Способ получения растительного средства, обладающего гастропротекторным действием Российский патент 2024 года по МПК A61K36/15 B01D11/02 A61P1/04 

Изобретение относится к области фармации, а именно, способам получения средств из растительного сырья, обладающих гастропротекторным действием.

Биологически активные вещества на основе древесной зелени хвойных пород деревьев широко распространены в качестве перспективных лекарственных средств в различных отраслях медицины.

Из уровня техники известен способ получения пихтового экстракта из древесной зелени пихты (см. RU №2216198, кл. А23К 1/00, А23К 1/12, А61К 35/78, опубл. 20.11.2003), заключающийся в том, что древесную зелень пихты измельчают и отгоняют эфирные масла водяным паром в течение 2 часов. После чего, остаток древесной зелени заливают 55-65 % раствором изопропилового спирта и настаивают смесь при 30-60°С в течение 8-24 часов. Затем смесь фильтруют, экстракт охлаждают и отстаивают, отделяют верхний слой от нижнего и упаривают каждый в отдельности. Из верхнего слоя получают натуральный хвойный экстракт, нижний используют для получения хлорофиллокаротиновой муки.

Кроме того, известен способ получения лекарственного препарата Абисиб в виде водного экстракта из древесной зелени пихты (см. RU №2061491, кл. А61К 35/78, опубл. 10.06.1996), в котором экстракцию проводят путем обработки сырья лапки пихты сибирской при температуре 100-110°С в течение 1,5-2 часов и давлении 0,2-0,3 атм.

Способ получения биологически активной добавки по патенту RU №2188563 (кл. A23L 1/30, опубл. 10.09.2002) основан на измельчении хвойной лапки (древесной зелени) хвои сосны и ели, которую экстрагируют гидрофобным органическим растворителем при температуре кипения экстрагента, затем экстракт сливают, охлаждают, фильтруют и направляют на отгонку растворителя. Полученный остаток обрабатывают 30 % водным раствором гидроокиси натрия, омыленный продукт разбавляют водой, добавляют бензин, отстаивают и отделившийся верхний слой декантируют с поверхности водного омыленного слоя.

Также известен способ получения углеводно-флавоноидного экстракта из древесной зелени хвои сосны и/или ели (см. RU №2181560, кл. A23L 1/30, А61К 35/78, опубл. 27.04.2002), включающий измельчение хвои, экстракцию горячей водой при соотношении хвоя:вода как 1:5 в течение 1-3 часов, отделение горячего экстракта и упаривание на пленочном испарителе.

При этом по способу получения средства (см. RU №2358746, кл. А61К 36/00, B01D 11/00, опубл. 20.06.2009) измельченную хвойную зелень экстрагируют при комнатной температуре большим протоком сжиженной углекислоты, отделяют масляную фракцию от водной, последняя представляет собой концентрированный клеточный сок, который является целевым продуктом.

Общим недостатком известных технических решений является использование липофильной фракции комплекса биологически активных соединений, в то время как фракции средней и высокой полярности остаются неиспользуемыми. В составе таких фракций обнаружено присутствие соединений, обладающих широким спектром биологической активности, в частности, процианидины, катехины и флавоноиды, которые обладают выраженной гастропротекторной активностью. Кроме того, из уровня техники не выявлено использование хвои сосны стланиковой для создания лекарственного средства с гастропротекторной активностью.

Задачей изобретения является создание комплексного растительного препарата на основе хвои сосны стланиковой, характеризующейся содержанием фенольных соединений.

Техническим результатом изобретения является повышенная гастропротекторная активность средства за счет содержащихся в препарате действующих веществ.

