Настоящее изобретение относится к производным циклического цианоенона, к фармацевтическим композициям, содержащим производные циклического цианоенона и к производным циклического цианоенона для применения в терапии.
Ядерный фактор, связанный с эритроидом 2 фактор 2 (NRF2 (название гена: NFE2L2), является основным фактором транскрипции основной лейциновой застежки-молнии (bZIP) и представителем семейства Cap-N-Colla (CNC) факиоров транскрипции. Он выступает в качестве мастер-регулятора клеточного ответа на окислительный стресс. Окислительный стресс происходит, когда общее повреждение свободными радикалами, образовавшимися в ответ на физиологический стресс, больше адекватно не нейтрализуется антиоксидантами, что приводит к перокислению липидов и повреждению клеток. Окислительный стресс участвует в разных патологиях, включая нейродегенеративное заболевание, сердечно-сосудистое заболевание, рак, диабет, большинство из которых возрастные.
При нормальных физиологических условиях Kelch-подобный связанный с ECH белок 1 (KEAP1), цитозольный связанный с актином репрессорный белок, поддерживает низкие уровни NRF2 путем промотирования его опосредуемого с помощью CUL3-RBX1 убиквитинирования и последующего разрушения протеасом. При условиях окислительного стресса окисление сульфгидрильных групп специфических цистеинов в KEAP1 или фосфорилирование KEAP1 и/или NRF2 индуцирует KEAP1 к высвобождению NRF2. NRF2, не содержащий KEAP1, стабилизируется и перемещается из цитоплазмы в ядра с помощью двустороннего сигнала локализации ядер, где он трансактивирует экспрессию более 200 средств защиты клеток, восстанавливает и детоксифицирует ферменты, например, гемоксигеназу 1, глутатион-S-трансферазы, ферритин и глутамат-цистеинлигазу. NRF2 связывается с элементом антиоксидантного ответа (ARE), находящимся на регулирующих промотор участках этих генов. Это координирует и повышающе регулирует множество генов, обеспечивая сильный ответ на многие типы клеточных стрессов.
В дополнение к ее роли в ответах на окислительные и электрофильные стрессы показано, что система KEAP-NRF2 регулирует другие ключевые процессы, запускающиеся в ответ на окислительный стресс, в том числе: аутофагию; митофагию; митохондриальную дисфункцию; воспаление; нарушение гомеостаза белка, приводящее к агрегации белка. Поэтому система KEAP1/NRF2, видимо, не только запускает механизмы уменьшения окислительного стресса, но и удаляет поврежденные вследствие окисления белки.
Имеется важное доказательство нарушенной активации Nrf2 при нейродегенеративных заболеваниях/старении, приводящей к дисфункции окислительно-восстановительного гомеостаза, митохондриальной дисфункции, аутофагии. Имеется основанное на фармакологии/генах существенное подтверждающее свидетельство об устранении дисфункции этих механизмов путем активации Nrf2. Показано, что ядерный перенос Nrf2 нарушен при самых разных нейродегенеративных заболеваниях, как показано с помощью контрольных и взятых у пациента с FRDA клеток в базовых условиях и во время окислительного стресса (Abeti et al., Novel Nrf2-Inducer Prevents Mitochondrial Defects and Oxidative Stress in Friedreich’s Ataxia Models. Front. Cell. Neurosci. 2018, 12:188-198).
Показано, что сверхэкспрессия NRF2, ингибирование KEAP1 и малые молекулы - фармакологические активаторы NRF2 обнаруживают защитные эффекты в широком диапазоне моделей нейродегенеративных заболеваний на животных. Клетки с дефицитом Nrf2 и Nrf2 нокаутированные мыши значительно более чувствительны к малонату и 3NP и демонстрируют регулируемую увеличенным элементом антиоксидантного ответа (ARE) транскрипцию, опосредуемую астроцитами. Предварительная активация ARE с помощью трансплантации в полосатое тело сверхэкспрессирующих Nrf2 астроцитов до поражения приводит к очень высокой защите от ингибирования митохондриального комплекса II (Calkins et al., Protection from mitochondrial complex II inhibition in vitro и in vivo by Nrf2-mediated transcription. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2005, 102(1):244-249). Допаминергические нейроны Nrf2 -/- дефицитных мышей более восприимчивы к нейротоксичности MPTP (Burton et al., In vivo modulation of the Parkinsonian phenotype by Nrf2. Neurotoxicology 2006, 27(6):1094-1100; Chen et al., Nrf2-mediated Neuroprotection in the MPTP Mouse Model of Parkinson’s Disease: Critical Role for the Astrocyte. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2009, 106(8): 2933-2938) и 6-OHDA модели на мышах (Jakel et al., 2007). Сверхэкспрессия Nrf2 астроцитами защищает от токсичности MPTP (Chen et al. Nrf2-mediated Neuroprotection in the MPTP Mouse Model of Parkinson’s Disease: Critical Role for the Astrocyte. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2009, 106(8): 2933-2938). Сверхэкспрессия Nrf2 снижает накопление a-синуклеина в области SN (Gan et al., Astrocyte-specific overexpression of Nrf2 delays motor pathology и synuclein aggregation throughout the CNS in the alpha-synuclein mutant (A53T) mouse model. J Neurosci. 2012, 32(49):17775-17778). Дефицит Nrf2 приводит к увеличенной агрегации a-синуклеина, усиленному воспалению и гибели нейронов в модели rAAV-a-синуклеина (Lastres-Becker et al. Repurposing the NRF2 Activator Dimethyl Fumarate as Therapy Against Synucleinopathy in Parkinson's Disease. Antioxid Redox Signal. 2016, 25(2):61-77). Сверхэкспрессия overexpression Nrf2 или его связывающего DNA пантнера димеризации, Maf-S и происходящая посредством RNAi понижающая регуляция Keap1 восстанавливают двигательную активность экспрессирующих a-синуклеин Drosophila. Индуцированная α-синуклеином утрата допаминергических нейронов подавляется сверхэкспрессией Maf-S или гетерозиготностью keap1 (Barone et al. Genetic activation of Nrf2 signalling is sufficient to ameliorate neurodegenerative phenotypes in a Drosophila model of Parkinson's Disease. Dis Model Mech. 2011, 4(5):701-707. Модель AT-Nrf2 (модель амилоидопатии и тауопатии) характеризуется увеличенным содержанием маркеров окислительного стресса/нейровоспаления в головном мозге, дефицитами в LTP и пространственной памяти (Rojo et al., NRF2 deficiency replicates transcriptomic changes in Alzheimer's patients и worsens APP и ТАУ pathology. Redox Biol. 2017, 13:444-451). Инъекция экспрессирующего Nrf-2 лентивирусного вектора в гиппокамп улучшает пространственное обучение и уменьшает астроцитоз в APPxPS-1 Tg модели AD (Kanninen et al. Intrahippocampal injection of a lentiviral vector expressing Nrf2 improves spatial learning in a mouse model of Alzheimer's disease. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009, 106(38):16505-16510).
Текфидера® (диметилфумарат - активный ингредиент монометилфумарата) является слабым активатором Nrf2, который утвержден для лечения рецидивирующе-ремиттирующего рассеянного склероза. Активатор Nrf2 омавелоксолон RTA обеспечивает его первичную концевую точку изменения показателя модифицированной шкалы атаксии Фридрейха (mFARS) по сравнению с плацебо после 48 недель лечения в фазе II исследования лечения атаксии Фридрейха.
Предсказано, что малые молекулы, которые промотируют активацию Nrf2 путем блокирования взаимодействия NRF2-KEAP1 (ингибиторы белок-белок) или имитации окисления сульфгидрильных групп специфических цистеинов KEAP1 (электрофилов), направлены на многие пути, вносящие вклад в дисфункцию нейронов и потери в широком диапазоне нейродегенеративных нарушений, включая следующие: болезнь Альцгеймера; боковой амиотрофический склероз; синдром Дауна; атаксия Фридрейха; лобно-височное слабоумие; болезнь Гентингтона; болезнь Паркинсона (обзор в публикациях Johnson и Johnson, Nrf2--a therapeutic target for the treatment of neurodegenerative diseases. Free Radic Biol Med. 2015, 88(Pt B):253-267; Li et al., Reasonably activating Nrf2: A long-term, effective и controllable strategy for neurodegenerative diseases. Eur. J. Med. Chem. 2020, 185:111862-111880). Прогнозируют, что применение активаторов Nrf2 задержит начало, модифицирует прогрессирование заболевания и/или ослабит симптомы, связанные с этими заболеваниями.
Малые молекулы, которые промотируют активацию Nrf2, известны в данной области техники. См., например, WO 2019/104030 и WO 2019/122265. Несмотря на доступность этих соединений, сохраняется необходимость в других активаторах NRF2, которые безопасны и эффективны.
Одним объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I):
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват,
где:
R1 и R2 все независимо означают H, галоген, C1-C6-алкил, -O-C1-C6-алкил, -NR5-C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил или 3-6-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранные из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил, -OC1-C6-алкил и C3-C6-циклоалкил все независимо необязательно замещены одним или большим количеством галогенов и где указанное гетероциклическое кольцо необязательно замещено одним или большим количеством заместителей, независимо выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил;
или R1 и R2 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют C3-C6-циклоалкил или 3-6-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранные из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2 и где указанный C3-C6-циклоалкил и 3-6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил;
R3 означает H, C1-C6-алкил, C3-C8-циклоалкил, C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил и указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов и где указанный C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R6;
R4 означает NR7R8, NR7C(O)R8, NR7S(O)nR8, CONR9R10, S(O)nNR9R10, C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R11;
или R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют C3-C8-циклоалкалкила или 3-11-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2 и где указанный C3-C8-циклоалкил и 3-11-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R12;
R5 означает H или C1-C6-алкил, необязательно замещенный одним или большим количеством галогенов;
R6 означает галоген, гидроксил, -C1-C6-алкил, -OC1-C6-алкил, -S(O)nC1-C6-алкил, -NR5-C1-C6-алкил, -C6-C10-арил или -OC6-C10-арил, где указанный -C1-C6-алкил необязательно замещен одним или большим количеством галогенов и где указанный -C6-C10-арил и -OC6-C10-арил необязательно замещены 1-4 заместителями R13;
R7 означает H, -C1-C6-алкил, -C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный -C1-C6-алкил и указанный -C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов и где указанный -C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-4 заместителями R13;
R8 означает H, -C1-C6-алкил, -C3-C8-циклоалкил, -C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный -C1-C6-алкил, -C3-C8-циклоалкил,-C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-4 заместителями R13;
R9 означает H, -C1-C6-алкил, -C3-C8-циклоалкил, -C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный -C1-C6-алкил, указанный -C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов и где указанный -C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-4 заместителями R13;
R10 означает H, C1-C6-алкил, C3-C8-циклоалкил, C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил, указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов и где указанный C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R13;
каждый R11 и R12 независимо выбран из группы, включающей:
(1) -C1-C6-алкил,
(2) галоген,
(3) оксогруппу,
(4) -(CH2)pC3-C6-циклоалкил,
(5) -(CH2)pC6-C10-арил,
(6) -(CH2)phet, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N
(7) -(CH2)p-OR14,
(8) -(CH2)p-NR15R16,
(9) -(CH2)p-C(O)NR17R18,
(10) -(CH2)p-S(O)nNR17R18
(11) -(CH2)p-NR17C(O)R18,
(12) -(CH2)p-NR17SO2R18,
(13) -(CH2)p-C(O)R19,
(14) -(CH2)p-S(O)nR19
(15) -(CH2)p-C(O)OR20 и
(16) -(CH2)p-CN;
где указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо все независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -OC1-C6-алкил и -SC1-C6-алкил и где указанный -C1-C6-алкил, -C3-C6-циклоалкил, -OC1-C6-алкил и -SC1-C6-алкил необязательно замещен одним или большим количеством галогенов или одним или большим количеством гидроксилов;
или два заместителя R12 у соседних атомов C3-C8-циклоалкалкила или 3-11-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют конденсированную бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R21;
или два заместителя R12 у одного атома C3-C8-циклоалкалкила или 3-11-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют спироциклическую бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R22;
или два заместителя R12 у разных атомов C3-C8-циклоалкалкила или 3-11-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют мостиковую бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R23;
R13 означает галоген, гидроксил, нитрил, -C1-C6-алкил, -OC1-C6-алкил, -S(O)nR24, -NR25R26, -S(O)nNR25R26, C(O)NR25R26, -OC3-C8-циклоалкил, -C3-C8-циклоалкил, -C6-C10-арил или -OC6-C10-арил, где в каждом случае указанный -C1-C6-алкил и указанный -C3-C8-циклоалкил независимо необязательно замещен одним или большим количеством галогенов и где указанный -C6-C10-арил и -OC6-C10-арил необязательно замещены 1-4 заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, гидроксил, -C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил;
R14 означает H, -C1-C6-алкил или -C3-C8-циклоалкил, указанный -C1-C6-алкил и -C3-C8-циклоалкил необязательно замещен одним или большим количеством галогенов;
R15 означает H или -C1-C6-алкил, необязательно замещенный одним или большим количеством галогенов;
R16 означает H, C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил или 5-8-членный гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил C6-C10-арил и 5-8-членный гетероарил все независимо необязательно замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил;
R17 означает H или C1-C6-алкил, необязательно замещенный одним или большим количеством галогенов;
R18, R19 и R20 все независимо означают H, -C1-C6-алкил, -C2-C6-алкенил, -C2-C6-алкинил, -C3-C6-циклоалкил -C6-C12-арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где указанный -C1-C6-алкил, -C2-C6-алкенил, -C2-C6-алкинил, -C3-C6-циклоалкил -C6-C12-арил и 5-10-членный гетероарил все необязательно независимо замещены одним или большим количеством заместителей R27;
каждый R21, R22 и R23 независимо выбран из группы, включающей H, галоген, гидроксил, -C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил, где указанный -C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил все необязательно независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил и -OC1-C6-алкил;
R24 означает -C1-C6-алкил, -C3-C6-циклоалкил -C6-C10-арил или 5-8-членный гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где указанный -C1-C6-алкил, -C3-C6-циклоалкил -C6-C10-арил и 5-8-членный гетероарил все независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, -C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил;
R25 означает H или -C1-C6-алкил, необязательно замещенный одним или большим количеством галогенов;
R26 означает H, -C1-C6-алкил, -C3-C6-циклоалкил -C6-C10-арил или 5-8-членный гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где указанный -C1-C6-алкил, -C3-C6-циклоалкил -C6-C10-арил и 5-8-членный гетероарил все независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, -C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил;
R27 означает галоген, гидроксил, нитрил, -C1-C6-алкил, -O-C1-C6-алкил, -S-C1-C6-алкил, C(O)NHC1-C6-алкил,
-C3-C6-циклоалкил, -C6-C10-арил, -O-C6-C10-арил, -O-C1-C2-алкил-C6-C10-арил или 5-8-членный гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный -C1-C6-алкил, -C3-C6-циклоалкил -C6-C10-арил и 5-8-членный гетероарил независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, нитрил, -C1-C6-алкил, -OC1-C6-алкил и -N(C1-C6-алкил)2, где указанный -C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил все независимо замещены одним или большим количеством галогенов;
m равно 0, 1 или 2;
каждое n независимо равно 0, 1 или 2 и
каждое p независимо равно 0, 1 или 2;
при условии, что соединение 
исключено.
Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сольват и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
Соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соли или сольваты применимы в терапии. В частности, соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соли или сольваты применимы для лечения или предупреждения заболеваний, опосредуемых активацией Nrf2 у пациента. Сами соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соли или сольваты можно применять, например, для лечения или предупреждения нейродегенеративных заболеваний, воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний или раковых заболеваний у пациента.
Поэтому другим объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват для применения для лечения или предупреждения заболевания, опосредуемого активацией Nrf2 у пациента. Настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвату для применения для лечения или предупреждения неврологического заболевания, воспалительного заболевания, аутоиммунного заболевания или рака у пациента. Настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвату для применения для лечения или предупреждения неврологическое заболевание у пациента. Настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвату для применения для лечения нейродегенеративного заболевания, выбранного из группы, включающей следующие: атаксия Фридрейха, боковой амиотрофический склероз, удар, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, периферическая невропатия и тугоухость у пациента.
Настоящее изобретение также относится к комбинации, содержащей соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сольват и одно, два, три или большее количество других терапевтических средств.
Термины, использующиеся в настоящем изобретении, обладают их обычными значениями и значения таких терминов в каждом случае независимы. Независимо и за исключением иных указаний следующие определения применяются во всем описании и формуле изобретения. Химические названия, обычные названия и химические структуры можно использовать для описания одной и той же структуры взаимозаменяемым образом. Если химическое соединение указано с использованием химической структуры, и химического названия и имеется противоречие между структурой и названием, структура преобладает. Эти определения применимы независимо от использования термина по отдельности или в комбинации с другими терминами, если не указано иное. Следовательно, определение "алкила" относится к "алкилу", а также "алкильным" фрагментам "гидроксиалкила", "галогеналкила", "-O-алкила" и т.п.
При использовании в настоящем изобретении и во всем настоящем изобретении следующие термины, если не указано иное, обладают указанными ниже значениями:
Термин "алкил" при использовании в настоящем изобретении означает алифатическую углеводородную группу, в которой один из ее атомов водорода заменен на связь. Алкильная группа может быть линейной или разветвленной. В одном варианте осуществления алкильная группа содержит от примерно 1 до примерно 6 атомов углерода (C1-C6-алкил). Примеры алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, неопентил, изопентил, н-гексил, изогексил и неогексил. В одном варианте осуществления алкильная группа является линейной. В другом варианте осуществления алкильная группа является разветвленной. Если не указано иное, алкильная группа является незамещенной.
Термин "OC1-C6-алкил" при использовании в настоящем изобретении означает группу, в которой термин "C1-C6-алкил" является таким, как определено выше.
Термин "алкенил" при использовании в настоящем изобретении означает алифатическую углеводородную группу, содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь и в которой один из ее атомов водорода заменен на связь. Алкенильная группа может быть линейной или разветвленной. В одном варианте осуществления алкенильная группа содержит от 2 до 6 атомов углерода (C2-C6-алкенил). Примеры алкенильных групп включают этенил, пропенил, н-бутенил, 3-метилбут-2-енил, н-пентенил, октенил и деценил. Если не указано иное, алкенильная группа является незамещенной.
Термин "алкинил" при использовании в настоящем изобретении означает алифатическую углеводородную группу, содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь и в которой один из ее атомов водорода заменен на связь. Алкинильная группа может быть линейной или разветвленной. В одном варианте осуществления алкинильная группа содержит от 2 до 6 атомов углерода (C2-C6-алкинил). В другом варианте осуществления алкинильная группа содержит от 2 до 3 атомов углерода (C2-C3-алкинил). Примеры алкинильных групп включают этинил, пропинил, 2-бутинил и 3-метилбутинил. Если не указано иное, алкинильная группа является незамещенной.
Термин "арил" при использовании в настоящем изобретении означает ароматическую моноциклическую или полициклическую кольцевую систему. В одном варианте осуществления арильная группа содержит от 6 до12 атомов углерода (C6-C12-арил). В другом варианте осуществления арильная группа содержит от 6 до10 атомов углерода (C6-C10-арил). В одном варианте осуществления арильная группа можно необязательно сконденсирована с циклоалкильной или циклоалканоильной группой. Примеры арильных групп включают фенил и нафтил. В одном варианте осуществления арильная группа означает фенил. Термин "арилоксигруппа" при использовании в настоящем изобретении означает группу, описывающуюся формулой -O-арил, где термин "арил" определен выше в настоящем изобретении.
Термин "циклоалкил" при использовании в настоящем изобретении означает non-ароматическую моно- или полициклическую кольцевую систему. В одном варианте осуществления циклоалкил содержит от 3 до 12 кольцевых атомов углерода (C3-C12-циклоалкил). В другом варианте осуществления циклоалкил содержит от 3 до 8 кольцевых атомов углерода (C3-C8-циклоалкил). В другом варианте осуществления циклоалкил содержит от 3 до 6 кольцевых атомов (C3-C6-циклоалкил). Примеры моноциклических циклоалкилы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Примеры полициклических циклоалкилы включают 1-декалинил, норборнил и адамантил. Кольцевой атом углерода циклоалкильной группы можно функционализировать в виде карбонильной группы. Иллюстративный пример такой циклоалкильной группы (также называющейся в настоящем изобретении, как "циклоалканоильная" группа) включает циклобутаноил:
Термин "галоген" при использовании в настоящем изобретении означает -F, -Cl, -Br или -I.
Термин "галогеналкил" при использовании в настоящем изобретении означает алкильную группу, определенную выше, где один или большее количество атомов водорода алкильной группы заменены на галоген. В одном варианте осуществления галогеналкильная группа содержит от 1 до 6 атомов углерода (C1-C6-галогеналкил). В другом варианте осуществления галогеналкильная группа замещена с помощью от 1 до 3 атомов F. Примеры галогеналкильных групп включают -CH2F, -CHF2, -CF3, -CH2Cl и -CCl3.
Термин "гидроксиалкил" при использовании в настоящем изобретении означает алкильную группу, определенную выше, где один или большее количество атомов водорода алкильной группы заменены группой -OH. В одном варианте осуществления гидроксиалкильная группа содержит от 1 до 6 атомов углерода (C1-C6-гидроксиалкил). Примеры гидроксиалкильных групп включают -CH2OH, -CH2CH2OH, -CH2CH2CH2OH и -CH2CH(OH)CH3.
Термин "5-12-членное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N" при использовании в настоящем изобретении означает ароматическую моноциклическую или бициклическую кольцевую систему, содержащую от 5 до 12 кольцевых атомов, где от 1 до 4 кольцевых атомов независимо представляют собой O, S или N и остальные кольцевые атомы являются атомами углерода. В одном варианте осуществления гетероарильное кольцо представляет собой 5- - 8-членное гетероарильное кольцо, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N. Гетероарильная группа присоединена через кольцевой атом углерода и любой атома азота гетероарила можно необязательно окислить в соответствующий N-оксид. Примеры 5- или 6-членных моноциклических гетероарилов включают пиридил, пиразинил, фуранил, тиенил, пиримидинил, пиридон (включая N-замещенные пиридоны), изоксазолил, изотиазолил, оксазолил, оксадиазолил, тиазолил, пиразолил, фуразанил, пирролил, триазолил, 1,2,4-тиадиазолил, пиразинил, пиридазинил, имидазолил, 1,2,4-триазинил и т.п., и все их изомерные формы. В другом варианте осуществления гетероарил представляет собой ароматическую бициклическую кольцевую систему, содержащую 9 или 10 кольцевых атомов, где от 1 до 3 кольцевых атомов независимо представляют собой O, N или S и остальные кольцевые атомы являются атомами углерода. A 9- или 10-членная бициклическая гетероарильная группа присоединена через кольцевой атом углерода и любой атома азота гетероарила можно необязательно окислить в соответствующий N-оксид. Примеры 9- или 10-членных бициклических гетероарилов включают имидазо[1,2-a]пиридинил, имидазо[2,1-b]тиазолил, бензофуразанил, индолил, азаиндолил, бензимидазолил, бензотиенил, хинолинил, бензимидазолил, хиназолинил, пирролопиридил, имидазопиридил, изохинолинил, бензоазаиндолил, бензотиазолил и т.п., и все их изомерные формы.
Термин "3-11-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2" при использовании в настоящем изобретении означает неароматическую моноциклическую или полициклическую saturated или partially unsaturated кольцевую систему, содержащую от 3 до 11 кольцевых атомов, где от 1 до 4 кольцевых атомов независимо представляют собой O, S или N и остальные кольцевые атомы являются атомами углерода. Гетероциклическое кольцо можно присоединить через кольцевой атом углерода или кольцевой атом азота. В одном варианте осуществления гетероциклическое кольцо является моноциклическим и содержит от 3 до 9 кольцевых атомов. В другом варианте осуществления гетероциклическое кольцо является моноциклическим и содержит от 3 до 6 кольцевых атомов. В другом варианте осуществления гетероциклическое кольцо является бициклическим и содержит от 7 до 11 кольцевых атомов. В еще одном варианте осуществления гетероциклическое кольцо является моноциклическим и содержит 5 или 6 кольцевых атомов. В одном варианте осуществления гетероциклическое кольцо является моноциклическим. В другом варианте осуществления гетероциклическое кольцо является бициклическим. В кольцевой системе не имеется соседних атомов кислорода и/или серы. Любая группа -NH в гетероциклическом кольце может быть защищенной, например, как группа -N(BOC), -N(Cbz), -N(Tos) и т.п.; такие защищенные гетероциклические группы считаются частью настоящего изобретения. Гетероциклическое кольцо также может включать гетероциклическое кольцо, определенное выше, которое сконденсировано с арильным (например, бензольным) или гетероарильным кольцом. Атом азота или серы гетероциклического кольца можно необязательно окислить в соответствующий N-оксид, S-оксид или S, S-диоксид. Примеры моноциклических гетероциклических колец включают оксетанил, пиперидил, пирролидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил, тиазолидинил, 1,4-диоксанил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, дельта-лактам, дельта-лактон, силациклопентан, силапирролидин и т.п. и все их изомеры.
Кольцевой атом углерода гетероциклической группы можно функционализировать, как карбонильную группу. Иллюстративный пример такой гетероциклической группы включает:
В одном варианте осуществления гетероциклическая группа представляет собой 5-членное моноциклическое гетероциклическое кольцо. В другом варианте осуществления гетероциклическая группа представляет собой 6-членное моноциклическое гетероциклическое кольцо. Термин "3-8-членное моноциклическое гетероциклическое кольцо" означает моноциклическое гетероциклическое кольцо, содержащее от 3 до 8 кольцевых атомов. Термин "3-6-членное моноциклическое гетероциклическое кольцо" означает моноциклическое гетероциклическое кольцо, содержащее от 3 до 6 кольцевых атомов. Термин "7-11-членное бициклическое гетероциклическое кольцо" означает бициклическую гетероциклическую кольцевую группу, содержащую от 7 до 11 кольцевых атомов. Если не указано иное, гетероциклическое кольцо является незамещенным.
Термин "замещенный" при использовании в настоящем изобретении означает, что один или большее количество атомов водорода у указанного атома заменены с выбором из указанной группы при условии, что при имеющихся условиях не превышена нормальная валентность атома и что замещение дает стабильное соединение. Комбинации заместителей и/или переменных допустимы только если такие комбинации дают стабильные соединения. "Стабильное соединение" или "стабильная структура" означает соединение, которое достаточно устойчиво, чтобы выдержать выделение из реакционной смеси до приемлемой степени чистоты и превращение в эффективное терапевтическое средство.
Термин "в основном в очищенной форме" при использовании в настоящем изобретении означает физическое состояние соединения после выделения соединения из процедуры синтеза (например, из реакционной смеси), натурального источника или их комбинацию. Термин "в основном в очищенной форме" также означает физическое состояние соединения после получения соединения из процедуры очистки или процедур, описанных в настоящем изобретении, или хорошо известных специалисту в данной области техники (например, хроматография, перкристаллизация и т.п.) в достаточно чистом виде, охарактеризованном по стандартным методикам анализа, описанным в настоящем изобретении или хорошо известным специалисту в данной области техники.
Также следует отметить, что любой атом углерода, а также гетероатом с ненасыщенными валентностями в тексте, на схемах, в примерах и таблицах в настоящем изобретении предполагается содержащим количество атомов углерода, достаточное для насыщения валентности.
Если функциональная группа в соединении называется "защищенной", это означает, что группа находится в модифицированной форме для исключения нежелательной побочной реакции по защищенному центру, если соединение вводят в реакцию. Подходящие защитные группы должны быть известны специалистам с общей подготовкой в данной области техники, а также описаны в стандартных пособиях, таких как, например, T. W. Greene et al., Protective Groups in Organic Synthesis (1991), Wiley, New York.
Если любой заместитель или переменная (например, алкил, R6 и т.п.) встречается более одного раза в любом компоненте или в формуле (I), его определение в каждом случае не зависит от его определения в любом другом случае, если не указано иное.
Термин "композиция" при использовании в настоящем изобретении включает продукт, содержащий указанные ингредиенты в указанных количествах, а также любой продукт, который образуется прямо из комбинации указанных ингредиентов в указанных количествах.
IC50 при использовании в настоящем изобретении означает количество, концентрацию или дозу конкретного исследуемого соединения, которая обеспечивает 50% ингибирование максимального ответа при исследовании, в котором определяют такой ответ.
Термины "субъект" и "пациент" при использовании в настоящем изобретении используются взаимозаменяемым образом. Термины "субъект" и "субъекты" означает млекопитающее, включая не являющихся приматами (например, крупный рогатый скот, свинья, лошадь, кошка, собака, крыса и мышь) и примата (например, обезьяну, такую как макак-крабоед, шимпанзе и человека), и, например, человека. Субъектом также может быть сельскохозяйственное животное (например, лошадь, крупный рогатый скот, свинья и т.п.) или комнатное животное (например, собака или кошка).
Термины "терапевтическое средство" и "терапевтические средства" при использовании в настоящем изобретении означают любое средство (средства), которое можно использовать для лечения или предупреждения нарушения или одного или большего количества его симптомов. Термин "терапевтическое средство" включает соединение, предлагаемое в настоящем изобретении. В некоторых случаях терапевтическое средство может представлять собой средство, которое известно, как применимое, или применялось, или применяется в настоящее время для лечения или предупреждения нарушения или одного или большего количества его симптомов.
Термин "эффективное количество" при использовании в настоящем изобретении означает количество соединения формулы (I) и/или дополнительного терапевтического средства, или содержащей его композиции, которое эффективно для обеспечения желательного терапевтического, облегчающего, подавляющего или предупредительного эффекта при введении пациенту, страдающему от вирусной инфекции или связанного с вирусом нарушения. При комбинированных терапиях, предлагаемых в настоящем изобретении, эффективное количество может относиться к каждому отдельному средству или к комбинации в целом, где количества всех вводимых средств эффективны совместно, но где средство - компонент комбинации может по отдельности не содержаться в эффективном количестве. "Терапевтически эффективное количество" может меняться, в частности, в зависимости от соединения, заболевания и его тяжести, и возраста, массы тела и т.п. подвергающегося лечению субъекта.
Термин "лечить" или "лечение" любого заболевания или нарушения при использовании в настоящем изобретении означает улучшение протекания заболевания или нарушения, которое имеется у субъекта. В некоторых случаях "лечить" или "лечение" включает улучшение по меньшей мере одного физического параметра, который может не ощущаться пациентом. В других случаях "лечить" или "лечение" включает модулирование заболевания или нарушения, физическое (например, стабилизацию проявляющегося симптома), или физиологическое (например, стабилизацию физикального параметра), или и то, и другое. В других случаях "лечить" или "лечение" включает задержку начала заболевания или нарушения.
Термин "предупреждение" при использовании в настоящем изобретении применительно к заболеванию или нарушению, означает уменьшение вероятности или тяжести заболевания или нарушения.
Одним вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R1 означает H, C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил или 3-6-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранные из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил и C3-C6-циклоалкил все независимо необязательно замещены одним или большим количеством галогенов и где указанное гетероциклическое кольцо необязательно замещено одним или большим количеством заместителей, независимо выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R1 означает H или C1-C6-алкил, который необязательно замещен одним или большим количеством галогенов. В другом варианте осуществления R1 означает H. В другом варианте осуществления R1 означает метил. В другом варианте осуществления R1 означает этил.
В другом варианте осуществления R1 означает C3-C6-циклоалкил или 3-6-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранные из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C3-C6-циклоалкил необязательно замещен одним или большим количеством галогенов и где указанное гетероциклическое кольцо необязательно замещено одним или большим количеством заместителей, независимо выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, где R2 означает H, C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил или 3-6-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранные из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил и C3-C6-циклоалкил все независимо необязательно замещены одним или большим количеством галогенов и где указанное гетероциклическое кольцо необязательно замещено одним или большим количеством заместителей, независимо выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R2 означает H или C1-C6-алкил, который необязательно замещен одним или большим количеством галогенов. В другом варианте осуществления R2 означает H. В другом варианте осуществления R2 означает метил. В другом варианте осуществления R2 означает этил.
В другом варианте осуществления R2 означает C3-C6-циклоалкил или 3-6-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранные из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C3-C6-циклоалкил необязательно замещен одним или большим количеством галогенов и где указанное гетероциклическое кольцо необязательно замещено одним или большим количеством заместителей, независимо выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R1 означает H и R2 означает C1-C6-алкил, который необязательно замещен одним или большим количеством галогенов.
В другом варианте осуществления R1 означает H и R2 означает метил.
В другом варианте осуществления R1 означает H и R2 означает этил.
В другом варианте осуществления R1 означает C1-C6-алкил, который необязательно замещен одним или большим количеством галогенов, и R2 означает H.
В другом варианте осуществления R1 означает метил и R2 означает H.
В другом варианте осуществления R1 означает этил и R2 означает H.
В другом варианте осуществления R1 и R2 все независимо означают C1-C6-алкил, который необязательно замещен одним или большим количеством галогенов.
В другом варианте осуществления R1 и R2 оба означают метил.
В другом варианте осуществления R1 означает метил и R2 означает этил.
В другом варианте осуществления R1 означает этил и R2 означает метил.
В другом варианте осуществления R1 и R2 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют циклопропил, циклобутил или циклопентил;
В другом варианте осуществления R1 и R2 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют циклопропил.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, где R3 означает H, C1-C6-алкил, C3-C8-циклоалкил, C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил и указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов и где указанный C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R6.
В другом варианте осуществления R3 означает H, C1-C6-алкил или C3-C8-циклоалкил, где указанный C1-C6-алкил и указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов.
В другом варианте осуществления R3 означает H или C1-C6-алкил, который необязательно замещен одним или большим количеством галогенов.
В другом варианте осуществления R3 означает H или метил, который необязательно замещен одним или большим количеством галогенов.
В другом варианте осуществления R3 означает C3-C8-циклоалкил, который необязательно замещен одним или большим количеством галогенов.
В другом варианте осуществления R3 означает C6-C10-арил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R6.
В другом варианте осуществления R3 означает фенил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R6.
В другом варианте осуществления R3 означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, указанное гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R6.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, где R4 означает NR7R8, NR7C(O)R8, NR7S(O)nR8, CONR9R10 или S(O)nNR9R10, где R7-R10 и n являются такими, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7R8 или NR7C(O)R8, где R7 и R8 являются такими, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7S(O)nR8, где R7, R8 и n являются такими, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает CONR9R10 или S(O)nNR9R10, где R9, R10 и n являются такими, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7R8, где R7 и R8 независимо означают H или C1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7R8, где R7 означает H или C1-C6-алкил и R8 означает C1-C6-алкил, C3-C8-циклоалкил, C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил и указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов и где указанный C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R11, где R11 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7R8, где R7 означает H или C1-C6-алкил
и R8 означает C1-C6-алкил или C3-C8-циклоалкил, где указанный C1-C6-алкил и указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7R8, где R7 означает H или C1-C6-алкил
и R8 означает C6-C10-арил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R11, где R11 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7R8, где R7 означает H или C1-C6-алкил
и R8 означает 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, указанное гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R11, где R11 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7C(O)R8, где R7 и R8 независимо означают H или C1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7C(O)R8, где R7 означает H или C1-C6-алкил и R8 означает C1-C6-алкил, C3-C8-циклоалкил, C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил и указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов и где указанный C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R11, где R11 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7C(O)R8, где R7 означает H или C1-C6-алкил
и R8 означает C1-C6-алкил или C3-C8-циклоалкил, где указанный C1-C6-алкил и указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7C(O)R8, где R7 означает H или C1-C6-алкил
и R8 означает C6-C10-арил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R11, где R11 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7C(O)R8, где R7 означает H или метил
и R8 означает C6-C10-арил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R11, где R11 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7C(O)R8, где R7 означает H или метил
и R8 означает фенил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R11, где R11 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает NR7C(O)R8, где R7 означает H или C1-C6-алкил
и R8 означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, указанное гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R11, где R11 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает C(O)NR9R10, где R9 и R10 независимо означают H или C1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R4 означает C(O)NR9R10, где R9 и R10 независимо означают H или метил.
В другом варианте осуществления R4 означает C(O)NR9R10, где R9 означает H или C1-C6-алкил и R10 означает C1-C6-алкил, C3-C8-циклоалкил, C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил и указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов и где указанный C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R11, где R11 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает S(O)nNR9R10, где R9 и R10 независимо означают H или C1-C6-алкил и n является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает S(O)nNR9R10, где R9 и R10 независимо означают H или метил и n является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает S(O)nNR9R10, где R9 означает H или C1-C6-алкил и R10 означает C1-C6-алкил, C3-C8-циклоалкил, C6-C10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2; где указанный C1-C6-алкил и указанный C3-C8-циклоалкил необязательно независимо замещены одним или большим количеством галогенов и где указанный C6-C10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R11, где n и R11 являются такими, как определено выше.
В другом варианте осуществления R4 означает C6-C10-арил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R11.
В другом варианте осуществления R4 означает фенил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R11.
В другом варианте осуществления R4 означает 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, указанное гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R11.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, где R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют C3-C8-циклоалкалкила или 3-11-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2 и где указанный C3-C8-циклоалкил и 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R12 выбран из группы, включающей гидроксил, -C1-C6-алкил, -C(O)O-C1-C6-алкил, -C(O)-C1-C6-алкил, -C(O)-C3-C6-циклоалкил, -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -S(O)2-C6-C10-арил, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют C3-C8-циклоалкил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют циклопентил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют циклогексил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют 3-11-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2 и где указанное 3-11-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2 и где указанное 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R12 выбран из группы, включающей гидроксил, -C1-C6-алкил, -C(O)O-C1-C6-алкил, -C(O)-C1-C6-алкил, -C(O)-C3-C6-циклоалкил, -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -S(O)2-C6-C10-арил, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют азетидин, пиперидин, пирролидин, морфолин, тетрагидрофуран или тетрагидропиран, указанный азетидин, пиперидин, пирролидин, морфолин, тетрагидрофуран и тетрагидропиран необязательно замещен 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R12 выбран из группы, включающей гидроксил, -C1-C6-алкил, -C(O)O-C1-C6-алкил, -C(O)-C1-C6-алкил, -C(O)-C3-C6-циклоалкил, -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -S(O)2-C6-C10-арил, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют тетрагидрофуран или тетрагидропиран, указанный тетрагидрофуран и тетрагидропиран необязательно замещен 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют азетидин, пиперидин, пирролидин или морфолин, указанный азетидин, пиперидин, пирролидин и морфолин необязательно замещен 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют спироциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, выбранное из группы, включающей:
где звездочка обозначает положение соединения спироциклического карбоциклического или гетероциклического кольца с цианоеноном, указанное спироциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R12 выбран из группы, включающей гидроксил, -C1-C6-алкил, -C(O)O-C1-C6-алкил, -C(O)-C1-C6-алкил, -C(O)-C3-C6-циклоалкил, -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -S(O)2-C6-C10-арил, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют спироциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, выбранное из группы, включающей:
где звездочка обозначает положение соединения спироциклического карбоциклического или гетероциклического кольца с цианоеноном, указанное спироциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R12, где R12 является таким, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R12 выбран из группы, включающей гидроксил, -C1-C6-алкил, -C(O)O-C1-C6-алкил, -C(O)-C1-C6-алкил, -C(O)-C3-C6-циклоалкил, -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -S(O)2-C6-C10-арил, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил.
Другим вариантом осуществления является соединение, описывающееся формулой Ia - Id:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R1, R2 и R12 являются такими, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R12 выбран из группы, включающей гидроксил, -C1-C6-алкил, -C(O)O-C1-C6-алкил, -C(O)-C1-C6-алкил, -C(O)-C3-C6-циклоалкил, -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -S(O)2-C6-C10-арил, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил.
Другим вариантом осуществления является соединение, описывающееся формулой Ia - Id:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R12 является таким, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R12 выбран из группы, включающей гидроксил, -C1-C6-алкил, -C(O)O-C1-C6-алкил, -C(O)-C1-C6-алкил, -C(O)-C3-C6-циклоалкил, -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -S(O)2-C6-C10-арил, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы Ia:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R12 является таким, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R12 выбран из группы, включающей гидроксил, -C1-C6-алкил, -C(O)O-C1-C6-алкил, -C(O)-C1-C6-алкил, -C(O)-C3-C6-циклоалкил, -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -S(O)2-C6-C10-арил, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил. В подварианте этого варианта осуществления R12 означает -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил. В подварианте этого варианта осуществления R12 означает -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает гетероциклическое кольцо, выбранное из группы, включающей пиридил, пиримидил, пиразинил, пиридазинил, оксазолил, имидазолил и пиразолил где в каждом случае указанный C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и het необязательно независимо замещен одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген,
Другим вариантом осуществления является соединение формулы Ib:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R12 является таким, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R12 выбран из группы, включающей гидроксил, -C1-C6-алкил, -C(O)O-C1-C6-алкил, -C(O)-C1-C6-алкил, -C(O)-C3-C6-циклоалкил, -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -S(O)2-C6-C10-арил, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C1-C6-алкил, C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил. В подварианте этого варианта осуществления R12 означает -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где в каждом случае указанный C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещено одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил. В подварианте этого варианта осуществления R12 означает -C(O)-C6-C10-арил, -C(O)-het, -C6-C10-арил, het, -CH2-C6-C10-арил, -CH2-C3-C6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает гетероциклическое кольцо, выбранное из группы, включающей пиридил, пиримидил, пиразинил, пиридазинил, оксазолил, имидазолил и пиразолил где в каждом случае указанный C3-C6-циклоалкил, C6-C10-арил и het необязательно независимо замещен одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, C1-C6-алкил, -C1-C6-галогеналкил, -C1-C6-гидроксиалкил, -O-C1-C6-алкил и -S-C1-C6-алкил.
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют C3-C8-циклоалкалкила или 3-11-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, где указанный C3-C8-циклоалкил и 3-11-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R12 и где два заместителя R12 у соседних атомов C3-C8-циклоалкила или 3-11-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклоалкила вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют конденсированную бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R21;
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют C3-C8-циклоалкил или 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, где указанный C3-C8-циклоалкил и 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R12 и где два заместителя R12 у соседних атомов C3-C8-циклоалкил или 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют конденсированную бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R21;
В другом варианте осуществления R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют C3-C8-циклоалкил, который необязательно замещен 1-3 заместителями R12 и где два заместителя R12 у соседних атомов C3-C8-циклоалкил вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют конденсированную бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R21;
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, где R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют 3-11-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца, содержащего от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, где указанное 3-11-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R12 и где два заместителя R12 у соседних атомов 3-11-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют конденсированную бициклическую кольцевую систему, которая необязательно независимо замещена одним или большим количеством заместителей R21;
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, где R3 и R4 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, где указанное 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-3 заместителями R12 и где два заместителя R12 у соседних атомов 3-8-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют конденсированную бициклическую кольцевую систему, которая необязательно независимо замещена одним или большим количеством заместителей R21.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы IIa, обладающее структурой:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где
X1 означает O, OCR12aR12a, CR12aR12aO, CR12aR12a, (CR12aR12a)2, C(O), NR12a, CHR12aNR12a или NR12aCR12aR12a;
X2 означает O, CR12aR12a, C(O) или NR12a;
X3, X4, X5 и X6 все независимо означают N или CR23, при условии, что не более 2 из X3-X6 могут означать N и
каждый R12a независимо означает H или C1-C6-алкил и
R23 означает 1-3 заместителя, независимо выбранных из группы, включающей H, галоген, гидроксил, C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил, где указанный -C1-C6-алкил и -OC1-C6-алкил все независимо замещены одним или большим количеством галогенов, или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы IIa:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где
X1 означает O или CR12aR12a;
X2 означает CR12aR12a, C(O) или NR12a;
X3, X4, X5 и X6 все независимо означают N или CR23, при условии, что не более 2 из X3-X6 могут означать N;
каждый R12a независимо означает H, -C(O)C1-C6-алкил или -C1-C6-алкил, необязательно замещенный гидроксилом, и
каждый R23 независимо означает H, галоген, -C1-C6-алкил или -C1-C6-галогеналкил.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы IIa:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где
X1 означает O где каждый R12a и X2-X6 независимо выбран из числа определенных ранее вариантов. В другом варианте осуществления этого варианта осуществления, X1 означает O и X2 означает CR12aR12a, где каждый R12a и X3-X6 независимо выбран из числа определенных ранее вариантов. В другом варианте осуществления этого варианта осуществления, X1 означает O, X2 означает CR12aR12a, где каждый R12a независимо выбран из числа определенных ранее вариантов, X3-X5 означают CR23, где каждый R23 независимо выбран из числа определенных ранее вариантов и X6 означает N. В другом варианте осуществления этого варианта осуществления, X1 означает O, X2 означает CH2, X3-X5 означают CR23, где каждый R23 независимо выбран из числа определенных ранее вариантов и X6 означает N.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы IIa:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где X1 означает O, X2 означает (CR12aR12a)2, где каждый R12a независимо выбран из числа определенных ранее вариантов и каждый X3-X6 независимо выбран из числа определенных ранее вариантов. В другом варианте осуществления этого варианта осуществления, X1 означает O, X2 означает CH2CH2, и X3-X6 означают CR23, где каждый R23 независимо выбран из числа определенных ранее вариантов.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы IIa:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где X1 означает CR12a, X2 означает CR12a, где каждый R12a независимо выбран из числа определенных ранее вариантов и X3-X6 are each selected независимо from ранее определенных вариантов. В другом варианте осуществления этого варианта осуществления, X1 означает O, X2 означает CH2CH2, и X3-X6 означают CR23, где каждый R23 независимо выбран из числа определенных ранее вариантов.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы IIa:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где X1 означает C(O) и X2 означает NR12a, где R12a является таким, как определено выше и X3-X6 все независимо выбраны из группы, включающей определенные ранее варианты. В другом варианте осуществления этого варианта осуществления, X1 означает C(O), X2 означает NR12a, где R12a является таким, как определено выше и X3-X6 означают CR23, где каждый R23 является таким, как определено выше. В другом варианте осуществления этого варианта осуществления, X1 означает C(O), X2 означает NCH3 и X3-X6 означают CR23, где каждый R23 является таким, как определено выше.
Другим вариантом осуществления является соединение, описывающееся формулой:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R12a и R23 являются такими, как определено выше. В подварианте этого варианта осуществления R23 означает 1-3 заместителя, независимо выбранных из группы, включающей H, фтор, хлор, метил и CF3.
Другим вариантом осуществления является соединение, описывающееся формулой:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R12a является таким, как определено выше и каждый R23 независимо выбран из ранее определенных вариантов. В подварианте этого варианта осуществления, R12a означает метил и каждый R23 независимо выбран из группы, включающей H, фтор, хлор, метил и CF3.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют C3-C8-циклоалкил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, где указанный C3-C8-циклоалкил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R12 и где два заместителя R12 у одного атома C3-C8-циклоалкил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют спироциклическую бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R22;
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют C3-C8-циклоалкил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей O, S и N, где S необязательно окислен в SO или SO2, где указанный C3-C8-циклоалкил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-3 заместителями R12 и где два заместителя R12 у C3-C8-циклоалкила или 3-8-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют мостиковую бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R22;
Другим вариантом осуществления является соединение формулы (I), которое выбрано из группы, включающей:
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 1
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 2
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
и
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы (I), которое выбрано из группы, включающей:
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.
В одном варианте осуществления переменные для соединений формулы (I) выбраны независимо друг от друга.
В другом варианте осуществления соединения формулы (I) находятся в основном в очищенной форме.
Пролекарства и сольваты соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, также входят в объем настоящего изобретения. Обсуждение пролекарств приведено в T. Higuchi и V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems (1987) 14 of the A.C.S. Symposium Series, и in Bioreversible Carriers in Drug Design, (1987) Edward B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association and Pergamon Press. Термин "пролекарство" означает соединение (например, предшественник лекарственного средства), которое подвергается превращению in vivo и образует соединение формулы (I) или фармацевтически приемлемую соль соединения. Превращение может происходить по разным механизмам (например, с помощью метаболических или химических процессов), таким как, например, гидролиз в крови.
Например, если соединение формулы (I) содержит карбоксильную функциональную группу, пролекарство может содержать сложноэфирную группу, образованную замещением атома водорода кислотной группы такой группой, как, например, (C1-8)алкил, (C2-12)алканоилоксиметил, 1-(алканоилокси)этил, содержащий от 4 до 9 атомов углерода, 1-метил-1-(алканоилокси)-этил, содержащий от 5 до 10 атомов углерода, алкоксикарбонилоксиметил, содержащий от 3 до 6 атомов углерода, 1-(алкоксикарбонилокси)этил, содержащий от 4 до 7 атомов углерода, 1-метил-1-(алкоксикарбонилокси)этил, содержащий от 5 до 8 атомов углерода, N-(алкоксикарбонил)аминометил, содержащий от 3 до 9 атомов углерода, 1-(N-(алкоксикарбонил)амино)этил, содержащий от 4 до 10 атомов углерода, 3-фталидил, 4-кротонолактонил, гамма-бутиролактон-4-ил, ди-N,N-(C1-2)алкиламино(C2-3)алкил (такой как β-диметиламиноэтил), карбамоил-(C1-2)алкил, N,N-ди (C1-2)алкилкарбамоил-(C1-2)алкил и пиперидино-, пирролидино- или морфолино(C2-3)алкил и т.п.
Аналогичным образом, если соединение формулы (I) содержит гидроксильную функциональную группу, пролекарство можно получить путем замещения одного или большего количества атомов водорода гидроксигрупп такой группой, как, например, (C1-6)алканоилоксиметил, 1-((C1-6)алканоилокси)этил, 1-метил-1-((C1-6)алканоилокси)этил, (C1-6)алкоксикарбонилоксиметил, N-(C1-6)алкоксикарбониламинометил, сукциноил, (C1-6)алканоил, α-амино(C1-4)алкил, α-амино(C1-C4)алкилен-арил, арилацил и α-аминоацил или α-аминоацил-α-аминоацил, где каждая α-аминоацильная группа независимо выбрана из числа приодных L-аминокислот, или гликозил (радикал, полученный удалением гидроксильной группы гемиацеталя углевода). Другие примеры образованных из спирта пролекарств включают -P(O)(OH)2; -P(O)(-O-C1-C6-алкил)2; -P(O)(-NH-(α-аминоацил))(-O-арил); -P(O)(-O-(C1-C6 алкилен)-S-ацил)(-NH-арилалкил); и описанные в патенте US № 7879815; международных публикациях №№ WO2005/003047, WO2008/082602, WO2010/0081628, WO2010/075517 и WO2010/075549; Mehellou, Chem. Med. Chem., 5:1841-1842 (2005); Bobeck et al., Antiviral Therapy 15:935-950 (2010); Furman et al., Future Medicinal Chemistry, 1:1429-1452 (2009); и Erion, Microsomes and Drug Oxidations, Proceedings of the International Symposium, 17th, Saratoga Springs, NY, United States, July 6-10, 2008, 7-12 (2008).
Если соединение формулы (I) содержит функциональную аминогруппу, пролекарство можно получить путем замещения атома водорода аминогруппы такой группой, как, например, R-карбонил-, RO-карбонил-, NRR’-карбонил- где R и R’ все независимо означают (C1-10)алкил, (C3-7) циклоалкил, бензил, натуральный α-аминоацил, -C(OH)C(O)OY1, где Y1 означает H, (C1-C6)алкил или бензил, -C(OY2)Y3, где Y2 означает (C1-4)алкил и Y3 означает (C1-6)алкил; карбоксигруппу (C1-6)алкил; амино(C1-4)алкил или моно-N- или ди-N,N-(C1-6)алкиламиноалкил; -C(Y4)Y5, где Y4 означает H или метил и Y5 означает моно-N- или ди-N,N-(C1-6)алкиламиноморфолиновую группу; пиперидин-1-ил или пирролидин-1-ил и т.п.
Фармацевтически приемлемые сложные эфиры соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, включают следующие группы: (1) эфиры карбоновой кислоты, полученные этерификацией гидроксигруппы гидроксильных соединения, в которых некарбонильный фрагмент карбоновой кислоты сложноэфирной группы выбран из группы, включающей обладающий линейной или разветвленной цепью алкил (например, метил, этил, н-пропил, изопропил, трет-бутил, втор-бутил или н-бутил), алкоксиалкил (например, метоксиметил), арилалкил (например, бензил), арилоксиалкил (например, феноксиметил), арил (например, фенил, необязательно замещенный, например, следующими: галоген, C1-C4-алкил, -O-(C1-C4-алкил) или амино); (2) сульфонаты, такие как алкил- или арилалкилсульфонил (например, метансульфонил); (3) эфиры аминокислот (например, L-валил или L-изолейцил); (4) фосфонаты и (5) моно-, ди- или трифосфаты. Фосфаты можно дополнительно этерифицировать, например, C1-20-спиртом или его реакционноспособным производным, или 2,3-ди-(C6-24)ацилглицерином.
