СРЕДСТВО НА ОСНОВЕ ВОДОРАСТВОРИМЫХ РАСТИТЕЛЬНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОАЛЛЕРГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2024 года по МПК A61K31/715 A61K36/28 A61P37/08 

Изобретение относится к области медицины, а более конкретно - клинической иммунологии и поиску новых средств противоаллергического действия, и может быть использовано для фармакологической коррекции нарушений системы иммунитета, связанных с повышенной секрецией интерлейкина 4 и иммуноглобулинов G1.

По данным Всемирной Организации Здравоохранения на текущий момент аллергии различного генеза входят в Топ-3 после сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний, и по прогнозам к 2050 году аллергическим заболеваниям будет подвержена большая часть населения мира. Многочисленные эпидемиологические исследования в России и в мире объективно отражают неуклонный рост аллергопатологии, особенно у детей. В настоящее время аллергическим ринитом страдает от 10 до 30% людей, а ежегодный прирост диагностирования ринита составляет 5-10% в общей практике и 10-12% в популяционных исследованиях. В различных регионах Российской Федерации в зависимости от социально-экономического статуса, уровня развития промышленности и/или сельского хозяйства, метеоусловий проживания и санитарно-бытового состояния населенных пунктов распространенность аллергических заболеваний колеблется от 17 до 30% (данные эпидемиологических исследований ФГБУ ГНЦ «Институт иммунологии ФМБА России»). Уже сейчас аллергиком является каждый третий взрослый россиянин и каждый четвертый ребенок. Резкий рост заболеваемости и аллергенной нагрузки на человека, связанные с загрязнением окружающей среды (атмосферного воздуха и почвы), а также питьевой воды и продуктов питания, расширением арсенала бытовых химических веществ, которые выступают аллергенами, делает аллергию важной медико-социальной проблемой [1, 2, 3].

Известно, что в основе патогенеза аллергии/атопии лежит активация синтеза иммуноглобулина Е и G1l (IgE и IgG1) и дезрегуляция продукции Тh1 и Th2 цитокинов, а именно увеличение экспрессии генов Тh2-цитокинов (ИЛ-4, -5, -13) и усиление активности В-лимфоцитов. Антиген, связываясь с Ig, специфическим к аллергену, запускает синтез простагландинов, лейкотриенов, цитокинов и высвобождение из тучных клеток, тканевых базофилов или базофилов крови медиаторов воспаления (гистамин, гепарин, протеазы, хемотаксические факторы), которые вызывают проявление симптомов воспаления: вазодилатацию и гиперсекрецию слизи, увеличение проницаемости капилляров, сокращение гладкой мускулатуры, инфильтрацию тканей эозинофилами, лимфоцитами и пр. Для блокады аллергических реакций применяют следующие группы лекарственных препаратов, во-первых, Hi-антигистаминные средства (кларитин, супрастин, терфенадин, лоратадин, цетиризин и пр.), во-вторых, стабилизаторы мембран тучных клеток (кетотифен, недокромил натрия, кромоглициевая кислота и пр.), и третья группа - это антагонисты лейкотриеновых рецепторов (монтелукаст, зафирлукаст и др.) [3, 4, 5, 6]. При длительном применении противогистаминных средств, обладающих широким спектром побочных явлений и противопоказаний, лечебный эффект постепенно ослабевает, что предполагает регулярную замену одного препарата другим.

Поэтому создание новых эффективных и безопасных, чем имеющиеся средства, препаратов является важной задачей. Противоаллергические средства растительного происхождения таргетного действия, целенаправленно влияющие на те, или иные звенья иммунной системы, обладают рядом преимуществ, как то минимальное количество побочных эффектов и противопоказаний, возможность применения в педиатрии, а также у пожилых лиц со сниженной реактивностью иммунной системы, при хронических атопических заболеваниях.

