СОЕДИНЕНИЯ ИНОЗИТОЛФОСФАТА ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ ДЛЯ УВЕЛИЧЕНИЯ ТКАНЕВОЙ ПЕРФУЗИИ Российский патент 2025 года по МПК A61K31/6615 A61P9/10 

[0001] Согласно настоящей заявке испрашиваются преимущества приоритета в соответствии с заявками ЕР 19382061.0, поданной 30 января 2019 г., и US 62/913259, поданной 10 октября 2019 г.

Область техники

[0002] Настоящее изобретение относится к применению инозитолфосфатов (IP), их аналогов и производных для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим указанные IP, их аналоги и производные, и их применению для здоровья животных и человека.

Уровень техники

[0003] Заболевание периферических артерий (PAD) представляет собой распространенное заболевание, характеризующееся стенозом и/или обструкцией артерий нижних конечностей, приводящим к снижению мышечной перфузии и оксигенации. PAD представляет собой серьезную проблему для общественного здравоохранения и создает высокий риск длительных страданий. PAD увеличивает риск омертвения тканей (гангрены), ампутации и преждевременной смерти.

[0004] PAD является результатом ишемии нижних конечностей. Основная причина представляет собой атеросклероз. В легкой форме PAD может ограничиваться перемежающейся хромотой и болью в нижних конечностях. PAD нижних конечностей является основной причиной инвалидности и потери подвижности у пожилых мужчин и женщин и оказывает решающее влияние на качество жизни.

[0005] Распространенность PAD составляет ~ 12% среди взрослого населения. Эта распространенность увеличивается до более чем 20% в группе населения старше 70 лет. В настоящее время PAD поражает более восьми миллионов мужчин и женщин только в Соединенных Штатах Америки. По оценкам, более 200 миллионов человек во всем мире страдают PAD. Распространенность PAD, вероятно, увеличится в ближайшем будущем по мере старения населения в целом и увеличения заболеваемости диабетом 2 типа, связанным с ожирением. Курение сигарет также является еще одним важным фактором риска. Пациенты с PAD имеют повышенные показатели сердечнососудистой (CV) заболеваемости и смертности, более быстрые темпы снижения функциональности и повышенные показатели потери подвижности по сравнению с населением в целом.

[0006] Цели протокола для лечения пациентов с PAD включают в себя снижение частоты сердечно-сосудистых явлений, улучшение функциональной работоспособности и предотвращение снижения функциональности и потери подвижности. Восстановление или улучшение кровоснабжения конечностей может помочь в достижении этих целей.

[0007] Хотя эндоваскулярные процедуры и процедуры реваскуляризации нижних конечностей значительно улучшают ходьбу у пациентов с PAD, процедуры реваскуляризации не являются терапевтическими вариантами для многих из них, либо из-за наличия коморбидных заболеваний, либо из-за того, что локализация и тип атеросклеротического заболевания нижних конечностей не поддаются реваскуляризации. Реваскуляризация инвазивна, дорогостояща и связана с риском, особенно для пожилых пациентов. По этим причинам клиницисты нуждаются в эффективных, доступных и хорошо переносимых лечебных средствах, улучшающих функционирование нижних конечностей у пациентов с PAD.

[0008] В настоящее время только два препарата были одобрены Федеральным управлением по лекарственным средствам (FDA) для улучшения ходьбы у людей с PAD: пентоксифиллин (1984) и цилостазол (1999). С тех пор не было одобрено никаких новых препаратов для лечения перемежающейся хромоты. Кроме того, в недавних исследованиях с участием пациентов с PAD пентоксифиллин не улучшил значительно симптомы перемежающейся хромоты или максимальную дистанцию безболевой ходьбы по сравнению с плацебо. Недавно опубликованные руководства по клинической практике не рекомендуют назначать пентоксифиллин при симптомах перемежающейся хромоты из-за отсутствия терапевтического эффекта.

[0009] Цилостазол представляет собой ингибитор фосфодиэстеразы, который обеспечивает примерно 25%-40% улучшение эффективности ходьбы по беговой дорожке у людей с симптоматическим PAD. Цилостазол представляет собой ингибитор фосфодиэстеразы 3 типа, который действует путем увеличения внутриклеточной концентрации циклического аденозинмонофосфата; при этом лекарственное средство подавляет агрегацию тромбоцитов и служит прямым артериальным сосудорасширяющим средством, улучшая перфузию крови. Однако механизм, с помощью которого цилостазол улучшает способность ходить у пациентов с PAD, остается неясным.

[0010] Побочные эффекты цилостазола включают в себя головную боль, диарею, сердцебиение и головокружение. Существует предостережение в черной рамке против назначения цилостазола пациентам с сердечно-сосудистыми заболеваниями в анамнезе. Цилостазол не следует назначать пациентам с PAD, у которых также есть сердечная недостаточность. Цилостазол взаимодействует с лекарственными средствами, регулярно назначаемыми пациентам с почечной недостаточностью или сердечнососудистыми заболеваниями, такими как цинакальцет, клопидогрель и ибандронат, что увеличивает риск нежелательных реакций у этих пациентов, возникающих при совместном применении цилостазола с другими лекарственными средствами.

[0011] В заключение, медицинские методы лечения для облегчения симптомов являются ограниченными, хирургические или эндоваскулярные вмешательства являются применимыми для некоторых людей, но долгосрочные результаты часто неутешительны. В результате возникает необходимость в разработке более эффективных и безопасных новых методов лечения PAD.

Сущность изобретения

[0012] Согласно первому аспекту настоящее изобретение относится к соединению общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для применения для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации у нуждающегося в этом субъекта

[0013] где R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ независимо выбраны из ОН, радикала формулы II, III, IV и гетерологичного фрагмента:

[0014] с условием, что:

[0015] по меньшей мере один из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ выбран из радикала формулы II, III и IV, и

[0016] ноль, один, два или три из R_1, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ представляют собой

гетер о логичный фрагмент.

[0017] Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к соединению общей формулы I, как определено выше, для применения при лечении или профилактике ишемии у нуждающегося в этом субъекта. Согласно версии этого аспекта настоящее изобретение относится к соединению общей формулы I, как описано выше, для применения при лечении или профилактике связанного с ишемией заболевания или состояния у нуждающегося в этом субъекта.

[0018] Согласно некоторым аспектам настоящее изобретение относится к соединению общей формулы I, как определено выше, где гетерологичный фрагмент выбран из радикала формулы V, радикала формулы VI и радикала формулы VH:

[0019] и где n представляет собой целое число в диапазоне от 2 до 200, и R₁₃ выбран из Н, метила или этила.

[0020] Согласно дополнительному аспекту настоящее изобретение также относится к способу увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации, который предусматривает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I, как определено выше, вместе с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами или носителями, нуждающемуся в этом субъекту. Этот аспект также может быть сформулирован как применение соединения формулы I, как определено выше, для производства лекарственного средства для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации у нуждающегося в этом субъекта.

[0021] Согласно другому аспекту настоящее изобретение также относится к способу лечения или профилактики ишемии и/или связанного с ишемией заболевания или состояния, который предусматривает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I, как определено выше, вместе с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами или носителями, нуждающемуся в этом субъекту. Этот аспект также может быть сформулирован как применение соединения формулы I, как определено выше, для производства лекарственного средства для лечения или профилактики ишемии и/или связанного с ишемией заболевания или состояния у нуждающегося в этом субъекта.

[0022] Согласно дополнительному аспекту настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики заболевания периферических артерий, который предусматривает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I, как определено выше, вместе с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами или носителями, нуждающемуся в этом субъекту. Этот аспект также может быть сформулирован как применение соединения формулы I, как определено выше, для производства лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания периферических артерий у нуждающегося в этом субъекта.

[0023] Соединения согласно настоящему изобретению являются особенно применимыми для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации в нижних конечностях и, особенно, для лечения или профилактики заболевания периферических артерий (PAD) и тесно связанных состояний, таких как критическая ишемия конечностей (CLI). Эти соединения также демонстрируют многие полезные свойства (например, лучший профиль безопасности) по сравнению с цилостазолом, эталонным лекарственным средством, которое в настоящее время показано для лечения PAD.

[0024] Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно соединение формулы I, как определено выше, для применения в следующем: (i) увеличение тканевой перфузии и/или оксигенации, (ii) лечение или профилактика ишемии и/или связанного с ишемией заболевания и/или (iii) лечение или профилактика PAD у нуждающегося в этом субъекта. Этот аспект также может быть сформулирован как применение фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно соединение формулы I, как определено выше, для производства лекарственного средства для следующего: (i) увеличение тканевой перфузии и/или оксигенации, (ii) лечение или профилактика ишемии и/или связанного с ишемией заболевания и/или (iii) лечение или профилактика PAD у нуждающегося в этом субъекта.

Краткое описание чертежей

[0025] На фиг. 1 показаны репрезентативные примеры аналогов инозитолфосфата, в которых два из шести X представляют собой OPSO₂^2-, а остальные X представляют собой OSO³. Показаны две специфические формы 4,6-ди-(O-тиофосфат)-инозитол-1,2,3,5-тетра-О-сульфата.

[0026] На фиг. 2 показаны аналоги инозитолфосфата и производные инозитолфосфата, которые можно использовать для осуществления на практике способов согласно настоящему изобретению. Показанные молекулы представляют собой мио-инозитолпентакисфосфат-2-PEG400, мио-инозитолгексакисульфат (мио-инозитолгексасульфат) и сцилломио-инозитолгексакисульфат (сцилло-инозитолгексасульфат).

[0027] На фиг. 3 показаны аналоги инозитолфосфата и производные инозитолфосфата, которые можно использовать для осуществления на практике способов согласно настоящему изобретению. X независимо представляет собой фосфор- и/или серосодержащие группы (например, фосфат, сульфат или тиофосфат). R¹ представляет собой гетерологичный фрагмент (например, PEG или PG).

[0028] На фиг. 4 показаны иллюстративные аналоги инозитолфосфата и производные инозитолфосфата, которые можно использовать для осуществления на практике способов согласно настоящему изобретению. R¹ представляет собой гетерологичный фрагмент (например, PEG или PG). n может составлять от 2 до 200.

[0029] На фиг. 5 показаны иллюстративные аналоги инозитолфосфата и производные инозитолфосфата, которые можно использовать для осуществления на практике способов согласно настоящему изобретению. n может составлять от 2 до 200.

[0030] На фиг. 6 показаны иллюстративные аналоги инозитолфосфата и производные инозитолфосфата, которые можно использовать для осуществления на практике способов согласно настоящему изобретению. n может составлять от 2 до 200.

[0031] На фиг. 7 показан кровоток в задних конечностях на модели крысы в D0, измеренный с помощью доплеровской лазерной визуализации. Кровоток показан в нормализованных единицах перфузии (PU). Нормализация достигается путем сравнения необработанных данных с данными группы 1 в D0.

[0032] На фиг. 8 показан кровоток в задних конечностях на модели крысы в D6, измеренный с помощью доплеровской лазерной визуализации. Кровоток показан в нормализованных единицах перфузии (PU). Нормализация достигается путем сравнения необработанных данных с данными группы 1 в D6.

[0033] На фиг. 9 показан кровоток в задних конечностях на модели крысы в D12, измеренный с помощью доплеровской лазерной визуализации. Кровоток показан в нормализованных единицах перфузии (PU). Нормализация достигается путем сравнения необработанных данных с данными группы 1 в D12.

[0034] На фиг. 10 показан процент ингибирования кальцификации аорты на модели крыс с использованием VitD в D12. Уровень кальция во время умерщвления измеряли с помощью ICP-OES.

[0035] На фиг. 11 показан кровоток в задних конечностях на модели крысы в D12 и D18 (6 дней после прекращения лечения), измеренный с помощью допплеровской лазерной визуализации. Кровоток показан в нормализованных единицах перфузии (PU). Нормализация достигается путем сравнения необработанных данных с данными группы 1 в D12 и D18.

[0036] На фиг. 12 показана (А) максимальная дистанция безболевой ходьбы (MWD) и (В) максимальное время безболевой ходьбы (MWT) на модели крысы в D10, измеренные с помощью теста на беговой дорожке. Максимальная дистанция безболевой ходьбы отображается в метрах (м), а максимальное время безболевой ходьбы - в минутах (мин).

[0037] На фиг. 13 показана максимальная дистанция безболевой ходьбы (MWD) на модели крыс в D17 (5 дней после прекращения лечения), измеренная с помощью теста на беговой дорожке. Максимальная дистанция безболевой ходьбы отображается в метрах (м) вплоть до 40 минут ходьбы.

[0038] На фиг. 14 показан процент ингибирования кальцификации аорты на модели крыс с использованием VitD в D24 (12 дней после прекращения лечения). Уровень кальция во время умерщвления измеряли с помощью ICP-OES.

[0039] На фиг. 15 показан кровоток в задних конечностях на модели крысы в D0, D5 и D13 (8 дней после начала лечения), измеренный с помощью допплеровской лазерной визуализации. Кровоток показан в нормализованных единицах перфузии (PU). Нормализация достигается путем сравнения необработанных данных с данными группы 1 в D0, D5 и D13.

[0040] На фиг. 16 показана (А) максимальная дистанция безболевой ходьбы (MWD) и (В) максимальное время безболевой ходьбы (MWT) на модели крыс в D11 (7 дней после начала лечения), измеренные с помощью теста на беговой дорожке. Максимальная дистанция безболевой ходьбы отображается в метрах (м), а максимальное время безболевой ходьбы - в минутах (мин).

[0041] На фиг. 17 показан процент ингибирования кальцификации бедренных артерий на модели крыс с использованием VitD на 13 день (9 дней после начала лечения). Уровень кальция во время умерщвления измеряли с помощью ICP-OES.

Подробное описание изобретения

[0042] Настоящее изобретение относится к соединениям, фармацевтическим композициям, способам и путям введения для применения для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации. Настоящее изобретение также относится к соединениям, фармацевтическим композициям, способам и путям введения для применения при лечении или профилактике ишемии и связанных с ишемией заболеваний и состояний.

[0043] Соединения согласно настоящему изобретению являются особенно применимыми для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации в нижних конечностях и, особенно, для лечения или профилактики заболевания периферических артерий (PAD) и связанных состояний, таких как критическая ишемия конечностей (CLI). Эти соединения также демонстрируют многие полезные свойства по сравнению с другими одобренными лекарственными средствами для лечения PAD и CLI.

1. Определения общих терминов и выражений

[0044] Настоящее изобретение включает в себя варианты осуществления, в которых ровно один представитель группы присутствует, используется или иным образом относится к данному продукту или процессу. Оно также включает в себя варианты осуществления, в которых более одного или все представители группы присутствуют, используются или иным образом относятся к данному продукту или процессу.

[0045] Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в настоящей области техники, к которой относится настоящее описание. Например, Pei-Show J, Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, 2-е изд. (CRC Press, Boca Raton, FL, USA 2002); Lackie J, The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 5-е изд. (Academic Press, Cambridge, MA, USA 2013) и Cammack R, et al, Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology, 2-е изд., (Oxford University Press, Oxford, GB, 2006) предоставляют квалифицированному специалисту общий словарь многих терминов, используемых в настоящем описании.

[0046] Единицы, префиксы и символы обозначаются в их форме, принятой в метрической системе единиц измерений (Systeme International de Unites, SI). Числовые диапазоны включают в себя числа, определяющие диапазон. Если указан диапазон значений, следует понимать, что каждое промежуточное целочисленное значение и каждая его доля между указанными верхним и нижним пределами этого диапазона также конкретно раскрывается вместе с каждым поддиапазоном между такими значениями. Верхний и нижний пределы любого диапазона могут независимо включаться в этот диапазон или исключаться из него, и каждый диапазон, в который включен один, ни один, либо оба предела, также охватывается настоящим изобретением.

[0047] Если значение указано явно, следует понимать, что значения, которые имеют приблизительно такое же количество или величину, что и указанное значение, также находятся в пределах объема настоящего изобретения. Когда раскрывается комбинация, каждая подкомбинация элементов этой комбинации также конкретно раскрывается и находится в пределах объема настоящего изобретения. И наоборот, если по отдельности раскрываются различные элементы или группы элементов, также раскрываются их комбинации. В тех случаях, когда любой элемент настоящего изобретения раскрывается как имеющий множество альтернатив, также раскрываются примеры настоящего изобретения, в которых каждая альтернатива исключена по отдельности или в любой комбинации с другими альтернативами; более чем один элемент настоящего изобретения может иметь такие исключения, и все комбинации элементов, имеющих такие исключения, являются раскрытыми.

[0048] Используемый в настоящем документе термин «и/или» следует понимать как конкретное изобретение каждого из двух указанных признаков или компонентов с другим или без другого. Таким образом, термин «и/или», используемый во фразе, такой как «А и/или В» в настоящем документе, предназначен для включения «А и В», «А или В», «А» (отдельно) и «В» (отдельно). Аналогичным образом, термин «и/или», используемый во фразе, такой как «А, В и/или С», предназначен для охвата каждого из следующих аспектов: А, В, и С; А, В, или С; А или С; А или В; В или С; А и С; А и В; В и С; А (отдельно); В (отдельно); и С (отдельно).

[0049] Термин «около», используемый в настоящем документе и применяемый к одному или нескольким представляющим интерес значениям, относится к значению, которое аналогично установленному эталонному значению. Согласно некоторым аспектам термин «около» относится к диапазону значений, которые находятся в пределах 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% или меньше в любом направлении (больше или меньше) от заявленного эталонного значения, если иное не указано или иное не очевидно из контекста (за исключением случаев, когда такое число превышает 100% от возможного значения).

[0050] Используемые в настоящем документе термины «критическая ишемия конечностей» или «CLI» относятся к серьезной обструкции артерий, которая заметно снижает кровоток к конечностям и прогрессирует до сильной боли и даже кожных язв, открытых поражений кожи или гангрены. Критическая ишемия конечностей представляет собой очень тяжелое заболевание периферических артерий. Согласно некоторым аспектам введение инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) нуждающемуся в этом субъекту улучшает его способность ходить быстрее и на большие расстояния по сравнению с отсутствием лечения.

[0051] Используемый в настоящем документе термин «соединение» включает в себя все изомеры и изотопы изображенной структуры. Используемый в настоящем документе термин «изомер» означает любой геометрический изомер, таутомер, цвиттерион, стереоизомер, энантиомер или диастереомер соединения. Соединения могут включать в себя один или несколько хиральных центров и/или двойных связей и, таким образом, могут существовать в виде стереоизомеров, таких как изомеры с двойной связью (т.е. геометрические E/Z-изомеры) или диастереомеры (например, энантиомеры (т.е. (+) или (-)) или цис/трансизомеры). Настоящее изобретение охватывает любые и все изомеры описанных в настоящем документе соединений, включая в себя стереомерно чистые формы (например, геометрически чистые, энантиомерно чистые или диастереомерно чистые) и энантиомерные и стереоизомерные смеси, например рацематы. Энантиомерные и стереомерные смеси соединений и способы их разделения на составляющие их энантиомеры или стереоизомеры хорошо известны. Соединение, соль или комплекс согласно настоящему изобретению можно получить в сочетании с молекулами растворителя или воды с образованием сольватов и гидратов обычными способами.