Для достижения поставленной задачи способ получения биологически активного средства гастропротекторного действия посредством экстракции растительного сырья, характеризуется тем, что в качестве сырья используют хвою сосны стланиковой, для чего, на первоначальном этапе измельченное сырье экстрагируют протоком сжиженного фреона в условиях повышенного рабочего давления в экстракторе 0,4 МПа, причем, фреон подают под давлением 0,7-0,9 МПа, продолжительность проточной экстракции составляет 3 часа, после чего, сырье смешивают с 60 % раствором этанола в соотношении сырье-экстрагент 1:(9,8-10,2) и обрабатывают ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 часов, полученный этанольный экстракт фильтруют и концентрируют в вакууме, а остаток растительного сырья смешивают с водой в соотношении сырье-экстрагент 1:8, обрабатывают ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 часов, полученный водный экстракт фильтруют и концентрируют в вакууме, далее, объединяют полученные концентраты после этанольной и водной экстракций, смесь концентратов сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60°С и давлении 0,1 атм в течение 8 часов, полученный сухой экстракт измельчают до порошкообразного состояния. Выход готового продукта (сухого экстракта) составляет 14,0-14,5 % от массы растительного сырья.

Выявленные отличительные признаки позволяют сделать вывод о соответствии предлагаемого технологического решения критерию «новизна».

Совокупность существенных признаков обеспечивает решение заявленной технической задачи, а именно, получение сухого экстракта (далее - средства) в виде рассыпчатого негигроскопичного порошка темно-коричневого цвета с горьковатым вяжущим вкусом и специфическим запахом. Потеря массы при высушивании 4,4-4,5%.

Способ иллюстрируется нижеследующими примерами.

Пример 1. Навеску 10,0 кг хвои сосны стланиковой, предварительно измельченную до размера частиц диаметром 2-3 мм, загружали в экстрактор, удаляли остаточный воздух, выравнивали давление в экстракторе и установке до 0,4 МПа (4 кгс/см²). В экстрактор подавали сжиженный газ (фреон) с рабочим давлением 0,40 МПа, после заполнения подавали газ с давлением 0,7 МПа (7 кгс/см²) и проводили проточную экстракцию в течение 3 часов. По окончании циркуляции хвою сосны стланиковой выгружали из экстрактора и переносили в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревателем и заливали 60 % этанолом (плотность 0,909 г/см³) в количестве 102 л (соотношение сырье-экстрагент 1:10,2). Полученную смесь перемешивали и посредством стержневого ультразвукового процессора обрабатывали ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 часов. По окончании обработки ультразвуком смесь фильтровали через сукно в сборник. В результате получали 75 л этанольного экстракта с плотностью 0,932 г/см³, которого концентрировали в вакууме до объема 5 л (плотность концентрата 1,114 г/см³). Остаток сырья после экстракции этанолом переносили в экстракционный аппарат, заливали 80 л воды (соотношение сырье-экстрагент 1:8), полученную смесь перемешивали и посредством стержневого ультразвукового процессора обрабатывали ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 часов. По окончании обработки ультразвуком смесь фильтровали через сукно в сборник. В результате получили 78 л водного экстракта с плотностью 0,995 г/см³, который концентрировали в вакууме до объема 4 л (плотность концентрата 1,102 г/см³). Полученные концентраты после этанольной и водной экстракций объединяли (объем объединенного концентрата составил 9 л, плотность 1,112 г/см³), сушили в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60°С и давлении 0,1 атм в течение 8 часов и измельчали на мельнице пропеллерного типа. Таким образом, получили 1,45 кг полупродукта, что составляет 14,5 % от массы растительного сырья. Средство представляет собой рассыпчатый негигроскопичный порошок, темно-коричневого цвета, с горьковатым вяжущим вкусом и специфическим запахом. Потеря массы при высушивании средства составила 4,5 %.

