Аппарат для культивирования клеток или вирусов на микроносителях Советский патент 1987 года по МПК C12M3/00 

для заполнения 7 и слива 8 культу-- ральной жидкости. Аппарат содержит устройство для перемешивания культу- ральной жидкости с микроносителями, вьтолненное в виде перфорированного барабана 9 с крьппкой 10 и полым днищем 11. Барабан 9 снабжен сеткой 12, установленной на его внутренней поверхности и зафиксированной пружинным элементом. Емкость 1 установлена на осях 14 и 15 в опорах 16 и 17с возможностью свободного враще

1

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано в медицине, ветеринарии и вирусологии

Цель изобретения - повышение выхода клеток или вирусов.

На фиг. 1 схематично изображен аппарат для культивирования клеток или вирусов на микроносителях,продоный разрез; на фиг. 2 - разрез А-А на фиг. 1.,

Аппарат содержит цилиндрическую емкость 1 с термоизоляционной рубащ кой 2 и крьщ1кой 3, выполненной из стекла.

Емкость 1 снабжена патрубком 4 для подачи в нее через мембранный фильтр-азратор 5 газовой смеси,патрубком 6 для отбора пробы и патрубками 7 и S для заполнения и слива культуральной жидкости.

Аппарат содержит устройство для перемешивания культуральной жидкости с микроносителями, выполненное в виде перфорированного барабана 9 с крышкой 10 и полым днищем 11.Ба- ,рабан 9 снабжен сеткой 12, установленной на его внутренней поверхности и .фиксируемой пружинным элементом 13. Емкость 1 установлена на осях 14 и 15 в опорах 16 и 17 с возможностью свободного вращения. Полая ось 15 соединена с патрубком 18 для загрузки микроносителей в барабан и уплотнена в отверстии крь ки 3 посредством сальника 19. На стенке емкости 1 размещен съемный привод, состоящий из электродвигате ля 20 и редуктора 21, а также магни

ния . Полая ось 15 соединена с патрубком 18 для загрузки микроносителей и имеет уплотнение 19. На стенке емкости 1 размещен съемный привод, состоящий из электродвигателя 20 редуктора 21 и магнитных полумуфт 22 и 23. Аппарат посредством цапф установлен на кронштейнах 25 и с помощью червячной пары переводится из горизонтального в вертикальное положение или любое промежуточное, з.п. ф-лы, 2 ил.

ных поЛумуфт 22 и 23. Емкость 1 посредством цапф 24 установлена на кронштейнах 25 и может быть снабжена механизмом поворота ее и барабана на 90, содержащим червячную пару 26, с помощью которой можно переводить из горизонтального положения в вертикальное или любое промежуточное.

Аппарат работает следующим образом.

В перфорированный барабан 9 вставляют сетку 12 и закрепляют ее пружинным злементом 13, затем устанавливают крышку 10 и закрепляют ее винтами. Барабан 9 помещают в емкость 1 таким образом, чтобы ось

14входила в опору 16. В отверстие крышки 3 устанавливают полую ось

15с патрубком 18 и уплотняют ее посредством сальника 19. Крышку 3 монтируют на емкости 1 так, чтобы полая ось 15 вошла в опору 17 и через резиновую прокладку винтами закрепляют ее на емкости 1. Патрубок 4 соединяют силиконовой трубкой с мембранным фильтром 5.На патрубки 6 - 8 и 18 надевают силиконовые трубки с пружинными зажимами. Затем аппарат помещают в автоклав и стерилизуют 2 ч при 130°Сс После охлаждения аппарата к нему подсоединяют привод и устанавливают посредством цапф на кронштейны 25 в вертикальном положении, а в рубашку 2 подают воду от термостата с температурой

37 t 0,50с.

