В данной заявке заявлен приоритет по предварительной заявке на патент Китая № 2019101440054, поданной 26 февраля 2019 года, полное содержание которой включено в данный документ посредством ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Данное изобретение относится к области фармацевтических препаратов, медицинской химии и фармакологии и, более конкретно, относится к определенному типу акрилсодержащих регуляторов белка CRM1, способам их получения и их применению.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Правильное клеточное расположение необходимо для надлежащего функционирования белков. При этом вход и выход белков из ядра имеют решающее значение для поддержания гомеостаза внутри клеток. Передвижение между цитозолем и ядром зависит от специфических транспортных белков, включая импортины и экспортины, которые переносят грузы в ядро и из него, соответственно. Экспортин 1, также известный как CRM1 или XPO1, опосредует ядерный экспорт более 200 белков, большинство из которых являются супрессорами опухолей и регуляторами клеточного цикла и апоптоза, такими как p53, p21, Rb1, APC, BCR-ABL, FOXO, циклин B1 и сурвивин 1. В нормальных клетках регулируемый ядерный экспорт указанных белков регулирует их активацию или инактивацию. В то время как в опухолевых клетках чрезмерный экспорт указанных белков способствует онкогенной трансформации [Current Medicinal Chemistry, 2008, 15(26): 2648-2655].
CRM1 сверхэкспрессируется во множестве типов опухолей, включая рак молочной железы [Cancer, 2008, 112 (8): 1733-1743], рак шейки матки [International Journal of Cancer, 2009, 124(8): 1829-1840], рак желудка [Medical Oncology, 2013, 30(4): 726], остеосаркому [Oncology Reports, 2009, 21(1): 229-235], глиобластому [Neurosurgery, 2009, 65(1): 153-160], рак легких [British Journal of Cancer (2014) 111, 281-291], рак поджелудочной железы [Gastroenterology, 2013, 144(2): 447-456], рак печени [Cancer Chemother Pharmacol, 2014, 74(3): 487-495], рак почек [Journal of Urology, 2013, 189(6): 2317-2326], рак пищевода [Oncology Report, 2014, 32(2): 730-738], лимфому [Blood, 2012, 120(23): 4621-4634], множественную миелому [Leukemia, 2014, 28(1): 155-165] и лейкоз [Blood, 2013, 121(20): 4166-4174], и высокая экспрессия CRM1 коррелирует с неблагоприятным прогнозом. Сверхэкспрессия CRM1 приводит к транспортировке опухолевых супрессоров в цитозоль, что вызывает их деградацию и последующую инактивацию, и это считается одним из механизмов, посредством которого опухолевые клетки избегают апоптоза [Biochemical Pharmacology, 2012,83 (8): 1021 -1032; Seminars in Cancer Biology, 2014, 27: 74-86]. Кроме того, мутации в KRAS повышают уязвимость клеток рака легких для ингибиторов CRM1, включая KPT-185 и KPT-330, тогда как клетки рака легких без мутаций KRAS более устойчивы. Сравнительный анализ набора генов показывает, что активация NF-кB может лежать в основе повышенной чувствительности рака легких с мутацией в KRAS к ингибированию CRM1 [Nature, 2016,538: 114-117].
Помимо опухолевых супрессоров, CRM1 опосредует ядерный экспорт многих ключевых белков воспаления и иммунитета, включая IкB, NF-кB, Cox-2, RXRб, Commd1, HIF1, HMGB1, FOXO и FOXP. IкB является ингибитором NF-кB. Он связывается с NF-кB в ядре и инактивирует его и тем самым регулирует активацию пути NF-кB, тесно связанного с воспалением и иммунитетом. CRM1 транспортирует IкB в цитозоль, где он разрушается и не может ингибировать NF-кB [Journal of Biological Chemistry, 1999, 274 (13): 9108-9115; Shock, 2008, 29 (2): 160-166]. Существенная роль CRM1-опосредованного ядерного экспорта в путях передачи сигналов NF-кB, HIF-1 и RXRб позволяет предположить, что блокирование ядерного экспорта может быть эффективным для лечения множества воспалительных заболеваний, поражающих многие ткани и органы, включая васкулит, артериит, атеросклероз, псориаз, артрит, волчанку и склеродермию.
Для сборки и созревания множества вирусов, таких как вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), вирус гриппа (HIN1), вирус гепатита B (HBV), белок гепатита C (HCV), вирус папилломы человека (HPV), респираторно-синцитиальный вирус (RSV), вирус лихорадки денге (Dungee), коронавирус тяжелого острого респираторного синдрома (SARS), вирус Западного Нила (WNE), вирус простого герпеса (HSV) и полиомавирус клеток Меркеля (MCV) также необходим CRM1 [Proceedings of the National Academy of Sciences, 2002, 99 (22): 14440-14445; Journal of Virology, 2008, 82(21): 10946-10952; Journal of Biological Chemistry, 2009, 284(23): 15589-15597; Journal of Virology, 2009, 83(11): 5353-5362]. Многие из указанных вирусов связаны с развитием рака. Например, хроническая инфекция HBV или HCV приводит к печеночно-клеточной карциноме, а инфекция HPV вызывает рак шейки матки. Таким образом, ингибирование CRM1 может блокировать вирусную инфекцию и препятствовать злокачественной трансформации под действием вирусов.
Природный продукт лептомицин B (LMB) широко использован в качестве ингибитора CRM1 во многих исследованиях. Несмотря на то, что LMB проявляет высокую активность по отношению к опухолевым клеткам, в исследованиях на животных он показал неудовлетворительную переносимость. Испытание LMB I фазы было досрочно прекращено вследствие его явной токсичности [Trends in Cell Biology, 2007, 17 (4): 193-201]. Компания Karyopharm с помощью молекулярной стыковки разработала ряд соединений на основе гидрофобного кармана NES-домена XPO1 и оценила их противоопухолевую активность. Разработано несколько медленно обратимых ингибиторов CRM1 с улучшенной растворимостью в воде, имеющих определенную конфигурацию, включая KPT-185, KPT-276, KPT-330 (Selinexor) и KPT-251 [WO2012099807; WO2013019548; WO2013019561; WO2013170068]. Их химические структуры представлены ниже:
По сравнению с KPT-276 и KPT-251, KPT-330 показал улучшенную пероральную биодоступность, а также фармакокинетические, фармакодинамические характеристики и профили безопасности. KPT-330 в настоящее время проходит клиническую разработку для лечения острого миелоидного лейкоза (AML), множественной миеломы (MM), диффузной B-крупноклеточной лимфомы (DLBCL), мультиформной глиобластомы (GBM), гинекологического рака, рака простаты и плоскоклеточной карциномы головы и шеи (HNSCC). Однако KPT-330 может преодолевать гематоэнцефалический барьер и имеет определенные недостатки, связанные с фармакокинетикой и безопасностью. В данном изобретении предложено новое поколение ингибиторов CRM1 с улучшенной растворимостью в воде, фармакокинетическими свойствами и профилем безопасности.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В данном изобретении предложено соединение общей формулы (1), его оптический изомер, кристаллическая форма, фармацевтически приемлемая соль, гидрат или сольват:
В формуле (1):
X представляет собой -NH- или связь;
если X представляет собой -NH-, то R представляет собой -NR1COR2, где R1 и R2 вместе с амидной группой, связанной с ними, образуют 4-7-членный насыщенный, ненасыщенный или частично насыщенный гетероцикл, причем указанный гетероцикл необязательно замещен 1-2 группами, выбранными из группы, состоящей из галогена, CN, CF3, CH2CF3, CH2CN, OCF3, OCH2CF3, OH, R3, OR3 и NR3R3'; при этом R3 и R3' независимо выбраны из группы, состоящей из H, замещенного или незамещенного C1-C3 алкила и замещенного или незамещенного C3-C6 циклоалкила; или
R1 и R2 вместе с амидной группой, связанной с ними, образуют 5-7-членный неароматический гетероцикл, конденсированный с 5-6-членным ароматическим гетероциклом, 5-7-членный неароматический гетероцикл, конденсированный с 3-6-членным неароматическим гетероциклом, спирокольцо, образованное 5-7-членным неароматическим гетероциклом и 3-6-членным неароматическим гетероциклом, или мостиковое кольцо, образованное 5-7-членным неароматическим гетероциклом и 3-6-членным неароматическим гетероциклом; причем указанные конденсированные 5-7-членные неароматические гетероциклы, указанный конденсированный 5-7-членный неароматический гетероцикл, указанное спирокольцо и указанное мостиковое кольцо необязательно замещены 1-2 группами, выбранными из группы, состоящей из галогена, CN, CF3, OCF3, OCH2CF3, OH, R3 и OR3; при этом R3 представляет собой замещенный или незамещенный C1-C3 алкил, или замещенный или незамещенный C3-C6 циклоалкил;
если X представляет собой связь, то R представляет собой -NR4NR5COR6, где R5 выбран из группы, состоящей из H, замещенного или незамещенного C1-C3 алкила, замещенного или незамещенного C3-C6 циклоалкила, алкокси-замещенного C1-C3 алкила, циклоалкил-замещенного C1-C3 алкила, замещенного или незамещенного 5-7-членного гетероарила и замещенного или незамещенного 5-7-членного неароматического гетероцикла; R4 и R6 вместе с гидразидной группой, связанной с ними, образуют 5-7-членный неароматический гетероцикл, который необязательно замещен 1-2 группами, выбранными из группы, состоящей из галогена, CN, OH, R3 или OR3; и R3 представляет собой замещенный или незамещенный C1-C3 алкил, или замещенный или незамещенный C3-C6 циклоалкил; или
если X представляет собой связь, то R представляет собой следующую группу:
где n равен 1 или 2;
Y выбран из группы, состоящей из связи, -CH2-, -CH2CH2-, -CO-, -SO2-, -SO-, -CON(R8)-, -SO2N(R8)- и -COCON(R8)-, причем R8 представляет собой H, замещенный или незамещенный C1-C3 алкил, или замещенный или незамещенный C3-C6 циклоалкил;
R7 выбран из группы, состоящей из H, замещенного или незамещенного C1-C3 алкила, замещенного или незамещенного C1-C3 алкокси, замещенного или незамещенного C3-C6 циклоалкила, замещенного или незамещенного 5-7-членного гетероарила и замещенного или незамещенного 5-7-членного неароматического гетероцикла.