Пример 2. Навеску 10,0 кг хвои сосны стланиковой, предварительно измельченную до размера частиц диаметром 2-3 мм, загружали в экстрактор, удаляли остаточный воздух, выравнивали давление в экстракторе и установке до 0,4 МПа (4 кгс/см²). В экстрактор подавали сжиженный газ (фреон) с рабочим давлением 0,4 МПа, после заполнения подавали газ с давлением 0,8 МПа (8 кгс/см²) и проводили проточную экстракцию в течение 3 часов. По окончании циркуляции хвою сосны стланиковой выгружали из экстрактора и переносили в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревателем и заливали 60 % этанолом (плотность 0,909 г/см³) в количестве 100 л (соотношение сырье-экстрагент 1:10). Полученную смесь перемешивали и посредством стержневого ультразвукового процессора обрабатывали ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 часов. По окончании обработки ультразвуком смесь фильтровали через сукно в сборник. В результате получали 73 л этанольного экстракта с плотностью 0,932 г/см³, которого концентрировали в вакууме до объема 5 л (плотность концентрата 1,111 г/см³). Остаток сырья после экстракции этанолом переносили в экстракционный аппарат, заливали 80 л воды (соотношение сырье-экстрагент 1:8), полученную смесь перемешивали и посредством стержневого ультразвукового процессора обрабатывали ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 часов. По окончании обработки ультразвуком смесь фильтровали через сукно в сборник. В результате получили 80 л водного экстракта с плотностью 0,995 г/см³, который концентрировали в вакууме до объема 4 л (плотность концентрата 1,103 г/см³). Полученные концентраты после этанольной и водной экстракций объединяли (объем объединенного концентрата составил 9 л, плотность 1,111 г/см³), сушили в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60°С и давлении 0,1 атм в течение 8 часов и измельчали на мельнице пропеллерного типа. Таким образом, получили 1,42 кг полупродукта, что составляет 14,2 % от массы растительного сырья. Средство представляет собой рассыпчатый негигроскопичный порошок, темно-коричневого цвета, с горьковатым вяжущим вкусом и специфическим запахом. Потеря массы при высушивании средства составила 4,4 %.

Пример 3. Навеску 10,0 кг хвои сосны стланиковой, предварительно измельченную до размера частиц диаметром 2-3 мм, загружали в экстрактор, удаляли остаточный воздух, выравнивали давление в экстракторе и установке до 0,4 МПа (4 кгс/см²). В экстрактор подавали сжиженный газ (фреон) с рабочим давлением 0,4 МПа, после заполнения подавали газ с давлением 0,9 МПа (9 кгс/см²) и проводили проточную экстракцию в течение 3 часов. По окончании циркуляции хвою сосны стланиковой выгружали из экстрактора и переносили в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревателем и заливали 60% этанолом (плотность 0,909 г/см³) в количестве 98 л (соотношение сырье-экстрагент 1:9,8). Полученную смесь перемешивали и посредством стержневого ультразвукового процессора обрабатывали ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 часов. По окончании обработки ультразвуком смесь фильтровали через сукно в сборник. В результате получали 71 л этанольного экстракта с плотностью 0,932 г/см³, которого концентрировали в вакууме до объема 5 л (плотность концентрата 1,110 г/см³). Остаток сырья после экстракции этанолом переносили в экстракционный аппарат, заливали 80 л воды (соотношение сырье-экстрагент 1:8), полученную смесь перемешивали и посредством стержневого ультразвукового процессора обрабатывали ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 часов. По окончании обработки ультразвуком смесь фильтровали через сукно в сборник. В результате получили 80 л водного экстракта с плотностью 0,995 г/см³, который концентрировали в вакууме до объема 4 л (плотность концентрата 1,104 г/см³). Полученные концентраты после этанольной и водной экстракций объединяли (объем объединенного концентрата составил 9 л, плотность 1,110 г/см³), сушили в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60°С и давлении 0,1 атм в течение 8 часов и измельчали на мельнице пропеллерного типа. Таким образом, получили 1,40 кг полупродукта, что составляет 14,0% от массы растительного сырья. Средство представляет собой рассыпчатый негигроскопичный порошок, темно-коричневого цвета, с горьковатым вяжущим вкусом и специфическим запахом. Потеря массы при высушивании средства составила 4,5 %.

Анализ химического состава средства.