Одно или большее количество соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, могут существовать в несольватированной, а также сольватированной формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, таким как вода, этанол и т.п., и следует понимать, что настоящее изобретение включает сольватированные и несольватированные формы. "Сольват" означает физическую ассоциацию соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, с одним или большим количеством молекул растворителя. Эта физическая ассоциация включает разные степени ионного и ковалентного связывания, включая водородную связь. В некоторых случаях сольват можно выделить, например, если одна или большее количество молекул растворителя включены в кристаллическую решетку кристаллического твердого вещества. "Сольват" включает находящиеся в фазе раствора и изолируемые сольваты. Примеры сольватов включают этаноляты, метаноляты и т.п. "Гидрат" означает сольват, где молекулой растворителя является вода.
Одно или большее количество соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, необязательно можно превратить в сольват. Получение сольватов обычно известно. Так, например, M. Caira et al., J. Pharmaceutical Sci., 93(3), 601-611 (2004) описали получение сольватов фунгицида флуконазола в этилацетате, а также в воде. Аналогичные препараты сольватов, полусольватов, гидратов и т.п. описаны в публикациях E. C. van Tonder et al., AAPS PharmSciTechours., 5(1), article 12 (2004); и A. L. Bingham et al., Chem. Commun., 603-604 (2001). Типичная процедура включает растворение соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, в желательных количествах желательного растворителя (органического или воды, или их смеси) при температуре выше комнатной и охлаждение раствора со скоростью, достаточной для образования кристаллов, которые затем выделяют по стандартным методикам. Аналитическое методики, такие как, например, IR спектроскопия, показывают наличие растворителя (или воды) в кристаллах, таких как сольват (или гидрат).
Соединения формулы (I) могут образовать соли, которые также входят в объем настоящего изобретения. Термин "соль (соли)" при использовании в настоящем изобретении означает соли с кислотами, образованные с неорганическими и/или органическими кислотами, а также соли с основаниями, образованные с неорганическими и/или органическими основаниями. Кроме того, если соединение формулы (I) содержит основной фрагмент, такой как пиридин или имидазол, и кислотный фрагмент, такой как карбоксигруппа, могут образоваться цвиттерионы ("внутренние соли") и они включены в термин "соль (соли)" при использовании в настоящем изобретении. В одном варианте осуществления соль является фармацевтически приемлемой (т.е. нетоксичной, физиологически приемлемой) солью. В другом варианте осуществления соль не является фармацевтически приемлемой солью. Соли соединений формулы (I) могут образоваться, например, по реакции соединения формулы (I) с количеством кислоты или основания, таким как эквивалентное количество, в среде, такой как в которой соль осаждается, или в водной среде с последующей лиофилизацией.
Типичные соли присоединения с кислотами включают ацетаты, аскорбаты, бензоаты, бензолсульфонаты, бисульфаты, бораты, бутираты, цитраты, камфораты, камфорсульфонаты, фумараты, гидрохлориды, гидробромиды, гидройодиды, лактаты, малеаты, метансульфонаты, нафталинсульфонаты, нитраты, оксалаты, фосфаты, пропионаты, салицилаты, сукцинаты, сульфаты, тартраты, тиоцианаты, толуолсульфонаты (также известные, как тозилаты) и т.п. Кроме того, кислоты, которые обычно считаются подходящими для образования фармацевтически применимых солей из основных фармацевтических соединений, обсуждены, например, в публикациях P. Stahl et al., Camille G. (eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use. (2002) Zurich: Wiley-VCH; S. Berge et al, Journal of Pharmaceutical Sciences (1977) 66(1) 1-19; P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33 201-217; Anderson et al, The Practice of Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, New York; и The Orange Book (Food & Drug Administration, Washington, D.C. на их сайте в интернете).
Типичные соли присоединения с основаниями включают соли аммония, соли щелочного металла, такие как соли натрия, лития и калия, соли щелочноземельного металла, такие как соли кальция и магния, соли с органическими основаниями (например, органическими аминами), такими как дихлоргексиламин, трет-бутиламин, холин, и соли с аминокислотами, такими как аргинин, лизин и т.п. Основные азотсодержащие группы можно кватернизовать реагентами, такими как низшие алкилгалогениды (например, метил-, этил- и бутилхлориды, -бромиды и -йодиды), диалкилсульфаты (например, диметил-, диэтил- и дибутилсульфаты), длинноцепочечные галогениды (например, децил-, лаурил- и стеарилхлориды, -бромиды и -йодиды), арилалкилгалогениды (например, бензил- и фенетилбромиды) и др.
Все такие соли с кислотами и соли с основаниями должны быть фармацевтически приемлемыми солями, которые входят в объем настоящего изобретения и все соли с кислотами и основаниями для задач настоящего изобретения считаются эквивалентными свободным формам соответствующих соединений.
Все стереоизомеры (например, геометрические изомеры, оптические изомеры и т.п.) соединений, предлагаемых в настоящем изобретении (включая изомеры солей и сольватов соединений), такие как те, которые могут существовать вследствие наличия асимметрических атомов углерода у разных заместителей, включая энантиомерные формы (которые могут существовать даже при отсутствии асимметрических атомов углерода), поворотные изомеры, атропоизомеры (например, замещенные биарилы) и диастереоизомерные формы входят в объем настоящего изобретения. Если соединение формулы (I) включает двойную связь или конденсированное кольцо, цис- и транс-формы, а также смеси входят в объем настоящего изобретения.
Соединения формулы (I) также могут существовать в разных таутомерных формах и все такие формы входят в объем настоящего изобретения.
Отдельные стереоизомеры соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, могут, например, в основном не содержать другие изомеры или могут быть смесями, например, рацематами или со всеми другими, или другим выбранным, стереоизомером. Хиральные центры в настоящем изобретении могут обладать S или R конфигурацией, определенной в IUPAC 1974 Recommendations. Применение терминов "соль", "сольват" и т.п.в равной степени относится к соли и сольвату энантиомеров, стереоизомеров, поворотных изомеров, таутомеров, позиционных изомеров, рацематов или пролекарств соединений, предлагаемых в настоящем изобретении.
Диастереоизомерные смеси можно разделить на их отдельные диастереоизомеры на основании различий их физических и химических характеристик по методикам, хорошо известным специалистам в данной области техники, например, с помощью хроматографии и/или фракционной кристаллизации. Энантиомеры можно разделить путем превращения энантиомерной смеси в диастереоизомерную смесь по реакции с подходящим оптически активным соединением (например, хиральным вспомогательным веществом, таким как хиральный спирт или хлорангидрид кислоты Мошера), разделения диастереоизомеров и превращения (например, гидролиза) отдельных диастереоизомеров в соответствующие чистые энантиомеры. Стереохимически чистые соединения также можно получить путем использования хиральных исходных веществ или путем использования методик разделения солей. Энантиомеры также можно прямо разделить путем использования хиральных хроматографических методик.
В соединениях формулы (I) атомы могут обладать природным изотопным составом или один или большее количество атомов может быть искусственно обогащен конкретным изотопом, обладающим таким же атомным номером, но атомной массой или массовым числом, не таким, как атомная масса или массовой число преимущественно обнаруженное в природе. Настоящее изобретение включает все подходящие изотопные варианты соединений родовой формулы (I). Например, разные изотопные формы водорода (H) включают протий (1H) и дейтерий (2H). Протий является преобладающим изотопом водорода, обнаруженным в природе. Обогащение дейтерием может обеспечить некоторые терапевтические преимущества, такие как увеличение периода полувыведения in vivo или снижение необходимой дозы, или может дать соединение, применимое в качестве стандарта для описания биологических образцов. Изотопно обогащенные соединения формулы (I) можно получить без чрезмерных исследований по обычным методикам, хорошо известным специалистам в данной области техники или по методикам, аналогичным описанным на схемах и в примерах в настоящем изобретении, с использованием подходящих изотопно обогащенным реагентов и/или промежуточных продуктов. В одном варианте осуществления в соединении формулы (I) один или большее количество атомов водорода заменены на дейтерий.
Полиморфные формы соединений формулы (I) и солей или сольватов соединений формулы (I) включены в настоящее изобретение.
Другие варианты осуществления настоящего изобретения включают следующие:
(a) Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
(b) Фармацевтическая композиция по параграфу (a), дополнительно содержащая одно или большее количество других терапевтических средств, выбранных из группы, включающей неврологические или психиатрические лекарственные средства, противовоспалительные лекарственные средства, иммуномодулирующие лекарственные средства и противораковые лекарственные средства.
(c) Комбинация, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сольват и одно, два, три или большее количество других терапевтических средств.
(d) Комбинация по параграфу (c), которая содержит (i) соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, и (ii) одно или большее количество других терапевтических средств, выбранных из группы, включающей неврологические или психиатрические лекарственные средства, противовоспалительные лекарственные средства, иммуномодулирующие лекарственные средства и противораковые лекарственные средства.
(e) Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват для применения в терапии.
(f) Соединение для применения по параграфу (e), где терапией является лечение или предупреждение заболевания, опосредуемого активацией транскрипции Nrf2 у субъекта.
(g) Соединение для применения по параграфу (e) или (f), где терапией является лечение или предупреждение неврологического нарушения, воспалительного нарушения, аутоиммунного нарушения или рака у субъекта.
(h) Соединение для применения по параграфу (g), где терапией является лечение или предупреждение нейродегенеративного заболевания, такого как атаксия Фридрейха, боковой амиотрофический склероз, удар, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, периферическая невропатия или тугоухость у субъекта.
(i) Соединение для применения по параграфу (e), (f), (g) или (h), где указанное соединение вводят в комбинации с одним или большим количеством других терапевтических средств.
(j) Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата для приготовления лекарственного средства для применения для лечения или предупреждения неврологического нарушения, воспалительного нарушения, аутоиммунного нарушения или рака у субъекта.
(k) Применение по параграфу (j), где нейродегенеративным заболеванием является атаксия Фридрейха, боковой амиотрофический склероз, удар, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, периферическая невропатия или тугоухость у субъекта.
(l) Применение по параграфу (j) или (k), где указанное соединение вводят в комбинации с одним или большим количеством других терапевтических средств.
(m) Способ лечения или предупреждения неврологического нарушения, воспалительного нарушения, аутоиммунного нарушения или рака у нуждающегося в нем субъекта, который включает введение субъекту эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
(n) Способ по параграфу (m), где неврологическим нарушением является нейродегенеративное заболевание, выбранное из группы, включающей следующие: атаксия Фридрейха, боковой амиотрофический склероз, удар, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, периферическая невропатия и тугоухость.
(o) Способ по параграфу (m) или (n), где соединение формулы (I) вводят в комбинации с эффективным количеством одного или большего количества других терапевтических средств.
Дополнительные варианты осуществления настоящего изобретения включают фармацевтические композиции, комбинации и способы, приведенные выше в параграфах (a)-(o), и применения, приведенные в обсуждении ниже, где соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, использующееся в настоящем изобретении представляет собой соединение одного из вариантов осуществления, объектов, классов, подклассов, или признаков соединений, описанных выше. Во всех этих вариантах осуществления соединение в соответствующих случаях необязательно можно использовать в форме фармацевтически приемлемой соли или сольвата. Следует понимать, что указание на соединения включает соединение в приведенной форме, а также в зависимости от ситуации в разных формах, таких как полиморфы и сольваты.
Также следует понимать, что варианты осуществления композиций и приведенные выше, как параграфы от (a) до (o) включают все варианты осуществления соединений, включая варианты осуществления, образованные в виде комбинаций вариантов осуществления.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, для применения для лечения или предупреждения нейродегенеративного нарушения у субъекта. В одном варианте осуществления нейродегенеративное нарушение выбрано из группы, включающей болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, другие с триплетными повторами CAG (или полиглутаминовые) заболевания, боковой амиотрофический склероз (ALS, болезнь Лу Герига), болезнь диффузных телец Леви, хорея-акантоцитоз, первичный боковой склероз, рассеянный склероз (MS), лобно-височное слабоумие, атаксия Фридрейха, острая травма головы и эпилепсия (подавление активации микроглии). В другом варианте осуществления нейродегенеративным нарушением является атаксия Фридрейха, боковой амиотрофический склероз, удар, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, периферическая невропатия или тугоухость. В другом варианте осуществления нейродегенеративным нарушением является болезнь Альцгеймера. В другом варианте осуществления нейродегенеративным нарушением является болезнь Паркинсона. В другом варианте осуществления нейродегенеративным нарушением является боковой амиотрофический склероз.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват для применения для лечения или предупреждения офтальмологического нарушения у субъекта. В одном варианте осуществления офтальмологическое нарушение выбрано из группы, включающей следующие: заболевания сетчатки, такие как дегенерация желтого пятна, диабетическая ретинопатия, диабетический отек желтого пятна, пигментная дегенерация сетчатки, дегенерация желтого пятна Штаргардта, синдром Ушера, врожденный амавроз Лебера, хороидеремия, палочко-колбочковая или колбочко-палочковая дистрофия, цилиопатия, прогрессирующая атрофия сетчатки, дегенеративные заболевания сетчатки, ретролетальная фиброплазия, заболевания сосудов сетчатки, катаракты, глаукома, глаукоматозная нейродегенерация сетчатки; ишемическая невропатия зрительного нерва и заболевания глазных сосудов.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват для применения для лечения заболевания почек у субъекта. В одном варианте осуществления заболеванием почек является хроническая или острая почечная недостаточность, острое повреждение почек перренальной, внутриренальной и постренальной этиологии, хроническое заболевание почек, диабетическая нефропатия, фокально-сегментарный гломерулосклероз (FSGS), нефротический синдром или недиабетическое хроническое заболевание почек.
Соответственно, настоящее изобретение также относится к способам лечения или предупреждения неврологического нарушения и/или уменьшения вероятности или тяжести симптомов неврологического нарушения у пациента, способы включают введение пациенту эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват для применения для подавления, лечения и/или уменьшения вероятности или тяжести симптомов воспалительного нарушения у субъекта. В одном варианте осуществления воспалительное нарушение выбрано из группы, состоящей из следующих: (i) респираторные заболевания, такие как хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), астма, идиопатический фиброз легких и радиационный пневмонит; (ii) сердечно-сосудистые заболевания, такие как атеросклеротическое заболевание; (iii) метаболические заболевания, такие как острое повреждение почек, хроническое заболевание почек, острое поражение почек и хроническая печеночная недостаточность; (iv) полиорганная недостаточность, возникшая вследствие системного сепсиса и/или обширной травмы; (v) воспалительный артрит, такой как подагра; (vi) воспалительная болезнь кишечника (IBD), такая как болезнь Крона или язвенный колит и (vii) воспалительные заболевания кожи, такие как атопический дерматит.
Соответственно, настоящее изобретение также относится к способам для лечения или предупреждения воспалительного нарушения и/или уменьшения вероятности или тяжести симптомов воспалительного нарушения у пациента, способы включают введение пациенту эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват для применения для подавления, лечения и/или уменьшения вероятности или тяжести симптомов аутоиммунного нарушения у субъекта. В одном варианте осуществления аутоиммунное нарушение выбрано из группы, состоящей из следующих: системная красная волчанка (SLE), синдром Шегрена, ревматоидный артрит, псориатический артрит, псориаз и миозит.
Соответственно, настоящее изобретение также относится к способам для лечения или предупреждения аутоиммунное нарушение и/или уменьшения вероятности или тяжести симптомов аутоиммунного нарушения у пациента, способы включают введение пациенту эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Другим вариантом осуществления является соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват для применения для подавления, лечения и/или уменьшения вероятности или тяжести симптомов рака у субъекта. В одном варианте осуществления рак выбран из группы, состоящей из следующих: рак печени, рак молочной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак толстой кишки, рак предстательной железы, рак желчного пузыря, рак яичников, рак легких, рак пищевода, глиома, плоскоклеточная карцинома пищевода, рак эндометрия, папиллярный рак, раковые заболевания головы и шеи, рак кожи, печеночно-клеточная карцинома, карцинома почки и мочевого пузыря, рак поджелудочной железы и лейкоз. В предпочтительных вариантах осуществления рак представляет собой метастазы, происходящие от других типов рака (таких как рак толстой кишки, рак поджелудочной железы и т.п.).
Соответственно, настоящее изобретение также относится к способам для лечения или предупреждения рака и/или уменьшения вероятности или тяжести симптомов рака у пациента, способы включают введение пациенту эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
В другом объекте настоящего изобретения терапевтическое применение соединений и композиций, предлагаемых в настоящем изобретении, может дополнительно включать введение одного или большего количества дополнительных терапевтических средств, которые не являются соединениями формулы (I).
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) вводят в комбинации с одним дополнительным терапевтическим средством. В другом варианте осуществления соединение формулы (I) вводят в комбинации с двумя дополнительными терапевтическими средствами. В еще одном варианте осуществления соединение формулы (I) вводят в комбинации с двумя или большим количеством дополнительных терапевтических средств.
В одном варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство представляет собой неврологическое или психиатрическое лекарственное средство, такое как улучшающее познавательную способность или память средство.
В другом варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство представляет собой противовоспалительное средство.
В другом варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство представляет собой иммуномодулирующее средство, такое как иммуносупрессорное средство.
В другом варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство представляет собой противораковое средство.
В одном варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство представляет собой ингибитор бета-секретазы, например, верубецестат; агонист M1 mAChR или PAM; агонист M4 mAChR или PAM; антагонист mGluR2 или NAM или PAM; ADAM 10 или активатор; ингибитор гамма-секретазы, такой как LY450139 и TAK 070; модулятор гамма-секретазы; ингибитор фосфорилирования тау; ингибитор переноса глицина; агонист LXR β; конформационный модулятор ApoE4; антагонист NR2B; модулятор андрогенового рецептора; блокаторы образования олигомера Aβ; агонист 5-HT4, такой как PRX-03140; антагонист 5-HT6, такой как GSK 742467, SGS-518, FK-962, SL-65,0155, SRA-333 и ксалипроден; антагонист 5-HT1a, такой как лекозотан; ингибитор p25/CDK5; антагонист рецептора NK1/NK3; ингибитор COX-2; ингибитор LRRK2; антагонист рецептора CB-1 или обратный агонист рецептора CB-1, такой как AVE1625; антагонист рецептора N-метил-D-аспартата (NMDA), такой как мемантин, нерамексан и EVT101; ингибитор холинэстеразы, такой как галантамин, ривастигмин, донепезил, такрин, фенсерин, ладостигил и ABT-089; стимулятор секреции гормона роста, такой как ибутаморен, ибутаморен мезилат и капроморелин; антагонист гистаминового рецептора H3, такой как ABT-834, ABT 829, GSK 189254 и CEP16795; агонист AMPA или модулятор AMPA, такой как CX-717, LY 451395, LY404187 и S-18986; ингибитор PDE IV, включая MEM1414, HT0712 и AVE8112; обратный агонист GABAA; ингибитор GSK3β, включая AZD1080, SAR502250 и CEP16805; нейронный никотиновый агонист; селективный агонист M1; ингибитор HDAC; и лиганды регулирующей сродство микротрубочек киназы (MARK).
Примеры комбинаций соединений включают комбинации со средствами для лечения шизофрении, например, комбинации со следующими: седативные, снотворные, анксиолитики, антипсихотические средства, успокаивающие средства, циклопирролоны, имидазопиридины, пиразолопиримидины, малые транквилизаторы, агонисты и антагонисты мелатонина, мелатонергические средства, бензодиазепины, барбитураты, 5HT-2 антагонисты и т.п., такими как: адиназолам, аллобарбитал, алонимид, аипразолам, амисульприд, амитриптилин, амобарбитал, амоксапин, арипипразол, бентазепам, бензоктамин, бротизолам, бупропион, буспирон, бутабарбитал, буталбитал, капурид, карбоклорал, хлораль бетаин, хлораль гидрат, кломипрамин, клоназепам, клоперидон, клоразепат, хлордиазепоксид, клоретат, хлорпромазин, клозапин, ципразепам, дезипрамин, декскламол, диазепам, дихлоралфеназон, дивалпроекс, дифенгидрамин, доксепин, эстазолам, этхлорвинол, этомидат, фенобам, флунитразепам, флупентиксол, флуфеназин, флуразепам, флувоксамин, флуоксетин, фозазепам, глутетимид, галазепам, галоперидол, гидроксизин, имипрамин, литий, лоразепам, лорметазепам, мапротилин, меклоквалон, мелатонин, мефобарбитал, мепробамат, метаквалон, мидафлур, мидазолам, нефазодон, низобамат, нитразепам, нортриптилин, оланзапин, оксазепам, паральдегид, пароксетин, пентобарбитал, перлапин, перфеназин, фенелзин, фенобарбитал, празепам, прометазин, пропофол, протриптилин, квазепам, кветиапин, реклазепам, рисперидон, ролетамид, секобарбитал, сертралин, супроелон, темазепам, тиоридазин, тиотиксен, траказолат, транилципромайн, тразодон, триазолам, трепипам, трицетамид, триклофос, трифлуоперазин, триметозин, тримипрамин, улдазепам, венлафаксин, залеплон, зипрасидон, золазепам, золпидем и их соли и их комбинации и т.п., или предлагаемое соединение можно использовать вместе с применением физических методик, таких как фототерапия или электростимуляция.
В другом варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство представляет собой леводопа (с селективным экстрацеребральным ингибитором декарбоксилазы или без него, таким как карбидопа или бенсеразид), антихолинергическое средство, такое как бипериден (необязательно как его гидрохлорид или лактат) и тригексифенидил(бензексол)гидрохлорид; ингибитор COMT, такой как энтакапон, ингибитор MAO-B, антиоксидант, антагонисты аденозинового рецептора A2a, холинергические агонисты, антагонисты рецептора NMDA, антагонисты серотонинового рецептора или агонисты допаминового рецептора, такие как алентемол, бромокриптин, фенолдопам, лизурид, наксаголид, перголид и прамипексол. Следует понимать, что агонисты допамина могут находиться в форме фармацевтически приемлемой соли, например, алентемол гидробромид, бромокриптин мезилат, фенолдопам мезилат, наксаголид гидрохлорид и перголид мезилат.
В другом варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство представляет собой противовоспалительное средство. Противовоспалительные средства включают нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (NSAIDs), неспецифические и COX-2 специфические ингибиторы фермента циклооксигеназы, соединения золота, кортикостероиды, метотрексат, антагонисты рецептора фактора некроза опухоли (TNF), иммуносупрессанты и метотрексат.
Примеры NSAIDs включают ибупрофен, флурбипрофен, напроксен и напроксен натрий, диклофенак, комбинации диклофенак натрия и мизопростола, сулиндак, оксапрозин, дифлунизал, пироксикам, индометацин, этодолак, фенопрофен кальций, кетопрофен, набуметон натрий, сульфасалазин, толметин натрий и гидроксихлорохин. Примеры NSAIDs также включают COX-2 специфические ингибиторы, такие как целекоксиб, валдекоксиб, лумиракоксиб и/или эторикоксиб.
В некоторых вариантах осуществления противовоспалительное средство представляет собой салицилат. Салицилаты включают, но не ограничиваются только ими, ацетилсалициловую кислоту или аспирин, салицилат натрия и салицилаты холина и магния.
Противовоспалительное средство также может представлять собой кортикостероид. Например, кортикостероид может представлять собой кортизон, дексаметазон, метилпреднизолон, преднизолон, преднизолон фосфат натрия или преднизон.
В дополнительных вариантах осуществления противовоспалительное средство представляет собой соединение золота, такое как тиомалат золота-натрия или ауранофин.
Настоящее изобретение также включает варианты осуществления, в которых противовоспалительное средство представляет собой ингибитор метаболизма, такой как ингибитор дигидрофолатредуктазы, такой как метотрексат или ингибитор дигидрофолатдегидрогеназы, такой как лефлуномид.
Другие варианты осуществления настоящего изобретения относятся к комбинациям, в которых по меньшей мере одно противовоспалительное средство представляет собой моноклональные антитела к C5 (такие как экулизумаб или пекселизумаб), антагонисты TNF, такие как этанерцепт или инфликсимаб, который представляет собой моноклональные антитела к TNF альфа.
В другом варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство представляет собой противораковое средство. Примеры таких средств включают сорафениб тозилат (неваксар), лучевую терапию, селективную лучевую терапию внутренних органов (например, SIR-Spheres и TheraSphere), этиодизированное масло (липидол), пексастимоген девацирепвек (Pexa-Vec, JX-594, Jennarex), хинакрин (Clevelane BioLabs), CC-223 (Celgene), CF102 (Can-Fite), SGI-110 (Astex) и G-202 (Genspera).
В одном варианте осуществления противораковое средство выбрано из группы, состоящей из следующих: ингибиторы рецептора сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF), ингибиторы топоизомеразы II, ингибиторы smoothened, алкилирующие средства, противоопухолевые антибиотики, антиметаболиты, ретиноиды, иммуномодулирующие средства, включая противораковые вакцины, CTLA-4, LAG-3, антагонисты PD-1 и ингибиторы BET бромодомена.
При использовании в настоящем изобретении термин "в комбинации" включает использование более одного средства (например, одного или большего количества профилактических и/или терапевтических средств). Использование термина "в комбинации" не ограничивает порядок, в котором средства (например, профилактические и/или терапевтические средства) вводят субъекту с нарушением. Первое средство (например, профилактическое или терапевтическое средство, такое как соединение, предлагаемое в настоящем изобретении) можно вводить за (например, 5 мин, 15 мин, 30 мин, 45 мин, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 12 ч, 24 ч, 48 ч, 72 ч, 96 ч, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 5 недель, 6 недель, 8 недель или 12 недель), одновременно или последовательно через (например, 5 мин, 15 мин, 30 мин, 45 мин, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 12 ч, 24 ч, 48 ч, 72 ч, 96 ч, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 5 недель, 6 недель, 8 недель или 12 недель) после введения второго средства (например, профилактического или терапевтического средства) субъекту с нарушением.
При использовании в настоящем изобретении термин "синергетический" включает комбинацию соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, и другого средства (например, профилактического или терапевтического средства), которое использовали или в настоящее время используют для предупреждения, ведения или лечения нарушения, которое более эффективно, чем аддитивные эффекты средств. Синергетический эффект комбинации средств (например, комбинации профилактических или терапевтических средств) позволяет использовать меньшие дозы одного или большего количества средств и/или менее частое введение указанных средств субъекту с нарушением. Возможность использования меньших доз средства (например, профилактического или терапевтического средства) и/или менее частое введение указанного средства снижает токсичность, связанную с введением указанного средства субъекту без снижения эффективности указанного средства для лечения или предупреждения нарушения). Кроме того, синергетический эффект может привести к улучшенной эффективности средств лечения или предупреждения нарушения. Кроме того, синергетический эффект комбинации средств (например, комбинации профилактических или терапевтических средств) может исключить или уменьшить вредные или нежелательные побочные эффекты, связанные с использованием каждого средства по отдельности.
При введении пациенту комбинированного средства, предлагаемого в настоящем изобретении, терапевтические средства в комбинации или фармацевтической композиции или композиций, содержащих терапевтические средства, можно вводить в любом порядке, таком как, например, последовательно, параллельно, совместно, одновременно и т.п. Количества разных активных средств в таком комбинированном средстве могут быть разными количествами (разными вводимыми количествами) или одинаковыми количествами (одинаковыми вводимыми количествами). Так, для иллюстрации, соединение формулы (I) и дополнительное терапевтическое средство могут содержаться в фиксированных количествах (вводимых количествах) в одной разовой дозе (например, капсуле, таблетке и т.п.).
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) вводят во время, когда дополнительное терапевтическое средство (средства) оказывают свое профилактическое или терапевтическое воздействие, и наоборот.
В другом варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и дополнительное терапевтическое средство (средства) вводят в дозах, обычно использующихся, когда такие средства используют в качестве монотерапии.
В другом варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и дополнительное терапевтическое средство (средства) вводят в дозах, меньших, чем обычно использующиеся дозы, когда такие средства используют в качестве монотерапии.
В еще одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и дополнительное терапевтическое средство (средства) действуют синергетически и вводят в дозах, меньших, чем обычно использующиеся дозы, когда такие средства используют в качестве монотерапии.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и дополнительное терапевтическое средство (средства) содержатся в одной композиции. В одном варианте осуществления эта композиция применима для перорального введения. В другом варианте осуществления эта композиция применима для внутривенного введения. В другом варианте осуществления эта композиция применима для подкожного введения. В еще одном варианте осуществления эта композиция применима для парентерального введения.
Активные соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно вводить в комбинации или поочередно с другим терапевтическим средством. В комбинированной терапии эффективные дозы двух или большего количества средств вводят вместе, тогда как в поочередной или пошаговой терапии эффективные дозы каждого средства вводят периодически или последовательно. Вводимые дозы зависят от скоростей всасывания, инактивации и выведения лекарственного средства, а также других фактором, известных специалистам в данной области техники. Следует отметить, что величины доз также меняются в зависимости от тяжести патологического состояния, которое необходимо облегчить. Также следует понимать, что для любого конкретного субъекта конкретные режимы и графики введения следует регулировать во времени в зависимости от любого конкретного субъекта, конкретных режимов и графиков введения в соответствии с индивидуальными требованиями и профессиональным решением лица, проводящего или контролирующего введение композиций.
По меньшей мере одно соединение формулы (I) и дополнительное терапевтическое средство (средства) могут действовать аддитивно или синергетически. Синергетическая комбинация может позволить использование меньших доз одного или большего количества средств и/или менее частое введение одного или большего количества средств комбинированной терапии. Использование меньших доз или менее частое введение одного или большего количества средств может снизить токсичность средства без снижения эффективности средства.
Дозы и режимы введения других средств, использующихся в комбинированных терапиях, предлагаемых в настоящем изобретении, может определить лечащий врач с учетом утвержденных доз и режимов введения на листке-вкладыше в упаковке лекарственного средства; возраста, пола и общего состояния здоровья пациента; и типа и тяжести вирусной инфекции или родственного заболевания или нарушения. При введении в комбинации, соединение формулы (I) и другое средство (средства) можно вводить одновременно (т.е. в одной композиции или в разных композициях одно после другого) или последовательно. Это, в частности, применимо если компоненты комбинации вводят в разных режимах, например, один компонент вводят один раз в сутки и другой компонент вводят каждые 6 ч или, если предпочтительные фармацевтические композиции являются разными, например, одна является таблеткой, а другая капсулой. Поэтому полезным является набор, содержащий отдельные дозированные формы.
Обычно полная суточная доза по меньшей мере одного соединения формулы (I) по отдельности или при введении в виде комбинированной терапии может находиться в диапазоне от примерно 1 до примерно 2500 мг/сутки, хотя обязательно происходят изменения в зависимости от цели терапии, пациента и пути введения. В одном варианте осуществления доза равна от примерно 10 до примерно 1000 мг/сутки при введении в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз. В другом варианте осуществления доза равна от примерно 1 до примерно 500 мг/сутки при введении в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз. В еще одном варианте осуществления доза равна от примерно 1 до примерно 100 мг/сутки при введении в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз. В еще одном варианте осуществления доза равна от примерно 1 до примерно 50 мг/сутки при введении в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз. В другом варианте осуществления доза равна от примерно 500 до примерно 1500 мг/сутки при введении в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз. В еще одном варианте осуществления доза равна от примерно 500 до примерно 1000 мг/сутки при введении в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз. В еще одном варианте осуществления доза равна от примерно 100 до примерно 500 мг/сутки при введении в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз.
Вследствие своей активности соединения формулы (I) применимы в ветеринарии и медицине. Как указано выше, соединения формулы (I) применимы для лечения или предупреждения нейродегенеративных заболеваний, воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний или раковых заболеваний у пациента.
При введении пациенту соединения формулы (I) можно вводить в виде составной композиции, которая содержит фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или энантиомера и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. В фармацевтических композициях и применениях, предлагаемых в настоящем изобретении, активные ингредиенты обычно вводят в смеси с подходящими материалами носителей, соответственно выбранными для предписанной формы введения, такими как пероральные таблетки, капсулы (заполненные твердым веществом, полужидким веществом или жидким веществом), порошки для восстановления, пероральные гели, эликсиры, диспергирующиеся гранулы, сиропы, суспензии и т.п., и согласующимися с обычной фармацевтической практикой. Например, для перорального введения в форме таблетки или капсулы компонент активного лекарственного средства можно объединить с любым пероральным нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как лактоза, крахмал, сахароза, целлюлоза, стеарат магния, дикальцийфосфат, сульфат кальция, тальк, маннит, этиловый спирт (жидкие формы) и т.п. Твердые формы препаратов включают порошки, таблетки, диспергирующиеся гранулы, капсулы, облатки и суппозитории. Порошки и таблетки могут содержать от примерно 0,5 до примерно 95% композиции, предлагаемой в настоящем изобретении. Таблетки, порошки, облатки и капсулы можно использовать в виде твердых дозированных форм, применимых для перорального введения.
Кроме того, если желательно или необходимо, в смесь также можно включить подходящие связующие, смазывающие вещества, разрыхляющие агенты и окрашивающие агенты. Подходящие связующие включают крахмал, желатин, натуральные сахара, кукурузные подсластители, природные и синтетические камеди, такие как камедь акации, альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль и воска. Из смазывающих веществ для использования в дозированных формах можно отметить борную кислоту, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Разрыхлители включают крахмал, метилцеллюлозу, гуаровую камедь и т.п. Также можно включить, если это является подходящим, подсластитель и вкусовые агенты и консерванты.
Жидкие формы препаратов включают растворы, суспензии и эмульсии и могут включать воду или растворы вода-пропиленгликоль для парентеральной инъекции.
Жидкие формы препаратов также могут включать растворы для назального введения.
Также включены твердые формы препаратов, которые предназначены для проводимого незадолго до применения превращения в жидкие формы препаратов для перорального или парентерального введения. Такие жидкие формы включают растворы, суспензии и эмульсии.
Для приготовления суппозиториев низкоплавкий воск, такой как смесь глицеридов жирных кислот или масло какао, сначала расплавляют и в ней равномерно диспергируют активный ингредиент, например, путем перемешивания. Затем расплавленную однородную смесь выливают в формы обычного размера, дают охладиться и таким образом затвердеть.
Кроме того, композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, можно приготовить в форме замедленного высвобождения и обеспечить регулируемую скорость высвобождения любого одного или большего количества компонентов или активных ингредиентов для оптимизации терапевтических эффектов, т. е. противовирусной активности и т.п. Подходящие дозированные формы для замедленного высвобождения включают многослойные таблетки, содержащие слои с разными скоростями диспергирования или полимерные матрицы регулируемого высвобождения, пропитанные активными компонентами и сформованные в таблетки или капсулы, содержащие такие пропитанные или капсулированные пористые полимерные матрицы.
В одном варианте осуществления одно или большее количество соединений формулы (I) вводят перорально.
В другом варианте осуществления одно или большее количество соединений формулы (I) вводят внутривенно.
В одном варианте осуществления фармацевтический препарат, содержащий соединение формулы (I), находится в разовой дозированной форме. В такой форме препарат разделяют на разовые дозы, содержащие эффективные количества активных компонентов.
Композиции можно приготовить по обычным методикам смешивания, гранулирования или нанесения покрытия соответственно и композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, могут содержать в одном варианте осуществления от примерно 0,1% до примерно 99% соединения формулы (I) по массе или объему. В различных вариантах осуществления композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, могут содержать, в одном варианте осуществления от примерно 1% до примерно 70% или от примерно 5% до примерно 60% соединения формулы (I) по массе или объему.
Количество соединения формулы (I) в разовой дозе препарата можно менять или поддирать равным от примерно 1 мг до примерно 2500 мг. В различных вариантах осуществления количество равно от примерно 10 мг до примерно 1000 мг, от 1 мг до примерно 500 мг, от 1 мг до примерно 100 мг и от 1 мг до примерно 100 мг.
Для удобства полную суточную дозу при желании можно разделять и вводить порциями в течение суток. В одном варианте осуществления суточную дозу вводят одной порцией. В другом варианте осуществления полную суточную дозу вводят в виде двух разделенных доз за период в 24 ч. В другом варианте осуществления полную суточную дозу вводят в виде трех разделенных доз за период в 24 ч. В еще одном варианте осуществления полную суточную дозу вводят в виде четырех разделенных доз за период в 24 ч.
Количество и частоту введения соединений формулы (I) регулируют в соответствии с решением лечащего врача с учетом таких факторов, как возраст, состояние и размер пациента, а также тяжесть подвергающихся лечению симптомов. Обычно полная суточная доза соединений формулы (I) составляет от примерно 0,1 до примерно 2000 мг/сутки, хотя с необходимостью вносят изменения в зависимости от цели лечения, пациента и пути введения. В одном варианте осуществления доза равна от примерно 1 до примерно 200 мг/сутки и ее вводят в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз. В другом варианте осуществления доза равна от примерно 10 до примерно 2000 мг/сутки и ее вводят в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз. В другом варианте осуществления доза равна от примерно 100 до примерно 2000 мг/сутки и ее вводят в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз. В еще одном варианте осуществления доза равна от примерно 500 до примерно 2000 мг/сутки и ее вводят в виде одной дозы или 2-4 разделенных доз.
ПРИМЕРЫ
Настоящее изобретение иллюстрируется приведенными ниже примерами. Для всех примеров можно использовать стандартные методики обработки и очистки, известные специалистам в данной области техники. Если не указано иное, все температуры выражены в °C (градусы стоградусной шкалы). Все реакции проводят при комнатной температуре, если не указано иное. Методики синтеза, проиллюстрированные в настоящем изобретении, предназначены для использования в качестве примеров применимых реакций с использованием конкретных примеров.
Использованы аббревиатуры, обычные в данной области техники или следующие:
ОБЩИЕ СХЕМЫ СИНТЕЗА
Хотя настоящее изобретение описано с помощью конкретных примеров, приведенных ниже, многие их альтернативы, модификации и варианты очевидны специалистам с общей подготовкой в данной области техники. В некоторых случаях порядок проведения стадий реакций на схемах можно менять для облегчения реакции или исключения нежелательных продуктов реакций. Исходные вещества и промежуточные продукты получали из коммерческих источников, получали по известным процедурам или представлены иным образом.
Разные методики получения соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, описаны на следующих схемах и в примерах. Если не указано иное, все переменные являются такими, как определено выше.
Схема 1:
На схеме 1 необязательно замещенные цианоеноны 5 можно синтезировать по четырехстадийной процедуре. Формилирование необязательно замещенных кетонов 1 дает 3, затем замыкание цикла дает изоксазол 4. Раскрытие цикла с последующим окислением дает цианоеноны 5.
Схема 2:
На схеме 2 необязательно замещенные цианоеноны 10 можно синтезировать по пятистадийной процедуре. Необязательно замещенные кетоны 6 можно алкилировать в щелочной среде и получить 7. Формилирование с последующим замыканием цикла дает изоксазол 9. Раскрытие цикла с последующим окислением дает цианоеноны 10.
Схема 3:
На схеме 3 необязательно замещенные цианоеноны 14 можно синтезировать по трехстадийной процедуре. Необязательно замещенные кетоны 11 можно алкилировать в щелочной среде и получить 12. Альфа-цианирование, затем окисление дает цианоеноны 14.
Схема 4:
На схеме 4 спироазетидин используют для иллюстративных целей. Другие амины можно функционализировать по аналогичной реакции. Если R3 и R4 означают спироциклический амин, аминный заместитель можно функционализировать по двухстадийной процедуре. У защищенного амина 15 можно удалить защитную группу в кислой среде и получить амин 16. Амин 16 можно использовать во множестве реакций. Сульфонилирование с использованием сульфонилхлоридов дает сульфонамиды 17. Альтернативно, амиды 18 можно получить с ацилхлоридами или карбоновыми кислотами. Альтернативно, алкилирование алкилгалогенидами дает алкиламины 19. В заключение катализируемая палладием реакция сочетания C-N с арилгалогенидами дает ариламины 20.
Схема 5:
На схеме 5 необязательно замещенные спироциклические цианоеноны 25 можно синтезировать по 5-стадийной процедуре. Необязательно замещенные спироциклические кетоны 21 можно алкилировать в щелочной среде и получить 22. Из амина можно удалить защитную группу в кислой среде и получить амин 23. Катализируемая палладием реакция сочетания C-N с арилгалогенидами дает ариламины 24. Альфа-цианирование, затем окисление дает спироциклические цианоеноны 25.
Схема 6:
На схеме 6 необязательно замещенные спироциклические индолиноны 31 можно синтезировать по 5-стадийной процедуре. Необязательно замещенные индолиноны 26 можно алкилировать в щелочной среде метилакрилатом и получить 27, который можно циклизовать в щелочной среде и получить 28. Кетон можно алкилировать в щелочной среде и получить 29. Альфа-цианирование, затем окисление дает спироциклические индолиноны 31.
Схема 7:
На схеме 7 необязательно замещенные спироциклические дигидроизобензофураны 40 можно синтезировать по 8-стадийной процедуре. Литиирование необязательно замещенного бромфенила 33 кетоном 32 дает диол 34, который можно замкнуть в спироциклический дигидроизобензофуран в щелочной среде с помощью TsCl или Tf2O и получить 35. Удаление защитной группы в кислой среде дает кетон 36. Альтернативно, диол 34 можно замкнуть в цикл и удалить защитную группу в одном реакторе с помощью TFA и получить кетон 36. Кетон 36 можно алкилировать в щелочной среде и получить 37. Формилирование с последующим замыканием цикла дает изоксазол 39. Раскрытие цикла с последующим окислением дает спироциклические дигидроизобензофураны 40. Необязательное альфа-цианирование 37, затем окисление дает спироциклические дигидроизобензофураны 40. Альтернативно 32, можно использовать кетон с предварительно введенными R1 и R2 в виде метила без проведения превращения 36 в 37.
СИНТЕЗ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ ПРОДУКТОВ
Рацемические соединения, которые очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой или нормальной фазой, дополнительно очищали с помощью хиральной SFC. Там, где указано, энантиомер 1 относится к первому элюирующемуся пику и энантиомер 2 относится ко второму элюирующемуся пику. В ином случае соединения являются ахиральными или рацемическими.
Схема 8:
Промежуточный продукт 1: 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил.HCl
Стадия 1: Трет-бутил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-2-карбоксилат (829 мг, 3,27 ммоля) растворяли в tBuOH (16 мл). Трет-бутоксид калия (918 мг, 8,18 ммоля) медленно добавляли в атмосфере азота и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. По каплям добавляли метилйодид (0,430 мл, 6,87 ммоля) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (20 мл) и водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-50% Et2O/гексаны) и получали трет-бутил-7,7-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-2-карбоксилат в виде масла. MS: 226 (M+H - tBu).
Стадия 2: К суспензии гидрида натрия (151 мг, 3,76 ммоля) в THF (5,5 мл) при 0°C добавляли раствор трет-бутил-7,7-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-2-карбоксилата (921 мг, 3,27 ммоля) в THF (5,5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при 0°C. Затем добавляли этилформиат (0,793 мл, 9,82 ммоля) и реакционной смеси давали нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. К смеси добавляли 0,5 экв. NaH и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали насыщенным раствором NH4Cl (водным) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным тил-(Z)-9-(гидроксиметилен)-7,7-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-2-карбоксилат сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали трет-Bu в виде жидкости, которую использовали без дополнительной очистки. MS: 254 (M+H - tBu).
Стадия 3: К раствору трет-бутил-(Z)-9-(гидроксиметилен)-7,7-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-2-карбоксилата (1,01 г, 3,27 ммоля) в 10:1 EtOH:H2O (8 мл) добавляли раствор гидроксиламингидрохлорида (0,25 г, 3,6 ммоля) в 10:1 EtOH:H2O (8 мл). Реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток подщелачивали насыщенным раствором NaHCO3 (водным) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали трет-бутил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]-1'-карбоксилат в виде маслянистого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. MS: 251 (M+H - tBu).
Стадия 4: К раствору трет-бутил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]-1'-карбоксилата (1,0 г, 3,3 ммоля) в MeOH (16 мл) добавляли метоксид натрия (30% в MeOH, 1,87 мл, 9,79 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении, разбавляли с помощью EtOAc и нейтрализовывали 1 M водным раствором HCl (9,8 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% Et2O/гексаны) и получали трет-бутил-9-циано-7,7-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-2-карбоксилат в виде вспененного вещества. MS: 251 (M+H - tBu).
Стадия 5: К раствору трет-бутил-9-циано-7,7-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-2-карбоксилата (843 мг, 2,75 ммоля) в THF (5,5 мл) при комнатной температуре добавляли ацетат палладия(II) (618 мг, 2,75 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении и затем разбавляли с помощью DCM (5 мл) и 1:1 вода:рассол (5 мл). Органический слой собирали с помощью разделителя фаз и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-80% Et2O/гексаны) и получали трет-бутил-7-циано-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-2-карбоксилат в виде маслообразного вспененного вещества. MS: 249 (M+H - tBu).
Альтернативная стадия 5: К раствору пиридина (34 мкл, 0,42 ммоля) в DCM (0,5 мл) при 0°C добавляли раствор фенилселенилхлорид (80 мг, 0,42 ммоля) в DCM (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при 0°C, затем добавляли раствор трет-бутил-9-циано-7,7-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-2-карбоксилата (64 мг, 0,209 ммоля) в DCM (1 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C и затем промывали 1 M водным раствором HCl (2 мл). Фазы разделяли и органическую фазу обрабатывали пероксидом водорода (30% в воде, 430 мкл, 4,2 ммоля) при 0°C. Реакционную смесь энергично перемешивали в течение 15 мин, затем фазы разделяли и органическую фазу концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% Et2O/гексаны) и получали трет-бутил-7-циано-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-2-карбоксилат в виде маслообразного вспененного вещества. MS: 249 (M+H - tBu).
Альтернативная стадия 5: К раствору соединения 5 (40,0 г, 124 ммоля, 1,0 экв.) в толуоле (0,4 л) при 25°C добавляли DDQ (42,2 г, 186 ммоля, 1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 110°C в течение 3 ч.Реакционную смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали остаток. Очистка с помощью колоночной хроматографии (SiO2, петролейный эфир:этилацетат=от 100:1 до 50:1) давала $ (23,0 г, 67,5 ммоля, 54,4% выход, 94% чистота) в виде светло-желтого твердого вещества. 1HNMR: ET33537-23-P1A1 (400 MHz, CDCl3) δ 7,61 (s, 1 H), 3,72-3,79 (m, 3 H), 3,62 (s, 1 H), 3,21-3,26 (m, 1 H), 3,15-3,19 (m, 1 H), 2,01-2,05 (m, 1 H), 1,82-,86 (m, 1 H), 1,48 (s, 9 H), 1,30 (s, 3 H), 1,20 (s, 3 H).
Стадия 6: Трет-бутил-7-циано-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-2-карбоксилат (443 мг, 1,45 ммоля) растворяли в DCM (14 мл). Добавляли HCl (4,0 M в диоксане, 3,64 мл, 14,5 ммоля) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил.HCl в виде вспененного вещества, которое использовали без дополнительной очистки. MS: 205 (M+H).
Схема 9:
Промежуточный продукт 5: 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил.HCl
Промежуточный продукт 6: 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил.HCl
Стадия 1: Трет-бутил-7-циано-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-2-карбоксилат (1,1 г, 3,6 ммоля) очищали с помощью хиральной SFC (OJ-H колонка, 15% MeOH/85% CO2 с 0,1% NH4OH в качестве модификатора) и получали два продукта в виде твердых веществ:
Трет-бутил-7-циано-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-2-карбоксилат (энантиомер 1). MS: 249 (M+H - tBu).
Трет-бутил-7-циано-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-2-карбоксилат (энантиомер 2). MS: 249 (M+H - tBu).
Стадия 2: К трет-бутил-7-циано-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-2-карбоксилату (энантиомер 1, 405 мг, 1,33 ммоля), растворенному в DCM (10 мл), добавляли HCl (4,0 M в диоксане, 3,33 мл, 13,3 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил.HCl (промежуточный продукт 5) в виде твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. MS: 205 (M+H).
Следует отметить, что из энантиомера 2 удаляли защитную группу по такой же процедуре, как описанная на стадии 2, и выделяли в качестве промежуточного продукта 6.
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Схема 10:
Промежуточный продукт 9: 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил.HCl
Стадия 1: К раствору трет-бутил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нонан-2-карбоксилата (1,25 г, 5,22 ммоля) в tBuOH (26 мл) добавляли трет-бутоксид калия (1,46 г, 13,1 ммоля) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К смеси добавляли метилйодид (0,685 мл, 11,0 ммоля) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (100 мл) и смесь экстрагировали с помощью EtOAc (3×75 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-30% EtOAc/гексаны) и получали трет-бутил-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нонан-2-карбоксилат в виде твердого вещества. MS: 212 (M+H - tBu).
Стадия 2: К LDA (2,0 M в THF, 2,32 мл, 4,64 ммоля) при -78°C по каплям добавляли раствор трет-бутил-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нонан-2-карбоксилата (620 мг, 2,32 ммоля) в THF (4 мл). Смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин. По каплям добавляли раствор 4-метилбензолсульфонилцианид (420 мг, 2,32 ммоля) в THF (3 мл) и смесь перемешивали в течение еще 30 мин при -78°C. Реакцию останавливали с помощью 2 M NH4OH (1,2 мл) и давали нагреться до комнатной температуры. Затем смесь нейтрализовывали 1 M водным раствором HCl до pH ~7 и экстрагировали с помощью EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-30% EtOAc/гексаны) и получали трет-бутил-8-циано-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нонан-2-карбоксилат в виде твердого вещества. MS: 237 (M+H - tBu).
Стадия 3: К раствору пиридина (314 мкл, 3,90 ммоля) в DCM (2,5 мл) при 0°C добавляли раствор фенилселенилхлорида (747 мг, 3,90 ммоля) в DCM (2,5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при 0°C, затем добавляли раствор трет-бутил-8-циано-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нонан-2-карбоксилата (570 мг, 1,95 ммоля) в DCM (5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C, затем промывали 1 M водным раствором HCl (8 мл) затем водой (16 мл). Фазы разделяли и органическую фазу обрабатывали пероксидом водорода (30% в воде, 4,0 мл, 39 ммоля) при 0°C. Реакционную смесь энергично перемешивали в течение 15 мин, затем фазы разделяли и органическую фазу концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-40% EtOAc/гексаны) и получали трет-бутил-6-циано-8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-2-карбоксилат в виде твердого вещества. MS: 235 (M+H - tBu).
Стадия 4: К раствору трет-бутил-6-циано-8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-2-карбоксилата (465 мг, 1,60 ммоля) в DCM (16 мл) добавляли HCl (4 M в THF, 4,0 мл, 16 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил в виде соли с HCl. MS: 191 (M+H).
Схема 11:
Промежуточный продукт 10: 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]гидрохлорид
Стадия 1: К раствору трет-бутил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]-1'-карбоксилата (2 г, 6,53 ммоля) в 2-MeTHF (10 мл) добавляли хлористоводородную кислоту (4 M в 1,4-диоксане, 30 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 18°C. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток выпаривали вместе с THF (15 мл×5) и получали 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]гидрохлорид (1,585 г, 6,53 ммоля, 100% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C12H18N2O [M+H]+ 207,14 найдено 207,10,1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,39 (s, 2H), 8,38 (s, 1H), 3,32-3,14 (m, 2H), 3,11-3,01 (m, 1H), 2,96-2,83 (m, 1H), 2,57 (d, J=15,7 Hz, 1H), 2,42 (d, J=15,7 Hz, 1H), 1,91-1,75 (m, 4H), 1,29 (s, 3H), 1,26 (s, 3H).
Схема 11:
Промежуточный продукт 13: N-метил-N-(1-метил-4-оксоциклогексил)бензамид
Стадия 1: К раствору 8-метил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-амина (1,89 г, 11,0 ммоля) в DCM (10 мл) добавляли триэтиламин (6,12 мл, 44,1 ммоля) и бензоилхлорид (2,56 мл, 22,1 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию останавливали водным раствором HCl (1 M, 10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% Et2O/гексаны) и получали N-(8-метил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)бензамид в виде твердого вещества. MS: 276 (M+H).
Стадия 2: К раствору N-(8-метил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)бензамида (2,76 г, 10,0 ммоля) в DCM (10 мл) добавляли гидрид натрия (1,00 г, 25,1 ммоля) и йодметан (2,18 мл, 35,1 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию останавливали водным раствором HCl (1 M, 10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали N-метил-N-(8-метил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)бензамид в виде твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. MS: 290 (M+H).