[0052] Используемый в настоящем документе термин «цилостазол» относится к 6-[4-(1-циклогексил-1Н-тетразол-5-ил)бутокси]-3,4-дигидро-2(1Н)-хинолинону [CAS-73963-72-1], производному хинолинона, которое ингибирует клеточную фосфодиэстеразу. Молекулярная формула и масса цилостазола представляют собой C₂₀H₂₇N₅O₂ и 369,46 г/моль соответственно. Его структурная формула представляет собой:

[0053] Используемый в настоящем документе термин «эффективное количество» и связанные с ним термины «эффективная доза» и «эффективная дозировка» применительно к следующему: (i) соединение общей формулы I (например, инозитолфосфат, аналог инозитолфосфата, производное инозитолфосфата или их комбинация), или (ii) фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно из соединений пункта (i), является таким количеством, достаточным для достижения благоприятных или требуемых результатов. Согласно некоторым вариантам осуществления благоприятные или требуемые результаты представляют собой, например, клинические результаты, и, как таковое, «эффективное количество» зависит от контекста, в котором оно применяется. В контексте введения терапевтического агента, который увеличивает тканевую перфузию и/или оксигенацию, эффективное количество терапевтического агента представляет собой, например, количество, достаточное для (а) увеличения тканевой перфузии в определенной области, (b) остановки, снижения, замедления прогрессирования или обратного развития ишемии в определенной области или (с) улучшения подвижности или способности ходить (например, скорости, расстояния) у субъекта по сравнению с теми же параметрами, наблюдаемыми у субъекта до введения терапевтического агента, или в популяции контрольных субъектов без введения терапевтического агента.

[0054] Используемый в настоящем документе термин «ишемия» относится к ограничению кровоснабжения тканей, вызывающему нехватку кислорода, необходимого для поддержания клеточного метаболизма. Ишемия включает в себя не только недостаток кислорода, но также снижение доступности питательных веществ и неадекватное удаление метаболических отходов. Ишемия может являться частичной (плохая перфузия) или полной.

[0055] Используемые в настоящем документе термины «максимальная дистанция безболевой ходьбы» или «MWD» относятся к расстоянию, на котором субъект не может продолжать ходить без посторонней помощи из-за истощения или сильной боли. В контексте оценки увеличения MWD, указанное приращение оценивается путем сравнения значений MWD субъекта до и после лечения терапевтическим агентом или путем сравнения значений MWD субъекта после лечения с популяцией контрольных субъектов, не получавших лечение с помощью терапевтического агента.

[0056] Используемые в настоящем документе термины «максимальное время безболевой ходьбы» или «MWT» относятся к времени, в течение которого субъект не может продолжать ходить без посторонней помощи из-за истощения или сильной боли. В контексте оценки увеличения MWT, указанное приращение оценивается путем сравнения значений MWT субъекта до и после лечения терапевтическим агентом или путем сравнения значений MWT субъекта после лечения с популяцией контрольных субъектов, не получавших лечение с помощью терапевтического агента.

[0057] Используемые в настоящем документе термины «парентеральное введение» и «вводимый парентерально» означают способы введения, отличные от энтерального и местного введения, как правило, путем инъекции, и включают в себя без ограничения следующее: внутривенная, внутримышечная, внутриартериальная, интратекальная, интракапсулярная, интраорбитальная, внутрисердечная, внутрикожная, внутрибрюшинная, транстрахеальная, подкожная, субкутикулярная, внутрисуставная, субкапсулярная, субарахноидальная, интраспинальная, эпидуральная и внутригрудинная инъекция и инфузия (например, почечная диализная инфузия).

[0058] Используемые в настоящем документе термины «заболевание периферических артерий» или «PAD» относятся к сужению периферических артерий к ногам (чаще всего), животу, рукам и голове. Симптомы включают в себя перемежающуюся хромоту (например, боль в ногах при ходьбе, которая проходит после отдыха), кожные язвы, синеватую кожу, холодную кожу или плохой рост ногтей и волос.

[0059] Используемые в настоящем документе термины «предотвращать», «предотвращение» и «профилактика» относятся к подавлению возникновения или уменьшению появления заболевания или состояния у субъекта (например, предотвращению развития ишемической ткани в конечностях).

[0060] Используемый в настоящем документе термин «SNF472» относится к составу мио-инозитолгексафосфатгексанатрия для внутривенного введения. SNF472 производят растворением мио-инозитолгексафосфатгексанатрия в физиологическом растворе с последующим регулированием рН и асептической фильтрацией. SNF472 получают с тремя различными дозировками: (a) (i) 20 мг/мл и (ii) 90 мг/мл в одноразовых флаконах объемом 5 мл, составленных в физиологическом растворе, рН 5,8-6,2 и (b) 30 мг/мл в одноразовых флаконах по 10 мл, составленных в физиологическом растворе, рН 5,6-6,4.

[0061] Используемые в настоящем документе термины «субъект», «индивидуум», «животное» или «млекопитающее» означают любого субъекта, в частности, субъекта-млекопитающего, для которого необходим диагноз, прогноз или лечение. Субъекты-млекопитающие включают в себя без ограничения людей, одомашненных животных, сельскохозяйственных животных, животных зоопарков, спортивных животных, домашних животных, таких как собаки, кошки, морские свинки, кролики, крысы, мыши, лошади, крупный рогатый скот, коровы; приматы, такие как высшие обезьяны, низшие обезьяны, орангутаны и шимпанзе; псовые, такие как собаки и волки; кошачьи, таких как кошки, львы и тигры; непарнокопытные, такие как лошади, ослы и зебры; медведи, пищевые животные, такие как коровы, свиньи и овцы; копытные, такие как олени и жирафы; грызуны, такие как мыши, крысы, хомяки и морские свинки; и так далее. Согласно определенным аспектам субъект является человеком. Согласно некоторым аспектам субъектом является пациент-человек со сниженной тканевой перфузией и/или оксигенацией в мышцах нижних конечностей или с риском развития указанного состояния. Согласно некоторым дополнительным аспектам субъект представляет собой пациента-человека с ишемией и/или связанным с ишемией заболеванием или состоянием, или с риском развития указанной ишемии, связанного с ишемией заболевания или состояние.

[0062] Используемый в настоящем документе термин «по существу» относится к качественному условию проявления полной или почти полной мере или степени характеристики или свойства, представляющего интерес. Специалист в области биологии поймет, что биологические и химические явления редко, если вообще когда-либо, доходят до завершения и/или переходят к завершению или достигают абсолютного результата или избегают достижения абсолютного результата. Таким образом, термин «по существу» используется в настоящем документе для обозначения потенциального отсутствия завершенности, присущего многим биологическим и химическим явлениям.

[0063] Используемый в настоящем документе термин «тканевая перфузия» относится к потоку крови или другого перфузата через сосуды конкретной ткани или органа. «Увеличить тканевую перфузию» или «увеличение тканевой перфузии» в контексте настоящего описания относятся к приращению кровотока в конкретной области ткани у субъекта после введения инозитолфосфата согласно настоящему изобретению по сравнению с теми же параметрами, которые наблюдались у субъекта до введение указанного терапевтического агента или в популяции контрольных субъектов без введения указанного терапевтического агента.

[0064] Используемые в настоящем документе термины «лечить» или «лечение» относятся к введению соединения или фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению для (i) замедления, (ii) ингибирования прогрессирования, (iii) остановки или (iv) обращение вспять прогрессирования заболевания или состояния после появления его клинических признаков. Под контролем прогрессирования заболевания понимаются благоприятные или требуемые клинические результаты, которые включают в себя без ограничения уменьшение симптомов, сокращение продолжительности заболевания, стабилизацию патологических состояний (особенно во избежание дополнительного ухудшения), отсрочку прогрессирование заболевания, улучшение патологического состояния и ремиссию (как частичную, так и полную). Контроль прогрессирования заболевания также включает в себя увеличение выживаемости по сравнению с ожидаемой выживаемостью, если лечение не применялось. В контексте настоящего изобретения термины «лечить» и «лечение» относятся конкретно к (а) увеличению тканевой перфузии и/или оксигенации или (b) остановке, снижению, замедлению прогрессирования или обращению вспять развития ишемической ткани, особенно в нижних конечностях, или (с) улучшению подвижности или способности ходить (например, скорости, расстояния, выносливости) у субъекта, которому вводят соединения или фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению.

[0065] Используемый в настоящем документе термин «способность ходить» относится к способности субъекта двигаться автономно без посторонней помощи. Параметры MWD и MWT указывают на способность субъекта ходить.

2. Соединения

[0066] Соединения для применения в настоящем изобретении представляют собой инозитолфосфаты, как определено в первом аспекте настоящее изобретения, а также их аналоги и производные. Используемый в настоящем документе термин «инозитолфосфат» относится к соединению с инозитоловым кольцом и одной, двумя, тремя, четырьмя, пятью или шестью фосфатными группами или их комбинацией. Мио-инозитолгексафосфат (IP6) представляет собой иллюстративный инозитолфосфат согласно настоящему изобретению. Согласно некоторым аспектам инозитолфосфат является чистым (например, более 99% видов инозитолфосфата относится к одним и тем же видам, например, IP6) или по существу чистым (например, по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% видов инозитолфосфата являются одними и теми же видами, например IP6). Согласно некоторым аспектам инозитолфосфат представляет собой смесь, например, содержащую различные количества IP1, IP2, IP3, IP4, IP5 и IP6. Согласно некоторым аспектам инозитолфосфат представляет собой рацемическую смесь.

[0067] Согласно настоящему изобретению также предусмотрены аналоги инозитолфосфата. Используемый в настоящем документе «аналог инозитолфосфата» относится к соединению, которое содержит кольцо с различным числом атомов углерода по отношению к кольцу инозитола (т.е. 5 или 7 атомов углерода) и/или содержит по меньшей мере одну сульфатную или тиофосфатную группу. Например, соединение, содержащее кольцо с 5, 6 или 7 атомами углерода и по меньшей мере одну фосфатную, сульфатную или тиофосфатную группу, будет считаться аналогом инозитолфосфата.

[0068] Используемый в настоящем документе термин «производное инозитолфосфата» относится к инозитолфосфату или аналогу инозитолфосфата, который содержит гетерологичный фрагмент (т.е. группу, которая не является фосфатом, сульфатом или тиофосфатом). Например, инозитолпентасульфат, содержащий гетерологичный фрагмент полиэтиленгликоля, или мио-инозитолгексафосфат, содержащий гетерологичный фрагмент полиглицерина, следует рассматривать как производные инозитолфосфата.

[0069] Используемый в настоящем документе термин «гетерологичный фрагмент» относится к радикалу в соединении формулы I, который не является фосфатом, сульфатом или тиофосфатом, и придает требуемое свойство такому соединению. Например, гетерологичный фрагмент (например, полиглицерин или полиэтиленгликоль) может увеличивать растворимость соединения. Согласно некоторым аспектам гетерологичный фрагмент может придавать несколько требуемых свойств (например, полиглицерин и полиэтиленгликоль могут как увеличивать растворимость соединения, так и снижать скорость выведения соединения).

[0070] Используемые в настоящем документе термины «инозитолфосфат согласно изобретению» и «инозитолфосфат согласно настоящему изобретению» являются общим термином, охватывающим «инозитолфосфат», «аналог инозитолфосфата», «производное инозитолфосфата» и их комбинации. Согласно некоторым аспектам термин «инозитолфосфат согласно настоящему изобретению» охватывает композиции, содержащие «инозитолфосфат», «аналог инозитолфосфата», «производное инозитолфосфата» или их комбинацию, и по меньшей мере один дополнительный терапевтический агент. Согласно некоторым аспектам дополнительный терапевтический агент включает в себя цилостазол, пентоксифиллин или их комбинацию.

[0071] Соединения согласно настоящему изобретению, содержащие кольцо с 5, 6 или 7 атомами углерода и по меньшей мере одну сульфатную или тиофосфатную группу, но без фосфатной группы, все равно будут считаться «аналогом инозитолфосфата» или «аналогом инозитолфосфата» в контексте настоящего изобретения. Таким образом, термин «инозитолфосфат согласно настоящему изобретению» охватывает не только фосфатсодержащие соединения, но также соединения без фосфатных групп, которые содержат кольцо с 5, 6 или 7 атомами углерода и по меньшей мере одну сульфатную или тиофосфатную группу.

[0072] Репрезентативные инозитолфосфаты согласно настоящему изобретению представлены на фиг. 1-6. На фиг. 3 представлены многочисленные примеры инозитолфосфатов, все они характеризуются мио-конформацией. Помимо мио-инозитола, другими встречающимися в природе стереоизомерами инозитола являются сцилло-, муко-, 1D-хиро-, 1L-хиро-, нео-инозитол, алло-, эпи- и цис-инозитол. Как следует из их названий, 1L- и 1D-хиро-инозитол являются единственной парой энантиомеров инозитола, но они являются энантиомерами друг друга, а не мио-инозитола. Следует понимать, что любой иллюстративный инозитолфосфат, представленный в настоящем раскрытии, не ограничен отображаемой репрезентативной конформацией. Таким образом, например, примеры, представленные на фиг. 3, также будут охватывать соответствующие эквиваленты в конформациях сцилло-, муко-, 1D-хиро-, 1L-хиро-, нео-инозитола, алло-, эпи- и цис-инозитола. В своей наиболее стабильной конформации изомер мио-инозитола принимает конформацию стула, которая перемещает максимальное количество гидроксилов в экваториальное положение, где они находятся дальше всего друг от друга. В этой конформации природный мио-изомер имеет структуру, в которой пять из шести гидроксилов (первый, третий, четвертый, пятый и шестой) являются экваториальными, тогда как вторая гидроксильная группа является аксиальной.

2.1. Инозитолфосфаты, аналоги и производные

[0073] Согласно некоторым аспектам по меньшей мере один из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ соединения общей формулы I независимо представляет собой Н, -X, -ОХ, - NHX, -NX₂, -SX, -OSO₃HX, -OSO₃X₂ или соединение формулы II, формулы III или формулы IV, где каждый X независимо представляет собой Н, C_1-30 алкил, С_2-30 алкинил или Су₁ где С_1-30 алкил, С_2-30 алкенил и С_2-30 алкинил независимо необязательно замещены одним или несколькими R₁₄ и где Cy₁ необязательно замещен одним или несколькими R₁₅; Cy₁ представляет собой карбоциклическое или гетероциклическое 3-10-членное кольцо, которое может быть насыщенным, частично ненасыщенным или ароматическим, где указанный гетероцикл содержит от одного до четырех гетероатомов, выбранных из О, S и N, где указанное кольцо может быть связано с остальной частью молекулы через любой доступный атом С, и где Cy₁ необязательно конденсирован с одним - четырьмя пяти- или шестичленными кольцами, каждое из которых является насыщенным, частично ненасыщенным или ароматическим, карбоциклическим или гетероциклическим, и где указанный конденсированный гетероцикл может содержать один или два гетероатома, выбранные из О, N и S; каждый R₁₃ независимо представляет собой Н, C_1-30 алкил, -NH₂, -NHC_1-30 алкил или N(C_1-30 алкил)₂, где каждый C_1-30 алкил независимо необязательно замещен одной или несколькими группами галогена, -ОН, -CN и -NO₂; и каждый R₁₄ и R₁₅ независимо представляет собой -ОН, C_1-30 алкокси, C_1-30 алкилтионил, C_1-30 ацилокси, фосфат, галоген, тригалоген C_1-30 алкил, нитрил, азид.

[0074] Согласно некоторым неявно выраженным аспектам каждый X независимо представляет собой Н, C_1-30 алкил или Cy₁, где C_1-30 алкил необязательно замещен одним или несколькими R₁₄ и где Cy₁ необязательно замещен одним или несколькими R₁₅; и каждый R₁₄ и R₁₅ независимо представляет собой -ОН, C_1-30 алкокси, C_1-30 алкилтионил, C_1-30 ацилокси, фосфат, галоген, тригалоген C_1-30 алкил, нитрил или азид. Согласно некоторым аспектам каждый X представляет собой Н, C_1-30 алкил или Cy₁. Согласно некоторым аспектам каждый X представляет собой Н.

[0075] Согласно некоторым дополнительным аспектам по меньшей мере один из радикалов R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ независимо представляет соединение формулы II, формулы III или формулы IV, каждый R₁₃ независимо представляет Н, С_1-30 алкил, -NH₂, -NHC_1-30 алкил или -N(C_1-30 алкил)₂, где каждый C_1-30 алкил независимо необязательно замещен одной или несколькими группами галонена, -ОН, -CN и -NO₂; и R₂, R₄, R₆, R₈, R₁₀ и R₁₂ независимо представляют Н.

[0076] Согласно дополнительному аспекту R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ независимо представляют соединение формулы II, формулы III или формулы IV, каждый R₁₃ независимо представляет Н или C_1-30 алкил, где каждый C_1-30 алкил независимо необязательно замещен одной или несколькими группами галонена, -ОН, -CN и -NO₂; и R₂, R₄, R₆, R₈, R₁₀ и R₁₂ независимо представляют Н.

[0077] Согласно дополнительному аспекту по меньшей мере один из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ представляет соединение формулы II, формулы III или формулы IV, и каждый R₁₃ независимо представляет Н или C_1-30 алкил. Согласно другому аспекту по меньшей мере один из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ представляет соединение формулы II, формулы III или формулы IV, и каждый R₁₃ представляет Н.

[0078] Согласно конкретному аспекту соединение представляет собой инозитолгексафосфат (IP6). Согласно другим аспектам соединение представляет собой инозитолмонофосфат (IP1), инозитолдифосфат (IP2), инозитолтрифосфат (IP3), инозитолтетрафосфат (IP4) или инозитолпентафосфат (IP5). Согласно некоторым аспектам соединение содержит комбинацию IP1, IP2, IP3, IP4, IP6 и IP6. Согласно некоторым аспектам IP6 может образовывать другие инозитолфосфаты (IP5, IP4, IP3, IP2, IP1) путем дефосфорилирования in vivo. Предполагается, что инозитол означает любую изомерную форму молекулы, например мио-инозитол.