Для изучения химического состава средства была применена микроколоночная ВЭЖХ-УФ на жидкостном хроматографе Милихром А-02 (Эконова, Новосибирск, Россия) с колонкой ProntoSIL-120-5-C18 AQ (2 мм × 75 мм × 5 мкм; Metrohm AG, Herisau, Switzerland); подвижная фаза: 0.2 М LiClO₄ в 0.006 M HClO₄ (А), MeCN (В). Условия градиента (% В): 0-26 мин 5-100%, 26-29 мин 100%; ν 150 мкл/мин; температура колонки 35°С; УФ-детектор, детектор 244 нм. Для получения пробы 20 мг средства переносили в пробирку Эппендорфа (2 мл), приливали 1 мл 60 % этанола и подвергали ультразвуковой обработке (рабочая частота 50 кГц, мощность 100 Вт, 10 мин, 40°С), после чего центрифугировали (6000 g, 20 мин), фильтровали через мембранный фильтр (0.45 мкм) и использовали для анализа (1 мкл).

В результате исследования средства было выявлено присутствие катехинов - катехин (7,60 - 9,20 мг/г), эпикатехин (20,22-21,61 мг/г), эпигаллокатехин (9,36-9,93 мг/г); процианидинов - процианидин В1 (16,33-18,26 мг/г), процианидин С1 (64,22-67,11 мг/г); флавоноидов - изокверцитрин (24,35-25,22 мг/г) (см. таблицу 1). Суммарное содержание фенольных соединений в средстве составило 145,22-150,15 мг/г.

Количественный анализ и показатели качества средства.

Для осуществления химической стандартизации средства разработана методика количественного анализа процианидинов в средстве методом спектрофотометрии. Для чего, аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с ячейками диаметром 1 мм. Навеску в 1 г измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, куда заливают 50 мл 60 % этанола, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 60 мин. После охлаждения извлечение фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл. Извлечение повторяют еще один раз в тех же условиях. Объем объединенного фильтрата доводят до метки 60 % этанолом (раствор А). 300 мкл раствора А переносят в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 50 мл, приливают 2,7 мл 70 % этанола, 18 мл смеси хлористоводородной кислоты и н-бутанола (соотношение 1:19), 600 мкл 2 % раствора железа (III) аммония сульфата в 2 М хлористоводородной кислоте, далее, перемешивают, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане при 80°С в течение 60 мин. После охлаждения раствор переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора до метки раствором сравнения (раствор Б). Оптическую плотность раствора Б измеряют при длине волны 550 нм. Для приготовления раствора сравнения 18 мл смеси хлористоводородной кислоты и н-бутанола (соотношение 1:19) переносят в колбу вместимостью 25 мл, приливают 2,7 мл 70 % этанола, 6 мл 2 % раствора железа (III) аммония сульфата в 2 М хлористоводородной кислоте и перемешивают. Суммарное содержание процианидинов в пересчете на цианидина гидрохлорид в абсолютно сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

,

где D - оптическая плотность исследуемого раствора; m - масса сырья, г; K^V- коэффициент разбавления исследуемого раствора (8333); 136 - удельный коэффициент погашения цианидина гидрохлорида при длине волны 550 нм; W - потеря в массе при высушивании сырья, %.

Метрологический анализ разработанной методики показал, что относительная ошибка определения процианидинов методом спектрофотометрии не превышает 2 % (см. таблицу 2). Полученные результаты свидетельствуют об удовлетворительных валидационных параметрах методик, что указывает на возможность их использования в практике фармакопейного анализа для определения показателей качества разработанного средства.

По данным проведенных исследований определены общие показатели качества средства, обобщенные в таблице 3. Для стандартизации средства было предложено определение внешнего вида, подлинности (присутствие изокверцитрина), потери в массе при высушивании, золы сульфатной, тяжелых металлов, количественное определение процианидинов (спектрофотометрия) и микробиологической чистоты.

Предлагаемое техническое решение позволяет получить препарат постоянного состава с более выраженной активностью за счет более высокого содержания действующих веществ (фенольных соединений). При этом относительно простая схема получения средства способствует рациональному использованию растительного сырья и определяет перспективность внедрения данного способа в фармацевтическую промышленность.

Фармакотерапевтическая эффективность средства при стресс-индуцированном повреждении желудка.

