Изобретение относится к химии стероидов и конкретно касается способа раздельного выделения хенодезоксихолевой кислоты, фракции липидов, содержащей холестерин, и фракции жирных кислот из желчных пузырей птиц.
Хенодезоксихолевая кислота (3 α, 7 α-дигидрокси-5β-холан-24-овая кислота, сокращенно ХДХК) формулы I
Обладает способностью растворять холестериновые желчные камни и находит применение для лечения желчно-каменной болезни, особенно в тех случаях, когда хирургическое вмешательство связано с повышенным риском. В медицинской практике известна как препарат Хенофалк (ФРГ), Деурил (Италия), Хенохол (Югославия), Хенодиол (США) [1]
Фракция липидов представляет собой смесь липидов, в которой основным компонентом (75%) является холестерин.
Холестерин находит применение в медицинской промышленности в качестве исходного сырья для производства гормональных препаратов, а также в косметической промышленности в качестве биодобавки [2]
Фракцию жирных кислот применяют в мыловарении как исходное сырье, в косметической промышленности в качестве жировых добавок при производстве косметических средств [3]
В литературе не описаны способы выделения из желчных пузырей птиц как фракции липидов, так и фракции жирных кислот.
Известны способы выделения желчных кислот, включая ХДХК [1] из желчи птиц.
Эти способы различаются по виду исходной желчи, которую предварительно извлекают из желчных пузырей птиц выдавливанием ее. Используют желчь или свежеполученную, или высушенную различными трудоемкими методами сушки, такими как вымораживание, лиофилизация, распыление или барабанная сушка.
Один из таких способов выделения ХДХК, где в качестве исходного сырья используют сырую (свежую) куриную желчь, выделенную из желчных пузырей птиц, заключается в следующем:
сырую куриную желчь (сырая птичья желчь содержит: желчные кислоты, среди которых наибольший процент приходится на ХДХК (80-85%) и холевую кислоту (≈ 10%), а также содержит литохолевую и другие кислоты, кроме того, липиды, жирные кислоты, пигменты) экстрагируют этанолом;
полученный экстракт очищают от пигментов печени, пропуская через колонку с окисью алюминия;
элюат, содержащий конъюгаты (желчные кислоты находятся в желчи в виде конъюгатов с одной из аминокислот: таурином или глицином) желчных кислот, гидролизуют щелочью (24 ч);
полученный гидролизат, содержащий ХДХК (1), подкисляют соляной кислотой (рН 1-3).
Техническую кислоту 1 (выпавшую в виде осадка) растворяют в водно-этанольной смеси (объемное соотношение 1:1), добавляют петролейный эфир (смесь: эфир 1:1);
после разделения 2-х слоев: петролейного и водно-спиртового, последний упаривают досуха;
остаток растворяют в этаноле и полученный раствор ХДХК пропускают через колонку с окисью алюминия;
элюат упаривают досуха;
остаток растворяют в растворе едкого натра и раствор подкисляют соляной кислотой;
выпадает осадок ХДХК (1), очищенный от липидов, жирных кислот и других примесей.
Из 1 л сырой желчи получают 40-50 г (≈ 4-5%) чистой ХДХК (1).