Стадия 3: Раствор N-метил-N-(8-метил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)бензамида (2,9 г, 10 ммоля) в ацетоне (11 мл), HCl (37 мас.% в H2O, 5,5 мл) и воде (5,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь нейтрализовывали водным раствором NaOH (2 M) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% Et2O/гексаны) и получали N-метил-N-(1-метил-4-оксоциклогексил)бензамид в виде твердого вещества. MS: 246 (M+H).
Схема 12:
Промежуточный продукт 14: N, N-диметил-4-оксо-1-фенилциклогексан-1-карбоксамид
Стадия 1: К раствору метил-4-оксо-1-фенилциклогексан-1-карбоксилата (1,4 г, 6,0 ммоля) в THF (18 мл) и MeOH (9 мл) добавляли гидроксид натрия (2,0 M в воде, 9,0 мл, 18 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали 4-оксо-1-фенилциклогексан-1-карбоновую кислоту в виде твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. MS: 219 (M+H).
Стадия 2: Раствор 4-оксо-1-фенилциклогексан-1-карбоновой кислоты (1,3 г, 6,0 ммоля), диметиламина (2,0 M в THF, 4,5 мл, 9,0 ммоля), N, N-диизопропилэтиламина (2,1 мл, 12 ммоля) и HATU (2,85 г, 7,50 ммоля) в DMF (7,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc, промывали водным раствором HCl (1 M), насыщенным водным раствором NaHCO3 и рассолом. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (20-90% Et2O/гексаны) и получали N, N-диметил-4-оксо-1-фенилциклогексан-1-карбоксамид в виде твердого вещества. MS: 246 (M+H).
Схема 13:
Промежуточный продукт 15: 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он
Стадия 1: К раствору циклогексан-1,4-диола (100 г, 860 ммоля) в DMF (2,5 л) добавляли NaH (68,9 г, 1,72 моля) при 0°C. Затем по каплям добавляли бензилбромид (161 г, 946 ммоля) и полученный раствор перемешивали при температуре окружающей среды в течение 12 ч. Реакцию останавливали путем добавления насыщенного водного раствора хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (3×). Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир (от 1 : 50 до 1 : 3) и получали 4-(бензилокси)циклогексан-1-ол. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,23-7,39 (m, 5H), 4,53 (d, J=5,6 Hz, 2H), 3,63-3,79 (m, 1H), 3,34-3,52 (m, 1H), 1,96-2,10 (m, 2H), 1,85-1,94 (m, 1H), 1,63-1,77 (m, 2H), 1,54-1,62 (m, 1H), 1,24-1,48 (m, 3H), 1,24-1,48 (m, 1H).
Стадия 2: К раствору 4-(бензилокси)циклогексан-1-ола (7,00 г, 33,9 ммоля) в DCM (140,0 мл) добавляли PCC (10,9 г, 50,9 ммоля) и celatom® (10,9 г) при температуре окружающей среды. Полученную смесь перемешивали в течение 12 ч. Реакционную смесь фильтровали и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (2×). Органический слой концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир (от 1 : 5 до 1 : 3) и получали 4-(бензилокси)циклогексан-1-он. MS: 205 (M+H).
Стадия 3: К раствору 4-(бензилокси)циклогексан-1-она (100 г, 489 ммоля) в t-BuOH (1,0 л) добавляли трет-бутоксид калия (137 г, 1,22 моля). Полученную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 ч. По каплям добавляли йодметан (145 г, 1,03 моля) и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 ч. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (5,0 л) и экстрагировали этилацетатом (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом (1,0 л) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир (от 1 : 100 до 5 : 100) и получали 4-(бензилокси)-2,2-диметилциклогексан-1-он. MS: 233 (M+H).
Стадия 4: К раствору 4-(бензилокси)-2,2-диметилциклогексан-1-она (132 г, 568 ммоля) в толуоле (2,0 л) добавляли 4-метилбензолсульфоновую кислоту (7,81 г, 45,3 ммоля) и этан-1,2-диол (105 г, 1,70 моля) при температуре окружающей среды. Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в азеотропных условиях в течение 12 ч. После охлаждения, смесь выливали в насыщенный раствор бикарбоната натрия (3,0 л) и экстрагировали этилацетатом (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом (800 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью препаративной HPLC (ACN/H2O с 10 мМ NH4HCO3 в качестве модификатора) и получали 8-(бензилокси)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан. MS: 277 (M+H).
Стадия 5: К раствору 8-(бензилокси)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декана (55,0 г, 199 ммоля) в метаноле (500 мл) добавляли Pd/C (10%, 25,0 г) при температуре окружающей среды в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 ч в атмосфере H2 (20 фунт-сила/дюйм2). Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS: 187 (M+H).
Стадия 6: К раствору 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (51,0 г, 273 ммоля) в дихлорметане (1,0 л) добавляли PCC (106 г, 493 ммоля) и celatom® (106 г) при температуре окружающей среды. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (3×). Органический слой концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир (от 1 : 50 до 1 : 30) и получали 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он. MS: 185 (M+H).
Схема 14:
Промежуточный продукт 16: 5'-хлор-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-4-он
Стадия 1: К раствору (2-бром-5-хлорфенил)метанола (2,22 г, 10,0 ммоля) в THF (30 мл) при -78°C добавляли н-бутиллитий (2,5 M в гексанах, 8,0 мл, 20 ммоля). Полученную суспензию перемешивали в течение 45 мин при -78°C. Добавляли раствор 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (1,56 г, 10,0 ммоля) в THF (3 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при -78°C. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл), нагревали до комнатной температуры и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-10% MeOH/DCM) и получали 8-(4-хлор-2-(гидроксиметил)фенил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол в виде масла. MS: 281 (M+H-H2O).
Стадия 2: К раствору 8-(4-хлор-2-(гидроксиметил)фенил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (1,4 г, 4,7 ммоля) в DCM (16 мл) добавляли п-толуолсульфонилхлорид (1,34 г, 7,03 ммоля), триэтиламин (1,95 мл, 14,1 ммоля) и 4-диметиламинопиридин (0,057 г, 0,4 7 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакцию останавливали водным раствором HCl (1 M, 10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-60% Et2O/гексаны) и получали 5-хлор-3H-диспиро[изобензофуран-1,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолан] в виде твердого вещества. MS: 281 (M+H).
Стадия 3: Раствор 5-хлор-3H-диспиро[изобензофуран-1,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолана] (7 65 мг, 2,72 ммоля) в ацетоне (3,6 мл), THF (3,6 мл), хлористоводородной кислоте (37 мас. % в H2O, 1,8 мл) и воде (1,8 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь нейтрализовывали водным раствором NaOH (2 M) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% Et2O/гексаны) и получали 5'-хлор-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-4-он в виде твердого вещества. MS: 237 (M+H). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7,29 (s, 1H), 7,26 (широкий s, 1H), 7,04 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,14 (s, 2H), 2,94-2,85 (m, 2H), 2,44-2,38 (m, 2H), 2,18-2,10 (m, 4H).
Из промежуточного продукта 15
Схема 15:
Промежуточный продукт 20: 3'-метил-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-4-он
Стадия 1: К раствору 1-(2-бромфенил)этан-1-ола (1,97 г, 9,80 ммоля) в THF (30 мл) при -78°C добавляли н-бутиллитий (2,5 M в гексанах, 7,84 мл, 19,6 ммоля). Полученную суспензию перемешивали в течение 1 ч при -78°C. Добавляли раствор 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (1,53 г, 9,80 ммоля) в THF (3 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при -78°C. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% Et2O/гексаны) и получали 8-(2-(1-гидроксиэтил)фенил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол в виде масла. MS: 261 (M+H - H2O).
Стадия 2: Раствор 8-(2-(1-гидроксиэтил)фенил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (1,25 г, 4,49 ммоля) в DCM (9 мл) и TFA (9 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию останавливали водным раствором NaOH (2 M) и экстрагировали с помощью DCM (3×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-45% Et2O/гексаны) и получали 3'-метил-3'Н-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-4-он в виде твердого вещества. MS: 217 (M+H).
Схема 15:
Промежуточный продукт 22: 5'-(трифторметил)-3'Н-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-4-он
Стадия 1: К раствору (2-бром-5-(трифторметил)фенил)метанола (3 г, 11,8 ммоля) в THF (35 мл) при -78°C добавляли н-бутиллитий (2,5 M в гексанах, 9,41 мл, 23,5 ммоля). Полученную суспензию перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли раствор 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (1,84 г, 11,8 ммоля) в THF (4 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при -78°С. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% Et2O/гексаны) и получали 8-(2-(гидроксиметил)-4-(трифторметил)фенил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол в виде масла. MS: 315 (M+H - H2O).
Стадия 2: К раствору 8-(2-(гидроксиметил)-4-(трифторметил)фенил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (2,09 г, 6,29 ммоля) в DCM (21 мл) добавляли п-толуолсульфонилхлорид (1,8 г, 9,4 ммоля), триэтиламин (2,6 мл, 18,8 ммоля) и 4-диметиламинопиридин (77 мг, 0,63 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакцию останавливали водным раствором HCl (1 M, 10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-60% Et2O/гексаны) и получали 5-(трифторметил)-3H-диспиро[изобензофуран-1,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолан] в виде масла. MS: 315 (M+H).
Стадия 3: Раствор 5-(трифторметил)-3H-диспиро[изобензофуран-1,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолана] (1,2 г, 3,8 ммоля) в DCM (6,5 мл) и TFA (6,5 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию останавливали водным раствором NaOH (2 M, 10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% Et2O/гексаны) и получали 5'-(трифторметил)-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-4-он в виде масла. MS: 271 (M+H).
Схема 16:
Промежуточный продукт 23: 7'H-спиро[циклогексан-1,5'-фуро[3,4-b]пиридин]-4-он
Стадия 1: При перемешивании к смеси (3-бромпиридин-2-ил)метанола (8 г, 42,5 ммоля) и 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (6,65 г, 42,5 ммоля) в THF (110 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 M в гексане, 34,0 мл, 85 ммоля) при -78°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (100 мл), экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash хроматографии при следующих условиях: колонка: C 18 гелевая колонка (330 г), 20-45 мкм, 19×150 мм; подвижная фаза A: 5 мМ водный раствор NH4HCO3; подвижная фаза B: MeCN; градиентный режим: 20% выдерживание в течение 7 мин, до 35% за 20 мин; скорость потока: 100 мл/мин; детектор: UV 254 и 210 нм; RT: 15 мин и получали 8-(2-(гидроксиметил)пиридин-3-ил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (1,6 г, 6,03 ммоля, 14% выход) в виде желтого масла. MS: m/z=266,15 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,46-7,45 (m, 1H), 7,56-7,32 (m, 1H), 7,23-7,20 (m, 1H), 5,03 (s, 2H), 4,03-3,95 (m, 4H), 2,20-2,07 (m, 4H), 1,95-1,88 (m, 2H), 1,72-1,69 (m, 2H).
Стадия 2: При перемешивании к смеси 8-(2-(гидроксиметил)пиридин-3-ил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (1,6 г, 6,03 ммоля) с DCM (5 мл) добавляли 4-диметиламинопиридин (0,074 г, 0,603 ммоля), триэтиламин (1,831 г, 18,09 ммоля) и трифторметансульфоновый ангидрид (2,55 г, 9,05 ммоля) при температуре окружающей среды. Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции смесь разбавляли водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (3×40 мл). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (40 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле в градиентном режиме 60 ~ 75% EA в PE и получали 7H-диспиро[фуро[3,4-b]пиридин-5,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолан] (800 мг, 3,24 ммоля, 53% выход) в виде желтого масла. MS: m/z=248,20 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,48-8,47 (m, 1H), 7,49-7,47 (m, 1H), 7,20-7,17 (m, 1H), 5,06 (s, 2H), 4,04-3,97 (m, 4H), 2,13-1,94 ( m, 4H), 1,90-1,76 (m, 2H), 1,75-1,72 (m, 2H).
Стадия 3: При перемешивании к смеси 7H-диспиро[фуро[3,4-b]пиридин-5,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолана] (800 мг, 3,24 ммоля) с THF (5 мл) добавляли хлористоводородную кислоту (5 мл, 18,00 ммоля, 2 M) при температуре окружающей среды. Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции смесь нейтрализовывали насыщенным раствором NaHCO3 (15 мл), экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Flash хроматографии при следующих условиях: колонка: C 18 гелевая колонка (80 г), 20-35 мкм, 19×150 мм; подвижная фаза A: 5 мМ водный раствор NH4HCO3; подвижная фаза B: MeCN; градиентный режим: 0% выдерживание в течение 5 мин, до 38% за 20 мин; 38% выдерживание в течение 2,2 мин. Скорость потока: 70 мл/мин; детектор: UV 254 и 210 нм; RT: 15 мин и получали 7'H-спиро[циклогексан-1,5'-фуро[3,4-b]пиридин]-4-он (500 мг, 2,460 ммоля, 76% выход) в виде белого твердого вещества. MS: m/z=204,20 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,56-8,54 (m, 1H), 7,47-7,44 (m, 1H), 7,25-7,21 (m, 1H), 5,17 (s, 2H), 3,01-2,89 (m, 2H), 2,46-2,38 (m, 2H), 2,26-2,09 (m, 4H).
Схема 17:
Промежуточный продукт 24: 3H-спиро[бензофуран-2,1'-циклогексан]-4'-он
Стадия 1: К суспензии магниевой стружки (1,56 г, 64,0 ммоля) в диэтиловом эфире (20 мл) добавляли I2 (0,163 г, 0,64 ммоля), затем 1-(бромметил)-2-фторбензол (0,24 г, 1,28 ммоля) в атмосфере азота. Для инициирования реакции использовали мощную термовоздуходувку, затем 1-(бромметил)-2-фторбензол (4,84 г, 25,6 ммоля) в диэтиловом эфире (5,0 мл) медленно добавляли при такой скорости, чтобы поддерживать слабое кипение. После завершения добавления реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч, охлаждали до комнатной температуры и раствор 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (2,0 г, 12,81 ммоля) в диэтиловом эфире (5,0 мл) и тетрагидрофуран (5,0 мл) медленно добавляли при энергичном перемешивании. После завершения добавления реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли водный раствор NH4Cl (50 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, экстрагировали этилацетатом (3×150 мл), промывали водой (200 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью EA : PE=0% - 30% и получали 8-(2-фторбензил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (3,00 г, 11,27 ммоля, 88% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,28-7,21 (m, 2H), 7,14-7,04 (m, 2H), 3,97 (d, J=1,8 Hz, 4H), 2,86 (d, J=1,8 Hz, 2H), 1,98-1,72 (m, 4H), 1,70-1,62 (m, 4H).
Стадия 2: 8-(2-фторбензил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (2,4 г, 9,01 ммоля) и гидрид натрия (60 мас.% дисперсия в минеральном масле, 511 мг, 11,73 ммоля) в толуоле (21 мл) нагревали при 110°C в течение 5 мин. Добавляли DMF (7 мл) и смесь перемешивали при 110°C в течение 30 мин, затем давали охладиться до комнатной температуры. Реакцию останавливали водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью EA : PE=5% - 40% и получали 3H-диспиро[1-бензофуран-2,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолан] (1,9 г, 7,71 ммоля, 86% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS: m/z=247,10 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,23-7,11 (m, 2H), 6,86-6,77 (m, 2H), 4,06-3,96 (m, 4H), 3,03 (s, 2H), 2,10-2,00 (m, 4H), 1,93-1,68 (m, 4H).
Стадия 3: К раствору 3H-диспиро[1-бензофуран-2,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолана] (1,9 г, 7,71 ммоля) в тетрагидрофуране (8 мл) по каплям добавляли 1 н. водный раствор HCl (8,0 мл, 97 ммоля) при 0°C в атмосфере аргона. Полученную смесь нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 3 ч. Реакцию останавливали водой (50 мл) и значение pH раствора устанавливали равным 6 ~ 7 1 н. водным раствором NaHCO3. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью EA : PE=5-40% и получали 3H-спиро[бензофуран-2,1'-циклогексан]-4'-он (1,3 г, 6,43 ммоля, 83% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS: m/z=203,05 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,21-7,15 (m, 2H), 6,92-6,82 (m, 2H), 3,12 (s, 2H), 2,93-2,82 (m, 2H), 2,42-2,32 (m, 4H), 2,08-1,98 (m, 2H).
Схема 18:
Промежуточный продукт 26: спиро[циклогексан-1,3'-изохроман]-4-он
Стадия 1: К суспензии магниевой стружки (2,45 г, 101 ммоля) в диэтиловом эфире (40,0 мл) добавляли I2 (0,26 г, 1,024 ммоля), затем 1-бром-2-(бромметил)бензол (0,34 г, 1,35 ммоля) в атмосфере азота. Для инициирования реакции использовали мощную термовоздуходувку, затем 1-бром-2-(бромметил)бензол (5,04 г, 20,17 ммоля) в диэтиловом эфире (10,0 мл) медленно добавляли при такой скорости, чтобы поддерживать слабое кипение. После завершения добавления реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч, охлаждали до комнатной температуры и раствор 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он (2,1 г, 13,45 ммоля) в диэтиловом эфире (10,0 мл) и тетрагидрофуран (10,0 мл) медленно добавляли при энергичном перемешивании. После завершения добавления реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли водный раствор NH4Cl (40 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, экстрагировали этилацетатом (200 мл×3), промывали с помощью H2O (300 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% - 30% этилацетата в петролейном эфире и получали 8-(2-бромбензил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (3,3 г, 10,09 ммоля, 75% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,59 (dd, J=8,0, 1,3 Hz, 1H), 7,38-7,18 (m, 2H), 7,17-7,06 (m, 1H), 3,97 (s, 4H), 3,04 (s, 2H), 1,98-1,58 (m, 8H).
Стадия 2: н-бутиллитий (2,5 M в н-гексане, 4,89 мл, 12,22 ммоля) по каплям добавляли к раствору 8-(2-бромбензил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (2,0 г, 6,11 ммоля) в тетрагидрофуране (15,0 мл) при -78°C. Полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 1 ч в атмосфере азота. Диметилформамид (2,37 мл, 30,6 ммоля) добавляли к смеси при -78°C и полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 1,5 ч. Реакцию останавливали насыщенным раствором хлорида аммония (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали неочищенный 2-((8-гидрокси-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метил)бензальдегид (1,689 г, 6,11 ммоля, 100% выход) в виде светло-желтого масла, которое использовали на следующей стадии без обработки.
Стадия 3: К смеси 2-((8-гидрокси-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метил)бензальдегида (1,689 г, 0,00 ммоля) с метанолом (8,0 мл) добавляли борогидрид натрия (0,35 г, 9,17 ммоля) при температуре окружающей среды и смесь перемешивали при этой температуре в течение 1 ч в атмосфере азота. Реакцию останавливали насыщенным раствором хлорида аммония (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме с помощью от 1:100 до 1:20 метанол в дихлорметане и получали 8-(2-(гидроксиметил)бензил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (1,3 г, 4,67 ммоля, 76% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C16H22O4 [M+Na]+ 301,14 найдено 301,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,42-7,35 (m, 1H), 7,35-7,23 (m, 2H), 7,23-7,14 (m, 1H), 4,65 (s, 2H), 3,98 (s, 4H), 2,92 (s, 2H), 1,93-1,58 (m, 8H).
Стадия 4: К раствору 8-(2-(гидроксиметил)бензил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (1,5 г, 5,39 ммоля) в толуоле (15 мл) добавляли фосфорную кислоту (85% в воде, 1,5 мл, 5,39 ммоля) при температуре окружающей среды. Смесь перемешивали в течение 1 ч при 110°C. Затем толуол удаляли путем отгонки и полученный остаток разбавляли водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (50 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 10% - 60% этилацетата в петролейном эфире и получали спиро[циклогексан-1,3'-изохроман]-4-он (800 мг, 3,70 ммоля, 67% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C14H16O2 [M+H]+ 217,12 найдено 217,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,31-7,16 (m, 2H), 7,15-7,05 (m, 2H), 4,87 (s, 2H), 2,79 (s, 2H), 2,78-2,67 (m, 2H), 2,37-2,12 (m, 4H), 1,88-1,76 (m, 2H).
Схема 19:
Промежуточный продукт 27: 1',4'-дигидро-2'H-спиро[циклогексан-1,3'-хинолин]-2',4-дион
Стадия 1: К раствору 1-метил-4-оксоциклогексан-1-карбоновой кислоты (2 г, 12,81 ммоля) в DCM (25 мл) добавляли N, N-диметилформамид (0,099 мл, 1,281 ммоля) и оксалилхлорид (1,625 г, 12,81 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 25°C. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток трижды выпаривали вместе с DCM и получали 1-метил-4-оксоциклогексан-1-карбонилхлорид (2,237 г, 12,81 ммоля, 100% выход) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 2: К раствору 1-метил-4-оксоциклогексан-1-карбонилхлорида (2,237 г, 12,81 ммоля) в DCM (25 мл) добавляли N, N-диизопропилэтиламин (3,31 г, 25,6 ммоля) и 2-броманилин (4,41 г, 25,6 ммоля) в DCM (1 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 16 ч при 25°C. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 10% - 70% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали N-(2-бромфенил)-1-метил-4-оксоциклогексан-1-карбоксамид (3,6 г, 11,61 ммоля, 91% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C14H16BrNO2 [M+H]+ 310,04 найдено 310,00. 1H-NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,34 (dd, J=8,3, 1,6 Hz, 1H), 8,04 (brs, 1H), 7,56 (dd, J=8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,39-7,30 (m, 1H), 7,07-6,96 (m, 1H), 2,70-2,53 (m, 2H), 2,53-2,33 (m, 4H), 1,96-1,78 (m, 2H), 1,47 (s, 3H).
Схема 20:
Промежуточный продукт 28: 3,3-диметил-5',6'-дигидроспиро[циклогексан-1,8'-имидазо[2,1-c][1,4]оксазин]-4-он
Стадия 1: К раствору 1-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-1H-имидазола (5,59 г, 24,69 ммоля) в THF (30 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 M в н-гексане, 9,87 мл, 24,69 ммоля) при -78°C и смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем раствор 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он (3,79 г, 20,57 ммоля) в THF (21 мл) добавляли к указанной выше смеси при -78°C и полученную смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (400 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали неочищенный 8-(1-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-1H-имидазол-2-ил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (8,44 г), который использовали без обработки на следующей стадии. MS ESI рассчитано для C21H38N2O4Si [M+H]+ 411,26 найдено 411,25.
Стадия 2: К раствору 8-(1-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-1H-имидазол-2-ил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (8,44 г, 20,57 ммоля) в THF (66 мл) добавляли фтористоводородную кислоту (70% в пиридине, 25,6 мл) при 0°C и раствор перемешивали в течение 20 мин при 0°C и в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали насыщенным раствором бикарбоната натрия (100 мл) и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой при следующих условиях: колонка AQ C18 сферический 20-35 мкм; подвижная фаза: 0%-30% ацетонитрила в воде, UV 210 нм. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 8-(1-(2-гидроксиэтил)-1H-имидазол-2-ил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (3,18 г, 10,72 ммоля, 52,1% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C15H24N2O4 [M+H]+ 279,17 найдено 279,20. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,07 (d, J=1,2 Hz, 1H), 6,69 (d, J=1,2 Hz, 1H), 5,10 (s, 1H), 4,96 (t, 1H), 4,32-4,22 (m, 2H), 3,98-3,76 (m, 4H), 3,72-3,62 (m, 2H), 2,37-2,21 (m, 1H), 2,11-1,76 (m, 5H), 1,11 (s, 3H), 0,67 (s, 3H).
Стадия 3: К раствору 8-(1-(2-гидроксиэтил)-1H-имидазол-2-ил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (3,177 г, 10,72 ммоля) в DCM (78 мл) добавляли 4-диметиламинопиридин (0,131 г, 1,072 ммоля), триэтиламин (3,25 г, 32,2 ммоля) и п-толуолсульфонилхлорид (3,07 г, 16,08 ммоля) при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение 16 ч. Реакцию останавливали водой (60 мл) и экстрагировали этилацетатом (60 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл ), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой при следующих условиях: колонка AQ C18 сферический 20-40 мкм; подвижная фаза: 0% - 50% ацетонитрила в воде, UV 210 нм. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-(2-(8-гидрокси-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)-1H-имидазол-1-ил)этил-4-метилбензолсульфонат (3,3 г, 7,32 ммоля, 68,3% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C22H30N2O6S [M+H]+ 451,18 найдено 451,25. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,68 (d, J=7,9 Hz, 2H), 7,32 (d, J=8,0 Hz, 2H), 6,89 (d, J=1,5 Hz, 1H), 6,87 (d, J=1,4 Hz, 1H), 4,55-4,51 (m, 2H), 4,35-4,25 (m, 2H), 4,01-3,92 (m, 2H), 3,92-3,88 (m, 2H), 2,44 (s, 3H), 2,43-2,32 (m, 1H), 2,16 (d, J=14,3 Hz, 1H), 2,07-2,02 (m, 1H), 1,88-1,80 (m, 1H), 1,74-1,60 (m, 2H), 1,20 (s, 3H), 0,80 (s, 3H).
Стадия 4: К смеси гидрида натрия (60% в минеральном масле, 0,439 г, 10,99 ммоля) с DMF (25 мл) добавляли раствор 2-(2-(8-гидрокси-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)-1H-имидазол-1-ил)этил-4-метилбензолсульфоната (3,3 г, 7,32 ммоля) в DMF (25 мл) при 0°C и смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°C и в течение 4 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали с помощью NH4Cl (60 мл) и экстрагировали этилацетатом (70 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (200 мл ), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1~70% EtOAc в петролейном эфире и получали 2',2'-диметил-5,6-дигидродиспиро[имидазо[2,1-c][1,4]оксазин-8,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан] (786 мг, 2,82 ммоля, 38,6% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C15H22N2O3 [M+H]+ 279,16 найдено 279,15. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,03 (s, 1H), 6,81-6,76 (m, 1H), 4,10-3,90 (m, 8H), 2,49 (t, J=13,3 Hz, 1H), 2,26 (d, J=14,7 Hz, 1H), 2,09 (td, J=13,7, 3,8 Hz, 1H), 1,95 (dd, J=14,0, 3,4 Hz, 1H), 1,85 (dd, J=14,8, 3,2 Hz, 1H), 1,59-1,51 (m, 1H), 1,24 (s, 3H), 0,89 (s, 3H).
Стадия 5: К раствору HCl (1,5 M в воде, 10 мл, 15,00 ммоля) добавляли раствор 2',2'-диметил-5,6-дигидродиспиро[имидазо[2,1-c][1,4]оксазин-8,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолана] (786 мг, 2,82 ммоля) в THF (10 мл) при комнатной температуре и раствор перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали насыщенным раствором бикарбоната натрия (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (80 мл ), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1~15% MeOH в DCM и получали 3,3-диметил-5',6'-дигидроспиро[циклогексан-1,8'-имидазо[2,1-c][1,4]оксазин]-4-он (460 мг, 1,963 ммоля, 69,5% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C13H18N2O2 [M+H]+ 235,14 найдено 235,15. 1H-NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,02 (d, J=1,3 Hz, 1H), 6,83 (d, J=1,3 Hz, 1H), 4,29-3,87 (m, 4H), 3,07-2,84 (m, 1H), 2,65-2,01 (m, 5H), 1,34 (s, 3H), 1,10 (s, 3H).
Схема 21:
Промежуточный продукт 29: 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-ол
Промежуточный продукт 30: 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-он
Промежуточный продукт 31: 1',3,3-триметил-1',4'-дигидроспиро[циклогексан-1,6'-фуро[3,4-c]пиразол]-4-он
Стадия 1: К раствору (3-(бензилокси)пропил)трифенилфосфонийбромида (10,06 г, 20,46 ммоля) в THF (23 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 M в гексане, 8,19 мл, 20,46 ммоля) при 0°C и раствор перемешивали в течение 2 ч при 25°C. Затем раствор 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он (2,9 г, 15,74 ммоля) в THF (5 мл) по каплям добавляли к указанному выше раствору при 0°C. Полученную смесь перемешивали в течение 6 ч при 25°C. После завершения реакции реакцию останавливали водным раствором NH4Cl и смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли этилацетатом (200 мл), затем промывали рассолом (20 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 10% - 40% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 8-(3-(бензилокси)пропилиден)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан (4,05 г, 12,80 ммоля, 81% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C20H28O3 [M+H]+ 317,20 найдено 317,15. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,40-7,29 (m, 5H), 5,26 (t, J=7,2 Hz, 0,5H), 5,13 (t, J=7,3 Hz, 0,5H), 4,51 (s, 2H), 4,01-3,87 (m, 4H), 3,49-3,40 (m, 2H), 2,40-2,28 (m, 2H), 2,28-2,15 (m, 2H), 2,14 (s, 1H), 2,07 (s, 1H), 1,67-1,55 (m, 2H), 0,94 (s, 3H), 0,92 (s, 3H).
Стадия 2: К раствору 8-(3-(бензилокси)пропилиден)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декана (3,5 г, 11,06 ммоля) в DCM (175 мл) и 0,5 M водном растворе бикарбоната натрия (53 мл) добавляли m-CPBA (85%, 2,863 г, 14,10 ммоля) при 0°C в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли с помощью DCM (250 мл), затем промывали 0,5 M водным раствором бикарбоната натрия (50 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash при следующих условиях: колонка: AQ-C18 OBD колонка, 330 г; подвижная фаза A: 10 мМ водный раствор NH4HCO3, подвижная фаза B: MeCN; скорость потока:100 мл/мин; градиентный режим: 0% - 100% за 35 мин. Детектор: UV 254 и 210 нм; Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-(2-(бензилокси)этил)-5,5-диметил-1,7,10-триоксадиспиро[2.2.46.23]додекан (2,96 г, 8,90 ммоля, 80,5% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C20H28O4 [M+Na]+ 355,20 найдено 355,25. 1H-NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,43-7,30 (m, 5H), 4,62-4,47 (m, 2H), 4,10-3,88 (m, 4H), 3,82-3,53 (m, 2H), 2,95-2,72 (m, 1H), 2,26-1,50 (m, 8H), 1,13-0,94 (m, 6H).
Стадия 3: 2-(2-(Бензилокси)этил)-5,5-диметил-1,7,10-триоксадиспиро[2.2.46.23]додекан (1,00 г, 3,01 ммоля) растворяли в MeOH (150 мл) и полученную смесь откачивали и помещали в атмосферу аргона при температуре окружающей среды. Затем добавляли гидроксид палладия на угле (20%, 800 мг, 1,14 ммоля) в атмосфере аргона. Суспензию дегазировали в вакууме и трижды продували водородом. Раствор реакционной смеси перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре при 1 атм. водорода. Суспензию фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 10% - 40% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-(5,5-диметил-1,7,10-триоксадиспиро[2.2.46.23]додекан-2-ил)этан-1-ол (684 мг, 2,82 ммоля, 93,8% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C13H22O4 [M+H]+ 243,15 найдено 243,10. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,60 (t, J=4,3 Hz, 0,5H), 5,57 (t, J=4,3 Hz, 0,5H), 3,98-3,77 (m, 4H), 3,63-3,43 (m, 2H), 2,79-2,70 (m, 1H), 1,79-1,34 (m, 8H), 0,98 (s, 1,5H), 0,93 (s, 3H), 0,90 (s, 1,5H).
Стадия 4: К раствору 2-(5,5-диметил-1,7,10-триоксадиспиро[2.2.46.23]додекан-2-ил)этан-1-ола (510 мг, 2,105 ммоля) в DCM (5 мл) добавляли (1S)-(+)-10-камфорсульфоновую кислоту (98 мг, 0,421 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 6 ч при комнатной температуре. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 10% - 40% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 4-гидрокси-7,7-диметил-1-оксаспиро[4.5]декан-8-он (320 мг, 1,614 ммоля, 77% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C11H18O3 [M+H]+ 199,13 найдено 199,20. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,99 (d, J=4,9 Hz, 0,5H), 4,93 (d, J=4,1 Hz, 0,5H), 3,93-3,72 (m, 3H), 2,73 (ddt, J=13,9, 8,4, 5,8 Hz, 1H), 2,24-2,02 (m, 2H), 1,90-1,62 (m, 5H), 1,20 (s, 1,5H), 1,19 (s, 1,5H), 0,97 (s, 1,5H), 0,94 (s, 1,5H).
Стадия 5: К раствору 4-гидрокси-7,7-диметил-1-оксаспиро[4.5]декан-8-она (310 мг, 1,564 ммоля) и этиленгликоля (97 мг, 1,564 ммоля) в толуоле (15 мл) добавляли п-толуолсульфоновую кислоту (269 мг, 1,564 ммоля). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником для удаления воды с помощью ловушки Дина-Штарка в течение 16 ч. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли этилацетатом (100 мл), затем промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-ол (400 мг, неочищенный) в виде коричневого масла, которое сразу использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C13H22O4 [M+H]+ 243,15 найдено 243,20. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,90-4,70 (m, 1H), 3,93-3,60 (m, 7H), 2,15-2,00 (m, 1H), 1,83-1,30 (m, 7H), 1,08 (s, 3H), 0,82 (s, 1,5H), 0,78 (s, 1,5H).
Стадия 6: К раствору 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-ола (400 мг, 1,564 ммоля, неочищенный) в DCM (10 мл) добавляли перйодинан Десса-Мартина (1400 мг, 3,30 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 25°C. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 0% - 30% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента и получали 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-он (220 мг, 0,916 ммоля, 58,6% выход за две стадии) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C13H20O4 [M+H]+ 241,14 найдено 241,20. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 4,28-4,05 (m, 2H), 4,04-3,85 (m, 4H), 2,51 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,00 (td, J=13,4, 4,2 Hz, 1H), 1,85-1,71 (m, 2H), 1,71-1,49 (m, 2H), 1,41 (dd, J=14,1, 2,9 Hz, 1H), 1,22 (s, 3H), 0,90 (s, 3H).
Стадия 7: К раствору 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-она (240 мг, 0,999 ммоля) в этиловом эфире (1 мл) добавляли метанолят калия (140 мг, 1,998 ммоля) и этилформиат (148 мг, 1,998 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 25°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (2 мл). Смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash при следующих условиях: колонка: AQ-C18 OBD колонка, 40 г; подвижная фаза A: вода (0,1% TFA), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 40 мл/мин; градиентный режим: 5% - 60% за 35 мин; детектор: UV 254 и 210 нм; Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 11-(гидроксиметилен)-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-он (256 мг, 0,954 ммоля, 96% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C14H20O5 [M+H]+ 269,13 найдено 269,10
Стадия 8: К раствору 11-(гидроксиметилен)-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-она (256 мг, 0,954 ммоля) в этаноле (5 мл) добавляли метилгидразиндигидрохлорид (227 мг, 1,908 ммоля) и AcOH (229 мг, 3,82 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 85°C. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и получали неочищенный 2,2',2'-триметил-2,4-дигидродиспиро[фуро[3,4-c]пиразол-6,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан] (266 мг, 0,954 ммоля, 100% выход) в виде коричневого твердого вещества, которое сразу использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C15H22N2O3 [M+H]+ 279,16 найдено 279,15.
Стадия 9: К раствору 2,2',2'-триметил-2,4-дигидродиспиро[фуро[3,4-c]пиразол-6,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолана] (266 мг, 0,954 ммоля) в THF (2 мл) добавляли хлористоводородную кислоту (2 M в воде, 3 мл, 6,00 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 25°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакцию останавливали бикарбонатом натрия (0,5 г, 6 ммоля) и смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash при следующих условиях: колонка: AQ-C18 OBD колонка, 40 г; подвижная фаза A: вода (0,1% TFA), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 40 мл/мин; градиентный режим: 5% - 60% за 35 мин. Детектор: UV 254 и 210 нм; Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2',3,3-триметил-2',4'-дигидроспиро[циклогексан-1,6'-фуро[3,4-c]пиразол]-4-он (90 мг, 0,384 ммоля, 40,3% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C13H18N2O2 [M+H]+ 235,14 найдено 235,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,18 (s, 1H), 4,94-4,84 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,21-3,09 (m, 1H), 2,35-2,27 (m, 1H), 2,24-2,12 (m, 2H), 2,10-1,98 (m, 2H), 1,42 (s, 3H), 1,09 (s, 3H).
Схема 22:
Промежуточный продукт 32: 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-он
Промежуточный продукт 33: 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен-11-илтрифторметансульфонат
Стадия 1: К раствору 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (48,0 г, 260 ммоля) в THF (1,0 л) по каплям при -78°C добавляли аллилбромид магния (1 M, 521 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при -78°C. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (1,0 л) и экстрагировали с помощью MTBE (3×). Объединенные органические слои промывали водой (2×), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении и получали 8-аллил-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5,73-5,87 (m, 1H), 4,96-5,15 (m, 2H), 3,77-4,02 (m, 5H), 2,07-2,15 (m, 2H), 1,96-2,05 (m, 1H), 1,51-1,72 (m, 3H), 1,35-1,43 (m, 2H), 1,16-1,22 (m, 3H), 0,76-0,83 (m, 3H).
Стадия 2: К раствору 8-аллил-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (55,0 г, 243 ммоля) в 4:1 растворе вода/ацетон (1,0 л) добавляли OsO4 (0,75 г, 2,95 ммоля) при 0°C. Полученный раствор перемешивали в течение 12 ч при КТ. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором Na2SO3 (0,5 л) и экстрагировали этилацетатом (8×). Объединенные органические слои промывали водой, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир (от 1 : 20 до 1 : 1) и получали 3-(8-гидрокси-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)пропан-1,2-диол. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,76-4,83 (m, 1H), 4,53-4,64 (m, 1H), 4,34-4,42 (m, 1H), 3,76-3,97 (m, 5H), 3,20-3,34 (m, 2H), 1,89-2,03 (m, 1H), 1,57-1,73 (m, 2H), 1,34-1,56 (m, 5H), 1,16-1,24 (m, 3H), 0,79-0,89 (m, 3H).
Стадия 3: К раствору 3-(8-гидрокси-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)пропан-1,2-диола (41,0.г, 158 ммоля) в THF (0,8 л) добавляли триэтиламин (87,7 мл, 630 ммоля). Смесь охлаждали до 0°C и порциями добавляли метансульфонилхлорид (21,7 г, 189 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч и нагревали при 50°C в течение еще 20 ч. Затем смесь разбавляли этилацетатом (250 мл), реакцию останавливали насыщенным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир (от 1 : 50 до 1 : 0) и получали 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.4.2]тетрадекан-11-ол. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,75-4,82 (m, 1H), 4,19-4,28(m, 1H), 3,73-3,91 (m, 6H), 3,48- 3,56 (m, 1H), 1,59-1,92 (m, 5H), 1,51-1,58 (m, 2H), 1,40-1,48 (m, 2H), 1,02-1,10 (m, 3H), 0,78-0,84 (m, 3H).
Стадия 4: К раствору 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.4.2]тетрадекан-11-ола (26,0 г, 107 ммоля) ) в дихлорметане (0,8 л) добавляли PCC (41,6 г, 193. ммоля) при температуре окружающей среды. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир (от 1 : 100 до 1 : 5) и получали 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.4.2]тетрадекан-11-он. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,87-4,00 (m, 6H), 2,24-2,54 (m, 2H), 1,67-1,92 (m, 4H), 1,45-1,64 (m, 2H), 1,04-1,14 (m, 3H), 0,80-0,90 (m, 3H).
Стадия 5: К раствору 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.4.2]тетрадекан-11-она (11,0 г, 45,8 ммоля) в THF (0,3 л) добавляли NaHMDS (2 M, 34,3 мл, 68,6 ммоля) при -78°C и полученный раствор перемешивали в течение 2 ч. Затем добавляли реагент Комина (26,9 г, 68,6 ммоля) и смесь перемешивали при -78°C в течение еще 1 ч. Затем реакционную смесь нагревали при КТ и перемешивали в течение 1 ч. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl и экстрагировали этилацетатом (3×). Объединенные органические слои промывали водой, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир (от 0 до 30%) и получали 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.4.2]тетрадец-11-ен-11-илтрифторметансульфонат. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5,52-5,62 (m, 1H), 4,47-4,60 (m, 2H), 3,78-3,92(m, 4H), 1,89-1,99 (m, 1H), 1,63-1,83 (m, 3H), 1,41-1,57 (m, 3H), 1,08-1,11 (m, 3H), 0,79-0,83 (m, 3H).
Схема 23:
Промежуточный продукт 34: 2-(6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен-11-ил)пиразин
Стадия 1: При перемешивании к раствору 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен-11-илтрифторметансульфоната (600 мг, 1,611 ммоля) в THF (6 мл) добавляли дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (56,6 мг, 0,081 ммоля), 2 н. водный раствор карбоната натрия (4 мл) и 2-(трибутилстаннил)пиразин (1190 мг, 3,22 ммоля). Реакционную смесь трижды дегазировали азотом и перемешивали при 80°C в течение 16 ч в атмосфере азота. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и экстрагировали этилацетатом (50 мл×3). Затем объединенный органический слой промывали рассолом (60 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 10% - 60% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-(6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен-11-ил)пиразин (330 мг, 1,037 ммоля, 64,3% выход) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C17H22N2O3 [M+H]+ 303,17 найдено 303,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,69 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 6,51 (t, J=2,2 Hz, 1H), 5,10 (d, J=2,1 Hz, 2H), 4,09-3,88 (m, 4H), 2,19-2,01(m, 1H), 2,01-1,76 (m, 3H), 1,69-1,52 (m, 2H), 1,26 (s, 3H), 0,93 (s, 3H).
Схема 24:
Промежуточный продукт 35: 6,6-диметил-11-фенил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен
Стадия 1: К раствору 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен-11-илтрифторметансульфоната (600 мг, 1,611 ммоля) в 1,4-диоксане (6 мл) добавляли фенилбороновую кислоту (236 мг, 1,934 ммоля), K2CO3 (557 мг, 4,03 ммоля) и воду (0,6 мл) при комнатной температуре. Затем к указанной выше смеси добавляли Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (132 мг, 0,161 ммоля). Воздух в системе трижды вытесняли азотом и перемешивали в течение 2 ч при 100°C в атмосфере азота. Реакцию останавливали водой (60 мл), экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (насыщенным, 2×50 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0-20% этилацетата в петролейном эфире и получали 6,6-диметил-11-фенил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен (450 мг, 1,498 ммоля, 93% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C19H24O3 [M+H]+ 301,18 найдено 301,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,37-7,27 (m, 5H), 6,01 (t, J=2,1 Hz, 1H), 4,99 (d, J=2,1 Hz, 2H), 4,01-3,92 (m, 4H), 2,07 (td, J=12,7, 4,5 Hz, 1H), 1,88 (td, J=13,0, 4,1 Hz, 1H), 1,82-1,73 (m, 2H), 1,63-1,52 (m, 2H), 1,23 (s, 3H), 0,90 (s, 3H).
Схема 25:
Промежуточный продукт 37: (Z)-10-бензилиден-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-он
Стадия 1: При перемешивании к смеси 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-она (480 мг, 1,998 ммоля) и бензальдегида (212 мг, 1,998 ммоля) в EtOH (4 мл) добавляли водный раствор NaOH (5% в H2O, 0,8 мл, 1,998 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Смесь фильтровали с использованием EtOH (3×10 мл) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-flash хроматографии, элюировали с помощью 0-55% ацетонитрила в воде и получали (Z)-10-бензилиден-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-он (300 мг, 0,913 ммоля, 45,7% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C20H24O4 [M+H]+ 329,18 найдено 329,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ - d) δ 7,83-7,74 (m, 2H), 7,45-7,30 (m, 3H), 6,34 (s, 1H), 4,11-3,92 (m, 4H), 2,58 (s, 2H), 2,42-2,14 (m, 1H), 2,12-1,85 (m, 4H), 1,71-1,57 (m, 1H), 1,36 (s, 3H), 0,98 (s, 3H).
Схема 26:
Промежуточный продукт 38: 10-бензил-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-ол
Стадия 1: При перемешивании к смеси 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-она (480 мг, 1,998 ммоля) и бензальдегида (212 мг, 1,998 ммоля) в EtOH (4 мл) добавляли водный раствор NaOH (5% в H2O, 0,8 мл, 1,998 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Смесь фильтровали с использованием EtOH (3×10 мл) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-flash хроматографии, элюировали с помощью 0-55% ацетонитрила в воде и получали (Z)-10-бензилиден-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-он (300 мг, 0,913 ммоля, 45,7% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C20H24O4 [M+H]+ 329,18 найдено 329,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ - d) δ 7,83-7,74 (m, 2H), 7,45-7,30 (m, 3H), 6,34 (s, 1H), 4,11-3,92 (m, 4H), 2,58 (s, 2H), 2,42-2,14 (m, 1H), 2,12-1,85 (m, 4H), 1,71-1,57 (m, 1H), 1,36 (s, 3H), 0,98 (s, 3H).
Стадия 2: При перемешивании к смеси (Z)-10-бензилиден-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-она (300 мг, 0,913 ммоля) с MeOH (5 мл) добавляли гидроксид палладия на угле (128 мг, 0,913 ммоля) при комнатной температуре в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H2 в течение 3 ч. Твердое вещество отфильтровывали и промывали с помощью MeOH (50 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в MeOH (3 мл) и добавляли борогидрид натрия (46,4 мг, 1,226 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию останавливали путем добавления водного раствора NH4Cl (30 мл), разбавляли этилацетатом (30×3 мл), органический слой промывали водой (60 мл) и рассолом (60 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали с помощью RP-flash хроматографии, элюировали с помощью 0-50% ацетонитрила в воде и получали 10-бензил-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-ол (190 мг, 0,572 ммоля, 69,9% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C20H28O4 [M+H]+ 333,21 найдено 333,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ - d) δ 7,34-7,29 (m, 3H), 7,28-7,17 (m, 2H), 4,15-4,03 (m, 1H), 3,99-3,90 (m, 4H), 3,09-2,79 (m, 2H), 2,13-1,59 (m, 8H), 1,54-1,39 (m, 2H), 1,25 (s, 1H), 1,19 (s, 0,6H), 1,12 (s, 0,6H), 1,05 (s, 0,6H), 0,91 (s, 1H), 0,90 (s, 0,6H), 0,88 (s, 0,6H), 0,85 (s, 0,6H).
Стадия 3: При перемешивании к смеси 10-бензил-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-ола (260 мг, 0,782 ммоля) с DCM (3 мл) добавляли пиридин (93 мг, 1,173 ммоля) и трифторметансульфоновый ангидрид (0,387 мл, 2,346 ммоля) при -10°C. Полученную смесь перемешивали при -10°C в течение 30 мин. Реакцию останавливали путем добавления водного раствора NaHCO3 (30 мл), экстрагировали с помощью DCM (3×50 мл), органический слой промывали водой (50 мл) и рассолом (50 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали неочищенный продукт 10-бензил-6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-10-ен (252 мг, 0,827 ммоля, 100% выход) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без обработки. MS ESI рассчитано для C20H26O3 [M+H]+ 315,20 найдено 315,30.
Схема 27:
Промежуточный продукт 39: 6,6-диметил-12-метилен-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан
К раствору метилтрифенилфосфонийбромида (2973 мг, 8,32 ммоля) в THF (3 мл) добавляли n-BuLi (2,5 M в гексане, 3,33 мл, 8,32 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали при 30°C в течение 30 мин. Затем раствор 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-он (500 мг, 2,081 ммоля) в THF (3,00 мл) добавляли к указанной выше смеси при 0°C. Герметизированный флакон облучали в микроволновом синтезаторе Biotage Smith при 80°C в течение 8 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакцию останавливали водным раствором NH4Cl (5 мл). Смесь концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли этилацетатом (80 мл), затем промывали рассолом (5 мл×3) и сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 0% - 30% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 6,6-диметил-12-метилен-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан (400 мг, 1,678 ммоля, 81% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C14H22O3 [M+H]+ 239,16 найдено 239,20. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 4,95-4,87 (m, 1H), 4,86-4,78 (m, 1H), 4,05-3,88 (m, 4H), 3,87-3,75 (m, 2H), 2,67-2,49 (m, 2H), 2,14-1,92 (m, 1H), 1,76-1,59 (m, 3H), 1,56-1,43 (m, 2H), 1,21 (s, 3H), 0,85 (s, 3H).
Схема 28:
Промежуточный продукт 40: 6,6-диметил-10-фенил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен
Стадия 1: К раствору 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (6 г, 32,6 ммоля) в тетрагидрофуране (60 мл) добавляли винилмагнийбромид (1 M в THF, 42,3 мл, 42,3 ммоля) при 0°C в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 1 ч. Раствор нейтрализовывали путем добавления насыщенного водного раствора NH4Cl (60 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (100 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании смесью этилацетат/петролейный эфир (0-10%) и получали 6,6-диметил-8-винил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (5,2 г, 22,05 ммоля, 67,7% выход) в виде белого твердого вещества. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 5,94 (dd, J=17,3, 10,7 Hz, 1H), 5,26 (dd, J=17,3, 1,2 Hz, 1H), 5,03 (dd, J=10,6, 1,2 Hz, 1H), 4,14- 3,84 (m, 4H), 2,12 (td, J=13,2, 3,9 Hz, 1H), 1,89 (td, J=13,5, 4,1 Hz, 1H), 1,78 (d, J=14,4 Hz, 1H), 1,65-1,48 (m, 2H), 1,42 (dd, J=14,4, 2,9 Hz, 1H), 1,28 (s, 3H), 0,90 (s, 3H).
Стадия 2: К раствору 6,6-диметил-8-винил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (1 г, 4,71 ммоля) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли гидрид натрия (60% в минеральном масле, 0,414 г, 10,36 ммоля) при 25°C в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали при 66°C в течение 0,5 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и к смеси добавляли 3-бромпроп-1-ен (1,425 г, 11,78 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение еще 2 ч при 66°C. Раствор нейтрализовывали путем добавления насыщенного водного раствора NH4Cl (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (30 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании смесью этилацетат/петролейный эфир (0-10%) и получали 8-(аллилокси)-6,6-диметил-8-винил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан (1 г, 3,96 ммоля, 84% выход) в виде желтого масла. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 5,92-5,80 (m, 1H), 5,79-5,70 (m, 1H), 5,35-5,21 (m, 1H), 5,20-5,04 (m, 3H), 4,15-3,84 (m, 4H), 3,82-3,81 (m, 2H), 2,10-1,70 (m, 4H), 1,63-1,52 (m, 1H), 1,50-1,48 (m, 1H), 1,24 (s, 3H), 0,90 (s, 3H).
Стадия 3: К раствору 8-(аллилокси)-6,6-диметил-8-винил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан (1 г, 3,96 ммоля) в толуоле (10 мл) добавляли бензилиден-бис(трициклогексилфосфин)дихлоррутений (0,065 г, 0,079 ммоля) при 25°C в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 4 ч. Затем добавляли этоксиэтен (2,86 г, 39,6 ммоля). Смесь перемешивали в течение 15 мин и затем кипятили с обратным холодильником в течение в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры раствор разбавляли рассолом (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (30 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании смесью этилацетат/петролейный эфир (0-10%) и получали 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-10-ен (400 мг, 1,783 ммоля, 45,0% выход) в виде желтого масла. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 6,20 (t, J=2,5 Hz, 1H), 4,76 (q, J=2,6 Hz, 1H), 4,04-3,81 (m, 4H), 2,37 (t, J=2,4 Hz, 2H), 2,06-1,45 (m, 6H), 1,16 (s, 3H), 0,90 (s, 3H).
Стадия 4: К раствору 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-10-ена (500 мг, 2,229 ммоля) в MeCN (5 мл) добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (258 мг, 0,223 ммоля), триэтиламин (338 мг, 3,34 ммоля) и йодбензол (682 мг, 3,34 ммоля) при 25°C в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали при 100°C в течение 16 ч. Раствор нейтрализовывали путем добавления насыщенного водного раствора NH4Cl (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (20 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке: XBridge Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: Вода, подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 30 мл/мин; градиентный режим: от 0% B до 70% B за 30 мин, 65% B; детектор: UV 220/254 нм и получали 6,6-диметил-10-фенил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен (400 мг, 1,198 ммоля, 53,8% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C19H24O3 [M+H]+ 301,17, найдено 301,25. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,36-7,25 (m, 5H), 5,92-5,87 (m, 2H), 5,75 (dd, J=4,0, 2,2 Hz, 1H), 3,93-3,83 (m, 4H), 1,92-1,88 (m, 2H), 1,73-1,55 (m, 2H), 1,55-1,47 (m, 2H), 1,15 (s, 3H), 0,85 (s, 3H).