Соссюрея иволистная (Saussurea salicifolia (L.) DC) - многолетнее травянистое растение с толстым, деревянистым корнем, многочисленными войлочными стеблями и розово-фиолетовыми цветками - не является фармакопейным растением и не входит в Государственный Реестр лекарственных средств, однако разрешено к применению в качестве сырья для производства биологически активных добавок. Надземная часть Соссюреи иволистной содержит не менее 2% дубильных веществ, 2,5% сесквитерпеновых лактонов, 1% флавоноидов (апигенин, кверцетин, гиперозид), кумарины эскулетин и умбеллиферон, алкалоиды соссюрин и куштин, тритерпеновые сапонины (агликоны амирина и олеаноловой кислоты), органические кислоты, включая яблочную, янтарную и лимонную, эфирные масла и микроэлементы (медь, железо, магний, цинк). Растение включено в состав ряда сборов противопаразитарного действия, таких как «Саусифол», «Паразинол», «Версулямбин» и др., которые используется для лечения лямблиоза, описторхоза и микс-инвазий. Растение используют в качестве общеукрепляющего средства, способного улучшать местный иммунитет и функциональное состояние желудочно-кишечного тракта, за счет подавления жизнедеятельности патогенных бактерий, а также как обладающего желчегонным, антитоксическим и противовоспалительным действием. Доказана низкая токсичность экстракта Соссюреи иволистной и отсутствие у него иммунотоксических и аллергизирующих свойств. Соссюрея иволистная за счет высокого содержания стероидных соединений регулирует всасывание холестерина в желудочно-кишечном тракте и способствуют расщеплению липопротеинов низкой плотности. Существуют данные, что соссюрея иволистная может оказывать противоопухолевое действие и положительно влиять на гормональный обмен, как у женщин, так и у мужчин [7, 8, 9, 10].

В предыдущих исследованиях авторами показано, что нативные безбелковые водорастворимые полисахариды, выделенные из надземной части соссюреи иволистной (Saussurea salicifolia (L.) DC) путем предварительного удаления из растительного сырья липофильных и фенольных компонентов, выделения и осаждения суммы полисахаридов с их последующей очисткой от белка и примеси эндотоксина, эффективно стимулировали продукцию оксида азота макрофагами мышей [11, 12].

Задачей данного изобретения является расширение арсенала безопасных противоаллергических средств природного происхождения, обладающих выраженной противоаллергической активностью. Поставленная задача решается путем применения водорастворимых полисахаридов, представленных арабиногалактоуронанами, выделенных из надземной части соссюреи иволистной (Saussurea salicifolia (L.) DC), обладающих противоаллергической активностью за счет угнетения секреции G1, ИЛ-4 и подавления Тh2-зависимых реакций, а также усиления стабилизации мембран тучных клеток.

Принципиально новым в предлагаемом изобретении является применение в качестве противоаллергического средства водорастворимых полисахаридов со средневесовой молекулярной массой 158,49 кДа, представленных арабиногалактоуронанами, выделенных из надземной части соссюреи иволистной (Saussurea salicifolia (L.) DC), новые свойства которых были выявлены в результате экспериментальных исследований и для специалиста, явным образом, не вытекают из уровня техники, и их описание не обнаружено авторами в патентной и научно-медицинской литературе.

Таким образом, предлагаемое техническое решение соответствует критериям изобретения, а именно - «новизна», «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».

Изобретение будет понятно из следующего описания.

Водорастворимые полисахариды (ВРПС SS) выделяли из высушенной до воздушно-сухого состояния (содержание влаги 6.0%) надземной части соссюреи иволистной. Сырье измельчали, депигментировали и очищали от липофильных и фенольных компонентов путем последовательной обработки хлороформом, этилацетатом и 96% этанолом. Затем трижды экстрагировали водой очищенной при температуре 25°С в течение 0,5 ч. Экстракты объединяли, концентрировали на роторном испарителе и полученный концентрат капельно переносили в колбу, содержащую 96% этанол при постоянном перемешивании в соотношении 1:4. Центрифугировали, осадок промывали этанолом, высушивали, подвергали очистке от белка по методу Севага, диализовали против воды в течение 30 ч и лиофилизировали. Содержание уроновых кислот (УК) в ВРПС SS определяли спектрофотометрическим методом, основанном на реакции углеводов с 3,5 - диметилфенолом в присутствии серной кислоты, белка - методом Лоури (ОФС.1.2.3.0012.15 - метод 2 В). Измерение проводили при двух длинах волн 400 и 450 нм, с использованием градуировочного графика, построенного для растворов галактуроновой кислоты [13].