Качество не указано [4]
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату аналогом заявляемого способа, т.е. прототипом, является способ выделения ХДХК (1) в виде чистой субстанции из сырой (свежей) желчи птиц [5]
Данный способ заключается в том, что сырую желчь (отделенную от желчных пузырей птиц) обезвоживают; полученную сухую желчь экстрагируют органическим растворителем (например, метанолом); экстракт, содержащий конъюгаты желчных кислот, этерифицируют (обрабатывают минеральной кислотой); получаемые в виде эфиров конъюгаты желчных кислот отделяют от липидов, жирных кислот, пигментов и других примесей путем обработки их водно-органической смесью (хлороформ-вода) с последующим разделением двух фаз: органической (примеси) и водно-органической (эфиры конъюгатов желчных кислот) и упаркой последней досуха; эфиры конъюгатов желчных кислот (сухой остаток) гидролизуют водным раствором едкого натра; образующиеся натриевые соли свободных желчных кислот обрабатывают минеральной кислот (рН 2-1); полученные желчные кислоты (в виде осадка) подвергают двойной очистке через бариевые соли следующим образом:
осадок растворяют в 10%-ном водном растворе аммиака при кипячении и добавляют 10%-ный водный раствор хлористого бария (по каплям);
смесь охлаждают, проверяют на полноту осаждения бариевых солей, фильтруют, сушат (60оС, вакуум, 48 ч);
образующиеся бариевые соли желчных кислот, в основном бариевая соль ХДХК (далее по тексту имеют в виду только ХДХК, кристаллический осадок), промывают метанолом, сушат (60оС, вакуум);
добавляют этилацетат и соляную кислоту;
этилацетатный раствор ХДХК (1) промывают водой, сушат (сульфат натрия), упаривают досуха;
полученную кислоту 1 (сухой остаток) повторно подвергают очистке через бариевую соль (остаток растворяют в метаноле, добавляют 25%-ный раствор аммиака и 10%-ный водный раствор хлористого бария при кипячении; смесь охлаждают, проверяют на полноту осаждения бариевой соли, фильтруют, осадок промывают, сушат (60оС, вакуум, 48 ч); к образующейся бариевой соли ХДХК (кристаллический осадок) добавляют этилацетат, затем соляную кислоту; этилацетатный раствор ХДХК промывают водой, сушат (сульфатом натрия), упаривают до ≈ 1/3 объема; в концентрат ХДХК добавляют гексан при перемешивании, выдерживают 12 ч при 4оС).
Таким образом, получают чистую ХДХК с выходом 4-6,4% (считая на вес исходной сырой желчи) в виде порошка с т.пл. 140-142оС.
Содержание основного продукта 99% по данным ГЖХ [5]
Однако следует отметить, что указанный выход 1 нельзя считать достоверным, поскольку в данном патенте [5] не указано содержание чистой желчи в исходном сырье (сырой желчи).
Что касается качества кислоты 1, то, как известно [6] получение 1 стабильного качества в условиях патента [5] невозможно.
Основными недостатками способа-прототипа [5] являются:
трудоемкость получения исходного сырья (желчи) и подготовка его для процесса выделения из нее целевых продуктов (ХДХК, фракции липидов, фракции жирных кислот).
Трудоемкая операция отделения самых желчных пузырей с желчью, которую необходимо выполнять очень аккуратно, а именно, без прирези других тканей, присутствие которых осложняет выделение целевых продуктов в условиях прототипа.
Также трудоемка следующая операция выдавливание из пузырей самой желчи, что, как правило, полно произвести эту операцию затруднительно и это приводит к потерям желчи.
В данном способе [5] допустимо использование только свежеполученной желчи и высушенной вскоре после выдавливания ее из пузырей. Сушка операция, требующая больших затрат ручного труда, дорогостоящего оборудования и энергетических затрат.
Заготовку желчи на хранение производить нецелесообразно, так как желчь подвергается порче уже на вторые сутки хранения.
Другими недостатками способа-прототипа являются необходимость выделения из желчи конъюгатов желчных кислот в виде метанольного экстракта; получение конъюгатов желчных кислот в виде эфиров; выделение фракции липидов и жирных кислот в смеси, которая не утилизируется и направляется в канализацию.
Как видно из сказанного, трудоемкость получения и подготовки к использованию исходного сырья (желчи), невозможность его полного использования, а также другие указанные недостатки способа-прототипа осложняют создание отечественного промышленного способа раздельного выделения ХДХК 1, фракции липидов (холестерин) и фракции жирных кислот.
Цель изобретения упрощение процесса и более полное использование исходного животного дорогостоящего сырья (желчи).
