БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЙ АНТИПАРАЗИТАРНЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ДИКИХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2025 года по МПК A61K31/53 A61K31/4164 A61K47/02 A61K47/04 A61P33/02 A61P33/10 

Изобретение относится к ветеринарии в области охотоведения, в частности к приманкам с биологически активным антипаразитарным средством для профилактики и лечения диких животных.

Известны различные антигельминтные (https://www.vidal.ru/veterinar/kfu/protivogelmintnye_preparaty_shirokogo_spektra_deystviia) [1] и противококцидийные (https://www.vidal.ru/veterinar/kfu/protivokoktsidiynye_preparaty) [2] препараты имеющий узконаправленный или широкий спектр воздействия на паразитические организмы.

Проведенные ветеринарные противопаразитарные мероприятия подтвердили высокую эффективность и хорошую переносимость альбендазола.

Альбендазол представляет собой бесцветные кристаллы с tпл=208-210°C, нерастворим в воде, хорошо растворим в диметилсульфоксиде и диметилформамиде.

Альбендазол обладает широким спектром антигельминтного действия, активен против имаго и личинок нематод и цестод, а также половозрелых трематод. Обладая овоцидным действием, обеспечивает снижение зараженности окружающей среды яйцами гельминтов.

Механизм действия альбендазола заключается в нарушении процессов транспорта глюкозы и микротубулярной функции, снижении активности фумаратредуктазы у гельминтов, нарушении проницаемости клеточных мембран и мышечной иннервации, что вызывает паралич и гибель гельминтов.

При пероральном введении препарата альбендазол всасывается из ЖКТ и проникает в органы и ткани; из организма выводится преимущественно с мочой и желчью в неизмененном виде и в виде метаболитов.

По степени воздействия на организм Альбендазол 10% относится к умеренно опасным веществам (3 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76); в рекомендуемых дозах хорошо переносится животными, не обладает гепатотоксическим и сенсибилизирующим действием (https://www.vidal.ru/veterinar/albendazol-10-27929) [3].

К антикокцидийным лекарственным препаратам относится толтразурил.

Толтразурил - по внешнему виду препарат представляет собой бесцветную или желтоватого цвета жидкость.

Толтразурил обладает широким спектром антикокцидийного действия на всех стадиях внутриклеточного развития (мерогонии и гамогонии) кокцидий.

Толтразурил, блокируя дыхательные ферменты кокцидий, оказывает повреждающее действие на митохондрии и процессы деления ядра кокцидий, нарушая процесс формирования макрогаметоцитов.

После перорального введения толтразурил медленно всасывается и оказывает кокцидиоцидное действие на слизистой и подслизистой оболочках желудочно-кишечного тракта.

Толтразурил 2,5% по степени воздействия на организм относится к малоопасным веществам (4 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76) (https://www.vidal.ru/veterinar/toltrazuril-30730) [4].

Существуют в этой области патенты: патент RU 2112511, МПК A61K 31/415, «Препарат для профилактики и лечения гельминтозов животных «Альбамелин»» (препарат содержит альбендазол и мел или цеолиты для профилактики и лечения гельминтозов животных); патент RU 2571543, МПК A61K 31/415, «Препарат для лечения гельминтозов животных» (препарат содержит албендазола сульфоксид, бутафосфан и воду для инъекций), имеющие схожесть с разработанной формулой заявленного изобретения.

Недостатками данных изобретений является то, что в их состав входят различные вещества и компоненты узконаправленного действия на определенные виды гельминтов, при отсутствие адсорбирующих свойств и имуннокорректного действия на организм животного, что снижает терапевтическую эффективность препаратов.

Заявленное решение имеет более широкий спектр действия на гельминтов и простейших (смесь антигельминтного препарата с действующим веществом альбендазола и противококцидийного препарата с действующим веществом толтразурил) в смеси с биологически активными веществами, входящими в состав приманки для диких животных.

В связи с трудностью проведения профилактических и лечебных мероприятий в дикой фауне (в частности, среди зайцеобразных) была разработана формула биологически активного антипаразитарного препарата для диких животных, которую возможно донести до животных дикой фауны без сложностей.

Задачей изобретения является разработка нового препарата альбендазола + толтразурил (противококцидийный препарат) в составе приманки, обладающей возможностью комплексного специфического воздействия на паразитов и сопутствующие инвазии побочные эффекты, а также низкой токсичностью и высокой терапевтической эффективностью.

