Способ получения средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью Российский патент 2025 года по МПК A61K36/84 A61K36/185 A61K36/23 A61K36/28 A61K36/481 A61K36/539 A61K36/704 B01D11/02 A61P25/28 A61P39/06 

Изобретение относится к области фармации, касается способа получения лекарственного средства на основе сбора лекарственных растений шлемника байкальского, левзеи одноцветковой, астрагала перепончатого, вздутоплодника сибирского, крапивы двудомной, горца птичьего и валерианы лекарственной, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью.

Ноотропные средства составляют особую группу веществ, специфический эффект которых определяется способностью их активировать высшую интегративную деятельность мозга, повышать внимание и улучшать процессы памяти. Многие ноотропные средства применяют не только с целью непосредственного воздействия на мнестические функции, а также при снижении общего уровня жизнедеятельности человека, возникающего при многих состояниях, заболеваниях и экстремальных ситуациях: при гипоксии, травмах мозга, ишемии, интоксикациях. Применение ноотропных средств, полученных на основе лекарственных растений, обусловлено рядом их положительных свойств, в том числе низкой токсичностью при достаточно высокой эффективности, широким спектром действия, комплексным влиянием на организм пациента. В традиционных медицинских системах стран Восточной Азии, в том числе в Тибете, заболевание рассматривается с позиции нарушения деятельности всего организма в целом и соответственно терапия должна быть направлена на регуляцию функционального состояния и структурной организации организма как единого целого. Этому требованию в полной мере отвечают растительные лекарственные средства, которые оказывают комплексное воздействие на организм человека за счет содержащихся в них широкого спектра биологически активных веществ [2].

С учетом патогенеза цереброваскулярного заболевания нами выбрано лекарственное растительное сырье, обладающее нейромодулирующим, нейропротективным, вазоактивным свойствами: корни шлемника байкальского; трава левзеи одноцветковой; корни вздутоплодника сибирского; корни астрагала перепончатого, листья крапивы двудомной; трава горца птичьего; корни и корневища валерианы лекарственной.

Экстракты из корней шлемника байкальского, его флавоноиды (байкалин, байкалеин, вогонин, ороксилин А) оказывают нейропротективное действие благодаря стимуляции ГАМКл-рецепторов [8, 11, 18, 20, 21, 24, 30, 31]. Флавоноиды, выделенные из этого растения, кроме того, обладают выраженной антиоксидантной активностью [16, 17, 22,23,26,29].

Действующие вещества астрагала перепончатого оказывают противоглутаматное, нейропротективное действие при глутаматной нейротоксичности, тритерпеновый сапонин - астрагалозид IV, проявляет защитный эффект при ишемии мозга [12,13,15,27].

Установлено церебропротекторное действие настойки и экстракта из корней вздутоплодника сибирского при ишемии головного мозга [3]. Растительное сырье левзеи одноцветкой содержит различные биологически активные вещества, основными из которых являются экдистероиды [25]. Известно проявление экдистероидами антиоксидантных, противомикробных, противовоспалительных и ранозаживляющих свойств [10].

Трава горца птичьего или спорыша издавна использовалась в народной медицине. В тибетской медицине спорыш известен как средство, применяемое при заболеваниях лимфатической системы, при мочекаменной болезни, как тонизирующее и кровоостанавливающее средство. [1]. Трава содержит флавоноидные гликозиды: кверцетин, авикулярин. Настои травы применяют в качестве средства, способствующего отхождению конкрементов при почечнокаменной болезни. Настой травы обладает умеренное противовоспалительное действие [5].

Препараты крапивы применяют в качестве кровоостанавливающего средства при легочных, почечных, маточных и кишечных кровотечениях. Листья крапивы содержат витамин С, каротин, витамин К, дубильные вещества, минеральные соли [5].

Препараты валерианы входят в состав успокоительных сборов и в состав комплексных средств - кардиовален, валидол, корвалол, валокармид, валоседан и др.. Такое действие валерианы обусловлены содержанием эфирного масла, главную часть которого составляют сложный эфир борнеола и изовалериановой кислоты, борнеол, органические кислоты, алкалоиды (валерин, хатинин), сахара, дубильные вещества. Валериановая кислота оказывает спазмолитическое действие. Препараты валерианы уменьшают возбудимость ЦНС, усиливают действие снотворных, обладают спазмолитическими свойствами. Их применяют как успокаивающие средства при нервном возбуждении, бессоннице, неврозах сердечно-сосудистой системы, спазмах ЖКТ [5].

