ЛЕЧЕНИЕ МОРЩИН НА ЛИЦЕ ВЫСОКОЙ ДОЗОЙ И МАЛЫМ ОБЪЕМОМ БОТУЛИНИЧЕСКОГО ТОКСИНА Российский патент 2025 года по МПК A61K38/48 A61P17/00 

Область техники

[001] Настоящее изобретение в целом относится к применению ботулинического токсина для лечения морщин на лице, при этом ботулинический токсин вводят в высоких дозах, используя малые объемы инъекций. Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения морщин на лице, таких как межбровные морщины, путем введения инъекцией высокой дозы ботулинического токсина в область лица субъекта с использованием малых объемов высококонцентрированного раствора ботулинического токсина.

Уровень техники

[002] Инъекции ботулинического токсина для улучшения внешнего вида морщин на лице стали обычным явлением в последние годы и в настоящее время наиболее популярны из всех косметических процедур во всем мире. Ботулинический токсин получают анаэробной ферментацией бактерии Clostridium botulinum. Установлено несколько различных штаммов С.botulinum, которые продуцируют восемь иммунологически различающихся серотипов (типы А-Н).

[003] Серотипы А и В разработаны для применения человеком, при этом препараты ботулинического токсина серотипа А наиболее широко используются во всем мире и одобрены для эстетического применения US FDA (United States Food and Drug Administration - Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США). На данный момент на рынке существует три ведущих продукта ботулинического токсина типа А: онаботулинумтоксин А (Ботокс^®/Вистабель^®, Allergan, Inc., Ирвайн, Калифорния, США), абоботулинумтоксин А (Диспорт^®/Аззалюр^®, Ipsen, Париж, Франция) и инкоботулинумтоксин А (Ксеомин^®/Бокутюр^®, Merz Pharmaceuticals GmbH, Франкфурт, Германия).

[004] Все серотипы ботулинического токсина продуцируются С.botulinum в их нативной форме в виде стабильных и нековалентных высокомолекулярных белковых комплексов. Эти белковые комплексы состоят из активного 150 кДа нейротоксина и нетоксичных нейротоксин-ассоциированных белков (НАБ). Все серотипы 150 кДа нейротоксина синтезируются в виде одноцепочечных белков (примерно 150 кДа), которые протеолитически расщепляются на двухцепочечные белки, состоящие из легкой цепи 50 кДа и тяжелой цепи 100 кДа, соединенных дисульфидной связью. Комплексы ботулинический нейротоксин-НАБ, выделенные из культур С.botulinum типа А, различаются по молекулярной массе (300-900 кДа) в зависимости от состава НАБ, который в свою очередь зависит от производственного процесса.

[005] Повторяющееся сокращение и активность мышц, участвующих в мимике лица, являются основным фактором образования линий и морщин, особенно на лбу и вокруг глаз. Ботулинический токсин блокирует высвобождение ацетилхолина в синаптическую щель, таким образом препятствуя холинергической нейромышечной иннервации поперечнополосатых и гладких мышц, необходимой для мышечного сокращения. Следовательно, его можно использовать для лечения всех морщин, которые являются результатом обычного движения лица (динамические морщины). Для этой цели ботулинический токсин вводят точечными инъекциями в соответствующие мышцы, чтобы достигнуть требуемый косметический эффект, например разгладить морщины на лице.

[006] Однако наряду с предполагаемыми эффектами ботулинический токсин также может вызывать нежелательные эффекты. Например, исходя из объема и/или дозы инъекции, методики инъекции или размера иглы, нейротоксин может распространяться из исходного места инъекции в соседнюю мышцу(ы), что приводит к нежелательному парализующему эффекту. Кроме того, ботулинический токсин может вызывать иммунный ответ, который может привести к выработке нейтрализующих антител, что может привести к вторичному отсутствию ответа. Хотя иммуногенность не может быть большой проблемой при эстетических показаниях при лечении малыми дозами, она может вызывать беспокойство у субъектов, получающих высокие дозы, частое введение доз (короткие интервалы лечения), большое число инъекций и/или лечение в течение длительного периода. Следовательно, клинические стратегии по снижению или устранению выработки нейтрализующих антител являются обоснованными и включают применение наименьшей эффективной дозы и продление интервала лечения до наибольшего допустимого интервала между инъекциями.

[007] Эффекты от ботулинических токсинов не являются постоянными, и через некоторое время даже устраняются из-за ветвления нервных окончаний и образования новых синаптических контактов. Для эстетического лечения клиническое ослабление косметических эффектов обычно наблюдается в течение 3-4 месяцев. Следовательно, для поддержания желаемого внешнего вида кожи ботулинический токсин необходимо повторно вводить инъекцией каждые 3-4 месяца. Продолжительность действия, и таким образом время между двумя лечениями, является важным фактором удовлетворенности пациента, при этом, как правило, желательны более длинные интервалы лечения. Кроме того, более длинные интервалы лечения снижают иммуногенный риск образования нейтрализующих антител. По этим причинам были выполнены попытки разработать модифицированные схемы лечения, которые могут привести к пролонгированным интервалам лечения.

[008] Например, в предшествующем исследовании по подбору доз ботулинического токсина типа А применительно к лечению межбровных морщин у женщин сравнивали эффективность, безопасность и продолжительность эффекта от четырех доз ботулинического токсина типа А (10 ЕД, 20 ЕД, 30 ЕД и 40 ЕД). Наблюдали зависимое от дозы увеличение продолжительности эффекта, а также частоты ответа при максимально нахмуренных бровях без увеличения нежелательных явлений. Статистически значимые различия наблюдались между дозами 10 ЕД и 40 ЕД. Однако статистически значимых различий не было между группами доз 20 ЕД, 30 ЕД и 40 ЕД. Авторы исследования пришли к выводу, что 20 ЕД являются эффективной дозой для лечения межбровных морщин и что 3-4 месяца являются подходящим интервалом между лечениями (Carruthers et al., Dose-Ranging Study of Botulinum Toxin Type A in the Treatment of Glabellar Rhytids in Females, Dermatol. Surg. 2005, 31:414-422).

[009] В подобном исследовании на мужчинах дозы 20 ЕД, 40 ЕД, 60 ЕД и 80 ЕД БоНТ/А (ботулинического нейротоксина типа А) вводили при лечении межбровных морщин. В целом существовало зависимое от дозы увеличение как частоты ответа при максимально нахмуренных бровях, так и продолжительности эффекта. Дозы 40 ЕД, 60 ЕД и 80 ЕД последовательно были более эффективны, чем доза 20 ЕД, в отношении как степени, так и продолжительности эффекта (Carruthers A. and Carruthers, J., Prospective, Double-Blind, Randomized, Parallel-Group, Dose-Ranging Study of Botulinum Toxin Type A in Men with Glabellar Rhytids, Dermatol. Surg. 2005, 31:1297-1303).

[0010] Исследование фазы II по подбору доз, ограниченное одним показанием (межбровные морщины), проводила фирма Merz в 2006-2007 годах (исследование MRZ 60201 - 0527, озаглавленное: 'A prospective, randomized, double-blind, placebo-controlled, multicenter trial to determine the optimal dose of NT 201, free of complexing proteins, in the treatment of glabellar frown lines'). В дополнение к плацебо исследовали дозы 10 ЕД, 20 ЕД и 30 ЕД NT 201 (Ксеомин^®). В этом исследовании наблюдалось зависимое от дозы увеличение частоты ответа пациентов на лечение и продолжительности эффекта. Несмотря на это, дозу 20 ЕД выбрали для двух последующих базовых исследований в отношении межбровных морщин (МБМ) (0724 и 0741) (смотрите, например, Therapeutics Goods Administration (TGA), AusPAR Attachment 2, Submission PM-2012-04159-1-1, Extract from the Clinical Evaluation Report for Botulinum Toxin type A - Xeomin - Merz Australia, 2014).