Мономерный состав определяли методом газожидкостной хроматографии после проведения полного кислотного гидролиза трифторуксусной кислотой и перевода моноз в соответствующие ацетаты полиолов. Выявлено, что полисахаридный комплекс ВРПС SS на 83,3% состоит из 30 фрагментов с молекулярной массой от 5,4 до 377,6 кДа и на 16,7% из 5 соединений с молекулярной массой ниже 5 кДа (от 2,5 до 4,4 кДа), средневесовая молекулярная масса (Mw) - 158,49 кДа, среднечисленная молекулярная масса (Мп) - 13,37 кДа, индекс гетерогенности (Mw/Mn) - 11,9. Как показано в таблице 1, ВРПС SS представляет собой арабиногалактоуронан, состоящий из доминирующих мономерных компонентов - галактозы, арабинозы, уроновых кислот и второстепенных компонентов -глюкозы, рамнозы, ксилозы и маннозы, в молярном отношении 11,5:7,3:7,1:3:2:1,6:0,8. Белок в полисахаридном комплексе ВРПС SS не обнаружен.

Оценку биологической активности согласно ВРПС SS проводили на лабораторных животных, полученных из отдела экспериментальных биологических моделей НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга Томский НИМЦ РАН (протокол биоэтического комитета НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга №171052020 от 18.052020 г.). Содержание, умерщвление животных, введение исследуемых веществ, осуществляли в соответствии с ГОСТ 33216-2014 [14].

Развитие ТЬ2-зависимого иммунного ответа моделировали трехкратным введением под кожу бедра 100 мкг овальбумина (OVA) и 5 мг гидроокиси алюминия (оба «Sigma», США) в качестве адъюванта в 0,1 мл физиологического раствора (ФР) с интервалом 3 недели у аутбредных мышей CDI (60 голов, возраст 7-8 недель) или мышей линии BALB/c (30 голов, возраст 7-8 недель) [15]. ВРПС SS в дозе 10 мг/кг или препарат положительного контроля супрастин в дозе 20 мг/кг ежедневно вводили внутрибрюшинной инъекцией в объеме 0,1 мл курсом 20 дней, начиная за 5 дней до каждой иммунизации OVA и в течение 5 дней после третьей иммунизации. Контрольная группа мышей получала 0,1 мл ФР. Через 7 суток после последней иммунизации у мышей CDI оценивали локальную реакцию гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ), а у наркотизированных углекислым газом животных (BALB/c) отбирали кровь из сердца, отделяя центрифугированием сыворотку, которую использовали для определения концентрации иммуноглобулинов или оценки непрямой реакции дегрануляции тучных клеток (НДТК).

Для определения ГНТ мышам опытных групп подкожно в подушечку задней лапы (опытная лапа - Мо) в 50 мкл ФР вводили 20 мкг овальбумина (OVA, «Sigma», США), а в контралатеральную лапу (контрольная лапа - Мк) 50 мкл ФР. Местную воспалительную реакцию оценивали через 4 часа, для чего животных забивали, обе лапы отрезали по выступу кости ниже сочленения мало- и большеберцовой кости и выше пяточного сустава. Величину реакции (разница массы Мо и Мк) выражали в мг.

Определение содержания IgGl проводили иммуноферментным методом в сыворотке крови мышей с использованием соответствующей тест-системы («eBioscience») согласно прилагаемым к ним протоколам.

Дегрануляцию тучных клеток (ПДТК - показатель дегрануляции тучных клеток) оценивали в тесте, смешивая в равных пропорциях на обезжиренных и окрашенных нейтральным красным стеклах тучные клетки, выделенные из брюшной полости аутбредных крыс Wistar (3 головы, возраст 7-8 недель), сыворотку крови иммунизированных мышей, получавших курс ВРПС SS, и OVA в концентрации, не вызывающей спонтанной дегрануляции. После инкубирования (15 минут, 37°С) и при помощи светового микроскопа подсчитывали количество клеток разной степени дегрануляции (на 100 клеток), используя формулу:

где а - количество дегранулированных клеток со слабовыраженной, б - умеренной, с - резкой, д - полной степенями дегрануляции.