В качестве прототипа данного изобретения принят стандартизированный экстракт гинкго билоба (Танакан). Танакан применяют при энцефалопатиях, нарушениях мозгового и периферического кровообращения, астениических состояниях, Танакан предложен в качестве ангиопротекторного, венотонизирующего и антиагрегативного средства. [5]. Недостатками указанного средства являются слабо выраженная нейропротективная и антиоксидантная активность по сравнению со средством, полученным по предлагаемому способу.

Технический результат изобретения - расширение ассортимента лекарственных средств, обладающих нейропротективным, антиоксидантным действием, за счет увеличения выхода экстрактивных веществ, а также за счет повышения фармакологической активности.

Для этого растительный материал, состоящий из высушенной измельченной растительной смеси состава (мас.части): шлемника байкальского (корней) 20, левзеи одноцветковой (корней) 18, вздутоплодника сибирского (корней) 15, крапивы двудомной (листьев) 15, астрагала перепончатого (корней) 5, горца птичьего (травы) 10,0, валерианы лекарственной (корневищ с корнями) 7,0 г, экстрагируют трехкратно в соотношении 1 мас.ч. сырья 10 об.ч экстрагента при первом и втором контакте фаз 60% этиловым спиртом, при третьем контакте фаз - 20% этиловым спиртом. Экстрагирование выполняется при температуре 60°С при 1-ом контакте фаз в течение 45 мин, при 2-ом и 3-ем контакте фаз - 30 мин. Спиртовые извлечения после экстракций фильтруют через серошинельное сукно в сборник, подавая каждый раз экстрагент в объеме, равном слитому от предыдущей экстракции. Объединенные спиртовые извлечения последовательно порциями упаривают примерно до 1/3 от первоначального объема. Объединенные кубовые остатки от трех извлечений сепарируют. Полученный продукт доупаривают приблизительно до 1/5 и высушивают в вакуум-сушильном шкафу. Выход готового продукта составляет 25,1% от массы растительного материала. Экстракт сухой, представляет собой аморфный порошок от коричневого до темно - коричневого цвета со специфическим запахом, горького вкуса, потеря в массе при высушивании не более 5%. Гигроскопичен, комкуется. Данный способ получения прост, не требует сложной схемы очистки, позволяет получить продукт постоянного состава.

Полученный нами состав характеризуется как средство, обладающее выраженной ноотропной, антиоксидантной активностью.

Подобраны оптимальные технологические параметры получения экстракта сухого: степень измельчения сырья, тип экстрагента, соотношение экстрагента и растительного сырья, температурный режим экстракции, продолжительность и кратность числа экстракций. Опыты выполняли в трехкратной повторности и использовали средние значения полученных данных. Эффективность экстракции оценивали по выходу экстрактивных веществ и содержанию суммы флавоноидов в пересчете на байкалин. Определение содержания экстрактивных веществ проводили согласно ОФС.1.5.3.0006.15 «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» [7].

Количественное определение флавоноидов проводили методом спектрофотометрии.

Около 1 г сбора (точная навеска), измельченного и просеянного через сито (размер частиц 2-5 мм) помещают в колбу на 150 мл, прибавляют 100 мл 60% этанола, колбу присоединяют к обратному холодильнику. Экстракцию проводят на водяной бане в течение 60 минут. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу на 100 мл, объем раствора доводят до метки 96% этанолом (раствор А). 1 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора до метки 96% этанолом (раствор Б). 1 мл раствора Б помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора до метки 96% этанолом. Измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 279 нм. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на байкалин рассчитывают по формуле

.

Для каждого вида сырья в зависимости от морфологических особенностей и степени измельчения изучено извлечение экстрактивных веществ. Растительный сбор разделен на 2 фракции: 1-листья и трава, 2-корни и корневища. Сырье измельчали с размером частиц <1,0 мм; 1,0-2,0 мм; 2,0-3,0 мм, 3,0-4,0 мм, 4,0-5,0 мм. Для листьев и травы оптимальная степень измельчения составила 1,0-2,0 мм; для корней и корневищ -2,0-3,0 мм (таблица 1).