[0011] В недавнем открытом исследовании 30 субъектов с межбровными морщинами от умеренных до ярко выраженных при максимально нахмуренных бровях вводили инъекцией 120 ЕД абоботулинумтоксина А 5 равными аликвотами в каждое из 5 мест инъекций. Было установлено, что 120 ЕД абоботулинумтоксина А значительно эффективнее в уменьшении межбровных морщин в течение более длительного периода времени, чем доза 50 ЕД, используемая в рандомизированных плацебо-контролируемых исследованиях фазы III FDA (Joseph et al., Does Increasing the Dose of abobotulinumtoxin A Impact the Duration of Effectiveness of the Treatment of Moderate to Severe Glabellar Lines?, J. Drugs Dermatol. 2016, 15(12):1544-1549).

[0012] Кроме того, эффективность и безопасность даксиботулинумтоксина A («DAXI»; Revance Therapeutics, Inc., Ньюарк, Калифорния, США), нового препарата ботулинического токсина типа А, оценили в недавних исследованиях, касающихся лечения межбровных морщин (МБМ). Препарат DAXI состоит из высокоочищенного даксиботулинумтоксина А (RTT150, 150-кДа ботулинический токсин типа А) в сочетании с патентованным стабилизирующим пептидом из 35 аминокислот (RTP004), который связывается с нейротоксином с высокой авидностью, и других вспомогательных веществ, включая полисорбат-20 (поверхностно-активное вещество), буферы и сахар.

[0013] В исследовании фазы 2 субъектов с межбровными морщинами от умеренных до ярко выраженных при максимально нахмуренных бровях случайным образом разделили на группы, получающие 20 ЕД, 40 ЕД или 60 ЕД даксиботулинумтоксина А, 20 ЕД онаботулинумтоксина А или плацебо. Объем инъекции на точку инъекции составлял 0,1 мл. Дозы 40 ЕД и 60 ЕД показали большую продолжительность эффекта по сравнению с 20 ЕД даксиботулинумтоксина А и 20 ЕД онаботулинумтоксина А. Дозу 60 ЕД даксиботулинумтоксина А дополнительно не исследовали из-за повышенных нежелательных эффектов, особенно птоза век, приводящих к неблагоприятной оценке соотношения риска и пользы (Carruthers et al., Injectable Daxibotulinumtoxin A for the Treatment of Glabellar Lines: A Phase 2, Randomized, Dose-Ranging, Double-Blind, Multicenter Comparison With Onabotulinumtoxin A and Placebo, Dermatol. Surg. 2017, 43(11): 1321-1331). [0014] Дополнительно в двух базовых исследованиях фазы III с 40 ЕД даксиботулинумтоксина А была продемонстрирована пролонгированная продолжительность эффекта. Обобщенные оценки исследователя и субъекта при максимально нахмуренных бровях после лечения даксиботулинумтоксином А показали, что не было выраженности межбровных морщин, или они были слабо выражены в среднем в течение 24,0 недель (SAKURA 1) и 23,9 недели (SAKURA 2) (Carruthers et al., Daxibotulinumtoxin A for Injection for the Treatment of Glabellar Lines: Results from Each of Two Multicenter, Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled, Phase 3 Studies (SAKURA 1 and SAKURA 2), Plast. Reconstr. Surg. 2020, 145(1):45-58).

[0015] Хотя исследователи сосредоточились главным образом на эффективности и продолжительности действия при различных дозах, влияние разных разбавлений на эффективность и продолжительность эффекта изучали в нескольких экспериментальных исследованиях, но со спорными результатами. Carruthers с соавт.установил, что разбавление не оказывает значительного влияния на эффективность или продолжительность эффекта. Однако увеличение частоты нежелательных эффектов наблюдалось при более сильных разбавлениях (Carruthers et al., Dilution Volume of Botulinum Toxin Type A forthe Treatment of Glabellar Rhytides: Does It Matter? Dermatol. Surg. 2007, 33:S97-S104).

[0016] Кроме того, Hsu с соавт. использовал разные разбавления и установил, что большие объемы приводят к большей диффузии и большей области поражения. Таким образом, для лечения больших сплошных областей, таких как лоб, можно использовать больший объем для достижения большего распространения. Это также означает меньшее количество инъекций, что важно для пациентов, плохо переносящих боль. Однако Hsu с соавт. отметил, что большему объему, вероятно, может сопутствовать уменьшение продолжительности и величины, а также нежелательное распространение на соседние мышцы (Hsu et al., Effect of Volume and Concentration on the Diffusion of Botulinum Exotoxin A, Arch. Dermatol. 2004, 140(11): 1351-1354).

[0017] В общем, желательна более длительная продолжительность эффекта лечения, поскольку это обеспечивает возможность уменьшить частоту повторных лечений, что повышает удовлетворенность пациента, ключевой показатель успеха эстетических лечений. Кроме того, это также снижает риск образования нейтрализующих антител. С учетом вышеизложенного растет спрос на эстетические лечения лица ботулиническим токсином, обеспечивающие более длительные результаты, т.е. более продолжительный период уменьшения морщин на лице, при сохранении безопасности современных лечений.

Задача изобретения

[0018] Задачей изобретения является улучшение лечения ботулиническим токсином морщин на лице путем обеспечения большей продолжительности эффекта при сохранении уровня безопасности современных лечений.

Раскрытие сущности изобретения

[0019] Обнаружено, что введение высоких доз ботулинического токсина при использовании малых объемов инъекций преимущественно обеспечивает пролонгированную продолжительность эффекта, т.е. более длительный период уменьшения морщин на лице, при сохранении благоприятного профиля безопасности. Это преимущественно позволяет сократить текущую частоту введений, что повышает удовлетворенность пациента.

[0020] Таким образом в одном аспекте настоящее изобретение относится к применению ботулинического токсина для лечения морщин на лице, при этом ботулинический токсин вводят инъекцией в область лица субъекта в общей дозе от 50 ЕД до 200 ЕД и общим объемом от 0,05 мл до 0,35 мл с обеспечением лечения указанных морщин на лице.

[0021] Предпочтительная общая доза составляет от 70 ЕД до 125 ЕД и предпочтительный общий объем составляет от 0,15 мл до 0,30 мл. Общую дозу обычно вводят инъекцией в равных количествах в несколько точек инъекции, например 3-6 точек инъекции. Применение таких малых общих объемов (и объемов на точку инъекции) высококонцентрированного раствора ботулинического токсина (т.е. высоких доз при малых объемах) особенно подходит для лечения небольших мышц, таких как горизонтальные лобные линии (ГЛЛ), межбровные морщины (МБМ) и морщины в углах глаз (например, гусиные лапки).

[0022] В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения морщин на лице, включающему инъекцию ботулинического токсина в область лица субъекта в общей дозе от 50 ЕД до 200 ЕД, предпочтительно от 70 ЕД до 125 ЕД, и общим объемом от 0,05 мл до 0,35 мл, предпочтительно от 0,15 мл до 0,30 мл, с обеспечением лечения указанных морщин на лице.

[0023] Предпочтительные варианты реализации применения и способа настоящего изобретения изложены в прилагаемой формуле изобретения.

[0024] Настоящее изобретение будет более понятно с учетом следующего подробного описания изобретения и включенных в него примеров.

Подробное описание изобретения

[0025] Настоящее изобретение основывается на обнаружении того, что комбинированное применение высоких доз и малых объемов инъекций ботулинического токсина значительно продлевает продолжительность эффекта лечения, т.е. уменьшение морщин на лице, при сохранении благоприятного профиля безопасности. В результате можно использовать более длительные интервалы лечения, что в свою очередь означает меньше инъекционных процедур и меньше неудобств, связанных с инъекциями. Таким образом, применение высокой дозы, малого объема ботулинического токсина согласно настоящему изобретению преимущественно позволяет достичь очень высокую степень эффективности, что обеспечивает более длительные интервалы лечения, что таким образом увеличивает удовлетворенность пациента. Кроме того, более длительные интервалы лечения снижают иммуногенный риск образования нейтрализующих антител, которое может привести к вторичной неэффективности лечения.