Поставленная цель достигается предлагаемым способом раздельного выделения фракции липидов, включая холестерин, фракции жирных кислот и ХДХК (1), заключающийся в том, что желчные пузыри птиц (с прирезями других тканей), содержащее конъюгаты желчных кислот, а также липиды, жирные кислоты, подвергают щелочному гидролизу при 94-97оС:
полученный гидролизат (смесь липидов, солей щелочного металла жирных и желчных кислот) экстрагируют низшим спиртом и малополярным растворителем, взятым в объемном соотношении (0,2-0,25):1 соответственно по отношению к водной щелочи, используемой для гидролиза исходного сырья; полученный экстракт фракция липидов (содержащая в основном холестерин) отделяют и, после очистки и упаривания, из нее выделяют путем кристаллизации холестерин; оставшийся после экстракции гидролизат, содержащий щелочные соли желчных и жирных кислот, обрабатывают минеральной (например, соляной) кислотой до рН 1-3 и выделяют фракцию жирных кислот путем экстракции ее низшим спиртом и малополярным растворителем, взятыми в объемном соотношении соответственно (0,15-0,25): 1 по отношению к водной щелочи, используемой для гидролиза желчных пузырей; полученный экстракт фракция жирных кислот отделяют и упаривают досуха, а оставшийся после экстракции гидролизат, содержащий желчные кислоты, включая ХДХК (1), обрабатывают низшим спиртом и малополярным растворителем, взятым в объемном соотношении соответственно как (0,4-0,5):1 по отношению к водной щелочи, используемой для гидролиза щелочных пузырей; полученный экстракт фракция желчных кислот, в основном ХДХК (1) обрабатывают слабым раствором водной щелочи с последующим отделением образовавшейся водной фазы, содержащей ХДХК (1), и ее обработкой минеральной кислотой; полученную в виде осадка ХДХК подвергают очистке от холевой кислоты путем растворения осадка в слабом растворе щелочи с последующим осаждением ее минеральной кислотой до рН среды 6,4-6,2; полученную ХДХК с т.пл. 140-146оС (выход 71-76% считая на 100%-ную ХДХК в желчных пузырях) кипятят в растворителе, имеющим температуру кипения в пределах 65-140оС.
Характеристика выделяемых по заявляемому способу продуктов.
Фракцию липидов получают в виде кристаллического осадка желтовато-коричневого цвета с выходом 0,16-0,23% от исходного сырья. Представляет собой смесь липидов, где основным компонентом (до 75%) является холестерин.
Холестерин получают в виде белого кристаллического порошка, т.пл. 145-149оС, отвечающая всем требованиям Фармакопеи Х.
Выход фармакопейного холестерина составляет 60-65% от массы липидной фракции или 0,1-0,2% от массы исходных желчных пузырей.
Фракция жирных кислот, состоящая из кислот, имеющих т.пл. 35-40оС (низкоплавкие) и 60-70оС (высокоплавкие) получают в виде воскообразной массы, окрашенной от желтого до светло-коричневого цвета, с выходом 7-9,7% от массы исходных желчных пузырей.
ХДХК (1) получают в трех кристаллических формах, различающихся по температуре плавления.
Низкоплавкая форма кристаллы с т.пл. ≈ 119оС;
Низкоплавкая форма игольчатые кристаллы, т.пл. 138-140оС;
Высокоплавкая форма пластинчатые кристаллы, т.пл. 164 + 4оС (лит.данные (7) т.пл. 168оС).
Выход ХДХК (с т.пл. 164 + 4оС) 70-75% в расчете на 100%-ную ХДХК от содержания ее в желчных пузырях.
Содержание основного вещества 95-97% холевой кислоты (примесь) не более 2%
Удельное вращение 12о +2 /в 1% растворе спирта.
В заявляемом способе в качестве низшего спирта используют, например метанол, изопропиловый спирт, предпочтительно этанол.
В качестве малополярного растворителя используют, например, ксилол, толуол, петролейный эфир, бензин, гексан.
В качестве щелочи, применяемой для гидролиза желчных пузырей, используют 9-11% водный раствор едкой щелочи. При концентрации щелочи <9 или >11% наблюдается увеличение времени гидролиза или осмоление продукта.
Гидролиз проводят при 94-97оС, т.к. при температуре выше 97оС наблюдается вспенивание реакционной массы, а при температуре ниже 94оС замедляется процесс гидролиза желчных пузырей.
В качестве слабого водного раствора щелочи, применяемой на стадии очистки 1 от холевой кислоты, используют 1-5%-ный водный раствор едкой щелочи (гидроокись натрия или калия).
