Способ подавления роста бактерий Советский патент 1990 года по МПК C12N1/26 C02F1/50 C12N1/26 C12R1/01 C02F1/50 C02F101/00 C02F103/00 

(Л

с

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано в медицине, ветеринарии, микробиологической промышленности и для защиты от биоповреждений. Цель изобретения - повышение антибактериального эффекта. Для подавления роста бактерий используют препараты на основе продуктов переработки горючих сланцев, а именно фракций сланцевых смольных вод и сланцевых смол. Для грамположительных бактерий препараты используют в концентрации от 6,2 до 25 мкг/мл, для грамотрицательных - от 50 до 500 мкг/мл. Препараты являются малотоксичными. 1 табл.

Изобретение относится к микробиологии, а именно к способам подавления бактериального роста, и может быть использовано в медицине, ветеринарии, микробиологической промышленности.

Целью изобретенияявляется повышение антибактериального эффекта.

Способ заключается в том, что в пробирку, содержащую 5 мл бульона Хоттингера, вносят суспензию бактерий до конечной концентрации 250000 клеток на 1 мл, антибактериальньш препарат, растворенный в 0,1 мл этанола, из расчета 500-1000 мкг/мл сре- ды. Пробирки термостатируют при 37 С 18 ч.

В качестве антибактериального вещества используют более эффективные препараты на основе продуктов переработки горючих сланцев, а именно фракции сланцевых.смольных вод и сланцевых смол.

Использованы следую1цие препараты.

Препарат № 1 - препарат, полученный из промьштенной фракции сланцевой смолы, кипящей в пределах 230- 260°С, путем комбинированной экстракции диизопропиловым эфиром (средняя мол. м. 203; м. д. гидроксильньгх групп 13,6%, м. д. 5-алкилрезорцинов 45,3%; м. д. нейтральных масел 0,94%).

Препарат № 2 - дистиллированный при остаточном давлении 0,13-0,26 кПА препарат № 1, кипит при 295-340 С (средняя мол. м. 194; м, д. гидрок- сильных групп 15,1%; м. д. 5-алкилрезорцинов 52,3%; в том числе, %: С -2, 66; С,732).

Препарат № 3 - препарат, полученный при ректификации-при т. кип. 295-340 С фракции смольных вод, котосд

со

00

СП

рую извлекают экстракцией сланцевых смольных вод смешанным органическим растворителем: бутилацетат - диизопро пиловый эфир (средняя мол. м. 157; м. д. гидроксильных групп 21,7%; индивидуальный состав, %: одноатомные фенолы 0,23; 2,5- и 4,5-диметилрезор.цины 1,23; 5-метилрезорцин 0,43; 5-этилрезорцин 2,11; неидентифициро-

ванные 96,0).

Испытания антибактериальной активности предлагаемых препаратов (1-3) проводят на расширенном спектре бактерий: четырех штаммах грампо- ложительных бактерий (стафилококк, микрококк, стрептококк, антракоид), и пяти штаммах грамотрицательных бактерий (кишечная палочка, сальмонелла, шигелла, вульгарный протей,

синегнойная палочка).

I Антибактериальную активность соединений изучают методом двукратных серийных разведений на жидких пита тельных средах (бульон Хоттингера, мясопептонный бульон). Максимальная испытуемая концентрация вещества 1000 мкг/мп.

1 Растворитель препаратов - этиловый спирт (ректификат 96%-ный).

I Бактериальная нагрузка 250000 кле- ,ток в 1 мл среды. Продолжительность инкубации бактерий 18 ч при 37 С.

Активность соединений оценивают по величине минимальных бактериоста- тических концентраций (МБсК), выраженных в мкг/мл.

Результаты изучения актйбактериаль ной активности представлены в табл.1.

Пример 1. В ряд пробирок, содержащих по 5 мл бульона Хоттингера, вносят суспензию стафилококка до конечных концентраций 250000 клеток н t мл. В первую пробирку вносят 0,1 мл этанола (контроль), во вторую - пре- парат К 1, растворенный в 0,1 мл этанола из расчета 3,120 мкг/мл питательной среды, в третью - препарат I, растворенный в 0,1 мл этанола из расчета 6,25 мкг/мл среды. Аналогично в 4,5,6,7,8,9,10 пробирках создают концентрацию препарата соответственно 12,5; 25; 50; 100; 250; 500; 1000 мкг/мл. Пробирки термостатируют при 37 С 18 ч. После термостатирова- ния наблюдают рост в пробирках 1-3. В пробирках 4-9 рост отсутствует.

Q

0

5

«

Qс

5

0

Это означает, что МБсК для препарата № 1 по отношению к стафилококку равно 12,5 мкг/мп.

Пример 2. Эксперимент проводят аналогично примеру Г, но в пробирку с питательной средой вносят суспензию кишечной палочки. В этом случае в пробирках 1-8 рост бактерий наблюдается, а в пробирках 9-10 отсутствует. Это означает, что МБсК для кишечной палочки составляет 500 мкг/мл.

Пример 3. Эксперимент проводят аналогично примеру 1, но в пробирку вносят препарат tP 3 в 0,1 мл этанола до конечных концентраций 3,12; 6,25; 12,5; 25; 50; 100; 250; 500; 1000 мкг/мл. После термостатирования наблюдается рост стафилококка в пробирках 1-4 и отсутствует в пробирках 5-10. Это означает, что МБсК для данного препарата в отношении стафилококка составляет 25 мкг/мл.

Пример 4. Эксперимент проводят аналогично примеру 1, но в пробирки с питательной средой вносят суспензию сальмонеллы,- а также препарат №2 в 0,1 мл этанола до конечной концентрации, как описано в примере 1. После термостатирования в пробирках 1-5 наблюдается рост культуры, в пробирках 6-10 рост отсутствуеуТ, Это означает, что МБсК составляет 50 мкг/мл.

Исследуемые препараты, взятые .в- концентрациях меныних МБсК, цроявля- ют меньшую антибактериостатическую активность, а взятые при концентрациях равных или больших, чем МБсК, полностью подавляют рост бактерий и не оказывают более выраженного антибак териостатичёского эффекта. Формула изобретения

Способ подавления роста бактерий, предусматривающий использование препаратов на основе продуктов переработки отходов нефтехимической промьш- ленности, отличающийся тем, что, с целью повышения антибактериального эффектаJ используют фракции сланцевых смольных вод или сланцевых смол в концентрациях 6,2-25 мкг/мл для грамположительных бактерий и 50-500 мкг/мл для грамотрицательщ.1х бактерий.

Staphylococcus aureus

209-p

Micrococcus.Lysodeikticus

Streptococcus haemoliticus 295

Bacillus anthracoides 1312

Esherichia coli 675

Salmonella typhi

Shigella flexneri 2aProteus vulgaris 5

(28-111)

Pseudomonas aeruginosa 165

Редактор С.Пекарь

Заказ 3032

ВНИШШ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

25 25 12,5

500 500 250

500 500

Составитель И.Болотина

Техред М.Дидык Корректор Л,Бескид

Тираж 508

Подписное