Исследования средства на фармакотерапевтическую эффективность были выполнены на белых крысах линии Wistar с исходной массой 180-200 г. Содержание животных соответствовало «Правилам лабораторной практики» (GLP) и Приказу МЗ РФ № 708Н от 23.08.2010 г. «Об утверждении правил лабораторной практики». Перед началом экспериментов животные, отвечающие критериям включения в эксперимент, распределялись на группы с учетом пола, возраста, массы и принципа рандомизации. Экспериментальную работу осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР №755 от 12.08.77 г.), «Правилами, принятыми в Европейской конвенции по защите позвоночных животных (Страсбург, 1986). Статистическая обработка полученных результатов проводилась с помощью пакета программ «Biostat-2006» с использованием t-критерия Стьюдента. Различия между сравниваемыми группами считали статистически значимыми при р ≤ 0,05. Исследуемое лекарственное средство и препарат сравнения (сок подорожника) в дозе 50 мг/кг вводили внутрижелудочно животным опытных групп в течение 7 дней до проведения исследований. Животные контрольной группы получали очищенную воду в эквивалентном объеме по аналогичной схеме введения исследуемого экстракта. Иммобилизационный стресс моделировали общепринятым методом путем фиксации животных в положении лежа на спине в течение 24 часов.

Результаты исследований показали, что 24-часовая иммобилизация животных вызывает образование деструктивных изменений на слизистой оболочке желудка в виде точечных кровоизлияний, эрозий и полосовидных язв (см. таблицу 4). На фоне курсового введения животным средства среднее число деструкций (точечных кровоизлияний и эрозий) не имело значимого отличия от показателя у контрольных животных, при этом эрозии встречались лишь в 50 % случаев при 75 % поражении в контроле. Индекс Паулса для точечных эрозий у крыс, получавших испытуемое средство, ниже, чем таковой у крыс контрольной группы и животных, получавших сок подорожника, и составляет 0,45 против 0,75 и 0,56, соответственно. О выраженном гастропротективном действии исследуемого средства также свидетельствует отсутствие глубоких деструкций слизистой оболочки желудка - полосовидных язв.

Результаты патоморфологических исследований показали, что иммобилизационный стресс вызывает структурные изменения в слизистой оболочке желудка, характеризующиеся дистрофическими и некротическими процессами в большинстве случаев покровно-ямочного эпителия с его десквамацией, нарушениями микроциркуляции, воспалительной инфильтрацией базальных отделов слизистой оболочке желудка и подслизистой основы. На фоне выраженных дистрофических изменений в слизистой оболочке желудка отмечали значительное количество поверхностных эрозий, локализованных в кардиальном и фундальном отделах желудка, проникающих вглубь на 1/4. Глубоких эрозий не отмечено. У животных опытных групп иммобилизационный стресс вызывал менее выраженные изменения в слизистой оболочке желудка, в виде нарушения микроциркуляции, умеренной воспалительной инфильтрации и дистрофических и некробиотических изменений клеток поверхностно-ямочного эпителия с их десквамацией. Глубина эрозий в слизистой оболочке желудка у животных, получавших средство и препарат сравнения, в 1,7 и 1,6 раза меньше показателя у контрольных животных.

Таким образом, применение средства на основе хвои сосны стланиковой при повреждениях желудка оказывает выраженное гастропротективное действие, предупреждая развитие воспалительных, дистрофических и некротических процессов в стенке желудка. Гастропротективное действие средства превосходит токовой эффект сока подорожника.

