КОМБИНАЦИЯ ВАКЦИН ДЛЯ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ СВИНЕЙ Российский патент 2025 года по МПК A61K39/02 A61K39/12 A61P31/04 A61P31/14 A61P31/20 

ОБЩЕЕ ОПИСАНИЕ ОБЛАСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Изобретение, главным образом, относится к области здоровья свиней (домашних свиней). Свиньи восприимчивы к множеству патогенных микроорганизмов. Контроль инфекции обычно проводится путем контроля ферм и кормов, обработки фармацевтическими препаратами, такими как противовирусные средства и антибиотики, или профилактического лечения с использованием вакцин. В частности, изобретение относится к вакцинам против цирковируса свиней типа 2 (PCV2 или PCV-2), Mycoplasma hyopneumoniae и вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней (PRRS), и к способу защиты животного от таких инфекций с использованием таких вакцин.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

PCV-2 связан с мультисистемным синдромом истощения после отъема (PMWS), наблюдаемым у молодых свиней. Это заболевание было впервые было выявлено в Канаде в 1991 году. Клинические признаки и патология впервые были опубликованы в 1996 году, и они включают прогрессирующее истощение, диспноэ, тахипноэ и иногда иктеричность и желтуху.

Nayar et al., Can. Vet. J. Volume 38, июня 1997 года, выявили PCV у свиней с клиническими симптомами PMWS и сделали заключение, что PCV, отличный от известного PCV, признанного в качестве естественного обитателя клеток PK-15, может быть связан с PMWS. Более поздние публикации (Hamel et al., J.Virol., 72(6), 5262-5267, 1998; Meehan et al., J. Gen.Virol., 79, 2171-2179, 1998) подтвердили эти данные, и было предположено (Meehan et al., выше), что они относится к новому патогенному PCV, PCV-2, в то время как исходный изолят из клеточной культуры PK-15 (Tischer et al., Nature 295, 64-66, 1982), должен обозначаться как PCV-1.

PCV-2 представляет собой небольшой (17-22 нм) икосаэдрический безоболочечный вирус, содержащий кольцевой одноцепочечный ДНК-геном. Длина генома PCV-2 составляет приблизительно 1768 п.о. Изоляты PCV-2, происходящие из разных областей мира, по-видимому, являются близкородственными друг другу и имеют идентичность нуклеотидных последовательностей приблизительно 95-99% (Fenaux et al., J.Clin. Micorbiol., 38(7), 2494-2503, 2000). ORF2 PCV кодирует капсидный белок вируса. Ген ORF2 PCV-2 кодирует белок приблизительно из 233 аминокислот. Гены ORF2 всех изолятов PCV-2 обладают идентичностью нуклеотидных последовательностей 91-100% и расчетной идентичностью аминокислотных последовательностей 90-100%.

Mycoplasma hyopneumoniae (Mhyo) представляет собой вид бактерий, известный тем, что он вызывает заболевание энзоотическую пневмонию свиней, в высокой степени контагиозное и хроническое заболевание, от которого страдают свиньи. Mhyo имеет малый размер (400-1200 нм), имеет небольшой геном (893-920 тысяч пар оснований (т.п.н.)) и лишен клеточной стенки. Mhyo прикрепляется к ресничкам эпителиальных клеток в легких свиней. Это вызывает остановку биения ресничек, слипание и утрату ресничек, и в конечном итоге приводит к гибели эпителиальных клеток. Это является источником очагов повреждений, встречающихся в легких свиней с энзоотической пневмонией свиней. Это повреждение препятствует нормальному мукоцилиарному клиренсу, и часто развиваются вторичные инфекции. Это вызывает значительное снижение прироста массы животных. Ежегодные потери в США ранее оценивались как вплоть до 1 миллиарда долларов. Энзоотическая пневмония свиней является эндемичной по всему миру и Mhyo присутствует практически в каждом стаде свиней. Иммунный ответ, индуцируемый присутствием Mhyo у свиней, является медленным и неэффективным. Таким образом, лечение этого заболевания имеет чрезвычайную важность, но ограничивается антибиотиками, которые в настоящее время являются только частично эффективными, поскольку они не полностью устраняют инфекцию. Было обнаружено, что вакцины снижают тяжесть заболевания, но не полностью препятствуют возникновению заболевания у инфицированных свиней.