Схема 29:
Промежуточный продукт 41: 3,3-диметил-6'H,8'H-спиро[циклогексан-1,5'-имидазо[2,1-c][1,4]оксазин]-4-он
Стадия 1: К суспензии 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (500 мг, 2,71 ммоля) и карбоната аммония (1304 мг, 13,57 ммоля) в смеси этанол/вода (1 : 1) (300 мл) добавляли цианид натрия (133 мг, 2,71 ммоля). Реакционную смесь нагревали при 50°C в течение 12 ч. После исчезновения исходного вещества по данным мониторинга с помощью TLC смесь нагревали при 80°C до разложения избытка (NH4)2CO3. Затем добавляли NaOH (434 мг, 10,86 ммоля) и этанол удаляли при пониженном давлении и полученный раствор кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь нейтрализовывали путем добавления 2 M HCl. Смесь дважды лиофилизировали и получали 8-амино-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбоновую кислоту (неочищенную 2,71 ммоля) в виде белого твердого вещества, которое сразу использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C11H19NO4 [M+H]+ 230,13 найдено 230,15.
Стадия 2: К раствору 8-амино-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбоновой кислоты (621 мг, 2,71 ммоля) в этиловом эфире (50 мл) добавляли LAH (206 мг, 5,42 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 6 ч при 38°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до 0°C, затем реакцию останавливали водным раствором NH4Cl (1 мл) и смесь перемешивали в течение 5 мин, затем добавляли 15% водный раствор NaOH (1 мл) и смесь перемешивали в течение еще 5 мин, затем добавляли 3 мл воды, смесь перемешивали в течение 15 мин до комнатной температуры. В заключение добавляли 3 г NaSO4, смесь перемешивали в течение 15 мин, затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 0% - 20% градиентного режима MeOH (10% NH3⋅H2O) в DCM в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали (8-амино-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метанол (400 мг, 1,858 ммоля, 68,6% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C11H21NO3 [M+H]+ 216,15 найдено 216,20. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,08 (s, 1H), 3,93-3,71 (m, 4H), 3,17 (s, 2H), 3,00 (s, 2H), 1,92 (td, J=12,7, 4,0 Hz, 1H), 1,56-1,32 (m, 3H), 1,30-1,16 (m, 1H), 1,19 (s, 3H), 1,11 (dd, J=13,8, 2,4 Hz, 1H), 0,77 (s, 3H).
Стадия 3: Смесь (8-амино-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метанола (380 мг, 1,765 ммоля) в этилацетате (7 мл) и насыщенном водном растворе Na2CO3 (7 мл) охлаждали до 0°C и добавляли 2-хлорацетилхлорид (399 мг, 3,53 ммоля). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. По данным LCMS и TLC большая часть составляла искомый продукт. Смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл×3). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (10 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали неочищенный 2-хлор-N-(8-(гидроксиметил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)ацетамид (630 мг, 1,765 ммоля) в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C13H22ClNO4 [M+H]+ 292,12, 294,12 найдено 292,05, 294,05. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 6,63 (s, 1H), 4,03 (d, J=2,4 Hz, 2H), 4,00-3,88 (m, 4H), 3,68 (s, 2H), 2,11-1,97 (m, 2H), 1,86-1,72 (m, 2H), 1,71-1,54 (m, 2H), 1,14 (s, 3H), 0,92 (s, 3H).
Стадия 4: К раствору 2-хлор-N-(8-(гидроксиметил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)ацетамида (600 мг, 2,056 ммоля) в t-BuOH (20 мл) добавляли 2-метилпропан-2-олат калия (254 мг, 2,262 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 30°C в течение 3 ч. По данным LCMS большая часть составляла искомый продукт. Реакционную смесь разбавляли с помощью NH4Cl (5 мл), затем экстрагировали этилацетатом (50 мл×3). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 10% - 40% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 6,6-диметил-1,4,12-триокса-9-азадиспиро[4,2,58,25]пентадекан-10-он (500 мг, 1,958 ммоля, 95% выход) в виде коричневого масла. MS ESI рассчитано для C13H21NO4 [M+H]+ 256,15 найдено 256,15. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 6,19 (s, 1H), 4,22-4,06 (m, 2H), 4,01-3,87 (m, 4H), 3,72 (d, J=11,6 Hz, 1H), 3,52 (d, J=11,6 Hz, 1H), 1,96-1,85 (m, 1H), 1,80-1,61 (m, 5H), 1,06 (s, 3H), 0,97 (s, 3H).
Стадия 5: Смесь 6,6-диметил-1,4,12-триокса-9-азадиспиро[4,2,58,25]пентадекан-10-она (340 мг, 1,332 ммоля), 2,2-диэтоксиэтан-1-амина (1,162 мл, 7,99 ммоля) и перхлорстаннана (1 M в DCM, 0,40 мл, 0,40 ммоля) в толуоле (3,6 мл) нагревали при 150°C и полученную смесь перемешивали в течение 48 ч в герметизированной пробирке. По данным LCMS большая часть составляла искомый продукт. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и получали остаток (1,332 ммоля) в виде черного твердого вещества, которое сразу использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C15H22N2O3 [M+H]+ 279,16 найдено 279,10.
Стадия 6: К раствору 2',2'-диметил-6H,8H-диспиро[имидазо[2,1-c][1,4]оксазин-5,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолана] (371 мг, 1,332 ммоля) в THF (3 мл) добавляли HCl (2 M в воде, 4 мл, 8,00 ммоля). Смесь перемешивали в течение 3 ч при 25°C. Смесь нейтрализовывали путем добавления NaHCO3. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 0% - 10% градиентного режима метанол в DCM в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 3,3-диметил-6'H,8'H-спиро[циклогексан-1,5'-имидазо[2,1-c][1,4]оксазин]-4-он (50 мг, 0,213 ммоля, 16,02% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C13H18N2O2 [M+H]+ 235,15 найдено 235,10. 1H-NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,06 (s, 1H), 6,99 (s, 1H), 4,90 (s, 2H), 4,19 (d, J=12,3 Hz, 1H), 4,02 (d, J=12,3 Hz, 1H), 2,80-2,63 (m, 1H), 2,62-2,47 (m, 1H), 2,48-2,28 (m, 2H), 2,24 (s, 2H), 1,27 (s, 3H), 1,23 (s, 3H).
Схема 30:
Промежуточный продукт 42: 5,5-диметил-1,7,10-триоксадиспиро[2.2.46.23]додекан
К раствору триметилсульфониййодида (3,59 г, 17,59 ммоля) и 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (2,0 г, 10,86 ммоля) в сухом DMSO (54,2 мл) добавляли трет-бутоксид калия (1,827 г, 16,28 ммоля) и полученную реакционную смесь перемешивали при r.t. в течение ночи в инертной атмосфере. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и реакцию останавливали с помощью H2O (20 мл). Органическую фазу экстрагировали с помощью MTBE (3×25 мл). Объединенные органические слои промывали с помощью H2O (2×20 мл) и затем сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали 5,5-диметил-1,7,10-триоксадиспиро[2.2.46.23]додекан в виде желтоватого масла (1,78 г, 83% IY). 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 3,98-3,95 (m, 4H), 2,58 (m, 2H), 1,94-1,87 (m, 1H), 1,84-1,77 (m, 1H), 1,76-1,65 (m, 2H), 1,64-1,57 (m, 1H), 1,51 (d, J=13,6 Hz, 1H), 1,07 (s, 3H), 0,97 (s, 3H).
Схема 31:
Промежуточный продукт 43: 4-(4-метоксибензил)-8,8-диметил-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-3,9-дион
Стадия 1: К раствору 5,5-диметил-1,7,10-триоксадиспиро[2.2.46.23]додекана (1,0 г, 5,04 ммоля) в метаноле (10,01 мл) добавляли (4-метоксифенил)метанамин (1,450 мл, 11,10 ммоля) и полученную реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение ночи. Реакционной смеси давали охладиться до r.t. и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-5% MeOH/DCM) и получали 8-(((4-метоксибензил)амино)метил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол в виде прозрачного масла (1,11 г, 66% IY). MS=336 [M+H]. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,23 (m, 2H), 6,86 (m, 2H), 3,97-3,83 (m, 4H), 3,80 (s, 3H), 3,76 (s, 2H), 2,49 (s, 2H), 2,12-2,04 (m, 1H), 1,65-1,52 (m, 2H), 1,52-1,43 (m, 2H), 1,43-1,38 (m, 1H), 1,25 (s, 3H), 0,84 (s, 3H).
Стадия 2: К раствору 8-(((4-метоксибензил)амино)метил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (1,11 г, 3,31 ммоля) и триэтиламина (0,484 мл, 3,47 ммоля) в сухом THF (44,1 мл) добавляли 2-хлорацетилхлорид (0,264 мл, 3,31 ммоля) при 0°C в потоке азота. Полученную реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и затем при r.t. в течение 3 ч в инертной атмосфере. Реакционную смесь разбавляли с помощью H2O (15 мл) и органическую фазу экстрагировали с помощью DCM (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-хлор-N-((8-гидрокси-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метил)-N-(4-метоксибензил)ацетамид в виде прозрачного масла. MS=412 [M+H]. Неочищенное вещество использовали на следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.
Стадия 3: К раствору 2-хлор-N-((8-гидрокси-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метил)-N-(4-метоксибензил)ацетамида (1,36 г, 3,30 ммоля) в сухом THF (33,3 мл) добавляли NaH (60% в минеральном масле) (172 мг, 4,29 ммоля) при 0°C в потоке азота. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 15 мин. и затем при 60°C в течение ночи в инертной атмосфере. Реакцию останавливали при 0°C с помощью H2O (20 мл). Органическую фазу экстрагировали с помощью DCM (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% MTBE/гептан) и получали 12-(4-метоксибензил)-6,6-диметил-1,4,9-триокса-12-азадиспиро[4,2,58,25]пентадекан-11-он в виде прозрачного масла, которое затвердевало при соприкосновении с воздухом (822 мг, 66% IY). MS=376 [M+H]. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,17 (m, 2H), 6,85 (m, 2H), 4,55-4,46 (m, 2H), 4,27-4,15 (m, 2H), 3,98-3,82 (m, 4H), 3,80 (s, 3H), 3,02-2,92 (m, 2H), 1,97-1,90 (m, 1H), 1,85-1,80 (m, 1H), 1,78-1,73 (m, 1H), 1,54-1,40 (m, 2H), 1,31 (m, 1H), 1,18 (s, 3H), 0,81 (s, 3H).
Стадия 4: 12-(4-метоксибензил)-6,6-диметил-1,4,9-триокса-12-азадиспиро[4,2,58,25]пентадекан-11-он (200 мг, 0,533 ммоля) растворяли в TFA (4,0 мл, 52,2 ммоля) и полученную реакционную смесь герметизировали и перемешивали при 80°C в течение 3 ч. Реакционной смеси давали охладиться до r.t. и нейтрализовывали насыщенным водным раствором NaHCO3. Органическую фазу экстрагировали с помощью DCM (3×15 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% MTBE/гептан) и получали 4-(4-метоксибензил)-8,8-диметил-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-3,9-дион в виде прозрачного масла (142 мг, 80% IY). MS=332 [M+H]. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,20-7,16 (m, 2H), 6,88-6,84 (m, 2H), 4,61 (d, J=14,4 Hz, 1H), 4,47 (d, J=14,4 Hz, 1H), 4,36-4,22 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,10-3,00 (m, 2H), 2,84-2,76 (m, 1H), 2,26-2,15 (m, 2H), 2,06 (dd, J=14,8, J’=3,6 Hz, 1H), 1,62-1,53 (m, 1H), 1,41 (d, J=14,8 Hz, 1H), 1,28 (s, 3H), 1,00 (s, 3H).
Схема 32:
Промежуточный продукт 44: 3',3',4-триметил-3,4-дигидроспиро[бензо[b][1,4]оксазин-2,1'-циклогексан]-4'-он
Стадия 1: В сосуде для микроволновой печи к раствору 2-броманилина (837 мг, 4,86 ммоля) в сухом THF (6 мл) добавляли гидрид натрия (389 мг, 9,73 ммоля) (60% в минеральном масле) при 0°C в потоке азота и полученную суспензию перемешивали при 0°C в течение 30'. Затем добавляли раствор 5,5-диметил-1,7,10-триоксадиспиро[2.2.46.23]додекана (643 мг, 3,24 ммоля) в сухом THF (6 мл). Полученную реакционную смесь герметизировали и перемешивали при 75°C в течение ночи. После проверки с помощью LCMS добавляли дополнительную аликвоту гидрида натрия (389 мг, 9,73 ммоля) (60% в минеральном масле) и реакционную смесь перемешивали при 75°C до завершения реакции. Реакцию останавливали с помощью H2O при 0°C и органическую фазу экстрагировали с помощью EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-50% MTBE/гептан) и получали 8-(((2-бромфенил)амино)метил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол в виде желтоватого масла, которое затвердевало при соприкосновении с воздухом (1,06 г, 88% IY). MS=371 [M+H]. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,43 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,17 (t, J=8,0 Hz, 1H), 6,82 (d, J=8,0 Hz, 1H), 6,62 (t, J=7,4 Hz, 1H), 4,00-3,88 (m, 4H), 3,12 (s, 2H), 2,12-2,05 (m, 1H), 1,84-1,72 (m, 2H), 1,68 (d, J=14,2 Hz, 1H), 1,59-1,54 (m, 1H), 1,54-1,49 (m, 1H), 1,26 (s, 3H), 0,88 (s, 3H).
Стадия 2: В сосуде для микроволновой печи к раствору 8-(((2-бромфенил)амино)метил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (1,43 г, 3,86 ммоля) в сухом толуоле (19,31 мл) добавляли карбонат цезия (2,52 г, 7,72 ммоля) и полученную смесь дегазировали в течение 10 мин. Затем ацетат палладия(II) (0,130 г, 0,579 ммоля) и [1,1'-бинафталин]-2-илди-трет-бутилфосфин (0,308 г, 0,772 ммоля) добавляли в потоке азота. Реакционную смесь герметизировали и перемешивали при 100°C в течение ночи в инертной атмосфере. Реакционной смеси давали охладиться до r.t., разбавляли с помощью EtOAc и фильтровали в вакууме через целит. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на основном оксиде алюминия (0-50% MTBE/гептан) и получали 2',2'-диметил-3,4-дигидродиспиро[бензо[b][1,4]оксазин-2,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан в виде палевого твердого вещества (420 мг, 38% IY). MS=290 [M+H]. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 6,78 (t, J=7,4 Hz, 2H), 6,70 (t, J=7,5 Hz, 1H), 6,65 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,05-3,89 (m, 4H), 3,05 (s, 2H), 2,24-2,16 (m, 1H), 1,87-1,82 (m, 1H), 1,76-1,72 (m, 2H), 1,57-1,49 (m, 2H), 1,23 (s, 3H), 0,85 (s, 3H).
Стадия 3: В сосуде для микроволновой печи к раствору 2',2'-диметил-3,4-дигидродиспиро[бензо[b][1,4]оксазин-2,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолана] (250 мг, 0,864 ммоля) в сухом THF (8 мл) добавляли гидрид натрия (138 мг, 3,46 ммоля) (60% в минеральном масле) при 0°C в потоке азота и полученную суспензию перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Затем добавляли йодметан (0,161 мл, 2,59 ммоля) и полученную реакционную смесь герметизировали и перемешивали при 45°C в течение 48 ч. После проверки с помощью LCMS добавляли дополнительные аликвоты гидрида натрия (138 мг, 3,46 ммоля) и йодметана (0,161 мл, 2,59 ммоля) и реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение ночи. Реакционной смеси давали охладиться до r.t. и реакцию останавливали при 0°C с помощью H2O (15 мл). Органическую фазу экстрагировали с помощью DCM (3×15 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-50% MTBE/гептан) и получали 2',2',4-триметил-3,4-дигидродиспиро[бензо[b][1,4]оксазин-2,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан в виде прозрачного масла (212 мг, 81% IY). MS=304 [M+H]. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 6,86 (t, J=7,6 Hz, 1H), 6,78 (d, J=7,7 Hz, 1H), 6,71-6,67 (m, 2H), 4,02-3,88 (m, 4H), 2,92 (d, J=5,0 Hz, 2H), 2,89 (s, 3H), 2,24-2,16 (m, 1H), 1,86-1,81 (m, 1H), 1,77-1,69 (m, 2H), 1,58-1,53 (m, 2H), 1,23 (s, 3H), 0,85 (s, 3H).
Стадия 4: 2',2',4-триметил-3,4-дигидродиспиро[бензо[b][1,4]оксазин-2,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан] (212 мг, 0,699 ммоля) растворяли в трифторуксусной кислоте (5247 мкл, 68,5 ммоля) и полученную реакционную смесь герметизировали и перемешивали при 80°C в течение 3 ч. Реакционной смеси давали охладиться до r.t. и нейтрализовывали насыщенным водным раствором NaHCO3. Органическую фазу экстрагировали с помощью DCM (3×15 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали 3',3',4-триметил-3,4-дигидроспиро[бензо[b][1,4]оксазин-2,1'-циклогексан]-4'-он в виде темного твердого вещества. MS=260 [M+H]. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 6,90 (t, J=7,6 Hz, 1H), 6,84 (d, J=7,7 Hz, 1H), 6,75-6,70 (m, 2H), 3,15-3,06 (m, 1H), 2,99 (s, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,29-2,20 (m, 2H), 2,16-2,11 (m, 1H), 1,87-1,78 (m, 1H), 1,63 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,35 (s, 3H), 1,05 (s, 3H). Неочищенное вещество использовали на следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.
Схема 33:
Промежуточный продукт 45: 1'-(циклопропилметил)спиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-дион
Стадия 1: При перемешивании к раствору спиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-диона (860 мг, 4 ммоля) в DMF (6 мл) добавляли (бромметил)циклопропан (701 мг, 5,19 ммоля) и Cs2CO3 (2083 мг, 6,39 ммоля) при комнатной температуре. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 1 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×2). Органический слой промывали водой (50 мл) и рассолом (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-50% EtOAc/PE) и получали 1'-(циклопропилметил)спиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-дион в виде твердого вещества. MS: 270 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,33-7,29 (m, 1H), 7,26-7,24 (m, 1H), 7,10-7,08 (m, 1H), 6,99-6,97 (m, 1H), 3,64 (d, J=6,8 Hz, 2H), 3,20-3,14 (m, 2H), 2,51-2,47 (m, 2H), 2,18-2,15 (m, 4H), 1,22-1,18 (m, 1H), 0,56-0,52 (m, 2H), 0,42-0,38 (m, 2H).
Схема 34:
Промежуточный продукт 49: 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-1,8-дион
Стадия 1: К дегазированным 100 мл RBF добавляли THF (15,5 мл) и LDA (12,8 мл, 25,7 ммоля) и охлаждали до -78°C. В колбу по каплям при перемешивании добавляли раствор этил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбоксилата (5 г, 23 ммоля) в THF (31 мл). Смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин. В колбу при -78°C добавляли раствор бромацетонитрила (1,95 мл, 28,0 ммоля) в THF (31 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при -78°C. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором хлорида аммония и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-30% EtOAc/гексаны), проводили мониторинг с помощью ELSD и получали этил 8-(цианометил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбоксилат в виде масла. MS: 254 (M+1).
Стадия 2: Борогидрид натрия (2,15 г, 56,7 ммоля) порциями добавляли к смеси этил 8-(цианометил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбоксилата (2,87 г, 11,3 ммоля) и хлорида кобальта(II) (0,736 г, 5,67 ммоля) в THF (44 мл) и воде (22 мл) при 0°C. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию останавливали с помощью 2M NH4OH (5 мл) и смесь фильтровали. Твердое вещество промывали смесью 2:1 THF:вода и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Водный раствор экстрагировали с помощью DCM (3×) и объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-10% MeOH/DCM) и получали 1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-9-он в виде твердого вещества. MS: 212 (M+1).
Стадия 3: 1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-9-он (908 мг, 4,30 ммоля) растворяли в DMF (43 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляли бромбензол (0,675 мл, 6,45 ммоля), N, N-диметилэтилендиамин (0,939 мл, 8,60 ммоля), йодид меди(I) (1,23 г, 6,45 ммоля) и фосфат калия (1,62 г, 7,61 ммоля) и смесь нагревали при 100°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали на лед с водой и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% EtOAc/гексаны) и получали 10-фенил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-9-он в виде твердого вещества. MS: 288 (M+1).
Стадия 4: К раствору 10-фенил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-9-она (1,4 г, 4,9 ммоля) в ацетоне (24 мл) добавляли моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (2,04 г, 10,7 ммоля) и воду (4,39 мл, 244 ммоля). Смесь нагревали при 70°C в течение ночи. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водный слой экстрагировали с помощью DCM (3×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% EtOAc/гексаны) и получали 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-1,8-дион в виде твердого вещества. MS: 244 (M+1).
Схема 35:
Промежуточный продукт 50: 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-3,8-дион
Стадия 1: В колбу добавляли 1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-он (1 г, 4,7 ммоля), йодид меди(I) (1,35 г, 7,1 ммоля), фосфат калия (1,80 г, 8,38 ммоля), бромбензол (0,744 мл, 7,1 ммоля) и N, N-диметилэтилендиамин (1,03 мл, 9,46 ммоля). Добавляли DMF (48 мл) и смесь перемешивали при 100°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (30-100% EtOAc/гексаны) и получали 10-фенил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-он в виде твердого вещества. MS: 288 (M+1).
Стадия 2: К раствору 10-фенил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-она (1,19 г, 4,16 ммоля) в ацетоне (21 мл) добавляли моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (1,74 г, 9,15 ммоля) и воду (3,75 мл, 208 ммоля). Смесь нагревали при 70°C в течение ночи. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, экстрагировали DCM (3×) и объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (20-100% EtOAc/гексаны) и получали 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-3,8-дион в виде твердого вещества. MS: 244 (M+1).
Схема 36:
Промежуточный продукт 51: 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он
Стадия 1: К раствору 1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-она (1,08 г, 5,11 ммоля) в THF (10 мл) добавляли алюмогидрид лития (0,388 г, 10,22 ммоля) при 0°C в атмосфере N2. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем реакцию останавливали путем добавления воды (0,39 мл), 15% водного раствора NaOH (0,39 мл) и воды (1,17 мл) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали 1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан (900 мг, 4,56 ммоля, 89% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C11H19NO2 [M+H]+ 198,14, найдено 198,25. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 3,96 (s, 4H), 2,99 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,74 (s, 2H), 1,74-1,56 (m, 10H).
Стадия 2: К смеси 1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекана (18 г, 91 ммоля), [2'-(амино-н)[1,1'-бифенил]-2-ил-c][[2',6'-бис(1-метилэтокси)[1,1'-бифенил]-2-ил]дициклогексилфосфин-п]хлорпалладия (7,09 г, 9,12 ммоля) и Ruphos (4,26 г, 9,12 ммоля) в 1,4-диоксане (180 мл) добавляли бромбензол (17,19 г, 109 ммоля) и 2-метилпропан-2-олат натрия (17,54 г, 182 ммоля) в атмосфере N2. Полученную смесь нагревали при 70°C и перемешивали в течение 16 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0-30% этилацетата в петролейном эфире и получали 10-фенил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан (13,5 г, 49,4 ммоля, 54,1% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C17H23NO2 [M+H]+ 274,17, найдено 274,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,30-7,18 (m, 2H), 6,68 (t, J=7,5 Hz, 1H), 6,57 (d, J=8,1 Hz, 2H), 3,97 (s, 4H), 3,37 (t, J=6,9 Hz, 2H), 3,18 (s, 2H), 1,89 (t, J=6,9 Hz, 2H), 1,80-1,60 (m, 8H).
Стадия 3: К раствору 10-фенил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекана (13,4 г, 49,0 ммоля) в THF (123 мл) добавляли хлористоводородную кислоту (2 M, 123 мл, 245 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 5 ч. Затем значение pH смеси устанавливали равным 8 насыщенным водным раствором NaHCO3. Смесь разбавляли водой (200 мл), экстрагировали этилацетатом (200 мл×3). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (250 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он (11,24 г, 49,0 ммоля, 100% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C15H19NO [M+H]+ 230,15, найдено 230,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,35-7,20 (m, 2H), 6,72 (t, J=7,2 Hz, 1H), 6,66-6,55 (m, 2H), 3,46 (t, J=6,9 Hz, 2H), 3,32 (s, 2H), 2,43 (t, J=6,9 Hz, 4H), 2,12-1,83 (m, 6H).
Схема 37:
Промежуточный продукт 52: 2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадекан-12-он
Стадия 1: Смесь 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-она (690 мг, 3,01 ммоля), 1,4-дибромбутана (682 мг, 3,16 ммоля) и 2-метилпропан-2-олата калия (709 мг, 6,32 ммоля) в толуоле (12 мл) кипятили с обратным холодильником и перемешивали в течение 4 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (40 мл). Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой при следующих условиях: колонка: C18 гелевая колонка, 80 г, 20-45 мкм, 100 A; подвижная фаза A: вода, подвижная фаза B: MeCN; градиентный режим: 0% B выдерживание в течение 5 мин, до 45% B за 5 мин, от 45% B до 95% B за 30 мин, 95% B выдерживание в течение 5 мин; скорость потока: 65 мл/мин; RT=25 мин; детектор: UV 254 и 210 нм. Фракции, содержащие продукт, собирали и выпаривали и получали 2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадекан-12-он (340 мг, 1,200 ммоля, 39,9% выход) в виде коричневого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H25NO [M+H]+ 284,19, найдено 284,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,32-7,24 (m, 2H), 6,70 (t, J=7,2 Hz, 1H), 6,65-6,54 (m, 2H), 3,51-3,18 (m, 4H), 2,64-2,40 (m, 2H), 2,29-1,31 (m, 14H).
Схема 38:
Промежуточный продукт 53: 7,7-диэтил-2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он
Стадия 1: К раствору 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-она (1000 мг, 4,36 ммоля) и трет-бутоксида калия (489 мг, 4,36 ммоля) в толуоле (10 мл) по каплям добавляли йодэтан (1428 мг, 9,16 ммоля) при 25°C. Полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч. После завершения реакции реакцию останавливали водным раствором NH4Cl (10 мл) и разбавляли этилацетатом (300 мл), затем промывали рассолом (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 0% - 20% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 7,7-диэтил-2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он (460 мг, 1,612 ммоля, 37,0% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C19H27NO [M+H]+ 286,21 найдено 286,15. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,28-7,22 (m, 2H), 6,75-6,67 (m, 1H), 6,63-6,55 (m, 2H), 3,49-3,32 (m, 3H), 3,22 (d, J=9,2 Hz, 1H), 2,55-2,33 (m, 2H), 2,05-1,99 (m, 2H), 1,98-1,89 (m, 1H), 1,87 (d, J=1,8 Hz, 2H), 1,85-1,75 (m, 1H), 1,75-1,64 (m, 2H), 1,58-1,49 (m, 2H), 0,87-0,72 (m, 6H).
Схема 39:
Промежуточный продукт 54: 7-фенил-7-азадиспиро[2.1.45.33]додекан-12-он
Стадия 1: К раствору 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-она (2 г, 8,72 ммоля) и 2-метилпропан-2-олата калия (2,94 г, 26,2 ммоля) в толуоле (30 мл) добавляли (2-бромэтил)дифенилсульфонийтрифторметансульфонат (4,64 г, 10,47 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в течение 16 ч. К реакционной смеси добавляли воду (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (400 мл). Органический слой промывали водой (500 мл), рассолом (500 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0~25% этилацетата в петролейном эфире и получали желтое масло, которое дополнительно очищали с помощью RP-flash хроматографии, элюировали с помощью 40-80% ацетонитрила в воде и получали 7-фенил-7-азадиспиро[2.1.45.33]додекан-12-он (236 мг, 0,924 ммоля, 10,60% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C17H21NO [M+H]+ 256,16, найдено 256,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,26-7,21 (m, 2H), 6,71 (t, J=7,2 Hz, 1H), 6,59 (d, J=7,8 Hz, 2H), 3,49-3,40 (m, 2H), 3,37 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,27 (d, J=9,2 Hz, 1H), 2,63-2,45 (m, 2H), 2,15-1,94 (m, 4H), 1,84 (s, 2H), 1,43-1,15 (m, 2H), 0,71-0,59 (m, 2H).
Схема 40:
Промежуточный продукт 55: 7-этил-7-метил-2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он
Стадия 1: При перемешивании к смеси 2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-она (2 г, 8,72 ммоля) в толуоле (20 мл) добавляли йодэтан (1,224 г, 7,85 ммоля) и трет-бутоксид калия (1,174 г, 10,47 ммоля) при комнатной температуре в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 3 ч. Реакцию останавливали путем добавления насыщенного водного раствора NH4Cl (20 мл), экстрагировали с помощью EtOAc (20 мл×3). Органический слой промывали рассолом (50 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0-10% этилацетата в петролейный эфир и получали 7-этил-2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он (760 мг, 2,95 ммоля, 33,9% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C17H23NO [M+H]+ 258,28 найдено 258,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,39-7,21 (m, 2H), 6,75 (t, J=7,3 Hz, 1H), 6,67 (d, J=8,1 Hz, 2H), 3,55-3,38 (m, 4H), 2,53-2,18 (m, 3H), 2,17-1,99 (m, 1H), 1,99-1,71 (m, 4H), 1,62-1,47 (m, 1H), 1,30-1,14 (m, 1H), 1,04-0,70 (m, 4H).
Стадия 2: К раствору 7-этил-2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-она (760 мг, 2,95 ммоля) в толуоле (8 мл) добавляли йодметан (461 мг, 3,25 ммоля) и трет-бутоксид калия (398 мг, 3,54 ммоля). Полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 2 ч и затем реакцию останавливали с помощью NH4Cl (10 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0-50% EtOAc в петролейном эфире и получали 7-этил-7-метил-2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он (320 мг, 1,179 ммоля, 39,9% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C18H25NO [M+H]+ 272,19 найдено 272,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,33-7,21 (m, 2H), 6,76 (t, J=7,3 Hz, 1H), 6,70-6,64 (m, 2H), 3,68-3,13 (m, 4H), 2,57-2,32 (m, 1H), 2,15-1,88 (m, 3H), 1,87-1,37 (m, 6H), 1,13-1,07 (m, 3H), 0,91-0,79 (m, 3H).
Схема 41:
Промежуточные продукты 56 и 57: 6,6-диметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекан-2-он, 56, и 2-метокси-2,6,6-триметилспиро[3.5]нонан-7-он, 57
Стадия 1: К смеси метилтрифенилфосфонийбромида (58,2 г, 163 ммоля) с THF (100 мл) добавляли трет-бутоксид калия (18,27 г, 163 ммоля) при 0°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 30 мин, к ней добавляли 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он (10 г, 54,3 ммоля) при 0°C. Полученную смесь нагревали при 25°C и перемешивали в течение 3 ч и затем реакцию останавливали водой (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические фракции промывали рассолом (250 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1 ~ 10% этилацетата в петролейном эфире и получали 6,6-диметил-8-метилен-1,4-диоксаспиро[4.5]декан (8,6 г, 47,2 ммоля, 87% выход) в виде бесцветного масла. 1H-NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 4,73 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 4,05-3,91 (m, 4H), 2,26 (t, J=6,6 Hz, 2H), 2,13 (s, 2H), 1,68 (t, J=6,6 Hz, 2H), 0,95 (s, 6H).
Стадия 2: К смеси 6,6-диметил-8-метилен-1,4-диоксаспиро[4.5]декана (7,6 г, 41,7 ммоля) и пару цинк-медь (16,13 г, 125 ммоля) в Et2O (65 мл) в атмосфере азота медленно добавляли раствор трихлорацетилхлорида (15,16 г, 83 ммоля) в Et2O (15 мл) при 25°C. Смесь перемешивали в течение 1,5 ч, затем реакцию останавливали раствором бикарбоната натрия (200 мл) при 0°C и фильтровали. Фильтрат экстрагировали этилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические фракции промывали рассолом (200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали коричневое масло. К раствору этого масла в MeOH (80 мл) добавляли хлорид аммония (4,46 г, 83 ммоля) и цинк (8,18 г, 125 ммоля) при 0°C. Смесь нагревали при 25°C и перемешивали в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью TLC. Реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1 ~ 14% этилацетата в петролейном эфире и получали 6,6-диметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекан-2-он (4,1 г, 18,28 ммоля, 43,8% выход) в виде почти белого твердого вещества. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 4,02-7,52 (m, 4H), 2,97-2,72 (m, 4H), 1,83-1,60 (m, 6H), 1,03-1,00 (m, 6H).
Стадия 3: К раствору 6,6-диметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекан-2-она (250 мг, 1,115 ммоля) в THF (2 мл) добавляли метилмагнийбромид (1M в THF, 2,229 мл, 2,229 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали в течение 10 мин., затем смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре и проводили мониторинг с помощью LCMS и TLC. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (40 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали 2,6,6-триметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекан-2-ол (250 мг, 1,040 ммоля, 93% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C14H24O3 [M+H - H2O]+ 223,17 найдено 223,25. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,67 (s, 0,3H), 4,57 (s, 0,7H), 3,94-3,73 (m, 4H), 1,87-1,69 (m, 5H), 1,60-1,40 (m, 5H), 1,22 (s, 0,5H), 1,20 (s, 2,5H), 0,85 (s, 6H).
Стадия 4: К раствору гидрида натрия (60% в минеральном масле, 80 мг, 1,997 ммоля) в DMF (1,0 мл) добавляли раствор 2,6,6-триметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекан-2-ола (192 мг, 0,799 ммоля) в DMF (0,5 мл) и метилйодид (283 мг, 1,997 ммоля) в DMF (0,5 мл) при 0°C и смесь перемешивали в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 5 ч и проводили мониторинг с помощью LCMS и TLC. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1 ~ 60% этилацетата в петролейном эфире и получали 2-метокси-2,6,6-триметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекан (140 мг, 0,550 ммоля, 68,9% выход) в виде желтого масла,1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 3,97-3,86 (m, 4H), 3,13 (s, 3H), 1,97 (m, 2H), 1,83-1,65 (m, 5H), 1,58 (m, 3H), 1,27 (s, 3H), 0,92 (s, 6H).
Стадия 5: К хлористоводородной кислоте (2 M в воде, 2,00 мл, 4,00 ммоля) добавляли раствор 2-метокси-2,6,6-триметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекана (140 мг, 0,550 ммоля) в THF (2,00 мл) при 0°C и смесь перемешивали в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 3 ч и проводили мониторинг с помощью LCMS и TLC. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NaHCO3 (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1 ~ 60% этилацетата в петролейном эфире и получали 2-метокси-2,6,6-триметилспиро[3.5]нонан-7-он (85 мг, 0,404 ммоля, 73,4% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C13H22O2 [M+H]+ 211,16 найдено 211,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 3,17 (s, 1H), 3,16 (s, 2H), 2,47-2,37 (m, 2H), 2,20-2,06 (m, 2H), 2,04- 1,70 (m, 6H), 1,36 (s, 1H), 1,33 (s, 2H), 1,09 (s, 6H).
Схема 42:
Промежуточный продукт 58: 7,7-диметил-N-фенил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-амин
Стадия 1: К смеси 6,6-диметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекан-2-она (500 мг, 2,229 ммоля) с MeOH (15 мл) в атмосфере азота добавляли NaBH4 (169 мг, 4,46 ммоля) при 0°C. Смесь перемешивали в течение 10 мин. Полученную смесь нагревали при 25°C и перемешивали в течение 1,5 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакцию останавливали насыщенным раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×40 мл). Объединенные органические фракции промывали рассолом (40 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1~23% этилацетата в петролейном эфире и получали 6,6-диметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекан-2-ол (408 мг, 1,803 ммоля, 81% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C13H22O3 [M+H]+ 227,16 найдено 227,25. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 4,46-4,18 (m, 1H), 4,02-3,84 (m, 4H), 2,41-2,20 (m, 2H), 1,81-1,68 (m, 3H), 1,68-1,58 (m, 5H), 0,96 (s, 3H), 0,93 (s, 3H).
Стадия 2: К смеси 6,6-диметил-8,11-диоксадиспиро[3.2.47.24]тридекан-2-ола (446 мг, 1,971 ммоля) с THF (5 мл) добавляли HCl (1M в H2O, 5 мл, 5,00 ммоля) при КТ. Полученную смесь нагревали при 35°C и перемешивали в течение 1 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакцию останавливали насыщенным раствором бикарбоната натрия (25 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×30 мл). Объединенные органические фракции промывали рассолом (25 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1~43% этилацетата в петролейном эфире и получали 2-гидрокси-6,6-диметилспиро[3.5]нонан-7-он (312 мг, 1,712 ммоля, 87% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C11H18O2 [M+H]+ 183,14 найдено 183,25. 1H-NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 4,50-4,30 (m, 1H), 2,52-2,36 (m, 4H), 2,04-1,97 (m, 1H), 1,95-1,83 (m, 3H), 1,78 (s, 1H), 1,76 (s, 2H), 1,12 (s, 3H), 1,09 (s, 3H).
Стадия 3: К смеси 2-гидрокси-6,6-диметилспиро[3.5]нонан-7-она (312 мг, 1,712 ммоля) в толуоле (6 мл) в атмосфере азота добавляли этилформиат (1268 мг, 17,12 ммоля) и метилат натрия (30% в MeOH, 3083 мг, 17,12 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч при 35°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×30 мл). Объединенные органические фракции промывали рассолом (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали (Z)-2-гидрокси-8-(гидроксиметилен)-6,6-диметилспиро[3.5]нонан-7-он (355 мг, 1,688 ммоля, 99% выход) (неочищенный) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C12H18O3 [M+H]+ 211,13 найдено 211,15.
Стадия 4: К смеси (Z)-2-гидрокси-8-(гидроксиметилен)-6,6-диметилспиро[3.5]нонан-7-она (355 мг, 1,688 ммоля) в EtOH (12 мл) добавляли раствор гидроксиламингидрохлорида (1173 мг, 16,88 ммоля) в воде (1,2 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 2 ч. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NaHCO3 (40 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические фракции промывали рассолом (45 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 39% этилацетата в петролейном эфире и получали 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-ол (189 мг, 0,912 ммоля, 54,0% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C12H17NO2 [M+H]+ 208,13 найдено 208,25. 1H-NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,03 (d, J=1,7 Hz, 1H), 4,67-4,25 (m, 1H), 2,65 (s, 1H), 2,52 (s, 1H), 2,51-2,40 (m, 1H), 2,34-2,23 (m, 1H), 2,01-1,88 (m, 1H), 1,89-1,76 (m, 3H), 1,37 (s, 3H), 1,34 (s, 3H).
Стадия 5: К смеси 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-ола (350 мг, 1,689 ммоля) в DCM (4,5 мл) в атмосфере азота добавляли перйодинан Десса-Мартина (1432 мг, 3,38 ммоля) при 0°C. Полученную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1,5 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакцию останавливали насыщенным раствором бикарбоната натрия (40 мл) и экстрагировали этилацетатом (130 мл×3). Объединенные органические фракции сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1 ~ 40% этилацетата в петролейном эфире и получали 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-он (312 мг, 1,520 ммоля, 90% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C12H15NO2 [M+H]+ 206,11 найдено 206,10. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,06 (s, 1H), 3,17-3,03 (m, 2H), 2,84-2,74 (m, 2H), 2,66 (s, 2H), 2,06 (s, 2H), 1,39 (s, 6H).
Стадия 6: К раствору 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-она (100 мг, 0,487 ммоля) в THF (1 мл) добавляли анилин (52,2 мг, 0,56 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, к ней добавляли триацетоксиборогидрид натрия (147,8 мг, 0,69 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0-50% этилацетата в петролейный эфир и получали 7,7-диметил-N-фенил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-амин (90 мг, 0,319 ммоля, 65,4% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C18H22N2O [M+H]+ 283,17 найдено 283,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,06-7,98 (m, 1H), 7,27-7,20 (m, 2H), 6,98-6,80 (m, 3H), 4,10-3,82 (m, 1H), 2,68-2,59 (m, 2H), 2,52-2,25 (m, 2H), 2,12-2,09 (m, 2H), 1,84 (d, J=5,9 Hz, 2H), 1,35 (s, 4H), 1,28 (s, 2H).
Схема 43:
Промежуточный продукт 59: N,7,7-триметил-N-фенил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-амин
Стадия 1: К раствору 7,7-диметил-N-фенил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-амина (75 мг, 0,266 ммоля) в MeOH (0,5 мл) добавляли уксусную кислоту (159 мг, 2,66 ммоля), формальдегид (80 мг, 2,66 ммоля) и раствор цианоборогидрида натрия (134 мг, 2,125 ммоля) в MeOH (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл). Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0-50% этилацетата в петролейный эфир и получали N,7,7-триметил-N-фенил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-амин (70 мг, 0,224 ммоля, 84% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C19H24N2O [M+H]+ 297,19 найдено 297,25.
Схема 44:
Промежуточный продукт 60: 9,9-диметил-1,8-диоксо-2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-7-карбонитрил
Стадия 1: К раствору 1-азаспиро[4.5]декан-2,8-диона (2 г, 12 ммоля) в MeOH (24 мл) добавляли триметилортоформиат (1,59 мл, 14,4 ммоля) и CSA (0,139 г, 0,598 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакцию останавливали триэтиламином и концентрировали при пониженном давлении и получали 8,8-диметокси-1-азаспиро[4.5]декан-2-он в виде твердого вещества. Неочищенное вещество использовали без обработки на следующей стадии.
Стадия 2: К раствору 8,8-диметокси-1-азаспиро[4.5]декан-2-она (2,44 г, 11,4 ммоля) в THF (17 мл) и DMF (5,7 мл) порциями добавляли NaH (1,33 г, 33,2 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли метилйодид (1,57 мл, 25,2 ммоля) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой и DCM и водный слой экстрагировали с помощью DCM (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-10% MeOH/DCM) и получали 8,8-диметокси-1-метил-1-азаспиро[4.5]декан-2-он в виде масла. MS: 228 (M+1).
Стадия 3: К 8,8-диметокси-1-метил-1-азаспиро[4.5]декан-2-ону (1,34 г, 5,89 ммоля) в ацетоне (20 мл) добавляли воду (5,31 мл, 295 ммоля) и CSA (0,137 г, 0,589 ммоля). Смесь нагревали при 70°C в течение 30 мин. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, экстрагировали с помощью DCM (3×) и объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-10% MeOH/DCM) и получали 9,9-диметил-1,8-диоксо-2-фенил-2-азаспиро[4.5]декан-7-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 182 (M+1).
Схема 45:
Промежуточный продукт 61: 3,5,5-триметил-3-(метиламино)-6-оксоциклогекс-1-ен-1-карбонитрилгидрохлорид
Стадия 1: К раствору трет-бутил-(1-метил-4-оксоциклогексил)карбамата (2 г, 8,80 ммоля) в THF (70 мл) по каплям добавляли алюмогидрид лития (1 M раствор в THF, 26,4 мл, 26,4 ммоля) при 0°C. Полученную смесь нагревали при 75°C и перемешивали в течение 1 ч, затем смесь охлаждали до 0°C, реакцию останавливали путем добавления воды (1 мл), 10% водного раствора NaOH (1 мл) и воды (3 мл), затем смесь фильтровали. Твердое вещество промывали с помощью THF (100 мл×3). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который использовали на следующей стадии без обработки. MS ESI рассчитано для C8H17NO [M+H]+ 144,13, найдено 144,25.
Стадия 2: К раствору 4-метил-4-(метиламино)циклогексан-1-ола (1,260 г, 8,80 ммоля) в DCM (90 мл) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (3,84 г, 17,60 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% - 55% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-(4-гидрокси-1-метилциклогексил)(метил)карбамат (1,95 г, 8,01 ммоля, 91% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C13H25NO3 [M+H]+ 244,18, найдено 244,25. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d): δ 3,73-3,64 (m, 1H), 2,85 (s, 3H), 1,93-1,69 (m, 4H), 1,47 (s, 9H), 1,44-1,35 (m, 2H), 1,32-1,22 (s, 2H), 1,19 (s, 3H).
Стадия 3: К раствору трет-бутил-(4-гидрокси-1-метилциклогексил)(метил)карбамата (1,95 г, 8,01 ммоля) в сухом DCM (200 мл) добавляли DMP (6,80 г, 16,03 ммоля) при 0°C в атмосфере N2. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором Na2S2O3 (150 мл) и насыщенным водным раствором NaHCO3 (150 мл), экстрагировали с помощью DCM (300 мл×3). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (400 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% - 40% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутилметил(1-метил-4-оксоциклогексил)карбамат (1,81 г, 7,50 ммоля, 94% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C13H23NO3 [M+H]+ 242,17, найдено 242,25. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d): δ 2,92 (s, 3H), 2,81-2,70 (m, 2H), 2,45-2,23 (m, 4H), 1,78-1,67 (m, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,31 (s, 3H).
Стадия 4: К раствору трет-бутилметил(1-метил-4-оксоциклогексил)карбамата (2,81 г, 11,64 ммоля) в t-BuOH (110 мл) добавляли 2-метилпропан-2-олат калия (1 M раствор в THF, 29,1 мл, 29,1 ммоля) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при 25°C в течение 1 ч. Затем добавляли раствор йодметан (3,47 г, 24,45 ммоля) в THF (5 мл) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 3 ч. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором. NH4Cl (100 мл), экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% - 20% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутилметил(1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)карбамат (1,53 г, 5,68 ммоля, 48,8% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C15H27NO3 [M+H]+ 270,20, найдено 270,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 3,16 (dd, J=14,7, 4,2 Hz, 1H), 2,91 (s, 3H), 2,67-2,39 (m, 2H), 2,33-2,21 (m, 1H), 1,87-1,61 (m, 2H), 1,46 (s, 9 H), 1,28 (s, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,04 (s, 3H).
Стадия 5: К раствору трет-бутилметил(1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)карбамата (1,2 г, 4,45 ммоля) в THF (25 мл) по каплям добавляли LiHMDS (1 M раствор в THF, 9,80 мл, 9,80 ммоля) при -70°C в атмосфере N2. Полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 1 ч. Затем добавляли раствор 4-метилбензолсульфонилцианида (1,211 г, 6,68 ммоля) в THF (5 мл). После перемешивания при -70°C в течение 30 мин смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Основной искомый продукт регистрировали с помощью LCMS и часть SM сохранялась. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (100 мл), экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (150 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% - 30% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-(5-циано-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)(метил)карбамат (680 мг, 2,31 ммоля, 51,9% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H26N2O3 [M+H]+ 295,19, найдено 295,30. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d): δ 4,00 (dd, J=14,0, 4,0 Hz, 1H), 3,19-3,08 (m, 2H), 3,00 (dd, J=14,0, 3,2 Hz, 1H), 2,92 (s, 3H), 2,85 (s, 3H), 2,57 (dd, J=16,4, 3,2 Hz, 1H), 2,30 (d, J=16,4 Hz, 1H), 2,04-1,94 (m, 1 H), 1,54-1,40 (m, 21H), 1,35 (s, 3H), 1,28 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,16 (s, 3H), 1,11 (s, 3H).
Стадия 6: Раствор пиридина (107 мг, 1,359 ммоля) в DCM (0,3 мл) по каплям добавляли к фенилгипохлорселенилу (260 мг, 1,359 ммоля) в DCM (5 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 мин и затем по каплям обрабатывали раствором трет-бутил-(5-циано-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)(метил)карбамата (200 мг, 0,679 ммоля) в DCM (2 мл). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Затем пероксид водорода (30%, 770 мг, 6,79 ммоля) по каплям добавляли при 0°C и смесь энергично перемешивали при 0°C в течение 40 мин. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором Na2S2O3 (20 мл), экстрагировали с помощью DCM (20 мл×3), промывали рассолом (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% - 35% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-(3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)(метил)карбамат (110 мг, 0,376 ммоля, 55,4% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C16H24N2O3 [M - 56+H]+ 237,18, найдено 237,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,70 (s, 1H), 2,86 (s, 3H), 2,33 (d, J=14,1 Hz, 1H), 1,92 (d, J=14,1 Hz, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,43 (s, 9H), 1,23 (s, 3H), 1,21 (s, 3H).
Стадия 7: К раствору трет-бутил-(3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)(метил)карбамата (110 мг, 0,376 ммоля) в DCM (2,1 мл) добавляли хлорид водорода (4 M раствор в диоксане, 0,941 мл, 3,76 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем смесь концентрировали при пониженном давлении и получали неочищенный 3,5,5-триметил-3-(метиламино)-6-оксоциклогекс-1-ен-1-карбонитрилгидрохлорид (86 мг, 0,376 ммоля, 100% выход) в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без обработки. MS ESI рассчитано для C11H16N2O [M+H]+ 193,14, найдено 193,20. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,81 (s, 2H), 7,89 (s, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,35 (d, J=14,4 Hz, 1H), 2,13 (dd, J=14,4 Hz, 1H), 1,67 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 1,16 (s, 3H).
Схема 46:
Промежуточный продукт 62: 3-амино-3,5,5-триметил-6-оксоциклогекс-1-ен-1-карбонитрилгидрохлорид
Стадия 1: К смеси этоксида титана(IV) (7,43 г, 32,6 ммоля) с THF (80 мл) в атмосфере азота добавляли раствор 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (2 г, 10,86 ммоля) в THF (20 мл) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 15 мин. Затем медленно добавляли 2-метилпропан-2-сульфинамид (1,316 г, 10,86 ммоля) в THF (80 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали при 65°C и перемешивали в течение 4 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакционной смеси давали охладиться до температуры окружающей среды, реакцию останавливали рассолом (80 мл). Полученную дисперсию фильтровали через слой целита и осадок на фильтре промывали этилацетатом (200 мл). Фильтрат промывали рассолом (80 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (200 мл). Объединенные органические фракции промывали рассолом (120 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 42% этилацетата в петролейном эфире и получали N-(6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид (1,96 г, 6,82 ммоля, 62,8% выход) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C14H25NO3S [M+H]+ 288,16 найдено 288,10. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4,08-3,93 (m, 4H), 3,22-2,74 (m, 2H), 2,62-2,44 (m, 2H), 2,05-1,76 (m, 2H), 1,25 (d, J=2,1 Hz, 9H), 1,03 (s, 1 H), 1,02 (s, 2 H), 1,01 (s, 2 H), 1,00 (s, 1 H).
Стадия 2: К смеси метиллития (1,6 M в Et2O, 9,79 мл, 15,66 ммоля) с толуолом (21 мл) в атмосфере азота добавляли раствор N-(6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамида (900 мг, 3,13 ммоля) в толуоле (6 мл) при 0°C. Смесь перемешивали в течение 15 мин. Полученную смесь нагревали при 25°C и перемешивали в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором Na2SO4 (до прекращения выделения газа) и разбавляли этилацетатом (25 мл). Твердый Na2SO4 добавляли и полученную дисперсию перемешивали при 0°C в течение еще 10 мин. Затем дисперсию фильтровали и промывали этилацетатом (50 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 56% этилацетата в петролейном эфире и получали 2-метил-N-(6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)пропан-2-сульфинамид (326 мг, 1,074 ммоля, 34,3% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C15H29NO3S [M+H]+ 304,19 найдено 304,15. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4,03-3,88 (s, 4H), 3,41 (s, 1H), 2,10-1,87 (m, 2H), 1,85-1,63 (m, 3H), 1,51-1,40 (m, 1H), 1,35 (s, 3H), 1,23 (s, 9H), 1,14 (s, 3H), 0,98 (s, 3H).
Стадия 3: К смеси 2-метил-N-(6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)пропан-2-сульфинамида (3 г, 9,89 ммоля) с MeOH (30 мл) и 1,4-диоксаном (30 мл) добавляли воду (12 мл) и HCl (4 M в диоксане, 60 мл, 240 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали при 55°C и перемешивали в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакционной смеси давали охладиться до температуры окружающей среды, значение pH раствора устанавливали равным 8 насыщенным раствором бикарбоната натрия. Смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 4-амино-2,2,4-триметилциклогексан-1-он (4,6 г, 9,78 ммоля, 99% выход) (неочищенный) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C9H17NO [M+H]+ 156,13 найдено 156,05.
Стадия 4: К смеси 4-амино-2,2,4-триметилциклогексан-1-она (5,37 г, 11,42 ммоля) с MeOH (50 мл) добавляли бикарбонат натрия (2,88 г, 34,2 ммоля) и Boc2O (3,98 мл, 17,12 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 16 ч при 25°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакцию останавливали водой (150 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл×2). Объединенные органические фракции промывали рассолом (120 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 15% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-(1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)карбамат (1,54 г, 6,03 ммоля, 52,8% выход) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C14H25NO3 [M+H - C4H8]+ 200,13 найдено 200,15. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4,56 (s, 1H), 2,82-2,66 (m, 1H), 2,57-2,45 (m, 1H), 2,36-2,17 (m, 2H), 1,89-1,73 (m, 1H), 1,58 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,38 (s, 3H), 1,27 (s, 3H), 1,06 (s, 3H).
