Способ получения билирубина Российский патент 2025 года по МПК A61K31/409 A61K35/413 C07D207/44 

Настоящее изобретение относится к биотехнологии, к способу получения препаратов, в частности препаратов, необходимых для создания лекарственных средств, а именно билирубина.

Известны способы получения лекарственных препаратов, в том числе средств для лечения печени, из растительного сырья - в частности лекарственных трав, высушенных плодов растений (см. патенты 1456013, C07D 407/02, 1980; 1433391, A61K 35/78, 1980; 2424818, A61K 36/28, B01D 11/02).

Известны также способы получения лекарственных препаратов из животного сырья, в частности гепарина - из внутренних органов животных, например, свиней (см. патент 1052234, A61K 31/727, 29.12.1981).

Известен способ получения билирубина, включающий дефростацию желчного пузыря, вскрытие желчного пузыря, сбор желчи и последующее выделение и экстракцию целевого вещества (см. «Экстракционные методы разделения и концентрирования веществ». А.Л. Гулевич, С.М. Лещев, Е.М. Рахманько. Учебное пособие. Минск: БГУ, 2009).

Известные способы получения билирубина не позволяют получать высокоактивный и чистый целевой продукт в необходимых количествах, который может быть использован для производства лекарственных препаратов в промышленных масштабах.

Задачей изобретения является создание надежного и эффективного способа получения билирубина в промышленных масштабах.

Технический результат изобретения - непрерывность технологического процесса получения высокоактивного и чистого билирубина.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе включающий дефростацию желчного пузыря, вскрытие желчного пузыря, сбор желчи и последующее выделение и экстракцию целевого вещества, отличающийся тем, что размораживают замороженные блоки желчного пузыря в течение 12 часов при температуре 16°С, собирают полученную жидкую желчь в емкость для сбора желчи, производят ее омыление. Для этого нагревают жидкую желчь при постоянном перемешивании, при достижении температуры желчи 20°С, добавляют в нее бисульфит натрия 0.188% от массы желчи и Na-ЭДТА дигидрат 0.108% от массы желчи, продолжают нагревать жидкую желчь с добавленными ингредиентами, при температуре смесидо 45°С, доводят РН смеси до 10, для этого добавляют гидроксид натрия, продолжают нагрев до температуры 85°С, и охлаждают ее до 45°С. Затем производят подкисление, для этого добавляют хлороформ 40% от массы желчи, и активно перемешивают в течение 2 минут, после чего добавлением уксусной кислоты с активным перемешиванием, снижают РН смеси до 5.7 ед. После вышеуказанных процедур выдерживают смесь 30 минут, до расслаивания на 2 части, верхний слой жидкости направляют на получение сопутствующих продуктов, а нижний слой нагревают до 80°С для извлечения хлороформа, Затем, при температуре не менее 75°С, процеживают через бумажный фильтр. Во время процеживания в смесь постепенно добавляют этанол температурой 75°С, в объеме, равном объему смеси. Полученный на фильтре осадок - красно-оранжевый порошок сушат 1 час, при температуре 110°С и очищают через сетчатый фильтр.

Для наиболее эффективного выделения билирубина, при омылении время всего процесса нагрева составляет не более 75 минут, а время охлаждения - не более 60 минут.

С той же целью, при подкислении снижение РН смеси до 5.7 ед. с активным перемешиванием производят не более 20 минут.

Полученный порошок и есть готовый продукт - билирубин.

В указанную совокупность включены все признаки, каждый из которых необходим, а все вместе достаточны для достижения указанного технического результата.

Способ осуществляется следующим образом. Для дефростации, замороженный при -20°С, свежий свиной желчный пузырь размораживают при температуре 16°С в течение 12 часов. После размораживания температура желчного пузыря составляет +4°С. Размороженные желчные пузыри вскрывают, собирают полученную жидкую желчь в емкость для сбора желчи. Вскрытие производят, например, слайсерами Чжэцзян Цяньцзяхуэй электрооборудование лтд, beckers ES 250, и др.

После этого производят ее омыление, для чего нагревают жидкую желчь при постоянном перемешивании. При достижении температуры желчи 20°С, добавляют в нее бисульфит натрия 0.188% от массы желчи, и Na-ЭДТА дигидрат 0.108% от массы желчи, продолжают нагревать жидкую желчь с добавленными ингредиентами. При температуре смеси 45°С добавляют гидроксид натрия и доводят РН смеси до 10, продолжают нагрев до температуры 85°С, затем охлаждают ее до 45°С.

