Способ диагностики эндотелиальной дисфункции сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа Российский патент 2024 года по МПК G01N33/66 G01N33/68 G01N33/70 G01N33/72 G01N33/84 G01N33/92 G01N33/493 A61B5/21 A61B5/20 

Изобретение относится к области медицины: к эндокринологии и патофизиологии, в частности к диагностике эндотелиальной дисфункции сосудов почек и печени при сахарном диабете (СД) 2 типа.

В настоящее время СД 2 типа является одной из наиболее актуальных проблем современной медицинской науки вследствие его распространенности и развития микрососудистых осложнений ретинопатии, нефропатии, нейроангиопатии. Согласно прогнозам ФЦ по СД, к 2040 году численность больных в мире возрастет до 642 миллионов. Наиболее тяжелой формой сопутствующих патологий является нефропатия, способствующая у 40% больных СД развитию хронической недостаточности функции почек. Более 30% больных СД с почечной патологией нуждаются в гемодиализе.

Известен способ диагностики нарушений компенсации обмена веществ и прогнозирования риска развития осложнений у больных сахарным диабетом 2 типа путем оценки апоптоза лимфоцитов (см. патент РФ №2452965, MПК 01.2006 G01N 33/533, опубл. 10.06.2012 г.), при котором в периферической венозной крови определяют процентное содержание апоптических лимфоцитов АР+IPI-.

Недостатком данного способа является ограниченный подход, а также сложность, дороговизна проведения исследований и невозможность применения в клинических условиях.

Наиболее близким к заявляемому техническому решению является способ прогнозирования риска развития сахарного диабета 2 типа, включающий определение сахара в крови, холестерина липопротеинов высокой плотности - ХС ЛПВП, артериального давления - АД (см. патент РФ №12611900, МПК 01.2006 А61В 5/00, G01N 33/48, опубл. 01.09.2017 г.).

Недостатком данного способа является использование ограниченного подхода к лабораторным исследованиям, полное отсутствие показателей, характеризующих состояние сосудистой системы и функции почек и печени. Кроме того, способ требует использования специальных программ для обработки данных и не позволяет определить прогнозирование и определение риска развития микрососудистых осложнений СД 2 типа в клинических условиях.

Технический результат предлагаемого способа диагностики эндотелиальной дисфункции сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа заключается в повышении точности и достоверности уровня воспроизводимости, адекватности, доступности и полноты оценки метаболических и функциональных показателей, характеризующих данную патологию.

Технический результат достигается тем, что в способе диагностики эндотелиальной дисфункции сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа, включающем определение глюкозы в крови, ммоль/л, холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП), ммоль/л, артериального давления (АД), согласно изобретению, у больных утром натощак забирают кровь с цитратом, центрифугируют и дополнительно определяют в эритроцитах и плазме крови концентрацию гликированного гемоглобина (HbA1c) %, гидроперекисей (ГП), ммоль/л, малонового диальдегида (МДА), нмоль/мл, активность антиокислительной системы супероксиддисмутазы (СОД), усл. ед, органоспецифических ферментов: аланинаминотрансферазы (АлАТ), мкмоль/с*л, аспартатаминотрансферазы (АсАТ), мкмоль/с*л, гамма-глутамилтранспептидазы (ГГТП), нмоль/с*л, щелочной фосфатазы (ЩФ), нмоль/с*л, в плазме крови, и определяют содержание суммарных метаболитов оксида азота (NOx) мкмоль, общего холестерина (ОХС), ммоль/л, холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС ЛПНП), ммоль/л, клиренс эндогенного креатинина - скорость клубочковой фильтрации (СКФ), мл/мин/1,73 м², канальцевую реабсорбцию воды (R_H2O), % и натрия (R_Na), %, экскрецию с мочой натрия, %, и белка, г/24 ч, величину суточного диуреза, мл/24 ч, и при уровне глюкозы - 14,6 ± 0,5 ммоль/л, HbAlc - 10,4% ± 0,71 %, при активности АлАТ - 43,01 ± 4 мкмоль/с*л, активности АсАТ 35,17 ± 6 мкмоль/с*л, активности ГГТП - 165,4 ± 17 нмоль/ с*л, активности ЩФ - 183,3 ± 7 нмоль/ с*л, и при повышении ОХС от уровня нормы, при повышении ХС ЛПHП от уровня нормы, при снижении ХС ЛПВП от уровня нормы, при отклонении концентрации ГП в плазме крови от уровня нормы, равной 0,97 ± 0,09 ммоль/л, при отклонении концентрации МДА в эритроцитах от уровня нормы, равной 2,93 ± 0,177 нмоль/мл, при снижении активности СОД от уровня нормы, равной 3,55 ± 0,156 усл. ед, при снижении содержания NOx, при норме 53,64 ± 0,831 мкмоль, при повышении АД, при снижении СКФ от уровня нормы, равной 126,4 ± 8,56 мл/мин/1,73 м², при снижении R_H2О, при норме 99,2 ± 0,16 %, при снижении R_Na, при норме 98,85 ± 0,165 %, при повышении экскреции с мочой Na, при норме 63,4 ± 3,6 %, при повышении экскреции с мочой белка, при норме 0,045 ± 0,011 г/24 ч, и при увеличении суточного диуреза, при норме 1380 ± 115 мл/24 ч, диагностируют эндотелиальную дисфункцию сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа.

