурин), суммарно в пересчете на сухое вещество - 0,01 - 170,0 г/л, пара полиэлектролит (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид или α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид)-противомакроион (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия или α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01- 3,0 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (янтарная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 7 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная -0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 16. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФОС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 12, отличающийся тем, что в фазе 2 полиэлектролит (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия) заменен на полиэлектролит (α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия), а в фазе 3 противомакроион (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид) заменен на противомакроион (α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид) при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор (полоксамер 188, смесь фосфолипидов с фосфатидилхолином, альфа-токоферол), суммарно - 32-270 г/л, аминокислоты и таурин (тирозин, лейцин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глутамин, изолейцин, триптофан, фенилаланин, валин, метионин, треонин, гистидин, лизина ацетат, аргинин, аланин, цистеин гидрохлорид моногидрат, ацетилцистеин, глицин, серии, N-ацетил L-тирозин, пролин, таурин), суммарно в пересчете на сухое вещество - 0,01-170,0 г/л, пара полиэлектролит (α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия)-противомакроион (α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-3,0 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (янтарная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противомакроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 6 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 6 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 6 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная -0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 17. Способ получения 8,4-12,6 об. % эмульсии ПФС с парой полиэлектролит - противомакроион.

Способ по примеру 12, отличающийся тем, что в фазе 2 полиэлектролит (α-поли-L-глутаминовая кислота или α-поли-L-глутамат натрия) заменен на полиэлектролит (α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид), а в фазе 3 противоматроион (α-поли-L-гистидин или α-поли-L-гистидин гидрохлорид или α-поли-L-аргинин гидрохлорид) заменен на противоматроион (α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия) при этом суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион находится в диапазоне от 0,01 до 3,0 г/л.

Полученная предлагаемым способом конечная рецептура прототипа имела следующий состав: перфторуглероды 8,4-12,6 об. %, из них: быстро выводящийся ПФД - 104-156 г/л, медленно выводящийся ПФМЦП - 52-78 г/л, эмульгатор (полоксамер 188, смесь фосфолипидов с фосфатидилхолином, альфа-токоферол), суммарно - 32-270 г/л, аминокислоты и таурин (тирозин, лейцин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глутамин, изолейцин, триптофан, фенилаланин, валин, метионин, треонин, гистидин, лизина ацетат, аргинин, аланин, цистеин гидрохлорид моногидрат, ацетилцистеин, глицин, серии, N-ацетил L-тирозин, пролин, таурин), суммарно в пересчете на сухое вещество - 0,01-170,0 г/л, пара полиэлектролит (α-поли-L-лизина гидробромид или α-поли-L-лизина гидрохлорид или α-поли-L-орнитина гидробромид или α-поли-L-орнитина гидрохлорид)-противомакроион (α-поли-L-аспарагиновая кислота или α-поли-L-аспарагинат натрия), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-3,0 г/л, электролиты (натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид, натрия дигодрофосфат), суммарно в пересчете на сухое вещество 0,01-9,0 г/л, регулятор рН - (янтарная кислота или натрия гидроксид) q.s. до рН 5,0-8,0, воду для инъекций q.s. до 1 л.

Для получения предлагаемым способом эмульсии размер частиц которой находится в диапазоне от 30 до 150 нм при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,01 г/л потребовалось 13 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 0,40 г/л потребовалось 6 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 1,00 г/л потребовалось 6 циклов рециркуляции и гомогенизации, при суммарной концентрации пары полиэлектролит-противоматроион равной 3,00 г/л потребовалось 6 циклов рециркуляции и гомогенизации. Следовательно, установлена оптимальная суммарная концентрация пары полиэлектролит-противоматроион равная -0,40 г/л для получения эмульсии предлагаемым способом. Установленные оптимальные суммарные концентрации пар полиэлектролит-противоматроион и их влияние на сокращение количества циклов гомогенизации обобщены в таблице 3.

Пример 18

Предлагаемая композиция предназначена для медицинских целей, а именно для проведения инфузионной терапии, т.е. метода лечения, основанного на проведении инфузий - введения в кровеносную систему растворов для коррекции патологий организма или их предотвращения. Инфузионная терапия перфторорганическими эмульсиями восстанавливает объем и состав крови с помощью парентерального введения лекарственных растворов.

Пример 19

Перед применением предлагаемой композиции эмульсии проводится биологическая проба: после медленного введения первых 5 капель препарата прекращают переливание на 3 минуты, затем вводят еще 30 капель и снова прекращают переливание на 3 минуты. При отсутствии реакции продолжается введение препарата. Результаты пробы обязательно регистрируются в истории болезни.