Отличительные признаки заявляемого способа:
использование в качестве исходного сырья непосредственно желчных пузырей вместе с желчью и прирезями других тканей (в прототипе используют желчь, предварительно отжатую из желчных пузырей, которые не должны иметь прирези других тканей);
изменение последовательности стадии очистки и выделения ХДХК (1) (в прототипе конъюгаты желчных кислот сначала выделяют, переводят в эфиры и последние очищают от липидов, жирных кислот и других примесей, при этом полученную смесь не разделяют и не утилизируют, а очищенные эфиры вновь переводят в конъюгаты желчных кислот и подвергают гидролизу; в заявляемом способе конъюгаты желчных кислот непосредственно подвергают гидролизу без предварительного их выделения);
применение ступенчатой экстракции для выделения липидной фракции, фракции жирных кислот и ХДХК (1) с использованием биполярного экстрагента;
использование в качестве биполярного экстрагента смеси малополярного растворителя и низшего спирта, взятых в определенном соотношении на стадии выделения фракции липидов, фракции жирных кислот и стадии выделения и очистки 1;
условия очистки ХДХК от холевой кислоты из щелочного раствора.
Совокупность указанных отличительных признаков в заявляемом способе создает ряд положительных эффектов.
Использование непосредственно желчных пузырей вместе с желчью и прирезями других тканей с целью выделения ХДХК, липидов и жирных кислот предлагается впервые. Это позволяет решить ряд проблем, которые имеют место в случае использования и хранения сырой желчи.
Замена извлеченной из желчных пузырей сырой желчи на предлагаемое сырье позволяет исключить необходимость отжима желчи из желчных пузырей.
Эта операция трудоемкая, при этом неизбежны значительные потери сырья, так как отжать полно желчь невозможно.
Кроме того, при отжиме в желчь возможно попадание остатков желчных пузырей, жира и других соединительных тканей, что не позволяет в условиях прототипа провести удовлетворительную очистку ХДХК от посторонних примесей, исключить необходимость дорогостоящего процесса сушки отжатой желчи, так как при хранении начинаются процессы гниения (в заявляемом способе возможно использовать желчные пузыри, замороженные (в виде брикетов), что, по мере необходимости, позволяет их дозировать).
Возможность проведения прямого гидролиза конъюгатов желчных кислот по сравнению с прототипом позволило существенно упростить процесс, а именно, исключить целый ряд операций выделения конъюгатов желчных кислот в виде спиртового раствора и превращения их в соответствующие эфиры; отделения этих эфиров водно-органической смесью от липидной фракции, фракции жирных кислот, а также пигментов и других примесей, что приводит к образованию неутилизируемых сточных вод; превращения указанных эфиров в натриевые соли.
Ступенчатая экстракция фракции липидов, жирных кислот и ХДХК (1) позволяет селективно выделить указанные продукты из щелочной среды липиды, а жирные и желчные кислоты (ХДХК) из кислой среды.
Впервые найдены условия селективного разделения ХДХК, липидов и жирных кислот. Эти условия определены экспериментальным путем.
В табл. 1 приведены пределы найденных соотношений водной фазы, спирта и малополярного растворителя.
Пределы найденных соотношений водной фазы, спирта и малополярного растворителя являются необходимыми и достаточными для селективного разделения указанных продуктов.
За пределами этих соотношений нельзя достаточно полно разделить и выделить эти вещества.
Так, в случае выделения липидов при сниженном количестве спирта, не происходит разделение водно-органических слоев из-за образования эмульсии, при выделении жирных кислот наблюдается неполное их извлечение, а при выделении ХДХК (1) не происходит никакого извлечения 1, оно выпадает в водной фазе в виде смолы.
При увеличении количества спирта в биполярном экстрагенте в случае выделения липидов получают интенсивно окрашенные пигментами растворы, т.е. продукт получают загрязненным; выделения жирных кислот экстрагируется наряду с ними и частично ХДХК, что приводит к потерям выхода ее; выделения ХДХК избыток спирта приводит к неполной очистке ее и продукт получают темно-окрашенным.