Данный способ диагностики эндотелиальной дисфункции сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа позволит повысить точность, достоверность, уровень воспроизводимости, доступность и безопасность жизнедеятельности организма больного человека.

Сущность способа поясняется графиками и таблицами, где на фиг. 1-4 изображена динамика уровня органоспецифических ферментов в плазме крови у больных СД 2 типа, в таблице 1 - изменение биохимических показателей крови у больных СД 2 типа, в таблице 2 - показатели функции почек у больных СД 2 типа.

Способ диагностики эндотелиальной дисфункции сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа осуществляли следующим образом.

Пример

У представителей контрольной группы и у больных СД 2 типа кровь для анализа брали утром натощак из локтевой вены с цитратом, центрифугировали при t=4°С в течение 15 мин при 2500 об/мин и получили плазму крови и эритроцитную массу, которую дважды промывали физиологическим раствором, а затем лизировали. В плазме крови определяли концентрацию глюкозы, HbAlc, ОХС, ХС ЛПНП, ХС ЛПВП, активность органоспецифических ферментов: АлАТ, АсАТ, ГГТП, ЩФ и NOx, а в гемолизате эритроцитов - концентрацию МДА и активность СОД, а также определяли по клиренсу эндогенного креатинина - СКФ мл/мин/1,73 м², рассчитывали канальцевую реабсорбцию воды и Na, экскрецию Na и белка с мочой, величину суточного диуреза.

Все биохимические и функциональные исследования проводили на базе лаборатории патобиохимии ИБМИ ВНЦ РАН, где определяли концентрацию глюкозы, HbAlc, интенсивность ПОЛ, о которой судили по изменению концентрации гидроперекисей, МДА в гемолизате эритроцитов, состояние АОС в эритроцитах оценивали по активности СОД, которую определяли методом аутоокисления адреналина. Концентрацию суммарных метаболитов оксида азота (NOx) определяли экспресс методом В.А. Метельской по реакции деазотирования. О нарушении метаболизма холестерина судили по данным общего ХС (ОХС), ХС ЛПНП, ХС ЛПВП, мочевины, клиренса эндогенного креатинина - СКФ, канальцевой реабсорбции воды R_H2O% и натрия R_Na% экскреции Na и белка с мочой, величине суточного диуреза. Функциональные показатели почек рассчитывали по формулам, разработанным акад. Ю.В. Наточиным.

Показателями повреждения мембран гепатоцита являлись данные уровня органоспецифических ферментов - АлАТ, АсАТ, ГГТП, ЩФ в плазме крови (см. фиг. 1-4).