[0026] Поскольку фармакодинамика ботулинического токсина, например ботулинического токсина типа А, не пропорциональна дозе, увеличение дозы не сопровождается пропорциональным увеличением эффекта. Это затрудняет предсказание величины эффекта после увеличения дозы. Экстраполяция уже исследованных доз невозможна. Кроме того, возможные побочные эффекты, например побочные эффекты, вызванные распространением токсина в соседние нецелевые мышцы в зависимости от дозы и/или объема, невозможно ни предсказать, ни предвидеть. Таким образом, может ли данный диапазон доз привести к значительному продлению эффекта без ущерба для безопасности субъектов, можно проверить только в ходе экспериментального исследования. Авторы настоящего изобретения выполнили соответствующие экспериментальные работы и обнаружили, что сочетание высоких доз и малых объемов инъекций приводит к устойчивой продолжительности эффекта, благоприятной области действия без побочных эффектов, и завершили настоящее изобретение.

[0027] В первом аспекте настоящее изобретение относится к применению ботулинического токсина для лечения морщин на лице, при этом ботулинический токсин вводят инъекцией в область лица субъекта в общей дозе от 50 ЕД до 200 ЕД и общим объемом от 0,05 мл до 0,35 мл с обеспечением лечения указанных морщин на лице.

[0028] Предпочтительно общая доза вводимого инъекцией ботулинического токсина составляет от 50 ЕД до 175 ЕД или от 60 ЕД до 150 ЕД, или от 70 ЕД до 125 ЕД, или от 75 ЕД до 100 ЕД. Общая доза вводимого инъекцией ботулинического токсина также может предпочтительно находиться в диапазоне от 65 ЕД до 95 ЕД или от 70 ЕД до 80 ЕД, или от 72 ЕД до 78 ЕД. Общая доза вводимого инъекцией ботулинического токсина также может находиться в диапазоне от 85 ЕД до 125 ЕД или от 90 ЕД до 110 ЕД, или от 95 ЕД до 105 ЕД. Примеры доз включают 50 ЕД, 55 ЕД, 60 ЕД, 65 ЕД, 70 ЕД, 75 ЕД, 80 ЕД, 85 ЕД, 90 ЕД, 95 ЕД, 100 ЕД, 105 ЕД, 110 ЕД, 115 ЕД, 120 ЕД, 125 ЕД, 130 ЕД, 135 ЕД, 140 ЕД, 145 ЕД, 150 ЕД, 155 ЕД, 160 ЕД, 165 ЕД, 170 ЕД и 175 ЕД. Особенно предпочтительным является диапазон доз от 70 ЕД до 125 ЕД, в частности, если подлежащие лечению морщины на лице выбраны из горизонтальных лобных линий (ГЛЛ), межбровных морщин (МБМ) и морщин в углах глаз (например, гусиных лапок).

[0029] При использовании в настоящем изобретении доза выражена в биологических единицах, поскольку используемый ботулинический токсин может содержать, например, различные процентные количества неактивного токсина, который вносит вклад в общую белковую нагрузку, не влияя на эффективность. В контексте настоящего изобретения биологическую активность ботулинического токсина определяют, используя биологический анализ на мышах (БАМ). В ходе БАМ определяют среднюю летальную дозу (ЛД₅₀) токсина/нейротоксина после внутрибрюшинной инъекции мышам, т.е. дозу токсина/нейротоксина, способную убить 50% группы мышей. Исходя из этого, 1 единицу (ЕД) токсина/нейротоксина при использовании в настоящем изобретении определяют как ЛД₅₀ одной мыши (1,0 ЛД₅₀=1,0 ЕД). Биологический анализ ЛД₅₀ на мышах является золотым стандартом среди различных биологических, химических или иммунологических способов обнаружения ботулинического токсина и известен специалистам в данной области техники (смотрите, например, Pearce, L.B.; Borodic, G.E.; First, E.R.; MacCallum, R.D. Measurement of botulinum toxin activity: Evaluation of the lethality assay. Toxicol. Appl. Pharmacol. 1994, 128, 69-77).

[0030] Другим пригодным способом определения биологической активности ботулинического нейротоксина является клеточный анализ, описанный, например, в WO2009/114748, WO 2013/049508 или WO 2014/207109. Результаты активности, полученные в ходе таких клеточных анализов, соответствуют значениям активности, полученным в ходе анализа в/б (внутрибрюшинной) ЛД 50 на мышах. Результаты активности, полученные для препаратов ботулинического токсина серотипа А, подобных имеющимся в продаже инкоботулинумтоксину А (ботулинический токсин серотипа А, без комплексообразующих белков; Ксеомин^®, Merz Pharmaceuticals GmbH) или онаботулинумтоксину А (ботулинический токсин серотипа А, с комплексообразующими белками; Ботокс^®, Allergan Inc.), можно преобразовать в значения для других токсинов, используя коэффициенты преобразования, известные специалисту в данной области техники. Например, необходимую дозу абоботулинумтоксина А (ботулинический токсин серотипа А, с комплексообразующими белками; Диспорт^®, Ipsen Biopharm Limited) можно определить умножением дозы инкоботулинумтоксина А или онаботулинумтоксина А на коэффициент от 2,5 до 5. Дозу римаботулинумтоксина В (ботулинический токсин серотипа В; Миоблок^®, Solstice Neurosciences/US WorldMeds LLC) можно вычислить, умножая дозу инкоботулинумтоксина А или онаботулинумтоксина А на коэффициент от 20 до 40.

[0031] Предпочтительные общие объемы вводимого инъекцией ботулинического токсина включают от 0,10 мл до 0,35 мл или от 0,10 мл до 0,30 мл, или от 0,15 мл до 0,35 мл, или от 0,15 мл до 0,30 мл. Примеры общих объемов включают 0,10 мл, 0,12 мл, 0,14 мл, 0,16 мл, 0,18 мл, 0,20 мл, 0,22 мл, 0,24 мл, 0,26 мл, 0,28 мл, 0,30 мл, 0,32 мл и 0,35 мл. Дополнительные примеры общих объемов включают 0,23 мл, 0,25 мл и 0,27 мл. Особенно предпочтительным является диапазон общих объемов от 0,15 мл до 0,35 мл или от 0,20 мл до 0,30 мл, в частности, если подлежащие лечению морщины на лице выбраны из горизонтальных лобных линий (ГЛЛ), межбровных морщин (МБМ) и морщин в углах глаз (например, гусиных лапок).

[0032] В контексте настоящего изобретения термины «общая доза» и «общий объем» относятся к общей дозе и общему объему ботулинического токсина, соответственно, главным образом вводимых за сеанс лечения (или «сеанс инъекций») и обычно вводимых в ходе многократных инъекций в разные точки инъекций в одну область. Обычно сеанс лечения длится менее одного часа, например, около 30 минут. Одной областью является область морщин на лице, подлежащих лечению, например межбровные морщины. То есть общая доза и общий объем главным образом относятся к дозе и объему, вводимым для лечения одного типа целевой морщины(морщин). Например, межбровные морщины, горизонтальные лобные линии и гусиные лапки являются тремя разными областями лечения и тремя разными целевыми морщинами.

[0033] Концентрация вводимого инъекцией ботулинического токсина может, например, находиться в диапазоне от 150 ЕД/мл до 2000 ЕД/мл, предпочтительно от 200 ЕД/мл до 1500 ЕД/мл или 250 ЕД/мл до 1000 ЕД/мл, или 300 ЕД/мл до 800 ЕД/мл, или 350 ЕД/мл до 600 ЕД/мл. Концентрация вводимого инъекцией ботулинического токсина также может находиться в диапазоне от 250 ЕД/мл до 500 ЕД/мл или 250 ЕД/мл до 350 ЕД/мл, или 350 ЕД/мл до 450 ЕД/мл. Такие высокие концентрации ботулинического токсина, например, можно получить, разбавляя лиофилизированный ботулинический токсин А подходящим объемом разбавителя, обычно стерильным солевым раствором и в частности стерильным солевым раствором без консервантов.

