Способ дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6 инфекции у детей Российский патент 2024 года по МПК A61B5/00 G01N33/49 C12Q1/686 

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано для дифференциальной диагностики латентной и активной форм бетагерпесвирусной инфекции человека 6 типа (ВГЧ-6) у детей.

Актуальность герпесвирусных инфекций, в частности ВГЧ-6, обусловлена повсеместной распространенностью среди детского и взрослого населения, полиорганностью поражений, полиморфизмом клинических проявлений, высокой частотой рецидивирующего течения, трудностью лабораторной верификации активной и латентной форм инфекции, отсутствием единых протоколов диагностики и лечения заболеваний. Определить истинную частоту ВГЧ-6 инфекции не представляется возможным ввиду отсутствия учета и регистрации нозологических форм. Согласно Государственному докладу «О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2021 году», инфекционный мононуклеоз, одна из клинических форм ВГЧ-6 инфекции, занимает 7 место среди экономически значимых инфекционных заболеваний, приводя к ущербу в 2,2 млн рублей.

ВГЧ-6 в активной форме является этиологическим фактором в развитии таких инфекционных болезней, как внезапная экзантема, инфекционный мононуклеоз, острый гепатит, менингит, энцефалит. Вирус пожизненно персистирует в мононуклеарных клетках периферической крови в латентной форме с возможностью реактивации. Изучается роль ВГЧ-6 в развитии большого спектра заболеваний (системная красная волчанка, тиреодит Хашимото, болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, синдром хронической усталости, Ходжкинская и неходжкинская лимфомы и др.) в связи с его обнаружением в органах и тканях. Таким образом, в настоящее время представляется актуальной разработка дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6 инфекции у детей с целью предупреждения гипердиагностики и рационального подхода к назначению противовирусной терапии.

Известен способ определения показаний к проведению противогерпетической терапии при инфекции ВГЧ-6 у детей с острыми респираторными заболеваниями - патент RU 2641609. Авторы предлагают использование количественной оценки ДНК вируса в крови методом ПЦР в режиме реального времени; при показателе более 100 копий/10⁵ клеток назначать противовирусную терапию. Однако, исследование кровиметодом количественной ПЦР является более дорогим и трудоемким анализом в сравнении с качественной ПЦР и в настоящее время не применяется рутинно в клинической практике. Трактовка полученных результатов количественной ПЦР затруднена в связи со сложностью в интерпретации и их сопоставимости между собой при использовании разных биологических сред и единиц расчета.

Существует аналогичный способ оценки активности инфекции, вызванной вирусами герпеса 4, 5 и 6 типа у детей (RU 2639593). Использование неинвазивного метода позволяет на основании количества ДНК ВГЧ-6 в соскобе из эпителия ротоглотки (более 10000 копий на 10⁵ клеток) определять активную стадию инфекции. Недостатками являются зависимость от методики забора соскоба медицинским персоналом, использование нестерильной биосреды и возможность персистенции вируса в эпителии ротоглотки и слюнных желез в значимой концентрации без клинических проявлений.

Известен способ диагностики активности сочетанной инфекции у детей с острыми респираторными заболеваниями (RU 2706126), в котором установление активного инфекционного герпесвирусного процесса проводится при наличии ДНК ВГЧ-6 в количестве не менее 10⁴ копий/мл, генотипа А, антител IgM, IgG с индексом авидности менее 40%. Применение указанного диагностического подхода ограничено в практическом здравоохранении в связи с отсутствием скринингового выполнения ПЦР для количественного определения ДНК ВГЧ-6, генотипирования по вариантам А/В, определения индекса авидности специфических антител класса IgM, IgG.