При ступенчатой экстракции значительно полнее возможно использовать исходное сырье, так как это позволяет раздельно получить три целевых продукта: ХДХК (1), холестерин, который является основным продуктом фракции липидов, и фракцию жирных кислот.
Все эти продукты получают с высокими выходами и они являются, как указано исходным сырьем в ряде промышленных отраслей.
Впервые найдены условия очистки ХДХК от трудноотделимой примеси холевой кислоты.
В процессе поиска условий осаждения ХДХК и холевой кислоты на чистых образцах замечено, что ХДХК начинает осаждаться из щелочного раствора в интервале рН 7,2-6,0 (предпочтительно 6,4-6,2), а холевая кислота при рН < 5,9, что впервые позволило практически полно таким образом их разделить.
На основе заявляемого способа может быть создано отечественное промышленное производство ХДХК особо важного лекарственного вещества, и одновременно получать наряду с ним и другие не менее важные сырьевые источники для ряда отраслей (медицины, мыловарения, косметики) холестерин, жирные кислоты.
П р и м е р 1 (предпочтительные условия). К 1603,3 г размороженных желчных пузырей с прирезями других тканей (соответствует требованиям ТУ 10.18.11.010-90), полученных от кур и цыплят бройлеров, с влажностью 71,4% и содержанием ХДХК 2,31% (на сырую массу) приливают 297,28 мл 45%-ного раствора едкого натра и 414,59 мл воды с таким расчетом, чтобы концентрация раствора едкого натра в реакционной массе была 10% (использование 9-11%-ного водного раствора щелочи не влияет на результат гидролиза). Общий объем 10% -ного раствора едкого натра должен быть в количестве 1:4 к массе сухого остатка желчных пузырей и составляет 1834 мл.
Реакционную массу нагревают до 94-97оС, проводят гидролиз в течение 26-27 ч при указанной температуре.
Полученный гидролизат охлаждают до 35-45оС, приливают 458,5 мл этилового спирта (25% от объема 10%-ного раствора едкого натра или 12,5% содержания спирта в реакционной массе) и 1834 мл толуола (1 объем по отношению к объему 10%-ного едкого натра), перемешивают массу 30 мин при 35-45оС.
Реакционную массу выдерживают без перемешивания в течение 30 мин, толуольный слой, содержащий липиды, в основном холестерин, отделяют. Экстракцию толуолом липидной фракции повторяют в тех же условиях.
Объединенный толуольный экстракт (3204 мл) очищают активированным углем 3,2 г (0,1% от объема экстракта) и очищенный экстракт промывают водой 1602 мл (0,5% от объема толуольного экстракта). Толуольный раствор упаривают досуха, получают 2,6 г сухого остатка липидов. Сухой остаток растворяют в 96% -ном этиловом спирте 18,34 мл (в массообъемном соотношении 1:5), добавляют 0,13 г активированного угля (5% от массы сухого остатка) и кипятят суспензию 30 мин. Горячий раствор фильтруют. Фильтрат охлаждают до комнатной температуры и выдерживают при 6±2оС в течение 2 ч. Выпавшие кристаллы холестерина отфильтровывают и промывают на фильтре 2 раза по 2,6 мл (в массообъемном соотношении 1:1).
Получают 3,2 г холестерина с т.пл. 146-149оС. Выход 0,02% на массу взятых для гидролиза желчных пузырей.
После выделения из гидролизата липидной фракции в реакционную массу добавляют еще 458,5 мл этилового спирта (25% от объема 10%-ного едкого натра или 25% содержания спирта в реакционной массе) и подкисляют концентрированной соляной кислотой до рН 1-2 (517,4 мл). Приливают 1834 мл петролейного эфира (или бензина, или гексана в том объеме) и извлекают жирные кислоты, перемешивая массу 30 мин при 35-45оС. Верхний слой петролейного эфира сифонируют. Операцию экстракции жирных кислот повторяют еще дважды в том же режиме. Петролейный (бензиновый или гексановый) экстракт очищают активированным углем и упаривают досуха.