Пример 20

Для лечения острой кровопотери и шока перфторорганическую эмульсию предлагаемого состава вводят внутривенно капельно или струйно в дозе от 5 до 30 мл/кг массы тела. Эффект эмульсии максимален, если во время и после его инфузий в течение суток больной дышит смесью, обогащенной кислородом.

Пример 21

Для лечения нарушений микроциркуляции различного генеза перфторорганическую эмульсию предлагаемого состава вводят в дозе 5-8 мл/кг массы тела. Повторно эмульсию можно вводить в той же дозе три раза с интервалом 2-4 дня. Для повышения оксигенациоиного эффекта в процессе терапии целесообразна подача воздушной смеси, обогащенной кислородом, через маску или носовой катетер.

Пример 22

Для противоишемической защиты донорских органов перфторорганическую эмульсию предлагаемого состава вводят капельно или струйно в дозе 20 мл/кг массы тела донору и реципиенту за 2 часа до операции.

Пример 23

Регионарное применение перфторорганической эмульсии предлагаемого состава используют для перфузии конечностей при заполнении стандартного оксигенатора из расчета 40 мл/кг массы тела. Перфузия представляет собой метод подведения и пропускания крови, кровезамещающих растворов и биологически активных веществ через сосудистую систему органов и тканей организма.

Таким образом, новое лекарственное средство в жидкой форме, удачно сочетающее активные вещества со вспомогательными веществами, обеспечивает создание стабильной композиции ПФОС в форме эмульсии, предназначенной для применения в качестве кровезаменителя, и оптимального способа ее получения.

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, в частности к лекарственным препаратам, а именно к кровезаменителям в форме эмульсии на основе перфторорганических соединений и полиэлектролитов, а также к способам их получения. Предложен способ получения стерильной перфторуглеродной эмульсии для инфузий для медицинских целей, заключающийся в том, что проводят предварительную стерилизующую фильтрацию смеси жидкостей перфторорганических соединений, при соотношении С₈-С₁₀-перфторорганических соединений к С₁₁-С₁₂-перфторорганическим соединениям от 1:1 до 1:4, с плотностями смеси от 1,872 до 1,945 г/мл в водном растворе и одного или нескольких эмульгаторов суммарно - не более 270 мг/мл, добавляют один или несколько полиэлектролитов суммарно - не более 3 мг/мл, диспергируют на скорости до 3000 об/мин; гомогенизируют полученную дисперсию путем пропускания через гомогенизатор высокого давления при давлении до 120 МПа, разбавляют полученную эмульсию водой для инъекций. Способ позволяет сократить количество циклов гомогенизации и быстрее получить эмульсию ПФОС. 22 з.п. ф-лы, 5 ил., 3 табл., 23 пр.

1. Способ получения стерильной перфторуглеродной эмульсии для инфузий для медицинских целей, заключающийся в том, что проводят предварительную стерилизующую фильтрацию смеси жидкостей перфторорганических соединений, при соотношении С₈-С₁₀-перфторорганических соединений к С₁₁-С₁₂-перфторорганическим соединениям от 1:1 до 1:4, с плотностями смеси от 1,872 до 1,945 г/мл в водном растворе и эмульгатора полоксамера 188 - 32-270 мг/мл, добавляют один или несколько полиэлектролитов суммарно - 0,01-1,0 мг/мл, диспергируют на скорости 2500-3000 об/мин; гомогенизируют полученную дисперсию путем пропускания через гомогенизатор высокого давления при давлении 70-120 МПа, разбавляют полученную эмульсию водой для инъекций.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве С₈-С₁₀-перфторорганических соединений используют перфтордекалин, перфтортрипропиламин, перфтороктилбромид.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве С₁₁-С₁₂-перфторорганических соединений используют перфтор-N-(4-метилциклогексил) пиперидина, перфтортрибутиламин.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве полиэлектролитов используют полианионы, а именно гиалуроновую кислоту и её соли, гиалуронат натрия, хондроитина сульфат и его соли, хондроитина сульфат натрия, альгиновая кислота и её соли, альгинат натрия, α-поли-L-глутаминовая кислота и её соли, α-поли-L-глутамат натрия, α-поли-L-аспарагиновая кислота и её соли, α-поли-L-аспарагинат натрия или поликатионы, а именно хитозан и его соли, хитозана гидрохлорид, α-поли-L-лизин и его соли, α-поли-L-лизина гидробромид, α-поли-L-лизина гидрохлорид, α-поли-L-орнитин и его соли, α-поли-L-орнитина гидробромид, α-поли-L-орнитина гидрохлорид, α-поли-L-гистидин и его соли, α-поли-L-гистидина гидрохлорид, α-поли-L-аргинин и его соли, α-поли-L-аргинина гидрохлорид.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно проводят высокоскоростное диспергирование и гомогенизирование высокого давления в водном растворе одного или нескольких эмульгаторов суммарно 32-270 мг/мл, с добавлением одного или нескольких полиэлектролитов суммарно не более 1,0 мг/мл.