Наиболее близок к данному изобретению способ, описанный группой авторов (М.Ю. Лысенкова, Е.В. Мелехина, Н.В. Каражас, О.А. Свитич, П.А. Веселовский, Т.Н. Рыбалкина, Р.Е. Бошьян, В.В. Косенчук, А.Д. Музыка, А.В. Горелов, Д.В. Усенко, М.Ю. Иванова. Клинико-эпидемиологические особенности ВГЧ-6А- и ВГЧ-6В-инфекции у детей г. Москвы. Детские инфекции. 2019; 18(1): 11-16), где изучалась активность ВГЧ-6 инфекции. Авторы оценивали клинический статус детей с ВГЧ-6 инфекцией (наличие лихорадки, катарального, лимфопролиферативного синдромов, экзантемы, изменений со стороны верхних (ротоглотка) и нижних дыхательных путей (бронхи). Выделены были три группы госпитализированных детей в зависимости от клинических проявлений: с лихорадочным состоянием и катаральным синдромом без гнойного очага инфекции, острым респираторным заболеванием с преимущественным поражением верхних дыхательных путей и фебрильным судорожным приступом, дополнительно в исследовании участвовали клинически здоровые дети. Пациенты разделялись в зависимости от маркеров герпесвирусной инфекции на основании детекции ДНК ВГЧ-6 в крови, обнаружения специфических антител, ранних и поздних антигенов на две группы: с латентной и активнойинфекциями. Недостатком указанной работы является тот факт, что обнаружение ДНК ВГЧ-6 в биосредах качественной ПЦР расценивалось как активная инфекция, без учета возможного обнаружения латентной формы вируса за счет персистенции в мононуклеарах крови после первичного инфицирования, при которой результат анализа также будет положительным. Кроме того, не описан алгоритм лабораторного обследования на маркеры ВГЧ-6 инфекции, а выполнение трех способов диагностики одновременно представляется экономически необоснованным. Таким образом, данный способ не обеспечивает точной и своевременной диагностики.

С целью устранения вышеописанных недостатков авторы предлагают принципиально новый способ дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6 инфекции у детей. Технический результат настоящего изобретения состоит в повышении точности и своевременности диагностики за счет проведения клинико-лабораторного обследования, ПЦР исследования, а именно оценки максимальной выраженности лихорадки во время заболевания, наличия кашля, абсолютного количества нейтрофилов и уровня пороговых циклов амплификации (cycle threshold, Ct) ДНК ВГЧ-6 в цельной крови методом качественной ПЦР. Полученные значения вносят в формулы расчета линейной дискриминантной функции (ЛДФ):

ЛДФ1 (латентная ВГЧ-6 инфекция):

42,7×Х1-49,2×Х2-6,2×Х3+5,2×Х4-865 ЛДФ2 (активная ВГЧ-6 инфекция):

45Д×Х1-53×Х2-6,7×Х3+4,7×Х4-940

где XI - максимальная выраженность лихорадки, измеряемая в градусах Цельсия;

Х2 - наличие кашля: нет - 0, есть - 1;

Х3-абсолютное количество нейтрофилов, ×10⁹/л;

Х4 - пороговые циклы амплификации ДНК ВГЧ-6;

сравнивают значения показателей ЛДФ1 и ЛДФ2: при ЛДФ1>ЛДФ2 диагностируют латентную форму ВГЧ-6 инфекции, а при ЛДФ2>ЛДФ1 - активную.

Авторы, профессионально занимаясь диагностикой и лечением детей с различной инфекционной патологией, в том числе вызванной ВГЧ-6, обратили внимание на частую детекцию ДНК ВГЧ-6 в цельной крови у детей как при наличии респираторного синдрома, так и без клинических проявлений острой инфекционной патологии. В связи с этим фактом, авторами впервые предложено выполнять комплексную оценку клинико-лабораторных показателей, включающих максимальную выраженность лихорадки, наличие кашля, абсолютное число нейтрофилов и уровень порогового цикла амплификации ДНК ВГЧ-6 в цельной крови методом качественной ПЦР.

Авторами впервые установлена высокая диагностическая способность оценки порогового цикла амплификации. Авторы оценивают результаты качественной ПЦР не категориально (отрицательный или положительный результат), а используют значения пороговых циклов амплификации ДНК ВГЧ-6. Пороговый цикл амплификации - это значение, при котором пороговая линия пересекает только S-образные (сигмообразные) кривые накопления сигнала в опытных образцах и контролях. Показатель Ct отражает количество циклов амплификации до момента начала детекции ДНК вируса в образце: низкое значение Ct свидетельствует о большом количестве вируса и, соответственно, выделенной вирусной ДНК в образце биопробы, а, следовательно, высокой вирусной нагрузке; высокие показатели Ct, напротив, говорят о низкой вирусной нагрузке.

