ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ МИКРОСФЕРЫ С ПРОЛОНГИРОВАННЫМ ВЫСВОБОЖДЕНИЕМ, СОДЕРЖАЩИЕ АНАЛОГ ГПП-1 ИЛИ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМУЮ СОЛЬ Российский патент 2025 года по МПК A61K9/14 A61K38/26 A61K47/56 A61K47/61 A61P3/04 A61P3/10 A61P25/16 A61P25/28 B01F21/00 B01F23/00 B01D1/00 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Данное изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей микросферу с пролонгированным высвобождением, содержащую аналог ГПП-1 или его фармацевтически приемлемую соль, и к способу получения микросферы с пролонгированным высвобождением.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Глюкагоноподобный пептид-1 (ГПП-1) образуется из полипептида-предшественника препроглюкагона из 158 аминокислот, который подвергается процессингу в различных тканях и образует различные многочисленные проглюкагон-индуцируемые пептиды, включая глюкагон, глюкагоноподобный пептид-1 (ГПП-1), глюкагоноподобный пептид-2 (ГПП-2) и оксинтомодулин (ОКСМ), которые участвуют в различных физиологических функциях, в том числе гомеостазе глюкозы, секреции инсулина, опорожнении желудка, развитии кишечника и регулировании потребления пищи. ГПП-1 вырабатывается в виде 37-аминокислотного пептида, соответствующего аминокислотам 72–108 (препроглюкагон 92–128) проглюкагона. ГПП-1 (7–36) амид или ГПП-1 (7–37) кислота является биологически активной формой ГПП-1, которая проявляет по существу эквивалентную активность относительно рецептора ГПП-1. Обнаружено, что ГПП-1 и аналоги ГПП-1, действующие как агонисты относительно рецептора ГПП-1, обеспечивают, например, эффективный гликемический контроль при лечении пациентов с сахарным диабетом 2 типа, эффект снижения массы тела, сохранения функции бета-клеток, уменьшения повышенного артериального давления и гипогликемии и/или гиперлипидемии. Определенные аналоги ГПП-1, в том числе Byetta® и Bydureon BCise® (эксенатид), Ozempic® (семаглутид), Victoza® (лираглутид), Adlyxin® (ликсисенатид); Tanzeum® (албиглутид) и Trulicity® (дулаглутид), имеются в продаже или в стадии разработки.

Агонисты ГПП-1, такие как семаглутид, представляют собой пептиды, и введение этих пептидов часто осуществляется посредством инъекции из-за различных препятствий, таких как ферментативное разложение в желудочно-кишечном тракте и слизистой оболочке кишечника, недостаточное всасывание в слизистой оболочке кишечника и пресистемный метаболизм в печени. А недавно были также выведены на рынок препараты для перорального введения, но их биодоступность очень низкая по сравнению с инъекционной лекарственной формой, так что дозировка значительно выше. Кроме того, содержащий семаглутид препарат готовят в форме для прямого введения (самостоятельного введения препарата) для продолжительного лечения ожирения или сахарного диабета, поэтому очень важно лечить боль, воспалительную реакцию и т.п., которые могут возникать в месте введения препарата.

С другой стороны, известен способ для инкапсулирования в микросферы пептида для длительного высвобождения пептида, такого как агонист ГПП-1, но для того, чтобы демонстрировать действенный длительный фармакологический эффект, в микросферу должно быть включено высокое содержание пептида. Однако в этом случае неизбежно происходит первоначальный резкий выброс действующего вещества и при этом агонист ГПП-1 имеет недостаток, потому что может привести к летальным побочным эффектам из-за этого первоначального резкого выброса.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ТЕХНИЧЕСКАЯ ЗАДАЧА

Для решения вышеописанных проблем было предложено настоящее изобретение, и задача данного изобретения состоит в том, чтобы обеспечить фармацевтическую композицию, содержащую микросферу с пролонгированным высвобождением, содержащую семаглутид, его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват, которая предотвращает первоначальное чрезмерное высвобождение действующего вещества семаглутида и проявляет свойства длительного замедленного высвобождения действующего вещества, и способ для приготовления микросферы с пролонгированным высвобождением.

ТЕХНИЧЕСКОЕ РЕШЕНИЕ

Для достижения описанных выше целей настоящее изобретение в качестве одного аспекта обеспечивает фармацевтическую композицию, которая содержит биоразлагаемый полимер и содержит микросферу с пролонгированным высвобождением семаглутида, включающую содержание семаглутида 3% по массе или более в расчете на общую массу микросферы.

В качестве другого аспекта, биоразлагаемый полимер может представлять собой один или несколько, выбранных из группы, состоящей из полимера, выбранного из группы, состоящей из полилактида (ПЛА), полигликолида (ПГА), полилактид-ко-гликолида (ПЛГА), который представляет собой сополимер лактида и гликолида, сложного полиортоэфира, полиангидрида, полиоксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната; сополимера или простой смеси из 2 или более из них; сополимера полимера и полиэтиленгликоля (ПЭГ); а также полимерно-сахарного комплекса, полимер или сополимер которого связан с сахаром.

В качестве еще одного аспекта фармацевтически приемлемая соль семаглутида может представлять собой ацетат, бензоат, гидроксинафтоат, нападизилат или памоат.

В качестве еще одного аспекта характеристическая вязкость полилактид-ко-гликолида или полилактида среди биоразлагаемых полимеров может составлять от 0,16 до 1,7 дл/г.

В качестве еще одного аспекта средний размер частицы микросферы, содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, может составлять от 5 мкм до 100 мкм.

В качестве еще одного аспекта величина диапазона значений микросферы, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, может составлять 1,2 или менее.

В качестве еще одного аспекта масса микросферы, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, может составлять от 20 до 1000 мг, от 20 мг до 800 мг, от 20 мг до 600 мг, от 20 мг до 500 мг, от 30 мг до 1000 мг, от 30 мг до 800 мг, от 30 мг до 600 мг, от 30 мг до 500 мг, от 40 мг до 1000 мг, от 40 мг до 800 мг, от 40 мг до 600 мг, от 40 мг до 500 мг, от 50 мг до 1000 мг, от 50 мг до 800 мг, от 50 мг до 600 мг или от 50 мг до 500 мг.

В качестве еще одного аспекта она может содержать один или несколько регуляторов высвобождения, выбранных из группы, состоящей из бутановой кислоты, валериановой кислоты, капроновой кислоты, энантовой кислоты, каприловой кислоты, пеларгоновой кислоты, каприновой кислоты, ундекановой кислоты, лауриновой кислоты, тридекановой кислоты, миристиновой кислоты, пентадекановой кислоты, пальмитиновой кислоты, гептадекановой кислоты, стеариновой кислоты, нонадекановой кислоты, арахиновой кислоты, изокротоновой кислоты, олеиновой кислоты, элаидиновой кислоты, сорбиновой кислоты, линолевой кислоты, арахидоновой кислоты, гидроксинафтойной кислоты, нападизиловой кислоты и памовой кислоты.

В качестве еще одного аспекта данное изобретение обеспечивает способ получения микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, включающий следующие стадии:

(a) растворение семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли и биоразлагаемого полимера в органическом растворителе с приготовлением раствора (дисперсной фазы), содержащего семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и биоразлагаемый полимер;

(b) добавление раствора, содержащего семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер, полученного на стадии (a), к водной фазе (непрерывной фазе), содержащей поверхностно-активное вещество, с приготовлением эмульсии;

(c) экстракцию и выпаривание органического растворителя из дисперсной фазы в состоянии эмульсии, полученной на стадии (b), в непрерывную фазу с образованием микросферы; и

(d) сбор микросферы из непрерывной фазы стадии (c) с приготовлением микросферы, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль.

В качестве еще одного аспекта биоразлагаемый полимер может представлять собой смесь 2 или более биоразлагаемых полимеров, отличающихся между собой.

В качестве еще одного аспекта данное изобретение обеспечивает способ получения микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, включающий следующие стадии:

(a') растворение семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли и 2 или более биоразлагаемых полимеров, отличающихся друг от друга, в органическом растворителе с приготовлением раствора (дисперсной фазы), содержащего семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер;

(b') добавление раствора, содержащего семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер, приготовленный на стадии (a'), к водной фазе (непрерывной фазе), содержащей поверхностно-активное вещество, с приготовлением эмульсии;

(c') экстракцию и выпаривание органического растворителя из дисперсной фазы в состоянии эмульсии, приготовленной на стадии (b'), в непрерывную фазу с образованием микросферы; и

(d') повторение процесса приготовления микросферы, включающего сбор микросферы из непрерывной фазы на стадии (c') для приготовления микросферы, 2 или более раза с приготовлением 2 или более микросфер, отличающихся между собой,

(e') смешивание 2 или более микросфер, состоящих из разных видов полимеров, между собой.