В предпочтительном варианте реализации соединение общей формулы (1) представлено следующей формулой (1A):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R1 и R2 вместе с амидной группой, связанной с ними, образуют 4-7-членный насыщенный, ненасыщенный или частично насыщенный гетероцикл, причем указанный гетероцикл необязательно галогеном, CN, CF3, CH2CF3, CH2CN, OCF3, OCH2CF3, OH, R3, OR3 или NR3R3'; при этом R3 и R3' независимо выбраны из группы, состоящей из H, замещенного или незамещенного C1-C3 алкила и замещенного или незамещенного C3-C6 циклоалкила; или
R1 и R2 вместе с амидной группой, связанной с ними, образуют 5-7-членный неароматический гетероцикл, конденсированный с 5-6-членным ароматическим гетероциклом, 5-7-членный неароматический гетероцикл, конденсированный с 3-6-членным неароматическим гетероциклом, спирокольцо, образованное 5-7-членным неароматическим гетероциклом и 3-6-членным неароматическим гетероциклом, мостиковое кольцо, образованное 5-7-членным неароматическим гетероциклом и 3-6-членным неароматическим гетероциклом; и указанный конденсированный 5-7-членный неароматический гетероцикл, указанный конденсированный 5-7-членный неароматический гетероцикл, указанное спирокольцо и указанное мостиковое кольцо необязательно замещены 1-2 группами, выбранными из группы, состоящей из галогена, CN, CF3, OCF3, OCH2CF3, OH, R3 или OR3; причем R3 представляет собой замещенный или незамещенный C1-C3 алкил, или замещенный или незамещенный C3-C6 циклоалкил.
В другом предпочтительном варианте реализации соединение общей формулы (1) представлено следующей формулой (1B):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R5 выбран из группы, состоящей из H, замещенного или незамещенного C1-C3 алкила, замещенного или незамещенного C3-C6 циклоалкила, алкокси-замещенного C1-C3 алкила, циклоалкил-замещенного C1-C3 алкила, замещенного или незамещенного 5-7-членного гетероарила и замещенного или незамещенного 5-7-членного неароматического гетероцикла; R4 и R6 вместе с гидразидной группой, связанной с ними, образуют 5-7-членный неароматический гетероцикл, причем указанный гетероцикл необязательно замещен 1-2 группами, выбранными из группы, состоящей из галогена, CN, OH, R3 и OR3; при этом R3 представляет собой замещенный или незамещенный C1-C3 алкил, или замещенный или незамещенный C3-C6 циклоалкил.
В другом предпочтительном варианте реализации соединение общей формулы (1) представлено следующей формулой (1C):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
n равен 1 или 2;
Y выбран из группы, состоящей из связи, -CH2-, -CH2CH2-, -CO-, -SO2-, -SO-, -CON(R8)-, -SO2N(R8)- и -COCON(R8)-; причем R8 представляет собой H, замещенный или незамещенный C1-C3 алкил, или замещенный или незамещенный C3-C6 циклоалкил; и
R7 выбран из группы, состоящей из H, замещенного или незамещенного C1-C3 алкила, замещенного или незамещенного C1-C3 алкокси, замещенного или незамещенного C3-C6 циклоалкила, замещенного или незамещенного 5-7-членного гетероарила и замещенного или незамещенного 5-7-членного неароматического гетероцикла.
В другом предпочтительном варианте реализации соединение формулы (1A) представлено следующей формулой (1AA):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
m равен 0, 1, 2 или 3;
Ra, Rb, Rc и Rd независимо выбраны из группы, состоящей из H, галогена, CN, CF3, OCF3, OCH2CF3, OH, NMe2, R3 и OR3; причем R3 представляет собой C1-C3 алкильную группу или C3-C6 циклоалкильную группу; или
Ra и Rb вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют C3-C6 циклоалкильную группу или 3-6-членный неароматический гетероцикл; или
Rc и Rd вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют C3-C6 циклоалкильную группу или 3-6-членный неароматический гетероцикл; или
Ra (или Rb) и Rc (или Rd) вместе со связью C-C, связанной с ними, образуют C3-C6 циклоалкил или 3-6-членный неароматический гетероцикл;
причем указанный 3-6-членный неароматический гетероцикл необязательно замещен 1-2 группами, выбранными из группы, состоящей из галогена, CN, OH, R3 и OR3; при этом R3 представляет собой замещенный или незамещенный C1-C3 алкил, или замещенный или незамещенный C3-C6 циклоалкил.
В другом предпочтительном варианте реализации соединение формулы (1A) представлено следующей формулой (1AB):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
n равен 1 или 2;
Re и Rf независимо выбраны из группы, состоящей из H, OH, OCH2CF3, R3 и OR3; причем R3 представляет собой замещенный или незамещенный C1-C3 алкил, или замещенный или незамещенный C3-C6 циклоалкил.
В другом предпочтительном варианте реализации соединение общей формулы (1A) представлено следующей формулой (1AC):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
M представляет собой -O-, -S-, -NR3- или -CONR3-, причем R3 представляет собой C1-C3 алкил или C3-C6 циклоалкил;
Rg, Rh, Ri и Rj независимо выбраны из группы, состоящей из H, R3 и OR3; причем R3 представляет собой замещенный или незамещенный C1-C3 алкил, или замещенный или незамещенный C3-C6 циклоалкил; или
Rg и Rh вместе представляют собой группу -CO-, или Rg и Rh вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют C3-C6 циклоалкил; или
Ri и Rj вместе представляют собой группу -CO-, или Ri и Rj вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют C3-C6 циклоалкил.
В другом предпочтительном варианте реализации соединение формулы (1B) представлено следующей формулой (1BA):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
n равен 1 или 2;
Q представляет собой -CH2- или -CO-;
R9 выбран из группы, состоящей из H, C1-C3 алкила, дейтерированного C1-C3 алкила, C3-C6 циклоалкила, амино-замещенного C1-C3 алкиламино, алкокси-замещенного C1-C3 алкила, циклоалкил-замещенного C1-C3 алкила, 5-7-членного гетероарила и 5-7-членного неароматического гетероцикла.
В другом предпочтительном варианте реализации соединение общей формулы (1) выбрано из соединений, указанных в таблице 1.
Таблица 1: Соединения согласно настоящему изобретению
В другом варианте реализации данного изобретения предложена комбинированная фармацевтическая композиция, содержащая фармакологически приемлемое вспомогательное вещество или носитель и соединение формулы (1) по данному изобретению, его оптический изомер или его фармацевтически приемлемую неорганическую или органическую соль в качестве активного ингредиента.
В другом варианте реализации данного изобретения предложено применение указанного соединения, его оптического изомера или его фармацевтически приемлемой неорганической или органической соли для производства противоопухолевых препаратов для лечения заболеваний, связанных с белком XPO1.