Стадия 5: К смеси трет-бутил-(1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)карбамата (2,2 г, 8,62 ммоля) с толуолом (66 мл) в атмосфере азота добавляли этилформиат (6,38 г, 86 ммоля) и метилат натрия (30% в MeOH, 15,51 г, 86 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при 25°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (100 мл) и экстрагировали с помощью DCM (150 мл×2). Объединенные органические фракции промывали рассолом (120 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали трет-бутил-(5-(гидроксиметилен)-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)карбамат (2,441 г, 8,62 ммоля, 100% выход) (неочищенный) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C15H25NO4 [M+H - C4H8]+ 228,12 найдено 228,00.
Стадия 6: К смеси трет-бутил-(5-(гидроксиметилен)-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)карбамата (2,441 г, 8,61 ммоля) с EtOH (120 мл) добавляли раствор гидроксиламингидрохлорида (5,99 г, 86 ммоля) в воде (12 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при 80°C. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NaHCO3 (120 мл) и экстрагировали с помощью DCM (120 мл×2). Объединенные органические фракции промывали рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат растворяли в THF (17 мл), затем добавляли Boc2O (5,00 мл, 21,54 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 19% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-(5,7,7-триметил-4,5,6,7-тетрагидробензо[d]изоксазол-5-ил)карбамат (1,84 г, 6,56 ммоля, 76% выход) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C15H24N2O3 [M+H]+ 281,19 найдено 281,25. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,05 (s, 1H), 4,37 (s, 1H), 2,69-2,52 (m, 3H), 1,62 (d, J=14,2 Hz, 1H), 1,51 (s, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,38 (s, 3H), 1,35 (s, 3H).
Стадия 7: К смеси трет-бутил-(5,7,7-триметил-4,5,6,7-тетрагидробензо[d]изоксазол-5-ил)карбамата (0,9 г, 3,21 ммоля) с Et2O (60 мл) в атмосфере азота добавляли метилат натрия (30% в MeOH, 17,34 г, 96 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч при 25°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×2). Объединенные органические фракции промывали рассолом (25 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 18% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-(5-циано-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)карбамат (833 мг, 2,97 ммоля, 93% выход) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C15H24N2O3 [M+H]+ 281,19 найдено 281,10. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4,47 (s, 1H), 4,12 (dd, J=13,8, 4,8 Hz, 1H), 3,11-2,90 (m, 1H), 2,58-2,26 (m, 1H), 2,16-1,96 (m, 1H), 1,66 (d, J=15,0 Hz, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,39 (s, 3H), 1,36 (s, 3H), 1,15 (s, 3H).
Стадия 8: К смеси пиридина (0,854 мл, 10,56 ммоля) в DCM (15 мл) добавляли раствор фенилселенилхлорида (2,022 г, 10,56 ммоля) в DCM (15 мл) при 0°C и смесь перемешивали в течение 15 мин. К реакционной смеси добавляли раствор трет-бутил-(5-циано-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)карбамата (1,48 г, 5,28 ммоля) в DCM (15 мл) при 0°C. Полученную смесь нагревали при 25°C и перемешивали в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 24% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-(3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)карбамат (1,42 г, 5,10 ммоля, 97% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C15H22N2O3 [M+H - C4H8]+ 223,11 найдено 223,05. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7,67 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 2,44 (d, J=14,4 Hz, 1H), 1,91 (d, J=14,4, 1H), 1,56 (s, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,28 (s, 3H), 1,27 (s, 3H).
Стадия 9: К смеси трет-бутил-(3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)карбамата (1,6 г, 5,75 ммоля) с DCM (16 мл) добавляли HCl (4 M в диоксане, 16 мл, 64,0 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при 25°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Из остатка получали 3-амино-3,5,5-триметил-6-оксоциклогекс-1-ен-1-карбонитрилгидрохлорид (1,2 г, 5,59 ммоля, 97% выход) (неочищенный) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C10H15ClN2O [M+H+H2O]+ 197,13 найдено 197,05.
Схема 47:
Промежуточный продукт 63: N-((3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)метил)-N-метилбензамид
Стадия 1: К раствору 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (3 г, 16,28 ммоля) в тетрагидрофуране (150 мл) добавляли 2-метилпропан-2-олат калия (2,193 г, 19,54 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали в течение 20 мин при 30°C. Затем 1-((изоцианометил)сульфонил)-4-метилбензол (3,81 г, 19,54 ммоля) добавляли к реакционной смеси при такой же температуре. Полученную смесь перемешивали в течение еще 4 ч. Реакцию останавливали насыщенным раствором NH4Cl (150 мл) и экстрагировали этилацетатом (300 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (100 мл). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 50% этилацетата в петролейном эфире и получали 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбонитрил (2 г, 9,22 ммоля, 56,6% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C11H17NO2 [M+H] + 196,13 найдено 196,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 4,07-3,80 (m, 4H), 2,73-2,53 (m, 1H), 2,08-1,96 (m, 1H), 1,96-1,80 (m, 2H), 1,70-1,62 (m, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,95 (s, 3H).
Стадия 2: К раствору 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбонитрила (6 г, 30,7 ммоля) в тетрагидрофуране (60 мл) добавляли бис(триметилсилил)амид лития (1,3 M в THF, 27,2 мл, 35,3 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали в течение 1 ч. Затем к смеси добавляли йодметан (4,80 г, 33,8 ммоля) и смесь перемешивали в течение 2 ч при такой же температуре. Реакцию останавливали насыщенным раствором NH4Cl и экстрагировали этилацетатом (300 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0~30% этилацетата в петролейном эфире и получали 6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбонитрил (5,5 г, 23,65 ммоля, 77% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C12H19NO2 [M+H] + 210,14 найдено 210,15. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 4,00-3,89 (m, 4H), 2,08-1,97 (m, 2H), 1,77-1,53 (m, 4H), 1,42-1,29 (m, 6H), 0,96-0,85 (m, 3H).
Стадия 3: К раствору 6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-карбонитрила (1 г, 4,78 ммоля) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли алюмогидрид лития (2,4 M в THF, 3,98 мл, 9,56 ммоля) при 25°C и смесь перемешивали при 70°C в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, разбавляли диэтиловым эфиром (10 мл) и реакцию останавливали путем добавления воды (0,3 мл), 15% водного раствора NaOH (0,3 мл) и воды (0,9 мл)., затем смесь фильтровали. Твердое вещество промывали с помощью THF (20 мл×3). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали (6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метанамин (1 г, 4,22 ммоля, 88% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C12H23NO2 [M+H] + 214,17 найдено 214,25. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 4,04-3,84 (m, 4H), 2,52 (d, J=12,9 Hz, 1H), 2,43 (d, J=13,0 Hz, 1H), 1,75 (ddd, J=13,6, 10,5, 4,3 Hz, 1H), 1,65-1,50 (m, 1H), 1,55-1,44 (m, 1H), 1,44 (d, J=3,8 Hz, 1H), 1,36 (dddd, J=13,0, 8,0, 5,2, 3,0 Hz, 1H), 1,24 (dd, J=13,9, 1,8 Hz, 1H), 1,07 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,94 (s, 3H).
Стадия 4: К раствору (6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метанамина (5,7 г, 26,7 ммоля) в тетрагидрофуране (57 мл) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (5,83 г, 26,7 ммоля) при 30°C и смесь перемешивали в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0~50% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-((6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метил)карбамат (7 г, 20,10 ммоля, 75% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C17H31NO4 [M+H] + 314,23 найдено 314,30. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 3,96-3,90 (m, 4H), 3,05 (dd, J=13,5, 6,6 Hz, 1H), 2,92 (dd, J=13,5, 6,0 Hz, 1H), 1,79-1,32 (m, 5H), 1,45 (s, 9H), 1,26 (dd, J=13,9, 1,6 Hz, 1H), 1,05 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,95 (s, 3H).
Стадия 5: К раствору трет-бутил-((6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метил)карбамата (7 г, 22,33 ммоля) в тетрагидрофуране (70 мл) добавляли алюмогидрид лития (2,4 M в THF, 9,31 мл, 22,33 ммоля) при 25°C и смесь перемешивали при 70°C в течение 1 ч, затем смесь охлаждали до 0°C, разбавляли диэтиловым эфиром (70 мл) и реакцию останавливали путем добавления воды (0,8 мл), 15% водного раствора NaOH (0,8 мл) и воды (2,4 мл), затем смесь фильтровали. Фильтрат промывали с помощью THF (70 мл×3). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали N-метил-1-(6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метанамин (5 г, 19,79 ммоля, 89% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C13H25NO2 [M+H]+ 228,19 найдено 228,30. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 4,07-3,85 (m, 4H), 2,44 (s, 3H), 2,41 (d, J=11,4 Hz, 1H), 2,33 (d, J=11,4 Hz, 1H), 1,76 (ddd, J=13,8, 10,7, 4,2 Hz, 1H), 1,60 (dq, J=7,4, 3,9 Hz, 1H), 1,53 (dd, J=13,8, 3,8 Hz, 2H), 1,48-1,35 (m, 1H), 1,31 (dd, J=13,9, 1,7 Hz, 1H), 1,07 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,94 (s, 3H).
Стадия 6: К раствору N-метил-1-(6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метанамина (5 г, 21,99 ммоля) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли хлорид водорода (2 M в воде, 50,00 мл, 100 ммоля) при 25°C и смесь перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь нейтрализовывали насыщенным водным раствором карбонат натрия. Смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 2,2,4-триметил-4-((метиламино)метил)циклогексан-1-онгидрохлорид (4 г, 18,2 ммоля, 83%) в виде почти белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C11H21NO [M+H] + 184,16 найдено 184,30. 1H NMR (300 MHz, метанол-d4) δ 3,09 (d, J=12,3 Hz, 1H), 2,89 (d, J=12,3 Hz, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,51-2,26 (m, 2H), 1,92-1,73 (m, 2H), 1,77-1,57 (m, 2H), 1,18 (s, 3H), 1,15 (s, 3H), 1,14 (s, 3H).
Стадия 7: К раствору 2,2,4-триметил-4-((метиламино)метил)циклогексан-1-онгидрохлорида (4 г, 18,20 ммоля) в MeOH (40 мл) добавляли карбонат натрия (5,79 г, 54,6 ммоля) и ди-трет-бутилдикарбонат (5,96 г, 27,3 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали при 30°C в течение 1 ч. Смесь экстрагировали этилацетатом (100 мл×3), промывали рассолом (50 мл×3), сушили над Na2SO4, фильтровали и фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 30% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутилметил((1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)карбамат (5,2 г, 16,51 ммоля, 91% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C16H29NO3 [M+H] + 284,21 найдено 284,30. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 3,44- 3,15 (m, 1H), 3,04 (d, J=14,6 Hz, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,65-2,48 (m, 1H), 2,50-2,32 (m, 1H), 1,92-1,76 (m, 1H), 1,74-1,62 (m, 2H), 1,56 (dd, J=14,3, 2,3 Hz, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,20 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,12 (s, 3H).
Стадия 8: К раствору трет-бутилметил((1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)карбамата (300 мг, 1,059 ммоля) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям добавляли бис(триметилсилил)амид лития (1,3 M в THF, 1,791 мл, 2,329 ммоля) при -70°C в атмосфере N2. Полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 1 ч. Затем добавляли раствор 4-метилбензолсульфонилцианида (288 мг, 1,588 ммоля) в тетрагидрофуране (1 мл). После перемешивания при -70°C в течение 30 мин смесь нагревали при 25°C и перемешивали в течение 2 ч. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (5 мл), экстрагировали этилацетатом (20 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (10 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% ~ 30% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-((5-циано-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)(метил)карбамат (300 мг, 0,875 ммоля, 83% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C17H28N2O3 [M+H] + 309,21 найдено 309,25. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 4,76-4,63 (m, 0,25H), 4,42-4,29 (m, 0,25H), 3,99-3,85 (m, 0,5H), 3,23-3,04 (m, 1H), 3,04-2,88 (m, 3H), 2,63-2,50 (m, 0,5H), 2,35-2,21 (m, 0,5H), 2,23-2,08 (m, 1H), 1,97-1,56 (m, 3H), 1,56-1,41 (m, 9H), 1,41-0,94 (m, 9H).
Стадия 9: К раствору фенилгипохлорселенила (1118 мг, 5,84 ммоля) в DCM (10 мл) по каплям добавляли раствор пиридина (462 мг, 5,84 ммоля) в DCM (10 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 мин и затем по каплям обрабатывали раствором трет-бутил-((5-циано-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)(метил)карбамата (900 мг, 2,92 ммоля) в DCM (2 мл). Полученную смесь перемешивали при 30°C в течение 2 ч. Затем пероксид водорода (30%, 662 мг, 5,84 ммоля) по каплям добавляли при 0°C и смесь энергично перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором Na2S2O3 (20 мл), экстрагировали с помощью DCM (50 мл×3), промывали рассолом (10 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% ~ 35% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-((3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)метил)(метил)карбамат (800 мг, 2,350 ммоля, 81% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C17H26N2O3 [M+H] + 307,19 найдено 307,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,46-7,43 (m, 1H), 3,65-3,46 (m, 1H), 3,23-3,08 (m, 1H), 3,00-2,90 (m, 3H), 1,95-1,91 (m, 1H), 1,75-1,70 (m, 1H), 1,49 (s, 9H), 1,32 (s, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,24 (s, 3H).
Стадия 10: К раствору трет-бутил-((3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)метил)(метил)карбамата (800 мг, 2,61 ммоля) в DCM (8 мл) добавляли хлорид водорода (4 M в 1,4-диоксане, 8 мл, 32,0 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали при 25°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 3,5,5-триметил-3-((метиламино)метил)-6-оксоциклогекс-1-ен-1-карбонитрилгидрохлорид (650 мг, 2,410 ммоля, 92% выход) в виде почти белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C12H18N2O [M+H]+ 207,14 найдено 207,15. 1H NMR (400 MHz, метанол-d4) δ 7,60 (s, 1H), 3,18 (s, 2H), 2,77 (s, 3H), 2,12 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,94 (dd, J=14,7, 1,6 Hz, 1H), 1,44 (s, 3H), 1,28 (s, 3H), 1,23 (s, 3H).
Стадия 11: К раствору 3,5,5-триметил-3-((метиламино)метил)-6-оксоциклогекс-1-ен-1-карбонитрила (50 мг, 0,242 ммоля) в DCM (2,3 мл) добавляли TEA (0,068 мл, 0,485 ммоля) и бензоилхлорид (40,9 мг, 0,291 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 30°C в течение 3 ч. К реакционной смеси добавляли воду (20 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (100 мл). Органический слой промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью Prep-TLC при элюировании смесью петролейный эфир : этилацетат=1 : 1 и получали N-((3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)метил)-N-метилбензамид (63 мг, 0,203 ммоля, 84% выход) в виде белого масла. MS ESI рассчитано для C19H22N2O2 [M+H]+ 311,17 найдено 311,10.
Стадия 12: Продукт разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRALPAK IH, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: гексаны, подвижная фаза B: EtOH; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 30% B до 30% B за 13,6 мин; длина волны: 254/220 нм; RT1: 7,87 мин; RT2: 10,55 мин. Фракции первого пика (RT1: 7,87 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали N-((3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)метил)-N-метилбензамид (24,7 мг, 0,080 ммоля, 27,4% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H22N2O2 [M+H]+ 311,17 найдено 311,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,53-7,22 (m, 6H), 3,97 (d, J=13,5 Hz, 1H), 3,43 (d, J=14,1 Hz, 1H), 3,07 (s, 3H), 2,10 (d, J=13,8 Hz, 1H), 1,86 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,44 (s, 3H), 1,29 (s, 6H). Фракции второго пика (RT2: 10,55 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали N-((3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)метил)-N-метилбензамид (21,8 мг, 0,070 ммоля, 24,22% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H22N2O2 [M+H]+ 311,17 найдено 311,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,61-7,14 (m, 6H), 3,97 (d, J=13,5 Hz, 1H), 3,43 (d, J=13,5 Hz, 1H), 3,05 (s, 3H), 2,10 (d, J=13,8 Hz, 1H), 1,86 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,41 (s, 3H), 1,27 (s, 6H).
Схема 48:
Промежуточный продукт 64: трет-бутил-((3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)метил)карбамат
Стадия 1: К раствору (6,6,8-триметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)метанамина (300 мг, 1,406 ммоля) в тетрагидрофуране (3 мл) добавляли хлорид водорода (2 M в воде, 3 мл, 6,00 ммоля) при 25°C и смесь перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 4-(аминометил)-2,2,4-триметилциклогексан-1-онгидрохлорид (289 мг, 1,406 ммоля) в виде белого твердого вещества, которое сразу использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C10H19NO [M+H] + 170,15, найдено 170,15.
Стадия 2: К раствору 4-(аминометил)-2,2,4-триметилциклогексан-1-онгидрохлорида (289 мг, 1,406 ммоля) в MeOH (2,5 мл) добавляли карбонат натрия (464 мг, 4,37 ммоля) и ди-трет-бутилдикарбонат (477 мг, 2,187 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали при 25°C в течение 1 ч. Смесь разбавляли этилацетатом (50 мл), промывали рассолом (10 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 30% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-((1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)карбамат (280 мг, 0,935 ммоля, 70,0% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C15H27NO3 [M+H] + 270,20 найдено 270,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 4,66 (brs, 1H), 3,18 (dd, J=13,9, 7,0 Hz, 1H), 3,00 (dd, J=13,8, 6,4 Hz, 1H), 2,55-2,40 (m, 2H), 1,80-1,73 (m, 1H), 1,68-1,61 (m, 2H), 1,54 (d, J=14,4 Hz, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,18 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,10 (s, 3H).
Стадия 3: К раствору трет-бутил-((1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)карбамата (400 мг, 1,485 ммоля) в толуоле (4 мл) добавляли этилформиат (550 мг, 7,42 ммоля) и метанолят натрия (401 мг, 7,42 ммоля) при 25°C и смесь перемешивали в течение 1 ч. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл), экстрагировали этилацетатом (30 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали трет-бутил-((5-(гидроксиметилен)-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)карбамат (442 мг, 1,485 ммоля) в виде коричневого твердого вещества, которое сразу использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C16H27NO4 [M+H] + 298,19 найдено 298,20.
Стадия 4: К раствору трет-бутил-((5-(гидроксиметилен)-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)карбамата (442 мг, 1,485 ммоля) в EtOH (20 мл) добавляли гидроксиламингидрохлорид (93 мг, 1,345 ммоля) при 25°C и смесь перемешивали при 80°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке: XBridge Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: Вода, подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 0% B до 50% B за 30 мин, 50% B; детектор: UV 220/254 нм и получали трет-бутил-((5,7,7-триметил-4,5,6,7-тетрагидробензо[d]изоксазол-5-ил)метил)карбамат (140 мг, 0,476 ммоля, 30,4% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H26N2O3 [M+H] + 295,19 найдено 295,25. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,02 (s, 1H), 4,66 (brs, 1H), 3,14-3,03 (m, 2H), 2,35 (d, J=15,3 Hz, 1H), 2,20 (d, J=15,4 Hz, 1H), 1,68 (d, J=14,0 Hz, 1H), 1,58 (d, J=14,1 Hz, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,38 (s, 3H), 1,34 (s, 3H), 1,01 (s, 3H).
Стадия 5: К раствору трет-бутил-((5,7,7-триметил-4,5,6,7-тетрагидробензо[d]изоксазол-5-ил)метил)карбамата (140 мг, 0,476 ммоля) в диэтиловом эфире (2,5 мл) добавляли метанолят натрия (30% в MeOH, 1,285 г, 7,13 ммоля) в MeOH (1 мл) при 0°C и смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч. Реакционную смесь нейтрализовывали уксусной кислотой. Полученную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл), промывали рассолом (5 мл×3), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% ~ 30% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-((5-циано-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)карбамат (120 мг, 0,408 ммоля, 86% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H26N2O3 [M+H] + 295,19 найдено 295,10
Стадия 6: К раствору фенилгипохлорселенила (156 мг, 0,815 ммоля) в DCM (1 мл) добавляли пиридин (64,5 мг, 0,815 ммоля) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 мин и затем по каплям обрабатывали раствором трет-бутил-((5-циано-1,3,3-триметил-4-оксоциклогексил)метил)карбамата (120 мг, 0,408 ммоля) в DCM (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч. Затем пероксид водорода (30%, 92 мг, 0,815 ммоля) по каплям добавляли при 0°C и смесь энергично перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором Na2S2O3 (5 мл), экстрагировали с помощью DCM (10 мл×3), промывали рассолом (10 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% ~ 35% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-((3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)метил)карбамат (90 мг, 0,277 ммоля, 68,0% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H24N2O3 [M+H] + 293,18 найдено 293,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,37 (s, 1H), 4,72 (brs, 1H), 3,27-3,16 (m, 2H), 1,93 (d, J=14,6 Hz, 1H), 1,70 (d, J=14,6 Hz, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,31 (s, 3H),1,27 (s, 3H), 1,25 (s, 3H).
Стадия 7: К раствору трет-бутил-((3-циано-1,5,5-триметил-4-оксоциклогекс-2-ен-1-ил)метил)карбамата (100 мг, 0,342 ммоля) в DCM (1 мл) добавляли хлорид водорода (4 M в диоксане, 1 мл, 4,00 ммоля) при 25°C и смесь перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 3-(аминометил)-3,5,5-триметил-6-оксоциклогекс-1-ен-1-карбонитрилгидрохлорид (78 мг, 0,341 ммоля) в виде коричневого твердого вещества, которое сразу использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C11H16N2O [M+H] + 193,13 найдено 193,15. 1H NMR (400 MHz, метанол-d4) δ 7,62-7,59 (m, 1H), 3,11 (s, 2H), 2,08 (d, J=14,3 Hz, 1H), 1,92 (dd, J=14,7, 1,6 Hz, 1H), 1,44 (s, 3H), 1,30 (s, 3H), 1,24 (s, 3H).
Примеры
В следующих экспериментальных процедурах подробно описано получение соединений конкретных примеров настоящего изобретения.
Примечание: Многие из заявленных соединений при комнатной температуре в растворе существуют в виде смеси поворотных изомеров, что усложняет их анализ с помощью 1H-NMR спектроскопии. В этих случаях сдвиги пиков приведены в виде диапазонов мультиплетов, которые включают сигналы обоих поворотных изомеров, а не описывают пики отдельного поворотного изомера.
Примечание: Рацемические соединения, очищенные с помощью хроматографии с нормальной фазой или обращенной фазой, дополнительно очищали с помощью хиральной SFC или хиральной HPLC. Там, где это отмечено, энантиомер 1 соответствует первому элюирующемуся пику и энантиомер 2 соответствует второму элюирующемуся пику. Если содержится более одного хирального центра, соединения описаны, как активные изомеры в порядке элюирования или продукт, для которого не установлена абсолютная стереохимическая конфигурация. В ином случае соединения являются ахиральными или рацемическими.
Пример 1 - энантиомер 1: 9,9-диметил-8-оксо-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Пример 2 - энантиомер 2: 9,9-диметил-8-оксо-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Стадия 1: 1-Оксаспиро[4.5]декан-8-он (1 г, 6,5 ммоля) растворяли в tBuOH (32 мл). Трет-бутоксид калия (1,82 г, 16,2 ммоля) медленно добавляли в атмосфере азота и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. По каплям добавляли метилйодид (0,852 мл, 13,6 ммоля) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (60 мл) и водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% Et2O/гексаны) и получали 7,7-диметил-1-оксаспиро[4.5]декан-8-он в виде жидкости. MS: 183 (M+H).
Примеры можно провести с использованием процедуры, аналогичной описанной на стадиях 2-5, где стадия 1 не требуется.
Стадия 2: К суспензии гидрида натрия (239 мг, 5,97 ммоля) в THF (8,5 мл) при 0°C добавляли раствор 7,7-диметил-1-оксаспиро[4.5]декан-8-она (946 мг, 5,19 ммоля) в THF (8,5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при 0°C. Добавляли этилформиат (1,26 мл, 15,6 ммоля) и реакционной смеси давали нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакцию останавливали насыщенным раствором NH4Cl (водным) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали (Z)-9-(гидроксиметилен)-7,7-диметил-1-оксаспиро[4.5]декан-8-он в виде жидкости, которую использовали без дополнительной очистки. MS: 211 (M+H).
Стадия 3: К раствору (Z)-9-(гидроксиметилен)-7,7-диметил-1-оксаспиро[4.5]декан-8-она (984 мг, 4,68 ммоля) в смеси 10:1 EtOH:H2O (12 мл) добавляли раствор гидроксиламингидрохлорида (358 мг, 5,15 ммоля) в смеси 10:1 EtOH: H2O (12 мл). Реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток подщелачивали насыщенным раствором NaHCO3 (водным) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-50% Et2O/гексаны) и получали 7,7-диметил-4',5',6,7-тетрагидро-3'H,4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-фуран] в виде твердого вещества. MS: 208 (M+H). 1H NMR (600 MHz, хлороформ-d) δ 8,03 (s, 1H), 3,88 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,63-2,54 (m, 2H), 2,05-1,99 (m, 2H), 1,96 (d, J=13,9 Hz, 1H), 1,84 (t, J=7,5 Hz, 2H), 1,74 (d, J=13,9 Hz, 1H), 1,45 (s, 3H), 1,36 (s, 3H).
Примеры можно провести с использованием процедуры, аналогичной описанной на стадиях 3-5, где стадия 1-2 не требуется.
Стадия 4: К раствору 7,7-диметил-4',5',6,7-тетрагидро-3'H,4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-фурана] (473 мг, 2,28 ммоля) в MeOH (11 мл) добавляли метоксид натрия (30% в MeOH, 1,31 мл, 6,85 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении, разбавляли с помощью EtOAc и нейтрализовывали 1 M водным раствором HCl (1,6 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали 9,9-диметил-8-оксо-1-оксаспиро[4.5]декан-7-карбонитрил в виде твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. MS: 208 (M+H).
Стадия 5: К раствору 9,9-диметил-8-оксо-1-оксаспиро[4.5]декан-7-карбонитрила (70 мг, 0,34 ммоля) в THF (675 мкл) при комнатной температуре добавляли ацетат палладия(II) (15,2 мг, 0,068 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли ацетат палладия(II) до 1 полного эквивалента и реакционную смесь перемешивали в течение 48 ч при комнатной температуре. Смесь концентрировали при пониженном давлении и затем разбавляли с помощью DCM (5 мл) и 1:1 вода:рассол (5 мл). Органический слой собирали с помощью разделителя фаз и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% Et2O/гексаны) и получали 9,9-диметил-8-оксо-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил. Рацемическую смесь очищали с помощью хиральной SFC (Lux-2 колонка, 20%/80% MeOH/CO2 с 0,1% NH4OH в качестве модификатора) и получали два продукта в виде масел:
9,9-диметил-8-оксо-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (пример 1 - энантиомер 1). MS: 206 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7,81 (s, 1H), 3,88-3,80 (m, 2H), 2,13-2,04 (m, 4H), 1,98-1,91 (m, 2H), 1,15 (s, 3H), 1,11 (s, 3H).
9,9-диметил-8-оксо-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (пример 2 - энантиомер 2). MS: 206 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7,81 (s, 1H), 3,88-3,80 (m, 2H), 2,12-2,04 (m, 4H), 1,98-1,91 (m, 2H), 1,15 (s, 3H), 1,11 (s, 3H).
Альтернативная стадия 5: К раствору пиридина (0,18 мл, 2,2 ммоля) в DCM (2 мл) при 0°C добавляли раствор фенилселенилхлорида (420 мг, 2,2 ммоля) в DCM (3 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при 0°C, затем добавляли раствор 3,3-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-5-карбонитрила (280 мг, 1,1 ммоля) в DCM (3 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C, затем промывали водным раствором HCl (1 M, 5 мл). Фазы разделяли и органическую фазу обрабатывали пероксидом водорода (50 мас.% в H2O, 1,3 мл, 22 ммоля) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин, затем фазы разделяли и органическую фазу концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/H2O с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил. Рацемическую смесь очищали с помощью хиральной SFC (OJ-H колонка, 15%/85% MeOH/CO2 с 0,1% NH4OH в качестве модификатора) и получали два продукта в виде твердых веществ:
5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил (пример 8 - энантиомер 1). MS: 254 (M+H). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7,42-7,33 (m, 2H), 7,30 (d, J=7,4 Hz, 1H), 7,17 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J=7,5 Hz, 1H), 5,21 (s, 2H), 2,29 (d, J=15,0 Hz, 1H), 2,20 (dd, J=15,0, 2,0 Hz, 1H), 1,43 (s, 3H), 1,23 (s, 3H)
5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил (пример 9 - энантиомер 2). MS: 254 (M+H). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7,42-7,33 (m, 2H), 7,30 (d, J=7,4 Hz, 1H), 7,17 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,09 (d, J=7,5 Hz, 1H), 5,21 (s, 2H), 2,29 (d, J=15,0 Hz, 1H), 2,20 (dd, J=15,0, 2,1 Hz, 1H), 1,43 (s, 3H), 1,23 (s, 3H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Диастереоизомер 2
Диастереоизомер 4
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Диастереоизомер 1
Диастереоизомер 3
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 54: 5,5-диметил-4-оксо-1'H-спиро[циклогексан-1,3'-фуро[3,4-c]пиридин]-2-ен-3-карбонитрил
Стадия 1: При перемешивании к смеси 1'H-спиро[циклогексан-1,3'-фуро[3,4-c]пиридин]-4-она (350 мг, 1,722 ммоля) в толуоле (7 мл) добавляли трет-бутоксид калия (406 мг, 3,62 ммоля) и йодметан (464 мг, 3,27 ммоля) при температуре окружающей среды. Смесь перемешивали при 110°C в течение 3 ч. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (30 мл), экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash при следующих условиях: колонка: 18 гелевая колонка (80 г), 20-35 мкм; подвижная фаза A: 5 мМ водный раствор NH4HCO3; подвижная фаза B: MeCN; градиентный режим: 30% выдерживание в течение 2 мин, до 35% за 20 мин; скорость потока: 70 мл/мин; детектор: UV 254 и 210 нм; RT: 15 мин и получали 3,3-диметил-1'H-спиро[циклогексан-1,3'-фуро[3,4-c]пиридин]-4-он (110 мг, 0,476 ммоля, 27% выход) в виде белого твердого вещества. MS: m/z=232,20 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,57-8,56 (m, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,35-7,34 (m, 1H), 5,19 (s, 2H), 3,20-3,11 (m, 1H), 2,37-2,32 (m, 1H), 2,20-2,13 (m, 2H), 2,05 (s, 2H), 1,42 (s, 3H), 1,11 (s, 3H).
Стадия 2: При перемешивании к смеси 3,3-диметил-1'H-спиро[циклогексан-1,3'-фуро[3,4-c]пиридин]-4-она (88 мг, 0,380 ммоля) с THF (2 мл) добавляли 1 M бис(триметилсилил)амид лития в THF (0,761 мл, 0,761 ммоля) при -78°C. Смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч. Затем к смеси добавляли 4-метилбензолсульфонилцианид (103 мг, 0,571 ммоля) при -78°C. Смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин и при температуре окружающей среды в течение 1,5 ч. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл), экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash при следующих условиях: колонка: C 18 гелевая колонка (40 г), 20-35 мкм, 19×150 мм; подвижная фаза A: 5 мМ водный раствор NH4HCO3; подвижная фаза B: MeCN; градиентный режим: 25% выдерживание в течение 3 мин, до 35% за 20 мин; скорость потока: 40 мл/мин; детектор: UV 254 и 210 нм; RT: 15 мин и получали 3,3-диметил-4-оксо-1'H-спиро[циклогексан-1,3'-фуро[3,4-c]пиридин]-5-карбонитрил (86 мг, 0,336 ммоля, 88% выход) в виде желтого твердого вещества. MS: m/z=257,20 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,63-8,59 (m, 1H), 8,43-8,42 (m, 1H), 7,30-7,29 (m, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,52-4,47 (m, 1H), 2,60-2,51 (m, 2H), 2,15-2,09 (m, 2H), 1,48 (s, 3H), 1,21 (s, 3H).
Стадия 3: К смеси фенилгипохлорселенила (74,7 мг, 0,390 ммоля) с DCM (5 мл) добавляли пиридин (30,9 мг, 0,390 ммоля) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 мин. Затем к смеси добавляли 3,3-диметил-4-оксо-1'H-спиро[циклогексан-1,3'-фуро[3,4-c]пиридин]-5-карбонитрил (50 мг, 0,195 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакционную смесь разбавляли водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (3×80 мл). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью Prep-TLC (PE : EA=1 : 1) и получали неочищенный продукт в виде небольшого количества желтого твердого вещества. Объединенный неочищенный продукт (38 мг) очищали с помощью ахиральной SFC при следующих условиях: колонка: Triart Diol-NP, 20×250 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: CO2, подвижная фаза B: изопропанол; скорость потока:60 мл/мин; градиентный режим: 25% B; детектор: UV 254 нм; RT: 6,50 мин. Фракции, содержащие продукт, собирали и выпаривали в роторном испарителе в вакууме и получали 5,5-диметил-4-оксо-1'H-спиро[циклогексан-1,3'-фуро[3,4-c]пиридин]-2-ен-3-карбонитрил (3,4 мг, 0,013 ммоля, 8,95% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS: m/z=255,20 [M+H]+.
При необходимости стадия 4: 1'-(3,4-диметилбензил)-5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (150 мг, 0,390 ммоля) растворяли в TFA (3 мл, 0,390 ммоля). Затем раствор реакционной смеси перемешивали при 90°C в течение 3 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакционную смесь концентрировали в вакууме и выпаривали вместе с толуол (трижды, 3 мл в каждом случае) для удаления избытка TFA. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash при следующих условиях: колонка: AQ 18 гелевая колонка (80 г), 20-35 мкм; подвижная фаза A: 5 мМ водный раствор NH4HCO3; подвижная фаза B: MeCN (Градиентный режим: 0% B выдерживание в течение 5 мин, до 49,2% B за 31 мин, 49,2% B выдерживание в течение 1,2 мин; до 95% B за 1 мин, 95% B выдерживание в течение 5 мин); скорость потока: 60 мл/мин; детектор: UV 254 и 210 нм; RT: 31,3 мин. Фракции, содержащие продукт, собирали и выпаривали в роторном испарителе в вакууме и получали 5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (49,2 мг, 0,185 ммоля, 47,4% выход) в виде белого твердого вещества. MS: m/z=265,05 [M - H]-. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,89 (s, 1H), 7,38-7,30 (m, 1H), 7,24-7,12 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 7,02-6,87 (m, 1H), 2,49-2,45 (m, 1H), 2,30-2,26 (m, 1H), 1,62 (s, 3H), 1,36 (s, 3H).
Энантиомер 1
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 64, энантиомер 1: 3'-Метокси-5,5-диметил-4-оксо-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-2-ен-3-карбонитрил
Пример 65, энантиомер 2: 3'-Метокси-5,5-диметил-4-оксо-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-2-ен-3-карбонитрил
Стадия 1: Гидрид натрия (60% в минеральном масле, 1,83 г, 45,7 ммоля) добавляли к смеси 6-бром-5-метилпиридин-3-ола (4,3 г, 22,87 ммоля) с диметилформамидом (60 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Затем по каплям добавляли йодметан (2,15 мл, 34,3 ммоля). Полученный раствор перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Полученный раствор разбавляли водой (50 мл) и водный слой экстрагировали этилацетатом (400 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (300 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир=от 0 : 1 до 1 : 1. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-бром-5-метокси-3-метилпиридин (2,38 г, 11,78 ммоля, 52% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C7H8BrNO [M+H]+ 201,98, 203,98, найдено 201,95, 203,95. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,91 (d, J=3,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J=2,9 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 2,37 (s, 3H).
Стадия 2: При перемешивании к раствору 2-бром-5-метокси-3-метилпиридина (2,38 г, 11,78 ммоля) в тетрахлорметане (15 мл) добавляли 1-бромпирролидин-2,5-дион (2,20 г, 12,37 ммоля) и бензоилпероксид (0,38 г, 1,18 ммоля) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 16 ч. Полученный раствор разбавляли водой (100 мл) и водный слой экстрагировали этилацетатом (200 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир=от 0 : 1 до 1 : 4. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-бром-3-(бромметил)-5-метоксипиридин (1,5 г, 5,34 ммоля, 45% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C7H7Br2NO [M+H]+ 279,89, 281,89, 283,89, найдено 279,85, 281,95, 283,95. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d): δ 8,04 (d, J=3,0 Hz, 1H), 7,33 (d, J=3,0 Hz, 1H), 4,54 (s, 2H), 3,90 (s, 3H).
Стадия 3: При перемешивании к раствору 2-бром-3-(бромметил)-5-метоксипиридина (1,49 г, 5,30 ммоля) в 1,4-диоксане (25 мл) добавляли N-метилморфолин-N-оксид (2,18 г, 18,56 ммоля) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 30 мин. Полученный раствор разбавляли водой (100 мл) и водный слой экстрагировали этилацетатом (150 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир=от 0 : 1 до 1 : 1. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-бром-5-метоксиникотиновый альдегид (1 г, 4,40 ммоля, 83% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C7H6BrNO2 [M+H]+ 215,96, 217,96, найдено 216,05, 218,05. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d): δ 10,33 (d, J=0,6 Hz, 1H), 8,32 (d, J=3,0 Hz, 1H), 7,68 (d, J=3,2 Hz, 1H), 3,93 (s, 3H).
Стадия 4: Борогидрид натрия (0,35 г, 9,26 ммоля) добавляли к смеси 2-бром-5-метоксиникотинового альдегида (1,0 г, 4,63 ммоля) с метанолом (25 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Полученный раствор разбавляли насыщенным водным раствором хлорида аммония (100 мл) и водный слой экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (150 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир=от 0 : 1 до 1 : 1. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали (2-бром-5-метоксипиридин-3-ил)метанол (850 мг, 3,86 ммоля, 83% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C7H8BrNO2 [M+H]+ 217,97, 219,97, найдено 218,05, 220,05. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,99 (d, J=3,1 Hz, 1H), 7,43 (d, J=3,0 Hz, 1H), 4,72 (s, 2H), 3,88 (s, 3H).
Стадия 5: н-бутиллитий (2,5 M в н-гексане, 4,22 мл, 10,55 ммоля) по каплям добавляли к раствору (2-бром-5-метоксипиридин-3-ил)метанола (1,15 г, 5,27 ммоля) в тетрагидрофуране (8,0 мл) при -78°C. Затем полученный раствор перемешивали при -78°C в течение 0,5 ч в атмосфере азота. 6,6-Диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он (1,17 г, 6,33 ммоля) добавляли к смеси при -78°C и полученный раствор перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Реакцию останавливали насыщенным раствором хлорида аммония (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой при следующих условиях: колонка, C18, 120 г, 19×150 мм; подвижная фаза: ацетонитрил в воде (5 мМ водный раствор муравьиной кислоты), 10% - 60% за 20 мин; детектор, UV 210 нм. RT: 13 мин. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 8-(3-(гидроксиметил)-5-метоксипиридин-2-ил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (700 мг, 2,17 ммоля, 41% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C17H25NO5 [M+H]+ 324,17, найдено 324,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): 8,17 (d, J=3,0 Hz, 1H), 7,52 (d, J=2,7 Hz, 1H), 5,04-4,87 (m, 2H), 4,07-4,02 (m, 4H), 3,91 (s, 3H), 2,53-2,15 (m, 3H), 1,81-1,49 (m, 3H), 1,37 (s, 3H), 0,90 (s, 3H).
Стадия 6: К раствору 8-(3-(гидроксиметил)-5-метоксипиридин-2-ил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (600 мг, 1,86 ммоля) в дихлорметане (6,0 мл) добавляли п-толуолсульфонилхлорид (531 мг, 2,78 ммоля), триэтиламин (0,78 мл, 5,57 ммоля) и 4-диметиламинопиридин (22,67 мг, 0,19 ммоля) при температуре окружающей среды. Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 16 ч. Реакцию останавливали водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой при следующих условиях: колонка, C18, 120 г, 19×150 мм; подвижная фаза: ацетонитрил в воде (5 мМ водный раствор муравьиной кислоты), 20% - 70% за 30 мин; детектор, UV 254 нм. RT: 22 мин. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 3-метокси-2',2'-диметил-5H-диспиро[фуро[3,4-b]пиридин-7,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан] (300 мг, 0,98 ммоля, 53% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C17H23NO4 [M+H]+ 306,16, найдено 306,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 8,19-8,12 (m, 1H), 7,07 (d, J=2,4 Hz, 1H), 5,02 (t, J=0,9 Hz, 2H), 4,05-3,95 (m, 4H), 3,87 (s, 3H), 2,28-2,08 (m, 3H), 1,79-1,48 (m, 3H), 1,31 (s, 3H), 0,92 (s, 3H).
Стадия 7: К раствору 3-метокси-2',2'-диметил-5H-диспиро[фуро[3,4-b]пиридин-7,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолана] (300 мг, 0,98 ммоля) в тетрагидрофуране (2 мл) по каплям добавляли HCl (1,5 M в H2O, 2,0 мл, 4,00 ммоля) при 0°C в атмосфере аргона. Полученную смесь нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 3 ч. Реакцию останавливали водой (20 мл) и значение pH раствора устанавливали равным 6 ~ 7 насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле при элюировании в градиентном режиме смесью этилацетат : петролейный эфир - от 1 : 9 до 3 : 2 и получали 3'-метокси-3,3-диметил-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-4-он (200 мг, 0,77 ммоля, 78% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C15H19NO3 [M+H]+ 262,14, найдено 262,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 8,17 (s, 1H), 7,13 (d, J=2,4 Hz, 1H), 5,12 (d, J=1,6 Hz, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,18-3,06 (m, 1H), 2,40-2,25 (m, 3H), 2,15-2,01 (m, 1H), 1,92 (dd, J=14,5, 3,5 Hz, 1H), 1,43 (s, 3H), 1,12 (s, 3H).
Стадия 8: Бис(триметилсилил)амид лития (1 M в THF, 2,14 мл, 2,14 ммоля) добавляли к раствору 3'-метокси-3,3-диметил-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-4-она (280 мг, 1,071 ммоля) в тетрагидрофуране (3,0 мл) (дегазировали азотом 3 раза) при -78°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°C в течение 45 мин. Затем раствор 4-метилбензолсульфонилцианида (291 мг, 1,607 ммоля) в тетрагидрофуране (1,0 мл) (в атмосфере азота) добавляли при -78°C. Смесь перемешивали при -78°C в течение 0,5 ч. Затем реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 16 ч. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (30 мл), разбавляли этилацетатом (50 мл×2), промывали рассолом (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью Prep-TLC этилацетат : петролейный эфир=1 : 2 и промывали этилацетатом и получали 3'-метокси-3,3-диметил-4-оксо-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-5-карбонитрил (100 мг, 0,35 ммоля, 33% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H18N2O3 [M+H]+ 287,13, найдено 287,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 8,16-8,15 (m, 1H), 7,12-7,11 (m, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,43 (dd, J=13,8, 5,1 Hz, 1H), 3,87 (s, 3H), 2,62-2,55 (m, 1H), 2,45-2,34 (m, 1H), 2,31 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,92 (dd, J=14,7, 3,7 Hz, 1H), 1,46 (s, 3H), 1,18 (s, 3H).
Стадия 9: Раствор пиридина (55,3 мг, 0,70 ммоля) в дихлорметане (0,5 мл) по каплям добавляли к фенилгипохлорселенилу (134 мг, 0,70 ммоля) в дихлорметане (0,5 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 мин и затем по каплям обрабатывали раствором 3'-метокси-3,3-диметил-4-оксо-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-5-карбонитрила (100 мг, 0,35 ммоля) в дихлорметане (1,5 мл). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. Реакцию останавливали водой (30 мл), разбавляли дихлорметаном (50 мл×2), промывали рассолом (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью Prep-TLC этилацетат: петролейный эфир=1:2 и промывали этилацетатом и получали 3'-метокси-5,5-диметил-4-оксо-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-2-ен-3-карбонитрил (80 мг, 0,28 ммоля, 61% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C16H16N2O3 [M+H]+ 285,12, найдено 285,10.
Стадия 10: 3'-Метокси-5,5-диметил-4-оксо-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-2-ен-3-карбонитрил (80 мг, 0,28 ммоля) очищали с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: CHIRALPAK IA - 3, 4,6×50 мм (3 мкм); подвижная фаза: гексаны: изопропанол=80:20; детектор, UV 254 нм. 3'-Метокси-5,5-диметил-4-оксо-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-2-ен-3-карбонитрил (26,0 мг, 0,091 ммоля, 33% выход) получали при 1,78 мин в виде светло-желтого твердого вещества; MS ESI рассчитано для C16H16N2O3 [M+H]+ 285,12, найдено 285,05. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 8,22 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,19 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,16 (d, J=2,6 Hz, 1H), 5,22 (d, J=13,0 Hz, 1H), 5,16 (d, J=13,1 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,60 (d, J=15,0 Hz, 1H), 2,10 (dd, J=14,9, 2,1 Hz, 1H), 1,43 (s, 3H), 1,27 (s, 3H).
3'-Метокси-5,5-диметил-4-оксо-5'H-спиро[циклогексан-1,7'-фуро[3,4-b]пиридин]-2-ен-3-карбонитрил (27,1 мг, 0,095 ммоля, 34% выход) получали при 3,16 мин в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H16N2O3 [M+H]+ 285,12, найдено 285,05. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 8,23 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,19 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,17 (d, J=2,6 Hz, 1H), 5,22 (d, J=13,2 Hz, 1H), 5,16 (d, J=13,1 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 2,61 (d, J=15,0 Hz, 1H), 2,10 (dd, J=14,9, 2,1 Hz, 1H), 1,46 (s, 3H), 1,27 (s, 3H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 76, Изомер 1: 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусная кислота
Пример 77, Изомер 2: 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусная кислота
Пример 78, Изомер 3: 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусная кислота
Пример 79, Изомер 4: 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусная кислота
Стадия 1: К раствору 2-(6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадец-11-ен-11-ил)пиразина (330 мг, 1,091 ммоля) в MeOH (6 мл) добавляли Pd/C (99 мг, 0,930 ммоля) при комнатной температуре. Систему трижды заполняли водородом и удаляли водород и перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре в атмосфере водорода. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали 2-(6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-ил)пиразин (330 мг, 1,084 ммоля, 99% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C17H24N2O3 [M+H]+ 305,19 найдено 305,15.
Альтернативная стадия 1: К раствору 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-она (220 мг, 0,916 ммоля) в THF (0,5 мл) добавляли метилмагнийбромид (1 M в THF, 1,831 мл, 1,831 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали в течение 16 ч при 60°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакцию останавливали водным раствором NH4Cl (1 мл), и разбавляли этилацетатом (40 мл), затем промывали рассолом (10 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 10% - 40% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 6,6,12-триметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-ол (80 мг, 0,312 ммоля, 34,1% выход). MS ESI рассчитано для C14H24O4 [M+H]+ 257,17 найдено 257,20. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 4,07-3,69 (m, 6H), 2,14-1,88 (m, 3H), 1,72-1,38 (m, 5H), 1,28 (s, 3H), 1,22 (s, 3H), 0,91 (s, 3H) и 6,6,12-триметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-12-ол (80 мг, 0,312 ммоля, 34,1% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C14H24O4 [M+H]+ 257,17 найдено 257,20. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 4,07-3,69 (m, 6H), 2,14-1,88 (m, 3H), 1,72-1,38 (m, 5H), 1,27 (s, 3H), 1,25 (s, 3H), 0,91 (s, 3H).
Альтернативно, изомеры можно разделить на стадии 8.
Альтернативная стадия 1: К раствору борогидрида натрия (47,2 мг, 1,248 ммоля) в MeOH (3 мл) добавляли раствор 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-она (200 мг, 0,832 ммоля) в MeOH (3 мл) и смесь перемешивали в течение 10 мин в атмосфере азота при 0°C, затем смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (2 мл) и экстрагировали этилацетатом (5 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (4 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали неочищенный 6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-ол (195 мг, 0,805 ммоля, 97% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C13H22O4 [M+H]+ 243,15 найдено 243,25. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 4,82-4,39 (m, 1H), 4,04-3,67 (m, 6H), 2,03-1,50 (m, 8H), 1,23-1,10 (m, 3H), 0,97-0,77 (m, 3H).
Стадию 1 и альтернативную стадию 1 также можно объединить и провести за одну стадию.
Стадия 2: К раствору 2-(6,6-диметил-1,4,9-триоксадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-ил)пиразина (330 мг, 1,084 ммоля) в THF (4,5 мл) добавляли 1 н. водный раствор HCl (4,34 мл, 4,34 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 6 ч при 40°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакцию останавливали насыщенным раствором NaHCO3 (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл×3). Органический слой промывали рассолом (60 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 10% - 60% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 7,7-диметил-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]декан-8-он (250 мг, 0,960 ммоля, 89% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C15H20N2O2 [M+H]+ 261,16 найдено 261,10.
Стадия 3: К раствору 7,7-диметил-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]декан-8-она (250 мг, 0,960 ммоля) добавляли метилат натрия (657 мг, 3,65 ммоля) и этилформиат (285 мг, 3,84 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч при 30°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции в реакционную смесь добавляли 5% водный раствор HCl (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл×3). Органический слой промывали рассолом (60 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и получали (Z)-9-(гидроксиметилен)-7,7-диметил-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]декан-8-он (250 мг, 0,867 ммоля, 90% выход) в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C16H20N2O3 [M+H]+ 289,16 найдено 289,10.
Стадия 4: К раствору (Z)-9-(гидроксиметилен)-7,7-диметил-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]декан-8-она (250 мг, 0,867 ммоля) в EtOH (2 мл) добавляли смесь гидроксиламингидрохлорида (602 мг, 8,67 ммоля) с водой (1 мл) при комнатной температуре. Затем смесь перемешивали в течение 3 ч при 85°C, за протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции реакцию останавливали водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (40 мл×3). Органический слой промывали рассолом (50 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 10% - 60% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 7,7-диметил-4'-(пиразин-2-ил)-4',5',6,7-тетрагидро-3'H,4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-фуран] (60 мг, 0,200 ммоля, 23,04% выход) в виде светло-желтого масла и 7,7-диметил-4'-(пиразин-2-ил)-4',5',6,7-тетрагидро-3'H,4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-фуран] (90 мг, 0,300 ммоля, 34,6% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C16H19N3O2 [M+H]+ 286,16 найдено 286,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,62-8,56 (m, 1H), 8,54 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,48 (d, J=2,6 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 4,31 (t, J=8,2 Hz, 1H), 4,02 (t, J=8,5 Hz, 1H), 3,88-3,72 (m, 1H), 2,93-2,67 (m, 2H), 2,40-2,27 (m, 2H), 2,09 (dd, J=14,0, 1,8 Hz, 1H), 1,82 (d, J=14,0 Hz, 1H), 1,50 (s, 3H), 1,40 (s, 3H). MS ESI рассчитано для C16H19N3O2 [M+H]+ 286,16 найдено 286,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,61-8,57 (m, 1H), 8,54 (d, J=1,5 Hz, 1H), 8,49 (d, J=2,6 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 4,31 (t, J=8,2 Hz, 1H), 4,05 (t, J=8,7 Hz, 1H), 3,86-3,75 (m, 1H), 2,82-2,62 (m, 2H), 2,32 (t, J=9,2 Hz, 2H), 2,20 (d, J=1,3 Hz, 1H), 1,92 (d, J=14,0 Hz, 1H), 1,48 (s, 3H), 1,39 (s, 3H).
Альтернативно, изомеры следующих соединений примеров можно разделить на стадии 7.
Стадия 5Q: К раствору 7,7-диметил-4'-(пиразин-2-ил)-4',5',6,7-тетрагидро-3'H,4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-фурана] (60 мг, 0,210 ммоля) в Et2O (2 мл) и MeOH (1 мл) добавляли метилат натрия (30% в метаноле, 1325 мг, 7,36 ммоля) при комнатной температуре. Затем смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали 1 н. водным раствором HCl (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×3). Органический слой промывали рассолом (30 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и получали 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]декан-7-карбонитрил (PH-EBR2320-270-5Q) (33 мг, 0,116 ммоля, 55,0% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C16H19N3O2 [M+H]+ 286,16 найдено 286,10.
Стадия 5H: К раствору 7,7-диметил-4'-(пиразин-2-ил)-4',5',6,7-тетрагидро-3'H,4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-фурана] (90 мг, 0,315 ммоля) в Et2O (1 мл) и MeOH (0,5 мл) добавляли метилат натрия (30% в метаноле, 1988 мг, 11,04 ммоля) при комнатной температуре. Затем смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали 1 н. водным раствором HCl (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (40 мл×3). Органический слой промывали рассолом (50 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и получали 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]декан-7-карбонитрил (70 мг, 0,245 ммоля, 78% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C16H19N3O2 [M+H]+ 286,16 найдено 286,10.