Затем производят подкисление. Для этого добавляют хлороформ 40% от массы желчи, и активно перемешивают в течение 2 минут. После чего, добавлением уксусной кислоты с активным перемешиванием, снижают РН смеси до 5.7 ед. После вышеуказанных процедур выдерживают смесь 30 минут, до расслаивания на 2 части - верхний слой жидкости направляют на получение сопутствующих продуктов, а нижний слой нагревают до 80°С для извлечения хлороформа. При температуре не менее 75°С, нижний слой, процеживают через бумажный фильтр. Во время процеживания в смесь постепенно добавляют этанол температурой 75°С, в объеме, равном объему смеси. Полученный на фильтре осадок - красно-оранжевый порошок, сушат 1 час при температуре 110°С и очищают через сетчатый фильтр. Полученный порошок и есть готовый продукт - билирубин.

Для наиболее эффективного выделения билирубина, при омылении время всего процесса нагрева составляет не более 75 минут, а время охлаждения - не более 60 минут.

С той же целью, при подкислении снижение РН смеси до 5.7 ед. с активным перемешиванием производят не более 20 минут.

Сопутствующий продукт получают из верхнего слоя жидкости, выделенного при подкислении.

Жидкость указанного слоя, помещают в дистилляционную реторту, удаляют остаточный хлороформ, пропустив через трехкорпусный испаритель и распылительную сушилку. В итоге побочный продукт - сухая холевая кислота в виде порошка.

Применение заявленного способа в промышленности позволит обеспечить непрерывность технологического процесса получения высокоактивного и чистого билирубина в промышленных масштабах.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу получения билирубина. Способ получения билирубина, включающий дефростацию желчного пузыря, вскрытие желчного пузыря, сбор желчи и последующее выделение и экстракцию целевого вещества, размораживают замороженные блоки желчного пузыря в течение 12 ч при температуре 16°С, собирают полученную жидкую желчь в емкость для сбора желчи, производят ее омыление, для чего нагревают жидкую желчь при постоянном перемешивании, при достижении температуры желчи 20°С добавляют в нее бисульфит натрия 0,188% от массы желчи и Na-ЭДТА дигидрат 0,108% от массы желчи, продолжают нагревать жидкую желчь с добавленными ингредиентами, при температуре смеси 45°С доводят pН смеси до 10, для этого добавляют гидроксид натрия, и продолжают нагрев до температуры 85°С, затем охлаждают ее до 45°С, после чего производят подкисление, для чего добавляют хлороформ 40% от массы желчи, затем активно перемешивают в течение 2 мин, после чего добавлением уксусной кислоты с активным перемешиванием снижают pН смеси до 5,7, после вышеуказанных процедур выдерживают смесь 30 мин до расслаивания на 2 части - верхний слой жидкости направляют на получение сопутствующих продуктов, а нижний слой нагревают до 80°С для извлечения хлороформа, затем, при температуре не менее 75°С, процеживают через бумажный фильтр, во время процеживания в смесь постепенно добавляют этанол температурой 75°С, в объеме, равном объему смеси, полученный на фильтре осадок - красно-оранжевый порошок сушат 1 ч при температуре 110°С и очищают через сетчатый фильтр. Изобретение позволяет обеспечить непрерывность процесса получения чистого билирубина. 2 з.п. ф-лы.

1. Способ получения билирубина, включающий дефростацию желчного пузыря, вскрытие желчного пузыря, сбор желчи и последующее выделение и экстракцию целевого вещества, размораживают замороженные блоки желчного пузыря в течение 12 ч при температуре 16°С, собирают полученную жидкую желчь в емкость для сбора желчи, производят ее омыление, для чего нагревают жидкую желчь при постоянном перемешивании, при достижении температуры желчи 20°С добавляют в нее бисульфит натрия 0,188% от массы желчи и Na-ЭДТА дигидрат 0,108% от массы желчи, продолжают нагревать жидкую желчь с добавленными ингредиентами, при температуре смеси 45°С доводят pН смеси до 10, для этого добавляют гидроксид натрия, и продолжают нагрев до температуры 85°С, затем охлаждают ее до 45°С, после чего производят подкисление, для чего добавляют хлороформ 40% от массы желчи, затем активно перемешивают в течение 2 мин, после чего добавлением уксусной кислоты с активным перемешиванием снижают pН смеси до 5,7, после вышеуказанных процедур выдерживают смесь 30 мин до расслаивания на 2 части - верхний слой жидкости направляют на получение сопутствующих продуктов, а нижний слой нагревают до 80°С для извлечения хлороформа, затем, при температуре не менее 75°С, процеживают через бумажный фильтр, во время процеживания в смесь постепенно добавляют этанол температурой 75°С, в объеме, равном объему смеси, полученный на фильтре осадок - красно-оранжевый порошок сушат 1 ч при температуре 110°С и очищают через сетчатый фильтр.

2. Способ получения билирубина по п. 1, отличающийся тем, что при омылении время всего процесса нагрева составляет не более 75 мин, а время охлаждения - не более 60 мин.

3. Способ получения билирубина по п. 1, отличающийся тем, что при подкислении снижение pН смеси до 5,7 с активным перемешиванием производят не более 20 мин.