31308

При выращивании клеток емкость 1 через патрубок 7 заполняют на 70- 80% объема культуральной жидкостью. В барабан 9 через патрубок 18 аагру- жают микроноситель. Для прикрепления клеток к микроносителям аппарат находится в таком положении 8-16 ч, затем он с помощью червячной пары 26 переводится в горизонтальное положение . При этом микроноситель с прик-/0 возможностью вращения и снабженного

15

расположенной на его внутре верхности сеткой, а также м повороту емкости и барабана ет увеличить выход клеток и сов с единицы объема, исклю ническое разрушение микроно а также клеток и вирусов, и вать аппарат совместно с уп мым ферментом для промышлен

репленнымй на нем клетками опускается на сетку и удерживается внутри барабана 9. При вращении барабана 9, которое осуществляется электродвигателем 20 и редуктором 21 при помощи магнитных полумуфт 22 и 23, микроноситель переходит во взвешенное состояние, перемешивается и удерживается во взвеси при частоте вращения 6- 10 об/мин. Частота вращения регулиру-20 работки клеток или вирусов, ется тиристорным регулятором. Контроль за процессом культивирования осуществляется путем отбора проб через патрубок 6. Аэрирование проводят через фильтр 5. Культуру выращи- вают до получения необходимой плотности клеток.

При выращивании вируса полученную культуру клеток заражают вирусом без смены среды.

Для этого через патрубок 18 вносят необходимое количество вирусосо- держащего материала и культивируют при постоянном вращении.

Клетки, разрушенные в результате репродукции в них вируса, отслаиваются с поверхности.микроносителя и переходят в культуральную жидкость. Сбор вирусосодержащего материала производится через патрубок 8.

Для извлечения микроносителей из барабана 9 емкость 1 на 1/2 объема заполняют физиологическим раствором и при помощи червячной пары 26 переводят в-положение крышкой вниз.Мик30

35

40

Формула изобре

1. Аппарат для культивир клеток или вирусов на микро содержащий герметичную цили кую емкость, снабженную аэр и устройство для перемешива туральной жидкости с микрон ми,- отличающийся с целью повьшения выхода кл или вирусов, устройство для вания культуральной жидкост роносителями вьщолнено в вид рированного барабана, устан с возможностью вращения и сн го расположенной на его вну поверхности сеткой,при эхом сители размещены внутри бар

2. Аппарат по п. 1, отл ющийся тем, что, с цел шения прикрепления клеток к сителям, аппарат снабжен мех 45 поворота емкости и барабана

роносители опускаются на конусную проточку крышки 10 и через ползто ось 15 и патрубок 18 удаляются вместе с раствором из барабана 9.

Наличие в аппарате для культивирования клеток или вирусов на микроносителях устройства для перемешивания, выполненного в виде перфорированного барабана, установленного с

расположенной на его внутренней поверхности сеткой, а также механизма повороту емкости и барабана позволяет увеличить выход клеток или вирусов с единицы объема, исключив механическое разрушение микроносителей, а также клеток и вирусов, использовать аппарат совместно с управляемым ферментом для промышленной наработки клеток или вирусов,

работки клеток или вирусов,

Формула изобретения

1. Аппарат для культивирования клеток или вирусов на микроносителях, содержащий герметичную цилиндрическую емкость, снабженную аэратором, и устройство для перемешивания культуральной жидкости с микроносителями,- отличающийся тем,что, с целью повьшения выхода клеток или вирусов, устройство для перемешивания культуральной жидкости с микроносителями вьщолнено в виде перфорированного барабана, установленного с возможностью вращения и снабженного расположенной на его внутренней поверхности сеткой,при эхом микроносители размещены внутри барабана.

2. Аппарат по п. 1, отличающийся тем, что, с целью улучшения прикрепления клеток к микроносителям, аппарат снабжен механизмом поворота емкости и барабана на 90.

фиг.г

Изобретение относится к биологии и может быть использовано в медицине ветеринарии и вирусологии,Целью изобретения является повышение выхода клеток или вирусов. Аппарат содержит цилиндрическую емкость 1 с термоизоляционной рубашкой 2 и крьпп- кой 3, выполненной из стекла. Емкость 1 снабжена патрубком для подачи в нее через мембранный фильтр газовой смеси и патрубком для отбора пробы. Емкость 1 снабжена также патрубками 2Q (Л

Редактор А.Козориз

Составитель Л.Смирнова Техред Л.Сердюкова Корректор С.Черни

Заказ 1774/21 Тираж 500Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 1130.35, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

.Производственно-полиграфическое предприятие, г . Ужг ород, ул. Проектная, 4