Стадия 6Q: Фенилселенилхлорид (44,3 мг, 0,231 ммоля) по каплям добавляли к раствору пиридина (0,019 мл, 0,231 ммоля) в DCM (0,3 мл) при 0°C. Полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 30 мин в атмосфере азота. Раствор 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]декан-7-карбонитрил (33 мг, 0,116 ммоля) в DCM (0,2 мл) добавляли в указанную выше смесь и смесь перемешивали при 0°C в атмосфере азота в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции полученный раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Flash (колонка: C18 20 г колонка; подвижная фаза A: вода (0,1% TFA), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 35 мл/мин; градиентный режим: от 2% B до 30% B за 30 мин, детектор: UV 210 нм; RT=28 мин). Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали и получали 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусную кислоту (PH-EBR2320-270-0Q) (30 мг, 0,075 ммоля, 65,3% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C16H17N3O2 [M+H]+ 284,13 найдено 284,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,74 (s, 1H), 8,64-8,50 (m, 2H), 7,73 (s, 1H), 4,47-4,30 (m, 1H), 4,05 (t, J=8,7 Hz, 1H), 3,87 (t, J=8,0 Hz, 1H), 2,55 (d, J=8,1 Hz, 2H), 2,33-2,06 (m, 2H), 1,32 (s, 3H), 1,24 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ - d) δ -75,64 (s, 3F).
Стадия 6H: Фенилселенилхлорид (94 мг, 0,491 ммоля) по каплям добавляли к раствору пиридина (0,040 мл, 0,491 ммоля) в DCM (0,6 мл) при 0°C. Полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 30 мин в атмосфере азота. Раствор 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]декан-7-карбонитрила (70 мг, 0,245 ммоля) в DCM (0,40 мл) добавляли в указанную выше смесь и смесь перемешивали при 0°C в атмосфере азота в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции полученный раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Flash (колонка: C18 20 г колонка; подвижная фаза A: вода (0,1% TFA), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 35 мл/мин; градиентный режим: от 2% B до 30% B за 30 мин, детектор: UV 210 нм; RT=28 мин). Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали и получали 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусную кислоту (PH-EBR2320-270-0H) (60 мг, 0,151 ммоля, 61,6% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C16H17N3O2 [M+H]+ 284,13 найдено 284,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,85 (s, 1H), 8,70-8,58 (m, 2H), 7,42 (s, 1H), 4,42 (t, J=8,0 Hz, 1H), 4,12 (t, J=8,6 Hz, 1H), 3,93 (t, J=8,3 Hz, 1H), 2,66-2,47 (m, 2H), 2,39-2,17 (m, 2H), 1,34 (s, 3H), 1,24 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ - d) δ -75,59 (s, 3F).
Альтернативная стадия 6: К раствору 3-гидрокси-9,9-диметил-8-оксо-3-(пиридин-3-ил)-1-оксаспиро[4.5]декан-7-карбонитрила (50 мг, 0,166 ммоля) в толуоле (0,5 мл) и добавляли DDQ (76 мг, 0,333 ммоля) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 115°C. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в вакууме, остаток очищали с помощью Prep-TLC с использованием DCM/IPA (10:1) и промывали с помощью DCM/IPA (10:1) и получали 3-гидрокси-9,9-диметил-8-оксо-3-(пиридин-3-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (15 мг, 0,050 ммоля, 30,2% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C17H18N2O3 [M+H]+ 299,14 найдено 299,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ - d) δ 8,72 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,87 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,41 (s, 1H), 4,24 (s, 2H), 2,67 (d, J=13,8 Hz, 1H), 2,42 (d, J=13,8 Hz, 1H), 2,30 (d, J=14,4 Hz, 1H), 2,10 (d, J=14,4 Hz, 1H), 1,31 (s, 3H), 1,20 (s, 3H).
Стадия 7Q: PH-EBR2320-270-0Q разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRALPAK IG, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: MtBE--HPLC, подвижная фаза B: EtOH--HPLC; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 5% B до 5% B за 14 мин; длина волны: 254/220 нм; RT1(мин): 5,74; RT2(мин): 11,79. Фракции первого пика (RT1: 5,74 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусную кислоту (PH-EBR2320-270-0QQ) (5,8 мг, 0,014 ммоля, 17,98% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H17N3O2 [M+H]+ 284,14 найдено 284,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,60 (s, 1H), 8,51 (s, 2H), 7,73 (s, 1H), 4,37 (dd, J=9,0, 7,4 Hz, 1H), 4,02 (t, J=8,6 Hz, 1H), 3,88-3,75 (m, 1H), 2,51 (dd, J=8,2, 3,0 Hz, 2H), 2,30-2,05 (m, 2H), 1,29 (s, 3H), 1,22 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ-d) δ -75,83 (s, 3F). Фракции второго пика (RT2: 11,79 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусную кислоту (PH-EBR2320-270-0QH) (16,1 мг, 0,037 ммоля, 48,8% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H17N3O2 [M+H]+ 284,14 найдено 284,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ - d) δ 8,68-8,39 (m, 3H), 7,72 (s, 1H), 4,42-4,32 (m, 1H), 4,02 (t, J=8,6 Hz, 1H), 3,88-3,75 (m, 1H), 2,51 (dd, J=8,1, 2,5 Hz, 2H), 2,30-2,05 (m, 2H), 1,29 (s, 3H), 1,22 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ-d) δ -75,81 (s, 3F).
Стадия 7H: PH-EBR2320-270-0H разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: колонка: CHIRALPAK IG, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: MtBE--HPLC, подвижная фаза B: EtOH--HPLC; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 5% B до 5% B за 10,5 мин; длина волны: 254/220 нм; RT1(мин): 5,47; RT2(мин): 8,25. Фракции первого пика (RT1: 5,47 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусную кислоту (PH-EBR2320-270-0HQ) (19,5 мг, 0,047 ммоля, 26,7% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H17N3O2 [M+H]+ 284,14 найдено 284,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ - d) δ 8,62-8,45 (m, 3H), 7,40 (s, 1H), 4,42-4,28 (m, 1H), 4,08 (t, J=8,7 Hz, 1H), 3,88-3,74 (m, 1H), 2,53 (d, J=8,9 Hz, 2H), 2,35-2,15 (m, 2H), 1,31 (s, 3H), 1,21 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ - d) δ -75,85 (s, 3F). Фракции второго пика (RT2: 8,25 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали 9,9-диметил-8-оксо-3-(пиразин-2-ил)-1-оксаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусную кислоту (PH-EBR2320-270-0HH) (15,7 мг, 0,038 ммоля, 21,53% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H17N3O2 [M+H]+ 284,14 найдено 284,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ - d) δ 8,60-8,47 (m, 3H), 7,39 (s, 1H), 4,36 (dd, J=8,6, 7,6 Hz, 1H), 4,08 (t, J=8,7 Hz, 1H), 3,88-3,74 (m, 1H), 2,53 (d, J=8,9 Hz, 2H), 2,35-2,14 (m, 2H), 1,31 (s, 3H), 1,21 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ - d) δ -75,82 (s, 3F).
Изомер 1
Изомер 3
Изомер 4
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Изомер 1
Изомер 2
Изомер 3
Изомер 1
Изомер 2
Изомер 3
Изомер 4
Изомер 1
Изомер 2
Изомер 3
Изомер 4
Изомер 1
Изомер 2
Изомер 3
Изомер 1
Изомер 2
Изомер 1
Изомер 3
Изомер 4
Изомер 1
Изомер 2
Изомер 3
Изомер 4
Изомер 1
Изомер 2
Изомер 3
Изомер 4
Изомер 1
Изомер 2
Изомер 3
Изомер 4
Изомер 1
Изомер 2
Изомер 3
Изомер 4
Изомер 5
Изомер 6
Изомер 7
Изомер 8
Пример 124, изомер 1: 3'-(гидроксиметил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил
Пример 125, изомер 2: 3'-(гидроксиметил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил
Пример 126, изомер 3: 3'-(гидроксиметил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил
Пример 127, изомер 4: 3'-(гидроксиметил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил
Стадия 1: К раствору 2-(2-бромфенил)оксирана (2 г, 10,05 ммоля) в THF (35 мл) при -78°C добавляли н-бутиллитий (4,82 мл, 12,06 ммоля). Полученную суспензию перемешивали в течение 30 мин. Добавляли раствор 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (1,851 г, 10,05 ммоля) в THF (4 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при -78°C, затем нагревали при 0°C.
Реакцию останавливали с помощью NH4Cl (водным), экстрагировали с помощью EtOAc (×3), промывали рассолом, сушили над Na2SO4, концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от 0 до 60% Et2O/гексаны) и получали (2',2'-диметил-3H диспиро[изобензофуран-1,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан]-3-ил)метанол в виде масла. MS: 285 (M - 17)
Стадия 2: К раствору (2',2'-диметил-3H-диспиро[изобензофуран-1,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан]-3-ил)метанола (2,9 г, 9,53 ммоля) в DCM (23,82 мл) добавляли имидазол (1,297 г, 19,05 ммоля) и трет-бутилдиметилсилилхлорид (1,436 г, 9,53 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи.
Реакционную смесь концентрировали и получали трет-бутил((2',2'-диметил-3H-диспиро[изобензофуран-1,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан]-3-ил)метокси)диметилсилан в виде масла. MS: 418 (M+1).
Стадия 3: Раствор трет-бутил((2',2'-диметил-3H-диспиро[изобензофуран-1,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан]-3-ил)метокси)диметилсилана (3,67 г, 8,77 ммоля) в THF (17,53 мл) и 1 M HCl (водный) (17,53 мл) перемешивали в течение ночи при КТ.
Реакцию останавливали с помощью 1 M HCl (водным), экстрагировали с помощью DCM, концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от 0 до 40% Et2O/гексаны) и получали 3'-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-3,3-диметил-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-4-он в виде масла. MS: 375 (M+1)
Стадия 4: К раствору 2,2,6,6-тетраметилпиперидина (1,352 мл, 8,01 ммоля) в THF (25 мл) при 0°C добавляли н-бутиллитий (3,20 мл, 8,01 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин, затем охлаждали до -78°C, затем добавляли раствор 3'-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-3,3-диметил-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-4-она (1 г, 2,67 ммоля) в THF (5 мл), реакционную смесь перемешивали в течение еще 20 мин. Затем добавляли раствор тозилхлорида (0,580 г, 3,20 ммоля) в THF (7,5 мл). Реакционной смеси давали нагреться до rt и перемешивали в течение ночи.
Реакцию останавливали с помощью 1 M HCl (водным), экстрагировали с помощью EtOAc, промывали рассолом, сушили над Na2SO4, концентрировали, и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от 0 до 50% Et2O/гексаны) и получали 3'-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-3,3-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-5-карбонитрил в виде масла. MS: 400 (M+1).
Стадия 5: К раствору пиридина (0,335 мл, 4,15 ммоля) в DCM (2,87 мл) при 0°C добавляли раствор фенилселенилхлорида (796 мг, 4,15 ммоля) в DCM (2 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при 0°C, затем добавляли раствор 3'-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-3,3-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-5-карбонитрила (830 мг, 2,077 ммоля) в DCM (2 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, затем промывали с помощью 1 M HCl (водным) и обрабатывали пероксидом водорода (2,55 мл, 41,5 ммоля) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин, затем реакцию останавливали насыщенным раствором NaHCO3 (водным), экстрагировали с помощью DCM, промывали водой, сушили над Na2SO4 и концентрировали и получали 3'-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил в виде масла. MS: 398 (M+1).
Стадия 6: К раствору 3'-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрила (826 мг, 2,078 ммоля) в DCM (9,216 мл) добавляли хлористоводородную кислоту (4 M в 1,4-диоксане, 3,64 мл, 14,54 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при КТ.
Реакционную смесь концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от 0 до 70% Et2O/гексаны) и с помощью SFC (MeOH) и получали 3'-(гидроксиметил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил (изомер 1, 1-й элюирующийся): 1H NMR (600 MHz, хлороформ-d) δ 7,45-7,37 (m, 2H), 7,28 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,24 (d, J=1,6 Hz, 1H), 7,11-7,07 (m, 1H), 5,46-5,41 (m, 1H), 4,05-3,95 (m, 1H), 3,85 (dd, J=12,0, 4,6 Hz, 1H), 2,27 (d, J=15,0 Hz, 1H), 2,20 (dd, J=15,0, 1,8 Hz, 1H), 1,45 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 3'-(гидроксиметил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил (изомер 2, 2-й элюирующийся): 1H NMR (600 MHz, хлороформ-d) δ 7,46-7,35 (m, 2H), 7,28 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,24 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,12-7,07 (m, 1H), 5,52-5,35 (m, 1H), 4,01 (dd, J=12,0, 3,2 Hz, 1H), 3,93-3,78 (m, 1H), 2,28 (d, J=15,0 Hz, 1H), 2,20 (dd, J=15,0, 2,0 Hz, 1H), 1,45 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 3'-(гидроксиметил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил (изомер 3, 3-й элюирующийся): 1H NMR (600 MHz, хлороформ-d) δ 7,47-7,38 (m, 2H), 7,30 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,15 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,12 (d, J=7,3 Hz, 1H), 5,54-5,38 (m, 1H), 3,99 (dd, J=11,9, 3,4 Hz, 1H), 3,87 (dd, J=12,0, 5,2 Hz, 1H), 2,53-2,31 (m, 1H), 2,31-2,13 (m, 1H), 1,44 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), и 3'-(гидроксиметил)-5,5-диметил-4-оксо-3'H-спиро[циклогексан-1,1'-изобензофуран]-2-ен-3-карбонитрил (изомер 4, 4-й элюирующийся): 1H NMR (600 MHz, хлороформ-d) δ 7,47-7,37 (m, 2H), 7,30 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,15 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,12 (d, J=7,2 Hz, 1H), 5,44 (dt, J=20,8, 4,2 Hz, 1H), 3,99 (dd, J=12,0, 3,4 Hz, 1H), 3,86 (td, J=11,7, 5,1 Hz, 1H), 2,41 (d, J=15,1 Hz, 1H), 2,24 (dd, J=15,1, 2,1 Hz, 1H), 1,46 (s, 3H), 1,24 (s, 3H).
Пример 128: 1'-(4-метоксибензил)-5,5-диметил-4-оксо-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-2-ен-3-карбонитрил
Стадия 1: К смеси 4,5-дийод-1H-имидазола (25 г, 78 ммоля) и K2CO3 (16,20 г, 117 ммоля) в ацетонитриле (250 мл) добавляли 4-метоксибензилхлорид (15,90 мл, 117 ммоля) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин при комнатной температуре и продолжали перемешивать в течение 16 ч при 80°C. Реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1 ~ 70% этилацетата в петролейном эфире и получали 4,5-дийод-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол (17 г, 38,6 ммоля, 49,4% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C11H10I2N2O [M+H]+ 440,89 найдено 440,95. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,57 (s, 1H), 7,11 (d, J=8,7 Hz, 2H), 6,89 (d, J=8,7 Hz, 2H), 5,08 (s, 2H), 3,81 (s, 3H).
Стадия 2: К раствору 4,5-дийод-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазола (17 г, 38,6 ммоля) в THF (350 мл) добавляли этилмагнийбромид (3 M в THF, 14,17 мл, 42,5 ммоля) при 0°C и раствор перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем раствор DMF (8,97 мл, 116 ммоля) в THF (30 мл) добавляли к смеси при 0°C и смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (50 мл), экстрагировали этилацетатом (200 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1 ~ 70% этилацетата в петролейном эфире и получали 4-йод-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол-5-карбальдегид (9,8 г, 28,6 ммоля, 74,1% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C12H11IN2O2 [M+H]+ 342,99 найдено 343,00. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 9,64 (d, J=1,0 Hz, 1H), 7,57 (d, J=1,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J=8,7 Hz, 2H), 6,88 (d, J=8,7 Hz, 2H), 5,42 (s, 2H), 3,80 (s, 3H).
Стадия 3: К раствору (метоксиметил)трифенилфосфонийхлорида (6,51 г, 19,00 ммоля) в THF (200 мл) добавляли бис(триметилсилил)амид лития (1 M в THF, 19 мл, 19,00 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем раствор 4-йод-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол-5-карбальдегида (5 г, 14,61 ммоля) в THF (20 мл) добавляли к смеси при 0°C и полученную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали с помощью NH4Cl (200 мл), разбавляли этилацетатом (500 мл), промывали рассолом (200 мл×2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Реакционную смесь очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 50% этилацетата в петролейном эфире и получали 4-йод-1-(4-метоксибензил)-5-(2-метоксивинил)-1H-имидазол (3,8 г, 10,06 ммоля, 68,8% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C14H15IN2O2 [M+H]+ 371,02 найдено 371,10. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,42 (s, 0,5H), 7,35 (s, 0,5H), 7,08-6,99 (m, 2H), 6,95 (d, J=12,9 Hz, 0,5H), 6,90-6,81 (m, 2H), 6,18 (d, J=6,7 Hz, 0,5H), 5,28 (d, J=12,8 Hz, 0,5H), 5,02 (s, 1H), 5,00 (s, 1H), 4,97 (d, J=6,7 Hz, 0,5H), 3,800 (s, 1,5H), 3,796 (s, 1,5H), 3,72 (s, 1,5H), 3,64 (s, 1,5H).
Стадия 4: К раствору 4-йод-1-(4-метоксибензил)-5-(2-метоксивинил)-1H-имидазола (3,8 г, 10,26 ммоля) в ацетоне (20 мл) добавляли HBr (48%, 20 мл, 147 ммоля) при комнатной температуре. Полученной смеси давали нагреться до 40°C и перемешивали в течение 16 ч при этой температуре. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли этилацетатом (300 мл), промывали рассолом (100 мл×2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 60% этилацетата в петролейном эфире и получали 2-(4-йод-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол-5-ил)ацетальдегид (2,3 г, 6,46 ммоля, 62,9% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C13H13IN2O2 [M+H]+ 357,00 найдено 357,00. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 9,45 (t, J=1,7 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H), 6,88 (d, J=8,6 Hz, 2H), 5,00 (s, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,59 (d, J=1,6 Hz, 2H).
Стадия 5: К раствору 2-(4-йод-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол-5-ил)ацетальдегида (2,3 г, 6,46 ммоля) в MeOH (25 мл) добавляли NaBH4 (0,366 г, 9,69 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (20 мл), разбавляли этилацетатом (200 мл), промывали рассолом (50 мл×2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0 ~ 10% MeOH в DCM и получали 2-(4-йод-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол-5-ил)этан-1-ол (1,9 г, 4,99 ммоля, 77% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C13H15IN2O2 [M+H]+ 359,02 найдено 359,10. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,42 (s, 1H), 7,04 (d, J=8,5 Hz, 2H), 6,87 (d, J=8,6 Hz, 2H), 5,15 (s, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,71 (t, J=6,3 Hz, 2H), 2,76 (t, J=6,3 Hz, 2H).
Стадия 6: К раствору 2-(4-йод-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол-5-ил)этан-1-ола (330 мг, 0,921 ммоля) в DCM (4 мл) добавляли этилмагнийбромид (3 M в THF, 270 мг, 2,027 ммоля) при 0°C. Смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем 6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он (170 мг, 0,921 ммоля) добавляли при 0°C. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (4 мл), разбавляли этилацетатом (50 мл), промывали рассолом (20 мл×2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Flash при следующих условиях: колонка: Flash C18 40 г; подвижная фаза A: вода, подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 40 мл/мин; градиентный режим: от 2% B до 40% B за 25 мин, детектор: UV 220 нм; RT=20 мин. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 8-(5-(2-гидроксиэтил)-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол-4-ил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол (100 мг, 0,240 ммоля, 26,1% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C23H32N2O5 [M+H]+ 417,23 найдено 417,30. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,46 (s, 1H), 7,06 (d, J=8,6 Hz, 2H), 6,95-6,86 (m, 2H), 5,04 (s, 2H), 3,90-3,83 (m, 4H), 3,73 (s, 3H), 3,52-3,32 (m, 2H), 2,93-2,75 (m, 2H), 2,37-2,13 (m, 1H), 2,10-1,89 (m, 2H), 1,66-1,39 (m, 3H), 1,17 (s, 3H), 0,73 (s, 3H).
Стадия 7: К раствору 8-(5-(2-гидроксиэтил)-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол-4-ил)-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (1 г, 2,401 ммоля) в DCM (10 мл) добавляли TEA (1,00 мл, 7,20 ммоля), DMAP (0,029 г, 0,240 ммоля) и TsCl (0,687 г, 3,60 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (20 мл), разбавляли с помощью DCM (60 мл), промывали рассолом (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Flash при следующих условиях: колонка: Flash C18 120 г; подвижная фаза A: вода, подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 30 мл/мин; градиентный режим: от 2% B до 50% B за 25 мин, детектор: UV 220 нм; RT=20 мин. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-(4-(8-гидрокси-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)-1-(4-метоксибензил)-1H-имидазол-5-ил)этил-4-метилбензолсульфонат (1 г, 1,609 ммоля, 67,0% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C30H38N2O7S [M+H]+ 571,24 найдено 571,25. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,74-7,64 (m, 2H), 7,45 (d, J=2,7 Hz, 1H), 7,36 (dd, J=8,7, 1,0 Hz, 2H), 7,09-7,00 (m, 2H), 6,97-6,86 (m, 2H), 5,04 (s, 2H), 4,14-3,90 (m, 6H), 3,86 (d, J=1,6 Hz, 3H), 3,13 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,46-2,08 (m, 3H), 1,83-1,66 (m, 1H), 1,57 (ddd, J=14,4, 8,5, 3,0 Hz, 2H), 1,31 (s, 3H), 0,89 (s, 3H).
Стадия 8: К раствору 2-(4-(8-гидрокси-6,6-диметил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ил)-1- (4-метоксибензил)-1H-имидазол-5-ил)этил-4-метилбензолсульфоната (1,2 г, 2,103 ммоля) в DMF (13 мл) добавляли NaH (60% в минеральном масле, 0,126 г, 3,15 ммоля) при 0°C и смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали с помощью NH4Cl (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×2). Объединенный органический слой промывали рассолом (30 мл×2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Остаток очищали с помощью RP-Flash при следующих условиях: колонка: Flash C18 120 г; подвижная фаза A: вода, подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 60 мл/мин; градиентный режим: от 2% B до 50% B за 20 мин, детектор: UV 220 нм; RT=20 мин. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 1-(4-метоксибензил)-2',2'-диметил-6,7-дигидро-1H-диспиро[пирано[3,4-d]имидазол-4,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолан] (440 мг, 1,068 ммоля, 50,8% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C23H30N2O4 [M+H]+ 399,22 найдено 399,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,36 (s, 1H), 7,03 (d, J=8,6 Hz, 2H), 6,86 (d, J=8,6 Hz, 2H), 4,93 (s, 2H), 4,03-3,82 (m, 6H), 3,80 (s, 3H), 2,63-2,22 (m, 3H), 2,20-1,98 (m, 2H), 1,81-1,63 (m, 2H), 1,57-1,45 (m, 1H), 1,25 (s, 3H), 0,87 (s, 3H).
Стадия 9: К раствору 1-(4-метоксибензил)-2',2'-диметил-6,7-дигидро-1H-диспиро[пирано[3,4-d]имидазол-4,4'-циклогексан-1',2''-[1,3]диоксолана] (440 мг, 1,104 ммоля) в THF (5 мл) добавляли HCl (2 M в воде, 4 мл, 8,00 ммоля) при 0°C. Полученную смеси давали нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-Flash при следующих условиях: колонка: Flash C18 120 г; подвижная фаза A: вода, подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 60 мл/мин; градиентный режим: от 2% B до 50% B за 20 мин, детектор: UV 220 нм; RT=20 мин. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 1'-(4-метоксибензил)-3,3-диметил-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-4-он (370 мг, 1,044 ммоля, 95% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C21H26N2O3 [M+H]+ 355,19 найдено 355,25. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,42 (s, 1H), 7,06 (d, J=8,6 Hz, 2H), 6,88 (d, J=8,7 Hz, 2H), 4,96 (s, 2H), 3,97 (dd, J=5,9, 5,0 Hz, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,02 (td, J=14,2, 5,7 Hz, 1H), 2,64-2,33 (m, 3H), 2,33-2,20 (m, 2H), 2,20-2,02 (m, 2H), 1,35 (s, 3H), 1,07 (s, 3H).
Стадия 10: К раствору 1'-(4-метоксибензил)-3,3-диметил-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-4-она (340 мг, 0,959 ммоля) в толуоле (5 мл) добавляли этилформиат (0,859 мл, 10,55 ммоля) и метоксид натрия (30% в MeOH, 1,90 г, 10,55 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали с помощью NH4Cl (10 мл), разбавляли этилацетатом (50 мл), промывали рассолом (20 мл×2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и получали неочищенный 5-(гидроксиметилен)-1'-(4-метоксибензил)-3,3-диметил-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-4-он (366,78 мг, 0,959 ммоля) в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C22H26N2O4 [M+H]+ 383,19 найдено 383,25.
Стадия 11: К раствору 5-(гидроксиметилен)-1'-(4-метоксибензил)-3,3-диметил-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-4-она (367 мг, 0,960 ммоля) в EtOH (4 мл) и воде (4 мл) добавляли гидроксиламингидрохлорид (80 мг, 1,151 ммоля) и ацетат натрия (157 мг, 1,919 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (5 мл), разбавляли этилацетатом (30 мл), промывали рассолом (10 мл×2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, и концентрировали в вакууме. Полученный раствор очищали с помощью RP-Flash при следующих условиях: колонка: Flash C18 40 г; подвижная фаза A: вода, подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 35 мл/мин; градиентный режим: от 2% B до 45% B за 20 мин, детектор: UV 220 нм; RT=20 мин. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали оксим 1'-(4-метоксибензил)-3,3-диметил-4-оксо-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-5-карбальдегида (320 мг, 0,805 ммоля, 84% выход) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C22H27N3O4 [M+H]+ 398,20 найдено 398,25. 1H NMR (300 MHz, метанол-d4) δ 7,61 (s, 1H), 7,50 (d, J=6,7 Hz, 1H), 7,15 (d, J=8,5 Hz, 2H), 6,93 (d, J=8,5 Hz, 2H), 5,10 (s, 2H), 4,02 (t, J=5,5 Hz, 2H), 3,95-3,83 (m, 1H), 3,80 (d, J=1,2 Hz, 3H), 2,64-2,09 (m, 6H), 1,42 (s, 3H), 1,07 (s, 3H).
Стадия 12: К раствору оксима 1'-(4-метоксибензил)-3,3-диметил-4-оксо-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-5-карбальдегида (244 мг, 0,614 ммоля) в ацетонитриле (1 мл) добавляли трифторметансульфонат висмута(III) (403 мг, 0,614 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 4 ч при 80°C. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью Prep-TLC с CH2Cl2/MeOH (15 : 1) и получали 1'-(4-метоксибензил)-7,7-диметил-6,6',7,7'-тетрагидро-1'H,4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,4'-пирано[3,4-d]имидазол] (200 мг, 0,527 ммоля, 86% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C22H25N3O3 [M+H]+ 380,19 найдено 380,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,04 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,09 (d, J=8,5 Hz, 2H), 6,90 (d, J=8,6 Hz, 2H), 4,99 (s, 2H), 3,92-3,78 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,16 (d, J=16,3 Hz, 1H), 2,70 (d, J=16,5 Hz, 1H), 2,63-2,38 (m, 2H), 2,28 (d, J=14,6 Hz, 1H), 2,10 (d, J=15,2 Hz, 1H), 1,45 (s, 3H), 1,37 (s, 3H).
Стадия 13: К раствору метанолята натрия (1424 мг, 7,91 ммоля) в MeOH (0,5 мл) добавляли раствор 1'-(4-метоксибензил)-7,7-диметил-6,6',7,7'-тетрагидро-1'H,4H-спиро[бензо[d] изоксазол-5,4'-пирано[3,4-d]имидазола] (200 мг, 0,527 ммоля) в Et2O (2 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (5 мл), разбавляли этилацетатом (20 мл), промывали рассолом (6 мл×2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью Prep-TLC с CH2Cl2/MeOH (20 : 1) и получали 1'-(4-метоксибензил)-3,3-диметил-4-оксо-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-5-карбонитрил (140 мг, 0,343 ммоля, 65,1% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C22H25N3O3 [M+H]+ 380,19 найдено 380,25. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,55 (s, 1H), 7,07 (d, J=8,3 Hz, 2H), 6,90 (d, J=8,2 Hz, 2H), 4,99 (s, 2H), 4,36 (d, J=13,7 Hz, 1H), 3,98 (s, 2H), 3,81 (d, J=1,7 Hz, 3H), 2,86-1,92 (m, 6H), 1,38 (s, 3H), 1,14 (s, 3H).
Стадия 14: К раствору пиридина (58,4 мг, 0,738 ммоля) в DCM (0,5 мл) добавляли фенилселенилхлорид (141 мг, 0,738 ммоля) в DCM (0,5 мл) при 0°C. Реакционную смесь дегазировали кислородом. Затем добавляли раствор 1'-(4-метоксибензил)-3,3-диметил-4-оксо-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-5-карбонитрила (140 мг, 0,369 ммоля) в DCM (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 20 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали насыщенным раствором NH4Cl (2 мл), экстрагировали этилацетатом (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (6 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью Prep-TLC с CH2Cl2/MeOH (15 : 1) и получали 1'-(4-метоксибензил)-5,5-диметил-4-оксо-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-2-ен-3-карбонитрил (40 мг, 0,106 ммоля, 28,7% выход) в виде желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью препаративной HPLC при следующих условиях: колонка: XBridge Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: Вода (10 мМ ацетат аммония), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 40% B до 70% B за 4,5 мин, 70% B; длина волны: 254/210 нм; RT1 (мин): 4,35; количество прогонов: 0. Фракцию объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 1'-(4-метоксибензил)-5,5-диметил-4-оксо-6',7'-дигидро-1'H-спиро[циклогексан-1,4'-пирано[3,4-d]имидазол]-2-ен-3-карбонитрил (5,7 мг, 0,015 ммоля, 37,2% выход) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C22H23N3O3 [M+H]+ 378,17 найдено 378,20. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,51 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,10 (d, J=8,2 Hz, 2H), 6,93 (d, J=8,2 Hz, 2H), 5,02 (s, 2H), 4,11-3,90 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 2,65-2,54 (m, 3H), 2,17 (d, J=15,1 Hz, 1H), 1,39 (s, 3H), 1,24 (s, 3H).
Пример 129, энантиомер 1: 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадец-13-ен-13-карбонитрил
Пример 130, энантиомер 2: 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадец-13-ен-13-карбонитрил
Стадия 1: К раствору 2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадекан-12-она (230 мг, 0,812 ммоля) в THF (4 мл) по каплям добавляли LiHMDS (1 M раствор в THF, 1,623 мл, 1,623 ммоля) при -70°C в атмосфере N2. Полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 40 мин. Затем добавляли раствор 4-метилбензолсульфонилцианида (221 мг, 1,217 ммоля) в THF (1,5 мл). После перемешивания при -70°C в течение 30 мин смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Затем реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (15 мл), экстрагировали этилацетатом (15 мл×3). Объединенную органическую фазу промывали рассолом (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (петролейный эфир : EtOAc=8 : 1) и получали 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадекан-13-карбонитрил (130 мг, 0,421 ммоля, 51,9% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C20H24N2O [M+H]+ 309,19, найдено 309,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,41-7,16 (m, 2H), 6,83-6,66 (m, 1H), 6,64-6,51 (m, 2H), 4,05-3,84 (m, 3H), 3,67-3,27 (m, 2H), 2,57-2,36 (m, 2H), 2,31-1,50 (m, 12H).
Стадия 2: К раствору 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадекан-13-карбонитрила (100 мг, 0,324 ммоля) в THF (3,5 мл) добавляли диацетоксипалладий (58,2 мг, 0,259 ммоля) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь (три порции объединяли, ~ 0,486 ммоля исходного вещества) очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой при следующих условиях: колонка: C18 гелевая колонка, 40 г, 20-45 мкм, 100 A; подвижная фаза A: вода, подвижная фаза B: MeCN; градиентный режим: 0% B выдерживание в течение 5 мин, до 95% B за 30 мин, 95% B выдерживание в течение 5 мин; скорость потока: 40 мл/мин; RT=25,5 мин; детектор: UV 254 и 210 нм. Фракции, содержащие продукт, собирали и выпаривали и получали 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадец-13-ен-13-карбонитрил (62 мг, 0,202 ммоля, 41,6% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C20H22N2O [M+H]+ 307,17, найдено 307,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d): δ 7,52 (s, 1H), 7,35-7,23 (m, 2H), 6,80 (m, 1H), 6,66-6,58 (m, 2H), 3,73-3,29 (m, 4H), 2,40-1,38 (m, 12H).
Рацемический 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадец-13-ен-13-карбонитрил (62 мг, 0,202 ммоля) разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRAL ART Cellulose-SB, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: гексаны, подвижная фаза B: EtOH; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 50% B до 50% B за 20 мин; детектор: UV 220/254 нм; RT1:13,879 мин; RT2:18,324 мин;
Фракции первого пика (RT1: 13,879 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали быстрее элюирующийся энантиомер (12 мг, 0,039 ммоля, 19,35% выход) в виде желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью препаративной HPLC при следующих условиях: колонка: SunFire Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм, 10 нм; подвижная фаза A: Вода (0,05% TFA ), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 20% B до 50% B за 6 мин; детектор: UV 210/254 нм. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадец-13-ен-13-карбонитрил - энантиомер 1: 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадец-13-ен-13-карбонитрил (3,4 мг, 0,011 ммоля, 28,3% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C20H22N2O [M+MeCN+H]+ 348,17, найдено 348,30. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7,91 (s, 1H), 7,24-7,11 (m, 2H), 6,69-6,48 (m, 3H), 3,63-3,43 (m, 2H), 3,42-3,20 (m, 2H), 2,29-2,18 (m, 1H), 2,17-2,09 (m, 3H), 2,06-1,95 (m, 2H), 1,71-1,55 (m, 4H), 1,53-1,42 (m, 2H).
Фракции второго пика (RT2: 18,324 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали медленнее элюирующийся энантиомер (15 мг, 0,049 ммоля, 24,19% выход) в виде желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью препаративной HPLC при следующих условиях: колонка: SunFire Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм, 10 нм; подвижная фаза A: Вода (0,05% TFA ), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 40% B до 65% B за 6 мин; детектор: UV 210/254 нм. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадец-13-ен-13-карбонитрил - энантиомер 2: 12-оксо-2-фенил-2-азадиспиро[4.1.47.35]тетрадец-13-ен-13-карбонитрил (4,8 мг, 0,016 ммоля, 32,0% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C20H22N2O [M+MeCN+H]+ 348,17, найдено 348,30. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7,91 (s, 1H), 7,24-7,11 (m, 2H), 6,66-6,51 (m, 3H), 3,57-3,20 (m, 4H), 2,29-2,18 (m, 1H), 2,17-2,09 (m, 3H), 2,08-1,97 (m, 2H), 1,74-1,55 (m, 4H), 1,53-1,37 (m, 2H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Изомер 2
Пример 137, изомер 1: 8,8-диметил-2-(метил(фенил)амино)-7-оксоспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил
Пример 138, изомер 2: 8,8-диметил-2-(метил(фенил)амино)-7-оксоспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил
Стадия 1: К раствору N,7,7-триметил-N-фенил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,1'-циклобутан]-3'-амина (70 мг, 0,236 ммоля) в Et2O (1 мл) добавляли метилат натрия (30% в метиловом спирте, 638 мг, 3,54 ммоля). Полученную смесь перемешивали при 30°C в течение 2 ч. Реакцию останавливали путем добавления водного раствора NH4Cl (10 мл), разбавляли этилацетатом (3×30 мл), и органический слой промывали водой (60 мл) и рассолом (60 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0-30% этилацетата в петролейном эфире и получали 8,8-диметил-2-(метил(фенил)амино)-7-оксоспиро[3.5]нонан-6-карбонитрил (60 мг, 0,192 ммоля, 81% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H24N2O [M+H]+ 297,19 найдено 297,30. 1H NMR (300 MHz, метанол-d4) δ 7,27-7,14 (m, 2H), 6,92-6,74 (m, 3H), 3,88 (tq, J=15,0, 7,9 Hz, 1H), 2,82-2,72 (m, 3H), 2,72-2,59 (m, 1H), 2,54-1,68 (m, 8H), 1,32-1,01 (m, 6H).
Стадия 2: К раствору 8,8-диметил-2-(метил(фенил)амино)-7-оксоспиро[3.5]нонан-6-карбонитрила (60 мг, 0,202 ммоля) в THF (0,6 мл) добавляли ацетат палладия(II) (36,32 мг, 0,162 ммоля). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли этилацетатом (30 мл), фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью RP-flash хроматографии при элюировании с помощью 0-50% ацетонитрила в воде и получали 8,8-диметил-2-(метил(фенил)амино)-7-оксоспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил (30 мг, 0,102 ммоля, 50,3% выход) в виде бесцветного масла. MS ESI рассчитано для C19H22N2O [M+H]+ 295,17 найдено 295,25.
Смесь цис/транс продуктов разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRAL ART Cellulose-SB, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: гексан--HPLC, подвижная фаза B: EtOH--HPLC; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 30% B до 30% B за 19,5 мин; длина волны: 254/220 нм; RT1: 11,37 мин; RT2: 15,43 мин; растворитель образца: EtOH--HPLC; инжектируемый объем: 1 мл; количество прогонов: 2.
Фракции, содержащие быстрее элюирующийся изомер (RT=11,37 мин), объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали изомер 1: 8,8-диметил-2-(метил(фенил)амино)-7-оксоспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил (4 мг, 0,014 ммоля, 6,71% выход) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H22N2O [M+H]+ 295,17 найдено 295,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,79 (s, 1H), 7,39-7,18 (m, 2H), 6,99-6,72 (m, 3H), 4,09 (t, J=7,8 Hz, 1H), 2,82 (s, 3H), 2,64 (dd, J=5,7 Hz, 2H), 2,42-2,26 (m, 2H), 2,00 (s, 2H), 1,13 (s, 6H).
Фракции, содержащие медленнее элюирующийся изомер (RT=15,43 мин), объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали изомер 2: 8,8-диметил-2-(метил(фенил)амино)-7-оксоспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил (14,5 мг, 0,049 ммоля, 24,3% выход) в виде почти белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H22N2O [M+H]+ 295,17 найдено 295,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,53 (d, J=12 Hz, 1H), 7,37-7,15 (m, 2H), 6,91-6,74 (m, 3H), 4,00-4,07 (m, 1H), 2,83 (s, 3H), 2,51 (t, J=10,8 Hz, 2H), 2,57-2,47 (m, 2H), 2,43-2,30 (m, 2H), 1,18 (s, 6H).
Изомер 1
Пример 140 - энантиомер 1: 4-ацетил-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Пример 141 - энантиомер 2: 4-ацетил-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Стадия 1: Триэтиламин (0,78 мл, 5,6 ммоля) и ацетилхлорид (0,20 мл, 2,8 ммоля) добавляли к раствору 10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил.HCl (310 мг, 1,41 ммоля) в DCM (10 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию останавливали водным раствором HCl (1 M, 5 мл) и экстрагировали с помощью DCM (3×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/H2O с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 4-ацетил-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил. Рацемическую смесь очищали с помощью хиральной SFC (IA колонка, 20%/80% MeOH/CO2 с 0,1% NH4OH в качестве модификатора) и получали два продукта в виде твердых веществ:
4-ацетил-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (пример 36 - энантиомер 1). MS: 263 (M+H). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7,59-7,50 (m, 1H), 4,15-4,01 (m, 1H), 3,81-3,66 (m, 2H), 3,50-3,36 (m, 2H), 3,29-3,18 (m, 1H), 2,19-2,10 (m, 3H), 2,07-2,01 (m, 1H), 1,91-1,79 (m, 1H), 1,33-1,20 (m, 6H).
4-ацетил-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (пример 37 - энантиомер 2). MS: 263 (M+H). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7,59-7,49 (m, 1H), 4,15-4,01 (m, 1H), 3,81-3,66 (m, 2H), 3,50-3,35 (m, 2H), 3,27-3,18 (m, 1H), 2,19-2,10 (m, 3H), 2,07-2,04 (m, 1H), 1,91-1,79 (m, 1H), 1,33-1,20 (m, 6H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Общие процедуры для таблицы 13:
Методика A: EDCI, пиридин, 50°C, 16 ч
В сосуд объемом 8 мл помещали 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (10,2 мг, 50 мкмоля), карбоновую кислоту (75 мкмоля), EDCI (14,4 мг, 75 мкмоля) и пиридин (500 мкл). Сосуд закрывали и встряхивали при 50°C в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции, реакционную смесь концентрировали с помощью Speedvac. Полученный остаток растворяли в MeCN и H2O и очищали с помощью препаративной HPLC и получали чистый конечный продукт.
Методика B: T3P, диоксан, TEA, 80°C, 16 ч
В сосуд объемом 8 мл помещали 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (10,2 мг, 50 мкмоля) и карбоновую кислоту (75,0 мкмоля) добавляли диоксан (500 мкл), триэтиламин (20,2 мг, 200 мкмоля) и 1-пропанфосфоновый ангидрид (23,9 мг, 75 мкмоля, 50 мас.% в EtOAc). Сосуд закрывали и встряхивали при 80°C в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакционную смесь концентрировали и экстрагировали с помощью DCM (1 мл×3) и водой (1 мл). Органические слои сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали с помощью Speedvac и получали неочищенные промежуточные продукты. Полученный остаток растворяли в MeCN и H2O и очищали с помощью препаративной HPLC и получали чистый конечный продукт.
Общая процедура для таблицы 14
В реакционные сосуды объемом 8 мл добавляли 10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (15,4 мг, 70 мкмоля), мономеры (105 мкмоля), 2-гидроксипиридин-N-оксид (11,6 мг, 105 мкмоля), N, N-Диизопропилэтиламин (27,1 мг, 210 мкмоля) и EDC гидрохлорид (20,1 мг, 105 мкмоля) в DCM (700 мкл) в атмосфере N2 и получали раствор. Сосуды закрывали и встряхивали при 65°C в течение 16 ч. После завершения реакций реакционные смеси концентрировали с помощью Speedvac. Остаток растворяли в ACN/H2O и очищали с помощью препаративной HPLC и получали чистый конечный продукт.
Общая процедура для таблицы 15
При перемешивании к раствору 8-циано-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-4-ийхлорида (15 мг, 1,0 экв., 0,059 ммоля) и триэтиламина (3 экв.) в DCM добавляли карбоновую кислоту (2,0 экв., 0,117 ммоля) и 50% раствор 1-пропанфосфонового ангидрида в EtOAc (5 экв.). Полученную смесь перемешивали при r.t. в течение 3 ч. Если проверка с помощью LCMS обнаруживала оставшееся исходно вещество, добавляли дополнительную аликвоту триэтиламина (3 экв.) и реакционную смесь перемешивали в течение еще 1 ч. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли в DCM и органическую фазу промывали с помощью NaHCO3, водой и рассолом. Органическую фазу сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении.
Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии при элюировании в градиентном режиме MTBE/гептан от 0% до 100% или MeOH/DCM от 0% до 5% и получали искомый продукт с выходом 37%-50%.
Пример 536: 8,8-диметил-7-оксо-2-(пиримидин-4-карбонил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил
К раствору пиримидин-4-карбоновой кислоты (9,8 мг, 0,079 ммоля), HATU (32 мг, 0,083 ммоля) и DIEA (34,5 мкл, 0,198 ммоля) в DMF (0,2 мл) при комнатной температуре добавляли раствор 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил.HCl (15,0 мг, 0,066 ммоля) в DMF (0,13 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь фильтровали и очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/вода с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 8,8-диметил-7-оксо-2-(пиримидин-4-карбонил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 297 (M+H). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,27 (s, 1H), 9,03 (d, J=5,0 Hz, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,95 (d, J=5,0 Hz, 1H), 4,81 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,68 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,30 (d, J=10,6 Hz, 1H), 4,14 (d, J=10,6 Hz, 1H), 2,26 (s, 2H), 1,05 (s, 3H), 1,04 (s, 3H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Получали из промежуточного продукта 5
Получали из промежуточного продукта 5
Получали из промежуточного продукта 5
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 565: 8,8-диметил-2-(3-метилбензоил)-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил
К раствору 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил.HCl (15 мг, 0,066 ммоля) и 3-метилбензойной кислоты (11 мг, 0,079 ммоля) в DCM (0,66 мл) при комнатной температуре добавляли триэтиламин (37 мкл, 0,26 ммоля), затем 1-пропанфосфоновый ангидрид (79 мкл, 0,13 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем нейтрализовывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1 мл). Затем смесь экстрагировали с помощью DCM (3×1 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/вода с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 8,8-диметил-2-(3-метилбензоил)-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 309 (M+H). 1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 8,35 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,43 (d, J=6,1 Hz, 1H), 7,39-7,29 (m, 2H), 4,51 (d, J=8,5 Hz, 1H), 4,35 (d, J=8,2 Hz, 1H), 4,23 (d, J=9,9 Hz, 1H), 4,09 (d, J=9,7 Hz, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,24 (s, 2H), 1,07 (s, 3H), 1,03 (s, 3H).
Общие процедуры для таблицы 17:
Методика A: EDCI, пиридин, 50°C, 16 ч
В сосуд объемом 8 мл помещали 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил (11,4 мг, 60 мкмоля), карбоновую кислоту (90 мкмоля), EDCI (17,3 мг, 90 мкмоля) и пиридин (600 мкл). Сосуд закрывали и встряхивали при 50°C в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции, реакционную смесь концентрировали с помощью Speedvac. Полученный остаток растворяли в MeCN и H2O и очищали с помощью препаративной HPLC и получали чистый конечный продукт.
Методика B: T3P, DCM, TEA,100°C, 16 ч
В сосуд объемом 8 мл помещали 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил (11,4 мг, 60 мкмоля) и карбоновую кислоту (90,0 мкмоля), добавляли DCM (500 мкл), триэтиламин (20,2 мг, 200 мкмоля) и 1-пропанфосфоновый ангидрид (60 мкл, 50,0 мкмоля). Сосуд закрывали и встряхивали при 100°C в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Реакционную смесь концентрировали и экстрагировали с помощью DCM (1 мл×3) и водой (1 мл). Органические слои сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали с помощью Speedvac и получали неочищенные промежуточные продукты. Полученный остаток растворяли в MeCN и H2O и очищали с помощью препаративной HPLC и получали чистый конечный продукт.
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 8
Получали из промежуточного продукта 8
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Общие процедуры для таблицы 18:
Методика A: BopCl, NMM, DMA, MeCN, 60°C, 16 ч
В сосуд объемом 8 мл помещали (R)-3,5,5-триметил-3-(метиламино)-6-оксоциклогекс-1-ен-1-карбонитрил (9,61 мг, 50,0 мкмоля), карбоновую кислоту (50 мкмоля), DMA (250 мкл) и MeCN (250 мкл). Затем реакционной смеси добавляли бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфинхлорид (19,1 мг, 75,0 мкмоля) и NMM (15,2 мг, 150 мкмоля). Сосуд закрывали и встряхивали при 60°C в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции, реакционную смесь концентрировали с помощью Speedvac. Полученный остаток растворяли в MeCN и H2O и очищали с помощью препаративной HPLC и получали чистый конечный продукт.
Методика B: Mukaiyama, DIEA, THF, 80°C, 16 ч
В сосуд объемом 8 мл помещали (R)-3,5,5-триметил-3-(метиламино)-6-оксоциклогекс-1-ен-1-карбонитрил (9,61 мг, 50,0 мкмоля), карбоновую кислоту (50 мкмоля) и THF (500 мкл). Затем реакционной смеси добавляли 2-хлор-1-метилпиридиниййодид (12,8 мг, 50,0 мкмоля) и N, N-диизопропилэтиламин (6,46 мг, 50,0 мкмоля). Сосуд закрывали и встряхивали при 80°C в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции, реакционную смесь концентрировали с помощью Speedvac. Полученный остаток растворяли в MeCN и H2O и очищали с помощью препаративной HPLC и получали чистый конечный продукт.
Пример 789: 7-оксо-1-оксаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил
Стадия 1: К LDA (2 M в THF, 1,2 мл, 2,4 ммоля) добавляли THF (1,5 мл) и смесь охлаждали до -78°C в атмосфере N2. К этой смеси добавляли раствор 1-оксаспиро[3.5]нонан-7-она (280 мг, 2,0 ммоля) в THF (1,5 мл). Полученную смесь перемешивали при -78°C в течение 20 мин, затем переносили в шприц и добавляли к смеси 4-метилбензолсульфонилцианида (724 мг, 3,99 ммоля) в THF (1,5 мл) при -78°C в атмосфере N2. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 45 мин. Реакцию останавливали с помощью NH3.H2O (5 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические слои промывали 1 н. водным раствором HCl и затем рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали 7-оксо-1-оксаспиро[3.5]нонан-6-карбонитрил в виде масла. MS: 166 (M+H). 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d): δ 4,76-4,48 (m, 2H), 4,30-4,29 (m, 1H), 2,83-2,59 (m, 1H), 2,57-2,40 (m, 4H), 2,30-2,02 (m, 2H), 1,97-1,84 (m, 1H).
Стадия 2: К раствору 7-оксо-1-оксаспиро[3.5]нонан-6-карбонитрила (80 мг, 0,48 ммоля) в DMF (2 мл) добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (49,1 мг, 0,172 ммоля) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и затем добавляли пиридин (80 мг, 1,0 ммоля). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (10 мл) и смесь промывали 1 н. водным раствором HCl (5 мл) и водой (5 мл). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% EtOAc/гексан) и затем дополнительно очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (5-40% ACN/вода с 5 мМ муравьиной кислотой в качестве модификатора) и получали 7-оксо-1-оксаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 164 (M+H). 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d): δ 7,86 (s, 1H), 4,75-4,59 (m, 2H), 2,88-2,82 (m, 2H), 2,80-2,69 (m, 1H), 2,67-2,38 (m, 3H).
Пример 791 - энантиомер 1: 9,9-диметил-8-оксо-2-фенил-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Пример 792 - энантиомер 2: 9,9-диметил-8-оксо-2-фенил-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
В сосуд, содержащий 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил.HCl (131 мг, 0,544 ммоля), RuPhos Pd G2 (42 мг, 0,054 ммоля) и 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диизопропоксибифенил (25 мг, 0,054 ммоля), в атмосфере азота добавляли диоксан (2,7 мл). Добавляли бромбензол (69 мкл, 0,65 ммоля) и трет-бутоксид натрия (2,0 M в THF, 544 мкл, 1,09 ммоля) и смесь перемешивали при 60°C в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли с помощью DCM, фильтровали через целит® и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% Et2O/гексаны) и получали 9,9-диметил-8-оксо-2-фенил-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил. Рацемическую смесь очищали с помощью хиральной SFC (OJ-H колонка, 40%/60% MeOH/CO2 с 0,1% NH4OH в качестве модификатора) и получали два продукта в виде твердых веществ:
9,9-диметил-8-оксо-2-фенил-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (пример 78 - энантиомер 1). MS: 281 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7,94 (s, 1H), 7,18 (t, J=7,9 Hz, 2H), 6,64 (t, J=7,3 Hz, 1H), 6,57 (d, J=7,9 Hz, 2H), 3,56-3,50 (m, 2H), 3,40-3,35 (m, 1H), 3,31-3,28 (m, 1H), 2,31-2,26 (m, 1H), 2,17-2,11 (m, 1H), 2,06 (s, 2H), 1,16 (s, 6H).
9,9-диметил-8-оксо-2-фенил-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (пример 79 - энантиомер 2). MS: 281 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7,94 (s, 1H), 7,18 (t, J=7,9 Hz, 2H), 6,64 (t, J=7,2 Hz, 1H), 6,57 (d, J=8,0 Hz, 2H), 3,56-3,49 (m, 2H), 3,40-3,36 (m, 1H), 3,31-3,29 (m, 1H), 2,31-2,26 (m, 1H), 2,18-2,11 (m, 1H), 2,06 (s, 2H), 1,16 (s, 6H).