Системную реакцию анафилаксии у морских свинок-альбиносов (30 голов, возраст 5-6 недель) вызывали, иммунизируя животных перорально 1% раствором OVA в физиологическом растворе в дозе 0,5 мл на 250 г массы тела в течение трех дней. Начиная с первого дня иммунизации, в течение 7 дней опытной группе морских свинок вводили один раз в сутки внутрибрюшинной инъекцией ВРПС в дозе 10 г/кг веса, растворенные в ФР, животные контрольной группы получали эквивалентный объем ФР. Супрастин 20 мг/кг вводили подкожно за 2 ч до введения разрешающей дозы OVA. Через 14 суток после первой иммунизации морским свинкам внутривенно вводили раствор OVA в ФР из расчета 1 мг на 300 г массы тела. Интенсивность системной реакции анафилаксии (анафилактический индекс - АИ) по Weigle вычисляли по формуле:

где n - летальные исходы; n₁ - тяжелый шок; n₂ - умеренный шок; n₃ - слабый шок; n₄ - шока не наступило.

Для определения уровня цитокинов из вымытой ледяным ФР взвеси перитонеальных клеток мышей линии C57/BL6 (45 голов, возраст 8-9 недель) с помощью набора EasySep™ Biotin Positive Selection Kit и антител специфических к макрофагальным рецепторам Anti-Mouse F4/80 Antibody («Stem Cell», США) фракционировали зрелые макрофаги (МФ). Спленоциты выделяли двукратной отмывкой физиологическим раствором (ФР) гомогената селезенки. Моноуклеары (Мн) получали из фракции клеток цельной крови здоровых доноров, сформировавших кольцо на градиенте плотности жидкости для сепарации «Histopaque-1077» («Sigma», США) после 15-минутного центрифугирования при 400 g. Все виды клеток отмывали, ресуспендировали в культуральной среде, оценивали жизнеспособность. Далее клетки (2,5-3×10⁶) в 96-луночных планшетах в присутствии различных концентраций ВРПС или митогенов (ЛПС 0,1 мкг/мл, Кон А 4 мкг/мл или митогена лаконоса 5 мкг/мл («Sigma», США)) культивировали 24 часа (37°С, 5% СO₂, 100% влажность) в полной культуральной среде (RPMI 1640 («Sigma», США) с добавлением 10% ЭТС («Нус1опе», Великобритания), 20 мМ HEPES («Sigma», США), 0,05 мМ 2-меркаптоэтанола («Sigma», США), 50 мкг/мл гентамицина (Sigma», США) и 2 мМ L-глютамина («Sigma», США)), собирали супернатанты, в которых измеряли концентрацию соответствующих цитокинов, используя коммерческие тест-системы.

Полученные в ходе исследования данные обрабатывали с помощью пакета статистических программ Statistica 13.3, используя критерий Шапиро-Уилка для проверки нормальности распределения, однофакторный дисперсионный анализ и критерий Даннета. Результаты представлены в виде Х±m, где X - среднее значение, m - стандартная ошибка среднего. Уровень статистической значимости различий р<0,05, объем выборки от m=5 до m=10.

Пример 1.

Показано, что курсовое введение морским свинкам водорастворимых полисахаридов со средневесовой молекулярной массой 158,49 кДа, представленных арабиногалактоуронанами, выделенных из надземной части соссюреи иволистной (S. salicifolia (L.) DC), приводило к снижению индекса системной реакции анафилаксии по Weigle в 1,45 раза на уровне препарата сравнения - супрастина (табл.2). Анафилактическая реакции зафиксирована у 8 из 10 животных (две головы с летальным исходом, у двух развился тяжелый шок, у двух умеренный и двух слабый шок). В контрольной группе у 9 из 10 животных были выявлены признаки анафилактического шока, и индекс реакции по Weigle составил 2,9: три морские свинки погибли, у пяти развился тяжелый шок, у одной - умеренный.

Гиперчувствительность немедленного типа (ГНТ), обусловленная выработкой специфических антител (IgE, IgGI) развивается через несколько минут или часов после воздействия аллергена и проявляется в виде сыпи, отека, зуда, бронхоспазма за счет расширения сосудов и повышения их проницаемости. Величина отека опытной лапы при введении аллергена OVA у иммунизированных мышей, получавших курс ВРПС SS, через 4 часа снижалась в 1,4 раза по сравнению с контрольной группой, что было сравнимо с введением супрастина.