[0079] Согласно некоторым аспектам соединения для применения в настоящем изобретении представляют собой соединения формулы I, где:

[0080] R₇ представляет собой OSO₃^-, и R₉, R₅, R₃, R₁ и R₁₁ независимо выбраны из ОРО₃^2-, OPSO₂^2- или OSO₃^-;

[0081] R₉, R₅ и R₁ представляют собой ОРО₃^2-, и R₇, R₃ и R₁₁ представляют собой OSO₃^-;

[0082] R₉, R₅ и R₁ представляют собой OSO₃^-, и R₇, R₃ и R₁₁ представляют собой ОРО₃^2-;

[0083] R₃, R₁ и R₁₁ представляют собой OSO₃^-, и R₉, R₇ и R₅ представляют собой ОРО₃^2-;

[0084] R₃, R₁ и R₁₁ представляют собой ОРО₃^2-, и R₉, R₇ и R₅ представляют собой OSO₃^-;

[0085] R₇ и R₁ представляют собой ОРО₃^2-, и R₉, R₅, R₃ и R₁₁ представляют собой ОРО₃^2-;

[0086] R₇ и R₁ представляют собой OSO₃^-, и R₉, R₅, R₃, и R₁₁ представляют собой ОРО3^2-;

[0087] R₇ и R₅ представляют собой ОРО₃^2-, и R₉, R₃, R₁ и R₁₁ представляют собой OSO₃^-; или,

[0088] R₇ и R₅ представляют собой OSO₃^-, и R₉, R₃, R₁ и R₁₁ представляют собой ОРО₃^2-.

[0089] Инозитолфосфаты согласно настоящему изобретению также включают в себя соединения, которые образуются в виде метаболитов во время физиологического дефосфорилирования (или десульфатирования или детиосульфатирования в случае соединений, содержащих сульфатные или тиофосфатные группы).

[0090] Согласно некоторым аспектам соединение, вводимое в дозировке согласно раскрытым в настоящем документе способам, представляет собой пролекарственное средство, которое после гидролиза или другого внутриклеточного или внеклеточного превращения дает инозитолфосфат согласно настоящему изобретению.

[0091] Инозитолфосфаты согласно настоящему изобретению включают в себя также любую комбинацию инозитолфосфата, аналогов инозитолфосфата и их производных, раскрытые в настоящем документе.

[0092] Все соединения формулы I содержат радикалы со связями С-О-Р или С-О-S, которые придают соединениям аффинность к кальцийсодержащим кристаллам и достаточно лабильную связь для гидролиза in vivo, тем самым предотвращая необратимое связывание с кальцийсодержащими кристаллами, такими как гидроксиапатит (НАР), в кости, что может оказать негативное влияние на ремоделирование кости, как в случае с бисфосфонатами при длительном введении, поскольку указанные соединения содержат связи Р-С-Р, которые не могут быть гидролизованы организмом. С противоположной стороны, фосфорилированные соединения, которые не содержат указанных связей С-О-Р, такие как пирофосфаты, связи Р-О-Р которых означают, что они слишком легко гидролизуются в кишечнике, что означает, что только парентеральное введение является целесообразным. Соединения согласно настоящему изобретению со связями С-О-Р, связями С-О-S и их комбинациями представляют собой адекватную срединную точку из-за их эффективности и того факта, что у организма есть механизмы для устранения указанных соединений, тем самым снижая риск побочных эффектов (например, соединения со связями Р-С-Р могут иметь периоды полужизни в несколько месяцев in vivo, тем самым влияя, например, на ремоделирование костей).

[0093] Термин «алкил» или «алкильная группа» в контексте настоящего изобретения относится к насыщенному углеводородному фрагменту, который может быть неразветвленным, разветвленным, циклическим или циклическим с неразветвленными или разветвленными боковыми цепями. Термин «алкил» включает в себя частично ненасыщенные углеводороды, такие как пропенил. Примерами являются метил, этил, н- или изобутил, н- или циклогексил. Термин «алкил» может распространяться на алкильные группы, связанные или соединенные мостиком гетероатомами. Гетероатомы в контексте настоящего изобретения представляют собой азот (N), серу (S) и кислород (О).

[0094] «Аминная функциональная группа» или «аминогруппа» представляет собой функциональную группу NR'R'', где R' и R'' независимо выбраны из водорода и C₁-С₅ алкила. Согласно некоторым аспектам R' и R'' выбраны из водорода и C₁-С₃ алкила. «Гидрокси-функциональная группа» или «гидроксигруппа» представляет собой ОН.

[0095] «Тиольная функциональная группа» или «тиольная группа» представляет собой SH. «Функциональная группа карбоновой кислоты» или «группа карбоновой кислоты» представляет собой СООН или ее анион, СОО^-. «Амид карбоновой кислоты» представляет собой CONR'R'' причем R' и R'' независимо имеют значения, указанные выше. «Сульфоновая кислота» представляет собой SO₃H. «Амид сульфоновой кислоты» представляет собой SO₂NR'R'', причем R' и R'' независимо имеют значения, указанные выше.

[0096] «С₁-С₃ алкил» в контексте настоящего изобретения относится к насыщенному неразветвленному или разветвленному углеводороду, содержащему 1, 2 или 3 атома углерода, где одна углерод-углеродная связь может быть ненасыщенной, а один фрагмент СН₂ может быть заменен на кислород (эфирный мостик). Неограничивающими примерами C₁-С₃ алкила являются метил, этил, пропил, проп-2-енил и проп-2-инил.

[0097] «С₁-С₅ алкил» в контексте настоящего изобретения относится к насыщенному неразветвленному или разветвленному углеводороду, содержащему 1, 2, 3, 4 или 5 атомов углерода, где одна или две связи углерод-углерод могут быть ненасыщенными и один фрагмент CH₂ может быть заменен на кислород (эфирный мостик). Неограничивающие примеры для С₁-С₅ алкила включают в себя примеры, приведенные выше для С₁-С₃ алкила, и дополнительно н-бутил, 2-метилпропил, трет-бутил, 3-метилбут-2-енил, 2-метилбут-3-енил, 3-метилбут-3-енил, н-пентил, 2-метилбутил, 3-метилбутил, 1,1-диметилпропил, 1,2-диметилпропил, 1,2-диметилпропил, бут-3-енил, бут-3-инил и пент-4-инил. «С₃-С₁₀ алкил» в контексте настоящего изобретения относится к насыщенному неразветвленному или углеводороду, содержащему 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 атомов углерода, где 1, 2 или 3 связи углерод-углерод могут быть ненасыщенными, и один фрагмент CH₂ может быть заменен на кислород (эфирный мостик).

[0098] Термин «C_1-30 алкил» как группа или часть группы относится к алкильной группе с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащей от 1 до 30 атомов углерода, включая в себя, среди прочего, метальные, этильные, пропильные, изопропильные, бутильные, изобутильные, втор-бутильные, трет-бутильные, пентильные, гексильные, децильные и додецильные группы.

[0099] Термин «С_2-30 алкенил» относится к неразветвленной или разветвленной алкильной цепи, содержащей от 2 до 30 атомов углерода, а также содержит одну или несколько двойных связей. Примеры включают в себя, среди прочего, этенил, 1-пропенил, 2-пропенил, изопропенил, 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил и 1,3-бутадиенил.

[0100] Термин «С_2-30 алкинил» относится к неразветвленной или разветвленной алкильной цепи, содержащей от 2 до 30 атомов углерода, а также содержит одну или несколько тройных связей. Примеры включают в себя, среди прочего, этинил, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил, 3-бутинил и 1,3-бутадиинил.

[0101] «Группа Cy₁» относится к 3-10-членному карбоциклическому или гетероциклическому кольцу, которое может быть насыщенным, частично ненасыщенным или ароматическим и которое связано с остальной частью молекулы через любой доступный атом углерода. В гетероциклическом состоянии Cy₁ содержит от одного до четырех гетероатомов, выбранных из N, О и S. Более того, Cy₁ необязательно может быть конденсирован с максимум четырьмя пяти- или шестичленными карбоциклическими или гетероциклическими кольцами, которые могут быть насыщенными, частично ненасыщенными или ароматическими. Если конденсированное кольцо представляет собой гетероцикл, указанное кольцо содержит один или два гетероатома, выбранных из N, О и S. Примеры Cy₁ включают в себя, среди прочего, фенил, нафтил, тиенил, фурил, пирролил, тиазолил, изотиазолил, имидазолил, пиразолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, тетразолил, 1,3,4-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, бензимидазолил, бензофуранил, изобензофуранил, индолил, изоиндолил, бензотиофенил, бензотиазолил, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, азетидинил и азиридинил.

[0102] «C_1-30 алкоксигруппа» как группа или часть группы относится к -OC_1-30 алкильной группе, где C_1-30 алкильная часть имеет то же значение, что и выше. Примеры включают в себя метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, втор-бутокси и трет-бутокси.

[0103] «C_1-30 алкилтионильная группа» как группа или часть группы относится к -SOC_1-30 алкильной группе, где C_1-30 алкильная часть имеет то же значение, что и выше. Примеры включают в себя метилтионил, этилтионил, пропитионил, изопропилтионил, бутилтионил, изобутилтионил, втор-бутилтионил и трет-бутилтионил.

[0104] «C_1-30 ацилокси-группа» как группа или часть группы относится к -СОС_1-30 алкильной группе, где C_1-30 алкильная часть имеет то же значение, что и выше. Примеры включают в себя ацетил, этаноил, пропаноил и 2,2-диизопропилпентаноил.

[0105] «Галогеновый радикал» или его сокращение «галоген» относится к фтору, хлору, брому и йоду.

[0106] «Тригалоген -С_1-30 алкильная группа» относится к группе, полученной в результате замещения трех атомов водорода C_1-30 алкильной группы тремя радикалами галогена, как определено выше. Примеры включают в себя, среди прочего, трифторметил, трибромметил, трихлорметил, трийодметил, трифторэтил, трибромэтил, трихлорэтил, трийодэтил, трибромпропил, трихлорпропил и трийодпропил.

[0107] «-NHC_1-30 алкильная группа» относится к группе, полученной в результате замещения одного атома водорода группы -NH₂ на C_1-30 алкильную группу, как определено выше. Примеры включают в себя, среди прочего, метиламин, этиламин, пропил амин, бутиламин и пентиламин.

[0108] «Группа -N(C_1-30 алкил)₂» относится к группе, полученной в результате замещения двух атомов водорода группы -NH₂ на C_1-30 алкильную группу, как определено выше. Примеры включают в себя, среди прочего, диметиламин, диэтиламин, диизопропиламин, дибутиламин и диизобутиламин.

[0109] Выражение «необязательно замещенная одним или несколькими» означает возможность того, что группа может быть замещена одним или несколькими (например, 1, 2, 3 или 4) заместителями. Согласно некоторым аспектам группа может быть замещена 1, 2 или 3 заместителями и даже 1 или 2 заместителями при условии, что группа имеет достаточное количество положений, которые могут быть доступны для замещений. Если присутствуют заместители, они могут быть одинаковыми или разными и могут находиться в любом доступном положении.

[0110] Согласно некоторым аспектам инозитолфосфаты согласно настоящему изобретению включают в себя соединения, раскрытые в WO 2017098033 и WO 2017098047 и US 9358243. Согласно некоторым аспектам используемые инозитолфосфаты согласно настоящему изобретению включают в себя соединения, показанные на фиг. 1-6.

[0111] Согласно некоторым аспектам инозитолфосфаты, аналоги инозитолфосфата и их производные содержат соединения формулы (VIII), формулы (ГХ) или формулы (X):

[0112] где каждый X независимо выбран из ОРО₃^2-, OPSO₂^2- или OSO3^-; Z представляет собой алкильную цепь, содержащую 1-3 атома углерода и/или гетероатома, необязательно содержащую группу X, где X также выбран из ОРО₃^2-, OPSO₂^2- или OSO₃^-; и R₁ представляет собой необязательный гетерологичный фрагмент (см. раздел 2.2. ниже). Согласно некоторым аспектам молекула содержит более одного гетерологичного фрагмента, в этом случае гетерологичные фрагменты могут быть одинаковыми или разными.

[0113] Согласно некоторым аспектам Z, используемый в формуле (VIII), представляет собой СН₂, СНХ, CHR¹, CXR¹, СН₂-СН₂, СН₂-СНХ, СНХ-СНХ, CHR¹-СНХ, CXR¹-СНХ, CHR¹-СН₂, CXR¹-СН₂, CHR¹-СНОН, СН₂-СН₂-СН₂, СН₂-O-СН₂, СНОН-CH₂-CH₂, СНОН-СНОН-CHR¹, СНОН-CHR¹-Снон, СНХ-CH₂-СН₂, СН₂-СНХ-СН₂, СНХ-СНХ-СН₂, СНХ-СН₂-СНХ или СНХ-CHR¹-СНХ, где X независимо выбран из ОРО₃^2-, OPSO₂^2- и OSO₃^-.

[0114] Согласно некоторым аспектам Z, используемый в формуле (VIII), представляет собой (CHX)_pCHX(CHX)_q; где каждый р и q независимо друг от друга имеют значение от 0 до 2, при условии, что (p+q) имеет значение, составляющее 0, 1 или 2; один или два или три X могут представлять собой гетерологичный фрагмент (например, PEG) и остальные X независимо выбраны из ОРО₃^2-, OPSO₂^2- и OSO₃^-. Согласно некоторым аспектам не все X в Z представляют собой ОРО₃^2-. Согласно некоторым аспектам не все X в Z представляют собой OSO₃^-.

[0115] Согласно некоторым аспектам один, два или три из X в соединениях формулы (VIII), формулы (IX) или формулы (X) могут представлять собой гетерологичный фрагмент, и остальные X могут быть независимо выбраны из ОРО₃^2-, OPSO₂^2- или OSO₃^-.

[0116] Формула (VII) выше описывает пятичленное, шестичленное или семичленное алкильное кольцо, и необязательный гетерологичный фрагмент или фрагменты прикреплен(ы) к одному из атомов углерода, образующих кольцо.

[0117] Согласно некоторым аспектам инозитолфосфаты, аналоги инозитолфосфата и их производные, используемые, например, в способах и композициях, раскрытых в настоящем документе, включают в себя соединения формулы (XI) или формулы (XII):

[0118] где:

[0119] X² представляет собой OSO₃^-, и X¹, X³, X⁴, X⁵ и X⁶ независимо выбраны из ОРО₃^2-, OPSO₂^2- или OSO₃^-;

[0120] X¹, X³ и X⁵ представляют собой ОРО₃^2-, и X², X⁴ иХ⁶ представляют собой OSO₃^-;

[0121] X¹, X³ и X⁵ представляют собой OSO₃^-, и X², X⁴ и X⁶ представляют собой ОРО₃^2-;

[0122] X⁴, X⁵ и X⁶ представляют собой OSO₃^-, и X¹, X² и X³ представляют собой ОРО₃^2-;

[0123] X⁴, X⁵ и X⁶ представляют собой ОРО₃^2-, и X¹, X² и X³ представляют собой OSO₃^-;

[0124] X² иХ⁵ представляют собой ОРО₃^2- и X¹, X³, X⁴, и X⁶ представляют собой ОРО₃^2-;

[0125] X² иХ⁵ представляют собой OSO₃^-, и X¹, X³, X⁴, и X⁶ представляют собой ОРО₃^2-;

[0126] X² и X³ представляют собой ОРО₃^2-, и X¹, X⁴, X⁵, и X⁶ представляют собой OSO₃^-; или,

[0127] X² и X³ представляют собой OSO₃^-, и X¹, X⁴, X⁵, и X⁶ представляют собой ОРО₃^2-.

[0128] Согласно некоторым аспектам инозитолфосфаты согласно настоящему изобретению или их метаболиты могут быть обнаружены и/или количественно определены с использованием способов, раскрытых в US 9612250. См. также US 8377909, US 8778912 и US 20070066574.

[0129] Раскрытые в настоящем документе соединения могут присутствовать в любой форме, обычно используемой в фармацевтической технологии. Конкретные аспекты включают в себя без ограничения соль натрия, соль магния, соль калия, соль аммония, свободную кислоту или смесь предшествующих форм. Другие фармацевтически приемлемые соли известны специалисту в настоящей области техники и могут быть легко получены Согласно конкретному аспекту соединение для применения, как определено в первом аспекте настоящего изобретения, представляет собой натриевую соль, например инозитолгексафосфатгексанатрий.

[0130] Согласно настоящему изобретению также предусмотрены натриевые соли инозитолмонофосфата, инозитолдифосфата, инозитолтрифосфата, инозитолтетрафосфата и инозитолпентафосфата в любой изомерной форме инозитола, в частности мио-инозитола Конкретным примером соединений для применения в настоящем изобретении является гексанатриевая соль мио-инозитолгексафосфата. Натриевые соли обеспечивают несколько преимуществ с точки зрения производства и уровня примесей в полученных составах IP6.

2.2. Гетерологичный фрагмент

[0131] Согласно некоторым аспектам настоящее изобретение относится к соединению общей формулы I, как определено выше, где гетерологичный фрагмент выбран из радикала формулы V, радикала формулы VI и радикала формулы VH

[0132] и где n представляет собой целое число в диапазоне от 2 до 200, и R₁₃ выбран из Н, метила или этила.

[0133] Согласно некоторым аспектам соединения для применения в настоящем изобретении, например, производные инозитолфосфата согласно настоящему изобретению, могут содержать один или два радикала, выбранных из радикалов формул V, VI и VII. Эти радикалы представляют собой гетерологичные фрагменты, придающие благоприятное свойство по отношению к соответствующей молекуле, лишенной такого гетерологичного фрагмента или фрагментов. Примеры указанных благоприятных свойств, которые могут быть приданы гетерологичный фрагментом или их комбинацией инозитолфосфату или аналогам инозитолфосфата, включают в себя без ограничения (а) повышение растворимости, (b) уменьшение скорости разложения или метаболизма, (с) увеличение периода полувыведения из плазмы, (d) уменьшение скорости метаболизма в печени, (е) уменьшение скорости клиренса, (f) уменьшение токсичности, (g) уменьшение раздражимости и (h) снижение побочных эффектов среди прочего. Эти благоприятные свойства могут быть оценены или количественно определены с использованием способов, известных в настоящей области техники, без проведения излишних экспериментов.

[0134] Согласно некоторым аспектам гетерологичный фрагмент представляет собой, например, полиэтиленгликоль (PEG) или полиглицерин (PG). Таким образом, согласно определенным аспектам соединение для применения в настоящем изобретении представляет собой любое из соединений, как определено в аспектах, раскрытых выше, содержащих гетерологичный фрагмент, то есть один из радикалов формулы I выбран из радикалов формул V, VI и VII. Согласно некоторым аспектам гетерологичный фрагмент включает полиэтиленгликоль (PEG). Согласно определенным аспектам гетерологичный фрагмент состоит из полиэтиленгликоля, то есть по меньшей мере один из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ соединения формулы I согласно первому аспекту настоящего изобретения представляет собой радикал формулы V. Альтернативно, гетерологичный фрагмент включает в себя полиглицерин. Согласно определенным аспектам гетерологичный фрагмент состоит из полиглицерина, то есть по меньшей мере один из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ соединения формулы I согласно первому аспекту настоящего изобретения выбран из радикала формула VI или VII. Согласно другим аспектам соединение формулы I согласно первому аспекту настоящего изобретения содержит один, два или три радикала, выбранных из радикала формулы VI или VII, например два PEG (радикал формулы V), три PEG, два полиглицерина (радикал формулы VI), три PG или любые их комбинации, например, один PEG и один PG, или два PEG и один полиглицерин. Согласно определенным аспектам все оставшиеся радикалы формулы I (т.е. те, которые не являются радикалами, выбранными из V, VI и VII) представляют собой радикалы, выбранные из II, III и IV. Согласно некоторым аспектам соединение формулы I согласно первому аспекту настоящего изобретения содержит два радикала, выбранных из радикала формулы VI или VII, например два PEG (радикал формулы V) или два полиглицерина (радикал формулы VI) или один PEG, один полиглицерин и все оставшиеся радикалы являются радикалами формулы II. Согласно некоторым аспектам R₃ и R₇ соединения формулы I выбраны из радикала формулы V, VI и VII. Согласно некоторым аспектам R₃ и R₇ соединения формулы I представляют собой радикалы формулы V, a R₁, R₅, R₉ и R₁₁ соединения формулы I представляют собой радикалы формулы II.