В качестве еще одного аспекта данное изобретение обеспечивает способ получения микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, включающий в себя следующие стадии:

(a'') растворение семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли и 2 или более биоразлагаемых полимеров, отличающихся между собой, в органическом растворителе, соответственно, с приготовлением 2 или более растворов (дисперсной фазы), содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер;

(b'') добавление 2 или более растворов, содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер, приготовленных на стадии (a''), к водной фазе (непрерывной фазе), содержащей поверхностно активное вещество, соответственно, с приготовлением 2 или более эмульсий;

(c") экстракцию и выпаривание органического растворителя из 2 или более дисперсных фаз в состоянии эмульсии, приготовленных на стадии (b"), в непрерывную фазу путем помещения 2 или более дисперсных фаз в состоянии эмульсии, приготовленных на стадии (b''), в тот же реактор с образованием микросфер; и

(d") сбор микросфер из непрерывной фазы на стадии (c").

В качестве еще одного аспекта pH непрерывной фазы, используемой в способах получения, может быть равен 5 или менее.

ПОЛЕЗНЫЕ ЭФФЕКТЫ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Фармацевтическая композиция с пролонгированным высвобождением, содержащая семаглутид, его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват в соответствии с одним препаративным примером согласно данному изобретению, может эффективно ингибировать летальные побочные эффекты путем предотвращения первоначального резкого выброса действующего вещества и может включать в себя высокое содержание действующего вещества в сравнении с размером частиц и, таким образом, обладает действием, способным к минимизации боли и воспалительной реакции у пациента, которые могут возникать при введении.

ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

ФИГ. 1 представляет собой график, подтверждающий изменение концентрации действующего вещества в плазме со временем после введения крысе микросфер, содержащих семаглутид, приготовленных в сравнительных примерах 1-4.

ФИГ. 2 представляет собой график, подтверждающий изменение концентрации действующего вещества в плазме со временем после введения крысе микросфер, содержащих семаглутид, приготовленных в примере 1, примере 2 и примере 4.

ФИГ. 3 представляет собой график, подтверждающий изменение суммарного высвобождения действующего вещества со временем после введения крысе микросфер, содержащих семаглутид, приготовленных в примере 4, примере 6, примере 7 и примере 8.

ФИГ. 4 представляет собой график, подтверждающий изменение концентрации действующего вещества в плазме со временем после введения крысе микросфер, содержащих семаглутид, приготовленных в примере 4, примере 6, примере 7 и примере 8.

ФИГ. 5 представляет собой фотографию, показывающую результат выполнения морфологического анализа на содержание микросферы, приготовленной согласно примеру 4, с помощью электронного микроскопа.

ПОДРОБНОЕ РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Далее данное изобретение будет раскрыто подробно.

Данное изобретение включает в себя семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль в качестве действующего вещества.

Семаглутид представляет собой агонист рецептора ГПП-1 N^6.26-{18-[N-(17-карбокси-гептадеканоил)-L-γ-глутамил]-10-оксо-3,6,12,15-тетраокса-9,18-диазаоктадеканоил}-[8-(2-амино-2-пропановую кислоту),34-L-аргинин]человеческий глюкагоноподобный пептид 1(7–37) и также называется N-эпсилон-26-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-карбокси-4-(17-карбоксидеканоиламино)бутириламино]этокси}этокси)ацетиламино]этокси}этокси)ацетил][Aib8,Arg34]ГПП-1-(7–37). Структура семаглутида показана в виде химической формулы 1 ниже.

[Химическая формула 1]

Этот семаглутид может быть приготовлен, как описано в препаративном примере 4 международной патентной публикации WO2006/097537, а также может быть использован имеющийся в продаже семаглутид.

Семаглутид может присутствовать, в частности, в виде фармацевтически приемлемой соли. В качестве соли можно использовать соли, часто используемые в данной области техники, без ограничений. Термин «фармацевтически приемлемая соль», согласно данному изобретению, означает любую из всех органических или неорганических солей присоединения соединения, при этом побочные эффекты, благодаря этим солям, не уменьшают полезное действие действующего вещества в концентрации, обладающей эффективным действием, которая является относительно нетоксичной и безвредной. Конкретный пример может включать ацетат, бензоат, гидроксинафтоат, нападизилат или памоат семаглутида, или тому подобное, но не ограничен этим.

Активное вещество, согласно данному изобретению, семаглутид или его фармацевтически приемлемая соль, может существовать в различных формах, например, в аморфной или кристаллической форме.

Биоразлагаемый полимер, включенный в микросферы с пролонгированным высвобождением семаглутида, содержащийся в фармацевтической композиции в соответствии с данным изобретением, выбран из группы, состоящей из полилактида (ПЛА), полигликолида (ПГА), полилактид-ко-гликолида (ПЛГА), который представляет собой сополимер лактида и гликолида, полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната; сополимера или простой смеси 2 или более, сополимера полимера и полиэтиленгликоля (ПЭГ), а также полимерно-сахарного комплекса, полимер или сополимер которого связан с сахаром. В качестве одного конкретного аспекта фармацевтическая композиция в соответствии с данным изобретением может содержать микросферу, содержащую 2 или более биоразлагаемых полимера. В качестве другого конкретного аспекта фармацевтическая композиция в соответствии с данным изобретением может содержать 2 или более микросферы, содержащие один или несколько полимеров, выбранных из биоразлагаемого полимера, соответственно.

Указанные 2 или более полимеров, выбранных из группы, состоящей из полилактид-ко-гликолида и полилактидных полимеров, не ограничены этим, а молярное соотношение лактида к гликолиду в сополимере может составлять от 50:50 до 100:0, от 60:40 до 90:10 или от 70:30 до 80:20, и характеристическая вязкость полимера составляет от 0,16 дл/г до 1,7 дл/г, от 0,2 дл/г до 1,3 дл/г или от 0,24 дл/г до 1,2 дл/г.

Характеристическая вязкость полилактид-ко-гликолида или полилактида, используемого в данном изобретении, относится к вязкости, измеряемой при концентрации 0,1% (м/об) в хлороформе при 25°С с использованием вискозиметра Уббелоде. Если характеристическая вязкость полилактид-ко-гликолида или полилактида составляет менее 0,16 дл/г, молекулярная масса полимера недостаточна, и, следовательно, трудно обнаружить эффект пролонгированного высвобождения семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли, а если характеристическая вязкость выше 1,7 дл/г, может возникнуть слишком большой эффект задержки высвобождения семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли. Кроме того, при производстве микросферы с использованием полимера с высокой характеристической вязкостью существует проблема в том, что должно применяться избыточное количество растворителя для производства из-за высокой вязкости полимера, и трудно производить воспроизводимые микросферы. Пример доступного на рынке полимера, обладающего вышеуказанными характеристиками, может включать RG502H, RG503H, RG504H, RG502, RG503, RG504, RG653H, RG752H, RG752S, RG755S, RG750S, RG757S, RG858S, R202H, R203H, R205H, R202S, R203S, R205S, R206S и R207S, которые представляют собой серии Resomer компании Evonik, и PDL 02A, PDL 02, PDL 04, PDL 05, PDLG 7502A, PDLG 7502, PDLG 7507, PDLG 5002A, PDLG 5002, PDLG 5004A и PDLG 5004 компании Corbion и тому подобное.

Содержание семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли в микросферах с пролонгированным высвобождением, содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, в соответствии с данным изобретением предпочтительно составляет 3% по массе или более, 3,5% по массе или более, или 3,9% по массе или более в виде семаглутида в пересчете на общую массу микросферы. Если содержание семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли в микросфере составляет менее 3% по массе в расчете на семаглутид, поскольку используемое количество полимера слишком велико в сравнении с действующим веществом, биодоступность семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли может быть снижена, а если содержание слишком высоко, это не является предпочтительным, поскольку имеется проблема высокого первоначального высвобождения семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли.

Микросферы, содержащие семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль в соответствии с данным изобретением, могут предпочтительно иметь стандартное распределение частиц со средним размером частиц от 5 мкм до 100 мкм, от 5 до 90 мкм, от 5 мкм до 80 мкм, от 10 мкм до 90 мкм, от 10 мкм до 80 мкм, от 15 мкм до 100 мкм, от 15 мкм до 90 мкм, от 15 мкм до 80 мкм, от 70 мкм до 100 мкм, от 70 мкм до 90 мкм, от 70 мкм до 80 мкм, от 60 мкм до 100 мкм, от 60 мкм до 80 мкм, от 60 мкм до 70 мкм, от 90 мкм до 100 мкм, от 20 мкм до 90 мкм, от 20 мкм до 70 мкм, от 20 мкм до 60 мкм, от 30 мкм до 80 мкм, от 30 мкм до 60 мкм, от 40 мкм до 70 мкм, от 40 мкм до 50 мкм, от 30 мкм до 40 мкм, от 20 мкм до 30 мкм, от 5 мкм до 30 мкм, от 5 мкм до 20 мкм, от 10 мкм до 20 мкм или от 5 мкм до 10 мкм. Используемый в данном изобретении термин «средний размер частиц» означает размер частиц, соответствующий 50% от величины % на кривой распределения частиц по размеру, и означает средний диаметр, и выражен как D50 или D(v, 0,5).

Если средний размер частицы микросферы, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, составляет менее 5 мкм, это не является предпочтительным, поскольку высвобождение действующего вещества семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли происходит слишком быстро. Если средний размер частицы превышает 100 мкм, это не является предпочтительным, поскольку при введении в организм человека проходит слишком толстая игла и, следовательно, это может вызывать признаки болезни при осуществлении инъекции или действующее вещество может проникать в место инъекции после введения.