Пример 793, энантиомер 1: 9,9-диметил-8-оксо-2-(пиридин-3-ил)-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Пример 794, энантиомер 2: 9,9-диметил-8-оксо-2-(пиридин-3-ил)-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Стадия 1: В сосуд, содержащий 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил.HCl (промежуточный продукт $, 20 мг, 0,083 ммоля) и рацемический-BINAP-Pd-G3 (8,2 мг, 8,3 мкмоля), добавляли THF (665 мкл), 3-бромпиридин (9,6 мкл, 0,10 ммоля) и трет-бутоксид натрия (2,0 M в THF, 166 мкл, 0,332 ммоля). Смесь перемешивали в течение ночи при 80°C. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, реакцию останавливали водой и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/H2O с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали соль с TFA 9,9-диметил-8-оксо-2-(пиридин-3-ил)-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрила в виде твердого вещества. MS: 282 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,11 (d, J=2,7 Hz, 1H), 8,08 (d, J=5,2 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,72 (dd, J=8,7, 5,3 Hz, 1H), 7,56 (d, J=6,9 Hz, 1H), 3,72 (d, J=10,6 Hz, 1H), 3,65-3,60 (m, 1H), 3,56-3,51 (m, 1H), 3,43 (d, J=10,6 Hz, 1H), 2,38-2,33 (m, 1H), 2,23-2,16 (m, 1H), 2,08 (q, J=14,2 Hz, 2H), 1,17 (d, J=2,6 Hz, 6H). Синтезировали, как описано в примере выше, из промежуточного продукта 5 и получали соль с TFA 9,9-диметил-8-оксо-2-(пиридин-3-ил)-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 282 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,12 (d, J=2,7 Hz, 1H), 8,09 (d, J=5,2 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,74 (dd, J=8,7, 5,3 Hz, 1H), 7,59 (dd, J=8,7, 2,2 Hz, 1H), 3,72 (d, J=10,6 Hz, 1H), 3,66-3,60 (m, 1H), 3,56-3,52 (m, 1H), 3,43 (d, J=10,6 Hz, 1H), 2,38-2,32 (m, 1H), 2,23-2,15 (m, 1H), 2,08 (q, J=14,2 Hz, 2H), 1,17 (d, J=2,7 Hz, 6H).
Пример 795: 2-(6-(1,1-дифторэтил)пиридин-2-ил)-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Стадия 1: В сосуды объемом 8 мл помещали 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (10,2 мг, 50 мкмоля) и 2-бром-6-(1,1-дифторэтил)пиридин (11,5 мг, 50 мкмоля), затем добавляли XPhos Pd G3 (2,11 мг, 2,5 мкмоля), t-BuONa (14,7 мг, 150 мкмоля) в диоксане (1000 мкл). Сосуды закрывали и встряхивали при 120°C в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. Затем реакционную смесь концентрировали с помощью Speedvac. Остаток растворяли в ACN/H2O и очищали с помощью препаративной HPLC (прибор EJ; методика: TFA; колонка: Phenomenex XbridgeC18 100*30 мм*5 мкм; Условия: вода (0,1%TFA)-CAN; в начале B 51; в конце B 81 градиентный режим, время (мин): 8,8; 100% B время выдерживания (мин): 2; скорость потока(мл/мин): 20; количество инжектирований 1) и получали 2-(6-(1,1-дифторэтил)пиридин-2-ил)-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (MS (ESI) [M+H]+ m/z 346,0, 2,92 мг.
Пример 796: 8,8-диметил-7-оксо-2-(пиридин-3-ил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил
В сосуд помещали 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил.HCl (22,7 мг, 0,10 ммоля) и SPhos Pd G4 (7,9 мг, 0,01 ммоля) и переносили в перчаточную камеру. Добавляли THF (0,8 мл), 3-бромпиридин (12 мкл, 0,12 ммоля) и трет-бутоксид натрия (2 M в THF, 0,2 мл, 0,4 ммоля). Сосуд герметизировали, извлекали из перчаточной камеры и помещали в предварительно нагретый круговой блок при 80°C. Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и реакцию останавливали водой (1,0 мл). Затем смесь экстрагировали с помощью EtOAc (3×1 мл), объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/вода с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 8,8-диметил-7-оксо-2-(пиридин-3-ил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 268 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,36 (s, 1H), 8,00-7,95 (m, 1H), 7,87 (d, J=2,8 Hz, 1H), 7,20 (dd, J=8,2, 4,6 Hz, 1H), 6,89 (ddd, J=8,3, 2,8, 1,2 Hz, 1H), 4,12 (d, J=7,4 Hz, 2H), 3,93 (d, J=7,4 Hz, 2H), 2,25 (s, 2H), 1,08 (s, 6H).
Пример 803: 4-(2-метоксифенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
В сосуде для микроволновой печи, снабженный магнитной мешалкой, и в инертной атмосфере к раствору 8-циано-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-4-ийхлорида, промежуточный продукт 7 (80 мг, 0,312 ммоля), в сухом диоксане (3,0 мл) добавляли карбонат калия (43 мг, 0,312 ммоля) и полученную смесь перемешивали при r.t. в течение 1 ч. Затем добавляли еще аликвоту карбоната калия (60 мг, 0,44 ммоля), 1-бром-2-метоксибензол (46,6 мкл, 0,374 ммоля) и XPhos Pd G3 (26,4 мг, 0,031 ммоля). Полученную реакционную смесь герметизировали и перемешивали при 80°C в течение ночи в инертной атмосфере. Реакционной смеси давали охладиться до r.t., фильтровали через целит и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-50% MTBE/гептан) и получали 4-(2-метоксифенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (3% IY) в виде темного твердого вещества. MS: 327 [M+H]. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,50 (d, J=1,3 Hz, 1H), 7,09-7,03 (m, 1H), 6,94 (d, J=4,3 Hz, 2H), 6,89 (d, J=8,0 Hz, 1H), 4,05-3,99 (m, 1H), 3,88-3,85 (частично перекрывающиеся сигналы, 4H), 3,24-3,18 (m, 2H), 3,13-3,07 (m, 1H), 2,75 (d, J=12,5 Hz, 1H), 2,05 (dd, J=14,7, J'=1,6 Hz, 1H), 1,80 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,35 (s, 3H), 1,19 (s, 3H).
Получали из промежуточного продукта 8
Получали из промежуточного продукта 8 Получали из промежуточного продукта 7
Пример 807, энантиомер 1: 2-(2-метоксипиридин-3-ил)-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Пример 808, энантиомер 2: 2-(2-метоксипиридин-3-ил)-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Стадия 1: К раствору 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]гидрохлорида (300 мг, 1,236 ммоля) и 3-бром-2-метоксипиридина (349 мг, 1,854 ммоля) и трет-бутоксида натрия (386 мг, 4,02 ммоля) в 2-MeTHF (6 мл) добавляли XantPhos Pd G4 (71,4 мг, 0,074 ммоля) при 25°C. Полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 16 ч. После завершения реакции смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1~10% MeOH в DCM и получали 2-(2-метоксипиридин-3-ил)-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-7-карбонитрил (164 мг, 0,523 ммоля, 42,3% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C18H23N3O2 [M+H]+ 314,18 найдено 314,20. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,70 (s, 1H), 7,05-6,70 (m, 2H), 4,11-4,82 (m, 4H), 3,74-3,16 (m, 4H), 2,71-2,52 (m, 1H), 2,29-1,78 (m, 5H), 1,35-1,18 (m, 6H).
Стадия 2: К раствору фенилселенилхлорида (113 мг, 0,589 ммоля) в DCM (1 мл) добавляли пиридин (46,6 мг, 0,589 ммоля) в DCM (1 мл) при 0°C и раствор перемешивали в течение 20 мин. Затем добавляли раствор 2-(2-метоксипиридин-3-ил)-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-7-карбонитрила (123 мг, 0,392 ммоля) в DCM (1 мл) и смесь перемешивали в течение 3 ч при 0°C. Затем добавляли пероксид водорода (30% в воде, 89 мг, 0,785 ммоля) и смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C. Реакцию останавливали насыщенным раствором Na2S2O3 (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой при следующих условиях: колонка C18 сферический 20-35 мкм; подвижная фаза: 0%-50% ацетонитрила в воде, UV 254 нм. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-(2-метоксипиридин-3-ил)-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (45 мг, 0,145 ммоля, 36,8% выход) в виде желтого масла. MS ESI рассчитано для C18H21N3O2 [M+H]+ 312,16 найдено 312,20. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,72 (d, J=4,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 6,92-6,86 (m, 1H), 6,86-6,79 (m, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,76-3,65 (m, 1H), 3,62 (d, J=10,3 Hz, 1H), 3,39-3,31 (m, 1H), 3,27 (d, J=10,3 Hz, 1H), 2,28-2,19 (m, 1H), 2,19-2,02 (m, 2H), 2,02-1,94 (m, 1H), 1,25 (s, 3H), 1,23 (s, 3H).
Альтернативная стадия 2: К раствору 4-(6-(2-гидроксиэтил)пиридин-3-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрила (300 мг, 0,874 ммоля) в толуоле (3 мл) добавляли DDQ (297 мг, 1,310 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 105°C. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash при следующих условиях: колонка: AQ-C18 OBD колонка, 40 г; подвижная фаза A: вода (0,1% TFA), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока:40 мл/мин; градиентный режим: 5%-60% за 35 мин. Детектор: UV 254 и 210 нм; Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали и получали 4-(6-(2-гидроксиэтил)пиридин-3-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (30 мг, 0,088 ммоля, 10,06% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H23N3O3 [M+H]+ 342,17 найдено 342,30
Стадия 3: Смесь разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRAL ART Cellulose-SB, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: гексаны, подвижная фаза B: IPA; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 30% B до 30% B за 17,5 мин; длина волны: 220/254 нм; RT1(мин): 12,73; RT2(мин): 15,64; растворитель образца: EtOH; инжектируемый объем: 1,5 мл; количество прогонов: 5, 2-(2-метоксипиридин-3-ил)-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (13,9 мг, 0,045 ммоля, 30,9% выход) получали при 12,73 мин в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C18H21N3O2 [M+H]+ 312,16 найдено 312,10. 1H-NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,76 (dd, J=5,0, 1,6 Hz, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,00-6,91 (m, 1H), 6,91-6,81 (m, 1H), 4,04 (s, 3H), 3,81-3,68 (m, 1H), 3,65 (d, J=10,4 Hz, 1H), 3,45-3,31 (m, 1H), 3,32 (d, J=10,4 Hz, 1H), 2,35-2,06 (m, 3H), 2,06-1,95 (m, 1H), 1,27 (s, 3H), 1,25 (s, 3H).
2-(2-метоксипиридин-3-ил)-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (14,1 мг, 0,045 ммоля, 31,3% выход) получали при 15,64 мин в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C18H21N3O2 [M+H]+ 312,16 найдено 312,15. 1H-NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,75 (dd, J=4,9, 1,7 Hz, 1H), 7,64 (s, 1H), 6,98-6,90 (m, 1H), 6,89-6,81 (m, 1H), 4,02 (s, 3H), 3,80-3,68 (m, 1H), 3,64 (d, J=10,3 Hz, 1H), 3,43-3,33 (m, 1H), 3,30 (d, J=10,3 Hz, 1H), 2,31-2,08 (m, 3H), 2,00 (dd, J=14,6, 1,0 Hz, 1H), 1,27 (s, 3H), 1,25 (s, 3H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1Энантиомер 2
Энантиомер 1Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 844: 10,10-диметил-9-оксо-4-(пиримидин-4-ил)-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Пример 845, энантиомер 1: 10,10-диметил-9-оксо-4-(пиримидин-4-ил)-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Пример 846, энантиомер 2: 10,10-диметил-9-оксо-4-(пиримидин-4-ил)-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Стадия 1: DIPEA (0,506 мл, 2,90 ммоля) добавляли к раствору 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолин]гидрохлорида (250 мг, 0,966 ммоля) и 4-хлорпиримидингидрохлорида (219 мг, 1,449 ммоля) в MeCN (8 мл) при 25°C в атмосфере N2. Полученный раствор перемешивали при 82°C в течение 18 ч. Раствор реакционной смеси концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью MeOH/DCM (0-10%) и получали 7,7-диметил-4'-(пиримидин-4-ил)-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо [d]изоксазол-5,2'-морфолин] (220 мг, 0,732 ммоля, 76% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для: C16H20N4O2 [M+H]+ 301,16 найдено 301,30. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,63 (s, 1H), 8,26 (d, J=6,3 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 6,51 (d, J=6,3 Hz, 1H), 3,87-3,70 (m, 4H), 3,66-3,52 (m, 2H), 2,79 (dd, J=16,0, 1,8 Hz, 1H), 2,54 (d, J=16,0 Hz, 1H), 2,26 (dd, J=14,5, 1,8 Hz, 1H), 1,68 (d, J=14,5 Hz, 1H), 1,44 (s, 3H), 1,38 (s, 3H).
Стадия 2, при необходимости: Раствор метанолята натрия в MeOH (30%, 1,8 г, 9,99 ммоля) в MeOH (1 мл) добавляли к смеси 7,7-диметил-4'-(пиримидин-4-ил)-6,7-дигидро-4H -спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолина] (200 мг, 0,666 ммоля) с Et2O (2 мл) при 0°C в атмосфере N2. Раствор перемешивали при 25°C в течение 2 ч. Значение pH раствора устанавливали равным 6-7 с помощью AcOH. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке с силикагелем при элюировании с помощью MeOH/DCM (0-10%) и получали 10,10-диметил-9-оксо-4-(пиримидин-4-ил)-1-окса -4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрил (180 мг, 0,599 ммоля, 90% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для: C16H20N4O2 [M+H]+ 301,16 найдено 301,30. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,63 (s, 1H), 8,29 (d, J=6,1 Hz, 1H), 6,54 (d, J=6,2 Hz, 1H), 4,22 (dd, J=13,7, 4,7 Hz, 1H), 4,04-3,84 (m, 2H), 3,82-3,74 (m, 1H), 3,71 (d, J=13,3 Hz, 1H), 3,68-3,60 (m, 1H), 3,57 (d, J=13,4 Hz, 1H), 2,69 (dt, J=13,7, 4,3 Hz, 1H), 2,27 (dd, J=14,9, 3,8 Hz, 1H), 2,07 (d, J=13,7 Hz, 1H), 1,60 (d, J=14,9 Hz, 1H), 1,36 (s, 3H), 1,15 (s, 3H).
Стадия 3: Раствор фенилселенилхлорида (230 мг, 1,199 ммоля) в DCM (1 мл) добавляли к раствору пиридина (0,097 мл, 1,199 ммоля) в DCM (1 мл) при 0°C в атмосфере N2. Раствор перемешивали при 0°C в течение 0,5 ч. Затем добавляли раствор 10,10-диметил-9-оксо-4-(пиримидин-4-ил)-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрила (180 мг, 0,599 ммоля) в DCM (0,5 мл). Раствор реакционной смеси перемешивали при 0°C в течение 6 ч. Раствор реакционной смеси концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке RP при следующих условиях: C18 колонка, 40 г; подвижная фаза A: Вода, подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 30 мл/мин; градиентный режим: от 28% B до 35% B за 4,3 мин; 254 нм; RT1: 6,8 мин. Объединенные фракции концентрировали при пониженном давлении и получали продукт (80 мг). Продукт очищали с помощью препаративной HPLC при следующих условиях: колонка: X Bridge Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: Вода (10 ммоль/л NH4HCO3), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 30% B до 50% B за 5 мин; длина волны: 254/210 нм; RT1: 4,5 мин. Объединенные фракции концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 10,10-диметил-9-оксо-4-(пиримидин-4-ил)-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (20 мг, 0,067 ммоля, 11% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для: C16H18N4O2 [M+H]+ 299,14 найдено 299,05. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,67-8,66 (m, 1H), 8,35 (d, J=6,2 Hz, 1H), 7,60 (d, J=1,8 Hz, 1H), 6,57 (dd, J=6,2, 1,3 Hz, 1H), 4,21 (d, J=13,7 Hz, 1H), 3,98-3,80 (m, 3H), 3,47-3,34 (m, 2H), 2,15 (dd, J=14,7, 1,9 Hz, 1H), 1,95 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,36 (s, 3H), 1,25 (s, 3H).
Стадия 4: Смесь разделяли с помощью Prep-CHIRAL-HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRALPAK IE, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: гексаны (0,5% 2M NH3-MeOH), подвижная фаза B: IPA; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 45% B до 45% B за 15 мин; длина волны: 220/254 нм; RT1 (мин): 9,579; RT2 (мин): 12,098; растворитель образца: EtOH; инжектируемый объем: 0,5 мл; количество прогонов: 13.
Фракции первого пика (RT1: 9,579 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 32 мг продукта, который дополнительно очищали с помощью препаративной HPLC при следующих условиях: колонка: X Bridge Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: Вода (10 ммоль/л NH4HCO3), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 20% B до 60% B за 4,5 мин; длина волны: 254/210 нм; RT1(мин): 4,35. Фракции объединяли, концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 10,10-диметил-9-оксо-4-(пиримидин-4-ил)-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (16,1 мг, 0,054 ммоля, 16% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для: C16H18N4O2 [M+H]+ 299,14 найдено 299,05. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,66 (s, 1H), 8,34 (d, J=6,3 Hz, 1H), 7,60 (t, J=8,7 Hz, 1H), 6,57 (dd, J=6,3, 1,2 Hz, 1H), 4,22 (d, J=13,8 Hz, 1H), 3,97-3,82 (m, 3H), 3,45-3,36 (m, 2H), 2,15 (dd, J=14,7, 1,8 Hz, 1H), 1,95 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,35 (s, 3H). Фракции второго пика (RT2: 12,098 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 30,8 мг продукта, который дополнительно очищали с помощью препаративной HPLC при следующих условиях: колонка: XBridge Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: Вода (10 ммоль/л NH4HCO3), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 25% B до 45% B за 4,5 мин, длина волны: 254/210 нм; RT1(мин): 4,35. Фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 10,10-диметил-9-оксо-4-(пиримидин-4-ил)-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (18,3 мг, 0,061 ммоля, 18% выход) в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для: C16H18N4O2 [M+H]+ 299,14 найдено 299,05. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,64 (d, J=21,6 Hz, 1H), 8,34 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,60 (d, J=1,6 Hz, 1H), 6,56 (d, J=6,0 Hz, 1H), 4,19 (d, J=13,8 Hz, 1H), 3,96-3,84 (m, 3H), 3,44-3,36 (m, 2H), 2,14 (dd, J=14,8, 1,2 Hz, 1H), 1,95 (d, J=14,8 Hz, 1H),1,58 (s, 3H), 1,33 (s, 3H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 852, энантиомер 1: 10,10-диметил-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Пример 853, энантиомер 2: 10,10-диметил-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Стадия 1: Аргон пропускали через смесь 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолин]гидрохлорида (100 мг, 0,386 ммоля), 4-йод-1-метил-1H-пиразола (161 мг, 0,773 ммоля) и трет-бутоксида натрия (111 мг, 1,159 ммоля) в 1,4-диоксане (1 мл) в течение 10 мин. Затем добавляли tBuXphos Pd G3 (61,4 мг, 0,077 ммоля). Полученную смесь перемешивали при 30°C в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (проявляли смесью этилацетат/этилацетат 1:1) и получали 10,10-диметил-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрил (60 мг, 0,198 ммоля, 51,3% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H22N4O2 [M+H]+ 303,17 найдено 303,20. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,17 (d, J=0,9 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 4,22 (dd, J=13,7, 4,7 Hz, 1H), 3,97 (ddd, J=11,9, 6,2, 4,0 Hz, 1H), 3,88 (ddd, J=11,9, 5,7, 4,0 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 2,97-2,84 (m, 3H), 2,72 (d, J=11,5 Hz, 1H), 2,65 (d, J=11,5 Hz, 1H), 2,47 (dd, J=15,0, 3,8 Hz, 1H), 1,98 (t, J=13,8 Hz, 1H), 1,51 (d, J=14,9 Hz, 1H), 1,36 (s, 3H), 1,14 (s, 3H).
Стадия 2: К раствору 10,10-диметил-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрила (60 мг, 0,198 ммоля) в THF (0,5 мл) добавляли ацетат палладия(II) (44,5 мг, 0,198 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 16 ч при 30°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash при следующих условиях: колонка: AQ-C18 40 г, 25 мкм, подвижная фаза A: вода (0,1% TFA), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 40 мл/мин; градиентный режим: 0-50% за 30 мин; Детектор: UV 254 и 210 нм; Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 10,10-диметил-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (25 мг, 0,083 ммоля, 41,9% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H20N4O2 [M+H]+ 301,16 найдено 301,10.
Стадия 3: Смесь разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRAL ART Cellulose-SB, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: гексаны, подвижная фаза B: EtOH; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 30% B до 30% B за 20 мин; длина волны: 220/254 нм; RT1(мин): 15,62; RT2(мин): 18,54; растворитель образца: EtOH; инжектируемый объем: 0,3 мл; количество прогонов: 10,10-диметил-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (3 мг, 9,99 мкмоля, 12,0% выход) получали при 15,62 мин в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H20N4O2 [M+H]+ 301,16 найдено 301,10. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,13 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 3,96 (td, J=11,3, 10,4, 3,0 Hz, 1H), 3,91-3,80 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,13 (d, J=11,7 Hz, 1H), 2,99-2,71 (m, 3H), 2,09 (dd, J=14,5, 1,9 Hz, 1H), 1,85 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,34 (s, 3H), 1,20 (s, 3H). 10,10-диметил-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (4 мг, 0,013 ммоля, 16,0% выход) получали при 18,54 мин в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H20N4O2 [M+H]+ 301,16 найдено 301,10. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,15 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 3,99 (td, J=11,3, 10,4, 2,9 Hz, 1H), 3,93-3,81 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,15 (d, J=11,7 Hz, 1H), 3,00-2,72 (m, 3H), 2,11 (dd, J=14,7, 1,9 Hz, 1H), 1,87 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,37 (s, 3H), 1,22 (s, 3H).
Пример 854, энантиомер 1: 4-(2-метоксипиримидин-5-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат
Пример 855, энантиомер 2: 4-(2-метоксипиримидин-5-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат
Стадия 1: К раствору 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолин]гидрохлорида (100 мг, 0,386 ммоля) в THF (0,5 мл) добавляли 5-йод-2-метоксипиримидин (137 мг, 0,580 ммоля), NaOtBu (130 мг, 1,353 ммоля) и Pd-PEPPSI-IHeptCl (18,82 мг, 0,019 ммоля) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 3 ч при 40°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 20% - 65% градиентного режима этилацетат в петролейном эфире в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 4-(2-метоксипиримидин-5-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрил (46 мг, 0,128 ммоля, 33,1% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C17H22N4O3 [M+H]+ 331,18 найдено 331,10.
Стадия 2: PhSeCl (53,3 мг, 0,278 ммоля) по каплям добавляли к раствору пиридина (0,023 мл, 0,278 ммоля) в DCM (1 мл). Полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 30 мин в атмосфере азота. Раствор 4-(2-метоксипиримидин-5-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрила (46 мг, 0,139 ммоля) в DCM (1,000 мл) добавляли в указанную выше смесь и смесь перемешивали при 0°C в атмосфере азота в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью RP-Flash (колонка: C18 40 г колонка; подвижная фаза A: вода (0,1% TFA), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 50 мл/мин; градиентный режим: от 2% B до 20% B за 5 мин, Градиентный режим: от 20% B до 50% B за 25 мин, детектор: UV 210 нм; RT=30 мин. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали и получали 4-(2-метоксипиримидин-5-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат (30 мг, 0,064 ммоля, 46,3% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C17H20N4O3 [M+H]+ 329,16 найдено 329,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,35 (s, 2H), 8,08 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 4,04-3,93 (m, 2H), 3,36 (d, J=11,7 Hz, 1H), 3,19-2,94 (m, 3H), 2,23-2,11 (m, 1H), 1,98-1,84(m, 1H), 1,39 (s, 3H), 1,24 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ-d) δ-75,84 (s, 3F).
Стадия 3: Продукт разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: Chiral ART Cellulose-SA, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: гексаны, подвижная фаза B: EtOH; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 50% B до 50% B за 21 мин; длина волны: 254/220 нм; RT1(мин): 8,32; RT2(мин): 15,4. Фракции первого пика (RT1: 8,32 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали 4-(2-метоксипиримидин-5-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат (7,9 мг, 0,017 ммоля, 24,49% выход) в виде оранжевого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C17H20N4O3 [M+H]+ 329,16 найдено 329,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,26 (s, 2H), 8,12 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,09-3,90 (m, 5H), 3,38-3,24 (m, 1H), 3,16-2,96 (m, 3H), 2,22-2,07 (m, 1H), 1,96-1,85 (m, 1H), 1,39 (s, 3H), 1,24 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ-d) δ-75,84 (s, 3F). Фракции второго пика (RT2: 15,4 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали 4-(2-метоксипиримидин-5-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат (7,7 мг, 0,016 ммоля, 23,87% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C17H20N4O3 [M+H]+ 329,16 найдено 329,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,26 (s, 2H), 8,12 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,07-3,91 (m, 5H), 3,36-3,26 (m, 1H), 3,18-2,87 (m, 3H), 2,21-2,10 (m, 1H), 1,96-1,85 (m, 1H), 1,39 (s, 3H), 1,24 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ-d) δ-75,83 (s, 3F).
Пример 856, энантиомер 2: 10,10-диметил-4-(5-метилпиридин-3-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат
Стадия 1: К раствору 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолин]гидрохлорида (200 мг, 0,773 ммоля) в толуоле (5 мл) добавляли 3-бром-5-метилпиридин (199 мг, 1,159 ммоля), ацетат палладия(II) (17,35 мг, 0,077 ммоля), три-трет-бутилфосфонийтетрафторборат (44,9 мг, 0,155 ммоля) и NaOtBu (353 мг, 3,67 ммоля) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 2 ч при 100°C. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 0% - 2% градиентного режима DCM в MeOH в качестве элюента. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 10,10-диметил-4-(5-метилпиридин-3-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрил (150 мг, 0,455 ммоля, 58,8% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C18H23N3O2 [M+H]+ 314,19 найдено 314,10.
Стадия 2: Фенилселенилхлорид (183 мг, 0,957 ммоля) по каплям добавляли к раствору пиридина (0,077 мл, 0,957 ммоля) в DCM (4 мл). Полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 30 мин в атмосфере азота. Раствор 10,10-диметил-4-(5-метилпиридин-3-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрила (150 мг, 0,479 ммоля) в DCM (4 мл) добавляли в указанную выше смесь и смесь перемешивали при 0°C в течение 16 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью RP-Flash (колонка: C18 40 г колонка; подвижная фаза A: вода (0,01% TFA), подвижная фаза B: ACN; скорость потока: 50 мл/мин; градиентный режим: от 2% B до 20% B за 20 мин, детектор: UV 210 нм; RT=19 мин. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали и получали 10,10-диметил-4-(5-метилпиридин-3-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат (80 мг, 0,173 ммоля, 36,1% выход) в виде светло-желтого масла. MS ESI рассчитано для C18H21N3O2 [M+H]+ 312,17 найдено 312,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,52 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 4,07-3,99 (m, 2H), 3,68 (d, J=11,8 Hz, 1H), 3,58 (d, J=12,4 Hz, 1H), 3,31-3,25 (m, 1H), 3,18 (d, J=12,0 Hz, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,16 (d, J=14,4 Hz, 1H), 2,06-1,95 (m, 1H), 1,38 (s, 3H), 1,24 (s, 3H). 19F NMR (376 MHz, хлороформ-d) δ -75,82 (s, 3F).
Стадия 3: Продукт разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRAL ART Cellulose-SC, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: гексаны (0,1% FA), подвижная фаза B: EtOH; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 30% B до 30% B за 27 мин; длина волны: 220/254 нм; RT1 (мин): 19,09; RT2 (мин): 23,17. Фракции второго пика (RT2: 23,17 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, затем сушили вымораживанием и получали 10,10-диметил-4-(5-метилпиридин-3-ил)-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат (4,7 мг, 5,37 мкмоля, 2,86% выход) в виде темно-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C18H21N3O2 [M+H]+ 312,17 найдено 312,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,20 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 4,08-3,90 (m, 2H), 3,51 (d, J=12,2 Hz, 1H), 3,34 (d, J=12,6 Hz, 1H), 3,20-2,97 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,17 (d, J=14,6 Hz, 1H), 1,93 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,39 (s, 3H), 1,25 (s, 3H). 19F NMR (282 MHz, хлороформ-d) δ -75,67 (s, 3F).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 859, энантиомер 1: (4-(2,6-диметилфенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусная кислота
Стадия 1: К раствору 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолин]гидрохлорида (800 мг, 3,09 ммоля) в THF (15 мл) и воде (15 мл) добавляли K2CO3 (427 мг, 3,09 ммоля). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакцию останавливали с помощью H2O (30 мл), экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (насыщенным, 2×50 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме и получали 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолин] (640 мг, 2,88 ммоля, 93% выход) (неочищенный) в виде белого твердого вещества. К смеси 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолина] (640 мг, 2,88 ммоля) с ацетонитрилом (12 мл) при КТ добавляли (2,6-диметилфенил)бороновую кислоту (648 мг, 4,32 ммоля), пиридин (1139 мг, 14,40 ммоля) и диацетоксимедь (1046 мг, 5,76 ммоля), полученную смесь перемешивали в течение 3 ч при 80°C. Реакцию останавливали с помощью H2O (50 мл), экстрагировали этилацетатом (3×80 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (насыщенным, 2×80 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали с помощью препаративной ТСХ (проявляли с помощью EA/PE 1/5) и получали 4'-(2,6-диметилфенил)-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолин] (20 мг, 0,058 ммоля, 2,022% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C20H26N2O2 [M+H]+ 327,21 найдено 327,15.
Стадия 2: К раствору 4'-(2,6-диметилфенил)-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолина] (20 мг, 0,061 ммоля) в Et2O (0,6 мл) и MeOH (0,2 мл) добавляли метанолят натрия (30% в MeOH, 66,2 мг, 1,225 ммоля). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Этот органический раствор промывали 5% водным раствором HCl (3 мл×3). Объединенные водные слои экстрагировали этилацетатом (5 мл×2). Объединенные органические слои после этого промывали насыщенным водным раствором NaHCO3 (10 мл) и рассолом (10 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме и получали 4-(2,6-диметилфенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрил (20,00 мг, 0,061 ммоля, 100% выход) в виде кристаллического твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки: MS ESI рассчитано для C20H26N2O2 [M+H]+ 327,21 найдено 327,25.
Стадия 3: К смеси 4-(2,6-диметилфенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрила (14 мг, 0,043 ммоля) с THF (0,7 мл) при КТ добавляли диацетоксипалладий (9,63 мг, 0,043 ммоля), полученную смесь перемешивали в течение 3 ч при КТ. Твердое вещество отфильтровывали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC при следующих условиях: колонка: SunFire Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: Вода (0,05% TFA), подвижная фаза B: ACN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 70% B до 90% B за 5 мин, 90% B; длина волны: 254 нм; RT1(мин): 4,98 и получали 4-(2,6-диметилфенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (4-(2,6-диметилфенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил-2,2,2-трифторуксусную кислоту (2,2 мг, 4,92 мкмоля, 11,47% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C20H24N2O2 [M+H]+ 325,19 найдено 325,30. 1H NMR (300 MHz, хлороформ - d) δ 8,11 (d, J=1,6 Hz, 1H), 6,63 (s, 1H), 6,55 (s, 2H), 3,99-3,78 (m, 2H), 3,44-3,38 (m, 1H), 3,25 (d, J=12,5 Hz, 1H), 3,06-2,86 (m, 2H), 2,30 (s, 6H), 2,19-2,04 (m, 1H), 1,88 (d, J=14,6 Hz, 1H), 1,36 (s, 3H), 1,21 (s, 3H). 19F NMR (376 MHz, хлороформ - d) δ -75,70 (s, 3F).
Пример 860, энантиомер 1: 4-(3-метоксифенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Пример 861, энантиомер 2: 4-(3-метоксифенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Стадия 1: К раствору 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,2'-морфолин]гидрохлорид (150 мг, 0,580 ммоля) в 2-MeTHF (1,5 мл) добавляли 1-йод-3-метоксибензол (204 мг, 0,870 ммоля) и трет-бутоксид натрия (265 мг, 2,75 ммоля) и перемешивали в течение 10 мин дегазированный азотом. Затем добавляли XantPhos Pd G4 (55,8 мг, 0,058 ммоля) и смесь перемешивали в течение 16 ч при 60°C. Раствор реакционной смеси концентрировали при пониженном давлении, остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% - 40% этилацетата в петролейном эфире и получали 4-(3-метоксифенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрил (110 мг, 0,335 ммоля, 57,8% выход) в виде желтоватого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H24N2O3 [M+H]+ 329,19 найдено 329,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,25 (d, J=8,0 Hz, 1H), 6,67-6,56 (m, 3H), 4,27 (dd, J=13,7, 4,8 Hz, 1H), 4,16-4,08 (m, 1H), 4,03-3,95 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,32-3,22 (m, 2H), 3,05 (d, J=12,1 Hz, 1H), 3,00-2,90 (m, 2H), 2,67 (d, J=15,3 Hz, 1H), 2,05 (t, J=13,7 Hz, 1H), 1,58-1,55 (m, 1H), 1,40 (s, 3H), 1,18 (s, 3H).
Стадия 2: К раствору 4-(3-метоксифенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрила (110 мг, 0,335 ммоля) в сухом THF (1,5 мл) добавляли ацетат палладия(II) (60,2 мг, 0,268 ммоля) при комнатной температуре в атмосфере азота, раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой при следующих условиях: колонка C18 сферический 20-35 мкм; подвижная фаза: ацетонитрил в воде 0-55%, UV 254 нм. Собранные фракции объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали 4-(3-метоксифенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (16 мг, 0,049 ммоля, 14,64% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H22N2O3 [M+H] + 327,17 найдено 327,20.
Необязательная стадия 3: К раствору 4-(6-(бензилокси)пиридин-3-ил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрила (140 мг, 0,347 ммоля) в DCM (2 мл) добавляли трихлорборан (1 M в DCM, 0,520 мл, 0,520 ммоля) при 0°C в атмосфере N2. Полученную смесь перемешивали при 40°C в течение 3 ч. Реакцию останавливали с помощью MeOH (0,5 мл). Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Смесь разбавляли этилацетатом (10 мл). Объединенный органический слой промывали водным раствором бикарбоната натрия (5 мл×3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0% ~ 10% MeOH в DCM и получали 10,10-диметил-9-оксо-4-(6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (40 мг, 0,115 ммоля, 33,1% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C17H19N3O3 [M+H] + 314,14 найдено 314,15.
Стадия 4: Смесь разделяли с помощью Prep-Chiral-HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRALPAK IG, 2×25 см, 5 мкм; подвижная фаза A: гексаны (0,1% FA), подвижная фаза B: EtOH; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 20% B до 20% B за 18,5 мин; длина волны: 254/220 нм; RT1 (мин): 12,39; RT2 (мин): 15,60; растворитель образца: EtOH; инжектируемый объем: 0,8 мл; количество прогонов: 5. 4-(3-метоксифенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (9,0 мг, 0,028 ммоля, 31,0% выход) получали при 12,39 мин в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H22N2O3 [M+H] + 327,17 найдено 327,10. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,09 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,24 (t, J=8,2 Hz, 1H), 6,54 (dd, J=8,2, 2,3 Hz, 2H), 6,46 (t, J=2,3 Hz, 1H), 4,02-3,87 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,45 (d, J=12,0 Hz, 1H), 3,28 (d, J=12,7, 1H), 3,09-3,00 (m, 1H), 2,96 (d, J=12,7 Hz, 1H), 2,14 (dd, J=14,7, 1,9 Hz, 1H), 1,90 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,38 (s, 3H), 1,24 (s, 3H).
4-(3-метоксифенил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (9,1 мг, 0,028 ммоля, 31,4% выход) получали при 15,60 мин в виде белого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C19H22N2O3 [M+H] + 327,17 найдено 327,15. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,09 (d, J=1,9 Hz, 1H), 7,24 (t, J=8,1 Hz, 1H), 6,54 (dd, J=8,2, 2,4 Hz, 2H), 6,46 (t, J=2,4 Hz, 1H), 4,01-3,86 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,45 (d, J=12,1 Hz, 1H), 3,27 (d, J=12,7 Hz, 1H), 3,08-3,00 (m, 1H), 2,96 (d, J=12,7 Hz, 1H), 2,14 (dd, J=14,8, 1,9 Hz, 1H), 1,89 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,38 (s, 3H), 1,24 (s, 3H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 882 - энантиомер 1: 1',5,5-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил
Пример 883 - энантиомер 2: 1',5,5-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил
Стадия 1: К раствору спиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-диона (0,50 г, 2,3 ммоля) в tBuOH (12 мл) добавляли трет-бутоксид калия (0,91 г, 8,1 ммоля) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К смеси добавляли метилйодид (0,45 мл, 7,2 ммоля) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (25 мл) и смесь экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-30% EtOAc/гексаны) и получали 1',3,3-триметилспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-дион в виде твердого вещества. MS: 258 (M+H).
Стадия 2: К раствору 1',3,3-триметилспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-диона (277 мг, 1,08 ммоля) в THF (1,2 мл) при -78°C по каплям добавляли раствор LDA (2 M THF, 1,2 мл, 2,4 ммоля). Смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин, затем по каплям добавляли раствор 4-метилбензолсульфонилцианид (195 мг, 1,08 ммоля) в THF (2,4 мл). Смесь перемешивали в течение еще 45 мин при -78°C. Реакцию останавливали с помощью 2 M NH4OH (0,5 мл) и затем нагревали до комнатной температуры. Затем смесь нейтрализовывали с помощью 1 M HCl до pH ~7 и экстрагировали с помощью EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-30% EtOAc/гексаны) и получали 1',3,3-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-5-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 283 (M+H).
Стадия 3: К раствору 1',3,3-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-5-карбонитрила (210 мг, 0,744 ммоля) в THF (2,5 мл) при комнатной температуре добавляли ацетат палладия(II) (167 мг, 0,744 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем реакцию останавливали водой (2 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-40% EtOAc/гексаны) и затем повторно очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/вода с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 1',5,5-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил. Рацемическую смесь очищали с помощью хиральной SFC (OJ-H колонка, 10%/90% MeOH/CO2 с 0,1% NH4OH в качестве модификатора) и получали два продукта в виде твердых веществ:
1',5,5-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (пример 81 - энантиомер 1): MS: 281 (M+H). 1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 7,65 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,45 (d, J=6,8 Hz, 1H), 7,43-7,36 (m, 1H), 7,16-7,04 (m, 2H), 3,18 (s, 3H), 2,37 (d, J=14,8 Hz, 1H), 2,21 (dd, J=14,8, 1,1 Hz, 1H), 1,39 (s, 3H), 1,21 (s, 3H).
1',5,5-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (пример 82 - энантиомер 2): в виде твердого вещества. MS: 281 (M+H). 1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 7,65 (d, J=1,1 Hz, 1H), 7,45 (d, J=6,8 Hz, 1H), 7,42-7,36 (m, 1H), 7,16-7,04 (m, 2H), 3,18 (s, 3H), 2,37 (d, J=14,8 Hz, 1H), 2,21 (dd, J=14,8, 1,1 Hz, 1H), 1,39 (s, 3H), 1,21 (s, 3H).
Альтернативная стадия 3: К раствору пиридина (30 мкл, 0,38 ммоля) в DCM (0,3 мл) при 0°C добавляли раствор фенилселенилхлорида (72 мг, 0,38 ммоля) в DCM (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при 0°C, затем добавляли раствор 1,9,9-триметил-2,8-диоксо-1-азаспиро[4.5]декан-7-карбонитрила (44 мг, 0,188 ммоля) в DCM (0,9 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C и затем промывали 1 M водным раствором HCl (0,8 мл), затем водой (1,6 мл). Фазы разделяли и органическую фазу обрабатывали пероксидом водорода (30% в воде, 384 мкл, 3,8 ммоля) при 0°C. Реакционную смесь энергично перемешивали в течение 15 мин, затем фазы разделяли и органическую фазу концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% Et2O/гексаны) и получали 1,9,9-триметил-2,8-диоксо-1-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил. Рацемическую смесь очищали с помощью хиральной SFC (AS-H колонка, 20%/80% MeOH/CO2) и получали два продукта в виде твердых веществ:
1,9,9-триметил-2,8-диоксо-1-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил (энантиомер 1): MS: 233 (M +1). 1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 7,88 (d, J=1,9 Hz, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,41-2,34 (m, 3H), 2,28-2,20 (m, 2H), 1,88 (dd, J=13,9, 2,0 Hz, 1H), 1,21 (s, 3H), 1,13 (s, 3H).
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 888: 4-(циклопропилметил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (энантиомер 2)
К раствору (хлорметил)циклопропана (16,20 мкл, 0,175 ммоля) в DMF (584 мкл) добавляли йодид натрия (31,5 мг, 0,210 ммоля) и полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 2 ч. Затем реакционной смеси давали охладиться до r.t. и добавляли 8-циано-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-4-ийхлорид, промежуточный продукт 8 (30 мг, 0,117 ммоля), и N, N-диизопропилэтиламин (50,9 мкл, 0,292 ммоля). Полученную реакционную смесь перемешивали при r.t. в течение 72 ч. После проверки с помощью LCMS добавляли дополнительные аликвоты йодида натрия (31,5 мг, 0,210 ммоля), добавляли N, N-диизопропилэтиламин (50,9 мкл, 0,292 ммоля) и (хлорметил)циклопропан (16,20 мкл, 0,175 ммоля) и реакционную смесь перемешивали при 45°C в течение ночи. Реакционной смеси давали охладиться до r.t., разбавляли с помощью H2O (5 мл) и органическую фазу экстрагировали с помощью DCM (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали с помощью H2O (2×10 мл), сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-5% MeOH/DCM) и получали 4-(циклопропилметил)-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (21% IY) в виде оранжевого твердого вещества. MS=275 [M+H]. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,12 (s, 1H), 3,86-3,81 (m, 1H), 3,75-3,70 (m, 1H), 2,82 (d, J=11,0 Hz, 1H), 2,66 (d, J=11,8 Hz, 1H), 2,35-2,23 (частично перекрывающиеся сигналы, 5H), 2,01 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,80 (d, J=14,7 Hz, 1H), 1,31 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 0,53 (m, 2H), 0,11 (m, 2H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Из промежуточного продукта 8
Из промежуточного продукта 8
Пример 893: 8,8-диметил-7-оксо-2-(пиридин-3-илметил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил
К раствору 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил.HCl (15 мг, 0,066 ммоля) в DCM (0,22 мл) добавляли DIEA (40 мкл, 0,23 ммоля), затем 3-(бромметил)пиридин (13 мг, 0,079 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем реакцию останавливали водой (1,0 мл). Смесь экстрагировали с помощью DCM (3×1 мл) и объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/вода с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 8,8-диметил-7-оксо-2-(пиридин-3-илметил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил в виде соли с TFA. MS: 282 (M+H). 1H NMR (499 MHz, CDCl3) δ 8,58-8,46 (m, 2H), 8,00 (s, 1H), 7,66 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,30 (dd, J=7,7, 4,9 Hz, 1H), 3,66 (s, 2H), 3,49 (d, J=7,3 Hz, 2H), 3,21 (d, J=6,9 Hz, 2H), 2,06 (s, 2H), 1,10 (s, 6H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Получали из промежуточного продукта 5
Получали из промежуточного продукта 5
Получали из промежуточного продукта 6
Получали из промежуточного продукта 6
Пример 903: 8,8-диметил-7-оксо-2-((3-(трифторметил)пиразин-2-ил)метил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил
К 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил.HCl (22,7 мг, 0,1 ммоля) и 2-(бромметил)-3-(трифторметил)пиразину (36,2 мг, 0,150 ммоля), растворенным в DMF (500 мкл), добавляли Et3N (28 мкл, 0,2 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали, и очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/H2O с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 8,8-диметил-7-оксо-2-((3-(трифторметил)пиразин-2-ил)метил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил, TFA в виде твердого вещества. MS: 351 (M+H). 1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 9,00 (d, J=1,9 Hz, 1H), 8,91 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 5,09 (m, 2H), 4,56 (m, 2H), 4,42 (m, 2H), 2,34 (m, 2H).
Пример 906: 4-бензил-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
К суспензии 8-циано-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-4-ийхлорида (80 мг, 0,312 ммоля) и карбоната калия (129 мг, 0,935 ммоля) в ацетонитриле (328 мкл) добавляли бензилбромид (40,7 мкл, 58,6 ммоля) и полученную реакционную смесь перемешивали при r.t. в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли с помощью H2O (5 мл) и органическую фазу экстрагировали с помощью EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-5% MeOH/DCM) и получали 4-бензил-10,10-диметил-9-оксо-1-окса-4-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил (52% IY) в виде красного твердого вещества. MS: 311 [M+H+]. VT 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,19 (широкий s,1H), 7,36-7,28 (m, 5H), 3,84 (широкий сигнал, 1H), 3,71 (широкий сигнал, 1H), 3,52 (широкий сигнал, 2H), 2,77-2,52 (широкий сигнал, 2H), 2,43-2,10 (широкий сигнал, 2H), 2,01-1,92 (m, 2H), 1,20 (s, 3H), 1,05 (s, 3H).
Получали из промежуточного продукта 4
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Получали из промежуточного продукта 8
Получали из промежуточного продукта 8
Получали из промежуточного продукта 8
Пример 913: 8,8-диметил-7-оксо-2-(фенилсульфонил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил
К раствору 8,8-диметил-7-оксо-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил.HCl (15 мг, 0,066 ммоля) в DCM (0,22 мл) при комнатной температуре добавляли триэтиламин (28 мкл, 0,20 ммоля), затем бензолсульфонилхлорид (10 мкл, 0,079 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем реакцию останавливали водой (1,0 мл). Затем смесь экстрагировали с помощью DCM (3×1 мл) и объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/вода с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 8,8-диметил-7-оксо-2-(фенилсульфонил)-2-азаспиро[3.5]нон-5-ен-6-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 331 (M+H). 1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 7,95 (s, 1H), 7,91-7,86 (m, 2H), 7,83 (t, J=7,4 Hz, 1H), 7,74 (t, J=7,7 Hz, 2H), 4,03 (d, J=8,6 Hz, 2H), 3,70 (d, J=8,6 Hz, 2H), 1,71 (s, 2H), 0,91 (s, 6H).
Получали из промежуточного продукта $
Получали из промежуточного продукта $
Получали из промежуточного продукта $
Получали из промежуточного продукта $
Рацемический промежуточный продукт 4
Рацемический промежуточный продукт 4
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 925: 3-ацетил-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Стадия 1: LDA (2,0 M в THF/гептан/этилбензол, 524 мкл, 1,05 ммоля) объединяли с THF (1 мл) и охлаждали до -78°C в атмосфере N2. К этой смеси добавляли раствор трет-бутил-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундекан-3-карбоксилата (250 мг, 0,935 ммоля) в THF (1 мл). Полученную смесь перемешивали при -78°C в течение 20 мин, затем переносили в шприц и добавляли к смеси тозилцианида (339 мг, 1,87 ммоля) с THF (1 мл) при -78°C в атмосфере N2. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 45 мин. Реакцию останавливали с помощью NaOH (1 M в воде, 2 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×). Объединенные органические слои промывали с помощью HCl (1 н. в воде) и рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% EtOAc/гексаны) и получали трет-бутил-8-циано-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундекан-3-карбоксилат в виде масла. MS: 315 (M+Na).
Стадия 2: Трет-бутил-8-циано-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундекан-3-карбоксилат (128 мг, 0,438 ммоля) растворяли в толуоле (4,4 мл). Добавляли DDQ (132 мг, 0,582 ммоля) и смесь нагревали при 110°C в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% EtOAc/гексаны) и получали трет-бутил-8-циано-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-3-карбоксилат в виде масла. MS: 313 (M+Na). 1H NMR (600 MHz, хлороформ-d) δ 7,55 (s, 1H), 3,65-3,60 (m, 2H), 3,48-3,42 (m, 2H), 2,63-2,59 (m, 2H), 1,78-1,72 (m, 2H), 1,69-1,62 (m, 4H), 1,50 (s, 9H).
Стадия 3: К раствору трет-бутил-8-циано-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-3-карбоксилата (30 мг, 0,103 ммоля) в DCM (1 мл) добавляли HCl (4,0 M в диоксане, 258 мкл, 1,03 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем концентрировали при пониженном давлении и получали 9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил.HCl в виде твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. MS: 191 (M+H).
Стадия 4: К смеси 9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил.HCl (23,4 мг, 0,123 ммоля) в DCM (1,2 мл) добавляли TEA (69 мкл, 0,49 ммоля). Добавляли ацетилхлорид (13 мкл, 0,18 ммоля) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении и затем очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния 0-10% MeOH/DCM) и получали 3-ацетил-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 233 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,07 (s, 1H), 3,67-3,62 (m, 1H), 3,59-3,53 (m, 1H), 3,48-3,39 (m, 2H), 2,57-2,53 (m, 2H), 2,01 (s, 3H), 2,00-1,94 (m, 2H), 1,77-1,71 (m, 1H), 1,69-1,58 (m, 2H), 1,55-1,49 (m, 1H).
Пример 926: 10,10-диметил-9-оксо-3-фенил-3-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил
Стадия 1: Трет-бутоксид калия (1,08 г, 9,59 ммоля) медленно добавляли к трет-бутил-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундекан-3-карбоксилату (1,03 г, 3,84 ммоля) в tBuOH (19 мл) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и по каплям добавляли метилйодид (0,504 мл, 8,06 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (10 мл) и водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-50% Et2O/гексаны) и получали трет-бутил-8,8-диметил-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундекан-3-карбоксилат в виде жидкости. MS: 240 (M+H - tBu).
Стадия 2: К трет-бутил-8,8-диметил-9-оксо-3-азаспиро[5.5]ундекан-3-карбоксилату (780 мг, 2,64 ммоля), растворенному в DCM (20 мл), добавляли HCl (4,0 M в диоксане, 6,60 мл, 26,4 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 8,8-диметил-3-азаспиро[5.5]ундекан-9-он.HCl в виде твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. MS: 196 (M+H).
Стадия 3: В сосуд, содержащий 8,8-диметил-3-азаспиро[5.5]ундекан-9-он.HCl (200 мг, 0,863 ммоля), RuPhos Pd G2 (67,0 мг, 0,086 ммоля) и 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диизопропоксибифенил (40,3 мг, 0,086 ммоля) в атмосфере азота добавляли диоксан (4,3 мл). Добавляли бромбензол (109 мкл, 1,04 ммоля) и трет-бутоксид натрия (863 мкл, 1,73 ммоля) и смесь перемешивали при 60°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли с помощью DCM, фильтровали через целит® и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% Et2O/гексаны) и получали 8,8-диметил-3-фенил-3-азаспиро[5.5]ундекан-9-он в виде твердого вещества. MS: 272 (M+H).
Стадия 4: В дегазированный сосуд, содержащий LDA (2,0 M в THF/гептан/этилбензол, 304 мкл, 0,608 ммоля), при -78°C по каплям добавляли раствор 8,8-диметил-3-фенил-3-азаспиро[5.5]ундекан-9-она (83 мг, 0,30 ммоля) в THF (400 мкл). Смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин. По каплям добавляли раствор 4-метилбензолсульфонилцианида (55 мг, 0,30 ммоля) в THF (800 мкл) и реакционную смесь перемешивали в течение еще 30 мин при -78°C. Реакцию останавливали с помощью 2M NH4OH (0,6 мл) и затем нагревали до комнатной температуры. Смесь нейтрализовывали с помощью 1M HCl до pH ~7 и смесь трижды экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% Et2O/гексаны и затем 0-10% MeOH/DCM) и получали 10,10-диметил-9-оксо-3-фенил-3-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрил в виде масла. MS: 297 (M+H).
Стадия 5: К раствору 10,10-диметил-9-оксо-3-фенил-3-азаспиро[5.5]ундекан-8-карбонитрила (83 мг, 0,28 ммоля) в THF (1 мл) при комнатной температуре добавляли ацетат палладия(II) (63 мг, 0,28 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении, разбавляли с помощью DCM (5 мл) и затем добавляли смесь 1:1 вода:рассол. Органический слой собирали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% Et2O/гексаны) и получали 10,10-диметил-9-оксо-3-фенил-3-азаспиро[5.5]ундец-7-ен-8-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 295 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,07 (s, 1H), 7,25-7,19 (m, 2H), 6,97 (d, J=8,0 Hz, 2H), 6,77 (t, J=7,2 Hz, 1H), 3,42-3,37 (m, 2H), 3,18-3,12 (m, 2H), 1,95 (s, 2H), 1,91-1,85 (m, 2H), 1,77-1,71 (m, 2H), 1,15 (s, 6H).