[0135] Радикалы формул V, VI и VII содержат R₁₃=Н, метил или этил, и n представляет собой целое число от 2 до 200. Согласно некоторым аспектам R₁₃=Н. Согласно конкретным аспектам n представляет собой 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17,18,19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 189, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199 или 200.

[0136] Согласно некоторым аспектам п составляет 2-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100, 100-110, 110-120, 120-130, 130-140, 140-150, 150-160, 160-170, 170-180, 180-190 или 190-200.

[0137] Согласно некоторым конкретным аспектам п характеризуется значением от 2 до 200, от 2 до 20, от 10 до 30 или от 9 до 45.

[0138] Согласно некоторым аспектам PEG представляет собой разветвленный PEG. Разветвленные PEG содержат от трех до десяти цепей PEG, исходящих из центральной основной группы.

[0139] Согласно определенным аспектам фрагмент PEG представляет собой монодисперсный полиэтиленгликоль. В контексте настоящего изобретения монодисперсный полиэтиленгликоль (mdPEG) представляет собой PEG, который имеет одну заданную длину цепи и молекулярную массу. mdPEG, как правило, получают путем выделения из смеси для полимеризации хроматографией. В некоторых формулах фрагмент монодисперсного PEG обозначается аббревиатурой mdPEG. Согласно некоторым аспектам PEG представляет собой звездообразный PEG. Звездообразные PEG содержат от 10 до 100 цепей PEG, исходящих из центральной основной группы.

[0140] Согласно некоторым аспектам PEG представляет собой гребнеобразные PEG. Гребнеобразные PEG содержат несколько цепей PEG, как правило, привитых к основной цепи полимера.

[0141] Согласно определенным аспектам PEG характеризуется молярной массой от 100 г/моль до 3000 г/моль, в частности от 100 г/моль до 2500 г/моль, более конкретно приблизительно 100 г/моль-2000 г/моль. Согласно определенным аспектам PEG характеризуется молярной массой, составляющей от 200 г/моль до 3000 г/моль, в частности от 300 г/моль до 2500 г/моль, более конкретно приблизительно 400 г/моль-2000 г/моль.

[0142] Согласно некоторым аспектам PEG представляет собой PEG₁₀₀, PEG₂₀₀, PEG₃₀₀, PEG₄₀₀, PEG₅₀₀, PEG₆₀₀, PEG₇₀₀, PEG₈₀₀, PEG₉₀₀, PEG₁₀₀₀, PEG₁₁₀₀, PEG₁₂₀₀, PEG₁₃₀₀, PEG₁₄₀₀, PEG₁₅₀₀, PEG₁₆₀₀, PEG₁₇₀₀, PEG₁₈₀₀, PEG₁₉₀₀, PEG₂₀₀₀, PEG₂₁₀₀, PEG₂₂₀₀, PEG₂₃₀₀, PEG₂₄₀₀, PEG₂₅₀₀, PEG1600, PEG₁₇₀₀, PEG₁₈₀₀, PEG₁₉₀₀, PEG₂₀₀₀, PEG₂₁₀₀, PEG₂₂₀₀, PEG₂₃₀₀, PEG₂₄₀₀, PEG₂₅₀₀, PEG₂₆₀₀, PEG₂₇₀₀, PEG₂₈₀₀, PEG₂₉₀₀ или PEG₃₀₀₀. Согласно одному конкретному аспекту PEG представляет собой PEG₄₀₀. Согласно другому конкретному аспекту PEG представляет собой PEG₂₀₀₀.

[0143] Согласно другим конкретным аспектам R₃ и/или R₇ соединения формулы I представляет собой радикал формулы V, где R₁₃ представляет собой Н, и n представляет собой целое число от 9 до 45. Согласно другим конкретным аспектам R₃ и R₇ соединения формулы I представляет собой радикал формулы V, где R₁₃ представляет собой Н, и n представляет собой целое число от 9 до 45, и все R₁, R₅, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II. Согласно другим конкретным аспектам соединение формулы I представляет собой натриевую соль, причем R₃ и R₇ = радикал формулы V, где R₁₃ представляет собой Н, и n представляет собой целое число от 9 до 45, и все R₁, R₅, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II.

[0144] Согласно некоторым другим аспектам гетерологичный фрагмент представляет собой полиглицерин (PG), описываемый формулой ((R₃-О-(СН₂-СНОН-СН₂О)_n-), причем R₃ представляет собой водород, метил или этил, и п характеризуется значением от 3 до 200. Согласно некоторым аспектам п характеризуется значением от 3 до 20. Согласно некоторым аспектам п характеризуется значением от 10 до 30. Согласно некоторым альтернативам этих аспектов п характеризуется значением от 9 до 45. Согласно некоторым аспектам гетерологичный фрагмент представляет собой разветвленный полиглицерин, описываемый формулой (R³-О-(СН₂-CHOR⁵-CH₂-O)_n-), причем R⁵ представляет собой водород, или линейную глицериновую цепь, описываемую формулой (R³-О-(CH₂-СНОН-CH₂-O)_n-), и R³ представляет собой водород, метил или этил. Согласно некоторым аспектам гетерологичный фрагмент представляет собой гиперразветвленный полиглицерин, описываемый формулой (R³-О-(CH₂-CHOR⁵-СН₂-O)_n-), причем R⁵ представляет собой водород, или глицериновую цепь, описываемую формулой (R³-О-(СН₂-CHOR⁶-CH₂-O)_n-), причем R⁶ представляет собой водород, или глицериновую цепь, описываемую формулой (R³-О-(CH₂-CHOR⁷-CH₂-O)_n-), причем R⁷ представляет собой водород, или линейную глицериновую цепь, описываемую формулой (R³-О-(CH₂-СНОН-CH₂-O)_n-), и R³ представляет собой водород, метил или этил. Гиперразветвленный глицерин и способы его синтеза известны в настоящей области техники. См. Oudshorn М, et at, Biomaterials 2006; 27:5471-5479, Wilms D, etal, Acc Chem Res 2010; 43:129-141 и цитируемые там ссылки.

[0145] Согласно определенным аспектам PG характеризуется молярной массой от 100 г/моль до 3000 г/моль, в частности от 100 г/моль до 2500 г/моль, более конкретно приблизительно 100 г/моль-2000 г/моль. Согласно определенным аспектам PG характеризуется молярной массой от 200 г/моль до 3000 г/моль, в частности от 300 г/моль до 2500 г/моль, более конкретно приблизительно 400 г/моль-2000 г/моль.

[0146] Согласно некоторым аспектам PG представляет собой PG₁₀₀, PG₂₀₀, PG₃₀₀, PG₄₀₀, PG₅₀₀, PG₆₀₀, PG₇₀₀, PG₈₀₀, PG₉₀₀, PG₁₀₀₀, PG₁₁₀₀, PG₁₂₀₀, PG₁₃₀₀, PG₁₄₀₀, PG₁₅₀₀, PG₁₆₀₀, PG₁₇₀₀, PG₁₈₀₀, PG₁₉₀₀, PG₂₀₀₀, PG₂₁₀₀, PG₂₂₀₀, PG₂₃₀₀, PG₂₄₀₀, PG₂₅₀₀, PG₁₆₀₀, PG₁₇₀₀, PG₁₈₀₀, PG₁₉₀₀, PG₂₀₀₀, PG₂₁₀₀, PG₂₂₀₀, PG₂₃₀₀, PG₂₄₀₀, PG₂₅₀₀, PG₂₆₀₀, PG₂₇₀₀, PG₂₈₀₀, PG₂₉₀₀ или PG₃₀₀₀. Согласно одному конкретному аспекту PG представляет собой PG₄₀₀. Согласно другому конкретному аспекту PG представляет собой PG₂₀₀₀.

[0147] Согласно другим конкретным аспектам R₃ и/или R₇ соединения формулы I представляет собой радикал формулы VI, где R₁₃ представляет собой Н, и n представляет собой целое число от 9 до 45. Согласно другим конкретным аспектам R₃ и R₇ соединения формулы I представляет собой радикал формулы VI, где R₁₃ представляет собой Н, и n представляет собой целое число от 9 до 45 и все R₁, R₅, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II. Согласно другим конкретным аспектам соединение формулы I представляет собой натриевую соль, причем R₃ и R₇ = радикал формулы VI, где R₁₃ представляет собой Н, и n представляет собой целое число от 9 до 45, и все R₁, R₅, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II.

3. Фармацевтические композиции

[0148] Согласно другому аспекту настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше. Согласно некоторым аспектам фармацевтическая композиция содержит соединение, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше, вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами или носителями. Эти фармацевтические композиции предназначены для применения для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации у нуждающегося в этом субъекта. Согласно некоторым аспектам эти фармацевтические композиции предназначены для применения при лечении или профилактике ишемии и/или связанного с ишемией заболевания или состояния. Согласно некоторым аспектам фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению применяют для лечения или профилактики PAD или CLI.

[0149] Используемый в настоящем документе термин «вспомогательное вещество» относится к веществу, которое способствует абсорбции элементов фармацевтической композиции, стабилизирует указанные элементы, активирует или содействует приготовлению композиции. Таким образом, примеры вспомогательных веществ, используемых в парентеральных составах, включают в себя без ограничения противомикробные агенты (например, хлорид бензалкония, метакрезол, тиомерсал), сорастворители (например, этанол), буферы и факторы, регулирующие рН (например, растворы карбоната, цитрата, фосфата).

[0150] Как и в случае вспомогательного вещества, «фармацевтически приемлемый носитель» представляет собой вещество, используемое в композиции для разбавления любого из компонентов, содержащихся в ней, до определенного объема или массы. Фармацевтически приемлемый носитель представляет собой инертное вещество или вещество с действием, аналогичным любому из элементов, составляющих фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению. Роль указанного носителя состоит в том, чтобы обеспечить включение других элементов, улучшить дозирование и введение или придать композиции консистенцию и форму.

[0151] Фармацевтические композиции могут содержать от приблизительно 1% до приблизительно 95% соединения, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше. Согласно некоторым аспектам фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут содержать, например, от приблизительно 20% до приблизительно 90%, или от 20% до 80%, или от 20% до 70%, или от 20% до 60%, или от 20% до 50%, или от 30% до 90%, или от 40% до 90%, или от 50% до 90%, или от 60% до 90%, или от 30% до 70% соединения, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше.

[0152] Согласно некоторым аспектам концентрация инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата или его аналога или производного или их комбинации) в каждой дозе фармацевтической композиции составляет от приблизительно 12,5 мМ до приблизительно 135 мМ. Согласно некоторым версиям этого аспекта концентрация инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата или его аналога или производного или их комбинации) в каждой дозе фармацевтической композиции составляет приблизительно 25 мМ, приблизительно 39 мМ или приблизительно 114 мМ.

[0153] Составы фармацевтической композиции, подходящие для парентерального введения, содержат соединение, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше, смешанное с фармацевтически приемлемым носителем (например, в виде стерильной воды или стерильного изотонического физиологического раствора). Такие составы могут быть получены, упакованы или проданы в форме, подходящей для болюсного введения или для непрерывного введения. Составы для инъекций могут быть получены, упакованы или проданы в виде стандартной лекарственной формы, такой как ампулы или многодозовые контейнеры, содержащие консервант. Составы для парентерального введения включают в себя без ограничения суспензии, растворы, эмульсии в масляных или водных носителях, пасты и имплантируемые составы с замедленным высвобождением или биоразлагаемые составы. Такие составы могут дополнительно включать в себя один или несколько дополнительных ингредиентов, включая в себя без ограничения суспендирующие, стабилизирующие или диспергирующие агенты.

[0154] Согласно некоторым аспектам в составе для парентерального введения активный агент (например, соединение, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше) предоставляется в сухой (т.е. порошковой или гранулированной) форме для восстановления подходящим носителем (например, стерильной апирогенной водой) перед парентеральным введением восстановленной композиции.

[0155] Фармацевтические композиции могут быть получены, упакованы или проданы в форме стерильной водной или масляной суспензии или раствора для инъекций. Эта суспензия или раствор могут быть составлены в соответствии с известным уровнем техники и могут содержать, в дополнение к активному агенту (например, соединению, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше), дополнительные ингредиенты, такие как диспергирующие агенты, смачивающие агенты или суспендирующие агенты, описанные в настоящем документе. Такие стерильные составы для инъекций можно получить с использованием нетоксичного парентерально приемлемого разбавителя или растворителя, такого как, например, вода или 1,3-бутандиол. Другие приемлемые разбавители и растворители включают в себя без ограничения раствор Рингера, изотонический раствор хлорида натрия и жирные масла, такие как синтетические моно- или диглицериды.

[0156] Другие применимые для парентерального введения составы включают в себя те, которые содержат активный агент (например, соединение, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше) в микрокристаллической форме, в липосомальном препарате или в качестве компонента биоразлагаемой полимерной системы.

[0157] Композиции для замедленного высвобождения или имплантации могут содержать фармацевтически приемлемые полимерные или гидрофобные материалы, такие как эмульсия, ионообменная смола, умеренно растворимый полимер или умеренно растворимая соль.

[0158] Составы фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению с контролируемым или замедленным высвобождением можно получить с использованием общепринятой технологии. В некоторых случаях используемые лекарственные формы могут быть представлены в виде медленного или контролируемого высвобождения одного или нескольких активных агентов в них с использованием, например, гидропропилметилцеллюлозы, других полимерных матриц, гелей, проницаемых мембран, осмотических систем, многослойных покрытий, микрочастиц, липосом или микросфер или их комбинации для обеспечения требуемого профиля высвобождения в различных пропорциях. Подходящие составы с контролируемым высвобождением, известные в настоящей области техники, включая в себя описанные в настоящем документе, могут быть легко выбраны для применения с фармацевтическими композициями согласно настоящему изобретению. Таким образом, единичные стандартные лекарственные формы, подходящие для парентерального или местного введения, такие как растворы для инъекций, гели, кремы и мази, которые адаптированы для контролируемого высвобождения, охватываются настоящим изобретением.

[0159] Большинство фармацевтических продуктов с контролируемым высвобождением имеют общую цель улучшения терапии по сравнению с теми, которые достигаются их неконтролируемыми аналогами. В идеале применение оптимально разработанного препарата с контролируемым высвобождением в медицинском лечении характеризуется использованием минимального количества терапевтического агента для излечения или контроля состояния за минимальное время. Преимущества составов с контролируемым высвобождением включают в себя увеличенную по времени активность терапевтического агента, уменьшенную частоту введения доз и повышенное соблюдение пациентом режима лечения. Кроме того, составы с контролируемым высвобождением можно использовать для воздействия на время начала действия или другие характеристики, такие как уровень терапевтического агента в крови, и, таким образом, можно влиять на возникновение побочных эффектов.

[0160] Большинство составов с контролируемым высвобождением разработаны для первоначального высвобождения количества терапевтического агента, которое быстро дает требуемый терапевтический эффект, и постепенного и непрерывного высвобождения других количеств терапевтического агента для поддержания этого уровня терапевтического эффекта в течение продолжительного периода времени. Чтобы поддерживать этот постоянный уровень терапевтического агента в организме, терапевтический агент должен высвобождаться из лекарственной формы со скоростью, которая заменит количество терапевтического агента, которое метаболизируется и выводится из организма.

[0161] Контролируемое высвобождение активного агента можно стимулировать различными индукторами, например рН, температурой, ферментами, водой или другими физиологическими условиями или соединениями. Термин «компонент с контролируемым высвобождением» в контексте настоящего изобретения определяется в настоящем документе как соединение или соединения, включая в себя без ограничения полимеры, полимерные матрицы, гели, проницаемые мембраны, липосомы или микросферы или их комбинацию, что способствует контролируемому высвобождению активного агента.

[0162] Согласно определенным аспектам составы согласно настоящему изобретению могут являться без ограничения составами краткосрочного действия, быстрого возмещения, а также составами с контролируемым, например, с замедленным высвобождением, отсроченным высвобождением и пульсирующим высвобождением.

[0163] Термин замедленное высвобождение используется в его общепринятом смысле для обозначения состава терапевтического агента (например, соединения, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше)), который обеспечивает постепенное высвобождение терапевтически активного агента в течение продолжительного периода времени, и это может, хотя и не обязательно, приводить к по существу постоянным уровням терапевтического агента в крови в течение длительного периода времени. Период времени может составлять не менее месяца или более и должен представлять собой высвобождение, более длительное, чем такое же количество агента, вводимого в форме болюса.

[0164] Для замедленного высвобождения соединения могут быть составлены с подходящим полимером или гидрофобным материалом, который придает соединениям свойства замедленного высвобождения. По существу, соединения для применения в способе согласно настоящему изобретению можно вводить в форме микрочастиц, например, путем инъекции или в форме пластин или дисков путем имплантации. Согласно определенным аспектам соединения согласно настоящему изобретению вводят пациенту, отдельно или в комбинации с другим фармацевтическим агентом, с использованием состава с замедленным высвобождением.

[0165] Термин «замедленное высвобождение» используется в настоящем документе в его общепринятом смысле для обозначения состава терапевтического агента, который обеспечивает начальное высвобождение терапевтического агента после некоторой задержки после введения терапевтического агента. Задержка может составлять от приблизительно 10 минут вплоть до 12 часов. Термин «пульсирующее высвобождение» используется в настоящем документе в его общепринятом смысле для обозначения состава терапевтического агента, который обеспечивает высвобождение терапевтического агента таким образом, чтобы получить импульсные профили терапевтического агента в плазме после введения. Термин немедленное высвобождение используется в его общепринятом смысле для обозначения состава терапевтического агента, который обеспечивает высвобождение терапевтического агента сразу после введения.

[0166] Дополнительные составы и лекарственные формы композиций согласно настоящему изобретению включают в себя лекарственные формы, как описано в US 6340475, US 6488962, US 6451808, US 5972389, US 5582837, и US 5007790; US 20030147952, 20030104062, 20030104053, 20030044466, 20030039688, и 20020051820; WO 2003035041, WO 2003035040, WO 2003035029, WO 200335177, WO 2003035039, WO 2002096404, WO 2002032416, WO 2001097783, WO 2001056544, WO 2001032217, WO 1998055107, WO 1998011879, WO 1997047285, WO 1993018755 и WO 1990011757.