Таблица 1 Химический состав средства, мг/г Соединение Средство. Пример 1 Средство. Пример 2 Средство.
Пример 3 Процианидин В1 17,81±0,34 18,26±0,39 16,33±0,33 Катехин 7,60±0,15 9,20±0,18 8,53±0,16 Эпикатехин 21,61±0,43 20,83±0,40 20,22±0,38 Процианидин С1 64,22±1,29 67,11±1,35 65,14±1,31 Эпигаллокатехин 9,93±0,21 9,53±0,18 9,36±0,18 Изокверцитрин 24,35±0,48 25,22±0,56 25,64±0,52 Сумма фенольных соединений 145,52 150,15 145,22

Таблица 2 Метрологические характеристики методики количественного анализа Средство , % S² S_x ±Δ, % E, % Пример 1 8,59 0,0115 0,0438 0,11 1,25 Пример 2 8,73 0,0188 0,0559 0,14 1,57 Пример 3 8,24 0,0135 0,0474 0,12 1,41

Таблица 3 Показатели качества средства Показатель Метод Норма Описание, внешние признаки Визуальный,
органолептический Рассыпчатый негигроскопичный порошок, цвет от коричневого до темно-коричневого, запах специфический, вкус 0,01 % водного раствора - горьковатый вяжущий Подлинность:
- изокверцитрин ВЭЖХ На хроматограмме должен присутствовать пик, совпадающий по подвижности с таковым изокверцитрина Потеря в массе при высушивании Гравиметрический Не более 6 % Зола сульфатная Гравиметрический Не более 0,1 % Тяжелые металлы Спектро-фотометрический Не более 0,01 % Количественное
определение:
процианидины Спектро-фотометрический Не менее 8 % Микробиологическая чистота Бактериологический Категория 3Б Хранение В защищенном от света месте при температуре 12-15°С Срок годности 5 лет

Таблица 4 Влияние средства на выраженность повреждений слизистой оболочки желудка белых крыс при стресс-индуцированном повреждении Индекс Паулса Контроль, n=8 Средство,
n=8 Сок подорожника, n=8 Точечные кровоизлияния 2,10 1,8 1,6 Эрозии 0,75 0,45 0,56 Полосовидные язвы 0,10 - -

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения биологически активного средства гастропротекторного действия. Способ получения биологически активного средства гастропротекторного действия посредством экстракции растительного сырья характеризуется тем, что в качестве сырья используют хвою сосны стланиковой, для чего измельченное сырье экстрагируют протоком сжиженного фреона в условиях повышенного рабочего давления в экстракторе 0,40 МПа, причем фреон подают под давлением 0,7-0,9 МПа, продолжительность проточной экстракции составляет 3 ч, после чего сырье смешивают с 60 % раствором этанола в соотношении сырье:экстрагент 1:(9,8-10,2) и обрабатывают ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 ч, полученный этанольный экстракт концентрируют в вакууме, а остаток растительного сырья смешивают с водой в соотношении сырье:экстрагент 1:8 и обрабатывают ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 ч, полученный водный экстракт концентрируют в вакууме, далее объединяют концентраты после этанольной и водной экстракций, смесь концентратов сушат при температуре 60°С и давлении 0,1 атм в течение 8 ч, полученный сухой остаток измельчают до порошкообразного состояния. Вышеописанный способ обеспечивает получение средства с повышенной гастропротекторной активностью за счет содержащихся в препарате действующих веществ. 4 табл., 3 пр.

Способ получения биологически активного средства гастропротекторного действия посредством экстракции растительного сырья, характеризующийся тем, что в качестве сырья используют хвою сосны стланиковой, для чего измельченное сырье экстрагируют протоком сжиженного фреона в условиях повышенного рабочего давления в экстракторе 0,40 МПа, причем фреон подают под давлением 0,7-0,9 МПа, продолжительность проточной экстракции составляет 3 ч, после чего сырье смешивают с 60 % раствором этанола в соотношении сырье:экстрагент 1:(9,8-10,2) и обрабатывают ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 ч, полученный этанольный экстракт концентрируют в вакууме, а остаток растительного сырья смешивают с водой в соотношении сырье:экстрагент 1:8 и обрабатывают ультразвуком с рабочей частотой 50 кГц и мощностью 100 Вт в импульсном режиме при температуре 75°С в течение 2 ч, полученный водный экстракт концентрируют в вакууме, далее объединяют концентраты после этанольной и водной экстракций, смесь концентратов сушат при температуре 60°С и давлении 0,1 атм в течение 8 ч, полученный сухой остаток измельчают до порошкообразного состояния.