Способ повышения эффективности иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота Российский патент 2024 года по МПК A61K31/00 

Изобретение относится к вирусологии и иммунологии, к частности способа иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота.

Эффективность ряда препаратов, воздействующих на иммунитет у крупного рогатого скота при лейкозе, таких как левомизол, унитиол, ронколейкин, ликопид, АСД, хитозан, катозал, и т.д., не изучено и практического применения они пока не имеют. Известны способы оздоровления хозяйств от лейкоза при использовании иммуномодуляторов. Однако они не получили широкого распространения.

Применение нынешних и разработка новых иммуномодулирующих препаратов в ветеринарии связана в связи с большим распространением среди животных, особенно молодых, вторичных иммунодефицитов, в частности возникающий при лейкозе крупного рогатого скота.

Иммунодефициты связаны с неблагоприятным влиянием на животных загрязненной окружающей среды в результате влияния деятельности человека, а также воздействие патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Введение иммуномодуляторов в организм при условии объективных показателей в нарушении конкретного звена иммунной системы позволяет изменить иммунный статус животного, устранить или снизить дисбаланс иммунологических показателей.

Известно применение различных иммуномодуляторов при лейкозе КРС №2621146 от 31.05.2017 г. Также известно применение препарата Миксоферон, используемого с целью профилактики эмбриональной смертности и внутриутробной задержки развития эмбрионов у молочных коров №2684784 от 15.04.2019 г. Кроме того, препарат Гамавит также используют при профилактике различных патологических состояний № 2787088 от 28.12.2022 г.

Также известен способ иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота (журнал ученые записки УО ВГАВМ, т.53, вып.1, с. 104-108, 2017 г. «Совершенствование методов элиминации лейкоза крупного рогатого скота в племенном хозяйстве», авторов Некрасов А.А. и др. - прототип).

В научно-производственном опыте по оздоровлению от лейкоза и респираторных инфекционных заболеваний молодняка крупного рогатого скота достигнуто резкое сокращение заболеваемости телят и полная элиминация лейкоза в стаде. Использованы селекционно-генетические методы и комплексная иммунопрофилактика с иммуномодуляторами Ронколейкином, Полиоксидонием и Миксофероном.

Недостатком известного способа является не достаточная эффективность иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота, из-за проведения на различных этапах выпаивания гипериммунных сывороток и проведения вакцинации, также изучено недостаточное количество иммунологических показателей на разных этапах.

Техническим результатом изобретения является повышение эффективности иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота.

Технический результат достигается тем, что в способе повышения эффективности иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота, включающем применение препарата Миксоферона, согласно изобретению дополнительно используют препарат Гамавит для глубокостельных коров, при этом препарат Миксоферон вводят подкожно два раза с интервалом 12 часов на 250 и 259 дни стельности по 2 мл в количестве 20 доз, совместно с ним применяют препарат Гамавит в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 250, 254, 256 и 259 дни стельности, а новорожденным телятам препарат Миксоферон вводят подкожно в течение 7 дней и на 25-30 день после рождения по 1 мл в количестве 10 доз, а препарат Гамавит применяют в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 1-й, 3-й, 5-й, 7-й и 21-й дни жизни телят.

Сопоставительный анализ заявляемого решения с известными способами предупреждения риска лейкоза крупного рогатого скота позволяет сделать вывод, о его соответствии критерию «НОВИЗНА», так как в результате проведенного патентно-информационного поиска, предлагаемая совокупность существенных признаков изобретения не обнаружена.

Сопоставление заявленного технического решения с известными позволили выявить признаки, не являющиеся очевидными для специалиста отрасли в связи с достигаемым всей совокупностью существенных признаков техническим результатом. Это позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «ИЗОБРЕТАТЕЛЬСКИЙ УРОВЕНЬ».

Заявляемое техническое решение соответствует критерию «ПРОМЫШЛЕННАЯ ПРИМЕНИМОСТЬ», так как может быть использовано при профилактике лейкоза телят, полученных от инфицированных вирусом лейкоза коров, в условиях существующих предприятий.

Способ повышения эффективности иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота, осуществляют следующим образом.

Одновременно с применением препарата Миксоферона, дополнительно используют препарат Гамавит для глубоко стельных коров. Препарат Миксоферон вводят глубокостельным коровам подкожно два раза с интервалом 12 ч на 250 и 259 дни стельности по 2 мл в количестве 20 доз, совместно с ним применяют препарат Гамавит в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 250, 254, 256 и 259 дни стельности.