Пример 927: 2-бензил-9,9-диметил-3,8-диоксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Стадия 1: К раствору трет-бутил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]-1'-карбоксилата (800 мг, 2,61 ммоля) в 2-MeTHF (8,7 мл) добавляли HCl (4M в диоксане, 6,5 мл, 26,1 ммоля) и полученный раствор перемешивали при КТ в течение 20 ч. Реакцию останавливали путем медленного добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и экстрагировали с помощью DCM (3×). Объединенные органические слои фильтровали через разделитель фаз и концентрировали при пониженном давлении и получали 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин], который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS: 207 (M+H - CO2tBu).
Стадия 2: К раствору 7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидина] (92 мг, 0,45 ммоля) и бензальдегида (47 мг, 0,45 ммоля) в MeOH:AcOH (10:1, 0,7 мл) добавляли 2-пиколинборан (49 мг, 0,45 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 4 ч и реакцию останавливали 10% водным раствором HCl. Полученный раствор перемешивали в течение еще 30 мин и затем подщелачивали (pH= 9) путем добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Добавляли EtOAc (10 мл) и фазы разделяли. Водный слой экстрагировали с помощью EtOAc (2×), объединенные органические слои экстрагировали рассолом (1×) и фильтровали через разделитель фаз, затем концентрирование при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-80% MTBE/гептаны) и получали 1'-бензил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]. MS: 297 (M+H).
Стадия 3: К раствору 1'-бензил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидина] (62 мг, 0,21 ммоля) и бикарбоната натрия (176 мг, 2,09 ммоля) в смеси THF:вода (2,5:1, 8,3 мл) добавляли йод (398 мг, 1,57 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 5,5 ч и затем переносили в 1:1 раствор насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и тиосульфата натрия. Полученный раствор экстрагировали с помощью DCM (2×). Объединенные органические слои экстрагировали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1×), фильтровали через разделитель фаз и концентрировали при пониженном давлении. Полученные региоизомеры (смесь 1,5:1) очищали и разделяли с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% MTBE/гептаны) и получали 1'-бензил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]-5'-он в качестве основного продукта. MS: 311 (M+H).
Стадия 4: К раствору 1'-бензил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]-5'-она (29 мг, 0,09 ммоля) в MeOH (0,5 мл) добавляли метоксид натрия (0,5 M раствор, 0,56 мл) и полученный раствор перемешивали при КТ в течение 16 ч. Реакцию останавливали путем медленного добавления 1M водного раствора HCl и экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои фильтровали через разделитель фаз и концентрировали при пониженном давлении и получали 2-бензил-9,9-диметил-3,8-диоксо-2-азаспиро[4.5]декан-7-карбонитрил, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS: 311 (M+H).
Стадия 5: Раствор пиридина (6 мкл, 0,07 ммоля) и фенилселенилхлорида (14 мг, 0,07 ммоля) в DCM (150 мкл) предварительно перемешанный при 0°C в течение 20 мин, по каплям добавляли к раствору 2-бензил-9,9-диметил-3,8-диоксо-2-азаспиро[4.5]декан-7-карбонитрила (11 мг, 0,03 ммоля) в DCM (150 мкл). Полученный раствор перемешивали при 0°C в течение еще 1 ч и добавляли пероксид водорода (18 мкл, 0,18 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч и реакцию останавливали 1M водным раствором HCl. Водный слой экстрагировали с помощью DCM (2×) и фильтровали через разделитель фаз, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с обращенной фазой с отбором по массе (ACN/H2O с 0,1% TFA в качестве модификатора) и получали 2-бензил-9,9-диметил-3,8-диоксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил. MS: 309 (M+H). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,40-7,34 (m, 3H), 7,30 (s, 1H), 7,25-7,24 (m, 2H), 4,53-4,45 (m, 2H), 3,28 (q, J=10,6 Hz, 2H), 2,68 (s, 2H), 1,98-1,97 (m, 2H), 1,18 (s, 3H), 1,12 (s, 3H).
Пример 928: 7'-фтор-1',5,5-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил
Стадия 1: Трет-бутоксид калия (1 M в THF, 0,662 мл, 0,662 ммоля) добавляли к раствору 7-фториндолин-2-она (2,0 г, 13 ммоля) в DMSO (10 мл) при комнатной температуре в атмосфере N2. Смесь нагревали при 45°C и добавляли метилакрилат (3,53 г, 41,0 ммоля). Раствор перемешивали при 45°C в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и реакцию останавливали водным раствором NH4Cl (20 мл). Смесь разбавляли с помощью EtOAc (400 мл) и органическую фазу промывали рассолом (3×100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-45% EtOAc/петролейный эфир) и получали триметил-3,3',3''-(7-фтор-2-оксоиндолин-1,3,3-триил)трипропаноат в виде масла. MS: 410 (M+H).
Стадия 2: Трет-бутоксид калия (1 M в THF, 25 мл, 25 ммоля) порциями добавляли в течение 40 мин к триметил-3,3',3''-(7-фтор-2-оксоиндолин-1,3,3-триил)трипропаноату (5,0 г, 12 ммоля) в DMSO (5 мл) при комнатной температуре в атмосфере N2. Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 2 ч. Затем добавляли воду (20 мл) и смесь перемешивали при 80°C в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли с помощью EtOAc (50 мл). Органический слой промывали рассолом (2×100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-35% EtOAc/петролейный эфир) и получали 7'-фторспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-дион в виде твердого вещества. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8,31 (s, 1H), 7,28-7,05 (m, 3H), 3,18-3,03 (m, 2H), 2,56-2,41 (m, 2H), 2,29-2,16 (m, 4H).
Стадия 3: Трет-бутоксид калия (1 M в THF, 7,50 мл, 7,50 ммоля) добавляли к смеси 7'-фторспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-диона (500 мг, 2,14 ммоля) с tBuOH (20 мл) при 0°C в атмосфере N2. Смесь перемешивали при 25°C в течение 1 ч и затем по каплям добавляли раствор йодметана (882 мг, 6,22 ммоля) в tBuOH (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Раствор реакцию останавливали водой (50 мл), разбавляли с помощью EtOAc (200 мл) и органическую фазу промывали рассолом (2×100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-30% EtOAc/петролейный эфир) и получали 7'-фтор-1',3,3-триметилспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-дион в виде твердого вещества. MS: 276 (M+H). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7,30-7,28 (m, 1H), 7,19-7,13 (m, 1H), 7,11-7,03 (m, 1H), 2,51 (s, 3H), 2,38-2,19 (m, 2H), 2,13-1,93 (m, 4H), 1,22 (s, 3H), 1,12 (s, 3H).
Стадия 4: Бис(триметилсилил)амид лития (1 M в THF, 0,686 мл, 0,686 ммоля) добавляли к раствору 7'-фтор-1',3,3-триметилспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-диона (126 мг, 0,458 ммоля) в дегазированном THF (1,0 мл) при -78°C и раствор перемешивали при -78°C в течение 1 ч. Добавляли раствор 4-метилбензолсульфонилцианида (100 мг, 0,549 ммоля) в дегазированном THF и реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 4 ч. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл), разбавляли с помощью EtOAc (100 мл) и органическую фазу промывали рассолом (2×30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью Prep-TLC (1:3 EtOAc:петролейный эфир и затем 1:1 EtOAc:петролейный эфир) и получали 7'-фтор-1',3,3-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-5-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 301 (M+H).
Стадия 5: Раствор фенилселенилхлорида (140 мг, 0,733 ммоля) в DCM (0,5 мл) добавляли к раствору пиридина (57,9 мг, 0,733 ммоля) в DCM (0,5 мл) при 0°C в атмосфере N2 и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Затем добавляли раствор 7'-фтор-1',3,3-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-5-карбонитрила (110 мг, 0,366 ммоля) в DCM (0,5 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пероксид водорода (831 мг, 7,33 ммоля) и раствор перемешивали при 0°C в течение 40 мин. Реакцию останавливали водным раствором Na2S2O3 (5 мл), разбавляли с помощью EtOAc (50 мл) и органическую фазу промывали рассолом (2×20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с обращенной фазой (60-70% ACN/вода с 5 мМ муравьиной кислотой в качестве буфера) и получали 7'-фтор-1',5,5-триметил-2',4-диоксоспиро[циклогекс[2]ен-1,3'-индолин]-3-карбонитрил в виде твердого вещества. MS: 299 (M+H). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7,15-7,04 (m, 2H), 6,99-6,94 (m, 2H), 3,47 (d, J=2,0 Hz, 3H), 2,38 (dd, J=1,2, 15,2 Hz, 1H), 2,23 (dd, J=1,2, 15,2 Hz, 1H), 1,47 (s, 3H), 1,31 (s, 3H).
Стадия 6, при необходимости: 1'-(3,4-Диметилбензил)-5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (150 мг, 0,390 ммоля) растворяли в TFA (3 мл, 0,390 ммоля). Затем раствор реакционной смеси перемешивали при 90°C в течение 3 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. После завершения реакционную смесь концентрировали в вакууме и выпаривали вместе с толуолом (трижды, каждый раз 3 мл) для удаления избытка TFA. Остаток очищали с помощью RP-Combi-Flash при следующих условиях: колонка: AQ 18 гелевая колонка (80 г), 20-35 мкм; подвижная фаза A: 5 мМ водный раствор NH4HCO3; подвижная фаза B: MeCN (градиентный режим: 0% B выдерживание в течение 5 мин, до 49,2% B за 31 мин, 49,2% B выдерживание в течение 1,2 мин; до 95% B за 1 мин, 95% B выдерживание в течение 5 мин); скорость потока: 60 мл/мин; детектор: UV 254 и 210 нм; RT: 31,3 мин. Фракции, содержащие продукт, собирали и выпаривали в роторном испарителе в вакууме и получали 5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (49,2 мг, 0,185 ммоля, 47,4% выход) в виде белого твердого вещества. MS: m/z=265,05 [M - H]-. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,89 (s, 1H), 7,38-7,30 (m, 1H), 7,24-7,12 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 7,02-6,87 (m, 1H), 2,49-2,45 (m, 1H), 2,30-2,26 (m, 1H), 1,62 (s, 3H), 1,36 (s, 3H).
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Энантиомер 1
Энантиомер 1
Энантиомер 2
Пример 942, энантиомер 1: 1'-циклопропил-5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил
Пример 943, энантиомер 2: 1'-циклопропил-5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил
Стадия 1: При перемешивании к раствору 5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрила (38 мг, 0,143 ммоля) в MeCN (3 мл) на воздухе добавляли циклопропилбороновую кислоту (18,39 мг, 0,214 ммоля), диацетоксимедь (78 мг, 0,428 ммоля) и пиридин (56,4 мг, 0,713 ммоля). Затем реакционную смесь перемешивали при 105°C в течение 1 ч. За протеканием реакции следили с помощью LCMS и TLC. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат очищали с помощью Prep-TLC (PE : EA=1 : 1) и получали 1'-циклопропил-5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (20 мг, 0,065 ммоля, 45,7% выход) в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали дл разделения. MS: m/z=307,30 [M+H]+. 1H-NMR (400 MHz, хлороформ-d) 7,41-7,39 (m, 1H), 7,21-7,15 (m, 3H), 7,01-6,98 (m, 1H), 2,73-2,71 (m, 1H), 2,40-2,36 (m, 1H), 2,28-2,20 (m, 1H), 1,52 (s, 3H), 1,34 (s, 3H), 1,20-1,14 (m, 2H), 0,94-0,86 (m, 2H). 1'-циклопропил-5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (24 мг, 0,078 ммоля) очищали с помощью хиральной HPLC при следующих условиях: колонка: CHIRAL ART Cellulose-SB, 4,6*100 мм,3 мкм; подвижная фаза A:гексан : EtOH=70:30, подвижная фаза B:; скорость потока:1 мл/мин; градиентный режим: от 0 B до 30% B за мин; нм; RT1:5,6; RT25,3. Объединенные фракции концентрировали при пониженном давлении, остаток лиофилизировали и получали 1'-циклопропил-5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (5,7 мг, 0,015 ммоля, 19,48% выход) в виде желтого твердого вещества и 1'-циклопропил-5,5-диметил-2',4-диоксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (5,3 мг, 0,014 ммоля, 18,33% выход) в виде светло-желтого твердого вещества.
Пример 944, энантиомер 1: 5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат
Пример 945, энантиомер 2: 5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат
Стадия 1: Этиленгликоль (3,85 г, 62,0 ммоля) и моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,410 г, 2,156 ммоля) добавляли к смеси спиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2',4-диона (5,8 г, 26,9 ммоля) с толуолом (60 мл) при 25°C. Смесь перемешивали при 110°C в течение 16 ч. Полученный раствор разбавляли водой (60 мл) и водный слой экстрагировали этилацетатом (60 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (100 мл×3), сушили над безводным Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1% - 50% этилацетата в петролейном эфире. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали диспиро[индолин-3,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолан]-2-он (6,5 г, 23,81 ммоля, 88% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C15H17NO3 [M+H]+ 260,12 найдено 260,15. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 8,11 (brs, 1H), 7,39-7,32 (m, 1H), 7,21 (td, J=7,7, 1,2 Hz, 1H), 7,03 (td, J=7,6, 1,1 Hz, 1H), 6,90 (dt, J=7,7, 0,8 Hz, 1H), 4,05-4,00 (m, 4H), 2,33-2,15 (m, 2H), 2,08-1,97 (m, 2H), 1,97-1,81 (m, 4H).
Стадия 2: LAH (1 M в THF, 8,10 мл, 8,10 ммоля) добавляли к раствору диспиро[индолин-3,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолан]-2-она (2 г, 7,71 ммоля) в THF (20 мл) при 0°C в атмосфере N2. Смесь перемешивали при 60°C в течение 16 ч. К реакционной смеси добавляли воду (0,3 мл), 15% NaOH (0,3 мл), воду (0,9 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 40 мин, затем смесь фильтровали, фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1% - 35% этилацетата в петролейном эфире. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали диспиро[индолин-3,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолан] (1,79 г, 6,20 ммоля, 80% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C15H19NO2 [M+H]+ 246,14 найдено 246,05. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,16-6,98 (m, 2H), 6,80-6,61 (m, 2H), 4,06-3,90 (m, 4H), 3,46 (s, 2H), 2,10-1,88 (m, 2H), 1,88-1,63 (m, 6H).
Стадия 3: К раствору диспиро[индолин-3,1'-циклогексан-4',2''-[1,3]диоксолана] (1,7 г, 6,93 ммоля) в THF (15 мл) добавляли водный раствор HCl (2 M, 15 мл, 30,0 ммоля) при 25°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученный раствор разбавляли водой (20 мл) и водный слой экстрагировали этилацетатом (20 мл×3). Объединенный органический слой промывали рассолом (20 мл×3), сушили над безводным Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 1% - 40% этилацетата в петролейном эфире. Фракции, содержащие искомый продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении и получали спиро[циклогексан-1,3'-индолин]-4-он (1,35 г, 6,57 ммоля, 95% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C13H15NO [M+H]+ 202,12 найдено 202,10. MS: m/z=202,10 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,14-7,02 (m, 2H), 6,82-6,64 (m, 2H), 3,64 (s, 2H), 2,54-2,43 (m, 4H), 2,17-2,07 (m, 4H).
Стадия 4: При перемешивании к раствору спиро[циклогексан-1,3'-индолин]-4-она (1,6 г, 7,95 ммоля) в DCM (20 мл) при 0°C в атмосфере азота добавляли TEA (2,216 мл, 15,90 ммоля), DMAP (0,097 г, 0,795 ммоля) и Boc2O (2,77 мл, 11,92 ммоля). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакцию останавливали насыщенным раствором хлорида аммония (50 мл) и разбавляли этилацетатом (100 мл). Органические слои промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия и концентрировали. Неочищенное вещество очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0~30% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-1'-карбоксилат (1 г, 3,31 ммоля, 41,7% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C18H23NO3 [M -C4H8+H]+ 246,11 найдено 246,20. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,27-7,17 (m, 2H), 7,11 (d, J=7,5 Hz, 1H), 6,99 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,05 (s, 2H), 2,62-2,43 (m, 4H), 2,19-2,01 (m, 4H), 1,60 (s, 9H).
Стадия 5: К раствору трет-бутил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-1'-карбоксилата (1,1 г, 3,65 ммоля) в THF (35 мл) добавляли NaH (60% в минеральном масле, 0,292 г, 7,30 ммоля) при 0°C. Затем добавляли раствор MeI (0,685 мл, 10,95 ммоля) в THF (1,5 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при 105°C. Реакцию останавливали водой (50 мл), разбавляли этилацетатом (100 мл), промывали рассолом (50 мл×2), сушили над безводным Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Реакционную смесь очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0-20% этилацетата в петролейном эфире и получали трет-бутил-3,3-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-1'-карбоксилат (330 мг, 0,912 ммоля, 24,98% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C20H27NO3 [M -C4H8+MeCN+H]+ 315,14 найдено 315,15. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,29-7,15 (m, 2H), 7,13-7,04 (m, 1H), 6,98 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,30 (brs, 1H), 4,06-3,96 (m, 1H), 2,87 (td, J=14,6, 5,7 Hz, 1H), 2,40-2,16 (m, 2H), 2,16-1,80 (m, 3H), 1,62 (s, 9H), 1,29 (s, 3H), 1,15 (s, 3H).
Стадия 6: К раствору трет-бутил-3,3-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-1'-карбоксилата (325 мг, 0,987 ммоля) в толуоле (3 мл) добавляли этилформиат (0,883 мл, 10,85 ммоля) и метоксид натрия (1954 мг, 10,85 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (5 мл), разбавляли этилацетатом (10 мл), промывали рассолом (10 мл×2), сушили над безводным Na2SO4, фильтровали, и концентрировали в вакууме и получали трет-бутил-5-(гидроксиметилен)-3,3-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-1'-карбоксилат (350 мг, 0,979 ммоля, 99% выход) в виде масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C21H27NO4 [M -C4H8+H]+ 302,13 найдено 302,10.
Стадия 7: К раствору трет-бутил-5-(гидроксиметилен)-3,3-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-1'-карбоксилата (350 мг, 0,979 ммоля) в EtOH (6 мл) добавляли гидроксиламингидрохлорид (708 мг, 10,18 ммоля) в воде (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при 80°C. Реакцию останавливали водой (5 мл), разбавляли этилацетатом (5 мл), промывали рассолом (5 мл×2), сушили над безводным Na2SO4, фильтровали, и концентрировали в вакууме и получали трет-бутил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-индолин]-1'-карбоксилат (325 мг, 0,917 ммоля, 94% выход) в виде масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C21H26N2O3 [M -C4H8+H]+ 299,13 найдено 299,10.
Стадия 8: К раствору метанолята натрия (2477 мг, 13,75 ммоля) в MeOH (15 мл) добавляли трет-бутил-7,7-диметил-6,7-дигидро-4H-спиро[бензо[d]изоксазол-5,3'-индолин]-1'-карбоксилат (325 мг, 0,917 ммоля) в Et2O (30 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали с помощью NH4Cl (10 мл), разбавляли этилацетатом (20 мл), промывали рассолом (10 мл×2), сушили над безводным Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Реакционную смесь очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании с помощью 0-20% EtOAc в петролейном эфире и получали трет-бутил-5-циано-3,3-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-1'-карбоксилат (190 мг, 0,536 ммоля, 58,5% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C21H26N2O3 [M+Na]+ 377,19 найдено 377,15. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,267-7,18 (m, 2H), 7,15-7,04 (m, 1H), 7,00 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,30 (brs, 1H), 4,17-3,93 (m, 2H), 2,47 (dd, J=13,8, 5,1 Hz, 1H), 2,31 (d, J=14,5 Hz, 1H), 2,27-2,15 (m, 1H), 2,00 (dd, J=14,5, 3,5 Hz, 1H), 1,62 (s, 9H), 1,33 (s, 3H), 1,22 (s, 3H).
Стадия 9: К раствору трет-бутил-5-циано-3,3-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-1'-карбоксилата (190 мг, 0,536 ммоля) в THF (2 мл) добавляли Pd(OAc)2 (96 мг, 0,429 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью Prep-TLC этилацетат/петролейный эфир (1 : 3) и получали трет-бутил-3-циано-5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-1'-карбоксилат (100 мг, 0,281 ммоля, 52,4% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C21H24N2O3 [M+MeCN+Na]+ 416,18 найдено 416,15. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,34-7,25 (m, 3H), 7,07-6,98 (m, 2H), 4,20-4,07 (m, 2H), 2,35 (d, J=14,7 Hz, 1H), 2,18 (d, J=14,8, 2,1 Hz, 1H), 1,59 (s, 9H), 1,31 (s, 3H), 1,25 (s, 3H).
Стадия 10: К хлориду водорода (4,0 M в 1,4-диоксане, 2 мл, 0,284 ммоля) добавляли трет-бутил-3-циано-5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-1'-карбоксилат (100 мг, 0,284 ммоля). Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Раствор реакционной смеси концентрировали в вакууме и получали 5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (70 мг, 0,277 ммоля, 98% выход) в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS ESI рассчитано для C16H16N2O [M+H]+ 253,13 найдено 253,10. 1H NMR (400 MHz, хлороформ-d) δ 7,75-7,69 (m, 1H), 7,59-7,49 (m, 2H), 7,42 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,31-7,25 (m, 1H), 4,23-2,4,01(m, 2H), 2,43 (d, J=14,4 Hz, 1H), 2,35 (d, J=14,9 Hz, 1H), 1,35 (s, 3H), 1,26 (s, 3H).
Стадия 11: 5,5-Диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (20 мг, 0,079 ммоля) разделяли с помощью Chiral-Prep-HPLC при следующих условиях: CHIRALPAK IH-3, 4,6×50 мм (3 мкм); подвижная фаза: гексаны: IPA=70 : 30; детектор, UV 254 нм. 5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (5,5 мг, 0,022 ммоля) получали при 2,77 мин в виде желто-зеленого твердого вещества, которое очищали с помощью препаративной HPLC при следующих условиях: колонка: SunFire Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм, 10 нм; подвижная фаза A: Вода (0,05% TFA ), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 15% B до 50% B за 6 мин; длина волны: 210/254 нм; RT1 (мин): 5,57; 5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат (3,1 мг, 8,18 мкмоля, 10,32% выход) получали в виде желто-зеленого твердого вещества; MS ESI рассчитано для C16H16N2O [M+H]+ 253,32 найдено 253,05. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,43 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,37-7,27 (m, 1H), 7,14-7,01 (m, 3H), 5,43 (brs, 1H), 3,96 (d, J=10,3 Hz, 1H), 3,89 (d, J=10,4 Hz, 1H), 2,39 (d, J=14,8 Hz, 1H), 2,27 (d, J=14,9 Hz, 1H), 1,31 (s, 3H), 1,28 (s, 3H).
Стадия 12: 5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (7,2 мг, 0,029 ммоля) получали при 3,87 мин в виде светло-желтого твердого вещества, которое очищали с помощью препаративной HPLC при следующих условиях: колонка: SunFire Prep C18 OBD колонка, 19×150 мм, 5 мкм, 10 нм; подвижная фаза A: Вода (0,05% TFA ), подвижная фаза B: MeCN; скорость потока: 20 мл/мин; градиентный режим: от 15% B до 50% B за 6 мин; длина волны: 210/254 нм; RT1 (мин): 5,57; 5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил-2,2,2-трифторацетат (5,0 мг, 0,013 ммоля, 16,81% выход) получали в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C16H16N2O [M+MeCN+H]+ 294,32 найдено 294,05. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 7,43 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,20-7,05 (m, 3H), 5,68 (brs, 1H), 3,98 (d, J=10,6 Hz, 1H), 3,90 (d, J=10,5 Hz, 1H), 2,39 (d, J=14,9 Hz, 1H), 2,27 (d, J=14,9 Hz, 1H), 1,31 (s, 3H), 1,28 (s, 3H).
Пример 946, энантиомер 1 1'-ацетил-5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил
Пример 947, энантиомер 2 1'-ацетил-5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил
Стадия 1: К раствору 5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрила (70 мг, 0,277 ммоля) в DCM (1 мл) добавляли ацетилхлорид (43,6 мг, 0,555 ммоля) и DIPEA (0,194 мл, 1,110 ммоля) при 0°C. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой (2 мл), разбавляли с помощью DCM (6 мл), промывали рассолом (6 мл×2), сушили над безводным Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью Prep-TLC этилацетатом/петролейный эфир (1 : 1) и получали 1'-ацетил-5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (60 мг, 0,204 ммоля, 73,5% выход) в виде желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C18H18N2O2 [M+MeCN+H]+ 336,14 найдено 336,10. 1H NMR (300 MHz, хлороформ-d) δ 8,29-8,21 (m, 1H), 7,33-7,28 (m, 2H), 7,18-7,04 (m, 2H), 4,31- 4,15 (m, 2H), 2,60-2,09 (m, 2H), 2,27 (s, 3H), 1,26 (s, 6H).
Стадия 2: 1'-Ацетил-5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (90 мг, 0,306 ммоля) очищали с помощью Chiral-Prep-HPLC при следующих условиях: CHIRALPAK IA-3, 4,6×50 мм (3 мкм); подвижная фаза: гексаны : EtOH=70 : 30; детектор, UV 254 нм. RT1: 1,45 мин; RT2: 1,84 мин;
Фракции первого пика (RT1: 1,45 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 1'-ацетил-5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (23,7 мг, 0,080 ммоля, 26,0% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C18H18N2O2 [M+H]+ 295,14 найдено 295,25. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,10 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,33-7,28 (m, 2H), 7,09-7,06 (m, 1H), 4,47 (d, J=11,1 Hz, 1H), 4,34 (d, J=11,0 Hz, 1H), 2,57-2,44 (m, 1H), 2,26-2,16 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,14 (s, 3H).
Фракции второго пика (RT1: 1,84 мин) объединяли и концентрировали при пониженном давлении, лиофилизировали и получали 1'-ацетил-5,5-диметил-4-оксоспиро[циклогексан-1,3'-индолин]-2-ен-3-карбонитрил (25,0 мг, 0,083 ммоля, 27,2% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. MS ESI рассчитано для C18H18N2O2 [M+H]+ 295,14 найдено 295,25. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,10 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,36-7,28 (m, 2H), 7,09-7,06 (m, 1H), 4,47 (d, J=11,1 Hz, 1H), 4,34 (d, J=11,1 Hz, 1H), 2,62-2,39 (m, 1H), 2,32-2,12 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,14 (s, 3H).
Пример 948, энантиомер 1: 2-бензоил-3,3,9,9-тетраметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Пример 949, энантиомер 2: 2-бензоил-3,3,9,9-тетраметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил
Стадия 1: К раствору 1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-она (1 г, 4,73 ммоля) в THF (16 мл) при 0°C добавляли NaH (0,295 г, 6,15 ммоля). Смесь перемешивали при 0°C в течение 15 мин. Добавляли (бромметил)бензол (0,619 мл, 5,21 ммоля) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали водой и экстрагировали с помощью DCM (3×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% EtOAc/гексаны) и получали 10-бензил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-он в виде твердого вещества. MS: 302 (M+1).
Стадия 2: К раствору 10-бензил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан-11-она (750 мг, 2,49 ммоля) в DCM (10 мл) добавляли 2,6-ди-трет-бутил-4-метилпиридин (613 мг, 2,99 ммоля). Смесь охлаждали до -78°C и по каплям добавляли трифторметансульфоновый ангидрид (0,502 мл, 2,99 ммоля). Смесь перемешивали при -78°C в течение 45 мин. Добавляли метилмагнийбромид (3 M в Et2O, 2,49 мл, 7,47 ммоля) и реакционную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Дополнительно добавляли метилмагнийбромид (3 M в Et2O, 2,49 мл, 7,47 ммоля) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором NH4Cl и экстрагировали с помощью DCM (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-10% MeOH/DCM) и получали 10-бензил-11,11-диметил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекан в виде масла. MS: 316 (M+1).
Стадия 3: К раствору 10-бензил-11,11-диметил-1,4-диокса-10-азадиспиро[4.2.48.25]тетрадекана (690 мг, 2,19 ммоля) в ацетоне (11 мл) добавляли моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,458 г, 2,41 ммоля) и воду (0,394 мл, 21,9 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при 70°C в течение ночи. Дополнительно добавляли воду (0,394 мл, 21,9 ммоля) и моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,458 г, 2,41 ммоля) и перемешивали при 70°C в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и реакцию останавливали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Экстрагировали с помощью DCM (3×) и объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-10% MeOH/DCM) и получали 2-бензил-3,3-диметил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он в виде масла. MS: 272 (M+1).
Стадия 4: К раствору 2-бензил-3,3-диметил-2-азаспиро[4.5]декан-8-она (568 мг, 2,09 ммоля) в трет-бутаноле (10 мл) добавляли трет-бутоксид калия (0,587 г, 5,23 ммоля). Смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Добавляли метилйодид (0,275 мл, 4,39 ммоля) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Дополнительно добавляли 184 мкл MeI и перемешивали в течение 36 ч. Реакцию останавливали водой, экстрагировали с помощью EtOAc (3×) и объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-30% EtOAc/гексаны) и получали 2-бензил-3,3,7,7-тетраметил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он в виде масла. MS: 300 (M+1).
Стадия 5: В реакционную пробирку во встряхивающем устройстве Парра, содержащую гидроксид палладия на угле (20 мас.%, 200 мг, 0,285 ммоля), добавляли раствор 2-бензил-3,3,7,7-тетраметил-2-азаспиро[4.5]декан-8-она (200 мг, 0,668 ммоля) в этаноле (10 мл). Добавляли концентрированный HCl (62 мкл, 2,04 ммоля) и реакцию проводили во встряхивающем устройстве Парра при давлении 50 фунт-сила/дюйм2 H2 в течение 72 ч. Реакционную смесь фильтровали через целит и промывали с помощью MeOH. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-10% MeOH/DCM) и получали 3,3,7,7-тетраметил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он в виде масла. MS: 210 (M+1).
Стадия 6: К раствору 3,3,7,7-тетраметил-2-азаспиро[4.5]декан-8-она (140 мг, 0,67 ммоля) в DCM (2,2 мл) добавляли TEA (280 мкл, 2,01 ммоля) и бензоилхлорид (117 мкл, 1,01 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% EtOAc/гексаны) и получали 2-бензоил-3,3,7,7-тетраметил-2-азаспиро[4.5]декан-8-он в виде твердого вещества. MS: 314 (M+1).
Стадия 7: К раствору 2-бензоил-3,3,7,7-тетраметил-2-азаспиро[4.5]декан-8-она (183 мг, 0,584 ммоля) в THF (1,9 мл) при -78°C добавляли LDA (1,0 M в THF, 1460 мкл, 1,460 ммоля). Смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин затем добавляли раствор тозилцианида (127 мг, 0,701 ммоля) в THF (1 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при -78°C и затем медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакцию останавливали с помощью 2M NH4OH (0,35 мл) и нейтрализовывали с помощью 1M HCl (2,5 мл). Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (3×) и объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-50% EtOAc/гексаны) и получали 2-бензоил-3,3,9,9-тетраметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-7-карбонитрил в виде масла. MS: 339.
Стадия 8: В пиридин (38 мкл, 0,47 ммоля) добавляли раствор фенилселенилхлорида (89 мг, 0,47 ммоля) в DCM (1,2 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при 0°C и затем добавляли раствор 2-бензоил-3,3,9,9-тетраметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]декан-7-карбонитрила (79 мг, 0,233 ммоля) в DCM (1,2 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. Реакционную смесь промывали 1 M водным раствором HCl (1,0 мл) и водой (2,0 мл) и в собранный органический слой при 0°C добавляли пероксид водорода (30% в воде, 477 мкл, 4,67 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 10 мин и затем промывали 1 M водным раствором HCl (1,0 мл) и водой (2,0 мл). Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-60% EtOAc/гексаны) и получали рацемический 2-бензоил-3,3,9,9-тетраметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил. Рацемическую смесь очищали с помощью хиральной SFC (CCU колонка, 20%/80% MeOH/CO2) и получали два продукта в виде масел:
2-бензоил-3,3,9,9-тетраметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил. MS: 337 (M+1). 1H NMR (499 MHz, хлороформ-d) δ 7,57 (s, 1H), 7,44-7,37 (m, 5H), 3,58-3,49 (m, 2H), 2,33 (d, J=13,6 Hz, 1H), 2,18 (d, J=13,6 Hz, 1H), 1,98 (d, J=14,3 Hz, 1H), 1,85 (d, J=14,3 Hz, 1H), 1,75 (s, 3H), 1,69 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 1,12 (s, 3H).
2-бензоил-3,3,9,9-тетраметил-8-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-6-ен-7-карбонитрил. MS: 337 (M+1). 1H NMR (499 MHz, хлороформ-d) δ 7,57 (s, 1H), 7,44-7,37 (m, 5H), 3,58-3,49 (m, 2H), 2,33 (d, J=13,6 Hz, 1H), 2,18 (d, J=13,6 Hz, 1H), 1,98 (d, J=14,3 Hz, 1H), 1,85 (d, J=14,3 Hz, 1H), 1,75 (s, 3H), 1,69 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 1,12 (s, 3H).
Пример 950, энантиомер 1: 2-бензоил-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.4]нон-6-ен-7-карбонитрил
Пример 951, энантиомер 2: 2-бензоил-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.4]нон-6-ен-7-карбонитрил
Стадия 1: Раствор трет-бутил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (515 мг, 2,15 ммоля) в безводном 2-MeTHF (10 мл) медленно добавляли в сосуд для микроволновой печи объемом 20 мл, содержащий NaH (172 мг, 4,30 ммоля) в атмосфере азота. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Добавляли метилйодид (0,404 мл, 6,45 ммоля) и реакционную смесь нагревали при 105°C в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и реакцию останавливали путем медленного добавления насыщенного водного раствора хлорида аммония. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (3×) и объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-60% Et2O/гексаны) и получали трет-бутил-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат в виде масла. MS: 212 (M+H - tBu).
Стадия 2: К суспензии гидрида натрия (93 мг, 2,3 ммоля) в THF (4 мл) при 0°C добавляли раствор трет-бутил-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (311 мг, 1,16 ммоля) в THF (4 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин и затем добавляли этилформиат (282 мкл, 3,49 ммоля). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение выходных дней. Реакцию останавливали насыщенным водным раствором хлорида аммония и экстрагировали с помощью EtOAc (2×). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали трет-бутил-8-(гидроксиметилен)-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат в виде твердого вещества. MS: 240 (M+H - tBu).
Стадия 3: К раствору трет-бутил-8-(гидроксиметилен)-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (344 мг, 1,17 ммоля) в воде (333 мкл) и уксусной кислоте (2 мл) добавляли гидроксиламингидрохлорид (97 мг, 1,4 ммоля) и ацетат натрия (191 мг, 2,33 ммоля). Смесь перемешивали при 60°C в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и экстрагировали с помощью DCM (3×). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали трет-бутил-8-((гидроксимино)метил)-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат в виде масла. MS: 255 (M+H - tBu).
Стадия 4: В сосуд, содержащий трет-бутил-8-((гидроксимино)метил)-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат (361 мг, 1,16 ммоля) в THF (11,6 мл), охлажденный до 0°C, по каплям добавляли триэтиламин (1,3 мл, 9,3 ммоля) и затем тионилхлорид (0,340 мл, 4,65 ммоля). Смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°C. К смеси медленно добавляли воду (50 мл) при 0°C и смесь экстрагировали с помощью EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-70% Et2O/гексаны) и получали трет-бутил-6,6-диметил-4,6-дигидроспиро[циклопента[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]-1'-карбоксилат в виде масла. MS: 237 (M+H - tBu).
Стадия 5: К раствору трет-бутил-6,6-диметил-4,6-дигидроспиро[циклопента[d]изоксазол-5,3'-пирролидин]-1'-карбоксилата (179 мг, 0,611 ммоля) в MeOH (3,1 мл) добавляли метоксид натрия (349 мкл, 1,83 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении, разбавляли с помощью EtOAc и нейтрализовывали 1 M водным раствором HCl (3 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении и получали трет-бутил-8-циано-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилат в виде масла. MS: 237 (M+H - tBu).
Стадия 6: К раствору трет-бутил-8-циано-6,6-диметил-7-оксо-2-азаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (158 мг, 0,540 ммоля) в THF (1,5 мл) при комнатной температуре добавляли ацетат палладия(II) (121 мг, 0,54 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли еще один эквивалент ацетата палладия(II) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении, разбавляли с помощью DCM (5 мл) и затем добавляли смесь 1:1 вода:рассол. Органический слой собирали с помощью разделителя фаз и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-100% Et2O/гексаны) и получали трет-бутил-7-циано-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.4]нон-6-ен-2-карбоксилат в виде масла. MS: 235 (M+H - tBu).
Стадия 7: К раствору трет-бутил-7-циано-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.4]нон-6-ен-2-карбоксилата (70 мг, 0,24 ммоля) в DCM (2,4 мл) добавляли HCl (4,0 M в диоксане, 603 мкл, 2,41 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали при пониженном давлении и получали 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.4]нон-6-ен-7-карбонитрил в виде твердой соли с HCL. MS: 191 (M+H).
Стадия 8: К раствору 9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.4]нон-6-ен-7-карбонитрил.HCl (50,2 мг, 0,22 ммоля) в DCM (2,2 мл) добавляли TEA (123 мкл, 0,886 ммоля). Добавляли бензоилхлорид (38,6 мкл, 0,332 ммоля) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой и экстрагировали с помощью DCM (2×). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния (0-10% MeOH/DCM) и получали рацемический 2-бензоил-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.4]нон-6-ен-7-карбонитрил. Рацемическую смесь очищали с помощью хиральной SFC (OJ-H колонка, 15%/85% MeOH/CO2) и получали два продукта в виде твердых веществ:
2-бензоил-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.4]нон-6-ен-7-карбонитрил - энантиомер 1. MS: 295 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 9,02-8,72 (m, 1H), 7,63-7,42 (m, 5H), 3,81-3,67 (m, 2H), 3,67-3,60 (m, 1H), 3,48-3,43 (m, 1H), 2,29-2,18 (m, 1H), 1,98-1,84 (m, 1H), 1,12-0,92 (m, 6H).
2-бензоил-9,9-диметил-8-оксо-2-азаспиро[4.4]нон-6-ен-7-карбонитрил - энантиомер 2. MS: 295 (M+H). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 9,02-8,72 (m, 1H), 7,63-7,42 (m, 5H), 3,81-3,67 (m, 2H), 3,67-3,60 (m, 1H), 3,48-3,43 (m, 1H), 2,29-2,18 (m, 1H), 1,98-1,84 (m, 1H), 1,12-0,92 (m, 6H).
Клеточный анализ ядерного превращения PathHunter® U2OS Keap1-Nrf2
Линию клеток ядерного превращения PathHunter® U2OS Keap1-NRF2 (Eurofins-DiscoverX) преобразовывали с помощью генной инженерии для экспрессии донора фермента (ED), прикрепленного к белку Nrf2, и акцептора фермента (EA) в ядрах. ED-Nrf2 сохраняет нормальную функцию в этой линии клеток. При нормальных условиях ED-Nrf2 связывается с Keap1 и выделяется для разложения по пути убиквитинирования. Если путь Nrf2 активирован, ED-Nrf2 переносится к ядрам, обеспечивая комплементацию ED с EA с образованием активного фермента, который гидролизует субстрат (входящий в набор для анализа) с образованием хемилюминесцентного сигнала. Перемещение ED-Nrf2 к ядрам является замещающим сигналом для измерения активности соединений в нарушении взаимодействия Keap1-Nrf2, которое необходимо для облегчения разрушения Nrf2.
Готовые для анализа клетки размораживали и повторно суспендировали в среде для планшетов с клетками (OptiMEM с добавлением 1% FBS). Точнее, 5000 клеток в 20 мкл среды высевали в каждую клетку 384-луночного культурального планшета (Perkin Elmer) и инкубировали при 37°C с 5% CO2 в течение ночи. На следующее утро 60 нл соединения (в DMSO при наибольшей концентрации, равной 10 мМ, и затем разводили, также в DMSO, в соотношении 1:3 с получением 10 серийных разведений) добавляли в каждую лунку подготовленного планшета с клетками с использованием Labcyte ECHO. Планшет для анализа центрифугировали (150×g в течение 15 с), затем помещали в инкубатор с 5% CO2 при 37°C на 5-6 ч. После обработки соединением планшет извлекали из инкубатора и приводили в равновесие до температуры окружающей среды (15-30 мин). После установления равновесия в каждую лунку добавляли 12,5 мкл смеси для детектирования и сигнал люминесценции измеряли после инкубации в течение 60 мин. Значения EC50 определяли с помощью нелинейной регрессионной аппроксимации в модели с сигмоидальной 4-параметрической кривой доза-ответ с использованием шаблона Spotfire.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| 1,1,1-ТРИФТОР-3-ГИДРОКСИПРОПАН-2-ИЛКАРБАМАТНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ КАК ИНГИБИТОРЫ MAGL | 2018 |
|
RU2720203C1 |
| СОЕДИНЕНИЕ, ОБЛАДАЮЩЕЕ ЦИКЛИЧЕСКОЙ СТРУКТУРОЙ | 2018 |
|
RU2795119C2 |
| СПИРО-КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ПИПЕРИДИНА ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ КАЛИЕВОГО КАНАЛА НАРУЖНОГО МЕДУЛЛЯРНОГО СЛОЯ | 2013 |
|
RU2642066C2 |
| МОДУЛЯТОРЫ ЯДЕРНЫХ РЕЦЕПТОРОВ | 2016 |
|
RU2715897C2 |
| БИЦИКЛИЧЕСКИЕ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СПИРОСОЕДИНЕНИЯ | 2010 |
|
RU2506266C2 |
| Бициклические конденсированные гетероарильные или арильные соединения в качестве модуляторов IRAK4 | 2016 |
|
RU2684324C1 |
| N-АЛКОКСИ-4, 4-ДИОКСИПОЛИАЛКИЛПИПЕРИДИНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ С ГЛИЦИДИЛЬНЫМИ ИЛИ АЛКИЛКАРБОНИЛЬНЫМИ ГРУППАМИ В КАЧЕСТВЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ИНИЦИАТОРОВ ДЛЯ РЕГУЛИРУЕМОЙ РАДИКАЛЬНОЙ ПОЛИМЕРИЗАЦИИ | 2001 |
|
RU2281281C2 |
| ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СПИРОСОЕДИНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ MAGL | 2018 |
|
RU2726631C1 |
| ПРОИЗВОДНОЕ ДИГИДРОПИРИДАЗИН-3,5-ДИОНА | 2014 |
|
RU2662832C2 |
| НОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ БЕНЗОТИАЗИНОНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ СРЕДСТВ | 2006 |
|
RU2395508C1 |
Изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемым солям, которые обладают способностью активации ядерного фактора Nrf2. В формуле (I) R1 и R2 каждый независимо означают Н или С1-С6-алкил; или R1 и R2 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют С3-С6-циклоалкил; R3 означает С1-С6-алкил или С6-С10-арил; R4 означает NR7C(O)R8 или CONR9R10; или R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют С3-С8-циклоалкил или 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О и N, где указанный С3-С8-циклоалкил и 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-4 заместителями R12; R7 означает Н или С1-С6-алкил; R8 означает Н, С1-С6-алкил, С3-С8-циклоалкил, С6-С10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О, S и N; где указанный С1-С6-алкил, С3-C8-циклоалкил, С6-С10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-4 заместителями R13; R9 означает С1-С6-алкил; R10 означает С1-С6-алкил; каждый R12 независимо выбран из группы, включающей: (1) C1-С6-алкил, (2) галоген, (3) оксогруппу, (4) -(СН2)рС3-С6-циклоалкил, (5) -(СН2)рС6-С10-арил, (6) -(CH2)phet, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О и N, (7) -(CH2)p-OR14, (8) -(CH2)p-NR15R16, (9) -(CH2)p-C(O)R19, (10) -(CH2)p-S(O)nR19 и (11) -(CH2)p-C(O)OR20; где указанный С1-С6-алкил, С3-С6-циклоалкил, С6-С10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо каждый независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил, и где указанный С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил необязательно замещены одним или большим количеством галогенов или одним или большим количеством гидроксилов; или два заместителя R12 у соседних атомов С3-С8-циклоалкила или 3-8-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют конденсированную бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R21; R13 означает галоген, С1-С6-алкил, -ОС1-С6-алкил или С6-С10-арил, где в каждом случае указанный С1-С6-алкил независимо необязательно замещен одним или большим количеством галогенов и где указанный С6-С10-арил необязательно замещен 1-4 заместителями, выбранными из галогена, гидроксила или C1-C6-алкила; R14 означает Н или С1-С6-алкил; R15 означает Н или С1-С6-алкил; R16 означает С6-С10-арил; R19 и R20 все независимо означают Н, С1-С6-алкил, С2-С6-алкинил, С3-С6-циклоалкил, С6-С12-арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О, S и N, где указанный С1-С6-алкил, С2-С6-алкинил, С3-С6-циклоалкил, С6-С12-арил и 5-10-членный гетероарил все необязательно независимо замещены одним или большим количеством заместителей R27; R21 независимо выбран из группы, включающей Н, галоген, гидроксил, С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил, где указанный С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил все необязательно независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил и -ОС1-С6-алкил; R27 означает галоген, гидроксил, нитрил, С1-С6-алкил, -О-С1-С6-алкил, -S-C1-С6-алкил, С(О)NHC1-С6-алкил, С3-С6-циклоалкил, С6-С10-арил, -О-С6-С10-арил, -О-С1-С2-алкил-С6-С10-арил или 5-8-членный гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О, S и N, где в каждом случае указанный С1-С6-алкил, С3-С6-циклоалкил, С6-С10-арил и 5-8-членный гетероарил независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, нитрил, С1-С6-алкил, -ОС1-С6-алкил и -N(С1-С6-алкил)2, где указанный С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил все независимо замещены одним или большим количеством галогенов; m равно 0, 1 или 2; каждое n независимо равно 0, 1 или 2 и каждое р независимо равно 0, 1 или 2. Изобретение относится также к фармацевтической композиции, содержащей указанное соединение. 2 н. и 12 з.п ф-лы, 33 табл., 951 пр.
1. Соединение формулы (I)
или его фармацевтически приемлемая соль,
где R1 и R2 каждый независимо означают Н или С1-С6-алкил;
или R1 и R2 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют С3-С6-циклоалкил;
R3 означает С1-С6-алкил или С6-С10-арил;
R4 означает NR7C(O)R8 или CONR9R10;
или R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют С3-С8-циклоалкил или 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О и N, где указанный С3-С8-циклоалкил и 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-4 заместителями R12;
R7 означает Н или С1-С6-алкил;
R8 означает Н, С1-С6-алкил, С3-С8-циклоалкил, С6-С10-арил или 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О, S и N; где указанный С1-С6-алкил, С3-C8-циклоалкил, С6-С10-арил и 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-4 заместителями R13;
R9 означает С1-С6-алкил;
R10 означает С1-С6-алкил;
каждый R12 независимо выбран из группы, включающей:
(1) C1-С6-алкил,
(2) галоген,
(3) оксогруппу,
(4) -(СН2)рС3-С6-циклоалкил,
(5) -(СН2)рС6-С10-арил,
(6) -(CH2)phet, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О и N,
(7) -(CH2)p-OR14,
(8) -(CH2)p-NR15R16,
(9) -(CH2)p-C(O)R19,
(10) -(CH2)p-S(O)nR19 и
(11) -(CH2)p-C(O)OR20;
где указанный С1-С6-алкил, С3-С6-циклоалкил, С6-С10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо каждый независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил, и где указанный С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил необязательно замещены одним или большим количеством галогенов или одним или большим количеством гидроксилов;
или два заместителя R12 у соседних атомов С3-С8-циклоалкила или 3-8-членного насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют конденсированную бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R21;
R13 означает галоген, С1-С6-алкил, -ОС1-С6-алкил или С6-С10-арил, где в каждом случае указанный С1-С6-алкил независимо необязательно замещен одним или большим количеством галогенов и где указанный С6-С10-арил необязательно замещен 1-4 заместителями, выбранными из галогена, гидроксила или C1-C6-алкила;
R14 означает Н или С1-С6-алкил;
R15 означает Н или С1-С6-алкил;
R16 означает С6-С10-арил;
R19 и R20 все независимо означают Н, С1-С6-алкил, С2-С6-алкинил, С3-С6-циклоалкил, С6-С12-арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О, S и N, где указанный С1-С6-алкил, С2-С6-алкинил, С3-С6-циклоалкил, С6-С12-арил и 5-10-членный гетероарил все необязательно независимо замещены одним или большим количеством заместителей R27;
R21 независимо выбран из группы, включающей Н, галоген, гидроксил, С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил, где указанный С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил все необязательно независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил и -ОС1-С6-алкил;
R27 означает галоген, гидроксил, нитрил, С1-С6-алкил, -О-С1-С6-алкил, -S-C1-С6-алкил, С(О)NHC1-С6-алкил, С3-С6-циклоалкил, С6-С10-арил, -О-С6-С10-арил, -О-С1-С2-алкил-С6-С10-арил или 5-8-членный гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О, S и N, где в каждом случае указанный С1-С6-алкил, С3-С6-циклоалкил, С6-С10-арил и 5-8-членный гетероарил независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, нитрил, С1-С6-алкил, -ОС1-С6-алкил и -N(С1-С6-алкил)2, где указанный С1-С6-алкил и -ОС1-С6-алкил все независимо замещены одним или большим количеством галогенов;
m равно 0, 1 или 2;
каждое n независимо равно 0, 1 или 2 и
каждое р независимо равно 0, 1 или 2;
при условии, что соединение 
исключено.
2. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 и R2 независимо означают Н или С1-С6-алкил.
3. Соединение по п. 1 или 2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 и R2 означают метил.
4. Соединение по любому из пп. 1-3 или его фармацевтически приемлемая соль, где R4 означает -NR7C(O)R8.
5. Соединение по любому из пп. 1-3 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют С3-С8-циклоалкил или 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О и N, где указанный С3-С8-циклоалкил и 3-8-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещены 1-4 заместителями R12.
6. Соединение по п. 5 или его фармацевтически приемлемая соль, где два заместителя R12 у соседних атомов С3-С8-циклоалкила или насыщенного или ненасыщенного гетероциклического кольца вместе с кольцевыми атомами, с которыми они связаны, образуют конденсированную бициклическую кольцевую систему, которая необязательно замещена одним или большим количеством заместителей R21.
7. Соединение по п. 5 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил, указанный циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил необязательно замещены 1-4 заместителями R12.
8. Соединение по п. 5 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют азетидин, пиперидин, пирролидин, морфолин, тетрагидрофуран или тетрагидропиран, указанный азетидин, пиперидин, пирролидин, морфолин, тетрагидрофуран и тетрагидропиран необязательно замещены 1-4 заместителями R12.
9. Соединение по п. 5 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 и R4 вместе с углеродом, с которым они связаны, образуют спироциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, выбранное из группы, включающей
,
где звездочка обозначает положение соединения спироциклического карбоциклического или гетероциклического кольца с цианоеноном, указанное спироциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо необязательно замещено 1-4 заместителями R12.
10. Соединение по п. 5 или его фармацевтически приемлемая соль, описывающееся формулой Ia-Id
,
где R12 выбран из группы, включающей гидроксил, С1-С6-алкил, -С(О)O-C1-С6-алкил, -С(О)-С1-С6-алкил, -С(О)-С3-С6-циклоалкил, -С(О)-С6-С10-арил, -C(O)-het, -S(О)2-С6-С10-арил, -С6-С10-арил, het, -СН2-С6-С10-арил, -СН2-С3-С6-циклоалкил и -CH2-het, где het означает 3-9-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей О и N, где в каждом случае указанный С1-С6-алкил, С3-С6-циклоалкил, С6-С10-арил и 3-9-членное гетероциклическое кольцо необязательно независимо замещены одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, гидроксил, С1-С6-алкил и -O-C1-C6-алкил.
11. Соединение по любому из пп. 1-10, которое выбрано из группы, включающей
или его фармацевтически приемлемая соль.
12. Фармацевтическая композиция для активации ядерного фактора Nrf2, содержащая эффективное количество соединения по любому из пп. 1-11 или его фармацевтически приемлемой соли вместе с одним или большим количеством фармацевтически приемлемых инертных наполнителей.
13. Соединение по любому из пп. 1-11 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии.
14. Соединение по любому из пп. 1-11 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения нейродегенеративного заболевания, выбранного из группы, включающей следующие: атаксия Фридрейха, боковой амиотрофический склероз, удар, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, периферическая невропатия и тугоухость у пациента.
| Станок для придания концам круглых радиаторных трубок шестигранного сечения | 1924 |
|
SU2019A1 |
| Многоступенчатая активно-реактивная турбина | 1924 |
|
SU2013A1 |
| Дровокольный станок | 1932 |
|
SU30431A1 |
| RU 2018101077 A, 15.07.2019. | |||