Для подбора типа экстрагента изучены процессы экстрагирования суммарного сбора, при этом в дальнейших испытаниях корни шлемника байкальского, левзеи одноцветковой вздутоплодника сибирского, астрагала перепончатого и корневища с корнями валерианы лекарственной измельчали до размера частиц сырья 2,0-3,0 мм, листья крапивы двудомной и траву горца птичьего 1,0-2,0 мм. Изучен выход суммы экстрактивных веществ и суммы флавоноидов при экстрагировании 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70 и 96% этиловым спиртом. Установлено, что максимальный выход экстрактивных веществ получен при экстракции сбора 20% этиловым спиртом, а флавоноидов - при экстракции 60% этиловым спиртом. Результаты исследований приведены в таблице 2.

Изучена зависимость извлечения суммы экстрактивных веществ и флавоноидов 60% и 20% этиловым спиртом от различных соотношений экстрагента к количеству сырья. Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что оптимальное соотношение растительного сбора и экстрагента является 1:10 для однократного залива сырья. Дальнейшее увеличение соотношения нецелесообразно ввиду незначительного повышения выхода действующих веществ.

Изучено влияние температурного режима экстракции на выход экстрактивных веществ и флавоноидов. Из данных таблицы 4 видно, что повышение температуры увеличивает выход веществ. Для получения экстракта сухого выбрана температура 60°С, которая обеспечивает оптимальное извлечение биологически активных веществ. Большее повышение температуры с одной стороны может привести к разрушению термолабильных веществ, ухудшению растворения или испарению некоторых веществ (например, эфирных масел), переходу в извлечение большого количества балластных веществ, с другой стороны - увеличивает энергозатратность производства готового продукта.

Для определения продолжительности экстракции изучено время наступления равновесной концентрации в системе сырье-экстрагент при трехкратной экстракции разными типами экстрагента. Для этого навески растительного сбора экстрагировали последовательно этиловым спиртом 60% и 20% в соотношении 1:10 на водяной бане при температуре 60°С при постоянном перемешивании с обратным холодильником. После первого контакта фаз 60%-ым этанолом или 20% этиловым спиртом через заданные промежутки времени (15, 30, 45, 60, 75 мин.) извлечения фильтровали, определяли содержание суммы экстрактивных веществ и флавоноидов. Затем проводили две последующие экстракции отжатого сырья при тех же промежутках времени, заливая во 2-ом и 3-ем контакте фаз - 60% или 20% этиловый спирт соответственно. Извлечения анализировали на содержание суммы экстрактивных веществ и флавоноидов.

По результатам данных таблицы 5 видно, что наиболее оптимальный экстрагент 60% этанол для извлечения флавоноидов при 1-ом контакте фаз через 45 мин, при 2-ом контакте фаз через 30, а для извлечения экстрактивных веществ при экстракции 20% этиловым спиртом - при 1-ом контакте фаз через 45 мин, при 2-ом контакте фаз через 30 мин. Наиболее оптимальным экстрагентом для извлечения экстрактивных веществ при 3-ем контакте фаз - 20% этиловый спирт через 30 мин. Поэтому для максимального извлечения флавоноидов и экстрактивных веществ для получения экстракта сухого из растительного сбора рекомендуем использовать экстракцию 60% этиловым спиртом при первом контакте фаз в течение 45 мин, при 2-ом контакте фаз в течение 30 мин, экстракцию при третьем контакте фаз оптимально выполнять 20% этиловым спиртов в течение 30 мин. Трехкратная экстракция обеспечивает максимальный выход биологически активных веществ.

Пример способа получения средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью.

20,0 г корней шлемника байкальского, 18,0 г корней левзеи одноцветковой, 15,0 г корней вздутоплодника сибирского, 15,0 г корней астрагала перепончатого, 7,0 г корневищ с корнями валерианы лекарственной измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 2,0-3,0 мм; 15,0 г листьев крапивы двудомной, 10,0 г травы горца птичьего измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 1,0-2,0 мм. Измельченное сырье смешивают и загружают в экстракционный аппарат с мешалкой. Заливают 1,0 л 60% этиловым спиртом и экстрагируют при температуре 60°С в соотношении сырье экстрагент 1:10. Экстракцию выполняют в течение 45 мин при постоянном перемешивании. Извлечение фильтруют через серошинельное сукно в сборник. Вторую экстракцию выполняют в течение 30 мин при той же температуре, подавая в экстрактор 60% этиловый спирт в количестве, равном слитому от первой экстракций, третью экстракцию выполняют в течение 30 мин, подавая в экстрактор 20% этиловый спирт в количестве, равном слитому от второй экстракций. Объединенные спиртовые извлечения последовательно порциями упаривают примерно до 1/3 от первоначального объема. Объединенные кубовые остатки от трех извлечений сепарируют. Полученный продукт доупаривают приблизительно до 1/5 и высушивают в вакуум-сушильном шкафу. Выход готового продукта составляет 25,1% от массы растительного материала. Средство, обладающее ноотропной и антиоксидантной активностью, представляет собой экстракт сухой, аморфный порошок от коричневого до темно - коричневого цвета со специфическим запахом, горького вкуса, потеря в массе при высушивании не более 5%.