[0167] Лекарственные средства согласно настоящему изобретению производятся способами, известными в настоящей области техники, в частности, обычным смешиванием, нанесением покрытия, гранулированием, растворением или лиофилизацией.

[0168] Настоящее изобретение также относится к соединению, комбинации соединений или фармацевтическому составу, как определено в любом из вышеупомянутых аспектов настоящего изобретения, в самом широком данном определении или как указано в любом из аспектов, представленных выше, для применения в качестве лекарственного средства.

4. Способы и пути введения

[0169] Согласно некоторым аспектам соединение, фармацевтическую композицию или комбинированный препарат, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше, вводят совместно, одновременно или последовательно с другим терапевтическим агентом. Согласно некоторым версиям этого аспекта дополнительный терапевтический агент включает в себя цилостазол, пентоксифиллин или их комбинацию.

[0170] Согласно некоторым аспектам предусмотрено введение эффективного количества соединения, фармацевтической композиции или комбинированного препарата, как определено в любом из аспектов, приведенных выше. Указанное соединение, фармацевтическую композицию или комбинированный препарат можно вводить парентерально, например, внутривенно, внутрибрюшинно, внутримышечно, внутриартериально, внутрикожно, интратекально, эпидурально или спинально или подкожно. Парентеральное введение можно осуществлять путем болюсной инъекции или внутривенной инфузии.

[0171] Согласно конкретному аспекту настоящего изобретения мио-инозитолгексафосфат (или состав, содержащий мио-инозитолгексафосфат, такой как SNF472) вводят путем внутривенной инфузии. Согласно другому конкретному аспекту настоящего изобретения мио-инозитолгексафосфат вводят подкожно. Согласно другому аспекту производное инозитола или производное мио-инозитолгексафосфата, например, соединение формулы I, где R₃ и R₇ = радикал формулы V, где R₁₃ представляет собой Н, и n представляет собой целое число от 2 до 200, и все R₁, R₅, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II (или его натриевую соль), вводят посредством внутривенной инфузии. Согласно другому аспекту производное инозитола или производное мио-инозитолгексафосфата, например, соединение формулы I, где R₃ и R₇ = радикал формулы V, где R₁₃ представляет собой Н, и n представляет собой целое число от 2 до 200, и все R₁, R₅, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II (или его натриевую соль), вводят подкожно.

[0172] Альтернативно, соединение, фармацевтическую композицию или комбинированный препарат можно вводить как компонент раствора или системы для гемодиализа, гемофильтрации или перитонеального диализа.

[0173] В конкретном случае пациентов, получающих диализ, очень подходящий способ введения состоит из введения (например, введения неболюсного типа) инозитолфосфата согласно настоящему изобретению через диализный аппарат (до или после фильтра) вместо прямой инъекции инозитолфосфата согласно настоящему изобретению пациенту внутривенно. Таким образом, кровь можно обрабатывать инозитолфосфатом согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфатом), когда она покидает организм пациента и циркулирует по диализному контуру, и когда кровь, содержащая инозитолфосфат согласно настоящему изобретению, возвращается в организм.

[0174] Таким образом, согласно некоторым аспектам соединение, фармацевтическую композицию или комбинированный препарат, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше, вводят пациенту во время гемодиализа. Согласно некоторым аспектам соединение, фармацевтическую композицию или комбинированный препарат, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше, вводят в кровь, взятую у пациента во время гемодиализа, предпочтительно до ее фильтрации (т.е. терапевтический агент вводят в нефильтрованную кровь пациента в диализном контуре). Согласно некоторым аспектам соединение представляет собой инозитолгексафосфат, в частности натриевую соль мио-инозитолгексафосфата или его производное, а именно соединение формулы I, где R₃ и R₇ = радикал формулы V, где R₁₃ представляет собой Н, и n представляет собой целое число от 2 до 200, и все R₁, R₅, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II (или его натриевую соль).

[0175] В случае диализных пациентов введение инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) через диализный аппарат позволяет крови уравновеситься с жидкостью для диализа перед возвращением в организм; таким образом, хотя инозитолфосфат согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфат) может связывать ионный кальций, этот факт компенсируется, когда кровь проходит через диализный фильтр, тем самым устраняя указанный побочный эффект и значительно улучшая профиль безопасности. Кроме того, введение инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) одновременно с гемодиализом, в частности, при введении в нефильтрованную кровь, взятую у пациента во время гемодиализа, позволяет снизить дозу соединения с последующими преимуществами с точки зрения снижения токсичности и минимизации нежелательных побочных эффектов.

[0176] Согласно некоторым аспектам соединение, фармацевтическую композицию или комбинированный препарат, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше, вводят пациенту, которого лечат гемодиализом, до лечения диализом или после лечения диализом.

[0177] Как правило, эффективная доза инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата), вводимая способами, раскрытыми в настоящем документе, будет зависеть, например, от относительной эффективности рассматриваемого соединения, степени тяжести заболевания, подлежащего лечению, а также вида и массы тела субъекта. Согласно некоторым аспектам эффективная доза инозитолфосфата согласно настоящему изобретению для субъекта определенного вида (например, человека) может быть рассчитана на основе экспериментальных данных, доступных для другого или контрольного вида (например, крысы).

[0178] Таким образом, например, доза мио-инозитолгексафосфата, вводимая как часть схемы, содержащей введение дозировки 20 мг/кг субъекту-крысе, будет эквивалентна введению того же активного агента в дозировке 4,2 мг/кг субъекту-человеку (т.е. общая доза 300 мг мио-инозитолгексафосфата субъекту-человеку с массой приблизительно 70 кг). Аналогичным образом, дозировка 40 мг/кг субъекту-крысе будет эквивалентна введению мио-инозитолгексафосфата в дозировке 8,4 мг/кг субъекту-человеку, как определено ранее. Дозировки могут быть скорректированы в зависимости от возраста субъектов, вида, массы тела, поверхности тела, почечного клиренса, пола, патологического состояния, пути введения, одновременного введения одного или нескольких других лекарственных средств, а также широкого спектра физиологических и психологических факторов с использованием способов, известных в настоящей области техники (Pan S., et al., Patient Prefer Adherence 2016; 10:549-560; Pai M, Pharmacotherapy 2012; 32:856-868; Hacker M., et al, Eds, "Pharmacology: Principles and Practice" (Academic Press; Burlington, MA, USA, 2009). Используемый в настоящем документе термин« мг/кг» относится к мг инозитолфосфата согласно настоящему изобретению на килограмм массы тела (веса тела) субъекта.

[0179] Согласно некоторым аспектам доза инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) содержит от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 60 мг/кг инозитолфосфата, аналога инозитолфосфата, производного инозитолфосфата или их комбинации согласно настоящему изобретению. Согласно некоторым дополнительным аспектам доза инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) составляет от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 20,0 мг/кг, от приблизительно 20,0 мг/кг до приблизительно 40,0 мг/кг или от приблизительно 40,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг.

[0180] Согласно некоторым аспектам доза инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) составляет от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 1,0 мг/кг, от приблизительно 1,0 мг/кг до приблизительно 10,0 мг/кг, от приблизительно 10,0 мг/кг до приблизительно 20,0 мг/кг, от приблизительно 20,0 мг/кг до приблизительно 30,0 мг/кг, от приблизительно 30,0 мг/кг до приблизительно 40,0 мг/кг, от приблизительно 40,0 мг/кг до приблизительно 50,0 мг/кг или от приблизительно 50,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг.

[0181] Согласно некоторым аспектам доза инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) составляет от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 0,5 мг/кг, от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 1,0 мг/кг, от приблизительно 1,0 мг/кг до приблизительно 5,0 мг/кг, от приблизительно 5,0 мг/кг до приблизительно 10,0 мг/кг, от приблизительно 10,0 мг/кг до приблизительно 15,0 мг/кг, от приблизительно 15,0 мг/кг до приблизительно 20,0 мг/кг, от приблизительно 20,0 мг/кг до приблизительно 25,0 мг/кг, от приблизительно 25,0 мг/кг до приблизительно 30,0 мг/кг, от приблизительно 30,0 мг/кг до приблизительно 35,0 мг/кг, от приблизительно 35,0 мг/кг до приблизительно 40,0 мг/кг, от приблизительно 40,0 мг/кг до приблизительно 45,0 мг/кг или от приблизительно 45,0 мг/кг до приблизительно 50,0 мг/кг.

[0182] Согласно некоторым аспектам доза инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) составляет от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 0,25 мг/кг, от приблизительно 0,25 мг/кг до приблизительно 0,5 мг/кг, от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 0,75 мг/кг, от приблизительно 0,75 мг/кг до приблизительно 1,0 мг/кг, от приблизительно 1,0 мг/кг до приблизительно 2,50 мг/кг, от приблизительно 2,50 мг/кг до приблизительно 5,0 мг/кг, от приблизительно 5,0 мг/кг до приблизительно 7,5 мг/кг, от приблизительно 7,5 мг/кг до приблизительно 10,0 мг/кг, от приблизительно 10,0 мг/кг до приблизительно 12,5 мг/кг, от приблизительно 12,5 мг/кг до приблизительно 15,0 мг/кг, от приблизительно 15,0 мг/кг до приблизительно 17,5 мг/кг, от приблизительно 17,5 мг/кг до приблизительно 20,0 мг/кг, от приблизительно 20,0 мг/кг до приблизительно 22,5 мг/кг, от приблизительно 22,5 мг/кг до приблизительно 25,0 мг/кг, от приблизительно 25,0 мг/кг до приблизительно 27,5 мг/кг, от приблизительно 27,5 мг/кг до приблизительно 30,0 мг/кг, от приблизительно 30,0 мг/кг до приблизительно 32,5 мг/кг, от приблизительно 32,5 мг/кг до приблизительно 35,0 мг/кг, от приблизительно 35,0 мг/кг до приблизительно 37,5 мг/кг, от приблизительно 37,5 мг/кг до приблизительно 40,0 мг/кг, от приблизительно 40,0 мг/кг до приблизительно 42,5 мг/кг, от приблизительно 42,5 мг/кг до приблизительно 45,0 мг/кг, от приблизительно 45,0 мг/кг до приблизительно 47,5 мг/кг, от приблизительно 47,5 мг/кг до приблизительно 50,0 мг/кг, от приблизительно 50,0 мг/кг до приблизительно 52,5 мг/кг, от приблизительно 52,5 мг/кг до приблизительно 55,0 мг/кг, от приблизительно 55,0 мг/кг до приблизительно 57,5 мг/кг или от приблизительно 57,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг.

[0183] Согласно некоторым аспектам доза инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) составляет от приблизительно 0,25 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 0,75 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 1,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 2,50 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 5,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 7,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 10,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 12,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 15,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 17,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 20,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 22,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 25,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 27,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 30,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 32,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 35,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 37,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 40,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 42,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 45,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 47,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 50,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 52,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг, от приблизительно 55,0 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг или от приблизительно 57,5 мг/кг до приблизительно 60,0 мг/кг.

[0184] Согласно некоторым аспектам доза инозитолфосфата согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфата) составляет от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 57,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 55,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 52,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 50,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 47,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 45,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 42,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 40,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 37,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 35,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 32,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 30,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 27,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 25,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 22,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 20,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 27,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 25,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 22,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 20,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 17,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 15,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 12,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 10,0 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 7,5 мг/кг, от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 5,0 мг/кг или от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 2,5 мг/кг.

5. Показания

[0185] Соединения, фармацевтические композиции, комбинированные препараты, способы и пути введения, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше, можно использовать для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации у нуждающегося в этом субъекта.

[0186] Используемые в настоящем документе термины «связанное с ишемией заболевание или состояние» относятся к любым заболеваниям или состоянию, связанным или возникающим в результате ишемического события или повреждения. Примеры связанных с ишемией заболеваний или состояний включают в себя без ограничения цереброваскулярные (например, инсульт, транзиторная ишемическая атака (TIA), субарахноидальное кровоизлияние, сосудистая деменция), сердечно-сосудистые (например, инфаркт миокарда, стенокардия), желудочно-кишечные (например, колит), периферические (например, острая ишемия конечностей) и кожные (например, цианоз, гангрена) заболевания или состояния.

[0187] Согласно некоторым аспектам соединения, фармацевтические композиции, комбинированные препараты, способы и пути введения согласно настоящему изобретению можно применять для лечения или профилактики ишемии и/или связанного с ишемией заболевания или состояния у нуждающегося в этом субъекта.

[0188] Используемый в настоящем документе термин «почечная недостаточность» относится к заболеванию, которое вызывает прогрессирующую потерю функции почек с сопутствующим снижением скорости или индекса клубочковой фильтрации (GFR). Почечная недостаточность также известна как нарушение функции почек или заболевание почек. Заболевание почек можно классифицировать как (i) острое повреждение почек (AKI), прогрессирующую потерю функции почек, которая, как правило, вызывает олигурию и дисбаланс жидкости и электролитов, и (ii) хроническое заболевание почек (CKD), гораздо более медленную потерю функцию почек течение месяцев или лет. В зависимости от степени функционирования почек на основе GFR выделяют пять стадий CKD: (а) стадия 1, нормальная или высокая GFR (>90 мл/мин), (b) стадия 2: легкая форма CKD, GFR=60-89 миль/мин, (с) стадия 3, умеренная форма CKD, GFR=30-59 м/мин, (d) стадия 4, тяжелая форма CKD, GFR=15-29 мл/мин и (е) стадия 5, терминальная форма CKD, GFR<15 мл/мин. На стадии 5 для поддержания здоровья требуется диализ или пересадка почки. AKI и CKD могут возникать одновременно, что известно как обострение хронической почечной недостаточности.

[0189] Согласно некоторым аспектам соединения, фармацевтические композиции, комбинированные препараты, способы и пути введения согласно настоящему изобретению можно использовать для увеличения тканевой перфузии у субъекта с заболеванием почек. Заболевание почек у субъекта может быть острым, хроническим или и тем, и другим. Согласно некоторым аспектам субъект проходит диализ (например, перитонеальный диализ, гемодиализ). Согласно еще одной форме этого аспекта субъект проходит гемодиализ. Согласно некоторым другим аспектам субъект не подвергается диализу (например, субъект с CKD на стадиях с 1 по 4). Согласно одной версии этого аспекта субъекту вводят инозитолфосфат согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфат) в эффективной дозировке, составляющей приблизительно 0,001 мг/кг - приблизительно 60 мг/кг.

[0190] Согласно некоторым аспектам соединения, фармацевтические композиции, комбинированные препараты, способы и пути введения согласно настоящему изобретению можно использовать для лечения или профилактики ишемии и/или связанного с ишемией заболевания или состояния у субъекта с заболеванием почек. Заболевание почек у субъекта может быть острым, хроническим или и тем, и другим. Согласно одной версии этого аспекта субъект проходит диализ (например, перитонеальный диализ, гемодиализ). Согласно еще одной форме этой версии субъект проходит гемодиализ. Согласно другой версии этого аспекта субъект не подвергается диализу (например, субъект с CKD на стадиях с 1 по 4). Согласно одной версии этого аспекта субъекту вводят инозитолфосфат согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфат) в эффективной дозировке, составляющей приблизительно 0,001 мг/кг - приблизительно 60 мг/кг.

[0191] Согласно некоторым аспектам соединения, фармацевтические композиции, комбинированные препараты, способы и пути введения согласно настоящему изобретению можно использовать для улучшения способности ходить нуждающегося в этом пациента. Согласно некоторым аспектам соединения, фармацевтические композиции, способы и пути введения согласно настоящему изобретению можно использовать для увеличения максимальной дистанции безболевой ходьбы (MWD), максимального времени безболевой ходьбы (MWT) или того и другого у нуждающегося в этом субъекта. Согласно некоторым аспектам субъект страдает заболеванием почек. Заболевание почек у субъекта может быть острым, хроническим или и тем, и другим. Согласно одной версии этого аспекта субъект проходит диализ (например, перитонеальный диализ, гемодиализ). Согласно другой форме этой версии субъект проходит гемодиализ. Согласно другой версии этого аспекта субъект не подвергается диализу (например, субъект с CKD на стадиях с 1 по 4). Согласно одной версии этого аспекта субъекту вводят инозитолфосфат согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфат) в эффективной дозировке, составляющей приблизительно 0,001 мг/кг - приблизительно 60 мг/кг.

[0192] Соединения, фармацевтические композиции, комбинированные препараты, способы и пути введения согласно настоящему изобретению являются особенно применимыми для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации в нижних конечностях и, особенно, для лечения и профилактики заболевания периферических артерий. Еще одно состояние, которое может быть улучшено за счет применения инозитолфосфатов согласно настоящему изобретению, представляет собой критическую ишемию конечностей. Согласно конкретным аспектам соединения, фармацевтические композиции, комбинированные препараты, способы и пути введения, как определено в любом из аспектов, раскрытых выше, предназначены для применения для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации, особенно в нижних конечностях и, особенно, для лечения и профилактики PAD и/или CLI. Согласно некоторым аспектам субъект проходит диализ (например, перитонеальный диализ, гемодиализ). Согласно некоторым дополнительным аспектам субъект проходит гемодиализ. Согласно некоторым другим аспектам субъект не подвергается диализу (например, субъект с CKD на стадиях с 1 по 4). Согласно одной версии этого аспекта субъекту вводят инозитолфосфат согласно настоящему изобретению (например, мио-инозитолгексафосфат) в эффективной дозировке, составляющей приблизительно 0,001 мг/кг - приблизительно 60 мг/кг.

[0193] Следующие ниже варианты осуществления дополнительно иллюстрируют объем изобретения:

[0194] Вариант осуществления 1. Соединение общей формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения для увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации у нуждающегося в этом субъекта

[0195] где R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ независимо выбраны из ОН, радикала формулы II, III, IV, V, VI и VII:

[0196] где: n представляет собой целое число в диапазоне от 2 до 200, и R₁₃ выбран из Н, метила, этила и С₃-С₁₀ алкила;

[0197] с условием, что:

[0198] по меньшей мере один из R₁, R₃, Rs, R₇, Rs и R₁₁ выбран из радикала формулы II, Ш и IV, и

[0199] ноль, один, два или три из R_1; R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ выбраны из радикала формулы V, VI и VII.

[0200] Вариант осуществления 2. Соединение для применения согласно варианту осуществления 1, которое предназначено для лечения или профилактики заболевания периферических артерий.

[0201] Вариант осуществления 3. Соединение для применения согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, которое предназначено для лечения или профилактики критической ишемии конечностей.

[0202] Вариант осуществления 4. Соединение для применения согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, которое предназначено для лечения субъекта, которого подвергают диализу, предпочтительно гемодиализу.