Микросфера, содержащая семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль согласно данному изобретению, предпочтительно имеет стандартное распределение частиц. Микросфера, содержащая семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, со стандартным распределением частиц имеет меньшую изменчивость во время введения, чем нестандартная микросфера, и может быть введена в более точном количестве. Предпочтительно, чтобы распределение по размеру или величина диапазона значений микросферы, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, согласно данному изобретению, составляла 1,5 или менее. Более предпочтительно, желательно, чтобы распределение по размеру составляло 1,2 или менее. Более конкретно распределение по размеру или величина диапазона значений может составлять 1,5 или менее, 1,2 или менее, от 0,1 до 1,5, от 0,3 до 1,5, от 0,5 до 1,5, от 0,1 до 1,0, от 0,4 до 1,0, от 0,6 до 1,0, от 0,2 до 0,8 или от 0,4 до 0,8. Используемый в данном изобретении термин «распределение по размеру» или «величина диапазона значений» означает показатель, указывающий на однородность размера частицы микросферы, и означает величину, полученную по формуле величины диапазона значений = (Dv0,9-Dv0,1)/Dv0,5. Здесь Dv0,1 представляет собой размер частицы, соответствующий 10% от величины % на кривой распределения по размеру частиц микросфер, а Dv0,5 означает размер частицы, соответствующий 50% от величины % на кривой распределения по размеру частиц микросфер, и Dv0,9 означает размер частицы, соответствующий 90% от величины % на кривой распределения по размеру частиц микросфер.

Микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащие семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, согласно данному изобретению, вводят путем инъекции, например, подкожной инъекции, и в частности, насколько это возможно, вводят самостоятельно, предпочтительно, чтобы семаглутид высвобождался в течение относительно длительного периода. Предпочтительно, микросфера с пролонгированным высвобождением фармацевтической композиции в соответствии с данным изобретением не ограничена этим, но может высвобождать семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль в течение одного месяца или более, 2 месяцев или более, 3 месяцев или более, от 1 месяца до 2 месяцев, от 1 месяца до 3 месяцев, от 1 месяца до 4 месяцев, от 1 месяца до 5 месяцев, от 1 месяца до 6 месяцев, от 2 месяцев до 6 месяцев, от 2 месяцев до 5 месяцев, от 2 месяцев до 4 месяцев, от 2 месяцев до 3 месяцев, от 3 месяцев до 5 месяцев или от 3 месяцев до 4 месяцев. Кроме того, в микросфере с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, согласно данному изобретению, данный аспект высвобождения не имеет конкретных ограничений, но предпочтительно, чтобы семаглутид или его фармацевтически приемлемая соль высвобождались менее чем на 10%, менее чем на 15% или менее чем на 20% в пределах 24 часов после того, как введены в живой организм.

Кроме того, в фармацевтической композиции, согласно данному изобретению, общее количество микросфер с пролонгированным высвобождением, содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, может составлять от 20 до 1000 мг, от 20 мг до 800 мг, от 20 мг до 600 мг, от 20 мг до 500 мг, от 30 мг до 1000 мг, от 30 мг до 800 мг, от 30 мг до 600 мг, от 30 мг до 500 мг, от 40 мг до 1000 мг, от 40 мг до 800 мг, от 40 мг до 600 мг, от 40 мг до 500 мг, от 50 мг до 1000 мг, от 50 мг до 800 мг, от 50 мг до 600 мг или от 50 мг до 500 мг. При содержании микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, в композиции в пределах этого диапазона, композиция в соответствии с данным изобретением имеет преимущество не только минимизации воспалительной реакции в месте введения, но также предусматривает самостоятельное введение препарата пациентом.

Микросферы, содержащие семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, содержащиеся в композиции согласно данному изобретению, могут дополнительно содержать регулятор высвобождения. Вещество, используемое в качестве регулятора высвобождения, может включать одно или несколько, выбранных из бутановой кислоты, валериановой кислоты, капроновой кислоты, энантовой кислоты, каприловой кислоты, пеларгоновой кислоты, каприновой кислоты, ундекановой кислоты, лауриновой кислоты, тридекановой кислоты, миристиновой кислоты, пентадекановой кислоты, пальмитиновой кислоты, гептадекановой кислоты, стеариновой кислоты, нонадекановой кислоты, арахиновой кислоты, изокротоновой кислоты, олеиновой кислоты, элаидиновой кислоты, сорбиновой кислоты, линолевой кислоты, арахидоновой кислоты, бензоата, гидроксинафтойной кислоты, нападизиловой кислоты и памовой кислоты в качестве примера, но не ограничиваясь этим. Предпочтительно регулятор высвобождения может представлять собой гидроксинафтойную кислоту, нападизиловую кислоту или памовую кислоту, но не ограничивается этим.

Фармацевтическая композиция, содержащая микросферы, содержащие семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль в соответствии с данным изобретением, может быть составлена в виде различных типов препаратов и, например, она может представлять собой известную форму выпуска в виде препарата для парентерального введения. Соответственно, фармацевтическая композиция в соответствии с данным изобретением может дополнительно содержать наполнитель, стабилизатор, регулирующий тоничность агент, регулирующий pH агент, поверхностно-активное вещество, вспомогательное вещество и/или носитель в дополнение к семаглутиду или его фармацевтически приемлемой соли. Доступный регулирующий тоничность агент может включать водное вспомогательное вещество, такое как маннитол, сахароза, сорбит, трегалоза, лактоза, натрия хлорид и тому подобное или сахарид, а наполнитель может включать кармеллозу натрия, карбоксиметилцеллюлозу натрия, повидон и т.п. в качестве примера. В качестве поверхностно-активного вещества допустим поливиниловый спирт и т. п. Кроме того, в качестве буфера можно использовать моногидрофосфат натрия, ангидрид лимонной кислоты, гидроксид натрия, хлорид натрия и т.п.

Фармацевтическую композицию в соответствии с данным изобретением можно вводить в терапевтической дозе семаглутида, например, в эффективной дозе в целях лечения сахарного диабета, в частности, сахарного диабета 2 типа, сохранения функции бета-клеток, высокого артериального давления, гиперлипидемии, ожирения, неалкогольного стеатогепатита или нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона. Терапевтически эффективную дозу семаглутида может определять врач. Фармацевтическую композицию, содержащую семаглутид в соответствии с данным изобретением, можно вводить от одного раза в месяц до одного раза в три месяца. В некоторых конкретных примерах дозировка один раз в месяц композиции в соответствии с данным изобретением может составлять от 1,0 мг до 100 мг, от 1,0 мг до 80 мг, от 1,0 мг до 30 мг, от 1,0 мг до 20 мг, от 2,0 мг до 100 мг, от 2,0 мг до 80 мг, от 2,0 мг до 30 мг, от 2,0 мг до 20 мг, от 4,0 мг до 100 мг, от 4,0 мг до 80 мг, от 4,0 мг до 30 мг, от 4,0 мг до 20 мг, от 8,0 мг до 100 мг, от 8,0 мг до 80 мг, от 8,0 мг до 30 мг, от 8,0 мг до 20 мг, от 9,6 мг до 100 мг, от 9,6 мг до 80 мг, от 9,6 мг до 30 мг, от 9,6 мг до 20 мг, от 10 мг до 100 мг, от 10 мг до 80 мг, от 10 мг до 30 мг, от 10 мг до 20 мг, от 1,0 мг до 10 мг, от 1,0 мг до 9,6 мг, от 1,0 мг до 8,0 мг, от 1,0 мг до 6,0 мг, от 2,0 мг до 10,0 мг, от 2,0 мг до 9,6 мг, от 2,0 мг до 8,0 мг, от 2,0 мг до 6,0 мг, от 2,0 мг до 24,0 мг или от 2,0 мг до 12 мг в расчете на семаглутид. Фармацевтическая композиция, в соответствии с данным изобретением, содержащая микросферу, содержащую семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль согласно данному изобретению, может вводиться путем парентерального введения, например, подкожной инъекции. Фармацевтическая композиция в соответствии с данным изобретением может вводиться с помощью предварительно заполненного шприца, например, шприца-ручки, этот шприц-ручка может представлять собой одноразовый шприц, содержащий однократную дозу, или дозирующий шприц (шприц с дозирующим устройством), делающий инъекцию только одной дозы при введении препарата.

В качестве одного конкретного варианта осуществления изобретения микросфера с пролонгированным высвобождением, содержащая семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, содержащаяся в композиции в соответствии с данным изобретением, имеет высокое содержание действующего вещества в сравнении с содержимым микросферы, а также ингибируют первоначальный резкий выброс действующего вещества, который может вызвать летальные побочные эффекты, и проявляет терапевтическую эффективность в качестве агониста ГПП-1, достаточную для необходимого периода, и, таким образом, полезна для профилактики и лечения сахарного диабета, в частности, сахарного диабета 2 типа, сохранения функции бета-клеток, высокого артериального давления, гиперлипидемии, ожирения, неалкогольного стеатогепатита или нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона.

В качестве еще одного аспекта данное изобретение предлагает способ получения микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль.

Здесь и далее главным образом раскрыт способ получения инъекционного препарата микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащего семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, согласно данному изобретению.

Инъекционный препарат микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, в соответствии с данным изобретением, может быть приготовлен, например, при помощи «способа экстракции растворителем и выпаривания», но способ получения этим не ограничен.