[0034] В зависимости от морщин на лице, подлежащих лечению, и соответствующих мышц-мишеней, а также индивидуальных потребностей пациента и предпочтений лечащего врача ботулинический токсин можно вводить инъекцией в 2-10 точек инъекции, но обычно вводят инъекцией в 3-8 (т.е. в 3, 4, 5, 6, 7 или 8) точек инъекции. Предпочтительно количество точек инъекции составляет 4-6, более предпочтительно 5. Для лба (например, горизонтальных лобных линий (ГЛЛ)) подходящее количество точек инъекции составляет 4-6, в частности 5. Для межбровных морщин (МБМ) количество точек инъекции может составлять 4-6, предпочтительно 5. Для морщин в углах глаз, например гусиных лапок, предпочтительно вводят инъекцию в 3-4 точки инъекции на сторону. Обычно вводят инъекцией равные аликвоты ботулинического токсина в каждую точку инъекции. То есть одинаковые объем и дозу обычно вводят инъекцией в точку инъекции.

[0035] Доза, вводимая в точку инъекции, обычно составляет от 6 ЕД до 50 ЕД, в частности от 8 ЕД до 30 ЕД или от 10 ЕД до 25 ЕД. Примеры доз на точку инъекции включают 6 ЕД, 8 ЕД, 10 ЕД, 12 ЕД, 14 ЕД, 16 ЕД, 18 ЕД, 20 ЕД, 22 ЕД, 24 ЕД, 26 ЕД, 28 ЕД, 30 ЕД, 32 ЕД, 34 ЕД, 36 ЕД, 38 ЕД, 40 ЕД, 42 ЕД, 44 ЕД, 46 ЕД, 48 ЕД и 50 ЕД. Другие примеры доз на точку инъекции включают 13 ЕД, 15 ЕД и 17 ЕД. Предпочтительно доза на точку инъекции составляет в диапазоне от 8 ЕД до 30 ЕД, более предпочтительно от 10 ЕД до 25 ЕД и наиболее предпочтительно от 14 ЕД до 22 ЕД или от 14 ЕД до 16 ЕД, в частности если подлежащие лечению морщины на лице выбраны из горизонтальных лобных линий (ГЛЛ), межбровных морщин (МБМ) и морщин в углах глаз (например, гусиных лапок).

[0036] Вводимый инъекцией объем на место инъекции может меняться от 0,01 мл до 0,15 мл, но обычно находится в диапазоне от 0,02 мл до 0,14 мл. Предпочтительно объем на место инъекции составляет от 0,03 мл до 0,10 мл или 0,04 мл до 0,08 мл, или 0,04 мл до 0,06 мл в каждое место инъекции. Примеры объемов на точку инъекции включают 0,02 мл, 0,03 мл, 0,04 мл, 0,05 мл, 0,06 мл, 0,07 мл, 0,08 мл, 0,09 мл, 0,10 мл, 0,11 мл, 0,12 мл, 0,13 мл и 0,14 мл.

[0037] Согласно настоящему изобретению обнаружено, что малый объем инъекции, как описано выше (например, 0,05 мл на точку инъекции и 0,25 мл всего), и высокая общая доза вводимого инъекцией ботулинического токсина (например, от 70 ЕД до 125 ЕД) обеспечивают требуемый биологический эффект пролонгированной продолжительности уменьшения морщин. Никаких признаков или симптомов маски на лице или замороженного лица не наблюдалось, что способствовало значительной удовлетворенности пациента эстетическим результатом. Кроме того, даже несмотря на то, что вводимый инъекцией объем согласно настоящему изобретению мал, технически с ним можно работать, и он в частности подходит при целенаправленном воздействии на небольшие мышцы лица.

[0038] Согласно настоящему изобретению ботулинический нейротоксин может быть введен в ходе последовательных циклов лечения. Под циклом лечения понимают временной интервал между двумя введениями ботулинического нейротоксина, т.е. цикл лечения состоит из одного введения ботулинического нейротоксина и периода наблюдения до введения следующей инъекции ботулинического нейротоксина. Указанное введение ботулинического токсина происходит за сеанс лечения (или «сеанс инъекций»). Временной интервал между двумя последовательными введениями ботулинического нейротоксина может варьироваться примерно от 5 до 10 месяцев, в частности от 6 до 9 месяцев. Этот пролонгированный интервал лечения возможен благодаря длительной продолжительности эффекта, достигаемого настоящим изобретением. Например, для дозы примерно 50 ЕД (например от 50 ЕД до 59 ЕД) интервал лечения может составлять от 150 дней до 210 дней (например, от 170 до 200 дней). Для дозы примерно 75 ЕД (например, от 60 ЕД до 89 ЕД) интервал лечения может составлять от 180 дней до 240 дней (например от 200 дней до 230 дней). Для дозы примерно 100 ЕД (например, от 90 ЕД до 110 ЕД) интервал лечения может составлять от 210 дней до 300 дней (например, от 230 дней до 270 дней). Кроме того, для дозы (т.е. общей дозы, вводимой за сеанс лечения) примерно 50 ЕД (например, от 50 ЕД до 59 ЕД) интервал лечения может составлять от 150 дней до 220 дней или от 150 дней до 210 дней (например, от 170 дней до 220 дней или от 170 дней до 210 дней, или от 180 дней до 190 дней), предпочтительно от 180 дней до 200 дней. Для дозы примерно 75 ЕД (например, от 60 ЕД до 89 ЕД) интервал лечения может составлять от 180 дней до 240 дней (например, от 180 дней до 220 дней или от 200 дней до 230 дней, или от 190 дней до 220 дней), предпочтительно от 200 дней до 220 дней. Для дозы примерно 100 ЕД (например, от 90 ЕД до 110 ЕД) интервал лечения может составлять от 180 дней до 300 дней или от 190 дней до 260 дней, или от 210 дней до 270 дней (например, от 200 дней до 240 дней или от 210 дней до 230 дней), предпочтительно от 220 дней до 240 дней.

[0039] Кроме того, несмотря на уменьшенный объем инъекции, установлено, что поле эффекта (т.е. область, демонстрирующая эффект после инъекции токсина, и в которой подвергается воздействию мышца) является достаточно большим для достижения высокой частоты ответа пациентов на лечение, например частоты ответа пациентов на лечение в 100% для межбровных морщин (МБМ) (пациент, ответивший на лечение: улучшение на ≥1 балл по оценке исследователя при максимально нахмуренных бровях на 30-ый день). Кроме того, наблюдаемое зависимое от дозы продление эффекта не было сопряжено с увеличением количества нежелательных побочных эффектов. Не ограничиваясь теорией, считают, что, малые объемы инъекций предотвратили миграцию токсина в нецелевые мышцы, что позволило избежать нежелательных побочных эффектов.

[0040] Согласно настоящему изобретению ботулинический токсин применяют в лечении морщин на лице. Лечение морщин является исключительно эстетическим применением. Другими словами, в настоящем изобретении ботулинический токсин применяют в косметических целях.

[0041] Термин «морщины» при использовании в настоящем изобретении следует толковать широко, не только включая морщины, но также линии, борозды, сгибы, рытвины и складки. Слова «линии», «морщины», «борозды», «сгибы» и «складки» имеют сходное определение и, следовательно, часто используются взаимозаменяемо. В настоящем изобретении «линии», как правило, взаимозаменяемы с «морщинами», но предпочтительно могут относиться к кожному углублению, которое менее глубокое, чем «морщина». «Складка» взаимозаменяема с морщинами и линиями, и предпочтительно представляет собой линейное углубление. «Сгиб» взаимозаменяем с морщинами, линиями и складками. Предпочтительно этот термин относится к слабой форме морщин и может описывать определенную морщину в конкретных местах. При использовании в настоящем изобретении «борозда» по существу имеет то же самое значение, что и морщина. Однако «борозда» предпочтительно относится к кожной структуре, которая образована нерегулярным скоплением линий. «Рытвина» является глубокой складкой или глубокой линией на коже.