Авторами впервые доказано, что использование совокупности клинико-лабораторных параметров, а именно: максимальное значение лихорадки, наличие кашля, абсолютное число нейтрофилов и уровень порогового цикла амплификации ДНК ВГЧ-6 в цельной крови методом качественной ПЦР, с последующим расчетом ЛДФ1 и ЛДФ2, позволяет диагностировать латентную и активную форму ВГЧ-6 инфекции с высокой долей вероятности (93,75%).

Авторы доказали, что использование данного способа дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6 инфекции у детей позволяет на основании клинических (выраженность лихорадки, наличие кашля) и лабораторных показателей (абсолютное число нейтрофилов, значение порогового цикла амплификации ДНК ВГЧ-6) верифицировать активную и латентную формы ВГЧ-6 инфекции, не используя дополнительные лабораторные и инструментальные обследования.

В доступной нам литературе подобных способов дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6 инфекции у детей не обнаружено, а совокупность предложенных клинических и лабораторных признаков, новизна, неочевидность и эффективность позволяют нам представить способ, как заявочный материал на изобретение.

На базе Федерального государственного бюджетного учреждения «Детский научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства» (ФГБУ ДНКЦИБ ФМБА России) в период с 2019 г. по 2022 г. было выполнено исследование. Группу наблюдения составили 112 пациента в возрасте от 1 месяца до 17 лет 11 месяцев 29 дней. Критерием включения являлось обнаружение ДНК ВГЧ-6 в цельной крови методом качественной ПЦР с использованием наборов производства ФГУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (Россия) с последующим анализом уровней пороговых циклов амплификации. Пациенты обращались в клинику экстренно или планово взависимости от тяжести состояния и наблюдались до выписки из стационара. Для оценки выраженности воспалительных маркеров выполнен клинический анализ крови на гематологическом анализаторе Sysmex ХР-300 (Япония).

Для дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6А/В инфекции у детей использовался дискриминантный анализ с использованием пакета программ по статистической обработке данных Statistica. В качестве переменной отклика взята дихотомическая переменная: 1 - латентная ВГЧ-6 инфекция (n=89), 2 - активная ВГЧ-6 инфекция (n=23). В качестве активной инфекции, «золотого стандарта», взята группа детей с внезапной экзантемой и выделенной ДНК ВГЧ-6 в цельной крови методом ПЦР, так как данное заболевание развивается при первичном инфицировании вирусом. В качестве потенциальных предикторов разделения форм ВГЧ-6 инфекции в исходную обучающую модель рассматривалось 27 признаков, включая клинико-анамнестические и параклинические данные. Построение дискриминантной модели осуществлялось методом пошагового включения предикторов с использованием F-критерия Фишера; величина критерия F принималась равной 4,0, нижняя граница толерантности - 0,01. При всех видах статистического анализа использовали критическое значение уровня значимости р<0,05. Из анализируемых признаков авторы выбрали 4 параметра, имеющие наибольшие достоверные различия в сравниваемых группах - р<0,0001. Перечень предикторов представлен в таблице 1.

В результате рассчитана статистически значимая (р<0,001) и классификационно способная на 93,75% модель дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6 инфекции у детей, учитывающая выраженность лихорадки, наличие кашля, абсолютное число нейтрофилов и значение пороговых циклов амплификации ДНК ВГЧ-6. Продемонстрированы высокие показатели квалификационной способности модели, которые составили 94,4% при латентной ВГЧ-6 инфекции и 91,3% - при активной (табл. 2).

Способ осуществляется следующим образом. При обращении за медицинской помощью амбулаторно или поступлении в стационар ребенка с подозрением на активную ВГЧ-6 инфекцию (лихорадка, катаральный, лимфопролиферативный синдромы, клинические проявления внезапной экзантемы, инфекционного мононуклеоз, наличие рекуррентных респираторных инфекций и инфицированность ВГЧ-6 в анамнезе) осуществляются клинический анализ крови на гематологическом автоматизированном анализаторе, способном дифференцировать лейкоцитарный пул на 3 или 5 популяций, с оценкой абсолютного содержания нейтрофилов и исследование цельной крови методом ПЦР с регистрацией значения пороговых циклов амплификации ДНК ВГЧ-6. Подставляя значения предикторных признаков у конкретного больного в формулы ЛДФ1 и ЛДФ2, проводится решение уравнений. Больного следует отнести в ту группу, для которой значение ЛДФ оказалось большим.

