Штамм @ @ N6,используемый в качестве тест-культуры для определения активности интерферона Советский патент 1984 года по МПК A61K38/21 

00

го

сх Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при производстве интерферона. Известно использование вируса в качестве тест-культуры для определе- ния.. активности интерферона СШ. Однако использование вируса в.качестве тест-культуры усложняет опре,деление активности интерферона, так как требует подготовки культур кле ток, что является длительной и сложной процедурой. Цель изобретения - упрощение опре деления активности интерферона. Поставленная цель достигается тем что используют штамм Staphylococc.us epidermidis № б. Штамм Staphylococcu.s epidermidia № б выделен из окружающей среды. Хранится в коллекции ГИСК им. Л,А.Тарасевича под номерЬм 33 и характеризуется следующими признака ми, Морфологические признаки. . Клетки имеют форму шаров диаметром 0,5-0,8 мкм, группируются в скоп ления, напоминающие гроздья винограда, окрашиваются грамположительно йеподвижНы и не образуют спор И капсуй. . Культуральные признаки, Мясопептонный агар, молочно--соЛевой агар.Колонии белого цвета, равармерновыпуклые с ровным краем, гладкой Матовой поверхностью,диамет ром 1,0-1,5 мм. Колонии легко снимаются с агара бактериальной петлей. Мясопептонный бульон, сахарный бульон, Помутнение бульона и небольшой осадок.. Физиологические признаки. Отношение к кислороду: факультативный аэроб. Оптимальная температура для размножения 37°С, , Глюкоза, лактоза,мальтоза,галактоза, сахароза, глицерин-сбраживание до кис.лоть без выделения газа, Результаты исполь для выявления уровня инт

Объект исследования

Нативный препарат человеческого лейко цитарного интерферона выпу ска ПНИИВС, серия

Антивирусный титр интерферона по задержке ЦПД в культу|зе клеток МЬлоко свертывает. Желатин разжи жает, Нитраты восставнавливает в нитриты, Образует аммиак и сероводород, Культура не однородна по синтезу i,-гемотоксина, ПлазмОкоагулазу не имеет, Леххитовителлазу не имеет, ДНК-азу не имеет, Новобиоцион - чувствителен,резисТентен к лизоцину сыворотки крови. Комплементу резистентен. Препарат интерферона - чувствителен. Погибает или перестает размножаться в зависимости от активности препарата интерферона при прямом контакте в течение 18 ч It 37°С ), Пример. Готовят последовательные разведения препарата интерферона мясопептонным бульоном в объеме 1,0 мл в пробирках. Затем помещают в пробирки по 100000 клеток стафилококка, предварительно выращенного на косом агаре в течение 18 ч. Пробирки выдерживаютв термостате при 37°С в течение 18 ч. Учет резуль тата опыта проводится визуально. За антибактериальный титр испытуемого интгерферона принимают то его наибольшее разведение, при котором культура стафилококка не растет (содержимое соответствующей пробирки остается прозрачным J, Результаты выявления уровней интерферона в нативном препарате человеческого интерферона выпуска Пермского НИИВС и в донорских сыворотках крови приведены в таблице, Выявление интерферона в образцах проводили одновременно по задержке цитопатогенного действия (ЦПД ) в культуре человеческих фибробластов (регламент 134-39) и бактериологическим методом серийных разведений, ния штамма б стафилококка рона в сравнении с прототипом.

Как видно из таблицы, антибактериальная активность препаратов интерферона а отношении штамма № 6 выше антивирусного эффекта, находится в прямой зависимости от послед него и дает представление об антивирусной активности исследуемых объектов ,

Пример 2. С помощью штамма W б кожного стафилококка бактериалогическим методом серийных разведений проведено исследование 100 сеоий йативнрго препарата человеческого лейкоцитарного интерферона, выпускаемого Пермским НИИВС, 20 сывороток крови доноров, 47 сывороток крови онкологических больных и 25 сывороток лабораторных животных ( морские свинки и кролики).

Получены следукяцие результаты. При Фй ФрацИй нативмого препарата человеческого лейкоцитарного интерферона выпуска ПНШШС в 96% сериях антибактериальный «йгр п вышал антивирусный, в tOM числе в 30% на 4,в 38%.на 3, в 22% на 2 и в 6% на 1 раддедение,в 4% случаев актибактер альный тИтр совпал с антивирусном.

В 20 донорских сыворотках интерферон выявлен в 100% по антибактериальному действию, а в 50% - по антивирусному.

; . Из 47 сывороток ой1{Ьлогических 5 больных интерферон выявлен в 2 сыворотках только по антибактериальному действию.

В 25 сыворотках лабораторных животных интерферон выявлен в 22 слуIQi чаях по антибактериальному действию.

{Сак видно из примеров, штамм Staphylocoocus iepiderwidis № б обладает чувствительностью к препаратам интерферона разной видовой специфичности, что позболяет использовать его в качестве тест-культуры для выявления уровня интерферона как в усЛсжиях производства препарата, так и в экспериментальных исследованиях. Использование штамма staphylococCU8 epidermidis 6 по сравнению с прототипом упроцает и удешевляет методику ВЕлявления уровней интерферона , отменяет иеобходимость проводить солоные вирусологические исследования и значительно экономит время.

ШТАММ STAPKYLOCOCCUS EPIDERMIDIS № 6. (коллекция ГИСК им.Л.А.Тарасевича/, № 33, используемый в качестве тест-культуры для определения активности интерферона.