Вирус PRRS впервые были описан в 1987 в Северной Америке и Центральной Европе. Вирус PRRS является небольшим оболочечным РНК-вирусом. Он содержит одноцепочечный положительный РНК-геном размером приблизительно 15 тысяч пар оснований. Геном содержит девять открытых рамок считывания. Вирус является членом рода Arterivirus, семейство Arteriviridae, отряд Nidovirales. Двумя прототипными штаммами PRRSV являются североамериканский штамм, VR-2332, и европейский штамм, вирус Лелистад (LV). Европейский и североамериканский штаммы PRRSV вызывают сходные клинические проявления. Недавно в Китае появился высокопатогенный штамм североамериканского генотипа. Этот штамм, HP-PRRSV, является более вирулентным, чем все другие штаммы, и вызывает значительные потери в азиатских странах. Клинические признаки включают неспособность к размножению у свиноматок, такую как выкидыши и рождение мертвых или мумифицированных плодов, и цианоз уха и вульвы. У новорожденных свиней заболевание вызывает расстройство дыхания с повышенной предрасположенностью к респираторным инфекциям, таким как болезнь Глассера.

Вакцины против указанных выше патогенов широко известны. Общепринятая вакцина для профилактического лечения животных, в частности, свиней, от инфекции PCV-2, может быть основана на целом инактивированном вирусе PCV-2 в качестве (нереплицирующегося) иммуногена. Также в данной области было показано, что кодируемый ORF2 капсидный белок (например, при рекомбинантной экспрессии) является пригодным в качестве субъединичного иммуногена PCV-2 для применения в адекватной вакцине. Это может быть понятно, поскольку эта субъединица в кровеносной системе проявляется так же, как и сам вирус (она формирует вирусоподобные частицы), по существу отличаясь только тем, что ДНК и неструктурные белки не присутствуют внутри капсида. Несколько вакцин против PCV-2 уровня техники являются коммерчески доступными. Porcilis^® PCV (доступная от MSD Animal Health, Boxmeer, Нидерланды) представляет собой вакцину для защиты свиней от PCV-2, для применения у свиней в возрасте от трех недель и старше. При введении в качестве вакцины с двумя введениями (двумя дозами), длительность иммунитета (DOI) составляет 22 недели, практически полностью охватывая период откорма свиней. Ingelvac CircoFlex^® (доступная от Boehringer Ingelheim, Ingelheim) представляет собой вакцину для защиты свиней от PCV-2, для применения у свиней от двух недель и старше. Она зарегистрирована в качестве вакцины только с однократным введением (одна доза). Circovac^® (доступная от Ceva, Libourne, Франция) представляет собой вакцину для защиты свиней от PCV-2 для применения у свиней в возрасте трех недель и старше. Suvaxyn^® PCV (доступная от Zoetis, Capelle a/d IJssel, Нидерланды) представляет собой вакцину для защиты свиней от PCV-2, для применения у свиней в возрасте трех недель и старше. Другие вакцины против PCV-2 описаны, например, в WO2007/028823, WO 2007/094893 и WO2008/076915.

Что касается Mhyo, существует множество коммерческих вакцин, и их часто используют в коммерческом свиноводстве. Как правило, эти вакцины содержат нереплицирующиеся иммуногены, такие как субъединичные белки и/или бактерины (т.е. композиция, либо содержащая убитые бактерии в качестве цельных клеток, (частично) лизированных, гомогенизированных, обработанных на прессе Френча, их комбинацию, либо содержащая убитые бактерии в другой форме при условии, что композиция получена из убитой бактериальной культуры), которые, как правило, вводят посредством парентеральной инъекции. Некоторыми примерами являются: RespiSure® (Zoetis), Ingelvac® M. hyo, и MycoFLEX® (Boehringer Ingelheim), Hyoresp® (Merial), Stellamune® Mycoplasma (Elanco Animal Health), Fostera® PCV MH (Zoetis) и M+Pac® и Porcilis® Mhyo (обе доступны от MSD Animal Health).

