Способ получения кукурбина Советский патент 1983 года по МПК A61K35/78 

ю ел to

00

Изобретение относится к медицине, в частности к способам получения лекарственных препаратов из растений, а именно антигельминтного препарата кукурбина.

Наиболее близким техническим решением к предлагаемому является способ получения кукурбина, включающий обезжиривание измельченных семян тыквы хлороформом, экстракцию водой при нагревании с последующей очисткой экстракта и сущки его.

Сущность способа заключается в том, что обезжиривание семян тыквы сорта Витаминная проводят холодным хлороформом, трехкартную экстракцию водой проводят при автоклавировании, экстракты сгущают под вакуумом, очищают и осаждают кукурбин спиртом 1.

Недостатками данного способа являются трудоемкий процесс экстракции путем многократного автоклавирования и необеспеченность сырьем из-за истощения сырьевой-базы семян тыквы сорта Витаминная.

Цель изобретения - упрощение процесса получения кукурбина.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения кукурбина, включающему обезжиривание измельченных семян тыквы хлороформом, экстракцию водой при нагревании с последующей очисткой экстракта и сущки его, экстракцию проводят при соотнощении сырье - экстрагент 1:4-5 на кипящей водяной бане, полученный экстракт фильтруют, очистку осуществляют сульфосалициловой кислотой, затем пропускают через катионит.

Способ осуществляют следующим образом.

Семена тыквы сортов Миндальная, Украинская многоплодовая, Мозолеевская, Волжская серая обезжиривают хлороформом, далее проводят однократную экстракцию водой при соотнощении 1:4-5 на кипящей водяной бане t (98-100°С), экстракт фильтруют и обрабатывают сульфосалициловой кислотой, пропускают через катионит и упаривают под вакуумом.

Пример /. 30 г измельченных семян тыквы (ядра с кожурой) сорта Мивдальиая обезжиривают в аппарате Сокслета в течение 12 ч хлороформом в соотнощении 1:3. Обезжчренный щрот высущивают при 40° С до полного удаления хлороформа. Высущенную и обезжиренную массу помещают в колбу вместимостью 250 мл, заливают горячей дистиллированной водой в соотнощении 1:5 и нагревают на кипящей водяной бане в течение 40 мин. Шрот отфильтровывают, к фкльтрату (1.00 мл) добавляют 4,4 г сульфосалициловой кислоты, выдерживают в течение 2 ч при 5°С. Выпавший осадок центрифугируют при 3 тыс. об/мин в течение 25 мин. Фильтрат, содержащий кукурбин

в растворенном виде, пропускают через колонку с катионитом КУ-2 и упаривают под вакуумом до получения препарата в сухом виде.

Выход кукурбина составляет 432 мг (2,5%) по отнощению к обезжиренному щроту семян.

Изучение полученного продукта методом жидкостной хроматографии реакцией с нинГидрином и с окисью серебра показало идентичность полученного продукта продукту, полученному по известному способу.

Пример 2. 30 г. измельченных семян тыквы сорта Украинская многоплодная обезжиривают в аппарате Сокслета в течение

12ч хлороформом в соотнощении 1:3. Обезжиренный щрот высущивают аналогично. Высущенную и обезжиренную массу помещают в колбу на 250 мл, заливают горячей дистиллированной водой в соотнощении 1:4 и нагревают на кипящей водяной бане в течение 40 мин. Последующие операции осуществляют аналогично способу по примеру 1.

Выход кукурбина составляет 430 мг (2,48

Аналогичные результаты получают в тех же условиях при использовании тыквы сорта Мозолеевская и Волжская серая.

Качество полученного продукта и выход его идентичны известному способу с использованием тыквы сорта Витаминная.

Изучение аминокислотного состава, электрофорез образцов кукурбина, получаемого по известному методу и предлагаемому, показывает, что предлагаемый способ приводит к повыщению чистоты продукта. Это подтверждается и при растворении продукта в воде - при растворении в воде кукурбина, полученного по известному методу, препарат полностью не растворяется и не дает прозрачного раствора в отличие от кукурбина, получаемого по предлагаемому способу. Антигельминтные свойства кукурбина определялись на мыщах, зараженных тремя щтаммами карликовых цепней: «мыщиный, «лабораторный и «см. Первый щтамм получен от мыщей, спонтанно зараженнь1х карликовым цепнем, второй - от больных людей и в течение длительного времени адаптированный к мыщам, третий - от больных, длительно (многократно) безрезультатно леченных фенасалом и другими антигельминтиками (упорный штамм).

Молодым мыщам весом 8 г вводили орально по 40--150 яиц Hymepolepis папа. На

13день мыщей лечили, а по истечении суток от момента назначения кукурбинов их вскрывали и подсчитывали цестод в кищечнике. Контролем служила группа мыщей, не получивщая препаратов. Активность препаратов определяли на трех партиях мыщей, леченных в разные месяцы путем перорального введения кукурбинов. Кукурбины вводили из расчетоа 5 г/кг массы животного .

В результате проведенных экспериментов установлено, что противоцистодная активность образцов кукурбина, полученных предлагаемым способом на 18-21% превышает (прослежено во всех повторностях опытов) активность образцов кукурбина, полученных известным сПЬсобом.

Следует особо подчеркнуть, что образцы кукурбина, полученные по предлагаемому способу, проявляют активность не только в отношении «мышиного и «лабораторных штаммов, но и- на упорном штамме «см. Определить токсичность образцов кукурбина, получаемых по известному и предлагаемому способам, не удается, так как он является прекрасным кормом для мышей. Проводимые испытания токсичности на других

видах дивотных показали, что для препарата не существует токсических доз.

Таким образом, предлагаемый способ получения кукурбина позволяет упростить процесс получения препарата за счет исключения стадии автоклавирования, сократить

время по сравнению с известным способом на 4 ч и получить препарат кукурбина на 18-2F/0 более противоцестодно активным

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КУКУРБИНА, включающий обезжиривание измельченных семян тыквы хлороформом, экстрацию водой при нагревании с последующей очисткой экстракта и сущку его, отличающийся тем что, с целью упрощения процесса, экстракцию проводят при соотнощении сырье - экстрагент 1:4-5 на кипящей водяной бане, полученный экстракт фильтруют, очистку осуществляют сульфосалициловой кислотой, затем пропускают через катионит.