В качестве одного конкретного примера способа получения микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, в соответствии с данным изобретением данный способ получения включает (a) растворение семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли и биоразлагаемого полимера в органическом растворителе с получением раствора (дисперсной фазы), содержащего семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер;

(b) добавление раствора, содержащего семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер, полученный на стадии (a), к водной фазе (непрерывной фазе), содержащей поверхностно-активное вещество, с приготовлением эмульсии;

(c) экстракцию и выпаривание органического растворителя из дисперсной фазы в состоянии эмульсии, приготовленной на стадии (b), в непрерывную фазу с образованием микросферы; и

(d) сбор микросферы из непрерывной фазы стадии (c) с приготовлением микросферы, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль.

При получении микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, в соответствии с данным изобретением для того, чтобы ингибировать избыточное высвобождение первоначального семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли при включении семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли с высоким содержанием в сравнении с массой микросферы и высвобождать в определенной концентрации в течение нужного длительного периода, например, в течение 1 месяца или более, 3 месяцев или более, от 1 месяца до 2 месяцев, от 1 месяца до 3 месяцев, от 1 месяца до 4 месяцев, от 1 месяца до 5 месяцев, от 1 месяца до 6 месяцев, от 2 месяцев до 6 месяцев, от 2 месяцев до 5 месяцев, от 2 месяцев до 4 месяцев, от 2 месяцев до 3 месяцев, от 3 месяцев до 5 месяцев или от 3 месяцев до 4 месяцев, в качестве биоразлагаемого полимера, в частности, предпочтительно использовать один или несколько, выбранных из группы, состоящей из полимера, выбранного из группы, состоящей из полилактида (ПЛА), полигликолида (ПГА), полилактид-ко-гликолида (ПЛГА), который представляет собой сополимер лактида и гликолида, полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната, сополимера или простой смеси из 2 или более из них, сополимера полимера и полиэтиленгликоля (ПЭГ), а также полимерно-сахарного комплекса, полимер или сополимер которого связан с сахаром. В качестве одного конкретнлшл варианта осуществления изобретения в способе получения в соответствии с данным изобретением в качестве биоразлагаемого полимера можно использовать поли(лактид-ко-гликолид) и/или полилактидный полимер.

В настоящем изобретении в случае включения 2 или более полимеров с различными повторяющимися звеньями, составляющими полимеры, и 2 или более повторяющихся звеньев, два или более биоразлагаемых полимера, отличающиеся между собой, могут содержать 2 или более полимера с различными молярными соотношениями повторяющегося звена. Кроме того, микросфера может представлять собой смесь из микросферы, содержащей полилактид-ко-гликолид, и микросферы, содержащей полилактидный полимер, или микросферы, содержащей полилактид-ко-гликолид и полилактидные полимеры вместе. В случае включения 2 или более повторяющихся звеньев 2 или более полимера с различными молярными отношениями повторяющихся звеньев могут иметь, например, молярное соотношение (лактид : гликолид) повторяющихся звеньев лактида и гликолида в полилактид-ко-гликолиде, составляющее от 50 : 50 до 100 : 0, от 60 : 40 до 90 : 10 или от 70 : 30 до 80 : 20.

В качестве одного конкретного примера, если биоразлагаемые полимеры, отличающиеся между собой, представляют собой 2 вида, отношение содержания этих биоразлагаемых полимеров может составлять от 0,5 : 10 до 10 : 0,5, от 0,5 : 8 до 8 : 0,5, от 1 : 10 до 10 : 1, от 1 : 4 до 4 : 1, от 1 : 3 до 3 : 1 или от 1 : 2 до 2 : 1 в виде массового отношения, но не ограничивается этим.

В качестве дополнительного конкретного аспекта, для того, чтобы приготовить микросферу с пролонгированным высвобождением, содержащую семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль в соответствии с данным изобретением, когда в качестве двух или более биоразлагаемых полимеров используют полилактид-ко-гликолид, может быть включен в состав по меньшей мере один или несколько биоразлагаемых полимеров с характеристической вязкостью от 0,25 дл/г до 0,44 дл/г. Более предпочтительно молярное отношение (лактид : гликолид) повторяющего звена лактида и гликолида биоразлагаемого полимера может составлять от 95 : 5 до 50 : 50, от 85 : 15 до 50 : 50, от 75 : 25 до 50 : 50.

В качестве конкретного аспекта микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, в соответствии с данным изобретением можно приготовить микросферу с пролонгированным высвобождением, содержащую семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, содержащую 2 или более полимера, путем растворения семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли и 2 или более биоразлагаемых полимеров, например, 2 или более полимеров, выбранных из группы, состоящей из поли(лактид-ко-гликолида) и полилактидных полимеров, в органическом растворителе одновременного на стадии (a).

Кроме того, микросфера с пролонгированным высвобождением, содержащая семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, в соответствии с данным изобретением может быть приготовлена путем смешивания 2 или более микросфер, содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, отличающихся между собой, содержащих полимеры, отличающиеся между собой, приготовленных в продолжение стадии (a) - стадии (d) с использованием 2 или более биоразлагаемых полимеров, отличающихся между собой, например, поли(лактид-ко-гликолида) или полилактидных полимеров. В частности, такие 2 или более микросферы, содержащие семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, отличающиеся между собой, содержащие полимеры, отличающиеся между собой, могут быть приготовлены способом получения, включающим следующие стадии:

(a') растворение семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли и одного или нескольких биоразлагаемых полимера, отличающихся между собой, в органическом растворителе с приготовлением раствора (дисперсной фазы), содержащего семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер;

(b') добавление раствора, содержащего семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер, приготовленного на стадии (a'), к водной фазе (непрерывной фазе), содержащей поверхностно-активное вещество, с приготовлением эмульсии;

(c') экстракцию и выпаривание органического растворителя из дисперсной фазы в состоянии эмульсии, приготовленной на стадии (b'), в непрерывную фазу с образованием микросферы; и

(d') повторение процесса приготовления микросферы, включающего сбор микросферы из непрерывной фазы на стадии (c') с приготовлением микросферы, 2 раза или более с приготовлением 2 или более микросфер, отличающихся между собой,

(e') смешивание 2 или более микросфер, состоящих из разных видов полимеров, друг с другом.

В другом случае они могут быть приготовлены способом получения, включающим следующие стадии:

(a'') растворение семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли и 2 или более биоразлагаемых полимеров, отличающихся между собой, в органическом растворителе, соответственно, с приготовлением 2 или более растворов (дисперсной фазы), содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер;

(b'') добавление 2 или более растворов, содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и полимер, приготовленных на стадии (a''), к водной фазе (непрерывной фазе), содержащей поверхностно-активное вещество, с получением 2 или более эмульсий;

(c") экстракцию и выпаривание органического растворителя из 2 или более дисперсных фаз в состоянии эмульсии, приготовленных на стадии (b"), в непрерывную фазу путем помещения 2 или более дисперсных фаз в состоянии эмульсии, приготовленных на стадии (b'), в тот же реактор с образованием микросфер; и

(d") сбор микросфер из непрерывной фазы на стадии (c").

На стадии (a), (a') или (a'') один или несколько биоразлагаемых полимеров могут представлять собой поли(лактид-ко-гликолид) или полилактид. Характеристическая вязкость поли(лактид-ко-гликолида) или полилактида предпочтительно находится в диапазоне 0,16–1,7 дл/г.

На стадии (a), (a') или (a'') органический растворитель, используемый для растворения семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли и одного или нескольких биоразлагаемых полимеров, представляет собой один или несколько органических растворителей. Кроме того, как органический растворитель можно использовать смешанный растворитель, в котором смешаны один или несколько видов органических растворителей. В качестве одного конкретного аспекта смешанный растворитель может представлять собой смешанный растворитель из органического растворителя, смешиваемого с водой, и органического растворителя, несмешиваемого с водой. В этом случае предпочтительно использовать по меньшей мере 50% (об/об) или более органического растворителя со свойством не смешиваться с водой. Используя свойство органического растворителя не смешиваться с водой, на стадии (b), (b') или (b''), раскрытых ниже, может быть создана эмульсия путем равномерного перемешивания дисперсной фазы в непрерывной фазе, содержащей поверхностно-активное вещество. Вид органического растворителя, который растворяет данный семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль и один или несколько биоразлагаемых полимеров, конкретно не ограничен, но предпочтительно можно использовать смешанный растворитель из одного или нескольких растворителей, выбранных из группы, состоящей из дихлорметана, хлороформа, этилацетата, метилэтилкетона, ацетона, ацетонитрила, диметилсульфоксида, диметилформамида, N-метилпирролидона, уксусной кислоты, метилового спирта, этилового спирта, пропилового спирта и бензилового спирта; более предпочтительно, одного растворителя, выбранного из дихлорметана и этилацетата, и одного или нескольких органических растворителей, выбранных из диметилсульфоксида, N-метилпирролидона, метилового спирта и уксусной кислоты.