Что касается вируса PRRS, хотя описаны и коммерчески доступны инактивированные вирусные вакцины, модифицированные живые вакцины (MLV вакцины), содержащие либо европейский тип (тип I), либо североамериканский тип (тип II) в аттенуированной форме, являются основными иммунологическими инструментами для его контроля. В данной области несколько вакцин являются коммерчески доступными. Porcilis® PRRS (доступная от MSD Animal Health, Boxmeer, Нидерланды) представляет собой вакцину, содержащую живой аттенуированный вирус PRRS типа I, и она зарегистрирована для снижения инфекции (виремии), вызываемой инфекцией вирусом PRRS. Ingelvac PRRS® MLV (доступная от Boehringer Ingelheim, Ingelheim) представляет собой вакцину, которая способствует уменьшению заболевания, вызываемого вирусом PRRS и которая обеспечивает перекрестную защиту против штаммов разных типов. Fostera® PRRS (доступная от Zoetis, Florham Park, New Jersey, США) также представляет собой вакцину MLV, и она зарегистрирована для защиты как от респираторной, так и репродуктивной формы заболевания, вызываемого вирусом PRRS. Другая вакцина MLV против PRRS представляет собой PrimePac PRRS (тип II), доступную от Merck Animal Health, Madison, NJ, США. Другие вакцины против PRRS описаны, например, в WO2006/074986, US 8728487 и WO2014/048955.

Описанные выше вакцины часто используются в качестве одновалентных вакцин, готовых для применения смесей (таких как Porcilis PCV M Hyo), приготавливаемых конечным потребителем смесей (например, таких как Ingelvac 3FLEX) и/или совместно применяемых без смешения, как известно, например, из WO2018/189290.

ЗАДАЧА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Существует постоянная потребность в удобных, безопасных и эффективных способах контроля здоровья свиней. В частности, существует потребность в удобных, безопасных и эффективных вакцинах, которые могут использоваться для профилактического лечения свиньи от инфекции PCV-2, инфекции Mhyo и инфекции вирусом PRRS, обеспечивая достаточную защиту без тяжелых негативных эффектов процесса вакцинации при минимизации стресса для вакцинированных свиней.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Чтобы выполнить задачу изобретения, было обнаружено, что комбинация первой вакцины, содержащей нереплицирующийся иммуноген цирковируса свиней типа 2 (PCV2) и нереплицирующийся иммуноген Mycoplasma hyopneumoniae, и второй вакцины, содержащей живой аттенуированный вирус репродуктивного и респираторного синдрома свиней (PRRS), может с преимуществом использоваться для профилактического лечения свиньи от инфекции цирковирусом свиней типа 2, инфекции Mycoplasma hyopneumoniae и инфекции вирусом PRRS, посредством ассоциированного раздельного инъецирования первой вакцины и второй вакцины в ткань свиньи в первой и второй областях инъекции соответственно, где первая и вторая области инъекции находятся на расстоянии не более 5 см друг от друга.

Хотя ассоциированное раздельное введение первой вакцины, содержащей нереплицирующийся иммуноген PCV-2 и нереплицирующийся иммуноген Mhyo, и второй вакцины, содержащей живой аттенуированный вирус PRRS, уже описано в WO2018/189290, было обнаружено, что эффекты защиты могут быть еще более улучшены без каких-либо негативных побочных эффектов относительно указанного документа, путем инъекции первой вакцины и второй вакцины в ткань свиньи в отдельные области инъекции, которые находятся на расстоянии не более 5 см друг от друга. Без связи с теорией полагают, что инъекция вблизи стимулирует иммунный ответ каким-то образом, возможно путем увеличенного локального присутствия антигенов, используемых в заявленной в формуле изобретения комбинации, т.е. нереплицирующегося иммуногена PCV-2 и Mhyo, и живого аттенуированного вируса PRRS. Увеличенное локальное присутствие антигена, по-видимому, приводит к увеличенной эффективности индивидуальных вакцин или по меньшей мере не сниженной эффективности, без индукции каких-либо нежелательных побочных эффектов. Хотя, как правило, область депонирования в ткани свиньи (такой как мышечная ткань) после инъекции может составлять вплоть до 3-4 см, и, таким образом, при введении двух вакцин отдельно на расстоянии 6-7 см все еще будет перекрывание областей депонирования и, таким образом, будет ожидаться стимулирующий эффект, полагают, что, когда расстояние между областями инъекции превышает 5 см, перекрывание между областями депонирования соответствующих вакцин является низким, так что не остается практических преимуществ.

