Способ определения активности препарата интерферона Советский патент 1983 года по МПК A61K39/02 

Изобретение относится к медицинс кой микробиологии и может быть испо зовано в практике производства преп рата интерферона. , Известен способ определения акти ности препарата интерферона путем последовательного разведения njpenaрата с последующим добавлением егю в культуру клеток, зараженной вирусом и определением активности по задержке цитопатогеннйго действия (ЦПД) вируса. 1 J. . Однако известный способ сложный, так как необходимо выращивать и под держивать культуру клеток фиброблас тов, производить заражение культур клеток жнвым вирусом и оценивать результат через; 3 сут. Цель изобретения - упрощение способа.. , Указанная цель достигается rsfu,. что при осуществле.нии способа «тутам последовательного разведения препарл та с последующим добавлением его в тест-культуру.клеток и определением активности в соответствующие разве.дения интерферона добавляют взвесь белого стафилококка, чувствительного интерферону, и определяют активность препарата по задержке роста бактериальной культуры. Пример. Выращивают культуру белого стафилококка на косом мясопептонном агаре 18 ч при . Куль туру смывают стерильным мясопептон-ным бульоном и бактериальную суспензию переносят в стерил;ьную пробирку. Суспензию стафилококков доводят до титра 1 млрд мясопептонным бульоном по соответствующему бактериальному стандарту мутности. Разведение препарата интерферона проводят следующим образом. В 10-12 стериальных пробирок разливают мясопептонный бульон по 1,0 мл. В первую пробирку ВНОСИТ1,0 мл испытуемого препарата интерферона, растворенного в дистиллированной воде, согласно указанню, имеющегося на ампуле с препаратом. Из первой пробирки МП.жидкости переносят во вторуиа пробирку, из второй - в третьюти т.д. В приготовленные разведения интерферона вносят по 0,1 МП стафилококковой суспензии. Пооле внесения бактерий жидкость в пробирках остается прозрачной. Опыт сопровождают контролями. Первым контролем 11роверяют ста рильность испытуемого препарата инт4р ферона - в пробирку вносят 1,0 мл исходного, растворенного в дистиллированной воде,препарата. Вторым контролем проверяют стерильность мясопептонного бульона - в пробирку вносят 1,0 мл бульона. Третьим контролем проверяют способность культуры стафилококка размножаться в мясопептон ном бульоне - в пробирку с 1,О мп бульона вносят 0,1 мп суспензии стафилококка. Все пробирки (опытные и контрольные) выдерживают 18 ч в термостате при . Затем производят учет результатов. В 1-ой и 2-ой контрольных пробирках жидкость должна быть. прозрачной. В 3-ьей контрольной пробирке - рост стафилококка в виде помутнения бульона. В опытных про- . бирках, где препарат интерферона подавляет развитие бактеригшьной культуры стафилококка, жидкость остается прозрачной, помутнение бульона указыв.ает на рост стафилококка. После учета результата опыта дают значение о титре препарата интерферона.. За антибактериальный титр препарата интерферона принимают то наибольшее раведеяие его, которое задерживает развитие культуры стафилококка. Результаты титрования 5-и серий нативного препарата человеческого лейкоцитарного интерферона в сравнении с известным представлены в таблице.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОЙТИ ПРЕПАРАТА ИНТЕРФЕРОНА путем иослвдовательного раэведеняя (|ярата с последующим добавлением В те сткультуру клеток и определением активности, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа., в соответствующие разведения интерферона добавляют взвесь белого-стафилококка, чувствительного к.интерферону, и определяют активность препарата по 3 адержке роста бактериальной культуры.

нет роет ста лококк

Условные обозначения -

сть рост стафилококка

З1012914

Из таблицы видно, что антибактери-нативного человеческого лейкоцитаральный титр препарата интерферонаного интерферона, выпускаемого Пермс серии 285 соответствует: 1:512, се-ким НИИВС Во всех случаях антибактерии 286 - 1:1024, серии 292 - 1:2048,риальный титр превышал или соответстсерии 293 - 1:512 серии 294 - 1:2048.вовал антивирусной активности испыКак видно из примера, антибакте- 5туемых препаратов интерферона, риальные титры всех испытанных серий

препарата выше .антивирусных на 4-5 Таким образом, предлагаемый спо раэведений..соб позволяет повысить точность опПредлагаемым методом серийных раз-ределения активности препарата интерведений с культурой белого стафило- 10ферона, а также упрощает процесс опрекокка протитровано 68 серий препаратаделения активности препарата. .