Способ определения выраженности хронического эндометрита Российский патент 2024 года по МПК G01N33/53 G01N33/48 A61B5/00 

Область техники

Изобретение относится к области медицины, а именно к патологической анатомии, репродуктологии, акушерству и гинекологии и может быть использовано для выявления хронического эндометрита (ХЭ) у женщин с аномальным маточным кровотечением в анамнезе, расстройством впоследствии менструального цикла маточного генеза на основании оценки маркеров хронического персистирующего воспаления эндометрия с наличием плазматических клеток, а так же для определения нарушения местного клеточного иммунитета с целью специфической диагностики эндометриального фактора аномального маточного кровотечения и расстройств менструального цикла, ассоциированного с ХЭ.

Предшествующий уровень техники

Под термином аномальное маточное кровотечение (АМК), подразумевается любое маточное кровотечение, выходящее за рамки нормальной менструации женщины репродуктивного возраста. По данным ряда популяционных исследований распространенность АМК достигает 35% и более [19,20,21,23]. Такие различия в частоте встречаемости обусловлены определенными особенностями патогенеза маточных кровотечений в репродуктивном периоде жизни женщины. Более, чем половина женщин репродуктивного возраста сталкивается с АМК хотя бы один раз в жизни, в то время, как только четверть из них обращаются за врачебной помощью.

Одной из причин аномального маточного кровотечения является ХЭ, по классификации FIGO (PALM-COEN) - АМК -Е. Предиктором АМК -Е следует считать хронический эндометрит.Распространенность данного заболевания у женщин репродуктивного возраста колеблется в широких пределах, что связано с определенными трудностями диагностики, латентным течением и скрытой клинической картиной [2,10-14].

Распространенность ХЭ в женской популяции соответствует 24,4% [1-4]. У пациенток репродуктивного периода этот показатель варьирует от 8% до 72% случаев, а у бесплодных пациенток - достигает 55,7% [2,15-16,24]. В России хроническое воспаление слизистой оболочки матки встречается от 15 - 80% наблюдений. Большую часть пациенток с хроническим эндометритом составляют женщины в фертильном периоде (88%).

ХЭ является наиболее частой причиной аномальных маточных кровотечений и других расстройств менструации. Об этом достоверно свидетельствует высокая распространенность ХЭ среди пациенток с АМК, достигающая от 3-10% и до 72%, или других ВЗОМТ, вызванных инфекциями, передаваемыми половым путем (ИППП) [5,19,20].

В источниках представлено множество патогенетических сценариев АМК на фоне ХЭ и ассоциированных с ним негативных репродуктивных исходов: персистирующее воспаление базально-эндометриального компартмента изменения в популяциях иммунокомпетентных клеток в эндометрии, на фоне высокой экспрессии провоспалительных цитокинов, негативного влияния на децидуализацию эндометрия [2-3]. Особое значение отводится изменению локального гемостаза, рецепции к половым стероидным гормонам, нарушению паттерна паракринных факторов и нарушению адгезии [17-18]. Таким образом, ХЭ нарушает децидуализацию, инициирует резистентность к прогестерону, в то же время нарушая баланс факторов адгезии [6-9]. Перечисленные аномалии эндометриальной среды становятся причиной повышенного пролиферативного потенциала при сниженной способности к дифференцировке, асинхронной перистальтики матки, что является причиной аномальных маточных кровотечений, а также вызывая дальнейшие нарушения менструального цикла. На сегодняшний день методы диагностики АМК у пациенток с верифицированным ХЭ далеки от идеала, поскольку не имеют специфичных маркеров. Все вышеизложенное определяет актуальность выбранной темы, свидетельствует о необходимости разработки новых способов диагностики и прогнозирования исходов нарушения менструального цикла у пациенток, страдающими АМК.