Следует понимать, что и изложенной выше общее описание, и следующее подробное описание данного изобретения являются иллюстративными и пояснительными, и они предназначены для дополнительного объяснения заявленного изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
Для более наглядной иллюстрации технической схемы в техническом варианте реализации данного изобретения ниже вкратце описаны графические материалы, необходимые для технического описания вариантов реализации. Очевидно, что представленные графические материалы в следующем описании являются лишь некоторыми вариантами реализации данного изобретения.
На Фиг. 1 представлена диаграмма эффекта подавления роста опухоли для контрольного носителя, KPT-330, соединений 38, 79 и 62 в ксенотрансплантатах BxPC-3.
На Фиг. 2 представлена диаграмма изменения массы тела для контрольного носителя, KPT-330, соединений 38, 79 и 62 в ксенотрансплантатах BxPC-3 у «голых» мышей.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЛЛЮСТРАТИВНЫХ ВАРИАНТОВ РЕАЛИЗАЦИИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В следующем разделе подробно описаны способы получения соединений общей формулы (1), но представленные конкретные способы не являются каким-либо ограничением данного изобретения.
Соединение формулы (1), описанное выше, могут быть синтезированы стандартными технологиями синтеза, общеизвестными технологиями или комбинацией способов, описанных в данном документе. Кроме того, растворители, температура и другие условия реакций, упомянутые в данном документе, могут варьироваться. Исходные материалы для синтеза соединений формулы (1) могут быть синтезированы или приобретены у коммерческих поставщиков, таких как, но не ограничиваясь ими, Aldrich Chemical Co. (Милуоки, штат Висконсин) или Sigma Chemical Co. (Сент-Луис, штат Миссури). Соединения, описанные в данном документе, и другие родственные соединения, содержащие другие заместители, могут быть синтезированы с использованием общеизвестных технологий и исходных материалов, включая те, которые описаны в публикациях March, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY, 4е изд. (Wiley 1992); Carey and Sundberg, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY, 4е изд., тома A и B (Plenum 2000, 2001), Green and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3е изд., (Wiley 1999). Общие способы получения предложенных соединений можно изменять, используя соответствующие реагенты и условия для внедрения различных групп в молекулярные формулы, представленные в данном документе.
В одном аспекте соединения, описанные в данном документе, получают общеизвестными способами. Однако условия процесса, такие как реагенты, растворители, основания, количество используемых соединений, температура реакций, время проведения реакций и т.п., не ограничены следующим пояснительным описанием. Соединения по данному изобретению также могут быть успешно получены с использованием необязательно комбинации различных синтетических способов, описанных в данном документе, или общеизвестных способов, такие комбинации могут быть без труда осуществлены специалистом в данной области техники. В другом аспекте данного изобретения также предложены способы получения соединений, представленных общей формулой (1), которые получены способом A, способом B или способом C:
Способ A включает следующую стадию: исходные материалы I-1 и 1-2 используют для реакции конденсации в присутствии агента конденсации и основания с получением соединения формулы (1A).
В описанной выше реакции R1 и R2 имеют такое же значение, как указано выше.
Способ B включает следующую стадию: исходные материалы I-1 и II-1 используют для реакции конденсации в присутствии агента конденсации и основания с получением соединения формулы (1B).
В описанной выше реакции R4, R5 и R6 имеют такое же значение, как указано выше.
Способ B включает следующую стадию: исходные материалы I-1 и III-1 используют для реакции конденсации в присутствии агента конденсации и основания с получением соединения формулы (1C).
В описанной выше реакции n, Y и R7 имеют такое же значение, как указано выше.
Дополнительные формы соединений
В некоторых вариантах реализации соединения формулы (1) получают в форме фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты (фармацевтически приемлемой соли) посредством приведения во взаимодействие свободного основания указанного соединения с фармацевтически приемлемой неорганической, органической или кислотной аминокислотой, которые включают, но не ограничиваются ими, неорганические кислоты, такие как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фтористоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота и фосфорная кислота; органические кислоты, такие как муравьиная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, щавелевая кислота, трифторуксусная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, пикриновая кислота, метансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, этансульфоновая кислота и бензолсульфоновая кислота; кислотные аминокислоты, такие как аспарагиновая кислота и глутаминовая кислота.
Термин «фармацевтически приемлемый» в данном контексте означает относительно нетоксичное вещество, такое как носитель или разбавитель, который не инактивирует биологическую активность или свойства соединений по данному изобретению, например, введение такого вещества субъекту не вызывает нежелательный биологический эффект или не приводит к неблагоприятному взаимодействию с любым из их составных компонентов.
Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к такой форме соединения, которая не вызывает существенное раздражение у субъекта, которому она введена, и не подавляет биологическую активность и свойства указанного соединения. В некоторых аспектах фармацевтически приемлемые соли получают посредством приведения во взаимодействие соединения формулы (1) с кислотой, такой как неорганическая кислота, такая как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фтористоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота или азотная кислота, органическая кислота, такая как муравьиная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, щавелевая кислота, трифторуксусная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, пикриновая кислота, метансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота или п-толуолсульфоновая кислота, и кислотные аминокислоты, такие как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота.
Следует понимать, что фармацевтически приемлемые соли включают формы присоединения растворителя или кристаллические формы, особенно сольваты или полиморфы. Сольваты содержат стехиометрическое или нестехиометрическое количество растворителей и селективно образуются во время кристаллизации с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода и этанол. Образуются гидраты, если растворителем является вода, или образуются алкоголяты, если растворителем является этанол. Сольваты соединения формулы (1) могут быть успешно получены или образованы в соответствии со способом, описанным в данном документе. Например, гидрат соединения формулы (1) без труда получают перекристаллизацией из смешанного растворителя, состоящего из воды/органического растворителя, и используемый органический растворитель включает, но не ограничивается ими, диоксан, тетрагидрофуран, этанол или метанол. Кроме того, соединения, упомянутые в данном документе, могут существовать в несольватированных или сольватированных формах. В целом, для описания соединений и способов, представленных в данном документе, сольватированные формы считаются эквивалентами несольватированных форм.
В других конкретных вариантах реализации соединения формулы (1) получают в различных формах, включая, но не ограничиваясь ими, аморфные, измельченные формы и формы наноразмерных частиц. Кроме того, соединения формулы (1) включают кристаллические формы и полиморфные формы. Полиморфные формы включают различные варианты кристаллической решетки соединений одного и того же элементного состава. Полиморфы обычно имеют разные профили рентгеновской дифракции, инфракрасные спектры, температуры плавления, плотность, твердость, кристаллическую форму, оптические и электрические свойства, стабильность и растворимость. Различные факторы, такие как растворитель, используемый для перекристаллизации, скорость кристаллизации и температура хранения, могут обусловливать преимущественное образование определенной кристаллической формы.
В другом аспекте соединения формулы (1) имеют один или более стереоцентров и, следовательно, существуют в форме рацемата, рацемической смеси, одного энантиомера, диастереомерного соединения и одного диастереомера. Асимметричные центры, которые могут существовать, зависят от свойств различных заместителей в молекуле. Каждый такой асимметричный центр в отдельности обусловливает образование двух оптических изомеров, и в объем данного изобретения входят все возможные оптические изомеры и диастереомерные смеси, а также чистые или частично чистые соединения. Данное изобретение включает все такие изомерные формы указанных соединений.
ТЕРМИНОЛОГИЯ
Если не указано иное, термины, использованные в данной заявке, включая описание и формулу изобретения, имеют следующие определения. Следует отметить, что в данном описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают формы множественного числа, если из контекста очевидно не следует иное. Если не указано иное, использовали стандартные способы, такие как масс-спектрометрия, ядерный магнитный резонанс, ВЭЖХ, белковая химия, биохимия, технология рекомбинантных ДНК и фармакология. В данной заявке «или» или «и» означает «и/или», если не указано иное.
«Соединение формулы (1)» относится к соединению, имеющему структуру формулы (1).
«Алкил» относится к насыщенной алифатической углеводородной группе, включая неразветвленные и разветвленные группы, содержащие от 1 до 6 атомов углерода, предпочтительно низшие алкильные группы, содержащие от 1 до 4 атомов углерода, такие как метил, этил, пропил, 2-пропил, н-бутил, изобутил или трет-бутил. В данном контексте «алкил» включает незамещенный и замещенный алкил, в частности, алкил, замещенный одним или более галогенами. Предпочтительные алкильные группы выбраны из CH3, CH3CH2, CF3, CHF2, CF3CH2, iPr, nPr, iBu, cPr, nBu или tBu.