Гигроскопичен, комкуется.

Оценка ноотропной активности средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью. Исследования проведены на 150 белых крысах Wistar обоего пола массой 200-240 г.

Содержание животных соответствовало Правилам надлежащей лабораторной практики (GLP) и Приказу МЗ РФ №199Н от 01.04.2016 г. «Об утверждении Правил надлежащей лабораторной практики». Экспериментальную работу осуществляли в соответствии с Правилами, принятыми в Европейской конвенции по защите позвоночных животных (Страсбург, 1986 г.). Протокол исследования согласован с этическим комитетом ИОЭБ СО РАН (№1 от 26.01.2022). Перед началом исследования животных, отвечающих критериям включения в эксперимент, распределяли на группы с учетом принципа рандомизации:

контрольная и три опытных.

Средство, обладающее ноотропной и антиоксидантной активностью в дозах 50, 100 и 200 мг/кг вводили животным I-III опытных групп соответственно в форме водного раствора один раз в сутки в течение 14 дней до экспериментов. Животные IV опытной группы получали препарат сравнения танакан (ITN011709/01, «Бофур Ипсен Индастри», Франция) в дозе 100 мг/кг, животные интактной и контрольной групп - эквивалентное количество воды очищенной по аналогичной схеме. На 14 сутки у животных всех групп вырабатывали условный рефлекс пассивного избегания (УРПИ) [9].

В первой серии экспериментов оценивали влияние средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью, на когнитивные функции лабораторных животных при острой гипоксии, которую моделировали помещением крыс контрольной и опытных групп, сразу после выработки УРПИ, в герметичный сосуд (1 литр) до появления атонального дыхания [9]. Во второй серии экспериментов нарушение процессов обучения и памяти у животных контрольной и опытных групп воспроизводили однократным внутрибрюшинным введением скополамина гидрохлорида в дозе 2 мг/кг [9]. Через 1 час, 24 часа, 3 и 7 суток после гипоксического воздействия или введения скополамина гидрохлорида регистрировали количество животных с формированным УРПИ и латентный период (время захода в темный отсек установки). УРПИ считали сохранным, если животное в течение 180 минут не заходило в темный отсек установки.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась с помощью пакета программ Statistica for Windows 6.0. Статистические различия оценивали с помощью непараметрический критерий Манна-Уитни (U-тест). Для сравнения частоты выработки рефлекса между группами был применен критерий Фишера. Различия считали достоверными при достигнутом уровне значимости р<0,05.

Результаты, представленные в таблице 6, свидетельствуют, что на фоне гипоксии развиваются нарушения когнитивных функций у лабораторных животных. Так, в контрольной группе УРПИ через 24 часа сохранился 43,6%, на 3 сутки - у 30,8% и к 7 суткам - у 15,3% животных. Латентный период у животных контрольной группы через 1 час и 24 часа после моделирования гипоксии был ниже в среднем 1,5 раза, на 3 и 7 сутки - в 3,0 раза такового у животных интактной группы.

Введение животным средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью, увеличивало долю животных с сохранившимся УРПИ во все сроки тестирования (таблица 6). На 7 сутки УРПИ сохранился у 50% животных, получавших исследуемое средство в дозах 100 и 200 мг/кг, что статически значимо отличается от контрольного показателя. Латентный период у животных всех опытных групп был выше, чем в контроле во все сроки наблюдений.

На фоне введения скополамина только через 24 часа стали наблюдаться существенные изменения в нарушении когнитивных функций у крыс (таблица 7). Так в контрольной группе УРПИ через 24 часа выявлялся у 50% животных, а к 3 и 7 суткам - у 21,4 и 14,3% животных соответственно. На поздних сроках наблюдений (3 и 7 сутки) медиана латентного периода была в среднем на 83% ниже, чем у интактных животных.