Новорожденным телятам препарат Миксоферон вводят подкожно в течение 7 дней и на 25-30 день после рождения по 1 мл в количестве 10 доз, а препарат Гамавит применяют в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 1-й, 3-й, 5-й, 7-й и 21 -й дни жизни телят.

Препарат Миксоферон раствор для инъекций (Mixoferon solutio pro injectionibus) официально зарегистрированный на территории РФ препарат 32-3-5.15-2655 № ПВР-3-1.0/02524. Международное непатентованное наименование: Интерферон альфа 2b. Миксоферон раствор для инъекций в 1 мл содержит смесь белков интерферона альфа 2b с противовирусной активностью 5-105 (5 доз) и 10-105 (10 доз) международных единиц (ME) и вспомогательные компоненты: реополиглюкин, натрий фосфорнокислый двузамещенный, калий фосфорнокислый однозамещенный, а также воду для инъекций. По внешнему виду лекарственный препарат представляет собой прозрачную бесцветную жидкость. Миксоферон раствор для инъекций относится к препаратам группы интерферонов. Миксоферон раствор для инъекций обладает противовирусным и иммуномодулирующим действием. Подавляет размножение как ДНК-, так и РНК-содержащих вирусов, ингибируя экспрессию вирусных генов. Иммуномодулирующее действие интерферона включает воздействие на клеточные звенья иммунной системы: стимулирует литическую активность лимфоцитов, специфических цитотоксичных Т-лимфоцитов и макрофагов, влияет на образование специфических антител В-лимфоцитами, регулирует экспрессию антигенов KLA на мембранах клеток и стимулирует выработку собственного интерферона альфа.

Препарат Гамавит (Gamavit) официально зарегистрированный на территории РФ препарат 77-3-5.14-2020 №ПВР-3-3.3/01313. Международное непатентованное наименование: Нуклеинат натрия и кислотный гидролизат плаценты денатурированной эмульгированной (ПДЭ). Гамавит в качестве действующих веществ в 1 мл содержит: нуклеинат натрия - 0,02 мг и кислотный гидролизат плаценты денатурированной эмульгированной (ПДЭ) - 0,50 мг, а в качестве вспомогательных веществ - среду 199 (10-ти кратный концентрат) и воду для инъекций. Гамавит по внешнему виду представляет собой прозрачную жидкость красного цвета, относится к комбинированным иммуномодулирующим лекарственным препаратам. Применение препарата стимулирует естественную резистентность, повышает бактерицидную активность сыворотки крови, устойчивость животных к стрессу и чрезмерным нагрузкам, оказывает иммуномодулирующее действие, повышает сохранность и привесы молодняка.

Заявляемый способ повышения эффективности иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота поясняется конкретным примером.

Для доказательства эффективности заявляемого способа были проведены производственные опыты в ЛПХ Лазарев Н.В.

Для проведения этих опытов, были сформированы две группы по 10 глубокостельных коров, положительно реагирующих на реакцию иммунодиффузии (РИД).

1-я группа (контрольная группа) - животные, положительно реагирующие в РИД.

2-я группа (опытная группа) - животные, положительно реагирующие в РИД, которым применили схему иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота.

Предварительно изучили гематологические и биохимические показатели инфицированных ВЛКРС стельных коров. Фоновые исследования в крови коров было выявлено снижение от физиологической нормы ряда показателей (таблица 1). Зарегистрировано уменьшение уровня общего белка, снижение концентрации мочевины, наблюдется нарушение углеводного и жирового обменов, выявлено нарушение Са:Р соотношения, отмечено понижение содержание цинка и железа, а также уменьшение концентрации каротина и ретинола. Установлен дисбаланс в обмене веществ, характеризующийся нарушением белкового, углеводного, минерального и витаминного обменов.

Для нормализации выявленных нарушений были использованы препараты Миксоферон и Гамавит. Миксоферон вводили подкожно два раза (с интервалом 12 часов) на 250 и 259 дни стельности по 2 мл (20 доз). Совместно с Миксофероном применяли Гамавит в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 250, 254, 256 и 259 дни стельности.

После проведения иммунопрофилактики на 259 день стельности наблюдается положительная динамика после применения препаратов контрольной группы в сравнении с опытной, о чем свидетельствуют морфо-биологические показатели (таблица 1).