Существует способ диагностики ХЭ, описанный в патенте РФ 2236013 от 10.09.2004 года, сущность которого заключается в том, что с помощью иммуногистохимического (ИГХ) окрашивания срезов эндометриальной ткани определяют показатели местного иммунитета: количество лимфоцитов, экспрессирующих маркеры естественных киллерных клеток, CD56+, CD16+ и маркеры активации HLA-DR(II)+, и тем самым диагностируют различные варианты течения ХЭ.

Недостатком данного метода является отсутствие комплекса ИГХ оценки ХЭ, отсутствие данных об аномальных маточных кровотечениях и нарушениях менструального цикла эндометриального генеза.

Известен способ диагностики ХЭ у пациенток после прерывания неразвивающейся беременности и с неблагоприятными потерями беременности в анамнезе (патент РФ 2697195 от 18.05.2018 г.). Суть метода заключается в исследовании менструальной крови на содержание в ней эндометриального белка гликоделина. Исследование проводится на 1-2 день менструального цикла. Полученный материал исследуется методом ИФА. Уровень эндометриального гликоделина менее 22,2 мкг/мл говорит о ХЭ.

Недостатком данного метода является отсутствие комплексного определения специфических маркеров, присущих персистирующему воспалительному процессу в эндометрии, а также отсутствие данных об аномальных маточных кровотечениях и последующих нарушениях менструального цикла.

Известен способ диагностики и прогнозирования развития ХЭ у пациенток (патент РФ 2587325 от 20.06.2016 г.). У женщин репродуктивного возраста посредством ИГХ исследования срезов эндометрия, по проценту позитивно окрашенных клеток эндометрия в баллах, определяют показатели локального врожденного иммунитета TLR2, TLR4, TLR9. Полученная ИГХ картина экспрессии TLR2, TLR4, TLR9 совместно с морфологическими данными позволяет диагностировать либо отсутствие ХЭ, либо наличие факторов риска и предрасположенности к его развитию, а также либо наличие и прогрессирование заболевания, либо стадию ремиссии данного состояния; либо наличие длительно персистирующего воспаления эндометрия, течение которого характеризуется развитием склеротических изменений сосудов и фиброзом стромы эндометрия различной степени выраженности.

Недостатком данного метода является отсутствие комплексной ИГХ оценки ХЭ, отсутствие данных об аномальных маточных кровотечениях и нарушениях менструального цикла.

Существует способ определения стадии клинического течения ХЭ, степени активности воспаления и выраженности фиброза с установлением прогноза имплантации и нарушения рецептивности эндометрия, описанный в патенте РФ 2674155 от 27.09.2017 года. Сущность метода заключается в оценке наличия воспалительной лимфоцитарной инфильтрации и определении выраженности фиброза, по количественной оценке, распространенности и наличию его в основных топографических зонах эндометрия в баллах, по сумме которых определяют индексы активности ХЭ и выраженности фиброза, по величине которых выделяют по три стадии активности и клинического течения ХЭ.

Недостатком данного метода является отсутствие системного определения патогномоничных маркеров, присутствующих при хроническом воспалительном процессе в эндометрии, а также ориентация на наличие одного только фиброза, в отсутствие других надежных маркеров, отсутствие данных об аномальных маточных кровотечениях и нарушениях менструального цикла.

Известен способ оценки рецептивности эндометрия в период "имплантационного окна" (патент РФ 2651762, 23.04.2018 г.). Для достижения этой цели исследователи методом пайпель-биопсии эндометрия на 20-23 день менструального цикла проанализировали на основании метода ИГХ с использованием двухэтапного стрептавидин-биотин-пероксидазного метода с демаскировкой антигена и с применением ключевых биомолекул, отвечающих за имплантацию: стандартный набор моноклональных и поликлональных антител ERα в строме, PR в строме, р53 в железах, bcl 2 в строме, CD95 в строме, Ki67 в строме, LIFR в железах, LIF в железах эндометрия. На основании полученных результатов исследования авторы рассчитали прогноз рецептивности эндометрия по формуле: d=-1,389x1+0,022x2-0,044x3-0,019x4+0,041x5+0,006x6+0,015x7-3,248, где x1 - индекс ER/PR в строме эндометрия (баллы H-score для определения ядерной экспрессии ER и PR), х2 - р53 в железах эндометрия (% окрашенных ядер в поле зрения), х3 - bcl 2 в строме эндометрия (% окрашенных ядер в поле зрения), х4 - CD95+ в строме эндометрия (% окрашенных клеток), х5 - Ki67 в строме эндометрия (% окрашенных ядер в поле зрения), х6 - LIF-R в железах эндометрия (баллы H-score), х7 - LIF в железах эндометрия (баллы H-score). При значениях d>0 эндометрий характеризовали как рецептивный, при d≤0 эндометрий характеризуется как нерецептивный.