Получают 144,3 г суммы жирных кислот. Выход 9,0% от массы взятых на гидролиз желчных пузырей.
К гидролизату, свободному от липидов и жирных кислот, приливают 917 мл этилового спирта (50% от объема 10%-ного раствора едкого натра или до 50%-ной концентрации его в реакционной среде) и 1834 мл толуола (или ксилола) (в соотношении 1: 1 к объему 10%-ного раствора едкого натра). Экстракцию ведут 30 мин при 35-45оС. Дают выдержку 30 мин и экстракт отделяют. Операцию экстракции ХДХК повторяют в том же режиме. Объединенный экстракт обрабатывают 1% -ным раствором едкого натра 613 мл (в массообъемном соотношении 1:15 к содержанию ХДХК в толуольном экстракте), перемешивая раствор 30 мин при 20-30оС.
Водный раствор натриевой соли ХДХК отделяют, очищают активированным углем и при энергичном перемешивании подкисляют 9-10%-ным раствором соляной кислотой до рН 1-3. Выпавшую в осадок "сырую" ХДХК отфильтровывают.
Влажный осадок "сырой" ХДХК растворяют в 1%-ном растворе едкого натра в количестве, соответствующем 1:100 к содержанию ХДХК в толуольном экстракте. Раствор фильтруют и к прозрачному раствору осторожно, небольшими порциями, приливают 1% соляную кислоту до рН 6,4-6,2. Дают выдержку в течение 2 ч. Выпавшую в осадок ХДХК отфильтровывают, промывают водой с рН 6,4-6,2 до бесцветного раствора промывных вод.
Влажный осадок ХДХК вновь растворяют в 1%-ном растворе едкого натра и повторно осаждают, как указано выше. После подкисления дают выдержку в течение 2 ч. Если рН меняется, дополнительно приливают соляной кислоты до рН 6,4-6,2.
Осадок ХДХК фильтруют и промывают на фильтре до бесцветного раствора промывных вод.
Влажный осадок растворяют в 1%-ном растворе едкого натра (в соотношении 1: 15 к массе влажного осадка), осторожно приливают концентрированную серную кислоту до рН 4-4,5. Выпадает белый творожистый осадок ХДХК. К суспензии добавляют этилацетат в соотношении 1:3 к массе влажного осадка. Экстракцию ведут с перемешиванием 30 мин при 20-30оС. Этилацетатный раствор отделяют. Экстракцию этилацетатом повторяют еще раз. Объединенный экстракт отмывают 6% -ным раствором хлористого натрия и водой, количеством, соответствующим 1/5 объема этилацетатного экстракта. Отмытый экстракт очищают активированным углем, фильтруют и упаривают до малого объема (1:3 к содержанию ХДХК в этилацетатном экстракте). Упаривают весь объем сразу с тем, чтобы имеющаяся в экстракте влага была полностью удалена из раствора, либо очищенный экстракт перед упаркой предварительно сушат безводным сульфатом натрия.
В упаренный экстракт при 40-45оС приливают небольшими порциями 1 объем гексана (по отношению к содержанию ХДХК в этилацетатном экстракте). Еще в теплом растворе начинают выпадать кристаллы. Суспензию выдерживают 1 ч при 20-30оС, затем 10-12 ч при 6 ±2оС. Выпавший в осадок кристаллы ХДХК отфильтровывают и промывают на фильтре охлажденной смесью этилацетата:гексана (3: 1) два раза по 1 объему к содержанию ХДХК в этилацетатном экстракте. Полученную техническую кислоту просушивают на фильтрате под вакуумом, затем на воздухе 6 ч и в вакуум-сушильном шкафу при 60оС с вакуумом (МРа 0,06) 24 ч.
Получают 29,56 г в виде белого сыпучего порошка с т.пл. 138-145оС.
Маточный раствор накапливают для выделения 2-го кристаллизата.
29,56 г технической ХДХК кипятят с 295,6 мл сухого циклогексана (1:10 к массе технической кислоты) 4 ч с перемешиванием. Охлаждают до 20-30оС и фильтруют, промывают на фильтре 2 раза по 29,56 мл циклогексана, хорошо отжимают, просушивают на воздухе 5-6 ч, при 20-30оС, затем 24 ч в вакуум-сушильном шкафу при 80оС с вакуумом (МРа 0,06).