Все вышеизложенные показатели определяли у здоровых лиц и у больных СД 2 типа при поступлении в стационар Республиканского эндокринологического диспансера г. Владикавказа в соответствии с договором. Анализ метаболических данных показал наличие стойкой гипергликемии и высокий уровень HbAlc, способствующие образованию активацию процесса ПОЛ, о чем свидетельствуют данные повышения концентрации гидроперекисей в плазме крови и МДА в гемолизате эритроцитов у больных СД 2 типа (см. табл. 1). Данные таблицы 1 показали снижение активности СОД в эритроцитах на фоне повышения концентрации МДА. В этих условиях активности ПОЛ данные показали снижение концентрации NOx, уровень которых находится в отрицательной корреляционной связи с содержанием МДА (r=-0.74, р<0.001). Одной из причин снижения уровня NOx может быть вследствие нарушенного обмена холестерина, повышения ОХС, ХС ЛПНП, снижения ХС ЛПВП, являющихся факторами развития эндотелия сосудов. Снижение уровня NOx в плазме крови и дисфункция эндотелия сосудов вызвали повышение величины АД при СД 2 типа. На фоне возрастания АД происходит нарушение адекватного взаимодействия между сосудистым тонусом приносящей и выносящей артериол клубочка почек, что вызывает снижение СКФ мл/мин/1,73 м², %, R_Na%, повышение экскреции Na и белка с мочой (см. табл. 2).

Данные показали снижение скорости клубочковой фильтрации - СКФ на 39,24%, канальцевой риабсорбции воды R_H2O на 1,61%, R_Na на 1,37%, экстреции Na на 55,36% и белка с мочой в 26,2 раза, увеличение суточного диуреза на 61,6%.

О повреждении сосудов печени свидетельствовали данные повышения уровня органоспецифических ферментов в плазме крови: АлАТ, АсАТ, ГГТП, ЩФ (см. фиг. 1-4). Таким образом, в условиях гипергликликемии, повышения HbAlc нарушение метаболизма глюкозы сопровождается развитием окислительного стресса и дислипидемией - повышением ОХС, ХС ЛПНП и снижением ХС ЛПВП, способствующие дисфункции эндотелия сосудов почек и печени вследствие сниженного уровня NOx и повышенного уровня АД.

Следствием патологического процесса - дисфункции эндотелия является нарушение функционального состояния почек (см. табл. 2). Показателем дисфункции эндотелия сосудов печени является повышение уровня АлАТ, АсАТ, ГГТП, ЩФ (см. фиг. 1-4).

Использование способа диагностики дисфункции эндотелия сосудов почек и печени у больных СД 2 типа позволит по сравнению с прототипом повысить точность и достоверность, уровень воспроизводимости, адекватности, доступности и полноты оценки метаболических и функциональных показателей, характеризующих данную патологию.

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии и патофизиологии, и может быть использовано для диагностики эндотелиальной дисфункции сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа. Осуществляют определение глюкозы в крови, ммоль/л, холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП), ммоль/л, артериального давления (АД). У больных утром натощак забирают кровь с цитратом, центрифугируют и дополнительно определяют в эритроцитах и плазме крови концентрацию гликированного гемоглобина (HbA1c), %, гидроперекисей (ГП), ммоль/л, малонового диальдегида (МДА), нмоль/мл, активность антиокислительной системы супероксиддисмутазы (СОД), усл. ед, органоспецифических ферментов: аланинаминотрансферазы (АлАТ), мкмоль/с*л, аспартатаминотрансферазы (АсАТ), мкмоль/с*л, гамма-глутамилтранспептидазы (ГГТП), нмоль/с*л, щелочной фосфатазы (ЩФ), нмоль/с*л, в плазме крови, и определяют содержание суммарных метаболитов оксида азота (NOx), мкмоль, общего холестерина (ОХС), ммоль/л, холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС ЛПНП), ммоль/л, клиренс эндогенного креатинина - скорость клубочковой фильтрации (СКФ), мл/мин/1,73 м², канальцевую реабсорбцию воды (R_H2O), %, и натрия (R_Na), %, экскрецию с мочой натрия, %, и белка, г/24 ч, величину суточного диуреза, мл/24 ч. При уровне глюкозы - 14,6 ± 0,5 ммоль/л, HbA1c - 10,4% ± 0,71%, при активности АлАТ - 43,01 ± 4 мкмоль/с*л, активности АсАТ - 35,17 ± 6 мкмоль/с*л, активности ГТТП - 165,4 ± 17 нмоль/с*л, активности ЩФ - 183,3 ± 7 нмоль/с*л, и при повышении ОХС от уровня нормы, при повышении ХС ЛПНП от уровня нормы, при снижении ХС ЛПВП от уровня нормы, при отклонении концентрации ГП в плазме крови от уровня нормы, равной 0,97 ± 0,09 ммоль/л, при отклонении концентрации МДА в эритроцитах от уровня нормы, равной 2,93 ± 0,177 нмоль/мл, при снижении активности СОД от уровня нормы, равной 3,55 ± 0,156 усл. ед, при снижении содержания NOx, при норме 53,64 ± 0,831 мкмоль, при повышении АД, при снижении СКФ от уровня нормы, равной 126,4 ± 8,56 мл/мин/1,73 м², при снижении R_H2O, при норме 99,2 ± 0,16 %, при снижении R_Na, при норме 98,85 ± 0,165 %, при повышении экскреции с мочой Na, при норме 63,4 ± 3,6 %, при повышении экскреции с мочой белка, при норме 0,045 ± 0,011 г/24 ч, и при увеличении суточного диуреза, при норме 1380 ± 115 мл/24 ч, диагностируют эндотелиальную дисфункцию сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа. Способ обеспечивает возможность повышения точности и достоверности, уровня воспроизводимости, адекватности, доступности и полноты оценки метаболических и функциональных показателей, характеризующих данную патологию эндотелиальной дисфункции сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа, за счет определения вышеупомянутых биохимических и функциональных показателей. 4 ил., 2 табл., 1 пр.