Введение исследуемого средства способствовало сохранности УРПИ на фоне скополаминовой амнезии. Так, на 3 и 7 сутки в опытных группах количество животных с сохранившемся рефлексом было выше 2,0 раза, чем в контроле. Наиболее статистически значимое повышение доли животных со сформированным УРПИ отмечали в группе животных, получавших исследуемое средство в дозе 200 мг/кг. Латентный период у животных, получавших исследуемое средство в дозах 100 и 200 мг/кг и препарат сравнения в дозе 100 мг/кг, был в среднем в 4,0 раза выше такового в контроле.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что исследуемое средство, обладающее ноотропной и антиоксидантной активностью, в дозах 100 и 200 мг/кг оказывает более выраженное ноотропное действие, что проявляется в улучшении выработки условного рефлекса и более прочной сохранности памятного следа в отдаленные сроки при гипоксии и скополаминовой интоксикации.

Оценка антиоксидантной активности средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью

Антиоксидантную активность нового средства оценивали по его способности нейтрализовать радикалы 2,2'-дифенил-1-пикрилгидразил (DPPH^⋅) и 2,2'-азино-бис-3- этилбензотиазолин-6-сульфонат (ABTS^⋅+) [19], супероксидный анион-радикал (О^2-), молекулы NO [28], восстанавливать металл переменной валентности - Fe (II) [6]. Влияние средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью, на процесс металлкатализируемой модификации биологических молекул изучали в модельной системе желточных липопротеидов с генерацией гидроксильного радикала (реакция Фентона) [14]. В качестве веществ-сравнения использовали тролокс и аскорбиновую кислоту (Sigma Aldrich, USA). Все эксперименты in vitro проводили в трехкратной повторности. Антирадикальную активность выражали через эффективную концентрацию вещества, при которой ингибирование свободнорадикальной реакции или нейтрализация радикалов происходи на 50% (IC₅₀). Статистическую обработку полученных данных проводили согласно рекомендациям [9].

В модельных системах, содержащих реакционно-активные молекулы, новое средство проявляет антирадикальную активность (таблица 8). Выявлено, что средство, обладающее ноотропной и антиоксидантной активностью, обладает выраженной радикал-связывающей активностью в отношении 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (DPPH) и 2,2'-азино-бис (3-этилбензотиазолин-6-сульфокислоты) диаммониевой соли (ABTS^⋅+). Концентрация 50% ингибирования составила: IC₅₀^DPPH=30,2 мкг/мл, IC₅₀^ABTS⋅+=39,1 мкг/мл.

Исследуемое средство характеризуется инактивирующей активностью в отношении активных форм кислорода (О₂^⋅- и NO) и ионов Fe (II) (таблица 8). Связывание 50% реакционно-активных молекул исследуемым экстрактом происходило в концентрации 540,1 мкг/мл (IC₅₀^Fe2+), а также 211,2 мкг/мл и 854,1 мкг/мл для IC₅₀^O2⋅- и IC₅₀^NO соответственно.

Влияние средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью, на процесс накопления ТБК-активных продуктов оценивали в модельной биологической системе желточных липопротеидов с реакцией Фентона (Fe(II)/H₂O₂). Установлено, что новое средство в концентрации 485,3 мкг/мл способствует половинному ингибированию свободно-радикальной реакции и снижению накопления соединений реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (таблица 8).

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что исследуемое средство, обладающее ноотропной и антиоксидантной активностью, проявляет более выраженную антиоксидантную активность, предотвращая цепную реакцию перекисного окисления липидов и окислительную модификацию биологических молекул.

Список литературы

1. Баторова С.М. Растения тибетской медицины. - Нивосибирск: Наука, 1989. - 158 с.

2. Гриневич М.А. Информационный поиск перспективных лекарственных растений. - Л.: Наука, 1990. - 138 с.

3. Гуляев С.М. Церебропротекторное действие настойки вздутоплодника сибирскогопри экспериментальной ишемии головного мозга / С.М. Гуляев, С.М. Николаев //Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2008. - №3 (61). - С. 71-72.

4. Дерффель К. Статистика в аналитической химии / К. Дерффель. - М.: Мир, 1994. - 98 с.

5. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Новая волна, 2012. - С. 457.