Недостатками данного метода являлось отсутствие данных об аномальных маточных кровотечениях и нарушениях менструального цикла.

Раскрытие сущности изобретения

Сущность заявляемого способа состоит в заборе биологического материала в виде биопсии на 7-11 день менструального цикла с комплексным патологоанатомическим исследованием забранного биологического материала, включающем гистологическую окраску гематоксилином и эозином, гистохимическую окраску по Маллори с последующим ИГХ исследованием с антителом к CD138 и анализом уровня экспрессии CD138+ плазматических клеток, наличия фиброза и морфометрических показателей артериол: диаметр просвета сосуда (Dпр), площадь просвета сосуда (Sпр). С последующей постановкой диагноза по результатам окрашивания и морфометрических показателей артериол.

При совокупности следующих полученных признаков по результатам окрашивания и измерений: наличие фиброза, площадь просвета артериол (Sпр - мкм2) ≤ 99 мкм² и диаметр просвета артериол (Dпр - мкм) ≤ 7,9 мкм, число CD138 положительных клеток 4 и более диагностируется хронический эндометрит выраженной степени.

При совокупности следующих полученных признаков по результатам окрашивания и измерений: наличие фиброза, площади просвета артериол составляет (Sпр - мкм2) 100 ≤ Sпр ≤ 149 мкм² и диаметре просвета артериол (Dпр - мкм) 8,0 ≤ Dnp ≤ 9,9 мкм, числе CD138 положительных клеток 2 или 3 диагностируется хронический эндометрит умеренной степени выраженности.

При совокупности следующих полученных признаков по результатам окрашивания и измерений: отсутствие фиброза, площади просвета артериол составляет (Sпр - мкм²) 150 ≤ Sпр ≤ 449 мкм² и диаметре просвета артериол (Dпр - мкм) 10,0 ≤ Dпр ≤ 19,9 мкм, числе CD138 положительных клеток не более 1 диагностируется хронический эндометрит слабой степени выраженности.

Осуществление изобретения

Приведенные данные для разработки способа определения выраженности хронического эндометрита получены в результате исследования.

В исследование были включены 95 пациенток в возрасте от 21 до 40 лет (средний возраст составил 29±9,1 год).

Основную группу (n=60) составили пациентки с аномальным маточным кровотечением в анамнезе и другим нарушением менструального цикла (код по МКБ10 N 92.0), имеющие хронические маточные кровотечения в анамнезе и подозрением на наличие ХЭ. Средняя продолжительность хронического маточного кровотечения 2,5±0,5 года.

Группу сравнения (n=35) составили женщины, проходившие плановое диспансерное наблюдение, не имеющие в анамнезе аномального маточного кровотечения и хронических маточных кровотечений, давшие добровольное информированное согласие на участие в исследовании.

Гистологический материал получен методом пайпель - биопсии в среднюю стадию фазы пролиферации менструального цикла (на 7-11 дни). После стандартной гистологической обработки материала приготовленные гистологические препараты были изучены под световым бинокулярным микроскопом DLMB с цифровой камерой и анализатором изображения Leica DM 2500 (Германия). Морфометрический анализ проводили на микрофотографиях с помощью программного обеспечения Image Scope М.