«Циклоалкил» относится к неароматической моноциклической или полициклической алифатической углеводородной группе, содержащей 3-6 атомов углерода, в которой одно или более колец могут содержать одну или более двойных связей, но ни одно из колец не содержит полностью сопряженную π-электронную систему. Например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексан, циклогексадиен и т.п.
«Алкокси» относится к алкильной группе, связанной с остальной частью молекулы через атом кислорода простого эфира. Типичные алкокси-группы представляют собой алкокси-группы, содержащие 1-6 атомов углерода, такие как метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, втор-бутокси и трет-бутокси. В данном контексте «алкокси» включает незамещенный и замещенный алкокси, в частности, алкокси, замещенный одним или более галогенами. Предпочтительные алкокси-группы выбраны из OCH3, OCF3, CHF2O, CF3CH2O, iPrO, nPrO, iBuO, cPrO, nBuO или tBuO.
«Арил» относится к группе, содержащей по меньшей мере одну ароматическую кольцевую структуру, т.е. карбоциклический арил с сопряженной р-электронной системой, такой как бензил и нафтил.
«Гетероарил» относится к ароматической группе, содержащей один или более гетероатомов (O, S или N). Гетероарил является моноциклическим или полициклическим, например, моноциклическое гетероарильное кольцо конденсировано с одной или более карбокциклическими ароматическими группами или другими моноциклическими гетероциклическими группами. Примеры гетероарила включают, но не ограничиваются ими, пиридил, пиридазинил, имидазолил, пиримидинил, пиразолил, триазолил, пиразинил, хинолинил, изохинолинил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, тиазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, индолил, бензимидазолил, бензофуран, бензотиазолил, бензотиофенил, бензоксазолил, бензопиридил и пирролопиримидил.
«Алкенил» относится к насыщенной линейной или разветвленной нециклической алкильной группе, содержащей от 2 до 12 атомов углерода и по меньшей мере одну двойную углерод-углеродную связь.
«Галоген» (или «гало») относится к фтору, хлору, брому или йоду.
«Оксо» означает «=O».
«Дейтерирование» (или «дейтерированный») означает, что все или часть атомов H в заместителях заменены на D.
Термин «связь» или «одинарная связь» относится к химической связи между двумя атомами или двумя фрагментами (если атомы, связанные связями, считаются частью крупной структуры). С одной стороны, если группа, описанная в данном документе, представляет собой связь, то упоминаемая группа отсутствует, обеспечивая возможность образования связи между определенными оставшимися группами.
Термин «кольцо» включает любые кольцевые структуры. Термин «член» означает количество скелетных атомов, образующих кольцо. Так, например, циклогексил, пиридил, пиранил и тиопиранил являются шестичленными кольцами, а циклопентил, пирролил, фуранил и тиенил являются пятичленными кольцами.
Термин «фрагмент» относится к определенной части или функциональной группе молекулы. Химические фрагменты, в целом, рассматривают как химические структуры, содержащиеся в молекулах или присоединенные к молекулам.
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ И МЕДИЦИНСКИЕ ТЕРМИНЫ
Термин «приемлемый» в данном контексте означает, что описываемый компонент или активный ингредиент не оказывает чрезмерно неблагоприятный эффект на здоровье субъекта.
В данном контексте термин «лечение», «курс лечения» или «терапия» включает облегчение, подавление или облегчение симптомов или состояния заболевания; сдерживание возникновения осложнений; улучшение или предотвращение потенциального метаболического синдрома; подавление возникновения заболевания или симптомов, такое как сдерживание развития заболеваний или патологических состояний; облегчение заболеваний или симптомов; уменьшение степени заболевания или симптомов; облегчение осложнений, вызванных заболеваниями или симптомами, или предупреждение, или лечение симптомов, вызванных заболеваниями или симптомами.
В данном контексте некоторые соединения или фармацевтические композиции могут улучшать определенное заболевание, симптом или патологическое состояние после введения, в частности, уменьшать его тяжесть, задерживать возникновение, замедлять развитие заболевания или сокращать продолжительность заболевания. Будь то систематическое введение или временное введение, непрерывное введение или периодическое введение, которые могут быть отнесены к соответствующему введению.
Термин «активный ингредиент» относится к соединениям, представленным общей формулой (1), и к фармацевтически приемлемым неорганическим или органическим солям соединений общей формулы (1). Соединения по данному изобретению могут содержать один или более асимметричных центров и, следовательно, существовать в форме рацематов, рацемических смесей, отдельных энантиомеров, диастереомерных соединений или отдельных диастереомеров. Асимметричные центры, которые могут существовать, зависят от свойств различных заместителей в молекуле. Каждый такой асимметричный центр в отдельности обусловливает образование двух оптических изомеров, и в объем данного изобретения входят все возможные оптические изомеры, диастереомерные смеси, а также чистые или частично чистые соединения. Данное изобретение включает все такие изомерные формы указанных соединений.
Соединения, представленные общей формулой (1), представляют собой цис-акриламид, и соединения общей формулы (1) по данной заявке для удобства называют просто акриламидом.
Кроме того, при необходимости соединения по данному изобретению могут быть получены посредством приведения во взаимодействие с фармацевтически приемлемыми кислотами в полярных протонных растворителях, таких как метанол, этанол и изопропанол, с получением фармацевтически приемлемых солей. Фармацевтически приемлемые неорганические или органические кислоты могут быть выбраны из хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, фтористоводородной кислоты, серной кислоты, азотной кислоты, фосфорной кислоты, муравьиной кислоты, уксусной кислоты, пропионовой кислоты, щавелевой кислоты, малоновой кислоты, янтарной кислоты, фумаровой кислоты, малеиновой кислоты, молочной кислоты, яблочной кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, пикриновой кислоты, метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты и т.п.
Такие термины как «соединение», «композиция», «агент» или «медицинский препарат или лекарственное соединение» могут быть использованы в данном контексте взаимозаменяемо, и все они относятся к соединению или композиции, которая может вызывать требуемый фармацевтический и/или физиологический ответ посредством локального и/или системного действия при введении субъекту (человеку или животному).
Термин «введенный, введение или обеспечение введения» в данном контексте относится к непосредственному введению соединений или композиций, или к введению пролекарств, производных или аналогов активных соединений, которые могут образовывать существенное количество активных соединений в организме субъекта.
Термины «субъект» или «пациент» использованы в данном контексте взаимозаменяемо для описания животного (включая человека), подлежащего лечению предложенными соединениями и/или способами. Термин «индивидуум» или «пациент» в данном контексте включает мужской и женский пол, если не указано иное. Таким образом, «индивидуум» или «пациент» включает любое млекопитающее, включая, но не ограничиваясь ими, людей, низших приматов, таких как млекопитающие, собаки, кошки, лошади, овцы, свиньи, крупный рогатый скот и т.п., которые могут иметь преимущество от лечения предложенными соединениями. Животные, пригодные для лечения предложенными соединениями и/или способом по данному изобретению, предпочтительно представляют собой людей. В целом, термин «пациент» и термин «индивидуум» могут быть использованы в данном контексте взаимозаменяемо.
Несмотря на то, что числовые диапазоны и параметры, использованные для описания широкого диапазона данного изобретения, являются приблизительными значениями, соответствующие значения в конкретных вариантах реализации, представленные в данном документе, являются максимально точными. Однако любое числовое значение неизбежно содержит стандартную ошибку, обусловленную конкретными методами испытаний. В данном контексте «около» обычно означает, что фактическое значение находится в пределах плюс или минус 10%, 5%, 1% или 0,5% указанного значения или диапазона. Альтернативно, термин «около» означает, что фактическое значение находится в пределах приемлемой стандартной погрешности среднего значения, в зависимости от мнения специалистов в данной области техники. За исключением экспериментальных примеров, или если не указано иное, следует понимать, что все диапазоны, количества, значения и проценты, используемые в данном документе (например, для описания количества материалов, продолжительности времени, температуры, технологических условий, пропорций количеств и других подобных параметров), модифицированы термином «около». Таким образом, если не указано иное, числовые параметры, описанные в данном документе и прилагаемой формуле изобретения, являются приблизительными значениями, и они могут быть при необходимости изменены. По меньшей мере такие числовые параметры следует понимать в соответствии с указанными значащими цифрами и числовыми значениями, полученными при использовании общего метода переноса в следующий разряд.
Если в данном описании не указано иное, то значения научных и технических терминов, использованных в данном документе, является таким, которое является понятным и используемым у специалистов в данной области техники. Кроме того, существительные в единственном числе в данном описании включают формы существительного во множественном числе, если это не противоречит контексту; использованные существительные во множественном числе также включают формы существительного в единственном числе.
ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ
Соединения или композиции, описанные в данном документе, могут быть, в целом, использованы для ингибирования CRM1, и, следовательно, могут быть использованы для лечения одного или более заболеваний, связанных с белком CRM1. Таким образом, в некоторых вариантах реализации данного изобретения предложен способ лечения заболевания, опосредованного CRM1, включающий стадию введения пациенту, нуждающемуся в этом, соединения по данному изобретению или его фармацевтически приемлемой композиции.
В данном контексте термин заболевание, «опосредованное CRM1», относится к любому заболеванию или другому неблагоприятному состоянию, в котором, как известно, играет роль белок CRM1. Таким образом, другой вариант реализации данного изобретения относится к лечению или уменьшению тяжести одного или более заболеваний, в которых, как известно, играет роль белок CRM1. В некоторых вариантах реализации данного изобретения предложен способ лечения заболеваний, связанных с экспрессией или активностью P53, P21, Rb1, APC, c-ABL, FOXO, IкB, NF-кB, COX-2 или HDAC, у субъекта, который включает введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению. В другом варианте реализации данное изобретение относится к способу лечения или снижения тяжести заболевания или патологического состояния, выбранного из пролиферативных заболеваний (например, рака), воспалительных расстройств, аутоиммунных заболеваний, вирусных инфекций или нейродегенеративных расстройств, причем указанный способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения или композиции по данному изобретению. В более конкретном варианте реализации данное изобретение относится к способу лечения рака или снижения его тяжести.
Раковые заболевания, который можно лечить соединениями по данному изобретению, включают, но не ограничиваются ими, гематологические злокачественные заболевания (лейкоз, лимфома, миелома, включая множественную миелому, миелодиспластический синдром или миелодиспластический синдром) и солидные опухоли (такие раковые заболевания как рак простаты, молочной железы, легких, толстой кишки, поджелудочной железы, почек, яичников, мягких тканей, а также остеосаркома или стромальные опухоли).
СПОСОБ ВВЕДЕНИЯ
Соединение по данному изобретению и его фармацевтически приемлемые соли могут быть составлены в различные препараты, которые содержат соединение по данному изобретению или его фармацевтически приемлемые соли и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества или носители в безопасном и эффективном диапазоне количества. Среди них «безопасное и эффективное количество» означает, что указанное количество соединения может очевидно улучшать состояние, не вызывая серьезных побочных эффектов. Безопасную и эффективную дозу соединения определяют в соответствии с возрастом, заболеванием, курсом лечения и другими специфическими параметрами субъекта.
«Фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество или носитель» относится к одному или более совместимых твердых или жидких наполнителей или гелеобразных веществ, которые подходят для применения человеком и должны иметь достаточную чистоту и низкую токсичность. «Совместимость» в данном контексте означает, что каждый компонент в композиции может быть смешан с соединениями по данному изобретению и между собой, без существенного снижения эффективности указанного соединения. Примеры фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ или носителей включают целлюлозу и ее производные (такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза натрия, ацетат целлюлозы и т.д.), желатин, тальк, твердые смазывающие вещества (такие как стеариновая кислота и стеарат магния), сульфат кальция, растительные масла (такие как соевое масло, кунжутное масло, арахисовое масло, оливковое масло и т.д.), полиолы (такие как пропиленгликоль, глицерин, маннит, сорбит и т.д.), эмульгаторы (такие как Tween), смачивающий агент (такой как додецилсульфат натрия), окрашивающий агент, вкусовой агент, стабилизатор, антиоксидант, консервант, апирогенная вода и т.д.
Соединения по данному изобретению можно вводить перорально, ректально, парентерально (внутривенно, внутримышечно или подкожно) или местно.
Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах активное соединение смешано с по меньшей мере одним стандартным инертным вспомогательным веществом (или носителем), таким как цитрат натрия или фосфат дикальция, или с: (a) наполнителем или компатибилизатором, таким как крахмал, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота; (b) связующими веществами, такими как гидроксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и гуммиарабик; (c) увлажнителем, таким как глицерин; (d) разрыхлителем, таким как агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые сложные силикаты и карбонат натрия; (e) агентами для замедления растворения, такими как парафин; (f) ускорителями абсорбции, такими как четвертичное аммониевое соединение; (g) смачивающими агентами, такими как цетиловый спирт и глицерилмоностеарат; (h) абсорбентом, таким как каолин; и (i) смазывающим веществом, таким как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердый полиэтиленгликоль, лаурилсульфат натрия, или с их смесями. Лекарственная форма капсулы, таблетки и пилюли также может содержать буфер.
Твердые лекарственные формы, такие как таблетки, сахарные пилюли, капсулы, пилюли и гранулы, могут быть получены с использованием покрытий и оболочечных материалов, таких как оболочка, а также других материалов, известных в данной области техники. Они могут содержать замутнитель, и высвобождение активного соединения или соединение в такой композиции может высвобождаться замедленным образом в определенной части пищеварительного тракта. Примеры компонентов для заливки, которые могут быть использованы, представляют собой полимерные вещества и воски. При необходимости активное соединение также может образовывать микрокапсулы с одним или более из вышеуказанных вспомогательных веществ.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы или настойки. Помимо активного соединения, жидкая лекарственная форма может содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники, такие как вода или другие растворители, солюбилизаторы и эмульгаторы, например, этанол, изопропанол, этилкарбонат, этилацетат, пропиленгликоль, 1,3-бутандиол, диметилформамид и масла, в частности, хлопковое масло, арахисовое масло, масло зерновых зародышей, оливковое масло, касторовое масло, кунжутное масло или их смеси, и т.п.
Помимо указанных инертных разбавителей, композиция также может содержать адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, ароматизаторы и вкусовые добавки.
Помимо активных соединений, суспензия может содержать суспендирующие агенты, такие как этоксилированный изостеариловый спирт, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сорбита, микрокристаллическая целлюлоза, метоксид алюминия, агар или смеси указанных соединений, и т.п.
Композиция для парентерального введения может содержать физиологически приемлемый стерильный водный или неводный раствор, дисперсию, суспензию или эмульсию, а также стерильный порошок для разведения в стерильном растворе или дисперсии для инъекций. Пригодные водные и неводные носители, разбавители, растворители или вспомогательные вещества включают воду, этанол, полиолы и их соответствующие смеси.
Лекарственные формы соединений по данному изобретению для местного введения включают мази, порошки, пластыри, спреи и средства для ингаляции. Активный ингредиент смешивают в стерильных условиях с физиологически приемлемым носителем и любыми консервантами, буферами или газами-вытеснителями, которые могут быть необходимы.
Соединение по данному изобретению можно вводить отдельно или в комбинации с другими фармацевтически приемлемыми соединениями.
При использовании фармацевтической композиции используют безопасное и эффективное количество соединения по данному изобретению для введения млекопитающему (например, человеку), нуждающемуся в лечении, причем доза в момент введения является фармацевтически приемлемой эффективной дозой, и для человека с массой тела 60 кг суточная доза обычно составляет от 1 до 1000 мг, предпочтительно от 10 до 500 мг. Конечно, конкретная доза должна учитывать такие факторы как способ введения, состояние здоровья пациента и т.д., и такие факторы известны опытным врачам.
Вышеупомянутые признаки, упомянутые в данном изобретении, или признаки, упомянутые в вариантах реализации, можно комбинировать случайным образом. Все признаки, описанные в данном документе, можно использовать в любой форме композиции, и различные признаки, описанные в данном описании, можно менять на любой альтернативный признак, который служит для той же, эквивалентной или подобной цели. Таким образом, если не указано иное, описанные признаки являются лишь обобщенными примерами эквивалентных или подобных признаков.
Различные конкретные аспекты, признаки и преимущества описанных выше соединений, способов и фармацевтических композиций, подробно изложены в следующем описании. Необходимо понимать, что следующее подробное описание и примеры описывают конкретные варианты реализации лишь для справки. Специалисты в данной области техники после прочтения описания данного изобретения могут сделать различные изменения или модификации, и такие эквиваленты входят в объем данной заявки.
Во всех примерах 1H-ЯМР записывали на ЯМР спектрометре Varian Mercury 400, и химические сдвиги выражены как д (м.д.); силикагель для разделения имеет размер частиц 200-300 меш при отсутствии специального указания, а соотношение элюентов представляет собой объемное соотношение.