[0042] Подлежащие лечению согласно настоящему изобретению морщины на лице в частности не ограничены и могут включать горизонтальные лобные линии, межбровные морщины, морщины в углах глаз, гусиные лапки, кроличьи морщины (т.е. расходящиеся лучами вниз линии по сторонам носа), носогубные складки, верхние радиальные линии губ, нижние радиальные линии губ, линии углов рта, морщины марионетки, линии вокруг губ, морщины углов рта, губоподбородочный сгиб и подбородок в виде булыжника, предпочтительно горизонтальные лобные линии, межбровные морщины и морщины в углах глаз (например, гусиные лапки). Морщины, которые предпочтительно лечат согласно настоящему изобретению, выбраны из горизонтальных лобных линий (ГЛЛ), межбровных морщин (МБМ) и морщин в углах глаз (например, гусиных лапок), и наиболее предпочтительны межбровные морщины (МБМ).

[0043] Для лечения вышеупомянутых морщин на лице ботулинический токсин обычно вводят внутримышечной инъекцией в следующие мышцы: лобную мышцу (горизонтальные лобные линии), мышцу гордецов и сморщивающие брови мышцы (межбровные морщины), латеральную круговую мышцу глаза (гусиные лапки/морщины в углах глаз), носовую мышцу гордецов для поперечных носовых мышц (кроличьи морщины), поднимающие верхнюю губу и крылья носа мышцы (носогубные складки), круговую мышцу рта (верхние радиальные линии губ), круговую мышцу рта (нижние радиальные линии губ), опускающие углы рта мышцы (линии углов рта), опускающие углы рта мышцы (морщины марионетки), круговую мышцу рта, опускающие углы рта мышцы и подбородочные мышцы (линии вокруг губ), опускающие углы рта мышцы (морщины углов рта), опускающие углы рта мышцы (губоподбородочный сгиб) и подбородочные мышцы (подбородок в виде булыжника).

[0044] Подлежащий лечению субъект в частности не ограничивается субъектом с морщинами на лице, подлежащими лечению. Например, субъект может представлять собой субъекта либо с умеренными и ярко выраженными, либо с (исключительно) ярко выраженными межбровными морщинами, при этом выраженность межбровных морщин оценивает исследователь, используя шкалу морщин на лице (FWS, Facial Wrinkle Scale) при максимально нахмуренных бровях. Кроме того, субъект может быть (i) женщиной, (ii) мужчиной или женщиной в возрасте 20-80, 30-70 или 40-60 лет, (iii) женщиной либо с умеренными и ярко выраженными, либо с исключительно ярко выраженными межбровными морщинами, при этом выраженность межбровных морщин оценивает исследователь, используя шкалу морщин на лице (FWS) при максимально нахмуренных бровях.

[0045] Кроме того, поскольку ботулинический токсин согласно настоящему изобретению также можно применять профилактически, например для лечения субъектов (мужчин или женщин), у которых нет или есть слабые межбровные морщины, при этом выраженность межбровных морщин оценивает исследователь, используя шкалу морщин на лице (FWS) при максимально нахмуренных бровях, еще одной группой субъектов, представляющей интерес, являются субъекты в возрасте 20-40 или 25-35 лет.

[0046] Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения ботулинический токсин применяют в лечении горизонтальных лобных линий (ГЛЛ), межбровных морщин (МБМ) и морщин в углах глаз (например, гусиных лапок), предпочтительно в лечении межбровных морщин (МБМ), при этом ботулинический токсин вводят инъекцией (i) в общей дозе от 60 ЕД до 130 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,35 мл, или (ii) в общей дозе от 65 ЕД до 110 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,30 мл, или (iii) в общей дозе от 65 ЕД до 90 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,30 мл, или (iv) в общей дозе от 65 ЕД до 90 ЕД и общим объемом от 0,10 мл до 0,25 мл, или (v) в общей дозе от 80 ЕД до 120 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,35 мл, или (vi) в общей дозе от 80 ЕД до 120 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,30 мл, или (vii) в общей дозе от 72 ЕД до 78 ЕД (например 75 ЕД) общим объемом 0,25 мл, или (vii) в общей дозе от 90 ЕД до 110 ЕД (например 100 ЕД) и общим объемом 0,25 мл, и при этом ботулинический токсин предпочтительно вводят инъекцией в 3, 4, 5 или 6, более предпочтительно 4 или 5, точек внутримышечной инъекции. Кроме того, в предпочтительном варианте реализации, описанном в этом абзаце, ботулинический токсин предпочтительно является серотипом А и в частности является (чистым) нейротоксическим компонентом серотипа А (например, Ксеомином^®). Кроме того, подлежащие лечению субъекты определены выше в настоящем изобретении.

[0047] Согласно другому предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения ботулинический токсин применяют в лечении умеренных или ярко выраженных межбровных морщин (МБМ) или в лечении ярко выраженных межбровных морщин (МБМ) на основании оценок исследователя, использующего шкалу морщин на лице (FWS) при максимально нахмуренных бровях, при этом ботулинический токсин вводят инъекцией (i) в общей дозе от 60 ЕД до 130 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,35 мл, или (ii) в общей дозе от 65 ЕД до 110 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,30 мл, или (iii) в общей дозе от 65 ЕД до 90 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,30 мл, или (iv) в общей дозе от 65 ЕД до 90 ЕД и общим объемом от 0,10 мл до 0,25 мл, или (v) в общей дозе от 80 ЕД до 120 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,35 мл, или (vi) в общей дозе от 80 ЕД до 120 ЕД и общим объемом от 0,15 мл до 0,30 мл, или (vii) в общей дозе от 72 ЕД до 78 ЕД (например 75 ЕД) общим объемом 0,25 мл, или (vii) в общей дозе от 90 ЕД до 110 ЕД (например 100 ЕД) и общим объемом 0,25 мл, и при этом ботулинический токсин предпочтительно вводят инъекцией в 3, 4, 5 или 6, более предпочтительно 4 или 5, точек внутримышечной инъекции. Кроме того, в предпочтительном варианте реализации, описанном в этом абзаце, ботулинический токсин предпочтительно является серотипом А и в частности является (чистым) нейротоксическим компонентом серотипа А (например, Ксеомином^®). Кроме того, подлежащие лечению субъекты определены выше в настоящем изобретении.

[0048] Для лечения межбровных морщин ботулинический токсин обычно вводят инъекцией в 4-6, предпочтительно 5, точек внутримышечной инъекции, предпочтительно в мышцу гордецов и мышцы, сморщивающие брови, в частности в два места в каждой мышце, сморщивающей бровь, и одно место в мышце гордецов, всего 0,20-0,30 мл. В частности, одну инъекцию можно сделать в мышцу гордецов на пересечении двух линий, которые соединяют медиальную часть брови и противоположную карункулу. По одной инъекции с каждой стороны можно сделать в медиальную (внутреннюю) часть мышцы, сморщивающей бровь, по меньшей мере на 1 см выше костного валика глазницы по воображаемой линии, проведенной вертикально от карункулы. По одной инъекции с каждой стороны можно сделать сбоку от вышеупомянутого места в средней части мышцы, сморщивающей бровь, по меньшей мере на 1 см выше костного валика глазницы по воображаемой линии, проведенной вертикально от центральной зрачковой линии.

[0049] Согласно настоящему изобретению ботулинический нейротоксин также можно вводить вместе с кожным наполнителем, либо одновременно, либо последовательно. В частности, при лечении линий вокруг губ (круговая мышца рта, мышцы, опускающие углы рта, и подбородочные мышцы) ботулинический токсин можно вводить в сочетании с кожными наполнителями. Кожный наполнитель предпочтительно представляет собой кожный наполнитель на основе гиалуроновой кислоты, более предпочтительно кожный наполнитель на основе перекрестносшитой гиалуроновой кислоты.

[0050] Ботулинический токсин, применяемый в настоящем изобретении, может представлять собой комплекс ботулинического токсина или нейротоксический компонент комплекса ботулинического нейротоксина. Указанный нейротоксический компонент лишен какого-либо другого белкового компонента комплекса нейротоксина Clostridium botulinum. Предпочтительно, как упомянуто выше, ботулинический токсин (т.е. токсиновый комплекс или чистый нейротоксический компонент) относится к серотипу А.