Полученные при морфометрическом исследовании результаты обрабатывали стандартными статистическими методами с использованием программы Statistica 10 for Windows (Stat Soft, США). Статистическую обработку результатов проводили с оценкой вида распределения, определением среднего Me, стандартной ошибки ±se, минимальных и максимальных значений в группах. Попарное сравнение групп проводили с помощью критерия Манна Уитни. Критический уровень значимости принимался равным 0,05.

ИГХ исследование биоптатов эндометрия, взятых методом пайпель - биопсии в среднюю стадию фазы пролиферации менструального цикла (на 7-11 дни), проводилось с использованием двухэтапного стрептавидин-биотин-пероксидазного метода с демаскировкой антигена. ИГХ окрашивание производилось в иммуностейнере Ventana BenchMark ULTRA IHC/ISH (США) на парафиновых срезах по стандартной методике с использованием антител CD138 - CD138/syndecan-1 (В-А38) «Cell-Marque» (США).

Были проведены измерения и анализ показателей архитектоники артериальных сосудов - Dпр - диаметр просвета сосуда, Sпр - площадь просвета сосуда, и получены статистические данные показателей - Dпр - диаметр просвета сосуда, Sпр - площадь просвета сосуда, для диагностики сосудов заявляемым способом.

Клинический пример 1.

Пациентка А., 29 лет, обратилась с жалобами на обильные менструации со сгустками до 9-11 дней в течение 2 лет, из анамнеза - эпизод аномального маточного кровотечения 2 месяца назад. Хламидиоз - пролечен в 2013 г. Беременностей не было. Диагноз: Аномальное маточное кровотечение в анамнезе, нарушение менструального цикла. С целью дифференциальной диагностики был проведен ряд исследований - гормональные исследования крови - в пределах референсных значений, в генетическом исследовании крови на мутации системы гемостаза нарушений не выявлено, по данным УЗИ органов малого таза патологии в полости матки не выявлено. Произведена пайпель-биопсия эндометрия на 8 день 28-дневного менструального цикла.

На основании проведенного комплексного патологоанатомического исследования, включавшего гистологическую окраску гематоксилином и эозином, окраску по Маллори с последующим ИГХ исследованием и морфометрическим анализом, были получены следующие данные: CD138+=6 клеток; площадь просвета сосудов составила 51,0 мкм², диаметр просветов сосудов составил 4,3 мкм. Выявлен фиброз эндометрия при окрашивании по Маллори.

Совокупность признаков свидетельствует о выраженном ХЭ.

Клинический пример 2.

Пациентка М., 35 лет, обратилась с жалобами на посткоитальные кровотечения в течение года, ранее в анамнезе аномальное маточное кровотечение в 29 лет. Гинекологические заболевания: РВ-коагуляция 2013 г. Операции - ручное исследование матки во время родов 2016 г. С целью дифференциальной диагностики был проведен ряд исследований - гормональные исследования крови - в пределах референсных значений, в генетическом исследовании крови на мутации системы гемостаза нарушений не выявлено, по данным УЗИ органов малого таза патологии в полости матки не выявлено. Жидкостная цитология NILM. Произведена пайпель-биопсия эндометрия на 9 день 28-дневного менструального цикла. На основании проведенного комплексного патологоанатомического исследования, включавшего гистологическую окраску гематоксилином и эозином, окраску по Маллори, ИГХ исследование и морфометрический анализ, были получены следующие данные: CD138+ = 0 клеток; площадь просвета сосудов составила 462,0 мкм², диаметр просветов сосудов составил 23,1 мкм. Выявлен фиброз эндометрия при окрашивании по Маллори.

Совокупность признаков свидетельствует о том, что ХЭ маловероятен.

Клинический пример 3.