Изобретение также относится к наборам, содержащим первую вакцину, содержащую нереплицирующийся иммуноген цирковируса свиней типа 2 (PCV2) и нереплицирущийся иммуноген Mycoplasma hyopneumoniae, и отдельно вторую вакцину, содержащую живой аттенуированный вирус PRRS, для применения для профилактического лечения свиньи от инфекции цирковирусом свиней типа 2, инфекции Mycoplasma hyopneumoniae и инфекции вирусом PRRS, посредством ассоциированного раздельного инъецирования первой вакцины и второй вакцины в ткань свиньи в первой и второй областях инъекции, соответственно, где первая и вторая области инъекции находятся на расстоянии не более 5 см.

Также вариантом осуществления изобретения является способ профилактического лечения свиньи от инфекции цирковирусом свиней типа 2 (PCV2), инфекции Mycoplasma hyopneumoniae и инфекции вирусом PRRS посредством ассоциированного раздельного инъецирования первой вакцины и второй вакцины в ткань свиньи в первой и второй областях инъекции, соответственно, где первая и вторая области инъекции находятся на расстоянии не более 5 см.

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Вакцина представляет собой фармацевтическую композицию, которая является безопасной для введения данному животному и способна индуцировать защитный иммунитет у этого животного против патогенного микроорганизма, т.е. индуцировать успешное профилактическое лечение, как определено в настоящем описании ниже.

Комбинация первой и второй вакцин представляет собой набор вакцин, где первая вакцина индивидуально обособлена от второй вакцины, но где эти две вакцины используют совместно для введения одному и тому же индивидууму в ходе одной согласованной обработки.

"Нереплицирующйися иммуноген" патогена представляет собой любое вещество или соединение, соответствующее патогену, отличное от живого реплицирующегося патогена в целом (либо в форме дикого типа, либо в аттенуированной форме), против которого намереваются индуцировать иммунологический ответ, так что соответствующий вирулентный патоген или один или несколько из его факторов вирулентности будут распознаваться иммунной системной хозяина в результате этого иммунного ответа и в конечном итоге по меньшей мере частично нейтрализоваться. Типичными примерами нереплицирующихся иммуногенов являются убитые целые патогены (этот термин включает патогены в лизированной форме) и субъединицы этих патогенов, такие как капсидные белки, экспрессируемые на поверхности молекулы (например, рекомбинантно экспрессируемые белки или липополисахариды) и экскретируемые молекулы, такие как токсины.

Бактерин представляет собой суспензию убитых бактерий, в качестве либо цельных клеток, либо частично лизированных или полностью лизированных (как например, посредством гомогенизации, прессования на прессе Френча или комбинации двух или более способов лизиса).

Живой аттенуированный патоген представляет собой жизнеспособную компетентную в отношении репликации форму патогена, имеющую сниженную вирулентность. В процессе аттенуации используют инфекционный патоген и его изменяют так, чтобы он стал безвредным или менее вирулентным, как правило, либо путем множества пассирований патогена через клеточные системы, либо путем генной модификации патогена.

Профилактическое лечение инфекции патогеном способствует предупреждению, смягчению или излечению инфекции этим патогеном или нарушения вследствие этой инфекции при заражении после лечения патогенным патогеном, в частности, снижая его нагрузку у хозяина после такого заражения или способствуя предупреждению или облегчению одного или нескольких клинических проявлений в результате инфицирования патогеном после лечения.

Свинья представляет собой животное, принадлежащее семейству Suidae - семейству парнокопытных млекопитающих, которые часто называют свиньями, кабанами или боровами. В настоящее время известно восемнадцать ныне существующих видов (или девятнадцать, если считать домашних свиней и диких кабанов отдельными видами), классифицируемых на от четырех до восьми родов. В этом семействе род Sus включает домашнюю свинью, Sus scrofa domesticus или Sus domesticus.