Техническим результатом является повышение эффективности вследствие комплексного воздействия на паразитов Passalurus ambiguous, Dicrocelium lanceatum, Eimeria stiedae в организме диких животных и устранение токсических воздействий паразитов на организм диких животных и иммунокорректирующего действия.

Технический результат достигается за счет того, что биологически активный антипаразитарный препарат для диких животных в отношении следующих видов паразитов: Passalurus ambiguous, Dicrocelium lanceatum, Eimeria stiedae, содержащий, г:

кормовой бентонит - 500;

древесный уголь - 300;

кормовой мел - 500;

кормовая сера - 45;

поваренная соль - 100;

альбендазол - 100;

толтразурил - 50.

Разрабатываемый препарат имеет в основе алюмосиликаты (кормовой бентонит (экобентокорм)), содержащий в своем составе комплекс минералов в легкоусвояемой форме. Благодаря катионообменным свойствам выполняют донорские функции в обеспеченности организма макро- и микроэлементами. А поскольку большинство из них входит в состав ферментных систем организма, активизирующих биохимические реакции, то такая стимуляция позволяет восстановить гомеостаз организма.

Кормовой бентонит (экобентокорм) Тарасовского месторождения Ростовской области (Кормовой бентонит для сельскохозяйственных животных и птицы (экобентокорм) ТУ 9283-199-10514645-13-2013, [5]) - сыпучий порошок с размерами частиц - 1-3 мм, серо-зеленого цвета специфического запаха является источником минеральных веществ, содержит в доступной форме окислы элементов (г/кг сухого вещества): двуокись кремния - 727,4, окись алюминия - 115,6, окись кальция - 13,3, окись магния - 10,9, окись калия - 18,2, окись натрия - 8,3, окись железа - 5,0, полутораокись железа - 41,4, двуокись углерода - 2,2, серный ангидрид - 1,6, фосфорный ангидрид - 0,5. Кормовой бентонит (экобентокорм) в приманке, помимо источника минеральных веществ и стимулятора переваримости, является еще и наполнителем, снижающим влажность, регулирует плотность.

Древесный уголь - мелко измельченный (но не доведенный до состояния пыли), включающий в себя, %: углерод - 85, кислород - 10, водород - 4,4, фосфор - 0,03.

Кормовой мел (CaCO3), включающий в себя, %: кальций - 37, калий - 0,5, фосфор - 0,18, натрий - 0,3, кремний и других элементов - не более 5.

Кормовая сера (S) - добавка к корму для животных и птиц, содержащая серу в виде минерального соединения. Она представляет собой белый или желтовато-белый порошок с характерным запахом. Кормовая добавка имеет большой спектр применения: она помогает предотвратить различные заболевания у животных и птиц, а также используется для приготовления песчаных ванн.

Поваренная соль (NaCl) - натриевая соль соляной кислоты. Известен в быту под названием поваренной соли, основным компонентом которой и является. Хлорид натрия в значительном количестве содержится в морской воде.

Альбендазол - лекарственное средство, антигельминтный препарат широкого спектра действия группы бензимидазолов. Эффективен при энтеробиозе, аскаридозе, стронгилоидозе, эхинококкозе, трихиниллёзе, трихофацелёзе.

Толтразурил - это производное триазинтриона, используемое в качестве противококцидного средства.

Рассмотрим пример изготовления препарата.

Биологически активный антипаразитарный препарат для диких животных готовят по упрощенной технологической схеме. Берут кормовой бентонит (экобентокорм) - 500 г., хорошенько ее просушивают и просеивают через сито. Древесный уголь - 300 г. мелко измельчают, но не доводят до состояния пыли. В чистой, сухой емкости нужного размера соединяют кормовой бентонит (экобентокорм) и уголь. К ним прибавляют кормового мела - 500 г., кормовой серы - 45 г. и поваренной соли 100 г. Все ингредиенты тщательно перемешивают. Затем в емкость добавляют альбендазол - 100 г и противококцидийный препарат - 50 г. небольшими порциями, постоянно помешивая кашицу. Из полученного продукта формуют некрупные шарики или кубики. Приманку оставляют для подсыхания.

Способом применения биологически активного антипаразитарного препарата для диких животных, при свободном доступе в период проведение биотехнических мероприятий по подкормке охотничьих ресурсов и улучшение кормовых условий среды их обитания является выкладка кормов в среде обитания диких животных.