[0051] Более конкретно, при использовании в настоящем изобретении термин «ботулинический токсин» включает 150 кДа нейротоксин как таковой, т.е. чистый нейротоксин, лишенный какого-либо НАБ (также называемый в настоящем изобретении «нейротоксический компонент» или «чистый нейротоксический компонент»), и комплексы 150 кДа нейротоксина и нейротоксин-ассоциированных комплексообразующих белков (НАБ) (называемые в настоящем изобретении «комплекс» или «токсиновый комплекс»). 150 кДа нейротоксин является активным белком, который в основном ингибирует высвобождение ацетилхолина. НАБ фармакологически не активны в отношении нервных окончаний и обычно состоят из нескольких гемагглютининов (ГА) и одного нетоксичного негемагглютинина (НТНГ).

[0052] Полноразмерный нейротоксин типа А имеет теоретическую молекулярную массу 150,3 кДа, тогда как молекулярные массы нейротоксинов других серотипов варьируются от 144,7 кДа (ботулинический токсин типа Е) до 152,9 кДа (ботулинический токсин типа В) (смотрите Weisemann et al., Toxins 2015, 7(12), 5035-5054). Несмотря на эти различия в молекулярной массе, предполагается, что при использовании в настоящем изобретении термин «150 кДа нейротоксин» относится к активному нейротоксину (нейротоксическому компоненту) всех серотипов, если не указано иное. Чистый 150 кДа нейротоксин серотипа А без каких-либо комплексообразующих белков (НАБ) находится в имеющемся в продаже продукте инкоботулинумтоксина А (Ксеомин/Бокутюр^®, Merz Pharmaceuticals GmbH, Франкфурт, Германия).

[0053] При использовании в настоящем изобретении термин «токсиновый комплекс» предпочтительно представляет собой высокомолекулярный комплекс нейротоксического компонента и набор НАБ, выбранных из 900 кДа, 500 кДа и/или 300 кДа токсиновых комплексов типа А С.botulinum. 900 кДа комплекс включен в онаботулинумтоксин А (Ботокс^®/Вистабель^®, Allergan, Inc., Ирвайн, Калифорния, США). Другим примером токсинового комплекса является абоботулинумтоксин А (Диспорт^®/Аззалюр^®, Ipsen, Париж, Франция).

[0054] Согласно настоящему изобретению ботулинический токсин (т.е. нейротоксический компонент или токсиновый комплекс) может относиться к серотипу А, В, C1, D, E, F или G. Предпочтительно в настоящем изобретении используют ботулинический токсин типа А благодаря его более продолжительным эффектам по сравнению с другими серотипами. Кроме того, в рамках настоящего изобретения термин «ботулинический токсин» может относиться к природному нейротоксину, получаемому из бактерии Clostridium botulinum, или к ботулиническому токсину, получаемому из альтернативных источников, включая рекомбинантные технологии или генетическую или химическую модификацию.

[0055] Как правило, используемый в настоящем изобретении ботулинический токсин находится в форме жидкой композиции. Для получения композиции, включающей ботулинический токсин, нейротоксин можно приготовить различными известными в данной области техники способами в зависимости от желаемых целей применения. Ботулинический токсин, используемый в настоящем изобретении, предпочтительно является водным раствором, более предпочтительно солевым раствором или физиологическим солевым раствором, и наиболее предпочтительно физиологическим раствором с фосфатным буфером. Водный раствор может дополнительно содержать одно или более фармацевтически приемлемых веществ. Подходящие фармацевтически приемлемые вещества включают вещества, хорошо известные в данной области техники, смотрите, например, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Истон, Пенсильвания.

[0056] В частности, водный раствор или композиция ботулинического токсина может включать другие носители или нетоксичные, нетерапевтические, неиммуногенные стабилизаторы и т.п. Таким образом, водная композиция ботулинического токсина может содержать глицерин, белковые стабилизаторы (ЧСА, человеческий сывороточный альбумин) или небелковые стабилизаторы, такие как поливинилпирролидон (ПВП), гиалуроновую кислоту или свободные аминокислоты, например, такие как метионин или гистидин. В одном аспекте композиция может не содержать аминокислот. В одном аспекте композиция может не содержать стабилизирующих пептидов (например, состоящих из 5-50 аминокислот, 10-40 аминокислот или 15-30 аминокислот). В одном аспекте подходящие небелковые стабилизаторы описаны в WO 2005/007185 или WO 2006/020208. Композиция ботулинического токсина также может включать неионное или ионное поверхностно-активное вещество, например, такое как полисорбат или полоксамер. Подходящий состав для стабилизированного ЧСА состава, содержащего ботулинический токсин согласно настоящему изобретению, например, описан в US 8,398,998 В2.

[0057] Предпочтительно ботулинический токсин, используемый в настоящем изобретении, находится в форме водного раствора, содержащего хлорид натрия (NaCl), более предпочтительно в форме физиологического солевого раствора (т.е. раствора, включающего хлорид натрия в физиологической концентрации, например, примерно 9 г/л NaCl), при этом водный раствор ботулинического токсина (i) не содержит другого вспомогательного вещества (кроме NaCl), (ii) содержит человеческий сывороточный альбумин (ЧСА) и сахар, в частности моносахарид или дисахарид, (iii) содержит человеческий сывороточный альбумин (ЧСА) и лактозу, (iv) содержит человеческий сывороточный альбумин (ЧСА) и сахарозу, (v) содержит моносахарид и/или дисахарид (например, лактозу и/или сахарозу), (vi) не содержит буфера, (vii) не содержит ни одной аминокислоты, (viii) не содержит человеческий сывороточный альбумин (ЧСА), хлорид натрия и лактозу, или не содержит ЧСА, хлорид натрия и сахарозу, или (ix) не содержит ЧСА и хлорид натрия, или любое сочетание от (i) до (ix).

[0058] В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения морщин на лице, включающему инъекцию ботулинического токсина в область лица субъекта в общей дозе от 50 ЕД до 200 ЕД и общим объемом от 0,05 мл до 0,35 мл с обеспечением лечения указанных морщин на лице.

[0059] Этот способ лечения используется исключительно в эстетических целях, т.е. лечение морщин на лице, и таким образом является косметическим способом. Ботулинический токсин внутримышечно вводят инъекцией, используя, например, иглу 30 G, 32 G или 33 G и, например, шприц на 0,3 мл, 0,5 мл или 1 мл в зависимости от необходимого объема.

[0060] Пролонгированная продолжительность эффекта позволяет реже вводить ботулинический токсин. Например, ботулинический нейротоксин можно вводить повторно с интервалом между первым введением и вторым введением, или между вторым или дополнительным введением и другим введением после указанного второго или дополнительного введения (т.е. между последовательными введениями ботулинического токсина) между примерно 5 и 10 месяцами, в частности между примерно 6 и 9 месяцами. Например, для общей дозы примерно 50 ЕД (например, от 50 ЕД до 59 ЕД) интервал лечения может составлять от 150 дней до 200 дней (например, от 170 до 190 дней). Для общей дозы примерно 75 ЕД (например, от 60 ЕД до 89 ЕД) интервал лечения может составлять от 180 дней до 240 дней (например, от 200 дней до 230 дней). Для дозы примерно 100 ЕД (например, от 90 ЕД до 110 ЕД) интервал лечения может составлять от 210 дней до 270 дней (например, от 230 дней до 260 дней). Кроме того, для общей дозы примерно 50 ЕД (например, от 50 ЕД до 59 ЕД) интервал лечения может составлять от 150 дней до 220 дней или от 150 дней до 210 дней (например, от 170 дней до 220 дней или от 170 дней до 210 дней, или от 180 дней до 190 дней), предпочтительно от 180 дней до 200 дней. Для общей дозы примерно 75 ЕД (например, от 60 ЕД до 89 ЕД) интервал лечения может составлять от 180 дней до 240 дней (например, от 180 дней до 220 дней или от 200 дней до 230 дней, или от 190 дней до 220 дней), предпочтительно от 200 дней до 220 дней. Для дозы примерно 100 ЕД (например, от 90 ЕД до 110 ЕД) интервал лечения может составлять от 180 дней до 300 дней или от 190 дней до 260 дней, или от 210 дней до 270 дней (например, от 200 дней до 240 дней или от 210 дней до 230 дней), предпочтительно от 220 дней до 240 дней.