[0203] Вариант осуществления 5. Соединение для применения согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, которое представляет собой натриевую соль.

[0204] Вариант осуществления 6: Соединение для применения согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, где по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять или по меньшей мере 6 из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ выбраны из радикалов формул V, VI и VII.

[0205] Вариант осуществления 7. Соединение для применения согласно предыдущему варианту осуществления, где по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять или по меньшей мере шесть из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы V.

[0206] Вариант осуществления 8. Соединение для применения согласно предыдущему варианту осуществления, причем соединение формулы I представляет собой инозитолгексафосфат.

[0207] Вариант осуществления 9. Соединение для применения согласно предыдущему варианту осуществления, которое представляет собой гексанатриевую соль.

[0208] Вариант осуществления 10. Соединение для применения согласно варианту осуществления 7, где:

[0209] R₇ представляет собой OSO₃^-, и R₁, R₃, R₅, R₉ и R₁₁ независимо выбраны из ОРО₃^2-, OPSO₂^2- или OSO₃^-.

[0210] R₉, R₅ и R₁ представляют собой ОРО₃^2-, и R₇, R₃ и R₁₁ представляют собой OSO₃^-;

[0211] R₉, Rs и R₁ представляют собой OSO₃^-, и R₇, R₃ и R₁₁ представляют собой ОРО₃^2-;

[0212] R₃, R₁ и R₁₁ представляют собой OSO₃^-, и R₉, R₇ и R₅ представляют собой ОРО₃^2-;

[0213] R₃, R₁ и R₁₁ представляют собой ОРО₃^2-, и R₉, R₇ и R₅ представляют собой OSO₃^-;

[0214] R₇ и R₁ представляют собой ОРО₃^2-, и R₉, R₅, R₃, и R₁₁ представляют собой ОРО₃^-;

[0215] R₇ и R₁ представляют собой OSO₃^-, и R₉, R₅, R₃, и R₁₁ представляют собой ОРО₃^2-;

[0216] R₇ и R₅ представляют собой ОРО₃^2-, и R₉, R₃, R₁, и R₁₁ представляют собой OSO₃^-; или,

[0217] R₇ и R₅ представляют собой OSO₃^-, и R₉, R₃, R₁, и R₁₁ представляют собой ОРО₃^2-.

[0218] Вариант осуществления 11. Соединение для применения согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, причем соединение формулы I характеризуется конформацией мио-инозитола.

[0219] Вариант осуществления 12. Соединение для применения согласно любому из вариантов осуществления 1-6, где один, два или три из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ выбраны из радикала формулы V, VI и VII.

[0220] Вариант осуществления 13. Соединение для применения согласно предыдущему варианту осуществления, где четыре из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II и два из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ выбраны из радикала формул V, VI и VII.

[0221] Вариант осуществления 14. Соединение для применения согласно предыдущему варианту осуществления, где четыре из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II, и два из R₁, R₃, R₅, R₇, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы V.

[0222] Вариант осуществления 15. Соединение для применения согласно любому из вариантов осуществления 12-14, где:

(i) R₁, R₅, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II, и R₃ и R₇ выбраны из радикала формул V, VI и VII,

(ii) R₁, R₃, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II, и R₅ и R₇ выбраны из радикала формул V, VI и VII.

[0223] Вариант осуществления 16. Соединение для применения согласно предыдущему варианту осуществления, где радикал, выбранный из V, VI и VII, представляет собой радикал формулы V.

[0224] Вариант осуществления 17. Соединение для применения согласно любому из вариантов осуществления 12-16, где радикал формулы V, VI или VI характеризуется n в диапазоне от 2 до 200.

[0225] Вариант осуществления 18. Соединение для применения согласно предыдущему варианту осуществления, где n находится в диапазоне от 9 до 30.

[0226] Вариант осуществления 19. Соединение для применения согласно предыдущему варианту осуществления, где n находится в диапазоне от 15 до 30.

[0227] Вариант осуществления 20. Соединение для применения согласно варианту осуществления 17, где n находится в диапазоне от 3 до 9.

[0228] Вариант осуществления 21. Соединение для применения согласно любому из вариантов осуществления 12-20, где R₁₃ представляет собой Н.

[0229] Вариант осуществления 22. Соединение для применения согласно варианту осуществления 21, где R₁, R₅, R₉ и R₁₁ представляют собой радикал формулы II, и R₃ и R₇ представляют собой радикал формулы V.

[0230] Вариант осуществления 23. Фармацевтическая композиция для применения, как определено в любом из вариантов осуществления 1-4, содержащая соединение, как определено в любом из предыдущих вариантов осуществления, вместе с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами и носителями.

[0231] Вариант осуществления 24. Фармацевтическая композиция согласно предыдущему варианту осуществления, в которой соединение присутствует в количестве 20-90% (мас./мас.) от всей композиции.

[0232] Вариант осуществления 25. Фармацевтическая композиция согласно предыдущему варианту осуществления, в которой соединение присутствует в количестве 30-80% (мас./мас.) от всей композиции.

[0233] Вариант осуществления 26. Фармацевтическая композиция согласно предыдущему варианту осуществления, в которой соединение присутствует в количестве 40-70% (мас./мас.) от всей композиции.

[0234] Вариант осуществления 27. Фармацевтическая композиция согласно любому из вариантов осуществления 23-26, причем композиция находится в сухой форме для восстановления подходящим носителем.

[0235] Вариант осуществления 28. Фармацевтическая композиция согласно любому из вариантов осуществления 23-26, причем композиция находится в растворе, предпочтительно в изотоническом солевом растворе.

[0236] Вариант осуществления 29. Фармацевтическая композиция согласно любому из вариантов осуществления 23-27, которая образует часть раствора для гемодиализа, гемофильтрации или перитонеального диализа.

[0237] Вариант осуществления 30. Фармацевтическая композиция согласно любому из вариантов осуществления 23-29, причем композиция предназначена для контролируемого высвобождения.

[0238] Вариант осуществления 31. Соединение для применения согласно любому из вариантов осуществления 1-22 или фармацевтическая композиция для применения согласно любому из вариантов осуществления 23-30, которые вводят пациенту, который подвергается диализу.

[0239] Вариант осуществления 32. Соединение для применения согласно предыдущему варианту осуществления, причем диализ представляет собой гемодиализ.

[0240] Вариант осуществления 33. Соединение или фармацевтическая композиция для применения согласно любому из вариантов осуществления 31-32, которые вводят перед диализом.

[0241] Вариант осуществления 34. Соединение или фармацевтическая композиция для применения согласно любому из вариантов осуществления 31-32, которые вводят во время диализа.

[0242] Вариант осуществления 35. Соединение или фармацевтическая композиция для применения согласно любому из вариантов осуществления 31-32, которые вводят после диализа.

[0243] Вариант осуществления 36. Соединение или фармацевтическая композиция для применения согласно любому из вариантов осуществления 31-35, которые вводят парентеральным путем.

[0244] Вариант осуществления 37. Соединение или фармацевтическая композиция для применения согласно предыдущему варианту осуществления, причем парентеральное введение является внутривенным, подкожным или внутримышечным.

[0245] Вариант осуществления 38. Соединение или фармацевтическая композиция для применения согласно предыдущему варианту осуществления, причем внутривенное введение осуществляют путем болюсной инъекции или внутривенной инфузии.

[0246] Вариант осуществления 39. Соединение или фармацевтическая композиция для применения согласно варианту осуществления 34, которые вводят в нефильтрованную кровь, взятую у пациента.

[0247] Вариант осуществления 40. Соединение или фармацевтическая композиция для применения согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, причем соединение вводят субъекту в терапевтически эффективной дозировке, составляющей приблизительно 0,001 мг/кг - приблизительно 60 мг/кг.

[0248] Вариант осуществления 41. Соединение или фармацевтическая композиция для применения согласно варианту осуществления 40, причем соединение вводят субъекту в терапевтически эффективной дозировке, составляющей приблизительно 15 мг/кг - приблизительно 45 мг/кг.

[0249] Вариант осуществления 42. Комбинированный препарат, содержащий: (i) (а) по меньшей мере одно соединение согласно любому из вариантов осуществления 1-22 или (b) по меньшей мере одну фармацевтическую композицию согласно любому из вариантов осуществления 23-30 и (ii) по меньшей мере один дополнительный терапевтический агент для применения в обеспечении здоровья человека.

[0250] Вариант осуществления 43. Комбинированный препарат согласно предыдущему варианту осуществления, в котором дополнительный терапевтический агент представляет собой цилостазол, пентоксифиллин или их комбинацию.

[0251] Вариант осуществления 44. Способ увеличения тканевой перфузии и/или оксигенации у нуждающегося в этом субъекта, который предусматривает введение терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции согласно любому из вариантов осуществления 1-41 или комбинированного препарата согласно любому из вариантов осуществления 42-43 субъекту.

[0252] Вариант осуществления 45. Способ лечения или профилактики ишемии и/или связанного с ишемией заболевания или состояния у нуждающегося в этом субъекта, который предусматривает введение терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции согласно любому из вариантов осуществления 1-41 или комбинированного препарата согласно любому из вариантов осуществления 42-43 субъекту.

[0253] Вариант осуществления 46. Способ улучшения способности ходить у нуждающегося в этом субъекта, который предусматривает введение терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции согласно любому из вариантов осуществления 1-41 или комбинированного препарата согласно любому из вариантов осуществления 42-43 субъекту.

[0254] Вариант осуществления 47. Способ увеличения максимальной дистанции безболевой ходьбы (MWD), максимального времени безболевой ходьбы (MWT) или обоих этих показателей у нуждающегося в этом субъекта, который предусматривает введение терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции согласно любому из вариантов осуществления 1-41 или комбинированного препарата согласно любому из вариантов осуществления 42-43 субъекту.

[0255] Вариант осуществления 48. Способ лечения или профилактики заболевания периферических артерий у нуждающегося в этом субъекта, который предусматривает введение терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции согласно любому из вариантов осуществления 1-41 или комбинированного препарата согласно любому из вариантов осуществления 42-43 субъекту.

[0256] Вариант осуществления 49. Способы согласно любому из вариантов осуществления 44-48, при которых комбинированный препарат вводят совместно, одновременно или последовательно субъекту.

[0257] Данное изобретение дополнительно проиллюстрировано следующими примерами, которые не следует рассматривать как ограничивающие. Содержание всех документов, цитируемых в настоящей заявке, полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.

Общие процедуры

1. Перфузия крови в конечностях

[0258] Перфузию крови в определенном положение конечности и ишемический статус (т.е. перфузию крови, включая в себя единицу перфузии, разницу в перфузии и коэффициент перфузии) оценивают с помощью лазерной допплеровской визуализации перфузии с использованием установки для визуализации PeriCam PSI NR (Perimed АВ, Järfälla, SE). Перед измерением субъектам проводят анестезию с использованием 3% изофлурана, подаваемого в 100% кислороде со скоростью потока 1 л/мин. Разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывают путем сравнения исходного уровня и любых указанных промежуточных или окончательных показаний для каждой группы. Кровоток оценивают около C_max тестируемых активных агентов (то есть через 15 минут после лечения с помощью SNF472, через 20 минут после лечения с помощью IP4-BIS-PEG100 и через 3-4 часа после лечения с помощью цилостазола).

2. Тесты на способность ходить

[0259] Количественную оценку способности ходить (максимальное время безболевой ходьбы (MWT) и максимальную дистанцию безболевой ходьбы (MWD)) измеряли с помощью теста принудительного инкрементного бега на беговой дорожке. Используют двухполосную беговую дорожку для грызунов (LE8709TS; PanLab/Harvard Apparatus, Холлистон, Массачусетс, США). Беговую дорожку устанавливают с наклоном 15% при работе со скоростью 15 м/мин (25 см/с) в течение первых 5 минут, затем со скоростью 33 см/с в течение следующих 5 минут и, наконец, со скоростью 40 см/с в течение максимум 30 дополнительных минут.

[0260] Функцию конечностей оценивают около C_max тестируемых активных агентов (т.е. через 15 минут после лечения с помощью SNF472 и через 3-4 часа после лечения с помощью цилостазола). Перед тестированием субъектов подвергают физической нагрузке на беговой дорожке для акклиматизации в соответствии с установленным протоколом. Субъекты, не соответствующие протоколу, исключаются из теста.

[0261] Субъекты продолжают бегать в течение 40 минут или до истощения (т.е. они остаются на сетке с разрядом в течение пяти непрерывных секунд) во время теста. Затем рассчитывают MWD и MWT для каждого животного.

3. Сбор тканей и крови, анализы кальцификации

[0262] Субъектов анестезируют путем ингаляции изофлурана. Кровь получают путем обескровливания через пункцию сердца. Затем субъектов умерщвляют и собирают их ткани (например, правую и левую бедренные артерии, аорту). Кровь и ткани обрабатывают и анализируют для определения содержания в них кальция.

[0263] Содержание кальция в образце ткани определяют количественно с помощью оптико-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ICP-OES) с использованием спектрометра Optima 7300 DV ICP-OES System (PerkinElmer, Inc., Уолтем, Массачусетс, США) в соответствии с инструкциями производителя. Содержания мио-инозитолгексафосфата в плазме определяют количественно с помощью хроматографических способов ЖХ-МС/МС, описанных в настоящей области техники. См. WO 2013050603.

Пример 1

Профилактика ишемии конечностей

Влияние на перфузию крови

[0264] Профилактические эффекты SNF472, натриевой соли IP4-4,6-бисPEG100 и цилостазола на перфузию крови тестировали с использованием модели на крысах в течение 12 дней. Ишемию конечностей у субъектов вызывали, начиная с D1, за исключением контрольной группы с имитацией вмешательства, в которой ишемию не вызывали. Затем субъектов с индуцированной ишемией лечили плацебо и составами активных агентов с D1 по D12, чтобы оценить их влияние на предотвращение ишемии конечностей. Наблюдения проводили в нескольких точках во время лечения с D1 по D12. Всех субъектов взвешивали каждый день перед лечением.

1. Индукция ишемии конечностей

[0265] Использовали пятьдесят четыре самца крыс Sprague Dawley (SD) (Envigo Corp., Хантингдон, Великобритания) массой приблизительно 250-275 г. Субъектов кормили диетой AO4 (Scientific Animal Food & Engineering; Carpe Bio, Амерсфорт, Нидерланды). Субъектов разделяли на 5 групп, по 8-10 крыс в каждой, следующим образом:

[0266] Группа 1 - Контроль (контрольная группа с имитацией вмешательства)

[0267] Группа 2а Плацебо - Физиологический солевой раствор

[0268] Группа 2b Плацебо - 5% раствор натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (CMC)

[0269] Группа 3 - SNF472 (Na₆IP₆)

[0270] Группа 4 - Натриевая соль IP4-4,6-бисPEG100

[0271] Группа 5 - Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂)

[0272] Ишемию конечностей индуцировали у субъектов групп 2а-5 подкожным введением 120000 МЕ/кг витамина D₃ (холекальциферол, Дюфафраль D₃ (Duphafral D₃) 1000; Zoetis Inc., Парсиппани, Нью-Джерси, США) в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) каждый день с D1 по D3. Субъектам контрольной группы с имитацией вмешательства 1 вводили физиологический солевой раствор (2 мл/кг) подкожно каждый день в период с D1 по D3 без витамина D₃.

[0273] Субъектам в группах 1 и 2а вводили физиологический солевой раствор (2 мл/кг) подкожно каждый день в период с D1 по D12. Субъектам в группе 2b вводили 5% натриевую соль CMC в водном растворе (5 мл/кг) перорально каждый день в период с D1 по D12.

[0274] Введение витамина D₃ вызывало ишемию в задних конечностях субъектов в группах 2а, 2b и 3-5, что оценивали с помощью лазерной допплеровской визуализации перфузии.

2. Купирование ишемии и влияние на перфузию крови в конечностях -анализ с помощью лазерной допплеровской визуализации

[0275] Перфузию крови в конечностях индуцировали у субъектов 3 и 4 групп подкожным введением 20 мг/кг SNF472 (Na₆IP₆; свободное основание: 600 г/моль) и натриевой соли IP4-4,6-бисPEG100 (свободное основание 696,27 г/моль), соответственно, в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) каждый день в период с D1 по D12. Перфузию крови в конечностях вызывали у субъектов группы 5 пероральным введением 20 мг/кг цилостазола (C₂₀H₂₇N₅O₂, свободное основание 369,46 г/моль; номер партии LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., Сент-Луис, Миссури, США) в 5% натриевой соли CMC в водном растворе (5 мл/кг) каждый день в период с D1 по D12.

[0276] Статус ишемии конечностей оценивали в дни D0 (исходный уровень), D6 и D12 у всех крыс с помощью лазерной допплеровской визуализации перфузии. Разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывали путем сравнения исходного уровня в D0 и показаний в D6 и D12 для каждой группы. В частности, разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывали путем сравнения показаний группы 1 (контроль) и (а) групп 2а и 2b плацебо (т.е. физиологический солевой раствор, 5% натриевая соль CMC в водном растворе), (b) группы 3 (SNF472), (с) группы 4 (натриевая соль IP4-4,6-бисPEG100) и (d) группы 5 (цилостазол).

[0277] В дни, когда проводили тесты перфузии крови с использованием активных агентов (то есть D6, D12), дозировки вводили следующим образом:

[0278] Группа 3 - SNF472 (Na₆IP₆): за 15 минут до снятия показаний

[0279] Группа 4 - Натриевая соль IP4-4,6-бисPEG100: за 20 минут до снятия показаний

[0280] Группа 5 - Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂): за 3-4 часа до снятия показаний

[0281] Согласно схеме, приведенной выше, активные агенты будут иметь максимальную концентрацию в сыворотке (C_max) в момент снятия показаний теста.

[0282] Субъекты группы 1 не показали каких-либо значительных изменений в параметрах перфузии.

[0283] Введение SNF472 и натриевой соли IP4-4,6-бисPEG100 ослабляло падение перфузии крови в конечностях субъектов групп 3-5 (т.е. получавших витамин D₃) по сравнению как с плацебо, так и цилостазолом. Эти результаты позволяют предположить, что SNF472 и IP4-4,6-бисPEG100 более эффективны, чем цилостазол, для увеличения перфузии крови в задних конечностях получавших лечение субъектов. См. фиг. 7, 8 и 9.

3. Содержание кальция и кальцификация - ICP-OES

[0284] SNF472 показал свою эффективность против кальцификации сосудов, поскольку SNF472 ингибировал кальцификацию аорты (31±16%) после ежедневного подкожного введения 20 мг/кг по сравнению с плацебо. Цилостазол не проявлял активности в отношении кальцификации в той же дозе. См. фиг. 10.