Этап 1:

Был установлен паразитический фон популяции зайца-русака на территории охотхозяйств Ростовской области (таблица 1).

Таблица 1 - Выявленные паразиты в популяции зайца-русака на территории охотхозяйств Ростовской области.

Название паразита Характеристика паразита 1 Passalurus ambiguus Нематода. Возбудитель пассалуроза зайцев и кроликов. Локализуется в ободочной, слепой и прямой кишках. Цикл развития прямой. Заражение происходит алиментарным путем при заглатывании яиц. 2 Trichostrongylus retortaeformis Нематода. Возбудитель трихостронгилеза кроликов и зайцев. Локализуется в тонком кишечнике. Цикл развития прямой. Из выделенных зараженным животным яиц выходят личинки. В окружающей среде достигают третьего возраста. Заражении происходит при заглатывании личинок L3. 3 Dicrocoelium dendriticum Трематода. Возбудитель дикроцелиоза копытных и других млекопитающих. Паразитирует в желчных протоках печени. Жизненный цикл сложный. Промежуточными хозяевами являются наземные брюхоногие моллюски родов Zebrina, Fruticicola, Cochlicopa и др. Дополнительные хозяева - муравьи рода Formica. Заражение окончательных хозяев происходит при случайном заглатывании муравьев с метацеркариями с пищей. 4 Cysticercus pisiformis Личиночная стадия цестоды Taenia pisiformis. Возбудитель цистицеркоза кроликов и зайцев. Цистицерки, как правило, формируются на капсуле печени или других серозных поверхностях брюшной полости. Заражение промежуточных хозяев происходит при проглатывании проглоттид или яиц, выделенных окончательными хозяевами, которым являются собаки и лисы. 5 Eimeria stiedae
E. perforans
E. magna
E. media Простейшие, споровики. Вызывают эймериозы печени кроликов и зайцев. Паразитируют в разных отделах пищеварительный системы: E. stiedae в печени, E. perforans в двенадцатиперстной кишке, E. magna и E. media в тонком кишечнике. Заражение происходит при заглатывании спрорулированных ооцист.

Этап 2.

Постановка опыта по определению инвазированности организма зайца-русака гельминтами и простейшими и терапевтической эффективности биологически активного антипаразитарного препарата для диких животных показала следующие результаты. В опыте была сформирована группа зайца-русака в количестве 7 голов (таблица 2).

Таблица 2 - Эффективность биологически активного антипаразитарного препарата для диких животных (зайца-русака, n=7).

Номер зайца-русака Период применения биологически активного антипаразитарного препарата для диких животных, сутки Эффективность, % 1 (перед дачей) 4 7 11 1 Passalurus ambiguus нет яиц и цист - - 100 Eimeria stiedae нет яиц и цист 100 2 Passalurus ambiguus Passalurus ambiguus Passalurus ambiguus нет яиц и цист 100 Eimeria stiedae нет яиц и цист - - 100 3 Passalurus ambiguus Passalurus ambiguus Passalurus ambiguus нет яиц и цист 100 4 Passalurus ambiguus,
1 100 Passalurus ambiguus Passalurus ambiguus Passalurus ambiguus,
209 81,0 Dicrocelium lanceatum Dicrocelium lanceatum нет яиц и цист - 100 Eimeria stiedae Eimeria stiedae Eimeria stiedae нет яиц и цист 100 5 Passalurus ambiguus Passalurus ambiguus нет яиц и цист - 100 Dicrocelium lanceatum Dicrocelium lanceatum нет яиц и цист - 100 6 Passalurus ambiguus,
1 100 Passalurus ambiguus Passalurus ambiguus Passalurus ambiguus,
206 81,3 Dicrocelium lanceatum нет яиц и цист - - 100 Eimeria stiedae Eimeria stiedae нет яиц и цист - 100 7 Passalurus ambiguus нет яиц и цист - - 100 Eimeria stiedae нет яиц и цист - - 100 ИТОГО Passalurus ambiguus 94,6 Dicrocelium lanceatum 100 Eimeria stiedae 100

Интенсивность инвазии (ИИ), количество яиц гельминтов или ооцист эймерий в 1 г фекалий, составило: Passalurus ambiguus - 1,1х10³, Dicrocoelium lanceatum - 2,6х10³, Eimeria stiedae - 2,0х10³.