Пациентка В., 32 года, обратилась с жалобами на скудные кровотечения в середине менструального цикла в течение 3 месяцев. Гинекологические заболевания: отсутствуют. Операции - Кесарево сечение 3 года назад. С целью дифференциальной диагностики был проведен ряд исследований - гормональные исследования крови - в пределах референсных значений, в генетическом исследовании крови на мутации системы гемостаза нарушений не выявлено, по данным УЗИ органов малого таза патологии в полости матки не выявлено. Жидкостная цитология NILM. Произведена пайпель-биопсия эндометрия на 8 день 28-дневного менструального цикла. На основании проведенного комплексного патологоанатомического исследования, включавшего гистологическую окраску гематоксилином и эозином, окраску по Маллори, ИГХ исследование и морфометрический анализ, были получены следующие данные: CD138+=1 клетка; площадь просвета сосудов составила 280,0 мкм2, диаметр просветов сосудов составил 17,2 мкм. Фиброз эндометрия при окрашивании по Маллори не выявлен.

Совокупность признаков свидетельствует о том, что у пациентки есть слабо выраженный ХЭ.

Клинический пример 4.

Пациентка У., 25 лет, обратилась с жалобами на появившиеся посткоитальные кровянистые выделения в течение 8 месяцев. Гинекологические заболевания: хламидиоз, гарднереллез, уреаплазмоз в анамнезе. Операции - нет. С целью дифференциальной диагностики был проведен ряд исследований - гормональные исследования крови - в пределах референсных значений, в генетическом исследовании крови на мутации системы гемостаза нарушений не выявлено, по данным УЗИ органов малого таза патологии в полости матки не выявлено. Жидкостная цитология NILM. Произведена пайпель-биопсия эндометрия на 9 день 28-дневного менструального цикла. На основании проведенного комплексного патологоанатомического исследования, включавшего гистологическую окраску гематоксилином и эозином, окраску по Маллори, ИГХ исследование и морфометрический анализ, были получены следующие данные: CD138+=2 клетки; площадь просвета сосудов составила 110,0 мкм2, диаметр просветов сосудов составил 8,2 мкм. Фиброз эндометрия при окрашивании по Маллори - выявлен.

Совокупность признаков свидетельствует о том, что у пациентки есть ХЭ умеренной степени выраженности.

Источники информации:

1. Толибова Г.Х., Траль Т.Г., Клещев М.А. и др. Эндометриальная дисфункция: алгоритм гистологического и иммуногистохимического исследования. Журн. акушерства и женских болезней. - 2015; 64 (4): 69-77.

2. Радзинский В.Е., Петров Ю.А., Полина М.Л. Хронический эндометрит: современные аспекты // Кубанский научный медицинский вестник. - 2017; No 24 (5). С. 69-74.

3. Оразов М.Р., Михалева Л.М, Семенов П.А. Хронический эндометрит: патогенез, диагностика, лечение и его связь с бесплодием//Клиническая и экспериментальная морфология. - 2020; 9 (2): 16-25. DOI: 10.31088/СЕМ2020.9.2.16-25.

4. Puente Е, Alonso L, Lagana AS, Ghezzi F, Casarin J, Carugno// J. Chronic endometritis: old problem, novel insights and future challenges. Int JFertil Steril. - 2020; 13(4):250-6. DOI: 10.22074/ijfs.2020.5779.

5. Cherng Sh., Young J., Ma H. // The Journal of American Science. - 2008; Vol. 4 (4). - P. 7-9.

6. Kimura F, Takebayashi A, Ishida M, et al. Review: Chronic endometritis and its effect on reproduction// J Obstet Gynaecol Res. - 2019, May; 45(5):951-960. doi: 10.1111/jog.13937. Epub 2019 Mar 6.

7. Creus M., Ordi J. The effect of different hormone therapies on integrin expression and pinopode formation in the human endometrium: a controlled study //Hum. Reprod. - 2003; Vol. 18. - P. 683-693.

8. Haouzi D., Mahmoud K., Fourar M. Identification of new biomarkers of human endometrial receptivity in the natural cycle // Hum. Reprod. - 2009; Vol.24, №1. - P. 198-205.