Таким образом, курсовое введение водорастворимых полисахаридов, выделенных из надземной части соссюреи иволистной (S. salicifolia (L.) DC), приводило к угнетению интенсивности системной реакции анафилаксии и снижению гиперчувствительности немедленного типа в 1,5 раза.

Пример 2.

Концентрация IgG1 снижалась в 1,8 раза у мышей леченных ВРПС SS, что значимо в 1,4 раза превышало эффективность приема препарата сравнения - супрастина (табл. 3).

Таким образом, снижение аллергической реакции у OVA-иммунизированных мышей, получавших курс ВРПС SS, сопровождалось подавлением образованиия иммунного комплекса IgG1 с антигеном.

Пример 3. Тучные клетки

Влияние ВРПС SS на Th2 тип иммунного ответа оценивали также по их влиянию на непрямую дегрануляцию тучных клеток. Известно, что тучные клетки играют ключевую роль в развитии аллергических и анафилактических реакций, поскольку контактируют с Fc-участками молекул IgE, связавшими антиген (кросс-связывание), в результате чего запускается высвобождение содержимого гранул, состоящих их вазоактивных аминов (прежде всего, гистамин, гепарин, серотонин). Разработка препаратов, направленных на стабилизацию мембран тучных клеток, препятствующих открытию кальциевых каналов, входу кальция в тучные клетки и их дегрануляции, является актуальной проблемой.

Эксперименты показали, что сыворотка животных, сенсибилизированных овальбумином и получавших курс ВРПС SS, снижала показатель дегрануляции тучных клеток в присутствии овальбумина в 2,9 раза по сравнению с сывороткой животных контрольной группы и существенно в 1,8 раза эффективнее препарата сравнения -супрастина (табл. 4).

Таким образом, курсовое введение ПС на фоне иммунизации овальбумином способствует стабилизации мембран тучных клеток.

Пример 4.

Митоген-активированные макрофаги мышей в присутствии ВРПС SS снижали в 1,5 раза продукцию ключевого цитокина ИЛ-4, определяющего возникновение и протекание аллергической реакции, и, следовательно, препятствовали дифференцировке Th0 в Th2 и синтезу иммуноглобулинов В-лимфоцитами. На Мн ВРПС не оказывали влияния (табл. 5).

Параллельная оценка продукции ИФН-у - плейотропного медиатора, обладающего противовирусной и иммуномодулирующей активностью, показала, что инкубирование лимфоцитов мышей с ВРПС SS приводило к повышению концентрацию цитокина в супернатанте клеток в 27 раз аналогично влиянию Кон А. На фоне митоген-стимуляции уровень продукции ИФН-γ вырастал еще в 6,5 раз, что указывает на смещение баланса Th1/Th2 в сторону Тh1 и, таким образом, усиление противоаллергических свойств. Оценка содержания ИЛ-2 не выявила влияния ВРПС SS, очевидно потому, что ИЛ-2 служит обеим задачам, как стимуляции иммунного ответа, так и его контролю и сдерживанию.

Таким образом, экспериментально установлено, что водорастворимые полисахариды со средневесовой молекулярной массой 158,49 кДа, представленные арабиногалактоуронанами, выделенные из надземной части соссюреи иволистной (S. salicifolia (L.) DC), обладают способностью снижать интенсивность системной реакции анафилаксии и гиперчувствительность немедленного типа, продукцию ключевого цитокина ИЛ-4 и подавлять синтез антигенспецифических иммуноглобулинов классов G1, а также способствовать стабилизации мембран тучных клеток, что позволяет рассматривать арабиногалактоуронаны, экстрагированные из соссюреи иволистной, в качестве основы для разработки высокоэффективных и малотоксичных противоаллергических средств растительного происхождения.

Список литературы

1. Швецова, Е.С. Распространенность аллергических заболеваний среди всех возрастных групп населения Липецкой области / Е.С. Швецова, Т.С. Короткова // Современные проблемы науки и образования. - 2017. - №4.

2. Эрназарова, X.X. Распространеность аллергических заболеваний в мире / Х.Х. Эрназарова, З.У. Адылова // International scientific review. - 2017. - с. 111-113.

3. Хаитов, P.M. Руководство по клинической иммунологии: Диагностика заболеваний иммунной системы / P.M. Хаитов - Издательство: ГЭОТАР-Медиа, 2009, 256 стр.