Всемирная ассоциация содействия развитию ветеринарной паразитологии (WAAVP) рекомендует классифицировать антигельминтики по эффективности: высокоэффективные - имеющие активность свыше 98 %, эффективные (90-98 %), умеренно эффективные (80-89 %) и недостаточно или неэффективные (ниже 80 %) [6].

В связи с данными рекомендации биологически активный антипаразитарный препарат для диких животных (разработанный препарат) можно классифицировать как эффективное.

Этап 3.

Для установления биологического действия предлагаемого препарата на организм зайца-русака была проведена серия опытов по установлению сорбционной активности кормового бентонита (экобентокорма) в отношении условно-патогенной микрофлоры на модели кишечной палочки (Escherichia соli) и золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus).

Определение антибактериального действия компонентов разработанного препарата проводилось путем измерения задержки роста микроорганизмов в условиях in-vitro (таблица 3).

Таблица 3 - Изменение числа КОЕ бактерий после воздействия кормового бентонита (экобентокорма) на бактериальную массу.

Проба Степень разведения 9 8 7 6 5 4 3 2 1 Escherichia соli, КОЕ Опытная 20 34 58 72 70 134 сплош. рост сплош. рост сплош. рост Контрольная 332 288 420 522 1148 1280 сплош. рост сплош. рост сплош. рост Staphylococcus aureus, КОЕ Опытная 10 18 21 29 44 63 75 сплош. рост сплош. рост Контрольная 328 534 440 645 824 1764 сплош. рост сплош. рост сплош. рост

Установлено, что сорбционная способность кормового бентонита (экобентокорма) в отношении бактерий достаточно выражена. Количество выросших колоний после контакта бактериальной массы с сорбентом было в 15-30 раз меньше, чем при посеве культуры, не контактировавшей с кормовым бентонитом (экобентокормом). При этом сорбционная способность препарата более выражена в отношении стафилококков, чем кишечной палочки.

Исходя из полученных данных, можно сделать заключение о том, что кормовой бентонит (экобентокорм) проявляет высокую сорбционную способность, в связи с чем он используется в разработанном препарате с целью снижения микробной и токсической контаминации различных биообъектов - пищеварительного тракта диких животных.

Этап 4.

Имуннокорректирующее действие разработанного препарата характеризуется изменением в гематологических и биохимических показателях крови зайца-русака (таблица 4).

Таблица 4 - Гематологические и биохимические показатели крови зайца-русака при применении биологически активного антипаразитарного препарата.

Номер зайца-русака Период применения биологически активного антипаразитарного препарата для диких животных, сутки Разница, ± 1 (перед дачей) 11 Гемоглобин, г/л 1 101,0 151,2 50,2 2 98,5 146,9 48,4 3 99,2 147,1 48,0 4 95,3 134,6 39,3 5 99,8 141,7 41,9 6 98,1 138,0 39,9 7 103,2 155,8 52,6 Эритроциты, 10¹²/л 1 5,04 7,54 2,50 2 4,92 7,32 2,41 3 4,95 7,36 2,41 4 4,98 7,01 2,03 5 5,01 7,10 2,09 6 5,05 7,12 2,07 7 5,13 7,70 2,57 Лейкоциты, 10⁹/л 1 13,10 6,46 -6,64 2 13,41 6,48 -6,93 3 13,72 6,68 -7,04 4 14,05 6,48 -7,57 5 13,58 6,70 -6,88 6 14,04 6,64 -7,40 7 13,37 6,89 -6,48 Кальций, ммоль/л 1 2,21 3,72 1,51 2 2,18 3,65 1,47 3 2,19 3,68 1,49 4 2,15 3,59 1,44 5 2,16 3,62 1,46 6 2,11 3,51 1,40 7 2,2 3,73 1,53 Неорганический фосфат, ммоль/л 1 1,11 2,17 1,06 2 1,00 1,94 0,94 3 1,08 2,11 1,03 4 0,91 1,76 0,85 5 1,03 2,03 1,00 6 0,97 1,88 0,91 7 1,09 2,15 1,06 Аланинаминотрансфераза (АЛТ), МЕ/л 1 93,00 71,93 -21,07 2 92,91 72,24 -20,67 3 78,53 71,11 -7,42 4 94,01 74,00 -20,01 5 79,82 72,45 -7,37 6 93,43 73,19 -20,24 7 91,89 71,22 -20,67 Аспартатаминотрансфераза (АСТ), МЕ/л 1 85,00 45,27 -39,73 2 84,29 45,82 -38,47 3 76,34 38,26 -38,08 4 80,11 44,32 -35,79 5 77,62 39,94 -37,68 6 81,28 45,84 -35,44 7 80,12 42,37 -37,75