[0061] Второй аспект настоящего изобретения, относящийся к косметическому способу лечения морщин на лице, тесно связан с первым аспектом изобретения, описанным выше в данном документе. Таким образом, все определения и объяснения, приведенные в данном документе в отношении первого аспекта, касающегося косметического применения ботулинического токсина, в равной мере применимы ко второму аспекту, касающемуся косметического способа лечения.

Примеры

Пример 1 Промежуточный анализ

[0062] Этот пример относится к промежуточному анализу проспективного, рандомизированного, двойного слепого, многоцентрового исследования. Целью исследования является изучение безопасности и продолжительности эффекта групп разных доз NT 201 после лечения межбровных морщин (МБМ).

[0063] Всего 151 случайно отобранный субъект (12,6% мужчин, 87,4% женщин) в возрасте от 22 до 76 лет со средним возрастом 48,9 лет был включен в проспективное, рандомизированное, двойное слепое, многоцентровое исследование. Согласно оценке исследователя у 15,3% субъектов были МБМ 2-ой степени (умеренные) и у 84,7% субъектов были МБМ 3-ей степени (ярко выраженные) на исходном уровне.

[0064] Степень выраженности МБМ оценивал исследователь при максимально нахмуренных бровях, используя 4-балльную исследовательскую шкалу морщин на лице (FWS исследователя) после лечения по сравнению с исходной оценкой. Справочник фотоснимков, содержащий образцы фотографий каждой из четырех степеней, был предоставлен исследователями в поддержку их оценки с помощью FWS наряду с характеристиками четырех степеней выраженности (смотрите таблицу 1).

[0065] Также выраженность МБМ оценивали субъекты при максимально нахмуренных бровях, используя 4-балльную шкалу морщин на лице субъекта (FWS субъекта). Таким же образом субъектам был предоставлен справочник фотоснимков для самооценки МБМ при максимально нахмуренных бровях наряду с характеристиками четырех степеней выраженности (смотрите таблицу 2).

[0066] Субъектов случайным образом разделяли на три группы; 20 ЕД NT 201 (N=30), 50 ЕД NT 201 (N=60) и 75 ЕД NT 201 (N=61). Все лечения состояли из пяти инъекций по 0,05 мл, по две в каждую мышцу, сморщивающую бровь, и одна в мышцу гордецов, всего 0,25 мл. Для инъекции общей дозы 20 ЕД, 50 ЕД и 75 ЕД ампулу 200 ЕД NT 201 разводили, используя различные объемы стерильного солевого раствора без консервантов (смотрите таблицу 3).

[0067] Субъектов оценивали на восьмой (8) день, следующий за лечением, тридцатый (30) день после лечения и затем каждые 30 дней. В качестве первичного критерия результата (первичной переменной эффективности) устанавливали медианную продолжительность эффекта (медианная продолжительность ответа; время между лечением для улучшения по меньшей мере на 1 балл по FWS исследователя при максимально нахмуренных бровях до возврата к исходным значениям). Кроме того, в качестве вторичных переменных эффективности исследователь оценивал, используя FWS исследователя, медианную продолжительность эффекта, при которой эффект определяли как (а) отсутствующий (0) или слабый (1), или (b) улучшение на 2 балла по сравнению с исходным уровнем.

[0068] Кроме того, долю (процент) субъектов на 180-ый день, у которых выраженность МБМ оценивали как отсутствующие (0) или слабые (1) в соответствии с FWS исследователя, а также FWS пациента, определяли в качестве вторичного критерия результата (вторичной переменной эффективности). Другими вторичными переменными эффективности были процент субъектов на 180-ый день с улучшением по меньшей мере на 1 балл, или процент субъектов на 180-ый день с улучшением по меньшей мере на 2 балла по сравнению с исходным уровнем по оценке с использованием FWS исследователя, а также FWS пациента. Кроме того, в качестве еще одной переменной эффективности исследователи и субъекты оценивали общее эстетическое улучшение при каждом визите после исходного уровня, используя шкалу общего эстетического улучшения (GAIS, Global Aesthetic Improvement Scale) со следующими баллами оценки, изменяющимися от -3 до 3: значительно хуже (-3), гораздо хуже (-2), хуже (-1), без изменений (0), улучшение (1), сильное улучшение (2) и значительное улучшение (3).

[0069] Результаты медианной продолжительности эффекта показаны в таблице 4.

[0070] Результаты частоты ответа на основе FWS на 180-ый день показаны в таблице 5, и удовлетворенность пациентов при использовании шкалы общего эстетического улучшения (GAIS) на 180-ый день показана в таблице 6.

[0071] Вышеприведенные результаты демонстрируют высокую частоту ответа пациентов на лечение в группах всех доз и зависимое от дозы продление эффекта. Можно продемонстрировать, что, несмотря на уменьшенный объем инъекций, поле эффекта было достаточно большим, чтобы достичь частоты ответа пациентов на лечение в 100% на 30-ый день после инъекции (улучшение ответившего на лечение пациента на ≥1 балл при макс, нахмуренных бровях по оценке исследователя) в группах всех доз с устойчивой продолжительностью эффекта.

[0072] Частота нежелательных явлений была сопоставима с частотой, известной из базовых исследований фазы III по показанию МБМ. Все дозы хорошо переносились, и профиль безопасности соответствовал известному профилю безопасности одобренной дозы 20 ЕД NT 201. Не было обнаружено новых проблем безопасности. В частности, не наблюдалось серьезных НЯВЛ (нежелательных явлений, возникших в ходе лечения). В частности, птоз век (N=2 из 151) составил всего 1,3%, и не наблюдалось никаких других НЯВЛОИ (нежелательных явлений, возникших в ходе лечения, представляющих особый интерес), связанных с лечением.

[0073] Кроме того, хотя в сообществе врачей более высокие дозы часто ассоциируются с замороженным лицом и увеличением нежелательных явлений, в настоящем исследовании признаков замороженного лица не наблюдалось. Субъекты, а также исследователи были очень довольны эстетическим результатом и продолжительным эффектом. В целом, результаты показывают, что применение высоких доз ботулинического токсина, сконцентрированных в малых объемах инъекций, очень эффективно, обеспечивает продолжительное действие, хорошо переносится и безопасно.

Пример 2 Заключительный анализ

[0074] Этот пример относится к заключительному анализу проспективного, рандомизированного, двойного слепого, многоцентрового исследования, описанного в примере 1, для изучения безопасности и продолжительности эффекта групп разных доз NT 201 после лечения межбровных морщин (МБМ). Заключительный анализ помимо прочего включает данные о четвертой группе пациентов, которых лечили 100 ЕД NT 201, и о 31 дополнительном субъекте в группе 20 ЕД NT 201.

[0075] Всего 241 случайно отобранный субъект (13,7% мужчин, 86,3% женщин) в возрасте от 22 до 76 лет со средним возрастом 49,4 лет был включен в проспективное, рандомизированное, двойное слепое, многоцентровое исследование. Согласно оценке исследователя у 14,1% субъектов МБМ были 2-ой степени выраженности (умеренные) и у 85,9% субъектов МБМ были 3-ей степени выраженности (ярко выраженные) по шкале морщин на лице на исходном уровне.

[0076] Степень выраженности МБМ оценивал исследователь при максимально нахмуренных бровях, используя 4-балльную исследовательскую шкалу морщин на лице (FWS исследователя) после лечения. Справочник фотоснимков, содержащий образцы фотографий каждой из четырех степеней, был предоставлен исследователями в поддержку их оценки с помощью FWS наряду с характеристиками четырех степеней выраженности (смотрите таблицу 1).