На стадии (b), (b') или (b'') способ однородного перемешивания непрерывной фазы, содержащей раствор семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли - полимера, и поверхностно-активного вещества конкретно не ограничен, но он может быть осуществлен с помощью высокоскоростной мешалки, встроенного смесителя, способом мембранного эмульгирования, способом эмульгирования в микрофлюидайзере, ультразвуковым смесителем или статическим смесителем, или тому подобное. Если эмульсия образуется с помощью высокоскоростной мешалки, встроенного смесителя, ультразвукового смесителя или статического смесителя, трудно получить однородную эмульсию, между раскрытыми ниже стадией (c) и стадией (d), между стадией (c') и стадией (d') или между стадией (c'') и стадией (d'') предпочтительно дополнительно осуществлять процесс просеивания и тому подобное. Эмульсию в виде однородной фракции можно получить при использовании способа мембранного эмульгирования и способа эмульгирования в микрофлюидайзере и, таким образом, дополнительно не требуется процесс просеивания и т.п. между раскрытыми ниже стадией (c) и стадией (d), между стадией (c') и стадией (d') или между стадией (c'') и стадией (d''), а значит, он является предпочтительным.

Тип поверхностно-активного вещества, используемого на стадии (b), (b') или (b''), конкретно не ограничен, можно использовать любой, если только он может способствовать тому, чтобы раствор семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли - полимера образовывал дисперсную фазу стабильных капель в непрерывной фазе. В качестве поверхностно-активного вещества можно использовать поливиниловый спирт.

На стадии (b), (b') или (b'') содержание поверхностно-активного вещества в непрерывной фазе, содержащей поверхностно-активное вещество, может составлять от 0,01% масс/об до 20% масс/об, предпочтительно от 0,03% масс/об до 18% масс/об, от 0,05% масс/об до 15% масс/об, от 0,07% масс/об до 10% масс/об или от 0,1% масс/об до 5% масс/об в расчете на общий объем непрерывной фазы, содержащей поверхностно-активное вещество. Если содержание поверхностно-активного вещества составляет менее, чем 0,01% масс/об, дисперсная фаза или эмульсия в форме капель в непрерывной фазе может не образоваться, а если содержание сурфактанта составляет более 20% масс/об, могут быть сложности при удалении поверхностно-активного вещества после образования микросферы в непрерывной фазе из-за избыточного количества поверхностно-активного вещества.

В качестве непрерывной фазы, используемой на стадии (b), (b') или (b''), можно использовать воду, и для того, чтобы контролировать степень экстракции органического растворителя из дисперсной фазы в состоянии эмульсии, можно использовать воду, содержащую некоторое количество одного или нескольких, выбранных из группы, состоящей из метилового спирта, этилового спирта, пропилового спирта и этилацетата.

Кроме того, pH непрерывной фазы может быть равным 5 или менее, 4 или менее, 3 или менее, от 2 до 5, от 2 до 4, от 2 до 3 или от 2,5 до 3, но не ограничивается этим. Когда pH непрерывной фазы регулируют в пределах данного диапазона, регулируют концентрацию H и ионов, а также первоначальное высвобождение семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли из микросферы, и, таким образом, его может дополнительно значительно снизить.

На стадии (с), (c') или (c''), когда эмульсию, содержащую дисперсную фазу в форме капель, и непрерывную фазу, содержащую поверхностно-активное вещество, поддерживают или перемешивают при температуре ниже, чем точка кипения органического растворителя в течение определенного времени, например, от 2 часов до 48 часов, органический растворитель может быть экстрагирован в непрерывную фазу из раствора семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли - полимера в форме капель, которые находятся в дисперсной фазе. Некоторое количество органического растворителя, экстрагированного в непрерывную фазу, можно выпаривать с поверхности. По мере того, как органический растворитель экстрагируют и выпаривают из раствора семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли - полимера в форме капель, дисперсная фаза в форме капель может застывать с образованием микросферы.

На стадии (с), (c') или (c'') для того, чтобы эффективно удалять органический растворитель дополнительно, для повышения температуры непрерывной фазы можно применять нагревание в течение определенного периода времени. Температура нагрева не ограничена, и специалисты в данной области техники могут отрегулировать ее соответствующим образом в зависимости от используемого органического растворителя. Например, если используется дихлорметан в качестве органического растворителя, можно применять нагрев для поддержания 30°С или более, 40°С или более, 45°С или более, от 30 до 50°С, от 40 до 50°С или 45°С.

На стадии (d), (d') или (d'') способ извлечения микросферы, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, можно осуществить, используя различные известные методики, и можно использовать, например, способ фильтрования или центрифугирования, или т.п.

Между стадией (c) и стадией (d), между стадией (c') и стадией (d') или между стадией (c'') и стадией (d'') можно удалять остаточное поверхностно-активное вещество путем фильтрования и промывания и можно извлекать микросферу путем повторного фильтрования.

Промывание для удаления остаточного поверхностно-активного вещества может осуществляться, главным образом, с использованием воды, и промывание может повторяться по несколько раз.

Кроме того, как описано выше, когда образуется эмульсия с использованием высокоскоростной мешалки или встроенного смесителя на стадии (b), (b') или (b'') однородные микросферы могут быть получены путем дополнительного применения процесса просеивания между стадиями (c) и (d), между стадиями (c') и (d') или между стадиями (c'') и (d''). Процесс просеивания может осуществляться с использованием известной технологии, и микросферы с одинаковым размером могут быть получены путем отфильтровывания друг от друга микросфер в виде мелких и крупных частиц с использованием сит с различными размерами.

Способом получения согласно данному изобретению после (d), (d') или (d'') либо после фильтрования и промывания с помощью высушивания полученных микросфер, используя обычный метод сушки, в результате можно получить высушенные микросферы.

В дополнение к вышеупомянутым веществам, для всех веществ, включающих семаглутид, биоразлагаемый полимер и их долю, которые не определены особо, все вещества, раскрытые в фармацевтической композиции, могут применяться как есть.

В соответствии со способом получения, согласно данному изобретению, может быть получен инъекционный препарат микросфер с пролонгированным высвобождением, содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, с помощью которого действующее вещество семаглутида или его фармацевтически приемлемой соли поддерживается при эффективной концентрации в течение необходимого периода при отсутствии быстрого кратковременного высвобождения. Кроме того, может быть получен инъекционный препарат микросфер с пролонгированным высвобождением, содержащих семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, в виде однородных частиц с хорошей активностью при введении.

ПРИНЦИП ИЗОБРЕТЕНИЯ

Пример

Здесь и далее данное изобретение будет более подробно описано с помощью приведенных ниже препаративных примеров. Тем не менее, следующие препаративные примеры только иллюстрируют данное изобретение, но содержание данного изобретения не ограничено приведенными ниже примерами.

Препаративный пример

Примеры 1-37 и сравнительные примеры 1-4: Получение микросферы из биоразлагаемого полимера, содержащей семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль

Дисперсную фазу приготавливали путем смешивания в качестве биоразлагаемого полимера одного или более, выбранных из ПЛГА или ПЛА (торговое наименование: Resomer^®, производитель: Evonik, Германия), и в качестве действующего вещества семаглутида (производитель: Chengdu, Китай) или его фармацевтически приемлемой соли (производитель: G2GBIO, Корея), и регулятора высвобождения в смешанном растворителе (массовое отношение около 1,7 : 1) из дихлорметана (производитель: J.T. Baker, США) и ледяной уксусной кислоты (производитель: Daejeong, Корея). Дисперсную фазу перемешивали в течение 30 минут или более и растворяли в достаточном объеме и использовали. Для непрерывной фазы использовали 1% водный раствор поливинилового спирта (вязкость: 4,8-5,8 мПа⋅с) и подавали непрерывную фазу в эмульгирующее устройство, оснащенное пористой мембраной диаметром 20 мкм, и одновременно вводили приготовленную дисперсную фазу с приготовлением эмульсии, в которой были диспергированы содержащие семаглутид микрокапли биоразлагаемого полимера, и помещали эту эмульсию в емкость для приготовления и перемешивали со скоростью 200 об/мин.

Температуру мембранного эмульгирующего устройства и емкости для приготовления поддерживали при 25°С, и после того, как завершали введение дисперсной фазы, органический растворитель удаляли при поддержании температуры суспензии композиции в соответствии с данным изобретением при 45°С в течение 3 часов. По окончании удаления органического растворителя температуру суспензии снижали до 25°С. Суспензию несколько раз повторно промывали особо чистой водой, чтобы удалить остаточный поливиниловый спирт, и композицию, полученную в форме частиц, лиофилизировали.