У животных опытной группы достоверно возрос уровень общего белка, в сравнении с фоновыми данными на 22,9%, что указывает на активизацию обменных процессов в организме и мобилизацию резервов для пластических и энергетических затрат. Миксоферон и Гамавит оказал стабилизирующее влияние на фракционный состав белка, при этом достоверно увеличилось количество альбуминов. При рассмотрении глобулиновых фракций отмечено, что в группе, где использовали Миксоферон и Гамавит содержание β- и γ-глобулинов оптимизировалось. В опытной группе количество мочевины нормализовалось. Данные по витаминному составу, установили достоверное увеличение концентраций каротина и витамина А у животных опытной группы. Уровень кальция и фосфора не изменился, содержание цинка увеличилось на 20,7%, железа на 39,6%, соответственно в опытной группе.

В поздний предродовой и ранний послеродовой периоды одним из факторов, ведущих к развитию осложнений послеродового периода у коров и оказывающих неблагоприятное воздействие на потомство, является дисбаланс в течении антиоксидантных процессов в организме животного. В связи с этим нами изучались продукты перекисного окисления ненасыщенных жирных кислот в крови коров, участвующих в эксперименте таких как: диеновые конъюгаты (ДК) и кетодиены (КД), обуславливающие дальнейшее развитие цепи перекисного окисления липидов (ПОЛ); малоновый диальдегид (МДА); флюоресцирующие основания Шиффа. Результаты исследований приведены в таблице 2.

Позитивное влияние препаратов Миксоферона и Гамавита на показатели, характеризующие интенсивность ПОЛ у коров проявилось снижение в концентрации всех продуктов липопероксидации.

Наряду с изменениями прооксидантных процессов ПОЛ у коров опытной группы происходили изменения в системе антиоксидантной защиты. Так, при биохимических исследованиях мы установили, что под влиянием препарата возрос уровень каротина, являющегося представителем неферментного звена антиоксидантной защиты (АОЗ). Следовательно, введение стельным коровам, инфицированным ВЛ КРС препарата, способствует менее выраженной активации свободнорадикального окисления липидов в наиболее критический период перед родами.

Изучили показатели, характеризующие антиоксидантную защиту у телят, полученных от коров опытной и контрольной групп, инфицированных ВЛ КРС, на которых изучали влияние Миксоферона и Гамавита на иммунобиологические показатели и антиоксидантную защиту организма.

Показатели ПОЛ и АОЗ новорожденных телят после применения препаратов Миксоферона и Гамавита сухостойным коровам инфицированных ВЛ не имеют отличий. Авторы предполагают, что это связано с тем, что у крупного рогатого скота формирование полноценной системы антиоксидантной защиты происходит только к месячному возрасту. При этом у телят в возрасте 1-10 дней она полностью еще не оформлена и характеризуется низким функциональным потенциалом как ферментативного, так и не ферментативного звеньев АОЗ.

В связи с этим, нами была поставлена задача изучить влияние препарата через организм матери на интенсивность процесса ПОЛ новорожденных телят. Исследования проведены на 10 клинически здоровых телятах, разделенных на 2 группы по 5 животных в каждой. 1 (опытная) группа - телята от коров, которым в период сухостоя вводили Миксоферон и Гамавит (далее препараты), 2 (контрольная) группа - интактные животные. Уровень интенсивности процесса ПОЛ оценивался по содержанию в крови ДК, КД, МДА и ШО (таблица 3), а состояние антиоксидантной системы - по активности антиоксидантных ферментов: супероксиддисмутаза (СОД), каталаза (КАТ), глутатионпероксидаза (ГПО), глутатионредуктаза (ГР).

Установлено, что введение коровам в сухостойный период (последние 2 месяца стельности) препарата снижает интенсивность процессов перекисного окисления липидов у новорожденных телят.

Так, содержание первичных продуктов ПОЛ - конъюгированных диенов в опытной группе было достоверно ниже, чем в контрольной на 25,6%. В уровне же кетодиенов и оснований Шиффа происходили статистически недостоверные изменения - снижение на 8,1% и 15,9%. А вот уровень малонового диальдегида, наиболее токсичного из продуктов ПОЛ в 1 группе был ниже на 15%, и эта разница была достоверной.

На фоне снижения интенсивности ПОЛ антиоксидантная система адекватно реагирует увеличением своей активности. Поддержание нормального уровня обмена перекиси водорода и предотвращение ее накопления в клетках и тканях имеет жизненно важное значение. Основную роль в этом играют ферменты, которые избирательно катализируют разрушение ее молекул, в первую очередь каталаза. Как видно из таблицы 4, активность каталазы в группе отрицательного контроля составила 28,9±1,3 мкМН2 02/л.мин., что на 12,2% меньше чем в опытной группе.