6. Олейников Д.Н., Зилфикаров И.Н., Торопова А.А., Ибрагимов Т.А. Химический состав сока каллизии душистой (Callisia fragrans Wood) и его антиоксидантная активность (in vitro). //Химия растительного сырья. - 2008; 4. - С. 95 - 100.

7. ОФС.1.5.3.0006.15 Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах.

8. Першина О.В., Суслов Н.И., Пашинский В.Г. и др.Некоторые фармакологические свойства препаратов из надземной части Scutellaria baicalensis Georgi // Растительные ресурсы. - 1998. - Т. 34, Вып.3. - С. 83-87. – шлемник.

9. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. - М., 2012. - 924 с.

10. Фитоэкдистероиды /под ред.В. В. Володина. - Санкт-Петербург, 2003. - 293 с. П. Шурыгин А.Я., Беззубое Н.В., Игнатова Е.А. и др. Экстракт шлемника байкальского стимулирует рост нейритов в культуре спинномозговых ганглиев крысы // БЭБиМ. - 2002. - Т. 134, №7. - С. 56-57.

12. Шурыгин А.Я., Кравцов А.А., Батсурен Д. и др. Сравнительное изучение защитного действия экстрактов корней Astragalus mongolicus Bunge и Astragalus membranaceus (Fischer) Bunge на зернистые нейроны мозжечка крыс в условиях глутаматной интоксикации // Наука Кубани. - 2009. - №3. - С. 46 - 49. – астрагал.

13. Шурыгин А.Я., Николаев С.М., Кравцов А.А. и др. Нейропротекторный эффект экстрактов из надземной части Astragalus membranaceus и A. mongolicus (Fabaceae) в условиях токсического действия глутамата // Растительные ресурсы. - 2012. - Т. 48, Вып. 2. - С. 273 - 277.-астрагал.

14. Agil A., Fuller C.J., Jialal I. Susceptibility of plasma to ferrous iron/hydrogen peroxide-mediated oxidation: demonstration of a possible Fenton reaction. //Clinical Chemistry. 1995,41(2). - P. 220 - 225.

15. Chan W.S., Durairajan S.S., Lu J.H., Wang Y. et al. Neuroprotective effects of Astragaloside IV in 6-hydroxydopamine-treated primary nigral cell culture // Neurochem. Int. - 2009. - Vol.55, №6. - P. 414- 422. – астрагал.

16. Cho J., Lee H.-K. Wogonin inhibits excitotoxic and oxidative neuronal damage in primary cultured rat cortical cells //Eur. J. Pharmacol. - 2004. - Vol. 485, №1-3. - P. 105-110.

17. Gao, Z., Huang K., Xu H.Protective effects of flavonoids in the roots of Scutellaria baicalensis Georgi against hydrogen peroxide-induced oxidative stress in HS-SY5Y cells //Pharmacol. Res. - 2001. - Vol. 43, №2. - P. 173-178.

18. Heo H., Shin Y., Cho W.et al Memory improvement in ibotenic acid induced model rats by extracts of Scutellaria baicalensis // J. Ethnopharmacol. - 2009. - Vol. 122, №1. - P. 20-27.

19. Huyut Z., Beydemir F., Giilcin E. Antioxidant and Antiradical Properties of Selected Flavonoids and Phenolic Compounds. //Biochemistry Research International. - 2017. - P. 1-10.

20. Hwang Y.K., Jinhua M., Choi B.-R. et al. Effects of Scutellaria baicalensis on chronic cerebral hypoperfusion-induced memory impairments and chronic lipopolysaccharide infusion-induced memory impairments // J. Ethnopharmacol. - 2011. - Vol. 137, №1. - P. 681-689.

21. Kim Y.O., Leem K., Park J. et al.Cytoprotective effect of Scutellaria baicalensis in CAI hippocampal neurons of rats after global cerebral ischemia // J. Ethnopharmacol. - 2001. - Vol. 77, №2-3. - P. 183-188.

22. Lee I.K., Kang K.A., Zhang R.et al Mitochondria protection of baicalein against oxidative damage via induction of manganese superoxide dismutase // Environ. Toxicol. Pharmacol. - 2011. - Vol.31, №1. - P. 233-241.

23. Liu Ch., Wu J., Gu J.et al. Baicalein improves cognitive deficits induced by chronic cerebral hypoperfusion in rats // Pharmacol. Biochem. Behav. - 2007. - Vol. 86, №3. - P. 423-430.