Получают 2868 г ХДХК с т.пл. 160-166оС (в пределах 3оС) белый порошок (удельное вращение +11,0 1% раствор в этиловом спирте), содержание основного вещества 97,0% 100%-ного продукта 27,82 г, что составляет 75% на содержание ХДХК в желчных пузырях.
Результаты анализа полученных образцов приведены в табл.2.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЖЕЛЧЕКАМЕННОЙ БОЛЕЗНИ | 2001 |
|
RU2207149C2 |
| ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРА И ПРЕБИОТИКА, ПОЛУЧЕНИЕ И ПРИМЕНЕНИЕ | 2006 |
|
RU2318538C1 |
| Способ производства сухих очищенных солей желчных кислот для бактериологии | 2019 |
|
RU2705314C1 |
| ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ХОЛЕЦИСТИТА И ЖЕЛЧНОКАМЕННОЙ БОЛЕЗНИ | 1993 |
|
RU2044546C1 |
| ПРИМЕНЕНИЕ ЛАНОХОЛЕСТЕРОЛОВОЙ ФРАКЦИИ ИЗ ШЕРСТНОГО ЖИРА В КАЧЕСТВЕ БИОЭМУЛЬГАТОРА ДЛЯ КОСМЕТИЧЕСКИХ АНТИВОЗРАСТНЫХ СРЕДСТВ | 2012 |
|
RU2526158C2 |
| Способ получения арахидоновой кислоты | 2016 |
|
RU2627273C1 |
| ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО ХОЛЕСТЕРИНОРЕГУЛИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗВАННЫХ НАРУШЕНИЕМ ОБМЕНА ХОЛЕСТЕРИНА В ОРГАНИЗМЕ | 1993 |
|
RU2043111C1 |
| СРЕДСТВО "ПАТРИМИН", ОБЛАДАЮЩЕЕ СЕДАТИВНЫМ, ГИПОТЕНЗИВНЫМ, АНТИКОАГУЛЯНТНЫМ, АНТИАГРЕГАЦИОННЫМ И ГИПОЛИПИДЕМИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ | 2001 |
|
RU2189241C1 |
| СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЖЕЛЧНОКАМЕННОЙ БОЛЕЗНИ | 1992 |
|
RU2045956C1 |
| Способ получения арахидоновой кислоты из морской красной водоросли рода Gracilaria | 2016 |
|
RU2620164C1 |
Использование: в качестве препарата для лечения желчно-каменной болезни без хирургического вмешательства. Сущность: продукт - хенодезоксихолевая кислота (ХДХК) + фракция липидов, содержащая холестерин и фракцию жирных кислот. Выход 71 - 76%, (холестерин). Реагент 1: желчные пузыри птиц. Реагент 2: щелочь. Реагент 3: смесь этилового спирта и толуола в соотношений 0,25 : 1. После отделения фракции липидов из экстракта выделяют холестерин. Гидролизат обрабатывают минеральной кислотой до pH 1 - 3 и добавляют биполярный экстрагент предпочтительно этиловый спирт, петролейный эфир, гексан для выделения фракции жирных кислот. Перевод низкоплавкой ХДХК с т. пл. 120 - 128°С в высокоплавкую с т. пл. 160 - 164°С проводят в слабом растворе щелочи, подкислением минеральной кислотой до pH 4 - 4,5 экстрагированием ее органическим растворителем, концентрированием экстракта и добавлением к остатку малополярного растворителя с выдержкой раствора при 6 - 2°С, выпавший осадок ХДХК с т. пл. 140 - 145°С кипятят в органическом растворителе с т. кип. 60 - 140°С. 4 з.п. ф-лы.
| Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды | 1921 |
|
SU4A1 |
| Способ восстановления хромовой кислоты, в частности для получения хромовых квасцов | 1921 |
|
SU7A1 |
| Massiah, Roberto A | |||
| Vergottini, Peter Ziegler, 1980. | |||