Ассоциированное введение вакцин, также называемое совместным введением, представляет собой введение этих вакцин по-отдельности, таким образом, не смешанными перед ведением, целевому животному, но в пределах таких временных рамок, чтобы происходила ожидаемая иммунологическая интерференция, как правило, в пределах 24 часов. Примерами ассоциированного применения являются одновременное введение в разные области применения у целевого животного и введение в одну и ту же или в разные области применения, но в разное время, как правило, с интервалом 1-6 часов.

Одновременное введение вакцин означает введение точно в одно и то же время или по меньшей мере в пределах периода времени, составляющего 1 час, предпочтительно в пределах 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 минут или даже в пределах 1 минуты.

Введение однократной дозы вакцины для применения для профилактического лечения означает, что для достижения защитного иммунитета вакцинация не должна быть усилена вторым введением вакцины. В режиме из двух уколов первую (первичную) вакцинацию, как правило, усиливают в пределах 6 недель от первого введения, часто в пределах 3 или даже 2 недель после первого введения, и защитный иммунитет, т.е. успешное профилактическое лечение, как определено выше, может быть достигнут только после второго (бустерного) введения.

ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном из вариантов осуществления комбинации первой и второй вакцины для применения в соответствии с изобретением, первая и вторая области инъекции находятся на расстоянии не более 4 см друг от друга или на расстоянии не более 3 см друг от друга. Полагают, что близкое проведение инъекций приводит к дополнительному увеличению обнаруженных стимулирующих эффектов.

В другом варианте осуществления комбинации первой и второй вакцин для применения согласно любому из предшествующих положений, применение характеризуется тем, что ассоциированная раздельная инъекция первой вакцины и второй вакцины происходит одновременно. Этот вариант осуществления имеет преимущество, состоящее в том, что животное необходимо обрабатывать только один раз или по меньшей мере в течение только очень короткого периода времени для депонирования обеих вакцин на близком расстоянии.

В другом варианте осуществления первая и вторая вакцина, введенная посредством указанных инъекций, депонируется по меньшей мере частично в мышечной ткани свиньи. Было обнаружено, что мышечная ткань свиньи является особенно преимущественной для депонирования двух отдельных вакцин на близком расстоянии. Вакцины могут быть инъецированы, например, с использованием шприца для подкожных инъекций, который проникает в мышечную ткань, или с использованием струйного потока соответствующих вакцин с использованием безыгольного устройства, где струйный поток проникает в кожу свиньи и в конечном итоге достигает нижележащей мышечной ткани (не исключая того, что часть вакцин депонируется в дерме).

В другом варианте осуществления первую и вторую вакцины вводят посредством однократной дозы. Было обнаружено, что введение однократной дозы каждой из двух вакцин приводило к эффективной вакцинации против всех патогенов. Это обеспечивает в высокой степени удобный и экономичный способ защитить животных от этих патогенов.

В другом варианте осуществления нереплицирующийся иммуноген PCV-2 представляет собой рекомбинантно экспрессируемый белок, кодируемый геном ORF2 PCV-2, например, такой как экспрессируемый бакуловирусом белок PCV-2, как известно в данной области. Было показано, что этот рекомбинантный белок является пригодным для применения в рамках настоящего изобретения. В частности, белок ORF2 может экспрессироваться в бакуловирусной системе экспрессии, такой как описана в WO2007/028823, WO 2007/094893 или WO2008/076915.

В другом варианте осуществления нереплицирующийся иммуноген Mycoplasma hyopneumoniae представляет собой бактерин Mycoplasma hyopneumoniae. Такой антиген Mhyo относительно легко получить, и он имеет хорошую историю эффективности в ежедневной практике свиноводства.

Далее изобретения объяснено более подробно с использованием следующего примера.

ПРИМЕР

Задача

Задачей этого эксперимента было определение эффективности разных смешанных и не смешанных комбинаций вакцин против PCV-2, Mhyo и PRRS у поросят в возрасте трех недель, определенной по заражению PCV2 через две недели после вакцинации. Эффективность PRRS и Mhyo оценивали на основе серологии.

