Аппарат для культивирования клеток на микроносителях Советский патент 1984 года по МПК C12M3/00 

00

tc

00

Изобретение относится к аппаратам для культивирования клеток на г кроносителях и предназначено для использования в медицине, вирусологии и ветеринарии.

Известен аппарат для культивирования клеток на микроносителях, содержащий корпус, устройство для пеЕ)емешиБания и устройство контроля и стабилизации параметров процесса 1.

Недостаток аппарата заключается в том, что из-за интенсивного перемешивания затруднена адгезия клеток к микроносителям. Поэтому в качестве микроносителей могут использоваться лишь некоторые биополимеры типа Декстранов, плотность которых близка к плотности клеток.

Известен- также аппарат для культивирования клеток на микроносителях содержащий корпус, мембранный насос, расположенный в нижней части корпуса, и диспергатор ,21,

В этом аппарате достигаются щадящие условия перемещения. Однако работа насоса затруднена, так как микроносители, проникая во внутренние полости насоса и оседая на их поверхностях, подвергаются разрушению., при этом разрушаются также и клетки.

Наиболее близок к предлагаемому аппарат для культивирования клеток f.a микроносителях, содержащий вертикально установленную емкость, снабженную аэратором и устройством для перемешивания культуральной жидкости с микроносителями, представляющим собой насос З.

Недостатком аппарата является пониженный выход клеток при культивировании, так как часть клеток оседает во внутренней полости устройства для перемешивания и не участвуют в процессе культивирования, а часть клеток разр тнается.

Цель изобретения - повышение выхода клеток.

Для достижения поставленной цели аппарате для культивирования клеток на микроносителях, содержащем ертикально установленную емкость, набженную аэратором и устройством ля перемешивания культуральной жидости с микроносителями, устройство ля перемешивания содерзкит пневмогенератор и стакан, установленный неподвижно днищем вверх в емкости и с зазором относительно днища поседней, при этом верхняя часть стакана, соединена трубопроводом, снаб- женным влагоуловителем и фильтром, с пневмогенератором для создания пульсаций в культуральной жидкости, причем указанный трубопровод подключен через дроссель к,верхней части емкости.

Нэ чертеже изображен аппарат для культивирования клеток на микроносителях, разрез.

Аппарат для культивирования клеток на микроносителях содержит вертикально установленную емкость 1 диаметром D, снабженную аэратором 2 и устройством для перемешивания культуральной с жидкости с микроносителями, состоящим из пневмогенератора 3 и стакана 4 диаметром d установленного неподвижно днищем вверх в емкости 1 и с зазором о относительно днища последней. При этом верхняя часть стакана 4 соединена трубопроводом 5, снабженнь влагоуловителем .6 и фильтром 7, с пневмогенератором 3 для создания пульсаций в культуральной жидкости, причем указанный трубопрвод 5 подключен через дроссель 8 к верхней части емкости 1.

На крышке емкости 1 имеются патрубок 9 для подачи культуральной жидкости и патрубок 10 для отбора проб.

Отношение диаметра D емкости 1 к диаметру d стакана 4 составляет 2:1,25. Стакан 4 установлен таким образом в емкости 1, что его перемещечием вверх или вниз можно изменять величину зазора сЛ.

Предлагаемый аппарат работает дуюш,им образом.

Емкость 1 примерно до половины через патрубок 9 заполняется культуральной жидкостью, состоящей, например, из,среды Игла с 10%-ной добавкой бычьей сыворотки и 0,1% метилцеллюлозы в объеме 300 мл, микроносителей из сополимера стирола с 0 дивинилбензолом в количестве 6,5-10 и клеток ВНК-21 в количестве 150-10.

С помощью пневмогенератора 3 создают попеременно разрежение или избыток давления в стакане 4. Воздух пневмогенератора 3 подается по трубопроводу 5 через фильтр 7, где он подвергается биологической очистке, и влагоуловитель 6, улавливающий пары влаги при разрежении. При осуществлении попеременно разрежения или избытка давления происходит интенсивное перемешивание культуральной жидкости в емкости 1.

Амплитуда колебаний культуральной жидкости регулируется таким образом, чтобы не происходило ее полного выталкивания или полного вталкивания в стакан 4,

Интенсивность перемешивания регулируется частотой и амплитудой колебаний, задаваемой пневмогенератором 3 и зазором сЛ между стаканом 4 и днищем емкости 1.

Рабочая часть колебаний уровня культуральной жидкости составляет 5 0,5-2,0 Гц, Величина зазора о зависит от диаметра партии микроносителей 1,80-350 мкм) .

Под действием постоянного перемешивания, обеспечивающего гомогенность среды, создаются благоприятные условия прикрепления клеток к микроносителям и их роста.

При необходимости прекреидения перемешивания выравнивание уровня культуральной жидкости в емкости 1 и стакане 4 осуществляется через дроссель 8.

В процессе культивирования осуществляется контроль за ростом клеток.

путем отбора проб через патрубок 10.

Наличие в аппарате для культивировання клеток на микроносителях устройства для перемешивания, состоящего из пневмогенератора и стакана, установленного неподвижно днищем вверх в емкости и с зазором относительно ее днища, соединение стакана трубопроводом с пневмогенератором через влагоуловитель и фильтр и подключение трубопровода через дроссель к верхней части емкости позволяет .увеличть выход клеток примерно-в 5 раз по сравнению с прототипом.

.АППАРАТ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК НА МИКРОНОСИТЕЛЯХ, содер.жащий вертикально установленную емкость, снабженную аэратором и устройством для перемешивания культурной жидкости с микроносителями, отлича1 щийс я тем, что, с целью повышения выхода клеток, устройство для перемешивания содержит пневмогенератор и стакан, установленный неподвижно днищем вверх в емкости и с зазором относительно днища последней, при этом верхняя часть стакана соединена трубопроводом, снабженным влагоуловителем и фильтром, с пневмогенератором для i создания пульсаций в культуральной жидкости, причем указанный трубопро(Л С вод подключен через дроссель к верхней части емкости.