Таблица 1

Тип полимера (г) Количество полимера (г) Количество действующего вещества (г) Количество растворителя для дисперсной фазы (г) Количество растворителя для непрерывной фазы (г) Действующее вещество Регулирующий высвобождение агент/вводимое количество pH непрерывной фазы Пример 01 RG653H 0,95 0,05 11,4 1440 Семаглутид^a) Нет данных Пример 02 RG753H 0,9472 0,05 11,40 1080 Семаглутид^a) Миристиновая кислота/
0,0028 г Пример 03 RG753H/RG653H (1:1) 0,57 0,03 6,86 648 Семаглутид^a) Пример 04 RG753H/RG653H (1:1) 0,555 0,045 7,72 730 Семаглутид^a) Пример 05 RG653H/RG753H(1:1) 0,90 0,10 14,46 1350 Семаглутид^a) Нет данных Пример 06 RG753H/RG653H (1:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) Пример 07 RG753H/RG653H (1:1) 1,85 0,15 25,70 2430 Семаглутид^b) pH 2,79 / 1% уксусная кислота Пример 08 RG753H/RG653H (1:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) pH 2,77 / 1,6 мМ хлористоводородная кислота Пример 09 RG753H/RG653H (1:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) pH 1,98 / 0,2 М цитратный буфер Пример10 RG753H/RG653H (1:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) pH 2,98 / 0,2 М цитратный буфер Пример11 RG753H/RG653H (1:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) pH 3,98 / 0,2 М цитратный буфер Пример 12 RG753H/RG653H (1:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) pH 4,98 / 0,2 М цитратный буфер Пример 13 RG753H/RG653H (1:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) pH 3,27 / 0,2 М ацетатный буфер Пример 14 RG753H/RG653H (1:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) pH 2,98 / 0,2 М лактатный буфер Пример15 RG503H 0,95 0,05 11,40 1080 Семаглутид^a) Нет данных Пример 16 RG753H 0,95 0,05 12,60 1200 Семаглутид^a) Нет данных Пример 17 R203H 0,95 0,05 11,40 1080 Семаглутид^a) Нет данных Пример 18 RG753H 0,9 0,1 14,25 1080 Семаглутид^a) Нет данных Пример 19 RG753H 0,85 0,15 17,10 1620 Семаглутид^a) Нет данных Пример 20 RG753H 0,9645 0,05 11,40 1080 Семаглутид^a) Стеариновая кислота/
0,0035 г Пример 21 RG753H 0,328 0,06 16,30 1350 Семаглутид^a) Памовая кислота/
0,012 г Пример 22 RG753H 0,425 0,075 21,10 1750 Семаглутида памоат Нет данных Пример 23 RG753H/R203H (1:1) 0,95 0,05 14,25 1080 Семаглутид^a) Нет данных Пример 24 RG503H/RG504H (1:1) 0,90 0,10 14,25 1080 Семаглутид^a) Нет данных Пример 25 R202H/R205S (1:1) 0,95 0,05 14,25 1280 Семаглутид^a) Нет данных Пример 26 RG504H 0,95 0,05 11,40 1080 Семаглутид^a) Нет данных Пример 27 R205S 0,95 0,05 11,40 1080 Семаглутид^a) Нет данных Пример 28 RG858S 0,95 0,05 14,25 1350 Семаглутид^a) Нет данных Пример 29 ПЛГА-глюкоза 0,45 0,05 21,10 1750 Семаглутид^a) Нет данных Пример 30 RG753H/RG653H (2:1) 0,555 0,045 7,72 730 Семаглутид^a) Нет данных Пример 31 RG753H/RG653H (1:2) 0,555 0,045 7,72 730 Семаглутид^a) Нет данных Пример 32 RG753H/RG503H (1:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) Нет данных Пример 33 RG753H/RG502H (2:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) Нет данных Пример 34 RG753H/RG502H (4:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) Нет данных Пример 35 RG753H/RG653H/RG502H (2:2:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) Нет данных Пример 36 RG753H/RG653H/RG503H (2:2:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) Нет данных Пример 37 RG753H/RG653H/RG504H (2:2:1) 1,3875 0,1125 19,30 1823 Семаглутид^b) Нет данных Сравнительный пример 01 RG752H 0,95 0,05 11,40 1080 Семаглутид^a) Нет данных Сравнительный пример
02 RG502H 0,95 0,05 11,4 1080 Семаглутид^a) Нет данных Сравнительный пример
03 R202H 0,95 0,05 11,4 1080 Семаглутид^a) Нет данных Сравнительный пример 04 RG753S 0,95 0,05 11,4 1080 Семаглутид^a)

^a) семаглутида натриевая соль

^b) семаглутид, свободное основание

Примеры 38-43: Получение препаратов, содержащих 2 или более микросферы, содержащие полимеры, отличающиеся между собой

Препараты микросфер с пролонгированным высвобождением, содержащие семаглутид или его фармацевтически приемлемую соль, приготовленные в приведенных выше препаративных примерах, были названы примерами 38–43, со смешиванием их, как в таблице 2 ниже.

Таблица 2

Классификация микросфера 1 микросфера 2 микросфера 3 Соотношение компонентов Пример 38 Пример 16 Сравнительный пример 02 - 1 1 - Пример 39 Пример 16 Пример 15 - 1 1 - Пример 40 Пример 16 Пример 28 - 1 1 - Пример 41 Пример 16 Сравнительный пример 03 - 1 1 - Пример 42 Пример 01 Пример 16 Сравнительный пример 02 2 2 1 Пример 43 Пример 01 Пример 16 Пример 15 2 2 1

Экспериментальный пример 1: Измерение инкапсулированного количества семаглутида в микросферах

Для того, чтобы измерить инкапсулированное количество семаглутида в микросферах, приготовленных в препаративных примерах 1–19, в ДМСО полностью растворяли 6 мг микросфер, а затем разводили подвижной фазой. Разведенный раствор 20 мкл вводили в ВЭЖХ и анализировали при длине волны детектирования 214 нм. Используемой колонкой в данном экспериментальном примере была колонка ZORBAX 300SB-C18, 5 мкм, 4,6 x 150 мм, и подвижную фазу использовали в изократическом режиме: 45% 0,1% трифторуксусной кислоты (ТФУ) в ацетонитриле, 55% водного раствора 0,1% ТФУ. Измеренное инкапсулированное количество показано в таблице 3 ниже.

Таблица 3

Лекарственная форма Количество (% по массе) Пример 01 4,17 Пример 02 4,60 Пример 03 4,08 Пример 04 6,12 Пример 05 8,45 Пример 06 7,10 Пример 07 6,62 Пример 08 7,02 Пример 09 6,65 Пример 10 6,72 Пример 11 6,35 Пример 12 7,01 Пример 13 6,73 Пример 14 6,80 Пример 15 4,62 Пример 16 4,51 Пример 17 4,47 Пример 18 8,57 Пример 19 11,40 Пример 20 4,60 Пример 21 13,10 Пример 22 13,70 Пример 23 4,49 Пример 24 8,36 Пример 25 4,46 Пример 26 4,35 Пример 27 4,65 Пример 28 4,67 Пример 29 8,62 Пример 30 6,36 Пример 31 6,23 Пример 32 7,39 Пример 33 7,29 Пример 34 7,55 Пример 35 7,27 Пример 36 7,29 Пример 37 7,42 Пример 38 4,22 Пример 39 4,57 Пример 40 4,59 Пример 41 4,40 Пример 42 4,26 Пример 43 4,40 Сравнительный пример 01 3,93 Сравнительный пример 02 3,93 Сравнительный пример 03 4,28 Сравнительный пример 04 4,52

Экспериментальный пример 2: Морфологический анализ микросфер под электронным микроскопом

Для того, чтобы анализировать морфологические характеристики приготовленных микросфер, проводилось наблюдение под растровым электронным микроскопом.

На алюминиевый наконечник с углеродной лентой помещали 5 мг микросфер, приготовленных в соответствии с примером 4, и покрывали платиной с помощью ионного напылителя (COXEM, Корея). Алюминиевый наконечник устанавливали в растровый электронный микроскоп (COXEM EM-30, Корея) и исследовали морфологические характеристики микросфер при ускоряющем напряжении 14 кВ. ФИГ. 4 представляет собой фотографическое изображение микросферы с пролонгированным высвобождением из биоразлагаемого полимера под электронным микроскопом. Как было подтверждено на ФИГ. 5, можно утверждать, что была приготовлена идеальная сферическая микросфера с относительно однородным размером частицы, и поверхность была ровной, и размер частиц одинаковым, несмотря на использование уксусной кислоты в качестве сорастворителя для получения микросферы в настоящем изобретении.

Экспериментальный пример 3: Анализ размера частицы микросферы с использованием способа лазерной дифракции

Его проводили для того, чтобы количественно измерить средний размер частиц, распределение и однородность приготовленной микросферы. Эксперимент состоял в следующем.

С 1 мл особо чистой воды смешивали 50 мг микросфер и перемешивали с помощью вихревой мешалки в течение 20 секунд, а затем ставили в ультразвуковой генератор и диспергировали в течение 1 минуты. Диспергированный раствор микросфер помещали в устройство для анализа размера частиц (Microtrac Bluewave, Япония) и производили измерение в течение 20 секунд.

В качестве показателя однородности размера частиц величина диапазона значений была получена по уравнению 1, как представлено ниже.

[Уравнение 1]

Величина диапазона значений = (Dv,0,9 – Dv, 0,1)/Dv,0,5

Таблица 4

№ партии Диапазон значений D50 Пример 01 0,50 23,77 Пример 02 0,53 22,36 Пример 04 0,64 24,10 Пример 06 0,77 24,62 Пример 08 0,92 23,84 Пример 15 0,75 22,53 Пример 16 0,63 24,84 Пример 18 0,71 20,41 Пример 19 0,57 21,34 Пример 20 0,52 25,54 Пример 26 0,59 21,63 Сравнительный пример 01 0,77 24,25 Сравнительный пример 02 0,73 22,40 Сравнительный пример 03 0,90 25,34 Сравнительный пример 04 0,56 23,60

Экспериментальный пример 4: тест начального элюирования in vitro

Для того, чтобы оценить возможность доставки действующего вещества из микросферы с семаглутидом с пролонгированным высвобождением, был проведен тест элюирования семаглутида in vitro. Эксперимент состоял в следующем.