Данный способ проиллюстрирован клиническими случаями ВГЧ-6 инфекции у детей, госпитализированных в Клинику ДНКЦИБ с подозрением на активную герпесвирусную инфекцию.

Пример 1.

Девочка В., 1 год 3 месяца, поступила в Клинику ДНКЦИБ 27.08.2022 на 2 день заболевания с жалобой на стойкую лихорадку до 39,5°С, с низким эффектом на жаропонижающие препараты. Ранний анамнез: хориоамнионит, длительный безводный период; растет и развивается по возрасту. При поступлении состояние средней тяжести, девочка вяловата, капризна. При объективном осмотре отмечались укусы комаров на лице, спине, нижних конечностях, гиперемия зева. Катаральный синдром не выражен, кашель отсутствовал (значение предиктора «0»). По остальным органам и системам без особенностей. В клиническом анализе крови показатели не превышали референсных значений, абсолютное значение нейтрофилов составило 2,0*10⁹/л. В связи с раннимвозрастом ребенка, отсутствием катаральных, диспепсических проявлений, заподозрена первичная ВГЧ-6 инфекция. Исследование цельной крови методом ПЦР на ДНК ВГЧ-6 было положительным, со значением порогового цикла амплификации ДНК ВГЧ-6 - 28. Полученные значения внесены в формулы:

ЛДФ1=42,7×39,5-49,2×0-6,2×2,0+5,2×28-865=954,85

ЛДФ2=45,1×39,5-53×0-6,7×2,0+4,7×28-940=959,65

ЛДФ2>ЛДФ1, следовательно, имеет место активная ВГЧ-6 инфекция с вероятностью 91,3%. Назначен интерферон а-2р в форме ректальных свечей с противовирусной целью. Дальнейшее динамическое наблюдение подтвердило наше предположение. На 5 день болезни отмечалось купирование лихорадки с последующим появлением мелкой пятнисто-папулезной сыпи на туловище, без кожного зуда. При лабораторном обследовании уровень С-реактивного белка (СРБ) в сыворотке крови был в норме (2,2 мг/л). В общем анализе мочи не выявлено воспалительных изменений. Исследование отделяемого из носоглотки на респираторные вирусы методом ПЦР (РНК респираторно-синцитиального вируса (PC-вируса), вирусов парагриппа 1-4 типов, коронавируса, метапневмовируса, риновируса, гриппа А, В, а также ДНК аденовируса и бокавируса) было отрицательным. Ребенок осмотрен врачом-оториноларингологом, данных за ЛОР-патологию выявлено не было. Девочка выписана на 7 день болезни в удовлетворительном состоянии, активная, без лихорадки и катарального синдрома. Выставлен заключительный клинический диагноз: Внезапная экзантема, средней степени тяжести. Таким образом, данный пример подтверждает дифференциально-диагностическое значение предложенного способа, позволившего на ранних сроках госпитализации верно установить форму ВГЧ-6 инфекции и назначить противовирусную терапию.

Пример 2.