4. Фармакокинетика

[0285] Субъектов из групп 1, 2, 3 и 5 умерщвляли после обескровливания. Затем проводили их вскрытие и забор аорт. Ткани лиофилизировали в течение 24 ч и взвешивали. Затем лиофилизированные ткани обрабатывали смесью 1:1 HNO₃:HClO₄ в термостате с сухой баней в течение 2-4 часов при 180°С. Обработанные ткани затем разбавляли ультрачистой водой Milli-Q (MilliporeSigma (Merck KGaA), Берлингтон, Массачусетс, США) до конечного объема 10 мл. Содержание кальция в образце аорты определяли количественно с помощью ICP-OES.

[0286] Субъектам из групп 1, 2, 3, 4 и 5 вводили анестезию и забор их крови проводили в D12. Проводили забор около 8-10 мл общей крови на каждого субъекта и разделяли в пробирки для сбора плазмы (K3EDTA, приблизительно 6 мл крови) и сыворотки (приблизительно 2-3 мл крови). Плазму хранили в одной аликвоте по 600 мкл и в нескольких других аликвотах по 500 мкл. Сыворотку разделяли на две аликвоты.

[0287] Содержание мио-инозитолгексафосфата в плазме субъектов из группы 3 (т.е. измеренные примерно при C_max, через 15 мин после введения последней дозы SNF472) количественно оценивали с помощью хроматографических способов ЖХ-МС/МС, описанных в настоящей области техники. См. WO 2013050603.

[0288] Все субъекты в группе 3 подвергались воздействию продукта SNF472 в достаточной степени. Содержание в плазме через 15 минут после последнего подкожного введения в D12 составляло 15587±нг/мл (24±12 мкМ). Содержания в плазме у крыс после ежедневного приема 20 мг/кг были сопоставимы с содержаниями, обнаруженными у гемодиализных пациентов, получавших SNF472 в дозе 4,2 мг/кг внутривенным путем.

Пример 2

Профилактика ишемии конечностей

Влияние на показатели максимального времени безболевой ходьбы (MWT) и дистанции безболевой ходьбы (MDT)

[0289] Профилактические эффекты SNF472 и цилостазола на перфузию крови, способность ходить и кальцификацию тканей тестировали с использованием модели на крысах в течение 24 дней. Кроме того, тестировали эффекты комбинированного лечения SNF472 и цилостазолом на перфузию крови. Ишемию конечностей у субъектов индуцировали с D1 по D3, за исключением контрольной группы с имитацией вмешательства, в которой ишемию не вызывали. Затем субъектов с индуцированной ишемией лечили плацебо и составами активных агентов от D1 до D12, чтобы оценить их влияние на предотвращение (а) ишемии конечностей и кальцификации тканей и (b) ухудшения способности ходить. Лечение всех субъектов прекращали с D13 по D24. Наблюдения проводили в нескольких точках во время фазы лечения и фазы после окончания лечения с D1 по D24. Всех субъектов взвешивали каждый день перед лечением.

1. Индукция ишемии конечностей

[0290] Использовали пятьдесят четыре самца крыс Sprague Dawley (SD) (Envigo Corp., Хантингдон, Великобритания) массой приблизительно 250-275 г. Субъектов кормили диетой AO4 (Scientific Animal Food & Engineering; Carpe Bio, Амерсфорт, Нидерланды). Субъектов разделяли на 5 групп, по 8-10 крыс в каждой, следующим образом:

[0291] Группа 1 - Контроль (контрольная группа с имитацией вмешательства)

[0292] Группа 2а Плацебо - Физиологический солевой раствор

[0293] Группа 2b Плацебо - 5% раствор натриевой соли CMC

[0294] Группа 3 - SNF472 (Na₆IP₆)

[0295] Группа 4 - Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂)

[0296] Группа 5 - Цилостазол + SNF472

[0297] Ишемию конечностей индуцировали у субъектов групп 2а-5 подкожным введением 120000 МЕ/кг витамина D₃ (холекальциферол, Дюфафраль D₃ (Duphafral D₃) 1000; Zoetis Inc., Парсиппани, Нью-Джерси, США) в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) каждый день с D1 по D3. Субъектам контрольной группы с имитацией вмешательства 1 вводили физиологический солевой раствор (2 мл/кг) подкожно каждый день в период с D1 по D3 без витамина D₃.

[0298] Субъектам в группах 1 и 2а вводили физиологический солевой раствор (2 мл/кг) подкожно каждый день в период с D1 по D12. Субъектам в группе 2b вводили 5% натриевую соль CMC в водном растворе (5 мл/кг) перорально каждый день в период с D1 по D12.

2. Купирование ишемии и влияние на перфузию крови в конечностях - анализ с помощью лазерной допплеровской визуализации

[0299] Субъектам в группах 1 и 2а вводили 2 мл/кг физиологического солевого раствора ежедневно с Dl по D12 подкожным путем. Субъектам в группе 2b вводили перорально 5 мл/кг 5% натриевой соли CMC в водном растворе ежедневно с D1 по D12. Кроме того, субъектам в группе 3 вводили 20 мг/кг SNF472 (Na₆IP₆, свободное основание: 600 г/моль), натриевой соли (свободное основание 696,27 г/моль) в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) каждый день с D1 по D12 подкожным путем. Субъектам в группе 4 вводили перорально 20 мг/кг цилостазола (C₂₀H₂₇N₅O₂, свободное основание 369,46 г/моль; номер партии LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., Сент-Луис, Миссури, США) в 5% натриевой соли CMC в водном растворе (5 мл/кг) ежедневно с D1 по D12. Субъектам в группе 5 вводили (i) 20 мг/кг цилостазола (C₂₀H₂₇N₅O₂, свободное основание 369,46 г/моль; номер партии LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., Сент-Луис, Миссури, США) в 5% натриевой соли CMC в водном растворе (5 мл/кг) перорально, а затем (ii) 20 мг/кг SNF472 (Na₆IP₆, свободное основание: 600 г/моль) в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) подкожно. Введение проводили ежедневно с D1 по D12.

[0300] В дни, когда проводили тесты перфузии крови с использованием активных агентов (т.е. D6, D12 и D18), дозировки вводили следующим образом:

[0301] Группа 3 - SNF472 (Na₆IP₆): за 15 минут до снятия показаний

[0302] Группа 4 - Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂): за 3 - 4 часа до снятия показаний

[0303] Группа 5 - Цилостазол + SNF472: за 15 минут для SNF472 и за 3 - 4 часа для цилостазола до снятия показаний

[0304] Согласно схеме, приведенной выше, активные агенты будут иметь максимальную концентрацию в плазме (C_max) в момент снятия показаний теста.

[0305] Статус ишемии конечностей оценивали во время лечения и после того, как лечение было прервано (т.е. D0, D6, D12, D18) у всех крыс с помощью лазерной допплеровской визуализации перфузии. Разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывали путем сравнения исходного уровня и любого из показаний в D6, D12 и D18 для каждой группы. В частности, разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывали путем сравнения показаний группы 1 (контроль) и (а) групп 2а и 2b плацебо (физиологический солевой раствор, 5% раствор натриевой соли CMC), (b) группы 3 (SNF472), (с) группы 4 (цилостазол) и (d) группы 5 (комбинация цилостазола/SNF472).

[0306] SNF472 сам по себе или в комбинации с цилостазолом ослаблял ишемию конечностей крысы. В этой модели лечение цилостазолом отдельно было неэффективным. Эффекты SNF472 на перфузию крови сохранялись даже через 6 дней после прекращения лечения. См. фиг. 11.

3. Эффекты на способность ходить - беговой тест на беговой дорожке

[0307] Максимальное время безболевой ходьбы (MWT) и максимальную дистанцию безболевой ходьбы (MWD) оценивали в группах 1-4 с помощью бегового теста на беговой дорожке (от 8 до 10 животных на группу и временную точку) в D0, D5, D10 и D17.

[0308] Субъектов подвергали акклиматизации к беговой дорожке в течение двух дней перед проведением теста. В первый день субъектов подвергали физической нагрузке в течение от 5 до 10 минут со скоростью беговой дорожки, постепенно изменяющейся от 15 м/мин до 24 м/мин. На второй день субъектов сначала подвергали физической нагрузке со скоростью 15 м/мин в течение 5 минут. Затем их подвергали физической нагрузке со скоростью 19,8 м/мин (33 см/сек) в течение 5 дополнительных минут. Наконец, субъектов подвергали физической нагрузке со скоростью 24 м/мин (40 см/с) в течение максимум 30 дополнительных минут. Получали показания времени и дистанции безболевой ходьбы до вмешательства. Животных, не удовлетворяющих требованиям протокола, исключали из теста.

[0309] Функцию конечностей (MWT и MWD) оценивали в группах 1, 2 и 3 с использованием бегового теста на беговой дорожке через 15 минут после соответствующего ежедневного введения. Функцию конечностей в группе 4 оценивали через 3-4 часа после лечения.

[0310] Согласно приведенной выше схеме активные агенты будут иметь максимальную концентрацию в плазме (C_max) в момент снятия показаний бегового теста.

[0311] Субъекты продолжали бегать в течение 40 минут или до истощения (т.е. они оставались на сетке разряда в течение пяти непрерывных секунд). Затем рассчитывали MWD и MWT для каждого животного.

[0312] SNF472 и цилостазол улучшали способность крыс к ходьбе по сравнению с носителем (+54% MWD и +46% MWT). См. фиг. 13. Более того, эффект SNF472 на улучшение способности ходить сохранялся даже через 5 дней после прекращения лечения (D17). Напротив, цилостазол утратил свои положительные эффекты сразу после прекращения лечения. См. фиг. 13.

4. Содержание кальция и кальцификация - ICP-OES

[0313] Субъектов подвергали анестезии и проводили забор их крови в D24. Субъектов умерщвляли после обескровливания. Затем проводили их вскрытие и забор аорт. Ткани лиофилизировали в течение 24 ч и взвешивали. Затем лиофилизированные ткани обрабатывали с использованием смеси 1:1 HNO3:HClO4 в термостате с сухой баней в течение 2-4 часов при 180°С. Обработанные ткани затем разбавляли ультрачистой водой Milli-Q (MilliporeSigma (Merck KGaA), Берлингтон, Массачусетс, США) до конечного объема, составляющего 10 мл. Содержание кальция в образцах ткани определяли количественно с помощью ICP-OES.

[0314] SNF472 показал свою эффективность против кальцификации сосудов, поскольку SNF472 ингибировал кальцификацию аорты (41±9%) после ежедневного подкожного введения в дозе 20 мг/кг по сравнению с плацебо. Цилостазол не проявлял активности в отношении кальцификации в той же дозе. См. фиг. 14.

Пример 3

Лечение ишемии конечностей

[0315] Эффекты SNF472 и цилостазола на перфузию крови, способность ходить и кальцификацию тканей после начала ишемии конечностей тестировали с использованием модели на крысах в течение 13 дней. Ишемию конечностей индуцировали во всех группах с D1 по D3, за исключением контрольной группы с имитацией вмешательства, в которой ишемию не вызывали. Субъектам с индуцированной ишемией вводили плацебо и составы активных агентов с D5, чтобы учесть развитие ишемии перед началом лечения. С D5 по D13 субъекты получали лечение для оценки воздействия лечения на ишемию конечностей, способность ходить и кальцификацию тканей. Наблюдения проводили в нескольких точках во время лечения с D1 по D13. Всех субъектов взвешивали каждый день перед лечением.

1. Индукция ишемии конечностей

[0316] Использовали шестьдесят шесть самца крыс Sprague Dawley (SD) (Envigo Corp., Хантингдон, Великобритания) массой приблизительно 250-275 г. Субъектов кормили диетой AO4 (Scientific Animal Food & Engineering; Carpe Bio, Амерсфорт, Нидерланды). Субъектов разделяли на 5 групп, по 8-14 крыс в каждой, следующим образом:

[0317] Группа 1 - Контроль (контрольная группа с имитацией вмешательства)

[0318] Группа 2 - D5 Исходный уровень Са

[0319] Группа 3а Плацебо - Физиологический солевой раствор

[0320] Группа 3b Плацебо - 5% раствор натриевой соли CMC

[0321] Группа 4 - SNF472 (Na₆IP₆)

[0322] Группа 5 - Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂)

[0323] Ишемию конечностей индуцировали у субъектов групп 2-5 подкожным введением 120000 МЕ/кг витамина D₃ (холекальциферол, Дюфафраль D₃ (Duphafral D₃) 1000; Zoetis Inc., Парсиппани, Нью-Джерси, США) в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) каждый день с D1 по D3. Субъектам группы 1 вводили физиологический солевой раствор (2 мл/кг) подкожно каждый день в период с D1 по D3 без витамина D₃.

2. Купирование ишемии и влияние на перфузию крови в конечностях -анализ с помощью лазерной допплеровской визуализации

[0324] Субъектам в группе 1 вводили 2 мл/кг физиологического солевого раствора ежедневно с D1 по D13 подкожным путем. Субъектам в группе 2 вводили 2 мл/кг физиологического солевого раствора ежедневно с D1 по D5 подкожным путем. На D5 четыре субъекта из группы 1 и всех субъектов из группы 2 умерщвляли для определения их значений исходного уровня Са.

[0325] Субъектам в группах 3а плацебо вводили 2 мл/кг физиологического солевого раствора ежедневно с D5 по D13 подкожным путем. Субъектам в группе 3b плацебо вводили перорально 5 мл/кг 5% натриевой соли CMC в водном растворе ежедневно с D5 по D13. Кроме того, субъектам в группах 4 вводили 40 мг/кг SNF472 (Na₆IP₆, свободное основание: 600 г/моль) в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) каждый день с D5 по D13 подкожным путем.

[0326] Субъектам в группе 5 перорально вводили 40 мг/кг цилостазола (C₂₀H₂₇N₅O₂, свободное основание 369,46 г/моль; номер партии LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., Сент-Луис, Миссури, США) в 5% натриевой соли CMC в водном растворе (5 мл/кг) ежедневно с D5 по D13. Доза цилостазола у крыс 40 мг/кг сопоставима с терапевтической дозой 8,4 мг/кг у пациентов с PAD.

[0327] В те дни, когда проводили тесты перфузии крови с использованием активных агентов (то есть D5, D13), дозировки вводили следующим образом:

[0328] Группа 4 - SNF472 (Na₆IP₆): за 15 минут до снятия показаний

[0329] Группа 5 - Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂): за 3 - 4 часа до снятия показаний

[0330] Согласно приведенной выше схеме активные агенты будут иметь максимальную концентрацию в плазме (C_max) в момент снятия показаний теста.

[0331] Функциональное состояние конечностей и ишемический статус оценивали с помощью лазерной допплеровской визуализации перфузии во всех группах в D0 и D5 и в группах 1, 3а, 3b, 4 и 5 в D13. Разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывали путем сравнения исходного уровня и показаний в D5 и D13 для каждой группы. В частности, разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывали путем сравнения показаний группы 1 (контроль) и: (а) группы 3а и 3b плацебо (физиологический солевой раствор, 5% раствор натриевой соли CMC), (b) группы 4 (SNF472); с) группы 5 (цилостазол).

[0332] Введение VitD3 вызывало снижение перфузии крови в задних конечностях в группах 3а, 3b, 4 и 5 (измерение в D5 непосредственно перед введением терапии). В D13 только животные, получавшие SNF472, показали значительное улучшение перфузии крови в конечностях по сравнению с D5 до лечения. У животных, получавших плацебо или цилостазол в D13, по сравнению с D5, не сообщалось об улучшении или купировании ишемии. См. фиг. 16.

3. Эффекты на способность ходить - беговой тест на беговой дорожке

[0333] Максимальное время безболевой ходьбы (MWT) и максимальную дистанцию безболевой ходьбы (MWD) оценивали во всех группах в D0 и в группах 1, 3а, 3b, 4 и 5 в D6 и D11 с помощью бегового теста на беговой дорожке (от 8 до 12 животных на группу и момент времени). Перед проведением теста субъекты акклиматизировались к беговой дорожке в течение двух дней. В первый день субъектов подвергали физической нагрузке в течение от 5 до 10 минут со скоростью беговой дорожки, постепенно изменяющейся от 15 м/мин до 24 м/мин. На второй день субъектов подвергали физической нагрузке сначала со скоростью, составляющей 15 м/мин в течение 5 минут. Затем их подвергали физической нагрузке со скоростью, составляющей 19,8 м/мин (33 см/с) в течение 5 дополнительных минут. Наконец, субъектов подвергали физической нагрузке со скоростью, составляющей 24 м/мин (40 см/с) в течение максимум 30 дополнительных минут. Получали показания времени и дистанции безболевой ходьбы до операции. Животных, не удовлетворяющих требованиям протокола, исключали из теста.

[0334] Функцию конечностей (MWT и MWD) оценивали в группах 1, 3а, 3b, и 4 с использованием бегового теста на беговой дорожке через 15 минут после соответствующего ежедневного введения. Функцию конечностей в группах 5 оценивали через 3-4 часа после лечения.

[0335] Согласно приведенной выше схеме активные агенты будут иметь максимальную концентрацию в плазме (C_max) в момент снятия показаний теста.

[0336] Субъекты продолжали бегать в течение 40 минут или до истощения (т.е. они оставались на сетке с разрядом в течение пяти непрерывных секунд). Затем рассчитывали MWD и MWT для каждого животного.

[0337] SNF472 улучшал способность крыс ходить по сравнению с носителем (+49% MWD), даже если лечение начиналось через 5 дней после индукции ишемии, тогда как цилостазол не эффективен в тех же условиях и в терапевтической дозе (40 мг/кг/день). См. фиг. 16.

4. Содержание кальция и кальцификация - ICP-OES

[0338] Четырех субъектов из группы 1 и всех субъектов из группы 2 умерщвляли на D5 для определения их значений исходного уровня Са. Остальных субъектов группы 1 и всех субъектов групп 3а, 3b, 4, 5 и 6 умерщвляли в D13.

[0339] Субъектов умерщвляли после обескровливания. Затем выполняли их вскрытие и собирали их правую и левую бедренные артерии. Ткани лиофилизировали в течение 24 ч и взвешивали. Затем лиофилизированные ткани обрабатывали с использованием смеси 1:1 HNO₃:HClO₄ в термостате с сухой баней в течение 2-4 часов при 180°С. Обработанные ткани затем разбавляли ультрачистой водой Milli-Q (MilliporeSigma (Merck KGaA), Берлингтон, Массачусетс, США) до конечного объема, составляющего 10 мл. Содержание кальция в образцах ткани определяли количественно с помощью ICP-OES.

[0340] SNF472 показал свою эффективность против кальцификации сосудов на D13. По сравнению с плацебо SNF472 ингибировал кальцификацию бедренных артерий примерно на (30%) после ежедневного подкожного введения в дозе, составляющей 40 мг/кг. См. фиг. 17.

5. Фармакокинетика

[0341] Субъектам из групп 1, 3а, 3b, 4 и 5 проводили анестезию и проводили забор их крови в D13. Проводили забор около 8-10 мл общей крови на каждого субъекта и разделяли в пробирки для сбора плазмы (K3EDTA, приблизительно 6 мл крови) и сыворотки (приблизительно 2-3 мл крови). Плазму хранили в одной аликвоте по 600 мкл и в нескольких других аликвотах по 500 мкл. Сыворотку делили на две аликвоты.