Ниже представлены сокращения, использованные в данном изобретении: CDCl3 означает дейтерированный хлороформ; CD3OD означает дейтерированный метанол; DABCO означает 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан; ДХМ означает дихлорметан; DIPEA означает диизопропилэтиламин; ДМФА означает диметилформамид; ДМСО означает диметилсульфоксид; EA означает этилацетат; ч. означает час; LiOH означает гидроксид лития; MgCl2 означает хлорид магния; мин. означает минуты; МС означает масс-спектр; NaSH означает гидросульфид натрия; ЯМР означает ядерный магнитный резонанс; T3P означает пропилфосфорный ангидрид; ТГФ означает тетрагидрофуран.
В результате масштабных исследований авторы данного изобретения синтезировали и провели оценку большого количества соединений, и впервые установили, что соединения формулы (1) обладают высокой противоопухолевой активностью, хорошей растворимостью в воде, более высокими фармакокинетическими свойствами и in vivo противоопухолевой активностью. Таким образом, авторами сделано данное изобретение.
Пример получения 1: синтез (Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)акриловой кислоты (I-1)
Синтез 3,5-бис(трифторметил)бензотиоамида (M2)
3,5-Бис(трифторметил)бензонитрил (47,82 г, 0,2 моль) растворяли в ДМФА (250 мл), добавляли NaSH (22,42 г, 2,0 экв.) и MgCl2 (38,08 г, 2,0 экв.), после перемешивания при комнатной температуре в течение 3 часов смесь выливали в ледяную воду (2 л), экстрагировали EA (250 мл*3), объединяли органические слои, сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Наконец, получали неочищенный продукт, 3,5-бис(трифторметил)тиобензамид (46,97 г, выход 86%).
Синтез 3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазола (M3)
3,5-Бис(трифторметил)тиобензамид (46,44 г, 0,17 моль) растворяли в ДМФА (250 мл) и по каплям добавляли гидразингидрат (16,5 мл, 2,0 экв.). После добавления перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа, затем по каплям добавляли HCOOH (200 мл). Затем смесь нагревали до 90°С для взаимодействия в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь выливали в насыщенный водный раствор NaHCO3 (1,2 л) и экстрагировали EA (300 мл*3). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл*2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который затем суспендировали с петролейным эфиром (400 мл), фильтровали и сушили с получением требуемого соединения, 3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазола (34,40 г, выход: 72%), МС (ИЭР, m/z): 282,1 [M+H]+.
Синтез изопропил-(Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)акрилата (M4)
3-(3,5-Бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол (33,74 г, 0,12 моль) растворяли в ДМФА (150 мл), добавляли DABCO (26,92 г, 2,0 экв.). После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 минут охлаждали смесь до 0°С и по каплям добавляли (Z)-3-изопропилиодид (31,68 г, 1,1 экв.), затем смесь оставляли взаимодействовать при комнатной температуре на 1 час. Смесь выливали в ледяную воду (1 л), экстрагировали EA (200 мл*3), объединяли органические слои, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл*2), сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, (Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)изопропилакрилата (28,32 г, выход 60%).
Синтез (Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)акриловой кислоты (I-1)
Изопропил-(Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)акрилат (27,53 г, 70 ммоль) растворяли в ТГФ и к полученному реакционному раствору по каплям добавляли раствор LiOH (8,4 г, 5,0 экв., 200 мл в воде), затем перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов, в реакционную смесь добавляли смесь льда и воды (100 мл). Значение pH доводили до 2-3 разбавленной соляной кислотой, экстрагировали EA (200 мл*3), объединяли органические слои, сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением требуемого продукта, (Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)акриловой кислоты (23,36 г, выход 95%).
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 9,54 (с, 1H), 8,63-8,56 (м, 2H), 8,04 (тт, J = 1,6, 0,9 Гц, 1H), 7,42 (д, J = 10,6 Гц, 1H), 5,90 (д, J = 10,6 Гц, 1H); МС (ИЭР, m/z): 352,1 [M+H]+.
Пример 1. Синтез (Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)-N-(2-оксоазетидин-1-ил)акриламида (соединение 1)
(Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)акриловую кислоту (105 мг, 0,3 ммоль) и 1-аминоазациклобутил-2-он (39 мг, 0,45 ммоль) растворяли в сухом EA (10 мл) под защитным слоем газообразного азота и охлаждали до -60°С. По каплям добавляли T3P (0,3 мл, 2 M раствор в EA). Затем добавляли DIPEA (77 мг, 0,6 ммоль) и продолжали перемешивать реакционную смесь в течение 3 часов. Реакцию гасили небольшим количеством ледяной воды, промывали водой (20 мл), экстрагировали водную фазу EA (20 мл*2), объединяли органические слои, промывали насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл), сушили безводным сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении и затем очищали колоночной хроматографией (ДХМ/MeOH = от 1/100 до 1/30) с получением требуемого продукта, (Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)-N-(2-оксоазациклобутил-1-ил)акриламида (15,1 мг, выход 12%).
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10,70 (с, 1H), 9,39 (с, 1H), 8,56 (с, 2H), 8,28 (с, 1H), 7,52 (д, J = 10,8 Гц, 1H), 5,95 (д, J = 10,6 Гц, 1H), 3,52 (т, J = 4,4 Гц, 2H), 2,91 (т, J = 4,2 Гц, 2H); МС (ИЭР, m/z): 352,1 [M+H]+.
Примеры с 2 по 89: Синтез соединений с 2 по 89
Соединения 2-89 синтезировали, используя I-1 в качестве исходного вещества, и осуществляя взаимодействие с различными гидразидами, аналогично синтезу соединения 1.
Таблица 2. Данные масс-спектров и ЯМР соединений 2-89
Пример 90. Синтез (Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)-1-(пиразолидин-1-ил)проп-2-ен-1-она (соединение 90)
В трехгорлую колбу объемом 100 мл загружали дигидрохлорид пиразолидина (1,5 г, 10,34 ммоль), DIPEA (6,23 г, 48,3 ммоль) и ДМФА (72 мл), затем охлаждали смесь до -50°С в атмосфере газообразного Ar. Добавляли соединение I-1 (2,42 г, 6,9 ммоль) и по каплям добавляли T3P (6,58 г, 10,34 ммоль) при -50°С. После капельного добавления перемешивали смесь при -50°С в течение 12 часов, контролировали по ТСХ (от ДХМ: MeOH = 20: 1 до ДХМ: MeOH = 10: 1) и по ЖХ-МС. После завершения реакции систему гасили водой (145 мл) при -50°С, перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, фильтровали и три раза промывали осадок на фильтре водой (каждый раз по 10 мл), и сушили в вакууме с получением белого твердого вещества, соединения 90 (1,97 г, выход: 71,6%).
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): д 9,18 (с, 1H), 8,60-8,55 (м, 2H), 8,04 (с, 1H), 7,26 (д, J = 10,3 Гц, 1H), 6,42 (д, J = 10,3 Гц, 1H), 4,57 (с, 1H), 3,65-3,55 (м, 2H), 2,95 (т, J = 6,6 Гц, 2H), 2,15-2,06 (м, 2H); МС (ИЭР, m/z): 406,1 [M+H]+.
Пример 91. Синтез (Z)-3-(3-(3,5-бис(трифторметил)фенил)-1H-1,2,4-триазол-1-ил)-1-(2-метилпиразолидин-1-ил)проп-2-ен-1-она (соединение 91)
Соединение 90 (50 мг, 0,123 ммоль), K2CO3 (34 мг, 0,247 ммоль) и ДМФА (5 мл) добавляли в одногорлую колбу объемом 10 мл. Помещали в атмосферу газообразного Ar, затем добавляли MeI (35 мг, 0,247 ммоль), затем нагревали смесь до 50°С и перемешивали еще 20 часов. Контролировали по ТСХ (ДХМ:MeOH = 20:1) и ЖХ-МС, после завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, гасили водой (10 мл), дважды экстрагировали EA (каждый раз по 10 мл), объединенные органические слои концентрировали досуха и очищали остаток пре-ТСХ с получением твердого вещества, соединения compound 91 (31 мг, выход: 60%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 9,76 (с, 1H), 8,58 (с, 2H), 7,89 (с, 1H), 7,15 (д, J = 11,0 Гц, 1H), 6,52 (д, J = 11,0 Гц, 1H), 3,71 (м, 2H), 3,00 (т, J = 6,9 Гц, 2H), 2,54 (с, 3H), 2,24 (м, 2H); МС (ИЭР, m/z): 420,1 [M+H]+
Примеры с 92 по 103: Синтез соединений с 92 по 103
Соединения 92-103 синтезировали, используя 90 в качестве исходного вещества, и осуществляя взаимодействие с различными галогенами, амидами, сульфонамидами и т.п. в щелочных условиях, аналогично синтезу соединения 91.