Исследуемые показатели (эритроциты, гемоглобин, кальций и неорганический фосфат) характеризуются тем, что перед дачей разработанного препарата находились на нижних границах, а на 11 день после применения повышались до верхних границ референсных значений (эритроциты - на 2,03-2,57*10¹²/л или 49,7-50 %; гемоглобина - на 39,3-52,6 г/л или 41,2-52 %; кальций - 1,40-1,53 моль/л или 66,4-69,4 %; неорганический фосфат - 0,85-1,06 моль/л или 93,2-97,7 %). Однако показатели, характеризующие наличие патологических (воспалительных) процессов в организме при воздействии паразитов - лейкоциты, аланинаминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), показали снижение на 7,57-6,48*10⁹/л или 46,1-51,5 %, 7,37-21,07 МЕ/л или 22,7-9,23 %, 38,26-45,84 МЕ/л или 50,1-56,4 % соответственно.

Данные этапов применения препарата доказывают повышение терапевтической эффективности вследствие комплексного воздействия на паразитов в организме диких животных и устранение токсических воздействий паразитов на организм диких животных и иммунокорректирующего действия.

Список использованных источников

1. Справочник Видаль «Лекарственные препараты в России». - URL: https://www.vidal.ru/veterinar/kfu/protivogelmintnye_preparaty_shirokogo_spektra_deystviia (дата обращения: 01.05.2024)

2. Справочник Видаль «Лекарственные препараты в России». - URL: https://www.vidal.ru/veterinar/kfu/protivokoktsidiynye_preparaty (дата обращения: 01.05.2024)

3. Справочник Видаль «Лекарственные препараты в России». - URL: https://www.vidal.ru/veterinar/albendazol-10-27929 (дата обращения: 01.05.2024).

4. Справочник Видаль «Лекарственные препараты в России». - URL: https://www.vidal.ru/veterinar/toltrazuril-30730 (дата обращения: 01.05.2024).

5. Зеленкова, Г. А. Кормовой бентонит для сельскохозяйственных животных и птицы (экобентокорм) Технические условия ТУ 9283-199-10514645-13-2013 : Технические условия ТУ 9283-199-10514645-13-2013 / Г. А. Зеленкова, И. Ф. Горлов. - Волгоград : Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Поволжский научно-исследовательский институт производства и переработки мясомолочной продукции», 2013. - 9 с. - EDN TNSOTV.

6. Geurden T, Smith ER, Vercruysse J, Yazwinski T, Settje T, Nielsen MK. World association for the advancement of veterinary parasitology (WAAVP) guideline for the evaluation of the efficacy of anthelmintics in food-producing and companion animals: general guidelines. Vet Parasitol. 2022 Apr;304:109698. doi: 10.1016/j.vetpar.2022.109698. Epub 2022 Mar 14. PMID: 35305843.

Изобретение относится к ветеринарии в области охотоведения, в частности к приманкам с биологически активным антипаразитарным средством для профилактики и лечения диких животных. Предлагается биологически активный антипаразитарный препарат для диких животных в отношении следующих видов паразитов: Passalurus ambiguous, Dicrocelium lanceatum, Eimeria stiedae, содержащий, г: кормовой бентонит - 500; древесный уголь - 300; кормовой мел - 500; кормовая сера - 45; поваренная соль - 100; альбендазол - 100; толтразурил - 50. Заявленное изобретение обеспечивает повышение эффективности вследствие комплексного воздействия на паразитов Passalurus ambiguous, Dicrocelium lanceatum, Eimeria stiedae в организме диких животных, устранение токсических воздействий паразитов на организм диких животных и иммунокорректирующее действие. 4 табл.

Биологически активный антипаразитарный препарат для диких животных в отношении следующих видов паразитов: Passalurus ambiguous, Dicrocelium lanceatum, Eimeria stiedae, содержащий, г:

кормовой бентонит - 500;

древесный уголь - 300;

кормовой мел - 500;

кормовая сера - 45;

поваренная соль - 100;

альбендазол - 100;

толтразурил - 50.