25 мг микросфер и 6 мл 10 мМ фосфатного буферного раствора (pH 7,4) помещали во флакон 8 мл из ПЭВП (полиэтилена высокой плотности) и помещали в термостат при 37°С. В предварительно заданное время отбирали 1 мл и центрифугировали при 13000 об/мин в течение 1 минуты и отбирали 0,5 мл супернатанта, и 20 мкл вводили в ВЭЖХ. Затем колонка ВЭЖХ и рабочие условия были такими же, как условия анализа ВЭЖХ экспериментального примера 1. Результат показан в таблице 5 ниже.

Таблица 5

Степень суммарного высвобождения семаглутида in vitro (%) 0 ч 1 ч 3 ч 6 ч 12 ч 24 ч Пример 01 0 1,60 1,70 1,80 - 2,20 Пример 02 0 0,70 0,90 1,00 - 1,00 Пример 03 0 0,50 0,70 0,90 - 1,20 Пример 04 0 0,80 1,10 1,30 - 1,50 Пример 05 0 2,90 3,30 3,70 - 3,90 Пример 06 0 0,30 0,50 0,60 - 0,80 Пример 07 0 0,00 0,00 0,00 - 0,40 Пример 08 0 0,40 0,60 0,80 - 1,40 Пример 09 0 0,27 - - 0,41 0,55 Пример 10 0 0,27 - - 0,40 0,53 Пример 11 0 0,29 - - 0,41 0,53 Пример 12 0 0,28 - - 0,41 0,54 Пример 13 0 0,29 - - 0,42 0,55 Пример 14 0 0,28 - - 0,43 0,58 Пример 15 0 1,20 1,40 1,50 - 2,00 Пример 16 0 1,60 1,70 1,80 - 2,20 Пример 18 0 2,30 2,70 3,00 - 3,00 Пример 19 0 45,50 47,60 50,00 - 51,60 Пример 20 0 1,20 1,50 1,70 - 1,70 Пример 26 0 3,60 3,80 3,80 - 4,20 Пример 30 0 0,00 1,20 1,40 1,70 1,80 Пример 31 0 0,00 1,00 1,30 1,60 1,80 Пример 32 0 0,00 0,32 - - 0,84 Пример 33 0 0,00 0,58 - - 1,69 Пример 34 0 0,00 0,28 - - 0,72 Пример 35 0 0,00 0,3 - - 0,73 Пример 36 0 0,00 0,26 - - 0,62 Пример 37 0 0,00 0,26 - - 0,65 Пример 38 0 0,00 2,15 2,30 2,40 2,90 Пример 39 0 0,00 1,40 1,55 1,65 2,10 Пример 40 0 0,00 1,60 1,70 1,80 2,20 Пример 41 0 0,00 1,70 1,95 2,10 2,85 Пример 42 0 0,00 1,82 1,94 2,04 2,48 Пример 43 0 0,00 1,52 1,64 1,74 2,16 Сравнительный пример 02 0 2,70 2,90 3,00 - 3,60 Сравнительный пример 03 0 2,20 2,90 3,10 - 3,20 Сравнительный пример 04 0 0,50 0,60 0,80 - 0,80

Как может быть подтверждено на основании результатов в вышеприведенной таблице 5, можно утверждать, что, когда pH непрерывной фазы был кислым, первоначальная скорость высвобождения в течение 24 часов составляла всего лишь 1/2 по сравнению с микросферами, приготовленными с использованием непрерывной фазы с относительно высоким pH 5,6. Кроме того, в результате теста первоначального элюирования in vitro микросфер примеров 9–14, приготовленных путем варьирования pH непрерывной фазы и состава буфера для регулирования pH, при получении микросферы примера 6 было подтверждено, что скорость первоначального высвобождения в течение 24 часов была снижена до около 60%–75% по сравнению с микросферой примера 6 без регулирования pH.

Экспериментальный пример 5: Фармакокинетический тест in vivo с использованием крыс

В целях оценки аспекта высвобождения действующего вещества in vivo из микросферы с семаглутидом с пролонгированным высвобождением в соответствии с данным изобретением концентрацию семаглутида в крови измеряли после ее введения крысам.

Микросферы подсчитывали так, чтобы доза семаглутида составляла 12,0 мг/кг, и диспергировали в 0,5 мл суспензии, а затем вводили крысам линии SD (крысам линии Спрег-Доули). В предварительно запланированные моменты времени собирали 0,5 мл крови и измеряли концентрацию семаглутида в крови с использованием ВЭЖХ. Измеренное изменение концентрации действующего вещества семаглутида в крови показано на ФИГ. 1, ФИГ. 2 и ФИГ. 4, а степень суммарного высвобождения показана на ФИГ. 3.

Как можно подтвердить на ФИГ. 1 выше, можно утверждать, что в случае микросфер, содержащих семаглутид, приготовленных в сравнительных примерах 1–3 в настоящем изобретении, была показана в значительной степени высокая концентрация действующего вещества в плазме сразу после введения, а затем высвобождение действующего вещества заканчивалось в течение 2–3 недель после введения, и можно подтвердить, что микросфера сравнительного примера 4 почти не показала высвобождения действующего вещества в течение 2 месяцев после низкого первоначального высвобождения.

С другой стороны, ФИГ. 2 выше подтверждает изменение концентрации действующего вещества в плазме со временем после введения крысам микросфер, содержащих семаглутид, приготовленных в примере 1, примере 2 и примере 4, согласно данному изобретению, и микросферы, приготовленные в соответствии с композицией полимера, согласно примеру данного изобретения, показали относительно низкое первоначальное высвобождение действующего вещества, по сравнению со сравнительным примером, и, кроме того, можно подтвердить, что действующее вещество постоянно высвобождалось в течение 1 месяца или более.

Кроме того, ФИГ. 4 выше подтверждает изменение концентрации действующего вещества в плазме со временем после введения содержащих семаглутид микросфер, приготовленных в примере 4 и примере 6 – примере 8, согласно данному изобретению, а в случае примера 6, примера 7 и примера 8, в которых pH непрерывной фазы регулировали при получении микросферы, мог быть подтвержден результат в значительной степени сниженного первоначального высвобождения действующего вещества, по сравнению с примером 4.

ФИГ. 3 выше подтверждает изменение степени суммарного высвобождения действующего вещества со временем после введения микросфер примера 4 и примера 6 – примера 8, согласно данному изобретению, и можно подтвердить, что действующее вещество постоянно высвобождалось в течение 5 недель или более после введения в случае микросфер, приготовленных в соответствии с композицией полимера, согласно примеру данного изобретения. Кроме того, результат подтвердил, что степень первоначального высвобождения в значительной степени снижена в соответствии с регулированием pH непрерывной фазы, и действующее вещество высвобождалось непрерывно вплоть до 63 дней после введения.

Группа изобретений относится к фармацевтической композиции для профилактики или лечения сахарного диабета, сахарного диабета 2 типа, ожирения, неалкогольного стеатогепатита, болезни Альцгеймера или болезни Паркинсона, содержащей микросферу с пролонгированным высвобождением, содержащую свободное основание семаглутида и биоразлагаемый полимер, в которой свободное основание семаглутида составляет от 3% до 15% по массе в пересчете на семаглутид, отнесенный к общей массе микросферы, биоразлагаемый полимер содержит два вида полилактид-ко-гликолида (ПЛГА), указанные два вида ПЛГА независимо имеют молярное соотношение повторяющихся звеньев лактида:гликолида от 65:35 до 75:25 и характеристическую вязкость от 0,32 дл/г до 0,44 дл/г, где микросфера с пролонгированным высвобождением приготовлена способом получения, включающим стадию растворения свободного основания семаглутида и двух видов ПЛГА в органическом растворителе с приготовлением раствора, содержащего свободное основание семаглутида и полимер, и стадию добавления раствора, содержащего свободное основание семаглутида и полимер к водной фазе (непрерывной фазе), содержащей поверхностно-активное вещество, с приготовлением эмульсии, в которой pH непрерывной фазы равен 5 или менее, микросфера с пролонгированным высвобождением высвобождает свободное основание семаглутида в течение от 1 до 2 месяцев, и микросфера с пролонгированным высвобождением получена для введения путем инъекции, и также относится к способам получения микросферы с пролонгированным высвобождением. Группа изобретений обеспечивает создание инъекционной композиции с превосходной активностью семаглутида при введении, но с ингибированием первоначального избыточного высвобождения семаглутида и в то же время с высвобождением его в течение от 1 до 2 месяцев в эффективной концентрации с ингибированием летальных побочных эффектов и минимизацией боли и воспалительной реакции у пациента в месте введения композиции. 4 н. и 14 з.п. ф-лы, 5 ил., 5 табл., 43 пр.