Мальчик М., 4 года 7 месяцев, поступил в стационар планово 08.11.2022 в связи с частыми респираторными инфекциями, протекающими преимущественно с поражением верхних дыхательных путей, для обследования и подбора терапии. Ребенок состоит на диспансерном учете у врача-оториноларинголога с диагнозом: гипертрофия аденоидов 3 степени. Ранее при амбулаторном обследовании выявлена инфицированность ВГЧ-6, в клиническом анализе крови регистрировался моноцитоз. При поступлении состояние мальчика удовлетворительное, самочувствие не нарушено, температура тела в пределах нормы (значение предиктора «36,6»). Отмечалось затруднение носового дыхания, обусловленное гипертрофией аденоидов, в остальном - без особенностей. Кашель не беспокоил (значение предиктора «0»), лимфопролиферативный синдром не выражен. В клиническом анализе крови зафиксирован тромбоцитоз до 595*10⁹/л и повышение скоростиоседания эритроцитов (СОЭ) до 15 мм/ч, абсолютное значение нейтрофилов было в пределах нормы (2,0*10⁹/л). В общем анализе мочи на выявлено воспалительных изменений. В посевах отделяемого из носо- и ротоглотки на микрофлору отмечался рост нормобиоты. Учитывая анамнестические данные, для исключения реактивации герпесвирусов выполнено исследование цельной крови на ДНК ВГЧ-6, вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) и цитомегаловируса (ЦМВ) методом ПЦР: обнаружена ДНК ВГЧ-6, значение порогового цикла амплификации - 33. При обследовании крови методом ИФА на специфические антитела класса IgM, IgG к герпесвирусам, получены следующие результаты: обнаружены IgG к ВГЧ-6, ЦМВ, капсидному антигену ВЭБ. Антитела IgM к ЦМВ, капидному антигену ВЭБ, IgG к раннему антигену ВЭБ не выявлены. Полученные данные свидетельствуют об инфицированности герпесвирусами 4-6 типов. Учитывая положительный результат ПЦР на ДНК ВГЧ-6, заключительный клинический диагноз трактовался как, персистирующая ВГЧ-6 инфекция в стадии активации. Ребенку была назначена противовирусная терапия интерфероном α-2β на 10 дней с последующим приемом меглюмина акридонацетата в течение 23 дней.

Ретроспективно выполнен расчет по формулам:

ЛДФ1=42,7×36,6-49,2×0-6,2×2,0+5,2×33-865=857,02

ЛДФ2=45,1×36,6-53×0-6,7×2,0+4,7×33-940=852,36

ЛДФ1>ЛДФ2, с вероятностью 94,4% имела место латентная форма ВГЧ-6 инфекции.

Данный пример демонстрирует, что, согласно предложенной дискриминантной модели, вероятность активной ВГЧ-6 инфекции была крайне низка (5,6%) и при ее использовании возможно было избежать длительного курса противовирусной терапии.

Пример 3.

Девочка С., 2 года 10 месяцев, госпитализировалась в Клинику ДНКЦИБ 05.01.2020 на 2 день заболевания с жалобами на стойкую лихорадку до 39,0°С, с кратковременным эффектом на жаропонижающие препараты, кашель, ринорею. Ранний анамнез - без особенностей, привита согласно Национальному календарю профилактических прививок, за исключением ежегодной вакцинации против гриппа (добровольный отказ родителей). Объективный статус при поступлении: состояние средней тяжести, вяловата, сознание ясное. Отмечались умеренная гиперемия зева, слизистый ринит, периодический малопродуктивный кашель, увеличение переднешейной группы лимфатических узлов до 1,5 см в диаметре, эластичные, безболезненные. Аускультативно дыхание жесткое, проводилось равномерно во все отделы, хрипы не выслушивались. По остальным органам и системам без особенностей. В клиническом анализе крови отмечались тромбоцитоз до 622*10⁹/л, палочкоядерный нейтрофилез до 15% на фоне нормального абсолютного числанейтрофилов (3,8*10⁹/л), повышение СОЭ до 26 мм/ч. В связи с лимфопролиферативным синдромом, назначено исследование цельной крови на ДНК ВЭБ, ЦМВ, ВГЧ-6 методом ПЦР: детекция ДНК ВГЧ-6, значение порогового цикла амплификации - 33. Полученные значения внесены в формулы расчета ЛДФ: ЛДФ 1=899,14, ЛДФ2=898,54. ЛДФ1>ЛДФ2, что позволило диагностировать латентную форму ВГЧ-6 инфекции. Продолжен диагностический поиск. Девочка осмотрена ЛОР-врачом, диагностирован острый ринофарингит. В общем анализе мочи не было обнаружено патологических изменений. В биохимическом анализе крови уровень СРБ оставался в пределах нормы (4 мг/л). ПЦР-исследование отделяемого из носоглотки на респираторные вирусы детектировало РНК вируса гриппа А, что явилось этиологическим патогеном в данном случае. В посевах отделяемого из носо-, ротоглотки на микрофлору зафиксирован рост нормобиоты. На отделении девочка получала инфузионную, противовирусную с использованием умифеновира, патогенетическую и симптоматическую терапии. Ребенка выписали на 7 день с клинико-лабораторным улучшением в виде купирования лихорадки, катарального синдрома, нормализации показателей гемограммы. Выставлен заключительный основной клинический диагноз: Грипп А, средней степени тяжести, сопутствующий: ВГЧ-6, латентная. Данный пример демонстрирует важность дифференциальной диагностики активной и латентной форм ВГЧ-6 инфекции, при наличии последней - необходимость продолжения диагностического поиска, что позволит верно установить этиологию заболевания и назначить терапию.