Схема испытания

Для этого испытания использовали тридцать поросят. Проводили вакцинацию трех групп по 10 животных в возрасте трех недель (+/- трое суток). В группе 1 вводили однократную дозу 2 мл коммерческой вакцины Porcilis PCV M Hyo (содержащей экспрессируемый бакуловирусом белок ORF2 PCV2 и бактерин Mhyo), вводимой внутримышечно посредством шприца для подкожных инъекций в правую сторону шеи, и однократную дозу 2 мл коммерческой вакцины Porcilis PRRS (содержащей живой аттенуированнй вирус PRRS, тип I), вводимой внутримышечно через иглу для подкожных инъекций в ту же сторону шеи на расстоянии 3 см от другой области введения. В группе 2 проводили ту же вакцинацию, но вакцину PCV MHyo вводили в правую сторону шеи, в то время как вакцину PRRS вводили в левую сторону шеи. Группу 3 вакцинировали только вакциной PRRS, и она выступала в качестве контроля заражения PCV-2. Через две недели после вакцинации (в возрасте 5 недель) всех животных заражали с использованием дозы 5,8 log₁₀ TCID_5o вируса PCV-2b дикого типа, примененного интраназально.

Через три недели после заражения всех животных умерщвляли и проводили взятие образцов пахового лимфатического узла, брызжеечного лимфатического узла, миндалевидной железы и легкого для детекции нуклеиновой кислоты PCV-2. После вакцинации всех поросят наблюдали каждые сутки в отношении клинических признаков. Взятие образцов сыворотки проводили в день вакцинации и через 2, 4 и 5 недель после нее (во время некропсии). Образцы тестировали в отношении присутствия нуклеиновой кислоты вируса PCV-2 и в отношении антител против PRRS и M hyo.

Результаты

Вакцины были безопасными для введения, не наблюдали неприемлемых побочных эффектов.

Результаты PCV-2 показали устойчивые признаки улучшенной защиты против заражения PCV-2. Результаты представлены в таблицах 1-3 ниже. Как можно видеть, виремия (на SD28 и 35), и, в частности, вирусная нагрузка в разных основных тканях и показатель IHC, в целом, были лучшими для группы 1 - группы, в которой вводили две вакцины на близком расстоянии, т.е. на расстоянии в пределах 5 см, в частности, на расстоянии приблизительно 3 см.

Таблица 1 Виремия PCV2 (кПЦР)

Титр (log10) SD0 SD13 SD28 SD35 1. PCV M HYO+PRRS (одна сторона) 0,00 0,24 2,10 1,15 2. PCV M HYO+PRRS (разные стороны) 0,00 0,20 2,38 1,40 3. Контроль (PRRS) 0,00 0,65 4,64 3,28

Таблица 2 Вирусная нагрузка PCV2 в тканях (log10 копий/мкл)

Миндалевидная железа Легкое IngLN MesLN 1. PCV M HYO+PRRS (одна сторона) 4,58 4,42 3,97 3,86 2. PCV M HYO+PRRS (разные стороны) 5,28 4,77 4,83 4,06 3. Контроль (PRRS) 7,41 6,32 6,71 6,89

Таблица 3 Средние показатели IHC

Миндалевидная железа IngLN MesLN Итого 1. PCV M HYO+PRRS (одна сторона) 0,3 0,3 0,4 1,0 2. PCV M HYO+PRRS (разные стороны) 0,7 0,4 0,4 1,5 3. Контроль (PRRS) 2,5 2,3 2,4 7,2

Также результаты Mhyo оказались лучшими для группы 1. Результаты указаны ниже в таблицах 4 и 5. Сероконверсия происходила быстрее и полученное соотношение S/P было неизменно более высоким.

Таблица 4 Процент животных после сероконверсии

SD0 SD13 SD28 SD35 1. PCV M HYO+PRRS (одна сторона) 0 20 90 90 2. PCV M HYO+PRRS (разные стороны) 0 0 40 80 3. Контроль (PRRS) 0 0 0 0

Таблица 5 Иммунный ответ на M Hyo

S/P SD0 SD13 SD28 SD35 1. PCV M HYO+PRRS (одна сторона) 0,04 0,19 0,86 1,05 2. PCV M HYO+PRRS (разные стороны) 0,07 0,11 0,57 0,71 3. Контроль (PRRS) 0,15 0,08 0,03 0,01

Также результаты PRRS оказались улучшенными для группы 1. Результаты указаны ниже в таблице 6. Полученное соотношение S/P было неизменно более высоким для группы 1.