9. Толибова Г.Х., Траль Т.Г., Айламазян Э.К., Коган И.Ю. Молекулярные механизмы циклической трансформации эндометрия// Журн. акушерства и женских болезней. - 2019; 68 (1): 5-12.

10. Song D, Feng X, Zhang Q, et al. Prevalence and confounders of chronic endometritis in premenopausal women with abnormal bleeding or reproductive failure// Reprod Biomed Online. - 2018; 36:78-83. DOI: 10.1016/j.rbmo.2017.09.008.

11. Zargar M, Ghafourian M Nikbakht R, et al. Evaluating Chronic Endometritis in Women with Recurrent Implantation Failure and Recurrent Pregnancy Loss by Hysteroscopy and Immunohistochemistry// J Minim Invasive Gynecol. - 2020; 27(1): 116-121. DOI: 10.1016/j.jmig.2019.02.016.

12. Kitaya K, Matsubayashi H, Yamaguchi K, Nishiyama R, Takaya Y, Ishikawa T et al. Chronic endometritis: potential cause of infertility and obstetric and neonatal complications// Am J Reprod Immunol. - 2016; 75(1): 13-22. DOI: 10.1111/aji. 12438.

13. Wu D, Kimura F, Zheng L et al. Chronic endometritis modifies decidualization in human endometrial stromal cells// Reprod Biol Endocrinol.-2017; 15: 16.

14. Fan X, Li X, Li Y, Liao J, Chen H, Li Y, Lu GX, Lin G, Gong F. Endometrial CD138 count appears to be a negative prognostic indicator for patients who have experienced previous embryo transfer failure//Fertil Steril. - 2019 Dec; 112(6): 1103-1111. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2019.08.006.

15. Xu Y, Mei J, Diao L, Li Y, Ding L. Chronic endometritis and reproductive failure: Role of syndecan-1// Am J Reprod Immunol. - 2020 Sep; 84(3):el3255. DOI: 10.1111/aji.13255. Epub 2020 Jun 26.

16. Серебренникова К.Г., Арутюнян H.A., Алехин А.И. Диагностика и клинические критерии хронического эндометрита// Гинекология. - 2018; 20 (6):53-59. DOI: 10.26442/20795696.2018.6.180070.

17. Uchida Н, Maruyama Т, Nishikawa-Uchida S, Miyazaki K, Masuda Н, Yoshimura Y. Glycodelin in reproduction// Reprod Med Biol. - 2013 Mar; 14; 12(3):79-84. DOI: 10.1007/sl2522-013-0144-2.

18. Старосветская H.A., Степанов A.A., Степанова И.И., Назимова С.В., Болтовская М.Н. Исследование роли альфа2-микроглобулина фертильности (гликоделина) в репродукции человека//Клиническая и экспериментальная морфология. - 2012; Т. 1. - №1. - С. 8-13.

19. Тамазян Г.В., Серова О.Ф., Лазарев А.П., Болтовская М.Н., Милованов А.П., Седая Л.В., Шутикова Н.В. Оптимизация тактики ведения пациенток в программе экстракорпорального оплодотворения// Эффективная фармакотерапия.- 2014; №38. - С. 18-23.

20. Mikhaleva L., Mikhalev S., Boltovskay M., Starosvetskaya N. Evalyation of cyclic glicodelin production in endometrium of patients with chronic endometritis /. //27th European Congress of Pathology, 5-9 September 2015, Sava Centar, Belgrad, Serbia, Virkhows Archiv, European Journal of Pathology. - 2015; Vol. 467, Supplement 1. - P. 134.

21. Савельева Г.М., Михалев C.A., Коноплянников А.Г., Михалева Л.М., Бабиченко И.И., Болтовская М.Н. Хронический эндометрит - показание для прегравидарной подготовки //Клиническая практика. - 2018; Т. 9. - №2. - С. 36-41.