Таблица 3. Данные масс-спектров и ЯМР соединений 92-103
Пример 104. Анализ ядерного экспорта Rev-GFP
Белок Rev из ВИЧ содержит последовательность ядерного экспорта (nuclear export sequence, NES) на C-конце и последовательность ядерной локализации (nuclear localization sequence, NLS) на N-конце. Ядерная локализация белка Rev зависит от CRM1. Клетки U2OS, экспрессирующие белок Rev, слитый с GFP (Rev-GFP), помещали в черные 384-луночные планшеты с прозрачным дном за один день до обработки. Соединения серийно 2-кратно разбавляли из 40 мкМ в среде DMEM в 384-луночных планшетах и затем инкубировали с клетками U2OS в течение одного часа. Затем клетки фиксировали 3,7% формальдегидом и окрашивали ядра реактивом Hoechst 33258. Определяли удерживание Rev-GFP в ядрах и рассчитывали IC50. Результаты анализа Rev-GFP обобщены в таблице 4. Соединения по данному изобретению, примеры которых представлены в разделе «Примеры», демонстрировали IC50 в следующих диапазонах: A = IC50≤1 мкМ; B = 1 мкМ<IC50≤10 мкМ; C = IC50<10 мкМ.
Пример 105. Анализ пролиферации раковых клеток
Клетки BxPC-3 (рак поджелудочной железы) и клетки MDA-MB-231 (клетки рака молочной железы) собирали на экспоненциальной фазе роста и высевали в 96-луночные планшеты при плотности клеток 2×104 на лунку. После связывания в течение ночи в клетки вносили соединения, включая положительные контроли, в пяти концентрациях и инкубировали в течение трех дней. В течение последних четырех часов инкубации добавляли 20 мкл раствора MTT с концентрацией 5 мг/мл, затем добавляли еще 100 мкл ДМСО. Затем планшеты встряхивали в течение 10 минут для растворения нерастворимого пурпурного формазана. Количественно измеряли абсорбцию (A) при длине волны 570 нм. Процент ингибирования использовали для расчета IC50 методом Блисса.
Таблица 4. Значения IC50 примеров в анализе ядерного экспорта и в анализе клеточной пролиферации.
(A = < 1 мкМ, B = 1-10 мкМ, C = > 10 мкМ, НТ = не тестировали)
REV-GFP
Как показано в представленной выше таблице, соединения по данному изобретению демонстрируют повышенную активность в отношении ингибирования ядерного экспорта Rev-GFP и пролиферации опухолевых клеток. Например, соединение из примера 87 демонстрирует 20-кратное увеличение активности в антипролиферативном анализе, и его IC50 составляют 41 и 21 нМ в клетках BxPC-3 и MDA-MB-231, соответственно, по сравнению с 705 и 455 нМ для KPT-330.
Пример 106. Анализ растворимости в воде
10-30 мг соединений растворяли в воде и в растворе HCl при рН 1,2, соответственно, и затем непрерывно встряхивали в течение трех дней, после чего центрифугировали при 10000 об/мин в течение пяти минут. Брали аликвоту 2 мл надосадочного раствора и разбавляли до 50 мл с получением раствора образца. Контрольный раствор получали посредством растворения 2,5 мг соединений в метаноле, после чего его разбавляли водой до конечного объема 50 мл. 20 мкл растворов контроля и экспериментального образца вводили в систему ВЭЖХ. Сравнивали площадь под кривой (A) раствора экспериментального образца с аналогичным параметром раствора контрольного образца, и использовали для определения концентрации. Растворимость рассчитывали по следующей формуле.
Растворимость (мг/мл) = c (контроль)*25*A(образец)/A(контроль)
C (контроль): концентрация раствора контрольного образца
A (образец): площадь под кривой раствора экспериментального образца
A (контроль): площадь под кривой раствора контрольного образца
Таблица 5. Растворимость соединений в водных растворах
Как показано в таблице 5, соединения по данному изобретению более растворимы в воде и в растворе HCl с рН 1,2, чем KPT-330. Улучшенная растворимость в воде может заметно улучшать фармакокинетические свойства лекарственных соединений и облегчать разработку рецептуры.
Пример 107. Фармакокинетический анализ in vivo
Группе из 9 мышей ICR вводили 5 мг/кг соединения в 0,5% КМЦ через пероральный зонд. Кровь брали до лечения и через 5 минут, 30 минут, 1, 2, 4, 8, 12 и 24 часа после лечения. Брали образец 80 мкл цельной крови (n = 3 в каждый момент времени) посредством ретроорбитального кровопускания или пункции сердца. Образцы крови собирали в пробирки с ЭДТК и получали плазму посредством центрифугирования при 1500-1600 об/мин в течение 10 минут при 4°С. После центрифугирования образцы плазмы переносили в чистые пробирки и хранили при температуре от -60 до -90°С для дальнейшего анализа. Концентрации соединений в плазме количественно определяли методом на основе жидкостной хроматографии в сочетании с тандемным масс-спектрометрическим обнаружением (ЖХ/МС/МС). Рассчитывали некомпартментные фармакокинетические параметры.
Таблица 6. Фармакокинетические параметры соединений (5 мг/кг) у мышей
(ч.)
(ч.)
(ч.)
(нг/мл)
(нг.ч/л)
Как показано в представленной выше таблице, по сравнению с KPT-330 соединения из примеров, описанных в данном изобретении, демонстрируют более продолжительное tЅ, более высокую Cmax и AUC0-t, что может существенно влиять на эффективность, снижение дозы и сокращение затрат.
Пример 108. Эффективность против роста опухоли в модели ксенотрансплантата опухоли поджелудочной железы BxPC3 у «голых» мышей
Клетки BxPC-3 выращивали в среде 1640, содержащей 10%, при 37°С и 5% CO2. 8×106 клеток BxPc-3 имплантировали подкожно в левую подмышку 40 «голых» мышей. По достижении среднего объема опухоли 65-66 мм3, 30 мышей случайным образом разделяли по объему опухоли на пять групп (n=6) и лечили носителем (5% ДМСО/45% ПЭГ400/50% воды), KPT-330, соединением 38, 79 и 62. Соединение 62 вводили перорально каждый день (qd) при 10 мг/кг, а KPT-330 и соединение 38 вводили три раза в неделю (tiw, понедельник, среда и пятница) при 10 мг/кг через пероральный зонд, и соединение 79 вводили три раза в неделю (tiw, понедельник, среда и пятница) при 2,5 мг/кг через пероральный зонд. Объем опухоли и массу тела измеряли через день. Мышей усыпляли на 21 день и записывали массу опухоли и конечную массу тела. Рассчитывали относительный объем опухоли, значения процентного соотношения эксперимент/контроль и ингибирование роста опухоли, и осуществляли статистические расчеты.
Таблица 7. Обобщение данных о росте опухоли и массе тела в моделях ксенотрансплантата BxPC-3
(%)
(%)
* : P < 0.05 по сравнению с группой, в которой вводили носитель; D1: первый день лечения лекарственным соединением; RTV: относительный объем опухоли; RTV = Vt / V0; T/C(%) = TRTV / CRTV X 100; TRTV: RTV в экспериментальной группе; CRTV : RTV в группе, в которой вводили носитель. TGI (%): ингибирование роста опухоли (%). T/C(%) > 60 считали неэффективным; T/C(%) ≤ 60 и P < 0,05 считали эффективным.
Как показано в таблице 7, а также на Фиг. 1 и 2, пример 79 демонстрирует существенную активность против роста опухоли в модели ксенотрансплантата BxPC-3. По сравнению с 10 мг/кг KPT-330, 2,5 мг/кг примера 79 являются более эффективными для ингибирования роста опухоли. При 10 мг/кг пример 38 демонстрирует более высокую эффективность и меньшее влияние на массу тела, чем KPT-330, что позволяет предположить более высокий диапазон безопасности.