[0342] Содержания мио-инозитолгексафосфата в плазме субъектов из группы 4 (т.е. измеренные примерно при C_max, через 15 минут после введения последней дозы SNF472) количественно оценивали с помощью хроматографических способов ЖХ-МС/МС, описанных в настоящей области техники. См. WO 2013050603.

[0343] Все субъекты в группе 4 подвергались воздействию продукта SNF472 в достаточной степени. Содержание в плазме через 15 минут после последнего подкожного введения в D13 составлял 40078±15024 нг/мл (60,7±22,8 мкМ). Содержания в плазме у крыс после ежедневного приема 20 мг/кг были сопоставимы с уровнями, обнаруженными у пациентов на гемодиализе, получавших SNF472 в дозе 8,4 мг/кг внутривенно.

Пример 4

Лекарственные взаимодействия SN472

[0344] Проанализировали совместимость SNF472 с другими лекарственными средствами, регулярно назначаемыми субъектам с почечной недостаточностью.

[0345] Крыс Wistar (Charles R₁ver Labs, Inc., Уилмингтон, Массачусетс, США) лечили с помощью следующего: (i) SNF472, вводимый подкожно (п/к), (ii) SNF472 + севеламер (перорально), (iii) SNF472 (п/к) + цинакальцет (перорально), (iv) SNF472 (п/к) + Vit D (п/к), (v) SNF472 (п/к) + тиосульфат натрия (п/к) и SNF472 (п/к) + ибандронат (п/к). Не наблюдалось значительных различий между введением SNF472 отдельно или совместно с любым другим исследуемым лекарственными средствами.

Пример 5

Профилактика ишемии конечностей

Зависимое от дозы SNF472 влияние на время максимальной ходьбы (MWT) и расстояния (MDT)

[0346] Профилактические эффекты нескольких различных доз SNF472 и наивысшей переносимой дозы цилостазола на перфузию крови, способность ходить и кальцификацию тканей тестировали в течение 12 дней с использованием модели на крысах. Ишемию конечностей была индуцировали у субъектов с D1 по D3, за исключением контрольной группы с имитацией вмешательства. Затем животных с индуцированной ишемией лечили плацебо и составами активных агентов с D1 по D12, чтобы оценить их влияние на предотвращение (а) ишемии конечностей и кальцификации тканей и (b) ухудшения способности ходить. Наблюдения проводили в нескольких точках во время фазы лечения с D1 по D12. Всех субъектов взвешивали каждый день перед лечением.

1. Индукция ишемии конечностей

[0347] Использовали сто два самца крыс Sprague Dawley (SD) (Envigo Corp., Хантингдон, Великобритания) массой приблизительно 250-275 г. Субъектов кормили диетой AO4 (Scientific Animal Food & Engineering; Carpe Bio, Амерсфорт, Нидерланды). Субъектов разделили на 5 групп, от 8 до 12 животных на группу, следующим образом:

[0348] Группа 1 - Контроль (контрольная группа с имитацией вмешательства);

[0349] Группа 2а Плацебо - Физиологический солевой раствор, подкожно;

[0350] Группа 2b Плацебо - 5% раствор натриевой соли CMC, перорально;

[0351] Группа 3 - SNF472 (Na₆IP₆) в дозе, составляющей 1 мг/кг, подкожно;

[0352] Группа 4 - SNF472 (Na₆IP₆) в дозе, составляющей 7,5 мг/кг, подкожно;

[0353] Группа 5 - SNF472 (Na₆IP₆) в дозе, составляющей 15 мг/кг, подкожно;

[0354] Группа 6 - SNF472 (Na₆IP₆) в дозе, составляющей 30 мг/кг, подкожно;

[0355] Группа 7 - SNF472 (Na₆IP₆) в дозе, составляющей 45 мг/кг, подкожно;

[0356] Группа 8 - Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂) в дозе, составляющей 45 мг/кг, перорально.

[0357] Ишемию конечностей индуцировали у субъектов групп 2-8 подкожным введением 120000 МЕ/кг витамина D₃ (холекальциферол, Дюфафраль D₃ (Duphafral D₃) 1000; Zoetis Inc., Парсиппани, Нью-Джерси, США) в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) каждый день с D1 по D3. Субъектам контрольной группы с имитацией вмешательства 1 вводили физиологический солевой раствор (2 мл/кг) подкожно каждый день в период с D1 по D3 без витамина D₃.

[0358] Субъектам в группах 1 и 2а вводили физиологический солевой раствор (2 мл/кг) подкожно каждый день в период с D1 по D12. Субъектам в группе 2b вводили 5% натриевую соль CMC в водном растворе (5 мл/кг) перорально каждый день в период с D1 по D12.

2. Купирование ишемии и влияние на перфузию крови в конечностях -анализ с помощью лазерной допплеровской визуализации

[0359] Субъектам в группах 1 и 2а вводили 2 мл/кг физиологического солевого раствора ежедневно с D1 до D12 подкожным путем. Субъектам в группе 2b вводили перорально 5 мл/кг 5% натриевой соли CMC в водном растворе каждый день с D1 до D12. Кроме того, субъектам в группах 3, 4, 5, 6 и 7 вводили 1 мг/кг, 7,5 мг/кг, 15 мг/кг, 30 мг/кг и 45 мг/кг SNF472 (Na₆IP₆, свободное основание: 600 г/моль), натриевой соли (свободное основание 696,27 г/моль) соответственно. SNF472 вводили в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) каждый день с D1 по D12 подкожным путем. Субъектам в группе 8 вводили перорально 45 мг/кг цилостазола (C₂₀H₂₇N₅O₂, свободное основание 369,46 г/моль; номер партии LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., Сент-Луис, Миссури, США) в 5% натриевой соли CMC в водном растворе (5 мл/кг) ежедневно от D1 до D12.

[0360] В дни, когда проводили тесты перфузии крови с использованием активных агентов (то есть D6 и D12), дозировки вводили следующим образом:

[0361] Группы 3, 4, 5, 6 и 7 - SNF472 (Na₆IP₆): за 15 минут до снятия показаний;

[0362] Группа 8 - Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂): за 3-4 часа до снятия показаний.

[0363] Согласно приведенной выше схеме активные агенты будут иметь максимальную концентрацию в плазме (C_max) в момент снятия показаний теста.

[0364] Статус ишемии конечностей оценивали во время периода лечения (т.е. в D0, D6 и D12) с помощью лазерной допплеровской визуализации перфузии у всех крыс. Разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывали путем сравнения исходного уровня и любого из показаний D6 и D12 для каждой группы. В частности, разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывали путем сравнения показаний группы 1 (контроль) и (а) групп 2а и 2b плацебо (физиологический солевой раствор, 5% раствор натриевой соли CMC), (б) групп 3, 4, 5, 6 и 7 (SNF472) и (с) группы 8 (цилостазол).

[0365] SNF472 ослаблял ишемию конечностей крысы в зависимости от дозы. Лечение цилостазолом отдельно не было эффективным в этой модели.

3. Влияние на способность ходить - беговой тест на беговой дорожке

[0366] Максимальное время безболевой ходьбы (MWT) и максимальную дистанцию безболевой ходьбы (MWD) оценивали в группах 1-8 с помощью бегового теста на беговой дорожке (8 -12 животных на группу и временную точку) в D0, D5 и D10.

[0367] Перед проведением теста субъекты акклиматизировались к беговой дорожке в течение двух дней. В первый день субъектов подвергали физической нагрузке в течение от 5 до 10 минут со скоростью беговой дорожки, постепенно изменяющейся от 15 м/мин до 24 м/мин. На второй день субъектов подвергали физической нагрузке сначала со скоростью, составляющей 15 м/мин в течение 5 минут. Затем их подвергали физической нагрузке со скоростью, составляющей 19,8 м/мин (33 см/с) в течение 5 дополнительных минут. Наконец, субъектов подвергали физической нагрузке со скоростью, составляющей 24 м/мин (40 см/с) в течение максимум 30 дополнительных минут. Получали показания времени и дистанции безболевой ходьбы до операции. Животных, не удовлетворяющих требованиям протокола, исключали из теста.

[0368] Функцию конечностей (MWT и MWD) оценивали в группах 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7 с использованием бегового теста на беговой дорожке через 15 минут после соответствующего ежедневного введения. Функцию конечностей в группе 8 оценивали через 3-4 часа после лечения.

[0369] Согласно приведенной выше схеме активные агенты будут иметь максимальную концентрацию в плазме (C_max) в момент снятия показаний бегового теста.

[0370] Субъекты продолжали бегать в течение 40 минут или до истощения (т.е. они оставались на сетке с разрядом в течение пяти непрерывных секунд). Затем рассчитывали MWD и MWT для каждого животного.

[0371] SNF472 и цилостазол улучшали способность крыс к ходьбе по сравнению с носителем. Более того, эффект SNF472 на улучшение способности к ходьбе зависел от дозы.

4. Содержание кальция и кальцификация - ICP-OES

[0372] Субъектам проводили анестезию и проводили забор их крови в D12. Субъектов умерщвляли после обескровливания. Затем выполняли их вскрытие и собирали артерии сердца и аорты. Ткани лиофилизировали в течение 24 ч и взвешивали. Затем лиофилизированные ткани обрабатывали с использованием смеси 1:1 HNO₃:HClO₄ в термостате с сухой баней в течение 2-4 часов при 180°С. Обработанные ткани затем разбавляли ультрачистой водой Milli-Q (MilliporeSigma (Merck KGaA), Берлингтон, Массачусетс, США) до конечного объема, составляющего 10 мл. Содержание кальция в образцах ткани определяли количественно с помощью ICP-OES.

[0373] Показано, что SNF472 эффективен против кальцификации сердца и сосудов, такой как, например, кальцификация артерий сердца и аорты, в зависимости от дозы. Цилостазол не проявлял активности в отношении кальцификации в той же дозе.

Пример 6

Профилактика ишемии конечностей на модели индуцированной аденином уремии на крысах

Влияние SNF472 на перфузию крови в конечностях

[0374] Профилактические эффекты доз SNF472 и цилостазола на перфузию крови и кальцификацию тканей тестировали с использованием соответствующей модели хронического заболевания почек на крысах в течение 21 дня.

[0375] Уремию и ишемию конечностей у животных индуцировали с D1 по D21, за исключением контрольной группы с имитацией вмешательства, в которой не индуцировали ни уремию, ни ишемию. Затем животных с индуцированной ишемией лечили плацебо и составами активных агентов от D1 до D21, чтобы оценить их влияние на предотвращение (а) ишемии конечностей и (b) кальцификации тканей. Наблюдения проводили в нескольких точках во время фазы лечения от D1 до D21. Всех субъектов взвешивали каждый день перед лечением.

1. Индукция уремии и ишемии конечностей

[0376] Использовали шестьдесят восемь самцов крыс Sprague Dawley (SD) (Envigo Corp., Хантингдон, Великобритания) массой приблизительно 250-275 г, которых кормили гранулированным рационом с высоким содержанием фосфора (SM R, гранулы 10 мм, 1,06% Са, 1,03% Р) (SSNIFF Spezialdiaeten, Зост, Германия) ad libitum. Субъектов разделяли на 6 групп, от 8 до 12 животных в каждой группе, следующим образом:

[0377] Группа 1 - Контроль (контрольная группа с имитацией вмешательства)

[0378] Группа 2а Плацебо - Физиологический солевой раствор, подкожно, один раз в день;

[0379] Группа 2b Плацебо - Физиологический солевой раствор, подкожно, насос Alzet, 4 недели;

[0380] Группа 3 - SNF472 (Na₆IP₆) в дозе, составляющей 30 мг/кг, подкожно, один раз в день;

[0381] Группа 4 - SNF472 (Na₆IP₆) в дозе, составляющей 45 мг/кг, подкожный, один раз в день;

[0382] Группа 5 - SNF472 (Na₆IP₆) в общей дозе, составляющей 400 мг/4 недели (100 мг/неделя), подкожно, насос Alzet на 4 недели был имплантирован в D1 перед введением аденина;

[0383] Группа 6 Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂) в дозе, составляющей 45 мг/кг/день, перорально, один раз в день.

[0384] Уремию и ишемию конечностей индуцировали в группах 2-6 суточной дозой аденина (500 мг/кг, суспендированный в 1% карбоксиметилцеллюлозе, вводимый перорально) в течение первых 10 дней, а затем дозой α- кальцидола (100 нг/кг в оливковом масле, вводимый перорально) три раза в неделю с D11 по D19, чтобы ускорить и обеспечивать однородность развития сердечно-сосудистой кальцификации и ишемии.

[0385] На 21 день животных умерщвляли и собирали образцы крови и тканей. Содержания креатинина (№ OSR6178) и мочевины (№ OSR6134) в сыворотке определяли с использованием соответствующего набора для анализа Beckman Coulter (Beckman Coulter, Inc., Бреа, Калифорния, США).

[0386] Животным контрольной группы с имитацией вмешательства 1 вводили 1% раствор карбоксиметилцеллюлозы (5 мл/кг) перорально каждый день с D1 по D10, а затем перорально вводили оливковое масло три раза в неделю с D11 по D19. Ни уремия, ни ишемия не вызывались в контрольной группе с имитацией вмешательства.

2. Купирование ишемии и влияние на перфузию крови в конечностях -анализ с помощью лазерной допплеровской визуализации

[0387] Субъектам в группах 2а вводили физиологический солевой раствор (2 мл/кг) подкожно два раза в день в течение 21 дня. Субъектам в группе 2b вводили физиологический солевой раствор через 4 недели подкожно с помощью насоса Alzet.

[0388] Кроме того, животным в группах 3 и 4 вводили подкожно два раза в день 30 мг/кг и 45 мг/кг SNF472 (Na₆IP₆, свободное основание: 600 г/моль), натриевой соли (свободное основание 696,27 г/моль), соответственно. SNF472 вводили в физиологическом солевом растворе (2 мл/кг) дважды в день с D1 по D21 подкожным путем. Животным в группе 5 вводили SNF472 в дозе 400 мг/4 недели растворенного физиологического солевого раствора через имплантированный на 4 недели подкожный насос Alzet.

[0389] Животным в группе 6 вводили перорально 45 мг/кг цилостазола (C₂₀H₂₇N₅O₂, свободное основание 369,46 г/моль; номер партии LRAB9590, Sigma-Aldrich Corp., Сент-Луис, Миссури, США) в 5% натриевой соли CMC в водном растворе (5 мл/кг) ежедневно с D1 по D21.

[0390] В дни, когда проводили тесты перфузии крови с использованием активных агентов (то есть D10, D17 и D21), дозировки вводили следующим образом:

[0391] Группы 3 и 4 - SNF472 (Na₆IP₆): за 15 минут до снятия показаний;

[0392] Группа 6 - Цилостазол (C₂₀H₂₇N₅O₂): за 3-4 часа до снятия показаний.

[0393] Согласно приведенной выше схеме активные агенты будут иметь максимальную концентрацию в плазме (C_max) в момент снятия показаний теста.

[0394] Статус ишемии конечностей оценивали во время лечения (т.е. D0, D10 и D17 и D21) у всех крыс с помощью лазерной допплеровской визуализации перфузии. Разницу в перфузии и коэффициент перфузии рассчитывались путем сравнения исходного уровня и показаний D10, D17 и D21 для каждой группы. В частности, разницу перфузии и коэффициент перфузии рассчитывали путем сравнения показаний группы 1 (контроль) и (а) групп 2а и 2b плацебо, (b) групп 3, 4 и 5 (SNF472) и (с) группы 6 (цилостазол).

[0395] SNF472 ослаблял ишемию конечностей крыс у уремических крыс в зависимости от дозы. Лечение цилостазолом отдельно не было эффективным в этой модели.

3. Содержание кальция и кальцификация - ICP-OES

[0396] Субъектам проводили анестезию и забор их крови в D21. Субъектов умерщвляли после обескровливания. Затем выполнили их вскрытие и собрали артерии сердца и аорты. Ткани лиофилизировали в течение 24 ч и взвешивали. Затем лиофилизированные ткани обрабатывали с использованием смеси 1:1 HNO₃:HClO₄ в термостате с сухой баней в течение 2-4 часов при 180°С. Обработанные ткани затем разбавляли ультрачистой водой Milli-Q (MilliporeSigma (Merck KGaA), Берлингтон, Массачусетс, США) до конечного объема, составляющего 10 мл. Содержание кальция в образцах ткани определяли количественно с помощью ICP-OES.

[0397] Было показано, что SNF472 эффективен против кальцификации сердца и сосудов у крыс с уремией, таких как, например, кальцификация артерий сердца и аорты, в зависимости от дозы после ежедневного подкожного введения доз или/и доставки с помощью насоса Alzet по сравнению с плацебо. Цилостазол не проявлял активности в отношении кальцификации в той же дозе.

Изобретение относится к медицине. Предложено применение гексанатриевой соли мио-инозитолгексафосфата или фармацевтической композиции, содержащей указанную соль вместе с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами и носителями, для лечения или профилактики заболевания периферических артерий. Изобретение обеспечивает улучшение перфузии крови в конечностях и подвижности (способности ходить) пациентов, страдающих заболеваниями периферических артерий и критической ишемией конечностей. 11 з.п. ф-лы, 17 ил., 6 пр.

1. Применение гексанатриевой соли мио-инозитолгексафосфата или фармацевтической композиции, содержащей указанную соль вместе с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами и носителями, для лечения или профилактики заболевания периферических артерий.

2. Применение по п. 1, предназначенное для лечения или профилактики критической ишемии конечностей.

3. Применение по п. 1, где фармацевтическая композиция представляет собой внутривенную водную композицию гексанатриевой соли мио-инозитолгексафосфата (SNF472).

4. Применение по любому из пп. 1-3, причем соединение или композицию вводят субъекту с почечной недостаточностью.

5. Применение по любому из пп. 1-4, причем соединение или композицию вводят субъекту во время диализа.

6. Применение по п. 5, причем соединение или композицию вводят субъекту во время гемодиализа.

7. Применение по п. 6, причем соединение или композицию вводят в нефильтрованную кровь, взятую у субъекта.

8. Применение по п. 1, причем соединение или композицию вводят парентеральным путем.

9. Применение по п. 8, причем парентеральное введение является внутривенным, подкожным или внутримышечным.

10. Применение по п. 1 для улучшения способности ходить у нуждающегося в этом субъекта.

11. Применение по п. 1 для увеличения максимальной дистанции безболевой ходьбы (MWD), максимального времени безболевой ходьбы (MWT) или обоих этих показателей у нуждающегося в этом субъекта.

12. Применение по любому из пп. 1-11, причем соединение вводят субъекту в эффективной дозировке, составляющей приблизительно 0,001 - приблизительно 60 мг/кг.