22. Автандилов Г.Г., Морфометрия в патологии / Г.Г. Автандилов. - М.: «Медицина», 1973. - 248 с.

23. Автандилов Г.Г., Медицинская морфометрия: Руководство / Г.Г. Автандилов. - М.: Медицина, 1990. - 384 с.

24. Михалева Л.М., Болтовская М.Н., Михалев С.А., Бабиченко И.И., Вандышева Р.А.. Клинико-морфологические аспекты эндометриальной дисфункции, обусловленной хроническим эндометритом// Архив патологии - 2017; 6, с. 22-29 https://doi.org/10.17116/patol201779622-29.

Изобретение относится к области медицины, а именно к патологической анатомии, репродуктологии, акушерству и гинекологии, и может быть использовано для выявления выраженности хронического эндометрита (ХЭ). Осуществляют забор биопсии эндометрия на 7-11 день менструального цикла, получают срезы для гистологического исследования с окраской гематоксилином и эозином, с последующей гистохимической окраской по Маллори для диагностики фиброза стромы и иммуногистохимической реакцией с моноклональными антителами к CD138. Степень выраженности хронического эндометрита определяют на основе наличия фиброза в строме функционального слоя эндометрия и морфометрических данных: подсчета числа окрашенных плазматических клеток CD138, диаметра и площади артериальных кровеносных сосудов функционального слоя эндометрия, находящихся в полученном гистологическом препарате. При наличии фиброза, площади просвета артериол (Sпp-мкм2)≤99 мкм² и диаметре просвета артериол (Dпp-мкм)≤7,9 мкм, числе CD138 положительных клеток 4 и более определяют хронический эндометрит выраженной степени. При наличии фиброза, площади просвета артериол составляет (Sпp-мкм²) 100≤Sпp≤149 мкм² и диаметре просвета артериол (Dпp-мкм) 8,0≤Dпp≤9,9 мкм, числе CD138 положительных клеток 2 или 3 определяют хронический эндометрит умеренной степени выраженности. При отсутствии фиброза, площади просвета артериол составляет (Sпp-мкм²) 150≤Sпp≤449 мкм² и диаметр просвета артериол (Dпp-мкм) 10,0≤Dпp≤19,9 мкм, числе CD138 положительных клеток не более 1 определяют хронический эндометрит слабой степени выраженности. Изобретение обеспечивает определение выраженности хронического эндометрита. 4 пр.

Способ определения выраженности хронического эндометрита, включающий забор биопсии эндометрия на 7-11 день менструального цикла, получение срезов для гистологического исследования с окраской гематоксилином и эозином, с последующей гистохимической окраской по Маллори для диагностики фиброза стромы и иммуногистохимической реакцией с моноклональными антителами к CD138, отличающийся тем, что степень выраженности хронического эндометрита определяют на основе наличия фиброза в строме функционального слоя эндометрия и морфометрических данных: подсчета числа окрашенных плазматических клеток CD138, диаметра и площади артериальных кровеносных сосудов функционального слоя эндометрия, находящихся в полученном гистологическом препарате, при этом: при наличии фиброза, площади просвета артериол (Sпp-мкм2)≤99 мкм² и диаметре просвета артериол (Dпp-мкм)≤7,9 мкм, числе CD138 положительных клеток 4 и более определяют хронический эндометрит выраженной степени; при наличии фиброза, площади просвета артериол составляет (Sпp-мкм²) 100≤Sпp≤149 мкм² и диаметре просвета артериол (Dпp-мкм) 8,0≤Dпp≤9,9 мкм, числе CD138 положительных клеток 2 или 3 определяют хронический эндометрит умеренной степени выраженности; при отсутствии фиброза, площади просвета артериол составляет (Sпp-мкм²) 150≤Sпp≤449 мкм² и диаметр просвета артериол (Dпp-мкм) 10,0≤Dпp≤19,9 мкм, числе CD138 положительных клеток не более 1 определяют хронический эндометрит слабой степени выраженности.