4. Энциклопедия лекарств «РЛС». https://www.rlsnet.ru

5. Левина, Ю.Г. Оценка эффективности антагонистов лейкотриеновых рецепторов в терапии бронхиальной астмы у детей / Ю.Г. Левина, Л.С.Намазова-Баранова // Педиатрическая фармакология. - 2009. - Т. 6/ №4, стр. 84-87.

6. Жункейра, Л.К. Гистология / Л.К. Жункейра, Ж. Карнейро // М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 576 с. - ISBN 978-5-9704-1352-4.

7. «Растительные ресурсы СССР: цветковые растения, их химический состав, использование» под редакцией П. Соколова, «Наука» Санкт-Петербург, 1993 г. - с. 165-170.

8. Бычкова, Н.К. «Фармакологические исследования соссюреи иволистной», тезисы доклада международной конференции / Н.К. Бычкова, Е.А. Краснов и др. // «Разработка и внедрение новых лекарственных средств и организационных форм фармацевтической деятельности», Томск, 2000 г. - с. 132-133.

9. Соколов, П.Д. (отв. ред.) Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейство Asteraceae (Compositae) СПб: Наука, 1993. - 352 с.

10. Краснов, Е.А. Разработка психотропных и противопаразитарных лекарственных средств / Е.А. Краснов и др. // Актуальные проблемы фармакологии и поиска новых лекарственных препаратов: материалы науч. конф., посвящ. 15-летию НИИ фармакологии: Томск. - 1999. - с. 197-200.

11. Патент №2018146344 RU, А61К 31/715, А61К 36/28, опубликован 25.06.2020.

12. Лигачева, А.А. Иммунотропное влияние водорастворимых полисахаридов растений рода Saussurea на активность NO-синтазы перитонеальных макрофагов мышей / А.А. Лигачева, Е.И. Гулина, Ю.В. Шабанова и др. // Разработка и регистрация лекарственных средств. - 2022. Т. 11. - №2. - С.59-64. https://doi.org/10.33380/2305-2066-2022-11-2-59-64

13. Корж, А.П. Количественное определение полисахаридов в корневищах аира болотного / Корж А.П., Гурьев А.М, Белоусов М.Д., Юсубов М..С..// Фармация. - М., 2011. - №4. - С. 24-26.

14. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. 4.1. - М.: Гриф и К. 2013. - С.51-63.

15. Modulation of antigen-induced В and Т cell responses by antigen-specific IgE antibodies / A.Oshiba, [et al.] // J. Immunol. - 1997. - Vol.159. - P.4 056-4063.

Изобретение относится к области фармацевтической промышленности, а именно к применению водорастворимых полисахаридов в качестве противоаллергического средства. Применение водорастворимых полисахаридов со средневесовой молекулярной массой 158,49 кДа, представленных арабиногалактоуронанами, выделенных из надземной части соссюреи иволистной (S. salicifolia (L.) DC.), в качестве противоаллергического средства, подавляющего развитие ранних стадий аллергических реакций за счет подавления продукции ключевого цитокина ИЛ-4 и овальбумин-специфических иммуноглобулинов класса G1, снижения тяжести протекания системной реакции анафилаксии и локальной гиперчувствительности немедленного типа, а также повышения стабилизации мембран тучных клеток. Использование изобретения обеспечивает противоаллергическое действие, подавляющее развитие ранних стадий аллергических реакций за счет подавления продукции ключевого цитокина ИЛ-4 и овальбумин-специфических иммуноглобулинов класса G1, снижение тяжести протекания системной реакции анафилаксии и локальной гиперчувствительности немедленного типа, а также повышение стабилизации мембран тучных клеток. 5 табл., 4 пр.

Применение водорастворимых полисахаридов со средневесовой молекулярной массой 158,49 кДа, представленных арабиногалактоуронанами, выделенных из надземной части соссюреи иволистной (S. salicifolia (L.) DC.), в качестве противоаллергического средства, подавляющего развитие ранних стадий аллергических реакций за счет подавления продукции ключевого цитокина ИЛ-4 и овальбумин-специфических иммуноглобулинов класса G1, снижения тяжести протекания системной реакции анафилаксии и локальной гиперчувствительности немедленного типа, а также повышения стабилизации мембран тучных клеток.