[0077] Также выраженность МБМ оценивали субъекты при максимально нахмуренных бровях, используя 4-балльную шкалу морщин на лице субъекта (FWS субъекта). Таким же образом субъектам был предоставлен справочник фотоснимков для самооценки МБМ при максимально нахмуренных бровях наряду с характеристиками четырех степеней выраженности (смотрите таблицу 2).

[0078] Субъектов случайным образом разделяли на четыре группы; 20 ЕД NT 201 (N=61), 50 ЕД NT 201 (N=60), 75 ЕД NT 201 (N=61) и 100 ЕД NT 201 (N=59). Все лечения состояли из пяти инъекций по 0,05 мл на точку инъекции, по две инъекции в каждую мышцу, сморщивающую бровь, и одна инъекция в мышцу гордецов, всего 0,25 мл. Для инъекции общей дозы 20 ЕД, 50 ЕД, 75 ЕД и 100 ЕД ампулу 200 ЕД NT 201 разводили, используя различные объемы стерильного солевого раствора без консервантов (смотрите таблицу 3).

[0079] Субъектов оценивали на восьмой (8) день, следующий за лечением, тридцатый (30) день после лечения и затем каждые 30 дней. В качестве первичного критерия результата (первичной переменной эффективности) устанавливали медианную продолжительность эффекта (медианная продолжительность ответа; время между лечением для улучшения по меньшей мере на 1 балл по FWS исследователя при максимально нахмуренных бровях до возврата к исходным значениям). Кроме того, в качестве вторичных переменных эффективности исследователь оценивал, используя FWS исследователя, медианную продолжительность эффекта, при которой эффект определяли как (а) отсутствующий (0) или слабый (1), или (b) улучшение на 2 балла по сравнению с исходным уровнем.

[0080] Кроме того, долю (процент) субъектов на 180-ый день с отсутствующей (0) или слабой (1) выраженностью МБМ при максимально нахмуренных бровях в соответствии с оценкой по FWS исследователя, а также оценкой по FWS пациента, определяли в качестве вторичного критерия результата (вторичной переменной эффективности). Другими вторичными переменными эффективности были процент субъектов на 180-ый день с улучшением по меньшей мере на 1 балл по сравнению с исходным уровнем по оценке исследователя, использующего FWS исследователя, а также пациента, использующего FWS пациента. Кроме того, в качестве еще одной переменной эффективности исследователи и субъекты оценивали общее эстетическое улучшение при каждом визите после исходного уровня, используя шкалу общего эстетического улучшения (GAIS) со следующими баллами оценки, изменяющимися от -3 до 3: значительно хуже (-3), гораздо хуже (-2), хуже (-1), без изменений (0), улучшение (1), сильное улучшение (2) и значительное улучшение (3).

[0081] Результаты медианной продолжительности эффекта показаны в таблице 4.

[0082] Результаты частоты ответа на основе FWS на 180-ый день показаны в таблице 5, и частота ответов на основе FWS на 240-ой день (только для «улучшения по меньшей мере на 1 балл» и «отсутствуют (0) или слабые (1)») показана в таблице 6.

Оценка исследователем и пациентом общего улучшения межбровных морщин с использованием шкалы общего эстетического улучшения (GAIS) на 180-ый день показана в таблице 7.

[0083] Вышеприведенные результаты демонстрируют высокую частоту ответа (частоту ответа пациентов на лечение) в группах всех доз и зависимое от дозы продление эффекта. Также можно продемонстрировать (результаты не показаны), что, несмотря на уменьшенный объем инъекций, поле эффекта было достаточно большим, чтобы достичь частоты ответа пациентов на лечение в 100% на 30-ый день после инъекции (улучшение ответившего на лечение пациента на ≥1 балл при макс, нахмуренных бровях по оценке исследователя) в группах всех доз с устойчивой продолжительностью эффекта.

[0084] Частота нежелательных явлений была сопоставима с частотой, известной из базовых исследований фазы III по показанию МБМ. Не наблюдалось зависимое от дозы увеличение частоты общих нежелательных явлений, возникших в ходе лечения, или нежелательных явлений, возникших в ходе лечения, связанных с ним. Все дозы хорошо переносились, и профиль безопасности соответствовал известному профилю безопасности одобренной дозы 20 ЕД NT 201. Не было обнаружено новых проблем безопасности. В частности, не наблюдалось серьезных НЯВЛ (нежелательных явлений, возникших в ходе лечения). В частности, частота птоза век (N=4 из 241) составила всего 1,7%, и не наблюдалось никаких других НЯВЛОИ (нежелательных явлений, возникших в ходе лечения, представляющих особый интерес), связанных с лечением.

[0085] Кроме того, хотя в сообществе врачей более высокие дозы часто ассоциируются с замороженным лицом и увеличением нежелательных явлений, в настоящем исследовании признаков неестественного вида или замороженного лица не наблюдалось при использовании доз вплоть до 100 ЕД NT 201. Субъекты, а также исследователи были очень довольны эстетическим результатом и продолжительным эффектом. В целом, результаты показывают, что применение высоких доз ботулинического токсина, сконцентрированных в малых объемах инъекций, очень эффективно, обеспечивает продолжительное действие, хорошо переносится и безопасно.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к косметологии, и может быть использована для лечения морщин на лице. Применение и способ по изобретению касаются введения ботулинического токсина инъекцией в область лица субъекта в общей дозе от 80 до 120 ЕД и общим объемом от 0,15 до 0,30 мл, где межбровные морщины представляют собой умеренные или ярко выраженные межбровные морщины исходя из оценок исследователя при использовании шкалы морщин на лице (FWS) при максимально нахмуренных бровях. При этом ботулинический токсин, представляющий собой нейротоксический компонент ботулинического токсина серотипа A, вводят инъекцией в 5 точек внутримышечной инъекции. Использование изобретений позволяет достичь устойчивого положительного эффекта при хорошей переносимости, позволяет избежать побочных эффектов - признаков замороженного лица - за счет сочетания высоких доз ботулинического токсина и малых объемов инъекций. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 6 табл., 2 пр.

1. Применение ботулинического токсина для лечения межбровных морщин, при котором ботулинический токсин вводят инъекцией в область лица субъекта в общей дозе от 80 до 120 ЕД и общим объемом от 0,15 до 0,30 мл, где межбровные морщины представляют собой умеренные или ярко выраженные межбровные морщины исходя из оценок исследователя при использовании шкалы морщин на лице (FWS) при максимально нахмуренных бровях, при этом ботулинический токсин вводят инъекцией в 5 точек внутримышечной инъекции, и при этом указанный ботулинический токсин представляет собой нейротоксический компонент ботулинического токсина серотипа A.

2. Применение по п. 1, отличающееся тем, что ботулинический токсин вводят инъекцией в общей дозе от 90 до 110 ЕД и общим объемом 0,25 мл.

3. Применение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что ботулинический токсин вводят в каждую точку инъекции в одинаковой дозе и объеме.

4. Применение по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что ботулинический токсин вводят с интервалом от 6 до 9 месяцев между двумя последовательными сеансами лечения.

5. Способ лечения межбровных морщин, включающий введение инъекцией ботулинического токсина в область лица субъекта в общей дозе от 80 до 120 ЕД и общим объемом от 0,15 до 0,30 мл, где межбровные морщины представляют собой умеренные или ярко выраженные межбровные морщины исходя из оценок исследователя при использовании шкалы морщин на лице (FWS) при максимально нахмуренных бровях, при этом ботулинический токсин вводят инъекцией в 5 точек внутримышечной инъекции, и при этом указанный ботулинический токсин представляет собой нейротоксический компонент ботулинического токсина серотипа A.

6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что ботулинический токсин вводят инъекцией в общей дозе от 90 до 110 ЕД и общим объемом 0,25 мл.

7. Способ по п. 5 или 6, отличающийся тем, что ботулинический токсин вводят в каждую точку инъекции в одинаковой дозе и объеме.

8. Способ по любому из пп. 5-7, отличающийся тем, что ботулинический токсин вводят с интервалом от 6 до 9 месяцев между двумя последовательными сеансами лечения.