Способ диагностики эндотелиальной дисфункции сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа, включающий определение глюкозы в крови, ммоль/л, холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП), ммоль/л, артериального давления (АД), отличающийся тем, что у больных утром натощак забирают кровь с цитратом, центрифугируют и дополнительно определяют в эритроцитах и плазме крови концентрацию гликированного гемоглобина (HbA1c), %, гидроперекисей (ГП), ммоль/л, малонового диальдегида (МДА), нмоль/мл, активность антиокислительной системы супероксиддисмутазы (СОД), усл. ед, органоспецифических ферментов: аланинаминотрансферазы (АлАТ), мкмоль/с*л, аспартатаминотрансферазы (АсАТ), мкмоль/с*л, гамма-глутамилтранспептидазы (ГГТП), нмоль/с*л, щелочной фосфатазы (ЩФ), нмоль/с*л, в плазме крови, и определяют содержание суммарных метаболитов оксида азота (NOx), мкмоль, общего холестерина (ОХС), ммоль/л, холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС ЛПНП), ммоль/л, клиренс эндогенного креатинина - скорость клубочковой фильтрации (СКФ), мл/мин/1,73 м², канальцевую реабсорбцию воды (R_H2O), %, и натрия (R_Na), %, экскрецию с мочой натрия, %, и белка, г/24 ч, величину суточного диуреза, мл/24 ч, и при уровне глюкозы - 14,6 ± 0,5 ммоль/л, HbA1c - 10,4% ± 0,71%, при активности АлАТ - 43,01 ± 4 мкмоль/с*л, активности АсАТ - 35,17 ± 6 мкмоль/с*л, активности ГТТП - 165,4 ± 17 нмоль/с*л, активности ЩФ - 183,3 ± 7 нмоль/с*л, и при повышении ОХС от уровня нормы, при повышении ХС ЛПНП от уровня нормы, при снижении ХС ЛПВП от уровня нормы, при отклонении концентрации ГП в плазме крови от уровня нормы, равной 0,97 ± 0,09 ммоль/л, при отклонении концентрации МДА в эритроцитах от уровня нормы, равной 2,93 ± 0,177 нмоль/мл, при снижении активности СОД от уровня нормы, равной 3,55 ± 0,156 усл. ед, при снижении содержания NOx, при норме 53,64 ± 0,831 мкмоль, при повышении АД, при снижении СКФ от уровня нормы, равной 126,4 ± 8,56 мл/мин/1,73 м², при снижении R_H2O, при норме 99,2 ± 0,16 %, при снижении R_Na, при норме 98,85 ± 0,165 %, при повышении экскреции с мочой Na, при норме 63,4 ± 3,6 %, при повышении экскреции с мочой белка, при норме 0,045 ± 0,011 г/24 ч, и при увеличении суточного диуреза, при норме 1380 ± 115 мл/24 ч, диагностируют эндотелиальную дисфункцию сосудов почек и печени при сахарном диабете 2 типа.