Использование способа дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6 инфекции у детей позволяет верифицировать их на любом этапе оказания медицинской помощи, не используя дополнительные лабораторные и инструментальные обследования. Данная комбинация показателей (выраженность лихорадки, наличие кашля, абсолютное число нейтрофилов, значение порогового цикла амплификации ДНК ВГЧ-6) обеспечивает точность диагностики, является уникальной и простой в применении. Предлагаемое изобретение помогает снизить гипердиагностику активной формы ВГЧ-6 инфекции у детей и своевременно назначить противовирусную терапию, избегая длительных и необоснованных курсов.

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано для дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6 инфекции у детей. Проводят клинико-лабораторное обследование, ПЦР-исследование. Определяют: максимальную выраженность лихорадки во время заболевания, наличие кашля, абсолютное количество нейтрофилов и значение пороговых циклов амплификации ДНК ВГЧ-6 в цельной крови методом ПЦР. Полученные значения вносят в формулы расчета линейной дискриминантной функции: ЛДФ1 - латентная ВГЧ-6 инфекция: 42,7×Х1-49,2×Х2-6,2×Х3+5,2×Х4-865, ЛДФ2 - активная ВГЧ-6 инфекция: 45,1×Х1-53×Х2-6,7×Х3+4,7×Х4-940, где X1 - максимальная выраженность лихорадки, измеряемая в градусах Цельсия; Х2 - наличие кашля: нет - 0, есть - 1; Х3 - абсолютное количество нейтрофилов, ×10⁹/л; Х4 - пороговые циклы амплификации ДНК ВГЧ-6. Сравнивают значения показателей ЛДФ1 и ЛДФ2. При ЛДФ1>ЛДФ2 диагностируют латентную форму ВГЧ-6 инфекции, а при ЛДФ2>ЛДФ1 - активную. Способ обеспечивает возможность повышения точности и своевременности диагностики за счет проведения клинико-лабораторного обследования, ПЦР-исследования, а именно оценки максимальной выраженности лихорадки во время заболевания, наличия кашля, абсолютного количества нейтрофилов и уровня пороговых циклов амплификации (cycle threshold, Ct) ДНК ВГЧ-6 в цельной крови методом качественной ПЦР. 2 табл., 3 пр.

Способ дифференциальной диагностики латентной и активной форм ВГЧ-6 инфекции у детей, включающий клинико-лабораторное обследование, ПЦР-исследование, отличающийся тем, что определяют: максимальную выраженность лихорадки во время заболевания, наличие кашля, абсолютное количество нейтрофилов и значение пороговых циклов амплификации ДНК ВГЧ-6 в цельной крови методом ПЦР, полученные значения вносят в формулы расчета линейной дискриминантной функции:

ЛДФ1 - латентная ВГЧ-6 инфекция:

42,7×Х1-49,2×Х2-6,2×Х3+5,2×Х4-865,

ЛДФ2 - активная ВГЧ-6 инфекция:

45,1×Х1-53×Х2-6,7×Х3+4,7×Х4-940,

где X1 - максимальная выраженность лихорадки, измеряемая в градусах Цельсия;

Х2 - наличие кашля: нет - 0, есть - 1;

Х3 - абсолютное количество нейтрофилов, ×10⁹/л;

Х4 - пороговые циклы амплификации ДНК ВГЧ-6;

сравнивают значения показателей ЛДФ1 и ЛДФ2: при ЛДФ1>ЛДФ2 диагностируют латентную форму ВГЧ-6 инфекции, а при ЛДФ2>ЛДФ1 - активную.