24. Mu X., He G., Cheng Y.et al. Baicalein exerts neuroprotective effects in 6-hydroxydopamine-induced experimental parkinsonism in vivo and in vitro // Pharmacol. Biochem. Behav. - 2009. - Vol. 92, №4. - P. 642-648.

25. Nikolaeva I. G., Tsybiktarova L. P., Garmaeva L. L. et al. Determination of ecdysteroids in Fornicium unflorum (L.) and Serratula centauroides (L.) raw materials by chromatography-UV spectrophotometry // Journal of analytical chemistry. 2017. - Vol. 72. - No 8. - P. 854-861

26. Perez C.A., Wei Y., Guo M. Iron-binding and anti-Fenton properties of baicalein and baicalin // J. Inorg. Biochem. - 2009. - Vol. 103, №3. - P. 326-332.

27. Qu Y.Z., Li M., Zhao Y.L., Zhao Z.W. et al. Astragaloside IV attenuates cerebral ischemia-reperfusion-induced increase in permeability of the blood-brain barrier in rats // Eur. J. Pharmacol. - 2009. - Vol. 606, №1- 3. - P. 137 - 141. – астрагал.

28. Rahini D., Anuradha R. In vitro antioxidant activity of Artabotrys hexapetallus //Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2014, 5(2). - P. 396-405.

29. Son D., Lee P., Lee J. et al Neuroprotective effect of wogonin in hippocampal slice culture exposed to oxygen and glucose deprivation //Eur. J. Pharmacol. - 2004. - Vol. 493, №1-3. - P. 99-102.

30. Tang W., Sun X., Fang J.-S. et al. Flavonoids from Radix Scutellariae as potential stroke therapeutic agents by targeting the second postsynaptic density 95 (PSD-95)/disc large/zonula occludens-1 (PDZ) domain of PSD-95 //Phytomedicine. - 2004. - Vol. 11, №4. - P. 277-284.

31. Wang, H.-H., Liao J -F., Chen C.-F. Anticonvulsant effect of water extract of Scutellariae radix in mice // J. Ethnopharmacol. - 2000. - Vol. 73, №1-2. - P. 185-190.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способа получения средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью. Способ получения средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью, которым растительный материал, состоящий из корней шлемника байкальского, корней левзеи одноцветковой, корней вздутоплодника сибирского, корней астрагала перепончатого, корневищ с корнями валерианы лекарственной, измельченных до размера частиц диаметром 2,0-3,0 мм, листьев крапивы двудомной, травы горца птичьего, измельченных до размера частиц диаметром 1,0-2,0 мм, в соотношении компонентов в мас.ч. 20:18:15:15:7:15:10 экстрагируют при температуре 60°С при соотношении 1 мас.ч. растительного материала 10 об.ч экстрагента 60% этиловым спиртом при постоянном перемешивании. Первый контакт фаз происходит в течение 45 мин и второй контакт фаз - в течение 30 мин, третий контакт фаз 20% этиловым спиртом в течение 30 мин. Далее объединенные извлечения фильтруют, упаривают, очищают сепарированием, доупаривают, затем высушивают в вакуум-сушильном аппарате. Вышеописанный способ расширяет ассортимент лекарственных средств, обладающих нейропротективным, антиоксидантным действием за счет увеличения выхода экстрактивных веществ, а также за счет повышения фармакологической активности. Полученное средство обладает выраженным ноотропным и антиоксидантным действием. 8 табл., 1 пр.

Способ получения средства, обладающего ноотропной и антиоксидантной активностью, которым растительный материал, состоящий из корней шлемника байкальского, корней левзеи одноцветковой, корней вздутоплодника сибирского, корней астрагала перепончатого, корневищ с корнями валерианы лекарственной, измельченных до размера частиц диаметром 2,0-3,0 мм, листьев крапивы двудомной, травы горца птичьего, измельченных до размера частиц диаметром 1,0-2,0 мм, в соотношении компонентов в мас.ч. 20:18:15:15:7:15:10 экстрагируют при температуре 60°С при соотношении 1 мас.ч. растительного материала 10 об.ч экстрагента 60% этиловым спиртом при постоянном перемешивании - первый контакт фаз в течение 45 мин и второй контакт фаз в течение 30 мин, третий контакт фаз 20% этиловым спиртом в течение 30 мин, далее объединенные извлечения фильтруют, упаривают, очищают сепарированием, доупаривают, затем высушивают в вакуум-сушильном аппарате.