Таблица 6 Иммунный ответ на PRRS (ELISA)

S/P SD0 SD13 SD28 SD35 1. PCV M HYO+PRRS (одна сторона) 0,29 0,41 1,28 1,10 2. PCV M HYO+PRRS (разные стороны) 0,35 0,30 0,80 0,89 3. Контроль (PRRS) 0,38 0,34 0,63 0,52

В кратком изложении, ассоциированное раздельное инъецирование вакцины PCV Mhyo и вакцины PRRS на близком расстоянии приводило, в целом, к лучшему иммунному ответу по сравнению с введением обеих вакцин в разные стороны шеи. Учитывая тот факт, что эффект присутствовал для всех типов антигена: субъединичного антигена (белок ORF2 PCV2), бактерина (Mhyo) или живого аттенуированного вируса (PRRS), точный выбор антигена, по-видимому, является некритичным. Таким образом, полагают, что, по меньшей мере когда первая вакцина содержит иммуноген того основного типа, который проиллюстрирован, т.е. нереплицирующий иммуноген, обычно индуцирующий гуморальный иммунный ответ, и вторая вакцина содержит живой аттенуированный вирус PRRS, могут быть достигнуты преимущества изобретения.

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к способу профилактического лечения свиньи от инфекции цирковирусом свиней типа 2 (PCV2), инфекции Mycoplasma hyopneumoniae и инфекции вирусом PRRS. Способ профилактического лечения свиньи от инфекции цирковирусом свиней типа 2 (PCV2), инфекции Mycoplasma hyopneumoniae и инфекции вирусом PRRS, посредством ассоциированного раздельного инъецирования первой вакцины, содержащей нереплицирующийся иммуноген цирковируса свиней типа 2 (PCV2) и нереплицирующийя иммуноген Mycoplasma hyopneumoniae, и второй вакцины, содержащей живой аттенуированный вирус репродуктивного и респираторного синдрома свиней (PRRS), в ткань свиньи в первой и второй областях инъекции, соответственно, где первая и вторая области инъекции находятся на расстоянии не более 5 см друг от друга. Изобретение позволяет обеспечить эффективную профилактику заражения свиней вышеуказанными вирусами. 9 з.п. ф-лы, 6 табл., 1 пр.

1. Способ профилактического лечения свиньи от инфекции цирковирусом свиней типа 2 (PCV2), инфекции Mycoplasma hyopneumoniae и инфекции вирусом PRRS, посредством ассоциированного раздельного инъецирования первой вакцины, содержащей нереплицирующийся иммуноген цирковируса свиней типа 2 (PCV2) и нереплицирующийя иммуноген Mycoplasma hyopneumoniae, и второй вакцины, содержащей живой аттенуированный вирус репродуктивного и респираторного синдрома свиней (PRRS), в ткань свиньи в первой и второй областях инъекции, соответственно, где первая и вторая области инъекции находятся на расстоянии не более 5 см друг от друга.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что первая и вторая области инъекции находятся на расстоянии не более 4 см друг от друга.

3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что первая и вторая области инъекции находятся на расстоянии не более 3 см друг от друга.

4. Способ по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что ассоциированное раздельное инъецирование первой вакцины и второй вакцины происходит одновременно.

5. Способ по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что первая и вторая вакцины в ходе указанного инъецирования депонируются по меньшей мере частично в мышечной ткани свиньи.

6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что первую и вторую вакцины инъецируют либо посредством шприца для подкожных инъекций, который проникает в мышечную ткань, либо посредством струйного потока соответствующих вакцин с использованием безыгольного устройства, где струйный поток проникает в кожу свиньи.

7. Способ по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что первую и вторую вакцины вводят посредством однократной дозы.

8. Способ по любому из пп. 1-7, отличающийся тем, что нереплицирующийся иммуноген PCV2 представляет собой рекомбинантно экспрессируемый белок, кодируемый геном ORF2 PCV2.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что нереплицирующийся иммуноген PCV2 представляет собой экспрессируемый бакуловирусом белок PCV2.

10. Способ по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что нереплицирующийся иммуноген Mycoplasma hyopneumoniae представляет собой бактерин Mycoplasma hyopneumoniae.