По результатам исследований установлено, что препараты увеличивает количество селенозависимой глютатионпероксидазы на 21,1% по сравнению с отрицательным контролем. Активность СОД и ГР достоверно не отличались от показателей контрольной группы, хотя следует отметить наличие тенденции к увеличению ГР на 4,4% у опытных телят.

Таким образом, применение препаратов коровам, инфицированным ВЛКРС в период сухостоя, снижает интенсивность накопления продуктов перекисного окисления липидов у новорожденных телят, стимулируя при этом увеличение антиоксидантной системы, что создает наиболее благоприятные условия для роста и развития организма животного.

Провели оценку применения препаратов Миксоферона и Гамавита у телят с выраженным иммунодефицитным состоянием и их влияние на продолжительность колострального иммунитета при лейкозе КРС проводили на неблагополучном хозяйстве по лейкозу крупного рогатого скота. Сформировали 2 группы по 10 новорожденных телят, находящиеся в индивидуальных клетках. Все телята после выпойки молозива были серопозитивны в реакции иммунодиффузии (РИД). Миксоферон применяли подкожно телятам в течение 7 дней по 1 мл (10 доз). Гамавит применяли в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 1-й, 3-й, 5-й, 7-й и 21-й дни жизни.

Прослеживая динамику изменения гематологических и иммунологических показателей у них в ходе опыта, следует отметить, что применяемые препаратов оказывали на них определенное действие, которое, как правило, выражалось увеличением количественных значений показателей на 7 день опыта и снижением к 25-30 дню. Было принято решение на 25 день повторно ввести Миксоферон однократно в дозе 1 мл (10 доз). При применении Миксоферона отмечали более высокие, по сравнению с контрольной группой, выразившееся в повышении количества Т- и В-лимфоцитов, нормализации значения Т/В индекса и повышении в 1,3 раза уровня фагоцитарной активности. Кроме того, отмечено снижение лейкоцитарного Т-индекса в 1,8 раза, что является доказательством положительного коррегирующего действия препарата на иммунокомпетентную систему.

Применение препаратов Миксоферона и Гамавита не оказало влияния на продолжительность колострального иммунитета к лейкозу КРС: средний показатель инфицирования телок в 6-месячном возрасте на не оздоровленных фермах хозяйства 15,3%. В контрольной группе этот показатель в 4,5-месячном возрасте составил 15%, в 6-месячном - 15%, в 1-й опытной группе соответственно 20% и 10%, во второй - 20% и 5%.

Приведенный пример практического применения заявляемого способа демонстрирует достижение технического результата изобретения - повышение эффективности иммунопрофилактики Миксофероном и Гамавитом при лейкозе крупного рогатого скота.

Таким образом, применение Миксоферона и Гамавита увеличивает количество серопозитивных телят при ранних сроках исследований на 5% и снижает постнатальное инфицированние на 5-10%.

Изобретение относится к ветеринарии и касается способа иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота. Способ повышения эффективности иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота включает применение препарата Миксоферона, дополнительно используют препарат Гамавит для глубокостельных коров, при этом препарат Миксоферон вводят подкожно два раза с интервалом 12 ч на 250 и 259 дни стельности по 2 мл в количестве 20 доз, совместно с ним применяют препарат Гамавит в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 250, 254, 256 и 259 дни стельности, а новорожденным телятам препарат Миксоферон вводят подкожно в течение 7 дней и на 25-30 день после рождения по 1 мл в количестве 10 доз, а препарат Гамавит применяют в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 1-й, 3-й, 5-й, 7-й и 21-й дни жизни телят. Изобретение позволяет повысить эффективность иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота. 4 табл.

Способ повышения эффективности иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота, включающий применение препарата Миксоферона, отличающийся тем, что дополнительно используют препарат Гамавит для глубокостельных коров, при этом препарат Миксоферон вводят подкожно два раза с интервалом 12 ч на 250 и 259 дни стельности по 2 мл в количестве 20 доз, совместно с ним применяют препарат Гамавит в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 250, 254, 256 и 259 дни стельности, а новорожденным телятам препарат Миксоферон вводят подкожно в течение 7 дней и на 25-30 день после рождения по 1 мл в количестве 10 доз, а препарат Гамавит применяют в дозе 0,1 мл/кг массы тела на 1-й, 3-й, 5-й, 7-й и 21-й дни жизни телят.