Несмотря на то, что выше описаны конкретные варианты реализации данного изобретения, специалистам в данной области техники понятно, что они являются лишь примерами, и в отношении приведенных вариантов реализации могут быть сделаны различные изменения или модификации без отступления от принципов и сущности данного изобретения. Соответственно, объем данного изобретения определяется прилагаемой формулой изобретения.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ПРОИЗВОДНОЕ ТРИАЗОЛА, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ | 2022 |
|
RU2832307C2 |
| ЗАМЕЩЕННЫЕ МОРФОЛИНЫ ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ПРОТИВОДЕЙСТВИЯ ВЕЩЕСТВУ Р ИЛИ БЛОКИРОВАНИЯ РЕЦЕПТОРОВ НЕЙРОКИНИНА-1 | 1995 |
|
RU2170233C2 |
| ЗАМЕЩЕННЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ МОРФОЛИНА, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ИХ ОСНОВЕ, СПОСОБ СНИЖЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ТАХИКИНИНОВ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ, АССОЦИИРУЕМЫХ С ИЗБЫТКОМ ТАХИКИНИНОВ | 1994 |
|
RU2131426C1 |
| МОЛЕКУЛЫ С ОПРЕДЕЛЕННОЙ ПЕСТИЦИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ И ОТНОСЯЩИЕСЯ К НИМ ПРОМЕЖУТОЧНЫЕ ПРОДУКТЫ, КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ | 2014 |
|
RU2650498C2 |
| МОДУЛЯТОРЫ МОНОАЦИЛГЛИЦЕРИНЛИПАЗЫ | 2019 |
|
RU2797323C2 |
| ПЕСТИЦИДНЫЕ КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К НИМ | 2012 |
|
RU2596946C2 |
| ЗАМЕЩЕННЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛЫ ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМАЯ СОЛЬ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ БЛОКАДЫ РЕЦЕПТОРОВ НЕЙРОКИНИНА-1 У МЛЕКОПИТАЮЩИХ, СПОСОБ ДЛЯ БЛОКАДЫ РЕЦЕПТОРОВ НЕЙРОКИНИНА-1 У МЛЕКОПИТАЮЩИХ | 1993 |
|
RU2140914C1 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ 1,2,4-ТРИАЗИН-3-АМИНА | 2011 |
|
RU2771819C2 |
| ДИФЕНИЛЬНЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ИХ ОСНОВЕ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ | 1997 |
|
RU2175319C2 |
| ПЕСТИЦИДНЫЕ КОМПОЗИЦИИ И СВЯЗАННЫЕ С НИМИ СПОСОБЫ | 2013 |
|
RU2667788C2 |
Изобретение относится к новым соединениям формул (1С): 
или его фармацевтически приемлемой соли, где: n равен 1; Y выбран из группы, состоящей из связи, -CH2-, -СО-, -SO2-, и -COCON(R8)-; причем R8 представляет собой Н, или С1-С3 алкил; и R7 выбран из группы, состоящей из Н, С1-С3 алкила, С3 циклоалкила, и 6-членного гетероарила, содержащего 1-2 гетероатома N, возможно замещенного галогеном;
или его фармацевтически приемлемой соли, где: m равен 0, 1, 2 или 3; Ra, Rb, Rc и Rd независимо выбраны из группы, состоящей из Н, галогена, OCH2CF3, ОН, NMe2, R3 и OR3; причем R3 представляет собой С1-С3 алкильную группу или С3 циклоалкильную группу; или Ra и Rb вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют С3 циклоалкильную группу или 4-6-членный неароматический гетероцикл, содержащий 1 гетероатом N, возможно замещенный СН3 или СОСН3; или Rc и Rd вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют С3-С6 циклоалкильную группу или 4-6-членный неароматический гетероцикл, содержащий 1 гетероатом N или О, возможно замещенный СН3 или СОСН3; или Ra (или Rb) и Rc (или Rd) вместе со связью С-С, связанной с ними, образуют С3-С6 циклоалкил;
или его фармацевтически приемлемой соли, где: n равен 1 или 2; Re и Rf независимо выбраны из группы, состоящей из Н, OCH2CF3, ОСН2СН2ОСН3, O-CD3, R3 и OR3; причем R3 представляет собой С1-С3 алкил, или С3 циклоалкил;
или его фармацевтически приемлемой соли, где: М представляет собой -О-, -NR3- или -СО-, причем R3 представляет собой С1-С3 алкил или СОСН3; Rg, Rh, Ri и Rj представляют собой Н; или Rg и Rh вместе представляют собой группу -СО-; или Ri и Rj вместе представляют собой группу -СО-, или Ri и Rj вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют С3 циклоалкил;
или его фармацевтически приемлемой соли, где: n равен 1 или 2; Q представляет собой -CH2- или -СО-; R9 выбран из группы, состоящей из Н, С1-С3 алкила, дейтерированного С1-С3 алкила, С3-С6 циклоалкила, амино-замещенного С1-С3 алкиламино, С1 замещенного С1-С3 алкила, С3 замещенного С1-С3 алкила, 6-членного гетероарила и 5-7-членного неароматического гетероцикла, содержащего 1 гетероатом N, необязательно замещенный СН3. Технический результат: получены новые соединения, которые могут быть применимы для лечения или предупреждения заболеваний, связанных с физиологическими состояниями, которые связаны с белком CRM1. 5 н. и 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 7 табл., 108 пр.
1. Соединение, которое представлено формулой (1С):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
n равен 1;
Y выбран из группы, состоящей из связи, -CH2-, -СО-, -SO2-, и -COCON(R8)-; причем R8 представляет собой Н, или С1-С3 алкил; и
R7 выбран из группы, состоящей из Н, С1-С3 алкила, С3 циклоалкила, и 6-членного гетероарила содержащего 1-2 гетероатома N, возможно замещенного галогеном.
2. Соединение, которое представлено формулой (1АА):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
m равен 0, 1, 2 или 3;
Ra, Rb, Rc и Rd независимо выбраны из группы, состоящей из Н, галогена, OCH2CF3, ОН, NMe2, R3 и OR3; причем R3 представляет собой С1-С3 алкильную группу или С3 циклоалкильную группу; или
Ra и Rb вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют С3 циклоалкильную группу или 4-6-членный неароматический гетероцикл, содержащий 1 гетероатом N, возможно замещенный СН3 или СОСН3; или
Rc и Rd вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют С3-С6 циклоалкильную группу или 4-6-членный неароматический гетероцикл содержащий 1 гетероатом N или О, возможно замещенный СН3 или СОСН3; или
Ra (или Rb) и Rc (или Rd) вместе со связью С-С, связанной с ними, образуют С3-С6 циклоалкил;
3. Соединение, которое представлено формулой (1АВ):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
n равен 1 или 2;
Re и Rf независимо выбраны из группы, состоящей из Н, OCH2CF3, ОСН2СН2ОСН3, O-CD3, R3 и OR3; причем R3 представляет собой С1-С3 алкил, или С3 циклоалкил.
4. Соединение, которое представлено формулой (1АС):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
М представляет собой -О-, -NR3- или -СО-, причем R3 представляет собой С1-С3 алкил или СОСН3;
Rg, Rh, Ri и Rj представляют собой Н; или
Rg и Rh вместе представляют собой группу -СО-; или
Ri и Rj вместе представляют собой группу -СО-, или Ri и Rj вместе с атомом углерода, связанным с ними, образуют С3 циклоалкил.
5. Соединение, которое представлено формулой (1ВА):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
n равен 1 или 2;
Q представляет собой -CH2- или -СО-;
R9 выбран из группы, состоящей из Н, С1-С3 алкила, дейтерированного С1-С3 алкила, С3-С6 циклоалкила, амино-замещенного С1-С3 алкиламино, С1 замещенного С1-С3 алкила, С3 замещенного С1-С3 алкила, 6-членного гетероарила и 5-7-членного неароматического гетероцикла содержащий 1 гетероатом N, необязательно замещенный СН3.
6. Соединение по любому из пп. 1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающиеся тем, что указанное соединение выбрано из группы, состоящей из:
7. Соединение по любому из пп. 1-6 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающиеся тем, что фармацевтически приемлемая соль представляет собой соль, образованную соединением, представленным общей формулой (1) и кислотой; причем указанная кислота представляет собой неорганическую кислоту, органическую кислоту или кислотную аминокислоту; при этом указанная неорганическая кислота выбрана из группы, состоящей из хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, фтористоводородной кислоты, серной кислоты, азотной кислоты и фосфорной кислоты; причем указанная органическая кислота выбрана из группы, состоящей из муравьиной кислоты, уксусной кислоты, пропионовой кислоты, щавелевой кислоты, трифторуксусной кислоты, малоновой кислоты, янтарной кислоты, фумаровой кислоты, малеиновой кислоты, молочной кислоты, яблочной кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, пикриновой кислоты, метансульфоновой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты и бензолсульфоновой кислоты; и при этом указанная кислотная аминокислота выбрана из группы, состоящей из аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты.
| WO 2014205393 A1, 24.12.2014 | |||
| WO 2014144772 A1, 18.09.2014 | |||
| EA 201490406 A1, 30.07.2014 | |||
| ТЕЛЕЖКА ДЛЯ ПЕРЕВОЗКИ БОЧЕК В ИХ ВЕРТИКАЛЬНОМ ПОЛОЖЕНИИ | 1932 |
|
SU29743A1 |
| EA 201490407 A1, 30.05.2014. | |||