6. Способ по п. 1, в котором установка получения эмульсии включает реактор для разбавления эмульсии водой для инъекций, гомогенизатор и трубопроводы, связывающие емкость и гомогенизатор.

7. Способ по п. 1, который проводят в асептических условиях.

8. Способ по п. 1, в котором, перед началом процесса, осуществляют проверку линии получения эмульсии путем её промывки стерильным водным раствором одного или нескольких эмульгаторов суммарно - 32-270 мг/мл, с добавлением одного или нескольких полиэлектролитов суммарно - не более 1,0 мг/мл в объеме, в 2-4 раза превышающем рабочий объем трубопроводов и рабочей камеры гомогенизатора при давлении в рабочей камере гомогенизатора 70-120 МПа, с последующим сливом водного раствора.

9. Способ по п. 1, в котором линию получения эмульсии содержит один или более дополнительных гомогенизаторов, подключенных параллельно к основному гомогенизатору.

10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что линия получения эмульсии содержит один или более дополнительных гомогенизаторов, подключенных параллельно к основному гомогенизатору.

11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что гомогенизатор содержит более одной рабочей камеры, где камеры подключены параллельно.

12. Способ по п. 1, отличающийся тем, что разбавление эмульсии проводят раствором одной или нескольких аминокислот и/или таурина с суммарной концентрацией не более 170 мг/мл.

13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что в качестве аминокислоты используют тирозин, лейцин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глутамин, изолейцин, триптофан, фенилаланин, валин, метионин, треонин, гистидин, лизина ацетат, лизина гидрохлорид, аргинин, аргинина гидрохлорид, гистидина гидрохлорид моногидрат, аланин, цистеин гидрохлорид моногидрат, ацетилцистеин, глицин, серин, N-ацетил L-тирозин, аргинина аспартат, пролин, таурин.

14. Способ по п. 12, отличающийся тем, что раствор для разбавления эмульсии дополнительно содержит один или несколько электролитов с суммарной концентрацией не более 11 мг/мл.

15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что в качестве электролитов используют натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид и его кристаллогидраты, натрия фосфат одно-, двух-, трёхзамещенный и его кристаллогидраты, кальция хлорид и его кристаллогидраты.

16. Способ по п. 1, отличающийся тем, что разбавление эмульсии проводят раствором одного или нескольких регуляторов осмоляльности с суммарной концентрацией не более 150 мг/мл.

17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что в качестве регуляторов осмоляльности используют моносахариды, дисахариды, полиспирты.

18. Способ по п. 16, отличающийся тем, что раствор для разбавления эмульсии дополнительно содержит один или несколько электролитов с суммарной концентрацией не более 11 мг/мл.

19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что в качестве электролитов используют натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорид и его кристаллогидраты, натрия фосфат одно-, двух-, трёхзамещенный и его кристаллогидраты, кальция хлорид и его кристаллогидраты.

20. Способ по п. 1, отличающийся тем, что раствор для разбавления эмульсии дополнительно содержит один или несколько противомакроион с зарядом, противоположным полиэлектролиту в суммарной концентрации 0,01-1,0 мг/мл.

21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что в качестве противомакроиона используют полианионы, а именно гиалуроновую кислоту и её соли, гиалуронат натрия, хондроитина сульфат и его соли, хондроитина сульфат натрия, альгиновая кислота и её соли, альгинат натрия, α-поли-L-глутаминовая кислота и её соли, α-поли-L-глутамат натрия, α-поли-L-аспарагиновая кислота и её соли, α-поли-L-аспарагинат натрия или поликатионы, а именно хитозан и его соли, хитозана гидрохлорид, α-поли-L-лизин и его соли, α-поли-L-лизина гидробромид, α-поли-L-лизина гидрохлорид, α-поли-L-орнитин и его соли, α-поли-L-орнитина гидробромид, α-поли-L-орнитина гидрохлорид, α-поли-L-гистидин и его соли, α-поли-L-гистидина гидрохлорид, α-поли-L-аргинин и его соли, α-поли-L-аргинин гидрохлорид.

22. Способ по п. 1, отличающийся тем, что рН разбавленной эмульсии доводят с помощью регуляторов рН до значений от 5,0 до 8,0.

23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что в качестве регуляторов рН используют неорганические кислоты, их соли и их растворы, а именно угольную, хлороводородную, фосфорную, серную; органические кислоты, их соли и их растворы, а именно янтарную, яблочную, уксусную, фумаровую, лимонную кислоту; гидроксиды щелочных металлов и их растворы, а именно гидроксиды натрия, калия, лития.