1. Фармацевтическая композиция для профилактики или лечения сахарного диабета, сахарного диабета 2 типа, ожирения, неалкогольного стеатогепатита, болезни Альцгеймера или болезни Паркинсона, содержащая микросферу с пролонгированным высвобождением, содержащую свободное основание семаглутида и биоразлагаемый полимер, в которой свободное основание семаглутида составляет от 3% до 15% по массе в пересчете на семаглутид, отнесенный к общей массе микросферы,

биоразлагаемый полимер содержит два вида полилактид-ко-гликолида (ПЛГА),

указанные два вида ПЛГА независимо имеют молярное соотношение повторяющихся звеньев лактида:гликолида от 65:35 до 75:25 и характеристическую вязкость от 0,32 дл/г до 0,44 дл/г,

микросфера с пролонгированным высвобождением приготовлена способом получения, включающим стадию растворения свободного основания семаглутида и двух видов ПЛГА в органическом растворителе с приготовлением раствора, содержащего свободное основание семаглутида и полимер, и

стадию добавления раствора, содержащего свободное основание семаглутида и полимер к водной фазе (непрерывной фазе), содержащей поверхностно-активное вещество, с приготовлением эмульсии, в которой pH непрерывной фазы равен 5 или менее,

микросфера с пролонгированным высвобождением высвобождает свободное основание семаглутида в течение от 1 до 2 месяцев, и

микросфера с пролонгированным высвобождением получена для введения путем инъекции.

2. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой средний размер частиц микросфер, содержащих свободное основание семаглутида, составляет от 5 мкм до 100 мкм.

3. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой распределение по размеру частиц микросфер, содержащих свободное основание семаглутида, составляет 1,5 или менее.

4. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой масса микросфер, содержащих свободное основание семаглутида, составляет от 20 до 1000 мг.

5. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой микросфера с пролонгированным высвобождением содержит один или несколько регуляторов высвобождения, выбранных из группы, состоящей из бутановой кислоты, валериановой кислоты, капроновой кислоты, энантовой кислоты, каприловой кислоты, пеларгоновой кислоты, каприновой кислоты, ундекановой кислоты, лауриновой кислоты, тридекановой кислоты, миристиновой кислоты, пентадекановой кислоты, пальмитиновой кислоты, гептадекановой кислоты, стеариновой кислоты, нонадекановой кислоты, арахиновой кислоты, изокротоновой кислоты, олеиновой кислоты, элаидиновой кислоты, сорбиновой кислоты, линолевой кислоты, арахидоновой кислоты, гидроксинафтойной кислоты, нападизиловой кислоты и памовой кислоты.

6. Способ получения микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей свободное основание семаглутида в соответствии с п. 1, включающий:

(a) растворение свободного основания и двух видов полилактид-ко-гликолида (ПЛГА) в органическом растворителе с приготовлением дисперсной фазы, содержащей свободное основание семаглутида и полимер;

(b) добавление раствора, содержащего свободное основание семаглутида и полимер, полученного на стадии (a), к непрерывной фазе, содержащей поверхностно-активное вещество, с приготовлением эмульсии;

(c) экстракцию и выпаривание органического растворителя из дисперсной фазы в состоянии эмульсии, полученной на стадии (b), в непрерывную фазу с образованием микросферы; и

(d) сбор микросферы из непрерывной фазы стадии (c) с приготовлением микросферы, содержащей свободное основание семаглутида,

при этом свободное основание семаглутида составляет от 3% до 15% по массе в пересчете на семаглутид, отнесенный к общей массе микросферы,

указанные два вида ПЛГА независимо имеют молярное соотношение повторяющихся звеньев лактида:гликолида от 65:35 до 75:25 и характеристическую вязкость от 0,32 дл/г до 0,44 дл/г,

pH непрерывной фазы на стадии (b) равен 5 или менее,

микросфера с пролонгированным высвобождением высвобождает свободное основание семаглутида в течение от 1 до 2 месяцев, и

микросфера с пролонгированным высвобождением получена для введения путем инъекции.

7. Способ получения по п. 6, в котором органический растворитель на стадии (a) представляет собой один или несколько органических растворителей, выбранных из группы, состоящей из дихлорметана, хлороформа, этилацетата, метилэтилкетона, ацетона, ацетонитрила, диметилсульфоксида, диметилформамида, N-метилпирролидона, уксусной кислоты, метилового спирта, этилового спирта, пропилового спирта и бензилового спирта.

8. Способ получения по п. 6, в котором поверхностно-активное вещество на стадии (b) представляет собой поливиниловый спирт.

9. Способ получения по п. 6, в котором непрерывная фаза на стадии (b) представляет собой воду или смешанный растворитель из воды и одного или нескольких, выбранных из группы, состоящей из метилового спирта, этилового спирта, пропилового спирта и этилацетата.

10. Способ получения микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей свободное основание семаглутида в соответствии с п. 1, включающий:

(a') растворение свободного основания семаглутида и двух видов полилактид-ко-гликолида (ПЛГА) в органическом растворителе с приготовлением дисперсной фазы, содержащей свободное основание семаглутида и полимер;

(b') добавление раствора, содержащего свободное основание семаглутида и полимер, приготовленного на стадии (a'), к непрерывной фазе, содержащей поверхностно-активное вещество, с приготовлением эмульсии;

(c') экстракцию и выпаривание органического растворителя из дисперсной фазы в состоянии эмульсии, полученной на стадии (b'), в непрерывную фазу с образованием микросферы; и

(d') повторение процесса приготовления микросферы, включающего сбор микросферы из непрерывной фазы на стадии (c') для приготовления микросферы, 2 или 3 раза с приготовлением 2 или 3 микросфер, отличающихся между собой,

(e') смешивание 2 или 3 микросфер, состоящих из отличающихся видов полимеров, между собой,

при этом свободное основание семаглутида составляет от 3% до 15% по массе в пересчете на семаглутид, отнесенный к общей массе микросферы, при этом указанные два вида ПЛГА независимо имеют молярное соотношение повторяющихся звеньев лактида:гликолида от 65:35 до 75:25 и характеристическую вязкость от 0,32 дл/г до 0,44 дл/г,

pH непрерывной фазы на стадии (b') равен 5 или менее, и микросфера с пролонгированным высвобождением высвобождает свободное основание семаглутида в течение от 1 до 2 месяцев, и микросфера с пролонгированным высвобождением получена для введения путем инъекции.

11. Способ получения по п. 10, в котором органический растворитель на стадии (a') представляет собой один или несколько органических растворителей, выбранных из группы, состоящей из дихлорметана, хлороформа, этилацетата, метилэтилкетона, ацетона, ацетонитрила, диметилсульфоксида, диметилформамида, N-метилпирролидона, уксусной кислоты, метилового спирта, этилового спирта, пропилового спирта и бензилового спирта.

12. Способ получения по п. 10, в котором поверхностно-активное вещество на стадии (b') представляет собой поливиниловый спирт.

13. Способ получения по п. 10, в котором непрерывная фаза на стадии (b') представляет собой воду или смешанный растворитель из воды и одного или нескольких, выбранных из группы, состоящей из метилового спирта, этилового спирта, пропилового спирта и этилацетата.

14. Способ получения микросферы с пролонгированным высвобождением, содержащей свободное основание семаглутида в соответствии с п. 1, включающий:

(a'') растворение свободного основания семаглутида и двух видов полилактид-ко-гликолида (ПЛГА) в органическом растворителе, соответственно, с приготовлением 2 дисперсных фаз, содержащих свободное основание семаглутида и полимер;

(b'') добавление 2 дисперсных фаз, содержащих свободное основание семаглутида и полимер, полученных на стадии (a''), к непрерывной фазе, содержащей поверхностно-активное вещество, соответственно, с приготовлением 2 эмульсий;

(c'') экстракцию и выпаривание органического растворителя из 2 дисперсных фаз в состоянии эмульсии, приготовленных на стадии (b''), в непрерывную фазу путем помещения 2 дисперсных фаз в состоянии эмульсии, приготовленных на стадии (b''), в тот же реактор с образованием микросфер; и (d'') сбор микросфер из непрерывной фазы на стадии (c''),

при этом свободное основание семаглутида составляет от 3% до 15% по массе в пересчете на семаглутид, отнесенный к общей массе микросферы,

при этом указанные два вида ПЛГА независимо имеют молярное соотношение повторяющихся звеньев лактида:гликолида от 65:35 до 75:25 и характеристическую вязкость от 0,32 дл/г до 0,44 дл/г,

pH непрерывной фазы на стадии (b'') равен 5 или менее, и микросфера с пролонгированным высвобождением высвобождает свободное основание семаглутида в течение от 1 до 2 месяцев, и

микросфера с пролонгированным высвобождением получена для введения путем инъекции.

15. Способ получения по п. 14, в котором органический растворитель на стадии (a'') представляет собой один или несколько органических растворителей, выбранных из группы, состоящей из дихлорметана, хлороформа, этилацетата, метилэтилкетона, ацетона, ацетонитрила, диметилсульфоксида, диметилформамида, N-метилпирролидона, уксусной кислоты, метилового спирта, этилового спирта, пропилового спирта и бензилового спирта.

16. Способ получения по п. 14, дополнительно включающий процесс просеивания между стадией (c'') и стадией (d'').

17. Способ получения по п. 14, в котором поверхностно-активное вещество на стадии (b'') представляет собой поливиниловый спирт.

18. Способ получения по п. 14, в котором непрерывная фаза на стадии (b'') представляет собой воду или смешанный растворитель из воды и одного или нескольких, выбранных из группы, состоящей из метилового спирта, этилового спирта, пропилового спирта и этилацетата.